Диагностическая ценность прижизненных методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота, используемых в широкой ветеринарной практике Найманов А.Х., Всероссийский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко (Москва, Россия) В настоящее время мероприятия по профилактике и борьбе с туберкулёзом животных в Российской Федерации проводятся в соответствии Санитарных и Ветеринарных правил «Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных», утверждённых Госкомсанэпиднадзором и Департаментом ветеринарии МСХ Российской Федерации 18 июня 1996 г. и «Наставлением по диагностике туберкулёза животных», утверждённого Департаментом ветеринарии МСХ Российской Федерации 18 ноября 2002 г. В соответствии этих утверждённых нормативных документов основным методом прижизненной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота является внутрикожная туберкулиновая проба. В качестве дополнительных методов диагностики применяют глазную пробу, пальпебральную пробу, внутривенную пробу, симультанную пробу с ППД туберкулином для млекопитающих и комплексным аллергеном из атипичных микобактерий (КАМ) и симультанную пробу с ППД - туберкулином для млекопитающих и ППД - туберкулином для птиц. В соответствии с «Наставлением по диагностике туберкулёза животных» глазной метод туберкулинизации применяют у крупного рогатого скота только одновременно с внутрикожной пробой в неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах для дополнительного выявления заражённых животных. Глазную пробу также можно использовать одновременно с внутрикожной пробой при отборе животных для диагностического убоя. Пальпебральный метод туберкулинизации применяют одновременно с внутрикожной пробой для дифференциации неспецифических реакций на туберкулин. Внутривенную туберкулиновую пробу применяют с целью отбора животных для диагностического убоя из числа реагирующих на туберкулин животных в благополучных по туберкулёзу стадах. Симультанную пробу с туберкулинами для млекопитающих и для птиц применяют для дифференциации неспецифических реакций у крупного рогатого скота и свиней при первичной постановке диагноза и для контроля благополучия животных по туберкулёзу в стадах, где реакции на туберкулин обусловлены сенсибилизацией животных микобактериями комплекса авиум - интрацеллюляре или атипичными микобактериями. Симультанную пробу с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ применяют для диагностики туберкулёза крупного рогатого скота при первичной постановке диагноза, а также для контроля за благополучием хозяйств, где реакции на туберкулин обусловлены сенсибилизацией животных атипичными микобактериями. Целью проведённых нами исследований является сравнительное изучение и определение диагностической ценности утвержденых методов прижизненной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота, используемых в ветеринарной практике нашей страны. Материалы и методы При сравнительном изучении различных диагностических тестов аллергические исследования проводили в соответствии утверждённых методик, представленных в «Наставлении по диагностике туберкулёз животных» от 2002 года. Сравнительное изучение внутрикожной и глазной пробы провели на 1064 головах крупного рогатого скота четырех длительно неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах. Провели убой 62 исследованных животных. Сравнительное изучение внутрикожной и пальпебральной пробы провели на 35 экспериментально заражённых М. bovis тёлках, на 136 головах крупного рогатого скота в одном благополучном хозяйстве, на 2 917 головах крупного рогатого скота 7 благополучных хозяйств, где была установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями, на 2 468 головах крупного рогатого скота 7 неблагополучных по туберкулёзу хозяйств. Провели убой 148 исследованных животных. Сравнительное изучение внутрикожной и внутривенной туберкулиновых проб провели на 18 здоровых животных в одном благополучном хозяйстве, на 33 экспериментально заражённых М. bovis тёлках, на 53 реагировавших на туберкулин животных благополучных хозяйств, где была установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями, на 49 головах крупного рогатого скота, реагировавших на внутрикожное введение туберкулина в неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах. Провели убой 10 исследованных животных. Диагностическую ценность симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц изучали на 516 головах крупного рогатого скота двух благополучных хозяйств, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиуминтрацеллюляре, на 5 504 головах крупного рогатого скота четырёх благополучных хозяйств, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными (атипичными) микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена. Диагностическую ценность симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и К AM изучали на 355 головах крупного рогатого скота в одном благополучном хозяйстве, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум - интрацеллюляре, на 11 467 головах крупного рогатого скота 20 благополучных хозяйств, где была установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена. Результаты исследований и обсуждение Диагностическая ценность глазной туберкулиновой пробы Сравнительное изучение диагностической ценности внутрикожной и глазной туберкулиновых проб мы провели в четырех длительно неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах на 1064 головах крупного рогатого скота. В хозяйстве 1, при исследовании 100 голов крупного рогатого скота реагировали по группам животных: на однократное внутрикожное введение от 95,0 до 100% исследованных животных, на первое глазное введение туберкулина от 0 до 25,0%, на второе глазное введение - от 16,5 до 70,0% исследованных животных. В хозяйстве 2, при исследовании 162 голов крупного рогатого скота реагировали по группам животных: на однократное внутрикожное введение от 85,0 до 100% животных, на первое глазное введение от 0 до 53,5%, на второе глазное введение от 18,5 до 90,0% исследованных животных. В хозяйстве 3, при исследовании 262 голов крупного рогатого скота методами однократной внутрикожной и двойной глазной пробы (с интервалом между повторным глазным введением через 6 суток), на внутрикожное введение реагировало 251 (95,8%) животных, на первое глазное введение реагировало 35 (11,4%), на второе глазное введение реагировало 130 (49,6%) исследованных животных. В хозяйстве 4, при исследовании 270 голов крупного рогатого скота методами однократной внутрикожной пробы и двойной глазной пробы (с интервалом между повторным глазным введением 72 часа) на внутрикожное введение реагировало 236 (87,4%), на первое глазное введение реагировало 57(21,1%), на второе глазное введение реагировало 197 (72,9%) исследованных животных. Итого, в длительно неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах по группам животных реагировало на внутрикожную пробу от 85,0 до 100% животных, на первое глазное введение реагировало от 0 до 53,5%, на второе глазное введение от 18,5 до 90,0% исследованных животных. В целях выяснения подтверждаемости аллергических реакций на внутрикожное и глазное введение туберкулина провели убой 62 исследованных животных. Из числа убитых животных 58 (93,5%) реагировали на внутрикожное введение туберкулина, характерные для туберкулёза изменения обнаружены у 47 (81,0%) реагировавших животных. Не реагировали на внутрикожное введение 4 животных, у которых в 2 случаях обнаружены характерные для туберкулёза изменения. Из числа убитых животных 38 (61,3%) реагировали на глазное введение, характерные для туберкулёза изменения обнаружены у 32 (84,2%) реагировавших животных. Не реагировали на двукратное глазное введение туберкулина 24 животных, у которых в 17 (70,8%) случаях обнаружены характерные для туберкулёза изменения. Полученные результаты исследований показывают, что однократная внутрикожная проба намного чувствительнее, чем двукратная глазная проба. Так, глазная проба недовыявляет значительное количество (до 70,8%) больных туберкулёзом животных. Кроме того, внутрикожная проба удобна и проста для выполнения, особенно при использовании безигольных инъекторов. Глазная проба трудоёмка и -длительна для исполнения. При применении усовершенствованного метода глазной пробы, на двукратное глазное введение туберкулина с интервалом 2 дня (через 72 ч) несколько повышается чувствительность пробы, однако, специфичность - остаётся на низком уровне, т.е. так же недовыявляются в большом количестве больные туберкулёзом животные. Поэтому, в настоящее время глазная проба не применяется при диагностике туберкулёза ни в одной стране мира. В нашей стране глазную пробу также практически не применяют. Иногда её используют в благополучных хозяйствах в целях отбора животных для диагностического убоя. Диагностическая ценность пальпебральной туберкулиновой пробы Экспериментально заражённые туберкулёзом бычки через 1,5 месяца после заражения реагировали на внутрикожную пробу в количестве 34 (97,1%) животных, с интенсивностью реакций 11,2+1,4 мм. Через 2,5 мес. после заражения, при исследовании этих животных внутрикожной и пальпебральной пробами, на внутрикожную пробу реагировало 24 (68,7%), а на пальпебральную - 22 (62,9%) животных. В благополучном по туберкулёзу хозяйстве здоровые животные не реагировали на внутрикожное и пальпебральное введение ППД - туберкулина для млекопитающих. В неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах при исследовании 2 468 голов крупного рогатого скота выявлено 1008 (40,8%) реагирующих животных, из них 684 (67,9%) реагировали на обе пробы. Кроме того, выявлено 166 (16,4%) животных, реагировавших только на внутрикожное и 158 (15,7%) животных, реагировавших только на пальпебральное введение туберкулина. В целях подтверждения результатов аллергических исследований провели диагностический убой 148 реагирующих животных. При дальнейших патологоанатомических и лабораторных исследованиях туберкулёз подтвердили у 118 (80,0%) реагировавших на внутрикожную пробу и 111 (75,0%) животных, реагировавших на пальпебральную пробу. В благополучных по туберкулёзу хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями, получены следующие результаты исследований. В хозяйстве 1, при исследовании 210 голов крупного рогатого скота, на внутрикожную пробу реагировало 14 (6,6%), на пальпебральную пробу - 4 (1,9%) исследованных животных. В хозяйстве 2, при исследовании 350 голов крупного рогатого скота, на внутрикожную пробу реагировало 21 (6,0%) животных, на пальпебральную пробу - реагирующих животных не выявили. В хозяйстве 3, при исследовании 209 голов крупного рогатого скота на внутрикожную пробу реагировало 14 (6,7%) животных, а на пальпебральную пробу выявили только одну (0,5%) реагирующую корову. В хозяйстве 4, при исследовании 9100 голов крупного рогатого скота, на внутрикожное введение реагировало - 14 (1,5%), на пальпебральную пробу - реагирующих животных не выявили. В хозяйстве 5, при исследовании 356 голов крупного рогатого скота, на внутрикожную пробу реагировало - 25 (7,0%), на пальпебральную пробуреагирующих животных не выявили. В хозяйстве 6, при исследовании 416 голов крупного рогатого скота, на внутрикожное введение реагировало 39 (9,4%) животных, на пальпебральное введение - реагирующих животных не выявили. В хозяйстве 7, при исследовании 466 голов крупного рогатого скота на внутрикожное введение реагировало 31 (6,6%) животных, а на пальпебральное введение реагировало - 3 (0,6%) исследованных животных. Итого в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями, при исследовании 2 917 голов крупного рогатого скота выявлено: на внутрикожную пробу - 158 (5,4%), а на пальпебральную пробу 8 (0,3%) реагирующих животных. Полученные результаты исследований показывают, что в благополучных по туберкулёзу хозяйствах здоровые животные не реагируют на внутрикожное и пальпебральное введения туберкулина, экспериментально заражённые М. bovis тёлки и инфицированные туберкулёзом животные в неблагополучных хозяйствах реагируют на внутрикожную пробу в незначительно большем количестве, чем на пальпебральную пробу, в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями на пальпебральную туберкулиновую пробу реагирующие животные не выявляются или выявляются в единичных (до 0,3%) случаях. Диагностическая ценность внутривенной туберкулиновой пробы В благополучном по туберкулёзу хозяйстве установлено, что здоровые коровы не реагируют на внутрикожное и внутривенное введения туберкулина. Из 33-х экспериментально заражённых M.bovis тёлок реагировали: на внутрикожное введение туберкулина 32 (96,9%), на внутривенное - 14 (42,45) животных. Причём положительную реакцию на внутривенную пробу наблюдали через 6 часов после введения у 10 тёлок и через 9 часов ещё у 4 тёлок. В благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями при переисследовании реагировавших на внутрикожное введение туберкулина животных внутривенной пробой - реагирующих животных не выявили. В неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах при исследовании 49 реагировавших на внутрикожную пробу животных, на внутривенную пробу выявили 18 (51,4%) животных (с повышением температуры тела на 1° и выше максимально нормальной температуры тела, т.е. выше 40,5°). При диагностическом убое 10 реагировавших на внутривенное введение туберкулина коров в 6 (60,0%) случаях обнаружены характерные для туберкулёза изменения. Следует отметить, что все 10 убитых коров реагировали и на внутрикожное введение туберкулина. Полученные результаты исследований показывают, что здоровые и сенсибилизированные нетуберкулёзными микобактериями животные из благополучных по туберкулёзу хозяйств не реагируют на внутривенное введение туберкулина. Экспериментально заражённые туберкулёзом животные в 42,4% случаев, а больные туберкулёзом животные в 51,4% случаях дают положительные показания на внутривенное введение туберкулина, то есть внутривенная проба по чувствительности значительно уступает внутрикожной пробе. Кроме того, трудоёмка для исполнения (в связи с необходимостью фиксации животных для внутривенного введения большой дозы туберкулина и необходимостью проведения неоднократного измерения температуры тела исследуемых животных). Диагностическая ценность реакций симультанной пробы с использованием ППД - туберкулина для млекопитающих и ППД туберкулина для птиц Исследования в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре. В хозяйстве 1, при исследовании 371 голов крупного рогатого скота выявлено 78 (21,0%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД для млекопитающих - (знак +) - 9, с меньшей реакцией (знак -) - 65, с равной реакцией (знак =) - 4. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на ППД - туберкулин для птиц. В хозяйстве 2, при исследовании 145 голов крупного рогатого скота выявлено 46 (31,7%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД для млекопитающих - 14, с меньшей реакцией - 25, с равной реакцией - 7. Результат симультанной пробы неопределённый. Исследования в благополучных хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена. В хозяйстве 1, при исследовании 111 голов крупного рогатого скота выявлено 30 (27,0%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 16, с меньшей реакцией - 8, с равной реакцией - 6. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 2, при исследовании 1 804 голов крупного рогатого скота выявлено 60 (3,3%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 27, с меньшей реакцией - 19, с равной реакцией - 14. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 3, при исследовании 2 810 голов крупного рогатого скота выявлено 95 (3,40%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД-туберкулин для млекопитающих— 58, с меньшей реакцией - 21, с равной реакцией - 16. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на ППД - туберкулин для млекопитающих. В хозяйстве 4, при исследовании 768 голов крупного рогатого скота выявлено 97 (12,6%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 35, с меньшей реакцией - 32, с равной реакцией - 30. Результат симультанной пробы неопределённый. Полученные результаты исследований показывают, что при применении симультанной пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и ППД - туберкулином для птиц лучшие дифференцирующие результаты получены в хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиуминтрацеллюляре. В хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями III и IY гр. по классификации Раньена получены неопределённые результаты, а в одном благополучном хозяйстве — получен ошибочный результат исследований, т.е. по результатам симультанной пробы реакции были достоверно более выражены на ППД для млекопитающих. Кроме того, следует отметить, что в соответствии «Наставления по диагностике туберкулёза животных» от 2002 г. результаты исследований на симультанную пробу с ППД для млекопитающих и ППД для птиц следует оценивать индивидуально или в целом по стаду. Однако в этом наставлении представлена только методика проведения индивидуального учёта. Следует указать, что в последние годы на территории нашей страны сенсибилизация крупного рогатого скота микобактериями туберкулёза птичьего вида встречается крайне редко. В основном устанавливают сенсибилизацию животных нетуберкулёзными микобактериями III и IY гр. по Раньену. Анализ бактериологических исследований, проведённых в лаборатории микобактериозов ВИЭВ, показывает, что из патматериала реагировавших на туберкулин и убитых с диагностической целью животных из благополучных хозяйств в большинстве случаев выделяются быстрорастущие нетуберкулёзные микобактерии IY гр. по классификации Раньена. Отчётные данные производственных лабораторий также подтверждают данные наших исследований. Так, на территории Российской Федерации ветеринарные лаборатории выделяют от реагировавших на туберкулин животных нетуберкулёзные микобактерии, которые в процентном соотношении распределяются следующим образом: 1 гр. -2,0%, 2 гр. 19,7%, 3 гр. - 16,8%, 4 гр.- 59,5%. Диагностическая ценность симультанной пробы с использованием ППД - туберкулина для млекопитающих и КАМ. В хозяйстве, где была установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиум-интрацеллюляре, при исследовании 355 голов крупного рогатого скота выявлено 44 (12,4%)реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД -туберкулин для млекопитающих - 8, с меньшей реакцией - 28, с равной реакцией - 8. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ. Исследования в хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных нетуберкулёзными микобактериями III и IV гр. по классификации Раньена. В хозяйстве 1, при исследовании 88 голов крупного рогатого скота выявлено 29 (32,9%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих — 5, с меньшей реакцией — 18, с равной реакцией - 5. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ. В хозяйстве 2, при исследовании 179 голов крупного рогатого скота выявлено 4 реагирующих животных только на КАМ. В хозяйстве 3, при исследовании 103 голов крупного рогатого скота выявлено 3 реагирующих животных только на КАМ. В хозяйстве 4, при исследовании 80 голов крупного рогатого скота выявлено 5 реагирующих животных только на КАМ. В хозяйстве 5, при исследовании 890 голов крупного рогатого скота выявлено 74 (8,3%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 6, с меньшей реакцией - 56, с равной реакцией - 12. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ. В хозяйстве 6, при исследовании 1 327 голов крупного рогатого скота выявлено 92 (6,9%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 6, с меньшей реакцией - 56, с равной реакцией - 12. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ. В хозяйстве 7, при исследовании 540 голов крупного рогатого скота выявлено 42 (7,7%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 13, с меньшей реакцией - 21, с равной реакцией — 8. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 8, при исследовании 722 голов крупного рогатого скота выявлено 50 (6,9%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 31, с меньшей реакцией - 8, с равной реакцией — 1 1 . Результат симультанной пробы достоверно более выражен на ППД - туберкулин для млекопитающих. В хозяйстве 9, при исследовании 2 980 голов крупного рогатого скота выявлено 74 (2,4%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 13, с меньшей реакцией - 35, с равной реакцией - 6. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ. В хозяйстве 10 , при исследовании 128 голов крупного рогатого скота, выявлено 8 реагирующих животных только на КАМ. В хозяйстве 11, при исследовании41 749 голов крупного рогатого скота выявлено 105 (6,0%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 43, с меньшей реакцией - 43, с равной реакцией - 19. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 12, при исследовании 278 голов крупного рогатого скота выявлено 58 (20,8%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 3, с меньшей реакцией - 29, с равной реакцией - 27. Результат симультанной пробы достоверно более выражен на КАМ. В хозяйстве 13, при исследовании 135 голов крупного рогатого скота выявлено 25 (18,5%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 4, с меньшей реакцией - 12, с равной реакцией — 9. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 14, при исследовании 435 голов крупного рогатого скота выявлено 57 (13,1%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих — 17, с меньшей реакцией — 17, с равной реакцией — 21. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 15, при исследовании 476 голов крупного рогатого скота выявлено 40 (8,4%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 13, с меньшей реакцией - 21, с равной реакцией — 4. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 16, при исследовании 428 голов крупного рогатого скота выявлено 32 (7,4%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 24, с меньшей реакцией - 5, с равной реакцией - 3. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 17, при исследовании 640 голов крупного рогатого скота выявлено 56 (8,7%) реагирующих животных, из них с большей реакцией на ППД - туберкулин для млекопитающих - 25, с меньшей реакцией - 15, с равной реакцией — 16. Результат симультанной пробы неопределённый. В хозяйстве 18, при исследовании 125 голов крупного рогатого скота выявлено 101 животное, реагирующие только на КАМ. В хозяйстве 19, при исследовании 109 голов крупного рогатого скота выявлено 7 животных, реагирующих только на КАМ. В хозяйстве 20, при исследовании 55 голов крупного рогатого скота выявлено 2 животных, реагирующих только на КАМ. Следует отметить, что список благополучных хозяйств, где мы применяли симультанную пробу с туберкулином и КАМ можно удвоить, но в этом нет необходимости, так как результаты исследований были примерно такими же. Анализ полученных результатов исследований показывает, что применение симультанной пробы с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ в благополучных по туберкулёзу хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных микобактериями комплекса авиуминтрацеллюляре и нетуберкулёзными микобактериями III и IV гр. по Раньену позволяет до 47,6% случаях дифференцировать неспецифические реакции по стаду животных. Тем не менее, считаем, что главная диагностическая ценность симультанной пробы заключается в том, что при её применении значительно сокращается количество реагирующих на туберкулин животных. Так, в благополучных хозяйствах, при исследовании реагирующих на туберкулин животных симультанной пробой с ППД - туберкулином для млекопитающих, как правило, многие реакции переходят на КАМ или превалируют на КАМ, то есть в конечном итоге «сужается поиск» животных для диагностического убоя, так как при применении симультанной пробы убою подлежат животные, более интенсивно реагирующие на туберкулин или при их отсутствии - реагирующие в равной степени на ППД - туберкулин для млекопитающих и КАМ. К недостаткам симультанной пробы следует отнести небольшую эффективность. Так, по сообщениям некоторых авторов из разных регионов, применение симультанной пробы с ППД - туберкулином и КАМ позволяет дифференцировать неспецифические реакции от 0 до 77% случаях. Кроме того, в соответствии наставления симультанная проба с ППД для млекопитающих и КАМ «является групповой и даёт возможность ориентироваться в ситуации по туберкулёзу лишь в целом по стаду или группе (не менее 6 голов) исследуемых животных». Проведённые нами многочисленные исследования по изучению возможности дифференциации неспецифических реакций на туберкулин показывают, что учёт результатов симультанной пробы с ППД для млекопитающих и КАМ можно проводить по группе животных, а при получении неопределённых результатов исследований - необходимо проводить индивидуальный учёт по каждой корове. В связи с тем, что в благополучных хозяйствах Российской Федерации, в основном, устанавливают сенсибилизацию крупного рогатого скота атипичными (нетуберкулёзными) микобактериями, а сенсибилизация М. avium встречается относительно редко, для дифференциации неспецифических реакций предпочтительно применять симультанную пробу с ППД туберкулином для млекопитающих и КАМ. В связи с тем, что Россия готовится к вступлению в Всемирную торговую организацию (ВТО) считаем необходимым представить какими стандартными методами проводят прижизненную диагностику туберкулёза крупного рогатого скота в странах Евросоюза. Так, в руководствах диагностических тестов и вакцинаций от 2000 г. и 2004 г. «Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines», 2000, «Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals», 2004, указано: внутрикожную туберкулиновую пробу проводят в области шеи или подхвостовой складки. Считается, что кожа в области шеи более чувствительна, чем в области подхвостовых складок. Учёт результатов внутрикожной пробы проводят через 72 часа после введения туберкулина. В неблагополучных по туберкулёзу стадах любая заметная или ощутимая припухлость в месте введения туберкулина считается положительной реакцией. В благополучных стадах: отрицательная реакция - утолщение кожной складки до 4 мм, без клинических признаков воспаления; положительная реакция - утолщение кожной складки более 4 мм или наличие утолщения кожной складки со всеми признаками воспаления (отёк, экссудация, некроз, боль, воспаление местных лимфатических сосудов или лимфатических узлов); Симультанную туберкулиновую пробу с применением ППД туберкулина бычьего вида и ППД - туберкулина для птиц проводят на одной стороне шеи. При этом расстояние между двумя туберкулинами должно составлять 12-15 см. Телятам (в связи с недостаточностью места на одной стороне шеи) симультанную пробу рекомендуют проводить на симметричных участках шеи справа и слева. ППД - туберкулин для млекопитающих и ППД - туберкулин для птиц вводят в дозе 2000 международных единиц (ME) в 0,2 мл. Учёт результатов симультанной пробы проводят через 72 часа после введения туберкулинов. Реакция считается положительной при увеличении кожной складки на ППД - туберкулин бычьего вида более 4 мм, чем на ППД туберкулин для птиц. Сомнительная реакция - при увеличении кожной складки на 1-4 мм больше на ППД бычьего вида, чем на ППД для птиц. Отрицательная реакция - при равной реакции на туберкулины или при увеличении кожной складки на ППД бычьего вида меньше, чем на ППД туберкулин для птиц. Такая интерпретация результатов симультанной туберкулиновой пробы используется в странах Европейского Союза и рекомендуется в Директиве 64/432/ЕЕС. То есть, учет результатов симультанной пробы в странах Европейского Союза проводится индивидуально по каждому исследованному животному. В нашей стране приказом Департамента ветеринарии МСХ Российской Федерации №33 от 11.01.02 г. была создана комиссия в составе сотрудников Департамента ветеринарии, Курской биофабрики, ВГНКИ и ВИЭВ для проведения комиссионных исследований активности национального стандарта ППД - туберкулина для млекопитающих по отношению к международному стандарту PPD bovine. В результате проведённых исследований установлено, что при введении 0,2 мл стандартного раствора ППД - туберкулина для млекопитающих крупному рогатому скоту, доза введения составляет 10000 ТЕ ранее используемых туберкулиновых единиц активности, что эквивалентно величине туберкулиновой активности, выраженной в международных единицах - 2000 ME первого международного стандарта PPD bovine. To есть, диагностическая доза ППД - туберкулина для млекопитающих 10000 ТЕ соответствует активности 2000 ME международного стандарта для этого вида туберкулина. В завершение публикации, следует особо отметить, что при туберкулёзе нет ни одного идеального метода диагностики. Поэтому, диагностика туберкулёза должна быть комплексной. На современном этапе борьбы с этой древней и сложной инфекцией необходимо знать все особенности известных методов диагностики и с учётом достоинств и недостатков этих методов, подбором наиболее оптимальных методов использовать разные комплексы методов диагностики: для благополучных хозяйств; для неблагополучных по туберкулёзу хозяйств; для индивидуальных хозяйств частного сектора. Для объективной оценки диагностической ценности и возможности применения в широкой ветеринарной практике утвержденных методов прижизненной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота считаем необходимым отметить все положительные и отрицательные качества каждого метода диагностики туберкулёза. Внутрикожная проба - наиболее чувствительная и приемлемая для проведения массовых прижизненных диагностических исследований на туберкулёз крупного рогатого скота. Тем более, что повсеместное применение безыгольных инъекторов значительно облегчает проведение этих исследований. Основным, общеизвестным недостатком внутрикожной пробы является выявление неспецифических реакций. Пальпебральная проба — по чувствительности уступает внутрикожной пробе, но намного превосходит глазную пробу. К недостаткам пальпебральной пробы следует отнести: трудоёмкость - так как необходима фиксация головы животного при введении туберкулина, некоторый субъективизм при оценке реакции (при незначительных, сомнительных реакциях). К преимуществам: нет необходимости проводить выстрижку в месте введения туберкулина и фиксировать животных при учёте реакции. Глазная проба (офтальмопроба) - слабо чувствительная, трудоёмкая и длительная (требуется 6-7 дней для выполнения) по сравнению с внутрикожной и пальпебральной пробами. Для нанесения 3-5 капель туберкулина на конъюнктиву нижнего века или поверхность роговицы глаза, необходима хорошая фиксация животного, причём голову животного необходимо вывернуть набок, чтобы исследуемый глаз был обращен вверх, что довольно сложно при проведении массовых исследований. Быковпроизводителей практически невозможно исследовать глазной пробой. Кроме того, при применении глазной пробы необходимо каждые 3 часа неоднократно проводить учёт реакции (в том числе и в тёмное время суток). Внутривенная проба - слабо чувствительная и наиболее трудоёмкая, так как требуется фиксация животных, введение в ярёмную вену большой дозы туберкулина, неоднократное измерение температуры тела животного до и после введения туберкулина, то есть эту пробу нельзя использовать для массовых исследований животных. Заключение На современном этапе борьбы с туберкулёзом животных, внутрикожная туберкулиновая проба является основным методом прижизненной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота, и при правильном и умелом её использовании, в комплексе с другими дополнительными методами диагностики, внутрикожная проба в обозримом будущем будет оставаться основным методом прижизненной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота. Для дифференциации неспецифических реакций следует применять симультанную туберкулиновую пробу с ППД - туберкулином для млекопитающих и КАМ, с учётом результатов исследований по группам животных и индивидуально по каждой корове. Пальпебральную туберкулиновую пробу следует применять как дополнительный метод дифференциации неспецифических реакций на туберкулин и в целях отбора реагирующих животных для диагностического убоя. При этом реагирующими следует считать животных с положительными показаниями на обе пробы.