МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ПОЧЕК ПРИ
advertisement
ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2010, ¹ 3 (73) УДК 611.611:616.613-007.63 В.Ф. Онопко1, О.А. Гольдберг2, С.А. Лепехова2, Т.Ю. Циприкова3 МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ПОЧЕК ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГИДРОНЕФРОЗЕ Иркутский государственный медицинский университет, Иркутск 2 Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии СО РАМН, Иркутск 3 МАНО, Ангарск 1 Для исследования закономерностей развития морфологических изменений паренхимы почек при гидронефрозе проведена серия экспериментов на 56 крысах-самцах породы Вистар. У всех животных моделировали острую обструкцию мочевых путей путем перевязки одного мочеточника в средней 1/3. Исследование морфологии почек проводили через 2–3 часа, 1 сутки, 3–5 суток, 1, 3, 6, 8 недель после моделирования процесса. Ключевые слова: морфология почек, острая обструкция мочевых путей, гидронефроз MORPHOLOGICAL STATE OF KIDNEYS WHEN EXPERIMENTAL HYDRONEPHROSIS V.F. Onopko1, O.A. Goldberg2, S.A. Lepekhova2, T.U. Tsiprikova3 1 Irkutsk State Medical University, Irkutsk 2Scientific center of reconstructive and restoration surgery CO RAMN, 3Irkutsk MANO, Angarsk A series of experiments was carried out with 56 rats, males of Vistar. The objective was examination of development regularities of morphological changes of kidneys parenchyma when hydronephrosis. All the animals were subjected to modelling of acute obstruction of urinary tracts by bandaging of one of ureters in middle 1/3. The examination of kidneys morphology were carried out every 2–3 hours, 24 hours, 3–5 days, 1, 3, 6, 8 weeks after modeling of the process. Key words: morphology of kidneys, acute obstruction of urinary tracts, hydronephrosis Среди заболеваний почек важное место занимают острые обструкции мочевых путей, включая гидронефроз (Лоран О.Б. и соавт., 2005; Гапанович В.М., и соавт.,1993). Эффективность лечения зависит от степени повреждения и запущенности процессов. Для оценки морфологических изменений при гидронефрозе часто используют экспериментальное моделирование применительно к запросам клиники гидронефроза [2, 4, 9]. Большинство исследований посвящено морфологическим изменениям, происходящим в паренхиме почек с констатацией дистрофически-атрофических и компенсаторно-приспособительных изменений в клубочках и канальцевой системе нефронов, а также наличие изменений нервного аппарата, белково-углеводных комплексов, ферментов и других веществ в расширенных экстрацеллюлярных, базальных и межклеточных пространствах и просвете канальцев [1, 5, 6, 10]. Однако, несмотря на достаточно большое число работ по проблеме морфологических изменений в почках при экспериментальном гидронефрозе остаются недостаточно раскрытыми вопросы, освещающие закономерности повреждения, компенсации и восстановления структуры почки в зависимости от сроков обструкции мочевых путей [3, 7, 8], что представляется важным с позиции оценки сроков для повышения эффективности хирургического лечения этой патологии. Цель нашего исследования – изучить закономерности развития морфологических изменений в почках при экспериментальном гидронефрозе в динамике обструкции мочевыводящих путей. МЕТОДЫ Работа выполнена на базе научного отдела экспериментальной хирургии с виварием Научного центра реконструктивной и восстановительной хирургии СО РАМН (директор – член-корр. РАМН, д.м.н., проф. Е.Г. Григорьев). Животных содержали в условиях вивария при свободном доступе к воде и пище соответственно нормативам ГОСТа «Содержание экспериментальных животных в питомниках НИИ» (виварий I категории, вет. удостоверение 238 № 0015220 от 25 марта 2009 г, служба ветеринарии Иркутской области). Опыты на животных выполнялись в соответствии с правилами гуманного обращения с животными, которые регламентированы «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных Приказом МЗ СССР № 742 от 13.11.84 г. «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и № 48 от 23.01.85 г. «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных», а также основывались на положениях Хельсинской Декларации Всемирной Медицинской Ассоциации от 1964 г., дополненной в 1975, 1983 и 1989 гг. Для исследования закономерностей развития морфологических изменений паренхимы почек при острой обструкции мочевых путей с развитием гидронефроза проведены исследования на 56 крысах-самцах породы Вистар, массой тела 250–300 г в возрасте не менее 6 месяцев. Все оперативные вмешательства проведены в стерильных условиях, под общим обезболиванием Экспериментальные исследования в биологии и медицине 249 ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2010, ¹ 3 (73) введением кетамина, дроперидола, атропина в мышцы скакательного комплекса. В качестве шовного материала использовался атравматический шовный материал викрил 4/0. У всех экспериментальных крыс моделировали острую обструкцию мочевых путей путем перевязки одного мочеточника средней его 1/3 (рис. 1). А Рис. 1. Крыса. Фрагмент операции двухсторонней перевязки мочеточников. Выведение животных из эксперимента осуществляли через 2–3 часа, 1 сутки, 3–5 суток, 1, 3, 6 и 8 недель после создания обструкции путем декапитации под хлороформным наркозом, по 7 животных. Для световой микроскопии материал фиксировали в 10% нейтральном растворе формалина. Исследовали депарафинированные срезы, окрашенные гематоксилином и эозином, гематоксилином и пикрофуксином. Препараты исследовали в фотомикроскопе 111 (К. Цейсс, Германия). Б Рис. 2. Крыса, левосторонняя перевязка мочеточника, экспозиция 2–3 ч: А – левая почка, Б – правая почка. Окраска гематоксилин-эозином ув. × 40. При гистологическом исследовании тканей почек выявлено расширение просвета собирательных трубочек всех отделов почки, толщина коры увеличивалась до М = 1.71 S = 0.05 (в контроле М = 1.62 S = 0.06) (рис. 3). ОПЕРАТИВНЫЕ ВМЕШАТЕЛЬСТВА После выполнения срединной лапаротомии в операционную рану выводили одну почку с мочеточником. После визуального осмотра, убедившись, что внешне почки и мочеточники не изменены, проводили одностороннюю перевязку мочеточников на уровне средней их 1/3, вызывая тем самым острую одностороннюю обструкцию мочевых путей. После контроля гемостаза послеоперационная рана ушивалась послойно наглухо. А РЕЗУЛЬТАТЫ При гистологическом исследовании тканей почек животных с односторонней обструкцией мочевых путей через 2–3 часа выявлено расширение лоханки, собирательных трубочек, канальцевой системы нефронов, а также смещение структур пирамидок (собирательных трубочек) в корковый отдел паренхимы почки. Отметим, что в контралатеральной здоровой правой почке в указанные сроки происходило расширение просвета чашечнолоханочной системы (рис. 2). 250 Б Рис. 3. Крыса, 3 часа эксперимента: А – расширение просвета собирательных трубочек пирамидок. Б – расширение просвета отдельных собирательных трубочек коры почки. Окраска гематоксилин-эозином ув. × 80 (А); × 140 (Б). Экспериментальные исследования в биологии и медицине ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2010, ¹ 3 (73) При гистологическом исследовании тканей почек животных с односторонней перевязкой мочеточника через сутки выявлено расширение собирательных трубочек, канальцев отдельных нефронов (рис. 4). Рис. 4. Крыса, 1 сутки эксперимента. Расширение просвета всех собирательных трубочек всех отделов почки. Окраска гематоксилин-эозином ув. × 140. Но уже через 5 дней эксперимента нааступало начало процесса нефросклероза и атрофии паренхимы почек (рис. 5). Рис. 5. Крыса, 5-е сутки эксперимента. Начало процесса нефросклероза и атрофии паренхимы почек. Окраска гематоксилином и пикрофуксином ув. × 140. Рис. 6. Крыса. 2 недели эксперимента. Развитие нефросклероза и межуточного нефрита в полюсах почек, атрофия части нефронов, часть нефронов сохранена. Расширены просветы собирательных трубочек. Окраска гематоксилин-эозином ув. × 80. Через 2–3 недели эксперимента – начало развития нефросклероза и межуточного нефрита в полюсах почек с прогрессированием и распространением на остальные отделы, атрофия части нефронов, часть нефронов – сохранена. Расширены просветы собирательных трубочек во всех отделах нефронов (рис. 6). В почках к 8 неделе исследования при некотором различии выявлена однотипность морфологических картин; прогрессируют процессы атрофии: а) уменьшаются размеры пирамидок до почти полного их исчезновения, собирательные трубочки пирамидок смещаются в мозговой отдел почки; б) в области коры развивается межуточный склероз с лимфоцитарными инфильтратами; в) уплотняется расположение клубочков, часть клубочков и нефронов подвергается атрофии, уменьшаются размеры клубочков; г) сохраняется часть канальцев нефронов со спавшимися просветами; д) сохраняются расширенными просветы собирательных трубочек и часть канальцев нефронов (рис. 7). Рис. 7. Крыса. 8 недель эксперимента. Развитие нефросклероза и межуточного нефрита. Расширены просветы собирательных трубочек и части нефронов. Окраска гематоксилин-эозином ув. × 140. Отметим, что к 8-ой неделе исследования уменьшается толщина коры до одного ряда клубочков почек, при этом толщина коры значительно варьирует М = 1.09 мм ��������������������������� S�������������������������� = 0.61 (в контралатеральной почке М = 1.86 мм S = 0.1). Рис. 8. Крыса. 8 недель эксперимента. Развитие нефросклероза с уменьшением толщины коры до одного ряда клубочков. Окраска гематоксилин-эозином ув. × 140. Экспериментальные исследования в биологии и медицине 251 ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2010, ¹ 3 (73) Таблица 1 Изменения структур почки крысы при развитии экспериментального гидронефроза во временном интервале от 2–3 часов до 8 недель ЗАКЛЮЧЕНИЕ В эксперименте на белых крысах при односторонней острой обструкции мочеточника нами были выделены следующие морфологические изменения в почках (табл. 1). Таким образом, как показал эксперимент на крысах, односторонняя обструкция мочевых путей приводит к морфологическим изменениям почечной паренхимы вначале компенсаторным и обратимым (расширение собирательных трубочек канальцев нефронов), а в дальнейшем необратимым с потерей компенсаторных возможностей (нарастание процессов склероза и фиброза). Полученные результаты при проведении параллелей с клиникой позволяют рекомендовать выполнение восстановления пассажа мочи в как можно более ранние сроки. ЛИТЕРАТУРА 1. Алиев М.Б. К вопросу об ультраструктурных изменениях нервных образований почки при ее гидронефрозе / М.Б. Алиев, Г.Д. Гусейнова // Азербайджанский медицинский журнал. – 1980. – № 1. – С. 72–75. 2. Гапанович В.М. Некоторые структурные и метаболические сдвиги в почке в процессе ее гидронефроточеской трансформации / В.М. Гапанович, В.С. Макаренко, И.А. Чиркина // Актуальные вопросы патологической физиологии: сб. трудов. – Каунас, 1976. – С. 34. 3. Леонова Л.В. Патологическая анатомия врожденных обструктивных уропатий у детей / Л.В. Леонова // Автореф. дис. … докт. мед. наук. – М., 2009. –54 с. 4. Любомудров А.П. Ангиоархитектоника почки при экспериментальном и патологическом гидронефрозе / А.П. Любомудров, В.И. Панов, Э.Л. Фрайфельд // Сборник докладов посвященный 60-летию и 25летию научно-педагогической деятельности в Казахстане П.О. Исаева. – Алма-Ата, 1958. – С. 61–67. 5. Меерсон Ф.З. К вопросу о восстановлении функции почки после длительно существующего гидронефроза / Ф.З. Меерсон // Архив патологии. – 1956. – Т. 18, № 6. – С. 109–111. 6. Наточин Ю.В. Гистологические изменения активности ферментов клеточного дыхания в почке при экспериментальном гидронефрозе / Ю.В. Наточин // Архив патологии. – 1965. –№ 11. – С. 59–61. 7. Савчук И.Ю. К характеристике морфологических преобразования в лимфатических сосудах капсулы почки при одностороннем экспериментальном гидронефрозе / И.Ю. Савчук, А.Б. Фиськова // Тезисы 49 научной конференции анатомов, гистологов и эмбриологов. – Самарканд, 1989. – С. 92–94. 8. Харченко Н.М. Гидронефроз и его обратимость: Дис. канд. мед. наук / Н.М. Харченко. –Симферополь, 1970. – 15 с. 9. Харченко Н.М. Экспериментальные данные о морфогенезе гидронефроза / Н.М. Харченко // Материалы юбилейной научной сессии Крымского мед. института. – Симферополь, 1968. – С. 67–69. 10 . ������������������������������������������� Claesson G. Experimental obstructive hydronephrosis in newborn ratsXL A one-year follow-up study of renal function and morphology / G. Claesson // J. Urol. – 1989. – Vol. 142(6) – P. 1602–1607. Сведения об авторах Онопко Виктор Федорович, доцент кафедры общей хирургии с курсом урологии Иркутского государственного медицинского университета. Гольдберг Олег Аронович, заведующий лабораторией патоморфологии НЦРВХ СО РАМН. Лепехова Светлана Александровна, зав. отделом экспериментальной хирургии НЦРВХ СО РАМН. Циприкова Т.Ю., врач-уролог МАНО г. Ангарск. 252 Экспериментальные исследования в биологии и медицине
