ИССЛЕДОВАНИЕ ХРОМОСОМ ПЕРЕВИВАЕМЫХ ЛИНИЙ

ÁÈÎÒÅÕÍÎËÎÃÈß
УДК 576.312.32:578.085.23
ИССЛЕДОВАНИЕ ХРОМОСОМ ПЕРЕВИВАЕМЫХ ЛИНИЙ
КЛЕТОК ЖИВОТНЫХ ИЗ КОЛЛЕКЦИИ ЛАБОРАТОРИИ
КУЛЬТУР ТКАНЕЙ ГУ НИИ ВИРУСОЛОГИИ РАМН
Г.Р. Михайлова,
ГУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН, Москва
В коллекции лаборатории культур
тканей НИИ вирусологии имеется 80
перевиваемых линий клеток различных видов животных. Все они пол-
ностью охарактеризованы и входят в
Каталог Всесоюзной коллекции клеточных культур [1], Human and animal
cell lines catalogue [2] и в Каталог РосТаблица
Наименование
линии
Происхождение
1. Клетки кроликов
RS-537
Фибробласты
RK-13
Почки
ПК-82
Почки
SIRC
Роговица
2. Клетки крупного рогатого скота
МDВК
Почки
ПЭК
Почки эмбриона
Разброс
хромосом
0
0
8
42
63
44
44
-“-“-
120
8
62
-“-
92
100
2
20
47
48
60
-“-
0
0
90
-“-
87-98
0
119
0
20
0
2
0
50
59
60
59
-“-“-“-“-
80-82
100-115,
120-160
4
42
42
14
76
-“-
Почки теленка
FВТ
FBL-J5
ТЭК
ВL-20
3. Клетки крыс.
NRK
Трахея
Легкое плода
Тимус эмбриона
Лимфосаркома
Почки
40-42
McA-RH7777
Гепатома
62-82
42
2n**
0
0
74-88
ПТ-80
Невринома Гассерова
узла
Саркома, индуцированХС
ная вирусом Рауса
Эмбриональная опухоль, трансформированTWERC
ная вирусом саркомы
Рауса
4. Клетки мышей
Фибробласты, клон
L929 (NCNC)
линии L
Вариант, дефицитный
L tkпо тимидинкиназе
Линия L, инфицированLSV5
ная вирусом SV5
BALB/3T3
Эмбриональные фибро(A-31)
бласты
Модальный
класс
31-46
58-65
38-45
6-16,
30-66
43-52
44-52
49-54,
79-93
44-52
56-61
56-64
51-61
НГУК-1
“Полиплоидия” *
Число хро%
мосом
39-45
79-84
26
41
-“-
32-52
72-82
16
39
-“-
46-47
84-105
10
51-52
-“-
53-68
0
0
61
40
45-54
0
0
49
-“-
45-53
96
2
51
-“-
66-79
0
0
72
-“-
Ветеринарная патология. № 1. 2003.
ÁÈÎÒÅÕÍÎËÎÃÈß
NIH/3T3
3T3 NIH TK-
-«-
58-71
0
0
66
-“-
Фибробласты, дефицитные по тимидинкиназе
51-64
120
8
59
-“-
46-56
0
0
53
-“-
73-90
0
0
82
-“-
JLSV-9
C-1300, 2M
Вариант линии LM,
дефицитный по тимидинкиназе
Эмбриональные фибробласты
Костный мозг
Нейробластома
52-71
49-55
0
80-93, 170
0
8
69
85
-“-“-
RAG
Аденокарцинома почек
52-75
96-98
4
61
-“-
50-66
103-110
12
60
-“-
32-41
76-80,120
10
39
-“-
TK-LM(1D)
SC-1
RVP3
Y-1
ЭПНТ-5
Опухоль, индуцированная вирусом Рауса
Опухоль коры надпочечника
Глиобластома
BW-5147
Тимома
YAС-1
Лимфома Молони
5. Клетки обезьян
Лейкоциты мармозетки,
В 95-В
трансформированные
вирусом ЭБ
Почки зеленой марBSC-1
тышки
ВGM
-«GMK AH-1
-«(вар.1)
GMK AH-1
-«(вар.2)
СV-1
-«Vero
-«Vero(B)
-«Vero C1008
-«MA 104
Почки макаки резус
LLC-MK2
-«FRhК-4
-«Rhfs-MPMV
Крайняя плоть макаки
резус
6. Клетки свиней
СПЭВ (вар 1) Почки эмбриона
СПЭВ (вар 2)
-«СПЭВ (вар 3)
-«СПЭВ (вар 4)
-«ППЭС
-«PS
-«PK (15)
-«IB-RS-2
-«7. Клетки собак
МДСК
Почки
А 7573
Тимус плода
Cf2th
Тимус
Ветеринарная патология. № 1. 2003.
40-47,
54-66
35-43
40-43
0
0
60
-“-
80-82
0
20
0
41
42
-“-“-
40-48
88
2
45
60
42-56
79, 100
6
53
60
55-63
120
4
60
-“-
78-96
0
0
87
-“-
85-100
108
2
90
-“-
49-60
50-64
49-58
52-58
88-105
56-69
53-67
72,89
110
108-110
112-114
110-210
130-140
117
4
2
3
6
22
16
2
57
58
54-55
56
100
68
63
-“-“-“-“42
-“-“-
49-63
0
0
59
-“-
37-40
36-40
33-40
31-40
53-61
52-56
34-39
34-40
78
77
0
0
0
100-105
71
62, 70
2
2
0
0
0
10
2
4
39
38
39
38
57
54-55
37
36
38
-“-“-“-“-“-“-“-
57-83
58-75
76-85
96
124-140
160
1
14
2
77
65-66
81
78
-“-“-
43
ÁÈÎÒÅÕÍÎËÎÃÈß
8. Клетки хомячков
Почки сирийского хоВНК-21 (С-13)
мячка
НаК
-«Фибробласты сирийскоЕНТ
го хомячка, трансформированные спонтанно
Фибробласты сирийскоЕН/А44
го хомячка, трансформированные HSV-1
14.012.81
-«Фибросаркома сирийХТКО
ского хомячка
Клетки сирийского
ХТК-1
хомячка, трансформированные НSV-2
ХТК-2
-«-
35-45
72-82
14
40
44
33-65
116-118
5
56-59
-“-
40-50
86
2
46
-“-
39-57
10
2
55
-“-
42-48
78
2
44-45
-“-
43-47
0
0
45
-“-
39-48
67, 78, 83
8
44
-“-
43-47
80
3
45
-“-
СНО
(К1)
Овариальные клетки
китайского хомячка
10-27
33, 39
4
22
22
А52m/рSG1
Перитонеальные клетки
китайского хомячка
16-22,
27-43
0
0
19
-“-
17-21,
36-42
72
4
18
-“-
6-13
22,23
2
12
6
-«-
6-21
29, 34
2
12
6
Почки кошки
32-38
67-69
4
36
38
Легкое китайского хомячка
9. Клетки различного происхождения
7/8
Aedes aegypti
(вар 1)
Аа (вар 2)
CRFK
Личинка комара
Фибробласты кошки,
инфицированные вирусом мышиной саркомы
Почки кенгуровой
крысы
26-32
60, 107
8
30
38
10-15,
20-26
0
0
11
12
Tb1Lu
Mv1Lu
Легкое летучей мыши
Легкое эмбриона норки
28-40
30
56-70
0
10
0
34
30
48
30
TH-1
Сердце черепахи
38-48
0
0
42
50
CC 81
PtK1
Muntjac
Почки мунтжака
5-14
0
0
7
7
FLK
Почки эмбриона овцы
44-55
95-96
4
54
54
ПО-2
Почки овцы
40-55
100,200
18
52
54
FHM
Клетки рыбы гольяна
47-52
0
0
48
50
Примечание: * — Понятие “полиплоидия” для гетероплоидных линий условно — под ним
понимаются варианты клеток с увеличенным количеством хромосом, обособленные от общей массы клеток.
** — 2n — диплоидное число хромосом
сийской коллекции клеточных культур (РККК) [3].
В настоящем сообщении приводятся данные кариологического анализа всех линий клеток животных,
включая варианты некоторых линий,
имеющиеся в коллекции. Исследования хромосом проводилась методом
44
Moorhead P.S. et al [4].
Из таблицы видно, что при исследовании перевиваемых линий клеток животных выявлено различие их
кариологии в пределах однотипных
органов, из которых они были получены. Наиболее характерны изменения в линиях, полученных из почек.
Ветеринарная патология. № 1. 2003.
ÁÈÎÒÅÕÍÎËÎÃÈß
Вместе с тем, варианты клеток свиней (СПЭВ) достаточно стабильны по
своему кариотипу.
Таким образом, кариологический
анализ перевиваемых линий клеток
животных из коллекции ГУ НИИ
вирусологии РАМН выявил наличие
значительных вариаций как в пределах одной линии, так и органов, из которых получена данная линия.
INVESTIGATION OF CHROMOSOMES OF ANIMAL CONTINUOUS CELL LINES FROM
THE COLLECTION OF TISSUE CULTURES LABORATORY OF VIROLOGY INSTITUTE
RAMS
Mikhailova G.P.
The D.I.Ivanovsky s Institute of Virology RAMS, Moskow
Summary
The karyological study of the continuouns
siderable variations in limits of the single line
animal cell lines from the collection of tissue
and also of the organs, from wath this cell line
cultures laboratory appeared presence of conhas origin.
Литература
1. Каталог Всесоюзной коллекции клеточных
культур. Л.: Наука, 1991.
2. Human and animal cell lines cataloge, ed.
B. Parodi et al. Italy, 1993.
3. Каталог Российской коллекции клеточ-
ных культур (РККК), С.-Петербург, Омск,
1999.
4. Moorhead P.S. et al. Chromosome preparations
of leukocytos cultured from human peripheral
blood. Exp. Cell Res., 1960, 20, 613.
УДК 578.085.23.002
ВЫЖИВАЕМОСТЬ ЛИНИЙ КУЛЬТУР КЛЕТОК
ВНК 21/13, VERO, HELA ПРИ ХРАНЕНИИ БЕЗ КОНСЕРВАНТОВ
В РАЗЛИЧНЫХ ТЕМПЕРАТУРНО-ВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ
К.Р. Кульбаева, к.в.н., А.К. Мусаева, к.б.н.
Казахский НИВИ
Проблема длительного сохранения перевиваемых культур клеток
без применения сложных методик
представляет определенный научнопрактический интерес. До настоящего времени общепринятым методом
консервирования клеток является
программное замораживание с использованием типовой аппаратуры,
которая не всегда имеется в вирусологической лаборатории. Перспективными являются исследования,
направленные на получение культур
клеток с длительным сохранением
жизнеспособности к росту без применения сложных методов криоконсервирования. Задачей наших ис-
следований явилось изучение возможности хранения клеточной суспензии без консервантов в обычных
условиях.
Материалы и методы
Суспензию клеток перевиваемых
линий ВНК 21/13, HeLa, Vero в концентрации 60 тыс. клеток в 1 см3 хранили без консервантов в питательной
среде 199 с содержанием 10% сыворотки крови крупного рогатого скота
при температуре 4°С, 18°С, 37°С в
термостате в пробирках по 5 см3. Выживаемость клеток определяли путем
подсчета живых клеток через 21, 30 и
45 суток в камере Горяева по общепринятой методике.
Таблица
Выживаемость клеток в суспензии при хранении без консерванта
ВНК-21/13
HeLa
Vero
Время хранения клет. сусп. 4°С 18°С 37°С
4°С
18°С 37°С 4°С 18°С 37°С
21 cут.
90% 70% 40% 100% 87% 20% 80% 60% 28%
30 сут.
87% 60% 35%
90%
80% 10% 80% 45% 25%
45 сут.
80% 60% 30%
87%
75% 10% 78% 45% 25%
Ветеринарная патология. № 1. 2003.
45