Фракция больших тромбоцитов как маркер активации

№ 2 - 2014 г.
14.00.00 медицинские науки
УДК 618.3-06:616-005.1-008
ФРАКЦИЯ БОЛЬШИХ ТРОМБОЦИТОВ
КАК МАРКЕР АКТИВАЦИИ
ТРОМБОЦИТАРНОГО ГЕМОСТАЗА ПРИ
БЕРЕМЕННОСТИ
Е. А. Цикаленко1,2, О. Ю. Дорн1,2, Е. Г. Степанова1, С. А. Песков1,2, М. В. Паламарчук1,
Л. В. Вохминцева1
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава
России (г. Новосибирск)
2
ГБУЗ НСО «Государственный Новосибирский областной клинический диагностический
центр» (г. Новосибирск)
1
При исследовании системы гемостаза мало лабораторных маркеров, используемых
в качестве скрининговых маркеров активации тромбоцитарного звена. Цель исследования:
показать значимость параметра PLCC (фракция больших тромбоцитов) как маркера
активации тромбоцитарного звена гемостаза. Сравнивались группы беременных женщин
с гестозом, беременных без гестоза и здоровые небеременные женщины. Выявленная
положительная корреляция между агрегационной активностью тромбоцитов
и показателем PLCC подтверждает данные о том, что повышение фракции больших
тромбоцитов может являться маркером активации тромбоцитарного гемостаза при
беременности, осложненной гестозом.
Ключевые слова: маркеров активации тромбоцитарного звена, фракция больших
тромбоцитов, беременность, гестоз.
Цикаленко Елена Александровна — кандидат медицинских наук, ассистент кафедры
клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный
медицинский университет», врач клинико-диагностической лаборатории ГБУЗ НСО
«Государственный Новосибирский областной клинический диагностический центр»,
рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34, е-mail: kld54@ngs.ru
Дорн Ольга Юрьевна — кандидат медицинских наук, ассистент кафедры клинической
лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский
университет», врач клинико-диагностической лаборатории ГБУЗ НСО «Государственный
Новосибирский областной клинический диагностический центр», рабочий телефон: 8
(383) 346-03-34, е-mail: olga_dorn@ngs.ru
Степанова Елена Георгиевна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры
клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный
медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34, е-mail: kld54@ngs.ru
Песков Сергей Александрович — доктор медицинских наук, профессор кафедры
гигиены и экологии медико-профилактического факультета ГБОУ ВПО «Новосибирский
государственный медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 226-19-25, е-mail:
med-prof@ngmu.ru
Паламарчук Марина Валерьевна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры
клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный
медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34, е-mail:
m.palamarchuc@mail.ru
Вохминцева Лариса Вениаминовна — кандидат медицинских наук, доцент кафедры
клинической лабораторной диагностики ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный
медицинский университет», рабочий телефон: 8 (383) 346-03-34, е-mail: kld54@ngs.ru
Введение. Благодаря внедрению за последние десятилетия новейших достижений
лабораторной медицины и клинической гемостазиологии в медицинскую практику, стал
понятен механизм многих патологических состояний беременных женщин. В России
и за рубежом проведено большое количество исследований, посвященных изучению
особенностей сосудисто-тромбоцитарного гемостаза при беременности. Именно
нормальное функционирование системы сосудисто-тромбоцитарного гемостаза является
залогом физиологического течения беременности, и эта система первой страдает при
любых отклонениях от нормы в период беременности. Изменения гемостаза во время
беременности являются адаптационным процессом, и возрастание тромбоцитарной
активности при физиологической беременности характерно для III триместра [3].
Тромбоцитам принадлежит ведущая роль в поддержании нормального функционирования
эндотелиальных клеток, осуществлении первичного гемостаза, но выраженная активация
тромбоцитов является важнейшим пусковым механизмом тромбообразования [1, 4].
Несмотря на успехи в области исследования системы гемостаза при беременности,
в научной литературе описано мало лабораторных маркеров, используемых в качестве
скрининговых маркеров активации тромбоцитарного гемостаза при беременности [2].
Показатель PLCC — фракция больших тромбоцитов включает в себя «молодые»
и активированные формы [5]. Этот показатель определяется в клиническом анализе
крови и становится информативным уже на начальном этапе обследования пациентов.
В связи с этим показатель тромбоцитов PLCC может быть использован в качестве
лабораторного маркера активации тромбоцитарного гемостаза при беременности,
осложненной гестозом.
Цель исследования: показать значимость параметра PLCC как маркера активации
тромбоцитарного звена гемостаза при беременности, осложненной гестозом,
и определить интервал нормальных значений данного показателя при физиологической
беременности.
Материал и методы исследования. Всего обследовано 76 женщин. В первую
клиническую группу вошли 12 беременных женщин (со сроком беременности
22–26 недель) с гестозом средней степени тяжести. Вторую группу составили
34 женщины (с аналогичным сроком беременности) с физиологически протекающей
беременностью. Диагноз гестоза средней степени тяжести был выставлен на основании
шкалы Виттлингера от 10-ти до 20-ти баллов. Группу сравнения составили
30 соматически здоровых, сопоставимых по возрасту небеременных женщин.
Функциональную активность тромбоцитов (индуцированную АДФ (АДФ-АТ), адреналином
(Адр-АТ), коллагеном (Кол-АТ) агрегацию тромбоцитов) исследовали с помощью
двухканального лазерного анализатора агрегации тромбоцитов «Биола ЛА 230-2»
и наборов реактивов фирмы «Технология-Стандарт» (Россия). Агрегация тромбоцитов
регистрировалась турбодиметрическим методом и методом, основанным на оценке
среднего размера агрегатов в реальном времени. Взятие крови у пациенток осуществляли
утром натощак. Исследования проводили на плазме, богатой тромбоцитами (БТП),
содержащей примерно 200 клеток/нл, полученной по стандартной методике путем
центрифугирования. Количество тромбоцитов и показатель PLCC определяли с помощью
автоматического гематологического анализатора ВС-5800 (Mindray, Китай).
Статистическая обработка проведена с применением пакетов программы SPSS 13.0. Для
распределений, являющихся приближенно нормальными, рассчитывали средние
значения (М) и стандартные отклонения (среднеквадратическое отклонение — σ),
результаты представлялись в виде М ± σ. Для оценки межгрупповых различий
количественных данных с нормальным распределение применяли t-критерий Стьюдента
(для двух независимых групп). Различия между средними величинами считали
статистически значимыми при р < 0,05. Для определения связи между изучаемыми
признаками использовали коэффициенты корреляции Пирсона, Спирмена (Флетчер Р.,
1998).
Результаты и обсуждение. Во II триместре беременности при физиологически
протекающей беременности количество тромбоцитов и адгезивно-агрегационный
потенциал клеток существенно не отличается от аналогичных показателей
у небеременных женщин, а при присоединении гестоза количество активированных
тромбоцитов резко увеличивается.
Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что количество тромбоцитов,
циркулирующих в периферической крови у женщин с физиологической беременностью
и беременностью, осложненной гестозом средней степени тяжести, варьировало
в пределах нормальных величин. Однако, показатель PLCC у женщин с беременностью,
осложненной гестозом, статистически значимо превышает соответствующие значения
в группе сравнения в 1,35 раза (р < 0,05) (см. табл.).
Изучение функциональной активности тромбоцитарного звена гемостаза показало, что
у беременных женщин первой клинической группы наблюдалось статистически значимое
повышение индуцированной (АДФ, адреналином и коллагеном) агрегации тромбоцитов
в 1,63; 1,54 и в 1,48 раза (р < 0,05) соответственно, по сравнению с группой сравнения.
Значения индуцированной агрегации тромбоцитов во второй клинической группе
статистически значимо не отличались от аналогичных показателей группы сравнения.
Показатели активации тромбоцитов у женщин с физиологически протекающей
беременностью и с беременностью, осложненной гестозом, М ± σ
Группы
Показатели
PLCC, × 109/л АДФ-АТ, %
Адр-АТ, %
Кол-АТ, %
Беременные с гестозом, n = 12
82,0 ± 1,74*
70,3 ± 1,73* 79,25 ± 2,29* 77,0 ± 1,88*
Беременные без гестоза, n = 34
60,52 ± 1,36
40,17±2,45
55,26±1,48
58,82±1,62
59,1 ± 2,0
43,1±1,33
51,44±1,52
51,8±1,67
Группа сравнения, n = 30
Примечание: * — различия статистически значимы в сравнении с группой сравнения (p <
0,05)
Выявленная положительная корреляция между агрегационной (АДФ-АТ, Адр-АТ, Кол-АТ)
активностью тромбоцитов в плазме крови и показателем PLCC тромбоцитов (r1 = 0,687; p
< 0,05; r2 = 0,605; p < 0,05; r3 = 0,613; p < 0,05 соответственно) подтверждает данные
о том, что повышение фракции больших тромбоцитов может являться лабораторным
маркером активации тромбоцитарного гемостаза при беременности, осложненной
гестозом.
Выводы. Таким образом, показатель PLCC (фракция больших тромбоцитов) должен
использоваться как скрининг для проведения агрегационных тестов тромбоцитарного
звена гемостаза. Уровень данного показателя, выше которого можно ожидать повышение
агрегации тромбоцитов, составляет 70 × 109/л.
Список литературы
1. Кузник Б. И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза
в норме и патологии / Б. И. Кузник. — Чита : «Экспресс-издательство», 2010. — 832 с.
2. Лифенко Р. А. Морфофункциональные особенности тромбоцитов и эритроцитов
в структуре гестационной адаптации системы гемостаза: автореф. дис. ... канд. мед.
наук / Р. А. Лифенко. — М., 2009. — 22 с.
3. Нарушение в системе гемостаза и его коррекция у беременных с метаболическим
синдромом / Е. И. Соколов, И. Б. Манухин, А. А. Мочалов, О. Б. Невзоров // Лечащий
врач. — 2011. — № 3. — С. 43–47.
4. Сидельникова В. М. Механизмы адаптации и дизадаптации гемостаза при
беременности / В. М. Сидельникова, Р. Г. Шмаков. — М. : Триада-Х, 2004. — 192 с.
5. Molecular basis for ADP-induced platelet activation : I. Evidence for three distinct ADP
receptors on human platelets / J. L. Daniel, C. Dangelmaier, J. Jin [et al.] // J. Biol. Chem.
— 2008. — Vol. 273. — P. 2024–2029.
FRACTION OF PLATELET LARGER CELLS
AS MARKER OF ACTIVATION
OF PLATELET HEMOSTASIS
AT PREGNANCY
Е. А. Tsikalenko1,2, О. Y. Dorn1,2, Е. G. Stepanova1, S. А. Peskov1,2, М. V. Palamarchuk1,
L. V. Vokhmintseva1
1
SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University» of Ministry of Health (Novosibirsk c.)
2
SBHE NR «State Novosibirsk Regional Clinical Diagnostic Center» (Novosibirsk c.)
There are few laboratory markers used as screening markers of activation of platelet link
at research of hemostasis system. The objective of research is to show the importance of the
PLCC parameter (fraction of platelet larger cells) as the marker of activation of platelet link
of hemostasis. Groups of pregnant women with gestosis, pregnant women without it and
healthy nonpregnant women were compared. The revealed positive correlation between
aggregative activity of thrombocytes and PLCC indicator confirms data concerning that the
rising of fraction of platelet larger cells can be the marker of activation of platelet hemostasis
at the pregnancy complicated with gestosis.
Keywords: markers of activation of platelet link, fraction of platelet larger cells, pregnancy,
gestosis.
About authors:
Tsikalenko Elena Aleksandrovna — candidate of medical sciences, assistant of clinical
laboratory diagnostics chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry
of Health», office phone: 8(383) 346-03-34, е-mail: kld54@ngs.ru
Dorn Olga Yurievna — candidate of medical sciences, assistant of clinical laboratory
diagnostics chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry of Health»,
office phone: 8 (383) 346-03-34, e-mail: olga_dorn@ngs.ru
Stepanova Elena Georgievna — candidate of medical sciences, assistant professor of clinical
laboratory diagnostics chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University of Ministry
of Health», office phone: 8(383) 346-03-34, е-mail: kld54@ngs.ru
Peskov Sergey Aleksandrovich — doctor of medical sciences, professor of hygiene and
ecology chair of medico-preventive faculty at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University
of Ministry of Health», office phone: 8(383) 226-19-25, е-mail: med-prof@ngmu.ru
Palamarchuk Marina Valerievna — candidate of medical sciences, assistant professor
of clinical laboratory diagnostics chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University
of Ministry of Health», office phone: 8 (383) 346-03-34, e-mail: m.palamarchuc@mail.ru
Vokhmintseva Larisa Veniaminovna — candidate of medical sciences, assistant professor
of clinical laboratory diagnostics chair at SBEI HPE «Novosibirsk State Medical University
of Ministry of Health», office phone: 8 (383) 346-03-34, e-mail: kld54@ngs.ru
List of the Literature:
1. Kuznik B. I. Cellular and molecular mechanisms of regulation of hemostasis system in norm
and pathology / B. I. Kuznik. — Chita: «Express publishing house», 2010. — 832 P.
2. Lifenko R. A. Morphofunctional features of thrombocytes and erythrocytes in structure
of gestational adaptation of hemostasis system: theses. ... cand. of medical science / R. A.
Lifenko. — M, 2009. — 22 P.Л
3. Disturbance of hemostasis system and its correction at pregnant women with metabolic
syndrome / E. I. Sokolov, I. B. Manukhin, A. A. Mochalov, O. B. Nevzorov // Attending
physician. — 2011. — № 3. — P. 43-47.
4. Sidelnikova V. M. Mechanisms of adaptation and hemostasis disadaptation at pregnancy /
V. M. Sidelnikova, R. G. Shmakov. — M.: Triada-H, 2004. — 192 P.
5. Molecular basis for ADP-induced platelet activation : I. Evidence for three distinct ADP
receptors on human platelets / J. L. Daniel, C. Dangelmaier, J. Jin [et al.] // J. Biol. Chem.
— 2008. — Vol. 273. — P. 2024–2029.