58 FAS-FASL ВЗаиМодеЙСТВие ВЫЗЫВаеТ иММУнодеФиЦиТ У

58
▪ медицинские науки ▪
УДК 616‑095
Fas-FasL взаимодействие вызывает
иммунодефицит у детей, больных атопической
бронхиальной астмой с грибковой
сенсибилизацией
Н. В. Купцова, З. В. Рябинина, О. В. Тютчева, Г. В. Порядин,
Ж. М. Са лмаси, А. Н. Казимирский, А. А. Терентьев
ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет», г. Москва
Обследование двух групп детей, больных атопической бронхиальной астмой с сенсибилизацией к аллергенам домашней пыли, и детей с поливалентной сенсибилизацией
к грибковым аллергенам показало развитие иммунодефицита у больных с грибковой
сенсибилизацией. Все пациенты не получали кортикостероидных гомонов, цитостатиков, антибиотиков широкого спектра действия в период обследования. У больных
детей с поливалентной сенсибилизацией нашли иммунологическое нарушение в виде
увеличения экспрессии CD95 и CD95L антигенов. Механизм выявленного иммунодефицита, по‑видимому, связан с усилением активационного апоптоза лимфоцитов
у этих больных.
Ключевые слова: CD95, CD95L (CD178), грибковая сенсибилизация, иммунодефицит.
Fas-FasL Interaction causes an immunodeficiency
in children with a fungi sensitization of atopic
bronchial asthma
N. V. Kuptsova, Z. V. Ryabinina, O. V. Tyutcheva, G. V. Porjadin,
Z. M. Salmasi, A. N. Kazimirsky, A. A. Terentyev.
Russian state medical university, Moscow
We are observed of two groups of children with the atopic bronchial asthma with the
sensitization to allergens of a house dust and the children with a polyvalent sensitization to
fungi allergens has shown development of an immunodeficiency in patients with a fungi sensitization. All patients did not receive corticosteroids hormones, cytostatics and antibiotics
during immunological study. Atopic bronchial asthma children with a polyvalent sensitization including fungi sensitization demonstrated immunological disturbance the increasing
of expression CD95 and CD95L antigens. The mechanism of the revealed immunodeficiency,
apparently, is connected with strengthening lymphocytes activation apoptosis at these patients.
Keywords: CD95, CD95L (CD178), fungoid sensibilization, immunodeficiency.
фундаментальные исследования №6, 2010
▪ медицинские науки ▪
В последние годы отмечается неуклон-
59
Методы исследования
ный рост числа аллергических заболева-
Клиническая характеристика пациентов
ний. По прогнозам ВОЗ, в XXI веке они
с бытовой и грибковой сенсибилизацией.
займут ведущее место в структуре общей
В исследование было включено 67 пациентов,
заболеваемости. Формирование аллергиче-
из них 17 детей в возрасте 4‑6 лет, 24 ребенка
ской реактивности человека часто начина-
от 7‑11 лет, 26 детей в возрасте от 12‑14 лет
ется в детском возрасте. В связи с высокой
с бронхиальной астмой и аллергическим ри-
проницаемостью гистогематических ба-
нитом, обусловленных аллергией к бытовым
рьеров спектр потенциальных аллергенов
и грибковым аллергенам, с длительностью
у детей очень широк. Поэтому респиратор-
заболевания от 1 года до 5 лет. Диагноз брон-
ная поливалентная аллергия у детей явля-
хиальная астма и определение ее степени
ется актуальной проблемой современной
тяжести проводили на основании критери-
педиатрии [7]. Среди различных видов
ев GINA 2006, диагноз аллергический ри-
сенсибилизации при заболеваниях легких
нит — на основании критериев ARIA, 2001.
у детей существенное значение имеет гриб-
Из 67 пациентов у 19 детей диагностирована
ковая, связанная с гиперчувствительно-
бронхиальная астма средней тяжести, кон-
стью к грибам родов Aspergillus, Alternaria,
тролируемого течения. У 49 пациентов брон-
Candida, Penicillium и др. Наряду с дерма-
хиальная астма сочеталась с аллергическим
тофагоидным клещем плесневые грибы
ринитом, у 10 пациентов диагностирован
являются одним из основных аллергенных
изолированный круглогодичный аллергиче-
компонентов домашней пыли. В группе
ский ринит. Длительность заболевания у па-
больных, имеющих сенсибилизацию к до-
циентов с бронхиальной астмой в сочетании
машней пыли, сочетание аллергии к до-
с аллергическим ринитом составила от 1 года
машней пыли с аллергией к грибам обна-
до 5 лет. Отдельную группу сравнения соста-
руживается в 74 %.
вили 12 больных бронхиальной астмой с мо-
Для бронхиальной астмы, сопровождающейся грибковой сенсибилизацией, ха-
носенсибилизацией к домашней пыли.
Все дети по результатам кожного тести-
непрерывно-рецидивирующий
рования имели положительные тесты с ал-
характер и тяжелое течение заболевания,
лергеном из домашней пыли, у 60 детей
причем во многих случаях выявляется со-
из 67 наблюдались положительные результа-
четание грибковой сенсибилизации с сен-
ты кожных проб с пыльцевыми аллергенами
сибилизацией к другим группам аллерге-
и аллергенами из плесневых грибов. Данная
нов [1, 5, 8].
группа детей не получала кортикостероид-
рактерны
Цель исследования
ных гомонов, цитостатиков, антибиотиков
Определить популяционный и субпопуля-
широкого спектра действия. Из 67 больных
ционный состав лимфоцитов с учетом мар-
34 детей жили на последних и первых эта-
керов активации в периферической крови
жах зданий, у 39 на стенах в ваннах комна-
детей, больных атопической бронхиальной
тах была плесень. Почти все дети страдали
астмой с грибковой сенсибилизацией.
приступами удушья, заложенностью носа
фундаментальные исследования №6, 2010
60
▪ медицинские науки ▪
в старых жилых помещениях, в сырую по-
значение в развитии бронхиальной астмы
году поздней осенью, при уборке опавших
имеет сенсибилизация к аллергенам до-
листьев, ранней весной во время таяния
машней пыли Dermatophagides pternyssinus
снега, у 19 детей наблюдалась лекарствен-
и Dermatophagides farinae. С увеличением
ная аллергия на пенициллиновые антибио-
возраста детей возрастает значение пыль-
тики. Из 67 детей у 52 отмечалась отягощен-
цевой сенсибилизации. В то же время не-
ная наследственность по аллергическим
сомненна и роль других факторов в разви-
заболеваниям. У 50 % детей в дальнейшем
тии атопий у детей. В последние годы все
при постановке прик-тестов с аллергена-
большее внимание привлекает сенсибили-
ми плесневых грибов наблюдались поло-
зация к микроскопическим грибам. С одной
жительные результаты, практически у всех
стороны, компоненты плесневых грибов
детей с грибковой сенсибилизацией отмеча-
и их спор обладают высокой сенсибилизи-
лась умеренно или сильно выраженная сен-
рующей активностью [3, 7]. С другой сто-
сибилизация к аллергену из домашней пыли
роны, продукты жизнедеятельности грибов
и пыльцевым аллергенам.
и их споры обладают выраженным действи-
При оценке значимости разных видов гри-
ем на клетки иммунной системы, вызывая
бов в сенсибилизации детей было показано,
изменение реактивности организма [8]. Это,
что в старшей возрастной группе частота
в свою очередь, может привести к усилению
сенсибилизации к грибам родов Aspergillus
синтеза IgE и, как следствие, способство-
встречается примерно с одинаковой часто-
вать развитию сенсибилизации и на другие
той. В то же время у детей младших воз-
аллергены. Следовательно, можно предпо-
растных групп сенсибилизация к грибам
ложить, что наличие поливалентной сенси-
рода Aspergillus встречается чаще.
билизации, включающей сенсибилизацию
Иммунологические методы исследования.
к антигенам грибов, может вызвать суще-
Лимфоциты больных выделяли в градиенте
ственные изменения в иммунной системе
плотности фиколл-верографина по методу
по сравнению с атопиями с сенсибилизаци-
Boyum. Определение относительного со-
ей только к аллергенам домашней пыли.
держания в периферической крови лимфо-
Для проверки данного предположения мы
цитов, экспрессирующих антигены CD3,
провели сравнение поверхностно фенотипа
CD4, CD8, CD16, CD56, CD20, CD72, CD23,
лимфоцитов периферической крови 2 групп
CD25, CD54, CD71, HLA-DR, CD95, CD178,
больных: атопической бронхиальной аст-
мембранные
mIgM
мой с сенсибилизацией к домашней пыли
и mIgG, с помощью отечественных моно-
и атопической бронхиальной астмой с по-
клональных антител ЛТ и ИКО в реакции
ливалентной сенсибилизацией. В качестве
непрямой иммунофлюоресценции.
контроля
иммуноглобулины
оценивали
иммунологические
Результаты исследования
параметры группы практически здоровых
Развитие клинических проявлений атопии
детей.
в значительной степени связано с природой этиологического фактора. Наибольшее
фундаментальные исследования №6, 2010
Оценка
популяционного
состава
Т-лимфоцитов показала, что для всех ато-
61
▪ медицинские науки ▪
пий характерна тенденция к снижению со-
цитов γ-интерферона, являющегося стиму-
держания в крови цитотоксических лим-
лятором цитотоксических лимфоцитов.
фоцитов CD8+ (табл. 1). Это объясняется
изменением баланса активности Th1 / Th
2
В то же время у больных с поливалентной
сенсибилизацией
наблюдается
до-
лимфоцитов и, как следствие, снижением
стоверное снижение содержания в крови
синтеза основного медиатора Th-1 лимфо-
Т-лимфоцитов, связанное, в первую очеТаблица 1
Сравнительная характеристика популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов у детей
с поливалентной сенсибилизацией и атопическими реакциями на домашнюю пыль
Маркеры
Здоровые
дети,
n=10
CD3
CD4
CD8
64,83±2,98
38,08±1,49
28,1±1,45
Больные с сенсибилизацией Больные с поливалентной
к домашней пыли,
сенсибилизацией,
n=12
n=14
Содержание лимфоцитов в %
61,75±1,75
55,32±1,66*
38,03±1,12
33,10±1,58*
25,81±1,62
25,04±2,43
Примечание: *-p<0,05; достоверность различий указана между группами атопических
больных
редь, со снижением содержания в крови
Оценка
состояния
популяции
В-лимфоцитов у обследуемых больных по-
Т-хелперов.
При оценке субпопуляций NK-клеток было
казала, что при сенсибилизации к домашней
выявлено достоверное снижение содержания
пыли содержание этих клеток в крови до-
в крови больных с поливалентной сенсибили-
стоверно увеличено, в то время как при по-
зацией CD16+-лимфоцитов. Если у больных
ливалентной сенсибилизации этот показа-
с сенсибилизацией к домашней пыли этот
тель ниже, чем у здоровых людей (p<0,05).
показатель составил 16,03±4,06 %, то у боль-
Содержание в крови лимфоцитов, несущих
ных с поливалентной сенсибилизацией —
поверхностные IgM и IgG, было увеличено
9,59±1,58 %.
во всех группах больных, однако у больных
Таблица 2
Сравнительная характеристика популяций и субпопуляций В-лимфоцитов у детей
с поливалентной сенсибилизацией и атопическими реакциями на домашнюю пыль
Маркеры
CD20
CD72
IgM
IgG
Здоровые дети n=10
17,00±1,26
11,16±1,17
5,25±0,43
6,21±1,23
Больные
Больные с сенсибилизацией
с поливалентной
к домашней пыли, n=12
сенсибилизацией, n=14
Содержание лимфоцитов в %
21,72±1,13
13,39±1,87*
12,15±0,79
10,03±1,37
13,02±1,05
8,33±2,31*
15,55±0,99
9,54±1,87*
Примечание: *-p<0,05; достоверность различий указана между группами атопических
больных
фундаментальные исследования №6, 2010
62
▪ медицинские науки ▪
с поливалентной сенсибилизацией оно было
та у обследуемых больных с поливалентной
достоверно ниже, чем у больных с сенсиби-
сенсибилизацией с наличием сенсибили-
лизацией к домашней пыли (табл. 2). Срав-
зации к плесневым грибам. Поэтому сле-
нение содержания основных популяций
дующим этапом наших исследований стало
и субпопуляций лимфоцитов в перифери-
изучение содержания в крови обследуемых
ческой крови больных с сенсибилизацией
больных лимфоцитов, экспрессирующих
к домашней пыли и поливалентной сенси-
поверхностные активационные антигены
билизацией позволяет сделать вывод о на-
(табл. 3). Содержание в крови лимфоцитов,
личии у больных с поливалентной сенсиби-
экспрессирующих низкоафинный рецептор
лизацией изменений в крови, характерных
для IgE CD23, было повышено в обеих груп-
для иммунодефицитного состояния. Это
пах больных. Количество лимфоцитов, экс-
проявляется одновременным снижением со-
прессирующих ранние маркеры активации
держания в крови Т-лимфоцитов (CD3+),
CD25 и CD71 у больных с сенсибилизаци-
В-лимфоцитов
ей к домашней пыли, не превышало пока-
(CD20+)
и NK-клеток
зателей здоровых детей, что отражает от-
(CD16+).
Ранее проведенные исследования по-
сутствие процессов активации лимфоцитов
казали, что при сенсибилизации к домаш-
у этих детей в стадию ремиссии (табл. 3).
ней пыли, к пыльце растений и эпидер-
У больных с поливалентной сенсибилизаци-
мису животных наблюдается активация
ей, несмотря на клиническую ремиссию, со-
В-клеточного звена иммунной системы [9].
держание CD25+ и CD71+ было достоверно
Аналогичные результаты приведены и в ли-
повышено (p<0,05).
тературе [6, 2]. Эти данные позволяют свя-
Содержание в крови лимфоцитов, экс-
зать наблюдаемое развитие иммунодефици-
прессирующих рецептор адгезии CD54
Таблица 3
Сравнительная характеристика поверхностных активационных маркеров
лимфоцитов у детей с поливалентной сенсибилизацией и атопическими реакциями
на домашнюю пыль
Маркеры
CD23
CD25
CD71
HLA-DR
CD54
CD95
CD178
Здоровые дети n=106
6,00±0,95
5,91±1,49
5,66±1,41
13,80 ±1,73
5,46±1,39
9,20 ±0,82
5,30±0,96
Больные
с сенсибилизацией
к домашней пыли, n=12
Содержание лимфоцитов в %
13,49±0,86
5,30±0,87
3,91±1,43
10,74 ± 2,93*
11,77±4,02
5,13 ± 2,52
4,82±2,34
Больные с поливалентной
сенсибилизацией, n=14
10,07±2,43
10,24±2,29*
10,09±2,14*
14,57±1,39
12,30±2,76
9,57±1,55*
16,66±2,44*
Примечание: *-p<0,05; достоверность различий указана между группами больных атопиями
фундаментальные исследования №6, 2010
▪ медицинские науки ▪
63
(ICAM1), было повышено в обеих груп-
процесса в лимфоцитах с сенсибилизаци-
пах больных, что подтверждает изменение
ей к плесневым грибам.
системы
Таким образом, результаты проведенного
при аллергии и в стадии ремиссии. Наибо-
изучения нарушений в иммунной системе
лее интересные результаты были получены
больных с поливалентной сенсибилизаци-
при изучении особенностей индукции Fas-
ей выявили развитие иммунодефицитного
зависимого апоптоза при аллергических
состояния, проявляющегося снижением со-
состояниях. Содержание в крови лимфоци-
держания в крови Т-, В- и NK-лимфоцитов.
тов, экспрессирующих рецептор индукции
Механизм выявленного иммунодефицита,
апоптоза CD95 у больных с сенсибилиза-
по‑видимому, связан с усилением акти-
цией к домашней пыли, было достоверно
вационного апоптоза лимфоцитов у этих
снижено (p<0,05), в то время как в группе
больных. По-видимому, ведущую роль
больных с поливалентной сенсибилизаци-
в формировании развившихся нарушений
ей оно было близко к показателям здоро-
играет развитие сенсибилизации к плесне-
вых детей. Напротив, содержание в крови
вым грибам.
функционирования
иммунной
CD178+-лимфоцитов, несущих Fas-лиганд,
запускающих апоптоз в клетках, было резко
Работа поддержана грантом РГНФ
№ 09‑06‑00241а.
повышено в группе больных с поливалент-
Список литературы
ной сенсибилизацией.
1. Лебедева Т. Н. Патогенез аллергии
Результаты исследования позволяют заключить, что у больных с поливалентной
к candida species // Проблемы медицинской
микологии. — 2004. — Т. 6, №.1. — С. 3‑8.
сенсибилизацией наблюдается высокое
2. Baranova N..I, Kostina E. M. Parameters
содержание в крови лимфоцитов, несу-
of the immune status in patients with allergic
щих рецептор для запуска Fas-зависимого
airway diseases with bacterial sensitization //
апоптоза, и резкое повышение содержания
Klin Lab Diagn. — 2009. — № 8. — P. 21‑23.
в крови лимфоцитов, несущих Fas-лиганд,
3. Corry D. B., Kheradmand F. Toward a
запускающих процессы апоптоза. Это по-
comprehensive understanding of allergic lung
зволяет нам предположить, что у боль-
disease // Trans Am Clin Climatol Assoc. —
ных с поливалентной сенсибилизацией
2009. — Vol. 120. — P. 33‑48.
интенсивность апоптоза лимфоцитов су-
4. Gaffin J. M., Phipatanakul W. The role of
щественно выше, чем у больных с сенси-
indoor allergens in the development of asthma //
билизацией к домашней пыли. Поскольку
Curr Opin Allergy Clin Immunol. — 2009. —
по данным литературы сочетание сенси-
Vol. 9, № 2. — P. 128‑135.
билизации к пыльце растений, эпидерми-
5. Gruchalla R. S., Pongracic J., Plaut M.,
су животных и домашней пыли не дает
Evans R., Visness C. M., Walter M., Crain E. F.,
кардинальных отличий в иммунограмме
Kattan M., Morgan W. J., Steinbach S., Stout J.,
по сравнению с моносенсибилизацией
Malindzak G., Smartt E., Mitchell H. // J Allergy
на домашнюю пыль [10,4, 9], мы связали
Clan Immunol. — 2005. — Vol. 115, № 3. —
выявленное
P. 478‑485.
усиление
апоптотического
фундаментальные исследования №6, 2010
64
▪ медицинские науки ▪
S.,
Smartt E., Mitchell H. E. // J Allergy Clin
Knutsen A. P. Increased sensitivity to IL-4
Immunol. — 2010. — Vol. 125, № 3. —
in patients with allergic bronchopulmonary
P. 593‑599.
6.
Khan S.,
McClellan
J. aspergillosis // Int Arch Allergy Immunol. —
2000. — Vol. 123, № 4. — P. 319‑326.
7. Madani Y., Barlow A., Taher F. Severe
asthma with fungal sensitization: a case report
and review of literature // J Asthma. — 2010.
Pongracic J. A.,
Poriadin Salmasi G. V.,
Zh. M.,
Orshanko A. M.,
Latysheva T. V.,
Kazimirskiĭ A. N. // Patol Fiziol Eksp Ter. —
2009. — № 1. — P. 23‑25.
10. Thunberg S., Akdis M., Akdis C. A.,
Grönneberg R., Malmström V., Trollmo C., van
Vol. 47, № 1. — P. 2‑6.
8.
9.
O’Connor G. T.,
Muilenberg M. L., Vaughn B., Gold D. R.,
Kattan M., Morgan W. J., Gruchalla R. S.,
фундаментальные исследования №6, 2010
Hage M., Gafvelin G. // Clin Exp Allergy. —
2007. — Vol. 37, № 8. — P. 1127‑1136.