Введение Мезенхимальные стволовые клетки, происходящие от

Мезенхимальные стволовые клетки,
происходящие от жировых тканей человека,
выделяют связанные с неприлизином функциональные экзосомы.
1,2
3
1
1
3
3
1
Takeshi Katsuda , Reiko Tsuchiya , Nobuyoshi Kosaka , Yusuke Yoshioka , Kentaro Takagaki , Katsuyuki Oki , Fumitaka Takeshita ,
2
4
1
Yasuyuki Sakai , Masahiko Kuroda & Takahiro Ochiya
1. From the Division of Molecular and Cellular Medicine, National Cancer Center Research Institute, 5-1-1 Tsukiji, Chuo-ku, Tokyo 104-0045, Japan
2. Institute of IndustrialScience (IIS), The University of Tokyo, 4-6-1 Komaba, Meguro-ku, Tokyo 153-8505, Japan
3. Research and Development Dept., seems Inc., 2-4-32 Aomi, Koto-ku, Tokyo 135-0064, Japan
4. Department of Pathology, Tokyo Medical University, 6-1-1, Shinjuku, Shinjuku-ku, Tokyo, 160-8402, Japan
Введение
Болезнь Альцгеймера, это нейродегенеративное заболевание, основным синдромом которого является дисфункция мозга. Предполагается, что в 2020 г в Японии у примерно 10% л
людей в
возрасте за 80 лет будет деменция, и у примерно 70% из них будет болезнь Альцгеймера. Поэтому надеются на скорейшее установление методов профилактики и лечения этой бо
болезни.
Причиной болезни Альцгеймера считается некроз нервных клеток в результате накопления или повышения концентрации белка β-амилоида (Aβ).
ингиб
На основе гипотезы, что причиной этой болезни является Aβ, в настоящее время в клинических испытаниях осуществляются иммунотерапия против амилоида с помощью ингибиторов
β-секретазы и γ-секретазы (ферменты, образующие Aβ), но многие из этих испытаний прекращены из-за сильных побочных действий.
с
Aβ образуется тем, что часть белка-предшественника амилоида отрезывается ферментами, называемыми β-секретазой и γ-секретазой. Для основательного лечения необходимо снизить
уровня Aβ в головном мозге. Кроме того, подтверждено, что в процессе разложения Aβ участвует неприлизин, являющийся протеазой и уменьшающийся по мере старения и ухудшения
ухуд
болезни Альцгеймера. Полагается, что активация неприлизина в головной мозге позволит смягчить симптомы болезни Альцгеймера.
происхожд
В этом исследовании рассмотрели лечебный эффект, проводя сравнение уровней экспрессии неприлизинов, образованных мезенхимальными клетками жирового происхождения
и
мезенхимальными клетками костномозгового происхождения.
Результаты
Экспрессия иРНК
Экспрессия белка
Relative expression
NEP/β-actin
12
ADSC
♯1 ♯2
10
8
6
♯3
BM-MSC
♯2 ♯3
♯1
♯4
NEP
4
3.30
2
0
♯1 ♯2 ♯3 ♯4 ♯5 ♯6 ♯1 ♯2 ♯3 ♯4
ADSC
5.09 3.14 1.12 0.87 1.03 0.97
Actin
BM-MSC
Выделили мезенхимальные стволовые клетки жирового происхождения и костномозгового
происхождения разных доноров, и сравнили уровни экспрессии иРНК неприлизина по
методу количественной ПЦР.
[ ADSC: мезенхимальные стволовые клетки жирового происхождения,
BM-MSC: мезенхимальные стволовые клетки костномозгового происхождения ]
По методу «верстерн-блоттинг» определили уровень неприлизина в ADSC и BM-MSC.
BM
Экспрессия белка на поверхности клеток
Экспрессия белка на поверхности клеток
BM-MSC
350
Fluorescent intensity
ADSC
250
♯1
300
♯2
250
♯3
200
PBS
ADSC
ADSC ♯4
♯1
200
♯2
♯4
150
100
PBS
100
50
50
0
0
0
-50
BM-MSC
♯3
150
10
20
30
40
0
10
20
30
40
-50
lncubation time［min］
С помощью проточного цитометра определили уровень неприлизина, экспрессирующегося
на поверхности ADSC и BM-MSC.
искусстве
Подготовили клеточный экстракт ADSC и BM-MSC, и с помощью искусственного
экстр
флуорогенного субстрата определили активность β-амилоида в экстракте.
(PBS: фосфатный буферный раствор)
Заключение
Показано, что ADSC экспрессирует больше неприлизина и более эффективно разлагает β-амилоид, чем BM-MSC. Это подсказывает возможность применения ADSC для лечения болезни
болез
Альцгеймера
Альцгеймера.
Russian