Шварёва О.А

ЗАО «Вектор-Бест».
АКТУАЛЬНОСТЬ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ
ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
1) оппортунистический и СПИД-маркерный
характер заболеваний;
2) дифференциальный диагноз с заболеваниями
другой этиологии;
3) дифференциальная диагностика внутри
семейства герпес вирусов;
4) этиологическая роль герпес вирусов в
канцерогенезе.
Краткая характеристика видов вируса герпеса
№
Общепринятая
аббревиатура
Название
1.
ВПГ-1
Вирус простого
герпеса 1 типа
2.
ВПГ-2
Вирус простого
герпеса 2 типа
VZV
Вирус
Varicella-Zoster
3.
4.
ВЭБ
Вирус ЭпштейнаБарр
5.
ЦМВ
Цитомегаловирус
6.
HHV-6
Герпес-вирус
6 типа
7.
HHV-7
8.
HHV-8
Герпес-вирус
7 типа
Герпес-вирус
8 типа
Основные заболевания
Орофациальный герпес,
офтальмогерпес, пневмотиты,
герпетические энцефалиты
Генитальный герпес
Ветряная оспа
Опоясывающий лишай
Инфекционный мононуклеоз,
лимфома Беркитта,
назофаренгиальная карцинома,
ворсистая лейкоплакия языка
Врожденные аномалии.
Ретинопатии, пневмониты, гепатиты,
сиаладениты.
Экзантема у детей раннего возраста,
синдром хронической усталости у
взрослых, лимфопролиферативные
заболевания
Лимфопролиферативные
заболевания
Саркома Капоши
ПУТИ ПЕРЕДАЧИ ВИРУСОВ
ГЕРПЕСА
1) контактный (половой),
2) контактно-бытовой,
3) воздушно-капельный,
4) трансплацентарный,
5) трансфузионный (при вирусемии),
6) трансмиссивный.
Группы семейства вирусов герпеса
Подсемейство



Вирус
ВПГ-1,2
VZV
ЦМВ
HHV-6
HHV-7
ВЭБ
HHV-8
Краткая характеристика
Вирусы данной группы являются причиной кожных
проявлений, поражают респираторный тракт, иногда
вызывают энцефалит. Персистируя в организме хозяина,
они поддерживают латентную инфекцию, нередко вызывая
периодические обострения, а при абортивных формах могут
привести к канцерогенезу.
Характеризуются строго выраженной патогенностью для
одного вида хозяина. Они формируют латентную инфекцию
у взрослых и вызывают генерализацию процесса при
иммунодефицитных состояниях
Обладают тропизмом к В- и Т- лимфоцитам и
персистенцией в них. Нередко являются причиной
тяжелых, смертельных лимфом и лейкемий
ВИРУС ГЕРПЕСА ЧЕЛОВЕКА - 3
VARICELLA ZOSTER
вызывает
ветряную оспу
опоясывающий
лишай
У лиц со сниженным иммунным статусом
вирус VARICELLA ZOSTER вызывает
опоясывающий герпес :
-Гангренозная форма.
-Гемморагическая форма. Тяжелые
осложнения: пневмония, энцефалит,
миокардит, гепатит.
-Язвенно-некротическая форма.
-Генерализованная форма.
Схематическая диаграмма первичного
течения ветряной оспы
Инфицирование
вирусом
ветряной оспы
gE-IgG
выделение
вируса
дни
недели
месяцы
Реактивация
Реактивация
Схематическая диаграмма динамики
маркеров VZV (опоясывающего лишая)
50-70%
Диагностика
Varicella Zoster
Назначение
Хромоген
№ по
каталогу
Количество
анализов
(включая
контроли)
«ВектоVZV-IgM»
Выявление IgМ к вирусу
Varicella Zoster
ТМБ
D-2188
12 × 8
«ВектоVZV-gE-IgG»
Вявление IgG к
гликопротеину gE вируса
Varicella Zoster
ТМБ
D-2186
12 × 8
«ВектоVZV-IgG»
Выявление IgG к вирусу
Varicella Zoster
ТМБ
D-2192
12 × 8
Интерпретация результатов
определения маркеров инфекции VZV
Стадия
заболевания
Инкубационный
период или
отсутствие
инфекции
Очень ранняя
первичная
инфенкция
Ранняя первичная
инфенкция
Поздняя первичная
инфекция
Реактивация
Паст-инфекция
Маркеры острой стадии
Пастинфекция
IgM
gE-IgG(остр.)
IgG(циркул.)
—
—
—
+
—
—
+
—
+
—
—
+
+
+
+
—
+
+
+
+
+
Опоясывающий лишай, больная Т., 23 года
Дни от
клиники
IgM к VZV,
о.е.
9
IgG к gE VZV
IgG к VZV
о.е.
титр, 1/Т
о.е.
титр, 1/Т
IgG к VZV
(BCM),
титр 1/Т
2,418
3,521
4000
3,387
25600
25600
10
2,743
3,712
3000
3,402
26000
25000
14
2,315
3,402
6400
3,656
20000
20000
21
1,437
3,594
1000
3,503
15000
12000
28
1,534
4,000
800
3,457
10000
7000
43
0,342
3,543
500
3,178
7000
4000
56
отр.
3,518
500
2,971
4000
3200
70
отр.
3,431
500
2,284
1600
2000
106
отр.
1,137
300
1,162
1000
1000
6 мес.
отр.
отр.
отр.
0,534
400
500
10 мес.
отр.
отр.
отр.
0,442
200
400
Группы семейства вирусов герпеса
Подсемейство



Вирус
ВПГ-1,2
VZV
Краткая характеристика
Вирусы данной группы являются причиной кожных
проявлений, поражают респираторный тракт, иногда
вызывают энцефалит. Персистируя в организме хозяина,
они поддерживают латентную инфекцию, нередко вызывая
периодические обострения, а при абортивных формах могут
привести к канцерогенезу.
ЦМВ
HHV-6
HHV-7
Характеризуются строго выраженной патогенностью для
одного вида хозяина. Они формируют латентную инфекцию
у взрослых и вызывают генерализацию процесса при
иммунодефицитных состояниях
ВЭБ
Обладают тропизмом к В- и Т- лимфоцитам и
персистенцией в них. Нередко являются причиной
тяжелых, смертельных лимфом и лейкемий
HHV-8
Распространенность ВЭБ среди
различных возрастных групп
Клетки, поражаемые ВЭБ:
• В- и Т-лимфоциты;
• эпителиальные клетки носоглотки;
• железистый эпителий желудка,
слюнных желез, щитовидной железы.
Ассоциация инфекции ВЭБ с различными заболеваниями
Заболевание
Инфекционный мононуклеоз
Волосатая лейкоплакия полости рта
Лимфома Ходжкина
Смешанно-клеточная/лимфоцит-дефицитная
СПИД-ассоциированная
Неходжкинские лимфомы и другие опухоли,
связанные с иммунодефицитом
Неходжкинская лимфома, СПИД-ассоциированная
Лимфома мозга, СПИД-ассоциированная
Пост-трансплантационные лифопролиферации
Лимфома Беркитта, Африканская
Лимфома Беркитта, Северо-американская
Лимфома Беркитта, СПИД-ассоциированная
Назальная T/NK-клеточная лимфома
Рак
Рак желудка
Лимфоэпителиома
Рак груди
Назофарингеальная карцинома
% ВЭБассоциированности
100%
100%
50-90%
>95%
40%
95%
95%
>95%
20%
30%
>95%
6-16%
>90%
0-51%
100%
Вирус
Эпштейна-Барр
Инфекционный
мононуклеоз
Назофарингеальная
карцинома
Лимфома
Беркитта
Лейкоплакия слизистых
оболочек языка, полости рта
Маркеры инфекции
ВЭБ
Маркеры
острой стадии:
• IgM к VCA
• IgG к EA
• низкоавидные
IgG к VCA
Маркеры
паст-инфекции:
• IgG к EBNA
• высокоавидные
IgG к VCA
Динамика продукции антител к
ВЭБ
Концен трация антител
ИА IgG-VCA
IgG-VCA
IgM-VCA
IgG-VCA
IgM-VCA
IgG-EBNA-1
IgM-EA
IgG-EA
IgG-EBNA-1
IgG-EA
IgM-EA
1
2
Недели
3
4
2
3
4
Месяцы
5
Концентрация антител
Реактивация ВЭБ
Индекс авидности
ИА,
VCA-IgG
%
VCA-IgG
VCA-IgM
EA-IgG
NA-IgG
Серологическая диагностика
первичного инфицирования ВЭБ
«ВектоВЭБ – VCA – IgGавидность»
Хромоген
№ по
каталогу
Количество анализов
(включая контроли)
ТМБ
D-2183
6×8
Назначение
Подтверждение диагноза первичной инфекции
Дифференцировка первичной инфекции от хронической и паст-инфекции
Основные характеристики
По чувствительности и специфичности набор реагентов «ВектоВЭБ – VCA –
IgG– авидность» не уступает набору реагентов «ВектоВЭБ – VCA – IgG»
Исследуемый образец – 10 мкл сыворотки (рабочее разведение сыворотки –
1:100)
Общее время инкубации – 1час 40 минут
Срок хранения: 9 месяцев при температуре 2-8 0С
При первичном инфицировании более 80% сывороток
являются низкоавидными и имеют индекс авидности (ИА)
анти-VCA-IgG ниже 60%.
В течение нескольких недель/месяцев происходит созревание
антител и возрастание ИА.
В сыворотках пациентов в период паст-инфекции значение
ИА более 70%.
Наличие низкоавидных VCA-IgG – острая стадия первичной
инфекции, либо недавняя (несколько недель) первичная инфекция.
Наличие высокоавидных VCA-IgG при отсутствии VCA-IgМ –
паст-инфекция.
Наличие высокоавидных VCA-IgG в присутствии VCA-IgМ –
реактивация вируса, либо поздняя первичная инфекция.
Пограничный результат ИА – поздняя первичная либо ранняя
паст-инфекция.
Интерпретация результатов определения
маркеров инфекции ВЭБ
Стадия
заболевания
при первичной
инфекции
Инкубационный
период или
отсутствие
инфекции
Очень ранняя
первичная
инфенкция
Ранняя первичная
инфенкция
Поздняя
первичная
инфекция
Атипичная
первичная
инфекция
VCA
IgM
VCA
IgG
—
Индекс
авидности
VCA IgG
EA
IgG
EBNA
IgG
—
—
—
—
+
—/+
—/<60%
—
—
+
+
<60%
+
±
+
60 – 70%
+
—
±
—
+
<60%
+
(ОП<0,5)
+
(ОП<0,5)
Интерпретация результатов определения
маркеров инфекции ВЭБ
Стадия
заболевания при
хронической
инфекции
VCA
IgM
VCA
IgG
Ранняя паст-инфекция
—
Поздняя пастинфекция (латентная
инфекция у клинически
здоровых лиц)
Реактивация
Индекс
авидности
VCA IgG
EA
IgG
EBNA
IgG
+
60 – 70%
+
+
—
+
>70%
—
+
+
↑+
>70%
+
↑+
Атипичная реактивация
—
Хроническая инфекция
±
↑+
+
>70%
>70%
(ОП>0,5)
+
↑+
(ОП>0,5)
+
—
Результаты обследования
пациентов методом ИФА
Частота положительных
результатов, %
Титры
1:3200
1:2800
1:2400
1:2000
1:1600
1:1200
1:800
1:400
Группа 1 – доноры
Группа 3 – дети, контроль
- IgG к EA, IgM к VCA Группа 2 – беременные Группа 4 – дети с инфекцион- IgG к EBNA
женщины
ным мононуклеозом
Диагностика вируса
Эпштейна-Барр
«ВектоВЭБ-VCA-IgM»
№ ФСР 2008/03377
«ВектоВЭБ-EА-IgG»
№ ФСР 2008/03378
«ВектоВЭБ-NA-IgG»
№ ФСР 2008/03379
«ВектоВЭБ-VCA-IgG»
№ ФСР 2011/11928
«ВектоВЭБ-VCA-IgGавидность»
№ ФСР 2011/11927
Назначение
№ по
каталогу
Количество
анализов
(включая
контроли)
Выявление IgМ к капсидному антигену
VCA вируса Эпштейна-Барр
D-2176
12 × 8
Определение IgG к раннему антигену
ЕА вируса Эпштейна-Барр
D-2172
12 × 8
Определение IgG к ядерному антигену
(EBNA) вируса Эпштейна-Барр
D-2170
12 × 8
Определение IgG к капсидному
антигену VCA вируса Эпштейна-Барр
D-2184
12 × 8
Определение индекса авидности IgG к
капсидному антигену VCA вируса
Эпштейна-Барр
D-2183
6×8
Группы семейства вирусов герпеса
Подсемейство



Вирус
ВПГ-1,2
VZV
ЦМВ
HHV-6
HHV-7
ВЭБ
HHV-8
Краткая характеристика
Вирусы данной группы являются причиной кожных
проявлений, поражают респираторный тракт, иногда
вызывают энцефалит. Персистируя в организме хозяина,
они поддерживают латентную инфекцию, нередко вызывая
периодические обострения, а при абортивных формах могут
привести к канцерогенезу.
Характеризуются строго выраженной патогенностью для
одного вида хозяина. Они формируют латентную инфекцию
у взрослых и вызывают генерализацию процесса при
иммунодефицитных состояниях
Обладают тропизмом к В- и Т- лимфоцитам и
персистенцией в них. Нередко являются причиной
тяжелых, смертельных лимфом и лейкемий
Клетки, поражаемые HHV-6:
• В- и Т-лимфоциты (более 90%
инфицированных клеток);
• Моноцитарные макрофаги;
• Глиальные клетки;
• Клетки тимуса.
HHV-6
Внезапная
экзантема
Синдром
хронической
усталости
Лимфопролиферативные
заболевания
Динамика образования антител
Антитела к HHV-6 обнаруживаются у 40-100%
населения в зависимости от возраста, места
проживания, социально-экологических условий
клиника
4-5
дни
6-7
15-20 (15-20)
У лиц со сниженным иммунным статусом
HHV-6 вызывает генерализованные формы
инфекции:
-Энцефалиты.
-Пневмонии.
-Лимфоаденопатии.
-Лейкемия.
- Коллагенозы и пр.
Диагностика
герпес-вируса
6 типа
Назначение
«ВектоHHV-6-IgG»
РУ № ФСР 2011/09853
Выявление IgG к герпесвирусу 6 типа
№ по
каталогу
Количество
анализов
(включая
контроли)
D-2166
12 × 8
Группы семейства вирусов герпеса
Подсемейство



Вирус
ВПГ-1,2
VZV
ЦМВ
HHV-6
HHV-7
ВЭБ
HHV-8
Краткая характеристика
Вирусы данной группы являются причиной кожных
проявлений, поражают респираторный тракт, иногда
вызывают энцефалит. Персистируя в организме хозяина,
они поддерживают латентную инфекцию, нередко вызывая
периодические обострения, а при абортивных формах могут
привести к канцерогенезу.
Характеризуются строго выраженной патогенностью для
одного вида хозяина. Они формируют латентную инфекцию
у взрослых и вызывают генерализацию процесса при
иммунодефицитных состояниях
Обладают тропизмом к В- и Т- лимфоцитам и
персистенцией в них. Нередко являются причиной
тяжелых, смертельных лимфом и лейкемий
Спектр заболеваний, ассоциированных с ВГЧ-8
Тип заболевания
Первичная
инфекция
Очень сильная
ассоциация с ВГЧ-8
Доказательство
присутствия
ДНК ВГЧ-8
Описание
Инфекционные мононуклеозоподобные заболевания
Саркома Капоши (все формы).
Многоочаговая болезнь Кастлемана у ВИЧ-инфицированных и не-ВИЧинфицированных пациентов.
Первичная выпотная лимфома (редкая опухоль, но часто встречается у
ВИЧ-инфицированных пациентов).
Развитие СК и ПВЛ у реципиентов крови, органов и тканей.
Кожные поражения, не связанные с СК, у реципиентов крови, органов
и тканей.
Реактивная лимфопатия при болезни Бовена.
Пузырчатка у ВИЧ-позитивных и ВИЧ-негативных пациентов.
Опухоли слюнных желез (двусторонняя лимфома околоушных желез у
ВГЧ-8-позитивных пациентов).
ВИЧ-инфицированные пациенты с интерстициальными пневмонитами.
Персистентная виремия ВГЧ-8 с коинфекцией человеческим Тлимфотропным вирусом 1 типа и миелофиброзом.
Гемофагоцитарный синдром.
Множественная миелома.
Болезнь Кикуши (гистоцитарный некротизирующий лимфаденит).
Саркоидоз.
HHV-8
Саркома
Капоши
Неходжкинская
лимфома
Многоочаговая
болезнь
Кастлемана
ВГЧ-8 выявляется:
 в эндотелиальных клетках сосудов и перивоскулярных
веретеновидных клетках из поражений СК;
 в периферических мононуклеарах крови у носителей
инфекции;
 в клетках глотки у 30% инфицированных пациентов;
 в слюне у 15% инфицированных пациентов;
 в тканях простаты (более 90% железистых клеток
эпителия);
 в сперме, а не в спермацитах
Возможные пути передачи ВГЧ-8
 трансфузионный;
 воздушно-капельный (контаминированая вирусом
слюна);
 контактный (половой).
Эпидемическая Саркома Капоши – наиболее
характерное проявление СПИДа
Основные клинические признаки СК у больных с
ВИЧ-инфекцией:
 Развитие заболевания у людей молодого возраста
(30-35 лет);
 Множественность, асимметричность и большая
распространенность кожных очагов поражения;
 Склонность к быстрой генерализации с поражением
слизистых оболочек полости рта и верхних дыхательных
путей, лимфатических узлов и внутренних органов;
 Частое изолированное поражение слизистых оболочек
и периферических лимфатических узлов;
 Высокая смертность больных в короткие сроки от
начала первых проявлений болезни (80% больных
умирают в течение 2 лет).
Диагностика
герпес-вируса
8 типа
Назначение
«ВектоHHV-8-IgG»
Выявление IgG к герпесвирусу 8 типа
Хромоген
№ по
каталогу
Количество
анализов
(включая
контроли)
ТМБ
D-2160
12 × 8
Серодиагностика HHV-8
у различных групп населения
г. Новосибирска
87
%
Титр IgG к HHV-8 у больных
саркомой Капоши (СК)
титр
100
1:52000
1:52000
80
1:3500
5
6
4
3
1,5
3
1:2000
0,5
2
1:800
1:500
1
- доноры
- раковые больные
- ВИЧ-инфицированные
1:400
- пациенты КВД
- дети (3-14 лет)
- больные СК (ВИЧ-инф.)
Наборы реагентов ЗАО «Вектор-Бест» для диагностики ГВИ
ВектоВПГ-1,2-IgG
ВектоВПГ-IgM
ВектоВПГ-1,2-IgG-авидность
ВектоВПГ-2-IgG
ВектоВПГ-2-IgM
ВектоВПГ-2 –IgG-авидность
ВПГ-IgM, IgG- авидность - контрольная панель
сывороток
ВектоVZV-IgG
ВектоVZV-IgM
ВектоVZV-gE-IgG
ВектоВЭБ-NA-IgG
ВектоВЭБ-EA-IgG
ВектоВЭБ-VCA-IgM
ВектоВЭБ-VCA-IgG
ВектоВЭБ-VCA-IgG-авидность
ВектоЦМВ-IgG
ВектоЦМВ-IgG-ИФА-БЕСТ (количествен.)
ВектоЦМВ-IgG-авидность
ВектоЦМВ-IEA-антитела
ВектоЦМВ-IgM
ЦМВ-IgM-контрольная панель сывороток
РУ № ФСР 2012/14012
РУ № ФСР 2007/00613
РУ № РЗН 2013/447
РУ № ФСР 2007/00617
РУ № ФСР 2010/09804
РУ № ФСР 2008/03643
8 образцов по 0,2 мл
(лиофилизированные)
6
ВектоHHV-6-IgG
РУ № ФСР 2011/09853
8
ВектоHHV-8-IgG
HHV-8 -IgG-контрольная панель сывороток
8 образцов по 0,2 мл (лиофил.)
Тип вирусов герпеса человека
1
2
3
4
5
РУ № ФСР 2008/03379
РУ № ФСР 2008/03378
РУ № ФСР 2008/03377
РУ № ФСР 2011/11928
РУ № ФСР 2011/11927
РУ № ФСР 2012/13834
РУ № ФСР 2012/13930
РУ № ФСР 2009/04546
РУ № ФСР 2008/03442
РУ № ФСР 2012/13931
8 образцов по 0,2 мл (лиофил.)
Спасибо за внимание