Alanine aminotransferase (ALT)

Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
Международная Федерация по Клинической
Химии (IFCC) без пиридоксальфосфата, 2
реагента
Назначение
Диагностический реагент аланинаминотрансфераза
(АЛТ)
используется
для
количественного
определения в лабораторных условиях
аланин
аминотрансферазы в сыворотке крови человека
методом фотометрии.
Обозначение
Содержание
GP4040
GP6040
GP7040
GP8040
GP9040
R1:2×400mL; R2:2×80mL
R1:4×80mL; R2:4×16mL
R1:5×60mL; R2:5×12mL
R1:3×40mL; R2:3×8mL
R1:2×80mL; R2:2×16mL
ALT Reagent
ALT Reagent
ALT Reagent
ALT Reagent
ALT Reagent
(1)
Клиническое значение
Фермент аланинаминотрансфераза(АЛТ) широко
представлен в различных
тканях организма.
Основным источником АЛТ является печень,
что привело к применению АЛТ для изучения
заболеваний печени. Повышенный уровень АЛТ
сыворотки
обнаруживают при
гепатитах,
циррозах печени, и желтухе.
(2, 3)
Принцип метода
Исследование основано на двухэтапной реакции:
АЛТ
1.
α-кетоглютарат+L-Аланин
L-глутамат + пируват
2.
ЛДГ
Пируват + НАДФ + H
L-лактат + НАД+
НАДФ
окисляется до НАД+, уменьшение
поглощения при 340 нм прямо пропорционально
активности АЛТ в образце.
Компоненты комплекта
Состав
Реагент 1(R1)
Реагент2(R2)
Трис-буфер
L-Аланин
ЛДГ
НАДФ
α-кетоглютарат
Исходные
концентрации
растворов
80 ммол/Л, pH=7.8
200 ммол/Л
>1.2U/мЛ
0.18 ммол/Л
12 ммол/Л
Хранение и стабильность
Невскрытые комплекты(флаконы): до истечения
срока годности при 2-8 ℃..
Стабильность вскрытых реагентов при условии
нахождения на «борту» автоматического
биохимического анализатора -30 дней.
Подготовка препарата (4)
Сыворотка
Стабильность: 3 дня при температуре 15-25℃
4 дня при температуре 2-8℃.
Процедура анализа
Действительно с 2010.05.01
версия: 01
Реагент 1
Дистиллиров
анная вода
Образец
Реагент 2
Бланк
200μl
20μl
40μl
Образец
200μl
20μl
40μl
Смесь инкубируется в течение 1 минуты при 37℃.
Прочитать коэффициент поглощения в течение 2
минут и вычислить среднюю скорость изменения
коэффициента поглащения ΔA/ мин.
Основная длина волны 340нм
Суб длина волны
410 нм
Метод
показатель
Фактор(F*)
2090
Расчеты
АЛТ (U/L) = ΔA/мин × F*.
Tv × 1000
Фактор =
ε× Sv × L
ε: коэффициент экстинкции μmolar
Tv: Общий объем реакционной смеси (мл)
Sv: Объем образца (мЛ)
L:
оптический путь (1,0 см)
Референтный интервал (5)
Мужчины: до 41 Ед / Л
Женщины: до 33 Ед / Л
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория
устанавливала свой образцовый интервал
Контроль качества
Для ежедневного контроля качества рекомендуются
Лидмэн мультибиохимические контроли.
Контроль интервалов и ограничений должен быть
адаптирован к индивидуальным требованиям каждой
лаборатории. Полученные значения
должны
находиться в определенных пределах. Каждая
лаборатория должна выработать меры по устранению,
которые должны быть приняты, в случае если
значения выходят за пределы.
Калибровка
Бланк калибровки рекомендуется:
- при изменении номера Лота реагентов.
- Контрольные значения изменились или находятся
вне диапазона и новая пробирка контроля не
устраняет проблему.
Метрологические характеристики
Линейность
Метод линейный до 600 Ед / Л.
Образцы выше этой концентрации необходимо
разбавить 1 +1(один к одному) с 0,9% раствором
хлорида натрия , результат умножается на 2.
Аналитическая чувствительность (нижний предел
обнаружения)
Предел обнаружения: 2Ед/Л. (АНАЛИЗАТОРЫ
ХИТАЧИ)
CE-JS-003-ALT-01
стр 1 из 2
Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
Международная Федерация поКлинической
Химии (IFCC) без пиридоксальфосфата, 2
реагента
Точность (при 37℃ )
Внутрисерийная
n= 20
Уровень 1
Уровень2
Значение (U/L)
20.1
142.4
0.55
2.06
SD（U/L）
CV (%)
Межсерийная
n= 20
Значение (U/L)
SD（U/L）
CV (%)
2.75
1.45
Уровень 1
81.2
1.60
1.97
Уровень 2
142.1
2.55
1.80
Интерференция
Влиянием
следующих
веществ
можно
пренебречь, если концентрация следующих
веществ находится на уровне или ниже данных
значений.
Вещества
Прямой билирубин
Общий билирубин
Гемоглобин
Интралипид
ВС
Концентрации
40 мг/дл
40 мг/дл
100 мг/дл
1.6 %
50 мг/дл
Сравнение методик
Сравнение определения аланинаминотрансферазы
используя метод Лидмэн (у) с другим коммерчески
доступным методом (х) дало следующее соотношение
(Ед / Л):
у = -1,2270 + 1,0689 х
R = 0,9990
Количество образцов измерения: 102
Показатели образцов были между 3,8 и 596,9 Ед / Л.
Автоматизация
Специальные приспособления для автоматических
анализаторов могут быть сделаны по запросу.
Меры предосторожности и предупреждения
Общие меры предосторожности
Использовать только для диагностики in vitro.
Диагноз должен быть поставлен только после принятия
во внимание клинических симптомов и результатов
других испытаний .
Выполнение
обычных
мер
предосторожности,
необходимых для обработки всех лабораторных
реагентов.
Удаление всех отходов должно осуществляться в
соответствии с местными правилами.
Действительно с 2010.05.01
CE-JS-003-ALT-01
версия: 01
стр 2 из 2
Меры предосторожности для измерения
Образцы должны рассматриваться как потенциально
инфекционные (ВИЧ, вирус гепатита В, вирус гепатита
С, и т.д.) и необходимо обращаться с ними с
соответствующей осторожностью.
Реагенты с другими серийными номерами не должны
быть заменены или смешаны.
Для диагностических целей, результаты всегда должны
быть оценены в сочетании с историей болезни пациента,
клиническими обследованиями и другими выводами.
Данные
по
безопасности
материалов
профессиональных пользователей по запросу.
для
Ссылки
1. Грейлинг Х, Гресснер АМ., ред. Учебник
клинической химии и Патобиохимии, 3-е изд
Штутгарт / Нью-Йорк: Харпер, 1995.
2. Бергмейр ХУ, Хордер М, Рей Р. Одобренные
рекомендации (1985) о методах IFCC для измерения
каталитической концентрации ферментов. Часть 3
IFCC метод аланинаминотрансферазы.
J Clin Chem Clin Biochem 1986; 24:481-489.
3. ЕССЛС.Определение каталитической активности в
сыворотке
крови
концентрации
L-аланин
аминотрансферазы (EC 2.6.1.1, АЛТ). Митт Клин
Хим 1989, 20:204-211.
4. Хейнс М, Н Хайль, Визхолд В. Хранение образцов
сыворотки или цельной крови? Влияние времени и
температуры на 22 анализа сыворотки. EUR J Clin
Chem Clin Biochem 1995, 33:231-238.
5. Тхэфельд В, Хоффмейстер Х, Баш, EW, Коллер PU,
Фольмар J. Значения индекса для положения
трансаминаз GOT и GPT и щелочной фосфатазы в
сыворотке
оптимизированные
стандартными
методами. Dtsch Med Wschr 1974, 99:343-351.
Группа компаний «LEADMAN»
Адрес: Южная дорога Хонда, 5, Зона
технико-экономического развития, Пекин, Китай,
100176
Тел. 0086-10-67855500
Факс：0086-10-84923540