Абай Гаухар

advertisement
АННОТАЦИЯ
диссертации на соискание ученой степени доктора философии (PhD) по
специальности 6D070100 – «Биотехнология»
Абай Гаухар
Совершенствование биотехнологических методов получения гонадотропных
гормонов и их использование в трансплантации эмбрионов у овец
Общая характеристика работы. Диссертационная работа относится
к
прикладным исследованиям в области биотехнологии и посвящена к решению
актуальной проблемы производства остродефицитных отечественных гормональных
препаратов, используемых в воспроизводстве сельскохозяйственных животных.
Актуальность темы исследования. Животноводство – одна из ведущих
отраслей аграрного сектора Республики Казахстан. В докладе ФАО отмечается, что
животноводство - динамичная отрасль сельского хозяйства, на которую приходится
40% валовой продукции сельского хозяйства и обеспечивает средства к существованию
и продовольственную безопасность для почти миллиарда человек на планете.
Одним из ключевых факторов устойчивого развития животноводства является
интенсификация
ускоренного
воспроизводства
высокоценных
генотипов
сельскохозяйственных животных.
На сегодняшний день для повышения сохранности поголовья, регулирования
процессов размножения и плодовитости сельскохозяйственных животных особо важно
применение гормонов и гормонально активных препаратов. Апробированным в
производстве биопрепаратом является гонадотропин сыворотки жеребых кобыл,
который эффективно применяется для ускорения темпов воспроизводства
сельскохозяйственных животных.
В настоящее время в Республике Казахстан не производят гормональные
препараты
для
индукции
полиовуляции
и
повышения
плодовитости
сельскохозяйственных животных. В воспроизводстве сельскохозяйственных животных
применяются дорогие, импортные препараты зарубежных фирм. Между тем, в
Республике имеются все предпосылки для производства отечественных гормональных
препаратов высокого качества альтернативных импортным. Тем более, без них
внедрение
биотехнологических
методов
в
ускоренном
воспроизводстве
высокопродуктивных сельскохозяйственных животных невозможно. Следовательно,
производство гормональных препаратов для ускоренного воспроизводства
сельскохозяйственных животных является актуальным.
В свое время, в г. Шымкент функционировала специализированная
биолаборатория по выпуску сыворотки жеребых кобыл, где ежегодно производилось
300-500 тысяч овцедоз нативного сыворотки жеребых кобыл, для воспроизводства
сельскохозяйственных животных, которая обеспечивала потребности в биопрепаратах.
Однако в последующем, в период перехода к рыночной экономике из-за ослабления
ресурсов биопродуцентов, производство сыворотки жеребых кобыл прекратилось.
На сегодняшний день в Республике Казахстан численность поголовья лошадей
достигла 1,5 млн. голов, что дает реальные возможности для возобновления,
изготовления и внедрения в производство гормонально активных препаратов для
динамичного развития отрасли животноводства.
Объекты исследования - кобылы-доноры породы «джабе», овцематки-доноры
каракульской породы овец.
Предмет исследования - биопрепараты сыворотки жеребых кобыл и
гонадотропин сыворотки жеребых кобыл, эмбрионы каракульских овец.
Цель и задачи работы. Целью работы является совершенствование технологии
получения гонадотропина сыворотки жеребых кобыл и использование его в
трансплантации эмбрионов у овец для увеличения суперовуляции и выхода большего
количества качественных эмбрионов.
Задачи исследования:
- установить жеребость у отобранных кобыл-доноров и получить от них нативные
моносыворотки различных серий;
- определить гонадотропную активность и соотношение фолликулостимулирующего и
лютеинизирующего гормонов в полученных образцах моносывороток;
- установить оптимально-репродуктивные дни жеребости у отобранных кобыл-доноров
разных возрастов;
- исследовать выход гонадотропных гормонов из исходного сырья после осаждения от
балластных белков;
- установить влияние биологических факторов у доноров на активность полученного
гонадотропина;
- провести экспериментальную оценку реакции яичников овец доноров
на полученный гонадотропин сыворотки жеребых кобыл (ГСЖК) нового образца.
Методы исследования: Экспериментальные работы были проведены на лошадях
казахской породы типа «джабе», а также на овцематках каракульской породы в
крестьянском хозяйстве «Жайлау» который расположен в Сузакском районе ЮжноКазахстанской области.
Лабораторные исследования для определения гормональной диагностики
жеребости кобыл на половозрелых самцах озерной лягушки, а также определение
соотношения фолликулостимулирующего и лютеинизирующего гормонов в препаратах
сыворотки жеребых кобыл и гонадотропина сыворотки жеребых кобыл методом
«ИФА-ФСГ/ЛГ», определение гонадотропной активности на неполовозрелых самках
белых мышей проводились в лаборатории Юго-Западного научно-исследовательского
института животноводства и растениеводства и в ЮКОФ РГП на ПХВ
«Республиканская ветеринарная лаборатория».
Научная новизна исследования. На основе изучения биологических факторов
влияющих на активность моносывороток, получены качественно новые данные,
способствующие повышению репродуктивного потенциала кобыл-доноров и
получению гонадотропных гормонов с высокой биологической активностью.
Впервые установлены оптимальные репродуктивные дни жеребости кобылдоноров и научно обосновано селективное значение их отбора в качестве продуцентов
гонадотропина сыворотки жеребых кобыл;
Разработан эффективный способ отбора жеребых кобыл для изготовления
нативной сыворотки жеребых кобыл и получения высокоактивных гонадотропных
гормонов из исходного сырья с учетом соотношения фолликулостимулирующего и
лютеинизирующего гормонов;
Доказана целесообразность внедрения нового способа в технологию получения
гонадотропина из сыворотки жеребых кобыл, с последующим использованием
полученного биопрепарата при индукции суперовуляции у овцематок-доноров;
Рекомендованы
научно-обоснованные
предложения
по
производству,
обеспечивающие повышение выхода гонадотропного гормона из исходного сырья и
получению большего числа эмбрионов от гормонально обработанных донорововцематок.
Теоретическая значимость работы. На основе корреляционного и
дисперсионного анализа выявлены факторы, влияющие на выход гонадотропных
гормонов из сыворотки жеребых кобыл полученных от кобыл разного возраста и с
разными сроками жеребости.
Практическая ценность работы. Разработанный новый способ получения
высокоактивных гонадотропных гормонов на основе выявления наилучших
репродуктивных дней жеребости кобыл-доноров, определения гонадотропной
активности и выявления оптимального соотношения фолликулостимулирующего и
лютеинизирующего гормонов в исследуемых биопрепаратах имеет большое
практическое значение и может с успехом применяться для ускоренного
воспроизводства
и
регулирования
процессов
размножения,
плодовитости
сельскохозяйственных животных. Данный способ позволяет повысить точность отбора
потенциальных жеребых кобыл в качестве доноров продуцентов сыворотки жеребых
кобыл, получить гонадотропин сыворотки жеребых кобыл с активностью не менее 300
м.е./мл, с соотношением фолликулостимулирующего и лютеинизирующего гормонов в
пределах 3/1-4/1, повысить выход гонадотропина из сыворотки жеребых кобыл на
31,7%, выход сухого гонадотропина в расчете на 1 литр сыворотки жеребых кобыл на
17,8%, увеличить число доноров с суперовуляцией на 2,3 раза, повысить число
эмбрионов в 1,5 раза.
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Отобраны кобылы породы «джабе» в количестве 16 голов разного возраста от
3-х до 10-ти лет и установлены их сроки жеребости.
2. Исследован биологический потенциал отобранных кобыл-доноров, который
позволяет получить моносыворотки с высокой гормональной активностью и
оптимальным соотношением фолликулостимулирующего и лютеинизирующего
гормонов.
3. Установлены репродуктивные дни жеребости кобыл-доноров для получения и
изготовления биопрепаратов с высокой гонадотропной активностью.
4. Определен выход гонадотропных гормонов из сыворотки жеребых кобыл при
осаждении от балластных белков.
5. Изучено влияние биологических факторов у доноров на активность
полученного гонадотропина после осаждения от балластных белков;
6. Использование готового биопрепарата в трансплантации эмбрионов у овец
увеличивает число доноров с суперовуляцией и обеспечивает повышение числа
эмбрионов.
Публикации. Основные научные результаты диссертации отражены в 15
научных работах, из них 4 в научных изданиях рекомендованных Комитетом по
контролю в сфере образования и науки МОН РК, 2 статьи в научных изданиях
входящих в международную базу данных Scopus, 6 работ в материалах международных
конференций, в том числе 5 работ в материалах зарубежных конференций, 3 статьи
входящих в базу данных РИНЦ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 154
страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы,
материалов и методов исследований, результатов и обсуждения, заключения и списка
использованных источников, который составляет 200 наименований. Работа содержит
34 таблицы, 20 рисунков и 11 приложений.
Download