Хасанов А. Х., Давлетшин Р. А., Давлетшина Г. К

Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298).
Биология. Вып. 2. С. 38–41.
А. Х. Хасанов, Р. А. Давлетшин, Г. К. Давлетшина, Р. А. Нурмухаметова,
В. Т. Гайсина, З. С. Кузьмина
КЛИНИКО-ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ
У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЛЁГКИХ
Обследовано 65 больных с хронической обструктивной болезнью лёгких (ХОБЛ) и 37 больных
ревматоидным артритом (РА). Установлено, что для коморбидного течения ХОБЛ и РА характерно
нарушение иммунорегуляции, что проявляется в снижении количества CD3-, CD8-, CD16-клеток.
По мере прогрессирования дыхательной недостаточности ХОБЛ и активности РА наблюдалось увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови. Высокая активность гуморального иммунитета выявлена при прогрессировании воспалительного процесса в лёгких и суставах, ассоциированная с наличием HLA-A3, HLA-B5, HLA-B35 и HLA-DRB1*01, HLA-DRB1*17, HLA-DRB1*04.
Ключевые слова: коморбидное течение ХОБЛ и РА, генетический полиморфизм, нарушение
­иммунорегуляции.
Введение. По данным ВОЗ, в настоящее время около 250 миллионов человек в мире страдают хронической обструктивной болезнью лёгких
(ХОБЛ). По общемировой статистике, это второе
по распространённости неинфекционное заболевание. Заболеваемость ХОБЛ прогрессивно растёт и является единственной причиной смерти с
увеличением количества регистрируемых случаев [1; 2]. ХОБЛ, по прогнозам ВОЗ, станет третьей
наиболее распространённой причиной смерти после инсульта и инфаркта миокарда к 2030 г. [3].
Наиболее часто встречающимися коморбидными
состояниями при ХОБЛ являются артериальная
гипертензия (АГ) (28 %), сахарный диабет (14 %),
ишемическая болезнь сердца (10 %) [2; 3].
Вместе с тем недостаточно изучен вопрос коморбидности ХОБЛ с аутоиммунными ревматологическими заболеваниями, в частности с
ревматоидным артритом (РА). По современным
представлениям, в основе развития и прогрессирования РА лежит генерализованный дефект иммунорегуляторных механизмов, определяющих
развитие клеточных и гуморальных иммунных
реакций. Это приводит к хроническому прогрессирующему воспалению, затрагивающему различные органы и системы организма человека
[4–6].
Цель. Изучение клинических особенностей
состояния иммунной системы у пациентов с коморбидным течением хронической обструктивной болезни лёгких и ревматоидного артрита.
Определение характера иммунологических нарушений в зависимости от распределения HLAантигенов I класса и аллельных вариантов гена
DRB1 при ХОБЛ с сопутствующим РА.
Материалы и методы. Обследовано 65 больных ХОБЛ в возрасте от 40 до 87 лет, из них 35
женщин и 30 мужчин. Все больные курили, индекс курящих составлял больше 10 пачек в год.
Обследуемые с респираторными симптомами
проходили углублённое клинико-функциональное тестирование. Для исследования функции
внешнего дыхания (ФВД) использовался спирограф SpiroLab II (Италия). Оценку парамет­ров
объёма форсированного выдоха за 1-ю секунду
(ОФВ1), форсированной жизненной ёмкости лёгких (ФЖЕЛ) и отношения ОФВ1 / ФЖЕЛ проводили после теста с бронхолитиком (ДАИ сальбутамол 400 мкг). Диагноз ХОБЛ устанавливался на основании рекомендаций программы
«Глобальная стратегия диагностики, лечения и
профилактики ХОБЛ» [7].
Важный фактор, влияющий на течение и тяжесть ХОБЛ,— это системные коморбидные состояния [8]. По результатам настоящего исследования все пациенты с ХОБЛ имели различные
сопутствующие заболевания, в том числе РА 37
(56,9 %) больных. Среди них женщин было 31,
мужчин — 6; у всех больных РА выявлен суставной синдром. Наиболее типичным началом
болезни было симметричное поражение пястно-фаланговых, лучезапястных, проксимальных
межфаланговых, коленных, плюстне-фаланговых
суставов. Системный вариант РА диагносцирован
у 15 больных, суставной — у 22. С умеренной
степенью активности наблюдались 23 человека,
с минимальной — 14. При постановке диагноза
руководствовались критериями Американской
коллегии ревматологов (1987), в соответствии с
рабочей классификацией РА (1979).
39
Клинико-иммуногенетические особенности у больных хронической обструктивной болезнью лёгких...
Исследование аллельного полиморфизма гена
DRB1 комплекса HLA проводили методом ДНКтипирования. Генотипирование локуса DRB1
проводили методом амплификации участков
этих генов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). HLA фенотипирование локусов А
и В определяли с помощью стандартного двухступенчатого комплементзависимого лимфоцитотоксического теста.
Комплекс исследований включал также определение основных иммунологических показателей. Методом проточной цитометрии типировали субпопуляции лимфоцитов (CD3, CD4,
CD8, CD16, CD22). О функциональной активности нейтрофилов судили по НСТ-тесту, проценту фагоцитирующих клеток. Содержание иммуноглобулинов класса M, G, A в сыворотке крови
определяли методом Manchini. Циркулирующие
иммунокомплексы определяли путём осаждения
белков в сыворотке крови полиэтиленгликолем.
Статистическую обработку проводили с использованием критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение. Результаты изучения частоты встречаемости ХОБЛ с учётом возраста и пола представлены в табл. 1. Отмечено
возрастание частоты распространённости ХОБЛ
с ИК >10 пачка/год как у мужчин, так и у женщин с увеличением возраста пациентов. Так,
максимальное количество курящих больных
ХОБЛ определялось в группе лиц 60 лет и более
(50,76 %, p < 0,001); до 49 лет распространённость
ХОБЛ была минимальной — 18,46 %.
Кроме того, чётко не прослеживается влияние
пола на частоту ХОБЛ. По нашим данным, ХОБЛ
в мужской группе определялась несколько чаще,
чем в женской (53,84 % против 46,16 %). После
бронходилатационного теста у лиц с респираторными симптомами впервые выявленный диагноз ХОБЛ имели 43 пациента (66,15 %). При этом
максимальное количество пациентов обоего пола
с впервые установленной ХОБЛ имели I–II стадию заболевания.
Согласно данным табл. 2, лёгкая степень тяжести (I стадия) ХОБЛ определялась у 36,93 %
пациентов, II стадия — у 29,23 %, III — у 23 %,
и лишь 10,76 % обследованных имели IV стадию
заболевания. В нашем исследовании ХОБЛ у пациентов в возрасте 40–49 лет была зарегистрирована в 13,8 % случаев; 50–59 лет — в 18,5 %;
≥ 60 лет — в 67,7 % случаев. Представленные результаты свидетельствуют о нарастании числа
больных ХОБЛ в старших возрастных группах.
Таблица 1
Распространённость ХОБЛ с учётом пола и возраста с ИК > 10 пачка/год
Женщины
Мужчины
Всего
с ХОБЛ, n (%)
с ХОБЛ, n (%)
с ХОБЛ, n (%)
40–49
7 (10,76)
5 (7,69)
12 (18,47)
50–59
11 (16,92)
9 (13,84)
20 (30,77)
≥ 60
17 (26,15)
16 (24,61)
33 (50,76)
Всего
35 (53,84)
30 (46,16)
65 (100)
Возраст, лет
Таблица 2
Распределение больных ХОБЛ по возрасту, полу с учётом стадии болезни
Пациенты
с ХОБЛ
40–49 лет
50–59 лет
≥ 60 лет
Всего, n (%)
М
Ж
М
Ж
М
Ж
I
2
1
1
3
10
7
24 (36,93)
II
3
0
1
1
8
6
19 (29,23)
III
1
1
3
1
7
2
15 (23,08)
IV
1
0
2
0
4
0
7 (10,76)
Стадия болезни
Всего, n (%)
9 (13,85)
12 (18,46)
44 (67,69)
65 (100)
40
А. Х. Хасанов, Р. А. Давлетшин, Г. К. Давлетшина, Р. А. Нурмухаметова, В. Т. Гайсина, З. С. Кузьмина и др.
Среди общего числа больных с I стадией ХОБЛ
коморбидные состояния установлены у 9,2 % пациентов, со II стадией — у 13,8 %. При тяжёлой
и крайне тяжёлой степени тяжести ХОБЛ сопутствующие заболевания имели 33,8 и 43,0 % соответственно.
Комплексная оценка иммунной системы у пациентов с коморбидным течением хронической
обструктивной болезни лёгких и РА позволила
определить дефицит общего пула Т-клеточного
иммунитета (табл. 3), а также субпопуляций
CD3, CD8 и значительную депрессию CD16
(р < 0,001; р < 0,002). Указанные тенденции прогрессировали при снижении лёгочной функции
больных ХОБЛ и генерализации системных проявлений РА.
Исследование В-лимфоцитов и гуморального
иммунитета выявило их активацию при гиперинфляции лёгких у больных ХОБЛ на основании КТ
лёгких и манифестации системных проявлений
РА. По мере прогрессирования дыхательной недостаточности ХОБЛ и активности РА наблюдалось увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови (р < 0,005; р < 0,001). Вместе с тем при
усугублении костно-хрящевой деструкции при
РА прослеживается последовательный рост активности CD22.
Анализ полиморфизма HLA антигенов I класса среди больных ХОБЛ с сопутствующим
РА показал высокий процент встречаемости
HLA-A2, HLA-A10, HLA-B5, HLA-B7, HLA-B35.
Проведение сравнительной характеристики меж-
ду показателями клеточного иммунитета и характером распределения указанных HLA антигенов
I класса выявило относительный дефицит CD3клеток преимущественно у носителей HLA-В35
(р < 0,01), HLA-A10 (p < 0,01), HLA-B7 (p < 0,03).
Дефицит CD8-клеток преобладал среди носителей HLA-В5 (р < 0,01), HLA-А2 (р < 0,01), HLA-В7
(р < 0,01), HLA-А10 (р < 0,025). Недостаточность
CD16-клеток была приблизительно одинакова
у больных РА с часто встречающимися HLA антигенами I класса.
Распределение продуктов генов комплекса
HLA у больных ХОБЛ в сочетании с РА установило, что наиболее часто встречающимися аллелями DRB1 оказались: HLA-DRB1*17, HLADRB1*04, HLA-DRB1*01, HLA-DRB1*13, HLADRB1*15, HLA-DRB1*11. Высокая ассоциативная связь дефицита CD3-клеточного иммунитета
выявлена с HLA-DRB1*04 (p < 0,01), значительный дефицит CD8 и CD16 — с HLA-DRB1*01
(p < 0,01).
Исследование гуморального иммунитета показало высокую активность при прогрессировании
воспалительного процесса в лёгких и суставах,
ассоциированную с наличием HLA-A3, HLA-B5,
HLA-B35 и HLA-DRB1*01, HLA-DRB1*17, HLADRB1*04.
Исследование неспецифической резистентности иммунной системы показало метаболическую недостаточность нейтрофилов преимущественно у больных с фенотипом HLA-B5,
HLA-А10, HLA-В7 (р < 0,01) и HLA-DRB1*04.
Таблица 3
Показатели иммунной системы при ХОБЛ с сопутствующим РА
Показатель
Контроль (n = 28)
ХОБЛ (n = 65)
РА (n = 37)
CD3, %
66,96±1,80
65,25±2,08 (р < 0,02)
64,5±0,09 (р < 0,01)
CD4, %
35,56±1,30
37,81±1,90 (р < 0,025)
38,32±0,09 (р < 0,05)
CD8, %
26,92±1,40
23,80±1,07 (р < 0,03)
19,64±0,04 (р < 0,05)
CD16, %
13,0±0,2
9,60±0,09 (р < 0,002)
7,96±0,02 (р < 0,001)
CD22, %
12,69±0,04
13,10±0,09 (р < 0,04)
14,08±0,05 (р < 0,01)
ФЧ, %
58,60±1,02
60,61±3,50 (р < 0,05)
45,62±0,19 (р < 0,01)
НСТ, %
13,6±1,2
12,4±3,6 (р < 0,025)
10,68±0,04 (р < 0,05)
НСТ, % стимулир.
26,4±0,18
25,63±0,17 (р < 0,02)
25,31±0,09 (р < 0,05)
Активность компл. СН50
67,28±2,4
65,2±2,7 (р < 0,002)
53,57±0,14 (р < 0,001)
ЦИК
44,16±0,19
48,32±2,03 (р < 0,005)
97,81±0,40 (р < 0,001)
Клинико-иммуногенетические особенности у больных хронической обструктивной болезнью лёгких...
Активность комплемента также была снижена
по мере прогрессирования дыхательной недостаточности больных ХОБЛ и высокой воспалительной активности ревматоидного процесса, ассоциированной с носительством HLA-В7, HLA-B5,
HLA-А10, HLA-A9, HLA-А2 (р < 0,01) и HLADRB1*01 (р < 0,01).
Выводы и заключение. Установлено, что для
коморбидного течения ХОБЛ и РА характерно
нарушение иммунорегуляции, что проявляется в
снижении количества CD3-, CD8-, CD16-клеток.
По мере прогрессирования дыхательной недостаточности ХОБЛ и активности РА наблюдалось увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови. Анализ полиморфизма HLA антигенов
I и II класса среди больных ХОБЛ с сопутствующим РА показал высокий процент встречаемости
HLA-A2, HLA-A10, HLA-B5, HLA-B7, HLA-B35,
наиболее часто встречающимися аллелями DRB1
оказались HLA-DRB1*17, HLA-DRB1*04, HLADRB1*01, HLA-DRB1*13, HLA-DRB1*15, HLADRB1*11.
Дефицит CD8-клеток преобладал среди носителей HLA-В5 (р < 0,01), HLA-А2 (р < 0,01), HLA-В7
(р < 0,01), HLA-А10 (р < 0,025). Недостаточность
CD16-клеток была приблизительно одинакова у
больных РА с часто встречающимися HLA антигенами I класса, значительный дефицит CD8 и
CD16 — с HLA-DRB1*01 (p < 0,01). Высокая активность гуморального иммунитета выявлена
при прогрессировании воспалительного процесса
в лёгких и суставах, ассоциированная с наличием HLA-A3, HLA-B5, HLA-B35 и HLA-DRB1*01,
HLA-DRB1*17, HLA-DRB1*04.
41
Список литературы
1. Hurd, S. S. COPD: good lung health is the key.
Comment / S. S. Hurd, C. Lenfant // Lancet. 2005.
№ 366. Р. 1832–1834.
2. WHO Key Facts COPD [Электронный ресурс].
URL: http: //www. who.int /mediacentre /factsheets/
fs315/en/index.html
3. Crisafulli, E. Role of comorbidities in a cohort
of patients with COPD undergoing pulmonary rehabilitation/ E. Crisafulli, S. Costi, F. Luppi [et al.] //
Thorax. 2008. № 63. Р. 487–492.
4. Emery, P. Early referral recommendation for
newly diagnosed rheumatoid arthritis: evidence
based development of a clinical guide / P. Emery,
F. C. Breedveld, M. Dougados [et al.] // Ann Rheum
Dis. 2002. № 61 (4). Р. 290–297.
5. Konttinen, Y. T. Current management: Management of rheumatic diseases in the era of biological
anti-rheumatic drugs / Y. T. Konttinen, S. Seitsalo,
M. Lehto, S. Santavirta // Acta Orthop. 2005. № 76
(5). Р. 614–619.
6. Furst, D. E. Updated consensus statement on
biological agents, specifically tumour necrosis factor
a (TNFa) blocking agents and interleukin-1 receptor
antagonist (IL-1ra), for the treatment of rheumatic
diseases / D. E. Furst, F. C. Breedveld, J. R. Kalden
[et al.] // Ann Rheum Dis. 2005. № 64. iv2–iv14.
7. Чучалин, А. Г. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической
обструктивной болезни лёгких. Пересмотр 2006
года : пер. с англ. М. : Атмосфера, 2007.
8. Чучалин, А. Г. Хроническая обструктивная
болезнь лёгких и сопутствующие заболевания //
Пульмонология. 2008. № 2. С. 5–14.