4 курс 8 семестр 2015-2016

ГБОУ ВПО
Волгоградский государственный медицинский университет
Министерства здравоохранения Российской Федерации
Кафедра фармацевтической и токсикологической химии
ПАРАМОНОВА М.П.
НОВИКОВ М.С.
под редакцией
ОЗЕРОВА А.А.
методические указания и
контрольные задания
ПО ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ
для студентов IV курса 8 семестр
фармацевтического факультета
(заочное отделение)
Волгоград 2016
1
УДК 615014
Рецензенты:
Ганичева Л.М. – док. фарм. наук, доцент, заведующая кафедрой
управления и экономики фармации, медицинского и
фармацевтического товароведения.
Сысуев Б.Б. – док. фарм. наук, доцент, заведующий кафедрой фармацевтической технологии и биотехнологии.
Составили:
под редакцией
канд.фарм.наук., ст.преподаватель Парамонова М.П.,
докт.фарм.наук., доцент Новиков М.С.
докт.хим.наук., профессора Озерова А.А.
Печатается по решению ЦМС ВолгГМУ
Представленное учебно-методическое пособие включает в себя
краткое содержание дисциплины данного семестра, требования и
указания по выполнению семестровой контрольной работы, варианты и
номера заданий по общей и специальной токсикологической химии.
Учебно-методическое пособие предназначено для студентов IV курса
фармацевтического факультета обучающихся по специальности 060301
«Фармация» (8 семестр, заочная форма обучения) для выполнения
контрольной работе по дисциплине токсикологическая химия.
Волгоградский государственный медицинский университет
400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов,1.
2
СОДЕРЖАНИЕ
Введение
Содержание дисциплины
Общие указания
Варианты и номера заданий по темам
Темы контрольной работы
Вопросы тестовых заданий контрольной работы
Химико-токсикологический анализ производных барбитуровой
кислоты
8 Химико-токсикологический анализ опиатов
8 План лекций и лабораторно-практических занятий
9 Вопросы к зачетному занятию
10 Экзаменационные вопросы по токсикологической химии
11 Перечень основной и дополнительной литературы
1
2
3
4
5
6
7
3
4
6
9
14
16
20
36
50
66
67
68
71
ВВЕДЕНИЕ
Токсикологическая химия является одной из специальных
фармацевтических дисциплин, занимающихся изучением свойств
ядовитых и сильнодействующих веществ, поведением их в организме
человека и трупе, разработкой способов выделения и методов
определения токсических соединений и метаболитов в биологических
объектах.
Овладение
теоретическими
и
практическими
основами
токсикологической химии необходимо провизору для последующей
специализации в области судебно-химической экспертизы, клинической
токсикологии, наркологии, криминалистики, клинической фармации и
экологии.
Цель курса
Сформировать
область
знаний
в
области
химикотоксикологических исследований, приучить студента к научному методу
исследования, к постановке опыта и тщательному его проведению в
точно определённых условиях, к построению логически правильных
выводов, вытекающих из полученных данных, а также к строгому
документальному их оформлению.
Задачи курса
•
сформировать общие представления об объектах химикотоксикологического анализа;
•
привить навыки и умения, необходимые для обнаружения и
определения химических веществ, вызвавших отравление в различных
объектах исследования;
•
сформировать знания в области метаболизма и биотрансформации
ядовитых и лекарственных веществ в организме и в трупе;
•
формировать знания по распределению отдельных ядовитых и сильнодействующих лекарственных веществ в различных органах и системах,
сохраняемости их в объектах и возможности определения одних веществ в
присутствии других;
•
изолировать,
обнаруживать
и
количественно
определять
токсикологические вещества в биологических объектах при проведении
судебно-химического анализа;
•
изолировать и определять токсические вещества в биологических
жидкостях
и
прочих
объектах
при
проведении
химикотоксикологического анализа с диагностической целью;
4
•
давать экспертную оценку результатам химико-токсикологического
анализа различных объектов исследования с учётом токсикокинетики
соединений;
•
составить экспертное заключение при проведении химикотоксикологического анализа с диагностической целью и акт проведения
судебно-химической экспертизы;
•
основываясь на данных судебно-медицинской экспертизы,
клиническом
диагнозе,
составить
план
проведения
химикотоксикологического анализа с применением комплекса химических и
физико-химических методов исследования.
Программа курса токсикологической химии
Программа курса токсикологической химии для студентов заочного
отделения составлена в соответствии с рабочей программой по
дисциплине «Токсикологическая химия», разработанной в соответствии с
Федеральным государственным образовательным стандартом (ФГОС)
высшего профессионального медицинского и фармацевтического
образования по направлению подготовки провизоров, с учетом
рекомендаций примерной основной образовательной программы высшего
профессионального образования по направлению подготовки провизоров
и примерной учебной программы дисциплины (2011 г.)
Рабочая программа по токсикологической химии учитывает
квалификационные характеристики провизоров по специальности 060301
– Фармация.
Рабочая программа составлена в соответствие с современным
состоянием науки и практики в области фармации и токсикологической
химии. В программе представлены основные положения, методология
химико-токсикологического
исследования,
связь
с
другими
дисциплинами,
современные
методы
анализа,
особенности
интерпретации получаемых результатов и оформления судебнохимических экспертиз.
Классификация ядовитых веществ в токсикологической химии
основана на методах выделения яда из объекта исследования.
Программа по токсикологической химии для студентов заочного
обучения является руководством при изучении курса, подготовке к
лабораторным занятиям и экзамену. Наиболее сложные и важные
вопросы программы планируется дать в лекциях по токсикологической
химии в период сессии, на лабораторных занятиях и во время
консультаций.
ВЫПОЛНЕНИЕ УЧЕБНОГО ПЛАНА (IV курс, 8 семестр)
Учебный план студента-заочника включает:
 Самостоятельное изучение теоретического курса.
5
 Выполнение контрольной работы по рабочей программе,
утверждённой ЦМС и учёным Советом университета.
 Посещение лекций в период лабораторно-экзаменационной
сессии.
 Выполнение лабораторного практикума и сдача зачёта.
При выполнении контрольной работы студенты систематизируют
приобретённые теоретические знания, излагают их кратко и
исчерпывающе, приводя формулы соединений и химические уравнения
протекающих реакций.
В процессе рецензирования представленных контрольных работ
оцениваются результаты самостоятельной работы студентов. Студенты,
получившие зачёт по контрольной работе допускаются к лабораторному
практикуму. К сдаче экзамена допускаются студенты после
прослушивания лекций и полного выполнения плана лабораторных работ
на кафедре.
СОДЕРЖАНИЕ ДИСЦИПЛИНЫ
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
ФГОС III
(для студентов заочного отделения IV курс, 8 семестр)
1.1. Группа токсикологически важных веществ, изолируемых
экстракцией и сорбцией.
1.1.1. Группа веществ, изолируемых экстракцией полярными
растворителями. Лекарственные средства, наркотические
вещества.
1.1.1.1.Общая характеристика группы. Физико-химические свойства и
реакционная способность ядовитых и сильнодействующих
веществ органической природы. Основные физико-химические
константы (рН, рКа, коэффициент распределения - Кр).
1.1.1.2.Общие и частные методы изолирования. Теоретические основы
изолирования. Термодинамика процесса. Факторы, влияющие на
эффективность экстракции на разных этапах изолирования (рН
среды, степень ионизации вещества, природа экстрагента, время
и кратность экстракции, влияние электролита и др.).
1.1.1.3.Методы очистки и отделения лекарственных соединений от
сопутствующих эндогенных веществ, их обоснование.
1.1.1.4.Методы обнаружения «лекарственных ядов». Химические
методы исследования. Хромогенные и осадочные реакции.
6
Микрокристаллоскопия. чувствительность и специфичность
реакций. Физико-химические методы анализа. Хроматография в
тонком слое сорбента, ТСХ как метод разделения и
предварительной идентификации. Перспективы использования
ВЭЖХ. Методы абсорбционной спектроскопии. Электронные
спектры. Хромато-масс спектрометрия, использование в
химико-токсикологическом
анализе.
Иммуноферментный
анализ. Фармакологические пробы при идентификации
некоторых алкалоидов (атропин, никотин, стрихнин).
1.1.1.5.Методы количественного определения «лекарственных ядов».
Дифференциальная
спектрофотометрия
(на
примере
производных барбитуровой кислоты). Фотометрические и
экстракционно-фотометрические методы анализа (на примере
азотсодержащих
оснований).
Чувствительность
и
специфичность методов. Значение данных о количественном
содержании вещества в органах трупа и биологических
жидкостях при оценке результатов исследования.
1.1.1.6.Особенности химико-токсикологического анализа отдельных
групп соединений, изолируемых экстракцией полярными
растворителями:
1.1.1.6.1. Подгруппа веществ, экстрагируемых хлороформом из
кислого раствора: производные барбитуровой кислоты
(барбитал,
фенобарбитал,
барбамил,
этаминал-натрия,
бутобарбитал). Салициловая кислота.
1.1.1.6.2. Подгруппа веществ, экстрагируемых хлороформом из
щелочного раствора: алкалоиды - производные пиридина и
пиперидина (пахикарпин, никотин, анабазин); производные
тропана (атропин, скополамин, кокаин); производные хинолина
(хинин); производные фенантренизохинолина (морфин, кодеин,
этилморфин,
героин);
производные
бензилизохинолина
(папаверин); производные тетраизохинолина (наркотин);
производные индола (стрихнин, бруцин); производные пурина
(кофеин). Синтетический аналог морфина - промедол.
Синтетические
производные:
пиразолона
(антипирин,
амидопирин,
анальгин);
парааминобензойной
кислоты
(новокаин, новокаинамид); фенотиазина (аминазин, дипразин,
тиоридазин,
левомепромазин);
1,4-бензодиазепины
(хлордиазепоксид,
оксазепам,
диазепам,
нитразепам);
фенилалкиламины
(эфедрин,
эфедрон,
амфетамин,
метамфетамин).
1.1.1.6.3. Подгруппа веществ, экстрагируемых диэтиловым эфиром и
этилацетатом из нейтральной среды: каннабиноиды
(каннабидиол, каннабинол, тетрагидроканнабинол, Δ9ТГК
кислота)
7
1.1.2. Группа веществ, изолируемых экстракцией неполярными
(органическими) растворителями. Пестициды.
1.1.2.1.Общая характеристика группы. Значение для народного
хозяйства. Проблема остаточных количеств пестицидов.
Причины и распространённость отравлений. Классификация
пестицидов: производственная, по способности проникать в
организм вредителя, по характеру и механизму действия, по
токсичности. Химическая классификация.
1.1.2.2.Объекты химико-токсикологического анализа на пестициды.
Правила отбора, направление на анализ. Методы извлечения из
биологических и прочих объектов исследования.
1.1.2.3.Фосфорорганические
соединения
(ФОС):
производные
фосфоновой (хлорофос, дихлофос), тиофосфорной (метафос,
тиофос), дитиофосфосфорной (карбафос) кислот. Строение и
физико-химические свойства. Токсичность, особенности
токсикокинетики. Объекты исследования на ФОС. Основные
этапы судебно-химического анализа. Энзиматический метод, его
значение. Реакции окрашивания, хроматография в тонком слое
сорбента. Специфичность методов. Использование ГЖХ с
селективными детекторами. Количественное определение ФОС
по фосфору. Оценка результатов судебно-химического
исследования.
1.1.2.4.Пестициды из группы хлорорганических производных (ХОП):
гексахлорциклогексан, гептахлор. Общая характеристика и
физико-химические свойства. Токсичность, способность
кумуляции. Объекты химико-токсикологического анализа.
Методы химико-токсикологического исследования.
1.1.2.5.Пестициды из группы производных карбаминовой кислоты
(севин).
Общая
характеристика,
методы
химикотоксикологического исследования.
1.1.2.6.Синтетические пиретроиды. Токсичность, токсикокинетика,
метаболизм. Физико-химические свойства и методы химикотоксикологического анализа.
1.2. Допинговые средства. Экотоксиканты. Биологическая опасность и
биологический терроризм.
1.2.1. Допинговые средства. Понятие, история использования,
основные классы. Особенности отбора образцов и проведения
исследований. Методы и интерпретация полученных
результатов.
1.2.2.
Экотоксиканты. Понятие, классификация. Экотоксиканты и
особенности их определения в биосистемах.
8
1.2.3.
Биологическая опасность и биологический терроризм.
Основные
понятия.
Природные
токсины:
источники,
классификация, токсические эффекты, методы определения
По вышеизложенной части программы студент IV курса в течение
8 семестра обязан выполнить одну контрольную работу и представить её
на кафедру "Фармацевтической и токсикологической химии" до 25 мая
текущего года.
ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ
по выполнению и оформлению контрольных работ
Основополагающим условием успешного освоения курса
токсикологической химии является правильно организованная
самостоятельная работа студента-заочника по методической литературе,
прилагаемой в конце данного пособия. Изучение материала
рекомендуется вести в соответствии с вышеизложенной программой в
следующем порядке:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Ознакомиться с литературными источниками, содержащими
изучаемый раздел.
Внимательно прочитать изучаемый раздел и составить общее
представление о материале, выделив трудные и непонятные моменты.
Тщательно изучить раздел в соответствии с задачами
токсикологической
химии (обращать внимание на специфические
особенности токсикологической химии, основные теоретические
положения, терминологию, формулировки).
При изучении частных вопросов по дисциплине необходимо
уделять наибольшее внимание методам изолирования, специфическим
особенностям изолирования из биологического объекта каждого
химического соединения, методам очистки извлечений, методам
качественного анализа, способам количественного определения, путям
метаболизма изучаемого вещества в организме человека и трупе,
токсикологическому значению препарата.
Проверить усвоение по вопросам темы.
Письменно ответить на вопросы контрольной работы. Ответы на
вопросы должны быть краткими, конкретными, логичными, содержать
исчерпывающие пояснения (исключить механическое переписывание
учебника). Ответы должны иллюстрироваться схемами, уравнениями
химических реакций, расчётами.
Контрольная работа выполняется в школьной общей ученической
тетради. Для замечаний оставляются поля не менее 3 см. вопрос
нумеруется в соответствии с номером задания,
полностью
9
переписывается, подчеркивается отделяется от ответа интервалом 1,5 - 2
см. Титульный лист оформляется следующим образом:
Волгоградский государственный медицинский университет
Контрольная работа № 2
по токсикологической химии
студента IV курса группы №__ заочного отделения
фармацевтического факультета
_________________________________________________
(Ф.И.О. полностью)
Вариант №
Зачетная книжка №________
Домашний адрес
(полностью)
Подается
(впервые, повторно)
В конце контрольной работы приводится список используемой
литературы. Правило записи используемой литературы: порядковый
номер, фамилия и инициалы автора, полное название книги, место и год
издания, том, страницы. Далее ставится подпись студента и дата сдачи
контрольной
работы.
9.
Контрольная
работа
отправляется
в
адрес
деканата
в
соответствии с графиком.
10. При зачтённой работе, контрольная остаётся на кафедре, при зачтённой "условно" она
отдаётся на руки студенту для выполнения
работы над ошибками. После исправления работа приносится на
зачётную сессию и отчитывается преподавателю.
11. Если контрольная работа не зачтена, студент выполняет незачтенные
задания и предоставляет их на повторное рецензирование вместе с
незачтенной первоначально контрольной работой.
12. Если в процессе выполнения работы возникают затруднения или
неясности, он может обратиться к рецензенту за разъяснениями (дни и
время консультаций указаны
на кафедре). При этом, студенту
необходимо владеть основным материалом учебника по данной теме,
кратко и четко формулировать вопросы.
13. Работа выполняется с вышеуказанными требованиями. Работа, не
соответствующая требованиям, проверке не подлежит.
14. К сдаче экзамена допускаются студенты, имеющие зачеты по всем
контрольным работам. Экзамен по токсикологической химии сдаётся в
8.
10
конце 8 семестра. В экзаменационные вопросы входит материал по всему
курсу обучения данной дисциплины.
15. Номер контрольной работы определяется двумя последними цифрами
зачётной книжки (столбец по вертикали). Номера заданий по темам
расположены в строчке (по горизонтали) против номера вариантов.
Римскими цифрами обозначены номера тем. Например, номер зачётной
книжки 1015, следовательно, номер варианта - 15 и номера заданий по
темам следующие: 1,2,3,8,2,7.
15
I
II
III
IV
V
1
2
3
8
2
Номера тестовых заданий выполняются в соответствии с последней
цифрой зачетной книжки. Например, номер зачётной книжки 1015,
следовательно, выполняются все тестовые задания, заканчивающиеся на
цифру 5 (5,15,25,35,45, и т.д.).
Номера заданий по вариантам меняются каждый учебный год. (Табл. №1)
При выполнении контрольной работы необходимо обратить особое
внимание на следующее:
1. В соответствии с действующей программой (2011 год) по
токсикологической химии принята новая классификация
токсикологически важных веществ, которая изложена в рабочей
программе в разделе «Частные вопросы» настоящих методических
указаний.
2. При характеристике предмета и задач, стоящих перед
токсикологической химией, необходимо чётко охарактеризовать
специфические особенности предмета, связь с другими
дисциплинами.
3. Большое внимание следует уделить методам изолирования
токсических веществ из биообъектов, отмечая, какие вещества
изолируются тем или иным методом. Если методов изолирования
группы веществ несколько, нужно сопоставить их, отметить
преимущество и недостатки того или иного метода в применении к
химико-токсикологическому анализу. Следует обращать внимание
на теоретические основы методов изолирования, учитывая
физико-химические свойства веществ. Например,
 морфин экстрагируют смесью хлороформ – н-бутанол (9:1)
после кислотного гидролиза при температуре 110°С для
освобождения от прочной связи с глюкуроновой кислотой;
 анализ некоторых веществ невозможен без предварительной
дериватизации, Δ9ТГК кислота метилируется йодистым
11
метилом для перевода в диметиловый эфир Δ9ТГК кислоты и
последующего ГЖХ-ХМС определения.
4. Изучая и описывая отдельные ядовитые и сильнодействующие
вещества, следует обращать внимание на их токсикологическое и
судебно-химическое
значение.
Последнее
определяется
токсичностью,
широтой
распространения
веществ
в
промышленности и сельском хозяйстве, медицине, в быту;
возможностью доступа к ним более или менее широких слоёв
населения. Немаловажным является изучение особенностей
токсического действия вещества на организм человека и
признаков отравления.
5. Формулы сложных органических веществ и реагентов следует
писать структурно, указывая химическое название.
6. Описание методов обнаружения отдельных веществ следует
начинать с общих методов или реакций, а потом переходить к
частным (хроматографический скрининг, затем общие цветные
реакции и, наконец, частные реакции). При этом нужно обращать
внимание на условия проведения реакций, специфичность для
данного вещества, чувствительность, отмечая судебно-химическое
значение
реакций
(положительное
или
отрицательное).
Обязательно приводятся химические уравнения реакций,
отмечаются характер окраски, цвет осадка, специфический запах,
форма кристаллов и т.п. Методики реакций переписывать не надо.
Достаточно указать название реакции и обосновать её.
7. При описании методов количественного определения следует
приводить его обоснование, химизм, особенности, принцип
расчета,
оценку
метода.
Необходимо
указать,
когда
количественное определение является обязательным и почему?
8. При рассмотрении метаболизма соединения следует указать пути
его
превращения
в
организме,
привести
химизм
биотрансформации и назвать метаболиты.
9. При ответе на вопросы, касающиеся характеристики отдельных
групп (алкалоиды, барбитураты, пестициды и др.), необходимо
дать точное определение и название этой группы веществ по
классификации, раскрыть их химическую природу, привести
примеры веществ из каждой группы (название, структурная
формула), физические и химические свойства.
10. Ответ на вопрос (пример) «Схема химико-токсикологического
исследования гексахлорана» следует строить следующим образом:
 химическая формула, рациональное название вещества;
 основные физические и химические свойства;
 назвать и описать (можно в виде схемы) все возможные методы
изолирования, дать им оценку;
12
 назвать и обосновать все возможные методы очистки (при
необходимости);
 привести методы обнаружения токсического вещества
(предварительный и подтверждающий анализ), подход к
описанию отдельных реакций или проб изложен в п.5;
 дать обоснование, химизм, принцип расчёта и оценку всех
возможных методов количественного определения;
 метаболизм данного вещества в организме человека;
 токсикологическое значение.
13
Варианты и номера заданий по темам
IV курс 8 семестр 2015 – 2016
Таблица №1
№
01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
I
6
8
5
3
8
8
9
9
5
8
10
7
6
1
8
3
5
2
8
10
10
10
10
4
2
1
5
7
5
9
3
6
6
5
9
2
3
4
II
3
5
4
4
3
3
2
8
9
2
7
1
8
5
2
7
10
6
4
10
5
5
4
2
3
5
1
2
9
5
2
5
8
6
2
9
3
7
III
5
1
2
6
4
10
3
10
4
7
1
4
9
4
7
8
6
3
9
4
2
5
10
5
6
2
3
10
3
7
7
7
8
5
3
8
4
6
14
IV
5
2
8
2
4
4
3
5
7
2
6
10
6
10
2
6
3
6
4
7
8
9
8
7
9
3
8
10
6
9
6
5
4
8
9
5
7
3
V
4
3
1
8
7
5
2
3
4
6
7
9
9
7
3
5
8
7
7
4
1
2
8
3
9
10
10
9
7
1
7
7
8
6
4
3
2
10
№
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
I
7
2
4
10
5
1
9
2
7
1
4
9
3
2
10
6
8
4
6
2
4
2
6
6
8
1
2
4
4
7
1
7
2
5
9
9
8
9
2
3
6
1
II
6
1
4
8
4
7
5
6
3
6
5
3
7
8
8
8
10
8
3
1
2
5
5
6
10
4
4
1
9
4
4
3
2
8
2
1
5
3
4
3
8
9
III
10
8
7
9
3
8
10
10
6
9
7
7
5
5
6
10
9
9
4
2
8
10
8
4
1
9
10
3
8
6
3
8
3
1
6
2
3
7
8
9
9
4
15
IV
3
7
4
4
8
9
6
8
8
7
7
3
5
9
10
7
3
8
2
6
10
4
7
5
3
2
8
8
8
4
4
9
2
8
7
6
4
2
3
2
2
4
V
5
8
9
7
4
3
7
6
2
4
8
3
6
7
8
5
6
7
9
2
5
6
4
2
7
10
3
5
7
4
3
4
4
3
5
8
7
5
6
8
5
1
№
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
I
7
4
7
3
4
6
9
6
10
2
7
6
1
8
5
4
7
1
10
2
II
3
5
2
2
2
9
2
5
9
3
5
7
6
2
9
6
4
6
7
7
III
1
6
9
4
7
10
7
3
6
8
3
8
4
7
1
7
5
4
2
6
IV
5
8
10
6
2
4
2
9
4
9
7
5
5
3
8
3
1
6
5
4
V
2
4
1
10
5
7
8
4
2
8
6
1
3
6
9
2
2
9
4
5
ТЕМЫ КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЫ №1 (IV курс, 8 семестр)
Тема I. Группа токсических веществ, изолируемых полярными
растворителями.
1. Схемы и принципы общих методов изолирования лекарственных
«ядов» из объектов исследования. Достоинства и недостатки методов.
2. Схемы и принципы частных методов изолирования лекарственных
«ядов» из объектов исследования. Достоинства и недостатки методов.
Изолирование ядов из биожидкостей.
3. Извлечение барбитуратов. Факторы, влияющие на извлечение
барбитуратов из биологического материала на первой и второй стадиях.
4. Извлечение алкалойдов. Факторы, влияющие на извлечение алкалоидов
из биологического материала на первой и второй стадиях.
5. Очистка извлечений при анализе лекарственных «ядов». Методы
очистки извлечений, характеристика, оценка.
6. Общеалкалоидные
осадительные
реактивы.
Классификация,
особенности проведения реакции. Судебно-химическое значение.
16
7. Применение
микрокристаллоскопических
реакций
в
анализе
лекарственных «ядов». Примеры, условия проведения, интерпретация
результатов, оценка.
8. Спектроскопическое исследование барбитуратов. Теоретическое
обоснование, химизм, качественный и количественный анализ, оценка.
9. Применение хроматографии в тонких слоях сорбента в анализе
лекарственных «ядов». Скрининг. Общий и частный скрининг,
требования. Краткая характеристика методов аналитического
скрининга.
10. Химическая классификация алкалоидов. Методы количественного
определения. Характеристика, теоретическое обоснование, химизм,
способы расчёта, оценка. Спектральные методы анализа, используемые
при химико-токсикологических исследованиях. Примеры, оценка.
Тема II. План химико-токсикологического анализа наркотических,
психотропных и сильнодействующих лекарственных
веществ.
1. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
алкалоидами - производными изохинолина (морфин, кодеин,
папаверин).
2. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
алкалоидами опия.
3. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
фенилалкиламинами (эфедрин, эфедрон).
4. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
хинином.
5. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
диазепамом.
6. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
синтетическими азотсодержащими лекарственными веществами
(антипирин, амидопирин, аминазин).
7. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
салициловой кислотой и этаминалом.
8. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
кофеином.
9. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
производными барбитуровой кислоты (барбитал, барбамил).
10. Составить примерный план анализа при подозрении на отравление
производными тропана (атропин, кокаин).
Тема
III.
Группа
веществ,
изолируемых
растворителями. Пестициды.
1. Химическая
классификация
и
основные
токсикологического исследования пестицидов.
17
органическими
этапы
химико-
2. Пестициды. Определение, классификация по форме применения,
токсичности, по направлению использования. Пути попадания
ядохимикатов в организм (примеры).
3. Пестициды
из
группы
галогенпроизводных
(гептапхлор,
гексахлорциклогексан): общая характеристика, токсичность, методы
обнаружения и количественного определения.
4. Пестициды класса карбаминовой кислоты: общая характеристика,
токсичность, методы обнаружения и количественного определения.
Севин.
5. Пестициды
из
класса
синтетических
пиретроидов:
общая
характеристика, токсичность, методы обнаружения и количественного
определения.
6. Механизм действия и биотрансформация ФОС. Энзимный метод
обнаружения ФОС и его значение для химико-токсикологического
анализа.
7. Пестициды из группы галогенпроизводных (гексахлорциклогексан,
гептахлор): общая характеристика, токсичность, методы обнаружения и
количественного определения.
8. Хлорофос и дихлорофос: общая характеристика, токсичность, методы
обнаружения и количественного определения.
9. Применение хроматографических методов в анализе ФОС.
10. Пестициды класса ФОС, химическая классификация, схема химикотоксикологического исследования.
Тема IV. Допинговые средства. Экотоксиканты.
опасность и биологический терроризм.
Биологическая
Допинговые средства. Понятие, история использования.
Допинговые средства. Понятие, основные классы.
Допинговые средства. Понятие, классификация.
Особенности отбора образцов и проведения исследований на допинговые
средства.
5. Методы исследования и интерпретация полученных результатов при
проведении анализа на допинговые средства.
6. Экотоксиканты. Понятие, классификация. Экополлютанты.
7. Экотоксиканты
и
экотоксичность.
Характеристика.
Объекты
экотоксикологии.
8. Экотоксиканты и особенности их определения в биосистемах.
9. Биологическая опасность и биологический терроризм. Основные
понятия.
10. Природные токсины: источники, классификация, токсические эффекты,
методы определения.
1.
2.
3.
4.
Тема V. Ситуационные задачи.
18
1. Ситуационная задача: гр. К. задержан сотрудниками ГИБДД,
подозревается в курении гашиша. Провести химико-токсикологическое
исследование слюны, волос и мочи гр. К. на наличие каннабиноидов.
2. Ситуационная задача: больному К., 29 лет, находящемуся на
обследовании в психиатрическом отделении больницы, ежедневно
вводили в/м 4 мл 2% раствора аминазина. Через трое суток больной
умер. Санитары отделения обнаружили в тумбочке покойного пустую
упаковку препарата «Хлозепид». Провести судебно-химическое
исследование на содержание аминазина и хлордиазепоксида.
3. Ситуационная задача: в Бюро СМЭ доставлены кровь и моча
гражданина К., попавшего в автомобильную катастрофу. В кармане
куртки потерпевшего найдены таблетки барбамила. Провести
направленное химико-токсикологическое исследование на барбамил.
4. Ситуационная задача: гражданин З., 1992 г.р. задержан сотрудниками
милиции. Подозревается в употреблении наркотиков. Провести химикотоксикологическое исследование крови, мочи, волос и ногтей гр.З. на
содержание героина и эфедрона.
5. Ситуационная задача: в лесу обнаружен труп неизвестного мужчины с
гнилостными изменениями. Рядом с трупом находились пустые
упаковки препаратов «Феназепам» и «Этаминал». Провести судебнохимическое исследование на феназепам и этаминал натрия.
6. Ситуационная задача: в приёмное отделение городской больницы
доставлена гражданка В. с признаками отравления тропановыми
алкалоидами. Провести химико-токсикологическое исследование
промывных вод, крови и мочи на наличие атропина и кокаина.
7. Ситуационная задача: подросток 14 лет обнаружен мёртвым на чердаке.
В кармане брюк находились пустые упаковки препаратов «Сонапакс» и
«Оксазепам». Провести судебно-химическое исследование на
тиоридазин и оксазепам.
8. Ситуационная задача: гражданин С. принял с целью опьянения 50 мл.
настойки чилибухи. Больной поступил в реанимационное отделение с
гипертонусом лицевых, затылочных и других мышц, часто
повторяющимися судорогами. Провести направленное судебнохимическое исследование биоматериала (внутренние органы, кровь,
моча) на наличие стрихнина.
9. Ситуационная задача: больной Н. вместо назначенного ему
противоглистного препарата «Нафтамон» ошибочно принял натощак 5
г кремнефторида натрия. Смерть наступила через 1,5 часа. Провести
судебно-химическое исследование крови, мочи и внутренних органов
трупа Н. на наличие кремнефторида натрия (Na2SiF6).
10. Ситуационная задача: труп А., 26 лет обнаружен дома. По сообщению
родственников, выпил таблетки «Кодеина» и «Фенобарбитала».
Провести судебно-химическое исследование на наличие кодеина и
фенобарбитала.
19
ВОПРОСЫ ТЕСТОВЫХ ЗАДАНИЙ
КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЫ №2 (IV курс, 8 семестр)
При ответе на тестовые задания выберите один из вариантов ответа
При ответе на тестовые задания выберите один из нижеприведенных
вариантов ответа
1.
КАКОЙ
МЕТОД
НАИМЕНЬШИЙ
РЕЗУЛЬТАТОВ?
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
БАРБИТУРАТОВ
ДАЕТ
ПРОЦЕНТ
ЛОЖНОПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ
1) ТСХ
2) ГЖХ
3) УФ-спектрофотометрия
4) фотоколориметрия
2.
В ОСНОВЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАРБИТУРАТОВ
МЕТОДОМ УФ-СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ ЛЕЖАТ
1) кислотные свойства
2) амфотерные свойства
3) способность к таутомерным превращениям при изменении
рН
4) способность к образованию ацисоли
3.
ПРИ ОБНАРУЖЕНИИ БАРБИТУРАТОВ
ИСПОЛЬЗУЕТСЯ ВСЕ
РЕАКТИВЫ КРОМЕ
1) реактива Марки
2) хлорцинкйода
3) медно-пиридинового
4) железойодидного
4.
КАКОЙ ИЗ МЕТОДОВ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НА
БАРБИТУРАТЫ
ЯВЛЯЕТСЯ
НАИБОЛЕЕ
ТОЧНЫМ
И
ЧУВСТВИТЕЛЬНЫМ:
1) дифференциальная спектрофотометрия в УФ-области
спектра
2) прямая спектрофотометрия в УФ-области спектра
3) фотоколориметрический
4) экстракционно-фотометрический
5.
ПРИ
МИКРОСКОПИЧЕСКОМ
ИССЛЕДОВАНИИ
ПРОДУКТА
ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЭТОГО БАРБИТУРАТА С ХЛОРЦИНКЙОДОМ
НАБЛЮДАЮТСЯ
КРИСТАЛЛЫ
В
ВИДЕ
ПРЯМОУГОЛЬНЫХ
ПЛАСТИНОК, ОКРАШЕННЫХ В ТЕМНО-КРАСНЫЙ И ЗОЛОТИСТЫЙ
ЦВЕТ
1) барбамил
2) фенобарбитал
20
3) этаминал-натрий
4) тиопентал
6.
ПРИ РЕАКЦИИ БАРБИТУРАТОВ С МЕДНОПИРИДИНОВЫМ
РЕАКТИВОМ В ЩЕЛОЧНОЙ СРЕДЕ (РЕАКЦИЯ ЦВИККЕРА)
ОБРАЗУЕТСЯ ОСАДОК
1) красного цвета
2) зеленого цвета
3) розово-фиолетового цвета
4) коричневого цвета
7.
БАРБИТУРАТЫ
ПРОЯВЛЯЮТ СИНЕРГИЗМ ПРИ ПРИЕМЕ ИХ
ОДНОВРЕМЕННО С
1) опиатами
2) алкоголем
3) алкалоидами белладонны
4) все ответы верны
8.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ПРОИЗВОДНЫХ
БАРБИТУРОВОЙ
КИСЛОТЫ
СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ
МЕТОДОМ В УФ-ОБЛАСТИ ПРОВОДЯТ ПРИ ЗНАЧЕНИИ рH СРЕДЫ
1) 5,0-6,0
2) 3,0-4,0
3) 10,0 и 13,0
4) рН не имеет значения
9.
ТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ БАРБИТУРАТОВ ЗАКЛЮЧАЕТСЯ В
1) угнетении ЦНС
2) возбуждении ЦНС
3) подавлении моторики ЖКТ
4) увеличении ЧСС
10. ДЛЯ ИЗОЛИРОВАНИЯ БАРБИТУРАТОВ ПРИМЕНЯЮТ ВСЕ МЕТОДЫ
КРОМЕ
1) метода Валова
2) метода Поповой
3) метода Стаса-Отто
4) метода Саломатина
11. ДЛЯ
ОЧИСТКИ
ПРИМЕНЯЕТСЯ
ИЗВЛЕЧЕНИЯ
1)
2)
3)
4)
ПО
МЕТОДУ
гель-хроматография
центрифугирование
возгонка
перекристаллизация
12. В ОСНОВЕ МЕТОДА ПОПОВОЙ ЛЕЖИТ
1) изолирование подкисленным спиртом
21
ПОПОВОЙ
2) изолирование водой, подкисленной щавелевой кислотой
3) изолирование водой, подкисленной серной кислотой
4) изолирование подщелоченной водой
13. С
АММИАЧНЫМ
РАСТВОРОМ
НИТРАТА
БАРБИТУРАТЫ ОБРАЗУЮТ ОСАДКИ
1) зеленого цвета
2) желтого цвета
3) красно-фиолетового цвета
4) оранжевого цвета
КОБАЛЬТА
14. ПРИ ВЭЖХ-ОПРЕДЕЛЕНИИ БАРБИТУРАТОВ ИСПОЛЬЗУЮТ
1) метод добавок
2) метод внешнего стандарта
3) метод внутреннего стандарта
4) все перечисленные
15. ПРИ МЕТАБОЛИЗМЕ БАРБИТУРАТОВ В 1 ФАЗЕ ПРОТЕКАЮТ ВСЕ
РЕАКЦИИ КРОМЕ
1) деалкилирования
2) окисления
3) ацетилирования
4) дебензоилирования
16. КАКОЙ ИЗ ПРИВЕДЕННЫХ НИЖЕ МЕТОДОВ ИЗОЛИРОВАНИЯ
БАРБИТУРАТОВ ЯВЛЯЕТСЯ ЧАСТНЫМ
1) метод Стаса-Отто
2) метод Васильевой
3) метод Валова
4) метод Саломатина
17. ДЛЯ
КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ПРИМЕНЯЮТСЯ ВСЕ МЕТОДЫ, КРОМЕ
1) УФ-спекрофотометрия
2) иммуноферментный
3) ГЖХ
4) ВЭЖХ
БАРБИТУРАТОВ
18. ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ИЗОЛИРОВАНИЯ БАРБИТУРАТОВ МЕТОДОМ
ВАЛОВА, ДАЛЬНЕЙШАЯ ОЧИСТКА ВКЛЮЧАЕТ ВСЕ, КРОМЕ
1) реэкстракции
2) возгонки
3) центрифугировании
4) ТСХ
19. ПРИ
ПРОВЕДЕНИИ
МУРЕКСИДНОЙ
ПРОБЫ
ИДЕНТИФИКАЦИИ БАРБИТУРАТОВ ПОЯВЛЯЕТСЯ
1) зеленое окрашивание
22
ДЛЯ
2) розовое окрашивание
3) коричневое окрашивание
4) синее окрашивание
20. МЕТОД, ПОЗВОЛЯЮЩИЙ ИЗОЛИРОВАТЬ 50-90% БАРБИТУРАТОВ,
ПОЛУЧАЯ ЧИСТЫЕ ИЗВЛЕЧЕНИЯ, НО С СОРБЦИЕЙ НЕКОТОРЫХ
БАРБИТУРАТОВ БЕЛКАМИ:
1) метод Валова
2) метод Стаса- Отто
3) метод Васильевой
4) метод Саломатина
21. КОНЪЮГАТ С УКСУСНОЙ КИСЛОТОЙ ОБРАЗУЕТ МЕТАБОЛИТ
1) Нитразепама
2) Феназепама
3) Хлордиазепоксида
4) Оксазепама
22. ОКИСЛЕНИЮ В ОРГАНИЗМЕ ЧЕЛОВЕКА ПОДВЕРГАЮТСЯ ВСЕ,
КРОМЕ
1) Нозепама
2) Диазепама
3) Хлозепида
4) Нитразепама
23. ВОССТАНОВЛЕНИЮ В ОРГАНИЗМЕ ЧЕЛОВЕКА ПОДВЕРГАЕТСЯ:
1) Нитразепам
2) Феназепам
3) Хлордиазепоксид
4) Оксазепам
24. ДЛЯ
МЕТАБОЛИТОВ
ПРОИЗВОДНЫХ
БЕНЗОДИАЗЕПИНА
ХАРАКТЕРНО ОБРАЗОВАНИЕ КОНЪЮГАТОВ ВСЕХ, КРОМЕ
1) С серной кислотой
2) С глицином
3) С глюкуроновой кислотой
4) С уксусной кислотой
25. ОБЪЕКТОМ АНАЛИЗА ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ НА ПРОИЗВОДНЫЕ
БЕНЗОДИАЗЕПИНА МОГУТ СЛУЖИТЬ ВСЕ, КРОМЕ
1) Моча
2) Кишечник с содержимым
3) Головной мозг
4) Ногти и волосы
26. ДЛЯ ИЗОЛИРОВАНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ
ИСПОЛЬЗУЮТ МЕТОД
1) Васильевой
23
1,4-БЕНЗОДИАЗЕПИНА
2) Валова
3) Швайковой
4) Саломатина
27. ИЗ ВОДНОЙ ФАЗЫ ПРИ рH 2 ЭФФЕКТИВНО ЭКСТРАГИРУЕТСЯ В
ХЛОРОФОРМ
1) Диазепам
2) Хлозепид
3) Нитразепам
4) Оксазепам
28. ЧАСТИЧНО ПЕРЕХОДИТ В ХЛОРОФОРМНЫЙ ЭКСТРАКТ ПРИ рH 2
1) Диазепам
2) Хлозепид
3) Нитразепам
4) Оксазепам
29. ПОСЛЕ КИСЛОТНОГО ГИДРОЛИЗА ПРИ НАЛИЧИИ В ОБЪЕКТЕ
ИССЛЕДОВАНИЯ
ПРОИЗВОДНЫХ
БЕНЗОДИАЗЕПИНА
ПОЯВЛЯЕТСЯ ОКРАШИВАНИЕ
1) Желтое
2) Оранжевое
3) Красное
4) Окраска не появляется
30. ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ТСХ-СКРИНИНГА НА 1-ОМ ЭТАПЕ ХИМИКОТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО
ИССЛЕДОВАНИЯ
ПРОИЗВОДНЫХ
БЕНЗОДИА-ЗЕПИНА ЭЛЮЕНТОМ СЛУЖИТ
1) Хлороформ
2) Этиловый эфир
3) Бензол
4) Толуол
31. РЕАКЦИЯ
БРАТТОНА-МАРШАЛЛА
МОЖЕТ
БЫТЬ
ИСПОЛЬЗОВАНА ДЛЯ ИНДИКАЦИИ ПЯТЕН НА ХРОМАТОГРАММЕ
1) После предварительного кислотного гидролиза
2) При обнаружении метаболитов производных бензодиазепина
3) После обработки хроматограммы реактивом Драггендорфа
4) При получении отрицательного результата на 1-ом этапе
исследования
32. ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В КАЧЕСТВЕ ВЕЩЕСТВ-СВИДЕТЕЛЕЙ
ГСО БЕНЗОДИАЗЕПИНОВ ЭЛЮЕНТОМ МОЖЕТ СЛУЖИТЬ
1) Бензол
2) Смесь бензол-этилацетат
3) Смесь хлороформ-этилацетат
4) Смесь хлороформ-ацетон
5) Смесь бензол-ацетон
24
33. ДЛЯ
ПРОЯВЛЕНИЯ
ПЯТЕН
БЕНЗОДИАЗЕПИНОВ
ХРОМАТОГРАММЕ ИСПОЛЬЗУЮТ ВСЕ РЕАКТИВЫ КРОМЕ
1) Реактива Марки
2) Реактива FNP
3) Нингидрина
4) Диазореактива
НА
34. ПРИ
ПРОВЕДЕНИИ
КОЛИЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ПРОИЗВОДНЫХ БЕНЗОДИАЗЕПИНА С ПРИМЕНЕНИЕМ РЕАКЦИИ
БРАТТОНА-МАРШАЛЛА ИСПОЛЬЗУЮТ
1) β-нафтол
2) 1-нафтиламин
3) N-1-нафтилэтилендиамин
4) Резорцин
35. ИЗВЛЕЧЕНИЕ МОРФИНА ХЛОРОФОРМОМ ИЗ ВОДНОЙ ФАЗЫ
ВЫПОЛНЯЮТ ПРИ рН
1) 2 – 4
2) 7
3) 8 – 10
36. ИЗВЛЕЧЕНИЕ БАРБИТУРАТОВ ДИЭТИЛОВЫМ
ВОДНОЙ ФАЗЫ ВЫПОЛНЯЮТ ПРИ рН
1) 2
2) 7
3) 10
ЭФИРОМ
ИЗ
37. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БАРБИТУРАТОВ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ ПРОВОДЯТ ПРИ ВСЕХ рН КРОМЕ
1) 7
2) 10
3) 13
38. ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1,4-БЕНЗОДИАЗЕПИНОВ В БИОЛОГИЧЕСКОМ
МАТЕРИАЛЕ ПРОВОДЯТ ПО ПРОДУКТАМ ГИДРОЛИЗА
1) фенолам
2) бензофенонам
3) ароматическим карбоновым кислотам
4) альдегидам
39. ОСНОВАНИЕМ ДЛЯ ВЫВОДА ОБ УПОТРЕБЛЕНИИ ГЕРОИНА
СЛУЖИТ
НАЛИЧИЕ
В
БИОЛОГИЧЕСКОМ
МАТЕРИАЛЕ
МЕТАБОЛИТА
1) 6-глюкоронид морфина
2) кодеина
3) норкодеина
4) 6-ацетилморфина
25
40. СПУСТЯ 30 ДНЕЙ
ПОСЛЕ УПОТРЕБЛЕНИЯ МЕТОДОМ ГЖХ
МОЖНО ОБНАРУЖИТЬ Δ9-ТЕТРАГИДРОКАННАБИНОЛ
1) в моче
2) в волосах
3) в крови
4) в слюне
41. РЕАКЦИЯМИ ИДЕНТИФИКАЦИИ ОПИАТОВ ЯВЛЯЮТСЯ ВСЕ
КРОМЕ
1) реакции Марки
2) реакции с FeCl3
3) пробы Сальковского-Катаяма
4) пробы по Драгендорфу (Кларка)
42. МДМА (ЭКСТАЗИ) ИЗОЛИРУЕТСЯ ИЗ МОЧИ ДИЭТИЛОВЫМ
ЭФИРОМ ПРИ рН
1) 12
2) 10
3) 8
43. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНОТИАЗИНОВ В МОЧЕ
ПРОВОДЯТ С ПОМОЩЬЮ
1) FNP-реактива (смесь FeCl3, HСlO4 и HNO3)
2) реактива Марки
3) реактива Сальковского-Катаяма
4) реактива Бертрана
44. ГЕКСАХЛОРЦИКЛОГЕКСАН
ИЗОЛИРУЮТ
ИЗ
МАТЕРИАЛА
1) подкисленным спиртом или водой
2) методом минерализации
3) методом дистилляции
4) полярными растворителями
45. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ВЫПОЛНЯЮТ МЕТОДОМ
1) нейтрализации
2) неводного титрования
3) аргентометрии
46. ЭНЗИМАТИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ОСНОВАН НА ОПРЕДЕЛЕНИИ АКТИВНОСТИ
1) фосфатазы
2) холинэстеразы
3) липазы
4) алкогольдегидрогеназы
26
ТРУПНОГО
ГЕКСАХЛОРАНА
ПЕСТИЦИДОВ
47. К ХИМИЧЕСКИМ МЕТОДАМ ОБНАРУЖЕНИЯ ОКСИДА УГЛЕРОДА
(II) В КРОВИ ОТНОСЯТ
1) пробу Хорошкевича-Маркса
2) реакцию Сакагучи
3) пробу Швайковой-Васильевой
48. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ПРОВОДЯТ МЕТОДОМ
1)
2)
3)
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
КАРБОКСИГЕМОГЛОБИНА
нейтрализации
спектрофотометрии
хроматографическим
49. ДЛЯ ИЗОЛИРОВАНИЯ ПЕСТИЦИДА ДДТ ИЗ ОРГАНОВ ТРУПА
ИСПОЛЬЗУЮТ
1) перегонку с водяным паром
2) минерализацию с азотной и серной кислотами
3) экстракцию эфиром
50. ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ПЕСТИЦИДА ДДТ ИСПОЛЬЗУЮТ
РЕАКЦИЮ
1) с серной кислотой при нагревании до 120 °С
2) с серной кислотой и нитратом калия при нагревании до 130 °С с
последующей обработкой метилатом натрия
3) с серной кислотой и фталевым ангидридом при нагревании до 120 °С
с последующей обработкой раствором щелочи
51. ОСНОВНЫМ НЕТОКСИЧНЫМИ МЕТАБОЛИТОМ ПЕСТИЦИДА ДДТ
ЯВЛЯЕТСЯ
1)
Cl
Cl
CCl3
2)
Cl
Cl
Cl
Cl
3)
Cl
Cl
COOH
52. МЕТОДЫ ИЗОЛИРОВАНИЯ ПЕСТИЦИДОВ ВСЕ КРОМЕ
1) минерализация с азотной и серной кислотами
2) экстракция органическим растворителем
27
3) перегонка с водяным паром
53. ПЕСТИЦИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1)
Cl
Cl
CCl3
2)
HO
O
N
H
C
CH3
3)
N
54. ПЕСТИЦИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1)
Cl
H3C CH3
O
Cl
O
2)
HO
O
N
H
C
CH3
3)
N
55. ПЕСТИЦИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1)
HO
O
N
H
C
CH3
2)
28
O
Br
H3C CH3
O
Br
O
CN
O
3)
N
56. ПЕСТИЦИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1)
N
2)
HO
O
N
H
C
CH3
3)
OH
CH3
O2N
NO2
57. ПЕСТИЦИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1)
+
N
+
N
2Br-
2)
HO
O
N
H
3)
N
58. ПЕСТИЦИДОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1)
29
C
CH3
N
2)
HO
O
N
H
C
CH3
3)
O
O
C
NHCH3
59. К МЕТОДАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕСТИЦИДОВ В БИОЛОГИЧЕСКОМ
МАТЕРИАЛЕ ОТНОСЯТ ВСЕ КРОМЕ
1) иммуноферментного
2) тонкослойной хроматографии
3) биохимических
4) титриметрических
60. К КОЛИЧЕСТВЕННЫМ МЕТОДАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕСТИЦИДОВ
В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ ОТНОСЯТ ВСЕ КРОМЕ
1) иммуноферментного
2) ВЭЖХ
3) микрокристаллоскопического
4) титриметрического
61. НАИБОЛЕЕ
СПЕЦИФИЧЕСКИМ
МЕТОДОМ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ЯВЛЯЕТСЯ МЕТОД
1) иммуноферментный
2) ВЭЖХ
3) микрокристаллоскопический
4) биохимический
62. ИНСЕКТИЦИДЫ НА ОСНОВЕ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ ЭФИРОВ
ПРОЯВЛЯЮТ ТОКСИЧНОСТЬ, ИНГИБИРУЯ
1) тимидилатсинтетазу
2) ацетилхолинэстеразу
3) цитохром Р450
63. НА
ЭКСТРАКЦИЮ
ОРГАНИЧЕСКИХ
СОЕДИНЕНИЙ
ИЗ
БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА НЕ ОКАЗЫВАЕТ ВЛИЯНИЕ
СЛЕДУЮЩИЙ ФАКТОР
1) природа экстрагента
2) рН стреды
3) температура
30
4) давление
64. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ОБ
ОБНАРУЖЕНИИ
ПРОИЗВОДНОГО
БАРБИТУРОВОЙ КИСЛОТЫ ДАЮТ НА ОСНОВАНИИ:
1) ТСХ исследования (дифенилкарбазид и сульфат ртути)
2) спектрофотометрического исследования
3) микрокристаллических реакций
65. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ОБ ОБНАРУЖЕНИИ ДИАЗЕПАМА ВОЗМОЖНО ПО:
1) АХБ (2-амино-5-хлорбензофенон)
2) АХБ + МХБ (2-метиламино-5-хлорбензофенон)
3) АХБ, МХБ, диазепаму
66. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ОБ ОБНАРУЖЕНИИ ОКСАЗЕПАМА ВОЗМОЖНО
ПО:
1) АХБ (2-амино-5-хлорбензофенон)
2) оксазепаму
3) АХБ, оксазепаму
67. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ОБ БНАРУЖЕНИИ ФЕНАЗЕПАМА ВОЗМОЖНО ПО:
1) АБХБ (2амино-5-бром-(орто-хлор)-бензофенон)
2) феназепаму
3) АБХБ, феназепаму
68. ОПТИМАЛЬНЫЙ МЕТОД ИЗОЛИРОВАНИЯ ИЗ БИОТКАНЕЙ
ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА В СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОМ
АНАЛИЗЕ ЯВЛЯЕТСЯ:
1) подкисленным спиртом - метод Стаса-Отто
2) ацетонитрильный метод
3) твёрдофазная сорбция
69. ГРУППОВОЙ
РЕАГЕНТ
(КОНЦЕНТРИРОВАННАЯ
КИСЛОТА) ОБРАЗУЕТ ГОЛУБОЕ ОКРАШИВАНИЕ С:
1) аминазином
2) тиоридазином
3) пропазином
4) всеми веществами
СЕРНАЯ
70. РАССЧИТАТЬ СОДЕРЖАНИЕ КАРБОКСИГЕМОГЛОБИНА В % ПРИ
СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ КРОВИ ПО
РЕЗУЛЬТАТАМ:
Раствор А: А 540 = 0,595; А 579 = 0,425;
Раствор В: А 540 = 0,638; А 579 = 0,425;
Раствор С: А 540 = 0,468; А 579 = 0,425;
1) 72%
2) 75%
3) 80%
4) 57%
31
71. РАССЧИТАТЬ СОДЕРЖАНИЕ КАРБОКСИГЕМОГЛОБИНА В %
МЕТОДОМ ГЖХ, ЕСЛИ А и = 84 мм2; V и = 0,5 мл; А н = 120 мм2; Vн = 0,5
мл:
1) 80%
2) 70%
3) 95%
4) 63%
72. ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ПРОБОЙ НА
ПЕСТИЦИДЫ ЯВЛЯЕТСЯ
1) пиридиновый тест
2) холинэстеразная проба
3) проба Бейльштейна
4) метод ТСХ
ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИЕ
73. ИЗОЛИРОВАНИЕ ФТОРИДОВ ПРОВОДЯТ:
1) озолением
2) методом мокрой минерализации
3) специальным методом, связанным с перегонкой и
минерализацией серной и хлорной концентрированными
кислотами.
74. ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
ФТОРИДОВ ПРИМЕНЯЮТ ВСЕ МЕТОДЫ, КРОМЕ
1) реакции образования геля ортокремниевой кислоты
2) реакции ализаринциркониевым лаком
3) реакции травления стекла
4) реакции с магнезиальной смесью
75. ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО
АНА-ЛИЗА ФТОРИДОВ ПРИМЕНЯЮТ
1) титриметрический метод
2) фотоэлектроколориметрический (длина волны 527 нм по голубой
окраске комплекса с эриохромцианином R и цирконием)
3) метод ГЖХ
76. ЕСТЕСТВЕННОЕ СОДЕРЖАНИЕ ФТОРИД-ИОНОВ В КРОВИ
1) 0,50 мг/л
2) 0,75 мг/л
3) 1,00 мг/л
4) 1,00 г/л
77. СПОСОБ ИЗОЛИРОВАНИЯ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИРЕТРОИДОВ В
ХТА
1) перегонка с водяным паром
2) жидкостная экстракция органическими растворителями
3) метод твёрдофазной экстракции из гомогенных жидких сред
32
78. МЕТОДЫ АНАЛИЗА СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИРЕТРОИДОВ В ХТА
1) ГЖХ (ДЭЗ) в виде пентафторбензилпроизводных
2) ГЖХ (ПИД) капиллярные колонки НР-1
3) ГЖХ-МС (синэргист-пиперонилбутоксид)
79. УКАЗАТЬ ПРИМЕНЕНИЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИРЕТРОИДОВ
1)
уничтожение
практически
всех
членистоногих,
имеющих
эпидемиологическое значение
2) пропитка одежды в целях защиты её от повреждения молью
3) обработка скота, домашних птиц и животных в целях борьбы с
эктопаразитами
80. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ПРОИЗВОДНЫХ
ФЕНОТИАЗИНА В ХТА ПРОВОДЯТ
1) методом неводного титрования
2) ФЭК – методом по продукту окрашивания серной
кислотой
3) спектрофотометрическим методом
81. ИФА ЯВЛЯЕТСЯ
1) высокочувствительным
2) предварительным
3) подтверждающим
82. ГЕРОИН МОЖНО ИЗОЛИРОВАТЬ
1) после кислотного гидролиза
2) рН 8,7 экстрагент хлороформ – н-бутанол 9 : 1
3) рН 10 хлороформом
83. ДОКАЗАТЬ 6-МОНОАЦЕТИЛМОРФИН
МОЖНО МЕТОДАМИ
1) ТСХ
2) ГЖХ
3) ГЖХ-МС, ВЭЖХ-МС
—
МАРКЁР
ГЕРОИНА
84. АНАЛИТИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ ГРУППЫ ЛЕКАРСТВЕННЫХ
ВЕЩЕСТВ НА ОСНОВЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
ОСНОВАН НА
1) разделении веществ кислого, нейтрального и основного характера в
ходе изолирования
2) использовании общих и специальных систем для разделения веществ
3) возможности использовать ряд реактивов для последовательного
проявления хроматограмм
85. В СООТВЕТСТВИИ С ПРИКАЗОМ МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РФ №
40 ОТ 27.01.06 КОНТРОЛЬНЫЙ ОБРАЗЕЦ БИООБЪЕКТА ХРАНИТСЯ
ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ –20С:
33
1) 1 месяц
2) 2 месяца
3) 6 месяцев
86. ПРИ ТСХ ИССЛЕДОВАНИИ ФЕНИЛАЛКИЛАМИНОВ ДЛЯ
ДЕТЕКТИРОВАНИЯ ИСПОЛЬЗУЮТ:
1) реактив Марки
2) 0,5% раствор нингидрина в ацетоне и нагревание до 60С
3) реактив Драгендорфа
87. ОСНОВНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ КОКАИНА:
1) бензоилэкгонин
2) метилэкгонин
3) норкокаин
4) все перечисленные
88. ИНДИКАТОРОМ НЕДАВНЕГО УПОТРЕБЛЕНИЯ
ЯВЛЯЮТСЯ МЕТАБОЛИТЫ В МОЧЕ:
1) 9 ТГК-СООН
2) 8,11-ди-ОН 9 ТГК
3) 9 ТГК
МАРИХУАНЫ
89. СПОСОБ ИЗОЛИРОВАНИЯ ФОСФИДА ЦИНКА В ХТА
1) перегонка с водяным паром
2) жидкостная экстракция органическими растворителями
3) метод твёрдофазной экстракции из гомогенных жидких сред
90. ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
ФОСФИДА ЦИНКА ПРИМЕНЯЮТ
1) реакцию образования геля ортокремниевой кислоты
2) реакцию с ализаринциркониевым лаком
3) реакцию травления стекла
4) реакцию с магнезиальной смесью
91. ОБНАРУЖЕНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОНООКСИДА УГЛЕРОДА В
КРОВИ ПРОВОДЯТ МЕТОДАМИ, КРОМЕ
1) газохроматографического
2) химического
3) биологического
92. ОБНАРУЖЕНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОНООКСИДА УГЛЕРОДА В
КРОВИ ПРОВОДЯТ МЕТОДАМИ, КРОМЕ
1) газохроматографического
2) спектрофотометрического
3) биологического
93. ФАКТОРОМ СДЕРЖИВАЮЩИМ НАСЫЩЕНИЕ КРОВИ УГАРНЫМ
ГАЗОМ ЯВЛЯЕТСЯ
34
1) Этиловый спирт
2) Синильная кислота
3) Окислы азота
94. ФАКТОРОМ УСИЛИВАЮЩИМ НАСЫЩЕНИЕ КРОВИ УГАРНЫМ
ГАЗОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1) Этиловый спирт
2) Серная кислота
3) Окислы азота
95. ФАКТОРОМ УСИЛИВАЮЩИМ НАСЫЩЕНИЕ КРОВИ УГАРНЫМ
ГАЗОМ ЯВЛЯЕТСЯ
1) Этиловый спирт
2) Серная кислота
3) Синильная кислота
96. ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРА В ВОЗДУХЕ
ПРИМЕНЯЮТ
1) Фотоколориметрический метод с иодидом калия и
крахмалом
2) Спектрофотометрический при рН 2
3) Метод микродиффузии
97. ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРА В ВОЗДУХЕ
ПРИМЕНЯЮТ
1) Фотоколориметрический метод по реакции образования азокрасителя
2) Спектрофотометрический по реакции с о-толидином
3) Метод микродиффузии
98. ДЛЯ
ИЗОЛИРОВАНИЯ
МИНЕРАЛЬНЫХ
КИСЛОТ
БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ИСПОЛЬЗУЮТ МЕТОД
1) минерализации
2) дистилляции
3) настаивания с водой
99. ДЛЯ ИЗОЛИРОВАНИЯ ЕДКИХ ЩЕЛОЧЕЙ И СОЛЕЙ
БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ИСПОЛЬЗУЮТ МЕТОД
1) минерализации
2) дистилляции
3) настаивания с водой
ИЗ
ИЗ
100. ОБНАРУЖЕНИЕ АММИАКА В ДИАЛИЗАТЕ ПРОВОДЯТ РЕАКЦИЕЙ
1) с реактивом Несслера
2) с гидроксидом натрия
3) с этиловым спиртом
35
ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПРОИЗВОДНЫХ
БАРБИТУРОВОЙ КИСЛОТЫ
Впервые снотворное действие барбитуратов было обнаружено в начале
XX в. Э.Фишером и Ф.Мерингом. Важным действием барбитуратов на
организм является угнетение центральной нервной системы (коры головного
мозга и центров ствола мозга). С лечебной целью производные барбитуровой
кислоты находят применение в медицинской практике в качестве снотворных и
успокаивающих средств. По продолжительности сна, вызываемого
барбитуратами, их делят на 3 группы: длительного действия (барбитал,
фенобарбитал); средней продолжительности действия (барбамил, этаминалнатрий); короткого действия (гексенал).
O
O
Et
HN
N
H
Барбитал
O
O
O
N
H
O
NaO
Фенобарбитал
O
Et
HN
NaO
H3C
HN
Et
O
Et
N
O
Барбамил
O
CH3
CH3
N
N
O
Гексенал
CH3
Et
HN
CH3
NaO
N
O
CH3
Этаминал-натрий
1. Токсикологическое значение производных барбитуровой кислоты
В настоящее время в медицинской практике находят применение
барбитал и фенобарбитал. Барбитал назначают внутрь перед сном по 0,25-0,5 г,
фенобарбитал – по 0,1-0,2 г. Фенобарбитал в качестве снотворного средства
применяется редко. Его чаще используют как противосудорожный препарат в
дозе 0,01-0,03 г 2-3 раза в день. Фенобарбитал входит в состав некоторых
готовых лекарственных форм «Пенталгин», «Андипал», «Беллатаминал»,
«Теофедрин», «Корвалол», «Валокордин», «Барбовал» и др.
Этаминал-натрий и барбамил исключены из Государственного реестра
лекарственных средств РФ и внесены в Список наркотических и психотропных
средств, оборот которых в РФ ограничен.
Барбитал и другие барбитураты используются как вспомогательные
средства при общей анестезии и при судорожных состояниях. Барбитураты
короткого действия используются в клинической практике в комплексе с
другими лекарственными препаратами для ускорения введения в наркоз.
Токсикологическое, судебно-медицинское и химико-токсикологическое
значение приобрели барбитал (веронал) и его натриевая соль барбитал-натрий
(мединал), фенобарбитал (люминал), гексенал, барбамил, этаминал-натрий
(нембутал).
36
Известно развитие пристрастия к барбитуратам и синергизма при приеме
их с другими препаратами. Злоупотребление барбитуратами приводит к
наркомании (особенно барбамила и этаминал-натрия). Картина опьянения
напоминает по внешним признакам алкогольное опьянение: приятное
ощущение состояния эйфории, общего благополучия. Позже наступает
оглушенность, сонливость, вплоть до комы. Состояние барбитуровой
абстиненции развивается на следующие сутки и характеризуется мрачным
настроением, тревогой, кишечными коликами, атаксией, тремором рук,
судорогами, психической опустошенностью. Резко меняется соматическое
состояние, наступает одряхление, снижается давление. Характерны
неврологические расстройства - дрожание, атаксическая походка, ослабление
многих рефлексов. При барбитуровой наркомании возникают психозы,
подобные алкогольным, с наплывом зрительных и слуховых галлюцинаций
угрожающего характера. Длительность стадии
2-3 суток. Возможны
сумеречные расстройства сознания, связанные с абстиненцией, судорожные
припадки, доходящие до эпилептического статуса при отнятии барбитуратов.
Отравления барбитуратами встречаются относительно редко. Чаще эти
препараты используются с целью самоубийства. Большинство острых
отравлений барбитуратами имеют сходную клиническую картину и характеризуются незначительными морфологическими изменениями. Клиническое
течение отравления связано с принятой дозой вещества и чувствительностью
организма. Токсические дозы барбитуратов вызывают первоначально
наркотическое опьянение, затем коматозное состояние, которое осложняется
сердечно-сосудистой или дыхательной недостаточностью. Тяжелые отравления
характеризуются глубокой комой, редким поверхностным дыханием, слабым
пульсом, цианозом. Зрачки у пострадавшего узкие, не реагирующие на свет. В
заключительной стадии отравления, вследствие поражения дыхательного
центра, дыхание становится неравномерным, после чего наступает его
остановка.
Токсическое действие барбитуратов усиливают наркотики, алкоголь,
транквилизаторы. Токсическими дозами для барбитала считают 3-4 г, для
барбамила – 1-3 г, для фенобарбитала – 0,6-1 г; смертельными – 6-10, 4-6 и 4-10
г соответственно.
Патологоанатомическая картина при отравлении барбитуратами
нехарактерна. При вскрытии в головном мозге обнаруживают точечные
кровоизлияния, дегенеративные изменения и некрозы в подкорковых центрах.
В ряде случаев на коже обнаруживают характерные пузырьки различной
величины с резко очерченными границами, наполненные желтоватокоричневой жидкостью. Они появляются в течение 24 ч после приема яда, что
связано с токсическим поражением капилляров кожи.
Данные о сохранности в трупе производных барбитуровой кислоты
разноречивы. Одни авторы считают, что барбитал сохраняется в трупе около
месяца, другие исследователи утверждают, что этот срок составляет до 1-2 лет.
2. Пути метаболизма производных барбитуровой кислоты
Обычно барбитураты принимают перорально в виде таблеток, порошков.
Большинство барбитуратов всасываются в ЖКТ достаточно быстро,
фенобарбитал всасывается относительно медленно, его биодоступность
37
составляет 80%. Барбитураты способны кумулировать в организме, и их
длительное применение может привести к острым отравлениям, особенно при
недостаточной функции почек.
В организме человека и животных барбитураты подвергаются, в основном в
печени, ряду превращений. К I фазе метаболизма относятся следующие
процессы:
1. Окисление одного из радикалов в положении 5 до спиртов.
2. Окисление до кислот и кетонов.
3. Десульфирование (тиобарбитураты).
4. Дезалкилировние и дебензоилирование (N-бензоилпроизводные
барбитуровой кислоты).
5. Гидролиз.
Барбитал и фенобарбитал метаболизируются на 15%, этаминал и
барбамил – на 90%. Остальная часть выводится почками в неизмененном виде.
Процесс разрушения пиримидинового цикла идет в незначительной степени на
8%.
Во II фазе метаболизма образуются конъюгаты нативных барбитуратов и
их окисленных производных с глюкуроновой кислотой.
Рассмотрим метаболические превращения на примере барбитала:
O
OH
Et
HN
O
N
H
O
O
CH3
O Glu
Et
HN
O
CH3
N
H
O
O
O
Et
HN
N
H
O
O
HN
O
-CH3CHO
O
Et
HN
Et
O
N
H
O
Et
Et
N
O
Glu
Glu – остаток глюкуроновой
кислоты
3. Методы изолирования
Для выделения барбитуратов из биологического материала долгое время
применялись общие методы, которые были разработаны для выделения
алкалоидов (методы Стаса-Отто, Васильевой). Однако в последние десятилетия
предложен ряд специальных методов (Швайковой, Валова, Поповой).
Метод Стаса-Отто. Биологический материал несколько раз настаивают
с этиловым спиртом, подкисленным щавелевой кислотой. Полученные кислые
спиртовые вытяжки сливают с твердых частиц биологического материала и
фильтруют. Профильтрованные спиртовые вытяжки упаривают до густоты
сиропа, прибавляют абсолютный (или 96°) этиловый спирт, осаждающий
примеси белковых и других веществ в виде хлопьев. Эти хлопья
отфильтровывают. Фильтр промывают этиловым спиртом. Фильтрат и
этиловый спирт, взятый для промывания фильтра, соединяют и снова
38
выпаривают до густоты сиропа, а затем примеси осаждают этиловым спиртом.
Эту операцию повторяют несколько раз (до тех пор, пока из сиропообразной
жидкости не прекратится осаждение примесей этиловым спиртом). Кислые
спиртовые вытяжки, из которых осаждены белковые и другие вещества,
разбавляют водой и взбалтывают с диэтиловым эфиром, в который переходят
примеси, неосаждаюшиеся абсолютным этиловым спиртом. Освобожденные
таким образом от примесей кислые спиртовые вытяжки из биологического
материала подщелачивают карбонатом натрия или аммиаком и взбалтывают с
диэтиловым эфиром, в который переходят азотистые основания. Затем
эфирные вытяжки выпаривают, а полученные остатки подвергают анализу.
Метод Васильевой. Трупный материал измельчают и заливают водой,
подкисленной щавелевой кислотой. Вытяжку процеживают через марлю.
Процеженную кислую водную вытяжку взбалтывают с хлороформом, который
отделяют от водной фазы. После этого кислую водную вытяжку
подщелачивают и взбалтывают с хлороформом. В хлороформной вытяжке
определяют наличие токсикантов.
Метод Швайковой. В коническую колбу или стакан вносят 100 г
тщательно измельченных органов трупов, прибавляют 200 мл воды,
подкисляют насыщенным водным раствором щавелевой кислоты до рН = 2 (по
универсальному индикатору) и оставляют на 2 ч при частом перемешивании.
Затем содержимое колбы переносят в стакан для центрифугирования
вместимостью 500 мл и центрифугируют в течение 30 мин (3000 об/мин).
Центрифугат сливают с осадка и процеживают через ватный тампон.
Процеженную жидкость собирают в делительную воронку и проверяют рН
этой жидкости. В случае необходимости доводят до рН = 2. Содержимое
делительной воронки взбалтывают с тремя порциями хлороформа (по 20, 15 и
15 мл) в течение 5 мин. Если образуется эмульсия, то ее разрушают
центрифугированием.
Хлороформные вытяжки соединяют, доводят хлороформом до 50 мл и
переносят в делительную воронку, в которую прибавляют 25 мл 0,1 н. раствора
гидроксида натрия, и взбалтывают. Водную фазу отделяют от хлороформной
вытяжки. Эту вытяжку взбалтывают с двумя порциями воды по 1,5 мл. Первую
и вторую порции воды (по 1,5 мл), которыми промывали хлороформные
вытяжки, присоединяют к щелочной водной фазе. Потом водную фазу
подкисляют соляной кислотой до рН = 2, вносят в делительную воронку и
взбалтывают с двумя новыми порциями хлороформа (по 20 мл) в течение 5
мин. Хлороформные вытяжки соединяют и доводят хлороформом до 50 мл. В
них определяют наличие и количественное содержание барбитуратов.
Метод Поповой.
Биологический материал настаивают с водой,
подкисленной серной кислотой (рН = 2-3). Полученные вытяжки освобождают
от примесей методом гель-хроматографии. Для этой цели используется гель
сефадекса G = 25.
В стакан вносят 100 г измельченного биологического материала,
прибавляют 80 мл 0,02 н. раствора серной кислоты, перемешивают и
проверяют рН среды. При необходимости смесь доводят до рН = 2-3 (по
универсальному индикатору) 30%-м раствором серной кислоты. Смесь
биологического материала и подкисленной воды настаивают в течение 2 ч при
частом перемешивании. Затем вытяжку сливают, а биологический материал
39
еще 2 раза настаивают с новыми порциями 0,02 н. раствора серной кислоты (по
80 мл) в течение 1 ч. Кислые водные вытяжки соединяют, процеживают через
сложенную в три слоя марлю и центрифугируют в течение 25-30 мин.
Надосадочную жидкость (центрифугат) сливают с осадка и очищают от
примесей методом гель-хроматографии. Этот метод обеспечивает хорошую
очистку барбитуратов, выделенных из биологического материала.
После очистки вытяжек из биологического материала с помощью метода
гель-хроматографии получают большие объемы элюатов, в одном миллилитре
которых содержатся малые количества барбитуратов. Поэтому барбитураты,
находящиеся в элюатах, подвергают экстракционному концентрированию. С
этой целью объединенные кислые элюаты 3 раза взбалтывают с новыми
порциями хлороформа (по 50 мл) в течение 7 мин. Хлороформные вытяжки,
полученные после каждой экстракции, соединяют и на водяной бане при 70 °С
отгоняют из них 120-130 мл хлороформа. Оставшуюся упаренную
хлороформную вытяжку при комнатной температуре выпаривают досуха.
Сухие остатки используют для идентификации и количественного определения
барбитуратов при помощи соответствующих реакций и методов.
Метод Валова. Метод изолирования подщелоченной водой. В стакан
или в коническую колбу вносят 100 г измельченного биологического
материала, прибавляют 180 мл воды и 20 мл 10 %-го раствора гидроксида
натрия. Содержимое стакана (или колбы) оставляют на 30 мин при частом
перемешивании, а затем центрифугируют в течение 30 мин (3000 об/мин). От
осадка отделяют надосадочную жидкость (центрифугат), к которой прибавляют
120 мл 10 %-го раствора вольфрамата натрия и 1 н. раствор серной кислоты (до
pH = 2). Жидкость нагревают на кипящей водяной бане в течение 20 мин, а
затем подвергают центрифугированию (30 мин). Центрифугат сливают с осадка
и процеживают через ватный тампон, смоченный водой. Процеженную
жидкость собирают в делительную воронку. Тампон промывают водой (10 мл).
Промывную воду тоже выливают в делительную воронку. К процеженной
жидкости прибавляют равный объем диэтилового эфира и взбалтывают в
течение 15 мин. Эфирный слой отделяют и взбалтывают с 50 мл 10 %-го
раствора гидроксида натрия.
Щелочной водный слой отделяют, подкисляют 25 %-м раствором серной
кислоты до рН = 2 и взбалтывают с равным объемом диэтилового эфира.
Полученную при этом эфирную вытяжку используют для обнаружения и
количественного определения барбитуратов.
4. Методы определения
Реакция с аммиачным раствором нитрата кобальта. К части остатка
после испарения хлороформного (эфирного) экстракта, помещенного в
фарфоровую чашку, добавляют с помощью стеклянной палочки смесь из 1%
спиртового раствора ацетата кобальта и 25% раствора аммиака в соотношении
1:1.
40
NH3 O
1
R
R2 O
2+
H
N
N
O
Co
O
N
N
H
O
O
R1
R2
NH3
При наличии в остатке производных барбитуровой кислоты появляется
красно-фиолетовое окрашивание.
Реакция
чувствительна.
Имеет
судебно-химическое
значение
при
отрицательном результате.
Реакция барбитуратов с изопропиламином и солями кобальта. К 2
мл хлороформного раствора исследуемого вещества прибавляют 0,3 мл 1%-го
раствора ацетата кобальта в безводном этиловом спирте и 1 мл 5%-го раствора
изопропиламина в этиловом спирте. При наличии барбитуратов появляется
фиолетовое окрашивание.
NH2 O
1
R
R2 O
2+
H
N
N
O
Co
O
N
N
H
O
2
O
R1
R
H2 N
Реакция с меднопиридиновым реактивом (реакция Цвиккера). К
сухому остатку на предметном стекле прибавляют каплю 25% раствора
аммиака и каплю меднопиридинового реактива. Стекло помещают во влажную
камеру. Через 10-15 мин наблюдают образование сиреневого осадка. Под
микроскопом наблюдают кристаллы в виде простых и сложных крестов, друз,
звездочек и прямоугольников при наличии барбитала.
O
N
2
R1
R
O
2+
H
N
N
O
Cu
O
N
N
H
O
2
O
R1
R
N
Чувствительность реакции для барбитала составляет 13,7 мкг при
разведении 8:10000. Фенобарбитал, барбамил, этаминал характерных
кристаллов с меднопиридиновым реактивом не образуют. Реакция
чувствительна, является подтверждающей.
Реакция с солями кобальта и щелочами. Исследуемое вещество или
остаток, полученный после выпаривания вытяжек из соответствующих
объектов, растворяют в 0,2-0,5 мл абсолютного этилового спирта. К этому
раствору прибавляют 1-2 капли 1%-го раствора ацетата кобальта в абсолютном
этиловом спирте и 1-2 капли 1%-го раствора гидроксида калия в абсолютном
41
этиловом спирте. При наличии барбитуратов появляется розовая или красная
окраска.
Выполнению этой реакции мешает вода, которая разлагает окрашенное
соединение. Поэтому при выполнении указанной реакции используют
реактивы, растворенные в абсолютном этиловом или метиловом спирте.
Оттенок и интенсивность окраски зависят от применяемого спирта, что
объясняется различной сольватирующей способностью образовавшихся
соединений этими спиртами. Метод может быть использован для
предварительного обнаружения барбитуратов в моче. Указанную реакцию дают
некоторые гидантоины, сульфаниламидные препараты, пурины, пиримидины и
др.
Мурексидная реакция. В фарфоровую чашку к сухому остатку,
полученному после выпаривания вытяжек из биологического материала, или к
небольшому количеству сухого вещества прибавляют 3 капли 3 %-го раствора
пероксида водорода и 3 капли реактива, содержащего соль Мора и хлорид
аммония (к 0,1 г соли Мора прибавляют 0,5 мл 25 %-го раствора соляной
кислоты, а затем воду до 100 мл; к 5 мл полученного раствора прибавляют 4 г
хлорида аммония и воду до 100 мл). Содержимое чашки выпаривают, сухой
остаток нагревают до появления белых паров. После охлаждения прибавляют 3
капли 6 н. раствора аммиака.
При наличии некоторых барбитуратов и тиобарбитуратов появляется
розовая окраска. Мурексидную реакцию дают барбамил, барбитал,
фенобарбитал, этаминал-натрий и тиопентал. Не дают этой реакции гексенал,
гексобарбитал и циклобарбитал.
Реакция с родамином 6Ж. В делительную воронку вносят 0,1 мл
раствора исследуемого вещества, прибавляют 0,2 мл 0,1 %-го раствора
родамина 6Ж и 1 мл четыреххлористого углерода. Смесь взбалтывают в
течение 1 мин. При наличии солей барбитуратов слой четыреххлористого
углерода приобретает светло-оранжевую или оранжево-красную окраску.
Эта реакция пригодна для обнаружения барбамила, гексенала и
этаминал-натрия в фармакопейных препаратах и в лекарственных смесях.
Реакция обнаружения кислотной формы барбитуратов. На
предметное стекло наслаивают экстракт путем его последовательного
испарения. Полученный сухой остаток растворяют в капле концентрированной
серной кислоты. Рядом наносят 1 каплю воды очищенной, после чего обе капли
осторожно соединяют с помощью тонкой стеклянной палочки. Через 10-20 мин
(иногда через 60 мин и даже через 3 сут.) при хранении стекла во влажной
камере наблюдают образование кристаллического осадка (под микроскопом) с
характерной для каждого барбитурата формой кристаллов.
Барбитал
кристаллизуется
в
виде
бесцветных
прозрачных
прямоугольных призм. Фенобарбитал образует сфероиды и сростки в виде
«снопов», «ежей», состоящих из тонких бесцветных игольчатых кристаллов.
Барбамил образует прозрачные шестиугольные пластинки и длинные призмы,
группирующиеся в сфероиды. Этаминал кристаллизуется в виде характерных
сростков из призматических кристаллов.
Эта реакция характеризуется высокой специфичностью, но низкой
чувствительностью. Реакция приемлема при относительно больших
количествах барбитуратов
42
Реакция с хлорцинкйодом. На предметное стекло наносят экстракт и
испаряют досуха. К сухому остатку прибавляют 1 каплю раствора
хлорцинкйода. Стекло помещают во влажную камеру. Через 10-15 мин
наблюдают под микроскопом характерную форму образовавшихся кристаллов.
С хлорцинкйодом этаминал образует сростки из окрашенных в
коричневый или оранжево-коричневый цвет призматических кристаллов.
Барбитал образует прямоугольные пластинки темно-красного, зеленого,
фиолетового, серо-розового цветов. Барбамил образует пластинки, окрашенные
в красный, оранжевый цвет или сростки из них. Фенобарбитал с
хлорцинкйодом кристаллов не образует. Реакция чувствительна, является
подтверждающей.
Реакция с подкисленным спиртовым раствором йодида калия. На
сухой остаток на предметном стекле наносят каплю реактива и помещают во
влажную камеру. Через 5-10 мин наблюдают образование характерного
кристаллического осадка.
Барбитал образует прямоугольные пластинки, окрашенные в красный,
зеленый, серо-зеленый цвет, часто с рассеченными концами. Этаминал
образует оранжевые призматические кристаллы, собранные в сростки.
Реакция чувствительна, позволяет обнаружить в пробе до 0,5 мкг
барбитуратов, является подтверждающей. Фенобарбитал и барбамил с
подкисленным спиртовым раствором йодида калия кристаллического осадка не
образуют.
Реакция со смесью растворов хлорида железа (III) и йодида калия
(железойодидной комплексной солью). На сухой остаток на предметном
стекле наносят каплю реактива и стекло выдерживают во влажной камере 10-15
мин. Под микроскопом наблюдают образование кристаллов в виде призм и
сростков из них. Кристаллы характерной формы образуют барбамил, этаминал,
фенобарбитал. Барбитал с железойодидным реактивом характерных кристаллов
не образует. Реакция чувствительна, является подтверждающей.
Реакция с дииодокупратом калия в растворе иода. К 3 мл 10 %-го
раствора хлорида железа (III) прибавляют 1 мл концентрированной соляной
кислоты и 3 г иодида калия, а затем прибавляют воду до 10 мл. Через сутки
реактив сливают с осадка и сохраняют в склянке из темного стекла. На
предметное стекло к сухому остатку, полученному после выпаривания раствора
исследуемого вещества, прибавляют каплю реактива. При наличии
барбитуратов (барбамил, бутобарбитал, этаминал) образуются кристаллические
осадки.
Тонкослойная хроматография в частной системе растворителей.
Метод очистки и идентификации барбитуратов. Чаще всего для очистки
барбитуратов используют сочетание экстракции с хроматографией в тонком
слое. Например, проводят реэкстракцию барбитуратов из «кислой»
хлороформной вытяжки в 0,1 н. раствор едкого натра, а затем, после
подкисления до рН = 2,0 соляной кислотой, вновь в хлороформный слой (2
порции по 20 мл). Хлороформные вытяжки объединяют, доводят (в мерной
колбе) до 50 мл и подвергают качественному и количественному анализу после
хроматографирования в тонком закрепленном слое силикагеля КСК на
пластинках размером 9 × 12 см.
43
Система растворителей: хлороформ–н-бутанол–25% водный аммиак
70:40:5. Длина пробега фронта растворителя – 10 см; время
хроматографирования 45-60 минут.
Для предварительного обнаружения барбитуратов 2 мл хлороформной
вытяжки упаривают до 0,25 мл и количественно наносят в виде точки на
стартовую линию хроматографической пластинки. На расстоянии 2 см от этой
точки на ту же стартовую линию наносят по 0,02 мл (20 мкг) метаноловых
растворов барбитала, фенобарбитала и этаминала натрия – свидетели
(метчики). Обнаружение на пластинке производят опрыскиванием 0,01%
раствором дифенилкарбазона в хлороформе, а затем 5% раствором HgSO4,
наблюдая красно- или сине-фиолетовые пятна в зоне расположения
барбитуратов.
Реакция
взаимодействия
барбитуратов
с
солями
ртути
и
дифенилкарбазоном имеет отрицательное судебно-химическое значение, т.е.
при отсутствии на хроматограмме красно- или сине-фиолетовых пятен
дальнейшее исследование на барбитураты не производят. При получении пятен
и соответствующем значении Rf проводится повторное хроматографирование
больших объемов хлороформных экстрактов из кислых растворов для
дальнейшего качественного обнаружения барбитурата и его количественного
определения.
Для качественного анализа 10-20 мл хлороформного извлечения
упаривают до 0,5 мл и наносят на новую хроматографическую пластинку в
виде полосы длиной 3-4 см. Метчик 0,5-2 мл извлечения. Хроматографируют
при описанных выше условиях. Часть пластинки со свидетелем проявляют
0,02% раствором дифенилкарбазона и сульфата ртути (II). С другой половины
пластинки параллельно проявленным пятнам снимают участок сорбента
площадью 4-5 см2, на фильтре промывают 5 мл смеси спирта и эфира в
соотношении 1:1 и подвергают исследованиям на тот или иной барбитурат
(ориентирует предварительное исследование и соответствующее значение Rf)
микрокристаллическими реакциями.
Для количественного определения барбитурата аналогичным путем
подвергают хроматографированию 5-10 мл хлороформного раствора, с той
только разницей, что элюирование производится 2 раза по 10 мл (настаивание 5
минут) боратным буфером рН = 10,0 (для внутренних органов трупа). Элюаты
отфильтровывают под вакуумом, доводят буфером до объема 25 мл и
исследуют спектрофотометрически.
УФ-спектрофотометрия.
Для
регистрации
УФ-спектра
поглощения остаток после испарения экстракта из водной вытяжки со
значением рН=2 растворяют в 5 мл воды очищенной, к которой была добавлена
1 капля 2 М раствора аммиака (рН=10), и измеряют величину светопоглощения
полученного раствора в интервале длин волн 210-320 нм. В спектре
обнаруживают максимум при 240 нм (лактимная форма барбитурата). При
добавлении к этому раствору 1-2 капель 4 М раствора гидроксида натрия
(рН=13) в спектре поглощения обнаруживают максимум при 255-260 нм
(дилактимная форма барбитурата). Этот метод чувствителен, но требует
тщательной очистки извлечений от присутствующих эндогенных примесей.
ИК-спектрометрия. Для регистрации ИК-спектра остаток после
органического растворителя растирают с бромидом калия и после прессования
44
помещают в прибор для снятия спектра. Производные барбитуровой кислоты
имеют основные характерные для каждого барбитурата волновые числа в ИК
спектре.
ГЖХ-анализ. Исследуемые вещества выделяют из мочи путем
экстракции или сорбции. Для ГЖХ-скрининга достаточно использовать часть
извлечения из объекта, которая соответствует по объему 10 мл мочи.
Условия хроматографического анализа: прибор ЛXM-80, детектор
термоаэрозольный (ТАД), термоионный или беспламенный азотно-фосфорный
(NPD), колонка стеклянная, силанизированная, длиной 1 м, внутренний
диаметр - 2-3 мм, сорбент - 3% SE-30 на хромосорбе W (HP) - 80-100 меш.,
скорость газа-носителя (азота) для ТАД 45 мл/мин и для NPD - 40 мл/мин
(гелия), эффективность колонки 1200 т.т. (ТАД) и 1300 (NPD), температура
детектора – 300 °С, температура испарителя 250 °С, температура испарителя по
линейной программе от 130 до 290 °С, объем пробы – 2,5 мкл.
Для идентификации хроматографических пиков определяют индекс
удерживания (Ix). С этой целью используют в качестве стандартов смесь налканов СnН2n+2 с числом атомов углерода от 10 до 32, которым присвоены
значения индексов, равные 100n (n - число атомов углерода в алкане). Расчет
проводят по формуле:
где Ix – индекс удерживания анализируемого вещества; tx, tn, tn+1, –
исправленное время удерживания неизвестного вещества (tx) и ближайших к
нему реперных н-алканов с числом атомов углерода n (tn) и n+1 (tn+1); In+1 и In индексы удерживания н-алканов.
Индексы удерживания и предел обнаружения барбитуратов методом
ГЖХ приведены в таблице 1.
Таблица 1. Индексы удерживания и предел обнаружения
барбитуратов методом ГЖХ.
Барбитурат
Индекс
удерживания
Барбамил
Барбитал
Бутобарбитал
Фенобарбитал
Этаминал
1732
1490
1680
1974
1743
Предел обнаружения в моче,
мкг/мл
NPD
ТАД
0,6
0,10
0,6
0,10
0,6
0,10
0,8
0,15
0,6
0,10
Газовая хроматография в сочетании с масс-спектрометрией. Метод
используется для обнаружения нанограммовых количеств барбитуратов и
позволяет вести анализ на фоне эндогенных соединений, выделенных из
исследуемого объекта. Для выделения барбитуратов из объекта после
гидролиза используют жидкость-жидкостную или твердофазную экстракцию.
Концентрирование извлечений проводят упариванием при температуре 40-60
°С. В ряде случаев для повышения летучести проводят дериватизацию с
45
уксусным
ангидридом
в
безводном
пиридине
(фенобарбитал).
Идентифицируют барбитураты по времени удерживания (для барбитала – 5,18
мин) и по отношению массы ионов к заряду (204 для фенобарбитала).
ВЭЖХ при обнаружении барбитуратов. Барбитураты извлекают из
биологических объектов при рН = 1-2 хлороформом, смесью хлороформ изопропанол 9:1 или диэтиловым эфиром. Предварительно рекомендуется при
анализе мочи провести кислотный гидролиз для разрушения метаболитов глюкуронидов.
Для обнаружения с помощью ВЭЖХ рекомендованы следующие
условия: хроматограф «Милихром», хроматографическая колонка (62х2 мм),
заполненная обращеннофазовым сорбентом «Сепарон» С18 (5 мкм), подвижная
фаза - смесь 0,05 М водного раствора гидрофосфата аммония и метанола 60:40,
скорость элюирования равна 100 мкл/мин. Сухой остаток растворяют в 100 мл
подвижной фазы и вводят в хроматограф 4 мкл.
Идентификация барбитуратов, содержащихся в биопробах, проводится
следующим образом:
1. Сопоставляются время (объем) удерживания и коэффициент емкости
определяемого компонента и образца сравнения (контрольный раствор)
индивидуальных барбитуратов;
2. Сравниваются УФ-спектры предполагаемого компонента и образца
сравнения;
3. Оценивается
совпадение значений времени
удерживания
определяемого компонента и образца сравнения при добавлении контрольного
раствора в раствор экстракта из биопробы (концентрация образца сравнения
должна быть близка к концентрации определяемого компонента);
4. Сопоставляются УФ-спектры определяемого компонента и образца
сравнения при двух длинах волн, и оценивается их спектральное отношение.
5. Количественное определение
Количественное определение барбитуратов проводится прямым
фотометрическим методом, с помощью дифференциальной спектрофотометрии
и высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Фотометрический метод основан на взаимодействии барбитуратов с
раствором ацетата кобальта в присутствии изопропиламина и метанола (метод
предложен В.И. Поповой). Барбитураты из биологического материала
извлекают водой, подкисленной серной кислотой. После очистки с помощью
гель-хроматографии
проводят
концентрирование
путем
экстракции
хлороформом. Хлороформный экстракт выпаривают до сухого остатка. Сухой
остаток, в зависимости от обнаруженного барбитурата, растворяют в
хлороформе (барбитал, фенобарбитал) или метиловом спирте (барбамил,
этамииал). К полученным растворам добавляют по 5 мл 0,125% раствора
ацетата кобальта в метиловом спирте и по 1 мл 50% изопропиламина в
метиловом спирте. Оптическую плотность растворов, окрашенных в
фиолетовый цвет, измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-М при
зеленом светофильтре в кювете со слоем раствора 20 мм. В качестве раствора
46
сравнения применяют смесь реактивов. Предел обнаружения составляет 0,040,08 мг барбитурата в 1 мл исследуемого раствора.
Дифференциальная спектрофотометрия. Количественное определение
проводят по разности величины оптической плотности исследуемого и
контрольного опытов. Этот метод приемлем в том случае, когда при различных
значениях рН среды изменяется спектр поглощения исследуемого вещества, а
спектр поглощения примесей (посторонних экстрактивных веществ) остается
без изменений. Такая методика предложена для определения производных
барбитуровой кислоты.
В основу метода дифференциальной спектрофотометрии положена
способность барбитуратов к лактим-лактамной (имидо-имидольной)
таутомерии.
O
HN
O
R2
N
H
O
R1
O
pH 10
HN
O
R2
N
I
O
R1
O
II
R1
N
pH 13
O
R2
N
O
III
В органическом растворителе после экстракции барбитураты находятся в
лактамной форме (I). В этом случае спектр поглощения барбитурата
представляет собой ниспадающую кривую 1 (рис. 1) в области 220-320 нм. Это
связано с тем, что в лактамной форме в молекуле барбитурата отсутствуют
сопряженные двойные связи.
При значении рН = 10 барбитураты перейдут в лактимную форму (II).
При регистрации спектра такого раствора обнаруживается максимум
светопоглощения при 240 нм (см. рис. 1, кривая 2).
При значении рН = 13 барбитураты перейдут в дилактимную форму (III).
Спектр поглощения барбитурата в этом случае имеет полосу с максимумом при
260 нм (см. рис. 1, кривая 3).
47
Рисунок 1. Спектры поглощения барбитуратов при различных значениях рН среды.
При исследовании внутренних органов определяют разницу
оптической плотности при рН=10 и рН=2 при длине волны 240 нм.
в
При исследовании биологических жидкостей определяют разницу в
оптической плотности при рН=13 и рН=10 при длине волны 260 нм.
Расчет содержания барбитуратов проводят по удельному показателю
поглощения, который рассчитывают при тех же значениях рН для раствора
стандартного образца:
Более воспроизводимые результаты получаются в том случае, когда
расчеты проводят по стандартному образцу:
Использование дифференциального варианта спектрофотометрического
определения барбитуратов позволяет получить достаточно надежные
результаты и исключить влияние посторонних веществ, экстрагируемых в
процессе анализа вместе с барбитуратами из раствора при рН = 2-2,5.
48
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Для количественного определения барбитуратов и других токсических веществ
высокоэффективная жидкостная хроматография находит применение в трех
вариантах: метод добавок, метод внешнего стандарта и метод внутреннего
стандарта.
Метод добавок. Для выделения токсических веществ из мочи используют
жидкость- жидкостную экстракцию. Анализ ведут с двумя пробами мочи. С
помощью ВЭЖХ проводят анализ экстракта из одной пробы мочи и экстракта
из второй пробы мочи с добавлением в нее определенного количества вещества
(эталонного раствора), обнаруженного при качественном анализе. Расчет
количества найденного вещества в экстракте из мочи ведут по формуле:
где Сх - концентрация найденного вещества в экстракте из мочи; Cd концентрация добавленного вещества в растворе подвижной фазы; Vd - объем
добавленного эталонного раствора; Vx - объем экстракта мочи с обнаруженным
веществом; hx - высота сигнала определяемого вещества в экстракте из мочи;
hx+d - высота сигнала экстракта из мочи с добавкой эталонного раствора.
Метод внешнего стандарта. В соответствии с методом внешнего
стандарта и с учетом линейности зависимости выходного сигнала от массы
вещества последовательно, с анализом раствора экстракта биопробы, проводят
анализ контрольного раствора идентифицированного вещества. Концентрация
контрольного раствора должна быть близка к концентрации определяемого
вещества в растворе экстракта. Анализы контрольного раствора и экстракта
биопробы должны проводиться в одном масштабе регистрации. Концентрация
определяемого вещества в растворе экстракта рассчитывается по формуле:
где Сх - концентрация определяемого вещества; hx - высота сигнала в растворе
экстракта из мочи; hd - высота сигнала эталонного раствора; Сd - концентрация
добавленного вещества в растворе подвижной фазы.
Метод внутреннего стандарта. В соответствии с данным методом в
биообъект до операции пробоподготовки добавляется известное количество
вещества, принятого за стандарт. В анализе барбитуратов в количестве
внутренних стандартов рекомендуется использовать одно из следующих
веществ: апробарбитал, метилфенобарбитал, фенилгидантоин и другие
вещества, которые в данных условиях хроматографического разделения
должны полностью отделяться от других компонентов образца, должны
элюироваться близко к пику анализируемого соединения, не реагировать с
другими компонентами, т.е. удовлетворять требованиям, предъявляемым к
внутреннему стандарту. Можно использовать одновременно два и более
внутренних стандарта. Концентрацию определяемого вещества рассчитывают
по формуле:
49
где Сх - концентрация определяемого вещества; Сст - концентрация внутреннего
стандарта; hст - высота (или площадь Sx) пика определяемого вещества; hст высота (или площадь Sст) пика стандарта; FCx/Ccт - относительный
калибровочный фактор, предварительно определяемый по следующей
формуле:
Методы добавок и внешнего стандарта для барбитуратов хорошо сопоставимы.
Например, при определении в крови фенобарбитала при проведении химикотоксикологического анализа по методу добавок концентрация составила 0,03
мг/мл, по методу внешнего стандарта - 0,041 мг/мл.
ХI. ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ОПИАТОВ
1. Классификация опиатов и наркотических анальгетиков
По источникам получения и химическому строению суррогаты опия и
наркотические анальгетики делятся на:
- природные алкалоиды, содержащиеся в растении Papaver
somniferum - морфин и морфиноподобные вещества (опиаты);
- полусинтетические соединения, полученные путем
химического модификации молекулы морфина;
- соединения, созданные в результате полного химического
синтеза, обладающие опиоподобными свойствами (опиоиды).
Нелегальные и фармакопейные препараты – опий, героин, морфин,
пантопон, морфилонг, омнопон, кодеин, дионин, бупренорфин, метадон,
фентанил и его аналоги; препараты, содержащие вещества группы опия – капли
и таблетки желудочные, кодтерпин, кодтермокс и др., особенно суррогаты
опия, могут быть причиной острых экзогенных отравлений.
Основные классы опиатов и наркотических анальгетиков представлены
в таблице 2.
Таблица 2. Основные классы опиатов и наркотических анальгетиков
Наркотические
вещества,
изготавливаемые из
растения Papaver
somniferum
Наркотические
вещества, извлекаемые
Наркогены:
● Маковая соломка («кокнар»),
● Настойка маковой соломки,
● Опий-сырец,
● Медицинский опий,
● Суррогаты опия «ханка», «черняшка», «султыга»
Фармацевтические средства:
● Морфин,
50
из опия
Полусинтетические
производные морфина:
Синтетические
морфиноподобные
вещества
Опиоиды
● Кодеин
Наркогены:
● Героин,
● Героин + кокаин (Speed ball)
● Героин + стрихнин
Фармацевтические средства:
● Апоморфин
● Налорфин
Фармацевтические средства:
● Пентазоцин (производное бензоморфана),
● Нальбуфин (производное морфинана),
● Трамадол (производное морфинана).
Средства заместительной терапии
героиномании:
● Метадон,
● Пропоксифен.
Наркогены:
● Фентанил и его гомологи.
Фармацевтические средства:
● Петидин,
● Этогептазин,
● Лоперамид.
Виды опия:
Опий-сырец - опийная смола - мягкая бесформенная масса темнобурого цвета со специфическим запахом. Представляет собой сгущенный
млечный сок, получаемый из недозревших головок снотворного мака.
Высушенный сок – это опий-сырец. После высушивания при температуре до 60
°С превращается в порошок от светло-желтого до светло-бурого цвета. В состав
входят более 50 алкалоидов, содержание которых доходит до 20% общей
массы. Остальную часть составляют углеводы, кислоты, жиры, аминокислоты.
Медицинский опий – тонкий порошок светло-коричневого цвета, имеет
характерный запах. В состав опия входят различные активные алкалоиды (от 25
до 50 и более), ряд органических и неорганических компонентов, а также
индифферентные вещества (меконин, меконоизон и опионин). Входящие в
состав опия алкалоиды являются производными фенантрена (морфин, кодеин,
тебаин) и изохинолина (папаверин, наркотин, нарцеин и др.)
Суррогаты опия - комплекс морфиноподобных соединений,
экстрагированных кустарным способом из маковой соломки или опия-сырца “ханка”, “черняшка”, «султыга» и др. В них неизбежно присутствие веществ,
используемых для извлечения активной фракции в процессе обработки
(уксусный ангидрид, ацетон и др.).
Опиумные шлаки - продукт, остающийся в трубке после курения опия,
еще содержит значительные количества морфина. Смешивается с сырцом или
обработанным опием для дальнейшего использования.
Омнопон – это смесь гидрохлоридов алкалоидов опия. В состав входят
около 50% морфина и 32-35% других алкалоидов. Омнопом представляет собой
51
порошок от кремоватого до коричневато-желтого цвета. Он растворяется в воде
(1:15) и этаноле (1:50). При взбалтывании водных растворов омнопона они
сильно пенятся. Омнопон применяется в тех же целях, что и морфин.
Меконовая кислота и меконин в омнопоне отсутствуют.
Характеристическим компонентом опия является – меконовая кислота,
содержание которой может доходить до 15% и лактон меконин, не обладающие
психоактивными свойствами. Алкалоидный состав опия представлен в таблице
3.
Таблица 3. Алкалоидный состав опия
Группа
Морфина
Содержание
в опии, %
3-23
Структура молекулы
Представители
Фенантреновый цикл
Морфин, кодеин,
тебаин, псевдоморфин,
неопин
Папаверин, лауданозин,
некоторые другие
минорные алкалоиды
Наркотин, нарцеин
Папаверина
0,5-1,3
Бензилизохинолиновый цикл
Наркотина
2-8
Фталилизохинолиновый цикл
2. Токсикологическое значение опиатов
Опий наиболее доступный для наркоманов продукт. Его могут
употреблять в виде смесей для курения. Однако чаще всего из него готовят
вытяжки для внутривенного введения.
Острое отравление развивается постепенно, так как эти препараты
медленно всасываются. Появляется головокружение, тошнота, рвота, наступает
сонливость, а затем непробудный сон. Зрачки узкие, не реагирующие на свет.
Дыхание поверхностное, замедленное, иногда, пульс слабый, еле
прощупывается. Лицо бледное с синюшным оттенком. Глубокое угнетение
ЦНС заканчивается параличом дыхательного центра. Смертельный исход
наступает при явлениях нарастающего отека легких. Дифференциальная
диагностика отравления опием с отравлением морфином затруднена.
При судебно-химическом анализе, в случае обнаружения в исследуемом
объекте морфина, меконовой кислоты, наркотина и других алкалоидов делают
заключение об отравлении опием. Иногда в содержимом желудка и в
кишечнике обнаруживают семена опийного мака. При обнаружении в
исследуемых объектах только морфина, наркотина и других алкалоидов опия
делают заключение об отравлении омнопоном.
Объектами исследования при отравлении опием (омнопоном) являются:
желудок с содержимым, почки, моча, печень с желчным пузырем, селезенка.
Легкие – в случае ингаляционного отравления.
Морфин – это наиболее фармакологически активный алкалоид опийного
мака. Содержащиеся в маке алкалоиды представлены солями меконовой.
52
яблочной и серной кислот. Опий был известен уже за много веков до нашей
эры. Название «опион» по-гречески означает «растительный сок». Первые
справки о маковом соке «меконион» восходят к Теофрасту (III век до н.э.). До
XIX в. употребляли только экстракты от и сырец опия. В 1805 г. Сертюрнер
выделил морфин в чистом виде.
Морфин и другие морфиновые алкалоиды встречаются в растениях рода
мак, стефания, синомениум, луносемянник. Реже они встречаются в родах
кротон, коккулюс, триклизия, окотея.
HO
3
O
N CH3
HO
6
Морфин один из основных представителей группы наркотических
анальгетиков, используемых в медицинской практике. Это сильное
болеутоляющее средство, действие которого обусловлено стимуляцией -, - и
-опиатных рецепторов. Морфин оказывает противошоковое действие при
травмах, которое объясняется понижением возбудимости болевых центров.
Снотворное действие морфина проявляется при принятии больших доз.
Медицинская промышленность выпускает морфин в виде порошка во флаконах
по 0,3 г, таблеток по 0,01 г, 1% раствора в ампулах и шприц-тюбиках по 1 мл.
Морфин способен вызнать эйфорию. При повторном применении
развивается пристрастие (морфиномания). Морфинизм имеет судебное и
судебно-медицинское значение. Наркоманы начинают с дозы 0,01-0,02 г и
постепенно увеличивают ее до 0,3-0,5 г и даже 3-10 г в сутки. Для здорового
человека, не употребляющего наркотики, токсическая доза составляет при
подкожном введении 0,1 г, а смертельная при приеме внутрь – 0,3-1,4 г.
Морфии понижает возбудимость кашлевого центра, тормозит
секреторную активность ЖКТ. Одним из характерных действий морфина
является угнетение дыхательного центра, что ограничивает его применение как
анальгетика.
Малые дозы морфина (5-10 мг) урежают и повышают глубину дыхания,
возникает эйфория, оживляются фантазии, острее становится восприятие,
выполнение умственной и физической работы сопровождается иллюзией
легкости, затрудняется концентрация внимания, уменьшается двигательная
активность. Внешний вид морфиниста характеризуется преждевременным
старением, трофическими расстройствами, кожа становится сухой, землистосерого цвета, зубы лишаются эмали, появляется кариес, зрачки сужаются,
вместо вен определяются плотные тяжи, лицо одутловатое, нарушается
функция желудочно-кишечного тракта.
Постоянное употребление препаратов опийной группы приводит к
психической и физической деградации и ранней гибели больных. При
внезапном прекращении приема морфина развивается коллаптоидное
состояние, опасное для жизни, которое длится от нескольких часов до 5-6
суток.
53
При остром отравлении морфином подавляются болевые ощущения,
исчезает чувство страха, дыхание замедляется, затем угнетается с переходом в
дыхание Чейна-Стокса. Нарушается сердечная деятельность, артериальное
давление падает, парализуется функция капилляров. Причина смерти – паралич
дыхания. Патологоанатомическая картина при остром отравлении морфином
мало характерна, обнаруживают застойное полнокровие внутренних органон,
отек легких и мозга, мелкие множественные кровоизлияния.
Объектами судебно-химического анализа на морфин являются желудок с
содержимым, печень, селезенка, почки, легкие, кровь, моча, головной и
спинной мозг.
Физико-химические свойства морфина: белые игольчатые кристаллы
или белый или мелкокристаллический порошок, желтеющий при хранении.
Основание морфина трудно растворимо в воде, спирте и диэтиловом эфире.
Соли морфина (ацетаты, гидрохлорида, сульфаты, тартраты) растворимы в
спирте и воде, нерастворимы в эфире. Кристаллизуется с одной молекулой
воды. При 100 С теряет воду, при 254 С плавится с разложением.
Кодеин - алкалоид, содержащийся в опийном маке. Он выделен из
растительного сырья в 1852 г. Его получают также полусинтетическим путем
из морфина. По характеру действия на организм колени близок к морфину, но
болеутоляющий эффект у него выражен слабее. Кодеин способен уменьшать
возбудимость кашлевого центра, он в меньшей степени угнетает дыхание,
слабее тормозит деятельность ЖКТ, но может вызывать запоры.
H3C O
3
O
N CH3
HO
6
В медицинской практике кодеин назначают для подавления возбуждения
кашлевого центра и реже при диарее. Его часто сочетают в лекарственных
формах с анальгином, кофеином, фенобарбиталом. Кодеин способен усилить
действие
жаропонижающих
и
аналгезирующнх
средств.
Такие
комбинированные лекарственные препараты применяют при головных болях,
невралгиях, мигренях и т.п. Максимальные дозы кодеина: разовая – 0,05 г.
суточная – 0,2 г. Выпускают кодеин в виде порошка и таблеток (с
гидрокарбонатом натрия) по 0,015 г. Кодеин входит в состав комбинированных
препаратов «Коделак», «Терпинкод», «Кодтерпин», «Таблетки от кашля»,
«Пенталгин», «Кодипронт», «Седалгин».
Кодеина фосфат по характеру действия и показаниям аналогичен
кодеину (содержит 80% кодеина основания).
При повторном применении кодеина иногда наблюдается пристрастие
(кодеиномания). Вначале проявляется психическое влечение к препарату,
возрастание толерантвости, наркотическая мотивация приема, затем
эйфорический эффект препарата падает и наступает общее психическое
истощение и социальная деградация личности. Для абстинентного синдрома
характерно развитие нервно-сосудистых реакций вплоть до возникновения
коллапса.
54
При приеме больших доз кодеина (0,2-0,3 г) отмечается угнетение
дыхательного центра, возбуждающий эффект с подъемом нервно-психического
тонуса. Смертельная доза кодеина составляет 0,5 г. Признаки отравления
проявляются через 30-40 мин после приема симптомами сонливости, головной
боли, шума в ушах, тошноты, жжения в под ложечкой, сухости во рту,
заторможенности.
При тяжелом отравлении развивается глубокая кома с полной потерей
рефлексов. Смерть наступает от остановки дыхания.
Объектами анализа при отравлении кодеином являются желудок и
толстая кишка с содержимым, почки, моча, мозг, печень с желчным пузырем,
кровь.
Физико-химические свойства кодеина: основание кодеина хорошо
растворимо в воде, эфире, хлороформе, спирте. Соли кодеина (гидрохлорид,
фосфат, сульфат) хорошо растворимы в воде и плохо растворимы в
хлороформе, спирте.
Этилморфин (дионин). Этот лекарственный препарат по действию
близок к кодеину. Этилморфин применяют внутрь (редко) для уменьшения
возбуждения кашлевого центра при хронических бронхитах, туберкулезе
легких и как болеутоляющее средство. Его назначают по 0,01-0,03 г на прием.
Максимальные дозы: разовая – 0,03 г, суточная – 0,1 г. Иногда этилморфин
используют в офтальмологической практике. Препарат оказывает
анальгезирующее действие на глаза при кератите, ирите, инфильтратах роговой
оболочки, конъюнктивите, воспалении радужной оболочки и других
заболеваниях глаз. В глазной практике этилморфин применяют в виде 1-2%
растворов или мази. Формы выпуска - порошок и таблетки по 0,015 г.
Этилморфин оказывает слабое действие на ЦНС. Картина отравления
этилморфином напоминает картину отравления кодеином.
Физико-химические
свойства
этилморфина:
это
белый
кристаллический порошок без запаха, горького вкуса. Гидрохлорид
этилморфина хорошо растворим в воде и спирте, но плохо растворим в
хлороформе и эфире.
H3C C O
3
O
EtO
3
O
O
O
H3C C O
N CH3
HO
6
Этилморфин
N CH3
6
Героин
Героин. Это быстродействующий наркотический анальгетик с малым
периодом полувыведения Он относится к числу наиболее опасных
наркотических средств. Героин является синтетическим веществом,
изготовляемым в подпольных лабораториях. Его получают по реакции
ацетилирования из морфина и морфинсодержашего сырья, к которому
относится морфин-сырец, экстракционный опий, экстракт маковой соломки и
др. Продуктом реакции является 3,6-ди-О-ацетилморфин. Полученный таким
образом героин содержит примеси алкалоидов, не подвергшихся
55
ацетилированию,
6-О-ацетилкодеин,
носкапин,
меконин
(продукт
восстановительного разложения носкапина) и др.
На нелегальный рынок с целью разбавления героин часто поступает с
добавками прокаина или в виде смеси с кокаином основанием (speed ball),
которая предназначена в основном для курения. Героин используют в виде
раствора для подкожных или внутривенных инъекций, порошкообразную
форму курят, вдыхают или втягивают носом. Применение героина часто
сочетается с приемом алкоголя или депрессантов.
Последствием действия героина на организм является привыкание,
которое наступает быстро, иногда с первого раза. Героин вызывает
расстройство пищеварения, деятельности внутренних органов. Наблюдается
нарушение эндокринного баланса, снижение иммунитета, импотенция.
Развивается
безразличие,
депрессия,
раздражительность,
истерия,
психопатические реакции, склонность к гневу, агрессии, суициду. Ухудшается
работа мозга, наблюдаются отек мозга, судорожные припадки, необратимые
изменения личности, умственная, психическая и физическая деградация,
остановка дыхания, потеря сознания, перебои в работе сердца и смерть.
После прекращения приема наркотика характерно эмоциональное
напряжение, раздражительность, зрачки расширяются, глаза слезятся,
наблюдается слюнотечение, потливость, «гусиная кожа», мышцы спины, рук и
ног напрягаются, возникает физическая слабость, аритмия, тахикардия,
тошнота, рвота, тремор, появляются выламывающие боли мышц рук, ног,
сведение жевательных мышц, икр, нестерпимые боли в животе, пояснице, в
области сердца, зуд, жжение
Физико-химические свойства героина: это белая или коричневая
пудра, хорошо растворимая в воде и спирте.
4. Пути метаболизма опиатов
Превращение опиатов и их синтетических аналогов в живом организме
проходит несколькими путями и включает обе фазы метаболизма.
Метаболизм морфина.
І фаза – Деметилирование и окисление.
HO
HO
HO
O
O
O
+
N CH3
HO
O
Морфина N-оксид
NH
N CH3
HO
HO
Морфин
ІІ фаза – образование конъюгатов:
56
Норморфин
HO
HSO3
HO
O
O
O
N CH3
Glu O
N CH3
N CH3 (H)
HO
HO
Морфин
6-О-глюкоронид
морфина
морфина (до 33%)
3-О-сульфат
(Норморфин)
Glu O
(5-10%)
CH3O
O
O
N CH3 (H)
N CH3
HO
HO
3-О-глюкоронид морфина(65-75%)
3-О-глюкоронид норморфина(3-4%)
Кодеин
Метаболизм кодеина и этилморфина.
І фаза – О- и N-Дезалкилирование:
HO
H3C O
H3C O
(C2H5)
(C2H5)
O
O
O
N CH3
HO
HO
HO
Морфин (5-15%)
NH
N CH3
Кодеин
(Этилморфин)
Норкодеин
(Норэтилморфин)
10-20%
ІІ фаза – образование глюкуронидов:
H3C O
H3C O
(C2H5)
(C2H5)
O
O
N CH3
N CH3
Glu O
HO
Кодеин
(Этилморфин)
6-О-глюкуронид кодеина
(6-О-глюкуронид этилморфина)
35-46%
57
HO
HO
O
O
N CH3
N CH3
Glu O
HO
Морфин
6-О-глюкоронид морфина
5-13%
Метаболизм героина.
І фаза – Гидролиз:
H3C C O
3
O
HO
HO
O
O
N CH3
HO
Морфин
моноацетилморфин
O
H3C C O
O
N CH3
O
H3C C O
6
Героин
N CH3
6
6-О-
ІІ фаза – образование глюкуронидов морфина:
Glu O
HO
O
O
N CH3
N CH3
HO
Glu O
3-О-глюкоронид морфина
6-О-глюкоронид морфина
5. Методы изолирования морфина
Изолирование алкалоидов из биологического материала при химикотоксикологическом анализе проводится подкисленным этанолом или
подкисленной водой. Однако оба этих метода приводят к потерям морфина,
достигающим 97-98,5%, что связано с амфотерными свойствами морфина. Из
водных растворов морфин лучше всего извлекается изоамиловым спиртом
(около 73-78%) при рН 8,5-9,5.
При анализе трупного материала на морфин был предложен хроматографическнй метод, основанный на использовании катионита СДВ-3. Через
колонку с катионитом пропускают водное извлечение из биологического
материала, подкисленное щавелевой кислотой до рН 5,0-6,0. Последующая
десорбция сорбированного морфина проводится 5%-ным водным раствором
аммиака.
6. Методы обнаружения морфина
1. Реакции с реактивами группового осаждения алкалоидов. Морфин
дает осадки с осадительными реактивами: Бушарда, Драгендорфа, Майера,
Зонненшейна и др.
58
2. Цветные реакции. Морфин с концентрированной азотной кислотой
дает красное окрашивание, с реактивом Эрдмана (к. серная кислота с к. азотной
кислотой) даёт красно-жёлтое окрашивание, с реактивом Фреде (к. серная
кислота с молибденовой кислотой) даёт фиолетовое окрашивание, с реактивом
Манделина (к. серная кислота с ванадиевой кислотой) даёт фиолетовое
окрашивание, с реактивом Марки даёт фиолетовое окрашивание, с реактивом
Мекке (селеновая кислота и серная кислота) - окраска от голубой до зеленой
(реактив неспецифичен).
3. Реакция Пеллагри. При нагревании морфина с концентрированными
соляной и серной кислотами он превращается в апоморфин, который дает
положительную реакцию Пеллагри.
Методика выполнения. В пробирку вносят несколько капель
хлороформной вытяжки, которую выпаривают досуха. К сухому остатку
добавляют 1-2 капли концентрированной соляной кислоты. После растворения
сухого остатка в этой кислоте в пробирку вносят 1-2 капли концентрированной
серной кислоты и смесь нагревают на водяной бане до полного выпаривания
соляной кислоты. После этого жидкость еще нагревают в течение 15 мин,
потом охлаждают и прибавляют 2-3 мл воды. Если при этом образуется осадок,
то его растворяют в нескольких миллилитрах разбавленной соляной кислоты.
Полученный раствор нейтрализуют 10% раствором карбоната натрия и
прибавляют 2-3 капли спиртового раствора йода. При этом появляется зеленая
окраска. После добавления 0,5-1 мл диэтилового эфира и взбалтывания водный
слой сохраняет зеленую окраску, а эфирный приобретает пурпурно-красную.
Избыток йода мешает этой реакции, так как его окраска маскирует окраску
конечного продукта реакции.
Реакция не специфична, ее дают и другие вещества: кодеин, этилморфин,
героин, апоморфин и др.
4. Реакция с хлоридом железа (ІІІ). В фарфоровую чашку вносят
несколько капель хлороформной вытяжки, которую при комнатной
температуре выпаривают досуха. К сухому остатку добавляют 1-2 капли
свежеприготовленного 2% раствора хлорида железа (ІІІ), появляется синяя
окраска.
5. Реакция с йодноватой кислотой (HIO3). При взбалтывании раствора
морфина, слабо подкисленного серной кислотой, с раствором йодноватой
кислоты или раствором иодата калия (КIO3), не содержащего иодидов,
выделяется свободный йод, который при взбалтывании с хлороформом
переходит в хлороформный слой, окрашивая его в фиолетовый цвет.
6. Реакция с гексацианоферратом калия (ІІІ) и хлоридом железа (ІІІ).
Гексацианоферрат калия (ІІІ) окисляет морфин
и превращается в
гексацианоферрат калия (ІІ), который взаимодействует с хлоридом железа (ІІІ).
При этом образуется берлинская лазурь, имеющая синюю окраску.
Эту реакцию дают и некоторые примеси, которые переходят из
биологического материала. Поэтому реакцию с гексацианоферратом калия (III)
применяют для обнаружения морфина в лекарственных препаратах и в хорошо
очещенных экстрактах из биологического материала.
7. Реакция с арсенатом калия. При растирании в фарфоровой чашке
равных количеств морфина и арсената калия в присутствии нескольких капель
59
концентрированной серной кислоты после осторожного нагревания появляется
темно-зеленое окрашивание.
8. Реакция с пероксидом водорода и сульфатом меди. С пероксидом
водорода в присутствии аммиака и 1 капли раствора сульфата меди морфин
приобретает постепенно исчезающее красное окрашивание.
9. Микрокристаллические реакции. Для проведения реакции
хлороформный экстракт из объекта испаряют на предметных стеклах до сухого
остатка, добавляют 1-2 капли 0,1 М раствора хлороводородной кислоты и
каплю соответствующего реактива. Смесь выдерживают во влажной камере 1015 мин. наблюдают образование кристаллического осадка с характерной
формой кристаллов.
В качестве реактивов используют:
пикролоновую
кислоту. Образуется
пикролонат
морфина,
представляющий собой кристаллический осадок из сферолитов желтого цвета.
- соль Рейнеке. Образуется рейнекат морфина, образующийся в виде
осадка сиреневого цвета, состоящий из кристаллов в виде густых пучков
тонких игл;
- иодид кадмия. Образуется иодокадмиат морфина в виде осадка белого
цвета, состоящий из бесцветных игл;
- хлорид ртути (ІІ). Образуется хлоромеркурат морфина в виде осадка
белого цвета, состоящего из игл, собранных в пучки.
10. Метод тонкослойной хроматографии. На линию старта на
хроматографической пластинке наносят 0.2 мл хлороформной вытяжки. Правее
на расстоянии 2-3 см на линию старта наносят 0.2 мл раствора «свидетеля»
(0,01%-й раствор морфина в хлороформе). Пластинку подсушивают на воздухе
и вносят в камеру для хроматографирования, насыщенную парами
растворителей (эфир-ацетон-25%-й аммиак в соотношении 20:10:1). Камеру
плотно закрывают крышкой. После того как система растворителей поднимется
на 10 см выше линии старта, пластинку вынимают из камеры, подсушивают на
воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа. При наличии морфина пятна
этого алкалоида на хроматографической пластинке приобретают розоватобурую окраску (Rf = 0,18).
11. Обнаружение морфина по УФ- и ИК-спектрам. Раствор морфина в
этиловом спирте имеет максимум поглощения при 287 нм. В 0,1 н. растворе
гидроксида натрия максимумы поглощения морфина наблюдаются при длинах
волн, равных 250 и 296 нм. В 0,1 н. растворе серной кислоты морфин имеет
максимум поглощения при 284 нм. Водные растворы гидрохлорида и сульфата
морфина имеют максимум поглощения при 285 нм.
В ИК-области спектра основание морфина (диск с бромидом калия)
имеет основные пики при 805, 1243, 1448, и 945 см−1.
Количественное определение морфина
1. Фотоколориметрический метод определения морфина (Метод
Крамаренко). Метод, основан на реакции мофина с кремнемолибденовой
кислотой, в результате которой возникает синяя окраска.
Методика определения: в мерную колбу вместимостью 25 мл вносят 3
мл 0,11%-го раствора силиката калия K2SiO3, 4 мл воды, 2 мл 0,5 н. раствора
соляной кислоты и 2 мл 5%-го раствора молибдата аммония. Через 3 мин
60
прибавляют 2 мл исследуемого раствора и 5 мл 6%-го раствора аммиака. Через
10 мин объем жидкости доводят водой до метки и измеряют оптическую
плотность
окрашенного
в
синий
цвет
раствора
с
помощью
фотоэлектроколориметра ФЭК-М (светофильтр красный, кювета 3 мм). В
качестве раствора сравнения берут смесь, состоящую из 3 мл 0,11%-го раствора
силиката калия, 2 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты, 2 мл 5%-го раствора
молибдата аммония, 5 мл 6%-го раствора аммиака и 13 мл воды.
Расчёт содержания морфина в пробах производят по калибровочному
графику. Для построения калибровочного графика в 6 мерных колб
вместимостью по 25 мл каждая вносят по 3 мл 0,11%-го раствора силиката
калия, 4 мл воды, 2 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты и 2 мл 5%-го раствора
молибдата аммония. Через 3 мин в колбы вносят соответственно по 0,1; 0,5; 0,8;
1,0; 1,5 и 2,0 мл стандартного раствора (в 1 мл стандартного раствора
содержится 2 мг гидрохлорида морфина), а далее поступают, как указано выше.
Этот метод позволяет определять от 0,2 до 4 мг морфина в пробе.
2. Экстракционно-фотоколориметрический метод.
Методика определения: 1 мл раствора остатка извлечения из объекта
вносят в делительную воронку, добавляют 9 мл ацетатной буферной смеси (рН
4,6) 5 мл 0,1% раствора тропеолина 00 и повторно экстрагируют 5 мл
хлороформа. Хлороформные экстракты объединяют, и объем доводят до 50 мл.
К 5 мл полученного раствора добавляют 20 мл хлороформа и 2,5 мл 1%
раствора концентрированной серной кислоты в метиловом спирте. Оптическую
плотность полученного раствора, окрашенного в фиолетово-красный цвет,
определяют с помощью фотоэлектроколориметра с использованием зеленого
светофильтра и кюветы 10 мм. Расчеты концентрации ведут, используя
калибровочный график.
3. Газо-жидкостная хроматография.
Проводят традиционным способом путем измерения высот (площадей
пиков) исследуемого вещества и «внутреннего стандарта». Расчет количества
проводят по калибровочному графику.
4. Метод ВЭЖХ.
Метод добавок. Проводят анализ экстракта из мочи и параллельно той
же пробы с добавкой в нее 0,2мл 0,11мкг/мл стандартного раствора морфина.
После получения на хроматограмме пиков исследуемого вещества и
«стандарта» концентрацию морфина рассчитывают по формуле.
Метод внешнего стандарта. Параллельно с анализом экстракта из
объекта проводят анализ стандартного раствора морфина в одном масштабе
регистрации.
После получения пиков на хроматограмме концентрацию исследуемого
вещества, рассчитывают по формуле.
Метод внутренного стандарта. К пробе исследуемого объкта до начала
пробоподготовки добавляют в качестве внутреннего стандарта налорфин. Затем
проводят изолирование, очистку извлечений и в полученном остатке
определяют морфин методом ВЭЖХ.
5. УФ-спектрофотометрия.
Используется после очистки извлечения из объекта от эндогенных
соединений с помощью ТСХ или твердофазной экстракции. Анализ ведут при
61
длинах волн, соответствующих максимумам светопоглощения морфина. Расчет
концентрации проводят по калибровочному графику.
4. Иммунохимические методы. Для количественного определения
морфина используют поляризационный иммунохимический анализ на
приборах фирмы «Эббот».
7. Методы изолирования и определения кодеина
Объектами анализа при отравлении кодеином являются желудок и
толстая кишка с содержимым, почки, моча, мозг, печень с желчным пузырем,
кровь.
Кодеин отличается от морфина тем, что морфин не экстрагируется
эфиром из щелочных растворов поскольку образует соли – морфинаты. Это
свойство используется для разделения этих алкалоидов в ходе анализа.
Предварительная проба на наличие кодеина в моче.
Методика. В делительную воронку вносят 50 мл мочи, подщелачивают
раствором аммиака до рН 10, прибавляют 50 мл хлороформа и взбалтывают в
течение 5 мин. Хлороформную вытяжку отделяют от водной фазы,
органическую фазу взбалтывают с 3 мл воды в течение 3 мин. Хлороформную
фазу отделяют от водной, фильтруют через безводный сульфат натрия и
упаривают досуха. Остаток растворяют в 1 мл этанола. Полученный спиртовый
раствор используют для обнаружения кодеина одним из следующих способов:
1) на фильтровальную бумагу наносят каплю полученного раствора и
прибавляют каплю реактива Марки. При наличии кодеина пятно приобретает
красноватую окраску, переходящую в сине-фиолетовую;
2) на фильтровальную бумагу наносят каплю полученного раствора и
прибавляют каплю 0,5%-го раствора ванадата аммония и каплю 2%-го раствора
серной кислоты. При наличии кодеина появляется зеленая окраска,
переходящая в синюю.
Для подтверждения результатов реакций необходимо провести
обнаружение кодеина в вытяжке методом ТСХ.
1. Реакция с осадительными реактивами. При взаимодействии
кодеина с реактивами Драгендорфа, Бушарда, Майера и другими образуются
соответствующие осадки.
2. Реакция Пеллагри. При нагревании кодеина с концентрированной
соляной кислотой, а затем с концентрированной серной кислотой ведет к
гидролизу метокси-группы кодеина и образуется апоморфин, который дает
соответствующую реакцию со спиртовым раствором иода.
3. Обнаружение кодеина методом ТСХ. На линию старта на
хроматографическкой пластинке наносят 0,2 мл раствора исследуемого
вещества. Справа на расстоянии 2 см на линию старта наносят 0,2 мл раствора
«свидетеля» (0,01%-ный раствор кодеина). Пластинку подсушивают на воздухе
и помещают в хроматографическую камеру и хроматографируют в системе
хлороформ-ацетон-диэтиламин в соотношении 25:15:1. После достижения
фронтом растворителя финиша, пластинку вынимают из камеры, подсушивают
на воздухе и опрыскивают реактивом Драгендорфа, модифицированным по
Мунье.
При наличии кодеина в исследуемом растворе пятно этого алкалоида
приобретает буровато-розовую окраску с Rf =0,40.
62
4. Обнаружение кодеина по УФ- и ИК-спектрам. Основание кодеина
растворе в этилового спирта имеет максимум поглощения при 286 нм.
В ИК-области спектра основание кодеина (диск с бромидом калия) имеет
основные пики при 1052, 1268 и 1500 см −1.
5. Микрокристаллические реакции. Для проведения реакции к
хлороформному раствору добавляют 1 каплю насыщенного раствора
пикролоновой кислоты. Образуется аморфный осадок, который при стоянии
становится кристаллическим. Под микроскопом видны кристаллы двух типов:
сферолиты желтого и пучки из бледно-желтых пластинок
Способы идентификации, позводяющие отличить кодеин от
морфина. Кодеин не дает реакций с FeCl3, c HIO3, гексацианоферратом калия
(III), которые дает морфин. Кроме того, кодеин можно отличить от морфина по
ИК-спектру.
Количественное определение кодеина
Экстракционно-фотоколориметрический
метод
определения
кодеина. Метод фотоколориметрического определения кодеина основан на
реакции с тропеолином 00, при которой образуется ионный ассоциат, который
экстрагируют хлороформом:
H3C O
-O S
3
O
N N
+
HO
N CH3
H
N
H
Методика выполнения: 1 мл исследуемого раствора вносят в
делительную воронку, прибавляют 9 мл ацетатной буферной смеси (рН 4,6), 5
мл 0,1%-го водного раствора тропеолина 00 и повторно экстрагируют 5 мл
хлороформа. Содержимое воронки взбалтывают в течение 5 мин,
хлороформный слой отделяют, водную фазу взбалтывают с новыми порциями
хлороформа по 5 мл до тех пор, пока 3-4 капли органической фазы не
перестанут давать окраску с 1%-ным раствором концентрированной серной
кислотой в метаноле. Хлороформные экстракты объединяют и объем доводят
хлороформом до 50 мл. К 5 мл полученного раствора прибавляют 20 мл
хлороформа и 2,5 мл 1% раствора концентрированной серной кислоты в
метиловом спирте. Затем измеряют оптическую плотность полученного
раствора,
окрашенного
в
фиолетово-красный
цвет,
с
помощью
фотоэлектроколориметра, используя зеленый светофильтр и кювету 10 мм. В
качестве раствора сравнения берут хлороформную вытяжку из смеси,
состоящей из 5 мл 0,1%-го раствора тропеолина 00, 9 мл ацетатного буфера (рН
4,6) и 1 мл воды. К полученному хлороформному экстракту прибавляют 2,5 мл
1%-го раствора концентрированной серной кислоты в метаноле.
Расчет концентрации ведут по калибровочному графику. Метод
позволяет определить от 0,2 до 2,0 мг кодеина в пробе.
8. Методы определения героина
63
Героин (диацетилморфин, ДАМ) является полусинтетическим опиатом,
который получают из морфина.
Объекты исследования. Используемый биологический материал для
диагностики: моча, кровь, слюна, потовые выделения, волосы, ногти.
Методы изолирования
100 г мелко измельченного трупного материала вносят в колбу
вместимостью 500 мл. Трупный материал заливают 200 мл воды, подкисленной
насыщенным водным раствором щавелевой кислоты до рН 2,0-2,5. Смесь
биологического материала и подкисленной воды оставляют на 2 ч при
периодическом перемешивании содержимого колбы. После указанного
времени кислую водную вытяжку сливают с трупного материала, который еще
раз в течение часа настаивают с водой, подкисленной щавелевой кислотой до
рН 2,5, а затем кислую водную вытяжку сливают с трупного материала. Кислые
водные вытяжки соединяют и процеживают через двойной слой марли.
Процеженную вытяжку подвергают центрифугированию. Надосадочную
жидкость из центрифужного стакана переносят в делительную воронку. Эту
жидкость 3-4 раза взбалтывают с новыми порциями хлороформа (по 15-20 мл).
Хлороформные вытяжки из кислой среды соединяют и исследуют на наличие
токсических веществ, которые экстрагируются хлороформом из кислой среды.
Оставшуюся в делительной воронке кислую водную вытяжку
подщелачивают 25 % раствором аммиака до рН 10 и 3-4 раза взбалтывают с
хлороформом (порциями по 15-20 мл). Хлороформные вытяжки из щелочной
среды соединяют и исследуют на наличие героина.
Химические методы определения героина.
• При добавлении к наркотическому средству концентрированной серной
кислоты наблюдают образование синего окрашивания.
• При добавлении к наркотическому средству концентрированной
азотной кислоты наблюдают образование желтого окрашивания.
• Реакция этерификации. К части исследуемого наркотического средства
добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, несколько капель
этилового спирта и
нагревают. Ощущается характерный запах
этилацетата.
H3C C O
3
O
HO
H+
O
O
H3C C O
N CH3
O
EtОН
+
АсОEt
N CH3
HO
6
Предварительные методы исследования: тонкослойная хроматография
(ТСХ), иммуноферментный анализ (ИФА).
Подтверждающие методы: газовая хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС)
или высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Время
обнаружения наркотика в моче, до 5 дней. При употреблении героина, в
неизменном виде это вещество присутствует в организме не более 30 минут.
Для
доказательства
употребления
героина
необходимо
идентифицировать его основной метаболит 6-МАМ (другие опиаты его не
64
образуют). Иногда героин может содержать в качестве примеси ацетилкодеин,
который при метаболизме могут давать еще и кодеин и морфин.
Таким образом, присутствие в моче только морфина или его конъюгатов
указывает на употребление чистого морфина или на злоупотребление героином
1 или 2 днями раньше. При низких концентрациях в моче морфина и кодеина
невозможно сделать строго однозначный вывод о веществе, который был
употреблен (морфин, героин, кодеин). Обнаружение в моче героина, морфина и
6-МАМ свидетельствует о приеме героина, тогда как наличие только морфина
указывает на употребление морфина.
9. Анализ биологических объектов на наличие меконовой кислоты и меконина
Обнаружение опия при наличии морфина сводится к обнаружению
меконовой кислоты, с которой он образует соль, и меконина. Меконовая
кислота и меконин в организме быстро разлагаются, и их обнаружение не
всегда возможно, особенно при поступлении в организм небольших количеств
опия.
O
H3C
OH
HOOC
O
O
O
H3C
COOH
O
O
Меконовая кислота
Меконин
Объекты исследования: трупный материал, остатки пищи, моча,
рвотные массы.
Изолирование. Для специального исследования на меконовую кислоту
исследуют материал и остаток после испарения хлороформного извлечения из
кислого раствора настаивают со спиртом, подкисленным соляной кислотой.
Вытяжку фильтруют и вновь выпаривают до небольшого объема и делят на 2
части. Одну часть исследуют на меконовую кислоту, вторую – на меконин.
Качественное обнаружение меконовой кислоты. Раствор упаривают
досуха на водяной бане. Остаток обрабатывают водой, фильтруют и фильтрат
взбалтывают в делительной воронке с бензолом для удаления примесей, затем
водную фазу кипятят с избытком MgO для перевода меконовой кислоты в
магниевую соль и горячий раствор фильтруют. К фильтрату, подкисленного
разведенной соляной кислотой, прибавляют раствор хлорида железа (III) –
появляется буровато-красное или кроваво-красное окрашивание.
Окрашивание не исчезает при нагревании (отличие от ацетата железа), а
так же при действии золотохлористоводородной кислоты (отличие от роданида
железа Fe(SCN)3). Окраска исчезает при добавлении минеральных кислот.
Имеются указания, что этим способом меконовую кислоту можно обнаружить
при наличии 0,05 г опия.
УФ-спектрофотометрия. После регистрации спектра поглощения
раствора, содержащего меконовую кислоту, в спектре обнаруживают 3
максимума при 210, 284 и 303 нм.
Качественное обнаружение меконина. Раствор экстрагируют бензолом.
Бензол отделяют от водной фазы и выпаривают досуха. Полученный остаток
исследуют на наличие меконина.
65
При добавлении к сухому остатку нескольких капель концентрированной
серной кислоты появляется зеленое окрашивание, которое в течение суток
переходит в красное. Если полученный при добавлении концентрированный
серной кислоты зеленый раствор нагреть, сразу появляется изумрудно-зеленое
окрашивание, переходящее в фиолетовое, а затем в красное.
ПЛАН
лекций по токсикологической химии
для студентов заочной формы обучения
(IV курс 8 семестр)
№
НАИМЕНОВАНИЕ ЛЕКЦИИ
IV курс, 8 семестр
1
Аналитическая диагностика наркотического опьянения. 2
ХТА каннабиноидов.
ПЛАН
практических занятий
студентов заочной формы обучения
(IV курс 8 семестр)
№
НАИМЕНОВАНИЕ ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЙ
IV курс, 7 семестр
1 Химико-токсикологический анализ на производные
барбитуровой кислоты.
2
2
Химико-токсикологический анализ опиатов.
2
3
Методы обнаружения и определения лекарственных
веществ
при
проведении
судебно-химической
экспертизы
производных 1,4-бензодиазепина и
фенотиазина.
2
66
ВОПРОСЫ К ЗАЧЁТУ
для студентов заочной формы обучения
IV курс 8 семестр
ПЕРЕЧЕНЬ ВОПРОСОВ
ДИСЦИПЛИНЕ.
ИТОГОВОГО
КОНТРОЛЯ
ПО
1. Правила производства экспертизы вещественных доказательств в судебнохимических отделениях лабораторий Бюро судебно-медицинской
экспертизы (Приказ Минздрава РФ № 346/Н от 12.05.2010 г.)
2. Положение о правилах отбора проб на обнаружение алкоголя,
наркотических средств, психотропных и других токсических веществ
(Приказ Минздравсоцразвития РФ № 40 от 27.01.2006.)
3. Факторы, определяющие эффективность выделения исследуемых веществ
на различных этапах экстракции.
4. Сравнительная характеристика общих методов изолирования лекарственных
соединений из биологических объектов.
5. Частные методы изолирования. Их характеристика и оценка.
6. Способы очистки и концентрирования извлечений.
7. Характеристика методов обнаружения лекарственных соединений,
используемых при химико-токсикологических исследованиях. Схема
обнаружения лекарственных соединений в извлечениях из биологических
объектов.
8. Иммуноферментный
анализ
в
судебно-химическом
и
химикотоксикологическом исследованиях.
9. ТСХ – скрининг — предварительный метод идентификации лекарственных
и наркотических соединений.
10. Количественное определение лекарственных и наркотических соединений.
Дифференциальная
спектрофотометрия на примере производных
барбитуровой кислоты. Фотометрия на основе реакции окрашивания и
экстракционно-фотометрический метод анализа.
11. Значение данных количественного анализа для оценки результатов
исследования.
12. Особенности химико-токсикологического анализа на содержание
наркотических средств.
13. Гниение биологических объектов и основные реакции вторичного
метаболизма. Способы консервирования биологического материала.
14. Соединения, изолируемые экстракцией полярными растворителями:
14.1. Соединения кислого характера: производные барбитуровой кислоты
(барбитал, фенобарбитал, барбамил, этаминал натрия, гексенал)
14.2. Соединения слабоосновного характера: производные 1,4 –
бенздиазепина (хлордиазепоксид, диазепам, оксазепам, феназепам,
нитразепам).
14.3. Соединения основного характера:
14.3.1. производные пиридина и пиперидина (пахикарпин, анабазин,
никотин)
14.3.2. производные тропана (атропин, скополамин, кокаин)
67
14.3.3. производные хинолина (хинин)
14.3.4. производные бензилизохинолина (папаверин)
14.3.5. производные тетрагидроизохинолина (наркотин)
14.3.6. производные фенантренизохинолина (морфин, кодеин, героин)
14.3.7. производные пиперидина (промедол)
14.3.8. фенилалкиламины
(эфедрин,
эфедрон,
амфетамин,
метамфетамин, МДМА)
14.3.9. производные
парааминобензойной
кислоты
(новокаин,
новокаинамид)
14.3.10. производные
фенотиазина
(аминазин,
дипразин,
левомепромазин, тиоридазин)
14.4. Каннабиноиды (каннабидиол, каннабинол, тетрагидроканнабинол,
тетрагидроканнабиноловая кислота).
Экзаменационные вопросы по токсикологической химии
для студентов 4 курса фармацевтического факультета
(заочное отделение)
Гигиеническая и патохимическая классификации ядов.
Классификация отравлений.
Основание для производства судебно-химической экспертизы.
Порядок производства судебно-химической экспертизы и методология
судебно-химического анализа. Приказ МЗ СР РФ №346/Н от 12.05.10.
5. Документация при производстве судебно-химических экспертиз.
6. Обязанности и права судебно-медицинского эксперта химика. Задачи
судебно-химической экспертизы.
7. Определение «ядовитое вещество», «отравление». Стадии острых
отравлений.
8. Положение о химико-токсикологической лаборатории наркологических
центров. Задачи ХТЛ. Приказ Минздравсоцразвития РФ №40 от 27.01.06.
9. Положение о правилах отбора проб на обнаружение алкоголя,
наркотических средств, психотропных и других токсических веществ
(Приказ Минздравсоцразвития РФ №40 от 27.01.06.).
10. Токсикокинетика. Математическая зависимость между ответом и дозой
токсиканта.
Уравнение
адсорбции
Ленгмюра,
нахождение
токсиметрических параметров графическим методом.
11. Теория избирательной токсичности: «оккупационная», кинетическая.
12. Теория неионной диффузии. Уравнение Гендерсона для органических
электролитов в организме.
13. Летальный синтез как метаболический процесс.
14. Наркомания, токсикомания, наркотическое средство. Постановление
Правительства РФ от 30.06.98 №681. Ответственность за
правонарушения, связанные с наркоманией. УК РФ ст.ст. 228, 229, 230,
231, 232, 233.
15. Особенности химико-токсикологического анализа на содержание
наркотических средств.
16. Гниение биологических объектов и основные реакции вторичного
метаболизма. Способы консервирования биологического материала.
1.
2.
3.
4.
68
17. Анализ производных барбитуровой кислоты. Специальный метод
изолирования подщелоченной водой. Прямая и дифференциальная
спектрофотомерия, применяемая для их обнаружения и количественного
определения.
18. Направленный химико-токсикологический анализ на вещества,
подвергающиеся в организме интенсивному метаболизму, на примере
производных 1,4-бензодиазепина.
19. Морфин, фармакологическое действие, метаболизм, специальный метод
изолирования, методы обнаружения. Интерпретация результатов
химико-токсикологического анализа.
20. Героин, фармакологическое действие, метаболизм, специальный метод
изолирования, методы обнаружения. Интерпретация результатов
химико-токсикологического анализа.
21. Каннабиноиды, физико-химические свойства. Фармакокинетика и
метаболизм каннабиноидов, методы изолирования и обнаружения.
22. Метаболизм, изолирование, обнаружение и количественное определение
фенилалкиламинов (эфедрин, эфедрон, амфетамин, метамфетамин,
МДМА).
23. Метаболизм, изолирование, обнаружение и количественое определение
производных фенотиазина (аминазин, дипразин, левомепромазин).
24. Аналитический скрининг на группы лекарственных веществ на основе
тонкослойной хроматографии.
25. Ненаправленный
химико-токсикологический
анализ
с
целью
диагностики острых отравлений.
26. Пестициды.
Физико-химические
свойства,
токсичность,
токсикокинетика. Клиника
27. Отравлений, клиническая диагностика. Методы детоксикации при
отравлении.
28. Пестициды.
Методы
изолирования.
Энзиматический
и
хроматографические методы анализа. Специфичность методов
исследования.
29. Синтетические пиретроиды. Физико-химические свойства. Токсичность.
Метаболизм. Химико-токсикологический анализ биологических проб.
30. Исследование на мышьяк. Какой из методов при исследовании
расценивается как предварительный, имеющий отрицательное судебнохимическое значение? Химизм реакций этого метода.
31. Исследование на мышьяк. По каким характерным признакам можно
судить о наличии мышьяка при исследовании его в аппарате Марша?
Какие
при
этом
происходят
химические
реакции.
Какие
микрокристаллические реакции используются для доказательства
мышьяка
по
методу Марша?
Количественное
определение.
Интерпретация результатов исследования.
32. Исследование на свинец. Каким образом из минерализата выделяется в
осадок ион свинца? Как далее перевести ион свинца в раствор для
выполнения качественного анализа? Каковы условия проведения
исследования на свинец с дитизоном? Назовите тип реакции, напишите
химизм. Осадочные и микрокристаллические реакции на свинец.
Количественное определение.
69
33. Исследование на марганец. Какие реакции лежат в основе обнаружения
ионов марганца? Количественное определение. Интерпретация
результатов исследования.
34. Исследование на хром. Какие реакции лежат в основе обнаружения
хрома? Являются ли они специфичными? Какие ионы маскируются при
исследовании на хром? Почему исследования на марганец и хром
согласно схеме дробного метода анализа проводятся до исследования на
серебро?
35. Исследование на серебро. Какие реакции лежат в основе обнаружения
ионов серебра? Каковы условия проведения реакции на серебро с
дитизоном? Назовите тип реакции, напишите химизм. Укажите, каким
образом отдифференцировать дитизонаты серебра и ртути. Почему
серебро осаждают из минерализата, чтобы продолжить исследования на
остальные ионы? Осадочные и микрокристаллические реакции на
серебро. Количественное определение.
36. Исследование на цинк. Каковы условия проведения реакции на цинк с
дитизоном? Напишите химизм, назовите тип реакции. Какое судебнохимическое значение имеет реакция? Напишите химизм реакции цинка с
диэтилтиокарбаминатом натрия. Укажите, каким образом проводится
маскирование ионов железа, кадмия, меди. Какие осадочные и
микрокристаллические реакции используются в дробном методе для
обнаружения ионов цинка? Количественное определение. Интерпретация
результатов исследования.
37. Исследование на кадмий. Напишите химизм реакции кадмия с
диэтилтиокарбаминатом
натрия.
Какие
осадочные
и
микрокристаллические реакции используются в дробном методе для
обнаружения
ионов
кадмия?
Количественное
определение.
Интерпретация результатов исследования.
38. Исследование на висмут. Напишите химизм реакции висмута с 8оксихинолином. Использование комплекса с тиомочевиной для ФЭКопределения висмута. Назовите микрокристаллические реакции,
используемые для подтверждающего исследования на ионы висмута.
Количественное определение. Интерпретация результатов исследования.
39. Исследование на сурьму. Напишите химизм реакции сурьмы с
малахитовым зелёным. Укажите тип химической реакции. Каким
образом дифференцировать комплексы с малахитовым зеленым ионов
железа (III), таллия (III), с комплексом ионов сурьмы? Какая реакция
используется для подтверждающего исследования?
40. Клинические симптомы отравления органическими соединениями ртути.
Этилмеркурхлорид: изолирование, обнаружение, количественное
определение.
41. Клинические симптомы отравления неорганическими соединениями
ртути. Их изолирование, обнаружение и количественное определение.
42. Изолирование, методы обнаружения и количественного определения
синильной кислоты. Чувствительность методов.
43. Метиловый спирт. Токсичность, токсикокинетика, биотрансформация.
Методы качественного и количественного определения.
70
44. Этиловый спирт. Токсичность, токсикокинетика, биотрансформация.
Химические
и
биохимические
методы
исследования.
Газохроматографический метод исследования этанола. Оформление акта
судебно-химического исследования на спирты.
45. Хлорофос. Метаболизм, изолирование, обнаружение и количественное
определение.
46. Токсичность и химико-токсикологический анализ соединений фтора.
47. Оксид
углерода.
Токсичность,
химические
экспресс-методы
обнаружения карбоксигемоглобина.
48. Количественное
определение
карбоксигемоглобина
спектрофотометрическим методом и оксида углерода методом ГЖХ.
Оценка результатов количественного определения.
49. Гомогенный и гетерогенный иммуноферментный анализ. Применение
ИФА в судебно-химическом и химико-токсикологическом анализе
лекарственных веществ. Интерпретация результатов исследования.
50 Ложноположительные и ложноотрицательные результаты в ИФА.
ПЕРЕЧЕНЬ ОСНОВНОЙ И ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПО ДИСЦИПЛИНЕ
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
ОСНОВНАЯ ЛИТЕРАТУРА
1. Токсикологическая химия: Учебник для вузов / Под ред. Т.В. Плетеневой.
2-е изд., испр. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 512 с. – Режим доступа:
http://www.studmedlib.ru/
2. Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов: учебное
пособие для вузов / под ред. проф. Н.И. Калетиной. - М. : ГЭОТАРМедиа, 2008. – 1008 с. - Режим доступа: http://www.studmedlib.ru/
3. ТСХ-скрининг токсикологически значимых соединений, изолируемых
экстракцией и сорбцией: учебное пособие для самостоятельной
подготовки студентов, обучающихся по специальности "Фармация" 060108 / Г.В. Раменская [и др.]; под ред. А.П. Арзамасцева. - М.: ГЭОТАРМедиа, 2010. - 240 с.: ил. – Режим доступа: http://www.studmedlib.ru/
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА
4. Токсикологическая химия : метаболизм и анализ токсинов : учеб. пособие
для вузов / [кол. авт. : Е. Ю. Афанасьева, Е. Я. Борисова, О. Л. Верстакова
и др.] . - М. : ГЭОТАР-Медиа , 2008 . - 1016 с. : ил. + 1 CD-ROM .
5. Токсикологическая химия. Ситуационные задачи и упражнения: учебное
пособие / под ред. Н.И. Калетиной. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - с. 352:
ил. – Режим доступа: http://www.studmedlib.ru/
71
6. Токсикологическая химия : Учебник / Т.Х. Вергейчик ; под ред. проф. Е.Н.
Вергейчика. – М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 400 с. : ил.
7. Токсикологический вестник : научно-практический журнал / ФГУЗ "Рос.
регистр потенциально опасных химических и биологических веществ"
Роспотребнадзора" ; гл. ред. : Курляндский Б А. ; редкол. : Хамидулина
Х.Х., Егиазарян А.Р., Гребенюк А.Н. и др. - Издается с 1993 г. - М. :
Рос.регистр потенциально опасных химических и биологических веществ
"Роспотребнадзора", 1998 -. 2012. - А4. - 6 номеров в год. - ISBN 0869 7922.
72