2 419 442(13) C1

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ
(19)
RU
(11)
2 419 442
(13)
C1
(51) МПК
A61K 35/28 (2006.01)
A61P 19/02 (2006.01)
A61P 19/04 (2006.01)
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(12) ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ
(21)(22) Заявка: 2010102047/15, 22.01.2010
(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
22.01.2010
(73) Патентообладатель(и):
Савинцев Александр Михайлович (RU)
2 4 1 9 4 4 2
Адрес для переписки:
195269, Санкт-Петербург, пр. Луначарского,
д.98, к.1, кв.88, А.М.Савинцеву
(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЙ СУХОЖИЛЬНО-СВЯЗОЧНЫХ СТРУКТУР
КОНЕЧНОСТЕЙ ЖИВОТНЫХ
(57) Реферат:
Изобретение
относится
к
области
ветеринарии. Способ включает определение,
инструментальное
обследование
места
повреждения и лечебное воздействие на
область повреждения. При осуществлении
аспирации костного мозга из грудины
пострадавшего животного предварительно
пальпаторно
определяют
локализацию
грудины. Осуществляют местную анестезию и
выполняют по ее ходу трепано-пункции
губчатого
вещества
кости
грудины
медицинской иглой для биопсии костного
мозга, оснащенной мандреном и боковыми
отверстиями на ее конце, с шагом 1.5-2 см на
глубину проникновения в кость грудины до 1
см. Отбирают костный мозг объемом 250-500
мл. При осуществлении каждой пункции
выполняют аспирацию дозы костного мозга
шприцем, содержащем смесь раствора NaCl
0,9% и гепарина, отфильтровывают ее и
собирают все дозы костного мозга в
стерильный герметичный полиэтиленовый
пакет,
содержащий
43
мл
антикоагулянта CPDA. Затем костный мозг
сепарируют
с
выделением
концентрата
мезенхимальных
стволовых
клеток
при
помощи аппарата клеточной сепарации Sepax S100 объемом 20-50 мл. После контроля места
повреждения
аппаратами
УЗИ
и/или
термографии маркером наносят границы места
лечения, точки введения клеточного материала
Ñòð.: 1
ru
C 1
R U
(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске: Tendon and Ligament Injuries, by: STACY
ОКЕ, 01 november 2009, адрес в Интернете:
http://www.thehorse.com. СА 2538187 А1,
18.03.2004. Центр медико-биологических
технологий. Архив новостей. 27 апреля 2007
г., адрес в Интернете http:
www.cmbt.su/rus/news. LISA A. FORTIER.
Isolation and chondrocytic differention of equine
bone marrow-derived mesenchymal stem cells //
Veterinary research, 1998, vol.59, No.9, p.11821187.
2 4 1 9 4 4 2
C 1
(45) Опубликовано: 27.05.2011 Бюл. № 15
R U
Приоритет(ы):
(22) Дата подачи заявки: 22.01.2010
(72) Автор(ы):
Савинцев Александр Михайлович (RU),
Берозашвили Артур Тогович (RU),
Конобеевский Михаил Юрьевич (RU),
Шевченко Марина Владимировна (RU)
и
инъецируют
его
в
толщу
концов
поврежденного сухожилия или связки. После
ввода
стволовых
клеток
осуществляют
иммобилизацию
поврежденного
сегмента
конечности. Способ повышает эффективность
и сокращает сроки лечения.
R U
R U
2 4 1 9 4 4 2
C 1
C 1
2 4 1 9 4 4 2
Ñòð.: 2
RUSSIAN FEDERATION
(19)
RU
(11)
2 419 442
(13)
C1
(51) Int. Cl.
A61K 35/28 (2006.01)
A61P 19/02 (2006.01)
A61P 19/04 (2006.01)
FEDERAL SERVICE
FOR INTELLECTUAL PROPERTY,
PATENTS AND TRADEMARKS
(12) ABSTRACT
OF INVENTION
(72) Inventor(s):
Savintsev Aleksandr Mikhajlovich (RU),
Berozashvili Artur Togovich (RU),
Konobeevskij Mikhail Jur'evich (RU),
Shevchenko Marina Vladimirovna (RU)
(21)(22) Application: 2010102047/15, 22.01.2010
(24) Effective date for property rights:
22.01.2010
(73) Proprietor(s):
Savintsev Aleksandr Mikhajlovich (RU)
(45) Date of publication: 27.05.2011 Bull. 15
containing mixture of NaCl 0.9% solution and
heparin, it is filtered and all doses of bone marrow
are collected into sterile airtight plastic bag,
which contains 43 ml of anticoagulant CPDA. After
that, bone marrow is separated with isolation of
mesenchymal stem cell concentrate by means of
apparatus for cell separation Sepax S-100 with
volume 20-50 ml. Under control of injured place with
ultrasound devices and/or thermography, boundaries
of place to be treated and points of cell material
introduction are marked with a marker, after which it
is injected into the mass of injured ligament or
tendon. After introduction of stem cells, injured
segment of extremity is immobilised.
EFFECT: method increases efficiency and
reduces treatment terms.
1 ex
R U
2 4 1 9 4 4 2
(57) Abstract:
FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention relates to field of
veterinary. Method includes detection, instrumental
examination of injured place and treating impact on
the region of injury. In carrying out aspiration of
bone marrow from sternum of injured animal,
preliminarily sternum localisation is detected by
palpation. Local anesthesia is performed and in the
course of it trepanopunctures of spongy substance
from sternum bone are carried out with medical
needle for bone marrow biopsy, provided with
mandrin and lateral holes on its end, with 1.5-2 cm
step to the depth of penetration into sternum bone up
to 1 cm. Bone marrow is sampled in volume 250-500
ml. In realisation of each puncture, aspiration of
bone marrow dose is performed with syringe,
Ñòð.: 3
en
C 1
C 1
(54) METHOD OF TREATING INJURIES OF TENDON-LIGAMENT STRUCTURES OF ANIMAL
EXTREMITIES
2 4 1 9 4 4 2
Mail address:
195269, Sankt-Peterburg, pr. Lunacharskogo, d.98,
k.1, kv.88, A.M.Savintsevu
R U
Priority:
(22) Date of filing: 22.01.2010
RU 2 419 442 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Способ лечения повреждений сухожильно-связочных структур конечностей
животных относится к ветеринарии, в частности к области травматологии и хирургии
лечения конечностей крупногабаритных животных, а именно лошадей, собак и
крупного рогатого скота - коров.
В организме животных имеются четыре вида тканей: эпителиальная,
соединительная, мышечная и нервная. Соединительная ткань подразделяется на
питательную и опорную. Главное назначение опорной ткани состоит в связывании в
единое целое составных частей организма и в формировании остова тела (костная
ткань, сухожилия, хрящи). Кости, мышцы, связки, сухожилия, суставы образуют
аппарат движения или опорно-двигательный аппарат. Грудная (передняя) конечность
лошади представлена плечом, локтем, предплечьем, запястьем, пястью, а торцевая
(задняя) - бедром, коленом, голенью, пяткой, плюсной. В функциональном отношении
конечности животных удерживают туловище на почве, противостоят гравитации, а
также перемещают его в пространстве. При этом перемещение в пространстве
происходит в виде сфазированного циклического движения четырех конечностей.
Каждый цикл движения включает две фазы - опоры и переноса. В фазе опоры
анатомические структуры удерживают туловище, а также осуществляют его
перемещение относительно точки опоры конечности. В фазе переноса эти структуры
способствуют движению конечности относительно тела в различных направлениях и
могут подвергаться травме.
Грудные конечности подвижны, прикреплены к туловищу и имеют с ним общий
кожно-фасцильный футляр. Осевая линия конечности проходит по передней
поверхности запястья и параллельно линии отвеса центра тяжести туловища. В
клинической практике на грудной конечности лошади и крупного рогатого скота
принято анатомо-топографические области: пясти, плюсна и пальцы. Проксимальный
отдел имеет прямое запястье, короткую и прямую пясть. Дистальный - пальца.
Сухожилия и связки, находящиеся в них, подвергнуты растяжениям и разрыву.
Связки - это пучки коллагеновых волокон, соединяющие кости или хрящи друг с
другом. Они испытывают ту же нагрузку веса тела, что и кости.
Грудина лошади - это плоская кость длиной 15-20 см, образующая переднюю часть
скелета грудной клетки, она соединена ключицами и реберными хрящами. Из кости
грудины чаще всего и менее болезненно можно взять костный мозг. Кость - это часть
скелета, в состав которой входят разные элементы. Она состоит из шести
компонентов, одним из которых является красный костный мозг - орган
кроветворения. Дольше всего красный костный мозг сохраняется в губчатом веществе
грудины и тел позвоночника. Все вены (до 50% вен всего тела) выходят из костей в
основном там, где больше губчатого вещества. Через эти участки производят
внутрикостные инъекции, которые заменяют внутривенные.
В хирургической практике ветеринарии известно лечение повреждений сухожилий и
связок животных, например, см. патент РФ №2157672, A61D 1/00, A61F 2/08
от 20.10.2000 г. «Способ восстановления застарелой травмы сухожилий или связок у
собак». Этот способ включает наложение и фиксацию материала, рассасывающегося в
биологической среде на поврежденном участке. В качестве такого материала
используют углеродную ленту, концы которой фиксируют на поврежденном
сухожилии или связке посредством прошивных узловатых швов, затем осуществляют
резекцию разволокненных концов сухожилия или связки между точками фиксации
углеродной ленты и ушивают рану наглухо непрерывным швом.
Недостатками такого решения являются: для крупного рогатого скота или лошади
Ñòð.: 4
DE
RU 2 419 442 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
скрепление сухожилий и связок углеродной ленты недостаточно из-за их веса и
динамической нагрузки на ортопедическую часть их конечности, т.е. заживление как
таковое не происходит, вместо сухожилия работает углеродная лента, которая со
временем разрушается, лизируется и сонаправленные волокна сухожилий крупных
животных не срастаются, на лечение затрачивается много времени, животное не
может долго лежать, оно двигается и заживление затягивается. Такое лечение
недостаточно эффективно.
Известен другой способ лечения повреждений сухожилий и связок конечностей
крупногабаритных животных, например, коров, см. п. РФ №2139695, A61D 7/00, дата
публикации 20.10.1999 г. «Способ лечения асептических воспалительных процессов в
суставах, сухожилиях и их влагалищах у крупного рогатого скота и собак».
Указанный способ включает введение в зону повреждения противоэкссудативного
средства в виде гидрокортизона в дозе 0,01-0,02 мг/кг массы тела или дексазона в
дозах 10-12 мг на одну инъекцию. Инъекции повторяют через 4-5 дней, а через 3-4 дня
начала болезни осуществляют наложение спиртовых компрессов с содержанием 3%
ихтиола, одновременно с компрессами вводят интравенозно 1% водный раствор
ихтиола в дозе 1 мл на 10 кг массы тела животного с интервалом 48-72 ч. С 10-12 дня
болезни при острых асептических воспалительных процессах и с 13-15 дня болезни при
хронических процессах осуществляют обработку ультразвуком с интенсивностью 0,20,3 Вт/см 2 при экспозиции 1,5-2,0 мин, частоте колебаний 830-880 кГц в количестве 5-7
процедур через 1-2 дня при острых процессах и в количестве 8-10 процедур при
хронических процессах. Кроме того, при хронических асептических воспалительных
процессах в суставах, сухожилиях и их влагалищах предварительно в зону
повреждения после аспирации экссудата инъецируют химотрипсин на 0,5%-ном
растворе новокаина в дозе 10-20 мг или лидазу в дозах 64-128 ЕД. В примере 1 указаны
действия лечения при травме крупного животного. Указанный способ лечения
крупногабаритного животного, как самое близкое решение, можно принять за
прототип.
Недостатками указанного выше способа лечения являются: при травме
крупногабаритного животного такие действия очень сложны и неэффективны, т.к.
указанная доза гидрокортизона для крупногабаритного животного для снижения
сосудистой реакции слишком мала, может вызвать повышенную возбудимость
животного, по указанной дозе введения гидрокортизона в сутки можно использовать
лишь одну инъекцию, начало болезни и начало лечения разные сроки, т.к. травму не
всегда можно сразу определить. Дексазон более эффективное средство, но проведение
одной инъекции через 5 дней вызывает сомнение в его эффективности, т.к. его
применяют ежедневно, при травмах использование раствора ихтиола и мази ихтиола
неэффективно, т.к. ее используют при лечении от гнойников и язв. Кроме того, очень
большие сроки лечения - 25 дней для крупногабаритного животного большой срок, и
предложенные лекарства неэффективны при травмах сухожилий и связок.
Техническим результатом способа лечения повреждений сухожилий и связок
конечностей крупногабаритных животных является: повышение эффективности
лечения посредством повышения активности регенерации травмированных и
разорванных сухожильно-связочных структур путем активации трансформирующего
фактора роста, сосудистого фактора роста и фактора роста фибропластов,
уменьшение времени лечения.
Этот результат достигается тем, что в способе лечения повреждений сухожильносвязочных структур конечностей животных, включающем определение,
Ñòð.: 5
RU 2 419 442 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
инструментальное обследование места повреждений и лечебное воздействие области
повреждения, при осуществлении аспирации костного мозга из грудины
пострадавшего животного предварительно определяют пальпаторно локализацию
грудины, осуществляют местную анестезию и выполняют по ее ходу трепано-пункции
губчатого вещества кости грудины медицинской иглой для биопсии костного мозга,
оснащенной мандреном и боковыми отверстиями на ее конце, с шагом 1.5-2 см на
глубину проникновения в кость грудины до 1 см с забором костного мозга
объемом 250-500 мл, при этом при осуществлении каждой пункции выполняют
аспирацию дозы костного мозга шприцем, содержащем смесь раствора NaCl 0,9% и
гепарина, отфильтровывают ее и собирают эти дозы в стерильный герметичный
полиэтиленовый пакет, содержащий 43 мл антикоагулянта CPDA, после окончания
аспирации собранный аутологичный костный мозг сепарируют с выделением
концентрата мезенхимальных стволовых клеток при помощи аппарата клеточной
сепарации Sepax S-100 объемом 20-50 мл, затем после контроля места повреждения
аппаратами ультразвукового исследования (УЗИ) и/или термографии маркером
наносят границы места лечения, точки введения клеточного материала и
осуществляют введение последнего посредством инъекции в толщу концов
поврежденного сухожилия или связки, и после ввода стволовых клеток осуществляют
иммобилизацию поврежденного сегмента конечности.
Сущность предложенного решения выражается в совокупности существенных
признаков, достаточной для достижения обеспечиваемого решением технического
результата.
Существенными признаками решения «Способ лечения повреждений сухожильносвязочных структур конечностей животных», совпадающими с признаками известного
решения - прототипа, являются: А - определение и инструментальное обследование
места повреждения; Б - лечебное воздействие на область повреждения.
Существенными отличительными признаками предложенного способа являются:
В - при осуществлении аспирации костного мозга из грудины пострадавшего
животного предварительно пальпаторно определяют локализацию грудины,
осуществляют местную анестезию, выполняют по ее ходу трепано-пункции губчатого
вещества кости грудины медицинской иглой для биопсии костного мозга, оснащенной
мандреном и боковыми отверстиями на ее конце с шагом 1,5-2 см на глубину
проникновения в кость грудины до 1 см с забором костного мозга объемом 250-500
мл; Г - при осуществлении каждой пункции выполняют аспирацию дозы костного
мозга шприцем, содержащем смесь раствора NaCl 0,9% и гепарина, отфильтровывают
ее и собирают все дозы костного мозга в стерильный герметичный полиэтиленовый
пакет, содержащий 43 мл антикоагулянта CPDA; Д - после окончания аспирации
собранный отфильтрованный аутологичный костный мозг сепарируют с выделением
концентрата мезенхимальных стволовых клеток при помощи аппарата клеточной
сепарации Sepax S-100 объемом 20-50 мл; Е - после контроля места повреждения
аппаратами ультразвукового исследования (УЗИ) и/или термографии маркером
наносят границы места лечения, точки введения клеточного материала и
осуществляют введение последнего посредством инъекции в толщу концов
поврежденного сухожилия или связки; Ж - после ввода стволовых клеток
осуществляют иммобилизацию поврежденного сегмента конечности.
Способ лечения повреждений сухожильно-связочных структур конечностей
животных включает определение места повреждения, инструментальное обследование
аппаратом УЗИ и/или аппаратом термографии места повреждения и лечебное
Ñòð.: 6
RU 2 419 442 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
воздействие на поврежденные сухожилия и связки. Предложенный способ
предназначен для лечения крупногабаритных животных, в частности лошадей,
крупного рогатого скота и собак. К внешним ориентирам конечностей относят также
и пальпируемые мышцы и их сухожилия, межмышечные и междусухожильные желоба,
отдельные связки суставов. Например, сухожилия лошади, которые могут
травмироваться - это сухожилия пясти и пальцев: сухожилия основного разгибателя
пальцев, поверхностного и глубокого сгибателей пальцев, длинного абдуктора
большого пальца и специального разгибателя пальцев. Связочный аппарат сустава запястного и локтевого сустава: связки пальца, абаксиальная сесамовидная связка,
проксимальная крестовидная межпальцевая связка, дистальная крестовидная
межпальцевая связка, межсесамовидная связка, пальмирная связка, аксиальные
боковые веночно-копытцевые связки. Для определения места повреждения лошади
используют метод пассивных движений. Проводят сгибание и разгибание
необремененной конечности, а также абдукцию, аддукцию и ротацию. Таким путем
уточняют степень боковой реакции при заболеваниях сухожильно-связочного
аппарата и мышц, ограниченную или ненормально увеличенную подвижность в
суставах или других сегментах конечности. Этим методом устанавливают
локализацию патологических изменений в тканях, формирующих сустав и опорный
аппарат конечности (связки, сухожилия). Например, при разрыве сухожилий
поверхностного и глубокого сгибателя пальца животное опирается на пяточную часть
копыта и заднюю поверхность пута и путового сустава. Пальпаторно определяют
локализацию грудины и осуществляют местную анестезию. Для анестезии используют
растворы новокаина 3-4% концентрации в дозе 10-15 мл. Растворы инъецируют
периневрально. На грудной конечности подвергают анестезии в верхнем отделе
срединный и локтевой нерв; в нижнем пястные или волярные, а также волярные нервы
ниже путового сустава. При подозрении на закрытый перелом или надрывы связок и
сухожилий проводниковая анестезия противопоказана, т.к. может наступить полный
перелом кости или полный разрыв связки или сухожилия. Из анестезированной
грудины по ее ходу выполнят трепано-пункции губчатого вещества кости грудины
медицинской иглой для аспирации костного мозга, оснащенной мандреном и
боковыми отверстиями на ее конце с шагом 1.5-2 см на глубину проникновения в
кость грудины до 1 см. При осуществлении каждой пункции выполняют аспирацию 2550 мл костного мозга шприцем объемом 100 мл, содержащем 5 мл смеси раствора 5
мл NaCl 0,9% и гепарина, предварительно приготовив ее смешиванием 200 мл
раствора NaCl 0,9% и 5 мл гепарина. Отфильтровывают каждую дозу костного мозга
и собирают все дозы аутологичного костного мозга в стерильный герметичный
полиэтиленовый пакет, содержащий 43 мл антикоагулянта CPDA. Общий объем
собранного костного мозга составляет 250-500 мл. После окончания аспирации
собранный отфильтрованный аутологичный костный мозг сепарируют с помощью
аппарата клеточной сепарации Sepax S-100 (Швейцария) с выделением концентрата
мезенхимальных стволовых клеток объемом 20-50 мл. После контроля места
повреждения аппаратами УЗИ и/или термографии маркером наносят границы места
лечения, точки введения клеточного материала и осуществляют его введение
посредством инъекции в толщу концов поврежденного сухожилия или связки. После
окончания ввода стволовых клеток в сухожилие осуществляют иммобилизацию
поврежденного места.
В качестве примера можно привести повреждение сухожилия поверхностного
сгибателя лошади. Чистокровный 4-летний жеребец стал хромать, было проведено
Ñòð.: 7
RU 2 419 442 C1
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
обследование ощупыванием (пальпаторно) и инструментальным обследованием
аппаратом УЗИ, была найдена причина хромоты - повреждение сухожилия
поверхностного сгибателя правой передней ноги. Проведена местная анестезия
грудины 3% раствором новокаина, взят из нее костный мозг посредством шприца
объемом 100 мл с каждой пункции по 50 мл. Всего было аспирировано 250 мл
аутологичного костного мозга. Каждая доза костного мозга была отфильтрована и
собрана в герметичный стерильный полиэтиленовый мешок, в котором находилось 43
мл антикоагулянта CPDA. Отфильтрованный и собранный аутологичный костный
мозг сепарировали на сепараторе Sepax S-100 с выделением клеточного концентрата
мезенхимальных стволовых клеток объемом 25 мл. Под контролем аппарата УЗИ в
толщу разорванного сухожилия вводили инъекции стволовых клеток. Забинтовывали
конечность в области повреждения вначале циркулярной повязкой, затем спиральной
с перегибом и одели пластиковую лангету. На вторые сутки лошадь осторожно
начала ступать на травмированную ногу, через 14 дней после инструментального
осмотра аппаратом УЗИ было констатировано восстановление целостности сращения
сухожилия.
Использование «Способа лечения повреждения сухожильно-связочной структуры
конечностей животного» по сравнению с прототипом показало эффективное лечение,
срастание сухожилия с уменьшением затраты времени. Введенные в толщу сухожилия
в месте повреждения мезенхимальные стволовые клетки, выделенные из
аутологичного костного мозга грудины животного, которого лечат, в процессе
регенерации принимают активное участие в создании ростовых факторов и цитокинов,
которые вырабатываются клеточным микроокружением в зонах повреждения.
Мезенхимальные стволовые клетки стимулируют ангиогенез и создают оптимальные
условия для дифференцировки фибропластов, формирования пучков коллагеновых
волокон первого и второго порядка. Предлагаемый способ перспективен и
промышленно применим, приводит к минимальному воздействию лекарственных
средств.
Формула изобретения
Способ лечения повреждений сухожильно-связочных структур конечностей
животных, например, лошадей, включающий определение, инструментальное
обследование места повреждения и лечебное воздействие на область повреждения,
отличающийся тем, что при лечебном воздействии при осуществлении аспирации
костного мозга из грудины пострадавшего животного предварительно пальпаторно
определяют локализацию грудины, осуществляют местную анестезию, выполняют по
ее ходу трепано-пункции губчатого вещества кости грудины медицинской иглой для
биопсии костного мозга, оснащенной мандреном и боковыми отверстиями на ее
конце, с шагом 1.5-2 см на глубину проникновения в кость грудины до 1 см с забором
костного мозга объемом 250-500 мл, при этом при осуществлении каждой пункции
выполняют аспирацию дозы костного мозга шприцем, содержащем смесь
раствора NaCl 0,9% и гепарина, отфильтровывают ее и собирают все дозы костного
мозга в стерильный герметичный полиэтиленовый пакет, содержащий 43 мл
антикоагулянта CPDA, после окончания аспирации собранный отфильтрованный
аутологичный костный мозг сепарируют с выделением концентрата мезенхимальных
стволовых клеток при помощи аппарата клеточной сепарации Sepax S-100 объемом 2050 мл, затем после контроля места повреждения аппаратами УЗИ и/или термографии
маркером наносят границы места лечения, точки введения клеточного материала и
Ñòð.: 8
CL
RU 2 419 442 C1
осуществляют введение последнего посредством инъекции в толщу концов
поврежденного сухожилия или связки, и после ввода стволовых клеток осуществляют
иммобилизацию поврежденного сегмента конечности.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Ñòð.: 9