Микрофлора кишечника человека и преддиабет
advertisement
Микрофлора кишечника и преддиабет В.М.Червинец ГБОУ ВПО Тверской ГМУ Минздрава России 23 сентября 2015 г. 1 – Цель и содержание работы: • Отбор и характеристика образцов содержимого желудочно-кишечного тракта и крови у людей с нормальным содержанием сахара и с предрасположенностью к диабету 2 типа; изучение качественных и количественных характеристик микроорганизмов, выделенных из кишечника. 2 • В исследование включены студенты Тверской государственной медицинской академии. Испытуемые были разделены на 2 группы. В первую группу вошли 30 человек, без признаков сахарного диабета. Во вторую группу вошли 30 человек, страдающие сахарным диабетом 2 типа. • Исследования проводились с разрешения этического комитета Тверской государственной медицинской академии. Все лица давали добровольное информированное согласие на бактериологическое исследование их материла. 3 • Для изучения спектра и количества микроорганизмов, населяющих кишечник, собирали кал и доставляли в бактериологическую лабораторию в течение 1 часа. Подготовка содержимого кишечника для исследования проводилась следующим образом: 1 г фекалий вносили в 9 мл стерильного изотонического раствора хлорида натрия (NaCl) и тщательно суспендировали путем встряхивания в шуттель-аппарате в течение 20-30 мин. Затем отстаивали и через 1 час из надосадочной жидкости делали разведения с изотоническим раствором хлорида натрия 102, 103, 104, 105. Из разведений 103, 104, 105 делали посев петлей на питательные среды. 4 • Культивирование осуществляли как в анаэробных условиях с использованием микроанаэростата и системы GasPak+, в эксикаторе со свечой при повышенном содержании CO2, так и в аэробном режиме. Инкубировали в течение 24 часов при температуре 37°С в термостате. После инкубации определяли культуральные, морфологические, тинкториальные свойства микроорганизмов по традиционной методике, а также производили подсчет числа колониеобразующих единиц (КОЕ) каждого типа колоний и пересчет КОЕ на 1 г исследуемого материала. Далее накапливали чистую культуру для идентификации и дальнейшего изучения. 5 • Биохимическая активность определялась с помощью тест систем api® (bio Mérieux) и программного обеспечения API WEB на базе бактериологической лаборатории кафедры микробиологии и вирусологии с курсом иммунологии ГБОУ ВПО Тверская ГМА Минздрава России. • Получение образцов капиллярной крови осуществляли с помощью прибора MICROLET 2 «Bayer». 6 Спектр и частота встречаемости микроорганизмов в кале здоровых людей . 7 • Количество выделяемых микроорганизмов было разным. Бифидобактерии в нормальном количестве выделялись в 56,5% случаев, превышающим норму на 1-3 порядка – в 30,4% и не выявлялись в 13,1%. • Лактобациллы в нормальном количестве изолировались в 60,9% проб фекалий, в 4,3% - в количестве превышающим норму и не выделялись в 34,8%. • Энтерококки в нормальном количестве выявлялись в 82,6% случаев, в 4,3% превышали норму и в 8,7% - меньше нормы. • Типичные эшерихии выделялись в 73,9% проб кала в количестве, превышающим норму на 1-2 порядка – в 8,7%, ниже нормы – в 8,7% и на выявлялись также в 8,7%. • Необходимо отметить, что лактозонегативные эшерихии изолировались в количестве превышающим норму на 2-4 порядка в 78,3% случаев, и в 21,7% не выделялись. • Клостридии выявлялись в 43,5% и во всех случаях их количество было выше нормального на 2-4 порядка. Количество пептококков, пептострептококков, золотистого стафилококка, эпидермального стафилококка, актиномицет также превышали нормальные значения. Микробиологические исследования кала на дисбактериоз опытной группы людей • В опытную группу входили юноши и девушки с показателем сахара в крови от 5,6 до 6,6. Спектр и частота встречаемости микроорганизмов в кале опытной группы людей. • Количество выделенных микроорганизмов также варьировало и отличалось от нормального содержания. Так, бифидобактерии в нормальном количестве выявлялись только в 20% проб кала, а в 70% - выше нормы на 1-2 порядка логарифма. Лактобациллы в нормальном количестве выделялись в 25% положителльных изолятов, в 10% - превышали норму на 3 порядка, а в 5% меньше нормы на 1 порядок. Энтерококки выделялись практически все в нормальном количестве. Количество кишечных палочек в норме было 60%, выше нормы – 15%, ниже – в 5%. Количество пептококков и стрептококков выявлялось выше нормы на 1-2 порядка. Сапрофитные и эпидермальные стафилококки изолировались в количестве превышающим норму на только 1 порядок. • На фоне измененного количественного содержания нормальной микрофлоры отмечено повышенние количества условно-патогенной микрофлоры. Так, количество всех выделенных клостридий превышало нормальное на 4-6 порядка, количество лактозонегативных эшерихий – на 2-4 порядка, золотистого стафилококка – на 4-6 порядков, дрожжевых грибов Candida albicans – на 6 порядков, стрептобацилл – на 4-6 порядков. • Таким образом у лиц с предласположенностью к сахарному диабету отмечается изменение качественное и количественное соотношение микрофлоры, характеризующееся как дисбактериоз 12 степени. Выводы • Состояние микрофлоры кишечника здоровых людей в возрасте 18-22 года можно характеризовать как нормобиоценоз и дисбактериоз 1 степени. • Микрофлора фекалий у людей с предрасположенностью к сахарному диабету изменяется в сторону дисбактериоза 1-2 степени за счет повышения содержания условно-патогенной микрофлоры на фоне снижения уровня лактобацилл.
