011278 Термин "синдром "паркинсонизм-плюс" охватывает некоторые идиопатические заболевания, которые ассоциированы с возникновением паркинсоноподобных симптомов, но которые можно дифференцировать от болезни Паркинсона диагностическими и клиническими/патофизиологическими методами. Заболевания, классифицируемые как синдром "паркинсонизм-плюс" (PPS), включают множественные системные атрофии (MSA), прогрессирующий супрануклеарный паралич (PSP), кортикобазальную ганглионарную дегенерацию (CBGD) и деменцию с тельцами Леви (DLB). К множественным системным атрофиям относятся в частности синдром Шая-Дрейджера, оливомостомозжечковая атрофия (OPCA) и дегенерация полосатого тела (SND) (Mark et al, Neurol Clin. 2001, 19(3): 607). Отнесение болезни Пика, гемипаркинсонизма и паркинсонизма у пациентов с болезнью Альцгеймера и ALS (боковым амиотрофическим склерозом), а также варианта Вестфаля хореи Гентингтона к PPS в специальной литературе не является однозначным, но для целей настоящей патентной заявки эти заболевания следует рассматривать как отнесенные к термину PPS в соответствии с классификацией, используемой Hobson et al (Hobson et al, Can J Neurol Sci. 2003 Mar; 30 Suppl 1: р 2). Общим для заболеваний, отнесенных к синдрому "паркинсонизм-плюс", является отсутствие или быстрое уменьшение отклика на L-допа или агонистов дофамина, а также дополнительные симптомы, такие как мозжечковые или пирамидальные симптомы, ранняя или тяжелая деменция в сочетании с расстройствами речи и глотания на ранней фазе (Mark 2001, выше; Gerlach et al, Die Parkinson-Krankheit, Springer, Vienna New York, 2003). В табл. 1 представлен обзор дифференциально-диагностических критериев для некоторых синдромов "паркинсонизма-плюс" и болезни Паркинсона (также известной как идиопатический синдром Паркинсона, IPS). Таблица 1. Обзор классификации некоторых симптомов паркинсоноподобных расстройств движения и дифференциально-диагностических критериев (Модифицировано согласно Mark MH, Lumping and splitting the Parkinson plus syndromes: dementia with Lewy bodies, multiple system atrophy, progressive supranuclear palsy, and corticalbasal ganglionic degeneration. Neurol Clin. 2001 Aug; 19(3): 607-27 и Gerlach M, Reichmann H, Riederer P, Die ParkinsonKrankheit, Springer Vienna New York, 2003). Компьютерная томография является важным критерием при дифференциации IPS и PPS. Пациенты с IPS демонстрируют нормальные уровни дофаминовых рецепторов в SPECT (однофотонной эмиссионной компьютерной томографии) до поздних стадий, тогда как пациенты с PPS демонстрируют раннюю -1- 011278 потерю пре- и постсинаптических дофаминергических нейронов, что ассоциируется с идентифицируемым снижением плотности дофаминовых рецепторов. Анализы PET (позитронная эмиссионная томография) подтверждают пониженное содержание L-допа и пониженный метаболизм L-допа у пациентов с IPS (Gerlach et al., 2003, выше). Вследствие часто отсутствующей или слабой реакции на L-допа, лечение PPS лекарственными средствами затруднено и обычно состоит в симптоматической терапии конкретных отдельных симптомов, например лечении гипотензии. Агонисты дофаминовых рецепторов обычно неэффективны для лечения PPS (Mark, 2001, выше). В исключительных случаях сообщалось об определенном терапевтическом успехе с отдельными агонистами дофамина, хотя эти эффекты, по-видимому, являются специфичными к веществу. Например, в Wenning et al (Lancet, 2004, 3, 93) сообщалось об успешном терапевтическом применении бромокриптина в клиническом испытании с шестью пациентами, в то время как контролируемое клиническое испытание с лизуридом выявило отсутствие эффективности. Поскольку известно, что большинство агонистов дофамина действует не на один-единственный дофаминовый рецептор, а имеет сложный рецепторный профиль (Newman-Tancredi, J Pharmacol Exp Ther 2002, 303, 805), причиной эффективности бромокриптина могли быть особые характеристики рецепторного профиля или другие, не дополнительно охарактеризованные, специфичные к веществу свойства. Синдром "паркинсонизм-плюс" обычно связан с дофаминергической нейродегенерацией в черном веществе (Mark, 2001, выше). Следовательно, можно ожидать успешного терапевтического лечения при применении эффективных нейропротекторов, которые ингибируют прогрессирующую деградацию дофаминергических нейронов (Dawson and Dawson VL, Nat Neurosci. 2002 Nov; 5 Suppl: 1058). Ротиготин [(-)-5,6,7,8-тетрагидро-6-[пропил[2-(2-тиенил)этил]амино]-1-нафтол] известен из предшествующего уровня техники как агонист дофамина и симптоматическое терапевтическое средство при болезни Паркинсона. В WO 02/089777 описано, например, трансдермальное введение ротиготина пациентам с болезнью Паркинсона и связанное с ним улучшение оценок по UPDRS (Unified Parkinson's Disease Rating Scale, объединенная шкала оценки болезни Паркинсона), что также было описано другими авторами (Metman et al, Clin Neuropharmacol. 2001, 24(3):163; Mucke HA, Rotigotine Schwarz Pharma. IDrugs. 2003 Sep; 6(9):894: The Parkinson Study Group, Arch Neurol. 2003 60(121:1721). Шкала UPDRS является важным инструментом для диагностики или лечения пациентов с болезнью Паркинсона (Fahn S, Elton RL, Members of the UPDRS Development Committee (1987) Unified Parkinson's Disease Rating Scale. In: Fahn, S, CD Marsden, DB Calne, M Goldstein (eds) Recent Developments in Parkinson's Disease. Vol II. Macmillan Healthcare Information, Florham Park (NJ), pp 153-163, 293-304). Однако оценка по UPDRS определяет только влияние активного вещества на симптомы болезни Паркинсона. Она не обеспечивает какой-либо информации о том, влияет ли активное вещество на деструкцию дофаминергических клеток, лежащую в основе данных симптомов. Однако процессы апоптоза играют важную роль в патогенезе синдрома "паркинсонизм-плюс", в частности в разрушении дофаминергических нейронов (Lev et al, Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 2003; 27(2): 245; Michel et al, Rev Neurol (Paris). 2002; 158 Spec no 1: p 24). Кроме того, считается, что различные другие нейродегенеративные процессы оказывают решающее влияние на развитие паркинсонизма и синдрома "паркинсонизм-плюс" (Hirsch et al, Ann N Y Acad Sci. 2003; 991: 214). Следовательно, существует потребность в нейропротективных веществах, которые способны останавливать или даже реверсировать разрушение дофаминергических клеток (Vila et al, Nat Rev Neurosci. 2003; 4(5): 365). Здесь предполагается, что MPTP(1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин)-модель является прогнозирующей в отношении необходимых нейропротективных свойств (Dawson, 2002, выше; Eberhardt O, Schulz JB, Toxicol Lett. 2003, 139(2-3): 135). Экспериментальные исследования теперь неожиданно выявили, что ротиготин, который вплоть до настоящего момента использовали только для симптоматической терапии идиопатической болезни Паркинсона, обладает нейропротективными свойствами. Ротиготин неожиданно демонстрирует желательный фармакологический профиль как в острой, так и подострой МРТР-модели (табл. 2, фиг. 1 и 2). Результаты исследования позволяют предположить, что ротиготин предотвращает процессы апоптоза. Например, ротиготин демонстрирует нейропротективное действие в мышиной модели болезни Паркинсона: после интенсивного введения MPTP, вызывающего симптомы Паркинсона у людей и обезьян, с одной стороны измеряли число дегенерирующих нейронов в острой фазе и с другой стороны устанавливали функциональную целостность стриатума в подострой фазе путем определения плотности транспортера дофамина в концевых нервных окончаниях. В обоих случаях можно было продемонстрировать, что ротиготин обладал нейропротективным действием: с одной стороны после введения ротиготина уменьшалось число дегенерирующих нейронов в среднем мозге (табл. 2), и с другой стороны дофаминергическая иннервация стриатума фактически полностью сохранялась или восстанавливалась (фиг. 1 и 2). -2- 011278 Таблица 2. Количество интенсивно дегенерирующих нейронов в мышиной модели MPTP, показанное путем окрашивания FluoroJade с лечением или без лечения посредством одиночного введения ротиготина Нейропротективное действие ротиготина также исследовали в пилотном исследовании на обезьянах. В использованной модели, отражающей прогрессирующий ход разрушения дофаминергических клеток у приматов, обезьянам (макакам) инъецировали подпороговые токсические дозы MPTP в течение нескольких дней. Симптомы паркинсонизма развивались у модели в течение периода времени приблизительно 2 недели. Как только достигался конкретный уровень повреждений, давали ежесуточные инъекции ротиготина в препарате, приводящие к постоянному уровню в плазме в течение 24 ч. Инъекции MPTP прекращали, как только моторная активность в контролях снижалась в определенной степени (приблизительно через 5 суток). Поведение животных оценивали каждый день. Через шесть недель после начала применения MPTP прекращали инъекции ротиготина и наблюдали за животными в течение дальнейших двух недель без обработки. Было замечено, что моторная активность животных значительно улучшилась при обработке, а также на следующей фазе вымывания. В конце применения ротиготина или в конце фазы вымывания, в каждом случае умерщвляли одну группу животных и гистологически и биохимически исследовали состояние базальных ганглиев. Плотность нервных окончаний в стриатуме была значительно выше, чем у необработанных животных. Содержание препроэнкефалина, индикатора неповрежденных перекрестных связей в "непрямом пути" базальных ганглиев, указывало на тенденцию к нормализации после обработки и после фазы вымывания. Результаты показывают, что нейропротективный потенциал ротиготина также можно продемонстрировать на приматной модели разрушения дофаминергических клеток. Следовательно, можно предположить, что у человека также имеет место антиапоптическое, нейропротективное действие. Следовательно, ротиготин обеспечивает активное вещество, которое идеально подходит для получения медицинского препарата для лечения и/или предупреждения потери дофаминергических нейронов у пациентов с синдромом "паркинсонизм-плюс", так как в дополнение к его нейропротективному действию, дофаминергическое действие ротиготина также может быть полезным. По сравнению с предыдущим применением ротиготина, которое было ограничено чисто симптоматическим дофаминергическим лечением пациентов с болезнью Паркинсона, лечение пациентов с синдромом "паркинсонизм-плюс", следовательно, раскрыто как новая область применения и, уточним, также для пациентов, которые не реагируют или неадекватно реагируют на лечение L-допа или агонистами дофамина без нейропротективного действия. Следовательно, одним объектом изобретения является применение ротиготина, его солей и пролекарств в качестве лекарств для предупреждения и/или лечения синдрома "паркинсонизм-плюс", при этом термин синдром "паркинсонизм-плюс" включает следующие заболевания: множественные системные атрофии, прогрессирующий супрануклеарный паралич, кортикобазальную дегенерацию, деменцию с тельцами Леви, болезнь Пика, гемипаркинсонизм, паркинсонизм у пациентов с болезнью Альцгеймера и ALS и варианта Вестфаля хореи Гентингтона. Заболевания, которые следует лечить ротиготином, таким образом, предпочтительно выбраны из следующей группы: множественные системные атрофии, прогрессирующий супрануклеарный паралич, кортикобазальная дегенерация и диффузная деменция с тельцами Леви. Другим объектом данного изобретения является способ лечения пациента с синдромом "паркинсонизм-плюс" путем введения терапевтически достаточного количества ротиготина, его солей и/или пролекарств, или путем введения лекарства, содержащего ротиготин или одну(но) из его солей и/или проле-3- 011278 карств. Для целей настоящей патентной заявки следует понимать, что термин "пролекарства" ротиготина в частности означает соединения, которые расщепляются, превращаются или метаболизируются в организме человека, в частности в плазме, или при прохождении через кожу или слизистую оболочку, в терапевтически эффективном количестве с образованием ротиготина. Ротиготин имеет следующую формулу: Следовательно, релевантными пролекарствами ротиготина в частности являются производные фенольной гидроксигруппы, в частности сложные эфиры, например арилкарбонильные эфиры, алкилкарбонильные эфиры или циклоалкилкарбонильные эфиры, в частности алкилкарбонильные эфиры и циклоалкилкарбонильные эфиры, каждый с числом атомов углерода вплоть до 6, карбонаты, карбаматы, ацетали, кетали, ацилоксиалкиловые эфиры, фосфаты, фосфонаты, сульфаты, сульфонаты, тиокарбонильные сложные эфиры, окситиокарбонильные сложные эфиры, тиокарбаматы, простые эфиры и силилэфиры. Термин "алкилкарбонильные эфиры" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с -С(O)алкильной группой. Алкилкарбонильный эфир формально образуется в результате этерификации фенольной гидроксигруппы с алкановой кислотой, например уксусной кислотой, пропионовой кислотой, масляной кислотой, изомасляной кислотой или валериановой кислотой. Термин "циклоалкилкарбонильные эфиры" включает соединения, в которых в каждом случае атом кислорода ротиготина связан с -C(O)циклоалкильной группой. Термин "арилкарбонильные эфиры" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с -С(O)арильной группой. Термин "карбонаты" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с -C(O)-O-R группой. Термин "карбаматы" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -C(O)-NRR1, -C(O)-NH-R1 или -C(O)-NH2. Термин "ацетали" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -CH(OR)R1. Термин "кетали" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -C(OR)R1R2. Термин "ацилоксиалкиловые эфиры" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -CHR-O-C(O)-R1 или-CH2-O-C(O)-R1. Термин "фосфаты" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -P(O2H)OR. Термин "фосфонаты" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -P(O2H)R. Термин "сульфаты" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -S(O2)OR. Термин "сульфонаты" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -S(O2)R. Термин "тиокарбонильные эфиры" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -C(=S)-R. Термин "окситиокарбонильные эфиры" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -C(=S)-O-R. Термин "тиокарбаматы" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -C(=S)-N-RR1, -C(=S)-NH-R1 или -C(=S)-NH2. Термин "простые эфиры" включает соединения, в которых атом кислорода ротиготина в каждом случае связан с группой -R. В приведенных выше определениях пролекарств каждый из R, R1, R2 независимо выбран из атома водорода, алкила, циклоалкила или арила, и предпочтительно из группы С1-6алкил, С3-10циклоалкил и фенил. "Алкил" может представлять собой разветвленную или неразветвленную алкильную группу, которая предпочтительно имеет от 1 до 10 атомов С, особенно предпочтительно от 1 до 6 атомов С. Алкильные группы также могут быть замещены одним или более заместителями, например галогеном. -4- 011278 "Циклоалкил" представляет собой алкильную группу, которая может состоять только из образующих кольцо атомов С, или возможно может нести дополнительные атомы С, образующие разветвление. Предпочтительные длины цепей составляют 3-10, особенно предпочтительно 4-8 или 4-6 атомов С. "Арил" предпочтительно представляет собой фенил. Фенил возможно может быть замещен по одному или более положениям, например алкокси, алкилом, галогеном или нитро. Получение посредством реакции ротиготина с соответствующими реакционноспособными предшественниками, такими как хлорангидриды, ангидриды кислот, карбамилхлориды, сульфонилхлориды и др. известно специалисту в области клинической химии и может быть найдено в подходящей специальной литературе. Примеры в литературе включают: Bundgaard: Design of Prodrugs, Elsevier, Amsterdam, 1985; Higuchi and Stella: Pro-drugs as novel drug delivery systems in American Chemical Society, Washington DC, 1975; Sloan: Prodrugs - Topical and Ocular Drug Delivery, Ed: M. Dekker, 1992; Roche: Design of biopharmaceutical properties through prodrugs and analogs, Washington, DC, 1977. Различные пролекарства рацемата ротиготина (N-0437) и соответствующие инструкции по изготовлению и способы исследования описаны, например, в Den Haas et al. Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol 1990, 342, 655; Den Haas et al. Naunyn-Schmiedeberg's Arch Pharmacol 1990, 341. 186 и Den Haas et al. J. Pharm Pharmacol 1991, 43. 11. Базисную пригодность производного ротиготина в качестве пролекарства можно определить путем инкубации соединения в определенных условиях с ферментативным коктейлем, гомогенатом клеток или фракцией клеток, содержащей фермент, и демонстрации того, что ротиготин может образоваться в достаточном количестве. Подходящей смесью ферментов является, например, смесь, содержащаяся в препарате печени S9, произведенная компанией Firma Gentest, Woburn, Ma, USA (воплощение 5). В качестве альтернативы можно провести инкубацию со свежей кровью, или плазмой, или даже с гомогенатом гиподермы для того, чтобы продемонстрировать независимую от печени метаболизацию пролекарства с образованием активного компонента. Трансдермальное нанесение требует проверки in vitro проникания на вырезанной коже. Окончательное доказательство пригодности и потенциальной эффективности в медицинских моделях осуществляют путем определения ротиготина, образующегося из пролекарства в плазме: in vivo пролекарство должно высвобождать достаточно ротиготина для достижения терапевтически эффективной устойчивой концентрации ротиготина в плазме, как уже известно из клинических и доклинических исследований. В этом отношении, эффективными концентрациями обычно являются концентрации ротиготина от 0,01 до 50 нг/мл, предпочтительно от 0,05 до 20 нг/мл и особенно предпочтительно от 0,1 до 10 нг/мл плазмы. Ротиготин представляет собой (S)-энантиомер 5,6,7,8-тетрагидро-6-[пропил[2-(2тиенил)этил]амино]-1-нафтола. Это означает, что согласно изобретению содержание (R)-энантиомеров в лекарстве является низким. (R)-Энантиомер предпочтительно присутствует с содержанием <10 мол.%, особенно предпочтительно с содержанием <2 мол.% и наиболее предпочтительно с молярным содержанием <1%, рассчитанного на основании общего количества ротиготина в этом лекарстве. Ротиготин и его пролекарство могут присутствовать в лекарстве в виде свободных оснований или в форме физиологически приемлемых солей, например в форме гидрохлорида. "Физиологически приемлемые соли" включают нетоксичные соли присоединения ротиготина с органическими или неорганическими кислотами, например с HCl. Существуют различные способы применения, подходящие для введения ротиготина и его пролекарств, которые специалист в данной области может выбрать и приспособить в соответствии с необходимостью, состоянием и возрастом пациента, требующейся дозой и желательным периодом времени применения. Предпочтительным способом введения ротиготина является трансдермальное введение. Фармацевтическую форму можно в принципе выбрать из, например, мази, пасты, спрея, пленки, пластыря или электрофоретического устройства. Предпочтительно в этом отношении ротиготин наносят на кожу пациента в виде пластыря, в силу чего активное вещество предпочтительно присутствует в матрице адгезивного полимера, например самоклеющегося адгезивного полисилоксана. Примеры подходящих трансдермальных препаратов можно найти в WO 99/49852, WO 02/89777, WO 02/89778, WO 04/58247, WO 04/12730, WO 04/12721 или WO 04/50083. Фармацевтическая форма этого рода делает возможным создание в значительной степени постоянного уровня в плазме и, следовательно, постоянной дофаминергической стимуляции на протяжении всего периодом времени применения (WO 02/89778; Metman, Clinical Neuropharmacol 24, 2001, 163). Если, с другой стороны, желательным является медицинский продукт в форме подкожного или внутримышечного депо, ротиготин можно, например, суспендировать в виде кристалла соли, например как кристаллический гидрохлорид, в гидрофобной, безводной среде и инъецировать, как описано в WO 02/15903, или же вводить в форме микрокапсул, микрочастиц или имплантатов на основе биоразлагаемых полимеров так, как описано, например, в WO 02/38646. Другими возможными формами введения ротиготина и его пролекарства являются трансмукозаль-5- 011278 ные препараты, например сублингвальные или назальные спреи, ректальные препараты или аэрозоли для легочного введения. Подходящие дозы ротиготина составляют от 0,05 и до приблизительно 50 мг/сутки, в соответствии с чем вводят предпочтительные суточные дозы от 0,1 до 40 мг и особенно от 0,2 до 20 мг/сутки. В этом отношении, дозу можно постепенно увеличивать, что означает, что лечение возможно можно начинать с низких доз, которые затем увеличивают до поддерживающей дозы. Для специалиста в данной области очевидно, что интервал дозировок можно варьировать в соответствии с применяемым количеством, способом применения и суточной потребностью пациента. Например, возможным является препарат для трансдермального применения, например для введения один раз в сутки, за трое суток или за семь суток, в то время как подкожное или внутримышечное депо может допускать, например, инъекции в одно-, двух- или четырехнедельном цикле. В нейропротективной фармацевтической форме в дополнение к ротиготину могут присутствовать другие активные вещества, которые предотвращают прогрессирующую потерю дофаминергических клеток. Примеры включают вещества с антиапоптозным действием (миноциклины, FK-506, циклоспорин A, zVAD) и нейротрофины, такие как, например, нейротрофный фактор глиальных клеток (GDNF). В комбинированном препарате высвобождение активных веществ, используемых в каждом случае, может происходить в значительной степени одновременно или даже последовательно. Последовательного введения можно, например, добиться при помощи фармацевтической формы, например пероральной таблетки, имеющей два различных слоя с разными профилями высвобождения для разных фармацевтически активных компонентов. Комбинированный препарат согласно изобретению, включающий препарат ротиготина, в качестве альтернативы, также может принимать вид "набора частей", в котором антиапоптозные активные вещества, которые нужно вводить, присутствуют в отдельных друг от друга препаратах, которые затем вводят одновременно или градуировано во времени. Для специалиста в данной области очевидно, что в контексте настоящего изобретения возможными являются различные фармацевтические формы и схемы применения, все из которых являются объектами данного изобретения. Воплощения 1-е воплощение: пластыри с ротиготином 1,8 г ротиготина (свободное основание) растворяли в 2,4 г этанола и добавляли к 0,4 г Kollidon 90F (растворенного в 1 г этанола). Эту смесь добавляли к 74%-ному раствору силиконовых полимеров (8,9 г BioPSA 7-4201 + 8,9 г BIO-PSA 7-4301 [Dow Corning]) в гептане. После добавления 2,65 г петролейного эфира, смесь перемешивали в течение 1 ч при 700 об./мин с получением гомогенной дисперсии. После наслаивания на полиэфир его высушивали при 50°C. Конечная масса пластыря составляла 50 г/см2. 2-е воплощение: суспензии для депо ротиготина (а) 1411,2 г Miglyol 812 взвешивали в колбе Дюрана. Добавляли к Miglyol 14,4 г Imwitor 312 и нагревали в течение 30 мин до 80°C при перемешивании. Прозрачный раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. (б) 1188 г раствора, полученного на стадии (а), переносили в стеклянный лабораторный реактор, добавляли 12 г ротиготина HCI и гомогенизировали в течение 10 мин при помощи Ultraturrax при 10000 об./мин в атмосфере азота. Суспензией заполняли коричневые стеклянные бутыли при помощи работающего Ultraturrax (2000 об./мин). 3-е воплощение: подострая МРТР-модель Чтобы вызвать интоксикацию, мышам вводили 80 мг/кг нейротоксина 1-метил-4-фенил-1,2,3,6тетрагидропиридина (MPTP) (частями по 20 мг/кг с двухчасовыми интервалами, группы 3-6 на фиг. 1 и 2), что приводило к дегенерации примерно 50-60% нейронов в черном веществе (максимальная дегенерация в группе 3 на фиг. 1 и 2). Ротиготин вводили ежесуточно дозами по 0,3, 1 или 3 мг/кг, соответственно, на протяжении 7 суток в виде так называемого "препарата с медленным высвобождением" (смотрите воплощение 2) (группы 4-6 на фиг. 1 и 2). Группе животных, обработанных MPTP (группа 3), давали раствор носителя ротиготина (воплощение 2 без ротиготина HCl), и она служила в качестве эталона. Контрольными были группы 1, 2 и 7, причем с группой 1 не производили никакой обработки, группу 2 обрабатывали растворами наполнителей для MPTP и ротиготина, и группе 7 давали исключительно ротиготин. Животных умерщвляли на 8-е сутки, их мозг удаляли и замораживали. Замороженные срезы инкубировали со 100 млн-1 [125I] РЕ21 ([125I]-(Е)-N(3-йодпроп-2-енил)-2β-карбоксиметил-3β-(4'метилфенил)нортропан) в фосфатном буфере, рН 7,4, для того чтобы маркировать количество дофаминовых транспортеров, все еще присутствующих в стриатуме, как индикатор количества функционирующих нервных окончаний. Ротиготин улучшает выживаемость нейронов и нервных окончаний в связи с дозой. Это является очевидным доказательством нейропротективных свойств данного вещества (фиг. 1 и 2). 4-е воплощение: острая МРТР-модель (включающая апоптоз) Чтобы вызвать интоксикацию, мышам вводили 80 мг/кг нейротоксина 1-метил-4-фенил-1,2,3,6тетрагидропиридина (MPTP) (частями по 20 мг/кг с двухчасовыми интервалами), что приводило к дегенерации примерно 50-60% нейронов в черном веществе. Приблизительно на 16 ч раньше добавляли ро-6- 011278 тиготин дозами 0,3, 1 или 3 мг/кг, соответственно, в виде так называемого "препарата медленного высвобождения" (воплощение 2). Задержки диффузии и поглощения означают, что ротиготин является оптимально доступным, когда добавляют MPTP. Животные, которым давали только раствор носителя (воплощение 2 без ротиготина HCl), служили в качестве контролей. Через 24 ч животных умерщвляли и мозг фиксировали. Для идентификации дегенерирующих клеток срезы мозга окрашивали FluoroJade. Для идентификации дофаминергических нейронов использовали иммуногистохимическое маркирование тирозингидроксилазы. Окрашивание тирозингидроксилазы не выявляло никаких различий между обработанными и необработанными животными; окрашивание FluoroJade выявило большое число дегенерирующих нейронов; однако нейроны не были полностью удалены (что объясняет отсутствие какого-либо различия в окрашивании на тирозингидроксилазу); это наводит на мысль, что разрушение клеток происходило посредством апоптоза и не было завершено на момент измерения (апоптические клетки не были полностью разрушены или фагоцитированы). Число дегенерирующих нейронов было приблизительно на 50% ниже после применения ротиготина, что является дополнительным подтверждением нейропротективных свойств данного вещества (табл. 2). 5-е воплощение: in vitro превращение пролекарства в активное вещество Микросомальную фракцию, содержащую важнейшие метаболические ферменты, получали из гомогенатов клеток печени человека, обезьян, собак, крыс и/или мышей путем дифференциального центрифугирования; альтернативно также возможно получение цитоплазматической фракции. Субклеточную фракцию суспендировали с буфером таким образом, что получали раствор с определенным содержанием белка. После добавления 1 мкмоль пролекарства, которое нужно было тестировать, его инкубировали при 37°С в течение 60 мин. Затем ротиготин количественно оценивали посредством ВЭЖХ/УФ или посредством ВЭЖХ/МС и соотносили с использованным количеством. Для более подробного анализа исследовали концентрационные или временные ряды. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ предупреждения и/или лечения синдрома "паркинсонизм-плюс", включающий введение пациенту ротиготина, его солей или производных его фенольной гидроксигруппы, где эти производные выбраны из простого эфира, сложного эфира, тиокарбонильного эфира, карбамата, тиокарбамата, карбоната, ацеталя, кеталя, ацилоксиалкилового эфира, окситиокарбонильного эфира, фосфата, фосфоната, сульфата, сульфоната или силильного эфира. 2. Способ по п.1, где синдром "паркинсонизм-плюс" выбран из следующей группы: множественные системные атрофии, прогрессирующий супрануклеарный паралич, кортикобазальная дегенерация и диффузная деменция с тельцами Леви. 3. Способ по одному из пп.1, 2, где синдром "паркинсонизм-плюс" характеризуется неспособностью реагировать на L-допа. 4. Способ по одному из пп.1-3, где указанное введение осуществляют парентерально, трансдермально или трансмукозально. 5. Способ по одному из пп.1-4, где ротиготин вводят в дозе 0,05-50 мг в сутки. 6. Способ по п.1, где производное представляет собой алкилкарбонильный эфир, содержащий вплоть до 6 атомов углерода. 7. Способ по одному из пп.1-6, где указанное введение осуществляют через кожу. 8. Способ по п.7, где фармацевтическая форма выбрана из мази, пасты, спрея, пленки, пластыря или электрофоретического устройства. 9. Способ по п.8, где фармацевтическая форма представляет собой пластырь. -7- 011278 Фиг. 1 - типичные примеры, показывающие нейропротективное действие ротиготина, измеренное на основе плотности дофаминового транспортера как индикатора плотности остающихся нервных окончаний в стриатуме Группа 1. Необработанная контрольная группа. Группа 2. Контрольная группа, обработанная раствором носителя ротиготина и MPTP (1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин). Группа 3. Обработка MPTP. Группа 4. Обработка MPTP плюс ротиготин 0,3 мг/кг. Группа 5. Обработка MPTP плюс ротиготин 1,0 мг/кг. Группа 6. Обработка MPTP плюс ротиготин 3,0 мг/кг. Группа 7. Обработка только ротиготином (3,0 мг/кг). Фиг. 2 - связывание транспортера дофамина (DAT) в дорсальной и вентральной части стриатума в разных группах. Количественная оценка плотности DAT такая же, как показано на фиг. 1 *: Значимое снижение связывания DAT по сравнению с группой 2 #: Значимая защита связывания DAT по сравнению с группой 3 Группа 1. Необработанная контрольная группа. Группа 2. Контрольная группа, обработанная раствором носителя ротиготина и MPTP. Группа 3. Обработка MPTP. Группа 4. Обработка MPTP плюс ротиготин 0,3 мг/кг. Группа 5. Обработка MPTP плюс ротиготин 1,0 мг/кг. Группа 6. Обработка MPTP плюс ротиготин 3,0 мг/кг. Группа 7. Обработка только ротиготином (3,0 мг/кг). Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2 -8-