методики «ЛЮМЭКС

КАПЕЛЬ®
СИСТЕМА КАПИЛЛЯРНОГО
ЭЛЕКТРОФОРЕЗА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТЕИНОГЕННЫХ АМИНОКИСЛОТ В
КОМБИКОРМАХ И СЫРЬЕ
Методика М-04-38-2009
ГОСТ Р 55569-2013
ВВЕДЕНИЕ
Методика предназначена для определения массовой доли аминокислот: аргинина, лизина, тирозина,
фенилаланина, гистидина, лейцина и изолейцина (суммарно), метионина, валина, пролина, треонина,
серина, аланина, глицина, цистина, аспарагиновой кислоты и аспарагина (суммарно), глутаминовой
кислоты и глутамина (суммарно) и триптофана в кормах, комбикормах и в исходном сырье для их
производства в форме фенилизотиокарбамильных производных (далее – ФТК-производных). Для
триптофана возможно также прямое определение (без получения ФТК-производного).
Методика измерений позволяет определять общее содержание аминокислот в пробах (суммарно
свободные и связанные формы). Поскольку в процессе разложения проб аспарагин и глутамин
количественно гидролизуются до аспарагиновой и глутаминовой кислот соответственно, то данные по
содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот представляют собой суммарное содержание этих
кислот и соответствующих амидов. В условиях проведения измерений лейцин и изолейцин не
разделяются, поэтому предусмотрено их суммарное определение.
МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ
Метод основан на разложении проб кислотным или щелочным (только для триптофана) гидролизом с
переводом аминокислот в свободные формы, получении ФТК-производных, дальнейшем их
разделении и количественном определении методом капиллярного электрофореза. Детектирование
проводят в УФ-области спектра при длине волны 254 нм. Для модификаций «КАПЕЛЬ®-105/105М»
возможно прямое количественное определение триптофана без получения ФТК-производного,
регистрируя поглощение при длине волны 219 нм.
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ
Диапазоны измеряемых содержаний аминокислот приведены в таблице (*в расчете на навеску 100 мг)
Аминокислота
Символ
Диапазон
измерений, %*
Аминокислота
Символ
Диапазон
измерений, %*
Аланин
Ala
0,25–10,0
Метионин
Met
0,25–10,0
Аргинин
Arg
0,5–10,0
Пролин
Pro
0,25–10,0
Аспарагиновая к-та
+аспарагин
Asp
Asn
0,5–10,0
Серин
Ser
0,25–10,0
Валин
Val
0,5–10,0
Тирозин
Tyr
0,25–10,0
Гистидин
His
0,5–10,0
Треонин
Thr
0,5–10,0
Глицин
Gly
0,25–10,0
Триптофан
Trp
0,1–10,0
Глутаминовая к-та
+глутамин
Glu
Gln
0,5–10,0
Фенилаланин
Phe
0,25–10,0
Лейцин+изолейцин
Leu+Ile
0,25–10,0
Цистин
Cys-Cys
0,1–10,0
Лизин
Lys
0,25–20,0
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАКТИВЫ ДЛЯ АНАЛИЗА
При выполнении измерений применяются следующие оборудование и реактивы:
• система капиллярного электрофореза «КАПЕЛЬ®-103РТ/104Т/105/105М», имеющая
специальную кассету для анализа аминокислот;
• натрия гидроксид, х.ч.;
• натрия тетраборат, 10-водный, х.ч.;
• натрия карбонат, 10-водный, х.ч.;
• натрия дигридрофосфат, 12-водный, х.ч.;
• натрия гидрофосфат, (моно- или дигидрат), х.ч.;
СИСТЕМА КАПИЛЛЯРНОГО
ЭЛЕКТРОФОРЕЗА
КАПЕЛЬ®
• бария гидроксид, 8-водный, х.ч.;
• кислота серная, х.ч.;
• кислота соляная, х.ч.;
• кислота муравьиная, х.ч.;
• водорода пероксид, 30%, х.ч.;
• спирт этиловый ректификованный;
• спирт изопропиловый, х.ч.;
• набор L-аминокислот;
• фенилизотиоцианат, имп.;
• β-циклодекстрин (β-ЦД), имп.;
• метиловый красный, индикатор, ч.
Сбор, обработку и вывод данных осуществляют с помощью персонального компьютера с
операционной системой (не ниже «Windows® 2000/XP.7»), на котором установлена соответствующая
программа сбора и обработки данных.
ПРИМЕРЫ АНАЛИЗА
Проба: кислотный
гидролизат рыбной муки
Найдено в пробе, %:
Arg
3,3
Lys
4,8
Tyr
1,8
Phe
2,3
His
1,1
Leu+Ile 6,6
Met
2,0
Val
2,9
Pro
3,3
Thr
2,4
Ser
2,9
Ala
3,8
Gly
5,2
Проба: щелочной
гидролизат рыбной муки
Найдено в пробе, %:
Trp
0,65
Вся информация в данной листовке является справочной. По вопросу получения более подробной информации следует
обращаться к разработчику методики и ГОСТ Р – Группе компаний «ЛЮМЭКС».
Центральный офис «ЛЮМЭКС»: 192029, г. Санкт-Петербург, пр. Обуховской обороны, д. 70, корп. 2.
Тел. (812) 718-53-90 Факс: (812) 718-68-65 E-mail: methodists@lumex.ru
Почтовый адрес: 190000, г. Санкт-Петербург, BOX 1234.