МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА Утверждаю

МИНИСТЕРСТВО
СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
(Минсельхоз России)
Утверждаю
Заместитель руководителя
Департамента ветеринарии
Е.А.Непоклонов
ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ
25.10.2000г.
№13-7-2/2160
Методические указания
по ускоренному санитарно-бактериологическому
контролю сырья и продукции животного и растительного
происхождения на наличие сальмонелл,
энтеропатогенных эшерихий и иерсиний
1.Общие положения
1.1. Ускоренный контроль санитарного качества сырья и продукции
животного и растительного происхождения по показателям наличия или
отсутствия в них сальмонелл, энтеропатогенных эшерихий и иерсиний
основан на реакции коагглютинации (РКОА) и микрокоагглютинации,
позволяющих выявить в первичных смешанных культурах микробов Оантигены сальмонелл серологических групп A; B1;C1; С2, Д1 Е1 (наиболее
частых возбудителей пищевых токсикоинфекций людей и возбудителей
сальмонеллеза сельскохозяйственных животных), адгезивные антигены
эшерихий (К88, К99, 987Р, F41, А20), образуемые энтеропатогенными и
энтеротоксигенными штаммами Escherichia coli, а также патогенными
штаммами иерсиний видов Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis, имеющие плазмиды патогенности.
Положительный результат РКОА и реакции микрокоагглютинации
следует рассматривать как сигнальную оценку, после которой (при
необходимости)
выделенные
культуры
энтеробактерий
подлежат
дальнейшему изучению общепринятым бактериологическим методом с целью
их родовой и видовой идентификации.
1.2. РКОА и реакция микрокоагглютинации обладают специфичностью,
высокой чувствительностью и позволяют обнаруживать искомые бактерии как
в чистых, так и в смешанных культурах.
РКОА основана на взаимодействии золотистого стафилококка штамма
Cowan-1, предварительно сенсибилизированного антителами определенной
специфической агглютинирующей сыворотки, с О-антигенами сальмонелл,
адгезивными антигенами эшерихий, плазмидами патогенности иерсиний, что
приводит к образованию хорошо заметного агглютината на стекле спустя 2-3
минуты после смешивания компонентов реакции.
Сущность реакции микрокоагглютинации, как и участвующие в ней
компоненты (антиген и специфические коагглютинирующие диагностикумы),
ничем не отличаются от обычной РКОА. Преимущество первой заключается в
возможности получения более быстрого результата за счет исследования
молодых культур бактерий в жидкой среде, которые после кратковременного
контакта с коагглютинирующими диагностикумами образуют мелкие
скопления микробных клеток (агглютинат), видимые при микроскопии
окрашенных мазков.
1.3. Компонентами РКОА, которую можно проводить разными способами,
являются: испытуемый материал, (чистая или смешанная культура бактерий)
и коагглютинирующие сальмонеллезные, эшерихиозные и иерсиниозный
диагностикумы (2%-ная взвесь убитого стафилококка штамм Cowan-1,
сенсибилизированная
антителами
специфической
агглютинирующей
сыворотки: сыворотки диагностической сальмонеллезной адсорбированной,
производства Санкт-Петербургского НИИ вакцин и сывороток; сыворотки
агглютинирующей эшерихиозной к адгезивным антигенам К88, К99, 987Р,
F41 и А20, производства НПФ «ДИАВАК», г. Обленск; сыворотки
диагностической к вирулентным иерсиниям (СВИ), производства СанктПетербургского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера), или
испытуемый материал (чистая или смешанная культура бактерий),
специфическая агглютинирующая сыворотка в рабочем разведении, 2%-ная
взвесь несенсибилизированного убитого стафилококка штамма Cowan-1.
2. Взятие проб материала и подготовка их к исследованию
2.1. Пробы материалов для исследования отбирают согласно правилам и в
количествах предусмотренных следующими ГОСТами:
Мясо птицы. Субпродукты и полуфабрикаты птичьи.
ГОСТ Р 50396.0-92
Методы отбора проб и подготовка к микробиологическим исследованиям
Мясо.
Методы отбора образцов и
органолептические методы определения свежести
ГОСТ
Колбасные изделия и продукты из свинины,
Баранины, говядины и мяса других видов убойных
животных и птиц Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 9792-73
Продукты пищевые и вкусовые
Методы отбора проб для микробиологических анализов
ГОСТ 26668-85
Молоко и молочные продукты
ГОСТ 13928-84
Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 26809-86
Яичный порошок
Правила отбора проб для микробиологического анализа
ГОСТ 2858-82
Продукты яичные мороженые
Яйца отбирают по 5 шт. из шести разных мест обследуемой
партии (в первую очередь хранившиеся более 7 суток).
Исследованию подлежат желтки 5 яиц, объединенные в одну пробу.
7269-79
ОСТ 49197-83
Комбикорма, сырье.
Правили отбора проб для микробиологического
анализа
ГОСТ 13496.0-80
Зерно.
Правила отбора проб для микробиологического
анализа
ГОСТ 13586.3-83
Подготовку проб материалов, подлежащих исследованию на
наличие сальмонелл и энтеропатогенных эшерихий, проводят в
соответствии с ГОСТами «Методы бактериологического анализа» на
каждый вид сырья и продукции животного и растительного
происхождения.
Для обнаружения иерсиний из каждой пробы материала, имеющего
плотную консистенцию, берут навеску в 25 г и стерильными ножницами
нарезают ее на мелкие кусочки, которые помещают в стерильную
фарфоровую ступку с небольшим объемом стерильной дистиллированной
воды или физиологического раствора, а затем тщательно растирают
стерильным пестиком. К полученной суспензии добавляют стерильную
дистиллированную воду или физиологический раствор до объема 100-125
куб.см.
Из каждой пробы материала, имеющего жидкую или полужидкую
консистенцию, навеску в количестве 25 г разводят в стерильной
дистиллированной воде или физиологическом растворе, разлитых в
колбах по 100 куб.см. Таким же образом поступают при исследовании
сыпучих продуктов, кормов и сырья, при этом колбу с содержимым
закрывают резиновой пробкой и тщательно встряхивают ее в течение 4-5
минут.
Верхнюю часть приготовленных и отстоявшихся в течение 10-15
минут суспензий материалов автоматической мерной пипеткой разливают
в лунки стандартной полистироловой пластины в объеме по 0,3-0,4 куб.см ,
заменяя наконечник пипетки после каждой пробы материала. Чернилами
для стекла маркируют пробы на широком крае полистироловой пластины,
а затем подвергают суспензии «холодовой» обработке. С этой целью
пластину с содержимым помещают в морозильную камеру бытового
холодильника (минус 12- 18°С) и выдерживают ее в течение 20-24 ч. При
наличие специальной морозильной камеры, создающей температуру
минус 28 - 30°С, пластину выдерживают 30-40 минут.
Извлеченный из морозильной камеры замороженный материал
оттаивают при комнатной температуре, после чего в лунки с суспензиями
проб вносят автоматической пипеткой по 0,3-0,4 куб.см 0,5%-ного раствора
КОН, компоненты в лунках размешивают путем осторожного
встряхивания полистироловой пластины, не отрывая ее от поверхности
стола, и выдерживают смесь при комнатной температуре в течение 2-3
минут, затем ее засевают на плотные селективные питательные среды в
чашках.
Указанный метод подготовки проб материалов (способ «холодового удара» с последующим воздействием раствора щелочи) позволяет сохранить жизнеспособность преобладающего количества клеток
иерсиний, тогда как большинство клеток
других родов и видов
энтеробактерий погибает, в результате чего повышается возможность
обнаружения искомых бактерий.
3. Порядок исследования проб материалов
3.1. Обнаружение сальмонелл в первичных культурах, полученных
а среде накопления (селенитовом бульоне, магниевой среде и др.) после
посева проб исследуемого сырья и продуктов, проводят в РКОА или в
реакции
микрокоагглютинации,
не
нарушая
порядка
их
бактериологического анализа, предусмотренного соответствующими
ГОСТами.
3.1.1. Для постановки РКОА используют 16-18 часовую культуру
бактерий в среде накопления, а при необходимости еще и культуру на
плотной селективной среде (агаре Плоскирева, висмут-сульфит агаре).
Постановку реакции осуществляют одним из способов, указанных в п.п.
3.1.1.1 ,3.2.1.1 и 3.3.1.
3.1.1.1. На чистую обезжиренную стеклянную пластинку размером
9 х 12 - 10 х 15 см наносят пастеровской пипеткой или капельницей одну
каплю (0,05 куб.см) поливалентного коагглютинирующего О-диагностикума,
а затем вносят в нее одну каплю (0,05 куб.см) культуры бактерий.
Компоненты тщательно перемешивают бактериологической петлей и
спустя 2-3 минуты учитывают результат реакции (визуально или с
помощью лупы) при покачивании пластины.
3.1.1.2. При положительной реакции испытуемую культуру
бактерий
исследуют
с
моновалентными
коагглютинирующими
сальмонеллезными О-диагностикумами рецепторов 2, 4, 7, 8, 9, 3-10 с
целью ее серогрупповой идентификации. Для этого на стеклянную
пластинку наносят по одной капле вышеуказанных моновалентных
диагностикумов и в каждую из них
добавляют по одной капле
исследуемой культуры бактерий, компоненты размешивают, как указано в
п. 3.1.1.1, затем учитывают результат реакции. После соприкосновения
бактериологической петли с каждым типом диагностикума ее
фламбируют над пламенем горелки (спиртовки).
3.1.1.3. Учет результатов реакции проводят спустя 2-3 минуты
после смешивания компонентов по следующим показателям:
- положительная реакция - наличие мелко или крупнозернистого
агглютината и просветления смеси (обозначается знаком «+»);
- сомнительная реакция - едва заметный агглютинат, просветление
смеси незначительное (обозначается знаком «±»);
- отрицательная реакция - отсутствие
агглютината,
наличие
равномерного помутнения смеси (обозначается знаком «-»).
3.1.1.4. В тех случаях, когда испытуемый материал дает
положительную реакцию с коагглютинирующими диагностикумами
(поли- или моновалентными), ставят следующие три контроля с целью
исключения неспецифической агглютинации:
- коагглютинирующий диагностикум + забуференный физиологический
раствор (рН 7,0-7,2);
- испытуемый материал + забуференный физиологический раствор;
- испытуемый материал + 2%-ная взвесь несенсибилизированного
стафилококкового реагента.
3.1.1.5. Заключение о наличие в испытуемом материале той или
иной серологической группы бактерий рода Salmonella делают на основании
положительного результата РКОА и отсутствия агглютинации во всех
контролях.
3.1.1.6. В случае отрицательного результата РКОА проводят
повторное исследование смешанной культуры бактерий на плотной селективной
среде (агаре Плоскирева, висмут-сульфит агаре), полученной после
пересева культуры в среде накопления из того же самого материала. Для
этого после осмотра и изучения колоний бактерий на плотной
селективной среде в чашке и пересева типичных для сальмонелл колоний
на скошенный МПА или комбинированную среду (Олькеницкого,
Клиглера) с целью последующей идентификации культур в чашку
наливают 5-8 куб.см забуференного физиологического раствора (рН 7,0-7,2),
стеклянным шпателем смывают культуру со всей поверхности среды в
чашке, затем тщательно эмульгируют колонии, стерильной пипеткой
отсасывают суспензию и переносят ее в стерильную пробирку.
Приготовленную суспензию бактерий подвергают исследованию с
поливалентной
и
моновалентными
коагглютинирующими
Одиагностикумами, как указано в п.п. 3.1.1.1 -3.1.1.5.
3.2.1.1. Способ постановки РКОА, при котором отпадает
необходимость использования коагглютинирующих диагностикумов,
предусматривает участие в реакции трех компонентов: испытуемого
материала (чистой или смешанной культуры бактерий), специфической
агглютинирующей сыворотки в рабочем разведении (1:10 - для
обнаружения сальмонелл и иерсиний, 1:20 - для обнаружения
энтеропатогенных эшерихий), 2%-ной взвеси несенсибилизированного
убитого стафилококка штамма Cowan-1.
3.2.1.2. Для постановки реакции на чистую обезжиренную
стеклянную пластину наносят одновременно по 1 капле (0,05 куб.см)
вышеуказанных компонентов, которые тщательно размешивают
бактериологической петлей до получения гомогенной взвеси.
Специфические
агглютинирующие
сыворотки
(сальмонеллезные
поливалентная
и
моновалентные
О-рецепторов
2,4,7,8,9,3-10;
антиадгезивные коли К88, К99, 987P, F41, A20; иерсиниозная к патогенным
штаммам Y.enterocolitica и Y.pseudotuberculosis) предварительно
разводят стерильным забуференным физиологическим раствором (рН 7,07,2) до титров, указанных в п. 3.2.1.1.
Учет результатов реакции проводят через 3-4 минуты после
смешивания компонентов по показателям, указанным в п. 3.1.1.3.
3.2.1.3. При получении положительного результата реакции
ставят следующие три контроля с целью исключения неспецифической
агглютинации:
- специфическая агглютинирующая сыворотка в рабочем разведении +
несенсибилизированный стафилококковый реагент;
- испытуемый материал + забуференный физиологический раствор;
- несенсибилизированный стафилококковый реагент + забуференный
физиологический раствор.
Все компоненты используют в количестве по одной капле (0,05
куб.см).
3.3. Методика обнаружения сальмонелл в первичных
культурах, полученных в среде накопления (селенитовом
бульоне, магниевой среде и др.), с помощью реакции
микрокоагглютинации
3.3.1. Для постановки реакции используют молодую 6-ти часовую
культуру бактерий, которую в количестве одной капли (0,05 куб.см) наносят
на чистую обезжиренную стеклянную пластину, затем добавляют к ней
одну каплю поливалентного коагглютинирующего сальмонеллезного
диагностикума, компоненты реакции размешивают бактериологической
петлей и выдерживают смесь в течение 2-3 минут, после чего краем
шлифованного предметного стекла, расположенного под углом, делают
равномерный мазок и подсушивают его на воздухе.
Высушенный мазок фиксируют вначале на пламени горелки
(спиртовки), не перегревая стекло, а затем смесью спирт-формалина
(спирт-ректификат 96° - 80 куб.см, формалин - 20 куб.см) в течение 2
минут, промывают дистиллированной водой и высушивают фильтровальной
бумагой.
3.3.2.
На
фиксированный
мазок
накладывают
полоску
фильтровальной бумаги, наливают на нее пипеткой краску Муромцева и
окрашивают в течение 2-3 минут, после чего полоску бумаги удаляют,
препарат промывают дистиллированной водой и высушивают
фильтровальной бумагой.
3.3.3. Одновременно готовят контрольный препарат из той же
культуры бактерий, каплю которой наносят на стеклянную пластину, а
затем добавляют к ней одну каплю стерильного физиологического
раствора и бактериологической петлей размешивают в ней культуру.
Приготовление мазка, его фиксацию и окраску осуществляют, как
указано в п.п. .3.3.1 и 3.3.2. Препараты микроскопируют под иммерсией.
3.3.4. При положительной реакции в поле зрения микроскопа
наблюдаются скопления окрашенных микробных клеток (агглютинаты),
окрашенные в голубовато-синий цвет. При отрицательной реакции и в
контрольном мазке окрашенные микробные клетки располагаются
равномерно по всему полю зрения, скопления (агглютинаты) микробных
клеток отсутствуют.
3.3.5. В случае положительного результата реакции с
поливалентным сальмонеллезным диагностикумом проводят аналогичное
исследование той же культуры бактерий
с моновалентными
коагглютинирующими
сальмонеллезными
О-диагностикумами
рецепторов 2, 4, 7,8,9,3-10.
3.4. Обнаружение энтеропатогенных штаммов эшерихий
3.4.1. Из подготовленных для исследования проб сырья и продуктов готовят суспензию в стерильной дистиллированной воде или
физиологическом растворе в разведении 1:5 - 1:10 и засевают их
бактериологической петлей на плотные селективные среды - агар Эндо и
среду Минка в чашках частыми широкими штрихами. Чашки инкубируют
при 37°С в течение 16-18 часов. При наличие типичных для эшерихий
колоний (средних размеров S-формы красно-малинового или розового
цвета с наличием или отсутствием металлического блеска на среде Эндо и
мелких или средних по размеру округлых колоний S-формы сероватобелого цвета на агаре Минка) в чашки с культурами наливают по 5-8 куб.см
(в зависимости от интенсивности роста колоний) стерильного
забуференного физиологического раствора (рН 7,0-7,2) и стеклянным
шпателем смывают колонии со всей поверхности
каждой среды, тщательно
эмульгируют их для получения гомогенной взвеси, после чего
стерильной пипеткой переносят взвесь бактерий с чашек в отдельные
стерильные пробирки и маркируют их.
3.4.2. Смешанные культуры бактерий подвергают исследованию в
РКОА с коагглютинирующими коли-диагностикумами. При этом
культуры, выросшие на агаре Эндо, исследуют с диагностикумами К88,
987Р, А20, а культуры, выросшие на агаре Минка, - с диагностикумами
К99, F41. Исследование культур эшерихий проводят по методике,
изложенной в п. 3.1.1.1. Результаты реакции учитывают по показателям,
указанным в п. 3.1.1.3. В случае получения положительного результата
реакции с одним или двумя и более диагностикумами ставят три
контроля, указанные в п. 3.1.1.4.
3.4.3. Заключение о наличие в испытуемом материале
энтеропатогенных эшерихий с адгезивными антигенами делают на
основании положительного результата РКОА и отсутствия агглютинации
во всех контролях.
3.5. Обнаружение патогенных штаммов иерсиний
3.5.1. Для выделения культур иерсиний подготовленный к
исследованию материал засевают бактериологической петлей на
поверхность подсушенных плотных селективных сред — агар Эндо или
среду СБТС (среда с желчью и индикатором бромтимоловым синим) в
чашках широкими частыми штрихами. Чашки инкубируют при
температуре 22-25 °С в течение 24-30 часов, после чего проводят осмотр
выросших колоний визуально и с помощью лупы.
Культуры иерсиний видов Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis
образуют на агаре Эндо мелкие диаметром 0,3-0,5 мм круглые, выпуклые,
бесцветные колонии S-формы, имеющие вид росинок; на вторые сутки
роста они увеличиваются в размере и приобретают бледно-розовый цвет.
На среде СБТС колонии имеют более крупный размер (1-2 мм в диаметре
у Y. enterocolitica и 2-3 мм у Y. pseudotuberculosis), гладкую выпуклую
поверхность, округлую форму с ровными или фестончатыми краям,
голубовато-зеленого цвета; на вторые сутки роста размер колоний
увеличивается, края их приобретают светло-зеленый, а центральная часть
- темно-зеленый цвет. Колонии других родов и видов энтеробактерий
более крупные, выпуклые, сочные, S-формы, темно-зеленого, коричневого
или черного цвета.
При микроскопии мазков из колоний обоих видов иерсиний,
окрашенных по Граму, бактерии имеют вид мелких размером 0,8-1,5 мкм
грамотрицательных палочек овоидной формы, не образующих спор и
капсул, расположенных одиночно, иногда попарно.
3.5.2. При наличии в культурах на средах Эндо и СБТС типичных
для иерсиний колоний, микробные клетки которых имеют присущие
данным бактериям морфологические признаки, в чашки наливают по 5-8
куб.см стерильного забуференного физиологического раствора, стеклянным
шпателем смывают колонии, тщательно их эмульгируют, а затем
переносят взвесь стерильной пипеткой в стерильные пробирки, последние
маркируют.
3.5.3. Исследование культур бактерий в РКОА проводят с
иерсиниозным коагглютинирующим диагностикумом к патогенным
штаммам Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis, как указано в п.
3.1.1.1,результаты реакции учитывают по показателям, указанным в п.
3.1.1.3.При наличии положительного результата ставят три контроля,
предусмотренные для других видов бактерий (п. 3.1.1.4).
3.5.4. Заключение о наличие в испытуемом материале патогенных
штаммов Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis делают на основании
положительного результата РКОА и отсутствия агглютинации во всех
контролях.
ПРИЛОЖЕНИЕ
1. Забуференный физиологический раствор.
К 1 куб.дм 0,85%-ного раствора хлорида натрия добавляют 10 куб.см
смеси 1/15М раствора двузамещенного фосфорнокислого натрия (Na2HP04 x
12Н2О) и однозамещенного фосфорнокислого калия (КН2Р04) в
соотношении 7:3 или 8:2 (в зависимости от исходной величины рН воды),
компоненты в колбе тщательно размешивают.
2. Среда Минка для выявления адгезивных антигенов эшерихий К99 и
F41
Для приготовления среды вначале готовят следующие исходные растворы:
а) Фосфатно-буферный раствор с рН 7,4-7,5. Для его приготовления
предварительно
получают
1/15
М растворы двузамещенного
фосфорнокислого натрия (Na2HP04 х 12 Н2О) и однозамещенного
фосфорнокислого калия (КН2Р04). С этой целью добавляют к 1куб.дм
дистиллированной воды 23 г Na2HP04 (в первую колбу) и 9 г КН2Р04 (во
вторую колбу), компоненты растворяют путем встряхивания колб. Колбы
с полученными 1/15 М растворами солей закрывают резиновыми или
корковыми пробками и хранят в темном месте при комнатной
температуре в течение 6 месяцев. Для получения фосфатно-буферного
раствора с рН 7,4-7,5 к 1куб.дм дистиллированной воды добавляют 10 куб.см
смеси 1/15 М растворов Na2HP04 и КН2РО4 в соотношении 9:1,
компоненты в колбе тщательно перемешивают.
б) Раствор микроэлементов:
марганец хлористый (MnCl2 x 4H20) - 0,1 г
магний сернокислый (MgS04 x 7H20) - 1 г
кальций хлористый
(СаСl2 x 6H20)
- 0,04 г
железо хлорное
(РеС1з х бН2О)
- 0,02 г
вода дистиллированная
- 100 куб.см
Компоненты тщательно перемешивают в воде, отверстие колбы
закрывают резиновой или корковой пробкой, хранят раствор
микроэлементов при комнатной температуре в течение 1 месяца.
в) 4%-ный раствор агар-агара. Для его приготовления в колбу с 1 дм
дистиллированной воды добавляют 40 г предварительно отмытого агарагара, колбу нагревают до полного расплавления агара, затем фильтруют
через ватный фильтр и стерилизуют при 1 атм (121°С) в течение 30 минут.
Перед употреблением застывший агар расплавляют в водяной бане.
Среду Минка готовят по следующему рецепту:
фосфатно-буферный раствор (рН 7,4 - 7,5)
- 950 куб.см
раствор микроэлементов
- 2 куб.см
40%-ный раствор глюкозы
- 25 куб.см
10%-ный раствор дрожжевого экстракта (*)
- 10 куб.см
10%-ный раствор гидролизата казеина (**)
- 20 куб.см
(*), (**) - Для приготовления среды используют экстракт дрожжевой,
сухой, очищенный - ТУ 6-09-4510-77 и сухой гидролизат казеина - ТУ 609-4764-79.
Компоненты в колбе размешивают, затем нагревают смесь до
температуры 45 - 50°С, после чего к ней добавляют 1 куб.дм расплавленного
4%-ного раствора агар-агара. Готовую среду (2%-ный агар Минка)
разливают в колбы по 100-200 куб.см и стерилизуют при 0,5 атм (110°С) в
течение 15 мин., хранят среду не более 1,5 мес. Перед употреблением ее
расплавляют в водяной бане и разливают в стерильные чашки Петри.
4. Среда СБТС (среда с желчью и бромтимоловым синим) для выделения
иерсиний - изготавливается предприятием Государственного научного
центра прикладной микробиологии.
142279, Московская область, Серпуховской район, пос. Оболенск.
5. Краска для окрашивания мазков по методу Муромцева.
Вначале готовят два раствора красок: №1 и №2.
Раствор №1: к 0,15 г основного кристаллического фуксина, помещенного в
фарфоровую ступку, добавляют 10 г кристаллической карболовой кислоты
(фенол), затем небольшими порциями приливают 20 см3 96°С этилового
спирта и пестиком размешивают компоненты до их растворения.
Раствор №2: 2,5 г метиленовой сини растворяют в 200 куб.см
дистиллированной воды.
Оба раствора смешивают, потом фильтруют через бумажный фильтр.
Готовую краску хранят в стеклянном флаконе из темного стекла с
притертой пробкой.
6. Коагглютинирующие диагностикумы готовят в соответствии с
«Методическими указаниями по ускоренной индикации морганелл,
сальмонелл и энтеропатогенных эшерихий с адгезивными антигенами в
патологическом материале, кормах, объектах внешней среды в реакции
коагглютинации», утв. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ
11.10.99.
Методические указания разработаны Л.С. Кавруком, А.Б. Кононенко,
С.В. Бритовой, А.Н. Бровкиной, П.Н. Рубченковым (Всероссийский научноисследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии),
И.И. Розановой, А.В. Жильцовой (Городская ветеринарная лаборатория
г. Москвы)