Витальная видеомикроскопия живых клеточных культур как
advertisement
Витальная видеомикроскопия живых клеточных культур как метод анализа процессов иммортализации и раковой трансформации Доклад Сапун Анастасии Рецензент: к.б.н., доцент, Квитко О.В Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, Минск a.sapun@igc.bas--net.by a.sapun@igc.bas Объекты исследования Культура эмбриональных фибробластов мыши Иммортальная культура из эмбриональных фибробластов человека Получение первичных культур 12-14-тисуточный эмбрион мыши 8-10-тинедельный эмбрион человека Первичная культура Эмбриональные фибробласты мыши Эмбриональные фибробласты человека Максимальная Биологический (рекордная) вид продолжительность жизни Частота раковой трансформации (в пересчете на клеточную генерацию в отн. ед.) 122 года 1 4 года 105 - 106 Исследование изменений, происходящих в клеточных популяциях в процессе становления иммортализированной культуры из эмбриональных фибробластов мыши Препарат эмбриональных фибробластов через 72 часа культивирования В культуре 2 на 38 В культуре 3 на 38 сутки появляются сутки – звездчатонебольшие группы подобные струкклеток атипичной туры, несвойственные для нормальокруглой формы ных стареющих культур Изменение морфотипов эмбриональных фибробластов мыши как первый признак иммортализации культуры Культура 1 Монослой из веретеновидных клеток Культура 2 В монослое увеличивается количество округлых клеток Культура 3 Появление редко расположенных многослойных агрегатов Морфофенотипические изменения на 58 сутки клеточных линий, полученных из эмбриона мыши Культура 1 Культура 2 Культура 3 Появление многослойных агрегатов во всех трех культурах из эмбриона мыши на 65-е сутки культивирования Исследование изменений, происходящих в клеточных популяциях в процессе становления иммортализированной культуры из эмбриональных фибробластов человека Культура 1 Культура 2 Культура 3 Монослой из клеток веретеновидной формы Появление многослойных агрегатов клеток «Звездчатый» монослой Возникновение и экспансия аномальных округлых клеток на фоне веретеновидного монослоя Динамика изменения числа округлых и веретеновидных клеток на ростовом субстрате в иммортализированной культуре фибробластов человека а) 2 сутки б) 3 сутки в) 4 сутки г) 5 сутки Спасибо за внимание!
