Павлова И. Ж., Хомич Ю. С.

Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298).
Биология. Вып. 2. С. 66–67.
И. Ж. Павлова, Ю. С. Хомич
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА STAPHYLOCOCCUS AUREUS,
ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ РАЗЛИЧНЫХ ЛОКУСОВ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЕЙ
Дана краткая оценка уровня бактерионосительства S. aureus среди детей младшего возраста, проживающих в промышленной зоне г. Челябинска. Определена степень выраженности факторов патогенности и антибиотикочувствительности выделенных стафилококков. Все изученные признаки
проанализированы методом коэффициента ранговой корреляции Спирмена, найдены связи между
различными биологическими свойствами S. aureus и их выраженностью.
Ключевые слова: бактерионосительство, Staphylococcus aureus, факторы патогенности, антибиотикочувствительность.
Введение. Проблема стафилококкового бактерионосительства является одной из наиболее актуальных для современной медицины в связи с
ростом числа носителей стафилококков. По данным ряда авторов, бактерионосительство стафилококков у разных групп населения и больных
подвержено большим колебаниям (24–82 %).
Staphylococcus aureus является уникальным
микроорганизмом, колонизирующим и поражающим многие органы и ткани, демонстрируя при
этом широкий диапазон адаптационных возможностей. Патогенные свойства конкретного штамма стафилококков определяются суммирующим
действием факторов патогенности, токсинов
и инвазивных свойств этого штамма. При этом
патогенность стафилококков варьирует в значительной степени.
Цель. Определить некоторые биологические
свойства Staphylococcus aureus, выделенных из
различных локусов бактерионосителей.
Материалы и методы. Исследования проводились на базе бактериологической лаборатории
Детской городской клинической больницы № 8
г. Челябинска. Всего на предмет стафилококкового бактерионосительства было обследовано 200
детей обоего пола, без локальных клинических
проявлений стафилококковой инфекции (бактерионосителей), находящихся на учёте в детской поликлинике, проживающих в Металлургическом
районе г. Челябинска. Средний возраст детей составил 11 месяцев.
В работе были использованы 83 культуры
S. aureus, выделенные в титре не более 105 КОЕ/г
из фекалий (n = 56), из носа (n = 13) и зева (n
= 12) детей-бактерионосителей. Идентификация
выделенных стафилококков проводилась на основании морфологических, культуральных, биохимических признаков в соответствии с классификацией Берджи (1980) [1]. Оценка антибио-
тикочувствительности проводилась диско-диффузионным методом в соответствии с методическими указаниями [2]. Из рекомендованного
списка антибиотиков использовали оксациллин,
бензилпенициллин, амоксициллин / клавулоновая кислота, ципрофлоксацин, амикацин, линкомицин.
Для определения пигмента и гемолитической
активности исследуемые культуры в виде «бляшек» засевали на кровяной агар (КА). Степень
продукции гемолизина оценивалась по радиусу зоны гемолиза вокруг «бляшек» (мм). Для
определения лецитиназы исследуемые культуры в виде «бляшек» засевали на желточно-солевой агар (ЖСА). О лецитиназной активности
свидетельствовало наличие радужного венчика
вокруг «бляшек». Для определения ДНКазной
активности исследуемые культуры засевали на
DNAse TEST AGAR (Manufactured by Hispanlab,
Madrid). Положительная реакция: просветление
среды вокруг посева. Для определения фибринолизина исследуемые культуры засевали в свернутую плазму крови. При положительной реакции
происходило растворение фибринового сгустка.
Для определения желатиназной активности исследуемые культуры засевали уколом в застывший питательный желатин. При положительной
реакции на вторые сутки происходило разжижение желатина.
Фаготипирование культур S. aureus проводилось с использованием международного набора
(АНГД, Англия), который включает в себя фаги
I, II, III групп и внегрупповые фаги: 81, 94, 95,
96. Определение адгезивных свойств стафилококков проводили по методу В. И. Брилис и соавт. (1986). Адгезивные свойства оценивали по
среднему показателю адгезии (СПА) и подсчитывали индекс адгезивности микроорганизма
(ИАМ).
Биологические свойства Staphylococcus aureus, выделенных из различных локусов бактерионосителей
Статистический анализ проводили с помощью
программы SPSS Statistics 17. Для анализа использовали метод корреляций по Спирмену [3].
Результаты и обсуждение. Все выделенные
культуры S. aureus проявили 100 %-ную чувствительность к ципрофлоксацину, амикацину, линкомицину и оксациллину независимо от источника выделения. Более 80 % культур проявили резистентность к бензилпенициллину, что совпадает
с литературными данными.
Наибольшую гемолитическую активность (зона
гемолиза ≥ 2 мм) проявляли культуры S. aureus,
выделенные из зева и носа. Доля негемолитических культур составила в среднем 21,5 %.
Среди выделенных стафилококков преобладали культуры с жёлтым пигментом (53–75 %), по
сравнению с белым (1–17 %) и промежуточным —
кремовым (25–38 %). По данным научных исследований жёлто-оранжевый пигмент большинства
клинических изолятов золотистого стафилококка
связан с повышенной бактериальной выживаемостью в неблагоприятных условиях и повышенной
патогенностью стафилококков, так как дефицитные по каротиноидам культуры теряют устойчивость к окислительному взрыву нейтрофилов.
Лецитиназная активность была обнаружена
у всех выделенных культур. Наиболее выражена
лецитиназная активность у стафилококков носовой полости. Большинство культур, выделенных
из испражнений (69 %), проявляли ДНКазную
активность. Наименьший процент ДНКаза+
культур был среди выделенных из зева (16 %).
Фибринолитической и желатиназной активностью обладала примерно половина выделенных
культур.
Среди всех культур фаготипируемыми оказались 59,1 %. Из них удельный вес принадлежал
III литической группе, что соответствует литературным данным.
Максимальный ИАМ характерен для S. aureus,
выделенных из носа (СПА от 0,8 до 16), и равен
6,8±4,1. Минимальная адгезия определена для
S. aureus, выделенных из зева (СПА от 0,1 до 11),—
4,2±3,1. Фекальные стафилококки проявили среднюю адгезивную способность (ИАМ 5,44±3,86).
Все изученные признаки были проанализированы методом коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Были обнаружены следующие
корреляции признаков: возраст детей — степень
гемолитической активности, гемолиз — лецитиназа, АБЧ — гемолиз, цвет колоний — фибринолизин, желатиназа — ДНКаза, адгезия — АБЧ,
67
адгезия — желатиназа, желатиназа — количество
бактерий.
Выводы. 1. Частота носительства S. aureus среди детей, проживающих в промышленной зоне
г. Челябинска, составляет 42,5 % (верхние дыхательные пути) и 40 % (в кишечнике).
2. S. aureus обладают 100 % чувствительностью к ципрофлоксацину, амикацину, линкомицину, амоксиклаву. 80 % культур устойчивы
к бензилпенициллину.
3. При стафилококковом бактерионосительстве
у детей наиболее часто выделяются типичные
культуры с жёлтым пигментом, которые характеризуются повышенной выживаемостью и патогенностью.
4. Все выделенные культуры S. aureus имели
типичные для них свойства. Наиболее выражены факторы патогенности у стафилококков, выделенных из носовой полости.
5. Фаготипируемыми оказалось 60 % культур.
Преобладающая группа — III (20–25 %). Менее
характерна I группа (0–3 %).
6. Наблюдается корреляция между различными признаками S. aureus, что объясняется генетическими механизмами их регуляции.
Заключение. Таким образом, проблема стафилококкового бактерионосительства остаётся
актуальной на сегодняшний день и требует целостного изучения на фоне неблагоприятной экологической ситуации. Выявление значительного
числа стафилококковых резидентных бактерионосителей среди детей, проживающих на различных территориях не случайно, так как детский
контингент в силу несовершенства механизмов
адаптации — наиболее чувствительный биоиндикатор воздействия химических полютантов
внешней среды на организм.
Список литературы
1. Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений : приказ Минздрава СССР от 22.04.85 № 535.
2. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам : метод.
указ. № МУК 4.2.1890-04 : утв. гл. гос. санитар.
врачом РФ 04.03.2004.
3. Клиническая лабораторная аналитика. Т. 1 :
Основы клинического лабораторного анализа.
М. : Агат-Мед, 2002. 860 с.