раздел БИОЛОГИЯ и МЕДИЦИНА 56 УДК 631.4+581+582.26 ББК 28.5 ДЕЙСТВИЕ ЗЕЛЕНЫХ ВОДОРОСЛЕЙ И ГЕТЕРОАУКСИНА НА РОСТ И РАЗВИТИЕ MEDICAGO SATIVA L. Асфандиярова Л.З., Маркова О.В. В микровегетационных опытах Chlorella vulgaris, Klebsormidium flaccidum var. nitens и гетероауксин стимулировали рост и развитие растений Medicago sativa. За 7 дней вегетации энергия прорастания, площадь листочков, длина сформировавшихся корней и стебельков, превысили контрольные показатели в пределах 1,5 – 2 раза. В условиях интенсификации сельского хозяйства и резкого повышения антропогенного воздействия на окружающую среду, в частности на почвенный покров, значительно возрастает роль биологических факторов повышения плодородия почв и их рекультивации. Большую помощь в этом может оказать умелое использование и регулирование развития почвенной биоты, постоянной и существенной составляющей которой являются водоросли. В прижизненных выделениях водорослей обнаружены многие вещества высокой биологической активности. В многочисленных опытах они оказывали стимулирующее действие на рост высших растений [1;2], нередко приводя к ускорению роста корней, репродуктивных органов и к повышению урожаев [3]. Роль водорослей в посевах многолетних трав в различных типах почв до конца не выяснена, поэтому целью данной работы было изучение закономерностей влияния Сhlorella vulgaris Beijer, Klebsormidium flaccidum (Kűtz.) Fott. var. nitens Menegh. emend. Klebs и гетероауксина (β– индолилуксусная кислота) на рост и развитие Medicago sativa L. (табл. 1). Эксперименты были поставлены и проведены в чашках Петри с навеской песка в течение 7 дней. Повторность постановки опыта трехкратная. Для полученных данных мы рассчитывали статистические параметры: дисперсию (стандартное отклонение от средней) и коэффициент вариации (v%). По критерию Фишера (F) проверялась достоверность математических данных. В чашки Петри поместили по 100 семян растений люцерны посевной. Гетероауксин и суспензию водорослей вносили однократно в объеме 15 мл, равномерно распределив на поверхности песка. В дальнейшем полив опытов производили дистиллированной водой. Просмотр проводился через 2 дня после постановки эксперимента и продолжался в течение одной недели. Учет полученных результатов проводился по морфологическим и биометрическим параметрам. Контролировали первичную и окончательную биометрические характеристики (длина корня, побега, стебелька, ширина листа растений). Полученные данные были математически обработаны. Статистические методы исследования включали как стандартные методы, так и многомерный анализ данных. Влияние средовых факторов на растения было изучено с использованием модели однофакторного дисперсионного анализа. Гетероауксин оказывает стимулирующее действие на растение люцерны посевной. Энергия прорастания семян с внесением гетероауксина увеличивается уже на второй день после постановки опыта по сравнению с контролем. В опытном варианте проросло 53% семян, а в контрольном 48%. Тенденция увеличения всхожести семян продолжался до четвертого дня, к этому сроку проросло 59% семян, а в контроле всего 53%. До окончания эксперимента, в опыте с внесением гетероауксина, прорастание новых семян не наблюдалось, в контрольном варианте на шестой день мы выявили 54% проросших семян. После снятия опыта длина корня составила в среднем 33, 96 мм при действии гетероауксина, что на 5,64 мм больше чем в контроле; длина стебля – 15, 31 мм, превышая контроль на 0,64 мм; по стебельку, длине и ширине листа показатели не различались и составили 2,5 мм±0,08, 5,10 мм±0,17 и 2,32 мм±0,09 соответственно (табл.1). На фоне действия гетероауксина формирование листочков на вторые сутки составило 2 первичных листочка, в то время как в контроле они не сформировались. Тем не менее, на 3 сутки количество в контроле было в 2 раза меньше, чем при действии гетероауксина. В дальнейшем, разрыв между контролем и гетероауксином по количеству сфор- Вестник Башкирского университета.2006.№3. мировавшихся листочков сократился и составил 1,2; 1,3 и 1,2 раза на 4,5 и 6 сутки соответственно в пользу гетероауксина. Значения коэффициентов вариации у корня и стебля различались и состави- 57 ли в контроле 13% и 18%, а при действии гетероауксина 23% и 20% соответственно. В стебельке, длине и ширине листа коэффициент вариации в контроле и гетероауксине не различались. Таблица 1 Средние значения морфометрических показателей по вариантам опыта Варианты опыта Контроль Гетероауксин Klebsormidium flaccidum Klebsormidium flaccidum и гетероауксин Сhlorella vulgaris Сhlorella vulgaris и гетероауксин Длина корня, мм 28,32±0,48 33,96±1,01 Средние значения по вариантам опыта Длина стебля, Длина стебельДлина листа, мм ка, мм мм 14,67±0,34 2,5±0,08 5,10±0,17 15,31±0,41 2,5±0,08 5,10±0,17 Ширина листа, мм 2,32±0,09 2,32±0,09 28,32±1,20 13,94±0,58 2,96±0,15 4,74±0,19 2,26±0,09 29,13±1,09 15,64±0,65 2,51±0,14 4,86±0,19 2,23±0.10 36,5 ±0,5 17,4 ±0,2 3,32 ±0,08 6,98 ±0,1 3,51 ±0,05 29,5 ±0,43 15,2 ±0,18 2,5 ±0,04 5,07 ±0,1 2,4 ±0,05 Положительный стимулирующий эффект на прорастание семян люцерны оказывал K. flaccidum var. nitens. Количество проросших семян превышал контроль на 2 сутки – на 8%, на 3 сутки – на 10%, 4 сутки – на 15%, 5 сутки – на 17%, 6 сутки – на 16%. По морфометрическим показателям эффект стимуляции водоросли на растения люцерны был недостоверным, что подтверждается однофакторным дисперсионным анализом. Однако, K. flaccidum var. nitens оказал также стимуляцию на формирование листочков. На 2 сутки в контроле не было листочков, в опытах с водорослью листочков было 3. На 3 сутки заметна стимуляция: в контроле листочков в 5 раз меньше, чем при действии водоросли, на 4 сутки в 2,1 раз меньше. На 5 и 6 сутки в контроле листочков было меньше, чем на фоне действия K. flaccidum var. nitens в 1,3 раза. Совместное действие гетероауксина и K. flaccidum var. nitens показало дружное прорастание семян, чем в контроле. С внесением водоросли и гетероауксина энергия прорастания семян повышается уже на 2 день после постановки опыта по сравнению с контролем. В контрольном варианте проросло 48% семян, а при суммарном действии водоросли и гетероауксина – 52%. Тенденция увеличения всхожести семян на фоне совместного действия водоросли и гетероауксина продолжается до ликвидации опыта, к этому времени проросло 64% семян. В контроле идет незначительное увеличение количества проросших семян по сравнению с водорослью и гетероауксина и составляет на 3 день – 51%, на 4 и 5 день – 53%, на 6 день - 54%. В контроле длина корня, стебля и стебелька была ниже, чем при суммарном действии водоросли и гетероауксина; составляя 28,32 мм±0,48; 14,67 мм±0,34; и 2,5 мм±0,08 в контроле и 29,13 м±1,09; 15,64 мм ±0,65 и 2,51 мм±0,14 в опытном варианте. Тем не менее, по длине и ширине листа на фоне совместного действия водоросли с гетероауксином, наблюдается ингибирующий эффект. В контроле показатели длины и ширины листа были выше, чем при совместном действии водоросли и гетероауксина. Полученные нами статистические данные по корню, стеблю и стебельку были недостоверны, а по длине и ширине листа – достоверны. По количеству проросших листочков на 2 и 3 дне в контроле и при суммарном действии водоросли и гетероауксина мало различаются, в дальнейшем на 4,5 и 6 сутки наблюдался стимулирующий эффект водоросли и гетероауксина почти в 2 раза больше. Проведенные нами исследования показали, что суспензия водорослей C. vulgaris оказывает заметное влияние на растения люцерны посевной. раздел БИОЛОГИЯ и МЕДИЦИНА 58 Через 2 дня после постановки опыта количество проросших семян в опыте политые суспензией водорослей превышало по сравнению с контролем на 13%. В течение проведения эксперимента в опыте с хлореллой наблюдается тенденция увеличения всхожести семян. В момент снятия опыта количество проростков в варианте опыта, который поливали суспензией водорослей, составило 75%, а в контрольном всего 54%. Это говорит о стимулирующем действии С. vulgaris на прорастание семян. Следует отметить, что все морфометрические показатели значительно превышали контрольные значения. Это особенно заметно по длине корня и стебля. В контроле длина стебля составила 14,67 мм.±0,19, а для суспензии хлореллы 17,4 мм±0,2. В опытном варианте длина корней превышала контрольной в 1,4 раза. Внесение гетероауксина совместно с суспензией С. vulgaris не оказало существенного влияния на растения люцерны посевной. Энергия прорастания семян в опытном варианте мало отличалась от контрольного. На шестой день после снятия опыта в контроле количество проросших семян составило 54%, а в пробе с внесением гетероауксина совместно с С. vulgaris 58% семян. Растения были слабее и разреженнее, чем в опытах с внесением гетроаук- сина и С. vulgaris по отдельности. Гетероауксин + С. vulgaris также оказывает незначительное влияние на все морфометрические показатели. Рассчитанные нами данные, среднее квадратическое отклонение и коэффициент вариации были статистически достоверными (по критерию Фишера). Для определения стимулирующей дозы гетероауксина были поставлены опыты на среде Громова и гетероауксина в следующих концентрациях 20 мг/л, 10 мг/л, 5 мг/л, 2 мг/л, 1 мг/л, 0,5 мг/л. Начальное число клеток в 1 мл суспензии составило 800 тыс. Повторность опыта трехкратная. В результате были получены следующие данные: при выращивании Сhlorella vulgaris с добавлением гетероауксина наблюдается положительное влияние на численность и накопление биомассы водорослей. Было установлено, что интенсивное размножение клеток отмечено при концентрации гетероауксина 5 мг/л. Число клеток превысило контроль в 2 раза. Выводы: все опыты, за исключением вариантов гетероауксин + Сhlorella vulgaris и Klebsormidium flaccidum var. nitens, показали статистически достоверное влияние на энергию прорастания и морфометрические показатели растений люцерны. ЛИТЕРАТУРА 1. 2. 3. Штина Э.А., Юнг Л.А. Пути и методы использования водорослей для повышения плодородия неорошаемых почв // Методы изучения и практического использования почвенных водорослей. – Киров, 1972. – с. 19-28. Дубовик И.Е., Шарипова М.Ю. Влияние внесения культур водорослей и активного ила на всхожесть и рост злаков // Тез. докл. научн. конф. по прогр. «Университеты Росии» - Уфа: БашГУ, 1995.- С. 76-77. Сайфуллина З.Н., Кузяхметов Г.Г. Влияние почвенных водорослей на рост проростков многолетних трав // Тез.докл. 2-й респ.научн.-практ. конф. молодых ученых-микробиол. (Ташкент, 20-22 сен. 1978).- Ташкент: Фан, 1978. – С. 203. Поступила в редакцию 06.12.05 г.