Автореферат - Казанская государственная академия

На правах рукописи
ПАВЛОВА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА
РОЛЬ БИОМАССЫ СПИРУЛИНЫ, ШРОТОВ СЕМЯН ВИНОГРАДА
И КУНЖУТА, А ТАКЖЕ ГУМАТА КАЛИЯ В МОДУЛЯЦИИ
НЕКОТОРЫХ СОСТАВЛЯЮЩИХ ГОМЕОСТАЗА
03.03.01 – Физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
Казань – 2015
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Научный консультант
Гарипов Талгат Валирахманович,
доктор ветеринарных наук, профессор
Официальные оппоненты:
Любин Николай Александрович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой морфологии, физиологии и патологии животных ФГБОУ ВПО
«Ульяновская государственная сельскохозяйственная
академия имени П.А. Столыпина»;
Игнатьев Николай Георгиевич, доктор биологических
наук, профессор, заведующий кафедрой биологии и экологии ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия»;
Молянова Галина Васильевна, доктор биологических
наук, профессор, профессор кафедры эпизоотологии, патологии и фармакологии ФГБОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия».
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Чувашский государственный педагогический университет им. И.Я. Яковлева»
Ведущая организация
Защита диссертации состоится 27 ноября 2015 года в 1400 часов на заседании диссертационного совета Д 220.034.02 при ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана» по адресу 420074, г. Казань, Сибирский тракт, 35,
КГАВМ; тел. / факс (843) 273-97-84.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана».
Автореферат разослан «28» августа 2015 г.
http://www.vak.ed.gov.ru/ и http:// www.ksavm.senet.ru/
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор биологических наук,
профессор
года
и
размещен
на
Р.Я. Гильмутдинов
2
сайтах
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования. В связи с ухудшением экологической ситуации организм
человека и животных, подвергаясь воздействию вредных факторов, вынужден постоянно
мобилизовывать свои компенсаторно-приспособительные механизмы, резервы которых
ограничены и со временем могут истощаться. Интенсивное и длительное воздействие экологически неблагоприятных факторов окружающей среды может вызывать перенапряжение и
срыв адаптационных процессов организма. Гарантом выполнения жизненных процессов является гомеостаз включая механизмы регуляции. По современным представлениям (Вапняр
В.В. Структура иерархической двухуровневой модели гомеостаза человека в определении
роли неравновесной термодинамики и синергетики при инфекционном процессе // Успехи
современного естествознания. – 2007. – № 7. – С. 43–45; Кулаев Б.С. Эволюция гомеостазиса
в биологическом пространстве – времени. – М.: Научный мир, 2006. – 229 с.), гомеостаз целостного организма определяется деятельностью различных функциональных систем, результатом которых являются гомеостатические константы. Перестройка систем гомеостаза
может осуществляться двумя путями: как изменением структуры включенных механизмов
систем регулирования, так и изменением допустимого диапазона регулируемых констант.
Использование биологически активных добавок (БАД) открывает широкие возможности
для модуляции физиологических процессов в организме. Использование БАД из природного
сырья повышает резистентность организма, облегчает клиническое течение многих экологически обусловленных заболеваний и практически не имеет негативных побочных эффектов.
В настоящее время ведется интенсивный поиск новых биологически активных веществ – антиоксидантов, способных поддерживать гомеостаз. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия – субстанции природного происхождения, которые
нашли достаточно широкое применение в животноводстве и птицеводстве в качестве премиксов и кормовых добавок, а также в ветеринарии в качестве средств профилактики и лечения
экологически обусловленных заболеваний домашних животных. Имеются данные об их использовании в качестве БАД и компонентов лекарственных препаратов, применяемых для
человека, однако весь спектр биологической активности их компонентов не раскрыт. В связи
с этим необходимы исследования, дополняющие и вносящие новые сведения о потенциальных положительных эффектах биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а
также гумата калия в модуляции гомеостаза организма.
Степень разработанности проблемы. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и
кунжута, а также гумат калия являются достаточно известными субстанциями и нашли широкое применение в различных отраслях птицеводства и животноводства (Белова Н.Ф. Использование биологически активных веществ в кормлении цыплят-бройлеров // Материалы
международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов. – Воронеж, 2008. – С. 111–112; Влияние препаратов спирулины на качественные показатели мяса
бройлеров / С.А. Тимофеевская // Пищевая и перерабатывающая промышленность. Реферативный журнал. – 2007. – № 4. – С. 1257; Майорова Ж.С. Гумат калия в рационах цыплятбройлеров / Инновационные направления и методы реализации научных исследований в
АПК // Сборник научных трудов преподавателей и аспирантов Рязанского государственного
агротехнического университета имени П.А. Костычева. – Рязань, 2012. – С. 222–225). Они не
токсичны, не обладают аллергизирующими и тератогенными свойствами. В литературе
имеются данные об использовании биомассы спирулины в качестве средства повышения выносливости при физических нагрузках, доказано, что она обладает выраженной противоопухолевой и противовирусной активностью (Первушкин С.В. Биомасса спирулины: исследования и перспективы использования : монография / С.В. Первушкин, А.В. Воронин, А.А. Сохина. – Самара : СамГМУ, 2004. – 100 с.). Гумат калия является средством активации обмена
веществ и проявляет высокую сорбционную способность, препятствует накоплению тяжелых металлов и токсинов в организме (Механизм действия гуминовых кислот / В.С. Бузлама,
В.Н. Долгополов, А.В. Сафонов, С.В. Бузлама // Итоги и перспективы применения гумино3
вых препаратов в продуктивном животноводстве, коневодстве и птицеводстве: всероссийская конференция, Москва, 21 декабря 2006 г.: сб. науч. тр. – М., 2006. – С. 24–35.). Гумат
калия обладает высокой антибактериальной и противовирусной активность, обладает иммуностимулирующим эффектом за счет активации фагоцитоза и выраженным эрготропным
эффектом. Установлено, что шрот семян винограда обладает выраженным антиоксидантным
действием, является гипотензивным средством, кардиопротектором и онкопротектором
(Биологически активные соединения винограда: перспективы производства и применения в
медицине и питании / В.М. Монченко [и др.] // Мат. международной, научно- практической
конференции. – Симферополь, 2001. – С. 7–15). Шрот семян кунжута является желчегонным
средством, улучшает свертываемость крови (Большакова И.В. Антиоксидантные свойства
ряда экстрактов лекарственных растений / И.В. Большакова, Е.Л. Лозовская, И.И. Сапежинский // Биофизика. – 1997. – Т. 42. – Вып. 2. – С. 480–483).
Биомассу спирулины и гумат калия используют в качестве средств повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, но без учета особенностей их влияния на организм. Известно, что богатый минеральный состав и ценный набор биологически активных
соединений, содержащихся в биомассе спирулины, шротах семян винограда и кунжута, а
также гумат калия, способен обеспечивать более глубокое и равновесное воздействие на
функциональную активность организма, и вследствие этого сочетать высокий терапевтический эффект с минимальным спектром противопоказаний к применению. В литературе отсутствуют данные об изменениях морфологического и биохимического состава крови крыс и
цыплят-бройлеров на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и
кунжута, а также гумата калия в сравнительном аспекте. Несмотря на важную роль системы
перекисного окисления липидов – антиоксидантов (ПОЛ-АО) в регуляции гомеостаза в организме не изучена ее ответная реакция на нагрузку биомассой спирулины, шротами семян
винограда и кунжута, а также гуматом калия в норме и при оксидативном стрессе. Нет сведений о сравнительном анализе с эталонными гепатопротекторами эффективности применения изучаемых субстанций в коррекции оксидативного стресса. Отсутствует гистологическая
оценка изменений ткани печени животных в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза, возникающих в результате внутрижелудочной нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия. Не изучены ответные реакции репродуктивной системы животных и особенности развития их потомства в антенатальном периоде онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда
и кунжута, а также гуматом калия. Не изучены процессы становления сенсорнодвигательных рефлексов у животных в ранний постнатальный период онтогенеза, родившихся от самок, получавших внутрижелудочно указанные субстанции природного происхождения. Отсутствуют исследования по применению шротов семян винограда и кунжута
при выращивании цыплят-бройлеров и кур- несушек. Все это сдерживает широкое использование указанных субстанций в качестве биологически активных добавок в ветеринарии и при
откорме животных. Поэтому, данная проблема требует более глубоких научных исследований, раскрывающих благотворное действие биомассы спирулины, шротов семян винограда и
кунжута, а также гумата калия на организм животных.
Цель и задачи исследования. Цель – изучение роли биомассы спирулины, шротов семян
винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции гомеостаза организма животного.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
1) изучить изменения морфобиохимического состава крови животных на фоне нагрузки
биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гумата калия;
2) исследовать ответную реакцию системы ПОЛ-АО печени крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия и сравнить
их эффективность с эталонным антиоксидантом β-каротином;
3) выявить реактивные изменения ткани печени крыс в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия;
4
4) изучить ответную реакцию репродуктивной системы крыс и развитие их потомства в
антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян
винограда и кунжута, а также гуматом калия;
5) исследовать процесс становления сенсорно-двигательных рефлексов в ранний постнатальный период онтогенеза у крысят, рожденных от самок, получавших биомассу спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия;
6) изучить возможности применения БАД для выращивания цыплят-бройлеров и повышения качества яиц кур-несушек.
Научная новизна результатов исследования. Впервые в сравнительном аспекте изучены основные морфологические и биохимические составляющие крови крыс и цыплятбройлеров на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а
также гуматом калия. Установлено, что при длительном внутрижелудочном поступлении в
организм крыс биомассы спирулины в дозе 10 мг/100 г массы тела животного в крови увеличивается количество эритроцитов на 21,1 %, концентрация гемоглобина – на 21,9 %, количество лейкоцитов – на 13,1 %, палочкоядерных нейтрофилов – на 27,1 % и снижается количество эозинофилов – на 9,5 % по сравнению с контролем. Биохимический состав крови крыс
на поступление биомассы спирулины отвечает достоверным увеличением концентрации общего белка на 12,9 %, альбуминов – на 10,6 %, α2-глобулинов – на 20,0 % и снижением концентрации γ-глобулинов – на 15,8 % (р < 0,05).
На внутрижелудочную нагрузку шротом семян винограда в течение 35 суток в дозе
10 мг/100 г массы тела организм крыс отвечает увеличением количества эритроцитов в крови
на 24,0 %, концентрации гемоглобина – на 32,4 %, палочкоядерных нейтрофилов – на 31,2 %
и сегментоядерных нейтрофилов – на 12,0 %, а также снижением количества моноцитов – на
20,4 % по сравнению с контролем. Эффект воздействия шрота семян винограда на биохимический состав крови крыс наиболее ярко проявляется увеличением количества альбуминов
на 13,9 % и снижением концентрации γ-глобулинов на 11,8 % (р < 0,05).
Нагрузка шрот семян кунжута при равных условиях увеличивает количество эритроцитов в крови на 13,3 %, концентрацию гемоглобина – на 15,2 %, а в лейкоцитарной формуле,
по сравнению с контролем, снижет количество моноцитов на 9,6 %, при этом биохимический
состав крови крыс не претерпевает существенных изменений (р < 0,05).
Организм крыс на длительное поступление гумата калия в дозе 10 мг/100 г массы тела
животного отвечает увеличением в крови количества лейкоцитов на 15,3 %, палочкоядерных
нейтрофилов – на 18,2 %, снижением количества эозинофилов на 20,4 % и количества моноцитов – на 15,0 %, повышает концентрацию общего белка на 14,1 %, альбуминов – на 16,6 %,
α2-глобулинов – на 12,7 % и снижает количество γ – глобулинов на 30,3 % (р < 0,05).
Нагрузка биомассой спирулины цыплят-бройлеров в течение 35 суток вызывает увеличение в сыворотке крови количества α – глобулинов на 17,6 % и γ-глобулинов на 32,9 %,
снижает количество β-глобулинов на 18,3 % и концентрацию β-липопротеидов на 25,96 %,
увеличивает концентрацию холестерина на 88,02 %, аспартатаминотрансферазы (АсАТ) – на
29,54 %, аланинаминотрансферазы (АлАТ) – на 41,79 %, кальция – на 50,96 % и фосфора –
на 25,33 % (р < 0,05).
Длительная нагрузка гуматом калия способствует увеличению количества α-глобулинов
на 22,3 % и γ-глобулинов на 20,7 %, снижает концентрацию β-липопротеидов на 31,99 % и
пировиноградной кислоты (ПВК) на 14,79 %, увеличивает концентрацию холестерина на
63,02 %, АлАТ – на 16,49 %, кальция – на 38,22 % и фосфора – на 19,21 % (р < 0,05).
Организм цыплят-бройлеров на поступление шрота семян винограда в течение 35 суток
отвечает увеличением количества γ-глобулинов на 16,7 %, снижением концентрации
β-липопротеидов на 38,19 % и ПВК на 37,24 %, увеличением концентрации холестерина на
57,80 %, АсАТ – на 18,62 %, кальция – на 72,58 % и фосфора – на 27,94 % (р < 0,05).
Шрот семян кунжута при равных условиях поступления в организм способствует увеличению в сыворотке крови цыплят-бройлеров концентрации общего белка на 13,3 %, количества α-глобулинов на 15,5 % и γ-глобулинов на 33,9 %, снижает количество β-глобулинов на
5
19,4 %, концентрацию β-липопротеидов на 34,64 % и ПВК на 30,07 %, увеличивает концентрацию холестерина на 54,17 %, АсАТ – на 13,16 %, АлАТ – на 27,47 %, кальция –
на 61,77 % и фосфора – на 15,22 % (р < 0,05).
Впервые проведена оценка системы ПОЛ-АО на фоне нагрузки биомассой спирулины,
шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия в норме в различных дозах и на
модели оксидативного стресса в сравнении с эталонным антиоксидантом β-каротином. Установлено, что нагрузка организма крыс биомассой спирулины, шротами семян винограда и
кунжута, а также гуматом калия в дозе 5, 10, 15 и 20 мг/100 г массы тела не вызывает негативных изменений в системе ПОЛ-АО печени. Определена оптимальная дозировка 10 мг/100 г
массы тела для применения биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а
также гумата калия. Выявлено, что данные природные субстанции обладают противотоксическими свойствами, способствуя нормализации гомеостаза в системе ПО-АО в состоянии
оксидативного стресса.
Впервые на гистологическом уровне изучено становление структуры печени, явления
апоптоза и пролиферации на фоне нагрузки биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия. Установлено, что на фоне нагрузки биомассой спирулины у эмбрионов печень более продолжительное время сохраняет роль органа кроветворения, увеличивается число митотически делящихся гепатоцитов и количество слоев клеток
наружной терминальной пластинки. На фоне нагрузки шротом семян кунжута на 21 сутки
эмбриогенеза в ткани печени отмечается усиленная пролиферация клеток желчевыводящих
протоков и их расширение, удлиняются сроки эритропоэза у плодов до момента рождения.
На длительную нагрузку гуматом калия ткань печени эмбрионов отвечает ускоренным
формированием печеночных балок и угнетением эритропоэза, отмечено наличие двуядерных
и полиплоидных гепатоцитов, особенно выраженное в центральной части долек печени.
На нагрузку суспензией шрота семян винограда, ткань печени крыс отвечает отсутствием ингибиторов апоптоза в гепатоцитах периферической части долек печени, что проявляется повышением синтетической активности клеток, синтезирующих альбумины и другие белки плазмы крови, усиливается пролиферация клеток центральной части органа.
Впервые доказано отсутствие патологического действия биомассы спирулины, шротов
семян винограда и кунжута, а также гумата калия на репродуктивную систему самцов и самок и на развитие их потомства в антенатальном периоде. Доказано отсутствие отрицательного действия биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия на становление сенсорно-двигательных рефлексов у крыс в ранний постнатальный период онтогенеза. Биологически активные добавки в организме крыс приводят к увеличению
среднего количества крысят в помете; снижению общей смертности эмбрионов, увеличению
массы и кранио-каудального размера плодов, а также средней массы плаценты, изменяют
динамику созревания сенсорно-двигательных рефлексов и уровень предметного действия,
связанный с мелкой моторикой и эмоциональной сферой.
Доказано, что БАД в организме цыплят-бройлеров способствуют в разной степени увеличению массы тела и снижению накопления тяжелых металлов в мышцах, повышению
концентрацию каротина в сыворотке крови и накоплению витаминов А и В 2 в тканях печени.
Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута в организме кур-несушек способствуют повышению содержания общего белка в сыворотке крови и концентрации кальция и
фосфора в зависимости от длительности поступления в организм. На фоне нагрузки БАД отмечается увеличение массы кур-несушек, массы и плотности яиц, содержания питательных
веществ в яйце, а также утолщение скорлупы.
Теоретическая значимость работы. Установлена роль биомассы спирулины, шротов
семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции функциональных составляющих гомеостаза животных. Результаты нашего исследования обогащают информацию о роли
биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в регуляции
процессов в организме, дополняют известную и вносят новое в теорию влияния БАД на организм животных, раскрывают возможности использования их в производстве животновод6
ческой продукции. Полученная информация может быть использована в учебном процессе
при изучении таких дисциплин, как физиология, этология и экология, а также в практических целях в ветеринарии и птицеводстве.
Практическая значимость. Результаты исследований физиологически обосновывают
возможность применения биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также
гумата калия в регуляции гомеостаза и целесообразность их использования при откорме
цыплят-бройлеров и выращивании кур-несушек.
Методология и методы исследования. Изучение роли биомассы спирулины, шротов
семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции гомеостаза проведено стандартными общепринятыми гематологическими, биохимическими, гистологическими и физиологическими методами.
Предметом исследования служила ответная реакция организма крыс, цыплят-бройлеров
и кур-несушек на введение биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия. Объектами исследования служили белые беспородные крысы, цыплятабройлеры и куры-несушки.
Цифровой материал экспериментов подвергали статистической обработке с определением критерия Стьюдента с использованием программы Sigma Stat 6.0.
Основные положения, выносимые на защиту:
 биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия, как
биологически активные добавки являются активными регуляторами гомеостаза.
 биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия при
внутреннем введении в организм восстанавливают нарушенное равновесие в системе ПОЛАО печени.
 реактивные изменения структуры ткани печени крыс в антенатальном и раннем постнатальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки БАД характеризуются разнообразными
проявлениями, зависящими от биологической активности биомассы спирулины, шрота семян
винограда, шрота семян кунжута и гумата калия.
 потомство крыс, получавших биологически активные добавки, по сравнению с контролем, отличается большим количеством и массой тела, размерами и ускоренным проявлением сенсорно-двигательных рефлексов.
 биологически активные добавки в организме цыплят-бройлеров способствуют в разной степени увеличению массы тела и снижению накопления тяжелых металлов в мышцах,
повышению концентрацию каротина в сыворотке крови и накоплению витаминов А и В2 в
тканях печени. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута и гумат калия у
кур-несушек способствуют, в разной степени, повышению содержания общего белка и концентрации кальция и фосфора в сыворотке крови, увеличению веса и плотности яиц, повышению содержания питательных веществ в яйце и утолщению скорлупы.
Степень достоверности и апробация результатов научных исследований. Цифровой
материал экспериментов подвергали статистической обработке с определением критерия
Стьюдента с использованием программы Sigma Stat 6.0.
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на XXXIV научной конференции студентов и аспирантов (Самара 2007); Медико-фармацевтическом конгрессе, 14-й
Международной фармацевтической выставке «Аптека 2007» (Москва, 2007); Всероссийской
научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы развития пищевой промышленности и общественного питания» (Челябинск 2007); Всероссийской научнотехнической конференции «Современные сервисные технологии» (Самара 2007); «IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы развития транспортного комплекса» (Самара, 2008); «III Всероссийской научно-практической конференций
«Процессы, технологии, оборудование и опыт переработки отходов и вторичного сырья»
(Самара 2008); «XIII конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, 2008); «IV Всероссийской конференции с международным участием «Медико-физиологические проблемы
экологии человека» (Ульяновск, 2011); «Российской научно-практической конференции
7
«Наука, образование, медицина» «Самара, 2011); «Региональной научно-практической
межвузовской конференции «Актуальные задачи ветеринарии, медицины и биотехнологии в
современных условиях и способы их решения»» (Самара, 2013); «Шестой международной
научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные
исследования в физиологии и медицине»» (Санкт-Петербург, 2014); «VII Международной
научно-практической конференции «Теория и практика актуальных исследований» (Краснодар, 2014); «Proceedings of the 2nd European Conference on Biology and Medical Sciences» (August, 2014); «Международной конференции, посвященной 85-летию Самарской научноисследовательской ветеринарной станции Российской академии сельскохозяйственных наук
«Актуальные проблемы развития ветеринарной науки» (Самара, 2014).
Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедре физиологии и патофизиологии ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия имени Н.Э. Баумана», кафедре
ботаники, общей биологии, экологии и биоэкологического образования ФГБОУ ВПО «Поволжская государственная социально-гуманитарная академия», на кафедре биоэкологи и
физиологии сельскохозяйственных животных ФГБОУ ВПО «Самарская государственная
сельскохозяйственная академия», на кафедрах медико-биологических дисциплин и естественнонаучных дисциплин ЧУООВО «Медицинский университет «РЕАВИЗ». Результаты
исследования и методические рекомендации по выращиванию сельскохозяйственной птицы
внедрены в производство в компаниях ООО «Эмульсионные технологии» и ООО «Доминант».
По теме диссертации опубликовано 56 научных работ, из которых 26 – в рекомендуемых
ВАК изданиях.
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Основная часть экспериментальной работы выполнена на кафедре физиологии и патофизиологии ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана». Эксперименты проведены на 2559 белых беспородных крысах массой
190–210 г, на 300 курах несушках и 1050 цыплятах-бройлерах. Всего поставлено 8 серий
опытов в трех повторностях. Схема проведения экспериментов представлена на рисунке 1.
В качестве биологически активных добавок использовали биомассу спирулины, шроты
семян винограда и кунжута, а также гумат калия.
В экспериментах использовали биомассу микроводоросли Spirulina platensis, культивирование которой осуществляется на базе ООО «Неофит» (г. Самара), шроты семян винограда и кунжута, которые вырабатывают на базе ООО «Золотой Корень» (г. Самара) и гумат калия, получаемый компанией ООО «Эмульсионные технологии» из бурых углей, добываемых в городе Липецк.
1. Исследование морфологического и биохимического состава крови крыс при нагрузке
биологически активными добавками проведено на 50 беспородных белых крысах-самцах
массой 190–210 г, разделенных на 5 групп, по 10 в каждой. Одна группа являлась контрольной и получала воду дистиллированную, 2 группа – суспензию биомассы спирулины;
3 группа – суспензию шрота семян винограда; 4 группа – суспензию шрота семян кунжута;
5 группа – раствор гумата калия. Все вещества вводили однократно в желудок с помощью
зонда в виде суспензии (гумат калия в виде раствора), приготовленной на воде дистиллированной в дозе 10 мг/100г массы животного, ежедневно в течение 35 суток. Взятие крови у
крыс проводили до начала эксперимента и на 35 сутки исследований.
В крови определяли: количество эритроцитов, концентрацию гемоглобина, количество
лейкоцитов и лейкоцитарную формулу. В сыворотке крови определяли содержание общего
белка, содержание альбуминов и фракции глобулинов. Количество эритроцитов и лейкоцитов подсчитывали в камере Горяева, содержание гемоглобина определяли в гемометре Сали,
уровень СОЭ – в аппарате Панченко. Подсчет клеток лейкограммы проводили в окрашенных
по Романовскому – Гимзе мазках крови. Общий белок в крови определяли методом Козлова
А.В., Слепышовой В.В. (2007 г.). Содержание альбуминов и фракций глобулинов определяли
рефрактометрически.
8
Этапы исследования
Реактивные изменения
морфологического и
биохимического состава
крови на фоне нагрузки
БАД
Система ПОЛ-АО крыс
на фоне нагрузки БАД в
дозе 5 мг, 10 мг, 15 мг и
20 мг на 100 г массы тела
Система ПОЛ-АО крыс
на фоне нагрузки БАД в
дозе 10 мг на 100 г массы
тела при оксидативном
стрессе
Реактивные изменения
ткани печени крыс в антенатальном и раннем
постнатальном периодах
онтогенеза на фоне
нагрузки БАД
Исследование реактивных изменений репродуктивной системы крыс
и развития их потомства
в антенатальный и ранний постнатальный период онтогенеза на фоне
нагрузки БАД
Предмет исследования
Объект исследования
эритроциты;
гемоглобин;
лейкоцитарная формула;
СОЭ;
общий белок;
альбумины;
фракции глобулинов
общий белок;
альбумины;
фракции глобулинов;
β-липопротеиды;
холестерин;
АсАт; АлАТ; глюкоза;
ПВК; кальций; фосфор
АсАТ; АлАТ; активность
каталазы, СОД, ГП; концентрация МДА
Структура печени 15 и 20
суточных эмбрионов;
печень 4-х месячных
крыс
Гибель зародышей до- и постимплантационная; общая
смертность; масса плодов; кранио-каудальный размер;
коэффициент массы/длины плодов; масса плаценты;
аномалии внутреннего и внешнего развития плодов;
функциональные показатели органов репродуктивной
системы самцов и самок, скорость созревания сенсорнодвигательных рефлексов в ранний постнатальный период у крысят, динамика длины и массы тела крысят
Масса птицы; содержание Cu,
Co, Pb, Zn, Fe, Mn, каротина,
витаминов А и В
Исследование влияния БАД на привесы,
степень накопления тяжелых металлов
и микроэлементов в мясе, а также витаминов группы В в печени цыплятбройлеров
общий белок, кальций, фосфор в сыворотке крови;
масса птицы; масса яйца;
плотность яйца; толщина
скорлупы; состав яйца (жир,
протеин, кальций, фосфор,
каротин)
Исследование
яйценоскости
курнесушек на фоне нагрузки биологически активными добавками
Рисунок 1 – Схема проведения исследований
9
2. Исследование реактивных изменений гематологических показателей цыплятбройлеров на фоне нагрузки биологически активными добавками проводили на базе ФГБОУ
ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия» на 5 суточных цыплятах
кросса Иза s 15 в количестве 250 особей, которые были разделены поровну на 5 групп:
1 группа – интактные птицы, 2 группа – получала биомассу спирулины, третья – гумат калия,
четвертая – шрот семян винограда, пятая – шрот семян кунжута. Материалы исследования на
протяжении всего эксперимента добавляли в рацион в дозе 10 мг/100 г массы цыпленка. Из
каждой группы на 35 сутки эксперимента методом случайной выборки отбирали по 10 цыплят, у которых брали кровь из подкрыльной вены для определения концентрации общего
белка и его фракций, β-липопротеидов, холестерина, АсАТ, АлАТ, глюкозы, ПВК, кальция и
фосфора. Содержание β-липопротеидов оценивали методом М. Буштейна (1956 г.). Холестерин определяли методом Ильке (1952 г.). Определение активности АсАТ и АлАТ проводили
с использование стандартного набора реактивов унифицированным методом РайтманаФренкеля (1957 г.). Глюкозу определяли колориметрически методом М. Самоджи (1967 г.).
Определение ПВК проводили методом П.М. Бабаскина (1981 г.). Концентрацию кальция
определяли по Де-Ваарду (1976 г.), концентрацию фосфора – по Бригсу (1975 г.).
3. Изучение функциональной активности системы ПОЛ-АО печени крыс на фоне
нагрузки биологически активными добавками в различной концентрации у клинически здоровых животных осуществляли на 170 белых беспородных крысах-самцах одного возраста,
массой 190–210 г. Животные были разбиты на 17 групп, по 10 крыс в каждой (таблица 1).
Таблица 1 – Группы экспериментальных животных
Номер группы
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
Схема введения БАД
Интактные животные
Получали биомассу спирулины в дозе 5 мг/100 г массы животного
Получали биомассу спирулины в дозе 10 мг/100 г массы животного
Получали биомассу спирулины в дозе 15 мг/100 г массы животного
Получали биомассу спирулины в дозе 20 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян винограда в дозе 5 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян винограда в дозе 10 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян винограда в дозе 15 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян винограда в дозе 20 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян кунжута в дозе 5 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян кунжута в дозе 10 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян кунжута в дозе 15 мг/100 г массы животного
Получали шрот семян кунжута в дозе 20 мг/100 г массы животного
Получали гумат калия в дозе 5 мг/100 г массы животного
Получали гумат калия в дозе 10 мг/100 г массы животного
Получали гумат калия в дозе 15 мг/100 г массы животного
Получали гумат калия в дозе 20 мг/100 г массы животного
Образцы БАД вводили однократно в желудок с помощью зонда в виде суспензии (гумат
калия в виде раствора), приготовленной на воде дистиллированной в соответствующей концентрации, объемом 1 мл ежедневно в течение 30 суток. На 31 сутки крыс убивали в соответствии с этическими нормами методом декапитации, затем проводили извлечение печени, промывали физиологическим раствором и замораживали. Гомогенат готовили механическим измельчением ткани печени массой 1 г с 9 мл трис-буфера (рН 7,4), со скоростью 5000 об/мин в
сосуде с двойными стенками, постоянно охлаждаемым проточной водой. В гомогенатах определяли активность АсАТ, АлАТ, СОД, каталазы, ГП и концентрацию малонового диальдегида, а также учитывали массу печени. Определение активности каталазы проводили по стандартной методике Королюка М.А. (1988 г.). Определение активности глутатионпероксидазы
осуществляли по методу В.М. Мойн (1986 г.). Активность супероксиддисмутазы определяли
10
по методу В.С. Гуревича (1990 г.). Концентрацию малонового диальдегида определяли по
методу Рогожина В.В. (2004 г.).
4. Изучение функциональной активности системы ПОЛ-АО печени крыс на фоне
нагрузки биологически активными добавками в состоянии оксидативного стресса в сравнении с эталонным антиоксидантом β-каротином осуществляли на 70 белых беспородных
крысах-самцах. Животные были разделены на 7 групп, по 10 крыс в каждой (таблица 2).
Таблица 2 – Группы экспериментальных животных
Материал исследования
Вода дистиллированная
CCl4
Суспензия биомассы спирулины
Суспензия шрота винограда
Суспензия шрота семян кунжута
Гумат калия (водный раствор)
Β-каротин (масляный раствор)
1
+
2
+
+
Номер группы
3 4 5 6
+
+
+
+
+
7
+
+
+
+
+
Исследуемые образцы БАД вводили однократно в желудок с помощью зонда в виде суспензии, приготовленной на воде очищенной (гумат калия вводили в виде раствора, -каротин
использовали в виде аптечного масляного раствора) в дозе 10 мг/100г массы животного, объемом 1 мл ежедневно в течение 30 суток до инициации оксидативного стресса и в течение
6 суток параллельно с введением четыреххлористого углерода. На седьмой день крыс убивали в соответствии с этическими нормами методом декапитации, затем проводили извлечение
печени из которой готовили гомогенат как в предыдущем опыте. Четыреххлористый углерод
также вводили внутримышечно в виде 50 % масляного раствора на абрикосовом масле в дозе
2 г/кг массы тела животного в течение 6 суток. В гомогенатах определяли активность АсАТ,
АлАТ, СОД, каталазы, ГП и концентрацию малонового диальдегида, а также определяли
массу печени.
5. Исследование реактивных изменений ткани печени крыс в антенатальном и раннем
постнатальном периодах онтогенеза проводили на 50 (35 – самок, 15 – самцов) белых беспородных крысах, которые были поделены поровну на 5 групп по 10 крыс в каждой (7 – самок
и 3 – самца). Первая группа – интактные животные, вторая – получала биомассу спирулины,
третья – шрот семян винограда, четвертая – шрот семян кунжута, пятая – гумат калия. Материалом для гистоструктурного анализа послужили ткани печени эмбрионов 15
и 21-суточного развития, полученные от крыс контрольной и экспериментальных групп, которые в течение 30 суток до наступления беременности и в период беременности в качестве
нагрузки внутрижелудочно получали суспензии биомассы спирулины, шрота семян винограда, шрота семян кунжута и гумат калия в виде раствора в дозе 10 мг/100 г массы тела, объемом 1 мл. Суспензии и раствор готовили на дистиллированной воде. Интактные животные
получали воду аналогичного объема. Также мы исследовали печень взрослых половозрелых
крыс, которые в течение 30 суток получали указанные БАД. Контролем послужил материал
от интактных крыс аналогичных сроков развития.
Для получения самок с датированным сроком беременности использовали
4–4,5-месячных крыс, которым, с учетом эстрального цикла, вечером подсаживали самцов, а
утром брали влагалищные мазки. Так как у крыс оплодотворение происходит в 1–2 часа ночи, считали день обнаружения спермиев в мазке первым днем беременности.
По окончанию эксперимента животных подвергали декапитации после, и извлекали печень. Фиксацию печени взрослых крыс и эмбрионов проводили в 10 %-м забуференном
формалине, затем осуществляли проводку гистологического материала с помощью аппарата
гистологической проводки замкнутого типа Tissue-Tek® Vip 5 junior, а после заливали в парафиновые блоки, из которых готовили срезы толщиной 6–7 мкм. Срезы ткани печени окра11
шивали гематоксилином и эозином. Также проведено иммуногистохимическое исследование
печени с применением набора моноклональных антител к ингибитору апоптоза (Bcl-2) и антигену пролиферации (Ki-67). Типирование проводили с использованием антител фирмы
DACO (Дания).
Гистологические исследования проведены классическим методом светопольной микроскопии. Фотографическую съемку образцов ткани печени проводили с помощью светового
микроскопа «Микромед» (Россия) при увеличении 40х, 100х, 200х и 400х.
6. Исследование изменений репродуктивной системы крыс и развития их потомства в
антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки БАД проведено на белых беспородных
половозрелых клинически здоровых 448 крысах (320 самок и 128 самцов), которые были
разделены поровну на 36 групп и в соответствии с групповой принадлежностью, а так же
установленным сроком получали ежедневно внутрижелудочно биомассу спирулины, шроты
семян винограда и кунжута в виде суспензии и гумат калия в виде раствора в дозе 10 мг/100 г
массы тела, объемом 1 мл. Схема эксперимента представлена в таблице 3.
Таблица 3 – Схема проведения эксперимента
Номер группы
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Схема введения БАД
Самки и самцы получали БАД в течение 21 суток до спаривания.
Самки получали БАД в течение 21 суток до оплодотворения, самцы получали
воду дистиллированную
Самцы получали БАД в течение 21 сутки до спаривания с самками, самки
получали воду дистиллированную.
Самки получали БАД 21 сутки до наступления беременности, и до 13 суток
беременности
Самки получали БАД 21 сутки до наступления беременности, а также с 14
по 20 сутки беременности
Самки получали БАД только с 1 по 13 сутки беременности
Самки получали БАД только с 14 по 20 сутки беременности
Контрольная группа животных
Самцы получали БАД на протяжении 41 суток
Суспензии и раствор БАД готовили на дистиллированной воде и вводили животным
ежедневно в соответствии с групповой принадлежностью и установленным сроком внутрижелудочно в дозе 10 мг/100 г массы тела, объемом 1 мл. Контрольным животным вводили
дистиллированную воду объемом 1 мл. За животными вели ежедневное наблюдение.
Для получения самок с датированным сроком беременности использовали методику
предыдущего эксперимента. Беременных крыс содержали в отдельных клетках, обеспечив их
необходимой подстилкой для устройства гнезда. С первого дня беременности за животными
устанавливали наблюдение. Контролировали состояние и поведение самок, регистрировали
продолжительность беременности. Учет результатов эксперимента проводили на 20-й день
беременности путем эвтаназии животных. В яичниках подсчитывали количество желтых тел,
в матке – места имплантации, число живых и погибших зародышей. Учитывали также состояние плаценты. Эмбриональный материал внимательно осматривали, оценивали анатомическое строение плодов, определяли массу плодов и кранио-каудальные размеры.
Показателями негативного действия считали эмбриональную (пред- и постимплантационную) гибель плодов и отставание в развитии, проявляющееся уменьшением массы тела и
кранио-каудальных размеров плодов. Предимплантационную эмбриональную смертность
рассчитывали по разнице между количеством желтых тел и количеством мест имплантации в
матке. Постимплантационную гибель определяли по разнице между числом имплантаций и
числом живых плодов.
Изучали также общую эмбриональную смертность, размер помета, выход живых плодов.
12
7. Изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов крыс в ранний постнатальный период онтогенеза проводили на крысятах, полученных от самок, получавших в
течение 30 суток до наступления беременности биологически активные добавки в качестве
нагрузки. В эксперименте участвовало 65 крыс (50 самок и 15 самцов), массой 190–210 г, которые были разделены поровну на 5 групп: 1 группа – интактные животные; 2 – получала
шрот семян кунжута, 3 – гумат калия; 4 – шрот семян винограда; 5 – биомассу спирулины. В
соответствии с групповой принадлежностью крысы получали ежедневно внутрижелудочно
биологически активные добавки в виде суспензии (гумат калия в виде раствора) в дозе 10
мг/100 г массы тела, объемом 1 мл. Суспензии и раствор готовили на дистиллированной воде.
Оценку формирования рефлексов у крысят проводили классическими методами и методом «Открытое поле». Также контролировали динамику массы их тела и изменение длины
тела (без хвоста).
8. Исследование влияния БАД на изменение живой массы, степень накопления тяжелых
металлов и минеральных соединений в мясе, а также витаминов группы В в печени цыплятбройлеров проведены в весенне-летний период. Были сформированы 5 групп семисуточных
цыплят-бройлеров кросса Иза s 15 (по 20 птиц в группе). Цыплята-бройлеры всех групп получали комбикорма согласно технологии откорма. Цыплята контрольной группы получали
только комбикорм, во второй группе цыплята с 10 дневного возраста в течение 31 дня дополнительно получали гумат калия в дозе 10 мг/100 г массы, цыплята третьей группы получали биомассу спирулины, цыплята четвертой группы – шрот семян винограда, а пятой –
шрот семян кунжута.
В ходе эксперимента определяли массу тела птицы. По окончанию эксперимента в
мышцах устанавливали содержание железа, меди, цинка, кобальта, марганца и свинца, а
также определяли содержание каротина, витаминов А и В2 в печени.
9. Исследование яйценоскости кур-несушек на фоне нагрузки биологически активными
добавками проводили на курах кросса Хайсекс белый, начиная с 70-суточного возраста. Куры-несушки в предкладковый период содержались в клеточных батареях КБУ-3. В возрасте
102 суток птицу перевели в промышленный цех. Плотность посадки – 5 птиц в клетке типа
ККТ. Для определения влияния БАД на состояние минерального обмена у кур- несушек в
125-суточном возрасте в сыворотке крови определяли концентрацию общего кальция, фосфора, уровень общего белка. Также проводили исследование морфологических показателей
яиц. В составе яйца определяли сырой жир, сырой протеин, кальций, фосфор, каротиноиды
классическими методами.
Для опыта было сформировано пять групп по 20 кур в возрасте 70 суток. Птицы во всех
группах получали комбикорм ПК-4. Экспериментальным группам в комбикорм вводили
биологически активные добавки: первой группе – биомассу спирулины; второй – гумат калия; третьей – шрот семян винограда; четвертой – шрот семян кунжута. Все БАД вводили в
рацион в дозе 10 мг/100 г массы птицы. Продолжительность опыта составила 90 суток.
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Изменения морфологического и биохимического состава крови крыс
при нагрузке биологически активными добавками
Динамика изученных показателей крови представлена в таблице 4.
Установлено, что на фоне длительного поступления биомассы спирулины в организм
крыс увеличивается количество эритроцитов на 21,1 %, концентрация гемоглобина –
на 21,9 %, количество лейкоцитов – на 13,1 %, палочкоядерных нейтрофилов – на 27,1 % и
снижается количество эозинофилов на 9,5 % по сравнению с контролем. Организм крыс на
поступление биомассы спирулины отвечает изменением биохимического состава крови: увеличивается концентрация общего белка на 12,9 %, альбуминов – на 10,6 %, α2-глобулинов –
на 20,0 % и снижается концентрация γ-глобулинов на 15,8 %.
13
Таблица 4 – Морфологические и биохимические показатели периферической крови крыс на фоне
нагрузки БАД
Показатель
Эритроциты, ·1012/л
Гемоглобин,
г/л
Лейкоциты, ·109/л
Палочкоядерные
нейтрофилы, %
Сегментоядерные
нейтрофилы, %
Эозинофилы, %
Моноциты, %
Лимфоциты, %
Общий белок, г/л
Альбумины, %
α1
α2
Глобулины,
%
β
γ
Сутки
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
0
35
Контроль
5,80±0,21
6,55±0,26
74,5±3,5
87,0±3,4
11,03±0,39
12,33±0,44
1,73±0,06
1,70±0,06
20,83±0,67
20,24±0,71
1,33±0,04
1,47±0,04
1,83±0,06
1,67±0,05
65,31±2,29
66,01±2,31
61,3±2,39
66,5±2,92
34,1±1,26
36,8±1,29
35,8±1,39
31,5±1,32
6,5±0,21
5,5±0,15
17,1±0,65
18,6±0,67
6,5±0,23
7,6±0,28
Спирулина
5,71±0,20
7,93±0,251
75,4±2,6
106,1±3,41
10,67±0,42
13,95±0,451
1,71±0,06
2,16±0,081
20,88±0,69
22,21±0,69
1,17±0,04
1,33±0,041
1,85±0,06
1,75±0,06
67,44±2,49
67,27±2,62
65,8±2,43
75,1±2,481
34,6±1,18
40,7±1,131
33,3±1,39
29,3±0,83
7,3±0,26
6,6±0,221
17,9±0,61
17,0±0,71
6,9±0,22
6,4±0,261
Виноград
5,93±0,18
8,12±0,301
77,2±2,4
115,2±3,11
10,91±0,34
13,21±0,49
1,69±0,06
2,23±0,081
20,79±0,72
22,66±0,811
1,50±0,05
1,50±0,05
1,85±0,06
1,33±0,041
64,19±2,25
66,65±2,20
61,9±2,29
67,2±2,82
35,6±1,32
41,9±1,511
34,2±1,29
28,7±1,12
6,8±0,23
5,4±0,18
16,9±0,73
17,3±0,65
6,5±0,24
6,7±0,251
Кунжут
5,78±0,23
7,42±0,211
68,7±2,2
100,2±3,61
11,09±0,40
12,04±0,47
1,52±0,05
1,85±0,06
20,77±0,69
21,84±0,72
1,33±0,04
1,47±0,05
1,67±0,05
1,51±0,051
65,97±2,18
67,03±2,55
63,7±2,61
66,9±1,94
36,9±1,25
39,5±1,15
33,5±1,27
29,9±1,14
6,7±0,26
5,9±0,22
16,9±0,52
17,6±0,51
6,0±0,20
7,1±0,26
Гумат
5,85±0,19
6,81±0,24
83,7±2,3
94,6±3,7
10,89±0,41
14,22±0,411
1,50±0,05
2,01±0,061
20,55±0,66
22,39±0,76
1,33±0,04
1,17±0,041
1,79±0,06
1,42±0,051
66,21±2,05
66,94±2,48
64,3±2,25
75,9±2,351
36,5±1,50
42,9±1,671
33,1±1,29
28,4±1,11
6,9±0,24
6,2±0,221
17,1±0,53
17,2±0,57
6,4±0,25
5,3±0,21
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Длительная нагрузка шротом семян винограда способствует достоверному увеличению
количества эритроцитов в крови крыс на 24,0 %, концентрации гемоглобина – на 32,4 %, количества палочкоядерных нейтрофилов – на 31,2 % и сегментоядерных нейтрофилов – на
12,0 %, а также снижением моноцитов на 20,4 % по сравнению с контролем. Эффект воздействия шрота семян винограда на биохимический состав крови крыс наиболее ярко проявляется достоверным увеличением количества альбуминов на 13,9 % и снижением концентрации γ-глобулинов на 11,8 %.
На нагрузку шротом семян кунжута организм крыс отвечает достоверным увеличением
количества эритроцитов в крови на 13,3 %, концентрации гемоглобина – на 15,2 %, снижением количества моноцитов на 9,6 %. Содержание общего белка и его фракций в сыворотке крови крыс на фоне нагрузки шротом семян кунжута не имели значительных откло- нений
от контрольных значений.
Организм крыс на длительное поступление гумата калия отвечает достоверным увеличением в крови количества лейкоцитов на 15,3 %, палочкоядерных нейтрофилов – на 18,2 %,
снижением количества эозинофилов на 20,4 % и количества моноцитов на 15,0 %, повышением концентрации общего белка на 14,1 %, альбуминов – на 16,6 %, α2-глобулинов –
на 12,7 % и снижением количества γ-глобулинов на 30,3 %.
Таким образом, на нагрузку биологически активными добавками организм крыс отвечает
разнообразными приспособлениями морфологического и биохимического состава крови, которые выражаются в изменениях параметров крови в пределах физиологической нормы, что
позволяет подбирать комбинации и схемы применения БАД для поддержания гомеостаза и
коррекции патологических состояний организма.
14
3.2 Реактивные изменения биохимического состава крови цыплят-бройлеров
на фоне нагрузки биологически активными добавками
Результаты исследования представлены в таблице 5.
Таблица 5 – Биохимический состав сыворотки крови цыплят-бройлеров на фоне нагрузки БАД
Показатель
Контроль
38,41±1,49
56,34±2,37
11,61±0,48
13,97±0,52
18,08±0,81
42,83±1,79
1,92±0,075
197,39±7,69
29,77±1,61
14,21±0,55
Общий белок, г/л
Альбумины, %
α-глобулины, %
β-глобулины, %
γ-глобулины, %
β-липопротеиды, г/л
Холестерин, ммоль/л
АсАТ, нкат/л
АлАт, нкат/л
Глюкоза, ммоль/л
Пировиноградная
597,71±24,51
кислота, мкмоль/л
Кальций, ммоль/л
2,59±0,098
Фосфор, ммоль/л
2,29±0,094
Спирулина
41,25±1,94
50,88±1,84
13,65±0,721
11,42±0,411
24,05±1,111
31,71±1,361
3,61±0,1521
255,69±10,741
42,21±1,731
13,05±0,49
Группа животных
Виноград
40,39±1,36
52,32±1,59
12,21±0,71
13,37±0,55
22,10±0,891
26,47±1,031
3,03±0,1301
234,15±8,891
31,57±1,23
13,11±0,46
Кунжут
43,51±1,871
51,12±1,64
13,41±0,681
11,26±0,461
24,21±1,291
27,99±1,151
2,96±0,1151
223,36±8,931
37,95±1,591
13,47±0,49
Гумат
42,15±1,77
51,23±2,04
14,20±0,741
12,74±0,51
21,83±1,041
29,13±1,091
3,13±0,1281
217,74±8,27
34,68±1,411
12,88±0,45
463,64±19,47
375,12±15,761
417,95±16,721
509,31±21,391
3,91±0,1561
2,87±0,1121
4,47±0,1741
2,93±0,1051
4,19±0,1591
2,64±0,1001
3,58±0,1431
2,73±0,1171
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Установлено, что при длительном поступлении в организм цыплят-бройлеров биомассы
спирулины в сыворотке крови увеличивается количество α-глобулинов на 17,6 % и γ- глобулинов на 32,9 %, снижается количество β-глобулинов на 18,3 % и концентрация β- липопротеидов на 25,96 %, увеличивается концентрация холестерина на 88,02 %, АсАТ – на 29,54 %,
АлАТ – на 41,79 %, кальция – на 50,96 % и фосфора – на 25,33 % (р < 0,05). Длительная нагрузка гуматом калия способствует увеличению количества α-глобулинов на 22,3 % и
γ-глобулинов на 20,7 %, снижает концентрацию β-липопротеидов на 31,99 % и ПВК – на
14,79 %, увеличивает концентрацию холестерина на 63,02 %, АлАТ – на 16,49 %, кальция –
на 38,22 % и фосфора – на 19,21 % (р<0.05). Организм цыплят- бройлеров на длительное поступление шрота семян винограда отвечает увеличением в крови количества γ-глобулинов на
16,7 %, снижением концентрации β-липопротеидов на 38,19 % и ПВК на 37,24 %, увеличением концентрации холестерина на 57,80 %, АсАТ – на 18,62 %, кальция – на 72,58 % и фосфора – на 27,94 % (р < 0,05). Длительная нагрузка шротом семян кунжута способствует увеличению в сыворотке крови концентрации общего белка на 13,3 %, количества α-глобулинов –
на 15,5 % и γ-глобулинов – на 33,9 %, снижению количества β-глобулинов на 19,4 %, концентрации β-липопротеидов – на 34,64 % и ПВК – на 30,07 %, увеличению концентрации холестерина на 54,17 %, АсАТ – на 13,16 %, АлАТ – на 27,47 %, кальция – на 61,77 % и фосфора –
на 15,22 % (р < 0,05).
Таким образом, на нагрузку биологически активными добавками организм цыплятбройлеров отвечает разнообразными приспособлениями биохимического состава крови.
3.3 Функциональная активность системы ПОЛ-АО печени крыс
на фоне нагрузки биологически активными добавками в различной концентрации
Установлено, что введение в организм животных биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в разных дозировках не отражается на массе печени.
Введение БАД в дозе 5 мг/100 г массы животного не выявило достоверных изменений в
активности и концентрации изучаемых ферментов по отношению к интактным животным.
Установлено, что нагрузка крыс в дозе 10 мг/100 г массы тела биомассой спирулины, шрота15
ми семян винограда и кунжута не влияет на активность аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы, а в группе животных, получавших гумат калия, вызывает возрастание
активности АсАТ и АлАТ по сравнению с интактными животными на 29,1 % и 12,7 % соответственно.
Активность ферментов каталаза, супероксиддисмутаза и глутатионпероксидаза у здоровых животных, на фоне нагрузки биомассой спирулины была ниже, чем в контроле на 14,44;
7,11 и 6,01 % соответственно.
На внутрижелудочное введение шрота семян винограда организм крыс отвечает выраженным снижением активности каталазы, супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы на
17,19; 11,39 и 9,4 % соответственно. Уровень антиоксидантных ферментов у животных, получавших шрот семян кунжута, почти полностью совпадает с результатами, полученными в
группе интактных крыс, за исключением активности СОД, которая была достоверно ниже на
13 %. Концентрация малонового диальдегида у животных всех экспериментальных групп
была примерно на одном уровне, без достоверных различий.
Нагрузка БАД в дозе 15 мг/100 г массы животного проводит к следующим изменениям в
системе ПОЛ-АО печени:
 Активность АсАТ в группе животных, получавших биомассу спирулины и шрот семян кунжута, не отличалась от контроля, а в группах, получавших шрот семян винограда и
гумат калия, была выше на 14,04 и 37,19 % соответственно.
 Активность АлАТ в группах животных, получавших биомассу спирулины и шроты,
почти совпадала с контролем, а группе, получавшей гумат калия, была выше на 18,48 %.
 Активность каталазы в группах животных, получавших шрот семян кунжута и гумат
калия, не существенно отличалась от контроля, а в группах, получавших биомассу спирулины и шрот семян винограда, была ниже на 17,64 и 21,65 % соответственно.
 Активность СОД в группах животных, получавших биомассу спирулины и гумат калия, не отличалась от контроля, а в группах, получавших шроты семян винограда и кунжута,
была достоверно ниже на 13,15 и 15,21 % соответственно.
 Активность ГП отличалась от контроля только в группе животных, получавших шрот
семян винограда, она была ниже на 10,89 % по отношению к интактным животным.
 Концентрация МДА во всех группах была примерно на одном уровне.
Нагрузка БАД в концентрации 20 мг/100 г массы животного проводит к следующим изменениям в системе ПОЛ-АО печени:
 Активность АсАТ в группах животных, получавших биомассу спирулины, не отличалась от контроля, а в группах, получавших шроты семян винограда и кунжута, а также гумат
калия была выше на 12,63; 12,98 и 56,49 % соответственно.
 Активность АлАТ в группах животных, получавших биомассу спирулины и шроты,
не существенно отличалась от контроля, а группе, получавшей гумат калия, была выше на
22,49 %.
 Активность каталазы в группах животных, получавших шрот семян кунжута и гумат
калия, была не существенно ниже, чем в контроле, а в группах, получавших биомассу спирулины и шрот семян винограда, была ниже на 19,58 и 21,92 % соответственно.
 Активность СОД в группах животных, получавших биомассу спирулины и гумат калия, также не отличалась от контроля, а в группах, получавших шроты семян винограда и
кунжута, была достоверно ниже на 13,53 и 14,83 % соответственно.
 Активность ГП отличалась от контроля только в группе животных, получавших шрот
семян винограда, она была ниже на 10,77 % по отношению к интактным животным.
 Концентрация МДА во всех группах была примерно на одном уровне.
На основании полученных результатов можно сделать вывод, что биомассу спирулины и
шрот семян винограда в дальнейших экспериментах следует использовать в дозе 10 мг/100 г
массы тела животного, что соответствует суточной норме потребления биологически активных соединений содержащихся в этих субстанциях. Гумат калия также следует использовать
в концентрации 10 мг/100 г массы тела животного, так как нагрузка в дозе 5 мг/100 г массы
16
не приводит к существенным сдвигам в системе ПОЛ-АО, а в концентрации 15 и 20 мг/100 г
массы тела животного ведет к патологическим сдвигам активности трансаминаз.
Шрот семян кунжута также решено использовать в дозе 10 мг/100 г массы животного,
так как нагрузка им клинически здоровых животных приводит к смещению только одного из
изучаемых нами показателей системы ПОЛ-АО и достоверные смещения уже наблюдаются в
этой концентрации. Исходя из вышесказанного, решено использовать эти БАД в качестве
корректоров оксидативного стресса.
3.4 Функциональная активность системы ПОЛ-АО печени крыс на фоне нагрузки
биологически активными добавками в состоянии оксидативного стресса
в сравнении с эталонным антиоксидантом β-каротином
Результаты сравнительного изучения системы ПОЛ-АО в тканях печени крыс на 7-й
день после шестидневного внутримышечного введения четыреххлористого углерода на фоне
употребления биологически активных добавок и β-каротина приведены в таблице 6.
Таблица 6 – Показатели системы ПОЛ-АО на фоне оксидативного стресса при внутрижелудочном
введении суспензий биологически активных добавок и β-каротина
Группа животных
Показатель
АсАТ,
мкмоль/с∙л
АлАТ,
мкмоль/с∙л
Каталаза,
мкат/л
СОД, АЕД/мг
белка печени
ГП, мкмоль/
мин/мг белка
печени
МДА,
мкмоль/л
Контроль
ССl4
Спирулина Шрот семян Шрот семян
+ ССl4
винограда + кунжута +
ССl4
ССl4
Гумат
калия +
ССl4
β-каротин
+ ССl4
0,285±0,012 1,989±0,0671 1,439±0,0421,2
1,717±0,0711
1,541±0,0571
1,933±0,0661 1,698±0,0541
1,596±0,058 2,284±0,0761
1,898±0,0721
1,958±0,0701
1,901±0,0701
2,291±0,085 2,037±0,0691
29,31±1,621
39,63±1,331
36,15±1,101
35,78±1,211
51,37±1,91
33,12±1,191
37,55±1,551
1,308±0,057 0,706±0,0231
0,997±0,0421 0,896±0,0331,2 0,888±0,0291,2 0,799±0,0241,2 1,010±0,0391
1,680±0,053 1,036±0,0411
1,245±0,0471
7,44±0,221
6,08±0,201,2
3,95±0,15
1,178±0,0511 1,311±0,0471,2
6,58±0,171
7,01±0,24
1,101±0,042 1,168±0,0451
6,23±0,231,2
6,82±0,161
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы; 2 – по сравнению с показателями животных, группы, получавшей β-каротин
Активность аспартатаминотрансферазы в группе крыс, принимавших только четыреххлористый углерод, возросла примерно в 7 раз относительно интактных животных; в группе,
получавших суспензию биомассы спирулины на фоне яда, активность возросла –в 5 раз, в
группе, получавшей шрот семян винограда – в 6 раз, в группе, получавшей шрот семян кунжута – в 5,4 раза, в группе, получавшей гумат калия – в 6,8 раза, а в группе, получавшей
β-каротин – в 6 раз.
Следовательно, наиболее эффективно способствуют снижению роста активности аспартатаминотрансферазы в тканях печени, при воздействии тетрахлорметана, суспензия биомассы спирулины и шрот семян кунжута, действуя эффективнее β-каротина.
В группе крыс, получавшей дистиллированную воду, на фоне введения четыреххлористого углерода, активность аланинаминотрансферазы возросла на 43,11 % относительно интактных животных; в группе, получавшей помимо яда, суспензию биомассы спирулины, активность АлАТ возросла на 18,9 %, в группе, получавшей шрот семян винограда, активность
АлАТ возросла на 22,6 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 19,1 %, в группе,
получавшей гумат калия – на 43,5 %, а в группе, получавшей β- каротин – на 27,6 %.
17
Таким образом, биомасса спирулины, шрот семян винограда и шрот семян кунжута способствуют снижению роста активности аланинаминотрансферазы в плазме крови при воздействии тетрахлорметана эффективнее β-каротина на 8,7; 5 и 8,5 % соответственно.
Активность каталазы в группе крыс, получавшей воду дистиллированную, на фоне введения четыреххлористого углерода, снизилась на 42,94 % относительно контроля; в группе,
получавшей, помимо четыреххлористого углерода, суспензию биомассы спирулины активность каталазы снизилась на 22,9 %; в группе, получавшей шрот семян винограда на фоне
яда – на 29,6 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 30,3 %, в группе, получавшей гумат калия – на 35,5 %, а в группе, получавшей β-каротин – на 26,90 %.
Таким образом, выявлено, что биомасса спирулины несколько эффективнее чем β-каротин
нормализуют активность каталазы в тканях печени при воздействии тетрахлорметана.
Активность супероксиддисмутазы в группе крыс, получавшей дистиллированную воду,
на фоне введения четыреххлористого углерода, снизилась на 46,02 % относительно интактных животных; в группе, получавшей, помимо четыреххлористого углерода, суспензию
биомассы спирулины, активность СОД снизилась на 23,8 %, в группе, получавшей помимо
яда, шрот семян винограда – снизилась на 31,5 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута, – на 32,1 %, в группе, получавшей гумат калия – на 38,9 %, в группе, получавшей
β-каротин – на 22,78 %.
Следовательно, по данному параметру ни один из протекторов природного происхождения не превосходит эффективность β-каротина.
В этом эксперименте активность глутатионпероксидазы в группе крыс, получавшей воду
дистиллированную, на фоне введения четыреххлористого углерода, снизилась на 38,33 %
относительно интактных животных; в группе, получавшей, помимо четыреххлористого углерода, суспензию биомассы спирулины, активность ГП снизилась на 25,9 %, в группе, получавшей помимо тетрахлорметана, шрот семян винограда – на 29,9 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 22,0 %, в группе, получавшей гумат калия – на 34,5 %, а в
группе, получавшей β-каротин – на 30,5 %.
Установлено, что биомасса спирулины и шрот семян кунжута эффективнее чем β- каротин нормализуют активность глутатионпероксидазы в тканях печени при воздействии тетрахлорметана, существенно повышая ее на 4,6 и 8,5 % соответственно.
Также выявлено, что в группе крыс, получавшей воду очищенную, на фоне введения четыреххлористого углерода, концентрация малонового диальдегида возросла на 88,35 % относительно интактных животных; в группе, получавшей помимо яда, суспензию биомассы спирулины, концентрация МДА возросла на 53,9 %, в группе, получавшей шрот семян винограда,
концентрация МДА возросла на 66,6 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута –
на 77,5 %, в группе, получавшей гумат калия – на 57,7 %, а в группе, получавшей β-каротин –
на 72,7 %.
Установлено, что биомасса спирулины, шрот семян винограда и гумат калия способствуют снижению роста концентрации малонового диальдегида в тканях печени при воздействии тетрахлорметана эффективнее β-каротина на 18,8; 6,1 и 15 % соответственно.
По результатам проведенных экспериментов можно сделать вывод, что нагрузка крыс
биомассой спирулины, шротом семян винограда и кунжута, а также гуматом калия не оказывает негативного влияния на систему ПОЛ-АО печени здоровых крыс в дозе 10 мг/100 г массы
тела животного, а дополнительное их введение животным, находящихся в состоянии оксидативного стресса, нормализует нарушенное равновесие в системе перекисного окисления липидов-антиоксидантов печени, то есть способствует восстановлению нарушенного гомеостаза.
3.5 Реактивные изменения ткани печени крыс в антенатальном и раннем
постнатальном периодах онтогенеза на фоне нагрузки БАД
По результатам проведенного эксперимента установлено:
 на фоне нагрузки биомассой спирулины у плодов крыс печень более продолжительное время сохраняет роль органа кроветворения. У взрослых крыс печень на нагрузку сус18
пензией спирулины отвечает увеличением числа митотически делящихся гепатоцитов и слоев клеток наружной терминальной пластинки;
 на фоне нагрузки шротом семян кунжута у плодов крыс на 21 сутки эмбриогенеза в
ткани печени отмечается усиленная пролиферация клеток желчевыводящих протоков и их
расширение, удлиняются сроки эритропоэза у эмбрионов до момента рождения;
 на длительную нагрузку гуматом калия, ткань печени плодов крыс отвечает ускоренным формированием печеночных балок и угнетением эритропоэза, имеются двуядерные и
полиплоидные гепатоциты в центральной части долек печени;
 на нагрузку суспензией шрота семян винограда, печень крыс отвечает отсутствием
ингибиторов апоптоза в гепатоцитах периферической части долек печени, что проявляется
повышением синтетической активности клеток, синтезирующих альбумины и другие белки
плазмы крови, усиливается пролиферация клеток центральной части печени.
3.6 Изменения репродуктивной системы крыс и развития их потомства
в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки биологически
активными добавками
В результате изучения реактивных изменений репродуктивной системы крыс и их
потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки шротом семян кунжута
установлено:
Среднее количество плодов в помете в 7 экспериментальной группе соответствует контролю, а в остальных группах достоверно больше: в 1 группе – на 22,4 %, во 2 – на 26,2 %, в
3 группе – 18,7 %, в 4 – на 31,8 %, в 5 группе – на 24,3 % и в 6 группе – на 13,1 %.
Количество желтых тел из расчета на одну самку в 1, 2, 3, 6 и 7 экспериментальных
группах на одном уровне с контролем. Среднее количество желтых тел из расчета на одну
самку в 4 группе больше на 21,0 %, а в пятой группе – на 12,3 % относительно контроля.
Количество мест имплантации из расчета на одну самку в группах 3 и 7 соответствовало
контролю, а в группах 1, 2, 4, 5 и 6 было больше на 19,82; 24,32; 41,44; 27,93 и 12,62 % соответственно.
Доимплантационная гибель зародышей во всех экспериментальных группах достоверно
ниже, чем в контроле на: в первой группе – 33,33 %, во второй – на 59,26 %, в третьей –
на 18,52 %, в четвертой – на 62,96 %, в пятой – на 51,85 %, в шестой – на 48,15 % и в седьмой –
на 55,56 %.
Постимплантационная гибель зародышей в 6 группе соответствует контролю. В группах
1 и 3 ниже, чем в контроле на 50 %, а во второй группе ниже на 25 %. В группах 4, 5 и 7
постимплантационная гибель зародышей выше, чем в контрольной группе в 4; 2,25 и 1,75
раза соответственно.
Общая смертность зародышей во всех экспериментальных группах достоверно ниже, чем
контрольной группе: в первой группе ниже на 35,48 %, во второй – на 54,84 %, в третьей – на
22,59 %, в четвертой – на 16,13 %, в пятой – на 29,03 %, в шестой – ниже на 41,94 % и в седьмой группе – ниже на 38,71 %.
Средняя масса плодов у животных 3, 6 и 7 групп не отличалась от контроля. В остальных
группах масса плодов достоверно выше, чем у животных контрольной группы: в 1 группе –
на 18,3 %, во 2 группе – на 15,3 %, в 4 группе – на 17,5 %, а в 5 группе – на 13,1 %.
Кранио-каудальный размер плодов в группах 3, 6 и 7 соответствует контролю, а в группах 1, 2, 4 и 5 достоверно больше на 15,6; 18,3; 19,8 и 12, 6 % соответственно относительно
контроля.
При этом коэффициент массы/длины плодов во всех группах соответствует контролю.
Средняя масса плаценты в группах 2, 6 и 7 соответствует контролю. В группах 1, 4 и 5
масса плаценты больше, чем в контроле на 13,2; 28,9 и 23,7 % соответственно, а в группе 3
она меньше, чем в контроле на 10,5 %.
Плодово-плацентарный индекс во всех группах, кроме 4 группы соответствует контролю. В 4 группе он на 11,1 % выше, чем в контроле.
19
В группах 1, 2, 4 и 7 аномалий развития не установлено. В контрольной группе выявлен
1 плод с нарушениями внешнего развития (0,9 %), в группе 3 – 1 плод (0,8 %) и в группе 5 –
2 плода (1,6 %), и в группе 6 – 2 плода (1,7 %).
Аномалии в развитии внутренних органов плодов установлены в контрольной группе у 7
плодов (6,1 %), во 2 и 5 группах по 1 плоду (0,7 % и 0,8 %), в 3 группе у 2 плодов (1,6 %) и в
6 группе у 3 плодов (2,5 %).
Задержка оссификации грудной кости установлена у 1 плода (0,9 %) в 7 экспериментальной группе. Задержка оссификации подъязычной кости зафиксирована у 2 плодов в контрольной (1,7 %), а также в 3 и 6 экспериментальных группах (1,6 и 1,7 % соответственно).
Задержка оссификации костей пясти и плюсны зафиксирована у 1 плода во 2, 5 и 6 экспериментальных группах (0,7; 0,8 и 0,8 % соответственно).
Полнокровие сосудов печени установлено у 1 плода (0,8 %) в 6 группе, кровоизлияния в
печени зафиксированы у 1 плода (0,8 %) в 3 группе, подкожные кровоизлияния – у 1 плода
во 2 и 6 группах (0,7 и 0,8 % соответственно). Кровоизлияния в почках зафиксированы у 1
(0,8 %) плода в 6 экспериментальной группе, в желудке и кишечнике – у 1 плода (0,8 %) в 3 и
5 группах. Кровоизлияние в мозговых оболочках наблюдалось у 7 (6,7 %) плодов контрольной группы.
Результаты оценки состояния репродуктивной системы самцов крыс показали, что массовый коэффициент семенников в 1 экспериментальной равен контрольной группе, а в 9
группе достоверно больше на 10,6 %.
Массовый коэффициент придаточных половых желез в экспериментальных группах не
отличается от контроля. Массовый коэффициент предстательной железы в 9 экспериментальной группе выше, чем в контрольной на 12,1 %, а в 1 группе равен контролю. У крыс,
получавших кунжутный шрот, патологические формы спермиев встречались реже, чем в
контроле на 19,4 % в 1 экспериментальной группе и реже на 16,0 %, чем в 9 группе.
Масса яичников крыс 1 экспериментальной группы больше на 11,51 % по сравнению с
контролем.
В 1 экспериментальной группе количество атретических тел яичников меньше на 20,6 %
по сравнению с контролем; граафовых пузырьков больше на 18,5 % по сравнению с контролем; фолликул с двумя и более слоями гранулезных клеток больше на 29,0 %. Однако, фолликул с одним слоем гранулезных клеток меньше на 4,2 % по сравнению с контролем.
В результате изучения реактивных изменений репродуктивной системы крыс
и их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки гуматом калия
установлено:
Среднее количество плодов в помете в 3 и 7 группах соответствует контролю. В остальных группах оно достоверно больше, чем в контроле: в 1 группе – на 24,3 %, во 2 –
на 13,1 %, в 4 группе – 33,6 %, в 5 – на 28,0 % и в 6 группе – на 19,6 %.
Количество желтых тел из расчета на одну самку во 2, 3, 6 и 7 группах соттвествует контролю. При этом в 1 группе среднее количество желтых тел из расчета на одну самку больше
на 16,66 %, в 4 группе – на 20,29 %, а в пятой группе – на 15,22 % относительно контроля.
Количество мест имплантации из расчета на одну самку в группах 3 и 7 соответствует контролю, а в группах 1, 2, 4, 5 и 6 больше на 31,53; 21,62; 38,74; 27,03 и 18,92 % соответственно.
Доимплантационная гибель зародышей в 7 группе соответствует контролю. В третьей
группе доимплантационная гибель зародышей больше, чем в контрольной группе на 59,3 %,
а в 1, 2, 4, 5 и 6 группах гибель ниже, чем в контроле, на 44,4; 37,0; 55,6; 33,3 и 59,3 % соответственно.
Постимплантационная гибель зародышей в 5 и 6 группах соответствует контролю, в 1, 2
и 4 группах существенно выше, чем в контрольной 3,25, 3,5 и 2,75 раза соответственно. В 3
экспериментальной группе она на 75 % ниже, чем в контроле.
Общая смертность зародышей во 2 и 7 группах соответствует контрольной группе, а в 1,
4, 5 и 6 группах достоверно ниже, чем в контроле на 9,7; 25,8; 29,0 и 51,6 % соответственно.
Во второй группе общая смертность зародышей превышала уровень контроля на 41,9 %.
20
Средняя масса плодов у животных 3 группы не отличалется от контроля. В остальных
группах масса плодов достоверно выше, чем у животных контрольной группы: в 1 группе –
на 25,6 %, во 2 группе – на 29,2 %, в 4 группе – на 34,3 %, в 5 группе – на 57,2 %, в 6 группе –
на 13,1 % и в 7 группе – на 19,0 %.
Кранио-каудальный размер плодов в группах 3 и 7 соответствует контролю, а в группах
1, 2, 4, 5 и 6 достоверно больше на 13,3; 16,4; 19,8; 17,9 и 9,9 % соответственно относительно
контроля.
Коэффициент массы/длины плодов в 3 и 6 группах соответствует контролю, а в 1, 2 и 7
группах достоверно выше на 11,5 %, в 4 группе – на 13,5 % и в 5 группе – на 17,3 % чем в
контроле.
Средняя масса плаценты в группах 3, 6 и 7 равна контролю, а в остальных группах достоверно больше: в 1 группе – на 15,8 %, во 2 группе – на 21,1 %, в 4 группе – на 26,3 % и
в 5 группе – на 18,4 % относительно контроля.
Плодово-плацентарный индекс в 1, 2, 3, 4 и 6 группах примерно одинаков и соответствует
контролю. В 5 и 7 группах он достоверно ниже, чем в контроле на 11,1 и 18,5 % соответственно.
В группах 2, 5 и 6 аномалий развития не наблюдается. В контрольной группе выявлен
1 плод с нарушениями внешнего развития (0,9 %), в группе 1 – 1 плод (0,8 %), в группе 3 –
4 плода (3,8 %), в группе 4 – 2 плода (1,5 %) и в группе 7 – 4 плода (1,9 %) .
Аномалии в развитии внутренних органов плодов выявлены в контрольной группе
у 7 плодов (6,1 %), во 2 группе – у 1 плода (0,8 %), в 3 группе – у 3 плодов (2,8 %), в 4 группе –
у 4 плодов (3,0 %), в группе 5 – у 1 плода (,7 %) и в 6 группе – у 5 плодов (3,8 %).
Задержка оссификации грудной кости наблюдалась у 3 плодов (2,3 %) в 6 экспериментальной группе. Задержка оссификации подъязычной кости наблюдалась у 2 плодов (1,7 %)
контрольной группы, 1 плода в 1 и 7 экспериментальных группах (0,8 % и 1,0 % соответственно). Задержка оссификации костей пясти и плюсны наблюдалась у 2 плодов (1,9 %) в 3
и 7 экспериментальных группах.
В ходе подробного обследования внутренних органов плодов, установлено наличие кровоизлияния в печени у 1 плода во 2, 3 и 5 группах (0,8; 0,9 и 0,7 % соответственно), а также у
2 плодов (1,5 %) в 4 и 6 группах. Подкожные кровоизлияния не наблюдаются. Кровоизлияние в почках зафиксировано у 2 плодов в 3 и 4 группах (1,9 и 1,5 % соответственно), а также
у 3 плодов (2,3 %) в 6 группе. Кровоизлияние в желудке и кишечнике не зафиксировано.
Кровоизлияние в мозговых оболочках наблюдаются у 7 (6,7 %) плодов контрольной группы.
Массовый коэффициент семенников в 1 экспериментальной группе равен контролю, а в
9 группе достоверно выше на 10,6 %.
Массовый коэффициент придаточных половых желез в 1 экспериментальной группе
также равен контролю, а в 9 группе достоверно выше на 10,3 %. Массовый коэффициент
предстательной железы во всех группах был одинаков.
У крыс, получавших гумат калия, патологические формы спермиев в 1 группе встречались реже, чем в контроле на 10,3 %, а в 9 группе – реже на 17,0 %.
По результаты оценки состояния репродуктивной системы самок крыс было выявлено,
что масса яичников крыс экспериментальной группы совпадает с контролем.
В 1 экспериментальной группе количество атретических тел яичников меньше на 17,3 %
по сравнению с контролем; граафовых пузырьков больше на 10,8 % по сравнению с контролем; фолликул с двумя и более слоями гранулезных клеток больше на 43,3 %. Однако, количество фолликул с одним слоем гранулезных клеток в экспериментальной группе было почти как в контроле.
В результате изучения реактивных изменений репродуктивной системы крыс и их
потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки шротом семян винограда
установлено:
Среднее количество плодов в помете в группах 2, 3, 4, 6, и 7 соответствует контролю. В
1 группе среднее количество крысят в помете по сравнению с контрольными животными достоверно меньше на 14,00 %, а в пятой группе – достоверно больше на 11,21 %.
21
Количество желтых тел из расчета на одну самку во 3, 4, 5, 6 и 7 группах равно контролю. В 1 группе среднее количество желтых тел из расчета на одну самку больше на 13,04 %,
а во второй группе – на 17,39 % относительно контроля.
Количество мест имплантации из расчета на одну самку в группах 3, 5, 6 и 7 соответствует контролю, а в группах 1, 2 и 4 выше на 15,32; 18,02 и 19,82 % соответственно.
Доимплантационная гибель зародышей в 1 и 5 группах соответствует контролю. Во второй экспериментальной группе наблюдалась большая доимплантационная гибель зародышей, чем в контрольной группе на 14,8 %, а в 3, 4, 6 и 7 группах гибель ниже, чем в контроле, на 18,5; 55,6; 22,2 и 33,3 % соответственно.
Постимплантационная гибель зародышей в 5 группе соответствует контролю, а во всех
остальных группах существенно выше: в 1 группе в 9 раз, во второй в 6,5 раз, в 3 и 7 группах
1,75 раза, в 4 группе в 4,25 раза и в 6 группе в 2 раза относительно контроля.
Общая смертность зародышей в 3, 4, 5 и 6 группах соответствует контрольной группе, а
в 1 группе выше почти в 2 раза, чем в контроле, во 2 группе выше на 83,9 % чем в контроле.
В седьмой группе общая смертность зародышей ниже на 19,4 % по отношению к контролю.
Средняя масса плодов у животных 1, 3, 4, 6 и 7 групп не отличается от контроля. В
остальных группах масса плодов достоверно выше, чем у животных контрольной группы: во
2 группе – на 13,1 %, в 5 группе – на 16,1 %.
Кранио-каудальный размер плодов в группах 3, 4, 6 и 7 соответствует контролю, а в
группах 1,2, и 5 достоверно больше на 11,8; 18,7 и 12,6 % соответственно относительно контроля (р < 0,05).
При этом коэффициент массы/длины плодов во всех группах одинаков и соответствует
контролю.
Средняя масса плаценты в группах 1, 3, 4, 6 и 7 соответствует контролю, а в остальных
группах достоверно больше: во 2 группе – на 13,2 %, в 5 группе – на 23,7 % относительно
контроля.
Плодово-плацентарный индекс во всех группах примерно одинаков и соответствует контролю.
Результаты внешнего осмотра плодов показали, что в группах 3, 5 и 7 аномалий развития
не наблюдается. При этом в контрольной группе выявлен 1 плод с нарушениями внешнего
развития (0,9 %), в группе 1 – 4 плода (4,1 %) и в группе 2 – 2 плода (1,9 %), в группе 4 –
2 плода (1,6 %) и в группе 6 – 5 плодов (4,2 %) .
Аномалии развития внутренних органов плодов установлены в контрольной группе у 7
плодов (6,1 %) в 1 группе – у 3 плодов (3,1 %), во 2 группе – у четырех плодов (3,7 %), в 3 и
5 группах по одному плоду (0,9 и 0,8 % соответственно) и в 6 группе – у трех плодов (2,5 %).
Задержка оссификации грудной кости выявлена у 2 плодов (1,7 %) в 6 экспериментальной группе и 1 плода (0,9 %) в 7 экспериментальной группе. Задержка оссификации подъязычной кости наблюдается у 2 плодов (1,7 %) контрольной группы и 1 плода (0,9 %)
в 7 группе. Задержка оссификации костей пясти и плюсны наблюдается у 1 плода (0,8 %)
6 группы и 2 плодов (1,8 %) 7 группы.
В ходе подробного обследования внутренних органов плодов, установлено наличие полнокровия сосудов печени во 2 группе у двух плодов (1,85 %); кровоизлияния в печени у одного
плода в 3 и 5 группах (0,9 % и 0,8 % соответственно). Подкожные кровоизлияния наблюдаются у
1 (1,03 %) плода в 1 группе. Кровоизлияние в почках зафиксировано у одного плода в 1
(1,03 %) группе, кровоизлияния в желудке и кишечнике зафиксированы у двух плодов (1,85 %)
во 2 группе, кровоизлияния в мозговых оболочках наблюдаются у семи (6,7 %) плодов контрольной группы, у одного плода (1,03 %) в 1 группе и трех плодов (2,5 %) в 6 группе.
Результаты оценки состояния половых органов самцов крыс показали, что массовый коэффициент семенников, придаточных половых желез и предстательной железы у 1 и 9 групп
получавших виноградный шрот практически совпадает с контрольной группой, а патологические формы спермиев, у этих же групп, встречаются чаще на 2,9 % и 5,7 % соответственно.
22
По результаты оценки состояния репродуктивной системы самок крыс, на фоне нагрузки
шротом семян винограда, было выявлено, что масса яичников крыс экспериментальной
группы совпадает с контролем.
В 1 группе количество атретических тел яичников больше на 12,37 % по сравнению с
контролем; граафовых пузырьков больше на 4,62 % по сравнению с контролем; фолликул с
двумя и более слоями гранулезных клеток меньше на 8,25 %, количество фолликул с одним
слоем гранулезных клеток в экспериментальной группе больше 20,41 %.
В результате изучения реактивных изменений репродуктивной системы крыс и их
потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки биомассой спирулины
установлено:
Установлено, что среднее количество плодов в помете в экспериментальных группах 3, 6
и 7 соответствует контролю. В 1 группе среднее количество плодов в помете по сравнению с
контрольными животными больше на 15,9 %, во второй группе – на 14,0 %, в 4 группе – на
16,8 %, а в 5 – на 14,9 %.
Количество желтых тел из расчета на одну самку во всех экспериментальных группах
равно контролю. Количество мест имплантации из расчета на одну самку в группах 3, 6 и
7 так же соответствует контролю, а в группах 1, 2, 4 и 5 выше на 12,6; 13,5; 10,8 и 11,7 % соответственно.
Доимплантационная гибель зародышей во всех экспериментальных группах ниже, чем в
контроле: в 1 группе – на 62,9 %, во 2 группе – на 59,3 %, в 3 – на 25,9 %, в 4 и 5 группах – на
48,1 %, в 6 – на 37,0 %, в 7 группе – на 25,9 %.
Постимплантационной гибели зародышей практически не наблюдалось ни в одной из
групп животных, участвовавших в эксперименте.
Установлено, что общая смертность зародышей связана с доимплантационной гибелью,
но во всех экспериментальных группах была достоверно ниже, чем в контроле.
Средняя масса плодов у животных 3 и 6 групп не отличалась от контроля. В остальных
группах масса плодов существенно выше, чем у животных в контроле: в 1 группе – на 32,8 %,
в группе 2 – на 30,6 %, в группе 4 – на 29,9 %, в группе 5 – на 31,4 %, в группе 7 – на 18,2 %.
Кранио-каудальный размер плодов в группах 3, 6 и 7 соответствует контролю, а в группах 1,2, 4 и 5 достоверно выше на 18,7; 22,1; 17,9; и 17, 6 % соответственно относительно
контроля.
Коэффициент массы/длинны плодов во всех экспериментальных группах равен контролю.
Средняя масса плаценты в группах 3 и 7 соответствует контролю, а в остальных группах
достоверно выше: в 1 группе – выше на 26,3 %, в группе 2 – на 21,0 %, в группе 4 – на 34,2 %,
в группе 5 – на 15,6 % и в 6 группе – на 13,1 %.
Плодово-плацентрный индекс достоверно выше на 11,1 %, по сравнению с контролем
только в 5 экспериментальной группе.
Результаты внешнего осмотра плодов показали, что в группах 1, 2, 4, 6, и 7 аномалий
развития не наблюдается. В контрольной группе выявлен 1 плод с нарушениями внешнего
развития (0,9 %), в группе 3 – 1 плод (0,83 %) и в группе 5 – 2 плода (1,39 %).
Аномалии в развитии внутренних органов обнаружены в контрольной группе у 7 крысят
(6,1 %) в 1 группе – у одного плода (0,74 %), в 5 группе – у трех плодов (2,09 %) и в 6 группе –
у двух плодов (1,5 %).
Задержка оссификации грудной кости наблюдается только у 1 плода (0,71 %) во 2 экспериментальной группе. Задержка оссификации подъязычной кости наблюдается у двух плодов (1,7 %) в контрольной и трех плодов в третьей (1,7 %) группах. Задержка оссификации
костей пясти и плюсны наблюдается у одного плода (0,8 %) 6 группы.
В ходе подробного обследования внутренних органов плодов, установлено наличие кровоизлияния в печени у 1 плода в 5 группе (0,8 %), подкожные кровоизлияния у 3 (2,09 %)
плодов в 6 группе, кровоизлияния в почках зафиксированы у 1 плода в 1 (0,74 %) группе, в
мозговых оболочках – у 7 (6,7 %) плодов контрольной группы.
23
Массовые коэффициенты семенников, придаточных половых желез и предстательной
железы у 1 и 9 групп, получавших биомассу спирулины, совпадают с показателями контроля, а патологические формы спермиев, у этих же групп, встречаются реже на 19,6 % и
20,7 % соответственно.
По результаты оценки состояния репродуктивной системы самок крыс, на фоне нагрузки
биомассой спирулины, выявлено, что масса яичников крыс экспериментальной группы на
13,20 % больше, чем в контроле.
В 1 экспериментальной группе количество атретических тел яичников больше на 14,73 %
по сравнению с контролем; граафовых пузырьков больше на 9,23 % по сравнению с контролем; фолликул с двумя и более слоями гранулезных клеток больше на 10,26 %, количество
фолликул с одним слоем гранулезных клеток в экспериментальной группе больше 6,44 %.
3.7 Скорость созревания сенсорно-двигательных рефлексов крыс
в ранний постнатальный период онтогенеза
Оценку формирования рефлексов у крысят проводили классическими методами и методом «Открытое поле».
По результатам эксперимента установлено, что введение биологически активных добавок в организм крыс стабилизирует психическое состояние животных, изменяет динамику
созревания сенсорно-двигательных рефлексов, уровень предметного действия или теменнопремоторный, связанный с мелкой моторикой и эмоциональной сферой.
3.8 Влияния БАД на изменение живой массы, степень накопления тяжелых металлов
и микроэлементов в мясе, а также витаминов группы В в печени цыплят- бройлеров
Результаты по оценке набора массы цыплятами на фоне употребления биологически активных добавок представлены в таблице 7.
Установлено, что цыплята экспериментальных групп набирали вес быстрее, чем цыплята
контрольной группы. Наиболее эффективные приросты массы наблюдались в группе птиц,
получавших гумат калия и биомассу спирулины.
Таблица 7 – Динамика прироста массы тела (г) цыплят-бройлеров на фоне употребления БАД
Возраст 1 - Контроль
23 - Шрот
4 - Шрот
5 - Гумат
% к контролю
цыплят,
Спирулина
семян
семян
калия
2
3
4
сутки
винограда
кунжута
10
433,51±17,77 438,12±16,65 433,15±16,89 435,71±18,29 437,39±16,18 101,06 99,97 100,51
20
824,31±30,49 968,73±41,661 941,67±32,02 925,51±39,79 984,36±38,3911 117,52 114,23 112,28
30
1189,46±46,39 1373,91±59,081 1282,41±47,45 1298,65±45,45 1409,84±57,801 115,51 107,81 109,18
45
1610,67±61,21 1809,06±61,511 1783,22±62,41 1754,39±63,16 1928,42±79,071 112,32 110,71 108,92
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
5
100,89
119,42
118,53
119,73
У цыплят по окончании периода выращивания (45 суток) в мышцах было определено содержание некоторых тяжелых металлов и микроэлементов (таблица 8).
Таблица 8 – Содержание тяжелых металлов и микроэлементов (мг/кг) в мясе цыплят-бройлеров
Показатель
Медь
Кобальт
Свинец
Цинк
Железо
Марганец
Контроль
3,01±0,126
2,13±0,085
0,295±0,012
97,42±4,19
34,78±1,43
1,94±0,074
Спирулина
3,34±0,130
1,97±0,077
0,261±0,0101
66,91±2,741
57,21±2,401
3,34±0,1341
Группа животных
Виноград
3,74±0,1351
1,81±0,0581
0,255±0,0081
70,53±2,681
45,34±1,631
2,09±0,077
Кунжут
3,91±0,1601
2,06±0,060
0,298±0,010
79,47±2,941
61,44±2,211
3,57±0,1211
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
24
Гумат
3,52±0,1441
1,99±0,080
0,274±0,011
77,25±3,091
52,13±2,091
3,07±0,1171
Концентрация меди в мясе цыплят-бройлеров в группе, получавшей биомассу спирулины, выше, чем в контрольной группе на 11 %, в группе, получавшей гумат калия – на 17 %, в
группе, получавшей шрот семян винограда – на 24 %, а в группе, получавшей шрот семян
кунжута – выше на 30 %. Концентрация кобальта у цыплят контрольной группы и группы,
получавшей шрот семян кунжута, несколько превышала предельно допустимую норму. У
цыплят получавших биомассу спирулины и гумат калия концентрация кобальта была на одном уровне (различия не превышали 3 %) и лежала в пределах допустимой нормы. У цыплят, получавших шрот семян винограда, концентрация кобальта достоверно ниже, чем у
цыплят контрольной группы на 15 %.
Концентрация свинца в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, ниже, чем в контрольной группе на 11,5 %, в группе, употреблявшей гумат калия –
на 7,2 %, а в группе, употреблявшей шрот семян винограда – на 13,5 %. В группе, получавшей шрот семян кунжута концентрация свинца незначительно выше, чем у цыплят контрольной группы.
Концентрация цинка в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, ниже, чем в контрольной группе на 31,3 %, в группе, употреблявшей гумат калия –
ниже на 20,7 %, в группе, употреблявшей шрот семян винограда, – на 27,6 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута, – на 17,4 %.
Концентрация железа в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, выше, чем в контрольной группе на 64,5 %, в группе, употреблявшей гумат калия –
на 49,9 %, в группе, употреблявшей шрот семян винограда – на 30,4 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 76,7 %.
Концентрация марганца в мясе цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, выше, чем в контрольной группе на 72 %, в группе, употреблявшей гумат калия –
на 58 %, а в группе, употреблявшей шрот семян винограда – на 7,7 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута, – на 84,0 %.
Содержание каротина, витаминов А и В2 в сыворотке крови цыплят-бройлеров после
нагрузки в течение 35 дня биологически активными добавками представлено в таблице 9.
Таблица 9 – Содержание каротина в сыворотке крови, витаминов А и В2 в тканях печени цыплятбройлеров
Показатель
Каротин (мкмоль/л)
Витамин А (мкг/г)
Витамин В2 (мкг/г)
Контроль
1,95±0,082
223,47±8,04
14,94±0,58
Спирулина
5,93±0,2491
267,46±10,971
18,69±0,771
Группа
животных
Виноград
4,41±0,1581
257,26±10,031
17,35±0,711
Кунжут
3,67±0,1431
241,31±8,93
19,97±0,761
Гумат
1,99±0,0,79
228,65±9,60
15,76±0,65
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Концентрация каротина в сыворотке крови цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей
биомассу спирулины, выше, чем в контрольной группе на 204 %, в группе, употреблявшей гумат калия – практически равна контролю (различия не превышают 3%), в группе, употреблявшей шрот семян винограда – выше на 126 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута –
выше на 88 %.
Концентрация витамина А в печени цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу спирулины, выше, чем в контрольной группе на 16 %, в группе, употреблявшей гумат калия – практически равна контролю (различия не превышают 3%), в группе, употреблявшей
шрот семян винограда – на 15 %, а в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 8 %.
Концентрация витамина В2 печени цыплят-бройлеров в группе, употреблявшей биомассу
спирулины, выше, чем в контрольной группе на 25 %, в группе, употреблявшей гумат калия – на
5 %, в группе, употреблявшей шрот семян винограда – на 16 %, а в группе, получавшей шрот
семян кунжута – на 34 %.
25
3.9 Яйценоскость кур-несушек на фоне нагрузки биологически активными добавками
Результаты исследования биохимических показателей сыворотки крови кур-несушек
представлены в таблице 10.
На момент начала эксперимента содержание общего белка, кальция и фосфора в сыворотке крови кур было примерно на одном уровне во всех группах. На 100 день опыта в экспериментальных группах концентрация общего белка была существенно выше, чем в контроле: в группе получавшей биомассу спирулины – на 25,4 %, в группе, получавшей гумат
калия – на 28,1 %, в группе, получавшей шрот семян винограда – на 19,3 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 17,2 %. На 130 день исследования в экспериментальных
группах птиц, получавших биомассу спирулины и шрот семян кунжута концентрация общего белка была достоверно выше, чем в контроле на 13,1 % и 13,2 % соответственно. В
остальных экспериментальных группах концентрация общего белка была не значительно
выше, чем в контроле. На 160 сутки исследования в экспериментальных группах птиц концентрация общего белка была не значительно выше, чем в контроле.
Достоверное увеличение концентрации кальция в сыворотке крови птиц экспериментальных групп по отношению к контролю наблюдалось только со 130 суток исследований в
группах, получавших шроты: в группе птиц, получавшей шрот семян винограда на 13,2 % и в
группе, получавшей шрот семян кунжута на 17,6 %.
К 160 суткам опыта концентрация кальция в сыворотке крови птиц всех экспериментальных групп была существенно выше, чем в контроле: в группе получавшей биомассу спирулины – на 31,7 %, в группе, получавшей гумат калия – на 27,9 %, в группе, получавшей
шрот семян винограда – на 38,5 %, в группе, получавшей шрот семян кунжута – на 39,3 %.
Таблица 10 – Биохимические показатели сыворотки крови кур-несушек на фоне нагрузки биологически активными добавками
Срок
эксперимента
70
100
130
160
70
100
130
160
70
100
130
160
Примечание: 1
Группа животных
Спирулина
Виноград
Кунжут
Гумат
Общий белок, г/л
38,54±1,23
38,97±1,36
38,71±1,47
38,66±1,43
38,63±1,31
47,37±1,52
59,42±2,081
56,51±2,031
55,51±1,991
60,71±2,251
61,94±2,35
69,08±2,56
68,44±2,60
70,03±2,241
70,12±2,521
65,28±2,42
71,08±2,49
72,13±2,38
71,75±2,80
68,31±2,53
Кальций, ммоль/л
2,28±0,08
2,25±0,09
2,26±0,07
2,22±0,07
2,31±0,08
2,51±0,09
2,68±0,08
2,74±0,10
2,71±0,09
2,59±0,10
1
1
3,19±0,12
3,28±0,11
3,37±0,12
3,61±0,11
3,75±0,12
1
1
1
3,79±0,12
4,99±0,17
5,25±0,19
5,28±0,16
4,85±0,181
Фосфор, ммоль/л
2,21±0,07
2,28±0,09
2,19±0,07
2,31±0,08
2,25±0,08
2,27±0,09
2,43±0,09
2,54±0,091
2,58±0,091
2,61±0,101
1
1
1
2,51±0,09
2,69±0,08
2,87±0,10
2,93±0,11
3,01±0,11
1
1
1
2,64±0,10
2,94±0,11
3,09±0,13
3,22±0,12
3,31±0,12
– P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Норма
Контроль
43–59
2,45–
3,49
2,26–
2,58
Концентрация фосфора на протяжении всего периода исследований в группе птиц, получавших гумат калия, была незначительно выше чем в контроле, а в остальных экспериментальных группах достоверно выше: на 100 сутки эксперимента в группе птиц, получавших
биомассу спирулины – на 11,9 %, в группе птиц, получавших шрот семян винограда – на
13,7 %, в группе птиц, получавших шрот семян кунжута – на 14,9 %; на 130 сутки эксперимента в группе птиц, получавших биомассу спирулины – на 14,3 %, в группе птиц, получавших шрот семян винограда – на 16,7 %, в группе птиц, получавших шрот семян кунжута – на
19,9 %; на 160 сутки эксперимента в группе птиц, получавших биомассу спирулины – на
26
17,0 %, в группе птиц, получавших шрот семян винограда – на 22,0 %, в группе птиц, получавших шрот семян кунжута – на 25,4 %;
Результаты изучения влияния БАД на массу тела и характеристики яиц приведены в таблице 11. Учет продуктивности кур проводили в течение 30 суток.
Таблица 11 – Масса кур-несушек и состояние яиц на фоне нагрузки биологически активными добавками
Показатель
Масса тела птицы, г
Начало яйцекладки
Масса яйца, г
Плотность яйца, г/см3
Толщина скорлупы, мм
Контроль
1309±45,82
130 день
50,34±1,61
2,12±0,07
0,531±0,019
Группа животных
Спирулина
Виноград
Кунжут
1358±46,17
1331±50,58
1339±48,20
124 день
125 день
130 день
60,41±1,931
56,34±2,081
55,97±2,071
2,42±0,081
2,31±0,08
2,30±0,09
0,555±0,020
0,558±0,021
0,560±0,019
Гумат
1367±48,75
127 день
58,44±2,041
2,36±0,091
0,547±0,020
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Масса тела кур-несушек на момент начала яйцекладки в экспериментальных группах
была незначительно выше, чем в контроле. Яйцекладка в группе, получавшей биомассу спирулины, началась на 6 суток раньше, чем в контроле, в группе, получавшей гумат калия – на
3 суток раньше, в группе, получавшей шрот семян винограда – на 5 суток раньше, а шрот семян кунжута – в один день с контролем.
Количество яиц во всех экспериментальных группах за период наблюдения было существенно выше, чем контроле: в группе получавшей биомассу спирулины – на 15 штук, в
группе, получавшей гумат калия – на 17, получавшей шрот семян винограда – на 9 штук, в
группе, получавшей шрот семян кунжута – на 10 штук.
Масса яйц, полученных от птиц экспериментальных групп была больше, чем в контроле:
в группе птиц, получавших биомассу спирулины – на 20,0 %, в группе птиц, получавших гумат калия – на 16,1 %, получавших шрот семян винограда – на 11,9 %, получавших шрот семян кунжута – на 11,2 % (р < 0,05).
Плотность яиц в группах птиц, получавших биомассу спирулины и гумат калия, была
достоверно выше, чем в контроле на 14,2 и 11,3 % соответственно. Толщина скорлупы у яйц,
полученных от кур экспериментальных групп была несколько больше, чем в контроле.
Результаты исследования состава яйц представлены в таблице 12.
Таблица 12 – Содержание питательных веществ в яйце
Показатель
Сырой жир, %
Сырой протеин, %
Кальций, %
Фосфор, %
Каротиноиды, мкг/г
Контроль
8,49±0,27
10,55±0,37
0,046±0,001
0,161±0,005
0,151±0,005
Группа животных
Спирулина
Виноград
Кунжут
8,61±0,33
8,73±0,29
8,63±0,32
11,32±0,41
10,76±0,41
10,59±0,40
0,055±0,0021 0,063±0,0021 0,062±0,0011
0,159±0,006
0,186±0,0061 0,189±0,0071
1
0,157±0,006
0,153±0,006
0,169±0,006
Гумат
8,91±0,32
11,77±0,421
0,051±0,0021
0,172±0,007
0,151±0,005
Примечание: 1 – P < 0,05 по сравнению с показателями животных контрольной группы.
Содержание сырого жира в яйцах всех групп было примерно на одном уровне. Содержание сырого протеина в яйце выше на 11,6 % по отношению к контролю в группе птиц, получавших гумат калия (р < 0,05).
Содержание кальция в яйце у всех экспериментальных птиц выше, чем в контроле: в
группе птиц, получавших биомассу спирулины – на 19,6 %, в группе птиц, получавших гумат калия – на 10,9 %, в группе птиц, получавших шрот семян винограда – на 36,9 %, в группе птиц, получавших шрот семян кунжута – на 34,8 % (р < 0,05).
27
Содержание фосфора в яйце в группах птиц, получавших шроты семян винограда и кунжута, достоверно выше на 15,5 и 17,4 % соответственно по отношению к контролю.
Содержание каротиноидов в яйце в группе птиц, получавших биомассу спирулины достоверно выше, чем в контроле на 11,9 %. В остальных группах содержание каротиноидов в
яйцах было примерно на одном уровне с контролем.
Установлено, что введение БАД в организм цыплят-бройлеров способствует в разной
степени набору массы тела и снижению накопления тяжелых металлов в мышцах, повышает
концентрацию каротина в сыворотке крови и накоплению витаминов А и В 2 в тканях печени.
У кур-несушек способствует повышению содержания общего белка в сыворотке крови и
концентрации кальция и фосфора в зависимости от длительности поступления в организм,
На фоне нагрузки БАД отмечается увеличение живой массы кур-несушек, увеличение веса и
плотности яиц, а также утолщение скорлупы и содержания питательных веществ в яйце.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия в дозе
10 мг/100 г массы тела животного при внутрижелудочном поступлении в организм в течение
35 суток являются активными модуляторами гомеостаза, проявляющимися:
1.1. Увеличением количества эритроцитов и концентрации гемоглобина: при поступлении биомассы спирулины на 21,1 и 21,9 %, шрота семян винограда – на 24,0 и 32,4 %, шрота
семян кунжута – на 15,2 и 13,3 % соответственно.
1.2. Увеличением количества лейкоцитов в крови на фоне нагрузки биомассой спирулины и гуматом калия на 13,1 и 15,3 % соответственно, что повышает резистентность организма животных.
1.3. Увеличением палочкоядерных нейтрофилов при поступлении биомассы спирулины, шрота семян винограда и гумата калия на 27,1; 31,2 и 18,9 % соответственно, повышая
устойчивость организма к действию патогенных агентов. Количество сегментоядерных
нейтрофилов на фоне нагрузки шротом семян винограда увеличивается на 12,0 %.
1.4. Возрастанием концентрации общего белка в крови на фоне нагрузки биомассой
спирулины, шротом семян кунжута и гуматом калия на 12,9 % (крысы), 13,3 % (цыплятабройлеры) и 14,1 % (крысы) соответственно, что свидетельствует о повышении усвояемости
питательных веществ и об уменьшении распада белков в организме.
1.5. Уменьшением концентрация γ-глобулинов в крови крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины и шротом семян винограда на 15,8 и 11,8 % соответственно, а при нагрузке
гуматом калия – увеличением на 30,3 %. А в крови цыплят-бройлеров увеличением концентрации γ-глобулинов на фоне нагрузки биомассой спирулины на 32,9 %, шротом семян винограда – на 16,7 %, шротом семян кунжута – на 33,9 % и гуматом калия – на 20,7 %.
1.6. Возрастанием концентрации альбуминов в крови крыс на фоне нагрузки биомассой
спирулины, шротами семян виноград и кунжута на 10,6; 13,9 и 16,6 % соответственно, что
обеспечивает интенсификацию водного обмена в организме за счет повышения синтетической активности гепатоцитов.
1.7. Увеличением концентрации γ-глобулинов при поступлении биомассы спирулины,
шрота семян кунжута и гумата калия на 17,6; 15,6 и 22,3 % соответственно, повышая гуморальный иммунитет.
1.8. Увеличением концентрации α2-глобулинов в крови крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины и гумата калия на 20,0 и 12,7 %, интенсифицируя деятельность транспортных
белков, транспорт ретинола и кальциферола.
1.9. Возрастанием концентрации β-глобулинов при поступлении шрота семян кунжута
и биомассы спирулины в крови цыплят бройлеров на 19,4 и 18,3 % соответственно, интенсифицируя транспорт холестерола, ионов меди и витамина В12 в организме.
1.10. Снижением концентрации β-липопротеидов и увеличением концентрации холестерина в крови цыплят-бройлеров на фоне нагрузки биомассой спирулины на 25,96 и 88,02 %,
28
шротом семян винограда – на 38,19 и 57,80 %, шротом семян кунжута – на 34,64 и 54,17 % и
гуматом калия – на 31,99 и 63,02 % соответственно, что свидетельствует высокой активности
гепатоцитов и смещении равновесия в системе ПОЛ-АО в сторону образования антиоксидантов и снижения концентрации кетоновых тел.
1.11. Увеличением концентрации АсАТ в крови цыплят-бройлеров фоне нагрузки биомассой спирулины на 29,54 %, шротом семян винограда – на 18,62 % и шротом семян кунжута – на 13,16 %, а также концентрация АлАТ на фоне нагрузки биомассой спирулины на
41,79 %, шротом семян кунжута – на 27,47 % и гуматом калия – на 16,49 %, что свидетельствует об интенсификации белкового обмена.
1.12. Возрастанием концентрации кальция и фосфора в крови цыплят-бройлеров на фоне
нагрузки биомассой спирулины на 50,96 и 25,33 %, шротом семян винограда – на 72,58 и
27,94 %, шротом семян кунжута – на 61,77 и 15,22 % и гуматом калия – на 38,22 и 19,21 %
соответственно.
2. Нагрузка организма клинически здоровых крыс биомассой спирулины, шротами семян
винограда и кунжута, а также гуматом калия в дозах 5, 10, 15 и 20 мг на 100 г массы тела не
вызывает негативных изменений в системе ПОЛ-АО печени. При этом интенсифицируется
распад продуктов перекисного окисления и снижается активность антиоксидантных ферментов за счет проявления биологической активности компонентов БАД, что подтверждается биохимическими параметрами крови. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а
также гумат калия обладают противотоксическими свойствами, способствуют нормализации
гомеостаза в системе ПОЛ-АО в состоянии оксидативного стресса, вызванного тетрахлорметаном. Оптимальная дозировка для применения БАД составляет 10 мг/100 г массы тела.
3. На фоне нагрузки биомассой спирулины беременных самок у эмбрионов печень более
продолжительное время сохраняет роль органа кроветворения. В печени взрослых крыс увеличивается число митотически делящихся гепатоцитов и количество слоев клеток наружной
терминальной пластинки.
На фоне нагрузки шротом семян кунжута на 21 сутки эмбриогенеза в ткани печени отмечается усиленная пролиферация клеток желчевыводящих протоков, удлинение сроков
эритропоэза у эмбрионов до момента рождения, усиливается желчевыделительная функция
печени и синтез альбуминов.
При длительном поступлении гумата калия ткань печени эмбрионов отвечает ускоренным формированием печеночных балок, имеются двуядерные и полиплоидные гепатоциты в
центральной части долек печени.
На нагрузку суспензией шрота семян винограда, ткань печени крыс отвечает отсутствием
ингибиторов апоптоза, повышается синтетическая активность клеток, синтезирующих альбумины и белки плазмы крови, усиливается пролиферация клеток центральной части органа.
4. Биомасса спирулины, шроты семян винограда и кунжута, а также гумат калия не оказывают патологического действия на репродуктивную систему самцов и самок и на развитие
их потомства в антенатальном периоде онтогенеза.
5. Нагрузка организма крыс биомассой спирулины, шротами семян винограда и кунжута, а также гуматом калия увеличивает среднее количество крысят в помете и количество
мест имплантации из расчета на самку; снижает общую смертность эмбрионов, увеличивает
массу и краниокаудальный размер плодов, среднюю массу плаценты, а также изменяет динамику созревания сенсорно-двигательных рефлексов у плодов и уровень предметного действия, связанный с мелкой моторикой и эмоциональной сферой.
6. На введение биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата
калия организм цыплят-бройлеров отвечает в разной степени увеличением массы тела и снижением накопления тяжелых металлов в мышцах, повышением концентрации каротина в сыворотке крови и накоплением витаминов А и В2 в тканях печени. В организме кур- несушек
повышается содержание общего белка в сыворотке крови и концентрации кальция и фосфора в
зависимости от длительности поступления БАД в организм, увеличивается масса тела курнесушек, яйценоскость и содержания питательных веществ в яйце, масса и плотность яиц.
29
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Результаты изучения морфологического и биохимического состава крови, маркеров
системы ПОЛ-АО, репродуктивной системы самцов и самок, развития плодов в антенатальном и постнатальном периодах онтогенеза, гистологические изменения ткани печени под
влиянием биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия
могут быть использованы в научно-исследовательской работе, в качестве физиологической
нормы, при решении вопросов, связанных со становлением структуры и функции органов и
организма животных.
2. Результаты экспериментов рекомендуется использовать для обоснования приемов
воздействия на организм биологически активных веществ в целях модуляции гомеостаза.
3. Материалы о роли биомассы спирулины, шротов семян винограда и кунжута, а также гумата калия в модуляции гомеостаза рекомендуется использовать в учебном процессе в
профильных высших учебных заведениях при изучении физиологии, гистологии, биохимии
и других дисциплин.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Публикации в рецензируемых изданиях, рекомендуемых ВАК РФ:
1. Павлова, O.Н. Изучение скорости созревания сенсорно–двигательных рефлексов у
крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, Т.В. Гарипов
[и др.] // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. – 2014. – Выпуск 4 (24). – С. 3–10.
2. Павлова, О.Н. Становление рефлексов у крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины
/ О.Н. Павлова, Т.В. Гарипов, О.Н. Пинаева // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. – Казань, 2015. – Т. 221. – С. 163–165.
3. Павлова, О.Н. Гистоморфологическая характеристика ткани печени крыс как реакции на шрот семян кунжута / О.Н. Павлова, Т.В. Гарипов, Ю.В. Григорьева // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. – Казань, 2013. – Т. 213. – С. 212–216.
4. Павлова, О.Н. Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки
шротом семян винограда / О.Н. Павлова, Т.В. Гарипов, Ю.В. Григорьева [и др.] // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. – 2013. – Выпуск 3. – С. 85–89.
5. Павлова, О.Н. Изучение морфологического и биохимического состава крови цыплят-бройлеров на фоне введения в их рацион смеси шрота семян кунжута и биомассы спирулины / О.Н. Павлова // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. – 2012. – Выпуск № 1. – С. 36–38.
6. Павлова, О.Н. Оценка морфологического состава крови крыс на фоне нагрузки внутрижелудочно шротами семян винограда, граната и кунжута/ О.Н. Павлова // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. – 2012. – Выпуск № 1. – С. 43–47.
7. Павлова, О.Н. Физиологическое обоснование применения фитогепатопротектора
«ВинСпир» в ветеринарии / О.Н. Павлова // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии . – 2011. – Выпуск № 1. – С. 101–105.
8. Павлова, О.Н. Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки
шротами семян винограда и кунжута / О.Н. Павлова, Т.В. Гарипов, Ю.В. Григорьева [и др.] //
Известия Самарского научного центра Российской академии наук: Т. 15 № 3(6). – Самара,
2013. – С. 1898–1903.
9. Павлова, О.Н. Сравнительная оценка морфологического состава крови крыс на
фоне нагрузки внутрижелудочно фитоантиоксидантами / О.Н. Павлова, Т.В. Гарипов, В.В.
Зайцев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им.
Н.Э. Баумана. – Казань, 2012. – Т. 212. – С. 109–115.
10. Павлова, О.Н. Исследование виноградного шрота для получения биологически активных добавок к пище / О.Н. Павлова, Ю.Л. Герасимов, П.П. Пурыгин // Процессы, техно30
логии, оборудование и опыт переработки отходов и вторичного сырья : Материалы 3 Всероссийской научно-практической конференции; Известия Самарского научного центра Российской академии наук. Спец. выпуск СНЦ РАН. – Самара, 2008. – С. 152–156.
11. Павлова, О.Н. Исследование гепатопротекторного действия фитоантиоксидантов /
О.Н. Павлова, Е.А. Грибанова, Н.Н. Желонкин [и др.]// Известия Самарского научного центра Российской академии наук. – 2010. – Т. 12 (33), № 1 (8). – С. 2088–2090.
12. Павлова, О.Н. Содержание микроэлементов в мышцах и витаминов в печени цыплят-бройлеров при нагрузке гуматом калия / О.Н. Павлова, Е.А. Грибанова, Р.Г. Каримова, [и
др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им.
Н.Э. Баумана. – 2013. – Т. 215. – С. 81–85.
13. Павлова, О.Н. Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки суспензией биомассы спирулины / О.Н. Павлова, Ю.В. Григорьева, Е.А. Грибанова [и др.] //
Актуальные вопросы ветеринарной биологии. – 2013. – Выпуск 2. – С. 51–55.
14. Павлова, О.Н. Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки гуматом калия / О.Н. Павлова, Ю.В. Григорьева, Е.А. Грибанова [и др.]// Известия Самарской
государственной сельскохозяйственной академии. – 2013. – Выпуск № 1. – С. 45–51.
15. Павлова, О.Н. О размножении дафний в растворах и экстрактах биомассы спирулины и
шрота косточек винограда и их композиции в соотношении 1:1 и о решении интегродифференциального уравнения / О.Н. Павлова, В.Б. Дмитриев, Ю.Л. Герасимов [и др.] // Известия Самарского
научного центра Российской академии наук. – 2009. – Т. 11, № 1(2). – С. 114–119.
16. Павлова, О.Н. Влияние биологически активной добавки «ВинСпир» на основные показатели крови / О.Н. Павлова, Н.Н. Желонкин, Е.А. Воишева [и др.] // Известия Самарского
научного центра Российской академии наук «13 конгресс «Экология и здоровье человека».
Т. 2. – Самара : Самарский научный центр Российской академии наук, 2008. – С. 249–252.
17. Павлова, О.Н. Исследование гепатопротекторного действия биологически активной добавки «ВинСпир» / О.Н. Павлова, Н.Н. Желонкин, С.В. Первушкин [и др.] // Известия Самарского
научного центра Российской академии наук «13 конгресс «Экология и здоровье человека»». Т. 2. –
Самара : Самарский научный центр Российской академии наук, 2008. – С. 253–257.
18. Павлова, О.Н. Влияние спирулины на репродуктивную систему крыс / О.Н. Павлова, В.В. Зайцев, Н.Н. Желонкин [и др.] // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. – 2014. – Выпуск № 1. – С. 18–21.
19. Павлова, О.Н. Исследование противотоксических свойств фитогепатопротектора
«ВинСпир» / О.Н. Павлова, Г.П. Логинов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана: Т. 204. – Казань, 2010. – С. 135–140.
20. Павлова, О.Н. Реактивные изменения репродуктивной системы крыс и их потомства в антенатальный период онтогенеза на фоне нагрузки шротом семян кунжута / О.Н.
Павлова, О.Н. Пинаева, Т.В. Гарипов // Ученые записки Казанской государственной академии ветери- нарной медицины им. Н.Э. Баумана: Т. 220 – Казань, 2014. – С. 184–187.
21. Павлова, О.Н. Реактивные изменения репродуктивной системы крыс на фоне
нагрузки шротом семян винограда / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, Т.В. Гарипов [и др.] // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. – 2014. – Т. 16, № 5 (4). –
С. 1233–1237.
22. Павлова, О.Н. Изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов у
крыс на фоне нагрузки шротом семян винограда /О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, Т.В. Гарипов
[и др.] // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. – 2014. – Т. 16,
№ 5 (2). – С. 1003–1008.
23. Павлова, О.Н. Реактивные изменения репродуктивной системы крыс на фоне
нагрузки гуматом калия / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Зайцев // Известия Самарской
государственной сельскохозяйственной академии. – 2015. – Выпуск № 1. – С. 36–40.
24. Павлова, О.Н. Изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов у
крыс на фоне нагрузки шротом семян кунжута / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Леонов //
31
Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. – 2015. – Выпуск № 1.
– С. 43–45.
25. Павлова, О.Н. Эффективность использования кормовой добавки «СпироГумат» при
выращивании цыплят-бройлеров / О.Н. Павлова, И.П. Токарев // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. – 2011. – Выпуск № 1. – С. 119–122.
26. Павлова, О.Н. Реактивные изменения тканей печени и морфологического состава
крови крыс в результате нагрузки шротом семян граната / О.Н. Павлова, А.В. Чигарева,
Н.Н. Желонкин [и др.] // Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. – 2014. – Выпуск № 1. – С. 35–40.
Публикации в прочих изданиях:
1. Павлова, О.Н. Морфофункциональный аспект реактивных изменений печени в результате нагрузки шротом семян винограда / О.Н. Павлова, О.В. Герасимова // Физиология и медицина. Исследования, высокие технологии, стартапы: сборник статей VI международной научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине», 22–23 мая 2014 г., Санкт–Петербург, Россия / научные редакторы А.П. Кудинов, Б.В. Крылов. – СПб.: Изд-во политехн. ун-та, 2014. – С. 101–104.
2. Павлова, О.Н. Классификация биологически активных добавок к пище и их применение в медицине и лечебном питании / О.Н. Павлова // Сборник материалов 34 научной конференции студентов и аспирантов «Дни студенческой науки».– Самара : СамГУПС, 2007. –
Выпуск 8. – С. 108.
3. Павлова, О.Н. Влияние шрота семян кунжута на основные показатели периферической крови / О.Н. Павлова, Е.В. Колесников // Биология – наука XXI века : 16-я Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых (Пущино, 16–21 апреля 2012 года).
Сборник тезисов. – Пущино, 2012. – С. 435.
4. Павлова, О.Н. Гистоморфологическая характеристика ткани печени эмбрионов крыс
как реакции на шрот семян кунжута / О.Н. Павлова, Е.В. Колесников // Биология – наука XXI
века : 17-я Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых (Пущино,
21–26 апреля 2013 года). Сборник тезисов. – Пущино, 2013. – С. 442–443.
5. Павлова, О.Н. Изучение гепатопротекторных свойств шрота семян кунжута /
О.Н. Павлова, Е.В. Колесников // Тенденции и инновации современной науки : Материалы II
Международной научно-практической конференции (24 сентября 2012 г.). Сборник научных
трудов. – Краснодар, 2012. – С. 51.
6. Павлова, О.Н. Обоснование применения кормовой добавки на основе биомассы спирулины и шрота семян кунжута при выращивании цыплят-бройлеров / О.Н. Павлова,
Е.В. Колесников // Материали за VIII международна научно практична конференция «Образованието и науката на XXI век – 2012» (17–25 октомври, 2012). Том 42. Селскостопанство.
Ветеринарна наука. – София : «Бял ГРАД-БГ» ООД, 2012. – С. 88–91.
7. Павлова, О.Н. Реактивные изменения печени крыс в эмбриогенезе и онтогенезе на
фоне нагрузки шротом семян кунжута / О.Н. Павлова, Е.В. Колесников // Тенденции и инновации современной науки : Материалы X Международной научно-практической конференции (17 сентября 2013 г.). Сборник научных трудов. – Краснодар, 2013. – С. 62.
8. Павлова, О.Н. Корреляционный анализ изменений репродуктивной системы крыс на
фоне нагрузки биомассой спирулины / О.Н. Павлова // Актуальные проблемы медицинских
наук : сб. науч. тр. III межрегион. студ. науч. форума с уч. молодых исследователей / под ред.
Л. В. Матвеевой. – Саранск : ООО «Референт», 2014. – С. 97–98.
9. Павлова, О.Н. Оценка влияния гумата калия на репродуктивную систему крыс /
О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Леонов [и др.] // Актуальные проблемы развития ветеринарной науки : Материалы Международной конференции, посвященной 85-летию Самарской
научно-исследовательской ветеринарной станции Российской академии сельскохозяйственных наук / ГНУ НИВС Россельхозакадемии. – Самара, 2014. – С. 282–286.
32
10. Павлова, О.Н. Разработка биологически активной добавки к пище на основе синезеленой микроводоросли Spirulina platensis и виноградного шрота / О.Н. Павлова // Труды
межвузовской конференции молодых ученых «Аспирантские чтения – 2007». – Самара :
СамГМУ, 2007. – С. 242–249.
11. Павлова, О.Н. Реактивные изменения репродуктивной системы крыс на фоне
нагрузки биомассой спирулины Физиология и медицина / О.Н. Павлова // Исследования, высокие технологии, стартапы: сборник статей Шестой международной научно–практической
конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине», 22–23 мая 2014 г., Санкт-Петербург, Россия / научные редакторы
А.П. Кудинов, Б.В. Крылов. – СПб.: Изд-во политехн. ун-та, 2014. – С. 97–100.
12. Павлова, О.Н. Реактивные изменения ткани печени крыс в результате нагрузки гепатопротекторами природного происхождения / О.Н. Павлова // Актуальные задачи ветеринарии, медицины и биотехнологии в современных условиях и способы их решения : Материалы Региональной научно-практической межвузовской конференции / ГНУ Самарская НИВС
Россельхозакадемии. – Самара, 2013. – С. 212–223.
13. Павлова, О.Н. Современные подходы к классификации биологически активных добавок к пище Современные подходы к классификации биологически активных добавок к
пище / О.Н. Павлова, Е.А. Грибанова, Н.Н. Желонкин [и др.] // Вестник Самарского государственного университета // Вестник СамГУ, № 9/1 (59). – Самара: СамГУ, 2007. – С. 256–269.
14. Павлова, О.Н. Преимущества сверхкритической экстракции как способа получения
биологически активных добавок к пище / О.Н. Павлова, Е.А. Грибанова, П.П. Пурыгин // Современные сервисные технологии. Научные исследования аспирантов и молодых ученых :
Материалы Всероссийской научно-технической конференции (27–28 ноября 2007 г.). – Самара : МГУС, 2007. – С. 256–260.
15. Павлова, О.Н. Гистоморфологическая характеристика ткани печени и морфологического состава крови крыс как реакции на шрот семян кунжута / О.Н. Павлова, Ю.В. Григорьева // Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: Реабилитация, Врач и Здоровье. – 2012. –
Выпуск № 2 (6). – С. 65–73.
16. Павлова, О.Н. Перспективы использования сине-зеленой водоросли спирулина платенсис для производства биологически активных добавок к пище / О.Н. Павлова, Н.Н. Желонкин, Т.Ю. Боронец [и др.] // Материалы Всероссийской научно–практической конференции, посвященный 10-тилетию кафедры «Технология и организация питания» «Современное
состояние и перспективы развития пищевой промышленности и общественного питания»
19 октября 2007 г. – Челябинск : ЮУрГУ, 2007. – С. 92–96.
17. Павлова, О.Н. Роль биологически активных добавок к пище в питании работников
железнодорожной отрасли / О.Н. Павлова, Н.Н. Желонкин, С.В. Первушкин [и др.] // Актуальные проблемы развития транспортного комплекса : Материалы 4 Международной научно-практической конференции. Самара, 4–5 марта 2008 г. – Самара : СамГУПС, 2008. –
С. 318–321.
18. Павлова, О.Н. Реактивные онтогенетические изменения нервной системы крыс на
фоне нагрузки гуматом калия / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева // Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: Реабилитация, Врач и Здоровье. – 2014. – Выпуск № 2 (14). – С. 54–61.
19. Павлова, О.Н. Состояние потомства крыс в антенатальном периоде при нагрузке
шротом семян кунжута / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, О.В. Герасимова // Национальная Ассоциация Ученых (НАУ). – 2014. – № 2, ч. 4. – С. 42–44.
20. Павлова, О.Н. Некоторые особенности онтогенетических изменений нервной системы крыс на фоне нагрузки гуматом калия / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, Е.А. Грибанова //
Теория и практика актуальных исследований : Материалы VII Международной научнопрактической конференции. 19 августа 2014 г. : Сборник научных трудов. – Краснодар, 2014.
– С. 165–173.
21. Павлова, О.Н. Состояние потомства крыс в антенатальном периоде при нагрузке шротом семян кунжута / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, Е.В. Колесников // Актуальные проблемы раз33
вития ветеринарной науки: Материалы Международной конференции, посвященной 85-летию
Самарской научно-исследовательской ветеринарной станции Российской академии сельскохозяйственных наук / ГНУ НИВС Россельхозакадемии. – Самара, 2014. – С. 287–293.
22. Павлова, О.Н. Изменения репродуктивной системы крыс на фоне нагрузки биомассой спирулины / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Леонов // Proceedings of the 2nd European
Conference on Biology and Medical Sciences (August 15,2014). «East West» Association for Advanced Studies and Higher Education GmbH. – Vienna, 2014. – 291 p.
23. Павлова, О.Н. Влияние гумата калия на репродуктивную систему крыс / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Леонов [и др.] // Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: Реабилитация, Врач и Здоровье. – 2014. – Выпуск № 3 (15). – С. 48–51.
24. Павлова, О.Н.Состояние потомства крыс в антенатальном периоде при нагрузке гуматом калия / О.Н. Павлова, О.Н. Пинаева, В.В. Леонов [и др.] // Вестник медицинского института «РЕАВИЗ»: Реабилитация, Врач и Здоровье. – 2014. – Выпуск № 4 (16). – С. 59–63.
25. Павлова, О.Н. Характеристика винограда как потенциального компонента биологически
активных добавок к пище / О.Н. Павлова, П.П. Пурыгин // Современные сервисные технологии.
Научные исследования аспирантов и молодых ученых : Материалы Всероссийской научнотехнической конференции (27–28 ноября 2007 г.). – Самара : МГУС, 2007. – С. 265–270.
26. Павлова, О.Н. Определение токсичности и антиоксидантной активности биомассы
Спирулины платенсис и лекарственных форм на ее основе / О.Н. Павлова, П.П. Пурыгин,
Н.Н. Желонкин [и др.] // Вестник Самарского государственного университета // Вестник
Самгу, №6 (56). – Самара: СамГУ, 2007. – С. 393–400.
27. Павлова, О.Н. Использование кормовых добавок природного происхождения при
выращивании сельскохозяйственной птицы как способ сохранения здоровья человека / О.Н.
Павлова, С.А. Симакова // Медико-физиологические проблемы экологии человека : Материалы IV Всероссийской конференции с международным участием (26–30 сентября 2011 г.). –
Ульяновск : УлГУ, 2011. – С. 242–244.
28. Павлова, О.Н. Природа оксидативного стресса и способы его коррекции / О.Н. Павлова, С.А. Симакова // Медико-физиологические проблемы экологии человека : Материалы
IV Всероссийской конференции с международным участием (26–30 сентября 2011 г.). – Ульяновск:УлГУ, 2011. – С. 244–246.
29. Pavlova, O.N. Reactive changes in rats’ liver tissue caused by potassium humate load /
O.N. Pavlova, T.V. Garipov, Y.V. Grigorieva, A.A. Supilnikov // European Journal of Natural History. – 2013. –№ 4. – С. 3–7.
30. Pavlova, O.N. Variazioni reattivo sistema riproduttivo dei ratti sullo sfondo del carico spirulina biomassa / O.N. Pavlova // Italian Science Review. – 2014. – 5(14). – PP. 44–48.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АлАТ – аланинаминотрансфераза
АсАТ – аспартатаминотрансфераза
БАД – биологически активная добавка
ВАК РФ – высшая аттестационная комиссия Минобразования Российской Федерации
ГП – глутатионпероксидаза
ГСХА – государственная сельскохозяйственная академия
МДА – малоновый диальдегид
ПВК – пировиноградная кислота
ПОЛ-АО – перекисное окисление липидов-антиоксиданты
РФ – Российская Федерация
СОД – супероксиддисмутаза
ФГБОУ ВПО – федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
34
ПАВЛОВА ОЛЬГА НИКОЛАЕВНА
РОЛЬ БИОМАССЫ СПИРУЛИНЫ, ШРОТОВ СЕМЯН ВИНОГРАДА
И КУНЖУТА, А ТАКЖЕ ГУМАТА КАЛИЯ В МОДУЛЯЦИИ
НЕКОТОРЫХ СОСТАВЛЯЮЩИХ ГОМЕОСТАЗА
03.03.01 – Физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
____________________________________________________________________
Подписано в печать 04.08.2015. Формат 60×90 1/16.
Усл. печ. л. 2,2. Тираж 100 экз. Заказ 180.
Отпечатано в Самарском государственном университете путей сообщения.
443022, Самара, Заводское шоссе, 18.
Тел.: (846) 255-68-36.
35