010316 Техническая область изобретения

010316
Техническая область изобретения
Изобретение относится к раневому перевязочному материалу, содержащему целлюлозу микробного
происхождения, для лечения специфических типов хронических ран, включая пролежневые, венозные и
диабетические язвы. Изобретение также относится к раневому перевязочному материалу на основе целлюлозы микробного происхождения, содержащему антимикробные добавки, которые дают возможность
подавлять рост микроорганизмов на поверхности перевязочного материала, находящегося в контакте с
раной.
Предшествующий уровень техники
Существует множество разнообразных материалов, используемых для изготовления раневых перевязочных материалов, которые используются для лечения хирургических и нехирургических повреждений, таких как ожоги и ссадины. Перевязочные материалы варьируют от простых марлевых перевязочных материалов до перевязочных материалов на основе белков животного происхождения, таких как
коллагеновые перевязочные материалы, причем композиция конкретного перевязочного материала зависит от типа раны, которую лечат. Каждый из этих перевязочных материалов имеет преимущества в зависимости от типа применения. Например, марлевые перевязочные материалы являются достаточными и
высокоэкономичными для простых ссадин и хирургических разрезов.
С другой стороны, было обнаружено, что в случаях хронических ран более эффективны перевязочные материалы на основе полимеров. По определению, хроническими ранами являются раны, при которых не протекает нормальный процесс заживления, и которые обычно являются проявлением основной
проблемы, такой как диабет, венозное заболевание или нарушение кровообращения (Lazarus, G.S. et al.,
Definitions and Guidelines for Assessment of Wounds and Evaluation of Healing, Arch. Dermatology, vol. 130,
p. 489-493, 1994). Таким образом, хронические раны могут быть ориентировочно классифицированы как
пролежневые язвы (пролежни), венозные и диабетические язвы в зависимости от основной проблемы. В
зависимости от причины используют различные типы лечебных обработок ран и материалов, которые с
учетом основной проблемы способствуют заживлению раны. Было показано, что современные полимерные материалы, обладающие способностью сохранять влажную среду в ране, более эффективны, чем
марля, при лечении этих с трудом заживающих хронических ран.
С точки зрения перевязочных материалов на основе полимеров для лечения кожных повреждений
используют различные типы полимерных материалов. В общем их можно поделить на два основных
класса, а именно: синтетические и природные полимерные материалы.
Синтетические материалы включают полиуретаны, поливинилпирролидон (ПВП), полиэтиленоксид
(ПЭО), поливиниловый спирт (ПВС) и полиакрилонитрил (ПАН). Эти материалы можно использовать в
комбинации с другими синтетическими или природными полимерами для изготовления раневых перевязочных материалов, обладающих специфическими свойствами, такими как поддержание влажной среды
и высокая степень поглощения жидкости. Оба этих свойства, обычно отсутствующих у марлевых перевязочных материалов, способствуют заживлению хронических ран, защищая их от инфекции и поддерживая определенный уровень влажности в ране. В патенте США № 6238691, Huang, раскрыт раневой перевязочный материал на основе трехмерного поперечно-сшитого полиуретанового гидрогеля, который поглощает жидкость, облегает область раны и поддерживает рану во влажном состоянии, чтобы способствовать заживлению.
В патенте США № 6156334, Meyer-lngold et. al., раскрыты раневые покрытия для удаления интерферирующих факторов, таких как антигены, свободные радикалы, ионы, белки, пептиды, липиды и свободные жирные кислоты, в раневой жидкости хронических ран. Эти раневые покрытия химически модифицированы "молекулярными ловушками", такими как антитела, хелатообразователи, ингибиторы ферментов, ферменты, миметики ферментов, пептиды и другие белки, и представляют собой полиуретан или
целлюлозу растительного происхождения.
Аналогично, природные полимеры или биополимеры, такие как коллаген и альгинаты, также применяли в качестве раневых перевязочных материалов, чтобы использовать превосходные характеристики
полимеров, такие как высокая абсорбционная способность альгината или биологически совместимая
природа коллагена. Каждый из этих перевязочных материалов обладает конкретными ассоциированными
преимуществами в зависимости от типа раны и количества экссудата, которое она выделяет. Однако эти
перевязочные материалы также имеют недостатки, которые включают более высокую стоимость, прилипание к ране, ограниченное поглощение экссудата и отложение остатка в области раны.
Гидроколлоидные перевязочные материалы поглощают раневой экссудат и создают влажную среду,
заживляющую рану, однако также обладают нежелательным свойством отложения остатка в области
раны. Кроме того, в отличие от описанного здесь перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения, гидроколлоидные перевязочные материалы не обладают способностью отдавать влагу, что необходимо для сухих хронических ран с ограниченным количеством экссудата. Известно также, что гидроколлоиды прилипают к ложу раны и могут вызывать повторное повреждение при
удалении. Гидроколлоиды имеют тенденцию распадаться в ложе раны, возможно вмешиваясь в процесс
заживления раны.
-1-
010316
В качестве альтернативного материала целлюлоза микробного происхождения обладает свойственными ей характеристиками, которые дают возможность эффективно способствовать заживлению раны, и
при этом не имеет недостатков, характерных для современных раневых перевязочных материалов. В
этом смысле целлюлоза микробного происхождения обладает физическими свойствами, которые отличают ее от целлюлозы растительного происхождения, такими как чрезвычайно высокая гидрофильность
и уникальные многослойные трехмерные ламинарные структуры, которые обуславливают ее способность транспортировать влагу. Целлюлоза микробного происхождения обладает высокой гидрофильностью со способностью удерживать влагу в количестве, превышающем ее собственную массу в 60-700
раз, как описано в патенте США № 4942128. Целлюлоза микробного происхождения имеет также превосходную прочность во влажном состоянии и не разрушается при прессовании. Наконец, поскольку
целлюлоза микробного происхождения имеет многослойную ламинарную структуру, из нее можно производить пленку, обладающую новой способностью транспортировать жидкость. Путем регулирования
соотношения целлюлоза/жидкость обработанная целлюлоза микробного происхождения способна отдавать жидкую среду или поглощать жидкость в зависимости от поверхности, для контакта с которой
пленка изготовлена.
Применение целлюлозы микробного происхождения, в виду ее превосходных свойств, ранее исследовали в медицинской промышленности. Например, в патентах США № 4588400, 4655758 и 4788146,
Ring et al., раскрыто возможное применение целлюлозы микробного происхождения в медицинских салфетках, пропитанных жидкостью. Патенты Ring et al. сфокусированы на применении салфеток из статически полученной целлюлозы микробного происхождения, пропитанных различными жидкостями и лекарственными средствами. Подробно описаны различные типы жидкостей, которые может содержать
салфетка на основе целлюлозы микробного происхождения, а также способ изготовления и очистки для
получения исходного целлюлозного материала. Кроме того, в этих патентах приведены примеры, в которых подробно описаны способы изготовления различных салфеток, которые включают серию стадий
прессования и пропитки для регулирования физических свойств, главным образом соотношения жидкость/целлюлоза, с получением целевого продукта. В качестве примера эти патенты иллюстрируют высокогидратированную салфетку (соотношение жидкость/целлюлоза 80/1), которая обладает охлаждающей способностью, идеальной для применения в лечении ожогов. В частности, в патенте США
№ 4788146 описано применение таких пропитанных жидкостью салфеток в качестве влажных перевязочных материалов для наложения на язвы, способных обеспечивать увлажнение раны в течение длительного периода времени. В этом же патенте США № 788146 упоминается также, что влажные перевязочные материалы, описанные в примерах, обладают к тому же дополнительной способностью поглощать большие количества жидкости из области раны в том случае, когда такой перевязочный материал
накладывают в менее чем насыщенном состоянии. Однако в патентах Ring et al. не упомянуто об уникальных перевязочных материалах, обладающих как способностью служить источником влаги для хронических ран, так и способностью поглощать жидкость. Кроме того, в патентах Ring et al. не описано
эффективное соотношение жидкость/целлюлоза для изготовления перевязочного материала, обладающего двойственной способностью транспортировки жидкости, и не раскрыты также конкретные преимущества комбинации целлюлозы микробного происхождения и антимикробного агента.
В частности, в патентах Ring не раскрыты уровни антимикробных агентов, которые не оказывают
раздражающего, цитотоксического и сенсибилизирующего действия. Кроме того, в патентах Ring не раскрыты агенты, которые устойчивы к стерилизации посредством гамма-излучения.
В патенте США № 4912049, Farah et al., раскрыто применение статически полученной дегидратированной целлюлозы микробного происхождения в качестве искусственного кожного трансплантата, разделительной мембраны или искусственной кожи. В патенте США 4912049 изложено применение продуцируемой Acetobacter xylinum целлюлозной пленки, дегидратированной и в то же время растягивающейся. Хотя в патенте США № 4912049 описано возможное применение их изобретения в качестве искусственной кожи для лечения ран или повреждений, никакого предположения о том, что этот материал можно использовать для хронических ран, выдвинуто не было. Кроме того, высушенная пленка, предложенная Farah, не обладает способностью отдавать влагу и обладает минимальной поглощающей способностью. В патенте Farah не раскрыто конкретное преимущество комбинации целлюлозы микробного происхождения и антимикробного агента.
Наконец, в патенте США № 5846213, Wan et al., раскрыты способы получения пленок на основе
целлюлозы микробного происхождения с использованием сырья, продуцируемого в биореакторе, который представляет собой резервуар с перемешивающим устройством, вместо статического способа. В
патенте США № 5846213 также описано применение такого целлюлозного материала, растворенного в
растворителях, для изготовления мембран, которые могут быть использованы в качестве раневых перевязочных материалов. Из-за сухой природы образующейся пленки отлитый материал не способен отдавать влагу и имеет ограниченную способность поглощать жидкость. Кроме того, полученная в результате
целлюлозная мембрана не обладает трехмерной многослойной структурой, обнаруживаемой только в
статически выращенной целлюлозе микробного происхождения, как было описано выше. Как и в патентах Ring et al. и Farah, в патенте Wan не указана конкретная польза комбинации целлюлозы микробного
-2-
010316
происхождения и антимикробного средства.
Было исследовано использование добавок в раневых перевязочных материалах для придания антимикробной или ингибиторной активности. Для придания перевязочному материалу антимикробного или
биоингибиторного свойства в коммерчески доступные раневые перевязочные материалы были включены
соединения на основе серебра (перевязочные материалы Arglaes и Acticoat), глюконат хлоргексидина
(Chlorhexidine Gauze Dressing BP), хлорид бензалкония (марлевая повязка Band-Aid), парабены (NugelDressing) и PHMB (полигексаметилен-бигуанид) (марлевые перевязочные материалы Kerlix и Excilon). B
патенте США № 4588400 в формуле изобретения указано использование добавок в пропитанных жидкостью медицинских салфетках, изготовленных из целлюлозы микробного происхождения, но не раскрыта
конкретная польза комбинации целлюлозы микробного происхождения и антимикробного агента. В частности, в патенте США № 4588400 не раскрыты уровни антимикробных агентов, которые не оказывают
раздражающего, цитотоксического и сенсибилизирующего действия. Кроме того, в патенте США
№ 4588400 не раскрыто, какие агенты могут быть устойчивы к стерилизации посредством гаммаизлучения.
PHMB представляет собой косметический консервант, поставляемый, среди прочего, в виде 20%
раствора в воде под товарным знаком Cosmocil CQ. Используемая в косметических средствах концентрация составляет 0,2-1,0% 20% раствора. 20% концентрат является сильным раздражителем. Пятьдесят
тысяч м.д. (миллионных долей) крысы переносили, причем раздражение отсутствовало. В тесте на сенсибилизацию на морских свинках сенсибилизация не наблюдалась (Cosmetic and Drug Preservation: Principles and Practice, Ed. Jon J. Kabara. Marcel Dekker, Inc. New York и Basel., p. 728-730, 1984).
В патенте США № 4643181, Brown, описан хирургический перевязочный материал или хирургическая салфетка, покрытая контактным адгезивом на основе растворителя, который содержит диспергированный в нем полигексаметилен-бигуанида гидрохлорид.
В патенте США № 6369289, Orr, раскрыт целлюлозный бинт, состоящий, по существу, из антимикробного количества полигексаметилен-бигуанида гидрохлорида, нанесенного на бинт, способ наложения
указанного бинта на открытую рану и способ изготовления такого бинта. Перевязочный материал, описанный в патенте США № 6369289, не обладает способностью отдавать влагу, которую имеет целлюлоза
микробного происхождения по настоящему изобретению.
В патенте США 4655756, Fawkes, раскрыт нетканый материал, обработанный линейным полимерным бигуанидом, предпочтительно полигексаметилен-бигуанида гидрохлоридом. Этот обработанный
нетканый материал используют для создания одноразовых подгузников, которые имеют более слабый
запах благодаря антимикробной активности полигексаметилен-бигуанида гидрохлорида.
В патенте США 4837079, Quantrille, раскрыта нетканая сетка, используемая в качестве влажной
салфетки, содержащая полигексаметилен-бигуанида гидрохлорид, и способ изготовления нетканой сетки, содержащей антимикробный агент. В отличие от изобретения Fawkes, это изобретение предусматривает нетканый материал, в котором полигексаметилен-бигуанида гидрохлорид связан с сеткой и является
связующим. Эта основная характеристика улучшает антимикробную активность при более низких концентрациях и уменьшает у пользователя раздражение от этого материала.
Хотя в вышеуказанных патентах рассматривается возможное применение целлюлозы микробного
происхождения в медицине, в предшествующем уровне техники не предложен способ создания раневых
перевязочных материалов, демонстрирующих эффективное заживление раны, способность регулировать
влажность, антимикробную активность и адекватную биологическую совместимость. Соответственно,
желателен эффективный перевязочный материал, содержащий целлюлозу микробного происхождения,
для лечения хронических ран, который характеризуется высокой биологической совместимостью. Кроме
того, раневой перевязочный материал с высокой степенью влагоотдачи и влагопоглощения также особенно желателен для оптимального заживления раны. Эта двойственная способность перевязочного материала по настоящему изобретению регулировать влажность обеспечивает поддерживание в ране влажной среды, необходимой для заживления хронических ран. Кроме того, высокая способность отдавать
влагу особенно полезна для лечения сухой некротической ткани и содействия аутолитическому очищению раны, что желательно для любого возможного закрытия раны. Дополнительно, способность раневого перевязочного материала по настоящему изобретению способствовать аутологическому заживлению
путем стимулирования грануляции и обеспечения миграции эпителиальных клеток дает явную возможность эффективного закрытия раны данным перевязочным материалом. Наконец, включение в раневой
перевязочный материал антимикробного агента также усиливает процесс заживления путем борьбы с
микробными инфекциями или их предотвращения.
Таким образом, авторы настоящего изобретения разработали раневой перевязочный материал, который обладает этой новой способностью транспортировать жидкость путем ее поглощения и отдачи.
Эта способность транспортировать жидкость представляет собой конечный результат обработки целлюлозы микробного происхождения для достижения надлежащего содержания целлюлозы согласно указанному назначению. Полученный раневой перевязочный материал может отдавать жидкость, если поверхность раны сухая, и, как было установлено, он особенно полезен для сухих хронических ран, покрытых
сухой некротической тканью или струпьями. Этот же перевязочный материал способен также поглощать
-3-
010316
жидкость из экссудирующего раневого ложа. Дополнительно, раневой перевязочный материал на основе
целлюлозы микробного происхождения, охарактеризованный в данном изобретении, в отличие от гидроколлоидных перевязочных материалов не разрушается и не оставляет остатка в области раны. При удалении перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения с раны ткань не повреждается, поскольку он не прилипает к поверхности раны.
Настоящее изобретение также предусматривает листы на основе целлюлозы микробного происхождения, которые могут быть прямо синтезированы практически в любой форме или любого размера. Ферментационные способы обеспечивают получение весьма тонкой и гибкой формы, которая является чрезвычайно прочной и в то же время проницаемой для газов и жидкостей. Форма сохраняется даже после
воздействия экстремальных условий окружающей среды, таких как автоклавирование или стерилизация
посредством гамма-излучения.
Краткое изложение сущности изобретения
Задача настоящего изобретения заключается в создании эффективного раневого перевязочного материала для лечения хронических ран, который способен отдавать и поглощать влагу для обеспечения
оптимального заживления раны.
Эта задача решена путем создания перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения, содержащего от 1,5 до 9 мас.% целлюлозы микробного происхождения и полигексаметилен-бигуанид (PHMB).
Предпочтительно перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения содержит менее 7900 миллионных долей (м.д.) PHMB.
Более предпочтительно перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения
содержит от 2700 до 3700 м.д. PHMB.
Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения может принимать форму
раны.
Предпочтительно перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения дает
отрицательный результат в тесте на реакцию с лизатом амебоцитов мечехвоста (LAL) (менее 0,5 Ед.э/мл
(единиц эндотоксина на 1 мл)) и, следовательно, является апирогенным.
Предпочтительно перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения дает
отрицательный результат в первичном тесте на раздражение на кроликах и отрицательный результат в
тесте на цитотоксичность с использованием мышиных клеток L929, успешно проходит тест на сенсибилизацию на морских свинках и, следовательно, является биологически совместимым.
Целесообразно, перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения отдает от
примерно 50 до примерно 90 мас.% своей жидкости сухому субстрату и поглощает от примерно 35 до
примерно 140 мас.%.
Согласно данному изобретению также предложено применение вышеуказанного перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения для изготовления набора для лечении хронических ран.
Кроме того, согласно данному изобретению предложено применение вышеуказанного перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения для лечения хронических ран.
Предпочтительно хроническая рана представляет собой венозную язву.
Хроническая рана также может представлять собой пролежневую язву (пролежень).
Кроме того, хроническая рана может представлять собой диабетическую язву.
Предпочтительно хроническая рана представляет собой хроническую рану на полную или частичную толщину.
Предпочтительно целлюлозный перевязочный материал следует менять от двух раз в сутки до одного раза в неделю.
Согласно данному изобретению, также предложен набор, включающий:
а) вышеуказанный перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения;
б) влагонепроницаемую упаковку, содержащую указанный перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения;
в) инструкции по наложению указанного перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения на хроническую рану.
Предпочтительно набор стерилизован гамма-излучением.
Вышеуказанный набор также может быть стерилизован посредством стерилизации электронным
пучком.
Предпочтительно в наборе влагонепроницаемая упаковка, содержащая перевязочный материал на
основе целлюлозы микробного происхождения в виде пленки, включает герметично закрываемый шевронный пакет из алюминия с пластиковым покрытием.
Другие задачи, признаки и преимущества настоящего изобретения будут понятны из приведенного
ниже подробного описания. Следует иметь в виду, однако, что подробное описание и конкретные примеры, хотя и показывают предпочтительные воплощения изобретения, приведены только для иллюстрации,
поскольку различные изменения и модификации сущности и объема изобретения будут ясны специали-4-
010316
сту в данной области из этого подробного описания.
Краткое описание графических материалов
Фиг. 1. Показана способность раневых перевязочных материалов на основе целлюлозы микробного
происхождения поглощать и отдавать влагу в зависимости от процентного содержания целлюлозы в этих
материалах. Все материалы имели одинаковую площадь и сходную толщину. Область пересечения двух
кривых показывает идеальное содержание целлюлозы для максимизации обоих свойств.
Фиг. 2. Показано количество жидкости, отдаваемой сухой поверхности раневым перевязочным материалом на основе целлюлозы микробного происхождения XCell и раневыми перевязочными материалами на основе гидрогеля. Отдаваемые количества выражены в виде процента от исходной массы образца. Отдача жидкости раневым перевязочным материалом XCell значительно превосходит этот показатель
для гидрогелей.
Фиг. 3. Способность раневых перевязочных материалов на основе целлюлозы микробного происхождения XCell поглощать и отдавать влагу сравнивается с такой же способностью раневых перевязочных материалов на основе гидрогеля Clearsite (NDM). Поглощающая способность почти идентична у
этих двух типов перевязочных материалов, но раневой перевязочный материал XCell может отдавать в 6
раз больше влаги, чем гидрогель.
Подробное описание предпочтительного воплощения
Согласно изобретению предложены раневые перевязочные материалы на основе целлюлозы микробного происхождения, обладающие способностью отдавать и поглощать жидкость для обеспечения
оптимального заживления ран. В отличие от гидроколлоидных, гидрогелевых, альгинатных, коллагеновых или марлевых перевязочных материалов описанный здесь перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения может создавать оптимальную для заживления влажную среду путем
отдачи жидкости сухой поверхности или поглощения избытка жидкости из ран, выделяющих экссудат.
Содержание целлюлозы микробного происхождения в перевязочном материале может колебаться в
зависимости от способа получения и возможного конечного применения этого раневого перевязочного
материала. В настоящем изобретении количество целлюлозы микробного происхождения, присутствующей в раневом перевязочном материале, предпочтительно составляет примерно от 1,5 до примерно
9 мас.%, более предпочтительно примерно от 3 до примерно 7 мас.%, наиболее предпочтительно примерно от 4 до примерно 6 мас.%. Предпочтительный диапазон содержания PHMB в раневом перевязочном материале на основе целлюлозы микробного происхождения составляет менее 7900 м.д., предпочтительно от 2700 до 3799 м.д., более предпочтительно от 3000 до 3700 м.д.
Раневой перевязочный материал по настоящему изобретению может быть использован для отдачи
влаги. Это означает, что рана, в которой имеется сухая некротическая ткань, может быть эффективно
вылечена наложением раневого перевязочного материала, содержащего жидкость. Большинство хронических ран, когда они изначально поверхностные, из-за основной проблемы, такой как венозная недостаточность, обычно образуют сухую поверхность, состоящую из мертвой (некротической) ткани. Отсутствие притока свежей крови в конкретную область (обычно вокруг лодыжки) является причиной гибели
дермы и эпидермиса под кожей и, в итоге, образования язвы. Жидкость, содержащаяся в раневом перевязочном материале в виде салфетки, может быть нанесена на сухую некротическую рану для стимуляции
аутолитического очищения раны, которое является первым условием заживления хронических ран. Жидкие материалы, которыми может быть пропитана салфетка, включают воду, физиологический раствор,
глицерин, синтетические полимеры, такие как полиэтиленоксид, и растворы биологических молекул,
включая белки, и фермент, такой как коллагеназа, но не ограничиваются ими.
Раневой перевязочный материал по настоящему изобретению также может быть использован для
поглощения влаги. Это означает, что рана, которая выделяет экссудат, может быть эффективно вылечена
путем наложения раневого перевязочного материала по настоящему изобретению, который будет поглощать избыточную жидкость из раны. Как правило, хронические раны, такие как венозные язвы, имеют тенденцию выделять в процессе заживления большое количество жидкости. Стадия экссудации
обычно происходит, когда рана начинает образовывать грануляционную ткань для заполнения пространства, которую занимала мертвая дермальная ткань. На этой стадии перевязочный материал по настоящему изобретению способен поглощать жидкий экссудат, одновременно сохраняя поверхность влажной для
того, чтобы эпителиальные клетки могли мигрировать. Эпителиальная миграция важна для окончательного затягивания раны. Таким образом, раневой перевязочный материал по данному изобретению способен обеспечивать оптимальные условия для заживления ран благодаря его двойственной способности
поглощать и отдавать влагу.
1. Получение целлюлозы микробного происхождения в статических условиях для процедур тестирования.
В процессе получения целлюлозы микробного происхождения по изобретению микроорганизмы,
такие как Acetobacter xylinum, выращивают в биореакторе, содержащем жидкую питательную среду, при
30°С при начальном pH 3-6. Среда основана на сахарозе или других углеводах. Предпочтительно эффективное получение пленки достигается с использованием сахарозы в качестве источника углерода, аммониевых солей в качестве источника азота и жидкого кукурузного экстракта в качестве источника пита-5-
010316
тельных веществ, с патентованной добавкой микроэлементов, т.е. в среде, которая отличается от основной среды Schramm & Hestrin (1954), используемой специалистами в данной области. Эта патентованная
добавка микроэлементов количественно определена в следующей таблице
Таблица 1
2 мл этого раствора добавляют на 1 л среды.
Выбирают подходящие биореакторы, которые минимизируют выпаривание и обеспечивают адекватные кислородограниченные условия. Кислородограниченные условия могут варьировать в зависимости от желаемого содержания воды и толщины целлюлозной пленки. Как правило, в кислородограниченных условиях кислород присутствует в количестве 5-21% от общего количества газа, присутствующего
на границе раздела воздух/жидкость. Биореактор состоит из пластикового контейнера с воздухонепроницаемой крышкой или крышкой с ограниченной газопроницаемостью. Размеры биореактора могут варьировать по конфигурации (куб или цилиндр) в зависимости от формы и размера получаемой целлюлозной
пленки. Например, цилиндр диаметром 6 дюйм (15,24 см) дает возможность получать перевязочный материал диаметром 6 дюйм (15,24 см), который может быть использован как есть или перед наложением
на рану может быть разрезан в соответствии с раной, которую лечат. Предполагается, что при ограничении количества кислорода в ферментационной среде Acetobacter используют углерод, имеющийся в среде, для продуцирования большего количества целлюлозы вместо того, чтобы использовать его для репродуцирования, что приводит к увеличению общего выхода целлюлозы.
Процессу ферментации в статических условиях давали возможность развиваться в течение периода
времени приблизительно 7-30 суток, в течение которых бактерии в культуральной среде продуцировали
цельную целлюлозную пленку, содержащую микроорганизмы. В зависимости от желаемой толщины,
которая соответствует определенному содержанию целлюлозы на единицу площади, ферментацию останавливают и тонкую пленку извлекают из биореактора. Избыток среды, содержащейся в этой тонкой
пленке, затем удаляют стандартными способами отделения, такими как прессование или центрифугирование, после чего осуществляют химическую очистку и последующую обработку пленки с получением
раневого перевязочного материала с соотношением целлюлоза/жидкость примерно от 1:10 до примерно
1:65. Неочищенная целлюлозная пленка имеет увеличенный выход сахар:целлюлоза примерно 35% по
сравнению с литературными значениями 10%. Этот увеличенный выход в сочетании с недорогим источником азота приводит к 40-кратному снижению себестоимости неочищенной целлюлозной пленки по
сравнению с целлюлозными пленками, производимыми в среде Schwamm & Hestrin [1954, J. Gen. Micro,
11: 123-129]. Эта целлюлозная пленка имеет уникальную многослойную трехмерную ламинарную структуру.
2. Способы обработки и депирогенизации.
После получения целлюлозной пленки клетки должны быть удалены из нее для очистки. Fontana et
al. (1990, Appl. Biochem. Biotech, 24: 253-264) охарактеризовали клетки как апирогенные, однако тестирование неочищенной целлюлозной пленки на пирогены с использованием набора для LAL-теста (тест
на реакцию с лизатом амебоцитов мечехвоста) дало положительный результат. Этот результат вызвал
необходимость удаления клеток путем химической обработки, обсуждаемой здесь, для того, чтобы успешно пройти стандартный тест на пирогенность и квалифицировать раневой перевязочный материал на
основе целлюлозы микробного происхождения как апирогенный.
Целлюлозную пленку подвергают серии стадий химической промывки для превращения неочищенной целлюлозной пленки в раневой перевязочный материал медицинского качества и апирогенный. В
типичном случае для обработки используют растворы гидроксидов в концентрациях 1-20 мас.%. Предпочтительно используют гидроксид натрия в концентрации не менее 3 мас.% и наиболее предпочтительно примерно от 3 до примерно 5 мас.% для ацетилирования и, в итоге, растворения клеток. Кроме того,
настоящее изобретение предусматривает промывку перекисью водорода, дающую возможность отбелить
и стерилизовать апирогенные пленки. Для осуществления отбеливания пленок пригодны концентрации
примерно от 0,05 до примерно 10 мас.% перекиси. Предпочтительно используемое количество перекиси
-6-
010316
составляет примерно от 0,1 до примерно 0,5%.
Способы очистки неочищенного продукта ферментации осуществляли с использованием различных
периодов времени экспозиции, концентраций и температур. С целью оптимизации способа были исследованы периоды времени обработки от 1 до 4 ч в сочетании с варьированием температуры в пределах 30100°C. Пленки, полученные при различных условиях обработки, тестировали на их соответственные
уровни пирогенности и физические характеристики. Затем по экономическим соображениям выбирали
условия способа, которые приводят к получению апирогенного продукта за наименьшее время и при
наименьшей концентрации химических веществ. Время осуществления этого способа может составлять
4 ч при примерно 90°C, предпочтительно примерно 1-2 ч при температуре примерно от 60 до примерно
80°C.
Количество клеточных остатков, оставшихся в целлюлозной салфетке после обработки, можно измерить с помощью LAL-теста, как предписано Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов, медикаментов и косметических средств США (FDA) в 21 CFR10.90. Способ очистки, в общих чертах
описанный выше, обеспечивает получение апирогенной целлюлозной салфетки (менее 0,05 Ед.э/мл (единиц эендотоксина на мл)). Допустимое содержание пирогенов в медицинских средствах класса I составляет 0,5 Ед.э/мл (норматив FDA для LAL-теста). Стадии LAL-теста определены производителем наборов
для данного теста, и можно просто следовать им с получением определенного уровня пирогенов в целлюлозной пленке.
3. Физическая модификация перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения.
Желаемые характеристики раневого перевязочного материала включают способность создавать
влажную среду и в то же время способность поглощать избыток экссудатной жидкости из раны или отдавать влагу ране. Имеющиеся в настоящее время в продаже гидрогелевые раневые перевязочные продукты имеют приблизительный состав 90-95% воды и 5-10% полимерного материала. Однако эти продукты не обеспечивают рану адекватной влажностью и характеризуются неадекватной прочностью.
Кроме того, эти перевязочные материалы имеют тенденцию прилипать к области раны. Это прилипание
к ране приводит к повторному повреждению раны при удалении. Напротив, перевязочные материалы по
настоящему изобретению обеспечивают превосходные увлажнение и поглощение благодаря их ламинарной многослойной трехмерной структуре, не обнаруженной ни у одного другого перевязочного материала. Перевязочный материал на основе целлюлозы также обладает способностью контролировать уровень
влаги на границе с раной посредством поглощения избыточной жидкости или отдачи влаги в зависимости от условий в области раны. Эта способность регулировать уровень влаги способствует стимулированию заживления хронических ран и представляет собой новую характеристику раневого перевязочного
материала на основе целлюлозы.
Целлюлозные пленки обычно имеют исходный состав более 90% воды и 0,2-1% целлюлозы или соотношение целлюлоза/вода приблизительно 1:100-1:500. Этот материал подвергают серии физических
обработок для получения конечного раневого перевязочного материала. Содержание воды в пропитанной салфетке на основе целлюлозы микробного происхождения может быть уменьшено до 98-0%, что
дает пленки с соотношением целлюлоза/вода приблизительно от 1:50 до 1:0, т.е. полностью сухой материал. Этого можно достичь с использованием различных методов сушки, включая механическое прессование, осушение центрифугированием, сушку на воздухе, вакуумную сушку и сублимационную сушку.
После механического прессования до желаемого соотношения целлюлоза/вода перевязочные материалы вымачивают в водном растворе, содержащем 5000 м.д. PHMB, в течение 4±0,25 ч без перемешивания. Можно использовать РНМВ-продукты различной молекулярной массы, например в пределах от
500 до 20000. Например, молекула PHMB может иметь от 5 до 12 бигуанидных единиц. В продаже имеются различные РНМВ-продукты, такие как Baquacil, Baquacil SB, Cosmoquil CQ и Ventocil. Могут быть
использованы также другие полимерные бигуаниды, такие как полимерные бигуаниды, описанные в патенте США № 4655756. Перевязочный материал затем прессуют для удаления нескольких мл раствора.
Полученный раствор разбавляют и анализируют на содержание PHMB на спектрофотометре, работающем в ультрафиолетовой и видимой областях света (UV/VIS), при 234 нм. Указанное количество PHMB,
выраженное в "м.д.", относится к раствору в перевязочном материале.
Полученные дегидратированные салфетки затем тестировали на поглощающую способность путем
полного погружения их в воду. Результаты показывают, что полностью высушенный материал обладает
уменьшенной способностью заново поглощать воду по сравнению с не высушенным материалом. Полностью дегидратированные салфетки в течение 24 ч поглощали только максимум 30 г воды на 100 см2
салфетки, тогда как не дегидатированные салфетки поглощали целых 60 г/100 см2 в течение того же периода времени. В связи с этим, раневые перевязочные материалы по настоящему изобретению предпочтительно имеют соотношение целлюлоза/вода примерно от 1:65 до 1:10 и более предпочтительно примерно от 1:24 до примерно 1:16. Эти раневые перевязочные материалы обладают способностью создавать влажную среду и даже обладают двойственной способностью отдавать влагу или поглощать экссудат для оптимального заживления ран.
-7-
010316
4. Упаковка и стерилизация продукта.
Упаковочный материал должен быть водонепроницаемым для предотвращения высыхания влажного целлюлозного раневого перевязочного материала и должен быть способным выдерживать стерилизацию. Например, герметически закрываемый путем запаивания шевронный пакет из алюминия с пластиковым покрытием обеспечивает адекватные непроницаемость и удерживание влаги.
Были исследованы два наиболее часто используемых способа стерилизации медицинских раневых
перевязочных материалов: стерилизация гамма-излучением и стерилизация электронным пучком. Упакованные целлюлозные раневые перевязочные материалы подвергали воздействию различных уровней излучения в пределах 5-50 кГр. Стерильность каждого перевязочного материала затем оценивали с использованием стандартных тестов на стерильность согласно USP (Фармакопея США). Также проверяли общий внешний вид и механическую целостность перевязочного материала и упаковочного материала. Результаты тестирования стерильности показали, что раневой перевязочный материал на основе целлюлозы был стабилен при дозе излучения 5-40 кГр, и что для обеспечения стерильности продукта была необходима минимальная доза 15 кГр. Продукты из раневого перевязочного материала на основе целлюлозы,
которые были предназначены для использования в тестах на биологическую совместимость на людях и
животных, затем стерилизовали при 30 кГр (фактор двойной безопасности) для обеспечения стерильности продукта. В отличие от глюконата хлоргексидина и сульфата неомицина PHMB стабилен при воздействии гамма-излучения в дозах, используемых для стерилизации перевязочного материала.
Биологические примеры
Пример 1. Исследование поглощения/отдачи.
Целлюлозные пленки различной толщины получали и обрабатывали для удаления клеточных остатков. Пленки прессовали до одинаковой толщины 1,9 мм с получением серии пленок с содержанием
целлюлозы от 1,5 до 10%. Эти пленки тестировали на способность поглощать физиологический раствор с
влажной поверхности и отдавать влагу сухой поверхности.
Взвешенные образцы одинаковой площади помещали на поверхность влажной губки. Физиологический раствор выливали вокруг губки для поддержания влажного состояния. Через 24 ч образцы повторно взвешивали для определения поглощения и полученные данные, выраженные в процентах от исходной массы образца, затем наносили на график. Для определения влагоотдачи взвешенные образцы
одинаковой площади помещали на поверхность гладкой сухой кожи. Перед этим кожу взвешивали. Через
2 ч образец удаляли и кожу повторно взвешивали для определения количества отданной влаги, и это количество, выраженное в процентах от массы исходного образца, также наносили на график.
Данные по поглощению и отдаче наносили на один график для определения оптимального содержания воды для обоих свойств. Эти данные представлены на фиг. 1. Из графика, представленного на фиг.
1, можно видеть, что для того, чтобы обладать способностями поглощения и отдачи, процент целлюлозы
в перевязочном материале в идеале должен находиться от 3 до 6%. Этот график также показывает, что
может быть изготовлен перевязочный материал, который обладает либо повышенной способностью поглощать, либо повышенной способностью отдавать за счет другого свойства.
Для того чтобы продемонстрировать превосходство способности раневого перевязочного материала
на основе целлюлозы микробного происхождения (XCell) отдавать влагу, осуществляли тесты на традиционных гидрогелях, имеющихся в продаже. Протестированными продуктами были Clearsite (NDM),
Nugel (Johnson&Johnson) и Flexigel (Smith&Nephew). B отношении этих продуктов осуществляли ту же
процедуру, которая описана выше. Данные представлены на фиг. 2. Использованные данные для XCell
были получены для материала, содержащего 4,3% целлюлозы. Ясно видно, что перевязочный материал
XCell отдает свыше 75% от своей исходной массы, и это означает, что по этому показателю он превосходит все продукты-конкуренты, которые отдают от 9 до 31%.
Хотя отдача очень важна для заживления ран, было бы идеально, чтобы раневой перевязочный материал обладал способностью и отдавать, и поглощать. Ранее описанная для поглощения процедура была
использована для тестирования раневого перевязочного материала на основе гидрогеля Clearsite. Данные
представлены на фиг. 3 вместе с данными по отдаче и данными для XCell. Как можно видеть, способность поглощать обоих образцов почти идентична, но материал XCell отдавал в шесть раз больше влаги,
чем гидрогель.
Образцы XCell, содержащие 2700 м.д. PHMB, оценивали в отношении их способности отдавать и
поглощать влагу. Среднее влагопоглощение при 2700 м.д. PHMB составляет 75,6% по сравнению с 71,5%
без PHMB; средняя влагоотдача составляет 80,7% при 2700 м.д. PHMB по сравнению с 79,0% без PHMB.
Ни влагоотдача, ни влагопоглощение существенно не меняются при добавлении 2700 м.д. PHMB.
Пример 2. Тестирование на биологическую совместимость.
Стерильный раневой перевязочный материал на основе целлюлозы подвергали следующим тестам
на биологическую совместимость:
1) сенсибилизация морских свинок;
2) первичное раздражение у кроликов и
3) клеточная цитотоксичность.
-8-
010316
В тесте на сенсибилизацию экстракты продукта инъецировали шести морским свинкам. Осуществляли мониторинг температуры тела морских свинок для регистрации какой-либо реакции сенсибилизации в течение периода исследования 8-10 недель. Результаты продемонстрировали отсутствие замедленной сенсибилизации при контакте с кожей у морских свинок. Тест на первичное раздражение представлял собой двухнедельное исследование на кроликах. В этом тесте экстракты целлюлозного перевязочного материала инъецировали подкожно и наблюдали проявление на коже какого-либо раздражения. Результаты продемонстрировали отсутствие свидетельств значительного раздражения или токсического
эффекта у кроликов в результате подкожной инъекции экстракта. Было обнаружено, что показатель первичного раздражения для экстракта перевязочного материала на основе целлюлозы был незначительным.
Наконец, цитотоксичность перевязочного материала в отношении клеток млекопитающих тестировали с
использованием культуры мышиных клеток L929. Результаты показали, что экстракт перевязочного материала на основе целлюлозы не был цитотоксичным и не подавлял рост клеток. Раневой перевязочный
материал на основе целлюлозы, полученный в соответствии с настоящим изобретением, успешно прошел
все эти тесты и, следовательно, гарантирует биологическую совместимость, безопасность продукта и не
тормозит заживление ран.
Дополнительно были исследованы различные уровни содержания PHMB в тестах на цитотоксичность, сенсибилизацию, раздражение, гемолиз и острый системный токсический эффект по методикам,
описанным в табл. 1. Результаты обобщены в табл. 1.
PHMB не обладает цитотоксичностью при уровнях вплоть до 3700 м.д., что было определено методом ISO Agarose Overlay Method (метод наложения агарозного слоя согласно стандарту Международной
организации по стандартизации (ISO)) (твердое вещество). PHMB не является сенсибилизатором при
уровнях вплоть до 15700 м.д., что было определено в исследовании ISO Maximization Sensitization Study
(исследование максимальной сенсибилизации согласно стандарту ISO) (экстракт). PHMB не является
раздражителем при уровнях вплоть до 7900 м.д., что было определено в исследовании ISO Intracutaneous
Study (внутрикожное исследование согласно стандарту ISO) (экстракт). PHMB не является гемолитическим или не демонстрирует системный токсический эффект при 2700 м.д. В отличие от целлюлозного
марлевого перевязочного материала, описанного в патенте США № 6369289, Orr, данные, представленные в табл. 2, свидетельствуют о том, что PHMB можно использовать в перевязочном материале на основе целлюлозы микробного происхождения, не вызывая раздражения, при уровнях содержания, которые значительно превышают диапазон не вызывающих раздражения уровней PHMB 500-3000 м.д., указанный в патенте США № 6369289.
Таблица 2
-9-
010316
Пример 3. Заживление ран на животных моделях.
Задача предклинических исследований на животных заключалась в том, чтобы сравнить показатели
заживления ран на свиных моделях с использованием раневого перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения и существующих раневых перевязочных продуктов, таких как гидроколлоиды и гидрогели.
Тест проводили с использованием протокола свиной модели Департамента дерматологии медицинского колледжа университета Майами (Department of Dermatology of the University of Miami School of
Medicine) в соответствии с нормами Ассоциации по аттестации и аккредитации содержания лабораторных животных (Association for Accreditation of Laboratory Animal Care (AAALAC)).
Кратко, тест проводили на 2 свиньях без патогенов в течение семидневного периода. Приблизительно 140 прямоугольных ран (10×7×0,3 мм) были сделаны в околопозвоночной и грудной области каждой свиньи с помощью специального электрокератома с лезвием 7 мм. Раны отделялись одна от другой
15 мм не раненой кожи. Примерно по 35 ран случайным образом предназначали каждой группе лечения
с использованием раневых перевязочных материалов на основе целлюлозы, гидроколлоида, гидрогеля и
без перевязочных материалов/воздействие воздуха. Оценку эпидермальной миграции начинали через два
дня после наложения перевязочных материалов.
В итоге, результаты показали, что раневой перевязочный материал на основе целлюлозы заживлял
раны на частичную толщину ткани, так же, как и гидроколлоидный перевязочный материал, и лучше,
чем гидрогелевый перевязочный материал. Важно, что на четвертый день после ранения раневой перевязочный материал на основе целлюлозы заживлял 70% ран по сравнению с 50, 20 и 0% ран, которые лечили с использованием перевязочных материалов на основе гидроколлоида, гидрогеля и незащищенных
ран соответственно. На пятый день и целлюлозные, и гидроколлоидные перевязочные материалы заживляли 100% ран, тогда как раны, подвергавшиеся воздействию гидрогеля и воздуха, заживали лишь на 70
и 50% соответственно.
Пример 4. Тестирование клинической эффективности на людях при лечении хронических ран.
Задача клинического тестирования на людях заключалась в том, чтобы оценить эффективность раневого перевязочного материала на основе целлюлозы при лечении различных типов хронических ран. В
общей сложности 29 пациентов с 31 различными типами хронических ран были включены в это исследование. Пациентов лечили с использованием раневого перевязочного материала на основе целлюлозы после того, как они прошли проверку на соответствие критериям включения, изложенным в протоколе исследования, одобренном IRB (Институционный наблюдательный совет (США)). Лечение с использованием раневого перевязочного материала на основе целлюлозы осуществляли в течение восьми недель
или до заживления раны. Проводили еженедельные наблюдения ран. После того как наблюдения регистрировали, перевязочные материалы меняли. Во время еженедельных посещений регистрировали как состояние, так и размер раны, и исследование заканчивалось после заживления раны или через восемь недель лечения.
Результаты исследования на людях можно распределить по трем значимым показателям, основываясь на свойствах раневого перевязочного материала на основе целлюлозы. Раневой перевязочный материал на основе целлюлозы продемонстрировал прочность при удалении некротических струпьев при
глубоких пролежневых язвах. Применение раневого перевязочного материала на основе целлюлозы
уменьшало гипергрануляционную ткань до уровня окружающего эпителия в двух случаях ран, представляющихся проблемными. Третья и наиболее интересная ответная реакция на раневой перевязочный материал на основе целлюлозы наблюдалась во время лечения венозных язв на ногах, в частности язв на
всю толщину ткани. Результаты продемонстрировали, что из тринадцати (13) венозных язв на ногах (две
раны на частичную толщину и одиннадцать ран на полную толщину) семь (54%) полностью затянулись,
а остальные (46%) продемонстрировали улучшение в процессе восьминедельного исследования.
Пример 5. Тестирование на антимикробную активность.
Антимикробная эффективность PHMB при 2700 м.д. была продемонстрирована по отношению различным микроорганизмам с использованием трех отдельных способов. Данные представлены в табл. 3.
При 2700 м.д. PHMB ингибирует рост 14 микробов/штаммов, что продемонстрировано в тесте на проникновение сквозь микробный барьер (Microbial Barrier/Strike-through Test). При 2700 м.д. PHMB убивает 99,2-99,9% из 5 микроорганизмов, что продемонстрировано с использованием модифицированного
метода тестирования 100 AATCC (Американской ассоциации текстильных химиков и колористов). Кроме того, не наблюдалось роста Aspergillus niger на образце перевязочного материала, содержащего
2700 м.д. PHMB, что продемонстрировано с использованием теста AATCC Test Method 30-Part III. Kerlix
и Excilon представляют собой марлевые перевязочные материалы, содержащие 2000 м.д. PHMB. При
сравнении этих марлевых перевязочных материалов с перевязочным материалом XCell, содержащим
2700 м.д. PHMB (табл. 3) выяснилось, что при использовании марлевых перевязочных материалов имеет
место макроскопический рост Aspergillus niger и отсутствие сокращения количества Pseudomonas aeruginosa (Kerlix) или Staphylococcus aureus (Excilon), тогда как при использовании перевязочного материала
XCell отсутствует рост Aspergillus niger и более 99,2% сокращение роста всех протестированных организмов. Уникальные характеристики XCell дают возможность использовать более высокие концентрации
- 10 -
010316
PHMB, обеспечивая превосходное сокращение или подавление роста микробов при отсутствии цитотоксичности, которая могла бы сдерживать заживление (табл. 2).
Таблица 3
Специалистам в данной области понятно, что могут быть сделаны различные модификации и вариации в способах и композициях по настоящему изобретению без отступления от сущности или объема
изобретения. Поэтому предполагается, что настоящее изобретение охватывает модификации и вариации
данного изобретения при условии, что они входят в объем прилагаемой пунктов формулы изобретения и
их эквивалентов.
Все публикации, включающие патенты и заявки на патенты, упомянутые в данном описании изобретения, включены в него посредством ссылки в той же самой степени, как если бы каждое из них было
индивидуально включено посредством ссылки.
- 11 -
010316
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения, содержащий от 1,5 до
9 мас.% целлюлозы микробного происхождения и полигексаметилен-бигуанид (PHMB).
2. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по п.1, содержащий
менее 7900 миллионных долей (м.д.) PHMB.
3. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1, 2,
содержащий от 2700 до 3700 м.д. PHMB.
4. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-3,
который принимает форму раны.
5. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-4,
который дает отрицательный результат в тесте на реакцию с лизатом амебоцитов мечехвоста (LAL) (менее 0,5 ед.э/мл (единиц эндотоксина на 1 мл)) и, следовательно, является апирогенным.
6. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-5,
который дает отрицательный результат в первичном тесте на раздражение на кроликах и отрицательный
результат в тесте на цитотоксичность с использованием мышиных клеток L929, успешно проходит тест
на сенсибилизацию на морских свинках и, следовательно, является биологически совместимым.
7. Перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-6,
который отдает примерно от 50 до примерно 90% массы своей жидкости сухому субстрату и поглощает
примерно от 35 до примерно 140% от своей массы.
8. Применение перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-7 для изготовления набора для лечения хронических ран.
9. Применение перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-7 для лечения хронических ран.
10. Применение по п.8 или 9, где хроническая рана представляет собой венозную язву.
11. Применение по п.8 или 9, где хроническая рана представляет собой пролежневую язву (пролежень).
12. Применение по п.8 или 9, где хроническая рана представляет собой диабетическую язву.
13. Применение по п.8 или 9, где хроническая рана представляет собой хроническую рану на полную или частичную толщину.
14. Применение по любому из пп.8-13, при котором целлюлозный перевязочный материал следует
менять от двух раз в сутки до одного раза в неделю.
15. Набор, включающий:
а) перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения по любому из пп.1-7;
б) влагонепроницаемую упаковку, содержащую указанный перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения;
в) инструкции по наложению указанного перевязочного материала на основе целлюлозы микробного происхождения на хроническую рану.
16. Набор по п.15, который стерилизован гамма-излучением.
17. Набор по п.15, который стерилизован посредством стерилизации электронным пучком.
18. Набор по любому из пп.15-17, где влагонепроницаемая упаковка, содержащая перевязочный материал на основе целлюлозы микробного происхождения в виде пленки, включает герметично закрываемый шевронный пакет из алюминия с пластиковым покрытием.
Поглощение и отдача влаги в зависимости от процента целлюлозы
Фиг. 1
- 12 -
010316
Отдача XCell и гидрогелями
Фиг. 2
Поглощение и отдача XCell по сравнению с Clearsite (NDM)
Фиг. 3
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2/6
- 13 -