Общеклинич_исслед 07-2015- с обложкойСкачать

СОДЕРЖАНИЕ
Раздел 1. ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ОБЗОР ОСНОВНЫХ НАПРАВЛЕНИЙ ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИХ
ИССЛЕДОВАНИЙ _______________________________________________ 2
ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ______________3
ДИАХИМ – Набор реагентов для исследования кала на гельминты по
Рабиновичу_____________________________________________________ 4
ДИАХИМ СК – Набор реагентов для обнаружения скрытой крови
в биологических материалах и контроля качества предстерилизационной обработки мед. изделий _________________________________ 19
ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-АЛЬЦИАНОВЫЙ _ _________________________ 20
ДИАХИМ-ЦИТОСТЕЙН-АМИЛОИД ________________________________ 21
Раздел 2. МИКРОБИОЛОГИЯ
ДИАХИМ – ДИФКВИК Набор для быстрого дифференцированного окрашивания биопрепаратов (кровь, эякулят, выпотные жидкости и др.) ____5
ДИАХИМ-Набор для окраски по Граму (с сафранином) _____________ 22
ДИАХИМ – УРИСТЕЙН Набор реагентов для суправитальной окраски
ДИАХИМ-Набор для окраски по Граму (с нейтральным красным) ___ 23
мочи __________________________________________________________ 6
ДИАХИМ – Набор реагентов для клинического анализа мочи __________ 7
ДИАХИМ-Набор для окраски по Граму (с фуксином Циля) __________ 24
ДИАХИМ-Набор для окраски по Циль-Нильсену ___________________ 25
ДИАХИМ – Набор реагентов для клинического анализа мокроты______ 10
ДИАХИМ – Набор реагентов для клинического анализа спинномозговой
жидкости_ ____________________________________________________ 13
ДИАХИМ – Набор реагентов для клинического анализа кала__________ 16
ДИАХИМ – Набор реагентов для исследования кала по методу Като_ _ 18
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
1
Раздел 1. ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Клинические анализы несут огромную информацию для врача, помогают определить стадию заболевания и контролировать течение болезни. Основные общеклинические анализы включают:
•
•
•
•
•
•
Общий анализ крови
Анализ мочи
Анализ кала
Анализ эякулята
Исследование ликвора
Исследования мокроты
Общий анализ крови.
Общий (клинический) анализ крови - наиболее часто
проводимое исследование, которое как лакмусовая бумажка в первую очередь реагирует на изменения состояния организма.
Широко используется как один из самых важных методов диагностики при большинстве заболеваний, поскольку показывает изменения, происходящие в организме в целом. Особое значение для оценки состояния
здоровья больного имеют соотношение объема жидкой и
клеточной частей крови, количество эритроцитов, цветовой показатель, гематокрит, количество лейкоцитов, лейкоцитарная формула и лейкоцитарный индекс, уровень
тромбоцитов, СОЭ.
Анализ мочи.
Различные анализы мочи позволяют диагностировать
не только различные нарушения выделительной системы
организма, но и другие заболевания и состояния, например сахарный диабет, беременность. При общеклиническом анализе мочи оценивают ее физические свойства
(цвет, прозрачность, запах, реакцию, относительную
плотность), содержание некоторых веществ (белок, глюкоза, гемоглобин, желчные пигменты, ацетон, кетоновые
тела, уробилин), а также проводят микроскопическое исследование осадка, при котором могут быть выявлены
лейкоциты, эритроциты, клетки эпителия из различных
отделов мочевыделительной системы, различные цилиндры, кристаллы солей, бактерии и прочие ингредиенты.
Исследование кала.
Копрограмма – совокупное описание физического,
химического и микроскопического исследования кала.
Макроскопические исследования: консистенция, форма,
цвет, запах, рН, наличие слизи, крови, остатков непереваренной пищи. Химические исследования: реакция на
скрытую кровь, реакция на белок, реакция на стеркобилин, реакция на билирубин. Микроскопические исследования: мышечные волокна, соединительная ткань,
нейтральный жир, жирные кислоты, мыла, растительная
клетчатка, крахмал, кристаллы, слизь, эпителий, эритроциты, лейкоциты, детрит.
Гельминтологические методы исследований - методы
диагностики гельминтозов разделяют на прямые, основанные на непосредственном выявлении самих гельминтов или их фрагментов, а также личинок и яиц гельминтов
(методы исследования фекалий, мочи, желчи и дуоденального содержимого, мокроты, крови и тканей, материала, полученного при соскобе из перианальной области и
подногтевых пространств), и косвенные, с помощью которых выявляют вторичные изменения, возникающие в организме человека в результате жизнедеятельности гельминтов (исследования морфологического состава крови,
иммунологические методы диагностики гельминтозов,
рентгенологические исследования и т.д.). Из прямых методов наиболее распространены копрологические, которые делятся на макро- и микрогельминтоскопические. В
отдельных случаях используют специальные методы.
роки развития уретры. Исследование семенной жидкости
также является одним из тестов при диагностике гормональных расстройств, заболеваний половых органов или
пороков их развития.
Исследование ликвора.
Ликвор (спинномозговая жидкость) образуется в желудочках головного мозга путем пропотевания плазмы крови через стенки сосудов, а также секретируется клетками
сосудистых сплетений.
Исследование ликвора является золотым стандартом
диагностики заболеваний, сопровождающихся поражением центральной нервной системы. Увеличение количества клеток (плеоцитоз) возможно при менингите, арахноидите, энцефалите, рассеянном склерозе, эпилепсии,
абсцессе, опухолях мозга.
Исследование мокроты.
Метод диагностики заболеваний органов дыхания посредством изучения физических, химических и микроскопических данных мокроты. Основные показания к применению: различные заболевания органов дыхания (острые
и хронические бронхиты, пневмонии, туберкулез, онкологические заболевания и многие другие).
Анализ эякулята.
Неотъемлемая часть диагностики бесплодия. Причиной могут быть заболевания яичек, простаты, нарушения
проводимости семявыносящих путей, заболевания и по-
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
2
ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Гельминтологические методы исследований
Методы диагностики гельминтозов разделяют на прямые, основанные на непосредственном выявлении самих
гельминтов или их фрагментов, а также личинок и яиц
гельминтов (методы исследования фекалий, мочи, желчи
и дуоденального содержимого, мокроты, крови и тканей,
материала, полученного при соскобе из перианальной
области и подногтевых пространств), и косвенные, с помощью которых выявляют вторичные изменения, возникающие в организме человека в результате жизнедеятельности гельминтов (исследования морфологического
состава крови, иммунологические методы диагностики
гельминтозов, рентгенологические исследования и т.д.).
Макрогельмитоскопические методы исследования
направлены на поиски гельминтов или их фрагментов
(сколексов, члеников, частей стробилы цестод). Их применяют для диагностики тех гельминтозов, при которых
яйца не выделяются с экскрементами больного или выделяются в небольшом количестве.
Микрогельминтоскопические методы исследования
(качественные) направлены на выявление яиц и личинок
гельминтов.
Отбор проб и доставка кала для гельминтологических исследований:
1. Фекалии после дефекации отбирают из разных
участков в количестве не менее 50 г (объём примерно от
чайной до столовой ложки).
2. Помещают в чистую (прокипяченную), сухую, стеклянную или пластмассовую посуду с крышками.
3. Стерильная стеклянная (пластиковая) посуда требуется при заборе кала для исследования на амебиаз.
4. Кал должен быть доставлен в лабораторию и исследован в день дефекации, поэтому, как правило, доставляется утренний кал.
5. Для обнаружения яиц стронгилоидеса кал доставляется и исследуется не позднее 1 ч после дефекации.
6. Для обнаружения личинок стронгилоидеса, яиц анкилостомид и трихостронгилоид исследуется кал не позднее 4 ч после дефекации.
7. Для обнаружения вегетативных (подвижных) форм
дизентерийной амебы необходимо кал доставить и провести исследование не позднее 20 мин. после дефекации
или 40 мин., если это время кал сохранялся при температуре 4°С.
8. Для обнаружения вегетативных форм кишечных
простейших (лямблий, диэнтамебы и др.) в жидком и
полуоформленном «стуле» время от дефекации до исследования должно быть по возможности сокращено до
минимума (не более 1-1,5 ч).
При невозможности исследования кала сразу же после дефекации или в день поступления материала в лабораторию используются:
1. Физический способ хранения фекалий:
- при низкой температуре от 0 до 4°С не более суток.
2. Химические консерванты
1. Жидкость Барбагалло.
2. Раствор формалина 4%-ный.
3. Смесь 4%-ного раствора формалина с равным количеством глицерина.
4. Раствор уксусной кислоты от 3 до 10%.
Заливается кал одним из приготовленных консервантов в объёме 1:1 или 1 часть фекалий и 2 части раствора
консерванта, при этом тщательно перемешивается индивидуальной палочкой.
Хранить фекалии в растворах консервантов можно от
нескольких месяцев до года, при более длительном хранении возможно разрушение яиц гельминтов.
Для консервации мышц с личинками трихинелл используется концентрированный раствор хлористого натрия (на 100 мл воды 40-50 г NaCl).
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
3
ДИАХИМ - Набор для исследования кала на гельминты
(по Рабиновичу)
Набор реагентов для исследования по Рабиновичу
предназначен для выявления яиц гельминтов методом
исследования перианальных складок.
Принцип реакции:
Яйца гельминтов обнаруживают в перианальных соскобах, сделанных с помощью клеевого слоя.
Реагенты:
1. Клеевой состав (По Рабиновичу) - 1 фл. (50 мл).
2. Глазные лопатки - 50 шт.
Набор обеспечивает 50 исследований (при расходе
1 мл клеевого состава на 1 глазную лопатку).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
цилиндры мерные вместимостью 25-500 мл;
колбы вместимостью 500,1000 мл;
стаканчики химические;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
воронка;
глазные палочки;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые;
штатив для глазных палочек.
Методика:
Подготовка глазных палочек:
Подготовить стеклянные глазные палочки: промыть,
обезжирить и простерилизовать (кипячением или автоклавированием), высушить; сухую лопаточку глазной
палочки обмакнуть в клей; просушить не менее 2–4 ч.
(глазная палочка при этом должна находиться лопа-
точкой вверх для стекания избытка клея и образования
равномерной пленки). Клей, обтекая лопаточку, образует
прозрачную клейкую пленку, сохраняющуюся после высыхания не менее недели (что позволяет готовить палочки заранее). Установить глазные палочки в специальный
штатив, где каждая ячейка имеет свой номер, или использовать пронумерованные пенициллиновые флаконы, предварительно закрепив ручку глазной палочки в
резиновой пробке от этого пузырька.
Ход обнаружения:
1. Взять соскоб путем соприкосновения или «отпечатка» плоской частью лопаточки обеих сторон с кожей перианальных складок.
2. Снова укрепить палочку в штативе или пенициллиновых пузырьках (промаркированных соответственно
номеру, присвоенному обследуемому по списку, или регистрационному номеру в журнале) для доставки в лабораторию.
3. Укрепить глазную палочку в специальном держателе для просмотра под микроскопом.
4. Микроскопировать непосредственно плоскую поверхность лопаточки поочередно с обеих сторон при увеличении: окуляр х 7 или х 10, объектив х 8 или х 10.
5. Использованные палочки дезинфицировать кипячением в мыльном растворе, тщательно промыть, прополоскать, обезжирить, просушить в сухожаровом шкафу.
Штатив и кассеты обработать 70%-ным спиртом и промыть мыльно-содовым раствором.
6. Пенициллиновые пузырьки и резиновые пробки
дезинфицировать кипячением или автоклавированием.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации.
Хранение реагентов при t° от +18 до +25°С в темном
месте. Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Меры предосторожности.
Меры предосторожности – соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при
работе в лабораториях (отделениях, отделах ) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981г.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
4
ДИАХИМ – ДИФФКВИК
Набор для быстрого дифференцированного окрашивания биопрепаратов
(кровь, эякулят, выпотные жидкости и др.)
В состав набора входят красители (в растворе), предназначенные для быстрого дифференцированного окрашивания биопрепаратов (кровь, эякулят, выпотные жидкости и др.)
Состав:
•
•
•
•
Раствор №1 (фиксатор) — 100 мл
Раствор №2 («розовый») — 100 мл
Раствор №3 («синий») — 100 мл
Буферная смесь — 1 фл.
Оборудование, материалы, реактивы:
•
•
•
•
•
•
•
•
секундомер;
рН-метр;
вместимостью 25‑1000 мл;
стёкла предметные;
перчатки резиновые;
микроскоп;
цилиндры мерные;
бумага фильтровальная.
Приготовление буферного раствора:
Для приготовления буферного раствора с рН 6,8‑7,2
рекомендуется буферную смесь развести в 3 л дистиллированной воды.
Проведение определения:
1. Налить растворы в отдельные ёмкости.
2. Зафиксировать мазки в растворе №1 на 15 сек.
3. Удалить избыток раствора, поставив стекло вертикально на фильтровальную бумагу.
4. Окрасить препараты раствором №2 («розовым») в
течение 10 сек. Удалить избыток раствора со стекла фильтровальной бумагой.
5. Окрасить препараты раствором №3 («синим») в
течение 10 сек. Удалить избыток раствора со стекла фильтровальной бумагой.
6. Промыть стекла с препаратом в забуференной
воде, высушить и микроскопировать.
Для окраски таких препаратов, как отпечатки лимфоузлов, или выпотные жидкости, необходимо подбирать
соответствующий режим. Более частое погружение
препарата в раствор №2 («розовый»), чем в раствор
№3 («синий») повышает интенсивность окраски эозинофильных клеток. Изменяя процесс погружения, можно подобрать наиболее подходящую для Ваших целей
процедуру.
Один из возможных вариантов проведения процесса
погружения:
1. Раствор №1 (фиксатор) — 15 сек.
2. Раствор №2 («розовый») — 6 сек.
3. Раствор №3 («синий») — 10 сек.
ются хранение и прием пищи и курение в помещениях,
предназначенных для работы с красителем.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение красителя должно проводиться при температуре от +2 до +25°С в крытых вентилируемых помещениях вдали от кислот и щелочей, не допуская воздействия
прямых солнечных лучей, в течение всего срока годности
(1 год). Краситель стабилен после вскрытия флакона в
течение всего срока годности при условии достаточной
герметизации флакона.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению красителя.
Меры предосторожности:
В состав красителей входит метанол — яд, класс
опасности III, особенности действия на организм А, токсичен при ингаляции, контакте с кожными покровами и
особенно при проглатывании. Огнеопасен. Концентрация
паров метанола в производственных помещениях при
использовании и испытании красителя не должна превышать ПДК = 5 мг / м3. Работа с красителем должна проводиться в вытяжном шкафу при хорошо действующей
вентиляции, в перчатках, вдали от открытого огня.
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе с красителями следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как
образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное
время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или
любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Химическая посуда и оборудование, используемые
при работе с красителем, должны быть соответствующим
образом маркированы и храниться отдельно. Запреща-
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
5
ДИАХИМ – УРИСТЕЙН
Набор реагентов для суправитальной окраски при исследовании мочевого осадка
Специальная суправитальная (т. е. без предварительной фиксации) окраска осадка мочи. Красители предназначены для стандартного и более четкого определения
и идентификации клеток, особенно атипичных, и других
элементов осадка мочи, в частности «активных» лейкоцитов. Суправитальная окраска позволяет провести
дифференциацию клеток плоского и переходного эпителия, без особого труда отличить при четырехсоткратном
увеличении клетки почечного эпителия от лейкоцитов,
что достаточно трудно при исследовании этих элементов осадка в практически бесцветной моче. В нативных
препаратах очень сложно оценить степень цилиндрурии,
представленной бесцветными нежными гиалиновыми цилиндрами. Суправитальный краситель делает гиалиновые цилиндры хорошо различимыми, окрашивая их в голубой цвет. Различное восприятие окраски гиалиновыми
и восковидными цилиндрами позволяет легко отличать и
друг от друга.
Реагенты:
• Реактив №1 — 1фл.
• Реактив №2 — 1 фл.
Набор обеспечивает до 2000 исследований (при расходе на одно исследование (один препарат) — 0,05 мл).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25‑500 мл;
пробирки химические;
стаканчики химические;
перчатки резиновые;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стёкла предметные.
Приготовление рабочего раствора:
Для приготовления рабочего раствора смешать реактив №1 и реактив №2 в соотношении 1:1. Раствор стабилен 3 месяца. При образовании осадка смесь профильтровать (желательно фильтровать каждые 2 недели).
Ход реакции:
В 0,5‑1 мл осадка мочи ввести с помощью пипетки 50
мкл (1‑2 капли) смеси реактивов и перемешать. Через
5 мин. нанести с помощью пипетки 20 мкл окрашенного
осадка мочи на предметное стекло и покрыть покровным
стеклом размером 18 х 18 мм или 22 х 22 мм. Микроскопическое исследование окрашенного осадка проводить
сначала при увеличении 80х, 100х или 200х, а затем на
большом 400х.
Результаты окраски:
Цитоплазма окрашивается в бледно-розовый — ярко
розовый цвет, ядра в синий – темно-синий цвет.
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
6
ДИАХИМ — Набор для клинического анализа мочи
Набор реагентов для клинического анализа мочи
Набор реагентов для клинического анализа мочи
предназначен для определения рН, обнаружения глюкозы, кетонов, билирубина, уробилиноидов, качественного и количественного определения содержания белка в
моче в клинико-диагностических лабораториях.
Набор рассчитан на 1000 проб для определения рН и
качественного определения белка, глюкозы, уробилиноидов, кетонов; 400 проб — для качественного определения
билирубина и 330 проб — для количественного определения белка при расходе 3 мл 3% раствора сульфосалициловой кислоты на один анализ.
Принцип реакции:
Определение рН
рН мочи определяется по изменению цвета индикатора бромтимолового синего. Границы изменения окраски
индикатора лежат в диапазоне значений рН 5,0‑9,0.
Определение белка
Белок под действием сульфосалициловой кислоты
коагулирует, что приводит к помутнению мочи. Интенсивность помутнения пропорциональна содержанию белка в
моче и определяется фотометрически при длине волны
600 (590-650) нм.
Определение глюкозы, проба Гайнеса
Глюкоза при нагревании в щелочной среде восстанавливает гидрат окиси меди (синего цвета) в гидрат закиси
меди (зеленого, желтого, оранжевого или коричневого
цвета).
Определение билирубина
Билирубин, после его осаждения хлоридом бария,
под действием треххлористого железа (реактив Фуше)
превращается в зеленый биливердин. Интенсивность
окраски пропорциональна содержанию билирубина.
Определение уробилиноидов
Уробилиноген при реакции с п-диметиламин­обензальдегидом (реактив Эрлиха) образует соединение, окрашенное в красный цвет. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию уробилиноидов.
Определение кетонов:
Кетоны в щелочной среде взаимодействуют с нитропруссидом натрия (реактив Лестраде) с образованием
соединений красно-фиолетового цвета. Интенсивность
окраски пропорциональна содержанию кетонов в моче.
Состав набора:
• Бромтимоловый синий, спиртовой раствор — 1 фл.
(20 мл).
• Кислота сульфосалициловая, 60 % раствор — 1 фл.
(100 мл).
• Калибратор — калибровочный раствор альбумина,
1,0 г / л — 1 фл. (10 мл).
• Реактив Гайнеса, концентрированный раствор — 1 фл.
(100 мл).
• Реактив Фуше — 1 фл. (50 мл).
• Барий хлористый — 2 фл. (по 150 г).
• Реактив Эрлиха — 1 фл. (100 мл).
• Реактив Лестраде — 1 фл. (20 г).
Анализируемые пробы:
Свежая моча.
Меры предосторожности при работе
с набором:
Потенциальный риск применения набора — класс 2а.
В состав набора входят сульфосалициловая, трихлоруксусная, соляная кислоты, натрия гидроокись, медь
сернокислая, п-диметиламинобензальдегид, барий хлористый, натрий нитропруссидный. При работе с ними
следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно
промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л
теплой воды и вызвать рвоту.
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые
резиновые или пластиковые перчатки.
Оборудование, материалы и реагенты:
• Спектрофотометр СФ-2000–02, спектральный диапазон от 200 до 750 нм;
• колбы конические вместимостью 100 мл, 200 мл;
• цилиндры мерные вместимостью 50 мл, 100 мл;
• флакон из темного стекла вместимостью 200 мл;
• колбы мерные вместимостью 200 мл, 1 л;
• весы лабораторные второго класса точности типа
ВЛР-200 г;
• пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости
1,0; 2,0; 3,0;4,0 и 5,0 мл;
• пробирки стеклянные вместимостью 10 мл;
• бумага фильтровальная лабораторная;
• секундомер механический;
• чашки Петри;
• баня водяная;
• раствор натрия хлористого 9 г / л;
• вода дистиллированная;
• перчатки резиновые или пластиковые.
Подготовка реагентов для анализа:
Приготовление рабочего раствора бромтимолового синего
Бромтимоловый синий спиртовой раствор разбавить водой
дистиллированной в соотношении 1:4.
Рабочий раствор бромтимолового синего можно хранить при комнатной температуре от +18 до +25°С в защищенном от света месте в плотно закрытом флаконе не
более 6 мес.
Приготовление 20% раствора сульфосалициловой кислоты
В колбу коническую вместимостью 200 мл внести 50
мл 60% раствора сульфосалициловой кислоты, добавить
100 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать, перенести во флакон из темного стекла.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
7
ДИАХИМ — Набор для клинического анализа мочи
Набор реагентов для клинического анализа мочи (продолжение)
Раствор сульфосалициловой кислоты 20 % можно
хранить при комнатной температуре в плотно закрытом
флаконе в течение срока годности набора.
Приготовление 3% раствора сульфосалициловой
кислоты
В мерную колбу вместимостью 1 л внести 50 мл 60%
раствора сульфосалициловой кислоты, довести раствор
до метки дистиллированной водой.
Раствор сульфосалициловой кислоты 3% можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.
Калибровочный раствор альбумина 1,0 г / л
Готов к применению.
После вскрытия флакона раствор можно хранить при
температуре от +2 до +8°С не более 6 мес.
Приготовление рабочего раствора реактива Гайнеса
Реактив Гайнеса концентрированный разбавить водой дистиллированной в соотношении 1:4.
Рабочий раствор реактива Гайнеса можно хранить
при комнатной температуре в защищенном от света месте в течение срока годности набора.
Реактив Фуше
Готов к применению. Перед применением взболтать.
После вскрытия флакона раствор можно хранить при
комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.
Приготовление раствора бария хлористого 15%
150 г бария хлористого внести в мерную колбу вместимостью 1 л, добавить 800 мл дистиллированной воды,
тщательно перемешать до полного растворения, довести
дистиллированной водой до метки и вновь тщательно
перемешать.
Раствор бария хлористого можно хранить при комнатной температуре в течение срока годности набора.
Реактив Эрлиха
Готов к применению.
После вскрытия флакона раствор можно хранить
при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе
в течение срока годности набора.
Реактив Лестраде
Готов к применению.
После вскрытия флакона реактив можно хранить при
комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.
Проведение анализа:
1. Определение рН
К 1‑2 мл свежесобранной мочи добавить 1‑2 капли рабочего раствора бромтимолового синего.
• желтый цвет соответствует кислой реакции;
• бурый цвет соответствует слабокислой реакции;
• травянистый цвет соответствует нейтральной
реакции;
• буровато-зелёный цвет соответствует слабо щёлочной реакции;
• зелёный и синий цвет соответствует щелочной
реакции.
2. Определение содержания белка
Качественное определение
В две пробирки, опытная и контрольная (холостая
проба), вместимостью 10 мл, внести по 1,0‑2,0 мл профильтрованной или центрифугированной мочи. В опытную пробирку добавить 2‑3 капли 20% раствора сульфосалициловой кислоты. На темном фоне сравнить
прозрачность опытной и контрольной (холостой) проб.
Помутнение в пробирке с опытной пробой указывает на
наличие белка в пробе мочи.
Примечание
Избыток 20% раствора сульфосалициловой кислоты
приводит к растворению белка.
Количественное определение
Компоненты и анализируемые пробы отмерить в количествах, указанных в таблице 1.
Содержимое пробирок тщательно перемешать, выдержать при комнатной t° от +18 +25°С в течение 10 мин. Измерить оптическую плотность опытной пробы при длине волны 600 (590-650) нм, против контрольной (холостой) пробы
в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.
Таблица 1
Отмерить, мл
Опытная проба
Контрольная
(холостая) проба
1,0
1,0
3,0
-
-
3,0
Образец,
профильтрованная
моча
Раствор
сульфосалициловой
кислоты 3%
Раствор натрия
хлористого, 9 г/л
Примечание
При стоянии образцов более 20 мин. возможно уменьшение значений оптической плотности за счёт оседания
части преципитата. Непосредственно перед измерением
пробирку с опытной пробой тщательно встряхнуть.
Расчет произвести по калибровочному графику.
Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика в 5 пробирок внести калибровочный раствор альбумина и раствор
натрия хлористого 9 г / л в с в соответствии с таблицей 2.
Таблица 2
Калибровочный
№
раствор
пробирок альбумина,
мл
1
2
3
4
5
0,25
0,5
1,0
2,5
5,0
Раствор
натрия
хлористого
9 г/л, мл
4,75
4,5
4,0
2,5
-
Концентрация
белка,
/л
0,05
0,10
0,20
0,50
1,00
Полученные разведения обработать так же, как и образец.
Примечания
Линейная зависимость сохраняется до концентрации
белка 1 г/л. При более высоких концентрациях пробу развести в 2‑3 раза, результат умножить на разведение.
Результаты, получаемые данным методом чувствительны к изменениям температуры. Рекомендуется производить измерения при комнатной температуре. Лож-
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
8
ДИАХИМ — Набор для клинического анализа мочи
Набор реагентов для клинического анализа мочи (продолжение)
ноположительные результаты могут быть получены при
наличии в моче контрастных веществ, содержащих органический йод, поэтому тест нельзя использовать у лиц,
принимающих препараты йода.
Ложноположительный тест может быть также обусловлен приемом сульфаниламидных препаратов, больших доз пенициллина и при высоких концентрациях в
моче мочевой кислоты.
3. Определение глюкозы
В пробирку вместимостью 10 мл внести 3‑4 мл мочи,
добавить 5‑10 капель реактива Гайнеса, перемешать или
выдержать на кипящей водяной бане в течение 5 мин. В
присутствии глюкозы появляется зеленая, желтая, оранжевая или коричневая окраска жидкости и осадок. Синий
цвет указывает на отсутствие глюкозы в моче.
Примечание. Моча больных диабетом должна исследоваться в первую очередь, т. к. ферменты бактерий
и дрожжевых грибов частично или полностью разлагают
глюкозу. То же самое наблюдается при бактериурии.
Нижний предел обнаружения глюкозы в моче составляет 0,5 ммоль/л.
4. Определение билирубина
В пробирку вместимостью 20 мл внести 10 мл мочи и
5 мл раствора бария хлористого 15%, тщательно перемешать и профильтровать через фильтр. Барий хлористый
осаждает билирубин.
Фильтр поместить в чашку Петри и на него нанести 2 капли реактива Фуше. Появление сине-зеленого,
голубовато-изумрудного пятна свидетельствует о присутствии билирубина в моче.
Примечание. Если реакция мочи щелочная, то необходимо подкислить ее несколькими каплями 30% уксусной кислоты.
5. Определение уробилиноидов
В пробирку вместимостью 10 мл внести 1‑2 мл свежевыпущенной мочи, охлажденной до комнатной температуры, добавить 1‑2 капли реактива Эрлиха из расчета
1 капля реактива Эрлиха на 1 мл мочи, тщательно перемешать круговыми движениями и включить секундомер.
Окрашивание мочи в красный цвет в течение первых
30 сек., после добавления реактива Эрлиха, указывает
на повышенное содержание уробилиногенов. Отсутствие
окраски или её появление через 60 сек., после добавления реактива Эрлиха указывает, что концентрация уробилиногенов в моче в норме.
Примечание. Определению уробилиноидов может
мешать билирубин, при обнаружении билирубина его
следует предварительно удалить, осадив раствором хлористого бария 15% (см п. определение билирубина).
Нижний предел определения уробилиноидов составляет 3,0 ммоль/л.
6. Определение кетонов
Нанести небольшое количество (на кончике ножа) реактива Лестраде на фильтровальную бумагу, добавить 2‑3
капли анализируемой мочи и включить секундомер. Появление розоватого, сиреневого или темно-фиолетового
окрашивания через 2 мин. указывает на наличие в моче
кетонов.
Нижний предел обнаружения кетонов составляет 0,5
ммоль/л.
коне в течение срока годности набора.
Калибровочный раствор альбумина 1,0 г/л после
вскрытия флакона можно хранить при t° от +2 до +8°С не
более 6 мес.
Рабочий раствор реактива Гайнеса можно хранить
при комнатной температуре в защищенном от света месте не более 6 мес.
Реактив Фуше после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.
Раствор бария хлористого 15 % можно хранить при
комнатной t° в течение срока годности набора.
Реактив Эрлиха, после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение срока годности набора.
Реактив Лестраде после вскрытия флакона можно
хранить при комнатной температуре в плотно закрытом
флаконе в течение срока годности набора.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Условия хранения и эксплуатации набора:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной
гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва,
1981 г. При работе следует одевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как исследуемые
образцы следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и
передавать возбудители вирусной инфекции.
Набор должен храниться в упаковке предприятияизготовителя при температуре от +2 до +8°С течение всего срока годности.
Срок годности набора — 1 год.
Компоненты набора после вскрытия флаконов можно
хранить при комнатной температуре от +18 до +25°С в
плотно закрытых флаконах в течение срока годности набора.
Рабочий раствор бромтимолового синего можно хранить при комнатной температуре в защищенном от света
месте в плотно закрытом флаконе не более 6 мес.
Раствор сульфосалициловой кислоты 20 % можно
хранить при комнатной температуре в плотно закрытом
флаконе в течение срока годности набора.
Раствор сульфосалициловой кислоты 3 % можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом фла-
Меры предосторожности
Условия хранения и эксплуатации
Хранение реагентов при t°от 2 до +25°С в тёмном месте. Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
9
ДИАХИМ — Набор для клинического анализа мокроты
Набор реагентов для клинического анализа мокроты
Набор реагентов для клинического анализа мокроты предназначен для проведения микроскопического и
бактериологического исследования мокроты в клиникодиагностических лабораториях.
Набор рассчитан на 100 определений при обнаружении альвеолярных макрофагов с гемосидерином, 200
определений при выявлении кислотоустойчивых микобактерий, 300 определений при выявлении клеток злокачественных новообразований.
Принцип реакции:
Исследование мокроты, смывов и материала, добытого при бронхоскопии, производят с целью диагностики
туберкулеза, новообразований, актиномикоза и других
патологических процессов.
Определение альвеолярных макрофагов, содержащих гемосидерин. Альвеолярные макрофаги, содержащие гемосидерин — сидерофаги, имеют в цитоплазме
золотисто-желтые включения. С достоверностью их
определяют реакцией на берлинскую лазурь, при этом
гемосидерин, лежащий всегда внутриклеточно, окрашивается в голубой или сине-зеленый цвет. Эти клетки обнаруживают в мокроте при застойных явлениях в легком,
инфарктах легкого, кровоизлияниях.
Обнаружение кислотоустойчивых микобактерий. Кислотоустойчивыми называют бактерии, которые после
окрашивания фуксином не обесцвечиваются под действием концентрированных минеральных кислот и спиртов. Особенностью этой группы бактерий является их
невосприимчивость к красителям, поэтому для их окрашивания применяют подогретые концентрированные
красители.
Принцип метода окраски по Циль-Нильсену основан
на способности различных микроорганизмов оставаться
окрашенным после воздействия спирто- и кислотосодержащими реагентами. Кислотоустойчивость обусловлена
особенностями химического состава бактерий.
Наиболее эффективны способы окраски по ЦильНильсену для выявления спирто- и кислотоустойчивых
бактерий, в частности семейства Mycobacteriaceae (микобактерий туберкулеза, лепры и др.) и некоторых простейших (криптоспоридий). Используемые при этом основной
фуксин и метиленовый синий позволяют выявить, помимо бактериальной флоры, фуксинофильные внутриклеточные включения, характерные для некоторых вирусных, особенно респираторных, инфекций.
Обнаружение клеток, характерных для воспалительных и злокачественных процессов в легких. Метод основан на воздействии азур-эозиновых красителей на
клеточные элементы мокроты. Ядра окрашиваются в
фиолетовый или тёмно-фиолетовый цвет, ядрышки — голубой, цитоплазма, в зависимости от ее принадлежности
с той или другой клетке, принимает соответствующую
окраску от розового, розового-серого до бледно-голубого,
синего.
Реагенты:
•
•
•
•
•
•
Карболовый фуксин Циля — 1 фл. (200 мл)
Солянокислый спирт (концентрат) — 1 фл. (20 мл)
Метиленовый синий (1%) — 1 фл. (200 мл)
Калий железистосинеродистый, 5% — 1 фл. (10 мл)
Кислота соляная (5%) — 1 фл. (10 мл)
Эозин-метиленовый синий по Май-Грюнвальду — 1 фл.
(100 мл)
• Азур-эозин по Романовскому — 1 фл. (100 мл)
• Фосфатный буфер — 1 фл.
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
фарфоровые ступки;
стеклянные палочки;
чашки Петри;
воронки;
предметные стекла;
покровные стекла;
пробирки;
штативы;
горелка;
весы;
• микроскоп;
• бумага фильтровальная;
• инструменты для отбора мокроты;
• рельсы для окраски мазков;
• перчатки резиновые;
• емкости для фиксации и окраски.
Микроскопическое исследование состоит из изучения
нативных и окрашенных препаратов.
Приготовление нативных препаратов:
• Материал выбирают из различных составных частей
(слизи, гноя, кровянистых участков)
• Необходимо также брать для исследования все
частицы, выделяющиеся формой, окраской, плотностью.
Отбирают непрозрачные комочки сероватого или
желтоватого оттенка, переносят требуемое количество
материала на предметное стекло, используя деревянную палочку или бактериологическую петлю, равномерно распределяют материал по предметному стеклу на
площади 2 на 1 см, высушивают. Препарат просматривают сначала с малым увеличением (объектив 8х, окуляр 10х), затем с большим (объектив 40х, окуляр 10х).
Просмотр с малым увеличением дает ориентировочное
представление о качестве выбранного материала, о
количестве тех или иных клеток и других образований,
позволяет быстрее обнаружить элементы, встречающиеся в мокроте в небольшом количестве (эластические
волокна, спирали Куршмана, клетки опухоли и т. д.) просмотр с большим увеличением необходим для детального исследования препаратов.
Проведение определения:
1. Обнаружение альвеолярных макрофагов
С нативного препарата, в котором обнаружены альвеолярные макрофаги желтовато-коричневого цвета
с единичными крупными и многочисленными мелкими
включениями в цитоплазме, подозрительные на содержание в них аморфных кристаллов гемосидерина, осто-
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
10
ДИАХИМ — Набор для клинического анализа мокроты
Набор реагентов для клинического анализа мокроты (продолжение)
рожно, под контролем малого увеличения микроскопа,
снять покровное стекло. На препарат нанести каплю 5%
раствора калия железистосинеродистого, смешать с мокротой уголком покровного стекла или стеклянной палочкой, добавить такую же по размеру каплю 5% соляной
кислоты, вновь смешать и накрыть препарат покровным
стеклом. Выдержать 10‑15 мин. и микроскопировать при
малом увеличении.
Аморфные кристаллы гемосидерина, расположенные
внутриклеточно, при внесении в нативный препарат мокроты раствора железистосинеродистого калия и раствора соляной кислоты вступают в реакцию с образованием
берлинской лазури — соединения, окрашенного в голубой или сине-зеленый цвет.
2. Обнаружение кислотоустойчивых микобактерий
Предметное стекло перед исследованием должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для
обезжиривания предметных стекол. Выбрать в мокроте непрозрачные комочки сероватого или желтоватого
оттенка, перенести требуемое количество материала
на предметное стекло, используя деревянную палочку
или бактериологическую петлю, равномерно распределить материал по предметному стеклу на площади 2
на 1 см, высушить. Высушенные стекла с мокротой три
раза проводят через среднюю часть пламени горелки
до исчезновения признаков запотевания стекла. Общая
продолжительность пребывания мазка в пламени не
должна превышать 3‑5 сек. Для приготовления рабочего (3%) раствора солянокислого спирта, необходимо во
флакон емкостью 200 мл внести концентрат солянокислого спирта (20 мл) и добавить 180 мл этилового спирта (96º), либо приготовить рабочий раствор солянокислого спирта в необходимом количестве из расчета 1:9
(концентрат-спирт). Раствор тщательно перемешать,
хранить в закрытом состоянии.
окрашенные участки могут быть видны в виде «полос».
Поместить на мазок полоску фильтровальной
бумаги и нанести на бумагу несколько капель (3‑4 капли) карболового фуксина Циля
и нагреть мазок над пламенем горелки до
появления паров. Оставить мазок для остывания и окраски.
5 мин.
Слить краску, удалить фильтровальную бумагу и сполоснуть в проточной воде
30 сек.
Поместить мазок в солянокислый спирт до
полного визуального обесцвечивания
3 мин.
Смыть проточной водой
10 сек.
Поместить мазок в метиленовый синий
Промыть стекла в проточной воде
1‑2 мин.
1 мин.
Высушить.
Микроскопировать в световом микроскопе
с масляной иммерсией (окуляр х10,
увеличение х100)
Кислотоустойчивые микроорганизмы окрашиваются в
красный цвет, кислотонеустойчивые — в синий.
Кислотоустойчивые микобактерии туберкулеза имеют
в длину примерно 1‑10 мкм, в ширину — 0,2‑0,6 мкм. Обычно они видны в виде тонких изящных палочек, но иногда
можно обнаружить изогнутые или извитые варианты.
При окраске карболовым фуксином микобактерии туберкулеза выявляются в виде тонких, слегка изогнутых
палочек малиново-красного цвета, содержащих различное количество гранул.
Микроорганизмы, располагающиеся по одиночке, парами или в виде групп, хорошо выделяются на голубом
фоне других компонентов препарата. Нередко бактериальные клетки могут располагаться в виде римской цифры «V». Внутри отдельных микробных клеток могут обнаруживаться участки более интенсивного окрашивания,
в результате чего они похожи на «бусы», а более слабо
3. Исследование на клетки злокачественных опухолей
Исследуют нативные и окрашенные препараты. Препараты мокроты, предназначенные для цитологического
исследования, делают тонкими, для чего материал осторожно растягивают на стекле препаровальными иглами.
Признаки злокачественности клеток:
1) полиморфизм величины, а часто формы клеток; отдельные клетки могут быть гигантских размеров;
2) нарушение ядерно-цитоплазматического соотношения в сторону увеличения ядра, иногда до гиганстких
размеров;
3) неправильная, часто уродливая форма ядра;
4) наличие в ядрах нуклеол, больших, множественных, неправильной формы;
5) часто встречающиеся клеточные митозы;
6) способность клеток к фагоцитозу;
7) химическая анаплазия, гиперхромия ядра и резкая
базофилия цитоплазмы отдельных клеток.
Небольшое количество одиночно расположенных клеток с перечисленными признаками не является достоверным. Для подтверждения диагноза необходимо искать
групповое их расположение в виде комплексов. Для распознавания клеток с признаками злокачественности требуется просмотр большого количества препаратов.
Для приготовления буферного раствора с рН 6,8‑7,2
рекомендуется буферную смесь развести в 3 л дистиллированной воды. Полученный раствор использовать для
разведения красителя и промывки стекол.
Приготовление рабочего раствора красителя
Aзур-Эозина по Романовскому:
Смешать краситель «Диахим-ГемиСтейн-Р» с буферным раствором в соотношении 1:10‑1:12. На нефиксированные мазки крови налить неразбавленный раствор фик-
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
11
ДИАХИМ — Набор для клинического анализа мокроты
Набор реагентов для клинического анализа мокроты (продолжение)
сатора-красителя «Диахим-ГемиСтейн-М-Г» так, чтобы он
покрывал весь мазок. Через 2 мин. краситель слить. Далее
красить рабочим раствором красителя азур-эозина по Романовскому («Диахим-ГемиСтейн-Р») в течение 10‑40 мин.
(режим окраски подбирается опытным путем). По истечении этого времени препараты промыть буферным раствором, высушить на воздухе и микроскопировать.
Окраска форменных элементов должна быть следующей: ядра лимфоцитов, моноцитов и нейтрофилов
— фиолетовые; цитоплазма лимфоцитов — голубая,
серо-голубая или сине-голубая; цитоплазма моноцитов
— серо-голубая; цитоплазма нейтрофилов — бледнорозовая или розово-серая; зернистость нейтрофилов
— фиолетовая или красно-фиолетовая; зернистость эозинофилов — оранжево-красная, розово-красная или розово-фиолетовая; зернистость базофилов — фиолетовая.
Микроскопию окрашенных препаратов провести с иммерсионной системой (объектив 90х, окуляр 10х).
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии,
противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарноэпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные,
способные длительное время сохранять и передавать возбудители вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
12
ДИАХИМ - Набор для клинического анализа спинномозговой жидкости
Набор реагентов для анализа спинномозговой жидкости (СМЖ)
Набор реагентов предназначен для определения
цитоза, качественного и количественного определения
общего белка и качественного определения глобулинов
в спинномозговой жидкости в клинико-диагностических
лабораториях.
Набор рассчитан на анализ 200 проб спинномозговой
жидкости.
Клеточный состав (цитоз)
Реактив Самсона предотвращает цитолиз клеток в
смесителе в течение нескольких часов. Уксусная кислота,
которая содержится в реактиве, растворяет эритроциты,
фуксин окрашивает ядра клеток в интенсивный красный
цвет, что облегчает счет клеток и их дифференцирование.
Белок общий
Качественная реакция Панди
Белок с раствором фенола дает помутнение, интенсивность которого зависит от содержания белка.
Количественное определение общего белка в реакции
с сульфосалициловой кислотой и натрием сернокислым
Белок с сульфосалициловой кислотой и натрием сернокислым дает помутнение, интенсивность которого пропорциональна содержанию белка и определяется фотометрически при длине волны 410 (400-480) нм.
Глобулины
Качественная реакция Нонне — Апельта
При взаимодействии глобулинов с насыщенным раствором сернокислого аммония появляется помутнение,
интенсивность которого зависит от содержания глобулинов (осаждаются такие белковые фракции, которые остаются не осаждёнными в реакции Панди).
Состав набора:
Реагент 1 — Реактив Самсона — 1 фл. (10 мл).
Реагент 2 — Фенол — 1 фл. (2,5 г).
Реагент 3 — Кислота сульфосалициловая
2‑водная - 1 фл. (50 мл).
Реагент 4 — Натрий сернокислый или натрий сернокис-
лый 10‑водный — п/э пакет (70 г или 160 г).
Реагент 5 — Калибровочный раствор общего белка,
10 г / л — 1 фл. (5,0 мл).
Реагент 6 — Аммоний сернокислый — п/э пакет (85 г).
Аналитические и диагностические
характеристики набора:
Клеточный состав (цитоз)
Повышенный цитоз наблюдают при воспалительных
поражениях мозговых оболочек и органических поражениях вещества мозга.
Белок общий.
Линейная область определения — в диапазоне от 0,1
г/л до 1,5 г / л, отклонение — не более 10 %.
Чувствительность — не более 0,05 г/л.
Коэффициент вариации результатов определения —
не более 10 %.
Повышение содержание белка отмечают при нарушении гемодинамики, воспалительных процессах, органических поражениях ЦНС и оболочек мозга.
Пониженное содержание белка наблюдается при гидроцефалии и гиперсекреции СМЖ.
Глобулины.
Минимальная определяемая концентрация глобулинов — 0,05 г / л (0,3 г / л общего белка).
Увеличение глобулиновой фракции наблюдается при
кровоизлияниях в мозг, опухолях, менингитах, прогрессивного паралича, рассеянного склероза. Примесь крови всегда дает положительные глобулиновые реакции.
Нормальные значения:
Цитоз — Норма в люмбальном ликворе у взрослых
— 2-4 х 106/л; у детей до 3 мес — 20-25 х 106/л; 3 мес.
— 1 год — 14-20 х 106/л; 1‑2 года — 11‑14 х 106/л; 2‑5 лет
— 10‑12 х 106/л; старше 10 лет — 2-6 х 106/л; большая
цистерна — 0-1 х 106/л; в вентикулярном ликворе — 0-1 х
10 6/л; в субокципитальном — 2-3 х 106/л;
Концентрации белка: — при люмбальной пункции — 0,22‑0,33 г/л; при вентрикулярной пункции —
0,12‑0,20 г/л; при цистернальной пункции — 0,10‑0,22 г/л;
— у новорожденных — 0,6‑0,9 г/л.
Меры предосторожности при работе с набором:
Потенциальный риск применения набора — класс 2а.
В состав набора входят кислота сульфосалициловая
2‑водная, токсичное вещество фенол, реагент 1 содержит
уксусную кислоту. При работе с ним следует соблюдать
осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное
место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
Оборудование, материалы и реагенты:
• спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, длина волны 410 (400-480) нм, кювета с длиной оптического пути 1,0 см;
• термостат, поддерживающий температуру (37 ±1)°С;
• таймер;
• рН-метр;
• смеситель для лейкоцитов или часовое стекло;
• камера Фукса-Розенталя или Горяева;
• микроскоп;
• цилиндр мерный 25 мл и 100 мл;
• колба мерная вместимостью 500 мл;
• колба коническая вместимостью 200 мл;
• пипетки, позволяющие отбирать объёмы жидкости
от 0,2 до 1,0 мл и 5,0 мл;
• пробирки стеклянные вместимостью 10 мл;
• стекло предметное;
• вода дистиллированная;
• раствор аммиака, 10%;
• раствор натрия хлористого (9 г/л NаСI);
• перчатки резиновые или пластиковые.
Анализируемые пробы:
Спинномозговая жидкость, полученная при люмбальной пункции или пункции желудочков мозга. Стабильна
при комнатной температуре не более 1 часа.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
13
ДИАХИМ - Набор для клинического анализа спинномозговой жидкости
Набор реагентов для анализа спинномозговой жидкости (СМЖ) (продолжение)
Проведение анализа:
Приготовление рабочих растворов реагентов
Реактив Самсона
Готов к применению.
Реагент 1 можно хранить при температуре от +2 до
+8°С в плотно закрытом флаконе в течение года.
Реактив Панди
К содержимому флакона с реагентом 2 добавить
25 мл воды дистиллированной, перемешать и поместить
в термостат при t° 37°С на сутки. В течение этого времени
жидкость необходимо несколько раз перемешать. Далее
реактив оставить на 1 сутки при комнатной температуре
от +18 до +25°С. Прозрачная надосадочная жидкость и
является реактивом Панди.
Раствор сульфосалициловой кислоты, 0,24 моль/л (6%)
Содержимое флакона с реагентом 3 перенести в мерную колбу вместимостью 500 мл и довести объём раствора до метки дистиллированной водой.
Раствор реагента 3 можно хранить при комнатной
температуре в течение года.
Раствор натрия сернокислого, 0,98 моль/л (14%)
Содержимое пакета с реагентом 4 количественно
перенести в мерную колбу вместимостью 500 мл растворить в 400 мл дистиллированной воды и довести объём
раствора до метки дистиллированной водой.
Раствор реагента 4 можно хранить при комнатной
температуре в течение года.
Реагент для количественного определения общего белка
Смешать раствор сульфосалициловой кислоты, 6%
и раствор натрия сернокислого, 14% в соотношении 1:1.
Готовят непосредственно перед применением, его можно хранить при комнатной температуре не более 8 часов.
Реагент 5 - Калибровочный раствор общего белка, 10 г/л
Готов к применению.
После вскрытия флакона калибровочный раствор
можно хранить при температуре от +2 до +8°С в плотно
закрытом флаконе не более 6 мес.
Насыщенный раствор аммония сернокислого
Содержимое пакета с реагентом 6 перенести в коническую колбу вместимостью 200 мл, растворить в
100 мл дистиллированной воды при кипячении. Полученный раствор выдержать в течение 12 часов при комнатной температуре и отфильтровать. Приготовленный
раствор должен иметь рН 7,0‑7,1, поэтому его следует
подщелочить раствором аммиака, 10 % осторожно добавляя его по каплям (~3 капли).
Насыщенный раствор сернокислого аммония можно
хранить при комнатной температуре в течение года.
Проведение анализа:
1. Определение цитоза
Спинномозговую жидкость тщательно размешать в течение 2 мин., затем смешать в смесителе для лейкоцитов
с реактивом Самсона. До первой метки набрать реактив,
до второй метки набрать спинномозговую жидкость. Смеситель встряхнуть и оставить на 10‑15 мин. для прокрашивания клеточных элементов. Если смесителя нет или
жидкости очень мало, допускается смешивание спинномозговой жидкости с реактивом Самсона в соотношении:
10 капель СМЖ и 1 капля реактива.
Окрашенную жидкость интенсивно встряхнуть, вылить
из смесителя первые 1‑2 капли и затем заполнить счётную камеру. Наиболее удобна камера Фукса-Розенталя.
Заполненную камеру оставить в горизонтальном положении на 1 мин. для оседания клеточных элементов.
2. Определение общего белка (реакция Панди)
На предметное стекло налить 2 капли реактива Панди, сбоку поместить 1‑2 капли спинномозговой жидкости,
так чтобы обе жидкости слились, и через 2 мин. визуально на темном фоне учесть результаты реакции.
3. Количественное определение общего белка
Построение калибровочного графика
Калибровочный раствор общего белка, 10 г/л разбавить раствором натрия хлористого, 9 г/л в следующих соотношениях:
Таблица 1
№
п/п
1
2
3
4
5
Калибровочный
раствор
общего белка,
10 г/л, мл
0,05
0,20
0,30
0,50
0,75
Раствор
натрия
хлористого,
9 г/л, мл
4,95
4,80
4,70
4,50
4,25
Концентрация
общего белка,
г/л
0,1
0,4
0,6
1,0
1,5
Приготовить 5 пробирок вместимостью 10 мл. Во все
пробирки внести по 5,0 мл реагента для количественного
определения общего белка, в каждую пробирку добавить
по 0,5 мл раствора общего белка с концентрацией 0,1 г/л,
0,4 г/л, 0,6 г/л, 1,0 г/л и 1,5 г/л, соответственно. Содержимое пробирок тщательно перемешать, выдержать при
комнатной температуре от от +18 до +25°С в течение 10
мин. Измерить оптическую плотность проб против раствора натрия хлористого, 9 г/л при длине волны 410 (400480) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.
Построить калибровочный график, откладывая по оси
ординат оптическую плотность проб, а по оси абсцисс —
соответствующие им значения концентрации общего белка, указанные в графе 4 таблицы 1.
Количественное определение общего белка
Компоненты и анализируемые пробы отмерить в количествах, указанных в таблице 2.
Таблица 2
Отмерить, мл
Реагент для
определения
общего белка
Спинномозговая
жидкость
Натрий хлористый
(9 г / л)
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
Опытная проба
Контрольная
(холостая)
проба
5,0
0,5
0,5
-
5,0
14
ДИАХИМ - Набор для клинического анализа спинномозговой жидкости
Набор реагентов для анализа спинномозговой жидкости (СМЖ) (продолжение)
Содержимое пробирок тщательно перемешать, выдержать при комнатной температуре от +18 до +25°С в течение
10 мин. Измерить оптическую плотность опытной (Еоп) пробы против контрольной (холостой) пробы при длине волны
410 (400-480) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.
Примечание: При стоянии образцов более 20 мин.,
возможно уменьшение значения оптической плотности
за счёт оседания части преципитата. Непосредственно
перед измерением пробирку с опытной пробой тщательно встряхнуть.
При использовании кюветы меньшего объема расход
реагентов может быть уменьшен при сохранении указанных выше соотношений.
При концентрациях белка более 1,5 г/л пробу следует
развести в 2‑3 раза раствором натрия хлористого, 9 г/л,
повторить определение и полученный результат умножить на разведение.
4. Определение глобулинов (реакция Нонне —
Апельта)
В пробирку внести 0,5 мл насыщенного раствора сернокислого аммония и 0,5 мл спинномозговой жидкости,
перемешать. В контрольную (холостую) пробирку внести
1,0 мл воды. Через 2 мин. визуально учесть результаты
реакции, сравнивая опытную и контрольную пробы на
тёмном фоне. Помутнение спинномозговой жидкости через 3 мин. и более не учитывается.
Примечание: Реакция Панди осаждает такие белковые фракции, которые остаются неосажденными в реакции Нонне-Апельта, поэтому целесообразно ставить обе
реакции одновременно.
5. Регистрация результатов
Подсчёт клеток
Не меняя горизонтального положения, камеру поместить на столик микроскопа.
Подсчет клеток производить во всей сетке при малом
увеличении микроскопа (окуляр 15х, объектив 8х). При
очень большом количестве клеток допускается подсчет
половины сетки с последующим умножением результатов на 2.
Определение общего белка (реакция Панди)
В области соприкосновения реактива и спинномозговой жидкости возникает помутнение, выраженность которого зависит от содержания белка.
Количественное определение общего белка
Длина волны: 410 (400-480) нм;
Длина оптического пути: 1,0 см;
Температура анализа: комнатная от +18 до +25°С;
Измерение: против холостой пробы.
Определение глобулинов (реакция Ноне-Апельта)
Результат (появление на границе белого кольца) определяют через 2 мин., затем жидкость встряхивают и отмечают интенсивность помутнения.
Учет результатов:
Камера Фукса-Розенталя
Количество клеток в 1 мкл рассчитать по формуле (1):
т. е. приблизительно
(1),
где А — количество клеток во всей камере;
3,2 — объём камеры, мкл;
11/10 — степень разведения спинномозговой жидкости реактивом Самсона.
Камеры Горяева
При использовании камеры Горяева для получения
более точного результата необходимо считать не менее
3 камер, взяв затем среднее арифметическое значение.
Количество клеток в 1 мкл рассчитать по формуле (2):
, или Х = А×1,2 (2),
где А — количество клеток во всей камере;
0,9 — объём камеры, мкл;
11/10 — степень разведения спинномозговой жидкости реактивом Самсона.
Реакция Панди
Степень помутнения обозначить крестами: слабая
опалесценция — (+), заметная опалесценция — (++),
умеренное помутнение — (+++), значительное помутнение — (++++).
Количественное определение общего белка
Расчет провести по калибровочному графику.
Реакция Ноне-Апельта
Реакцию выразить плюсами (как в реакции Панди).
Условия хранения и эксплуатации набора:
Набор должен храниться в упаковке предприятияизготовителя при температуре от +2 до +8°С в течение
всего срока годности. Допускается хранение при температуре до +25°С не более 20 суток.
Срок годности набора — 1 год.
Реактив Самсона после вскрытия флакона можно
хранить при температуре от +2 до +8°С в плотно закрытом флаконе не более 1 года.
Реактив Панди можно хранить при комнатной температуре от +18 до +25°С не более 1 года. При снижении
температуры реактив мутнеет, при подогревании просветляется и становится пригодным к использованию.
Раствор сульфосалициловой кислоты, 6% можно хранить при комнатной температуре не более 1 года.
Раствор натрия сернокислого, 14% можно хранить
при комнатной температуре не более 1 года.
Насыщенный раствор аммония сернокислого можно
хранить при комнатной температуре от +18 до +25°С не
более 1 года.
Калибровочный раствор общего белка после вскрытия флакона можно хранить при температуре от +2 до
+8°С в плотно закрытом флаконе не более 6 месяцев.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
15
ДИАХИМ - Набор для клинического анализа кала
Набор реагентов для клинического анализа кала
Набор реагентов для клинического анализа кала предназначен для обнаружения в кале скрытой крови, билирубина и стеркобилина и микроскопического исследования
кала в клинико-диагностических лабораториях.
Набор расчитан на анализ 1000 проб для обнаружения
скрытой крови, 50 проб для качественного определения
стеркобилина, 200 проб для качественного определения
билирубина и 2000 проб для проведение микроскопического анализа кала.
Принцип реакции:
Морфологическое и химическое исследования кала дают
суммарное представление о функции важнейших пищеварительных желез, оно отражает степень переваривания принятой пищи и состояние слизистой кишечного тракта.
Определение скрытой крови. В присутствии гемоглобина крови бензидин реагирует с перекисью водорода с образованием в течение первых 2 мин. соединений, окрашенных
в зелёный, сине-зелёный или синий цвет. Интенсивность
окраски пропорциональна количеству крови в кале.
Определение стеркобилина. Стеркобилин взаимодействует с уксуснокислым цинком в присутствии раствора
Люголя с образованием соединений, дающих зеленую
флюоресценцию.
Определение билирубина.
Билирубин, поступающий в кишечник с желчью, под
влиянием кишечной флоры восстанавливается, в результате чего образуется уробилин (стеркобилин) - нормальный пигмент кала и уробилиноген - продукт более полного восстановления.
Билирубин под действием реактива Фуше превращается в зеленый биливердин; интенсивность окраски пропорциональна количеству билирубина в кале.
Реагенты:
• Бензидин – 1 фл. (1,0 г)
• Уксусная кислота (50%) – 1 фл. (100 мл)
• Гидроперит – 1 упаковка
•
•
•
•
•
•
•
Уксусная кислота (30 %) – 1 фл. (100 мл)
Уксуснокислый цинк (10%) – 1 фл. (100 мл)
Раствор Люголя – 1 фл. (50 мл)
Реактив Фуше – 1 фл. (100 мл)
Раствор судана III (2%) – 1 фл. (100 мл)
Глицерин – 1 фл. (130 г)
Метиленовый синий (2%) – 1 фл. (20 мл).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
фарфоровые ступки;
стеклянные палочки;
чашки Петри;
воронки;
предметные стекла;
покровные стекла;
пробирки;
штативы;
горелка;
весы;
микроскоп;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые.
Приготовление нативных препаратов:
Кусочек кала величиной с лесной орех помещают в
ступку, добавляют немного водопроводной воды и растирают до консистенции жидкой кашицы. Капли приготовленной эмульсии стеклянной палочкой наносят на предметные стекла и готовят не менее 6 препаратов: нативный,
с раствором Люголя, с метиленовым синим, с суданом III, с
30% уксусной кислотой и глицерином.
Проведение определения:
1. Определение скрытой крови
Приготовление 3% раствора перекиси водорода.
Растворить 3 таблетки гидроперита в 50 мл дистиллированной воды. Раствор стабилен при хранении в посуде из
темного стекла и температуре 2-8°С в течении 3 месяцев.
Приготовление раствора бензидина. Перед употре-
блением немного бензидина (~500 мг) растворяют в 5 мл
50% уксусной кислоты до полного растворения. Раствор
годен к употреблению, нестойкий.
Ход определения:
Неразведенный кал наносят толстым слоем на предметное стекло, добавляют 2-3 капли раствора бензидина
в уксусной кислоте и столько же перекиси водорода. Перемешивают стеклянной палочкой. Положительная реакция на кровь дает зелёное или сине-зелёное окрашивание в течение первых 2 мин. Окрашивание, наступившее
позже, чем через 2 мин., не учитывают.
2. Определение билирубина
Приготовление эмульсии кала: кусочек кала помещают в фарфоровую ступку и растирают в небольшом
количестве дистиллированной воды или изотоническим
растворе хлорида натрия.
Эмульсию кала поместить в 2 пробирки по 1-2 мл,
в опытную пробирку добавить по каплям реактив Фуше
(объём реактива не должен быть больше эмульсии кала).
В присутствии билирубина появляется зеленое или зеленоватое окрашивание.
Сравнить опытную и контрольную окраску в проходящем свете.
3. Определение стеркобилина
Приготовление эмульсии кала: кусочек кала помещают в фарфоровую ступку и растирают в небольшом
количестве дистиллированной воды или изотоническим
растворе хлорида натрия.
Приготовление рабочего раствора Люголя. Разбавить
раствор Люголя дистиллированной водой в соотношении
1:1.
Эмульсию кала внести в пробирку в количестве 1-2 мл,
добавить 1-2 мл раствора уксуснокислого цинка (предварительно взболтать) и 1 каплю рабочего раствора Люголя.
Полученную смесь профильтровать в стеклянную
пробирку, при наличии стеркобилина (положительная
реакция) раствор дает зеленую флюоросценцию, видную
на темном фоне.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
16
ДИАХИМ - Набор для клинического анализа кала
Набор реагентов для клинического анализа кала (продолжение)
4. Исследование нативного препарата
При микроскопическом исследовании нативного препарата различают следующие элементы: детрит, остатки
пищи, элементы слизистой оболочки кишечника, кристаллические образования, флору, мышечные волокна,
нейтральный жир в виде бесцветных капель, жирные кислоты и мыла. растительную клетчатку и крахмал, микроорганизмы, яйца гельминтов, кристаллы.
5. Исследование кала с суданом III
Капли нейтрального жира и капли жирных кислот окрашиваются в оранжевый цвет. Нагревание такого препарата
ведёт к расщеплению мыл (если они есть) и образованию
капель жирных кислот, которые также окрашиваются в оранжевый цвет.
На предметное стекло стекл. палочкой нанести 1-2 капли
эмульсии кала или жидкой каловой массы, внести в препарат
1-2 капли раствора судана III, эмульсия и реактив смешивают краем покровного стекла и рассматривают сначала под
малым (8х10), а затем под большим (40х10) увеличением.
6. Исследование кала с метиленовым синим
Для получения 0,5% раствора метиленового синего,
перед использованием, 2% раствор метиленового синего
разбавить дистиллированной водой в соотношении 1:3.
При обнаружении жира в виде капель микроскопируют препарат с метиленовым синим, капли нейтрального
жира бесцветны, капли жирных кислот окрашены в голубой или синий цвет.
На предметное стекло стеклянной палочкой нанести
1-2 капли эмульсии кала или жидкой каловой массы, внести в препарат 1-2 капли раствора метиленового синего
(0,5%), эмульсия и реактив смешивают краем покровного
стекла и рассматривают сначала под малым (8х10), а затем под большим (40х10) увеличением.
7. Исследование кала с глицерином
Глицерин очищает от бактерий и калового дейтрита
яйца гельминтов, «просветляет» препарат и помогает
установить принадлежность обнаруженных яиц. При обнаружении яиц гельминтов необходимо провести специальное исследование по Като.
На предметное стекло стеклянной палочкой нанести
1-2 капли эмульсии кала или жидкой каловой массы,
внести в препарат 1-2 капли глицерина, эмульсию и глицерин смешивают краем покровного стекла и рассматривают сначала под малым (8х10), а затем под большим
(40х10) увеличением.
8. Исследование кала с нагреванием
Дифференцирует жирные кислоты от мыл. При обнаружении глыбок и игл нативный препарат подогревают
(не доводя до кипения) и тотчас микроскопируют. Образование капель после нагревания указывает на наличие
жирных кислот, при остывании препарата капли вновь
превращаются в глыбки (препарат можно подогреть повторно. Если при нагревании капель не образовалось, а
иглы и глыбки остаются, нагревают препарат с уксусной
кислотой.
9. Исследование с 30% р-ром уксусной кислоты
Глыбки и кристаллы мыл сплавляются в капли после
нагрева (до кипения) препарата с уксусной кислотой. Уксусная кислота расщепляет мыла и освобождает жирные
кислоты, которые плавятся, образуя капли.
Меры предосторожности:
Меры предосторожности – соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать возбудители вирусной инфекции.
Раствор Люголя
Микроскопическое исследование кала производится для выявления остатков пищи, клеток, отделяемой
кишечной стенкой слизи, яиц гельминтов, простейших.
Большинство микроскопических составляющих кала
можно обнаружить в нативном препарате, который готовят из эмульсии кала в небольшом количестве воды.
Покрытый покровным стеклом препарат рассматривают в затемненном поле при малом и большом увеличении. Из остатков углеводной пищи в кале можно обнаружить крахмал и растительную клетчатку. Клетки растений
легко узнаются в нативном препарате по толстым оболочкам, растительная ткань - по толстым межклеточным
перегородкам. Количество клетчатки зависит от характера пищи и от времени прохождения фекалий по толстой
кишке, где клетчатка частично расщепляется бактериями
микробиоты. Для выявления крахмала к эмульсии кала
прибавляют каплю раствора Люголя. Крахмальные зерна окрашиваются в синий или фиолетовый цвет. Крахмал
усваивается хорошо, в нормальном кале его совсем или
почти нет.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в темном
месте. Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
17
ДИАХИМ - Набор для исследования фекалий
Набор реагентов для микроскопического исследования фекалий по методу Като
Набор реагентов для исследования фекалий по Като
предназначен для выявления яиц гельминтов методом
толстого мазка и окраски по Като.
Принцип реакции:
Принцип: яйца гельминтов обнаруживают в толстом
мазке фекалий, просветленных глицерином и подкрашенных малахитовой зеленью.
Реагенты:
• Реактив Като 1 фл. (50 мл)
• Гидрофильный целлофан (пластинки) 500 шт
Набор обеспечивает 500 исследований (при расходе
10 мл реактива Като на 100 пластинок.
Оборудование:
● термостат;
● секундомер;
● микроскоп;
● рН-метр;
● чашки Петри;
● пипетки;
● перчатки резиновые;
● рельсы для окраски;
● воронка;
● разделительная воронка;
● стаканчики химические;
● стеклянные палочки;
● стекла предметные;
● колбы вместимостью 500,1000 мл;
● бумага фильтровальная;
● цилиндры мерные вместимостью 25‑500 мл;
Методика окраски:
Пластинки по Като: пластинки гидрофильного целлофана погружают в смесь Като так, чтобы они прилегали
друг к другу (3‑5 мл раствора Като на 100 пластинок). Через 24 часа они готовы к употреблению. Готовые пластинки можно хранить в растворе Като в хорошо закрытой
посуде при комнатной температуре в течение 6 месяцев.
Ход обнаружения:
100 мг фекалий без добавления воды или какой‑либо
другой жидкости наносят на предметное стекло, накрывают вместо покровного стекла целлофановой покровной
пластинкой, обработанной смесью Като, и придавливают
резиновой пробкой так, чтобы фекалии размазались по
предметному стеклу в пределах целлофановой пластинки, но не выдавливались из‑под неё. Мазок оставляют
при комнатной температуре для осветления, после чего
просматривают его под микроскопом. Время осветления
мазка зависит от температуры воздуха, но даже в прохладном помещении оно не превышает 1 часа; в жаркое
время года во избежание пересушивания мазок микроскопируют через 30‑40 мин. В некоторых случаях, чтобы
избежать чрезмерного высыхания препарата, на целлофановую покровную пластинку приготовленного препарата следует класть влажную губку.
МИКРОСКОП БИОЛОГИЧЕСКИЙ
ДЛЯ ЛАБОРАТОРНЫХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
PRIMO STAR
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены
при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как исследуемые
образцы следует рассматривать как потенциально инфицированные,способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +18 до +25°С в тёмном
месте. Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Область
применения
гематология, цитология, гистология,
микробиология, гельминтология,
иммунология, бактериология,
ветеринария, ботаника и т.д.
Методы
исследования
светлое поле, темное поле,
фазовый контраст, флуоресценция
Источник света
традиционная галогенная лампа, экономичный светодиод, простейшее зеркало
Освещение
фиксированное или настраиваемое
по Келеру
Револьвер
объективов
4-х позиционный
Объективы
4х, 10х, 20х, 40х, 100х
Окуляры
10х/18 мм или 10х/20 мм
Фото/видео
камера
опционально
Источник
электропитания
сеть 220V или независимая
аккумуляторная батарея
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
18
ДИАХИМ-СК
Набор реагентов для обнаружения скрытой крови в биологических материалах и
контроля качества предстерилизационной обработки медицинских изделий
Метод основан на способности о-Толидина образовывать соединение сине-зеленого цвета при контакте с
атомарным кислородом, выделяющимся при взаимодействии перекиси водорода с кровью.
Состав набора:
• о-Толидин — 5 фл. (по 50 мг).
• Уксусная кислота 70% — 1 фл. (10 мл)
• Гидроперит — 0,5 таблетка.
Аналитические характеристики набора:
Чувствительность — возможно обнаружение при разведении крови в 350 000 раз.
Необходимое оборудование и реактивы:
Пипетки для отбора реактивов (2 мл и 8 мл), мерная
колба или стакан вместимостью 50 мл, фильтр. бумага,
предметные стекла, секундомер, дистиллированная вода.
Меры предосторожности:
В состав набора входит ядовитое вещество — о-Толидин и едкое вещество — уксусная кислота. При попадании
этих реактивов на кожу и слизистые промыть их большим
количеством теплой воды, при попадании внутрь — выпить 0,5‑1 л воды и вызвать рвоту раздражением глотки.
Приготовление рабочего реагента:
1. Приготовление 1% раствора перекиси водорода.
Растворить 0,5 таблетки гидроперита в 50 мл дистиллированной воды. Раствор стабилен при хранении в посуде
из темного стекла в течении нескольких месяцев.
2. Приготовление смеси уксусной кислоты и перекиси
водорода. Смешать 2 мл 70% уксусной кислоты и 8 мл 1%
раствора перекиси водорода.
3. Приготовление рабочего реагента. Внести полученную смесь в 1 фл. с о-Толидином и тщательно перемешать. Оставить стоять (при периодическом перемешивании) для растворения о-Толидина на 15‑20 мин.
Полученный рабочий реагент стабилен в течении 3 часов.
Ход определения:
I. Проверка качества предстерилизационной обработки медицинских инструментов.
1.1 Набрать в пипетку несколько капель рабочего реагента, смочив им всю внутреннюю поверхность пипетки, и через
30‑40 сек. выдуть реактив чистой грушей на фильтр. бумагу,
сложенную вчетверо. Реакция считается положительной при
появлении зеленого окрашивания не позднее чем через 120
сек. после начала контакта рабочего реагента с поверхностью
пипетки.
1.2 Набрать в шприц 4‑5 капель рабочего реагента и, смочив всю его внутреннюю поверхность движением поршня, выдуть рабочий реагент на сложенную вчетверо фильтр. бумагу.
Реакция считается положительной при появлении зеленого
окрашивания не позднее чем через 120 сек. после начала контакта рабочего реагента с поверхностью шприца.
1.3 Для проверки качества обработки игл набрать рабочий
реагент в чистый, без коррозии металлических частей шприц
и, меняя иглы, выдавливать через них по 2‑3 капли реагента на сложенную вчетверо фильтр. бумагу. Реакция считается положительной при появлении зеленого окрашивания не
позднее чем через 120 сек. после начала контакта рабочего
реагента с поверхностью иглы.
1.4 Для обнаружения скрытой крови на наружной поверхности медицинских инструментов, столов, центрифуг и т. д.
смочить кусочек марли или фильтр. бумаги рабочим реагентом и протереть им исследуемую поверхность. Реакция считается положительной при появлении зеленого окрашивания не
позднее чем через 120 сек. после начала контакта тампона,
смоченного рабочим реагентом, с исследуемой поверхностью.
II. Обнаружение скрытой крови в кале.
Нанести кал тонким мазком на предметное стекло.
Нанести на мазок 1‑2 капли рабочего реагента. Реакция
считается положительной при появлении зеленого окрашивания не позднее чем через 120 сек. после начала контакта биоматериала с рабочим реагентом.
МИКРОСКОП
БИНОКУЛЯРНЫЙ
МИКМЕД-5
Область
применения
Микроскоп может быть использован
для проведения рутинных работ в
области медицины и биологии, а также
для учебных целей.
Методы
исследования
На микроскопе МИКМЕД-5 исследуются
окрашенные и неокрашенные препараты
в проходящем свете по методу светлого поля в виде мазков, гистологических
срезов и в специальных камерах.
Источник света
Галогенная лампа накаливания 12В,
20Вт / Светодиод 5 Вт
Координатный
столик
Координатный предметный столик с
диапазоном перемещения 75х50 мм
Револьвер
объективов
4-х позиционный
Объективы
4х, 10х, 40х, 100х
Окуляры
10х/18 мм
Потребляемая
мощность, ВА
50 с галогенной лампой
20 со светодиодом
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
19
ДИАХИМ – ЦИТОСТЕЙН – Альциановый
Набор реагентов для окраски на слизь с альциановым синим.
Набор реагентов предназначен для окраски на слизь
с альциановым синим.
Реагенты:
• Раствор альцианового синего 1 фл. (50 мл)
• Гематоксилин 1 фл. (50 мл)
Набор обеспечивает 50 исследований.
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25‑500 мл;
разделительная воронка;
колбы вместимостью 500,1000 мл;
стаканчики химические;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
рельсы для окраски мазков;
воронка;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые.
Подготовка к анализу:
Предметное стекло перед исследованием должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью
для обезжиривания предметных стекол производства
«АБРИС+».
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт,
ацетон, смесь Никифорова, жидкость Карнуа. Предметное стекло с высушенным мазком погружают в склянку с
фиксирующим веществом на 10‑15 мин. и затем высушивают на воздухе. Возможна фиксация в этаноле или 10%
формалине.
Методика окраски:
МИКРОСКОП
1. Мазок зафиксировать в фиксирующем реагенте.
2. Провести через спирты понижающей концентрации
(96 %, 70 %, 50 %, 30 %) с задержкой в каждом спирте на
2‑3 сек.
3. Поместить мазок в раствор альцианового синего - 30
мин.
4. Ополоснуть в дистиллированой воде.
5. Окраска гематоксилином - 5 мин.
6. Промыть в воде.
БИНОКУЛЯРНЫЙ
МИКРОС МС-50
Результат окраски:
Вакуоли в цитоплазме, заполненная слизью, окрашивается в ярко-синий цвет, ядра – светло-коричневого цвета.
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпи-демиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте. Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Область
применения
Бинокулярный микроскоп для
лабораторных исследований
Источник света
галогенная лампа, 6 В, 20 Вт,
светодиодное освещение
Координатный
столик
координатный с нониусом,
коаксиальная рукоятка управления по
осям XY, правосторонняя
Револьвер
объективов
4-х позиционный
Объективы
4х, 10х, 40х, 100х
Окуляры
широкопольные WF 10х/18 мм
широкопольные P 16х/12 (опция)
Источник
электропитания
Встроенный в штатив блок питания,
220 В, регулируемый
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
20
ДИАХИМ – ЦИТОСТЕЙН – Амилоид
Набор реагентов для окраски на амилоид.
Набор реагентов для окраски на амилоид предназначен для выявления амилоида с конго красным.
Принцип реакции:
Амилоидоз — это мезенхимальный диспротеиноз,
сопровождающийся образованием в мезенхиме сложного
вещества — амилоида. Амилоид представляет собой белково-полисахаридный комплекс, состоящий из F — компонента (фибриллярный белок), P — компонента (плазменный
компонент), T — компонента (тканевой).
Амилоид в гистологических препаратах очень похож
на гиалин и выглядит в световом микроскопе как бесструктурный, гомогенный, плотный, стекловидный, розового цвета белок.
Микроскопически определяется — а) конго-рот, б) йодгрюн, в) генцианвиолет — окраска основана на метахромазии амилоида.
Реагенты:
• 1. Раствор конго красного 1 фл. (50 мл)
• 2. Карбонат лития 1 фл. (0,5 г)
• 3. Гематоксилин 1 фл. (50 мл)
Набор обеспечивает 50 исследований.
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25‑500 мл;
разделительная воронка;
колбы вместимостью 500,1000 (мл);
стаканчики химические;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
рельсы для окраски мазков;
• воронка;
• бумага фильтровальная;
• перчатки резиновые.
Подготовка к анализу:
Предметное стекло перед исследованием должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью
для обезжиривания предметных стекол производства
«АБРИС+».
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт,
ацетон, смесь Никифорова, жидкость Карнуа. Предметное
стекло с высушенным мазком погружают в склянку с фиксирующим веществом на 10‑15 мин. и затем высушивают
на воздухе. Возможна фиксация в этаноле или 10% формалине.
Приготовление раствора карбоната лития.
Навеску карбоната лития (реагент 2) растворить в
50 мл дистиллированной воды.
Методика окраски:
Меры предосторожности.
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации.
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
1. Мазок фиксируют в фиксирующем реагенте.
2. Тщательно промывают водой.
3. Поместить мазок в раствор конго красного — 15‑20
мин.
4. Поместить в раствор карбоната лития — 15 мин.
5. Дифференцировать 80% этанолом, пока отходят
излишки краски.
6. Ополоснуть в водопроводной воде.
7. Окраска гематоксилином — 10 мин.
8. Промыть в воде.
Результат окраски:
Амилоид окрашивается в красный цвет, ядра - в синий. Возможна окраска гематоксилином, а затем конго
красным.
Окраску можно проводить как в ёмкостях для окрашивания, так и на «рельсах».
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
21
Раздел 2. МИКРОБИОЛОГИЯ
ДИАХИМ – Набор для окраски по Граму
Набор реагентов для окраски микроорганизмов по Граму (с сафранином)
Набор реагентов для окраски по Граму предназначен
для окраски микроорганизмов и выявления принадлежности бактерий к грамположительным или к грамотрицательным группам.
Принцип реакции:
Для окраски по Граму чаще используют красители трифенилметановой группы: генциановый, метиловый фиолетовый или кристалвиолет. Грамположительные Грам
(+) микроорганизмы дают прочное соединение с указанными красителями и йодом. При этом они не обесцвечиваются при воздействии на них спиртом, вследствие чего
при дополнительной окраске фуксином Грам (+) микроорганизмы не изменяют первоначально принятый фиолетовый цвет.
Грамотрицательные Грам (-) микроорганизмы образуют с основными красителями и йодом легко разрушающееся под действием спирта соединение. В результате
микробы обесцвечиваются, и затем окрашиваются сафранином, приобретая красный цвет.
Реагенты:
• Карболовый раствор генцианвиолета 1 фл. (100 мл)
• Раствор Люголя 1 фл. (100 мл)
• Раствор сафранина 1 фл. (100 мл)
Набор обеспечивает 200 исследований (исходя из
0,5 мл на одно исследование).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25-500 мл;
разделительная воронка;
колбы вместимостью 500,1000 мл;
стаканчики химические;
чашки Петри;
•
•
•
•
•
•
•
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
рельсы для окраски мазков;
воронка;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые.
Подготовка к анализу:
Предметное стекло перед проведением исследования
должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью
для обезжиривания предметных стекол пр-ва «АБРИС+».
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт,
ацетон, смесь «Диахим-Профиклин», жидкость Карнуа.
Предметное стекло с высушенным мазком погружают в
склянку с фиксирующим веществом на 10‑15 мин. и затем
высушивают на воздухе.
Либо полученные мазки тщательно высушивают и
затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается
посредством несильного нагревания (примерно до 70°С)
предметного стекла, которое для этого трижды проводят
над пламенем спиртовки мазком вверх.
Методика окраски:
1. Помещают на мазок полоску фильтровальной бумаги
и наносят на фиксированный мазок несколько капель
карболового раствора генцианвиолета (реагент 1)
и выдерживают 2‑3 мин. Сливают краску, удаляют
фильтровальную бумагу и споласкивают в проточной
воде (до 30 сек).
2. Мазок заливают на 1‑2 мин. раствором Люголя
(реагент 2) до почернения препарата.
3. Раствор сливают, мазок промывают водой (водопроводной или дистилированной).
4. Дифференцируют 96° спиртом, наливая и сливая его,
пока отходит синяя краска и не обесцветится мазок
(приблизительно 20‑60 сек.) Во время дифференцировки препарат все время покачивают. Если вместо
спирта использовать ацетон, то промывание продолжа-
ется 30 сек. Можно дифференцировать смесью спирта
и ацетона (1:1) 30 сек.
5. Тщательно промывают стекло в проточной или дистиллированной воде 1‑2 мин.
6. Для выявления грамотрицательной группы бактерий
препараты дополнительно окрашивают раствором
сафранина (реагент 3) (несколько капель) в течение
2‑3 мин.
7. Промывают в проточной воде и высушивают фильтровальной бумагой.
Окрашенные мазки исследуют в масле, с иммерсионным объективом; при желании заключают в бальзам, в таком случае на окрашенный и хорошо высушенный мазок
кладут каплю бальзама и покрывают покровным стеклом.
Результат окраски:
Грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовый цвет (темно-синий), а грамотрицательные — розово-красный, красный или коричневый.
Меры предосторожности.
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации.
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
22
ДИАХИМ – Набор для окраски по Граму
Набор реагентов для окраски урогенитальных трихомонад по Граму
(с нейтральным красным)
Набор реагентов для окраски по Граму с нейтральным
красным предназначен для окраски урогенитальных трихомонад.
Принцип реакции:
Для окраски по Граму чаще используют красители трифенилметановой группы: генциановый, метиловый фиолетовый или кристалвиолет. Грамположительные Грам (+)
микроорганизмы дают прочное соединение с указанными
красителями и йодом. При этом они не обесцвечиваются
при воздействии на них спиртом, вследствие чего при дополнительной окраске фуксином Грам (+) микроорганизмы
не изменяют первоначально принятый фиолетовый цвет.
Грамотрицательные Грам (-) микроорганизмы образуют с основными красителями и йодом легко разрушающееся под действием спирта соединение. В результате
микробы обесцвечиваются, и затем окрашиваются фуксином, приобретая красный цвет.
Реагенты:
• Карболовый раствор генцианвиолета 1 фл. (100 мл)
• Раствор Люголя 1 фл. (100 мл)
• Нейтральный красный 1 фл. (100 мл)
Набор обеспечивает 200 исследований (при расходе
0,5 мл реагента на одно исследование).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25-500 мл;
разделительная воронка;
колбы вместимостью 500,1000 мл;
стаканчики химические;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
•
•
•
•
рельсы для окраски мазков;
воронка;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые.
Подготовка к анализу:
Предметное стекло перед исследованием должно
быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для обезжиривания предметных стёкол производства «АБРИС+».
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт,
ацетон, смесь «Диахим-Профиклин», жидкость Карнуа.
Предметное стекло с высушенным мазком погружают в
склянку с фиксирующим веществом на 10‑15 мин. и затем
высушивают на воздухе.
Либо полученные мазки тщательно высушивают и затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С)
предметного стекла, которое для этого трижды проводят
над пламенем спиртовки мазком вверх.
Методика окраски:
1. Помещают на мазок полоску фильтровальной
бумаги и наносят на фиксированный мазок несколько капель карболового раствора генцианвиолета (реагент 1) и выдерживают 2‑3 мин. Сливают
краску, удаляют фильтровальную бумагу и споласкивают в проточной воде (до 30 сек.).
2. Мазок заливают на 1‑2 мин. раствором Люголя
(реагент 2) до почернения препарата.
3. Раствор сливают, мазок промывают водой (водопроводной или дистилированной).
4. Дифференцируют 96° спиртом, наливая и сливая
его, пока отходит синяя краска и не обесцветится мазок (приблизительно 20‑60 сек.) Во время
дифференцировки препарат все время покачивают.
Если вместо спирта использовать ацетон, то промывание продолжается 30 сек. Можно дифференцировать смесью спирта и ацетона (1:1) 30 сек.
5. Тщательно промывают стекло в проточной или
дистиллированной воде 1‑2 мин.
6. Для выявления урогенитальных трихомонад препараты дополнительно окрашивают раствором
нейтрального красного (реагент 3) (несколько
капель) в течение 2‑3 мин.
7. Промывают в проточной воде и высушивают фильтровальной бумагой.
Окрашенные мазки исследуют в масле, с иммерсионным объективом; при желании заключают в бальзам,
в таком случае на окрашенный и хорошо высушенный
мазок кладут каплю бальзама и покрывают покровным
стеклом.
Результат окраски:
Ядра трихомонад — синии, сине-фиолетовые, цитоплазма трихомонад — желтая, оранжевая. Грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовый цвет
(темно-синий), а грамотрицательные — розово-красный, красный или коричневый.
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при
работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарноэпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
23
ДИАХИМ – Набор для окраски по Граму
Набор реагентов для окраски микроорганизмов по Граму (с фуксином Циля)
Набор реагентов для окраски по Граму предназначен
для окраски микроорганизмов и выявления принадлежности бактерий к грамположительным или к грамотрицательным группам.
Принцип реакции:
Для окраски по Граму чаще используют красители трифенилметановой группы: генциановый, метиловый фиолетовый или кристалвиолет. Грамположительные Грам (+)
микроорганизмы дают прочное соединение с указанными
красителями и йодом. При этом они не обесцвечиваются
при воздействии на них спиртом, вследствие чего при дополнительной окраске фуксином Грам (+) микроорганизмы
не изменяют первоначально принятый фиолетовый цвет.
Грамотрицательные Грам (-) микроорганизмы образуют с основными красителями и йодом легко разрушающееся под действием спирта соединение. В результате
микробы обесцвечиваются, и затем окрашиваются фуксином, приобретая красный цвет.
Реагенты:
• Карболовый раствор генцианвиолета 1 фл. (100 мл)
• Раствор Люголя 1 фл. (100 мл)
• Фуксин Циля 1 фл. (10 мл)
Набор обеспечивает 200 исследований (при расходе
0,5 мл реагента на одно исследование).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25 - 500 мл;
разделительная воронка;
колбы вместимостью 500, 1000 мл;
стаканчики химические;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
•
•
•
•
рельсы для окраски мазков;
воронка;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые.
Подготовка к анализу.
Предметное стекло перед исследованием должно
быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для обезжиривания предметных стекол производства «АБРИС+».
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт,
ацетон, смесь «Диахим-Профиклин», жидкость Карнуа.
Предметное стекло с высушенным мазком погружают в
склянку с фиксирующим веществом на 10‑15 мин. и затем высушивают на воздухе.
Либо полученные мазки тщательно высушивают и затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С)
предметного стекла, которое для этого трижды проводят
над пламенем спиртовки мазком вверх.
Приготовление рабочего раствора фуксина Циля:
Перед использованием фуксин Циля разводят в 10
раз дистиллированной водой. (Из расчета — к 1 мл фуксина добавляют 9 мл дистиллированной воды).
Методика окраски:
1. Помещают на мазок полоску фильтровальной
бумаги и наносят на фиксированный мазок несколько капель карболового раствора генцианвиолета (реагент 1) и выдерживают 2‑3 мин. Сливают
краску, удаляют фильтровальную бумагу и споласкивают в проточной воде (до 30 сек.).
2. Мазок заливают на 1‑2 мин. раствором Люголя
(реагент 2) до почернения препарата.
3. Раствор сливают, мазок промывают водой (водопроводной или дистилированной).
4. Дифференцируют 96° спиртом, наливая и сливая
его, пока отходит синяя краска и не обесцветится мазок (приблизительно 20‑60 сек.) Во время
дифференцировки препарат все время покачивают.
Если вместо спирта использовать ацетон, то промывание продолжается 30 сек. Можно дифференцировать смесью спирта и ацетона (1:1) 30 сек.
5. Тщательно промывают стекло в проточной или
дистиллированной воде 1‑2 мин.
6. Для выявления грамотрицательной группы бактерий
препараты дополнительно окрашивают рабочим фуксином Циля (несколько капель) в течение 1‑3 мин.
7. Промывают в проточной воде и высушивают фильтровальной бумагой.
Окрашенные мазки исследуют в масле, с иммерсионным объективом; при желании заключают в бальзам,
в таком случае на окрашенный и хорошо высушенный
мазок кладут каплю бальзама и покрывают покровным
стеклом.
Результат окраски:
Грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовый цвет (темно-синий), а грамотрицательные — розовокрасный, красный или коричневый.
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно- эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
24
ДИАХИМ – Набор для окраски по Циль-Нильсену
Набор реагентов для окраски микроорганизмов по Циль-Нильсену
Набор реагентов для окраски по Циль-Нильсену предназначен для окраски микроорганизмов (микобактерий
туберкулеза).
Принцип реакции:
Кислотоустойчивыми называют бактерии, которые после окрашивания фуксином не обесцвечиваются под действием концентрированных минеральных кислот и спиртов.
Особенностью этой группы бактерий является их невосприимчивость к красителям, поэтому для их окрашивания применяют подогретые концентрированные красители.
Принцип метода окраски по Циль-Нильсену основан
на способности различных микроорганизмов оставаться
окрашенным после воздействия спирто- и кислотосодержащими реагентами. Кислотоустойчивость обусловлена
особенностями химического состава бактерий.
Наиболее эффективны способы окраски по ЦильНильсену для выявления спирто- и кислотоустойчивых
бактерий, в частности семейства Mycobacteriaceae (микобактерий туберкулеза, лепры и др.) и некоторых простейших (криптоспоридий). Используемые при этом основной
фуксин и метиленовый синий позволяют выявить, помимо бактериальной флоры, фуксинофильные внутриклеточные включения, характерные для некоторых вирусных, особенно респираторных, инфекций.
Реагенты:
• Карболовый фуксин Циля 1 фл. (100 мл)
• Солянокислый спирт (концентрат) 1 фл. (10 мл)
• Метиленовый синий 1 фл. (100 мл)
Набор обеспечивает 200 исследований (при расходе
0,5 мл реагента на одно исследование).
Оборудование:
•
•
•
•
•
•
термостат;
секундомер;
микроскоп;
рН-метр;
цилиндры мерные вместимостью 25-500 мл;
разделительная воронка;
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
колбы вместимостью 500, 1000 (мл);
стаканчики химические;
чашки Петри;
стеклянные палочки;
пипетки;
стекла предметные;
рельсы для окраски мазков;
воронка;
бумага фильтровальная;
перчатки резиновые.
Подготовка к анализу:
Предметное стекло перед проведением исследования должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для обезжиривания предметных стекол производства «АБРИС+».
Полученные мазки тщательно высушивают и затем
фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С) предметного стекла, которое для этого трижды проводят над
пламенем спиртовки мазком вверх. Можно фиксировать
мазки и в 96°спирте (10‑15 мин.).
Приготовление рабочего раствора солянокислого спирта:
Для приготовления рабочего (3 %) раствора солянокислого спирта, необходимо во флакон емкостью 100 мл
внести концентрат солянокислого спирта (10 мл) (реагент 2) и добавить 90 мл этилового спирта (96°). Раствор
тщательно перемешать, хранить в закрытом состоянии.
Методика окраски:
1. Помещают на мазок полоску фильтровальной бумаги и наносят на фиксированный мазок несколько
капель карбол-фуксин Циля (реагент 1) и подогревают над пламенем спиртовки до появления паров.
Эту температуру поддерживают в течение 1‑2 мин.,
не доводя до кипения. Охлаждают мазок до комнатной температуры.
2. Сливают краску, удаляют фильтровальную бумагу
и основательно промывают в водопроводной воде.
3. Дифференцируют рабочим раствором солянокислого спирта до полного визуального обесцвечивания
(1‑3 мин.).
4. Промывают в воде 15‑30 и более сек.
5. Докрашивают (несколько капель) метиленовым
синим (реагент 3) 1‑2 мин.
6. Основательно споласкивают в воде и высушивают
фильтровальной бумагой. Мазки, перекрашенные
метиленовым синим, можно дифференцировать
70° спиртом.
Окрашенные мазки исследуют в масле, с иммерсионным объективом; при желании заключают в бальзам, в таком случае на окрашенный и хорошо высушенный мазок
кладут каплю бальзама и покрывают покровным стеклом.
Результат окраски:
Микобактерии окрашиваются в красный цвет на общем голубом или синем фоне.
Меры предосторожности:
Меры предосторожности — соблюдение «Правил
устройства, техники безопасности, производственной
санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г.
При работе следует одевать одноразовые резиновые
или пластиковые перчатки, так как исследуемые образцы
следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В, или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Условия хранения и эксплуатации:
Хранение реагентов при t° от +2 до +25°С в тёмном
месте.
Для получения надежных результатов необходимо
строгое соблюдение инструкции по применению набора.
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 458-44-35.
25
ЖУРНАЛЫ ДЛЯ РАБОТЫ В ООМД
Полный перечень рабочих журналов нашего производства:
Артикул
Наименование товара
39774
Журнал учета генеральных уборок (24 страницы, формат А5)
39773
Журнал регистрации и контроля работы бактерицидной установки (48 страниц, формат А4)
40344
Журнал учета количества проведенных лабораторных исследований в отделениях (64 стр., формат А4)
40341
Рабочий журнал регистрации исследований кала на энтеральные паразитозы (64 стр., формат А4)
40345
Журнал учета мероприятий по обслуживанию медицинского оборудования (64 стр., формат А4)
40339
Рабочий журнал регистрации исследований мочи (64 страницы, формат А4)
40343
Рабочий журнал регистрации биохимических исследований (80 страниц, формат А4)
40340
Рабочий журнал регистрации исследований кала (копрограмма) (64 страницы, формат А4)
40342
Рабочий журнал регистрации гематологических исследований (80 страниц, формат А4)
40884
Журнал учета получения и расходования дезинфицирующих средств в стационаре/поликлинике/отделении
(80 страниц, формат А4)
Раздел 1: Расчет потребности в дезинфицирующих средствах.
Раздел 2: Сведения о поступлении дезинфицирующих средств.
Раздел 3: Сведения о расходовании дезинфицирующих средств в подразделении (в стационаре).
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 339-88-23.
26
ЖУРНАЛЫ ДЛЯ РАБОТЫ В ООМД
Мы готовы предоставить любую консультационную и практическую помощь по продукции собственного производства:
красители для гематологии и цитохимии, микробиология: (812) 339-88-23.
27
Сервисный центр НПФ «АБРИС+» осуществляет свою деятельность
по лицензии №99-03-003050 от 01.08.2012 г.
Обслуживание клинико-диагностических лабораторий, оборудования для
обеззараживания медицинских отходов и дезинфекции. Обеспечивает
методическую поддержку наших клиентов.
Осуществляет следующие виды услуг:
Сервисное обслуживание в течение года на выгодных условиях
Ремонт оборудования
Пуско-наладочные работы
Постгарантийное
обслуживание
Предпродажная подготовка
Консультативная помощь
Сервисный центр работает с широким
спектром оборудования, в том числе:
33 гематологические анализаторы,
33 биохимические анализаторы,
33 иммуноферментные анализаторы,
33 шейкеры,
33 вошеры,
33 продукция ФГУП «Касимовский Приборный
Завод»,
33 центрифуги,
33 коагулометры,
33 анализаторы электролитов и газов крови,
33 анализаторы глюкозы и лактата,
33 анализаторы мочи,
33 СВЧ-установка «СВМЕД» (Россия),
33 установка «Балтнер» (Россия) для
утилизации отходов
33 другое общелабораторное и
медицинское оборудование.
Телефон сервис-центра: (812) 458-44-50.
”” Адаптация и программирование биохимических анализаторов
¡¡ под наборы реактивов производства НПФ «АБРИС+»
¡¡ под наборы реактивов импортных производителей
”” Адаптация и программирование гематологических анализаторов под
реагенты отечественного производства
Руководитель: Москвичева Юлия Борисовна.
Моб. тел.: +7 (911) 117-13-46
Ведущий инженер сервис-центра:
Глушенко Игорь Владимирович.
Моб. тел.: +7 (981) 153-07-17
Инженер сервис-центра:
Бандурин Николай Викторович
Моб. тел.: +7 (911) 117-14-35
Бесплатный звонок по России: 8-800-1000-422.
Е-mail: BandurinNV@abrisplus.ru
http: www.abrisplus.ru
28