актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии
advertisement
«НИИЦМиБ» ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы VI-й Международной студенческой научной конференции, посвящённой 70-летию ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 14 – 15 мая 2013 года Часть I Ульяновск – 2013 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии «НИИЦМиБ» ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» Кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы VI-й Международной студенческой научной конференции, посвящённой 70-летию ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 14 – 15 мая 2013 года Часть I Ульяновск – 2013 2 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 61+631 Материалы VI-й Международной студенческой научной конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии», посвящённой 70-летию ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» /– Ульяновск: ГСХА им. П.А. Столыпина, 2013. – ч. 1. – 86 с. Сборник содержит материалы исследований студентов ВУЗов России и ближнего зарубежья по актуальным проблемам микробиологии, вирусологии, иммунологии, санитарной экспертизы, товароведению, эпизоотологии, эпидемиологии, биотехнологии. Рассмотрены вопросы диагностики, лечения и профилактики инфекционных заболеваний людей и животных. Приводятся современные методы исследования пищевых продуктов и их санитарная оценка, информационно-аналитические исследования по распространению и угрозе возникновения опасных инфекционных заболеваний. Материалы сборника рекомендованы для студентов биологических, медицинских, ветеринарных специальностей, научных сотрудников, преподавателей и аспирантов. Редакционная коллегия Дмитрий Аркадьевич Васильев, зав. каф. МВЭиВСЭ (гл. редактор) Сергей Николаевич Золотухин, декан ФВМ (зам. гл. редактора) Елена Николаевна Ковалева, отв. по НИРС каф. МВЭиВСЭ (отв. редактор) Авторы опубликованных статей несут ответственность за патентную чистоту, достоверность и точность приведенных фактов, цитат, экономико-статистических данных, собственных имен, географических названий и прочих сведений, а также за разглашение данных, не подлежащих открытой публикации. Статьи приводятся в авторской редакции. Печатается на средства Научно-исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии УГСХА. Верстка Е.В. Сульдина © ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», кафедра МВЭиВСЭ 3 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Дорогие коллеги! Студенческие научные конференции проводятся кафедрой микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ ежегодно с 2008 года. В настоящий момент область научных интересов кафедры включает в себя исследования этиологической роли малоизученных энтеробактерий в инфекционной патологии сельскохозяйственных животных, их значимость в пищевых инфекциях людей. Ведётся разработка диагностических и лечебно-профилактических фаговых препаратов. Следующим направлением является исследование малоизученных инфекционных заболеваний домашних животных. Научно-исследовательская работа также направлена на изучение очаговых инфекций зооантропонозного характера на территории Ульяновской области и создание кадастров указанных инфекций. Студенты активно занимаются научно-исследовательской работой в научном студенческом кружке «Инфекционист» и «Товаровед» на базе научно- исследовательского инновационного центра микробиологии и биотехнологии. Студенты, выполняющие дипломные работы, проводят исследования не только на базе кафедры, а также во Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии в г. Покров Владимирской области. Ежегодно студенты-кружковцы принимают участие, занимают призовые места в научных конкурсах, конференциях, конгрессах, выставках Всероссийского и Международного уровня. Отрадно отметить, что в данной конференции принимают участие студенты ВУЗов России и ближнего зарубежья. Благодаря таким мероприятиям значительно укрепляются межвузовские связи, расширяется научное сотрудничество молодого поколения, формируется научное сообщество. Желаю всем участникам конференции успехов в реализации своего научного потенциала, жизненного оптимизма и здоровья! Заведующий кафедрой микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ УГСХА, директор НИИМиБ, академик РАЕН, д.б.н., профессор Дмитрий Аркадьевич Васильев 4 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии О КАФЕДРЕ МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ, ЭПИЗООТОЛОГИИ И ВЕТЕРИНАРНО – САНИТАРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ В тяжелые годы войны, Совет Народных Комиссаров СССР 12 июля 1943 года, с осознанием необходимости того, что для разрушенной войной страны потребуются специалисты высшей квалификации, издал Распоряжение о создании Ульяновского сельскохозяйственного института. Уже в сентябре этого года на ветеринарном, зоотехническом и агрономическом факультетах нового вуза обучалось 293 студента. Тогда же были организованы кафедры, которые позднее и составили кафедру микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно–санитарной экспертизы. Это кафедры: эпизоотологии, которую возглавил первый директор института - доцент Леонид Дмитриевич Кузин (в последствие профессор Л. Д. Кузин заведующий кафедрой микробиологии Оренбургского СХИ); микробиологии, заведующая – к.в.н., доцент А.М.Рубцова; ветеринарно-санитарной экспертизы, заведующий С.А.Лубянецкий, с сентября 1946 года до 6 ноября 1947 года работавший также заместителем директора УСХИ по учебной и научной работе (профессор Сергей Андреевич Лубянецкий, ученик основателя отечественной школы ветеринарно – санитарной экспертизы, автора первых в стране учебников по ВСЭ профессора В.Ю. Вольферца, являлся одним из крупнейших учёных, принявший участие в создании современной концепции ветеринарно–санитарной экспертизы в СССР). С 28 августа 1946 года доцентом кафедры микробиологии и исполняющим обязанности заведующего был назначен кандидат ветеринарных наук Гаврила Никитович Борисов. Через год заведующим этой кафедрой избран по конкурсу кандидат биологических наук Михаил Васильевич Земсков (в последствие профессор М. В. Земсков один из ведущих учёных СССР в области ветеринарной иммунологии). В 1950 году кафедру микробиологии и зоогигиены с основами ветеринарии возглавлял доцент Викторин Владимирович Сливко, одновременно являясь заместителем директора института по учебной и научной работе (в последствие профессор В.В. Сливко ректор Вологодского молочного института). С 1954 по 1985гг. руководителем курса ветеринарной микробиологии, вирусологии и иммунологии являлся к.в.н., доцент А.П. Васильев (ученик создателя отечественной школы ветеринарной микробиологии, автора самых массовых в стране учебников по ветеринарной микробиологии, генерал – майора Советской Армии, профессора Я.Е. Колякова). До 1964 года база курса микробиологии размещалась в правом крыле 2-го этажа 1 корпуса на бульваре Новый Венец. С 1964 года курс переехал в помещение на Молочном переулке. С 1985г. по 1999 гг. курсы ветеринарной микробиологии, иммунологии, вирусологии возглавлял д.в.н., профессор В.Я. Ганюшкин (аспирантура УСХИ у доцента А.П. Васильева). В настоящее время руководит этими курсами д.б.н, профессор С.Н. Золотухин (докторантура УГСХА у профессора Д.А. Васильева). 5 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Кафедра эпизоотологии к 1 сентября 1946 года называлась: «Эпизоотология с ветеринарным делом». С 1 сентября 1947 года до 1954 года её возглавлял кандидат ветеринарных наук Алексей Прокофьевич Новиков. Он выполнил здесь исследования по теме докторской диссертации «Эпизоотический лимфангит лошадей» и после её успешной защиты в ВИЭВе уехал. С 1954 года по 1958 год кафедрой заведовал доцент Иосиф Ефимович Голубев, работавший над темой НИР по бруцеллезу лошадей. Он с блеском защитил докторскую диссертацию и так же уехал. С 1957 года в состав этой кафедры помимо курса эпизоотологии входил и курс паразитологии. С 1958 по 1963 гг. кафедрой руководил доцент курса паразитологии М.Н. Филимонов. Курс организации ветеринарного дела вел доцент Захар Мусаивич Куюмджи, работавший на кафедре с 1955 по 1968 годы, одновременно с 1963 года являясь проректором УСХИ по учебной работе. В 1963 году состоялась очередная реорганизация кафедры эпизоотологии. Новая кафедра включала три курса микробиологии, эпизоотологии, организации ветеринарного дела. Её заведующим стал доцент Александр Иванович Улендеев. С 1987 г. по настоящее время руководителем курса эпизоотологии является доцент А.И. Козин (аспирантура ВИЭВ у профессора В.Е. Щуревского). Кафедра ВСЭ также претерпела неоднократные изменения: к 1 сентября 1946 года она имела название: кафедра ветеринарно-санитарной экспертизы и технологии продуктов животноводства. А в 1950 году это была уже кафедра ветеринарно-санитарной экспертизы и паразитологии. Неизменным её руководителем с 1943 года оставался Сергей Андреевич Лубянецкий. Защитив докторскую диссертацию в МВА, по ВСЭ при саркоцистозе он уехал в Воронеж. С этого времени руководителем курса ветеринарно-санитарной экспертизы стала доцент А.Г. Какурина. И курс вошёл в состав единой кафедры ВСЭ, фармакологии, паразитологии и молочного дела. Заведующей кафедрой являлась профессор Е.А. Савельева. А с 1974 года курс ВСЭ объединили в одну кафедру с курсами микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и организации ветеринарного дела. С 1987г. руководителем курса ВСЭ является профессор Д.А. Васильев (аспирантура ВНИИВВиМ у академика ВАСХНИЛ И.А. Бакулова). В связи с переездом в студенческий городок (1976 г) в пос. Октябрьский вышеуказанные кафедры были объединены, появилась наша кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно – санитарной экспертизы и мы получили специальный инфекционный корпус. В течение 10 лет кафедрой руководила доцент Александра Георгиевна Какурина. В 1985 году подразделение возглавил доктор ветеринарных наук, профессор Виктор Яковлевич Ганюшкин. Спустя десять лет, в 1995 году, В.Я. Ганюшкин предложил Д.А. Васильеву заменить его в должности заведующего кафедрой и с этого года согласно решению ученого совета вуза кафедрой руководит академик РАЕН, доктор биологических наук, профессор Дмитрий Аркадьевич Васильев. В настоящее время кафедра размещается в самостоятельном корпусе в академгородке УГСХА и располагает 6-ю учебными аудиториями, манежем, 96 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ю стационарными микробиологическими боксами, автоклавной, бактериологической кухней, лабораторией биофизики бактерий, виварием для лабораторных и с/х животных. На базе 1 корпуса УГСХА (Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1) создана микробиологическая лаборатория совместно с учебной аудиторией, что позволяет вести учебный процесс для студентов биотехнологического факультета. Для проведения эпизоотологического мониторинга домашних животных города там же создана ветеринарная клиника. Существуют и постоянно обновляющиеся два музея – микробиологический и ВСЭ. Кафедра обладает комплектами ПК, принтерами, сканерами, мультимедийным проектором, своим сайтом в Интернете «www.microbiology-ul.ru». По курсу эпизоотологии развернута фотогалерея на 47 стендах, включающая более 120 фотографий, в которых отражены клинические и паталогоанатомические особенности 24-х инфекционных болезней с/х животных, иммется видеотека по особо опасным инфекциям животных. Кафедра обеспечена лабораторной базой: определенным комплектом микроскопов (включая тринокуляры с увеличением до 1600 и цифровыми видеонасадками, мультимидийным проектором получаемых изображений с микроскопа, 5-тью автоклавами, термостатами, минусовыми и бытовыми холодильниками, парком центрифуг (скоростная, большеобъемная, лабораторные – в том числе модели СМ-6М с угловыми и баккет - роторами и показателем седиментации до 2000 g), установкой для лиофилизации бактерий LL-3000 (необходимой для пополнения микробиологического музея кафедры), ультразвуковым дезинтегратором MSE, денситометром Doc Print, оборудованием для электрофореза - S-2N (SE-2 ), набором для фильтрации бактерий и фагов (Millipore – Millivac), оборудованием для постановки ИФА и другими приборами необходимым для проведения учебного процесса в области микробиологии, эпизоотологии, ветеринарно –санитарной экспертизы и биотехнологии. Микробиологическая лаборатория имеет лицензию, на работу с микроорганизмами 3 – 4 групп патогенности. Коллектив кафедры составляет 29 человек, включая 5 профессоров являющихся докторами наук – д.б.н. Васильев Д.А. , д.б.н. Золотухин С.Н., д.м.н. Нафеев А.А., д.м.н. Потатуркина-Нестерова Н.И., д.б.н. Ильина Н.А., 20 кандидатов наук – к.б.н. Мерчина С.В., к.б.н. Молофеева Н.И., к.б.н. Пульчеровская Л.П., к.в.н. Богданов И.И., к.в.н. Васильева Ю.Б., к.б.н. Феоктистова Н.А., к.б.н. Ляшенко Е.А., к.б.н. Меркулов А.В., к.б.н. Канаева Т.И., к.б.н. Ковалева Е.Н., к.б.н. Марьина О.Н., к.б.н. Журавская Н.П., к.б.н. Сверкалова Д.Г., к.б.н. Семанина Е.Н., к.б.н. Калдыркаев А.И., к.б.н. Шестаков А.Г., к.б.н. Мастиленко А.В., к.б.н. Викторов Д.А., к.б.н. Барт Н.Г., к.б.н. Карамышева Н.Н., к.б.н. Юдина М.А. по специальностям 03.00.06 – микробиология и 03.00.23 – биотехнология, 16.00.03 - эпизоотология, 03.00.07 – вирусология. На кафедре по разным специальностям старшие лаборанты: Юдина В.М., Евина О.В., врач-ординатор Дулатова Р.Г. Все профессора – микробиологи нашего города получали это звание, проходя через кафедру микробиологии УГСХА. На кафедре существуют следующие специальности: 7 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии «Ветеринария» УМО МВА, «Микробиология» УМО МГУ, «Ветеринарносанитарная экспертиза» УМО Московского государственного университета прикладной биотехнологии, «Товароведение пищевых продуктов» УМО академии им. Плеханова. Учебная нагрузка кафедры за последние три года составляла от 13500 до 15500 часов. На кафедре в настоящее время преподаются более 80 дисциплин: история науки, теоритические основы товароведения и экспертизы, основы микробиологии, микробиология продовольственных товаров, гигиена и санитария, анатомия пищевого сырья, ветеринарная микробиология и иммунология, ветеринарная вирусология, стандартизация и контроль безопасности лекарственных средств и кормов, эпизоотология и инфекционные болезни животных, стандартизация и сертификация пищевых продуктов, микробиология, вирусология, фитопатогенные бактерии, частная вирусология и систематика вирусов, пробиотики, бактериологическая безопасность в лабораторных условиях, биотехнология, основы научных исследований, эволюция микроорганизмов, методология научных исследований, сельскохозяйственная микробиология, бактериофагия, токсины микроорганизмов, методы лабораторной диагностики, товароведение и экспертиза зерномучных товаров, товароведение и экспертиза кондитерских товаров, товароведение и экспертиза плодоовощных товаров, товароведение и экспертиза вкусовых товаров, товароведение и экспертиза молочных товаров, товароведение и экспертиза пищевых жиров, товароведение и экспертиза рыбных товаров, товароведение упаковочных материалов, экспертиза продовольственных товаров, безопасность и гигиена питания, сенсорный анализ продовольственных товаров, таможенная экспертиза качества продовольственных товаров, идентификация и фальсификация, биоповреждение потребительских товаров, пищевые и биологически активные добавки, введение в технологию продуктов питания, оценка паразитологического загрязнения сырья и продуктов, ВСЭ с основами технологии и стандартизации продуктов животноводства, инфекционные болезни мелких домашних животных, санитарная микробиология, технология переработки продукции животноводства, товароведение и экспертиза товаров, производственный ветеринарно-санитарный контроль, ветеринарно-санитарная экспертиза, технология мяса и мясных продуктов, технология молока и молочных продуктов, ветеринарная санитария, товароведение, биологическая безопасность и экспертиза товаров, ВСЭ на перерабатывающих предприятиях, пищевые токсикозы и токсикоинфекции, ветеринарно-санитарный контроль на таможне и транспорте, ветеринарно-санитарный контроль в лабораториях, цитология микроорганизмов, частная микробиология и систематика микроорганизмов, генетика микроорганизмов, промышленная микробиология и биотехнология, энзимология, иммунохимия и медицинская микробиология, антибиотики, эволюция микроорганизмов, основы регуляции метаболизма, физиология роста микроорганизмов, возбудители бактериальных инфекций человека, возбудители вирусных болезней человека, основы эпидемиологии, клиническая микробиология, возбудители грибковых заболеваний человека. 8 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии По большинству их перечисленных учебных дисциплин сотрудниками кафедры подготовлены и изданы учебно – методические комплексы, включающие лекционный курс, лабораторно – практические занятия, глоссариум, вопросы к экзаменам, зачётам, темы курсовых работ, список литературы. В среднем объём УМК составляет от 330 до 600 страниц. Сотрудниками кафедры, совместно с ведущими учеными страны академиками РАСХН И.А. Бакуловым (ВНИИВВиМ), А.М. Смирновым (ВНИИВСГиЭ), академиком РАЕН В.В. Макаровым (РУДН), д.в.н. профессором В. Е. Никитченко (РУДН), руководителем Россельхознадзора МСХ РФ д.б.н. Н.А. Власовым и др., издаются учебные пособия для студентов, аспирантов и специалистов – по наиболее актуальным или малоизученным проблемам специальностей преподаваемых на кафедре. В настоящей момент выпущено около 100 таких изданий. Указанные учебные материалы размещены на сайте кафедры. С 2000 года готовятся комплекты учебно-методических разработок на электронных носителях с включением уникальных видеофильмов, выпущено более 20 комплектов. За последние годы преподаватели кафедры помимо активизации учебного процесса приняли решение увеличить объем работы со студентами в области повышения их профессионализма и активизации участия в научноисследовательской работе. Ежегодно в течение 5-ти лет кафедрой организуются поездки на Международный ветеринарный конгресс (Москва) и семинары практикующих ветеринарных врачей Гильдии Татарстана (Казань, ГАВМ). На кафедре работают научные студенческие кружки «Инфекционист» и «Товаровед». Студенты-кружковцы представляют результаты научных исследований на ежегодных студенческих конференциях и участвуют в Международных, Всероссийских, региональных научных конкурсах. Студенты кружковцы ежегодно представляют результаты НИР на выставке-конкурсе творчества студентов (УГСХА), где занимают призовые места, награждаются грамотами. Кружковцы кафедры занимаются оформительской работой, периодически выпускают стенгазету «МИКРОБ», «ТОВАРОВЕД», стенды «Осторожно еда», «Нобелевские лауреаты с области биологии», «Классификация вирусов» и другие. Преподаватели кафедры ежегодно проводят викторины по дисциплинам. Проводятся конкурсы стенгазет, научных рефератов, презентаций и др. После прохождения производственной практики, студенты-кружковцы кафедры участвуют в научно-методической студенческой конференции «Первые шаги практикующих врачей». Также студенты-кружковцы принимают активное участие в организации и проведении научно-технических мероприятий академии, в работе научно-инициативного клуба школьников, студентов и аспирантов «НИКА». Активная работа сотрудников кафедры по организации НИРС отмечена в рейтинге УГСХА, где кафедра ежегодно занимает призовые места. Одним из перспективных направлений является создание системы интеграции системы образования и науки. В этом направлении студенты, занимающиеся НИРС на кафедре, проходят производственную практику в 9 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ветеринарной клинике «Друг», закрепляя свои теоретические знания практическими навыками. Также выполняют НИР на базе научноинновационного исследовательского центра микробиологии и биотехнологии (УГСХА). Студенты по специальности «Микробиология» могут выполнять дипломные исследования на базе крупнейших научно-производственных НИИ страны – ГНУ ВНИИВВиМ (Покров), ФГУ ВНИИЗЖ (Владимир). С данными научно-исследовательскими коллективами заключены договора о научном сотрудничестве. Многие студенты, занимающиеся НИР на кафедре, в дальнейшем продолжают свои исследования в аспирантуре кафедры или крупных научных центрах России. Ежегодно в эти научные центры по рекомендации кафедры от 4 до 8 человек поступают в аспирантуру. Заведующий кафедрой, д.б.н., профессор Дмитрий Аркадьевич Васильев 10 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ИССЛЕДОВАНИЯ В ОБЛАСТИ МИКРОБИОЛОГИИ И ВИРУСОЛОГИИ УДК 619/639.3:579.6 АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ БАКТЕРИЙ РОДОВ AEROMONAS, PSEUDOMONAS И FLAVOBACTERIUM Горшков И. Г., Воротников А., Антошкин П., Гринева Т.А., Куклина Н.Г., Парамонова Н.А. Научные руководители: к.б.н., ст.преподаватель Викторов Д. А., д.б.н., профессор Васильев Д.А. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Бактерии рода Aeromonas были описаны еще в конце XIX века Санарелли. Он выделил их из крови и лимфы инфицированной лягушки [9]. Род Aeromonas вместе с Oceanimonas и Tolumonas образует семейство Aeromonadaceae. Клетки бактерий рода Aeromonas граммотрицательны, имеют палочковидную форму с округленными концами, диаметр клеток от 0,3 до 1 мкм, длина от 1 до 3,5 мкм. В природе встречаются в виде одиночных палочек, попарно или в виде коротких цепей. Большинство видов подвижны: Aeromonas hydrophila. Aeromonas caviae. Aeromonas eucrenophila, Aeromonas schubertii, Aeromonas sobria, Aeromonas veronii, но есть и не подвижные виды, в частности, Aeromonas salmonicida [8]. Актуальность. Аэромонады способны вызывать тяжелые заболевания – аэромонозы, которым, в частности, подвержены прудовые промысловые рыбы семейств карповые и лососёвые, в меньшей степени угри. A. sobria широко распространены в пресной воде, но не встречаются в океанических водах. Бактериальные заболевания рыб также часто представлены псевдомонозами и флавобактериозами. По этой причине нами была изучена резистентность к антибиотикам штаммов бактерий видов A. sobria, A. hydrophila, Р. chlororaphis и F. psychrophilum. Объектами исследования явились референс-штаммы бактерий P. chlororaphis B-1246, A. hydrophila 43, F. psychrophilum 570, полученные из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарносанитарной экспертизы Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина, полевой штамм бактерии Aeromonas sobria Asob26-УГСХА выделенный нами из объектов окружающей среды. Материалы и методы исследования Антибиотикорезистентность исследовалась диффузным методом с применением стандартных бумажных дисков с антибиотиками. Результаты исследования и обсуждение Результаты исследования приведены в таблице 1. 11 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица 1 – Антибиотикорезистентность близкородственных видов и родов Антибиотик A. sobria и бактерий A. sobria Asob26-УГСХА A. hydrophila 43 P. chlororaphis B-1246 F. psychrophilum 570 Стрептомицин r s r r Тетрациклин s s r r эритромицин r mr r r Неотинином r r mr r Полимиксин s s r r Ампицилин r r mr r Доксициклин s s s s Линкомицин mr mr r mr Оксициклин r r r r r – бактерия резистентная к данному антибиотику mr – бактерия слабо резистентная к антибиотику s – бактерия чувствительна к антибиотикам Выводы: Исходя из представленных данных следует, что A. sobria обладает повышенной резистентностью по отношению к антибиотикам всех основных родов, но чувствительны к некоторым препаратам тетрациклинового ряда. По сравнению с A. hydrophila, бактерии вида A. sobria обладают большей антибиотикорезистентностью. Библиографический список: 1.Горшков, И.Г. Исследование устойчивости бактерий рода Aeromonas к селективным компонентам / И.Г. Горшков, Н.Г. Куклина, Д.А. Викторов // Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения: Материалы IV международной научнопрактической конференции, Ульяновск, 22-24 ноября 2012. – Т. 1. – С. 245248. 2.Горшков, И.Г. Исследование селективных добавок питательных сред для бактерий рода Aeromonas / И.Г. Горшков, Н.Г. Куклина, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Биотехнология: реальность и перспективы в сельском хозяйстве: Материалы Международной научно-практической конференции, Саратов, ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ», 28-29 января 2013. – Саратов: Издательство «КУБиК», 2013. – С. 175-177. 3.Гринева, Т.А. Бактерии Pseudomonas chlororaphis в научном и практическом отношении / Т.А. Гринева, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения: Материалы IV международной научно-практической конференции, Ульяновск, 22-24 ноября 2012. – Т. 1. – С. 249-254. 4.Гринева, Т.А. Схема выделения Pseudomonas chlororaphis / Т.А. Гринева, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Вестник ветеринарии. – Ставрополь: «Энтропос», 2013. – №64(1/2013). – С. 18-20. 12 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 5.Гринева, Т.А. Схема выделения и идентификации бактерии Pseudomonas chlororaphis / Т.А. Гринева, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Биотехнология: реальность и перспективы в сельском хозяйстве: Материалы Международной научно-практической конференции, Саратов, ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ», 28-29 января 2013. – Саратов: Издательство «КУБиК», 2013. – С. 181183. 6.Парамонова, Н.А. Об актуальности и практической значимости изучения Flavobacterium psychrophilum / Н.А. Парамонова, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев // Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения: Материалы IV международной научнопрактической конференции, Ульяновск, 22-24 ноября 2012. – Т. 1. – С. 303306. 7.Парамонова, Н.А. Роль бактерий Flavobacterium psychrophilum в патогенезе рыб / Н.А. Парамонова, Д.А. Викторов, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин // Биотехнология: реальность и перспективы в сельском хозяйстве: Материалы Международной научно-практической конференции, Саратов, ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ», 28-29 января 2013. – Саратов: Издательство «КУБиК», 2013. – С. 93-95. 8.BERGEY’S MANUAL OF Systematic Bacteriology Second Edition. USA 2007. 9.Knut Karst. Vorkommen von vermehrungsfaehigen Aeromonasarten in Rohrinkrustationen eines staedtischen Wasserversordnungssystems. // Dissertation zur Erlangung des Doctorgrades der Zahnmedizin des Fachbereichs Humanmedizin der Johann Wolfgang Goethe Universitaet Frankfurt am Main, 2001. ANTIBIOTIC RESISTANCE BACTERIA OF GENERA AEROMONAS, PSEUDOMONAS AND FLAVOBACTERIUM Gorshkov I. G., Vorotnikov А., Аntoshkin P., Grineva T.А., Kuklina N.G., Paramonova N.А., Viktorov D.А., Vasil'ev D.А. The work was studied resistance Aeromonas sobria, Pseudomonas chlororaphis and Flavobacterium psychrophilum to the main antibiotics used in the treatment aeromonosis and psevdomanozov fish. УДК 602.3:579.8 БАКТЕРИИ РОДА BACILLUS Брежнева Я., Казакова А., 2 курс экономический факультет Научный руководитель: к.б.н., доцент Феоктистова Н.А. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина», г. Ульяновск В данной статье дано определение бактериям рода Bacillus и более подробно приведены примеры двух видов бактерий данного рода: Bacillus anthracis и Bacillus cereus. Бациллы рассмотрены как возбудители заболеваний человека. В заключении представлены прочие виды бактерий рода Bacillus, имеющие немаловажное значение. 13 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Бактерии рода Bacillus - прямые палочки до 10 мкм, с закругленными или обрубленными концами, часто в парах или цепочках. Подвижные (кроме Вacillus anthracis) за счет перитрихиальных жгутиков. Образуют эндоспоры, характеризующиеся повышенным коэффициентом светопреломления, устойчивостью к повреждающим агентам и высоким содержанием дипиколиновой кислоты (5-20 % сухой массы). Род включает 48 видов; некоторые виды — строгие аэробы, другие — факультативные анаэробы. Bacillus anthracis - грамположительная, спорообразующая бактерия. Возбудитель сибирской язвы у человека и животных. Заболевание известно с глубокой древности, со времен Гиппократа и Гомера, болезнь фигурирует под названием «священный огонь» (ignis sacer) или «персидский огонь» (ignis persicus). С.С. Андриевский, изучавший заболевание во время эпидемии на Урале (1786-1788), дал ему название «сибирская язва», а в 1788 г. путем самозаражения доказал единство этиологии сибирской язвы у людей и животных. Первый доказанный возбудитель заболеваний человека, выделен в чистую культуру Р. Кохом в 1877 г. Сибирская язва - типичный зооантропоноз; среди животных наиболее восприимчивы травоядные, но отмечены случаи заболевания среди зайцев, кошек и собак; у человека носит выраженный профессиональный характер (сельскохозяйственные рабочие, работники боен, шерстобиты и щеточники). Наиболее интенсивные очаги заболевания находятся в Азии, Южной Африке, Южной Америке и Австралии; спорадические случаи регистрируют в Европе, России и США. Ежегодно сибирской язвой заболевает около 1 млн. животных и регистрируется около 40 тыс. случаев заболевания у людей. Животные заражаются при заглатывании спор во время выпаса или при поедании загрязненных кормов. У животных возбудитель проникает через микротравмы ротовой полости или стенку кишечника. Больные животные выделяют сибиреязвенные палочки с мочой и испражнениями. Болезнь быстро прогрессирует в течение 2-3 суток, а при молниеносных формах – в течение нескольких часов; летальность достигает 80 %. Клинические признаки болезни (судороги, диарея с кровью) проявляются непосредственно перед гибелью животного. Человек заражается при контакте с инфицированным материалом (уход за больными животными, переработка шерсти, шкур, щетины, кож и костей), либо при употреблении в пищу мяса больных животных. Пути заражения ингаляция, заглатывание или проникновение через порезы и ссадины кожи спор Bacillus anthracis. Ежегодно в мире регистрируют 25-100 тыс. случаев заражения. Значительную эпидемическую опасность представляют скотомогильники, особенно если трупы животных, павших от сибирской язвы, были зарыты без надлежащих предосторожностей. В сельских районах заболеваемость носит сезонный характер, пик заболеваемости приходится на летние месяцы. Для профилактики зоонозов иммунизируют животных живой вакциной, приготовленной из некапсулированного штамма Bacillus anthracis, или протективным Аг. 14 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Bacillus cereus - палочка длиной 8 мкм, шириной 0,9-1,5 мкм, подвижная, образует споры. Отдельные штаммы этого микроба могут образовывать капсулу. Грамположительная. Вызывает спорадические случаи пищевых отравлений у человека. Температурный оптимум роста 30 °С, оптимум рН 79,5. Следует отметить высокую протеолитическую активность микроорганизма - разжижает желатин в течение 1-4 сут (80 % штаммов). Bacillus cereus (от лат. cera - воск, свеча) широко распространена в природе, морфологически сходна с Bacillus anthracis (характерно расположение микробных тел в виде штакетника), но обладает подвижностью, чувствительна к действию Продуцирует 2 энтеротоксина: термостабильный (обуславливающий рвоту) и термолабильный (обуславливающий диарею). Способна размножаться в самых различных объектах. Споры во внешней среде обладают высокой устойчивостью. Сначала источником пищевых отравлений, обусловленных Васillus cereus, считали кулинарные изделия, содержащие картофельный крахмал. Затем были описаны вспышки пищевых отравлений этой этиологии, обусловленные растительными, мясными, мясо-растительными, рыбными и другими пищевыми продуктами. Особенно быстро Ваcillus cereus размножается в измельченных продуктах (фарш, котлеты, колбаса, кремы). При накоплении этого микроба изменяются органолептические свойства продукта: на поверхности образуется сероватая пленка, изменяются цвет и запах. Вызываемый Вacillus cereus диарейный синдром в целом сходен с обусловленным энтеротоксинпродуцирующей кишечной палочкой, за исключением того, что при нем чаще бывают схваткообразные боли в животе (в 75 % случаев), короче инкубационный период (6-14 ч) и средняя продолжительность болезни (20 ч). Рвотный синдром клинически не отличим от вызываемого стафилококковым энтеротоксином и характеризуется коротким инкубационным периодом (в среднем 2 ч), непродолжителен (в среднем 9 ч), рвота развивается у 100 % больных (при диарейном синдроме менее чем у 25 %). Проведение специфического лечения нецелесообразно, поскольку оба синдрома купируются спонтанно и в целом протекают в умеренной форме. При подозрении на пищевое отравление, вызванное В. cereus, диагноз может быть подтвержден при обнаружении возбудителя в пищевых продуктах в количестве 105/г и более. Диагностическим признаком считают обнаружение в подозрительных продуктах более 105 бактерий в 1 г/мл продукта либо 102-103 бактерий в 1 г/мл каловых и рвотных масс или промывных вод. В большинстве случаев инфекции проходят без антибактериальной терапии и госпитализации не требуют. Летальные исходы очень редки. Клиническая картина неспецифична, и от других кишечных инфекций эту инфекцию отличить невозможно. Еще следует иметь в виду, если заболеванию предшествовало пребывание у моря или употребление в пищу морепродуктов. Включают Bacillus (далее B.) subtilis, В. megaterium, В. alvei, В. laterosporus, В. pumilus, В. thuringiensis и В. sphaericus. Два первых вида 15 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии широко распространенные сапрофиты, остальные виды - энтомопатогены. Они могут вызвать заболевания человека в составе микробных ассоциатов, особенно у лиц с иммунными расстройствами. Значительная часть героина, продаваемого уличными торговцами, обсеменена Bacillus sublilis, отсюда тяжелые глазные инфекции и бактериемии у наркоманов. Также следует упомянуть В. stearothermophilus, патогенную для насекомых и применяемую в качестве средства биологического воздействия в первую очередь на гусениц чешуекрылых (Lepidiptera). Механизм энтомоцидного действия связан со способностью образовывать белковые кристаллические структуры (гранулы) при спорообразовании, они высвобождаются при прорастании споры и выделяют бактериальные токсины под действием пищеварительных ферментов желудочно-кишечного тракта гусеницы. SORT BACILLUS BACTERIA Brezhneva Y., Kazakova A., Feoktistova N.A. In this article definition is given to sort Bacillus bacteria in more detail examples of two species of bacteria of this sort are given: Bacillus anthracis and Bacillus cereus. Bacilli are considered as causative agents of diseases of the person. Other species of bacteria are presented in the conclusion the sorts Bacillus having important value. УДК 616:578 ВИРУСЫ ГРИППА Сатдарова Д., 1 курс факультет ветеринарной медицины Научные руководители: д.б.н., профессор Васильев Д.А., к.б.н., доцент Молофеева Н.И. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Грипп (от фр. grippe) — острое инфекционное заболевание дыхательных путей, вызываемое вирусом гриппа. Входит в группу острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). Периодически распространяется в виде эпидемий и пандемий. В настоящее время выявлено более 2000 вариантов вируса гриппа, различающихся между собой антигенным спектром. По оценкам ВОЗ от всех вариантов вируса во время сезонных эпидемий в мире ежегодно умирают от 250 до 500 тыс. человек (большинство из них старше 65 лет), в некоторые годы число смертей может достигать миллиона. Вирус гриппа имеет сферическую форму диаметром 80—120 нм, в центре находятся РНК-фрагменты, заключённые в липопротеидную оболочку, на поверхности которой имеются «шипы» состоящие из гемагглютинина (H) и из нейраминидазы (N). Известны 3 типа вирусов гриппа: A, B и С. Вирус гриппа А как правило вызывает заболевание средней или сильной степени тяжести. Поражает как человека, так и некоторых животных (лошадь, свинья, хорек, птицы). 16 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Вирусы гриппа В не вызывают пандемий и обычно являются причиной локальных вспышек и более ограниченных, по сравнению с гриппом типа А, эпидемий, иногда охватывающих одну или несколько стран. Вирус гриппа С достаточно мало изучен. Известно, что в отличие от вирусов А и В, он не вызывает эпидемий и не приводит к серьезным последствиям. Является причиной спорадических заболеваний, чаще у детей. Инфицирует только человека. Симптомы болезни обычно очень легкие, либо не проявляются вообще. Геном вируса складывается из 8 фрагментов однонитчатой РНК, которые кодируют 10 вирусных белков. Фрагменты РНК имеют общую белковую оболочку, соединяющую их, образуя антигенно-стабильный рибонуклеопротеид (S-антиген), который определяет принадлежность вируса к серотипу А, В или С. К гриппу восприимчивы все возрастные категории людей. Источником инфекции является больной человек с явной или стёртой формой болезни, выделяющий вирус с кашлем, чиханьем и т. д. Больной заразен с первых часов заболевания и до 5–7-го дня болезни. Больные способны инфицировать других людей в течение примерно 8–ми дней с начала заболевания. Наибольшую опасность для окружающих представляют больные в первые 2 дня болезни. Большую эпидемическую опасность представляют люди, которые при заболевании гриппом вынуждены по разным причинам выходить из дома. Вирус гриппа, обладая довольно высокой устойчивостью, особенно при низких температурах (сохраняется при температуре 4°С), может сохраняться во внешней среде до 3–х недель. Поэтому, существует вероятность второго пути распространения инфекции – контактно–бытового. Инкубационный период может колебаться от нескольких часов до 3-х дней, обычно 1-2 дня. Тяжесть заболевания варьирует от лёгких до тяжёлых гипертоксических форм. Вакцина (от лат. vacca — корова) — медицинский или ветеринарный препарат, предназначенный для создания иммунитета к инфекционным болезням. Впервые вакцинация против вируса была разработана в начале сороковых и испытана на солдатах, воевавших во Второй мировой войне. До последнего времени лечение было обычно симптоматическое, в виде жаропонижающих, отхаркивающих, и противокашлевых средств, а также витамины, особенно витамин С в больших дозах. Свиной грипп (англ. Swine influenza) — условное название заболевания людей и животных, вызываемого штаммами вируса гриппа. Испанский грипп или «испанка»был, вероятней всего, самой страшной пандемией гриппа за всю историю человечества. В 1918—1919 годах во всем мире от испанки умерло приблизительно 50-100 млн человек. Было заражено около 400 млн человек, или 21,5 % населения планеты. Эпидемия началась в последние месяцы. Лечение заболевания, вызванного штаммами вируса «свиного» гриппа по сути не отличается от лечения так называемого «сезонного» гриппа. 17 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 1.Лихорадка – т.е. повышение температуры тела, как правило с ознобом. При быстром снижении температуры отмечается потливость. 2.Интоксикация. 3.Катаральные явления, приводят к появлению насморка, кашля, слезотечения и др. 4.Признаки поражения дыхательных путей. Основным методом профилактики против гриппа является -активная иммунизация вакцинация, когда в организм вводят частицу инфекционного агента. -одним из наиболее распространенных и доступных средств профилактики гриппа является ватно-марлевая повязка (маска). -необходимо принимать аскорбиновую кислоту и поливитамины, которые способствуют повышению сопротивляемости организма. Наибольшее количество витамина С содержится в квашеной капусте, клюкве, лимонах, киви, мандаринах, апельсинах. -для профилактики в период эпидемий гриппа можно принимать по 2 – 3 зубчика чеснока ежедневно. Достаточно пожевать несколько минут зубчик чеснока, чтобы полностью очистить полость рта от бактерий. Положительным действием обладает и употребление репчатого лука. Библиографический список: 1.Казанцев А. П., Матковский В. С. Справочник по инфекционным болезням. — М.: Медицина, - 1979. — С. 46-50. 2.Каверина Н. В. Пандемии гриппа в истории человечества / Ветеринария. – 1992 - №2. – С.51-54. 3.http://ru.wikipedia.org FLU VIRUSES Satdarova D., Vasilyev D. A., Molofeeva N. I. Work is devoted to research of value of a virus of flu in human life. УДК 930(091) ВЛАДИМИР ДМИТРИЕВИЧ ТИМАКОВ Бурова Н.,2 курс факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.б.н., доцент Феоктистова Н.А., к.б.н., доцент Ковалева Е.Н. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Статья посвящена деятельности советского микробиолога и эпидемиолога, создателя научной школы микробиологов и генетиков, академик Академии Медицинских Наук СССР и Академии Наук СССР, президент Академии Медицинских Наук СССР. Владимир Дмитриевич Тимаков (1905-1977) - советский микробиолог и эпидемиолог, создатель научной школы микробиологов и генетиков, академик Академии Медицинских Наук СССР и Академии Наук СССР, президент 18 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Академии Медицинских Наук СССР. Родился в селе Пустотино ныне Кораблинского района Рязанской области в многодетной крестьянской семье. Русский. Член ВКП(б)/КПСС с 1941 года. В 1922 году с отличием окончил среднюю школу. Работает в Пустотинской комсомольской ячейке. В 1924 году поступил на медицинский факультет Томского университета, получил диплом врача (1929), затем поступил в аспирантуру. С 1932 года ассистент кафедры микробиологии и одновременно заведующий отделом Томского санитарно-бактериологического института. В 1934 году был приглашён в Туркменский медицинский институт, где работал ассистентом, затем доцентом (1935) и заведующим кафедрой микробиологии (с 1944). Одновременно (1934-1941) руководил отделом Туркменского института микробиологии и эпидемиологии. В 1941 году защитил диссертацию на соискание учёной степени доктора медицинских наук на тему «Молочные тифозные и паратифозные вакцины». В годы Великой Отечественной войны В.Д.Тимаков был назначен наркомом здравоохранения Туркменской ССР (1941-1945). Под его руководством была ликвидирована вспышка острых кишечных инфекций в Красноводске среди эвакуированного населения и раненых. Туркменский институт микробиологии и эпидемиологии изготовил для фронта и тыла 11 миллионов бактериальных препаратов, 6 миллионов доз оспенного детрита, 20 видов вакцин и сывороток. В 1945 году В.Д. Тимаков принял предложение Академии Медицинских Наук СССР и возглавил в Москве академический Институт эпидемиологии и микробиологии (ныне – НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи). Здесь работали Н.Ф. Гамалеи, П.Ф. Здродовский, М.А. Морозов, Л.А. Зильбер, В.Л. Троицкий. За короткое время В.Д.Тимаков сплотил коллектив для проведения важных теоретических и прикладных исследований по микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. В 1952 году за совершенствование производства лечебно-профилактических препаратов большая группа научных сотрудников во главе с В.Д.Тимаковым была удостоена Сталинской премии. С 1949 года и до конца жизни В.Д.Тимаков заведовал кафедрой микробиологии 2-го Московского медицинского института имени Н.И.Пирогова и одновременно отделом Института эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи. В 1948 году был избран членом-корреспондентом, в 1952 году – действительным членом (академиком) Академии Медицинских Наук СССР, а в 1968 году – академиком Академии Наук СССР. В 1957-1963 годах вицепрезидент, в 1968-1977 годах президент Академии Медицинских Наук СССР. В.Д.Тимаков опубликовал более 300 научных работ, в том числе 7 монографий, 19 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии учебники по микробиологии. Он обобщил опыт противоэпидемической практики, выдвинул ряд принципов ликвидации инфекций (1959). Основные его научные труды посвящены изучению проблемы изменчивости и генетики микробов, бактериофагии – формам бактерий, микоплазматологии, эпидемиологии и лабораторной диагностике инфекционных болезней, иммунологии. Важным этапом его научной деятельности было изучение L-форм бактерий. Установлено, что под воздействием ряда лекарств некоторые бактерии не погибают, а лишь теряют часть своей оболочки, приобретают форму шара и становятся неузнаваемыми. L-формы различных бактерий длительное время сохраняются в организме и обладают способностью вызывать хронические заболевания. Под руководством В.Д.Тимакова в лаборатории института был изучен процесс образования Lформ бактерий, проведены сравнительные исследования L-форм бактерий и микоплазм. Итоги исследований обобщены в 3 монографиях В.Д.Тимакова в соавторстве с Г.Я.Каган (1961, 1967, 1973). За эти исследования он совместно с Г.Я.Каган был удостоен Ленинской премии (1974). Благодаря исследованиям учёного и его учеников создано учение об L-формах бактерий и микоплазмах, значение которых особенно велико при заболеваниях сердечно-сосудистой и нервной систем, респираторных инфекциях. Им создано несколько лабораторий по изучению генетики бактерий, он был инициатором организации Института медицинской генетики Академии Медицинских Наук СССР. В.Д.Тимаков создал научную школу микробиологов и генетиков. По его инициативе были проведены два Всесоюзных симпозиума по генетике бактерий. На третьем съезде Всероссийского общества генетиков и селекционеров в 1977 году В.Д.Тимаков сделал доклад «Генетика микроорганизмов и медицина», в котором были подведены итоги собственных исследований в области генетики микроорганизмов, определены перспективы дальнейшей работы. Он занимался также вопросами организации противоэпидемической службы, обосновал принципы ликвидации ряда инфекций и снижения общего уровня инфекционной заболеваемости в нашей стране. Совместно с учениками разработал методы фагодиагностики и фагоиндикации бактерий в окружающей среде, предложил методы повышения эффективности вакцин. Около 40 лет В.Д.Тимаков вёл преподавание микробиологии студентам. Он был инициатором создания во 2-м Московском медицинском институте медикобиологического факультета для подготовки врачей – биофизиков, биохимиков, биокибернетиков, принимал участие в создании Сибирского филиала Академии Медицинских Наук СССР. Указом Президиума Верховного Совета СССР от 21 июля 1975 года за выдающиеся заслуги в развитии медицинской науки и в связи с семидесятилетием со дня рождения академику Тимакову Владимиру Дмитриевичу присвоено звание Героя Социалистического Труда с вручением ордена Ленина и золотой медали «Серп и Молот». Избирался делегатом XXIV и XXV съездов КПСС, депутатом Верховного Совета СССР, городских и районных Советов народных депутатов, депутатом Моссовета, членом ЦК профсоюза медицинских работников. Был председателем комиссии по здравоохранению и социальному обеспечению Совета национальностей 20 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Верховного Совета СССР, возглавлял секцию медицины Комитета по Ленинским и Государственным премиям (1958-1966), был главным редактором «Журнала микробиологии, эпидемиологии и иммунологии», входил в состав редколлегий других журналов, был членом ряда зарубежных академий и научных обществ, почётным доктором медицины Краковского университета (Польша). Жил и работал в городе-герое Москве. Скончался 21 июня 1977 года. Похоронен на Новодевичьем кладбище в Москве. Награждён тремя орденами Ленина, тремя орденками Красного Знамени, орденом Октябрьской Революции, двумя орденами Трудового Красного Знамени, медалями. Заслуженный деятель науки Туркменской ССР (1945). Лауреат Ленинской премии (1974), Сталинской премии (1952). Его именем названа одна из улиц города Томск. VLADIMIR DMITRIYEVICH TIMAKOV Burova N., Feoktistova N.A., Kovaleva E.N. Article is devoted to activity of the Soviet microbiologist and the epidemiologist, the founder of school of sciences of microbiologists and geneticists, the academician of Academy of Medical Sciences of the USSR and Academy of Sciences of the USSR, the president of Academy of Medical Sciences of the USSR. УДК 616:578.2 ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИИ ФАГОВ БАКТЕРИЙ B.BRONCHISEPTICA C ПРИМЕНЕНИЕМ КОМПЬЮТЕРНОГО 3-D МОДЕЛИРОВАНИЯ Скорик А., Суркова Е., 3 курс факультета ветеринарной медицины Научные руководители: д.б.н., профессор Васильев Д.А., к.вет.н., доцент Васильева Ю.Б. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск В статье приводится анализ литературных данных по выделению бактериофагов Bordetella bronchiseptica, 3D-моделированию бактериофагов бактерий и по механизму взаимодействия фагов с бактериями. С 80-х годов прошлого века учеными предпринимаются попытки выделения фагов бактерий рода Bordetella. В настоящее время несколькими группами отечественных и зарубежных исследователей выделены, изучены и охарактеризованы бактериофаги Bordetella bronchiseptica, Bordetella pertussis, В.parapertussis и В. avium (Лапаева И.А. и др., 1982; Liu M. et.al., 2004). Учеными НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи были описаны бактериофаги бактерий B.bronchiseptica - 214, B.pertussis - Т, К, 134, 41405 и B.parapertussis 662-2. Исследователями проведены сравнительный анализ структуры геномов бактериофагов, выявлены особенности лизогении и конверсии бактерий рода Bordetella. В 2004 году исследователем Minghsun Liu были выделены бактериофаги B.bronchiseptica путем многократного облучения бактерий ультрафиолетовыми лучами. На основе структурных характеристик, автор отнес фаг B.bronchiseptica 21 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии к семейству Podoviridae. Это семейство короткохвостовых фагов с изометрической головкой. Автор описал бактериофаги BPP-1, BMP-1 и BIP-1 B.bronchiseptica (Liu M. et.al., 2004). Развитие компьютерных технологий позволяет разработать 3D-модель бактериофагов и изучить механизм взаимодействия фагов с клеткой-хозяином. Целью нашей работы явился анализ литературных источников по 3Dмоделированию бактериофагов бактерий В.bronchiseptica и по механизму взаимодействия фагов с бактериями. В отечественной литературе мы не нашли сведений по данному направлению. Американские ученые изучили строение бактериофага BPP-1 B.bronchiseptica и смоделировали его компьютерную трёхмерную структуру. Они установили, что каждая частица фага BPP-1 имеет икосаэдрическую головку и необычный волокнистый хвост, состоящий из короткого центрального отростка, шести периферических коротких шипов и шести удлиненных нитей. Полная трехмерная структура фага ВРР-1 была сконструирована авторами на основании анализа многочисленных электронных 2D-снимков отдельных частиц. Методы криоэлектронной микроскопии позволили изучить структуру головки фага, а криоэлектронной томографии – его уникального хвоста с функциями адаптивного тропизма (рис. 1). Рис.1 – Струкутура фага ВРР-1 22 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии На рисунке показано компьютерное 3D-моделирование фага путем анализа каждой отдельной частицы на электронных снимках, находящихся в угловом диапазоне от -70° до 70° (рис.1. А). Продольные разрезы отдельных частиц фага позволили авторам изучить головку, центральный отросток хвоста, шипы (жёлтая стрелка на рис. 1 В) и нитчатый хвост (красная стрелка на рис. 1В). Компьютерные модели строения фага и его отдельных частей показаны на рис. 1 С, D и E. Бактериофаг В.bronchiseptica BPP-1 относится к короткохвостовым фагам и механизм доставки его ДНК уникален. Гибкость нитей хвоста необходима для эффективного сканирования наружной мембраны бактерий, однако, нити всегда находятся параллельно центральному отростку, то есть немного ограничены в движениях. После прикрепления нитей хвоста к бактерии они фиксируются, располагая перпендикулярно центральный отросток хвоста к поверхности клетки-хозяина. Это облегчает взаимодействие с клеточной мембраной, вызывая высвобождение ДНК (рис. 2). Для инъекции ДНК в бактериальную клетку кончик хвоста центрального отростка должен достичь сначала внешнюю, а затем внутреннюю мембрану. Когда частицы фага находятся во внешней среде средний угол между вертикальной осью хвоста и нитями хвоста составляет 66°. Нити хвоста закрывают центральный отросток и, возможно, блокируют контакт с бактериями. Для появления центрального отростка необходим угол не менее 78°. На рисунке 2В видно, что при атаке фаги располагаются по всей длине бактерий, как на ровных боковых поверхностях, так и на округлых полюсах. В томографической реконструкции частиц видно, что у свободных фагов средняя разница высоты между хвостом и шестью окружающими шипами составляет 60Å (рис. 1 Е). Тогда как средняя толщина клеточной мембраны В.bronchiseptica составляет ≈ 100Å. Авторы предполагают, что после прикрепления хвоста к бактериальной клетке шипы сгибаются еще на 30 градусов внутрь к хвосту (рис. 2А). Эти изменения передаются в капсид и служат началом выпуска ДНК в цитоплазму, так как хвост уже может проникнуть через внутреннюю мембрану. Предположение авторов подтверждает анализ плотности шипов хвоста. Он показал, что шипы - цилиндрические структуры, взаимодействующие с белками оболочки головы, а не с центральным хвостом (рис. 1 D). Таким образом, механизм фаговой структурной адаптации к динамически изменяющимся клеткам-хозяина состоит в строгом сохранении ДНК материала капсида и относительной мобильности и изменчивости хвостового аппарата, что обеспечивает выживание потомства фага. Анализ литературных источников показал перспективность применения технологий компьютерного моделирования в изучении, как строения фага, так и механизмов взаимодействия с бактериями. 23 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Рис. 2 – Высвобождение ДНК фага В дальнейшем мы планируем провести 3D моделирование 8-ми бактериофагов В.bronchiseptica, выделенных на кафедре микробиологии. Библиографический список: 1.Лапаева И.А. Бактериофаг Bordetella pertussis / И.А. Лапаева [и др.] // Микробиология - 1980. - Т. 5. -С. 85-90. 2.Лапаева И.А. Конверсия токсигенности коклюшными фагами у Bordetella parapertussis / И.А. Лапаева [и др.] // Микробиология -1982. -Т. 9. - С. 60-64. 3.Liu M. Reverse Transcriptase-Mediated Tropism Switching in Bordetella Bacteriophage / M. Liu [et al.] // Science. - 2002. - V. 295. - P. 2091- 2094. STUDY PHAGE BIOLOGY B.BRONCHISEPTICA C BACTERIA USING A COMPUTER 3-D MODELING Skoryk A., Surkov E., Vasilieva Y.B., Vasiliev D.A. This article provides an analysis of published data on the allocation of bacteriophages Bordetella bronchiseptica, 3D-modeling of bacteria and bacteriophages on the mechanism of interaction of phages with bacteria. 24 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 613.495:579 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПАРФЮМЕРНОКОСМЕТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ НА ПРИМЕРЕ ЛОСЬОНОВ ДЛЯ ТЕЛА Долгов Н., Сосина Ю., 4 курс экономический факультет Научный руководитель: к.б.н., доцент Ляшенко Е.А. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Работа посвящена прорабатыванию методик микробиологических исследований в области косметических средств. В качестве объектов исследования были выбраны лосьоны для тела 2 фирм-производителей, в количестве 3 тюбиков. Кожа тела человека н (фр. lotion, от лат. lotio — мытье, омовение) — косметическое гигиеническое средство для ухода за кожей; водно-спиртовой раствор различных активнодействующих (органические кислоты, витамины, соки, настои лекарственных растений) и других веществ.[2] Для начала необходимо было отобрать достаточное количество исследуемого материала. Для этого было проведено три ряда разведения 1г каждого образца в физиологическом растворе. Вторым этапом исследования стало приготовление питательных сред для роста исследуемых микроорганизмов. На данном этапе были приготовлены следующие питательные среды : среда Сабуро , мясо-пептонный агар с глюкозой, желточно-солевой агар, мясо-пептонный бульон с глюкозой, агар Эндо и жидкая среда Кеслера. Прежде чем начинать исследование, были изучены методики проведения испытаний. Сущность этих методик заключается в следующем: 1.Определение количества дрожжей, дрожжеподобных и плесневых грибов. Сущность метода: метод основан на выявлении и количественном подсчете всех выросших колоний микроорганизмов, типичных по макро- и (или) микроскопической морфологии, на селективной агаризованной питательной среде Сабуро, при культивировании посевов при температуре (30 +/- 1) °С в течение (120 +/- 3)ч. 2.Выявление и идентификация бактерий сем. Enterobacteriaceae. Сущность метода: метод основан на выявлении бактерий семейства Enterobacteriaceae с использованием накопительных и селективных питательных сред с дальнейшей идентификацией выявленных бактерий по нижеследующим биохимическим тестам. 3.Выявление и идентификация Pseudomonas aeruginosa Сущность метода: метод основан на выявлении бактерий вида Pseudomonas aeruginosa с использованием накопительных и селективных питательных сред с дальнейшей идентификацией выявленных бактерий по нижеследующим биохимическим тестам. 4.Выявление и идентификация Staphylococcus aureus. 25 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Метод основан на выявлении бактерий вида Staphylococcus aureus с использованием накопительных и селективных питательных сред с дальнейшей идентификацией выявленных бактерий. [1] Следующим этапом стало непосредственно проведение испытаний отобранных образцов на наличие вышеописанных микроорганизмов. 1.Для определения количества дрожжей, дрожжеподобных и плесневых грибов производили посев на агаризованную среду Сабуро. 2. Выявление и идентификация бактерий сем. Enterobacteriaceae была использована среда Эндо. 3. Для выявления наличия колоний бактерий Pseudomonas использовали мясо-пептонный бульон с глюкозой и скошенный мясо-пептонный агар с глюкозой. 4. Для идентификации Staphylococcus aureus был произведен посев на желточно-солевой агар. Результаты исследований. В ходе проведённых исследований роста колоний искомых микроорганизмов обнаружено не было. Это свидетельствует об относительной безопасности данной продукции и возможности её использования человеком, без риска нанесения вреда здоровью. Библиографический список: 1.Методы микробиологического контроля парфюмерно-косметической продукции. Методические указания. МУК 4.2.801-99 2.http://ru.wikipedia.org MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF THE PERFUMES AND COSMETICS AN EXAMPLE BODY LOTION Dolgov N., Sosina J., Lyashenkо E.A. The work is devoted to working through methods of microbiological research in the field of cosmetics. The objects of study were selected body lotions 2 manufacturers, the number of 3 tubes. УДК 639.3:579.62 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ БАКТЕРИИ YERSINIA RUCKERI–ВОЗБУДИТЕЛЯ БОЛЕЗНИ КРАСНОГО РТА ФОРЕЛИ(ERM) Логинова Е., студентка 5 курса факультета ветеринарной медицины, Научные руководители: к.б.н., ст.преподаватель Викторов Д.А. д.б.н., профессор Васильев Д.А. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина», г. Ульяновск В работе представлен литературный обзор по рассматриваемой тематике, приведены данные о биологических свойствах бактерий рода Yersinia. Болезнь красного рта (ERM) является одной из самых серьезных болезней, затрагивающих пресноводную форель, которая вызывается микроорганизмом Yersinia ruckeri. Данная бактерия была изначально 26 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии изолирована от радужной форели. Однако существует вероятность, что указанным инфекционным агентом поражаются все виды лососевых. Есть данные, что Y. ruckeri была выявлена у озерной форели, чавычи, семги, пескарей, сиги, осетра, белокорого палтуса, у карпа, угрей, налима, серебристой сайды и арктического гольца, у ондатры, пустельги, стервятников, чаек, речного рака, людей, а также из сточных вод, и речной воды (Altinok, 2004). Бактерия Y. ruckeri может находиться больше 3 месяцев в водах рек, озёр, в отложениях устьев рек (Romalde и др., 1994). Инфекционная доза Y. ruckeri для лососевых и других восприимчивых разновидностей неизвестна (Stone, MacDiarmid, Pharo, 1997). К факторам, способствующим возникновению и распространению заболевания, относятся неблагоприятные условия окружающей среды, а также высокие показатели плотности посадки рыб (Altinok, 2004, Altinok, Grizzle, 2011). Род Yersinia, согласно «определителю бактерий Берджи» (1997), входит в семейство энтеробактерий. Бактерии Y. ruckeri характеризуются как подвижные грамотрицательные палочки (Brenner, Krieg, Staley, Garrity, 2005). Температурный оптимум – 25-28 ⁰С. Границы рН для роста – в пределах 5,88,0; оптимум – 6,9-7,2. Факультативные анаэробы. Обладают дыхательным и бродильным типами метаболизма. Не требовательны к питательным веществам. Штаммы Y. ruckeri растут на агаре Мак-Конки и XLD-агаре (Xylose Lysine Desoxycholate), добавление дефибринированной 7-10% крови овец усиливает их рост. Рост может также быть получен на tryptone soya agar (Oxoid CM131). Если есть подозрения на присутствие вторичной микрофлоры, то образцы должны также быть культивированы на агаре XLD (Oxoid CM469) или предпочтительно на Ribose Ornithine Desoxycholate agar (ROD). Среда Shotts-Waltman – полуселективная среда для бактерий Y. ruckeri, с избирательными свойствами эквивалентными агару Мак-Конки. Индикация основана на способности штаммов Y. ruckeri гидролизировать твин 80, и неспособности производить кислоту из сахарозы. На агаровых средах Y. ruckeri растет в виде круглых беловатых сливающихся колоний. На бульоне вызывает равномерное помутнение. Биохимические свойства штаммов трёх видов Yersinia, с которыми работают сотрудники центра представлены в таблице 1. Таблица 1 – Биохимическая характеристика бактерий рода Yersinia. Показатели окраска по грамму Оксидаза образование индола проба с метиловым красным реакция Фогеса-Проскауэра цитрат(среда Симонса) Образование сероводорода гидролиз мочевины Орнитиндекарбоксилаза Подвижность Y. enterocolitica +/+ +/+ + + 27 Y. pseudotuberculosis + + + Y. ruckeri + +/+ + +/- Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии гидролиз желатины 22⁰ использование малоната образование кислоты из D-глюкозы + образование газа из D-глюкозы образование кислоты из : D-адонитола L- арабинозы + Глицерола + Дульцитола D-ксилозы +/Лактозы мальтозы + D-маннитола + D-маннозы + Мелибиозы L-рамнозы Раффинозы Салицина Сахарозы + Трегалозы + восстановление нитрата + образование каталазы + Примечания: «+» - положительная реакция, «-» - отрицательная реакция, «+/-» - вариабельная реакция. + - +/+ - +/+/+ + + + +/+/+ + + +/+ + + + + + Библиографический список: 1.Stone M A B, MacDiarmid S C, Pharo H J. (1997). Import health risk analysis: salmonids for human consumption. Ministry of Agriculture Regulatory Authority, New Zealand. 2.Brenner, D. J., N. R. Krieg, J. T. Staley, and G. M. Garrity. 2005. Bergey’s manual of systematic bacteriology, 2nd edition. Springer-Verlag, New York. 3.Altinok I. The infectious route of Yersinia ruckeri is affected by salinity. Bull. Eur. association Fish // Pathologists. 2004. V. 24. 4.Altinok I., Grizzle J.M. Effects of salinity on Yersinia ruckeri infection of rainbow trout and brown trout // J. Aquatic Animal Health. 2011. V. 3. 5.J Carson, T Wilson. Australia and New Zealand Standard Diagnostic Procedure. Jan 2009. MICROBIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF BACTERIA YERSINIA RUCKERI - RED MOUTH DISEASE PATHOGEN TROUT (ERM). Loginova E., Viktorov D.A., Vasilyev D.A. This paper presents a review of literature on the subjects, data on the biological properties of bacteria of the genus Yersinia. 28 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 614.78:579.6-8 CАНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КОМПЬЮТЕРНЫХ КЛАВИАТУР Ульчина А., 2 курс факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.б.н., доцент Пульчеровская Л.П., д.б.н., профессор Васильев Д.А. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Современный мир теперь трудно представить без инноваций и таких повседневных вещей как персональный компьютер. Сегодня в нашей повседневной жизни все чаще мы используем компьютеры и ноутбуки. Скорее всего, эта техника уже присутствует в каждом доме. О вреде компьютера для здоровья человека написаны уже целые трактаты, однако большинство пользователей ассоциирует эту проблему с электромагнитными излучениями, эргономикой рабочего места и влиянием разных типов мониторов на зрение. Существует и другая угроза, но при упоминании слова «вирус» большинство пользователей ПК представляют себе вредоносную программу. Тем не менее, наши компьютеры способны причинять гораздо более ощутимый вред при помощи совсем иных вирусов, если не соблюдать элементарных мер гигиены. Один квадратный дюйм клавиатуры компьютера может дать пристанище примерно 3295 микробам, а аналогичный участок поверхности компьютерной мыши способен разместить 1676 микробов. Разумеется, что не все из них будут безвредными [3]. Понятно, что «чисто там, где не сорят», и пресловутому ободку унитаза в цивилизованных заведениях и домах уделяется гораздо больше внимания, чем предающимся ежедневному контакту с руками пользователя поверхностям компьютера и периферийных устройств. И все же, пренебрегать правилами гигиены в отношении клавиатуры не стоит – исследования показывают, что при ежедневной обработке поверхности рабочего стола дезинфицирующими салфетками уровень содержания бактерий снизился на 99%. Если вы регулярно моете руки и не облизываете пальцы при работе на клавиатуре то особо бояться нечего – вирусы передаются преимущественно через руки. Просто не забывайте, что мы не одиноки во Вселенной, и еще несколько миллионов микроорганизмов сопутствуют вам ежедневно при работе за компьютером [3]. Материалом для исследований послужили смывы со студенческих компьютерных клавиатур компьютеров и ноутбуков. Всего было отобрано 8 проб. Пробы исследовали на наличие санитарно-показательных микроорганизмов, а именно: определяли общую микробную обсемененность, присутствие бактерий группы кишечных палочек, наличие патогенных микроорганизмов (бактерии родов: Salmonella, Klebsiella, Staphylococcus). 29 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Смывы брали с помощью стерильных увлажненных тампонов. Ватные тампоны на металлических палочках, вмонтированных в пробирки с ватными пробками, заготавливали заранее в лаборатории. В день взятия смывов в каждую пробирку с тампоном наливали стерильный изотонического раствора хлорида натрия таким образом, чтобы тампон не касался жидкости. Непосредственно перед взятием смыва тампон увлажняли, наклоняя пробирку. В процессе отбора смывов неоднократное смачивали тампоны. После проведения смыва тампон вкладывали в ту же пробирку, погружая в жидкость. Смывы исследовали сразу же после их взятия. Хотя допускается их хранение и транспортирование не более 6 ч при температуре 1 - 10 0С. Для определения общего числа микроорганизмов (ОМЧ) в исследуемых смывах к 2 мл воды, которая была использована для увлажнения тампона, прибавляли еще 8 мл стерильной воды. Тампон тщательно в течение 2-3 мин отмывали, получая исходное разведение. Из него готовили ряд последовательных десятикратных разведений. Затем из различных разведений смыва брали по 1 мл, вносили в стерильные чашки Петри, заливали расплавленным и остуженным МПА. Посевы выдерживали 24 ч при 37°С и 24 ч при комнатной температуре, после чего производили подсчет выросших колоний. Устанавливали количество микроорганизмов в 1 мл исходного разведения смыва (для этого подсчитывают число колоний в чашке и полученную величину умножали на степень разведения смыва) [1,2]. В микробиологической лаборатории НИИЦМиБ также производили посевы смывов на среду КОДА с целью обнаружения бактерий группы кишечной палочки (БГКП), которые инкубировали при температуре 37 0С. Через 24 ч из пробирок со средой КОДА производили высев на секторы чашек со средой Эндо в случае изменения окраски среды, (из исходной зеленого до желтого) или ее помутнения. Из колоний, характерных для БГКП, готовили мазки, окрашивали их по методу Грама, микроскопировали, идентифицировали по общепринятым тестам для бактерий группы кишечных палочек. Обнаружение БГКП в смывах с поверхностей свидетельствует о нарушении санитарного режима при пользовании компьютеров[1,2]. Для выявления стафилококка производили посев 0,5 мл смыва на желточно-солевой агар и в среду накопления (солевой бульон - МПБ, содержащий 6,5 % NaCl). Колонии с признаками, характерными для стафилококков, изучали согласно МУ. Просматривали посевы на плотных средах. Из подозрительных колоний готовили препараты, окрашивали по методу Грама. Проверяли наличие каталазы. Обнаружили Staphylococcus aureus, которые были - неподвижные округлой формы, расположенные одиночно, парами и гроздьями. По методу Грамма окрашивались положительно, каталазоположительны. Из пробирок с солевым бульоном делали высев на желточно-солевой (колонии имели форму плоских дисков (диаметр 2 - 4 мм) белого, желтого, кремового и золотистого цвета с ровными краями; вокруг колоний образуются радужное кольцо и зона 30 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии помутнения среды), проводили предварительную идентификацию, как описано выше. Сделали вывод о возможном наличии Staphylococcus aureus в исследуемом образце. Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1. Таблица 1 – Результаты микробиологических исследований компьютерных клавиатур Микробиологичес кий показатель КМАФАнМ (1х104) БГКП (не допускается) Патогенные микроорганизмы, в т.ч.: Сальмонеллы (не допускается) Коагулазоположи тельные стафилококки (не допускается) Клебсиеллы (не допускается) Плесневые грибы Номер исследуемой пробы Клавиатура ноутбуков Клавиатура стационарных компьютеров 1 2 3 4 5 6 7 8 2080 1994 3000 1300 478 508 707 1900 + - + + + + + + - - - - - - - - + + + + + + + + - - - + - - - - в норме в норме в норме в норме в норме в норме в норме в норме Таким образом, из результатов проведенных исследований видно, что микробная обсемененность клавиатур персональных компьютеров значительно выше (превышает в 3-4 раза) микробного населения клавиатур стационарных компьютеров. Это объясняется, скорее всего тем, что пользователи пользуются ноутбуками значительно чаще и пренебрегают правилами личной гигиены Библиографический список: 1.Сбойчаков В.Б. Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований/ В.Б. Сбойчаков.- СПб.:СпецЛит,2007.592с. 2.Черкес Ф.К. Микробиология/ Ф.К.Черкес, Богоявленская Л.Б., Бельская Н.А.М.: Медицина, 1987.- 512с. 3.http://www.overclockers.ru SANITARY AND MICROBIOLOGICAL TESTING OF COMPUTER KEYBOARDS Ulchin A, Pulcherovskaya L.P., Vasilev D.A. The article tells about the study on the level of bacteriological keyboards stationary and mobile devices. 31 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 616/619:578 ФАГОВЫЙ БИОКОНТРОЛЬ БАКТЕРИЙ ВИДА LISTERIA MONOCYTOGENES Щербина А., Курбанова К., 4 курс факультет ветеринарной медицины. Научные руководители: к.б.н., доцент Ковалева Е.Н., д.б.н., профессор Золотухин С.Н. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Исследование направленно на изучение фагового биоконтроля за бактериями вида Listeria на продуктах питания. Опыт проводился с разной концентрацией фага и культуры. Листерия является оппортунистическим патогенном человека, они широко распространены в окружающей среде и передаются человеку и животным через загрязненные продукты. Эта бактерия терпит высокие дозы содержания соли (от 10 до 20%), может расти при рН ниже 6, с низким содержанием кислорода, и при температуре до 1 ° C. [4] Listeria monocytogenes вызывают листериоз, тяжелое заболевание, которое может привести к сепсису, или потере плода во время беременности. Хотя листериоз сравнительно редкое заболевание по сравнению с другими инфекциями пищевого происхождения, высокая смертность, от 15 до 40%, приносит большое беспокойство. Спорадические случаи и эпидемии листериоза растут. Было подсчитано, что около 2000 госпитализаций и 500 смертей ежегодно происходит в США, в результате потребления Listeria в продуктах питания. [1] Многие продукты могут служить в качестве переносчика этого патогена. Listeria часто находится в готовых к употреблению продуктах, таких как молоко и сыр, холодное мясо, копченая рыба, морепродукты, овощи и фрукты. [2] Сыр считается одним из продуктов наиболее часто загрязненных листериями. Около 30% основных вспышек пищевых инфекций Listeria monocytogenes приходится на долю сыров. Бактерии Listeria monocytogenes на сыре были обнаружены, в диапазоне от 1% до 22%. [3] Целью нашей работы является заражение кусочков сыра культурой Listeria monocytogenes, для дальнейшей санациии при помощи бактериофага Р100. Задачи: 1.Заразить кусочки сыра культурой Listeria monocytogenes в концентрациях 103, 104, 105. 2.Санирование кусочков сыра раствором бактериофага P100 в концентрациях 103, 104, 105. 3.Сделать смыв с кусочков сыра и посеять на Listeria Oxford Medium Base Agar Материалы и методы исследования: сыр твердых сортов, культура Listeria monocytogenes, бактериофаг Р100, стерильный 1,5 % МПБ. 32 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Приготовили ряд пробирок с разведениями культуры и бактериофага. Нарезали сыр твердых сортов на 16 равных частей(m=0,6 гр). Следуя таблице №1 мы проделали наше исследование, где К- контроль, О-опытный образец. Кусочки сыра опускались в МПБ с разведенной в нужной концентрации культурой. Время экспозиции 5 минут. Затем кусочки вынимались и, следуя таблице, опускались в заранее разведенные пробирки с фагами нужной концентрации. Время экспозиции 10 минут. Затем каждый кусочек был помещен в отдельную чашку Петри. Чашки оставили на 18 часов при комнатной температуре. Таблица 1 Фаги\ Культура 103 104 105 0 103 O1 O2 O3 K1 104 O4 O5 O6 K2 105 O7 O8 O9 K3 0 K4 K5 K6 K7 Через 18 часов экспозиции, кусочки сыра вынимались из чашек Петри и опускались в стерильный МПБ. Для смыва, мы брали по 1 мл бульона и переносили его на Listeria Oxford Medium Base Agar, раскатывали при помощи шпателя для получения однородного газона. Затем чашки поставили в термостат при t=28 C на сутки. Смыв с зараженного листериями, а затем санированного фагами сыра, показал, что листерии чувствительны к различным концентрациям фага. Мы считаем, что применение сильнодействующих бактериофагов для контроля листерий в продуктах представляет определенный, эффективный и экологически дружественный путь к производству и поставке более безопасных пищевых продуктов. Фаги могут также быть полезными в обеззараживании пищевого оборудования, где Listeria monocytogenes могут присутствовать. Ведь преимущества фага в том, что он: 1.Не вредит здоровью и микрофлоре человека 2.Не изменяет цветовых и вкусовых качеств продукта 3.Естественный враг бактерий 4.Строго специфичен Различные правовые требования и правила существуют в различных странах и для различных продуктов. Что касается Listeria в продуктах, Соединенные Штаты приняли политику нулевой терпимости. В РФ недопустимо содержание Listeria в 25 г. продукта.[5] 33 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Библиографический список: 1.Mead, P. S., L. Slutsker, V. Dietz, L. F. McCaig, J. S. Bresee, C. Shapiro, P. M. Griffin, and R. V. Tauxe. 1999. Food-related illness and death in the United States. Emerg. Infect. Dis. 5:607–625. 2.Ryser, E. T. 1999. Foodborne listeriosis, p. 299–358. In E. T. Ryser and E. H.Marth (ed.), Listeria, listeriosis and food safety, 2nd ed. Marcell Dekker, Inc., New York, NY. 3.Ryser ET, Marth EH. Behavior of Listeria monocytogenes during manufacture and ripening of brick cheese. J Dairy Sci 1989; 72:838-53; 4.Slutzker, L., and A. Schuchat. 1999. Listeriosis in humans, p. 75–95. In E. T. Ryser and E. H. Marth (ed.), Listeria, listeriosis and food safety, vol. 2. Marcell Dekker, Inc., New York, NY. 5.СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования к безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов" PHAGE BIOCONTROL BACTERIA OF LISTERIA MONOCYTOGENES ScherbinaA., Kurbanova K., Kovaleva E.N., Zolotukhin S.N. The study aimed at investigating the phage for biocontrol bacteria Listeria species on food. The experiment was conducted with different concentrations of phage and culture. УДК 614.78 ЧЕМ МОЖНО ЗАРАЗИТЬСЯ ПРИ РАБОТЕ ЗА КОМПЬЮТЕРОМ?! Родина Ю., Первухина К., 2 курс факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.б.н., доцент Пульчеровская Л.П., д.б.н., профессор Золотухин С.Н. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Компьютерная клавиатура, которой пользуются насколько человек, вполне может быть источником распространения различных заболеваний среди сотрудников и учащихся учебных заведений, работников офисов, банков или даже среди жителей одной квартиры. В этой статье мы постараемся дать краткое описание микробов живущих на клавиатурах компьютеров, их краткую характеристику, болезни которые они вызывают, и способы защиты от них. В современном обществе компьютер стал не отъемлимой частью нашей жизни. Его можно встретить везде, в каждом доме, офисе, банке, учебном заведении, даже в больнице. Компьютер. Что это: новая угроза для здоровья или современный друг и помощник? Клавиатура компьютера может быть самым настоящим рассадником болезней. Далеко не все клавиатуры одинаково опасны, однако если помимо вас по одним и тем же клавишам на протяжении дня стучат десятки, а то и сотни разных людей - стоит лишний раз побеспокоиться о своем здоровье. Лучше предупредить болезнь, чем потом вести изнурительную войну с микробами.[3] 34 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Враг не дремлет! Через клавиатуры можно заразиться множеством самых разных болезней. Тут вам и обыкновенная простуда, и кожные инфекции, и грипп, и кишечные заболевания, и конъюнктивит (воспаление соединительной оболочки глаза), и пневмония, и еще много самой разной заразы. Каким-либо из вышеназванных недугов легче всего заразиться через клавиатуру в зимнее время года и в тех местах, где компьютерами пользуется достаточно большое количество людей. Например, в больших учебных заведениях, где через один компьютер ежедневно проходит добрый десяток студентов. Как утверждают ученые, именно через клавиатуры компьютеров передавались бактерии конъюнктивита в Дартмутском колледже Нью-Гемпшира в 2002 году, когда заразились около 500 человек. Опасны и клавиатуры компьютеров, расположенных в интернет-кафе, а также клавиши банкоматов и платежных терминалов. Не менее опасны клавиатуры компьютеров и лэптопов, расположенных в больницах. Впрочем, не стоит думать, что подцепить микробы с компьютерных клавиатур сложнее, чем, скажем, с поручней в общественном транспорте.[1] Какие микробы живут рядом с нами? Самые распространенные обитатели квартир, учебных заведений и офисов, которых обнаруживают инфекционисты: Escherichia coli - вызывает кишечные расстройства, заболевания кожи; Klebsiella pneumonia - вызывает целый спектр инфекционных заболеваний от кишечных до легочных; бактерии рода Salmonella - вызывают сальмонеллез; бактерии рода Streptococcus - вызывают кожные и внутренние инфекционные заболевания; Staphylococcus aureus – вызывает целый спектр болезней от кожных до сепсиса (общего заражения крови).[2] До сих пор не ясно, сколько же именно могут прожить вирусы на поверхности клавиатуры. Одни вирусы способны "перепрыгнуть" на новую жертву лишь в том случае, если здоровый человек сел за компьютер сразу после зараженного. Другие могут жить на клавишах на протяжении нескольких дней. В частности, как считают американские врачи из центров по контролю над заболеваниями и профилактике, именно так было во время вспышки конъюнктивита в Дартмутском колледже. Лабораторный эксперимент, проведенный недавно, показал, что бактерии конъюнктивита могут на протяжении нескольких дней жить на поверхности клавиатуры.[3] Как защититься от микробов? Коварные болезни, поджидающие своих жертв на клавишах компьютеров и поверхностях "мышек", одолеть на самом деле не так уж и сложно. Хрестоматийный совет – чаще мыть руки с мылом, в том числе и после работы за общим компьютером. Тем, кто хочет обеспечить себе дополнительные гарантии безопасности, следует еще и обрабатывать клавиатуру своего железного друга дезинфицирующим раствором или специальными салфетками. А совсем уж экзотический вариант - покупка антибактериальных клавиатур, обладающих противовирусным покрытием. 35 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Такие клавиатуры можно совершенно спокойно мыть в посудомоечной машине - им это нисколько не повредит. Тем же, кто не пускает за свой компьютер посторонних людей, волноваться практически не о чем: вряд ли у них есть шанс заразиться чем-либо через клавиатуру личного компьютера.[1] Привычка есть за компьютером, также играет в пользу микробов. Клавиатуры, между клавишами которых завалялось множество мелких кусочков еды, являются подходящей средой для размножения самых разных болезнетворных бактерий. Потому пользователям рекомендуется чаще чистить клавиши своего железного друга. Как утверждают врачи, полностью стерильных поверхностей в нашем мире практически нет - но мы ведь не лежим сейчас все в больницах, верно? Во многих случаях иммунитета человека достаточно, чтобы в зародыше предотвратить болезнь (хотя с серьезными инфекциями иммунитет может не справиться). И все-таки врачи настоятельно рекомендуют не пренебрегать правилами личной гигиены - тогда риск заражения будет сведен к минимуму.[3] Библиографический список: 1.«Санитарные правила и нормативы "Гигиенические требования к персональным электронно-вычислительным машинам и организации работы СанПиН 2.2.2/2.4.1340-03», утвержденные Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 30 мая 2003 года. 2.А.А. Воробьёв, А.С. Быков «Микробиология», М. 1994 год. 3.Микрофлора окружающей среды и тела человека Литусов Н.В., Сергеев, А.Г., Григорьева Ю.В., Ишутинова В.Г., М. 2005 год. THAN IT IS POSSIBLE TO CATCH DURING THE WORK AT THE COMPUTER?! Rodina Yu., Pervukhina K., Pulcherovskaya L.P., Zolotukhin S.N. A computer keyboard, which is used as much as a man may well, be the source of the spread of various diseases among the staff and students of educational institutions, employees of offices, banks, or even among the residents of one apartment. УДК 619:616-07 ИСЛЕДОВАНИЕ СКОРОСТИ РОСТА НА РАЗНЫХ ПИТАТЕЛЬНИХ СРЕДАХ ЛЕКАРСВЕННОГО СЪЕДОБНОГО ГРИБА COPRINUS COMATUS (O.F.Müll.) Pers Полюх Н., студентка 4 курса факультета биотехнологии и микробиологии Научный руководитель: д.б.н., профессор Карпов О.В., к.б.н., научный сотрудник Ломберг М.Г. Национальный университет пищевых технологий Институт ботаники им. М. Г. Холодного НАН Украины, г. Киев C.comatus или же навозник белый – известный съедобный гриб, один из перспективных продуцентов биологически активных веществ [3]. Существуют 36 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии данные о том, что экстракты из плодовых тел и глубинно выращенного мицелия обладают антиопухолевыми, антиоксидантными и антимикробными свойствами [2]. Рекомендуют употреблять его для лечения гипоксемии и поддержание уровня глюкозы в крови при диабете[1]. В народной медицине гриб используют для лечения алкоголизма[2]. Данные литературные сведенья обусловливают изучения морфологии, характеру роста навозника на разных питательных средах. Нами было исследовано среднюю радиальную скорость роста штаммов C.comatus разного географического происхождения. Объектами исследований были чистые культуры C.comatus, хранящиеся в Коллекции культур шляпочных грибов Института ботаники им. М.Г. Холодного НАН Украины. В данной работе использовались такие щтамы: 137, 1727, 1930, 2000, 138, 173, 1544, 1687. Проводилось сравнительное исследование скорости роста вегетативного мицелия культуры C.comatus на средах различного состава. Для расчетов средней скорости радиального роста (VR, мм / сут) строили кривые зависимости радиуса мицелиальной колонии от времени культивирования, и в фазе линейной зависимости прироста радиуса от времени определяли среднюю скорость роста. При расчетах учли также среднюю статистическую погрешность измерения. Как правило, минимально допустимая вероятность, которая рекомендуется при определении вероятных интервалов в биологических исследованиях равна 95%. Критерием для определения сроков получения физиологически активного посевного материала на агаризованной среде принимали время, необходимое для достижения радиуса колоний 40 мм в среде соответствующего состава. В качестве посевного материала были использованы 7 суточные культуры, выращенные на сусло-агаре. Диски мицелия диаметром 5 мм вырезали стерильной стальной трубкой по краю (до 10 мм) активно растущей колонии переносили их в центр чашки Петри на среды СА ( сусло-агар), МЭА (мальтозный агар), КГА( картофельно-глюкозный агар), МДПА(мальтозо-дрожжевой пептонный агар), и инкубировали в термостате при температуре 34 ± 1° С тринадцать суток. Радиусы колоний измерили в двух взаимно перпендикулярных направлениях на 4-ю, 5-ю, 7-м и 11-у и 13-ю суток после посева до полного обрастания среды. Обобщенные данные сведены в таблицу 1. По данным результатам штаммы можно разделить на тех, которые быстро растут и те, что медленно. Среди штаммов выделено штамм 1687, который показал наиболее высокую скорость роста. Также, можно подобрать наиболее подходящую питательную среду для необходимых штаммов, что может стать фундаментом для дальнейших исследований. Кроме того, ведутся дальнейшие исследования культивирования мицелия навозника на питательных средах на основе компонентов из среды привычного обитания гриба в природы, таких как компостный агар. 37 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таблица 1 - Средняя скорость радиального роста штаммов C.comatus на разных питательных средах Питательная среда Среднее Штамм СА МЕА КГА МДПА значение 137 1,69 ± 0,08 1,56 ± 0,1 2,05 ± 0,1 1,08 ± 0,17 1,59 1727 2,19 ± 0,12 2,05 ± 0,14 2,9 ± 0,17 3,5 ± 0,4 2,66 1930 1,57 ± 0,2 3,3 ± 0,1 3,7 ± 0,14 4,1 ± 0,4 3,17 2000 1,83 ± 0,6 1,16 ± 0,26 1,7 ± 0,1 1,19 ± 0,2 1,47 138 173 1544 1,6 1± 0,1 1,52 ± 0,14 2, 6± 1 1,7 ± 0,14 3,5 ± 0,5 1,7 ± 0,4 2,13 ± 0,2 3,15 ± 0,3 1,5 ± 0,1 0,93 ± 0,14 4,1 ± 0,3 1,4 ± 0,13 1,59 3,07 1,8 1687 4,1 ± 0,1 2,2 ± 0,1 3,6 ± 0,2 4,2 ±0,12 3,52 Библиографический список: 1.Круподьова Т. А. Базидіальні гриби – основа для створення функціональних продуктів // Stamets P. Growing gourment and medicinal mushrooms. –Hong Kong: Ten Speed Press, 2000. –574 p. Wasser S.P. Medicinal mushroom science: history, current status, future trends, and unsolved problems //Int. J. Med. Mush. – V.12, –ʋ 1. –2010. –P. 1-16. 2.Е.Ю.Ершова, О.В.Ефременкова, В.А. Зенкова, И.В. Толстых, Ю.В. Дудник. Выявление антимикробной активности у преставителей рода Coprinus // Микология и фитопатологияб. – 2001. – № 6 – 32 с. 3.Anke T. Basidiiomycetes: a sourse for new bioactive secondary metabolites from bioactive secondary metabolites from microorganisms / T. Anke – Amsterdam: Elsevier, 1989. - 125 p THE RATE OF GROWTH IN DIFFERENT NUTRIENT MEDIUMS EDIBLE MEDICINAL MUSHROOM COPRINUS COMATUS (O.F.Müll.) Pers Poljuh N., Karpov O.V., Lomberg M.G. Work is devoted to study of the average radial velocity growth strains C.comatus on nutrient media of different composition. For research, the authors was elected promising strain for further research. 38 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 581.264.3 ВЛИЯНИЕ PH СРЕДЫ НА РОСТ МИЦЕЛИАЛЬНОЙ БИОМАССЫ ТРУТОВИКА СЕРНО-ЖЕЛТОГО (LAETIPORUS SULPHUREUS) Cкульская А., студентка 5 курса факультета биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: д.б.н., профессор Карпов О.В., Киевский национальный университет пищевых технологий, г.Киев Рассматривается вопрос определения рН жидкой среды, благоприятной для получения максимальной биомассы гриба. Исследования направлены на подбор условий культивирования для получения мицелиальной биомассы и метаболитов трутовика серно-желтого. В последние годы наблюдается большое внимание к различным особенностям биологии и биосинтетической активности высших дереворазрушающих грибов отдела Basidiomycota, обусловленное, в первую очередь, расширением сферы их практического использования [1]. Изучение влияния рН на рост высших базидиомицетов в культуре и определение оптимального его значения для каждого штамма-продуцента необходимо в изучении физиологии грибов, при получении физиологически активного посевного мицелия, оптимизации процесса культивирования с целью получения грибной биомассы или метаболитов. Прежде всего, привлекают внимание грибы рода Laetiporus sulphureus как перспективные объекты биотехнологии. Трутовик серно-желтый обладает антимикробными, антивирусными, иммуномодулирующими, антиоксидантными свойствами, используется для профилактики раковых заболеваний [2]. Объектами исследования были два штамма Laetiporus sulphureus 2254 и 2257 из коллекции культур шляпочных грибов Института ботаники им. М.Г. Холодного НАН Украины (IВК). Исследования проводились в 100 мл конических колбах. рН среды доводили до необходимого уровня с помощью 10% КОН и 1 н НСl. В качестве инокулюма использовали 7-10 суточные культуры грибов, которые были предварительно выращенные на СА (пивное агаризованной сусло). В каждую колбу вносили по 4 диска с мицелием диаметром 5 мм вырезаны стальной полой трубкой. Культивировали посевы при температуре +26°С. Опыт снимали, когда мицелий полностью покрывал поверхность в одном из вариантов среды с различным рН. Мицелиальную биомассу отделяли от культуральной жидкости через капроновый фильтр. В фильтрате проводили измерения конечного значения рН, а биомассу после промывки дистиллированной водой переносили в тарированные флаконы и высушивали до постоянного веса при 105°С. В результате было установлено, что для штамма 2257 рН 3,0 оказалось оптимальным для роста мицелия, причем выход биомассы составил 2,0+0,3 г / л, а при рН 5,3 выход биомассы составил 1,1+0,4 г/л. Для штамма 2254 при рН 39 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 2,7 образовывалось 2,2+0,6 г/л биомассы, а наименьший выход биомассы наблюдался при рН 4,5 и составил 1,2+0,2 г/л. Таким образом, в ходе исследования влияния рН среды на рост мицелия штаммов трутовика серно-желтого 2254 и 2257 впервые установлены оптимальные значения этого параметра для мицелиального роста исследованных штаммов. Библиографический список: 1.Иванова И. Е. Изучение продуктивности и биологической активности нового штамма Ls 1-06 Laetiporus sulphureus (Bull. fr) Bond. et Sing // Иммунология, Аллергология, Инфектология. – Москва – 2010. - №1.- с.251. 2.Антимікробні властивості ксилотрофного базидіоміцету Laetiporus sulphureus (bull.: fr.) murrill // Л. П. Дзигун, А. В. Кудрінецька, О. М. Дуган // Вісник Національного університету "Львівська політехніка". Хімія, технологія речовин та їх застосування. — 2011. — № 700. — С. 156-160. INFLUENCE OF MEDIA PH ON LAETIPORUS SULPHUREUS MYCELIUM BIOMASS GROWTH Skylska A., Karpov O.V. The question of determining the optimal pH of liquid medium to obtaining maximum yield of fungi’s biomass is considered. Research aimed on selection of cultivation conditions for Laetiporus sulphureus mycelial biomass and metabolites. УДК 619:579 ИДЕНТИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ ВИДА KLEBSIELLA PNEUMONIAE ПО БИОЛОГИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ Семенова В., Кафидова А., Барсукова Т., 1 курс факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.б.н., доцент Ковалева Е.Н. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Вид Klebsiella pneumoniae вызывает болезнь клебсиеллез. Клебсиеллез – инфекционная болезнь с воздушно-капельным, пищевым и контактным механизмами передачи, поражающая преимущественно желудочно-кишечный тракт; проявляется чаще в виде острого гастроэнтерита. Источники возбудителя инфекции – больной человек и бактерионоситель. Клебсиеллез характеризуется разнообразными клиническими проявлениями вплоть до летального исхода [1]. Для идентификации бактерий вида Klebsiella pneumoniae используются преимущественно бактериологические методы исследования. [2]. В связи с этим целью исследования является идентификация бактерий вида Klebsiella pneumoniae с помощью ферментативных свойств и особенностей роста на различных питательных средах. Материалы и методы. В качестве исследуемого материала использован штамм бактерий вида Klebsiella pneumoniae, полученный из музея кафедры 40 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы УГСХА им. П.А. Столыпина. Для работы с ним использовали следующие питательные среды: мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), Эндо, Симмонса. Для получения изолированных колоний применяли метод посева штрихом на чашках с плотной питательной средой. Пробирки и чашки Петри с посевами инкубировали при 37°С в течение 24 часов. Для изучения цитологических свойств бактерий применяли окраску по Граму. Идентификацию культуры проводили по ферментативным свойствам, используя среды Гисса с глюкозой, мальтозой, сахарозой, лактозой и маннитом. Результаты. Штамм бактерий вида Klebsiella pneumoniae засевали в мясопептонный бульон и культивировали при 37ºС, по истечении 24 часов наблюдали, что рост культуры вызвал равномерное помутнение среды и образование слизистой пленки на ее поверхности. С полученной суточной культуры сделали мазок и окрасили по Граму (рис. 1). Рис.1 - Грамотрицательные толстые короткие с закругленными концами палочки, расположенные одиночно или попарно. Бульонную культуру пересевали на плотные питательные среды. Через 24 часа культивирования при температуре 37ºС просматривали посевы исследуемого материала для выявления характерных особенностей роста колоний. На среде Эндо исследуемая культура росла в виде крупных выпуклых блестящих слизистых колонии розово-малинового цвета. Посев на агар Симмонса выявил, что микроорганизмы способны к утилизации цитрата как единственного источника углерода. В ходе размножения микроорганизмов на среде продуцировались щелочные продукты, которые способствовали изменению цвета индикатора с зеленого на синий. 41 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Рис. 2 – Рост культуры на среде Эндо Рис. 3 – Рост штамма на агаре Симмонса Для изучения ферментативных свойств суточную агаровую культуру высевали на среды Гисса с глюкозой, маннитом, сахарозой, мальтозой и лактозой. Исследуемый штамм микроорганизма разлагал все используемые нами сахара (табл. 1). Рис. 4 – Рост культуры на средах Гисса Таблица pneumonia 1 – Ферментативные свойства бактерий вида Klebsiella Ферментируемые вещества Klebsiella pneumoniae Глюкоза + Сахароза + Маннит + Мальтоза + Лактоза + Выводы. Таким образом, по морфологическим, тинкториальным, культуральным и ферментативным свойствам исследуемая культура подтвердила принадлежность к виду Klebsiella pneumoniae. 42 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Библиографический список: 1.Иванов А.И. Острые кишечные инфекции. – Ленинград, 1982. 2.Похил С.И., Кособуцкий Л.А. Оценка биохимического типирования культур клебсиелл. – Микробиологический журнал, 1992. 3.Ярков А.Н., Павлова Л.С., Добромыслова О.Н. Клинические проявления синдрома интоксикации при заболеваниях клебсиеллезной этиологии. – Смоленск, 1989. IDENTIFICATION OF BACTERIA OF KLEBSIELLA PNEUMONIAE BIOLOGICAL PROPERTIES Semenova V., Kafidova А., Barsukova T., Kovaleva E.N. The work is devoted to the study of the biological properties of the bacterium Klebsiella pneumoniae. УДК 619:579 ИДЕНТИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ ВИДА PSEUDOMONAS AERUGINOSA ПО БИОЛОГИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ Кафидова А., Семенова В., Барсукова Т., 1 курс факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.б.н., доцент Ковалева Е.Н. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Pseudomonas aeruginosа - синегнойная палочка вызывает до 15–20 % всех внутрибольничных инфекций. Она считается одним из основных возбудителей внутригоспитальных пневмоний, вызывает треть всех поражений мочеполовой системы у урологических больных и считается причиной 20–25% гнойных хирургических инфекций. Бактерия поражает, в основном людей с ослабленным иммунитетом с сопутствующими заболеваниями, пожилых и детей. Синегнойная палочка в медицинских учреждениях переносится с зараженной пищей или водой, через руки медицинского персонала иа также, обсемененные, плохо продезинфицированные медицинские инструменты и оборудование. Инфекции, вызванные синегнойной палочкой, плохо поддаются антибиотикотерапии, что обусловлено частым выделением полирезистентных штаммов. Для идентификации бактерий вида Pseudomonas aeruginosa используются преимущественно бактериологические методы. Целью исследования является идентификация бактерий вида Pseudomonas aeruginosa с помощью морфологии, ферментативных свойств и особенностей роста на различных питательных средах. Материалы и методы. В качестве исследуемого материала был использован штамм бактерий вида Pseudomonas aeruginosa, полученный из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарносанитарной экспертизы УГСХА им. П.А. Столыпина. 43 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Для работы с ним использовали следующие питательные среды: мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), среда Эндо, агар Симмонса. Для получения изолированных колоний применяли метод посева штрихом на плотные питательные среды. Пробирки и чашки Петри с посевами инкубировали при 37°С в течение 24 часов. Для изучения цитологических свойств микроорганизма применяли окраску по Граму. Идентификацию культуры проводили по ферментативным свойствам, используя среды Гисса с глюкозой, мальтозой, сахарозой, лактозой и маннитом. Результаты исследований. Штамм бактерий вида Pseudomonas aeruginosa засевали в мясопептонный бульон и культивировали при 37ºС, в течении 24 часов. Суточная бульонная культура имеет на поверхности пристеночное кольцо сине-зеленого цвета. При встряхивании бульон окрашивается в сине-зеленый цвет, наблюдается обильный хлопьевидный осадок. В полужидком агаре рост наблюдается в толще среды, что говорит о подвижности палочки. В месте проколы среды наблюдается обильный рост, изменивший цвет среды на сине-зеленый. С МПБ окрашивали мазок по Граму и микроскопировали (рис. 3). Рис. 1 – Рост на МПБ Рис. 2 – Рост культуры на полужидком агаре Рис. 3 - Грамотрицательные, палочковидные бактерии, расположенные одиночно Для получения однородного газона – 1 мл суточной бульонной культуры переносили в чашку Петри с 2 % МПА, равномерно распределяли шпателем по поверхности агара, после чего излишки бульонной культуры отбирали с помощью пипетки. Затем чашки подсушивали 20 минут и помещали в термостат на 20 – 24 часа. На среде Эндо исследуемая культура росла в виде плоских амебовидных колоний малинового цвета. Посев на агар Симмонса выявил, что микроорганизмы способны к утилизации цитрата как единственного источника углерода. В ходе размножения микроорганизмов на среде продуцировались щелочные продукты, 44 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии которые способствовали изменению цвета индикатора с зеленого на синий. Колонии сине-зеленые, круглые, с неровным бахромчатым краем и выпуклым, блестящим центром. Размер колоний – 1 – 2 мм. Рис. 4 – 24-х часовой газон Рис. 5 – Рост на среде Эндо культуры Рис. 6 – Рост на агаре Симмонса Для изучения ферментативных свойств суточную агаровую культуру высевали на среды Гисса с глюкозой, маннитом, сахарозой, мальтозой и лактозой. Исследуемый штамм микроорганизма расщеплял глюкозу с образованием кислоты, и не разлагал остальные сахара (табл. 1). Таблица 1 - Ферментативные свойства бактерии вида Pseudomonas aeruginosa Ферментируемые вещества Pseudomonas aeruginosa Глюкоза + Лактоза Мальтоза Маннит Сахароза Выводы. Таким образом, по морфологическим, тинкториальным, культуральным и ферментативным свойствам исследуемая культура подтвердила принадлежность к виду Pseudomonas aeruginosa. Библиографический список: 1.Васильев Д.А., Золотухин С.Н.,Никишина Н.М. Методы общей бактериологии. – Ульяновск, 1998. 2.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований. Под редакцией А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой. А.Сю Ещиной – М.: Медицина, 2004 SPECIES IDENTIFICATION OF BACTERIA PSEUDOMONAS AERUGINOSA BIOLOGICAL PROPERTIES Semenova V., Kafidova А., Barsukova T., Kovaleva E.N. The work is devoted to the study of the biological properties of the bacterium Pseudomonas aeruginosa. 45 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 619:616-07 ИЗУЧЕНИЕ МИКРОБНОЙ ОБСЕМЕНЁННОСТИ ВОДОПРОВОДНОЙ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ НА ТЕРРИТОРИИ МАОУ СОШ №72 Лифанова И., Смирнова К., Набиева А., ученицы 9 класса Научный руководитель: учитель биологии Рыбина Н.А. МАОУ средняя образовательная школа №72 с углублённым изучением отдельных предметов, г. Ульяновск Работа посвящена изучению обсемененности водопроводной воды, бактериальными патогенами. Плохая питьевая вода является причиной множества заболеваний, связанных с мочеполовой системой. Например, повышенное содержание солей в обыкновенной водопроводной воде является одной из причин возникновения различных болезней. Согласно действующим стандартам, питьевая вода (и водопроводная в том числе) должна быть безопасна в эпидемиологическом, радиационном отношении, безвредна по химическому составу и иметь благоприятные органолептические свойства. Качество воды определяется целым рядом показателей (содержание тех или иных примесей), предельно допустимые значения которых, задаются соответствующими нормативными документами. В России на данный момент основным нормативным документом является СанПиН 2.1.4.1074-01 "Вода питьевая". Наблюдая за учащимися нашей школы, которые ежедневно пьют воду из под крана, у нас возник вопрос: «Достаточно ли безопасна вода из под крана? Одинакова ли вода дома и в школе? И если она отличается, то от чего это зависит?» С помощью нашего учителя и преподавателей кафедры МВЭ и ВСЭ Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина, мы решили провести исследование в этой области. Цель работы: Проанализировать микробиологический состав питьевой воды пропущенной через бытовые фильтры; в пробах, взятых в жилых и общественных помещениях. Методы исследования и материалы Исследовали три образца водопроводной воды: два – из водопроводных кранов в школьной столовой МАОУ СОШ №72 г. Ульяновска, (проба №1 и №2), один – из водопроводного крана в жилом помещении на ул. Карбышева 24 (проба №3). Время исследования ноябрь-декабрь 2012г. (всего 96 часов). Использовался метод посева на питательных средах и инкубирование посевов с последующим микроскопированием обнаруженных бактерий. В качестве питательных сред использовали: мясопептонный бульон, мясопептонный агар, среда Эндо. Исследование проводилось на базе кафедры МВЭиВСЭ Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина под руководством к.б.н. Ковалевой Е.Н. 46 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Ожидаемые результаты В результате исследования мы хотим узнать, содержит ли вода, употребляемая в сыром виде учащимися школы и вода из домашнего крана, микроорганизмы вредные для здоровья человека. Микробиологические показатели качества водопроводной воды Наименование показателя Норматив Термотолерантные колиформные бактерии, число в 100 мл Отсутствие Общие колиформные бактерии, число в 100 мл Отсутствие Общее микробное число, число образующихся колоний бактерий в 1 мл Не более 50 Колифаги, число бляшкообразующих единиц (БОЕ) в 100 мл Отсутствие Споры сульфитредуцирующих клостридий, число спор в 20 мл Отсутствие Ход работы Исследуемые пробы были отобраны в бутылки (колбу на 0,25, 0,5 л), которые были тщательно вымыты и простерилизованы в автоклаве при 1,5 атм в течение 30 мин. Перед забором воды мы обожгли край крана на водопроводной трубе (в школе и дома) ватным тампоном, пропитанным спиртом. Открыли кран и в течение 10-15 минут спускали воду, после чего произвели отбор проб в стерильные бутылки. Анализ воды начали через 1,5 часа после забора проб. Количественный учет микроорганизмов Для своего исследования мы выбрали метод культивирования и метод разведений. Методами высева на плотные и в жидкие питательные среды учитываются только жизнеспособные клетки микроорганизмов. Для выделения и учета как можно более широкий круг микроорганизмов, населяющих данный субстрат, используют метод Коха и при этом подбирают такую по составу среду, на которой способны развиваться микроорганизмы с различными свойствами. Для выявления санитарно-показательных микроорганизмов используют элективные среды. Количественный учет микроорганизмов путем счета колоний (чашечный метод Коха) В качестве питательной среды для выращивания бактерий мы применили мясопептонный агар. Работа этим методом включает этапы: приготовления разведений, посев на плотную питательную среду в чашки Петри, культивирование в термостате при температуре (37 ± 0,5) °С в течение (24 ± 2) ч и подсчет выросших колоний. Приготовление разведений. Разведения готовили в физиологическом растворе (0,5%-ый водный раствор NаСl) использовали десятикратное последовательное разведение (1:10, 1:100, 1:1000). 47 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Рис. 1 – Схема разведения воды Затем для глубинного посева мы вносили взвесь микроорганизмов непосредственно в стерильную чашку Петри на дно, слегка приоткрыв крышку, а затем заливали ее расплавленным и охлажденным агаром. Среду с культурой тщательно перемешивали круговыми движениями чашки, не поднимая ее с поверхности стола. После этого чашку оставляют на столе до застывания агара. После полного застывания препарата мы поместили его в термостат для культивировния. Рис. 2 - Приготовление разведения Рис. 3 - Застывание препарата Выделение чистой культуры бактерий Колонии бактерий подсчитали через 2 суток. Колонии, как правило, подсчитывают с помощью лупы, не открывая чашек Петри. Чтобы определить степень обсемененности изучаемого объекта (микробное число) необходимо количество колоний чашки Петри, умножить на знаменатель соответствующего разведения и вычислить среднее арифметическое число из полученных цифр. Мы провели подсчет только количества колоний при разных значениях разведения (табл. в результатах). Чтобы выделить чистую культуру из исследуемого объекта, мы выбрали из описанных нами колоний одну, растущую изолированно и преобладающую в 48 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии посеве. Затем с помощью стерильной бактериологической петли взяли небольшое количество бактериальной массы из выбранной колонии, слегка к ней прикасаясь. Петлю с бактериями ввели в пробирку с «косым» мясопептоновым агаром, коснулись поверхности в его нижней части и повели петлю вверх, скользя по поверхности агара в виде штриха. Пробирки подписали и поставили в термостат на 24 часа при температуре (37 ± 0,5) °С. Далее было проведено исследование появившихся колоний (их было от 2 до 5) по плану: а) форма (круглая) б) окраска (по краям желтая в середине золотистая); в) поверхность колоний (гладкая); г) профиль колонии (выпуклый) д) блеск и прозрачность (колонии блестящие, матовые); е) размер колонии ( мелкие имеют диаметр 1-2 мм, средние - 2-4 мм) ж) край колонии (ровный); з) структура колонии (мелкозернистая) Для идентификации микроорганизмов приготовили фиксированный препарат с окрашиванием по Граму: при сравнении полученного препарата с образцами мы пришли к выводу, что перед нами грамположительные бактерии. Результаты исследования По результатам исследования проб питьевой воды, взятых в школе и в квартире, мы обнаружили, что в исследуемых образцах имеются бактерии рода Streptococcus. Они представлены парами или короткими цепочками. Результаты посева: Проба №1 Ингредиенты Разведение исследуемой воды Исследуемая вода 1:10 1:100 1:1000 Колонии 6 2 1 Проба №2 Ингредиенты Разведение исследуемой воды Исследуемая вода 1:10 1:100 1:1000 Колонии 8 5 2 Проба №3 Ингредиенты Разведение исследуемой воды Исследуемая вода 1:10 1:100 1:1000 Колонии 7 4 1 Из таблиц видно, что количество микроорганизмов, которые дали начало отдельным колониям примерно одинаково во всех пробах и не превышает допустимые нормы (СанПиН 2.1.4.1074-01 "Вода питьевая".) Наши планы Данные исследования мы продолжили в мае, когда растаял снег. Мы поставили перед собой задачи: выяснить, влияет ли это на качество питьевой воды в наших водопроводных сетях; 49 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии выяснить содержит ли вода пропущенная через бытовые фильтры микроорганизмы; как на состоянии воды сказывается срок использования фильтров. Методы исследования и материалы Для исследования были взяты три образца воды: 1.Проба №1 - Водопроводная вода из школьной столовой 2.Проба №2 - Водопроводная вода пропущенная через фильтр марки «Барьер» (использовался 3 месяца) 3.Проба №3 - Водопроводная вода пропущенная через фильтр марки «Барьер» (использовался 1 месяц) Время исследования 06.05 – 13.05 2013г. Использовался метод посева на питательных средах и инкубирование посевов с последующей идентификацией колоний. В качестве питательных сред использовали: мясопептонный агар, Исследование проводилось на базе кафедры МВЭиВСЭ УГСХА им. П.А. Столыпина под руководством к.б.н. Ковалевой Е.Н. Результат исследования: Проба №1 Ингредиенты Разведение исследуемой воды Исследуемая вода 1:10 1:100 1:1000 Колонии 200 55 2 Проба №2 Ингредиенты Разведение исследуемой воды Исследуемая вода 1:10 1:100 1:1000 Колонии 212 47 15 Проба №3 Ингредиенты Разведение исследуемой воды Исследуемая вода 1:10 1:100 1:1000 Колонии сливной рост 4 2 Для идентификации микроорганизмов приготовили фиксированные препараты с окрашиванием по Граму. Проба №1 содержит - Кокки, диплококки, тонкие палочки Проба №2 содержит бациллы, коккобациллы, синие бациллы. Проба №3 содержит кокки, стрептококки 50 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Выводы: 1.В результате исследования мы выяснили, что водопроводная вода в школе и домашнем водопроводе содержит примерно одинаковое количество микроорганизмов, не выходящее за пределы нормы. 2.Водопроводная вода зимой меньше заселена микроорганизмами, чем весной (талые воды доходят до водопроводных сетей и частично загрязняют питьевую воду). 3.Бытовые фильтры значительно очищают воду от микроорганизмов. 4.Длительное использование фильтра способствует увеличению микроорганизмов в питьевой воде. Библиографический список: 1.ВОДА ПИТЬЕВАЯ. Методы санитарно-бактериологического анализа ГОСТ 18963-73 2.Выделение и идентификация бактерий вида Streptococcus agalactiae» / Е.В. Сульдина., Чернова Т.Л., Ковалева Е.Н., [и др.] // Материалы II-й межвузовской студенческой научной конференции «актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии» Ульяновск: УГСХА, 2010. – С 2123 3.Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества. Санитарные правила и нормы СанПиН 2.1.4.559-96 http://water.mechanik.spb.ru 4.Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы (утв. руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ Г.Г. Онищенко 18 января 2008 г.) 5.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований. Под редакцией А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. – М.: Медицина, 2004. STUDY OF MICROBIAL COLONIZATION WATER DRINKING WATER IN THE SFAX SCHOOL № 72 Lifanova I., Smirnov K., Nabiyeva A., Rybina N.A. This is a study of contamination of tap water by bacterial pathogens. 51 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 619:616-07 МИКРОБНАЯ ОБСЕМЕНЁННОСТЬ КЛАВИАТУРЫ КОМЬЮТЕРА Миллер В. Лозгачев Г., ученики 9 класса Научный руководитель: учитель биологии Рыбина Н.А. МАОУ средняя образовательная школа №72 с углублённым изучением отдельных предметов, г. Ульяновск Работа посвящена изучению обсемененности клавиатуры офисной техники кабинета информатики и изучению качественного и количественного состава микрофлоры рабочих поверхностей. Цель работы: Выявить наличие микроорганизмов и проанализировать их качественный состав на поверхности компьютерной клавиатуры в кабинете информатики школы № 72 г. Ульяновска. Задачи: 1.Углубить свои знания о микроорганизмах. 2.Научиться проводить элементарные микробиологические исследования. 3.Сделать сравнительные выводы по результатам работы. 4.Выработать практические рекомендации по правилам безопасного использования офисных предметов 5.Познакомить с результатами исследований учащихся школы. 6.Познакомиться с профессией «Микробиолог». Методы исследования и материалы Исследовали микробную обсемененность клавиатуры №1 и №2 в кабинете информатики №303 Время исследования 06.05 – 13.05 2013г. Использовался метод посева на питательных средах и инкубирование посевов с последующей идентификацией колоний. В качестве питательных сред использовали: среда Эндо, висмут сульфитный агар (ВСА), Плоскирева, Клиглера, Симмонса. Исследование проводилось на базе кафедры МВЭиВСЭ Ульновской ГСХА им. П.А. Столыпина руководством к.б.н. Ковалевой Е.Н. Ожидаемые результаты В результате исследования мы хотели узнать, содержат ли рабочие поверхности офисной техники патогенные микроорганизмы, опасные для здоровья человека. Ход работы В медицинском кабинете школы нами были взяты стерильные материалы для проведения смыва с рабочих поверхностей компьютерных клавиатур. Ватные тампоны с биологическим материалом были помещены в стерильные банки с дистиллированной водой. Через 1,5 часа был проведен посев на мясопептонный бульон на 24 часа при температуре 37°С для увеличения количества микроорганизмов. Через сутки сделали пересев на питательные среды - Эндо, Плоскирева висмут сульфитный агар (ВСА), Клиглера, Симмонса и термостатировали а течении 48 часов при оптимальной температуре. Выделение чистой культуры бактерий 52 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Колонии бактерий подсчитали через 2 суток. Далее было проведено исследование появившихся колоний по плану: форма, окраска, поверхность колоний, профиль колонии, блеск и прозрачность, размер колонии, край колонии, структура колонии Результаты исследования Результаты посева исходных проб на дифференциально-диагностические среды Клиглера и Симмонса представлены в таблице 1. Таблица 1- Результаты посева на питательные среды проба №1 проба №2 концентрат на вате вода концентрат на вате вода Клиглера + + + + Симмонс + + + + Посев на твердые питательные среды Эндо, ВСА, Плоскирёва выявил следующие результаты: на средах Эндо и Плоскирёва появилось большое количество колоний от смыва с ваты в пробе №1 и пробе №2. На среде ВСА роста колоний нет. Таким образом, выявили, что исследуемые рабочие поверхности содержали энтеробактерии. Для идентификации микроорганизмов готовили фиксированный препарат и окрашивали его по Граму: 1. Фиксация мазка 2. Окраска мазка генциявнолетом (3 мин.) 3. Обработка мазка раствором Люголя (2-3 мин.) 4. Обработка мазка 96 –процентным спиртом до 30 сек. 5. Обильно промыть мазок водой 6. Окраска мазка Фуксином Пфейфеля (1-2 мин.) 7. Промыть мазок водой 8.Высушить мазок. 9. Микроскопия. Результаты микроскопирования Из каждой группы были отобраны типичные единичные колонии для микроскопирования. В результате было определено: Проба №1 Рис.1 - Мелкие, бледно розовые кокки Рис. 2 - Маленькие тонкие бациллы 53 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Проба №2 Рис. 3 бациллы - Тонкие грамотрицательные Рис. 4 - Грамотрицательные коккобациллы Выводы: В результате исследования выявили, что рабочие поверхности офисной техники в кабинете информатики содержат энтеробактерии. Библиографический список: 1.Выделение и идентификация бактерий вида Streptococcus agalactiae» / Е.В. Сульдина., Чернова Т.Л., Ковалева Е.Н., [и др.] // Материалы II-й межвузовской студенческой научной конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии» Ульяновск: УГСХА, 2010. – С 2123 2.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований. Под редакцией А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. – М.: Медицина, 2004. COLONIZATION OF THE CATHETER KEYBOARD COMPUTERS Miller B., Lozgachev G., Rybina N.A. This is a study of contamination keyboard office equipment office computer science and study of the qualitative and quantitative composition of the microflora of the work surfaces. УДК 619:616-07 МИКРОБНАЯ ОБСЕМЕНЁННОСТЬ НЕКОТОРЫХ СУХИХ ПЛОДОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В ПИТАНИИ ЧЕЛОВЕКА Пидиксеева Т., ученица 9 класса Научный руководитель: учитель биологии Рыбина Н.А. МАОУ средняя образовательная школа №72 с углублённым изучением отдельных предметов, г. Ульяновск Работа посвящена изучению обсемененности сухих плодов, таких как арахис, кедровые орехи, семечки, бактериальными патогенами и безопасности применения их в качестве продуктов питания человека. 54 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Цель работы - выявление наличия микроорганизмов и анализ их качественного состава на поверхности семян употребляемых в пищу. Задачи: 7.Углубить свои знания о бактериях. 8.Научиться проводить микробиологические исследования. 9.Сделать сравнительные выводы по результатам работы. 10.Выработать практические рекомендации по безопасному использованию сухих плодов в пищу. 11.Познакомиться с профессией «Микробиолог». Материалы и методы Для исследования отобрали 6 образцов сухих плодов: 1) семечки (приобретены в супермаркете) - упаковка семечек не очищенных - упаковка семечек очищенных 2) кедровые орехи (приобретены на рынке) - со скорлупой - очищенные, без скорлупы; 3) арахис (приобретен на рынке) - не очищенный, со скорлупой - арахис очищенный, без скорлупы Исследования проводились в период с 06.05.2013 по 13.05.2013г. В ходе работы применялись методы посева на питательные среды с последующей идентификацией колоний. В качестве питательных сред использовали: мясопептонный агар, Эндо, висмут-сульфит-агар (ВСА), Плоскирева, Клиглера, Кесслера, Кода, Симмонса. Исследование проводилось на базе кафедры микробиология, вирусология, эпизоотология и ВСЭ Ульяновской ГСХА им. П.А. Столыпина Ожидаемые результаты По результатам исследования мы хотели узнать, содержат ли сухие плоды, употребляемые в сыром виде, микроорганизмы вредные для здоровья человека; и отличаются ли по содержанию бактерий плоды находящиеся в герметичной упаковке от плодов, без таковой. Ход работы 1,0 каждого исследуемого образца помещали в мясопептонный бульон и термостатировали при 37◦С в течении 24 часов. С суточной бульонной культуры проводили посев на питательные среды: МПА, Эндо, ВСА, Плоскирева, Клиглера, Кесслера, Кода и Симмонса и культивировали 24 часа при температуре 37◦С. Выросшие на питательных средах колонии оценивали по следующим критериям: форма, окраска, поверхность колоний, профиль колонии, блеск и прозрачность, размер колонии, край колонии,структура колонии Для оценки морфологии выделенных бактерий готовили мазки и окрашивали их по Граму. Результаты исследования 55 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Результаты посева исходных проб на дифференциально-диагностические среды представлены в таблице 1. Таблица 1 – Результаты посевов образцов на питательные среды Питательные среды Клиглера Кесслера Кода Симмонс Семечки подсолнечника не очищен очищенные + - Арахис не очищен не очищен очищенные + + +- +- Кедровые орехи + + мутный + очищенные + + голубой + Кедровые орехи: рост колоний наблюдался на всех средах с пробами из очищенных орехов и неочищенных. На ВСА выросли колонии черного цвета с металлическим блеском. На среде Эндо и Плоскирева рост характерный для энтеробактерий. Арахис дал аналогичную картину - активный рост колоний на всех питательных средах. Пробы семян подсолнечника взятые из герметичных упаковок дали наименьший рост колоний. На средах Плоскирева и ВСА рост не наблюдается. На средах Эндо и МПА рост незначительный. Микроскопирование Из каждой группы были отобраны единичные колонии для приготовления мазка и окрашивания его по Граму. При микроскопировании наблюдали следующее: 1)кедровые орехи –коккобациллы, бациллы 2)арахис – бациллы, коккобациллы 56 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 3)семечки подсолнечника - коккобациллы, бациллы, споры Выводы: 1.Наиболее безопасны сухие плоды, реализуемые в супермакетах в герметичной упаковке, т.к. они проходят предварительную термическую обработку. Тем не менее, данные продукты содержат некоторое количество энтеробактерий, которые могут служить причиной кишечных заболеваний 2.Сухие плоды приобретенные на рынке содержат значительное количество опасных для здоровья человека бактерий, поэтому требуют перед употреблением тщательной обработки. Библиографический список: 1.Выделение и идентификация бактерий вида Streptococcus agalactiae» / Е.В. Сульдина., Чернова Т.Л., Ковалева Е.Н., [и др.] // Материалы II-й межвузовской студенческой научной конференции «актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии» Ульяновск: УГСХА, 2010. – С 2123 2.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований. Под редакцией А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой, А.С. Ещиной. – М.: Медицина, 2004. COLONIZATION OF THE CATHETER SOME DRY FRUITS USED IN HUMAN NUTRITION Pidikseeva T., Rybina N.A. This is a study of contamination of nuts such as peanuts, pine nuts, sunflower seeds, bacterial pathogens and safety of using them as human food. УДК 619:579 ИДЕНТИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ ВИДА ENTEROBACTER CLOACAE ПО БИОЛОГИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ Барсукова Т., Семенова В., Кафидова А., 1 курс факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.б.н., доцент Ковалева Е.Н. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Вид Enterobacter cloacae, будучи условно-патогенным микробом, может вызывать инфекционные заболевания мочеполовой и респираторной систем 57 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии человека. Enterobacter cloacae нередко бывает причиной внутрибольничных инфекций. Для идентификации бактерий вида Enterobacter cloacae используются преимущественно бактериологические методы исследования. В связи с этим целью исследования является идентификация бактерий вида Enterobacter cloacae с помощью морфологии, ферментативных свойств и особенностей роста на различных питательных средах. Материалы и методы. В качестве исследуемого материала был использован штамм бактерий вида Enterobacter cloacae, полученный из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии ветеринарно-санитарной экспертизы УГСХА им. П.А. Столыпина. Для работы с ним использовали следующие питательные среды: мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), Эндо, агар Симмонса. Для получения изолированных колоний применяли метод посева штрихом на чашки с плотной питательной средой. Пробирки и чашки Петри с посевами инкубировали при 37°С в течение 24 часов. Для изучения цитологических свойств микроорганизма применяли окраску по Граму. Идентификацию культуры проводили по ферментативным свойствам, используя среды Гисса с глюкозой, мальтозой, сахарозой, лактозой и маннитом. Результаты исследований Штамм бактерий вида Enterobacter cloacae засевали в мясопептонный бульон и культивировали при 37ºС в течении 24 часов. Суточная бульонная культура мутная, при отстаивании выпадает хлопьевидный осадок. В полужидком агаре рост просматривается по уколу, в месте прокола среды обильный рост. С суточной бульонной культуры делали мазок, окрашивали его по Граму и микроскопировали (рис.1). Рис. 1 - Грамотрицательные палочковидные бактерии Для получения газона - 1 мл бульонной культуры переносили в чашку Петри с МПА. Распределяли равномерно по чашке с помощью шпателя, после чего излишки бульонной культуры убирали с помощью пипетки. Оставляли для 58 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии подсушивания на 20 минут и помещали в термостат для культивирования при 37°С на 20-24 часа. С получившегося газона производили посев штрихом на питательные среды. На среде Эндо колонии плоские с выпуклым центром, слизистые, гладкие, блестящие, малинового цвета с металлическим блеском. Посев на агар Симмонса выявил, что микроорганизмы способны к утилизации цитрата как единственного источника углерода. В ходе размножения микроорганизмов на среде продуцировались щелочные продукты, которые способствовали изменению цвета индикатора с зеленого на синий. Колонии на цитратном агаре мелкие, расинчатые, блестящие, округлые, синезеленого цвета. Рис. 2 –Рост культуры на среде Эндо Рис. 3 – Рост культуры на агаре Симмонса Для изучения ферментативных свойств суточную агаровую культуру высевали на среды Гисса с глюкозой, маннитом, сахарозой, мальтозой и лактозой. Исследуемый штамм микроорганизма не разлагал используемые нами сахара (табл. 1). Таблица 1 - Ферментативные свойства бактерий вида Enterobacter cloacae Ферментируемые вещества Глюкоза Сахароза Маннит Лактоза Мальтоза Enterobacter cloacae _ _ _ _ _ Выводы. Таким образом, по морфологическим, тинкториальным, культуральным и ферментативным свойствам исследуемая культура подтвердила принадлежность к виду Enterobacter cloacae. 59 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Библиографический список: 1.Иванов А.И. Острые кишечные инфекции. – Ленинград, 1982. 2.Васильев Д.А., Золотухин С.Н.,Никишина Н.М. Методы общей бактериологии. – Ульяновск, 1998. 3.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований. Под редакцией А.С. Лабинской, Л.П. Блинковой. А.Сю Ещиной – М.: Медицина, 2004 IDENTIFICATION OF BACTERIA OF ENTEROBACTER CLOACAE BIOLOGICAL PROPERTIES Barsukova T., Semenova V., Kafidova А., Kovaleva E.N. The work is devoted to the study of the biological properties of the bacterium Enterobacter cloacae. 60 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ БИОТЕХНОЛОГИИ (В ТОМ ЧИСЛЕ НАНОБИОТЕХНОЛОГИИ) И ИММУНОЛОГИИ УДК 547.963.32/636.082 К ВОПРОСУ О ПРОБЛЕМАХ И ПЕРСПЕКТИВАХ КЛОНИРОВАНИЯ Шкаликова М., Шабулкина Е., 3 курс факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.вет.н., доцент Васильева Ю.Б. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Клонирование - метод получения нескольких идентичных организмов путем бесполого (в том числе вегетативного) размножения. Таким способом на протяжении миллионов лет размножаются в природе многие виды растений и животных. Однако сейчас термин «клонирование» обычно используется в более узком смысле и означает копирование клеток, генов, антител и даже многоклеточных организмов в лабораторных условиях.[2] Клоны не всегда выглядят одинаково. Хотя у клонов один и тот же генетический материал, окружающая среда так же играет огромную роль в том, как приспособится к ней организм клонированного существа. Репродуктивное клонирование может позволять исследователям клонировать животных с потенциальной выгодой для областей медицины и сельского хозяйства. Так же можно использовать животных для того чтобы тестировать на них новые виды лекарств и обычную продукцию, предназначенную для человека. Большое преимущество использования клонированных животных для проверки на таблетки состоит в том, что все они являются генетически идентичными, что означает, что их реакция на таблетки должна быть боле менее сходной, чем у животных с различным генетическим набором.[1] Другой причиной для клонирования может служить то, что существуют популяции животных, которые стоят на грани вымирания. Однако некоторые ученые считают, что клонирование несет негативный характер, так как все особи имею генетически идентичный набор хромосом, что в целом играет отрицательную роль, так как для выживания разновидности необходимы разные варианты ДНК. Некоторые люди так же проявили интерес в том, чтобы их умерших домашних любимцев клонировали, надеясь, что эти клоны будут абсолютно такими же как и их умерший донор. Репродуктивное клонирование - очень неэффективная техника и большинство клонированных животных эмбрионов, не могут развиваться в здоровых особях. [3] Другая потенциальная проблема заключается в возрасте хромосомы клонируемой клетки. Клоны, созданные от клетки, принятой от взрослой особи, могут иметь хромосомы, которые уже короче, чем нормальная, и это может повлиять на быстрое старение клонированной особи. И действительно, Долли, которая была клонирована от клетки шестилетней овцы, имела хромосомы, теломеры которого были короче, чем у овец ее возраста. Долли умерла в возрасте 6 лет, приблизительно половина продолжительности жизни овцы, 61 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии которая составляет 12 лет. В своей работе мы хотели бы проанализировать основные отрицательные и положительные стороны клонирования. Учёные установили, что большинство клонированных животных страдает от серьезных врожденных дефектов, многие из них живут значительно меньше, чем обычные животные. Клонирование редких видов животных может способствовать не спасению и восстановлению их в дикой среде обитания, а повышению на них рыночного спроса и реализации с целью получения выгоды. Противники клонирования человека утверждают, что создание людей с идентичным генетическим кодом противоестественно и аморально. Клон никогда не станет точной копией клонированного существа. Клонирование уменьшает генетическое разнообразие и делает человечество более уязвимым в случае эпидемий. [2]. На это сторонники идеи отвечают, что сегодня в мире живет 150 миллионов людей, чей генетический код не уникален. Речь идет о близнецах, у которых гораздо больше общего, чем у клона и его донора. Общее количество клонов будет незначительным из-за высокой стоимости процедуры и нежелания большинства женщин вынашивать клонов. Клонирование даст возможность бездетным парам иметь детей, а обществу - воспроизводить выдающихся личностей: актеров, ученых, спортсменов. [3]. На сегодняшний день нигде в мире продукты из мяса животных-клонов не продаются, однако, по мнению экспертов, они могут появиться на продовольственных рынках. Комитет по безопасности продуктов питания сделал заключение о том, что мясо клонированных коров и свиней безопасно. Исходя из всего вышесказанного, можно сделать вывод, что конец спору о полезности или вреде клонирования будет положен лишь с появлением первой человеческой копии. Именно тогда появится реальная возможность узнать, что же такое на самом деле клонированный двойник. Мы считаем, что неразумно клонировать людей, пока не доведены до совершенства эксперименты на животных. Библиографический список: 1.Завертляев Б.П. Биотехнология в воспроизводстве и селекции. Л.: Агропромиздат, 1989.-255 с. 2.Спиер Р.Е., Адамс Г.Д., Гриффитс Дж.Б. и др. Биотехнология клеток животных. М.: Агропромиздат, 1989. Т. 1, 2. 3.Вир С. Клонирование человека: Аргументы в защиту. – М.: Медицина, 2002.314 с. TO THE QUESTION ABOUT THE PROBLEMS AND PROSPECTS OF CLONING Shkalikova M., Shabulkina E., Vasilyeva Y. B. The debate on the usefulness or harmfulness of cloning will be brought only with the advent of the first human copy. That's when a real opportunity to find out what is actually cloned twin. We believe that it is unwise to clone people, until perfected animal experiments. 62 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 632.937+631.46 РАЗРАБОТКА БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ УТИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЧЕСКИХ ОТХОДОВ СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА Антошкин П., Воротников А., 2 курса факультет ветеринарной медицины Научные руководители: к.б.н., ст. преподаватель Викторов Д.А., д.б.н., профессор Васильев Д.А. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Рост числа животноводческих хозяйств приводит к накоплению больших объёмов (порядка 164,2 млн. тонн) навоза и навозных стоков, которые являются опасными источниками загрязнения окружающей среды. От животноводческих комплексов в окружающую среду выделяются вредные токсичные газы, вызывая резкое ухудшение экологических и санитарных условий. Внедрение экологически безопасных и экономически эффективных биотехнологических способов утилизации органических отходов в сложившейся ситуации позволит глобально решить обозначенную проблему. Биотехнологические способы утилизации, основанные на применении бактериальных препаратов, способствует: - значительному ускорению процессов биоразложения навоза, повышению его биологической ценности и сокращению сроков обеззараживания; - значительному сокращению расходов технологической воды и образованию навозных стоков; - снижению концентрации токсичных газов в производственных помещениях; - улучшению класса условий труда персонала животноводческих комплексов, сокращению негативного воздействия на окружающую среду и проживающего вблизи населения. Существует ряд последовательных этапов утилизации бесподстилочного навоза: образование, накопление, транспортировка, подготовка, переработка, хранение, использование (внесение). Уже на первых этапах возникают технологические и санитарные проблемы, связанных с образованием навоза, к основным из них можно отнести: 1. Фракционность состава, седиментационнные и реологические свойства, обусловленные характером кормового рациона и содержания животных, 2. Выделение токсичных газов и зловонных запахов, обусловленное анаэробным процессом гниения органических веществ навоза, 3. Экологическая опасность нативного навоза обусловленная его биологическими свойствами, Таким образом, проблема утилизации навоза и других органических отходов вызывает ряд технологических проблем, приводя к снижению экономической эффективности животноводческого предприятия и может стать причиной локального экологического бедствия. 63 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Предлагаемый метод утилизации органических отходов заключается в применении нового разработанного коллективом авторов биопрепарата на основе эффективных штаммов сапрофитных бактерий Bifidobacterium longum, Bifidobacterium thermophilum, Bacillus subtilis, Lactobacillus acidophilus, а также ферментов для эффективной биологической утилизации органических отходов, очистки, обеззараживания и детоксикации сточных вод и прудов сельскохозяйственного назначения с возможностью переработки отходов в эффективное органическое удобрение. Данная технология применима в масштабах любого животноводческого комплекса, не требует значительных капитальных затрат, сооружений, оборудования, проста в применении и позволяет получить значительную дополнительную прибыль в короткие сроки, а так же способствует: - уменьшению расхода технологической воды; - устранению вязкого донного осадка бесподстилочного навоза и гомогенизации навоза; - снижению образования вредных газов в производственных помещениях и степени токсичности навоза, уменьшению негативного влияния на атмосферу, уменьшению объемов навозонакопителей для выдерживания навоза, рисков штрафных санкций со стороны контролирующих органов. - уменьшению распространения запахов в окружающую среду и населенные пункты; - снижению концентраций вредных веществ, улучшению условий работы персонала на животноводческих комплексах; - снижению выхода животноводческих стоков с комплекса, уменьшению площади полей отводимых под утилизацию; - улучшению физико-химических и гигиенических показателей бесподстилочного навоза. Библиографический список: 1.Антюхов Ю. Н. Больше времени на бизнес, меньше - на утилизацию / Ю. Н. Антюхов // Твердые бытовые отходы. - Отраслевые ведомости. – 2012. - №10. – с. 38-39. 2.Афанасьев В.Н., Афанасьев А.В., Самсонов А.Н. Технологические решения по утилизации навоза на животноводческих фермах при отсутствии сельскохозяйственных угодий // Вестник Всероссийского научноисследовательского института механизации животноводства. 2009. Т. 20. № 3. С. 150-155. 3.Белоусов Н. Утилизация навоза - это экологично, технологично и выгодно / Н. Белоусов // Свиноводство. 2010. № 4. С. 24-27. DEVELOPMENT OF A BIOLOGICAL PRODUCT FOR DISPOSAL OF ORGANIC WASTE AGRICULTURE Аntoshkin P., Vorotnikov А., Viktorov D.А., Vasil'ev D.А. The article discusses the relevance of organic waste utilization with the help of a biological product, as well as the possibility of its application. 64 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 571.27:615.281:547.96 СИНТЕТИЧЕСКИЕ ПЕПТИДНЫЕ ВАКЦИНЫ Гурьянов Н., 4 курс факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.вет.н., доцент Васильева Ю.Б. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск В данной реферативной работе описывается история создания синтетических пептидных вакцин, а также процесс их изготовления, включая процесс разработки синтетических пептидов, практическое применение, положительные и отрицательные стороны их применения. Также приведен анализ литературы по разработке экспериментальной синтетической вакцины против ящура, созданной британскими учеными. Вакцины (лат. vaccinia) – биологические специфические препараты, полученные с помощью микроорганизмов, их, составляющих, продуктов жизнедеятельности, а также, химическим или генно-инженерным путями для выработки активного иммунитета против инфекционных болезней. Название происходит от латинского слова vacca (корова), vaccinia коровья оспа, первого заболевания, против которого и были разработаны вакцины. Создателем является Эдвард Дженнер, испытавший данный метод лечения в 18 веке. Также большой вклад в развитие вакцинопрофилактики внес Луи Пастер. В наше время вакцины получили широкое распространение в качестве способа лечения и профилактики различных заболеваний человека и животных. Современные исследования в данной сфере предоставляют широкое разнообразие для выбора лечения и специфической иммунопрофилактики. Разрабатываются новые виды узкоспецифических вакцин, более щадящих, слаботоксичных и аллергически малоактивных, внедряются также новые способы их получения. Основными видами вакцин на данный момент являются: Живая вакцина - содержащая живой ослабленный микроорганизм Инактивированная (корпускулярная) - содержащая убитые цельные микроорганизмы Генно-инженерная (рекомбинатная)– выделение генетического материала микроорганизмов, их рекомбинация Химическая – выделение «чистого» антигена химическим путем. В данное время активно развивается разработка синтетических пептидных вакцин. Данное направление зародилось в 1974 году, когда был выделен и описан М.Села первый искусственный пептид, вызывающий образование антител к белку лизоциму. В процессе исследования было установлено, что синтетически выведенные полисахариды, входящие в состав многих антигенов, по свому строению максимально приближены к естественным, что дает возможность организму проявлять аналогичный иммунный ответ. В итоге мы получаем антиген с аналогичным белковым составом, в который могут входить, как фрагмент синтетически выведенного патагента, так и цельная имитация патагента. Одним из способов разработки 65 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии данных видов вакцин является изучение наиболее точной молекулярной структуры и последующее её воссоздание с помощью компьютерной графики. Для выяснения и создания молекулярной структуры оксфордские ученые использовали ускоритель элементарных частиц. С помощью направленного потока электронов по магнитному кольцу выделяется энергия в форме рентгеновского излучения, которое в свою очередь помогают исследовать точную молекулярную структуру белка. В настоящее время уже получены экспериментальные вакцины против ящура, полиомиелита, дифтерии, холеры, стафилококковой инфекции. При разработке синтетической вакцины против ящура британские ученые Института Пирбрайт под руководством Брайана Чарльстона использовали моделирование оболочки вируса ящура для последующего его воссоздания из синтетических компонентов. В процессе изучения выяснилось, что оболочка данного вируса представлена в виде двадцатиугольника с треугольными гранями, что представляло наибольшую сложность при дальнейшем построении модели. Данная модель была крайне нестабильной, поскольку при транспортировке оболочка легко распадалась. Учеными было решено использовать в соединении граней оболочки пептидные связи. Также возникали проблемы, связанные с близким сходством оболочки вируса ящура с оболочкой вируса полиомиелита. При испытании вакцины ученые получили весьма положительные результаты: из восьми попыток провакцинировать крупный рогатый скот получили положительный результат в пяти. Также проводились испытания на свиньях и морских свинках. У большинства из них данные препараты вызвали выработку специфических антител. Об актуальности синтетических продуктов следует судить из немалого числа их преимуществ по отношению к другим видам вакцин. Прежде всего, это меньшая иммуногенность, вирулентность, по сравнению с другими. Это, в свою очередь, обусловлено отсутствием РНК в синтетических микробных клетках, что позволяет свести к минимуму или же полностью исключить возможность заражения при введении вакцины, а также дорогостоящей биологической защиты при её создании. Вакцина является узко специфичной. Решение ученых Пирбрайт о применении пептидных связей между синтетическими элементами оболочки решило немаловажную проблему хранения и транспортировки вакцины. Следует отметить, что многие виды вакцин нуждались в низких температурах (хранение в холодильниках, перевозка в специальных термосах). Новый вид вакцины неприхотлив в данном плане, что облегчает доставку в страны с жарким климатом. Вакцина не вызывает аллергической реакции организма после её введения. Немаловажна также экономическая сторона данного вопроса. На создание синтетической вакцины затрачивается намного меньше средств, что, по обещаниям разработчиков, в скором времени позволит использовать продукт для вакцинации даже обычному фермеру. 66 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Однако, имеются и отрицательные стороны синтетических продуктов. После немалого количества положительно проведенных экспериментов с животными, испытывались также пептиды других вирусов (грипп, гепатит В), что не принесло желаемых результатов. В целом, результаты исследования синтетических пептидных вакцин не дают колоссальных результатов на данном этапе развития. Однако, данное направление является большим шагом в развитии биопрепаратов и медицины с ветеринарией в общем. Библиографический список 1.http://humbio.ru/ 2.http://www.iamok.ru/ 3.http://meduniver.com/ SYNTHETIC PEPTIDE VACCINES Gurianov N., Vasilyeva Y.B. This article describes the history of the creation of synthetic peptide vaccines and their production process, including the process of development of synthetic peptides, the practical application, the positive and negative aspects of their application. Development of an experimental synthetic vaccine against foot-andmouth disease, created by British scientists, may be the beginning of a new generation of vaccines and a new approach to the treatment and prevention of infectious diseases. УДК: 616-097:57.083.3 КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ С ПОМОЩЬЮ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА Карпюк Е., студентка 5 курса факультета биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: д. фарм.н., профессор Борщевская М.И. Национального университета пищевых технологий, г. Киев Работа посвящена изучению методов определения моноклональных антител, в частности – иммуноферментному анализу. Прогресс в молекулярной биологии и биотехнологии открыл огромные возможности для развития новых подходов к лечению больных онкологическими заболеваниями. Достижения в области генной инженерии моноклональных антител (МкАТ) позволили создать новые перспективные гуманизированные антитела, которые активно изучаются в онкологической практике. Эти достижения имеют большое значение для лечения больных злокачественными новообразованиями, и их значение в создании новых специфических препаратов будет только возрастать 3 . И для того, чтобы использовать данные препараты, необходимо определить методики по которой быстро и еффективно можно определить количественное содержание МкАТ в этих препаратах. 67 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии В связи с развитием клеточных технологий, молекулярной биологии, генетики, физики, химии и ряда других высокотехнологичных дисциплин в повседневную практику внедряются новые высокоточные и высокотехнологичные методы. Данные междисциплинарные тенденции затрагивают и область медицинских знаний, и смежные области биологических, биохимических проблем. За последние десять лет получил широкое распространение и внедрение в массовую практику метод клинической лабораторной диагностики под названием иммуноферментный анализ 2 . Иммуноферментный анализ — это иммунологический метод качественного определения и количественного измерения антигенов и антител, а также иммуноглобулинов и гормонов. Теоретически ИФА основывается на данных современной иммунохимии и химической энзимологии, знании физикохимических закономерностей реакции антиген-антитело, а также на главных принципах аналитической химии. Чувствительность ИФА и время его проведения определяется несколькими основными факторами: кинетическими, термодинамическими характеристиками реакции антиген-антитело, соотношением реагентов, активностью фермента и разрешающей способностью методов его детекции 1 . Используется несколько типов иммуноферментного анализа, таких как: непрямой, прямой, блокирование, конкурентный, но любой вариант ИФА содержит 3 обязательные стадии: 1) стадия узнавания тестируемого соединения специфическим к нему антителом (антигеном), что ведет к образованию иммунного комплекса; 2) стадия формирования связи конъюгата с иммунным комплексом или со свободными местами связывания; 3) стадия превращения ферментной метки в регистрируемый сигнал. ИФА пришел на смену широко используемым ранее в клинической практике методам агглютинации, преципитации и РИА. По сравнению с вышеназванными методами ИФА менее трудоемок и менее продолжителен по времени, удобен для выполнения большого числа однотипных анализов. В ИФА сочетается уникальная специфичность иммунохимического анализа с высокой чувствительностью определения ферментной метки. Чувствительность метода (под чувствительностью подразумевают минимальное выявляемое количество антител или антигена) определяется следующими факторами: аффинностью антител, предпочтительнее использование моноклональных антител; специфической активностью фермента; интенсивностью сигнала; чувствительностью учета сигнала. Различные варианты ИФА различаются по своей чувствительности. Отдельные варианты твердофазного ИФА позволяют выявлять в образце единичные молекулы. Средняя чувствительность ИФА – 109 – 10-12 моль 4 . Именно благодаря перечисленным выше преимуществам, на сегодня, данный метод широко используется в диагностической и клинической медицине, научно-исследовательской работе и в фармацевтической биотехнологии. 68 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Библиографический список: 1.Егоров А. М., Осипов А. П. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. – М.: Высшая школа. – 2000. – 350 с. 2.Кишкун А.А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике. – М: Медицинское информационное агентство. – 2009. – 435 с. 3.Личиницер М.Р. Новые противоопухолевые препараты на основе моноклональных антител / М.Р. Личиницер, Е.В. Степанова // Рос. Мед. журн.. – 2002. – №14. – С.609-615. 4.Шигина Ю.В. Иммунология: Учебное пособие. – М: Издательство РИОР. – 2007. – 313 с. QUANTITATIVE DEFINITION MONOCLONAL ANTIBODIES BY ENZYME IMMUNOASSAY Karpiuk K., Borshchevska M.I. Is devoted to the study of methods for determining monoclonal antibodies, including enzyme immunoassay. УДК 628.33 ХАРАКТЕРИСТИКА БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СПОСОБОВ ОЧИСТКИ СТОКОВ ОТ СОЕДИНЕНИЙ ФОСФОРА Ивашута В., студент 5 курса факультета биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: к.т.н., доцент Антонюк М.Н. Национальный университет пищевых технологий, г. Киев Работа посвящена изучению литературных данных относительно уровня загрязнения фосфатами водных объектов, а также биотехнологических методов очистки сточных вод для предотвращения евтрофикации. За счет интенсивного развития новых технологий в промышленности и широкого применения фосфоросодержащих моющих средств в последние годы концентрация растворенных фосфатов значительно увеличилась. На данный момент явление эвтрофикации уже достигло уровня экологического кризиса. К сожалению, большинство из существующих методов очистки не всегда дают возможность достичь необходимых показателей ПДК фосфора в выбрасываемых потоках воды [4]. Поэтому оценив глобальную опасность попадания фосфатов в водоемы, целью работы был анализ литературных данных и сравнение современных биотехнологических методов очистки водоемов от фосфорсодержащих ксенобиотиков. К наиболее часто используемым способам удаления фосфатов из воды промышленного и бытового происхождения относятся физико-химические, биологические и комбинированные (объединяет биологический и химический механизм) методы. Физико-химическими способами фосфор, находящийся в 69 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии сточной воде, может быть выделен путем добавления коагулянтов с дальнейшим осаждением или посредством адсорбции. В качестве реагента чаще всего используются такие соединения, как СаО, FeCl3, Fe2(SO4)3, Al2(SO4)3. Данный способ является экономически затратным, кроме того есть вероятность повторного загрязнения. Поэтому проводится поиск новых реагентов – отходов производства. Передовой разработкой в процессе комбинированной очистки есть использование белого шлама – отход производства алюминиевых конструкций. Хотя данное решение есть экономически выгодным, оно все же не обеспечивает экологические показатели очистки [2,4]. Биологический способ подразумевает использование микроорганизмов активного ила. Механизм очищения от фосфатов заключается в том, что отдельные виды микроорганизмов активного ила, при определенных условиях культивирования, поглощают фосфаты из жидкой фазы и выводят их из очистных сооружений вместе с избыточной биомассой. В настоящее время процесс накопления фосфора в наибольшей степени изучен у бактерий кишечной палочки, дрожжей и обитающих в сточных водах бактерий рода Acinetobacter. Также к новым исследованиям относится изучение способности поглощения фосфора с использованием бактерий Zoogloea и водорослей, таких как Chlorella, Spirulina platensis [1,2]. В процессе биологической очистки стоков концентрация фосфора в сточной воде снижается, однако, как показывает практика водоочистки, значение ПДК все же не достигает необходимых показателей. Поэтому данный метод также может быть дополнен иммобилизацией клеток на определенных носителях, что дает возможность повысить эффективность очистки. Комбинации взвешенных и прикрепленных форм микроорганизмов включают многоступенчатую анаэробно-аэробную обработку. Данный метод дает возможность повысить степень очистки сточных вод путем увеличения поверхности контакта между микроорганизмами и водой [3]. Таким образом, на основании анализа литературных данных, что касается методов очистки природных водных ресурсов от загрязнения фосфатами, к эффективным и экологически надежным относится биологический способ удаления с использование взвешенных и прикрепленных форм микроорганизмов активного ила. Библиографический список: 1.Кореньков А.Д. Технологическое моделирование комбинированного процесса биологического удаления фосфора из сточных вод: Автореф. дис ... к-та техн. наук. - Щ., 2011. - 16 с. 2.Крючихин Е.М., Николаев А.Н. Методы очистки городских сточных вод от биогенных элементов // Водоочистка. - 2008. - Т.3., № 1. - С. 30-34. 3.Осадчий В.Ф., Яременко Л.В. Интенсивная биотехнология глубокой очистки сточных вод от органических загрязняющих веществ, соединений азота и фосфора // Экологический вестник России. - 2010. - № 9. - С.40-45. 4.Запольский А.К. Водопостачання, водовідведення та якість води: Підручник. – К.: Вища шк., 2005. – 671 с. 70 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии CHARACTERISTIC OF BIOTECHNOLOGICAL METHODS WASTEWATER TREATMENT FROM COMPOUNDS OF PHOSPHORUS Ivashuta V., Antoniuc M.N. The work dedicated to the study of literature data about the level of phosphate pollution of water bodies, as well as biotechnological methods of sewage treatment to prevent eutrophication. УДК 637.1:641.85:637.144 ПУДИНГ ПОНИЖЕННОЙ КАЛОРИЙНОСТИ С ПИЩЕВЫМИ ВОЛОКНАМИ НА ОСНОВЕ ВТОРИЧНОГО МОЛОЧНОГО СЫРЬЯ – СЫВОРОТКИ Легашов П., студент 3 курса технологического факультета Научные руководители: аспирант Плеханова Е.А., к.т.н., ст.преподаватель Банникова А.В., д.х.н., профессор Птичкина Н.М. ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н.И. Вавилова», г. Саратов Разработана технология молочного десерта пониженной калорийности с применением натурального сахарозаменителя и заменой желатина и части крахмала в рецептуре некрахмальными полисахаридами. Экспериментальным путем подобраны оптимальные концентрации полисахаридов и сахарозаменителя. Определены физико-химические, органолептические свойства разработанного продукта, рассчитана его пищевая и энергетическая ценность. Традиционное применение пищевых добавок предусматривает коррекцию продуктов питания с точки зрения полезности для здоровья человека. Пищевые продукты, содержащие такие ингредиенты, должны соответствовать по качеству исходному продукту, а также не обладать вредным для здоровья действием. Такая цель не может быть достигнута без использования пищевых добавок. Одними из самых востребованных и широко применяемых пищевых добавок являются полисахариды (ПС) [1, 2]. Цель исследования: разработка технологии сладкого десерта - пудинга пониженной калорийности с пищевыми волокнами на основе вторичного молочного сырья - сыворотки. Объекты и методы исследований Для проведения исследований использовали полисахариды (ПС) растительного происхождения* (FMCcomp., USA); ПС водорослевого происхождения (FMCcomp., USA); ПС микробного происхождения (CP Kelco ApS, Дания); сыворотка творожная (ГОСТ Р 53438 - 09); фруктоза (ТУ 9111– 011–35937677 - 02). Определение сухих веществ осуществлялось в сушильном шкафу [3]; плотность систем определяли физическим методом [4]. Проводили органолептический анализ готовых изделий [3], определяли пищевую и энергетическую ценность готовых десертов [5]. 71 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Результаты и их обсуждение. За основу была взята рецептура пудинга на основе сыворотки творожной [6]. Сыворотка не оказывает побочных отрицательных воздействий на организм человека и практически не имеет противопоказаний к использованию. В качестве стабилизатора в известной рецептуре используется желатин. С целью улучшения текстурных и органолептических характеристик производилась замена желатина на пищевые некрахмальные полисахариды различной природы. С целью снижения калорийности разрабатываемого продукта производилась замена сахара на сахарозаменитель – фруктозу. Органолептический анализ показал, что разработанные пудинги имеют высокие показатели. ПС маскируют запах сыворотки, придают продукту эластичную текстуру, держат форму, с течением времени не расслаиваются в отличие от контрольного образца с желатином. Изучение физико-химических свойств полученных десертов показало, что наибольшее содержание сухих веществ в образце с бинарной системой ПС, а именно, микробным ПС и растительным ПС. При этом плотность системы меньше, чем у других образцов. На основании полученных данных была разработана технология приготовления пудингов с полисахаридами и фруктозой. Был произведен расчет пищевой и энергетической ценности разработанных рецептур пудингов с ПС и фруктозой. Замена сахара на фруктозу снижает его энергетическую ценность на 36,9 ккал, по сравнению с контрольным образцом с желатином. * - Названия полисахаридов не приводятся, т.к. готовится заявка на патент. Выводы: разработана технология пудинга на основе сыворотки с полисахаридами разной природы, произведена замена сахара на сахарозаменитель – фруктозу, удалена часть крахмала из рецептуры с целью снижения калорийности. Библиографический список: 1.Птичкин, И.И. Пищевые полисахариды: структурные уровни и функциональность / И.И. Птичкин, Н.М. Птичкина. - ГУП «Типография №6» – Саратов, 2012. – 96 с. 2.Phillips, G. O. Gums and Stabilisers for the Food Industry 10 / G. O. Phillips, P. A. Williams. - IRL Press, New York, 2000. - 452 p. 3.Ловачева, Л.Н. Стандартизация и контроль качества продукции. Общественное питания: Учеб.пособие для ВУЗов по спец. «Технол. прод. общ. питания» / Л.Н. Ловачева. - М.: Экономика, 1990. - 239 с. 4.Евграфова, Н.Н. Курс физики для подготовительных отделений вузов: Учеб. пособие. – 3-е изд., испр. и перераб / Н.Н. Евграфова, В.Л. Каган. – М.: Экономика, 1990. – 239 с. 5.Химический состав и энергетическая ценность пищевых продуктов: справочник МакКанса и Уиддоусона / пер. с англ. под общ. ред. д-ра мед. наук А. К. Батурина. - СПб.: Профессия, 2006. - 416 с., табл. 6.Храмцов, А.Г. Технология продуктов из вторичного молочного сырья: Учебное пособие / А.Г. Храмцов [и др.]. - СПб.: ГИОРД, 2009. – 424 с. 72 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии PUDDING OF THE LOWERED CALORIC CONTENT WITH FOOD FIBRES ON THE BASIS OF SECONDARY DAIRY RAW MATERIALS – COTTAGE CHEESE WHEY Legashov P., Plekhanova E.A., Bannikova A.V., Ptichkina N.M. Technology of milk desserts of the lowered caloric content were developed using fructose and polysaccharides in order to replace gelatin and part of starch in formulations. Recommended concentrations of polysaccharides and fructose were experimentally carried out. Physicochemical, nutritional and organoleptic parameters for the developed products were determined. УДК 57.013 ИССЛЕДОВАНИЕ МАССОПЕРЕНОСА КИСЛОРОДА В ПИЛОТНОМ ФЕРМЕНТЕРЕ Цыганков О., cтудент 5 курса факультета биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: к.т.н., доцент Карлаш Ю.В. Национального университета пищевых технологий, г. Киев Рассмотрена эффективность работы пилотного ферментера при изменении конструкции, количества оборотов мешалок и параметров аэрации. По результатам исследований определена зависимость объемного коэффициента массопередачи KLa от параметров перемешивания, аэрации и выбрана наиболее эффективная конструкция мешалки ферментера. Оптимизация параметров работы ферментера имеет важное значение для увеличения экономической эффективности биотехнологического производства. Уменьшения затрат электроэнергии на перемешивание и воздуха при проведении биосинтеза приводит к снижению себестоимости конечной продукции и увеличения прибыли. Процессы биосинтеза чаще лимитируются скоростью растворения кислорода, вследствие чего для практических целей необходимо знать потребности культуры в кислороде и скорость его растворения (скорость массообмена), которая определяется величиной объемного коэффициента массопередачи KLa [1]. Одним из основ метода интенсификациии маособминних процессов в ферментерах, широко сейчас применяется в биотехнологических процессах, перемешивание, которое проводится различными способами и устройствами. Наиболее интенсивное перемешивание достигается использованием наиболее распространенного механического перемешивания устройствами различной конструкции - турбинными, лопастные, винтовыми мешалками и т.п.. При этом достигается смешанный эффект - диспергирования газовой, жидкой, твердой фаз и выравнивания концентрации компонентов питательной среды по всему объему ферментера [2]. Для ферментеров с механическим перемешиванием с достаточной точностью можно принять, что интенсификация процессов абсорбции 73 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии кислорода проходит в зоне перемешивающего устройства, где дисипуе основная часть энергии создаваемых турбулентных вихрей (кроме крупномасштабных) и достигается высокий уровень массопередачи. При малых объемах ферментеров растворена масса кислорода и компонет питательной среды равномерно распределена по объему, т.к. достигается гомогенная структура потоков и роль крупномасштабного перемешивания незначительна. Однако с повышением масштаба и скорости потребления кислорода характер распределения энергии турбулентных вихрей и концентрация растворенного кислорода по объему сильно меняется все больше локализуясь в зоне перемешивающего устройства. Как подчеркивается в работе [3], увеличение коэффициента массопередачи по кислороду в зоне мешалки, не может компенсировать низкого (ниже критического) уровня растворенного кислорода в области, удалена от перемешивающего устройства. Итак, массообменные возможности ферментера будут реализованы лишь частично, а расчет ферментера приведет к завышенным показателям. С целью определения наиболее эффективной конструкции перемешивающего устройства при абсорбции кислорода в водных растворах проводились эксперименты на пилотном ферментер геометрическим объемом 0,1 м3. Определялись величины объемного коэффициента массопередачи по кислороду при изменении конструктивных характеристик перемешивающих устройств и режимных параметров работы ферментера. По результатам проведенных исследований установлено влияние конструктивных характеристик и режимных параметров работы перемешивающих устройств на скорость абсорбции кислорода и выбрана наиболее эффективная конструкция перемешивающего устройства. Библиографический список: 1.Ждан-Пушкина С.М. Основы роста культур микроорганизмов - Л.: ЛГУ, 1983., 187 с. 2.Манаков М.Н. Теоретические основы технологии микробиологических производств - М.: Агропромиздат, 1990., 272 с. 3.Кафаров В.В., Винаров А.Ю., Гордеев Л.С. Моделирование биохимических реакторов. - М.: Лесная промышленность, 1979.,344 с. INVESTIGATION OF MASS TRANSFER OXYGEN IN PILOT FERMENTERS Tsygankov O., Karlash Y.V. The efficiency of the pilot fermenter when modifications are made, the number of turns stirring and aeration parameters. According to the research determined the dependence of the bulk mass transfer coefficient KLa on the parameters of mixing, aeration and choose the most effective combination stirrer fermenter. 74 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 637.3 РЕОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СЫРНОГО СГУСТКА С БОБОВЫМИ НАПОЛНИТЕЛЯМИ Чечеткина А. 5 курс, факультет технологии пищевых производств Научный руководитель: к.б.н., доцент Серова О.П. ФГБОУ ВПО «Волгоградский ГТУ», г. Волгоград Работа посвящена решению проблемы использования козьего молока в качестве альтернативного сырья, разработки технологии мягкого козьего сыра с бобовыми наполнителями, изучению реологических свойств готового продукта. В статье приведены научные основы эффективности производства бобовых наполнителей. Сырное тесто обладает рядом структурно-механических свойств: твердостью, пластичностью, упругостью, которые характеризуют консистенцию сыра [1]. От реологических характеристик сыра зависит тип применяемого упаковочного материала, способ упаковки в индивидуальную и групповую тару, внешний вид сыра, способность выдерживать механические нагрузки, потери при порционировании, производительность упаковочного и порционирующего оборудования. Особое значение структурно-механические (реологические) характеристики приобретают при работе с мягкими сырами. Целью работы являлось исследование влияние вводимых добавок на реологические свойства кислотно-сычужного сгустка, а именно механическую прочность его структуры и выбор наиболее обоснованных управляющих параметров для получения конечного продукта с заданными свойствами. Измерения осуществляли в условиях неограниченного объема. В качестве белковых наполнителей предлагается использовать муку из нута и экструдированного нута. В состав нута, его еще называют турецкий горох или бараний горох, входят многие ценные элементы таблицы Менделеева. Например, эта бобовая культура содержит много селена, который необходим организму для молодости, защиты от раковых заболеваний и мозговой активности. В нуте имеется 50-60% углеводов, 20-26% белка, 7-8% жиров. Среди минералов много кальция, калия, фосфора, магния, марганца, кремния, железа и бора. Нут богат необходимыми человеку витаминами: такими как фолиевая кислота (0,07 мг/100 г), витамины B1, B2, B3, B5, биотин, витамины B6 и E. Нельзя не отметить низкую калорийность нута (120 кКал/100 г), делающую его отличным диетическим продуктом [3]. В качестве добавки в мягкий сыр предлагается вносить экструдированный нут. Экструзия (от латинского extrudo -выталкивание, выдавливание) как процесс, совмещающий термо-, гидро- и механохимическую обработку сырья с целью получения продуктов с новой структурой и свойствами, известен достаточно давно. Бобовые различных видов экструдируют для того, чтобы облегчить процесс перевариваемости. Фактически, в экструдере под давлением 75 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии и высокой температурой происходит преобразование сложных молекулярных компонентов клетки корма в более простые. Анализировались образцы сырного продукта с мукой из нута и образцы с экструдированным нутом. Для подготовки образцов использовался микротом (Microm) HM 525 замораживающий, с температурой в камере −30°С. Окрашивание подготовленных образцов проводили по стандартной методике с использованием гематоксилина и эозина. Для исследования гистологического среза подготовленных образцов толщиной слоя 20 мкм, использовался микроскоп AxioCam MRc 5 Imager.Z2, просмотр среза происходил в on-line режиме с использованием программы AxioVision. Микроструктура сырного продукта с различными бобовыми добавками представлена на рисунках. Известно что мицеллы казеина в натуральном молоке имеют размеры от 40 до 200 нанометров (рисунок 1а), размеры субмицеллы в них 12-20 нм, а молекул казенное, из которых состоят субмицеллы, и сывороточных белков в пределах 3-6 нм. На рисунке 1б представлена электронно-микроскопическая фотография структуры сычужного сгустка с добавлением экструдированного нута. а б Рис. 1. а – гистологический срез; б − срез с добавлением экструдированного нута В процессе экспериментальных исследований выявлено, что частицы нутовой муки, экструдированного нута несколько замедляют процесс синерезиса геля; частично блокируют действие фермента на каппа-казеин; физико-химические процессы ферментативного гелеобразования в молоке при участии частиц муки протекают иначе, чем при участии хлористого кальция; частицы нутовой муки, экструдированного нута способствуют связыванию сывороточных белков и предположительно способствуют связыванию лактозы [4]. Таким образом, результаты сравнительных реологических и электронномикроскопических исследований показывают существенное влияние состава исходных смесей, в частности их белковой и жировой части, на процесс гелеобразования и структуру получаемых сгустков. Результаты электронно-микроскопических исследований свидетельствуют о том, что при выработке сырных продуктов с добавлением бобовой культуры наблюдаются изменения как пространственной сетки, так и структурного элемента, формирующего белковый каркас, обусловленные 76 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии трансформацией субмикроструктуры. В данных образцах сырных продуктов пространственная сетка искажается. Таким образом, показано, что использование частиц нутовой муки и экструдированного нута в процессе производства продуктов сыроделия безопасно и перспективно в технико-экономическом смысле. Библиографический список: 1.Влияние основных технологических параметров на прочность структуры кислотно-сычужного сгустка // Сыроделие и маслоделие. − 2006. − №1. − С. 37-38. 2.Горлов, И. Ф. Биологическая ценность основных пищевых продуктов животного и растительного происхождения / И. Ф. Горлов. – Волгоград : Перемена, 2000. – 264 с. 3.Король В, Лахмоткина Г. Люпин-комплекс ингредиентов для продуктов функционального питания.//Питание и общество.-2011. №8.- С.8-9. 4.Влияние сушки на микроструктуру сыра // Сыроделие и маслоделие. – 2012. − №3. RHEOLOGICAL FEATURES CHEESE CURD WITH BEAN FILLERS A. Chechetkina, O.P. Serova Is devoted to solving the problem of using goat's milk as an alternative raw material, technology development of soft goat cheese with bean fillings, the study of the rheological properties of the final product. The article presents the scientific basis of efficiency bean fillings. 77 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ПРОБЛЕМЫ ЭПИЗООТОЛОГИИ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ УДК 619:616.155.392:636.22/.(477.75) АНАЛИЗ ПРОТИВОЛЕЙКОЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ В ХОЗЯЙСТВАХ УЛЬЯНОВСКОЙ ОБЛАСТИ Степанова Л., Нестерчук В., студентки факультета ветеринарной медицины Научный руководитель: к.вет.н., доцент Васильева Ю.Б. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Лейкоз крупного рогатого скота - одна из наиболее распространенных инфекций, наносящих значительный экономический ущерб, вследствие падежа животных, недополучения продуктов животноводства. Проблема лейкоза крупного рогатого скота одна из важнейших проблем не только ветеринарной медицины, животноводства, но и биологии, и экологии в целом, имеющая непосредственное отношение к безопасности здоровья человека, так как вирус имеет близкое морфологическое и эволюционное родство с вирусом Тклеточного лейкоза человека. Большой интерес представляют проблемы потенциальной опасности для человека, продуктов питания от животных из стад, неблагополучных по лейкозу, влияния вредных метаболитов, накапливающихся в организме больных коров, на организм человека, а также использование животных для получения биопрепаратов. В связи с этим, разные регионы Российской Федерации разрабатывают свои индивидуальные программы по профилактике и ликвидации вирусного лейкоза крупного рогатого скота». Лейкоз крупного рогатого скота (лат. – Bovine leucosis; англ. – Leukaemia in cattle) – гемобластоз, хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, протекающая бессимптомно или характеризующаяся лимфоцитозом и злокачественным разрастанием кроветворных и лимфоидных клеток в различных органах. Лейкоз - болезнь неизлечимая. Корова будет носить вирус всю жизнь. В настоящее время лейкоз крупного рогатого скота диагностируют практически во всех странах мира. Лейкоз распространился повсеместно. Экономический ущерб от лейкоза складывается из потерь в результате выбраковки инфицированных и больных животных, утилизации туш, сдачи на мясо молодняка от больных коров и расходов на проведение оздоровительных мероприятий. Лейкоз крупного рогатого скота продолжает лидировать среди заболеваний в развитом молочном животноводстве. Распространение лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации. По данным исследований в 2002 году, в реакции иммунной диффузии (РИД) крови от КРС. количество зараженных животных составило в Московской области около 14%, в Ростовской и Владимирской — по 25%, в Брянской — 18%, в Краснодарском крае — до 45%. В некоторых хозяйствах количество инфицированных животных достигает 80—90%. В настоящее время программы оздоровления хозяйств от лейкоза построены на применении в качестве диагностики лейкоза метода РИД: серопозитивных 78 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии животных считают зараженными и выводят из стада. Как показала практика, при таком подходе оздоровление затягивается на годы, так как невозможно выявить всех инфицированных животных, особенно на ранних стадиях заболевания, и изолировать их от здоровых. Вследствие этого оздоровительные меры не имеют положительного результата. При проведении массовых серологических исследований ветспециалистами допускается подмена проб крови лейкозных коров на заведомо отрицательные для получения минимального процента РИД-положительных результатов. Так как в основном больные животные – высокопродуктивный скот и их экономически невыгодно сдавать на убой. При кормлении молодняка допускается дача молока от больных лейкозом коров и сбор лейкозного молока в общий удой. Взятие крови проводится общей иглой для нескольких коров, перезаражая их. В значительной мере осложняет работу по профилактике и ликвидации лейкоза отсутствие на животноводческих фермах родильных отделений, телятников-профилакториев, помещений для раздельного содержания крупного рогатого скота, отсутствие специализированных ферм по целенаправленному выращиванию ремонтного молодняка. Во многих сельхозпредприятиях широко используется естественное осеменение животных быками-производителями, зачастую не обследованными на наличие ВЛ КРС. На фермах надлежащим образом не налажен зоотехнический учет, нумерация животных. Имеет место нарушение ветеринарно-санитарных правил при проведении обработок животных. Не на должном уровне находится материально-техническая оснащенность государственных ветеринарных лабораторий, что не позволяет своевременно и качественно проводить диагностические исследования. Сложившаяся ситуация с заболеванием животных лейкозом требует согласованных действий органов государственной власти, органов местного самоуправления, государственной ветеринарной службы, руководителей и специалистов сельхозпредприятий, владельцев животных, направленных на решение организационнохозяйственных, селекционно-зоотехнических и специальных ветеринарносанитарных мероприятий на должном научном обеспечении. При четком выполнении «плана организационно-хозяйственных, ветеринарно-санитарных и специальных мероприятий по профилактике и ликвидации лейкоза среди крупного рогатого скота в Чувашской республике» ветслужба района ликвидировала эту инфекцию в течение двух лет. Проведено 5 исследований животных с интервалом в 3 месяца до получения первого отрицательного результата по всему стаду крупного рогатого скота в возрасте 6 месяцев, реакцией иммунодиффузии в геле агара (РИД). Таким образом, особое место в системе противолейкозных мероприятий отводится серологическому контролю за животными, особенно молодняка КРС, в процессе их выращивания через каждые 6 месяцев: в 12-месячном возрасте, перед осеменением и нетелей в возрасте 6-7 месячной стельности. После каждого исследования положительно реагирующий молодняк переводится в откормочную группу. 79 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ANALYSIS OF ANTI ANTILEUKEMIC ACTIVITIES OF HOUSEHOLDS ULYANOVSK L. Stepanova, V. Nesterchuk, Yu.B. Vasilyeva «Leukemia cattle - one of the most common infections that cause significant economic damage as a result of death of animals, animal products shortfall. The problem of bovine leukemia is one of the major problems not only in veterinary medicine, animal husbandry, but also biology, and ecology as a whole, is highly relevant to the safety of human health, as the virus has a close morphological and evolutionary relationship with the virus of T-cell leukemia. Of great interest are the problems of the potential hazard to human food products from animals from herds disadvantaged by leukemia, the effects of harmful metabolites that accumulate in the body of sick cows, on the human body, as well as the use of animals for biological products. In this regard, the different regions of the Russian Federation are developing their individual programs for the prevention and elimination of viral bovine leukemia». УДК 619:616.98:578.824.11(048) БОЛЕЗНЬ АУЕСКИ – ЛОЖНОЕ БЕШЕНСТВО ЖИВОТНЫХ Галужко И., 3 курс факультет ветеринарной медицины Научные руководители: д.б.н., профессор Васильев Д.А., к.б.н., доцент Молофеева Н.И. ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина», г. Ульяновск Болезнь Ауески (Morbus Aujeskyi) – ложное бешенство. Инфекционное заболевание (по имени венгерского бактериолога A. Aujeszky) домашних и диких животных. В настоящее время болезнь Ауески встречается во всех частях света. В России широкого распространения не получила, но регистрируется повсеместно. Экономический ущерб складывается из прямого убытка от гибели животных, вынужденного убоя, выбраковки туш, снижения живой массы больных животных, абортов, а также из огромных затрат на обеззараживание кожи, мяса, лечение, профилактическую вакцинацию, вынужденную дезинфекцию, выполнение карантинных мероприятий. Возбудитель болезни - фильтрующийся вирус, открытый венгерским исследователем Ауески в 1902 г., относится к ДНК-содержащим вирусам. Размер вириона 186 нм. Вирус относится к семейству Herpesviridae. Вирус чувствителен к эфиру, желчи, формалину, ультрафиолетовым лучам, однако устойчив во внешней среде, особенно при низких температурах. Вирус хорошо размножается в первичных перевиваемых клеточных культурах с характерным цитопатогенным действием. К экспериментальному заражению высокочувствительны куриные эмбрионы, морские свинки, крысы и особенно кролики, 1-14-дневные цыплята (при интерацеребральном заражении).[1]. Восприимчивы все виды с/х животных, дикие плотоядные, грызуны; чувствителен молодняк, имеются данные, что имеется невысокая вероятность 80 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии восприимчивости людей. Человек заражается через поврежденные наружные покровы. Значительно реже заражение происходит через загрязненные вирусом пищевые продукты. Источник возбудителя являются больные животные и вирусоносители. Пути передачи: алиментарный, ведущую роль в распространении играют грызуны. Инкубационный период имеет продолжительность до 20 суток. Поросята погибают через 2-12 ч без каких-либо специфических признаков: у взрослых свиней - обильное пенистое слюнотечение - в начале болезни температура 4142°С, угнетение; при эпилептической форме - внезапное возбуждение, стремление вперед, судороги, поза сидячей собаки; при оглумоподобной форме – угнетение, шаткая походка, искривление шеи. У крупного рогатого скота – сильнейший зуд, прекращение жвачки, нарастающее возбуждение, судороги, частые мочеиспускания, дрожь. То же у овец, коз. [2]. У плотоядных наблюдается зуд, возбуждение, самопогрызание; у кошек – мяукание. Основными клиническими признакими у людей является слабость и головная боль, в месте внедрения вируса появляется мелкая зудящая сыпь, затем припухлость. Заболевание обычно длится 5 - 7 дней и заканчивается выздоровлением. Из патолого-анатомических изменений у животных отмечают расчесы (у свиней отсутствуют), кровоизлияния, гаймориты, тонзилиты, переполнение желудка, застойные явления, резко выражен отек легких. При гистологическом исследовании в головном и спинном мозге выявляют картину острого менингоэнцефалита. Для диагностики данного заболевания в лаборатории проводят РН, РСК, реакции преципитации в агаровом геле, иммунофлюоресценции, биопробу на кроликах и кошках. В лабораторию посылают головной мозг, миндалины; заглоточные и бронхиальные лимфоузлы; трупы мелких животных. [3] Клиническую картину болезни Ауески нередко смешивают с клинической картиной бешенства. Отличительными признаками последнего заболевания являются нарушения сознания, проглатывание несъедобных предметов, паралич нижней челюсти, отсутствие или наличие слабо выраженного зуда и расчесов. При листериозе свиней и поросят имеются нервные явления, сходные с таковыми при болезни Ауески. Для дифференциации проводят бактериологическое исследование и биопробу на лабораторных животных. У свиней сходная картина с болезнью Ауески отмечается тем, что при ней не наблюдают тяжелых нервных явлений у поросят сосунов и отъемышей. [4] Специфических медикаментозных средств лечения нет. В начале заболевания пушным зверям применяют у-глобулин. Для активной иммунизации имеется несколько эффективных вакцин: сухая культуральная вирус-вакцина ВГНКИ против болезни Ауески крупного рогатого скота и овец; инактивированная концентрированная культуральная вакцина против болезни Ауески пушных зверей, овец, свиней; сухая культуральная вирус-вакцина из штамма БУК-628 против болезни Ауески свиней. 81 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Профилактические мероприятия включают соблюдение санитарногигиенических правил при уходе за животными. Меры иммунопрофилактики неразработаны. Туши и продукты убоя от животных, больных и подозрительных по заболеванию указанными болезнями, выпускать в сыром виде запрещается. При наличии дегенеративных или других патологических (абсцессы и др.) изменений в мускулатуре тушу с внутренними органами направляют на утилизацию. Патологически измененные внутренние органы, кишки и кровь, а также головы от больных листериозом животных во всех случаях направляют на утилизацию с обработкой при температуре не менее 100°С или проварку при этой же температуре в течение 1 ч. [6] Библиографический список: 1.Алтухов Н.Н. Краткий справочник ветеринарного врача. /Н.Н.Алтухов// Москва: «Агропромиздат». - 1990. - С. 574 2.Бакулов И.А. Эпизоотология с микробиологией. /И.А Бакулов/ - Москва: «Агропромиздат». - 1987. – С. 415. 3.Достоевский П.П., Судаков Н.А. Справочник ветеринарного врача/ П.П. Достоевский, Н.А. Судаков/. – К.: «Урожай». - 1990. – С. 784. 4.Судорчук А.А. Инфекционные болезни животных / А. А. Сидорчук/. — М.: «Колос». - 2007. —С. 671. 5.Кузнецов А.Ф. Справочник ветеринарного врача/ А.Ф Кузнецов/. – Москва: «Лань». - 2002. – С. 896. AUJESZKY'S DISEASE Galujko I., Vasilyev D. A., Molofeeva N. I. Aujeszky’s Disease is a contagious disease of domestic and wild animals. It is common throughout the world and causes great damage to the economy. 82 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии СОДЕРЖАНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ОБЛАСТИ МИКРОБИОЛОГИИ И ВИРУСОЛОГИИ 1. Воротников А., Антошкин П. Антибиотикорезистентность бактерий родов Aeromonas, Pseudomonas и Flavobacterium 10 2. Брежнева Я., Казакова А. Бактерии рода Bacillus 12 3. Сатдарова Д. Вирусы гриппа 15 4. Мурова Н. Владимир Дмитриевич Тимаков 17 5. Скорик А., Суркова Е. Изучение биологии фагов бактерий B.bronchiseptica c применением компьютерного 3-d моделирования 20 6. Долгов Н., Сосина Ю. Микробиологические исследования парфюмерно-косметических средств на примере лосьонов для тела 24 7. Логинова Е. Микробиологические характеристики бактерии Yersinia ruckeri – возбудителя болезни красного рта форели (erm) 25 8. Ульчина А. Санитарно-микробиологическое исследование компьютерных клавиатур 28 9. Щербина А., Курбанова К. Фаговый биоконтроль бактерий вида Listeria monocytogenes 31 10. Родина Ю., Первухина К. Чем можно заразиться при работе за компьютером?! 33 11. Полюх Н. Иследование скорости роста на разных питательних средах лекарсвенного съедобного гриба Coprinus comatus (O.F.Müll.) Pers 35 12. Cкульская А. Влияние PH среды на рост мицелиальной биомассы трутовика серно-желтого (Laetiporus sulphureus) 38 13. Семенова В., Кафидова А., Барсукова Т. Идентификация бактерий вида Klebsiella pneumoniae по биологическим свойствам 39 14. Кафидова А., Семенова В., Барсукова Т. Идентификация бактерий вида Pseudomonas aeruginosa по биологическим свойствам 42 15. Лифанова И., Смирнова К., Набиева А. Изучение микробной обсеменённости водопроводной питьевой воды на территории маоу СОШ №72 45 16. Миллер В. Лозгачев Г. Микробная обсеменённость клавиатуры комьютера 51 17. Пидиксеева Т. Микробная обсеменённость некоторых сухих плодов, используемых в питании человека 53 18. Барсукова Т., Семенова В., Кафидова А. Идентификация бактерий вида Enterobacter cloacae по биологическим свойствам 56 АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ БИОТЕХНОЛОГИИ (В ТОМ ЧИСЛЕ НАНОБИОТЕХНОЛОГИИ) И ИММУНОЛОГИИ 19. Шкаликова М., Шабулкина Е. К вопросу о проблемах и перспективах клонирования 60 20. Антошкин П., Воротников А. Разработка биопрепарата для утилизации органических отходов сельского хозяйства 62 21. Гурьянов Н. Синтетические пептидные вакцины 64 83 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 22. Карпюк Е. Количественное определение моноклональных антител с помощью иммуноферментного анализа 23. Ивашута В. Характеристика биотехнологических способов очистки стоков от соединений фосфора 24. Легашов П. Пудинг пониженной калорийности с пищевыми волокнами на основе вторичного молочного сырья – сыворотки 25. Цыганков О. Исследование массопереноса кислорода в пилотном ферментере 26. Чечеткина А. Реологические особенности сырного сгустка с бобовыми наполнителями ПРОБЛЕМЫ ЭПИЗООТОЛОГИИ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ 27. Степанова Л., Нестерчук В. Анализ противолейкозных мероприятий в хозяйствах ульяновской области 28. Галушко И. Болезнь ауески – ложное бешенство животных 84 66 68 70 72 74 77 79 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы VI-й Международной студенческой научной конференции, посвящённой 70-летию ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина» 14 – 15 мая 2013 года Часть I Подписано в печать 20.07.2013 Формат 60х90 1/16 Усл.п.л. 7,5. Тираж 100. Заказ Адрес издателя: 432980, г. Ульяновск, ул. Карла Марска, «Копи-компани» 85 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ДЛЯ ЗАМЕТОК 86
