3 катехоламина в плазме и моче ИФА (3

3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
1
_________________________________________________________________________________________
Регистрационное удостоверение ФС 2010/06594 от 22 апреля 2010 года
3 катехоламина в плазме и моче ИФА
(3-CAT ELISAFast Track)
Иммуноферментный тест для количественного определения адреналина (эпинефрина), норадреналина
(норэпинефрина) и дофамина в плазме крови и моче.
Набор рассчитан на 3 × 96 определений
Номер по каталогу: ВАЕ-6600
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор 3-CAT ELISAFast Track – диагностическая in vitro иммуноферментная (ИФА) тест-система для
количественного определения адреналина (эпинефрина), норадреналина (норэпинефрина) и дофамина в
плазме крови и моче.
1. ВВЕДЕНИЕ И ПРИНЦИП МЕТОДА
Адреналин (эпинефрин), норадреналин (норэпинефрин) и дофамин экстрагируются цис-диол-специфичным
аффинным гелем, ацилируются и затем ферментативно модифицируются.
Набор 3-CAT ELISAFast Track представляет собой твердофазный конкурентный метод иммуноферментного
анализа на микропланшетах. Антиген иммобилизован на поверхности лунок микропланшета (твердой
фазе). Модифицированные аналиты, содержащиеся в стандартах, контролях и исследуемых образцах, и
иммобилизованные на твердой фазе конкурируют за ограниченное число центров связывания
специфичных антител антисыворотки. Когда система достигнет равновесия, несвязавшийся антиген и
несвязавшиеся комплексы антиген-антитело удаляются промывкой. Антитела, связавшиеся с
иммобилизованным на твердой фазе аналитом, выявляют конъюгатом антикроличьих антител к IgG с
пероксидазой. В качестве субстрата используется ТМБ, интенсивность реакции измеряют при длине волны
450 нм.
Количество определяемого аналита в исследуемых образцах рассчитывается по калибровочной кривой,
построенной по известным концентрациям в стандартах.
2. ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Все реагенты необходимо хранить при температуре 2 – 8оС в течение всего срока годности. Не используйте
компоненты набора по истечении срока годности, указанного на этикетке. Не смешивайте компоненты из
наборов разных серий в одном исследовании.
3. МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ, ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
Набор 3-CAT ELISAFast Track содержит реагенты, достаточные для выполнения 96 количественных
определений (включая стандарты) адреналина, норадреналина и дофамина.
FOILS
Пленка для заклеивания
стрипов
ВА E-0030
WASH-CONC 50×
Концентрат промывочного
буфера
ВА E-0040
CONJUGATE
ВА E-0055
SUBSTRATE
ВА E-0080
STOP-SOLN
ВА E-0131
UU ADR-MN
ВА E-0231
UU NAD NMN
ВА E-0331
UU DOP
BA D-0090
3х4 шт.
готова к использованию
Концентрат. Разведите
содержимое флакона
3х20 мл
дистиллированной водой до
конечного объема 1000 мл
готов к использованию,
Ферментный конъюгат
3х12 мл
конъюгированные с пероксидазой
хрена антитела к IgG кролика
готов к использованию, содержит
Субстрат
3х12 мл
ТМБ
готов к использованию, содержит
Стоп-реагент
3х12 мл
0,25 M серную кислоту
12 стрипов 8-луночных
Планшет с иммобилизованным
(разделяемых на отдельные
1х96 лунок
адреналином – метанефрином
лунки), покрытых адреналиномметанефрином, синего цвета
12 стрипов 8-луночных
(разделяемых на отдельные
Планшет с иммобилизованным
лунки), покрытых
норадреналином –
1х96 лунок
норадреналиномнорметанефрином
норметанефрином, желтого
цвета
Планшет с иммобилизованным
12 стрипов 8-луночных
1х96 лунок
дофамином
(разделяемых на отдельные
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
2
_________________________________________________________________________________________
лунки), покрытых дофамином,
зеленого цвета
Кроличья, готовая к
использованию, синего цвета,
синяя крышка
Кроличья, готовая к
использованию, желтого цвета,
желтая крышка
Кроличья, готовая к
использованию, зеленого цвета,
зеленая крышка
ВА E-6110
ADR-AS
Антисыворотка к Адреналину
1х6 мл
ВА E-6210
NAD-AS
Антисыворотка к
Норадреналину
1х6 мл
ВА E-6310
DOP-AS
Антисыворотка к Дофамину
1х6 мл
ВА R-0050
ADJUST-BUFF
Корректирующий буфер
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6601
STANDARD A
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6602
STANDARD B
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6603
STANDARD C
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6604
STANDARD D
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6605
STANDARD E
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6606
STANDARD F
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6611
ACYL-BUFF
Ацилирующий буфер
1х20 мл
готов к использованию
ВА E-6612
ACYL-REAG
Ацилирующий реагент
1х3 мл
готов к использованию
BA R-6613
ASSAY-BUFF
Буфер для анализа
1х6 мл
ВА R-6614
COENZYME
Кофермент
1х2 мл
ВА R-6615
ENZYME
Фермент
6х1 мл
BA R-6617
EXTRACT-BUFF
Буфер для экстракции
1х6 мл
ВА R-6618
EXTRACT-PLATE 48
Планшет для экстракции
BA E-6619
HCl
Соляная кислота
1х30 мл
ВА R-6651
CONTROL 1
Контроль 1
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6652
CONTROL 2
Контроль 2
1х4 мл
готов к использованию
ВА R-6609
STANDARD A/B
Стандарт А/B* (Д – 4,5 нг/мл)
1х4 мл
готов к использованию
Стандарт А
(А – 0 нг/мл; Н – 0 нг/мл;
Д – 0 нг/мл)
Стандарт B
(А – 1 нг/мл; Н – 5 нг/мл;
Д – 10 нг/мл)
Стандарт C
(А – 4 нг/мл; Н – 20 нг/мл;
Д – 40 нг/мл)
Стандарт D
(А – 15 нг/мл; Н – 75 нг/мл;
Д – 150 нг/мл)
Стандарт E
(А – 50 нг/мл; Н – 250 нг/мл;
Д – 500 нг/мл)
Стандарт F
(А – 200 нг/мл; Н – 1000 нг/мл;
Д – 2000 нг/мл)
2х48 лунок
готов к использованию, содержит
1М НCl
готов к использованию, содержит
S-аденозил-L-метионин
Лиофилизованный, содержит
фермент катехол-Ометилтрансферазу
готов к использованию
покрытых боранированным
аффинным гелем
готов к использованию, желтого
цвета, содержит 0,025М НCl
Внимание! Для определения дофамина в плазме крови необходим дополнительный стандарт А/В.
4. НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА
Откалиброванные автоматические пипетки переменного объема (например, 10-100 мкл/100-1000 мкл)
Устройство для промывки планшет
Планшетный спектрофотометр, способный измерять оптическую плотность при длине волны 450 нм,
620 или 650 нм
Орбитальный шейкер (со скоростью около 600 об/мин; амплитуда встряхивания 3 мм)
Абсорбирующий материал (фильтровальная бумага, бумажные полотенца)
Дистиллированная вода
Вортекс
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
3
_________________________________________________________________________________________
5. ВЗЯТИЕ И ХРАНЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Плазма
Необходимо использовать плазму с ЭДТА в качестве антикоагулянта.
Не используйте гемолизированные и особенно липемические образцы.
Хранение: не более 6 часов при температуре 2 – 8 °С, не более 6 месяцев при температуре – 20 °С.
Избегайте повторного замораживания и оттаивания образцов.
Моча
Можно использовать как разовую, так и суточную мочу.
Собранный объем мочи следует поместить в емкость, содержащую 10 – 15 мл 6 М соляной кислоты, и
перемешать.
Для расчета результатов анализа необходимо определить суточный объем мочи.
Для длительного хранения (до 6 месяцев) образцы мочи следует заморозить и хранить при температуре 20 °С.
Избегать повторного замораживания и оттаивания.
Предохранять от воздействия прямых солнечных лучей.
6. ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
Перед использованием дайте всем реагентам прогреться до комнатной температуры и тщательно
перемешайте, аккуратно переворачивая. Рекомендуется постановка анализа в дубликатах.
6.1. Приготовление реагентов
Промывочный буфер
Разведите 20 мл Концентрата промывочного буфера дистиллированной водой до конечного объема
1000 мл. Храните разведенный буфер не более 6 месяцев при температуре 4 – 8 °С.
Приготовление раствора фермента
Внести во флакон с Ферментом (“Enzyme”) 1 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать.
Добавить 0,3 мл Кофермента (“Coenzyme”), а затем – 0,7 мл Корректирующего буфера (“Adjustment
Buffer”). Общий объем ферментного раствора составляет 2,0 мл.
Внимание! Ферментный раствор необходимо готовить непосредственно перед использованием
(не ранее чем за 10–15 минут). Остатки раствора утилизировать после использования.
6.2. Подготовка образцов, экстракция и ацилирование
Внимание! Для определения дофамина
дополнительного стандарта А/В.
в
плазме
крови
обязательно
использование
1. Внесите по 10 мкл стандартов A – F, контролей 1 и 2, образцов мочи и по 300 мкл образцов
плазмы в соответствующие лунки Планшета для экстракции.
2. Добавьте по 250 мкл дистиллированной воды в лунки со стандартами, контролями и
образцами мочи.
3. Внесите во все лунки по 50 мкл Буфера для анализа.
4. Внесите во все лунки по 50 мкл Буфера для экстракции.
5. Закройте планшет пленкой для заклеивания стрипов и инкубируйте 30 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин).
6. Снимите пленку и вытряхните жидкость из лунок, остатки удалите, постукивая перевернутым
планшетом по впитывающей бумаге.
7. Внесите во все лунки по 1 мл Промывочного буфера. Инкубируйте 5 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин). Вытряхните жидкость из лунок,
остатки удалите, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
8. Внесите во все лунки еще по 1 мл Промывочного буфера. Инкубируйте 5 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин). Вытряхните жидкость из лунок,
остатки удалите, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
9. Внесите во все лунки по 150 мкл Ацилирующего буфера.
10. Добавьте во все лунки по 25 мкл Ацилирующего реагента.
11. Инкубируйте планшет в течение 15 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном
шейкере (около 600 об/мин).
12. Вытряхните жидкость из лунок, остатки удалите, постукивая перевернутым планшетом по
впитывающей бумаге.
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
4
_________________________________________________________________________________________
13. Внесите во все лунки по 1 мл Промывочного буфера. Инкубируйте 10 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин). Вытряхните жидкость из лунок,
остатки удалите, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
14. Внесите во все лунки по 175 мкл Соляной кислоты.
15. Закройте планшет пленкой и инкубируйте 10 минут при комнатной температуре (20-25°С) на
орбитальном шейкере (около 600 об/мин).
Удалите пленку.
Внимание: Не удаляйте содержимое лунок после инкубации!
Для последующего ИФА необходимо следующие объемы супернатанта:
Для определения дофамина: Стандарты и образцы мочи – 25 мкл, образцы плазмы – 50 мкл.
Для определения адреналина – 100 мкл.
Для определения норадреналина – 20 мкл.
6.3. Иммуноферментный анализ – Дофамин.
1. Внесите по 25 мкл свежеприготовленного Раствора фермента (см. пункт 6.1) во все лунки
Планшета с иммобилизованным дофамином.
2. Внесите в соответствующие лунки по 25 мкл экстрагированных стандартов, контролей и
образцов мочи и по 50 мкл экстрагированных образцов плазмы.
3. Внесите в лунки со стандартами, контролями и образцами мочи по 25 мкл Соляной кислоты.
4. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
5. Внесите в каждую лунку по 50 мкл Антисыворотки к дофамину и заклейте Пленкой для стрипов.
6. Инкубируйте в течение 2 часов при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
7. Снимите пленку, удалите содержимое лунок и тщательно промойте 3 раза, добавляя по 300 мкл
разведенного Промывочного буфера в каждую лунку. После цикла промывки удалите остатки
жидкости из лунок, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
8. Внесите во все лунки по 100 мкл Ферментного конъюгата.
9. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
10. Удалите содержимое лунок и тщательно промойте 3 раза, добавляя по 300 мкл разведенного
Промывочного буфера в каждую лунку. После цикла промывки удалите остатки жидкости из лунок,
постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
11. Внесите во все лунки по 100 мкл Субстрата и инкубируйте в течение 20 – 30 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин). Избегайте воздействия
прямых солнечных лучей!
12. Внесите во все лунки по 100 мкл Стоп-реагента и встряхните планшет для обеспечения
гомогенного распределения раствора.
13. Измерьте оптическую плотность раствора не позже, чем через 10 минут, с помощью планшетного
спектрофотометра при длине волны 450 нм и референтной длине волны (620–650 нм).
6.4. Иммуноферментный анализ – Норадреналин
1. Внесите по 25 мкл свежеприготовленного Раствора фермента (см. пункт 6.1) во все лунки
Планшета с иммобилизованным норадреналином.
2. Внесите в соответствующие лунки по 20 мкл экстрагированных стандартов, контролей и
исследуемых образцов.
3. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
4. Внесите в каждую лунку по 50 мкл Антисыворотки к Норадреналину и заклейте Пленкой для
стрипов.
5. Инкубируйте в течение 2 часов при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
6. Снимите пленку, удалите содержимое лунок и тщательно промойте 3 раза, добавляя по 300 мкл
разведенного Промывочного буфера в каждую лунку. После цикла промывки удалите остатки
жидкости из лунок, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
7. Внесите во все лунки по 100 мкл Ферментного конъюгата.
8. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
9. Удалите содержимое лунок и тщательно промойте 3 раза, добавляя по 300 мкл разведенного
Промывочного буфера в каждую лунку. После цикла промывки удалите остатки жидкости из лунок,
постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
5
_________________________________________________________________________________________
10. Внесите во все лунки по 100 мкл Субстрата и инкубируйте в течение 20 – 30 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин). Избегайте воздействия
прямых солнечных лучей!
11. Внесите во все лунки по 100 мкл Стоп-реагента и встряхните планшет для обеспечения
гомогенного распределения раствора.
12. Измерьте оптическую плотность раствора не позже, чем через 10 минут, с помощью планшетного
спектрофотометра при длине волны 450 нм и референтной длине волны (620–650 нм).
6.5. Иммуноферментный анализ – Адреналин
1. Внесите по 25 мкл свежеприготовленного Раствора фермента (см. пункт 6.1) во все лунки
Планшета с иммобилизованным адреналином.
2. Внесите в соответствующие лунки по 100 мкл экстрагированных стандартов, контролей и
исследуемых образцов.
3. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
4. Внесите в каждую лунку по 50 мкл Антисыворотки к Адреналину и заклейте Пленкой для
стрипов.
5. Инкубируйте в течение 2 часов при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
6. Снимите пленку, удалите содержимое лунок и тщательно промойте 3 раза, добавляя по 300 мкл
разведенного Промывочного буфера в каждую лунку. После цикла промывки удалите остатки
жидкости из лунок, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
7. Внесите во все лунки по 100 мкл Ферментного конъюгата.
8. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере
(около 600 об/мин).
9. Удалите содержимое лунок и тщательно промойте 3 раза, добавляя по 300 мкл разведенного
Промывочного буфера в каждую лунку. После цикла промывки удалите остатки жидкости из лунок,
постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге.
10. Внесите во все лунки по 100 мкл Субстрата и инкубируйте в течение 20 – 30 минут при комнатной
температуре (20-25°С) на орбитальном шейкере (около 600 об/мин). Избегайте воздействия
прямых солнечных лучей!
11. Внесите во все лунки по 100 мкл Стоп-реагента и встряхните планшет для обеспечения
гомогенного распределения раствора.
12. Измерьте оптическую плотность раствора не позже, чем через 10 минут, с помощью планшетного
спектрофотометра при длине волны 450 нм и референтной длине волны (620–650 нм).
7. РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Концентрации стандартов
A
B
C
D
E
F
Адреналин (нг/мл)
0
1
4
15
50
200
Адреналин (нмоль/л)
0
5,5
22
82
273
1092
Норадреналин (нг/мл)
0
5
20
75
250
1000
Норадреналин (нмоль/л)
0
30
118
443
1478
5910
Дофамин (нг/мл)
0
10
40
150
500
2000
4,5
Дофамин (нмоль/л)
0
65
261
980
3265
13060
29
Стандарт
Перевод единиц
A/B*
Адреналин (нг/мл) × 5,46 = Адреналин (нмоль/л)
Норадреналин (нг/мл) × 5,91 = Норадреналин (нмоль/л)
Дофамин (нг/мл) × 6,53 = Дофамин (нмоль/л)
*Внимание! Для определения дофамина в плазме крови необходим дополнительный стандарт А/В.
Рассчитайте среднюю оптическую плотность каждого стандарта, контроля или исследуемого образца. На
миллиметровой бумаге постройте калибровочную кривую зависимости средней оптической плотности
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
6
_________________________________________________________________________________________
стандартов (по оси Y, линейная шкала) от log концентрации аналитов в стандартах в нг/мл (по оси X,
логарифмическая шкала). Для построения кривой можно использовать различные типы нелинейной
регрессии (напр., сплайн, 4х парам. логистику, Акима).
Расчет концентрации в образцах мочи и в контролях:
Содержание адреналина, норадреналина и дофамина в образцах мочи и в контролях рассчитывается
непосредственно по калибровочной кривой.
Количество аналита, выделяемого с мочой в течение дня (мкг/день) рассчитывается как:
Концентрация аналита в исследуемом образце (мкг/л) × суточный объем мочи (л/день)
мкг/день = мкг/л × л/день
Расчет концентрации в образцах плазмы:
Для расчета концентрации адреналина и норадреналина в образцах плазмы следует величины,
определенные по калибровочной кривой, разделить на 30.
Для расчета концентрации дофамина в образцах плазмы следует величины, определенные по
калибровочной кривой, разделить на 60.
7.1. Контроль качества
Рекомендуется использовать контрольные образцы в соответствии с государственными и федеральными
нормативами. Используйте контроли как с нормальными, так и с патологическими уровнями концентраций
определяемых веществ. Концентрации аналитов в контролях, прилагающихся к набору, и других
коммерческих контролях не должны выходить за рамки заданных диапазонов. Заданные диапазоны
контролей, прилагающихся к набору, указаны в листе контроля качества (QC Report).
7.2. Калибровка
Связывание антисывороток и конъюгатов фермента, а также активность использованного фермента
зависят от температуры, поэтому значения оптической плотности могут изменяться, если не используется
термостат. Чем выше температура, тем будут выше значения оптической плотности. Сходные колебания
связаны и с изменением времени инкубации. Оптимальная температура при иммуноферментном анализе –
20 – 25оС.
Примечание: при превышении максимальных значений оптической плотности, измеряемых прибором
при длине волны 450 нм, можно измерить оптическую плотность в лунках не более чем через 10 минут,
используя длину волны 405 нм.
7.3. Типичные калибровочные кривые
На стр. 7 английского варианта инструкции приводится образец типичных калибровочных кривых для
набора 3-CAT ELISAFast Track. Пожалуйста, не используйте эту кривую для определения концентрации
аналитов в образцах.
8. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
8.1. Ожидаемые значения
Референтные значения, приведенные ниже, могут служить только в качестве ориентировочных.
Рекомендуется для каждой лаборатории выработать собственные значения нормы.
Адреналин
Норадреналин
Дофамин
< 20 мкг/день
(110 нмоль/день)
< 90 мкг/день
(535 нмоль/день)
< 600 мкг/день (3900
нмоль/день)
< 100 пг/мл
< 600 пг/мл
< 100 пг/мл
Адреналин
Норадреналин
Дофамин
Моча
0,3 нг/мл
1,5 нг/мл
4,5 нг/мл
Плазма
10 пг/мл
50 пг/мл
25 пг/мл
Моча
Плазма
8.2. Чувствительность (Предел обнаружения)
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
7
_________________________________________________________________________________________
8.3. Специфичность (Перекрестная реактивность)
Соединение
Перекрестная реакция (%)
Дериватизированный Адреналин
Дериватизированный Норадреналин
Дериватизированный Дофамин
Метанефрин
Норметанефрин
3-Метокситирамин
3-Метокси-4-гидроксифенилгликоль
Тирамин
Фенилаланин
Кофеиновая кислота
L-допа
Гомованилиновая кислота
Тирозин
3-Метокси-4-гидроксиманделовая
кислота
Адреналин
100
0,20
<0,0007
0,64
0,0009
<0,0007
0,03
<0,0007
<0,0007
<0,0007
<0,0007
<0,0007
<0,0007
<0,0007
Норадреналин
0,14
100
0,2
<0,003
0,48
<0,003
0,01
<0,003
<0,003
<0,003
<0,003
<0,003
<0,003
<0,003
Дофамин
0,03
0,87
100
<0,007
0,008
0,55
<0,007
0,13
<0,007
<0,007
<0,007
<0,007
<0,007
<0,007
8.4. Воспроизводимость
Норадреналин
Вариабельность в пределах постановки
Образец
Среднее ± SD (нг/мл)
CV (%)
1
24,4 ± 3,9
16,1
2
92,7 ± 9,0
9,8
Вариабельность между постановками
Образец
Среднее ± SD (нг/мл)
CV (%)
1
39,8 ± 3,4
8,5
2
135 ± 20
15,0
Адреналин
Вариабельность в пределах постановки
Образец
Среднее ± SD (нг/мл)
CV (%)
1
2,5 ± 0,4
15,0
2
11,7 ± 0,8
6,9
Вариабельность между постановками
Образец
Среднее ± SD (нг/мл)
CV (%)
1
8,8 ± 1,1
13,2
2
34,2 ± 5,2
15,4
Дофамин
Вариабельность в пределах постановки
Образец
Среднее ± SD (нг/мл)
CV (%)
1
120 ± 11,5
9,5
2
1074 ± 169
15,8
Вариабельность между постановками
Образец
Среднее ± SD (нг/мл)
CV (%)
1
148 ± 23,6
15,9
2
589 ± 107
18,2
8.5. Линейность
Норадреналин
Диапазон
4,9-339 нг/мл
Серийные разведения до
1:64
Диапазон (%)
87-120
Адреналин
Дофамин
1,3-81,4 нг/мл
14-917 нг/мл
1:64
1:64
88-122
86-104
8.6. Открытие
Моча
Норадреналин
Плазма
Моча
Плазма
Моча
Плазма
Адреналин
Дофамин
Значение (%)
109
Диапазон (%)
83-115
97
107
92
95
90
85-108
84-119
80-113
85-104
74-110
8.7. Сравнение с ВЖХ
Норадреналин
Адреналин
Дофамин
ВЖХ=1,27 ИФА-0,04
ВЖХ=1,17 ИФА-0,06
ВЖХ=0,98 ИФА+0,08
r =0,96; n=30
r =0,99; n=30
r =0,95; n=30
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
8
_________________________________________________________________________________________
* Концентрации были оценены с использованием методов ИФА и ВЖХ (образцы для внешнего контроля
качества QC, полученные от UK NEQAS). Корреляция между этими двумя методами была очень высокой.
Следует принять во внимание, что величины данных контрольных образцов представляют собой среднее
значение концентраций, полученных примерно 40 различными пользователями ВЖХ, и всегда содержат
один патологический образец на постановку.
9. ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
9.1 Надежность результатов анализа
Для того чтобы обеспечить надежные результаты анализа, его следует проводить в соответствии с
прилагающимися инструкциями, а также с текущими правилами и нормативами (GLP, RILIBÄK и т.д.).
Особое внимание следует обращать на контрольные исследования точности и правильности во время
проведения анализа; результаты этих контрольных исследований не должны выходить за рамки
нормальных диапазонов. В случае значительных расхождений в характеристиках анализа, указанных
производителем и реально полученных Вами, пожалуйста, свяжитесь с производителем набора для
получения дальнейших инструкций.
Рекомендуется каждой лаборатории выработать собственные референсные интервалы. Значения,
приведенные в данной инструкции ориентировочные. При постановке диагноза нельзя полагаться только на
результаты полученные с помощью этого набора. Только в случаях, когда результаты данных
исследований коррелируют с результатами других анализов и соответствуют общей клинической картине
пациента, они имеют клиническую значимость.
9.2.Рекламации
В случае рекламации, пожалуйста, прилагайте письменный отчет, содержащий все данные по проведению
анализа, полученным результатам, а также копии оригиналов распечаток. Пожалуйста, свяжитесь с Labor
Diagnostika Nord для получения формы рекламации и верните эту форму полностью заполненной
производителю.
9.3. Гарантии
Набор произведен в соответствии с последними достижениями в технологии и подвергается обязательным
внутренним и внешним проверкам контроля качества. Любые изменения в наборе или в процессе
постановки анализа, а также использование реагентов непредусмотренного назначения могут отрицательно
сказаться на результатах анализа и, таким образом, не подпадают под действие гарантии. Производитель
не отвечает за повреждения, произошедшие при транспортировке.
9.4 Утилизация отходов
Остатки материалов и/или все остатки реагентов и готовых к использованию растворов являются
специальными отходами. Обращение с ними регулируется местными и государственными нормативами. Об
удалении специальных отходов имеется информация соответствующих структур органов власти.
Утилизация набора должна быть проведена в соответствии с действующими на территории страны
нормативами. Законодательной базой утилизации специальных отходов является пакет социальноэкономических законов. Данные по безопасности набора можно найти на домашней страничке компании
LDN. Данные по безопасности соответствуют стандарту ISO 11014-1.
9.5 Возможные отклонения
Не используйте в одном анализе реагенты и растворы из разных серий набора. Учитывайте разные условия
транспортировки и хранения набора. Отступления от инструкции при обработке образцов и работе с
набором могут привести к получению искаженных результатов. Не используйте компоненты набора по
истечении срока годности. Избегайте микробной контаминации реагентов и промывочного раствора.
Соблюдайте указанные в инструкции режимы инкубации и промывки.
9.6 Меры предосторожности
1.
2.
3.
4.
Соблюдайте указанные в инструкции режимы инкубации и промывки.
Никогда не пипетируйте ртом и избегайте контакта реагентов и образцов с кожей.
Не курите, не ешьте и не пейте в зоне работы с образцами или тестовыми пробирками к набору.
При работе с компонентами набора или с образцами всегда используйте одноразовые перчатки,
тщательно мойте руки сразу после окончания работы.
5. Избегайте разбрызгивания реагентов и образцов!
6. Избегайте контактов реагентов с кожей, используйте защитные перчатки и одежду.
7. Все стадии необходимо выполнять согласно протоколу исследования. Необходимо точно соблюдать
объемы всех реагентов и образцов, указанные в различных разделах инструкции (объемы при отборе
пипеткой или в процессе подготовки).
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
3-CAT ELISAFast Track, Labor Diagnostika Nord GmbH & Co. KG
9
_________________________________________________________________________________________
8. Правильные результаты также зависят от использования поверенных откалиброванных пипеточных
дозаторов.
9. Азид натрия может взаимодействовать свинцом и медью пробирок с образованием взрывчатых
соединений, для предотвращения этого необходимо промывать их большим объёмом воды.
10. Все реагенты набора, содержащие человеческую или животную сыворотку или плазму
протестированы и имеют подтвержденный отрицательный результат по ВИЧ (I/II), HbsAg, HCV. Тем не
менее, все реагенты должны рассматриваться как потенциально инфицированные и соответственно
утилизироваться.
Современная литература, информация о клиническом значении и другие сведения о наборе размещены на
домашней странице фирмы-производителя или могут быть предоставлены напрямую.
ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СИМВОЛЫ
Температура
хранения
Производитель
Для проведения <n>
анализов
Использовать до
Серия
Только для in vitro
диагностики
См. инструкцию по
применению
Состав
CE маркировка
Внимание!
Номер по каталогу
Только в
исследовательских
целях!
Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования
сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см.
внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо
руководствуйтесь оригиналом инструкции.
LDN 3-CAT_BAE-6600_rus.doc
12/15/2010 3:57:00 PM
Оригинал
04.11.2010
_____________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2010
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru