АБЗИМЫ

Иммунопатология, аллергология, инфектология
Immunopathology, allergology, infectology
2012, №1:1218
АБЗИМЫ
УДК 616.72 – 002.77
Нуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G
у пациентов с ранним ревматоидным артритом
М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И. Генералов
Витебский государственный медицинский университет
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Nuclease polyclonal IgG activity in patients with early rheumatoid arthritis
M.V. Volkova, E.V. Kunder, I.I. Generalov
Vitebsk State Medical University
Belarusian Medical Academy of Post"graduate Education
Аннотация
Summary
Изучена нуклеазная активность поликлональных IgG к
различным субстратам ДНК (бактериальная плазмидная
двухспиральная ДНК E.coli, ДНК Chlamydia trachomatis,
полученная методом амплификации, ДНК тимуса телен
ка (Sigma)) у пациентов с ранним ревматоидным артри
том. Выявлена наибольшая активность IgG к ДНК тимуса
теленка по сравнению с другими субстратами. Выполне
но исследование ДНКазной активности поликлональных
IgG с использованием ДНК тимуса теленка (Sigma) в ка
честве субстрата реакции у 63 пациентов с ранним ревма
тоидным артритом и 45 практически здоровых лиц.
Уровни ДНКазной активности поликлональных IgG у
пациентов с ранним ревматоидным артритом статисти
чески высокозначимо (p<0,001) превышали значения у
здоровых лиц. Выявлены значимые взаимосвязи между
уровнями ДНКазной активности поликлональных IgG,
клиническими проявлениями раннего ревматоидного ар
трита и лабораторными показателями у обследованных
пациентов.
Выявление у пациентов с ранними артритами повышен
ной ДНКазной абзимной активности указывает на роль
каталитически активных иммуноглобулинов в иммуно
патогенезе данного заболевания.
The nuclease activity of polyclonal IgG to various substrates
(a bacterial plasmid doublestranded DNA E.coli, DNA of
Chlamydia trachomatis, obtained by the amplification calf
thymus DNA (Sigma) in patients with early rheumatoid
arthritis. The highest IgG activity to calf thymus DNA (Sigma)
was revealed. We assessed the DNAse IgG activity against calf
thymus DNA (Sigma) in 63patients with early rheumatoid
arthritis and 45 healthy donors.
The levels of DNAse IgG activity in patients with early
rheumatoid arthritis were higher (p<0,001) in comparison
with the same ones in healthy persons. We revealed the
multiply relationships between DNAse polyclonal IgG activity
levels, clinical symptoms of early rheumatoid arthritis and
laboratory findings in examined patients.
The detection of high DNAse IgG activity levels in patients
with early rheumatoid arthritis confirms the role of abzymes
in the immune pathogenesis of this disease.
Ключевые слова
Key words
Поликлональные IgG, нуклеазная активность, ранний
ревматоидный артрит
Polyclonal IgG, nuclease activity, early rheumatoid arthritis.
Природные каталитически активные анти
тела (абзимы) были впервые обнаружены в 1989
году в крови пациентов с бронхиальной астмой
[1]. В дальнейшем существование абзимов, об
ладающих активностью к субстратам различ
ной природы, было доказано у здоровых людей,
12
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°1
Абзимы: Нуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G у пациентов с ранним ревматоидным артритом
а также при аутоиммунных и инфекционных
заболеваниях [2]. Как правило, индукция нук
леазных абзимов сопровождает заболевания,
для которых характерно повышение в крови
концентрации антител к ДНК и нуклеопроте
идным комплексам [3]. В настоящее время
продолжается исследование возможной биоло
гической роли и механизмов индукции антител,
обладающих нуклеазной активностью, при раз
личных заболеваниях [3]. Доказанным являет
ся факт проникновения нуклеазных абзимов в
клетку, а также в клеточное ядро с последую
щим развитием их цитотоксической активнос
ти [4]. Установлено, что антитела, обладающие
нуклеазной активностью, отличаются от кано
нических нуклеаз (ДНКаз и РНКаз) и могут
представлять собой антитела к нуклеиновым
кислотам и их комплексам с белками [5].
Предприняты попытки изучения патогене
тической роли и клинической значимости
ДНКгидролизирующих антител при ревмато
идном артрите (РА). Установлено, что наиболь
шая активность присуща пациентам мужского
пола с серопозитивным по ревматоидному фак
тору вариантом артрита и женщинам с сероне
гативным вариантом заболевания. В целом по
группам пациентов с серонегативным и серопо
зитивным артритом различий в уровнях
ДНКазной активности иммуноглобулинов по
лучено не было. Максимальная ДНКазная ак
тивность была обнаружена у пациентов с экст
раартикулярными проявлениями РА [6]. При
раннем ревматоидном артрите изучение ката
литической активности поликлональных имму
ноглобулинов ранее не проводилось.
Цель исследования: изучить нуклеазную ак
тивность иммуноглобулинов к различным суб
стратам ДНК (бактериальная плазмидная двух
спиральная ДНК E.coli,
ДНК Chlamydia
trachomatis, полученная методом амплифика
ции, ДНК тимуса теленка (Sigma)) у пациентов
с ранним ревматоидным артритом.
Материалы и методы
Выделение препаратов поликлональных IgG
1,2 и 4 подклассов из сыворотки крови прово
дили комбинированным риванолаффиннохро
матографическим методом [7]. Препараты IgG
хранили в пластиковых пробирках при 200С.
Контроль чистоты полученных IgG проводили
с помощью электрофореза в диссоциирующих
и восстанавливающих условиях [8].
Для оценки нуклеазной активности поли
клональных IgG использовались следующие
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2012 N°1
субстраты: бактериальная плазмидная двухспи
ральная ДНК E.coli, ДНК Chlamydia trachomatis,
полученная методом амплификации, ДНК ти
муса теленка (Sigma).
Для постановки реакции гидролиза иммуно
глобулинами бактериальной плазмидной ДНК
E.coli использовалась разработанная нами ме
тодика. Реакционная смесь (0,3 мл) состояла из
0,1 мл двухспиральной плазмидной ДНК (3.400
пар оснований) производства DIARECT AG
(Германия) в концентрации 100 мкг/мл, 0,1 мл
препарата поликлональных IgG в концентра
ции 1 мг/мл или 0,1 мл 0,9% раствора NaCl в
контрольной пробе и 0,1 мл буферного раство
ра 0,02 М TрисHCl (pH 7,4), содержащем 0,01
М MgCl2. Субстратнобуферная смесь инкуби
ровалась в течение 20 часов при 37°С.
В качестве субстрата реакции гидролиза
бактериальной ДНК поликлональными IgG ис
пользовалась ДНК Chlamydia trachomatis, полу
ченная в результате амплификации модифици
рованного, клонированного в плазмиде фраг
мента ДНК Chlamydia trachomatis, фланкиро
ванного праймерами CT1, CT2, выбранными в
области генома криптической плазмиды (330
пар оснований). Реакционная смесь (0,03 мл)
состояла из 0,01 мл амплифицированной ДНК
Chlamydia trachomatis, 0,01 мл препарата поли
клональных IgG в концентрации 1 мг/мл или
0,01 мл 0,9% раствора NaCl в контрольной про
бе и 0,01 мл буферного раствора 0,02 М Tрис
HCl (pH 7,4), содержащем 0,01 М MgCl2.
Наличие ДНКазной активности поликло
нальных IgG к вышеупомянутым субстратам
подтверждалось электрофорезом продуктов
распада ДНК под действием IgG в 1,5% агароз
ном геле. Субстратнобуферную смесь (0,01
мл)
вносили в агарозный гель (Fluka,
BioChemika), содержащий Трисборатный бу
фер (89 мMТрис, 2,5 мM этилендиаминтетраук
сусная кислота (ЭДТА), 8,9 мM H3BO3) с бро
мидом этидия (0,4 мкг/мл). Электрофорез вы
полнялся в аппарате для горизонтального элек
трофореза при силе тока 30 мA, напряжении
120 V, в течение 2 часов или момента достиже
ния образцами края геля.
ДНКгидролизующую плазмидную ДНК
E.coli и ДНК С. trachomatis способность антител
оценивали по изменению электрофоретичес
кой подвижности продуктов реакции.
Постановка реакции гидролиза ДНК тимуса
теленка (Sigma) осуществлялась согласно мето
дике, разработанной нами и апробированной
на различных биологических моделях [911]. В
13
М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И. Генералов
состав реакционной смеси входили IgG в кон
центрации 1 мг/мл в 0,1 мл пробы, 0,1 мл 0,02 М
Трис HCl буферного раствора pH 7,4, содер
жащего 0,01 М раствор MgCl2 и 0,2 мл раствора
ДНК в концентрации 300 мкг/мл. Реакция ста
вилась в дублях. Затем осуществлялась инкуба
ция при 37оС в течение суток.
При изучении ДНКазной активности поли
клональных IgG у пациентов с ранним РА оце
нивалась активность на 1 мг образца (удельная
активность IgG), проводился визуальный учет
результатов в баллах после добавления в пробы
по 0,02 мл 0,75% раствора этакридина лактата
(риванола) по величине образовавшихся сгуст
ков нераспавшейся ДНК (0 – отсутствие актив
ности (компактный сгусток); 1 минимальная
активность (рыхлый сгусток); 2 – слабая актив
ность (рыхлый сгусток, хлопья, нити);3 – уме
ренная активность (хлопья, нити); 4 – высокая
активность (распад сгустка, хлопья, нити); 5 –
максимальная активность (полный распад сгу
стка с образованием гомогенной взвеси)). Вве
дение полуколичественного экспрессучета ре
зультата реакции в баллах делает возможной
одновременную постановку большого количе
ства проб, что удобно в клинической практике.
Дополнительно оценивали чаcтоту встреча
емости положительных результатов определе
ния ДНКазной активности IgG. Положитель
ным результатом считали удельную ДНКазную
активность 1 балл и более.
Обследовано 63 пациента с ранним РА и 45
практически здоровых лиц. Диагноз РА уста
навливали соответствии с классификационны
ми критериями 2010 года [12]. В сравниваемых
группах не выявлено различий по полу и возра
сту (p>0,05). Средняя длительность болезни па
циентов с ранним РА составила 4,24±2,12 меся
ца (95%ДИ: 3,084,97). В группе пациентов с
ранним РА 38 пациентов (60,3%) были серопо
зитивными по РФ, 25 (39,7%) серонегативны
ми. Активность 1 степени отмечалась у 16 паци
ентов (25,4%), 2 степени – у 36 (57,1%), 3 степе
ни – у 11 пациентов (17,5%). Рентгенологичес
кая 1 стадия отмечалась у 18 пациентов
(28,6%), 2 стадия – у 34 пациентов (54%), 3 ста
дия – у 11 пациентов (17,4%). У всех пациентов
определялся 1ый функциональный класс.
Средняя величина DAS28 составила 6,25±1,23
(95%ДИ: 4,586,74). Среднее значение индекса
Ричи равнялось 16,78±14,19 (95%ДИ: 11,34
21,35). Все пациенты, принявшие участие в ис
следовании, на амбулаторном этапе принимали
нестероидные противовоспалительные препа
14
раты. Обследование на каталитическую актив
ность выполнялось до назначения терапии ба
зисными препаратами и глюкокортикоидами.
Статистический анализ результатов исследо
вания был выполнен с использованием анали
тического пакета Statistica 7.0. Для количе
ственных признаков, не имеющих нормального
распределения, центральные тенденции и дис
персии описывались медианой (Me), размахом
(MinMax) и межквартильным интервалом (25
й и 75й процентили). Рассчитывались 95% до
верительные интервалы (ДИ) для медиан. При
сравнении исследуемых групп по количествен
ным признакам, имеющим распределение, отли
чающееся от нормального, проводилось парное
сравнение групп с использованием непарамет
рического теста для проверки достоверности
различий изучаемых признаков в независимых
выборках Uтест МаннаУитни (Mann
Whitney). Различия считали статистически вы
сокозначимыми при p<0,01, значимыми – при
p<0,05 и незначимыми при p>0,05. Анализ дос
товерности различий относительных величин
выполнялся по критерию c 2. Для выявления
корреляционных взаимосвязей использовался
метод ранговых корреляций Спирмена
(Spearman).
Результаты и обсуждение
На рисунке 1 представлены результаты ис
следования способности поликлональных IgG,
выделенных из сыворотки крови пациентов с
рРА, гидролизовать плазмидную ДНК E.coli.
Исследуемые образцы IgG обладали различной
способностью гидролизовать данный субстрат.
Так, образец IgG одного пациента с рРА (рис.1
4) полностью гидролизовал ДНК в течение 20
часов инкубации. Два других образца IgG
(рис.13,5) в большей степени воздействовали
на суперскрученную фракцию плазмидной
ДНК по средствам образования одноцепочеч
ных разрывов и перехода суперскрученной
ДНК в релаксированную форму по сравнению
с контрольным образцом плазмидной ДНК
(рис.1 1) в течение 20 часов.
При оценке нуклеазных свойств IgG при рРА
мы также использовали ДНК Chlamydia
trachomatis в качестве субстрата реакции, прини
мая во внимание свойство молекулы ДНК изме
нять подвижность в геле в результате измене
ний вследствие случайных одно и двухцепочеч
ных разрывов. В опытных образцах мы наблю
дали изменение подвижности амплифициро
ванной ДНК Chlamydia trachomatis вследствие
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°1
Абзимы: Нуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G у пациентов с ранним ревматоидным артритом
конформационных изменений (рис.2 3,4), в то
время как в образце здорового человека и кон
трольном образце (не содержащем IgG) ДНК
мигрировала в виде одной сфокусированной
полосы (рис.2 1,2).
Предложенная в нашей лаборатории моди
фикация электрофоретического метода опре
деления ДНКазной активности заключается в
использовании в качестве субстрата коммер
ческого препарата ДНК тимуса теленка (произ
водства «Sigma») в концентрации 0,25 мг/мл.
При электрофорезе препарата ДНК тимуса те
ленка в 1,5% геле агарозы происходило разделе
ние субстрата на высоко и низкополимерную
фракции (рисунок 3.1). Поликлональные IgG,
обладающие каталитической ДНКазной актив
ностью, прежде всего деполимеризовали высо
кополимерную фракцию ДНК (рисунок 3.2).
Таким образом, нами была изучена нуклеаз
ная активность IgG к различным субстратам
при рРА. Возможность абзимов гидролизовать
ДНК различного происхождения свидетель
ствует о неспецифическом механизме их дей
ствия, что можно объяснить поликлональнос
Рис. 1. Электрофорез плазмидной ДНК E.coli в 1,5% агарозном геле
1 "контрольный образец; 2,3,4,5 – результаты реакции IgG пациентов с рРА и плазмидной ДНК; а"релаксированная фракция ДНК; b"суперскрученная фракция
ДНК
Рис. 2. Электрофорез амплифицированной ДНК Chlamydia trachomatis в 1,5% агарозном геле
1"контрольный образец; 2" результаты реакции IgG практически здорового человека с амплифицированной ДНК Chlamydia trachomatis; 3,4 " результаты
реакции IgG пациентов с рРА с амплифицированной ДНК Chlamydia trachomatis
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2012 N°1
15
М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И. Генералов
тью IgG. В тоже время изучение специфическо
го действия абзимов представляет интерес, как
с диагностической, так и терапевтической точ
ки зрения. Следует отметить, что плазмидная
ДНК, используемая нами в эксперименте, ру
тинно используется в качестве субстрата в им
муноферментном анализе для определения ан
тител к двухспиральной ДНК, поэтому, можно
предположить, что различная степень гидроли
за ДНК различными образцами иммуноглобу
линов обусловлена наличием в них определенно
го уровня антинуклеарных антител. Инфек
ционный фактор является общепризнан
ным в этиологии ревматоидного артрита,
поэтому возможность образования анти
тел к компонентам генома бактерий и ви
русов и последующее их взаимодействие с
собственной ДНК по принципу молекуляр
ной мимикрии представляется вполне веро
ятным. Ряд авторов рассматривает возбу
дителей из рода Proteus как одного из вероят
ных артритиндуцирующих микроорганизмов
[13]. Также обнаружены взаимосвязи между
развитием ревматоидного артрита и хламидий
ной инфекцией, поэтому полученные нами дан
ные о способности абзимов гидролизовать хла
мидийную ДНК свидетельствует о возможном
участии данных возбудителей в патогенезе рев
матоидного артрита на каком–либо из этапов
и требует дальнейшего изучения [14].
В качестве субстрата для дальнейшего изуче
ния ДНКазной активности IgG при рРА нами
использована ДНК тимуса теленка, так как
данный субстрат имеет преимущества перед
другими. С экономической точки зрения его
можно использовать в реакциях с визуальным
учетом, где необходимо сравнительно большое
его количество. Преимущество визуального
учета заключается в возможности количествен
но оценить степень ДНКазной активности и
использовать данные для статистического ана
лиза. Данный субстрат является однородным и
имеет высокую степень очистки, что позволяет
использовать его как стандарт.
Уровни удельной ДНКазной активности IgG
у обследованных лиц представлены в таблице 1.
Различия между уровнями удельной ДНКаз
ной активности IgG у пациентов с рРА по срав
нению с группой здоровых лиц были статисти
чески высокозначимыми (p<0,0001).
Частоты встречаемости положительных ре
зультатов определения удельной ДНКазной ак
тивности IgG (1 балл и более) у обследованных
лиц представлены в таблице 2.
Выявлены статистически высокозначимые
различия (p<0,0001) между частотами встреча
емости положительных результатов определе
ния удельной ДНКазной активности IgG у всех
пациентов с рРА по сравнению со здоровыми
донорами крови.
1
2
3.1
3.2
Рис. 3. Электрофорез ДНК тимуса теленка в 1,5% геле агарозы
3.1 (К) – контроль ДНК; 3.2 (R) – ДНК под действием IgG от пациента с ревматоидным артритом; 1 – высокополимерная фракция ДНК; 2 –низкополимерная
фракция ДНК
16
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°1
Абзимы: Нуклеазная активность поликлональных иммуноглобулинов класса G у пациентов с ранним ревматоидным артритом
Таблица 1. Уровни удельной ДНКазной активности IgG у обследованных лиц
Группы
обследованных
лиц
Медиана
Размах
(MinMax)
95%ДИ для
медианы
Межквартиль
ный интервал
Число
наблюдений
рРА
Здоровые лица
4,00
0,00
3,005,00
0,002,00
3,504,50
0,000,00
3,504,50
0,000,00
63
39
Таблица 2. Частоты встречаемости положительных результатов определения удельной ДНКазной активности IgG
у обследованных лиц
Группы
обследованных
лиц
Частоты встречаемости положительных результатов определения
удельной ДНКазной активности IgG
%
95% ДИ
Число наблюдений
рРА
Здоровые лица
100,00
23,19
100,00100,00
13,2333,15
При рРА обнаружены статистически зна
чимые прямые взаимосвязи (p<0,05) между
ДНКазной активностью IgG и числом болез
ненных суставов из 28 (r=0,66), индексом DAS
(r=0,85),
содержанием
Тлимфоцитов
(r=0,76), Тсупрессоров (0,38), фагоцитар
ным числом (r=0,83), а также отрицательная
взаимосвязь с иммунорегуляторным индек
сом (r=0,495).
Согласно литературным данным [2,9] наи
более высокие уровни ДНКазной активности
поликлональных иммуноглобулинов наблю
даются при аутоиммунных заболеваниях. В
нашем исследовании при рРА уровни высокие
уровни ДНКазной активности поликлональ
ных IgG подтверждают представление о РА
как о прогрессирующем системном аутоим
мунном процессе, при котором наблюдаются
выраженные иммунопатологические сдвиги.
В настоящее время существует представле
ние о двойственной патогенетической роли
абзимов [15]. При системной красной волчан
ке доказана взаимосвязь между каталитичес
кой активностью антител и их цитотоксич
ностью [16]. Для ревматоидного артрита
этот аспект остается в настоящее время не
изученным. В ранней стадии ревматоидного
артрита абзимы, обладающие нуклеазной ак
тивностью, вероятно носят защитный харак
тер, способствуют снижению концентрации
ДНК в сыворотке крови. Цитотоксический
эффект абзимов может быть направлен на
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2012 N°1
63
39
деплецию аутореактивных клонов иммунных
клеток. В настоящее время изучено образо
вание антинуклеарных антител до и после те
рапии ингибитором фактора некроза опухо
ли альфа инфликсимабом, при этом проде
монстрировано увеличение титра и частоты
встречаемости антинуклеарных антител пос
ле терапии указанным биологическим аген
том, что может свидетельствовать о протек
тивной роли антинуклеарных антител на
фоне общего снижения системного воспале
ния [17].
Принимая во внимание обнаруженное
нами свойство антител гидролизовать бакте
риальную ДНК, можно предположить учас
тие инфекционных агентов в инициации
либо поддержании аутоиммунного воспале
ния при ревматоидном артрите. С другой
стороны, неконтролируемый каскад воспа
лительных реакций может сопровождаться
цитотоксическим действием абзимов и по
вреждением собственных тканей.
Таким образом, исследование нуклеазной
активности поликлональных иммуноглобули
нов при раннем ревматоидном артрите пред
ставляется перспективным для уточнения им
мунопатогенетических событий при данном
заболевании, а также возможного использо
вания нуклеазной абзимной активности для
диагностики раннего ревматоидного артрита
и мониторинга активности воспалительного
процесса и требует дальнейшего изучения.
17
М.В. Волкова, Е.В. Кундер, И.И. Генералов
Выводы
1. У пациентов с ранним ревматоидным артри
том обнаружена ДНКазная активность поли
клональных IgG к различным ДНКсодержа
щих субстратам (бактериальная плазмидная
двухспиральная ДНК E.coli, ДНК Chlamydia
trachomatis, полученная методом амплифика
ции, ДНК тимуса теленка (Sigma)).
2. У пациентов с ранним ревматоидным артри
том уровни удельной ДНКазной активности
поликлональных IgG с использованием ДНК
тимуса теленка (Sigma) в качестве субстрата
реакции, а также частоты встречаемости по
ложительных результатов определения
удельной ДНКазной активности поликло
нальных IgG статистически высокозначимо
(p<0,001) превышают контрольные величи
ны у здоровых лиц.
3. Установленные при раннем ревматоидном
артрите взиамосвязи между ДНКазной ак
тивностью IgG и клиническими признаками
заболевания, а также показателями иммуно
граммы свидетельствуют о том, что показа
тели ДНКазной активности иммуноглобу
линов могут служить дополнительными
критериями оценки активности заболевания
и могут быть использованы в клинической
практике.
Литература
1. Paul S., Said S.I., Thompson A.B. et al. Characterization of
autoantibodies to vasoactive intestinal peptide in asthma. J.
Immunol, 1989; 2: 133–42.
и онкологических заболеваниях. Иммунопатология, аллер
гология, инфектология, 2000; 3: 19–24.
2. Невинский Г.А., Канышкова Т.Г., Бунева В.Н. Природ
ные каталитически активные антитела (абзимы) в норме
и при патологии. Биохимия, 2000; 65:1245–55.
10. Генералов И.И., Сидорская Е.В. Абзимная актив
ность препаратов IgG у больных ревматоидным артри
том и системной красной волчанкой. Иммунология,
1998; 3: 54–6.
3. Барановский А.Г., Бунева В.Н., Невинский Г.А. Дезок
сирибонуклеазы человека (обзор). Биохимия, 2004; 69:
72542.
11. Генералова А.Г., Генералов И.И. Оценка ДНКазной ак
тивности методом риванолового сгустка. Клин.лаб. диагн,
1997; 11: 33–4.
4. Janq J.Y., Jeong J.G., Jun H.R. et al. A nucleic acid
hydrolyzing antibody penetrates into cells via caveolaemediated
endocytosis, localizes in the cytosol and exhibits cytotoxicity.
Cell.Mol.Life Sci, 2009; 66: 19857.
12. Aletaha D. 2010 rheumatoid arthritis classification criteria:
an American College of Rheumatology/European League
Against Rheumatism collaborative initiative. Ann. Rheum. Dis.,
2010; 69 (9): 15808.
5. Krasnorutskij M.A., Buneva V.N., Nevinsky G.A. Antibodies
against RNAhydrolyze RNA and DNA. J.Mol.Recognit, 2008;
21: 33847.
13. Ebringer A., Rashid T., Wilson C. Rheumatoid arthritis,
Proteus, antiCCP antibodies and Karl Popper. Autoimmun. Rev,
2010; 9(4): 21623.
6. Хитров А.Н., Ромоданова Н.Б., Огнева Е.А. ДНКабзи
мы при ревматоидном артрите: патогенетическое и клини
ческое значение. Тер.архив, 2005; 77: 7580
14. Fabris M., De Vita S., Pasini E. et al. Chlamydophila psittaci
subclinical
infection
in
chronic
polyarthritis.
Clin.Exp.Rheumatol, 2011; 29(6): 97782.
7. Способ очистки иммуноглобулинов класса G из сыворот
ки крови и устройство для аффинной хроматографии : пат.
3205 Респ. Беларусь, МПК 6G 01 N 33/48 / М.Р. Конорев, И.И.
Генералов, И.В. Жильцов, А.Г. Генералова ; заявитель Витеб
ск.гос. мед. инстт. – заявл. 05.02.96 ; опубл. 30.12.99.
Афiцыйныбюл. Нац. цэнтрiнтэлектуал. уласнасцi. 1999; 3: 121.
15. Belogurov A .Jr., Kozyr A., Ponomarenko N., Gabibov A. .
Catalytic antibodies: balancing between Dr. Jekyll and Mr. Hyde.
Bioessays, 2009; 31(11): 116171.
8. Остерман, Л.А. Методы исследования белков и нукле
иновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирова
ние (практическое пособие).Л.А. Остерман, М.,1981; 286 с.
9. Генералов И.И. Комплексная оценка абзимной актив
ности поликлональныхIgG при аутоиммунных, вирусных
16. Suchkov S.V. Comparative study of catalytic (DNA
hydrolyzing) and cytotoxic properties of antidna
autoantibodies. Bull.Exp.Biol.Med., 2001; 131(4): 3535.
17. Yukawa N., Fujii T., KondoIshikawa S. et al. Correlation of
antinuclear antibody and antidoublestranded DNA antibody
with clinical response to infliximab in patients with rheumatoid
arthritis: a retrospective clinical study. Arthritis Res Ther,
2011;13 R213
Сведения об авторах:
Волкова М.В., аспирант кафедры госпитальной терапии УО “Витебский государственный медицинский университет”
210032, Республика Беларусь, г. Витебск, пр. Победы 5/2"74.
тел. +375"44"777"39"00, e"mail: margovolkova@gmail.com
Кундер Е.В., профессор кафедры кардиологии и ревматологии ГУО «Белорусская медицинская академия последипломного образования», д.м.н., доцент
Генералов И.И., зав. кафедрой клинической микробиологии УО «Витебский государственный медицинский университет», д.м.н., профессор
Поступила 12.01.2012 г.
18
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°1