Т-клеточное звено иммунитета Несмиянов П. П., доцент кафедры иммунологии и аллергологии ВолгГМУ Outline 1. Т-клеточное звено иммунитета. Клеточная основа 2. Дифференцировка Т-лимфоцитов 3. Понятие о регуляторной и цитотоксической функциях Т-клеток 4. Механизмы распознавания антигенов 5. Выбор пути Т-клеточного ответа (CD4+/CD8+) 6. Методы изучения Т-клеточного иммунитета Клеточная основа Т-клеточного звена иммунитета – Тлимфоциты (удивительно) LM 0.77 - 2.68 x 106/ml CD4+: 0.53 - 1.76 x 106/ml CD8+: 0.30 - 1.03 x 106/ml SEM Созревание и дифференцировка Т-лимфоцитов Реарранжировка βTCR Клетки-няньки Созревание и дифференцировка Т-лимфоцитов Выделяют следующие типы эпителиоретикулоцитов: I тип – расположены на границе с перегородками и капсулой, окружают сосуды коркового вещества, формируют барьер II тип находятся внутри коркового вещества и окружают тимоциты. Эти клетки имеют отростчатую форму и карманы, в которых расположены лимфоциты. Регулируют деление и дифференцировку лимфоцитов, поэтому их также называют «клетки-няньки» (Nurse Cells) III тип образуют функциональный барьер между корковым и мозговым веществом. Презентируют тимоцитам антигены собственного организма IV тип находятся в мозговом веществе. Вместе с III типом образуют барьер между корковым и мозговым веществом и участвуют в селекции V тип формируют каркас мозгового вещества VI тип – секреторно активные клетки, образующие эпителиальные слоистые тельца – тельца Гассаля. Секретируют тимозин и тимопоэтин Созревание и дифференцировка Т-лимфоцитов Созревание и дифференцировка Т-лимфоцитов Два класса Т-клеточного рецептора Реарранжировка цепей TCR Созревание и дифференцировка Т-лимфоцитов Нарушения дифференцировки Т-лимфоцитов Механизм распознавания антигенов: вспоминаем презентацию антигена Механизм распознавания антигенов и активации Т-клетки Механизм передачи сигнала от TCR Он же Т-киллинг и Т-хелпинг – на следующих лекциях! Методы изучения Т-клеточного иммунитета Методы изучения Т-клеточного иммунитета: MHC-тетрамеры Методы изучения Т-клеточного иммунитета: MHC-тетрамеры Методы изучения Т-клеточного иммунитета: ELISPOT Cultured ELISPOT to detect central memory capsid T cells in human. PBMCs from human were expanded in vitro prior to assay as follows. Freshly isolated cells are cultured for 7 days in medium with peptides pools in the presence of hIL2 and hIL-7 at 2x10^6 cells/ml. Cells are harvested and analyzed by ELISPOT measuring production of IFN-γ. The data are presented for two samples, one that showed high frequencies in most peptide pools and one in which the frequencies were intermediate. Indicated are the peptide pools for the different serotypes 2, 7, 8 and 9. SEB and PMA are positive controls. Методы изучения Т-клеточного иммунитета: ELISPOT Методы изучения Т-клеточного иммунитета:пролиферация Методы изучения Т-клеточного иммунитета: CFSE PBMCs isolated from a Cynomolgus macaque were stained with 5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester and stimulated with PHA for 3 days. PBMCs were also stained for CD4 and CD8 Методы изучения Т-клеточного иммунитета: спектратипирование ТКР Спектратипирование ТКР Методы изучения Т-клеточного иммунитета: апоптоз Методы изучения Т-клеточного иммунитета: апоптоз Методы изучения Т-клеточного иммунитета: апоптоз Методы изучения Т-клеточного иммунитета: апоптоз in vivo Методы изучения Т-клеточного иммунитета: ППР Методы изучения Т-клеточного иммунитета: цитотоксичность Методы изучения Т-клеточного иммунитета: специфические популяции Методы изучения Т-клеточного иммунитета: специфические популяции Методы изучения Т-клеточного иммунитета: метод лимитирующих разведений