ПЕРСПЕКТИВЫ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИИ В
advertisement
3-4 '2005 УКРАТНСЬКИЙ ЖУРНАЛ 3 ПРОБЛЕМ МЕДИЦИНИ ПРАЩ УДК: 610-057+613.0+575.113:001.5 П Е Р С П Е К ТИ В Ы Г Е Н Е ТИ Ч Е С К И Х И С С Л Е Д О В А Н И И В М ЕДИ Ц И Н Е ТР У А А С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ М Е ТО Л А ПОЛИМ ЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ Стеж ка В .А ., Верхолаз Н.В. Институт медицины труда АМ Н Украины, г.Киев Проведено обобщение данных литературы, касающихся установления ассоциации отдельных генетических марке­ ров полиморфизма генов с измененной чувствительностью организма к влиянию факторов производственной сре­ ды и риском развития некоторых профессиональных заболеваний. Сделан вывод о том, что принципиально новые и важные научные результаты в медицине труда могут быть получены на основании исследования генетического полиморфизма белковых систем организма с применением метода полимеразной цепной реакции. Это существен­ но расширит научные подходы к индивидуальной первичной профилактике развития профессиональных заболе­ ваний путем научно обоснованного профессионального отбора. Ключевые слова: полиморфизм генов, индивидуальная предрасположенность к заболеваниям, мультифакторные заболевания, профессиональные заболевания, полимеразная цепная реакция В течение нескольких последних десятилетий со з­ даны современные, порою сложные, но достаточно эффективные методы разделения различных много­ компонентных смесей белков на отдельные фракции по их специфическим биологическим свойствам. Это привело к обнаружению множественных м оле­ кулярных, генетически контролируемых белковых систем организма. Было показано, что альтерна­ тивные формы белков, находящиеся под строгим генетическим контролем, очень неравномерно р ас­ пределены среди народов мира. Поэтому явление их генетического полиморфизма изначально было использовано для гено-географических исследова­ ний в популяционной генетике и антропологии [19]. Однако еще в 4 0 —50 годах прошлого столе­ тия среди исследователей различных специальнос­ тей, и в первую очередь среди биохимиков, сф ор­ мировалась точка зрения, что биохимические реак­ ции в организме имеют как общие основы химизма молекулярных процессов и функционирования бо­ лее высоких и сложных по иерархическому постро­ ению физиологических систем, так и определенные особенности у разных индивидов, которые форм и­ руют их своеобразный индивидуальный профиль. В частности, больш ая часть известных на сегодня би­ охимических показателей гомеостаза имеет вы со­ кую индивидуальную изменчивость с вариацией по­ рядка 15—5 0 % . В ряде фундаментальных работ [2 3 —27] показаны довольно существенные разли­ чия в активности многих ферментов, величинах им­ мунологических показателей, уровнях гуморальных и гормональных факторов в биосредах, некоторых показателях функционирования физиологических 74 систем организма у здоровых людей и различных видов лабораторных животных. Д ля человека ха­ рактерна особенно ш ирокая зона изменения вели­ чин физиологических показателей, в границах ко­ торых в определенных условиях сохраняется опти­ мальная жизнедеятельность организма. Это так на­ зываемый диапазон адаптационных модификаций организма. В частности, ранее нами было показано, что у человека активность некоторых биохимических систем организма и ферментов значительно варьи­ рует как в физиологических условиях, так и в ответ на экзогенные воздействия, в зависимости от вре­ мени суток и сезона года [20]. Так, наиболее высо­ кая активность системы неферментативного сво­ боднорадикального перекисного окисления липи­ дов (С Р П О Л ) наблюдалась в весенне-летний п е­ риод года и по сравнению с осенне-зимним разли­ чия в ее активности по некоторым показателям составляли 2 ,5 —6 раз. Активность ферментов, обеспечиваю щих антиоксидантную защ иту орга­ низма (АОС), такж е существенно зависела от сезо­ на года. Различия в активности фермента супероксиддисмутазы достигали 7 раз, каталазы — до 3 раз. В то ж е время, активность главного сывороточного антиоксиданта — фермента церулоплазмин мало з а ­ висела от сезона года. М аксимальные различия в его сезонной активности составляли 12% . По на­ шим наблюдениям, в динамике суток и в различные сезоны года у людей выявлялось изменение не толь­ ко взаим освязанного ф ункционирования систем С Р П О Л и АОС, но и процессов переаминирования и гликолиза в организме. А такж е ферментативно­ 3-4 ‘2005 ____________________________ го энергообеспечения реализации отдельных про­ явлений его реактивности по показателям ф агоци­ тоза, бактерицидной активности фагоцитов в пери­ ферической крови вследствие достаточно резких изменений активности внутриклеточных ф ерм ен­ тов и функциональных резервов последних. Н а о с­ новании этих исследований нами были выявлены временные точки в динамике суток и сезоны года, в которых неблагоприятные экзогенные воздействия на человека могут вызвать наиболее выраженные нарушения гомеостаза. В подтверждение этому н а­ ми были установлены сезонные различия (осеньвесна) в состоянии свободнорадикального окисли­ тельного гомеостаза у рабочих, которые в условиях производства подвергались воздействию соедине­ ний свинца или были выведены из профессии В С В Я ­ ЗИ с установленным диагнозом хронической свин­ цовой интоксикации [ 18). Эти различия были обус­ ловлены сезонной направленностью ответной р е ­ акции АОС на наличие свинца в биологических средах обследованных людей. Согласно концепции РУ ильямса, определение значений пределов биохимической вариабельности здорового человека является чрезвычайно в а ж ­ ным, исходя из роли крайних вариантов нормы, как основы для выделения лиц со сниженными адапта­ ционными возможностями и с больш ей предраспо­ ложенностью к различным заболеваниям. В ероят­ но, справедливым может быть и наше утверж де­ ние, что биохимическая индивидуальность организ­ ма — это совокупность индивидуальных показате­ лей особенностей генетически детерминированных биохимических реакций, обеспечивающих как оп­ ределенный уровень ответных реакций организма На воздействие экзогенных и эндогенных факторов, так и исход этих воздействий для организма. В последнее десятилетие изучение биохимичес­ кого полиморфизма популяций людей связано с р е ­ шением целого ряда прикладных медико-биологи­ ческих вопросов, в частности, при установлении Роли генетической компоненты в предрасполож ен­ ности отдельных индивидов к определенным за б о ­ леваниям. Д оказано, что лю бая функция организма Человека осущ ествляется посредством активации соответствующих генов, которые детерминируют все его морфо-функциональные свойства и призна­ ки, в том числе и поведение в определенных усло8Иях [10). Особенности обмена веществ, детокси­ кации ксенобиотиков, иммунологической реактив­ ности, нервной деятельности и многих других про­ цессов в организме изначально определяются фун^ — 1 1 4 кционированием определенны х генов, другими словами генетической конституцией человека. Б о ­ лезнь такж е развивается на основе взаимосвязи внешних факторов, как правило, повреждающих и внутренних, сохраняющих биологическое наслед­ ственное постоянство [17]. В зависимости от относительной роли наслед­ ственных и средовых факторов в развитии б о лез­ ней, последние, с генетической точки зрения, при­ нято разделять на три основные группы [ 1 ,9 , 17]. П ервая — болезни, для которых этиологическим фактором является наследственная генная, хромо­ сомная или геномная мутация. В этом случае про­ явление патологии не зависит от влияния окруж а­ ющей среды. Вторая группа представлена болезн я­ ми с наследственной склонностью, так назы ваем ы ­ ми мультифакторными болезнями (М Ф Б ). Они развиваю тся под влиянием факторов окружающей среды, включая производственные, у лиц с опреде­ ленной генетической конституцией — имеющих полигенные мутации. К этой группе относят полигенные заболевания ведущих физиологических систем организма — сердечно-сосудистой, бронхолегочной, нервной, эндокринной и других. Считается, что о с­ новная роль в их развитии принадлежит факторам окружающей среды. Однако частота их возникно­ вения и тяж есть течения существенно зависят от наследственной предрасположенности, вы раж ен­ ность (степень) которой определяется количеством мутировавших генов [31, 32]. Вклад М Ф Б в обшую патологию человека составляет около 9 2 % , а в детскую смертность даж е в экономически развитых странах — 3 5 —4 0 % . Следовательно, создание б л а ­ гоприятных внеш них условий м ож ет облегчить протекание этих болезней и даж е предупредить их развитие. Последнее такж е зависит от степени полигенности мутаций у индивидуума. К третьей груп­ пе относятся болезни, в возникновении которых наследственность не имеет существенного значе­ ния — травмы, ожоги, однако влияет на их течение и исход [17]. Основными недостатками существующих мето­ дов определения наследственной склонности к оп­ ределенным болезням (клинико-генеалогический, близнецовый, популяционно-статистический) я в ­ ляются: необходимость использования больш ого количества семей, близнецовых пар, как можно б о ­ лее полной генеалогической информации, эм пири­ ческих подходов. Более перспективным и совре­ менным подходом является выявление ассоциаций между М Ф Б и их генетическими маркерами. При — 75 3-4 '2005 УКРАЇНСЬКИЙ ЖУРНАЛ З ПРОБЛЕМ МЕДИЦИНИ ПРАЦІ наличии последних у индивида можно судить о сте­ пени его генетически обусловленной склонности к какой-либо М Ф Б. В последнее десятилетие до­ стигнуты определенные успехи в этом направле­ нии, в частности, в изучении М Ф Б на основе ан а ­ лиза конкретных биохимических или иммунологи­ ческих наследственно обусловленных признаков их развития. Д ля целого ряда заболеваний выявлены такие признаки или их комплекс. М етодология о б ­ наружения генетических маркеров склонности к М Ф Б заклю чается в сравнении частоты встречае­ мости тех или иных типов полиморфных белков, ферментов, антигенов у пациентов с конкретным заболеванием и в контрольной группе здоровых людей, а ткже в установлении статистически досто­ верной их ассоциации и количественного риска возникновения болезни. В ранее проведенных нами исследованиях б ы ­ ли разработаны биохимические и иммунологи­ ческие критерии вредного влияния на человека и риска для его здоровья от воздействия соедине­ ний свинца. Н а основании этих и специально п р о ­ веденных иммуногенетических исследований б ы ­ ло показано, что некоторы е антигены главного ком плекса гистосовм естим ости (H L A -ком п лек­ са) 1 класса (локусы А, В, С ) A3, А10, A w l9, В7, B w l 6 , В 18, В27 и H LA -антигенные комбинации A3A wl9, А2А10, B 1 2 B w l6 , B 1 3 B w l6 , B14Bw 21, B w l 6 B w l 8 , Cw2bl, Cw4bl ассоциированы с повы ­ шенной чувствительностью организма человека к соединениям свинца [ 6 , 21]. При этом оцен ива­ емый риск увеличенного содерж ания свинца в б и ­ осредах организма составлял по отдельным анти­ генам от 1,2 до 3,0 раз по сравнению со среднепо­ пуляционным уровнем. В этом плане важно такж е продемонстрировать результаты им м уногенети­ ческих исследований в небольшой группе лиц с у с­ тановленным клиническим диагнозом токсическо­ го гепатита свинцовой этиологии (таблица). П р а к ­ тически у всех обследованных вы явлен генетичес­ кий деф ект, который проявлялся отсутствием од­ ного из обязательно парных H LA -антигенов в локусе В (больной 2) и, особенно, в локусе С (б о л ь ­ ные 1, 2, 4 —6). П оследнее, вероятно, можно р а с ­ см атривать как высокую степень полигенных му­ таций у некоторых из них (больны е 2, 4, 5). Кроме того, во всех трех локусах у обследованных вы яв ­ ляли сь как отдельные H LA -антигены, так и их комбинации, которые предопределяли повы ш ен­ ную чувствительность организма к биологическо­ му действию соединений свинца. 76 Таблица HLA-антигены у обследованны х с токсическим гепатитом свинцовой этиологии Больные А 1. Р-й 1,2 2. К-о 3. Б-в 4. Р-в HLA-локусы В С 16, 18 2, Ы 9 , 10 5,Ы 4, Ы 2, 11 1,3 8, 13 2, 3 7,12 ы, ы 5. П-а 2,3 13, 16 ы, ы 6. А-в 1,2 8, 17 2, Ы Примечания: 1) Ы — отсутствие НЬА-антигена(нов) в со­ ответствующем локусе; 2) подчеркнуты и выделены жирным отдельные HLA-анти­ гены и их комбинации, предопределяющие повышенную чув­ ствительность организма к соединениям свинца. Как известно, вероятность развития проф ессио­ нального заболевания существенно зависит от ин­ тенсивности воздействия производственного ф ак ­ тора и стаж а работы во вредных условиях. М ежду тем, на сегодня при проведении эпидемиологиче­ ских исследований в отдельных профессиональных группах накоплены сведения о существенных инди­ видуальных различиях как в сроках развития про­ фессиональных заболеваний, так и выраженности манифестации связанных с ними патологических процессов. Эти различия, согласно концепции эко­ логической генетики, объясняю тся индивидуаль­ ными особенностями организма, в основе которых леж ит генетический полиморфизм, другими слова­ ми, генетическое разнообразие человека. Н а во з­ можность рассмотрения понятия проф ессиональ­ ного риска как реализации причинно-следственной зависимости между вредным воздействием и б о ­ лезнью и дозо-эф фективной зависимости действия ф актора с учетом индивидуальных (эндогенных) факторов риска (наследственность, вредные при­ вычки) указываю т [ 8 ]. В этой связи следует отметить установленную дос­ товерную зависимость развития ряда заболеваний от полиморфизма групп (ABO) и антигенов крови сис­ тем M N , Р, АВН, а также резус-фактора (Rh); неко­ торых фенотипов белков сыворотки крови — гаптоглобина (Н р), трансферрина (Tí), витамин Д-транспортирующего белка (G C ), 3-го компонента ком­ племента (СЗ), ингибитора протеиназ ос-1 -антитрип­ сина (PI); эритроцитарных ферментов: кислой фосф атазы (А сР), фосфоглюкомутазы (P G M 1 ), эстеразы (E S D ), глиоксилазы (C L 0 1 ), 6 -фосфоглю конатдегидрогеназы ( 6 -P G D ); изоформ ф ер м ен ­ 3-4 Z005 тов глутатион-Э-трансферазы (G ST), N -ацетилтрансферазы (NAT), цитохрома Р-450 (CYP); генетичес­ ких разновидностей антигенов главного комплекса гистосовместимости (H L A )[3, 7, 17, 3 9 —41, 44]. В частности, при обследовании рабочих неф те­ химического завода установлена генетическая д е ­ терминированность адаптационных реакций гем о­ стаза [2]. Н аибольш ая функциональная устойчи­ вость системы гемостаза наблюдалась у носителей гетерозиготного фенотипа гаптоглобина Н р 2 —1, тогда как носители гомозиготных его фенотипов Н р 2 —2 и Нр 1 —1 были подвержены гипокоагуляционным и гиперкоагуляционным сдвигам. П о м е­ ре увеличения стаж а рабочих существенно ум ень­ ш алась доля лиц с гомозиготными фенотипами Нр (Нр 1 —1 и Н р2—2) и, соответственно, увеличивалось представительство лиц с гетерозиготным Н р 2 —1. Авторы считают, что это обусловлено тем, что лица с гомозиготными фенотипами Нр постепенно поки­ дают производство в связи с затруднением адап­ тации к условиям труда нефтехимического произ­ водства, чрезмерным напряжением регуляторных систем и нарастанием вегетативно-сосудистой дис­ функции, которые тесно коррелировали со стажем. По 15 биохимическим системам наследственно­ го полиморфизма установлены определенные ф е­ нотипы и их комбинации, определяющие предрас­ положенность или резистентность человека к р аз­ витию силикоза [4]. П редрасполож енность к сили­ козу ассоциировалась с фенотипами: фосфоглюкомутазы P G M 2 —2, А В Н -секреторов, антигенами HLA А28, В 18. Резистентность к развитию этого заболеван ия определялась у обладателей ф еноти­ пов: иммуноглобулина G m l( - ) , M l M l системы а - 1-антитрипсина, кислой фосфатазы АсРаЬ, ан ­ тигенов HLA АЗ, В 12, В35. Риску развития сили­ коза подвержены обладатели таких комбинаций фенотипов: NN, Нр 2 —2; G m l (-), AcPbb; M l М 2, PG M 1—2, AcPab; M 1M 2, AcPbb. Устойчивость к силикозу оссоциировалась со следующими их соче­ таниями: Rh ( + ), М 1М 2; G m l( + ), М 1М 2; М М , М 1М 2; Нр 2 - 2 , М 1М 2 ; G C 1 - 2 , М 1 М 2 ; G m l( + ), Н р 2 —2; NN, Н р 2 —1. Авторы делаю т вы ­ вод о том, что применение генетических маркеров позволяет выявить среди обследованных практи­ чески здоровых лиц, работающих в условиях повы ­ шенной запы ленности производственной среды, группы риска по развитию силикоза, о чем свиде­ тельствовали высокие показатели риска развития данного заболевания, ассоциирующиеся с опреде­ ленными фенотипами разных генетических систем ____________________________ м м » организма. Кроме того, проведенные исследования открывают возможность использования данных о генетическом статусе индивида при проведении проф ессионального отбора на силикозоопасные предприятия. Другими исследователями [11, 12] проведено тестирование работающих в условиях воздействия пылевого фактора по 7 генетическим локусам и о б ­ наружены достоверные различия по частоте вы яв­ ления риска развития силикоза по 5 из них. Н оси­ тели некоторых аллелей — Нр*2; C3*F; P G M P 2 - ; P I*С 1 ; Tf*D; G C*R характеризовались меньшими адаптационными возможностями и больш ей за б о ­ леваемостью силикозом в условиях воздействия пыли. О бобщ ение результатов обследования больных такими профессиональными бронхолегочными з а ­ болеваниями, как силикоз, пылевой бронхит, брон­ хиальная астма, проведенное [ 12 ], с их точки зр е ­ ния, дает основание предложить комплекс инфор­ мативных генетико-биохимических показателей, отображаю щих наличие предрасположенности ин­ дивида не только к данным заболеваниям, но и к определенному их клиническому течению. В част­ ности, по их мнению, при наличии экзогенного в о з­ действия неблагоприятных факторов организм мо­ билизует «программу адаптивного поведения», ко­ нечная цель которой — повышение резистентности к раздражителю. Нередко такое приспособление связано с развитием воспаления с целью локализа­ ции повреждения и ограничения его распростране­ ния, а также восстановления поврежденной струк­ туры. При этом развивается комплекс защитных реакций организма, включающих биохимические, клеточные, гуморальные, гормональные и другие механизмы, выполняющие различные функции — транспортны е, антиоксидантные, ингибиторные, активирующие (стимулирующие) и прочие, которые генетически детерминированы. Преобладание того или иного типа реакций организма на неблагопри­ ятное воздействие зависит именно от этого. П оказано, что между ведущими проф ессиональ­ ными заболеваниями бронхолегочной системы есть как общие, так и различные генетические маркеры, что и предопределяет особенности развития пато­ логии данной системы. Так, общим генетическим маркером восприимчивости или чувствительности бронхолегочной системы к воздействию пылевого ф актора можно считать гомозиготный фенотип гаптоглобина Н р*2. При этом для риска развития именно силикоза характерно наличие фенотипов 77 УКРАШСЬККЙ ЖУРНАЛ 3 ПРОБЛЕМ МЕДИЦИНИ ПРАЩ СЗ-комплемента (C3F, аллель PtA), трансферрина (Tf*D), гомозиготного фенотипа эритроцитарной фосфоглюкомутазы (PG M 1 *2-). Тогда как для р аз­ вития пылевого бронхита и бронхиальной астмы — фенотипа а-ингибитора протеиназ (PI*S). А для силикоза и пылевого бронхита — фенотипа группо­ специфического компонента сыворотки крови, осу­ щ ествляющ его перенос витамина D 3 в организме (G C *R ). Важно такж е отметить, что ассоциации фенотипов второго эритроцитарного фермента — глиоксилазы ( G L 0 1 ) с профессиональной патоло­ гией бронхолегочной системы авторами не уста­ новлено. У лиц, контактирующих в производственных ус­ ловиях с соединениями фтора и не имеющих рент­ генологических признаков интоксикации, вы явле­ но достоверное увеличение частоты антигена крови фенотипа Р (-), что позволяет рассматривать его как маркер генетической устойчивости к их токси­ ческому влиянию, а фенотипы О (ABO) и Р( + ) — как маркеры повышенной чувствительности соеди­ нительной ткани к ним [5]. Д ля выявления роли ге­ нетического фактора в развитии разных типов по­ ражения костной ткани при флю орозе, а именно остеосклероза или остеопороза, авторами прове­ ден анализ распростаненности фенотипов исследо­ ванных биохимических систем у рабочих с этими костными заболеваниями. Среди больных остео­ склерозом выявлено увеличение до 3 8 ,5 % лиц с группой крови В (ABO), тогда как среди лиц с остеопорозом достоверное снижение наличия этого ф е ­ нотипа до 16,2% . Это подтвердило, что развитие остеопороза при хронической фтористой интокси­ кации определяется, прежде всего, тропностью фтора к соединительной ткани, которая связана с фенотипом О (ABO). В работе [14] проведено тести­ рование больных хронической профессиональной фтористой интоксикацией, здоровых рабочих алю ­ миниевого завода и контрольной группы по 12 ге­ нетическим системам. Установлены различия в распределении между обследованными группами генотипов фосфоглю комутазы (P G M 1 ), кислой фосфатазы (АсР), ушной серы (C erum en). В груп­ пе больных выявлена достоверно повыш енная час­ тота аллелей АсР1*А, P G M 1 * 1 -, фенотипов кис­ лой ф осф атазы АА, фосфоглю комутазы 1 + 14-, 2 + 2 4 - и сухого типа консистенции ушной серы -d. Полиморфизм систем груп крови (ABO), сы воро­ точных белков — Н р, TF, G C, СЗ, PI и эритроцитарных ферментов — ESD , G L O 1, 6 -P G D не ассо ­ циировал с развитием интоксикации. Авторы счи­ 78 3-4 ‘2005 тают, что выявленные ассоциации полиморфных ферментов с хронической фтористой интоксикацией решают фундаментальную проблему — расш ифров­ ку патогенетического механизма воздействия ф то­ ристых соединений на организм. В ряде работ показано, что при производствен­ ном контакте со свинцом у обладателей гомозигот­ ного генотипа ф ермента аминолевулинат-дегидрогеназы (ALAD 1 —1) содержание в плазме крови аминолевулиновой кислоты (5-А Л К ) выше, чем у имеющих гетерозиготный ее фенотип (ALAD 1 —2). При этом важно отметить, что особенности геноти­ па не влияли на экскрецию 5-А Л К с мочой. О тм е­ чена корреляция между содержанием в плазме крови свинца и 5-А ЛК и Z n -протопорфирина. Ав­ торы считают, что лица с разными генотипами ALAD могут иметь разную чувствительность к нейротоксическому действию свинца, опосредован­ ному 5-АЛК. В то ж е время, проведеным анализом генотипа гена ALAD при наличии токсического действия свинца у рабочих, связанных с его вы п­ лавкой, установлено, что его фенотип влияет толь­ ко на ассоциацию между уровнем свинца в плазме крови и содержанием в ней Z n -протопорфирина и не влияет на другие эффекты интоксикации свин­ цом [28, 42]. В другой работе показано, что нали­ чие у обследованных, контактирующих со свинцом, аллели ALAD2 ассоциировало с меньшим содер­ жанием креатинина и кальция в моче. Однако д ос­ товерной связи ALAD-генотипа с содержанием свинца в крови и костном мозге установить не удалось. Авторы считают подтвержденной связь ге­ нотипа ALAD с функцией почек. При этом не и с­ ключается, что сочетание аллелей ALAD 1—2 (г е ­ терозиготы) все-таки может быть связано с чув­ ствительностью организма к каким-либо химичес­ ким вещ ествам [29]. Многими исследователями высказывается пред­ положение, что свободнорадикальное повреж де­ ние молекулы Д Н К приводит к развитию ряда з а ­ болеваний, в том числе рака [43]. При этом, наря­ ду с традиционными методами выявления повреж ­ дения этой молекулы и генотоксического действия, такими как одно- и двунитиевые разрывы, хромо­ сомные аберрации, сестринские хроматидные о б ­ мены, в последнее время значительное внимание уделяется определению аддуктов Д Н К При иссле­ довании экскреции с мочой окислительного аддукта Д Н К 8 -гидроксидезоксигуанозина ( 8 -O hdG ) у р а ­ бочих производства асбеста, резины, красителей выявлено увеличение его содержания в моче. Авто­ 3-4 7005 ры считают, что данный аддукт Д Н К может быть использован как индикатор риска канцерогенеза при мониторинге определенных профессиональных групп. В оценке индивидуальной чувствительности к токсичным и канцерогенным химическим соедине­ ниям представляет интерес полиморфизм ф ермен­ тов суперсемейства монооксигеназ, среди которых одно из ведущих мест занимает цитохром Р-450 [13]. Изоформы последнего находятся под генети­ ческим контролем около 50 групп генов [39, 40]. Среди биомаркеров индивидуальной чувствитель­ ности людей к действию химических канцерогенов выделяются те, которые отражаю т различия на уровне метаболической активации этих вещ еств с участием цитохрома Р -4 5 0 и зависимых от него мо­ нооксигеназ в печени и других органах [41 ]. К ним относятся: степень индуцируемости арилуглеводородгидроксилазы (бенз[а]пиренгидроксилазы) под влиянием полициклических ароматических углево­ дородов, полиморфизм уровней окисления дебризохина/спартеина и полиморфизм ацетилирования (реакции коньюгации). Индивидуальные различия в активности цитохром Р-450-зависимы х ферментов достигают 30 —100-кратных. Получены доказатель­ ства генетической регуляции (A h-локус генома) р я ­ да изоформ цитохрома Р -450, которые превращ ают канцерогенны е полициклические углеводороды, нитрозамины и бензол из преканцерогенов в ф акти­ ческие канцерогены у человека. Н аиболее доказан­ ными метаболическими активаторами канцероген­ ных химических веществ являю тся ферменты его фенотипов CYP1A1, CYP1A2, CYP2C9, CYP2D6 и CYP2E1. Среди ферментов второй фазы м етабо­ лизма ксенобиотиков важное значение в канцеро­ генезе имеют полиморфизм N -ацетилтрансферазы (NATI и NAT2), осуществляющей процессы ацети­ лирования довольно узкого круга ксенобиотиков (преимущественно содержащих в своей структуре амино-ароматические и гидразиновые группиров­ ки), а такж е глю татион-Б-трансф еразы (GSTA, G STM , GSTP, GSTT, G STZ, G STS, GSTK), об ес­ печивающей детоксикацию большого числа эндо­ генных и экзогенных канцерогенов в различных компартментах клетки путем нуклеофильного зам е­ щения при их коньюгации и алкилировании с учас­ тием глутатиона [ 39 [. Генотипы G ST P 1, GSTT1, G S T M 1, G STM 3 отдельно и в комбинации исследо­ ватели используют в качестве маркера злокачест­ венного поражения легких (плоскоклеточный и м ел­ коклеточный рак, мезотелиома) и патологических ..................................................... .......... ...... .. процессов, связанных с высоким риском злокачес­ твенной трансформации [30, 44]. Сочетание гено­ типов ЫАТ2 и ОЭТАН более чем в 7 раз увеличи­ вает риск заболевания на мезотелиому легких при влиянии на человека пыли асбеста по сравнению с лицами, имеющими отдельно генотипы ЫАТ2 или СЭТМ1 [34, 35]. Аналогичный эф ф ект — увели­ чение риска развития рака легких наблюдается при сочетании генотипов С 5Т М 1 и О Э Т Т Ь Уста­ новлен такж е полиморфизм супероксиддисмутазы, в первую очередь эритроцитарной растворимой формы данного фермента, имеющей три фенотипа БСЮ -АК 5СЮ -А2-1, БО О -А 2, которые контроли­ руются двумя аллелями 5СЮ-А1 и ЭОО-А2, нахо­ дящимися в локусе, ответственном за ее детермина­ цию на хромосоме 21. Известны генетические м ар­ керы полиморфизма ферментов церулоплазмина, щелочной и кислой ф осфатазы, холинэстеразы, миелопероксидазы и других ферментов [44]. С точки зрения [ 22 ], изучение генетико-биохимического статуса необходимо для обоснования критериев ин­ дивидуального прогноза риска развития профессио­ нальных заболеваний и экологически обуслов­ ленной патологии, лечения и рационального трудо­ устройства лиц с определенными генетическими особенностями организма. Приведенные выше данные позволяю т заклю ­ чить, что в настоящ ее время принципиально новые и важные научные результаты в медицине труда могут быть получены на основе изучения полимор­ физма белковых систем организма человека. Они позволят глубже оценить основу адаптационных реакций или патологических процессов, развиваю ­ щихся вследствие воздействия неблагоприятных факторов производственной среды. При этом от­ ветные реакции организма могут отображ ать преи­ мущественно клеточные, тканевые, органные про­ цессы в организме или его системную реакцию, как целого. Генетические маркеры биохимического по­ лиморфизма ассоциированы с наследственно д е ­ терминированными особенностями реакций: на клеточном уровне — например, иммунокомпетентных клеток на внешние воздействия, риском реали­ зации иммунотоксического действия химических веществ; на тканевом уровне — резистентностью соединительной, костной или другой ткани к р а з­ личным токсическим воздействиям; на органном уровне — детоксицирующей функцией печени или легких; на системном уровне — особенностями нерв­ ной деятельности, специфическими процессами, наприм ер, б иотрансф орм ацией ксенобиотиков, 79 УКРАЇНСЬКИЙ ЖУРНАЛ З ПРОБЛЕМ МЕДИЦИНИ ПРАЦІ гормональным обеспечением деятельности, антиоксидантными возможностями организма, риском развития вторичного иммунодефицита и онкологи­ ческих заболеваний и прочее. Однако, множественность биохимических про­ цессов, которые необходимо исследовать при т р а ­ диционном подходе к данной проблеме, требует, соответственно, и единовременного применения большого арсенала определенных, достаточно тру­ доемких и громоздких методов, а такж е, что осо­ бенно важно, — большого обьема генетического материала. В частности, наиболее часто прим еняе­ мыми методами при исследовании биохимического полиморфизма являются: 1. М ногоступенчатая процедура выделения г е ­ номной Д Н К из биологических образцов, кото­ рыми могут быть кровь, ткани, содержащие яд­ ра клетки. 2. Эндонуклеазная рестрикция Д Н К , т.е. получе­ ние фрагментов (или сайтов) Д Н К со специфи­ ческими последовательностями из 4 —6, реже 8—12 нуклеотидов, которые могут быть исполь­ зованы в качестве ее генетических маркеров. 3. Физическое картирование полученных сайтов проведением электрофореза в крахмальном, ага­ ровом, агарозном или полиакриламидном геле. 4. Идентификация сайтов Д Н К блот-гибридизацией или гибридизацией in situ с применением флю оресцентных или радиоактивных меток, процедуры которых очень трудоемки. 5. Наконец, ауторадиография в течение 1—5 дней при -70°С и учет результатов. При этом для р е ­ ализации данных методов необходимы не толь­ ко примерно до 10 дней, но и внушительные ко­ личества биологического материала: от 5 до 30 мл крови, граммы тканей. Исходя из вы ш епе­ речисленных методов, очевидны и сущ ествен­ ные недостатки применяемой технологии ис­ следования генетического полиморфизма, и их дороговизна. Американским исследователем Карри Мюллисом в 1983 г был предложен альтернативный метод анализа геномной Д Н К , за что через 10 лет он был удостоен Н обелевской премии. Это — метод поли­ меразной цепной реакции (П Ц Р ), в английской а б ­ бревиатуре — PCR. М етод ПЦР, или специфичес­ кой амплификации, т.е. выборочного копирования определенного участка Д Н К , позволяет избира­ тельно синтезировать in vitro относительно н е­ больш ие участки Д Н К длиной от нескольких д есят­ ков до нескольких сотен пар нуклеотидов (п.о.), р е­ 3-4 ‘2005 ж е — до 1000—2000 или 5000 п.о., используя в к а ­ честве матрицы любые образцы Д Н К , содержащие интересующую исследователя последовательность. Необходимым условием для проведения П Ц Р я в ­ ляется знание специфической нуклеотидной после­ довательности амплифицируемой области Д Н К , так как выбор этого участка для амплификации осущ ествляется путем гибридизации матричной Д Н К с двумя искусственно синтезированны ми праймерами. Последние являю тся олигонуклеотидными фрагментами Д Н К длиной от 15 до 30 п.о., которые комплементарны к 3 ’-концам амплифицируемого участка на смысловой и антисмысловой нитях ДНК- В качестве матрицы для синтеза может быть использован любой тип Д Н К — геномная от отдельных индивидов различных видов про- и эука­ риот, из культур клеток, бактерий, растений [ 16]. С помощью П Ц Р можно непосредственно исследо­ вать места локализации предполагаемых мутаций или наличие полиморфных сайтов, а такж е изучать наличие других специфических особенностей моле­ кулы Д Н К. Д ля проведения П Ц Р не требуется больших количеств матричной Д Н К , и, в принципе, достаточно даж е одной молекулы [37]. При этом в качестве фермента, обеспечиваю щего синтез ко­ пий ф рагментов матричной Д Н К , используется термоф ильная Д Н К -полим ераза, выделенная из бактерий, живущих в горячих источниках, и поэто­ му устойчивая к действию высоких температур. И з ­ вестны, по крайней мере, 9 видов Д Н К -полимеразы, обладающие определенными преимуществами при их использовании в некоторых рецептурах вос­ произведения П Ц Р [36]. Следует отметить, что различные органические компоненты клеток и т к а ­ ней — белки, углеводы, липиды, фрагменты к л е­ точных органелл или мембран в некоторых случаях заметно не препятствуют проведению амплиф ика­ ции. В качестве источника матричной Д Н К можно использовать любой, даж е деструктурированный биологический материал, сохранивший полный н а­ бор фрагментов исходной Д Н К Поэтому для сп е­ цифической амплификации, наряду с очищенной Д Н К , можно использовать высушенные на ф ильт­ ровальной бумаге пятна крови, небольшие кусочки ткани (биоптаты), смывы со слизистых, культу­ ральные среды, луковицы корней волос, цитогене­ тические соскобы, а такж е оставш иеся после паталогоанатомического анализа длительно хранивш и­ еся фиксированные ткани [33]. Информацию о сущности метода ПЦР, техничес­ ких средствах его воспроизведения, рецептуре от­ дельных вариантов постановки, подходах к оптими­ зации процедуры ПЦР, устройстве лаборатории П Ц Р-диагностики, обеспечении мер предосторож­ ности и безопасности при работе с биологическим материалом на всех этапах реализации этого м ето­ да, существующих стандартных протоколах для различных вариантов постановки ПЦР, библиоте­ ках, атласах и картах генов, кодирующих свойства различных белковых молекул с ответственными за это нуклеотидными последовательностями и имею­ щимися праймерами для реализации ПЦР, кроме специализированны х научных ж урналов, можно найти в Internet на информационных сайтах Aport Ru, W eism ann In stitute of Science, Библиотеки Конгресса СШ А и других. По данным журнала LabM edica International, с 1995 г. наблюдается увеличение расходов на П Ц Р диагностику, что является показателем роста ис­ пользования данного метода в практической меди­ цине. Американские ученые констатируют, что з а ­ траты на Д Н К-диагностику с 1996 по 2003 гг. в о з­ росли со 181,6 миллиона до 1400 миллионов дол­ ларов. По данным этого ж е журнала в настоящее время наиболее быстро развиваю тся пять основ­ ных направлений ПЦ Р-диагностики: диагностика инфекционных, онкологических, генетических з а ­ болеваний, идентификация личности, диагностика патогенов в пище. На сегодняшний день больш ин­ ство специалистов мирового сообщ ества по П Ц Р диагностике считают, что наиболее эффективно и экономически рационально использование данного метода для обнаружения микроорганизмов, трудно культивируемых в лабораторных условиях, и ати­ пичных форм бактерий. Поэтому наиболее широко П Ц Р используется: в урогинекологической практи­ ке — для выявления большого перечня специфи­ ческих инфекций данной локализации; в пульмоно­ логии —для дифференциальной диагностики вирус­ ных и бактериальных пневмоний, туберкулеза; в клинике инфекционных болезней — в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллеза, диф те­ рии, вирусных гепатитов; в гастроэнтерологии — для диагностики геликобактериоза; в гематологии — для выявления цитомегаловирусной инфекции, он­ ковирусов. Значительно реж е в открытой печати встречаются научные публикации о применении данного метода для исследования генетического полиморфизма и установления генетических м ар­ керов предрасположенности человека к опреде­ ленным заболеваниям и, особенно, проф ессио­ нальной патологии. С нашей точки зрения, разви ­ тие такого направления исследований в медицине труда является чрезвычайно перспективным. На современном этапе развития медицины труда внед­ рение достижений молекулярной биологии, в ч ас­ тности генетических исследований с применением метода ПЦР, может существенно расширить науч­ ные подходы к исследованию причин возникнове­ ния, в том числе ранних, профессиональных заб о ­ леваний и разработке средств их индивидуальной первичной профилактики путем научно обоснован­ ного профессионального отбора. В конце считаем необходимым привести м не­ ние английского исследователя Гарри Харрис, вы ­ сказанное им в последнем абзац е известной м оно­ графии [26]: «М ы приходим к примечательному парадоксу. О казы вается, что изучение генетики многих болезней мож ет привести к разработке методов их предотвращ ения или лечения, зак л ю ­ чающихся исклю чительно в изменениях среды. Весьма возмож но, что одним из наиболее важных социальных и медицинских аспектов прилож ения генетических исследований окаж ется регулирова­ ние условий среды, поскольку, чем точнее мы см о­ ж ем охарактеризовать генетическую конституцию индивидуума, тем яснее нам станет, каким о б р а ­ зом следует изменять или приспосабливать усл о ­ вия среды соответственно его потребностям ». Литература 4. ГЬрбатовский Л.А., Морозова O.A., Лотош Е.А., Л узина Ф.И. Роль генетических ф акторов в разв и ­ тии сил и коза//М ед. труда и пром. экол.- 1996,№ 7 ,-С. 13-16. 5. Данилов И.П., Протасов В.В., Лотош Е.А., Лузи­ на Ф.А. Некоторые генетические маркеры подвер­ женности профессиональному ф лю орозу//М ед. тру­ да и пром. экол.- 20 0 1 .- № 7,- С. 30-33. 6. Дмитруха Н.М., Стежка В.А., Чумак A.A., Мінченко Ж.М. Імуногенетичні маркери індивідуальної чутливості людини до сполук свинцю, імунологічні і біохімічні критерії шкідливого впливу та ризику для зд оров'я//Ф ізіол. ж у р н - 2 0 0 0 - Т.46, № 2 .-С . 100. 1. Бочков Н.П. К линическая генетика.- М.: Меди­ цина. 19 9 7 ,-2 8 7 с. 2. Гклкина Л.М., Борисова H.A. Генетические осо­ бенности адаптивны х реакций системы гемостаза у работников нефтехимического п р о и зво дства//М а­ тер. конф. «Современные методы диагностики и ле­ чения заболеваний нервной системы»,- Уфа. 1996.С. 82-84. 3. ГЬловенко Н.Я. Некоторые аспекты биохимии, молекулярной биологии и генетики цитохрома Р4 5 0 //С о в р . пробл. токсикол.- 20 0 1 ,- № 3.- С. 17-23. 81 УКРАЇНСЬКИЙ ЖУРНАЛ З ПРОБЛЕМ МЕДИЦИНИ ПРАЦІ 7. Дранник Г.Н., Дизик Г.М. Генетические системы крови человека и болезни.- К.: Здоров'я, 1 9 9 0 - 243 с. 8. Измеров Н.Ф., Капцов В.А., Денисов Э.И., Овакимов В. Г. П роблема оценки профессионального риска в медицине труда//М ед. труда, и пром. экол,1 9 9 3 - № 3 -4 ,- С. 1-4. 9. Козлова С.И., Демикова Н.С., Семанова Е.И., Блинникова Е.И. Наследственные синдромы и медико-генетическое консультирование.- М.: П рактика, 1 996,-410 с. 10. Кордюм В.А. Расш ифровка генома человека: ф иниш чего, старт ку д а?//Л ікування т а діагности­ к а,- 20 0 0 ,- № 3,- С. 6-11. 11. Кузьмина Л.П. Ф енотипические и генотипи­ ческие особенности сы вороточны х и эритроцитарны х белков при профессиональной бронхолегоч­ ной патологии//М ед. труда и пром. экол.- 1997.№ 9.- С. 26-30 12. Кузьмина Л.П., Тарасова Л.А. Биохимический профиль организма: теоретические и практические аспекты изучения и оценки в медицине труда//М ед. труда и пром. экол.- 2000 - № 7.- С. 1-6. 13. Леоненко О.Б., Стежка В.А. Сучасні уявлення про механізми гомеостатичної реакції за участю біотрансформ ації і детоксикації хім ічних речовин, вільнорадикального окислення, імунної т а антиок­ сидантної систем о рганізм у//М атер. XIV з'їзду гігіє­ ністів України «Гігієнічна наука т а практика на рубе­ жі століть».- Дніпропетровськ: АРТ-ПРЕС, 2 0 0 4 .- С. 176-179. 14. Макаров С.В., Спицын В.А., Кравчук О.И. Ге­ нетические факторы предрасположенности к разви ­ тию профессионального ф лю ороза//М ед. труда и пром. э к о л .-2 0 0 0 .- № 6 .- С. 17-21. 15. Морозова О.А., ГЬрбатовский В.Д., Суржиков В Д . и др. Особенности наследственного плиморф изм а у больных силикозом с сопутствующим хро­ ническим бронхитом //М ед. труда и пром. экол.20 0 1 ,- № 4 ,- С. 9-12. 16. Молекулярно-генетические и биофизические методы исследования в м едицине/П од ред. Ю.И.Бажоры, В.И.Кресюна, В .Н .Запорож ана,-К .: Здоров’я, 1996,- 206 с. 17. Нейко Е.М.. Ковальчук Л.Е. Мультифакторні хвороби: від теорії до п р ак ти ки //Л іку ван н я та діаг­ ностика,- 20 0 1 ,- № 4,- С. 14-19. 18. П адакина Е.В. Сезонные особенности некото­ рых биохимических процессов организм а человека при воздействии соединений свинца и его носительстве//С оврем ен н ы е проблемы медицины труда в Украине,- К., 1 9 9 9 ,-С. 39-42. 19. Спицын В.А. Биохимический полиморфизм человека,-М .: МГУ, 1 9 8 5 .-2 1 5 с . 82 3-4 ‘2005 20. Стежка В.А., Падакіна О.В. Сезонні та циркадні ритми взаємопов'язаного фізіологічного функціо­ нування систем вільнорадикального окислення та ендогенних біоантиоксидантів у л ю д и н и//Ф ізіоло­ гія т а патологія імунітету, гемостазу та перекисного окислення ліпідів (зб. наук, праць).-П олтава. 1997.С. 213-215. 21. Стежка В.А., Дмитруха Н.М., Покровська Т.М. т а ін. Критерії імунотоксичності важких металів, ме­ тоди скрінінгового дослідження потенційної токсич­ ності т а імунотоксичної дії ксенобіотиків in уі1хо//Фізіол. ж урн.- 2 0 0 0 .-Т.46, № 2,- С. 65-66. 22. Т арасова Л.А., К узьм ина Л.П., М илищ никова В.В. Изучение генетико-биохимического статуса рабочих, подвергающ ихся воздействию промы ш ­ ленных аэр о зо л е й //5 Росс. нац. конгр. «Человек и лекарство»: тез. докл.- М.. 1998.- С. 460. 23. Трахтенберг И.М., Сова Р.Е., Ш ефтель В.О., Оникиенко Ф.А. Проблемы нормы в токсикологии (современные представления и методические подхо­ ды, основные параметры и константы ).- М.: Меди­ цина, 1991,- 208 с. 24. Трахтенберг И.М., ТЬічинин В.А.. Сова РЕ. и др. Основные показатели физиологической нормы у человека (руководство для токсикологов).- К.: Ави­ ценна, 20 0 1 .- 372 с. 25. Уильямс Р. Биохимическая индивидуальность. Пер. с англ.-М .: Мир, I 9 6 0 .- 210 с. 26. Харрис Г. Основы биохимической генетики человека. Пер. с англ.- М.: Мир, 1973,- 160 с. 27. Хрисанфова Е.Н. Конституция и биохимичес­ кая индивидуальность человека,- М.: МГУ. 1990.230 с. 28. Alexander В.Н., Checkoway H., Costa-M allen P. et al. Interaction of blood lead and aminolevulinic acid dehydratase genotype on workers of hem e synthesis and sperm production in lead sm elter w orkers//E nviron. Health Perspect. - 1998, - V. 106. №4. - P. 213-216. 29. Berydahl I.A., G erhardsson L., Schütz A. et al. Delta-aminolavulinic acid dehydratase polymorphism: Influence on lead levels an d kidney function in h u m a n s//A rc h . Environ. H ealth.- 1 9 9 7 .-V.52, № 2.- P. 91-96. 30. Reszka E., Wasowicz W. Significance of genetic polym orphism s in glutatione S-transferase m ultigene family and lung cancer r is k //In t. J . Occup. Med. Envir. H ealth.- 20 0 1 .- V. 14, № 2,- P .99-1 13. 31. Hani E.N., Stoffers D.A., Chevre J.C . et al. Detective m utations in the insulin prom oter factor-1 (IPF-1) gene in late-onset tipe 2 diabetes m e llitu s// Clin. Invest.- 1 9 9 9 - V. 1 0 4 ,-P. 41-48. 32. Hearch A.C., Bucholz K.K., Madden P.A. et al. Genetic and environm ental contributions to alcohol dependence risk in a national twin sam ple - co nsisten­ cy of findings in women and m en//P sychol. Med.1997.-V.27, № 6.-P. 1381-1396. 33. Higuchi P., von Beroldingen C.H., Seusabangh G.F., Erlich H.A. DNA typing from single h a irs //N a tu re .1988.-V .332.-P. 543-546. 34. Hirvonen A., Pelin K., Tammiletbo I. et al. Inherited GSTM1 and NAT2 defects as concurrent risk modifiers for asbestos-associated hum an malignant mesotheliom a //C a n c e r Res.- 1995.-V. 5 5 .- P. 2981-2983. 35. Hirvonen A. Polymorphism of xenobiotic-metabolising enzymes and suscebtibility to c a n c e r//E n v i­ ron. Health Perspect.- 1999.- V. 107.- P. 37-47. 36. Kogan S.C.. Doherly M., G iischeir J . An im pro­ ved m ethod for prenatal diagnosis of genetic diseases by analysis of amplified DNA seq u en ces//N ew Engl. J . Med.- 1987.- V. 15 - P. 985-990. 37. LiC., Gyllensten U.B., CuiX . e ta l. Amplification and analysis of DNA sequence in single h u m an sperm and diploid c e lls//N a tu re .- 1 9 8 8 ,-V.335.- P. 414-417. 38. Mullis K.B. The u n u su a l origin of the polyme­ rase chain re a ctio n //S c i. A m .- 1990.- V.3.- P. 36-43. 39. Meyer U.A., Zanger U.M. Molecular m echanism s of genetic polym orphism s of d ru g m e ta b o lis m // Pharmacol. Toxicol.- 1 9 9 7 - V.37 - P. 269-296. 40. Nelson D.R., K am ataki T., W axman D .J. The P450 superfamily: Up date on new sequence, gene m apping, accession num bers, early trival nam es, and nom enclature//D N A C ell. Biol.- 1 9 9 3 .-V. 1 2 .- P. 1-51. 41. Palkonen O. Carcinogen m etabolism and indi­ vidual s u s c e p tib ility //S c a n d . J . Work, Environ. H ealth.- 1992.-V.18 (S uppl.l).-P . 17-21. 42. S ithisarankul P., Schw artz B.S., Lee B.-K. et al. Aminolevulinic acid dehydratase genotype m ediates plasm a levels of the neurotoxin, 5-am inolevulinic acid, in lead-exposed w orkers//A m . J . Int. M ed.- 1 9 9 7 V.32.- № 1.- P. 15-20. 43. U w arunkow ania srodowiskow e і genetyczne rak a pluca/P od red. K.Rydzynskiego.- Lodz, 20 0 0 .150 s. П Е РС П ЕК ТИ В И ГЕН ЕТИ ЧН И Х Д О С Л ІЛ Ж Е Н Ь У М ЕД И Ц И Н І П РА Ш ІЗ ЗА СТО СУВАН НЯМ М Е Т О Д А П О Л ІМ Е РА ЗН О Ї Л А Н Ц Ю ГО В О Ї РЕ А К Ц ІЇ Стеж ка В .А ., Верхолаз Н.В. Інститут медииини npaui А М Н України, м.Київ Проведено узагальнення даних літератури стосовно встановлення ассоціації окремих генетичних маркерів полі­ морфізму генів зі зміненою чутливістю організму до впливу факторів виробничого середовища і ризиком розвитку деяких професійних захворювань. Зроблено висновок про те, що принципово нові і важливі наукові результати у медицині праці можуть бути отримані на основі дослідження поліморфізму білкових систем організму із застосу­ ванням метода полімеразної ланцюгової реакції. Це суттєво розширить наукові підходи до індивідуальної первин­ ної профілактики розвитку професійних захворювань шляхом науково обгрунтованого професійного відбору. К л ю чо в і слова: по лім орф ізм генів, індивідуальна схи л ь н ість до захворю вань, м ульти ф акто р іал ьн і захворю вання, про ф есійні захворю вання, полім еразна ланцю гова р еакц ія P E R SPE C T IV E S O F GENETIC STU D IES IN OCCUPATIONAL HEALTH USING A PO LY M ER A SE CHAIN REACTION M ETH OD S tezhka V.A., Verkholaz N.V. Institute for Occupational Health of AM S of Ukraine, Kyiv The generalization of the literature data was performed concerning associations of separate genetic markers of gene poly­ morphism with the changing body sensitivity to work environmental factors and risks of developments of some occupational diseases. It was concluded that new and important scientific results in occupational medicine are supposed to be received bas­ ing on studies of the polymorphism of protein body systems using a polymerase chain reaction method. This will allow to sig­ nificantly broaden scientific approaches to individual primary prevention of occupational disease development through sci­ entifically grounded professional selection. K e y words: gene polym orphism , in d iv id u a l sen sitivity to diseases, m u ltifa c to ria l diseases, o ccup ation al diseases, polym erase ch ain reaction Поступила 21.03.05 Контактное лицо: Стежка A.B., Институт медицины труда АМН Украины, ул. Саксаганского, 75, Киев 01033, Украина
