Уровень активности антиоксидантных ферментов у больных с

УДК 612.1: 612.13
Л.П. Смирнова, Н.М. Кротенко, В.Н. Логинов,
М.В. Духан, Н.В. Кротенко, Е.В. Рудиков, Е.В. Гуткевич, С.А. Иванова
УРОВЕНЬ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ
У БОЛЬНЫХ С НЕВРОТИЧЕСКИМИ РАССТРОЙСТВАМИ
Показано достоверное отличие показателей активности глутатионзависимых ферментов и каталазы у лиц с невротическими расстройствами от показателей активности этих ферментов в контрольной группе, что свидетельствует о вовлечённости эритроцитарных антиоксидантных ферментов в патогенез адаптационных нарушений на клеточном уровне при психогенных расстройствах.
Пограничные психические расстройства приобретают
всё большую актуальность в структуре заболеваемости
современного общества [1]. При длительно протекающих
стрессовых состояниях либо в случаях, когда уровень
данного стрессового воздействия достаточно высок, резервы гомеостаза исчерпываются, что приводит к срыву
системной адаптации организма. В свете сказанного
большой интерес представляет изучение уровня так называемого окислительного стресса, которое реализуется
посредством активации процессов свободнорадикального
окисления (СРО). Избыточное образование активных
форм кислорода (АФК) может быть причиной повреждения и гибели клеток, а также способно запускать патогенетические механизмы многих заболеваний, в частности
механизм активации перекисного окисления липидов
(ПОЛ), развивающийся на фоне хронического стресса.
Действие внешних прооксидантов, недостаток поступления облигатных антиоксидантов и активация эндогенной
генерации активных форм кислорода приводят к напряжению механизмов антиоксидантной защиты и развитию
окислительного стресса, который может проявляться на
клеточном, тканевом и организменном уровне.
Активация процессов СРО и ПОЛ играет важную
роль в патогенезе невротических расстройств. Большинство представленных в литературе работ касается
определения показателей окислительного стресса в
сыворотке крови пациентов, в то время как изучение
активности антиоксидантных систем в эритроцитах
представляется нам более адекватным и информативным для выяснения патогенеза заболевания.
Целью работы явилось изучение активности глютатионзависимых антиоксидантных ферментов и каталазы в
эритроцитах у больных с невротическими расстройствами.
Материалы и методы исследования
Проведено комплексное клинико-биологическое
обследование больных с невротическими расстройствами, проходивших курс лечения в отделении пограничных состояний клиник ГУ НИИ ПЗ ТНЦ СО
РАМН. Исследуемая группа состояла из 25 больных с
истерическими расстройствами невротического уровня
и расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций. Группу контроля составили 20 психи-
чески и соматически здоровых лиц, сопоставимых по
полу и возрасту с исследуемой группой.
У обследуемых лиц брали кровь из локтевой вены
утром натощак. Кровь, стабилизированную гепарином,
центрифугировали, осаждая эритроциты, которые впоследствии подвергались гемолизу дистиллированной
водой в соотношении 1:10. Для определения активности антиоксидантных ферментов гемолизат центрифугировали при 18000 об/мин в течение 90 мин при 4 ºC.
В полученном супернатанте спектрофотометрически
определяли активность глутатионпероксидазы [2],
глутатионредуктазы [3], глутатион-S-трансферазы [4] и
каталазы [5]. Расчет активности ферментов производили на 1 мг белка. Содержание белка в исследуемом образце определяли по методу Бредфорда [6]. Единица
ферментативной активности (U) соответствует количеству фермента, которое катализирует превращение
1 мкмоля субстрата в 1 мин при 25 °C.
Статистическую обработку результатов исследования
проводили с использованием пакета прикладных статистических программ STATISTIKA 6.0. Достоверность различий между группами определяли с помощью непараметрических критериев Вилькоксона – Манна – Уйитни. Статистически значимыми считались различия при р<0,05.
Результаты исследования
В результате проведенных исследований выявлено,
что активность всех исследуемых ферментов антиоксидантной защиты в эритроцитах у больных с невротическими расстройствами достоверно отличается от активности ферментов в группе здоровых лиц (таблица).
Активность глутатионпероксидазы в эритроцитах
больных невротическими расстройствами была достоверно выше в 1,7 раза активности глутатионпероксидазы у лиц контрольной группы (р<0,05), активность каталазы в эритроцитах больных невротическими расстройствами превышала аналогичный показатель у
здоровых лиц в 2,7 раза (р<0,01). В то же время активность глутатионредуктазы и глутатионтрансферазы в
эритроцитах больных невротическими расстройствами
была достоверно ниже активности ферментов в контроле (в 1,4 раза – глутатионредуктаза (р≤0,05) и в
4,1 раза – глутатионтрансфераза (р<0,05)).
Активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах у больных с невротическими расстройствами (U/мг белка)
Контрольная группа
Больные невротическими расстройствами
Глутатион-пероксидаза
6,485±0,7
11,15±1,3
(р=0,036)
Глутатион-редуктаза
2,24±0,09
1,576±0,06
(р=0,042)
Глутатион-трансфераза
11,73±2,9
2,865±0,067
(р=0,027)
Каталаза
39,48±3,4
105,15±5,1
(р=0,0058)
233
Полученные нами результаты позволяют предположить, что активность каталазы и глутатионпероксидазы в эритроцитах больных увеличивается в связи с
увеличением в организме количества активированных
кислородных метаболитов, появление которых обусловлено окислительным стрессом, вызванным психотравмирующим воздействием. Снижение активности
глутатионредуктазы в эритроцитах у больных с невротическими расстройствами связано с функциональным
использованием данного фермента в клетках крови, т.к.
глютатионредуктаза является поставщиком восстановленного глутатиона в клетке и работает в противофазе
с глутатионпероксидазой. Снижение активности глута-
тионтрансферазы в эритроцитах больных, возможно,
связано со срывом общих адаптационных механизмов
организма и, следовательно, снижением индуцибельности фермента, а это в свою очередь приводит к потере
способности эритроцитов не только утилизировать
липоперекиси, но и ксенобиотики в организме. Таким
образом, показатели активности глутатионзависимых
ферментов и каталазы у лиц с невротическими расстройствами достоверно отличаются от показателей
активности этих ферментов в контрольной группе, что
свидетельствует о вовлечённости антиоксидантных
ферментов в патогенез адаптационных нарушений на
клеточном уровне при психогенных расстройствах.
ЛИТЕРАТУРА
1. Семке В.Я. Клиническая персонология. Томск: РАСКО, 2001. 376 с.
2. Littel C., O’Brien P.J. Biochem. Biophys // Res. Commun. 1968. Vol. 31. P. 145–150.
3. Carbery J., Mannervic B. // J. Biol. Chem. 1975. № 250. Р. 5475–5480.
4. Keen J.H. // J. Biol. Chem. 1976. Vol. 251. P. 6183–6188.
5. Beers R.F., Sizer J.W. // J. Biol. Chem. 1952. Vol. 195. P. 133–140.
6. Bredford M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding // Anal.
Biochem. 1976. № 72. Р. 248–354.
Статья поступила в редакцию журнала 5 декабря 2006 г., принята к печати 25 декабря 2006 г.
234