Lab 7x

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ (ВИТАМИН С)
МЕТОДОМ ТИЛЬМАНСА
Метод основан на редуцирующих свойствах аскорбиновой кислоты. Синяя
краска (индикатор), 2,6-дихлорфенолиндофенол, восстанавливается в бесцветное
соединение аскорбиновой кислотой (реакция Тильманса). При этом аскорбиновая
кислота окисляется до дегидроаскорбиновой кислоты.
2,6-Дихлорфенолиндофенол имеет разную окраску при различных значениях pH
среды. Интенсивный синий цвет в щелочной среде и бледно-красный в кислой среде.
Переход окраски происходит между рН 4 и 5, в этом интервале индикатор имеет
фиолетовый цвет. При окислительно-восстановительных реакциях темно-синий цвет
соответствует окисленному состоянию, а восстановленный - бесцветному.
Эту последнюю реакцию и используют для определения аскорбиновой кислоты.
Анализируемый раствор титруют раствором индикатора (с известным титром) до
наступления розового окрашивания, обуславливаемого избытком индикатора в кислой
среде.
На одну молекулу аскорбиновой кислоты (молекулярный вес 176) приходится
две молекулы индикатора. При приготовлении этой краски получается натриевая соль 2,6дихлорфенолиндофенола, имеющая молекулярный вес 290.
Реактивы и аппаратура.
1. 1-процентная соляная кислота (23 мл концентрированной соляной кислоты,
удельного веса 1.19 доводят дистиллированной водой до 1 л);
2. аскорбиновая кислота, кристаллическая;
3. 0.001 н. раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола; на весах отвешивают 30 мг сухой краски,
переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 70-80 мл теплой дистиллированной
воды и 4-5 капель 0.01 н. щелочи; сильно взбалтывают колбу руками до растворения,
затем доливают до метки водой.
4. микробюретки с градуировкой на 0.01 мл, емкостью 1-5 мл.
5. пипетки на 5 мл;
6. мерные колбы на 50, 100 мл;
7. конические колбы на 50-100 мл;
8. мерный цилиндр на 50 мл;
9. химические стаканы на 50 мл;
10. весы
Установление титра краски по аскорбиновой кислоте.
Установление титра краски основано на титровании раствора стандартной
аскорбиновой кислоты 0.001 н. раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола.
1. Рассчитать ориентировочный титр 2,6-дихлорфенолиндофенола по аскорбиновой
кислоте. Т.е. определить, какому количеству аскорбиновой кислоты (мг) соответствует 1
мл 0.001 н. 2,6-дихлорфенолиндофенола.
2. Исходя из титра, рассчитать навеску аскорбиновой кислоты для растворения в 50 мл 1процентной хлороводородной кислоты с последующим взятием аликвотного объема 5 мл.
Учесть, что объем израсходованного 0.001 н. 2,6-дихлорфенолиндофенола не должен
превышать 5 мл (т.е. объем пипетки для титрования)
3. Провести титрование 5 мл аликвоты стандартного раствора аскорбиновой кислоты
0.001 н. раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола исходя из предварительно рассчитанного
титра и навески аскорбиновой кислоты. Определить точную концентрацию и титр (по
аскорбиновой кислоте) 2,6-дихлорфенолиндофенола.
Ход определения.
При определении аскорбиновой кислоты жидких продуктах (соки, газ. воды) в
случае их непрозрачности производят центрифугирование. При необходимости (при
большом содержании аскорбиновой кислоты) разбавляют 1%-раствором соляной кислоты.
Ход работы. В коническую колбочку отмеривают 5 мл анализируемого образца, 5 мл 1%-го
раствора соляной кислоты. Содержимое каждой колбочки перемешивают и титруют ~ 0,001 н
раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до появления розовой окраски, не исчезающей в
течение 30 секунд.
Приготовление вытяжек.
Навеску исследуемого материала в 5-10 г заливают в ступке 20 мл 1-процентной
соляной кислоты и быстро растирают в присутствии кислоты до образования гомогенной
массы. Процесс растирания не должен длиться больше 10 минут. Полученную массу
сливают из ступки (через стеклянную палочку и воронку) в мерную колбу на 100 мл.
Ступку споласкивают несколько раз 1-процентной соляной кислотой, которую выливают
в ту же мерную колбу. Содержимое колбы доводят до метки, колбу закрывают пробкой,
сильно встряхивают и оставляют стоять около 5 минут. Затем содержимое колбы
центрифугируют и определяют содержание аскорбиновой кислоты титрованием.
Расчет количества витамина С в пищевых продуктах проводят по формуле:
Т  А  50  100
Х =  ,
БВ
где Х – содержание аскорбиновой кислоты в мг% (количество мг аскорбиновой кислоты в 100
г анализируемого продукта );
Т – количество аскорбиновой кислоты (в мг), эквивалентное приготовленному раствору 1 мл
~0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (молекулярная масса аскорбиновой
кислоты равна 176, а грамм-эквивалент – 88 г., т.к. фактор эквивалентности в реакции 1/2);
А – количество ~0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедшее на
титрование (средняя арифметическая трех проб в мл);
50 – общее количество вытяжки в мерной колбочке (в мл);
100 – пересчет на 100 г исследуемого материала;
Б – количество фильтрата, взятое для титрования (в мл);
В – количество исследуемого материала, взятое для анализа (в г);
Сравните полученные результаты с литературными данными.
Аскорбиновая кислота не синтезируется в организме человека. Главным источником этого
витамина являются свежие овощи и фрукты. В различных пищевых продуктах содержится
следующее количество витамина С (в мг%):
Черная смородина – 100-400 Укроп – 120-135 Лимон – 40-55 Капуста (свежая и
квашенная) – 30-40 Томаты – 20-40 Лук зеленый – 16-33 Яблоки северные – 20-40 Яблоки
южные – 5-17 Смородина красная – 5-15 Картофель – 7-10 Бананы – 7-10 Печень – 20-50
Селезенка – 20-50 Кумыс – 20-25 Хвоя ели и сосны, 150-250.