Ìîëåêóëÿðíàÿ áèîëîãèÿ ÑÅËÜÑÊÎÕÎÇßÉÑÒÂÅÍÍÀß ÁÈÎËÎÃÈß, 2012, ¹ 2

ÑÅËÜÑÊÎÕÎÇßÉÑÒÂÅÍÍÀß ÁÈÎËÎÃÈß, 2012, ¹ 2
Ìîëåêóëÿðíàÿ áèîëîãèÿ
ÓÄÊ 636.52/.58:591.436.2:577.217.346
ÁÈÎÃÅÍÅÇ ÐÈÁÎÑÎÌ Â ÏÅ×ÅÍÈ ÖÛÏËßÒ ÏÎÑËÅ ÂÂÅÄÅÍÈß
17-β-ÝÑÒÐÀÄÈÎËÀ
Ë.Ã. ÊÎÐØÓÍÎÂÀ, Ð.Â. ÊÀÐÀÏÅÒßÍ
Íà öûïëÿòàõ ïîðîäû áåëûé ëåããîðí â íàó÷íîì îïûòå èçó÷àëè âëèÿíèå îäíîêðàòíîé è
ïîâòîðíîé ýñòðîãåíèçàöèè íà ñîäåðæàíèå áåëêà, ÄÍÊ, ÐÍÊ, ðèáîñîì â ïå÷åíè. Ïîêàçàíî, ÷òî
ââåäåíèå öûïëÿòàì 17-β-ýñòðàäèîëà âûçûâàëî ïðîëèôåðàöèþ è ãèïåðòðîôèþ ãåïàòîöèòîâ, óâåëè÷åíèå ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì â íèõ. Ñîäåðæàíèå ðèáîñîì â òêàíÿõ ïå÷åíè ïîñëå ïîâòîðíîé ýñòðîãåíèçàöèè áûëî âûøå, ÷åì ïîñëå îäíîêðàòíîé. Íàáëþäàåìûå èçìåíåíèÿ ïîñëå îäíîêðàòíîãî è
ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà íîñèëè îáðàòèìûé õàðàêòåð.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: öûïëÿòà, 17-β-ýñòðàäèîë, ïå÷åíü, ðèáîñîìà, ÐÍÊ, ÄÍÊ.
Keywords: chicken, 17-β-estradiol, liver, ribosome, RNA, DNA.
Ïå÷åíü — ìåñòî ñèíòåçà áîëüøèíñòâà æåëòî÷íûõ áåëêîâ ó ÿéöåêëàäóùèõ ïîçâîíî÷íûõ. Áåëêè æåëòêà â îñíîâíîì ïðîèñõîäÿò èç âèòåëëîãåíèíà è ëèïîïðîòåèäîâ î÷åíü íèçêîé ïëîòíîñòè (ËÎÍÏ), ñèíòåç êîòîðûõ
íà÷èíàåòñÿ â ïå÷åíè ñàìîê ïî äîñòèæåíèè èìè ðåïðîäóêòèâíîãî âîçðàñòà
(1). Ñ íàñòóïëåíèåì ïåðèîäà ÿéöåíîñêîñòè ïå÷åíü êóðèöû ïðèîáðåòàåò
íîâóþ âèòåëëîãåííóþ ôóíêöèþ áåç óòðàòû ïðåäøåñòâóþùèõ. Òàêàÿ äèôôåðåíöèðîâêà óæå ñïåöèàëèçèðîâàííîé òêàíè íàõîäèòñÿ ïîä êîíòðîëåì
ýñòðîãåíîâ. Ñèíòåç âèòåëëîãåíèíà è ËÎÍÏ ìîæåò áûòü âûçâàí òàêæå ó
ïåòóõîâ è íåïîëîâîçðåëîé ïòèöû ââåäåíèåì èì ýñòðàäèîëà (2). Ñòàíîâëåíèå âèòåëëîãåííîé ôóíêöèè ïå÷åíè ó êóð ïðè ïîëîâîì ñîçðåâàíèè, à òàêæå ïå÷åíè öûïëÿò ïîä âëèÿíèåì ýêçîãåííîãî ýñòðîãåíà ñîïðîâîæäàåòñÿ
çíà÷èòåëüíûì óñèëåíèåì áèîñèíòåòè÷åñêèõ ïðîöåññîâ (3-6). Ïîòåíöèàëüíûé óðîâåíü áåëêîâîãî ñèíòåçà çàâèñèò îò ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì â êëåòêàõ ïå÷åíè, à áèîãåíåç ðèáîñîì, â ñâîþ î÷åðåäü, îáóñëîâëåí èíòåíñèâíîñòüþ áåëêîâîãî ñèíòåçà è àêòèâíîñòüþ ÿäðûøêîâûõ îðãàíèçàòîðîâ, ãäå
ïðîèñõîäèò ñèíòåç ðèáîñîìíûõ ÐÍÊ (7, 8).
Öåëüþ ðàáîòû áûëî èçó÷åíèå äèíàìèêè ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì è ìàêðîìîëåêóë â òêàíÿõ ïå÷åíè öûïëÿò ïîñëå îäíîêðàòíîãî è ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà.
Ìåòîäèêà. Èññëåäîâàíèÿ âûïîëíÿëè íà ïòèöå ïîðîäû áåëûé ëåããîðí, êîòîðàÿ ñîäåðæàëàñü â óñëîâèÿõ âèâàðèÿ ÃÓÏ «Çàãîðñêîå ÝÏÕ ÂÍÈÒÈÏ Ðîññåëüõîçàêàäåìèè» (Ìîñêîâñêàÿ îáë.). Áûëè ñôîðìèðîâàíû äâå
îïûòíûå è îäíà êîíòðîëüíàÿ ãðóïïû öûïëÿò â âîçðàñòå 75 ñóò (ïî 70 ãîë.
â êàæäîé). Öûïëÿòàì îäíîé îïûòíîé ãðóïïû âíóòðèìûøå÷íî ââåëè ðàñòâîð 17-β-ýñòðàäèîëà â ïðîïèëåíãëèêîëå â äîçå 20 ìã/êã æèâîé ìàññû. ×åðåç 16 ñóò 17-β-ýñòðàäèîë â òîé æå äîçå èíúåöèðîâàëè öûïëÿòàì èç îáåèõ
îïûòíûõ ãðóïï. Â êîíòðîëå ïòèöå ââîäèëè ïðîïèëåíãëèêîëü.
Öûïëÿò (ïî 5 ãîë.) äåêàïèòèðîâàëè ÷åðåç 3, 6, 9 è 12 ÷, çàòåì ÷åðåç
1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 è 9 ñóò ïîñëå èíúåêöèè ïðåïàðàòà. Ïðèãîòîâëåíèå ãîìîãåíàòîâ ïå÷åíè è âûäåëåíèå èç íèõ ðèáîñîì ïðîâîäèëè â áîêñå ïðè
òåìïåðàòóðå 0-4 °Ñ. Â ãîìîãåíàòàõ îïðåäåëÿëè ñîäåðæàíèå îáùåãî áåëêà,
ÐÍÊ, ÄÍÊ (9) è ÐÍÊ-àçíóþ àêòèâíîñòü ïî ñêîðîñòè ðàñùåïëåíèÿ î÷èùåííîãî ïðåïàðàòà äðîææåâîé ÐÍÊ. Êîíöåíòðàöèþ ïðîäóêòîâ ðåàêöèè
îöåíèâàëè ïî ïîãëîùåíèþ ïðè λ = 260 íì. Ðèáîñîìû îñàæäàëè ïðåöèïèòàöèåé 0,2 Ì MgCl2 (10). Êîëè÷åñòâî ðèáîñîì îïðåäåëÿëè ïî îïòè÷åñêîé
27
ïëîòíîñòè (ÎÏ) ðàñòâîðîâ â äîäåöèëñóëüôàòå íàòðèÿ (SDS) ïðè λ = 260 íì.
Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû îáðàáàòûâàëè ñòàòèñòè÷åñêè îáùåïðèíÿòûìè ìåòîäàìè â ïðîãðàììå Microsoft Excel.
Ðåçóëüòàòû. Ìàññà ïå÷åíè öûïëÿò çàìåòíî óâåëè÷èâàëàñü íà 2-å ñóò
ïîñëå îäíîêðàòíîãî è ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà (p < 0,001) —
ïî ãðóïïàì 36,1 è 38,2 ã ïðîòèâ 28,1 ã â êîíòðîëå, äîñòèãàÿ ìàêñèìóìà íà
4-å ñóò (37,6 è 41,1 ã) è íà 8-å ñóò âîçâðàùàÿñü ê êîíòðîëüíîìó óðîâíþ
(28,7 è 29,2 ã).  èçìåíåíèè ñîäåðæàíèÿ ÄÍÊ â òêàíÿõ ïå÷åíè îòìå÷àëàñü
íåêîòîðàÿ ïåðèîäè÷íîñòü (òàáë. 1). Òàê, íà 1-å è 3-è ñóò ïîñëå îäíîêðàòíîãî ââåäåíèÿ ãîðìîíà ïðîèñõîäèëî ïîâûøåíèå êîëè÷åñòâà ÄÍÊ, ïåðåìåæàåìîå ñíèæåíèåì ýòîãî ïîêàçàòåëÿ, ÷òî ìîæåò áûòü îáóñëîâëåíî ÷àñòè÷íîé ñèíõðîíèçàöèåé êëåòîê ïå÷åíè ïî ìèòîòè÷åñêîìó öèêëó. Íàèìåíüøåå ñîäåðæàíèå ÄÍÊ íàáëþäàëè íà 4-å ñóò, êîãäà îòìå÷àëèñü ìàêñèìóìû
ïî ìàññå ïå÷åíè è ñîäåðæàíèþ ðèáîñîì. Ñëåäîâàòåëüíî, ðàçâèòèå áåëîêñèíòåçèðóþùåãî àïïàðàòà êëåòîê ïå÷åíè äîñòèãàëî ìàêñèìóìà íà 4-å ñóò,
÷òî è âûçûâàëî íåêîòîðîå ñíèæåíèå ñîäåðæàíèÿ ÄÍÊ.  ïîñëåäóþùåì ñîäåðæàíèå ÄÍÊ ïîñòåïåííî ïîâûøàëîñü è íà 9-å ñóò äîñòîâåðíî îòëè÷àëîñü îò ðåãèñòðèðóåìîãî íà 4-å ñóò (p < 0,05). Êîëè÷åñòâî ðèáîñîì ïðè
ýòîì óìåíüøàëîñü (p < 0,01) è íà 9-å ñóò âîçâðàùàëîñü ê êîíòðîëüíîìó
çíà÷åíèþ. Î÷åâèäíî, ÷òî óâåëè÷åíèå ñîäåðæàíèÿ ÄÍÊ è óìåíüøåíèå ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì âûçâàíû ðàñïàäîì ãèïåðòðîôèðîâàííîãî ïîä âëèÿíèåì
17-β-ýñòðàäèîëà áåëîêñèíòåçèðóþùåãî àïïàðàòà êëåòîê ïå÷åíè.
1. Äèíàìèêà ñîäåðæàíèå îáùåãî áåëêà, ÐÍÊ, ÄÍÊ è ðèáîñîì â òêàíÿõ ïå÷åíè
ïîñëå îäíîêðàòíîãî (Î) è ïîâòîðíîãî (Ï) ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà 75-ñóòî÷íûì öûïëÿòàì ïîðîäû áåëûé ëåããîðí
Âðåìÿ ïîñëå
ââåäåíèÿ
Áåëîê, ìã/ã
Î
Ï
ÐÍÊ, ìã/ã
Î
Ï
ÄÍÊ, ìã/ã
Î
Ï
Ðèáîñîìû, ÎÏ260/ã
Î
Ï
Êîíòðîëü
195±2
189±4
6,81±0,37
7,08±0,37
2,11±0,24 2,17±0,10
152±8
145±5
3-é ÷
173±5
166±2
6,77±0,40
7,04±0,16
2,40±0,18 2,64±0,08
108±3
146±10
6-é ÷
162±3
168±1
7,48±0,29
6,82±0,40
2,41±0,09 2,54±0,15
173±4
166±10
9-é ÷
178±3
177±4
7,85±0,23
7,78±0,37
2,32±0,04 2,45±0,12
117±3
128±5
12-é ÷
175±2
167±4
7,48±0,06
6,57±0,16
2,45±0,13 2,16±0,09
150±8
171±4
1-å ñóò
169±3
169±4
6,77±0,23
6,83±0,16
1,94±0,04 1,98±0,13
199±9
187±4
2-å ñóò
169±3
162±4
8,51±0,13
8,39±0,29
2,19±0,02 1,79±0,11
167±7
179±7
3-è ñóò
165±2
170±3
8,68±0,18
8,44±0,20
1,93±0,07 2,07±0,07
184±4
213±2
4-å ñóò
166±3
168±2
8,41±0,21
8,50±0,05
2,04±0,07 1,76±0,07
207±8
204±5
5-å ñóò
180±4
179±1
9,21±0,28
9,21±0,24
2,34±0,14 2,17±0,06
191±7
193±4
6-å ñóò
189±4
191±10
8,87±0,24
8,84±0,47
2,17±0,10 2,36±0,11
183±6
215±2
7-å ñóò
181±1
176±4
8,41±0,43
8,55±0,23
2,13±0,15 2,12±0,04
217±8
218±7
8-å ñóò
187±5
197±2
7,85±0,25
9,15±0,33
2,37±0,08 2,80±0,19
185±3
206±14
9-å ñóò
186±3
186±12
8,45±0,47
8,60±0,16
3,20±0,09 2,57±0,17
148±13
168±5
Ï ð è ì å ÷ à í è å. Ïîñêîëüêó ââåäåíèå ïðîïèëåíãëèêîëÿ öûïëÿòàì èç êîíòðîëüíîé ãðóïïû íå îêàçàëî
âëèÿíèÿ íà èçó÷åííûå ïîêàçàòåëè, â êîíòðîëå ïðèâåäåíû çíà÷åíèÿ, ñîîòâåòñòâóþùèå ñðåäíèì ïî îïûòó
è èñõîäíûì ïî ãðóïïàì.
Ýòî ïîäòâåðæäàåòñÿ èçìåíåíèåì ðèáîíóêëåàçíîé àêòèâíîñòè â òêàíÿõ ïå÷åíè (òàáë. 2). Ñ 5-õ ñóò ïîñëå ââåäåíèÿ ãîðìîíà îíà çíà÷èòåëüíî
ïðåâûøàëà êîíòðîëüíûå çíà÷åíèÿ (p < 0,01-0,02), à íà 2-4-å ñóò â ïåðèîä
íàðàñòàíèÿ ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì â ïå÷åíè ñòàíîâèëàñü íèæå êîíòðîëÿ. Íàáëþäàåìîå óìåíüøåíèå ñîäåðæàíèÿ ÐÍÊ è ðèáîñîì â ïå÷åíè íà 4-é ÷ ïîñëå
îäíîêðàòíîãî ââåäåíèÿ ãîðìîíà ñîïðîâîæäàëîñü ðåçêèì óâåëè÷åíèåì ðèáîíóêëåàçíîé àêòèâíîñòè (p < 0,02).
Îïèñàííûå èçìåíåíèÿ ñòàíîâÿòñÿ áîëåå íàãëÿäíûìè ïðè ïåðåñ÷åòå
íà ñîäåðæàíèå ÄÍÊ â òêàíÿõ ïå÷åíè. Ïðèâåäåííûå â òàáëèöå 2 ðåçóëüòàòû ïî ÷èñëó, ìàññå êëåòîê ïå÷åíè è ñîäåðæàíèþ â íèõ ðèáîñîì ïîñëå îäíîêðàòíîãî ââåäåíèÿ ãîðìîíà ïîëó÷åíû, èñõîäÿ èç òîãî, ÷òî ó êóð íà äèïëîèäíûé ãåíîì ïðèõîäèòñÿ 2,3 ïã ÄÍÊ (11), 1 ìã ðèáîñîì ñîîòâåòñòâóåò
11 åä. ÎÏ260 (10) è ðèáîñîìà ñîäåðæèò 2,3½106 Äà ÐÍÊ, êîòîðàÿ ñîñòàâ28
ëÿåò 40 % åå ìàññû (12). Èç ýòèõ äàííûõ ñëåäóåò, ÷òî óâåëè÷åíèå ìàññû
ïå÷åíè ïîä âëèÿíèåì 17-β-ýñòðàäèîëà ïðîèñõîäèò êàê çà ñ÷åò óâåëè÷åíèÿ
÷èñëà êëåòîê, òàê è çà ñ÷åò óâåëè÷åíèÿ èõ ìàññû. Ýòè ïîêàçàòåëè íà÷èíàëè çàìåòíî âîçðàñòàòü ÷åðåç 2 ñóò ïîñëå ââåäåíèÿ ãîðìîíà. Íà 2-6-å ñóò â èõ
èçìåíåíèè îòìå÷àëàñü 2-ñóòî÷íàÿ ïåðèîäè÷íîñòü, ïðè÷åì ñîîòâåòñòâóþùèå êðèâûå áûëè ñäâèíóòû îòíîñèòåëüíî äðóã äðóãà ïî ôàçå íà ïîëïåðèîäà (1 ñóò): ðîñò ÷èñëà êëåòîê ñîïðîâîæäàëñÿ óìåíüøåíèåì èõ ìàññû è
íàîáîðîò. Ïî îêîí÷àíèè äåéñòâèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà (8-9-å ñóò) âîçâðàùåíèå
ìàññû ïå÷åíè ê èñõîäíîìó çíà÷åíèþ îñóùåñòâëÿåòñÿ çà ñ÷åò ðàñïàäà êëåòîê, êîòîðûé íà÷èíàåòñÿ, ïî-âèäèìîìó, ñ öèòîïëàçìû, ÷òî è îáóñëîâëèâàåò óìåíüøåíèå ìàññû ãåïàòîöèòîâ. Ýòî ñîãëàñóåòñÿ ñ õàðàêòåðîì èçìåíåíèÿ ðèáîíóêëåàçíîé àêòèâíîñòè â ïå÷åíè: íà 2-4-å ñóò îíà áûëà íèæå, à
íà 5-9-å ñóò — âûøå êîíòðîëÿ.
2. Ðàçìåð ïå÷åíè è ïîêàçàòåëè áåëîêñèíòåçèðóþùåé àêòèâíîñòè ïðè îäíîêðàòíîì ââåäåíèè 17-β-ýñòðàäèîëà 75-ñóòî÷íûì öûïëÿòàì ïîðîäû áåëûé
ëåããîðí
Âðåìÿ ïîñëå
ââåäåíèÿ
×èñëî êëåòîê
íà îðãàí, ½109
Êîíòðîëü
4-é ÷
12-é ÷
1-å ñóò
2-å ñóò
3-è ñóò
4-å ñóò
5-å ñóò
6-å ñóò
7-å ñóò
8-å ñóò
9-å ñóò
Ï ð è ì å ÷ à í è å. Òî æå,
38,1±2,5
35,3±2,3
39,7±3,9
39,6±1,7
46,4±3,5
56,6±3,6
49,7±2,7
55,6±2,7
48,4±2,8
47,9±4,7
44,6±2,0
36,4±8,7
÷òî â òàáëèöå 1.
Ìàññà êëåòêè, ïã
683±41
658±23
697±64
637±9
727±53
660±37
821±41
729±9
743±37
731±30
697±9
559±39
×èñëî ðèáîñîì íà ÐÍÊ-àçíàÿ àêòèâêëåòêó, ½106
íîñòü, %
1,38±0,05
1,15±0,03
1,33±0,07
1,25±0,04
1,79±0,07
1,51±0,04
2,06±0,05
1,57±0,09
1,74±0,03
1,54±0,04
1,39±0,05
0,94±0,02
100±5
135±8
93±5
99±8
71±5
93±9
84±1
141±8
154±8
131±6
130±4
129±6
Îäíîâðåìåííî ñ ðîñòîì ÷èñëà ãåïàòîöèòîâ óâåëè÷èâàëñÿ èõ áåëîêñèíòåçèðóþùèõ àïïàðàò. Íà 4-å ñóò ïîñëå ââåäåíèÿ ãîðìîíà îòìå÷àëè
óâåëè÷åíèå ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì â ðàñ÷åòå íà êëåòêó â 1,5 ðàçà îòíîñèòåëüíî êîíòðîëÿ. Íàèáîëüøèé ðîñò ýòîãî ïîêàçàòåëÿ áûë áîëåå ÷åì 2êðàòíûì, ÷òî ïîçâîëÿåò ïå÷åíè îáåñïå÷èâàòü âèòåëëîãåíåç áåç óùåðáà äëÿ
îñòàëüíûõ ôóíêöèé.
Ýôôåêòèâíîñòü áèîñèíòåçà áåëêà â êëåòêàõ çàâèñèò îò âðåìåíè æèçíè ìîëåêóë ÐÍÊ, òî åñòü îò ÷èñëà öèêëîâ èõ èñïîëüçîâàíèÿ. Îäíèì èç
ãëàâíûõ ôàêòîðîâ, îïðåäåëÿþùèõ âðåìÿ æèçíè ÐÍÊ, ñëóæèò àêòèâíîñòü
âíóòðèêëåòî÷íûõ ðèáîíóêëåàç. Èçó÷åíèå ýòîé àêòèâíîñòè â òêàíÿõ ïå÷åíè
öûïëÿò ïîñëå ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà âûÿâèëî äâóõôàçíûé õàðàêòåð åå
äèíàìèêè.  ïåðâóþ ôàçó îòâåòà íà ýñòðîãåíèçàöèþ, êîãäà óâåëè÷èâàëîñü
÷èñëî ãåïàòîöèòîâ è ñîäåðæàíèå â íèõ ðèáîñîì, ðèáîíóêëåàçíàÿ àêòèâíîñòü áûëà íèæå, âî âòîðóþ ôàçó, êîãäà äåéñòâèå ãîðìîíà ïðåêðàòèëîñü è
âîçíèêëà íåîáõîäèìîñòü ðàñïàäà ãèïåðòðîôèðîâàííîãî áåëîêñèíòåçèðóþùåãî àïïàðàòà, — âûøå êîíòðîëÿ. Òàê, íà 9-å ñóò ïîñëå ýñòðîãåíèçàöèè
ñîäåðæàíèå ðèáîñîì â êëåòêàõ ïå÷åíè îêàçàëîñü íà 30 % ìåíüøå êîíòðîëüíîãî, ÷òî îáúÿñíÿåòñÿ, ïî-âèäèìîìó, íå òîëüêî ñíèæåíèåì èíòåíñèâíîñòè áèîñèíòåçà â ðèáîñîìàõ, íî è èõ óñèëåííûì ðàñïàäîì. Èíòåðåñ
ïðåäñòàâëÿåò ðåçêîå è êðàòêîâðåìåííîå ïîâûøåíèå ðèáîíóêëåàçíîé àêòèâíîñòè â ïåðâûå ÷àñû ïîñëå ââåäåíèÿ ãîðìîíà, êîòîðîå ñîïðîâîæäàëîñü
äîñòîâåðíûì ñíèæåíèåì ÷èñëà ðèáîñîì â ãåïàòîöèòàõ. Âîçìîæíî, ýòî óâåëè÷åíèå îòðàæàåò íåîáõîäèìîñòü ðàñïàäà îïðåäåëåííîé ÷àñòè ÐÍÊ ïåðåä
ïåðåñòðîéêîé ìåòàáîëèçìà ãåïàòîöèòîâ. Ðîñò àêòèâíîñòè ðèáîíóêëåàç ïî
ïðîäîëæèòåëüíîñòè ñîâïàäàë ñ ëàã-ïåðèîäîì, êîòîðûé ïîñëå ýñòðîãåíèçà29
öèè ïðîäîëæàåòñÿ äî íà÷àëà ñèíòåçà âèòåëëîãåíèíà. Ýòè äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò, ÷òî ïåðâûå ÷àñû ïîñëå ýñòðîãåíèçàöèè íàèáîëåå âàæíû äëÿ
ñòàíîâëåíèÿ âèòåëëîãåííîé ôóíêöèè ó öûïëÿò.
Ñîäåðæàíèå ÐÍÊ â òêàíÿõ ïå÷åíè öûïëÿò (ñì. òàáë. 1) âîçðàñòàëî
êàê ïîñëå îäíîêðàòíîãî, òàê è ïîñëå ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà
ïðè íàèáîëüøåì çíà÷åíèè íà 5-å ñóò. Èçìåíåíèå êîëè÷åñòâà ÄÍÊ çàâèñåëî îò ñõåìû ïðèìåíåíèÿ ýñòðîãåíà. Òàê, íà 2-å è 4-å ñóò ñîäåðæàíèå ÄÍÊ
áûëî äîñòîâåðíî íèæå ïðè ïîâòîðíîì ââåäåíèè ýñòðàäèîëà, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î áîëåå âûñîêîé ñòåïåíè ãèïåðòðîôèè ãåïàòîöèòîâ. Íà 9-å ñóò
ïîñëå îäíîêðàòíîãî ââåäåíèÿ ýñòðàäèîëà ýòîò ïîêàçàòåëü âîçðàñòàë è ïðåâûøàë êîíòðîëüíîå çíà÷åíèå (ð < 0,01). Ïðè ïîâòîðíîì ââåäåíèè ýñòðàäèîëà ïîâûøåíèÿ êîëè÷åñòâà ÄÍÊ íà ïîñëåäíèõ ñòàäèÿõ îòâåòà íå íàáëþäàëè. Ñîäåðæàíèå îáùåãî áåëêà ïðè îäíîêðàòíîé è ïîâòîðíîé ýñòðîãåíèçàöèè íå ðàçëè÷àëîñü.
 äèíàìèêå ñîäåðæàíèÿ
ðèáîñîì â ïå÷åíè ïîñëå îäíîêðàòíîãî è ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ
öûïëÿòàì 17-β-ýñòðàäèîëà òîæå
èìåëèñü íåêîòîðûå ðàçëè÷èÿ:
ñíèæåíèÿ â ïåðâûå ÷àñû ïîñëå
ââåäåíèÿ ãîðìîíà, õàðàêòåðíîãî
äëÿ îäíîêðàòíîé ýñòðîãåíèçàöèè
(p < 0,02), ïîñëå ïîâòîðíîé íå
îòìå÷àëè. Íà 12-é ÷ ïîñëå ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ ýñòðîãåíà, à
òàêæå íà 3-å è 6-å ñóò ñîäåðæàíèå ðèáîñîì áûëî äîñòîâåðíî
Äèíàìèêà ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì â òêàíÿõ ïå÷åíè ïî- âûøå, ÷åì ïîñëå îäíîêðàòíîãî. Â
ñëå îäíîêðàòíîãî (1) è ïîâòîðíîãî (2) ââåäåíèÿ 17- îñòàëüíûå ñðîêè äîñòîâåðíûõ ðàçβ-ýñòðàäèîëà 75-ñóòî÷íûì öûïëÿòàì ïîðîäû áå- ëè÷èé íå îáíàðóæèëè.
ëûé ëåããîðí.
Íàëè÷èå ðàçáðîñîâ, îáóñëîâëåííûõ èíäèâèäóàëüíîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ öûïëÿò ê 17-β-ýñòðàäèîëó,
çàòðóäíÿåò íåïîñðåäñòâåííîå ñðàâíåíèå èçìåíåíèé ïîêàçàòåëÿ. Ïîýòîìó
äëÿ îöåíêè äèíàìèêè ñîäåðæàíèÿ ðèáîñîì ìåòîäîì íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ áûëè ïîñòðîåíû óðàâíåíèÿ ðåãðåññèè: A = a + b t + ct 2 + d t 3, ãäå À —
ñîäåðæàíèå ðèáîñîì â òêàíÿõ ïå÷åíè, À260/ã; t — âðåìÿ ïîñëå ââåäåíèÿ
ãîðìîíà, ñóò (ðèñ.). Ïðè ñðàâíåíèè ïîëó÷åííûõ êðèâûõ âèäíî, ÷òî ñîäåðæàíèå ðèáîñîì â ïå÷åíè öûïëÿò ïîñëå ïîâòîðíîé ýñòðîãåíèçàöèè â öåëîì âûøå (p < 0,05). Ýòî ïîçâîëÿåò çàêëþ÷èòü, ÷òî ïîñëå ïîâòîðíîé ýñòðîãåíèçàöèè èíòåíñèâíîñòü ñèíòåçà áåëêà â ïå÷åíè âûøå, ÷åì ïîñëå îäíîêðàòíîé, è òðåáóåò áîëüøåãî ÷èñëà ðèáîñîì.
Òàêèì îáðàçîì, áèîãåíåç ðèáîñîì â ïå÷åíè ó öûïëÿò ïðåäñòàâëÿåò
ñîáîé îäèí èç ãëàâíûõ ôàêòîðîâ, êîëè÷åñòâåííî îïðåäåëÿþùèõ îòâåò íà
ââåäåíèå 17-β-ýñòðàäèîëà. Èçìåíåíèÿ â ïå÷åíè ïîñëå îäíîêðàòíîãî è ïîâòîðíîãî ââåäåíèÿ 17-β-ýñòðàäèîëà íîñèëè îáðàòèìûé õàðàêòåð.
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1.
2.
3.
30
B e r g i n k E.W., W a l l a c e R.A. Precursor-product relationship between amphibian vitellogenin and the yolk proteins, lipovitellin and phosvitin. J. Biol. Chem., 1974, 249: 2897-2903.
J o s t J.P., P e h l i n g G., B a c a O.G. Rate of synthesis of beta L-lipovitellin in the liver
of immature chicks treated with 17-beta estradiol. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975,
62(4): 957-65.
Æ ó ð à â ë å â È.Â., Ô è ñ è í è í Â.È., Ò î ë ê à ÷ å â Ï.Ñ., Ä à í è ë è í à Â.À.
Äåéñòâèå ãîðìîíîâ íà ñîäåðæàíèå ñâîáîäíûõ àìèíîêèñëîò â ïå÷åíè öûïëÿò. Ñ.-õ. áèîë.,
1980, 15(6): 949-950.
Ê î ð ø ó í î â à Ë.Ã. Î ðîëè ìèòîõîíäðèé â ñòàíîâëåíèè âèòåëëîãåííîé ôóíêöèè ïå÷åíè ó êóð. Ñ.-õ. áèîë., 2009, 4: 46-50.
5. Ê î ð ø ó í î â à Ë.Ã., Ê à ð à ï å ò ÿ í Ð.Â. Ñèíòåç âèòåëëîãåíèíà â ïå÷åíè ýñòðîãåíèçèðîâàííûõ öûïëÿò. Âåñò. ÐÀÑÕÍ, 2011, 4: 67-69.
6. Ê î ð ø ó í î â à Ë.Ã., Ê à ð à ï å ò ÿ í Ð.Â. Áèîõèìè÷åñêèé ïîäõîä ê ïðîãíîçèðîâàíèþ ÿè÷íîé ïðîäóêòèâíîñòè êóð. Äîêë. ÐÀÑÕÍ, 2011, 6: 43-44.
7. Ý ð í ñ ò Ë.Ê., Ê ë å í î â è ö ê è é Ï.Ì., Á à ã è ð î â Â.À., Â î ë ê î â à Í.À., Ç èí î â ü å â à Í.À., Ã ó ñ å â È.Â., Ä à í ÷ Ñ.Ñ., Á ð å ì Ã. Ñîñòîÿíèå õðîìîñîìíîãî
àïïàðàòà ó ñâèíåé, òðàíñãåííûõ ïî ãåíó ñîìàòîëèáåðèíà ÷åëîâåêà MT1/RhGH. Ñ.-õ. áèîë.,
2009, 2: 31-36.
8. Ñ ï è ð è í À.Ñ. Ìîëåêóëÿðíàÿ áèîëîãèÿ: ðèáîñîìû è áèîñèíòåç áåëêà. Ì., 2011.
9. Ò ð ó ä î ë þ á î â à Ì.Ã. Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ÐÍÊ è ÄÍÊ â ñóáêëåòî÷íûõ
ôðàêöèÿõ êëåòîê æèâîòíûõ. Â êí.: Ñîâðåìåííûå ìåòîäû â áèîõèìèè. Ì., 1977: 313-316.
10. P a l m i t e r R.D. Magnesium precipitation of ribonucleoprotein complexes. Expedient techniques for the isolation of undergraded polysomes and messenger ribonucleic acid. Biochemistry, 1974, 13(17): 3606-3615.
11. D e e l e y R.G., U d e l l D.S., B u r n s A.T., G o r d o n J.I., G o l d b e r g e r R.F.
Kinetics of avian vitellogenin messenger RNA induction. Comparison between primary and secondary response to estrogen. J. Biol. Chem., 1977, 252(22): 7913-7915.
12. L o e n i n g U.E. Molecular weights of ribosomal RNA in relation to evolution. J. Mol. Biol.,
1968, 38(3): 355-65.
4.
ÃÍÓ Âñåðîññèéñêèé íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèé
è òåõíîëîãè÷åñêèé èíñòèòóò ïòèöåâîäñòâà
Ðîññåëüõîçàêàäåìèè,
Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ
23 ìàÿ 2011 ãîäà
141300 Ìîñêîâñêàÿ îáë., ã. Ñåðãèåâ Ïîñàä, óë. Ïòèöåãðàäñêàÿ, 10,
e-mail: lg@vnitip.ru, vnitip@vnitip.ru
BIOGENESIS OF RIBOSOMES IN CHICKEN LIVER AFTER
INTRODUCTION OF 17-β-ESTRADIOL
L.G. Korshunova, R.V. Karapetyan
Summary
On the chicken of the White Leghorn breed in scientific experiment the authors studied an
influence of single and repeated estrogens introduction on content of protein, DNA, RNA, ribosome
in liver. It was shown, that 17-β-estradiol introduction to the chicken results in proliferation and hypertrophy of hepatocytes, the increase of ribosome content in them. The content of ribosome in liver
tissue after repeated estrogen introduction was higher, than after single one. The observed changes
after single and repeated 17-β-estradiol introduction had reversible character.
Íîâûå êíèãè
È ì à ø å â Ó.Á. Îñíîâû îðãàíè÷åñêîé õèìèè. Ì.: èçä-âî «ÊîëîñÑ», 2011, 464 ñ.
Äàíû îñíîâû ñîâðåìåííîé îðãàíè÷åñêîé õèìèè ñ ïðèâëå÷åíèåì òåîðåòè÷åñêèõ
ïðåäñòàâëåíèé, íåîáõîäèìûõ äëÿ ïîíèìàíèÿ
õèìèçìà è ìåõàíèçìà îðãàíè÷åñêèõ ðåàêöèé.
Ñèñòåìàòè÷åñêè èçëîæåíà îðãàíè÷åñêàÿ õèìèÿ îñíîâíûõ êëàññîâ óãëåâîäîðîäîâ è èõ
ôóíêöèîíàëüíûõ ïðîèçâîäíûõ; ðàññìîòðåíû
ìåòîäû ïîëó÷åíèÿ, ôèçè÷åñêèå è õèìè÷åñêèå ñâîéñòâà, ìåõàíèçì òèïè÷íûõ ðåàêöèé
è îáëàñòè ïðàêòè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ âàæíåéøèõ îðãàíè÷åñêèõ âåùåñòâ. Ó÷åáíèê âêëþ÷àåò ãëîññàðèé îñíîâíûõ òåðìèíîâ îðãàíè÷åñêîé õèìèè, ñïèñîê ðåêîìåíäóåìîé ëèòåðàòóðû è ïðåäìåòíûé óêàçàòåëü.
Ê à ì ê è í À.Ã., Ê è ñ å ë å â à È.Ñ. Ôèçèîëîãèÿ è ìîëåêóëÿðíàÿ áèîëîãèÿ ìåìáðàí
êëåòîê. Ì.: èçä-âî «Àêàäåìèÿ», 2008, 592 ñ.
Èçëîæåíû ñîâðåìåííûå ïðåäñòàâëåíèÿ îá ýëåêòðîôèçèîëîãèè è ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè ìåìáðàí êëåòîê. Îñâåùåíû
âîïðîñû ìîëåêóëÿðíîé îðãàíèçàöèè áèîëîãè÷åñêèõ ìåìáðàí, ïàññèâíûõ ýëåêòðè÷åñêèõ
ñâîéñòâ ìåìáðàí, ïóòåé ïåðåìåùåíèÿ èîíîâ
÷åðåç ìåìáðàíû êëåòîê. Äàíû îáùèå ïðåäñòàâëåíèÿ î ñòðóêòóðå è ôóíêöèÿõ èîííûõ
êàíàëîâ. Îïèñàí ïàññèâíûé èîííûé òðàíñïîðò, ðàññìàòðèâàþòñÿ ïîòåíöèàëû êëåòîê è
èõ ñâÿçü ñ èîííûìè òîêàìè. Ïðèâåäåíû ìîëåêóëÿðíàÿ îðãàíèçàöèÿ è ôóíêöèè ïîòåíöèàëóïðàâëÿåìûõ íàòðèåâûõ, êàëüöèåâûõ è êàëèåâûõ êàíàëîâ, îáñóæäàþòñÿ îòäåëüíûå àñïåêòû ëèãàíäóïðàâëÿåìûõ êàíàëîâ, ïîäðîáíî ðàññìîòðåíà ðàáîòà ìåõàíîñåíñèòèâíûõ êàíàëîâ.
Äàíà íîâàÿ êëàññèôèêàöèÿ êàíàëîâ. Äëÿ ñòóäåíòîâ ìåäèöèíñêèõ è áèîëîãè÷åñêèõ âûñøèõ ó÷åáíûõ çàâåäåíèé.
Á è ñ ñ â à í ã å ð Õ. Ïðàêòè÷åñêàÿ ýíçèìîëîãèÿ. Ì.: èçä-âî «Áèíîì. Ëàáîðàòîðèÿ çíàíèé», 2010, 328 ñ.
Ðàññìîòðåíû òåîðåòè÷åñêèå îñíîâû
ýíçèìîëîãèè, ïðèìåíÿåìûõ â ýòîé íàó÷íîé
îáëàñòè ìåòîäîâ, à òàêæå ïðèâåäåíû îïèñàíèÿ îñíîâîïîëàãàþùèõ ëàáîðàòîðíûõ ðàáîò.
31