Липосомальный препарат Липоферол для внутривенного
advertisement
156 Вопросы экспериментальной, производственной и клинической … А. И. Шанская, С. М. Пучкова, Г. А. Хмылова, Н. А. Недачина Липосомальный препарат Липоферол для внутривенного введения с альфа-токоферолом ФГБУ «Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России», г. Санкт-Петербург О дно из актуальных направлений медико-биологической науки состоит в поиске и создании новых классов лекарственных средств с улучшенными фармакологическими свойствами. В настоящее время наиболее перспективными в области разработки лекарственных препаратов являются нанотехнологии, направленные на получение наночастиц и различных композиций на их основе. Липосомы представляют собой наночастицы (наносферы) водной субстанции, заключенные в фосфолипидную везикулу размером менее 100 нм. Успех применения липосом обусловлен тем, что они эффективно связывают и высвобождают лекарственное вещество, облегчают всасывание и прохождение его через биологическую мембрану, обеспечивают интактность до взаимодействия с клетками-мишенями. Липосомальные препараты биодеградабельны, не вызывают аллергических реакций, снижают токсичность инкапсулированных веществ, пролонгируют их действие в организме, доставляя лекарственное вещество непосредственно в клетку. В Российском НИИ гематологии и трансфузиологии (РосНИИГТ) был создан оригинальный липосомальный мелкодисперсный препарат Липоферол для внутривенного введения на основе фосфолипидов сои. Одним из активных действующих веществ, включенных в бислой препарата Липоферол, является альфа-токоферол (витамин Е), жирорастворимый природный антиоксидант. Биологическая роль и антиоксидантные свойства альфа-токоферола дают основание рассматривать его как наиболее значимое защитное вещество при воздействии на организм различных вредных факторов и при развитии многих патологических состояний, для которых характерно инициирова- Липосомальный препарат Липоферол для внутривенного введения 157 ние процесса перекисного окисления липидов (ПОЛ). Нормализация ПОЛ при многих заболеваниях посредством активации физиологической антиоксидантной системы способствует восстановлению химического состава, структуры и функции биомембран, что и определяет лечебное действие антиоксидантных препаратов при различных патологических состояниях (ожоговый шок, травмы, токсемии различного происхождения). Лечебное действие препарата Липоферол определяется сочетанием сильного антиоксиданта альфа-токоферола с высокоочищенными фосфолипидами сои, которые рассматриваются не только как строительный материал для восстановления и регенерации состава и структуры клеточных мембран и органелл, но и как антиоксидантные системы. Проведено доклиническое исследование препарата с учетом «Правил доклинической оценки безопасности фармакологических средств, GLP». Препарат Липоферол безвреден, не вызывает аллергических реакций, не оказывает отрицательного воздействия на функциональную активность жизненно важных органов и систему гемостаза, нетоксичен, непирогенен. Изучена лечебная эффективность Липоферола на моделях геморрагического и ожогового шока, а также на модели токсического гепатита. Липоферол улучшает системную гемодинамику и кислородный режим организма и снижает летальность при ожоговом шоке. Кроме того, Липоферол оказывает умеренное антиагрегационное действие на тромбоциты человека; повышает электрофоретическую подвижность эритроцитов, обеспечивая стабильное поддержание отрицательного заряда на высоком уровне; снижает степень нарастания в крови содержания свободного гемоглобина и процента осмотически неустойчивых эритроцитов. Таким образом, показано, что Липоферол обладает выраженным антиоксидантным, мембраностабилизирующим и гепатопротекторным действием, снижает уровень эндогенной интоксикации. Получены рекомендации Фармакологического комитета МЗ РФ и Комитета по этике на проведение клинических исследований Липоферола у взрослых пациентов. В соответствии с требованиями Отраслевого стандарта ОСТ 91500.05.001-00 и ГФ XII, а также экспертов НЦЭСМП разработаны проекты ФСП на субстанции и лекарственную форму препарата Липоферол. Составлен «Лабораторный регламент на производство липосомального препарата с использованием гомогенизатора высокого давления». Разработанная в РосНИИГТ жидкая лекарственная форма препарата Липоферол стабильна в течение 2 лет, однако имеет 158 Вопросы экспериментальной, производственной и клинической … определенные ограничения при хранении и транспортировке, что вызывает необходимость усовершенствования технологии производства липосомального препарата, с целью увеличения стабильности готовой лекарственной формы. Одним из надежных путей повышения стабильности липосом является лиофилизация. Процесс лиофилизации, включающий замораживание, высушивание и последующее ресуспендирование, требует выбора таких условий лиофилизации (криопротекторы, температурные режимы, время сублимации и др.), которые обеспечивали бы получение сухой пористой массы и образование, после ее регидратации, однородной тонкодисперсной эмульсии, имеющей физико-химические параметры исходной жидкой формы липосомального препарата. Поскольку липосомы рассматриваются как упрощенная модель клеточной мембраны, для их лиофилизации используют те же методические подходы, которые применяются для биологических клеточных объектов. Лиофилизация может приводить к разрушению бислойной мембраны липосом, поэтому проводить ее необходимо в определенном режиме и с добавлением специальных защитных веществ, обеспечивающих сохранение бислойных структур – криопротекторов. В настоящее время проводятся исследования по созданию лиофилизированной формы липосомального препарата с альфатокоферолом. При изучении разных типов криопротекторов (сорбит, маннит, лактоза, сахароза, мальтоза и др.) предпочтения были отданы сахарозе, установлены оптимальные значения ее концентрации и соотношения криопротектор – фосфолипиды. Проведены исследования по отработке условий лиофилизации липосомального препарата (давление, температура высушивания, конечная температура препарата в период досушивания, продолжительность процесса сублимации). Оценены физико-химические свойства липосомального препарата с альфа-токоферолом до и после лиофилизации. Экспериментальные серии препарата по ряду основных показателей (влажность, рН, размер везикул) соответствовали всем предъявляемым требованиям. Следовательно, разработанная технология позволяет получать после ресуспендирования препарат, пригодный для внутривенного введения.
