Влияние физических и химических факторов на микроорганизмы. Стерилизация. Дезинфекция. Асептика. Антисептика. Павел Несмиянов План 1.История вопроса 2.Терминология 3.Факторы, влияющие на эффективность стерилизации 4.Физические методы контроля микроорганизмов 5.Химические методы контроля микроорганизмов История вопроса Труды Пастера (1822-1895) История вопроса https://www.youtube.com/watch?v=duzREbZjSpM Терминология Стерилизация УБИТЬ ВСЕХ!!! Коммерческая стерилизация Уничтожение Clostridium botulinum Дезинфекция Уничтожение вегетативных форм Антисептика -»»- на живых тканях, в ране Асептика комплекс мероприятий, направленных на предупреждение попадания микроорганизмов в рану Degerming Механическое удаление микробов Санитация Обработка на пищевых предприятиях Биоцид (гермицил) Убивает микроорганизм Фунгицид, вируцид, спороцид Ну вы поняли Бактериостатики Останавливают рост бактерий Бактерициды Убивают бактерии Факторы, влияющие на эффективность обработки Количество микроорганизмов Факторы, влияющие на эффективность обработки Влияние окружения Биопленки (сообщество микроорганизмов на поверхности зуба, контактных линз, катетеров в виде гидрогеля) в 1000 раз более устойчивы к микробицидным агентам Факторы, влияющие на эффективность обработки Время воздействия 70 минут, 115 градусов Эндоспоры 7 минут, 125 градусов Эквивалентные режимы Факторы, влияющие на эффективность обработки Характеристики микроорганизмов Механизмы действия антимикробных агентов Нарушение проницаемости мембраны Повреждение белков и нуклеиновых кислот Механизмы действия антимикробных агентов Бактерициды Бактериостатики Физические методы контроля микроорганизмов Тепло (heat) Время термической гибели время, в течение которого погибают бактерии определенного вида в данной среде и при данной температуре Точка температурной гибели самая низкая температура, при которой в течение 10 минут погибают все микроорганизмы Коэффициент десятичной редукции Время, за которое погибает 90% бактерий при определенной температуре Физические методы контроля микроорганизмов Паровая стерилизация (moist heat) Физические методы контроля микроорганизмов Схема автоклава АВТОКЛАВ Физические методы контроля микроорганизмов Зависимость времени автоклавирования от объема Физические методы контроля микроорганизмов Индикаторы эффективности Физические методы контроля микроорганизмов Контроль стерилизации (checking for sterility Физические методы контроля микроорганизмов Пастеризация 72 градуса – 15 секунд. Индикатор – тест на фосфатазную активность Физические методы контроля микроорганизмов Ультравысокотемпературная пастеризация (UHT) Физические методы контроля микроорганизмов Стерилизация сухим теплом Сухожаровый шкаф: 170 градусов – 2 часа Физические методы контроля микроорганизмов Инсинерация (сжигание) Физические методы контроля микроорганизмов Высушивание Физические методы контроля микроорганизмов Лиофилизация Высушивание материала в замороженном состоянии (сохранение, не уничтожение!) В основе процесса – дессикация (высушивание) Физические методы контроля микроорганизмов Фильтрация HEPA фильтры – 0,3 мкм Физические методы контроля микроорганизмов Фильтрация Сканирующая электронная микроскопия Staphylococcus epidermidis (20000X) на поверхности 0,22 мкм фильтра Millipore Физические методы контроля микроорганизмов Низкотемпературное воздействие Малоэффективно, лучше замораживание-оттаивание Медленное замораживание более эффективно Физические методы контроля микроорганизмов Высокое давление Физические методы контроля микроорганизмов Ионизирующее излучение (радиация) Физические методы контроля микроорганизмов Электронно-лучевой стерилизатор Физические методы контроля микроорганизмов Продукты, стерилизованные радиацией Физические методы контроля микроорганизмов Ионизирующее излучение (радиация) Физические методы контроля микроорганизмов 电离辐射是不 Физические методы контроля микроорганизмов Сравнение ионизирующей радиации и УФ Физические методы контроля микроорганизмов Ультрафиолетовая стерилизация воды Физические методы контроля микроорганизмов Действие видимого света Обусловленное ультрафиолетовым компонентом: формирование синглетного кислорода 400-700 нм: Окисление рибофлавина и порфиринов Окисление красителями: эозином, метиленовым синим (абсорбируют энергию и вызывают окисление белков и НК Физические методы контроля микроорганизмов Ультразвук Физические методы контроля микроорганизмов Ультразвук Физические методы контроля микроорганизмов СВЧ-излучение (микроволны) Сами по себе волны малоэффективны Используются для стерилизации сред: -увеличение давления в емкости - увеличение температуры Физические методы контроля микроорганизмов Плазма Физические методы контроля микроорганизмов Будущее: кремниевые поверхности Физические методы контроля микроорганизмов Осмотическое давление Физические методы контроля микроорганизмов Переходим к химической стерилизации Физические методы контроля микроорганизмов: summary Физические методы контроля микроорганизмов: summary Химические методы контроля микроорганизмов Принципы эффективной дезинфекции Ни один агент не подходит для всех обстоятельств Концентрация влияет на действие Влияние обрабатываемой поверхности Влияние pH среды Химические методы контроля микроорганизмов Оценка эффективности дезинфектанта Металлические цилиндры Дезинфектант Проверка Химические методы контроля микроорганизмов Оценка эффективности дезинфектанта Химические методы контроля микроорганизмов Фенолы и их производные Фенол, лизол (смесь), резорцин Повреждение мембран клеток Химические методы контроля микроорганизмов Бисфенолы Химические методы контроля микроорганизмов Бигуаниды Хлоргексидин Химические методы контроля микроорганизмов Галогены Йодофор – йод+органический компонент Химические методы контроля микроорганизмов Гипохлорит Химические методы контроля микроорганизмов Спирты Этанол (70%) Изопропанол Химические методы контроля микроорганизмов Тяжелые металлы (heavy metals) Химические методы контроля микроорганизмов Тяжелые металлы Химические методы контроля микроорганизмов Тяжелые металлы Химические методы контроля микроорганизмов Поверхностно-активные вещества Не убивают, но смывают Химические методы контроля микроорганизмов Четвертичные амины Химические методы контроля микроорганизмов Мойте руки, но не чужим мылом Химические методы контроля микроорганизмов Кислоты и щелочи Лактат, пропионовая кислота – в хлебной продукции Бензоевая кислота – в напитках, соусах, маргарине Сорбаты - сыр Химические методы контроля микроорганизмов Сравнение некоторых дезинфектантов Химические методы контроля микроорганизмов Пищевые добавки (preservatives) Диоксид серы Сорбат калия Пропионат кальция Нитрат натрия Нитрит натрия (выбирай – канцероген (нитрозамины) или ботулизм) Химические методы контроля микроорганизмов Антибиотики Низин (E234) Химические методы контроля микроорганизмов Альдегиды Глутаральдегид Орто-фталальдегид Орто-фталальдегид Химические методы контроля микроорганизмов Сверхкритические жидкости (CO2) Химические методы контроля микроорганизмов Пероксид водорода, перацетат, бензоил пероксид, озон Химические методы контроля микроорганизмов Типы дезинфектантов Химические методы контроля микроорганизмов Этиленоксид Химические методы контроля микроорганизмов Красители Акридин Метиленовый синий Генциан виолет Химические методы контроля микроорганизмов Домашний способ 5 литров воды 1 стакан «Белизны» 1 стакан уксуса Кислота высвобождает больше ионов хлора из отбеливателя Химические методы контроля микроорганизмов Бытовуха* * Характеристики микроорганизмов Химические методы контроля микроорганизмов: summary Химические методы контроля микроорганизмов: summary Спасибо за внимание!