Изучение алкалоидов маклейи мелкоплодной в качестве

Изучение
алкалоидов
маклейи
мелкоплодной
в
качестве
антисептических агентов в рецептурах косметических средств
М.Г. Герасимчик, Н.В. Ильчишина, О.В. Кожевникова, Т.В.Пелипенко
В.Е. Тарасов
ГОУ ВПО Кубанский государственный технологический университет
Кафедра технологии жиров, косметики и экспертизы товаров
На
современном
этапе
все
большей
популярностью
пользуются косметические средства, обладающие антисептическими
свойствами. В качестве антимикробных агентов в таких средствах могут
выступать вещества различного происхождения. Немалые резервы для
поиска антимикробных средств таятся в мире растений. Известно, что
препараты растительного происхождения, являющиеся ингибиторами
микроорганизмов,
имеют
ряд
преимуществ
по
сравнению
с
синтетическими, как по действию (активность в отношении лекарственно
резистентных штаммов), так и по безвредности (отсутствие аллергенных,
мутагенных, тератогенных, эмбриотоксических и других нежелательных
свойств).
Цель данной работы заключалась в исследовании возможности
использования
антимикробного
фармацевтического
препарата
растительного происхождения – сангвиритрина в составе косметических
продуктов
рецептурах
лечебно-профилактического
антиперспирантов,
действия,
поскольку
одним
в
частности
из
в
основных
действующих компонентов в них является ингибитор микроорганизмов.
Препарат
сангвиритрин
создан
во
Всесоюзном
научно-
исследовательском институте лекарственных растений. Сангвиритрин
получают из надземной части маклейи сердцевидной и мелкоплодной
(Macleya cordata (Willd) Br. R. и M. Microcarpae (Maxim) Fedde). В
качестве источника для выделения препарата можно также использовать
чистотел большой (Chelidonium majus L.) [1-4].
Препарат сангвиритрин представляет собой очищенную смесь
бисульфатов двух бензо[c]фенантридиновых алкалоидов сангвинарина и
хелеритрина, находящихся приблизительно в равном соотношении [5].
Эти алкалоиды обладают высокой реакционной способностью [6].
Алкалоиды
сангвинарин
и
хелеритрин
близки
по
своей
противомикробной активности между собой и с сангвиритрином, однако
более
реакционноспособный
отношении
стафилококка)
Сангвиритрин
обладает
сангвинарин
по
несколько
сравнению
широким
с
спектром
активнее
хелеритрином
(в
[7].
противомикробной
активности, ингибируя в опытах in vitro рост грамположительных (в том
числе
антибиотикоустойчивых)
и
грамотрицательных
бактерий.
Противомикробный эффект препарата в присутствии белковой нагрузки
уменьшается в 2-8 раз. В основе механизма антимикробного действия
сангвиритрина лежит подавление бактериальной нуклеазы, нарушение
процессов проницаемости клеточных стенок, перегородок давления,
строения
нуклеоида
[8].
При
токсикологических
исследованиях
установлено, что сангвиритрин относится к умеренно токсичным
веществам.
У
препарата
отсутствуют
кумулятивные
свойства.
Сангвиритрин не обладает мутагенным, тератогенным и канцерогенным
эффектами [9].
В
работе
исследована
противобактериальная
активность
сангвиритрина в отношении штаммов бактерий родов Sthafylococcus и
Sarcina, являющихся естественными обитателями кожных покровов
человека. Культуры тестируемых микроорганизмов выделены из смывов
подмышечных впадин доноров по традиционной методике принятой для
выделения
микробные
чистых
культур
клетки
после
[10].
Для
тестирования
микроскопирования
отбирались
фиксированных
окрашенных препаратов из отдельных характерных для данных видов
бактерий
колоний, выросших на микробиологическом питательном
агаре.
Для определения антибактериального действия
препарата
сангвиритрина
чувствительности
использованы
методы
исследуемого
определения
микроорганизмов к антимикробным агентам -
диффузионный метод и метод серийных разведений в жидких средах [11]
в модификации авторов данной работы.
Модифицированный
диффузионный
метод.
Чашки
Петри
заполняют питательной средой (для бактерий рода Sthafylococcusсолевой питательный агар, для бактерий рода Sarcina-МПА) слоем в 4-5
мм. После застывания среду подсушивают в термостате при 37 ºС в
течение 20 мин. Посев тест- культуры осуществляют наслаиванием
микробной взвеси (106 клеток/см3 физиологического раствора) на
питательный агар. После равномерного распределения по поверхности
излишки суспензии удаляют, а чашки подсушивают в термостате. Затем в
них вносят по 1 см3
водного раствора сангвиритрина заданной
концентрации ( 0,05%; 0,1%, 0,2%) и аналогично распределяют по
поверхности питательной среды. После чего инкубируют 24 часа при (37
±1) ºС ( время инкубации варьируется в зависимости от скорости роста
микроорганизмов). По окончании инкубирования оценку степени
подавления роста микроорганизмов проводят визуально по каждой
чашке Петри в сравнении с микробным ростом в контрольной чашке, не
содержащей сангвиритрин.
Иллюстрации к исходному методу представлены на рисунках 1, 2, 3.
Результаты исследования по исходному методу показали, что
частичное подавление роста исследуемых тест-культур бактерий родов
Sthafylococcus и Sarcina наблюдается при концентрации сангвиритрина
0,05 %. Полное подавление достигнуто начиная с концентрации 0,1 % и
выше.
Рисунок 1- Чашка Петри с микробной взвесью
Staphylococcus
Sarcina
Рисунок 2 – Контрольная чашка (без введения сангвиритрина)
Рисунок 3 – Чашка с введением сангвиритрина концентрации 0,1 %
(полное подавление)
Метод серийных разведений в жидких средах.
Метод серийных разведений в жидких средах. Метод позволяет
установить
антимикробного
минимальную
агента
(МИК)
ингибирующую
и
минимальную
концентрацию
бактерицидную
концентрацию (МБК). Авторами установлена МИК для выделенных
возбудителей (культуры стафилококка и сарцины). Исследования
выполняют в 10 см³ питательной среды (солевой МПБ -
для
стафилококка и МПБ – для сарцины). Готовят 8 пробирок двойных
разведений препарата в концентрациях 0,05%, 0,1% и
0,2% в
питательных средах. Контролем служит пробирка, содержащая чистую
питательную среду. В каждую пробирку вносят по 0,05 см
физиологического раствора, содержащего 10
6
3
/см3 микробных клеток.
Пробирки инкубируют 18 – 24 часа при 37 0С (или до появления
бактериального
роста
в
контрольной
пробирке).
По
истечению
указанного срока результаты учитывают по изменению оптической
плотности среды визуально. Минимальная ингибирующая концентрация
соответствует наибольшему разведению препарата, тормозящему рост
тест-культур.
Рисунок 4- Метод серийных разведений
Метод серийных разведений (рис. 4) показал, что минимальная
ингибирующая концентрация раствора сангвиритрина составила 0,05 %.
Также было установлено, что концентрация препарата – 0,2 % в жидкой
среде провоцирует образование нерастворимых хлопьев в виде осадка.
Оптимальной была принята концентрация сангвиритрина 0,1 %, которая
не вызывает помутнения среды, но дает полное подавление
бактериального роста.
Авторами установлено, что сангвиритрин в концентрации 0,1 %
полностью подавляет рост исследуемых тест-культур, и следовательно в
этом количестве может вводиться как антисептическое средство в
рецептуры косметических изделий.
Выводы. По результатам проведенных экспериментов можно
сделать вывод о том, что сангвиритрин является предпочтительной
заменой синтетическим антибактериальным средствам. Сангвиритрин в
отличие
от
многих
местнораздражающим
установлено,
что
синтетических
и
веществ
общетоксическим
сангвиритрин
не
обладает
свойствами.
Авторами
подавляет
рост
бактерий
рода
Staphylococcus и Sarcina. Хорошая переносимость лекарственных форм
сангвиритрина,
отсутствие
раздражающего
действия
на
кожу
и
слизистые оболочки позволяют считать, что он может использоваться в
качестве антисептической добавки при производстве антиперспирантов,
косметических кремов для лица и тела, шампуней для волос, зубных
паст, косметико-гигиенических моющих средств.
Литература
1. Вичканова С. А., Ростоцкий Б. К., Рубинчик М. А. и др. – А. с. 230387
(СССР); Изобретения, 1968, № 34.
2. Вичканова С. А.- Herba pol., 1970. Т. 16. №2, с. 301-308.
3. Вичканова С. А.- В кн.: Передовые достижения в области лекарств
растительного
происхождения.
Международный
симпозиум.
Доклады. Познань, 1970, с. 10.
4. Вичканова С. А. В кн.: Всесоюзная научная конференция по
фармакологическому
изучению
лекарственных
препаратов
из
растений. Материалы. М., 1972, с. 194-203
5. Вичканова С. А.- В кн.: Фитонциды. Киев, 1975, с. 89-93.
6. Ласская О. Е., Толкачев О. Н., Маслова Г. А. – А. с. 571258 (СССР),
Открытие, 1977.
7. Яхонтова Л. Д., Толкачев О. Н., Кибальчик П. Н. и др.- Фармация,
1973, №1,с. 31-33.
8. Адгина В. В., Вичканова С. А.-В кн.: Совещание по проблеме
фитонцидов. 7-е. Тезисы докладов. Киев, 1973, с. 63; В кн.:
Фитонциды. Киев, 1975, с. 159-161.
9. Вичканова С. А., Рубинчик М. А., Адгина В. В. и др. – Фармакология
и токсикология, 1969, №3, с. 325-328.
10.Егоров Н.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии:
Практ. пособие / Под ред Н.С. Егорова.-2-е изд.-М.:Изд-во Моск. Ун-та,
1983.-215с.
11.Покровский В. И., Поздеев О. К. Медицинская микробиология;
ГЭОТАР Медицина, М. 1998, 1184 с.