Основные вопросы - Автоматизированная информационная

УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 1 из 169
МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ
РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
имени ШАКАРИМА г.СЕМЕЙ
Документ СМК 3
УМК
УМКД
уровня
042-18-23.1.01/03-2013
УМКД
Редакция № ____
Учебно-методические
От____________
.
материалы
«Ветеринарная
микробиология и
вирусология -1»
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС
ДИСЦИПЛИНЫ
«Ветеринарная микробиология и вирусология - 1»
для специальностей
5В120200 – «Ветеринарная санитария»
5В120100 – «Ветеринарная медицина»
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ
Семей
2013
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 2 из 169
Содержание
1
2
3
4
Глоссарий
Лекции
Лабораторные занятия
Самостоятельная работа студента
1 ГЛОССАРИЙ
В настоящем УММ использованы
соответствующими определениями:
следующие
термины
с
РА – реакция агглютинации
РСК – реакция связывания комплемента
РДСК – реакция длительного связывания комплемента
КР – кольцевая реакция с молоком
РБП – роз-бенгал проба
РИФ (МФА)– реакция иммунофлуоресценции (метод флюоресцирующих
антител)
ИФА – иммуноферментный анализ
ПЦР – полимеразная цепная реакция
Гр(-) – грамотрицательные бактерии
Гр(+) – грамположительные бактерии
Аг - антиген
Aт - антитело
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 3 из 169
2 ЛЕКЦИИ
ЛЕКЦИЯ 1
Тема: Предмет и задачи микробиологии
ПЛАН:
1. Предмет и задачи микробиологии
2. Основные этапы развития микробиологии
Ключевые слова: микробиология, общая микробиология, вирусология,
вездесущность микробов.
1.Предмет и задачи микробиологии
«МИКРОБИОЛОГИЯ» происходит от греческих слов «micros» -малый,
«bios» - жизнь и «logos» - наука (учение). Таким образом, микробиология
является наукой о жизни микроскопически малых существ микроорганизмов,
невидимых невооруженным глазом.
Микробиология – наука о мельчайших, невидимых невооруженным
глазом организмах, названных микробами или микроорганизмами. Она
изучает их строение, морфологию, физиологию, роль в различных процессах,
происходящих в природе, генетику и экологию микроорганизмов,
использование микробов в тех или иных областях жизни и деятельности
человека, а также изменения, вызываемые ими в организме людей,
животных, растений, знакомит с методами устранения их вредного действия.
Предметом изучения микробиологии являются бактерии, плесневые
грибы, дрожжи, актиномицеты, риккетсии, микоплазмы, вирусы. Но
поскольку вирусы абсолютно не могут существовать без живого организма,
изучением
их
занимается
самостоятельная
наука,
называемая
«вирусологией».
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 4 из 169
Взаимосвязь с другими науками. Ботаника и зоология(где изучается
жизнь и строение простейших представителей обоих царств природы),
биохимией (в вопросах изучения ферментов, витаминов, антибиотиков),
гигиеной (в разделах микробиологии почвы, воздуха и воды), физиологией
(она помогла понять роль микробов в процессах пищеварения у животных и
человека). Методы стерилизации, разработанные микробиологией, оказали
неоценимую услугу хирургии.
Вездесущность
микробов.
Мир
микроорганизмов
сложен
и
многообразен. Они широко распространены в природе. Естественными
резервуарами микробов в природе являются почва, воздух и вода.
Миллиарды микробов окружают нас. Академик В.А.Омелянский так
характеризовал микробов: «Поистине они вездесущи…. Незримо они
сопутствуют человеку на всем его жизненном пути, властно вторгаясь в его
жизнь то в качестве врагов, то, как друзья. В громадном количестве они
встречаются в пище, которую мы принимаем, в воде которую пьем, и в
воздухе, которым дышим».
Полезные и вредные свойства микроорганизмов
Полезные свойства микроорганизмов
1. Сапрофитные микробы (гнилостные бактерии, вызывающие
минерализацию белков) являются санитарами в природе (гниение –
микробиологический процесс)
2. Микроорганизмы используют для получения продуктов питания
(молочнокислых продуктов, кормовых белков, хлеба, алкогольных
напитков - пива, вина, спирта)
3. Микроорганизмы используют для получения биологически активных
веществ – ферментов, гормонов, витаминов, антибиотиков,
гибберилинов, аминокислот, органических кислот и т.д.
4. Микроорганизмы могут быть источником электрической энергии
5. Микробы способны извлекать ионы металлов из полезных руд.
6. Микроорганизмы принимают участие в пищеварении животных и
человека. (В толстом кишечнике человека обитает кишечная палочка –
Escherichia coli, продуцент витаминов группы В. Название получила в
честь открывшего ее крупного немецкого педиатра Теодора Эшериха,
нашедшего эту бактерию в человеческом кале. Ее численность – 75%
от общего числа всех кишечных микроорганизмов. Другим
распространенным микробом кишечника является (Streptococcus
faecalis). Микроорганизмы пищеварительного тракта снабжают наш
организм витамином К, который необходим для свертывания крови
(без которого нарушается образование протромбина)
7. Патогенные микроорганизмы (микроорганизмы вызывающие
инфекционные болезни у животных и человека) используют для
профилактики инфекционных болезней, путем получения из них
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 5 из 169
вакцинных штаммов. Ослабленные патогенные микробы не вызывают
заболевания, а напротив, стимулируют формирование иммунитета.
Препараты, приготовленные из убитых или ослабленных микробов
получили название – вакцины. (Слово вакцина произошло от
латинского Vacca – корова. Дженнер. Оспа.) Впервые аттенуацию
(ослабление вирулентных свойств патогенных микробов) микробов
разработал Л.Пастер, когда готовил вакцину против бешенства.
Вредные свойства микроорганизмов
1. Патогенные микроорганизмы вызывают инфекционные заболевания
(сибирская язва, бруцеллез, туберкулез, сальмонеллез и др.)
2. Микроорганизмы могут вызывать порчу продуктов питания, могут
быть вредителями на различных производствах, разлагают древесину,
волокна текстильного сырья - хлопка, шерсть, вызывают коррозию
металлов. Микробы участвуют в процессах разложения каучука, нефти,
бумаги, текстиля и пластмасс.
Полезных микроорганизмов большинство, лишь 1:30000 часть от всех
известных микробов составляют вредные микроорганизмы.
Направления микробиологии. Развитие микробиологии, как и других
научных дисциплин, находится в тесной зависимости от способов
производства, запросов практики, общего прогресса науки и техники. В
настоящее время в соответствии с потребностями общества
микробиология дифференцировалась на:
-общую микробиологию;
-медицинскую;
-сельскохозяйственную;
-ветеринарную;
-промышленную
Фундаментом (базой) для всех перечисленных направлений является
общая микробиология, которая изучает морфологию, физиологию,
распространение и сохранение микробов во внешней среде, генетику
микроорганизмов, вопросы систематики и классификации их, роль
микробов в круговороте веществ в природе, патогенность и
вирулентность, роль микробов в инфекционном процессе, вопросы
иммунитета.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 6 из 169
Задачи микробиологии будут зависеть от направления. Задачи общей
микробиологии изложены в определении.
2.Основные этапы развития микробиологии
В развитии микробиологии выделяют два этапа:
1. Морфологический – связан с именем Антона Левенгука (1632-1723),
который создал первый микроскоп и описал основные формы микробов.
2. Физиологический – на этом этапе происходило более глубокое изучение
жизнедеятельности микробов.
- Луи Пастер (1822-1895) –французский ученый;
- Роберт Кох (1843-1910) – немецкий ученый,
- Илья Ильич Мечников(1845-1916) – русский ученый;
- Пауль Эрлих (1854-1916) немецкий ученый,
- Сергей Николаевич Виноградский (1856-1953);
- Василий Леонидович Омелянский (1867-1928)
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 7 из 169
- Дмитрий Иосифович Ивановский (1864-1920);
- Н.Ф. Гамалея (1859-1949);
- Г.Н.Габричевский (1860-1907);
- А.Флеминг(1929г. – открыл пенициллин),
- В.Н Шапошников (1884-1968) (производство молочной кислоты при
помощи молочно-кислых бактерий),
- Я.Я.Никитинский (1878-1941)(консервное производство)
3. Вторая половина 20 столетия – новый этап, связан с рождением
молекулярной генетики и молекулярной биологии. Носитель гена – ДНК.
2.1. Этапы развития микробиологии ( по Сидоренко О.Д., Ванькова
А.А., Войно Л.И., 2005)
1. Эвристический период (Гиппократ, Авиценна, Ф.Бэкон, Я.Гельмонт –
они предполагали о существовании микроорганизмов, были сделаны
существенные и достаточно точные наблюдения за многими инфекционными
болезнями)
Таблица
Этапы развития микробиологии
№ Этапы
в
развитии
микробиоло
гии
1 2
1 Эвристическ
ий
2
3
Ученые
Открытия ученых
3
4
Гиппократ,
Предполагали о существовании
Авиценна, Ф.Бэкон, микроорганизмов, были сделаны
Я.Гельмонт
существенные
и
достаточно
точные наблюдения за многими
инфекционными болезнями.
Морфологич Г.Галилей (1610)
Увеличивающее
оптическое
еский
устройство.
Ханс
и
Захарис Настоящее
устройство
для
Янсены (голландские изучения
микроскопических
ученые).
объектов (32-кратное увеличение).
Впервые
наблюдал
мир
Анастасиус Кирхер невидимых существ.
(ученый-иезуит).
Использовал микроскопы с 160Антуан ван Левенгук кратным увеличением.
(1632-1723)голландец.
Открыл мельчайшие организмы
1684 г.
Эксперимен М.М.Тереховский
Показал
роль
различных
тальный
(1740-1796).
физических
и
химических
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
период
6.
7.
8.
Страница. 8 из 169
воздействий на микроорганизмы и
подходы
к
термическому
обеззараживанию
различных
объектов.
Рождение
эксперементальных
методов исследования
Внес большой практический вклад
в борьбу с чумой. Предпринял
Данило Самойлович попытку создания противочумной
Самойлович
вакцины. (он утверждал, что чума
(Сущинский) (1743- вызывается «неким особливым и
1805).
совсем отменным существом».
Осуществил
профилактику
натуральной оспы вакцинацией –
искусственной
прививкой
возбудителя коровьей оспы в
1796г.
Эдвард
(1796).
1.
2.
3.
4.
5.
Ред. №___ от _______
2013г.
Дженнер
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №1
Аттенуация
Вакцина
Вирусология
Микробиология
Направления микробиологии (общая микробиология, ветеринарная
микробиология, медицинская микробиология, сельскохозяйственная
микробиология, промышленная микробиологи, пищевая микробиология)
Патогенные микроорганизмы
Предмет микробиологии (бактерии, плесневые грибы, дрожжи,
актиномицеты, риккетсии, микоплазмы)
Сапрофиты
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ:
1. Что изучает дисциплина «микробиология и вирусология»?
2. Предмет микробиологии.
3. Что изучают конкретные направления микробиологии (общая,
медицинская, сельскохозяйственная, ветеринарная, промышленная,
пищевая генетическая и др.)?
4. Морфологический этап в развитии микробиологии.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
5.
6.
7.
8.
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 9 из 169
Физиологический этап в развитии микробиологии.
Полезные свойства микроорганизмов.
Вредные свойства микроорганизмов.
Вклад ученых в развитие микробиологии.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА:
Основная
1. Бияшев Б.К. Ветеринарная микробиология и иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.3-10.
3. Костенко Т.С., Скаршевская Е.И., Гительсон С.С. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- 272с.
Дополнительная
2. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
3. Сидоренко О.Д., Ванькова А.А., Войно Л.И. Микробиология: Учебник
для агротехнологов. – М.:ИНФРА-М,2005.-287 с. (С.3-17).
4. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.3-11.
5. Ассонов Н.Р. Микробиология.-М.1989.- С.3-18.
6. Бетина В. Путешествие в страну микробов. – М.,1976.- 272с. - С.14-98.
Лекция №2
ТЕМА: Систематика и морфология микроорганизмов
ПЛАН:
1. Систематика, классификация и номенклатура микроорганизмов
2. Морфология и строение бактерий
2.1 Постоянные элементы - нуклеоид, цитоплазма, оболочка
2.2 Непостоянные элементы - спора, капсула, жгутики
Ключевые слова: систематика, классификация, номенклатура
микроорганизмов, идентификация, морфология и строение бактерий.
1. Систематика, классификация и номенклатура бактерий.
В настоящее время все микроорганизмы делятся на три царства.
Царство вирусов. К ним относят возбудителей инфекционных болезней и
бактериофаги
Эукариоты – ядерные организмы, ядерная мембрана отграничивает ДНК
от цитоплазмы (дрожжи, микроскопические грибы).
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 10 из 169
Прокариоты – безъядерные организмы, ДНК располагается в цитоплазме
(бактерии).
Рисунок 1. Классификация микроорганизмов
Систематика (таксономия) – наука, занимающаяся вопросами
классификации, номенклатуры и идентификации микроорганизмов.
Под классификацией микроорганизмов понимают распределение их по
группам (таксонам) на основании общих признаков. Каждая группа имеет
свое название (Рис.1).
Самой мелкой единицей классификации является «вид» – группа
микроорганизмов, наделенная общими стабильными
признаками и
происходящая от общего предка.
В микробиологии пользуются терминами «вид», «штамм», «клон»,
«культура».
Вид – это совокупность особей, имеющих общее происхождение и
генотип, морфологические, физиологические и др. признаки, способные в
определенных условиях вызывать одинаковые процессы.
Культура - это микроорганизмы, выделенные от животного, человека,
растений и т.д. и выращенные на питательных средах. Культуры микробов
могут быть чистыми (из одного вида микроорганизмов) или смешанными (из
нескольких видов).
Штамм – культура одного и того же вида, но выделенная из различных
объектов и поэтому отличающаяся незначительным изменением свойств.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 11 из 169
Клон – культура микроорганизмов, выращенная из одной микробной
клетки на искусственной питательной среде. Всё потомство обладает
совершенно одинаковыми свойствами.
Идентификация – отнесение микроорганизмов к определенному таксону
(виду) на основании конкретных признаков.
Номенклатура – система наименований, применяемых в определенной
области знаний.
Название бактериям присваивается в соответствии с правилами
Международного кодекса номенклатуры бактерий введенного с 1 января
1980 года. Принята двойная номенклатура, предложенная еще в 18 в. К.
Линнеем. Название бактериям дается на латинском языке и состоит из двух
слов. Первое слово обозначает род, к которому принадлежит данная
бактерия, второе – название вида. Родовое название пишется с прописной
буквы, видовое – со строчной. В настоящее время классификация
микроорганизмов основана на комплексе следующих признаков:
1.Фенотипические признаки – внешние признаки, не связанные с
наследственностью и генотипом. Фенотипические признаки определяют
место микробов в классификации по их сходству по морфологическим
признакам, культуральным, физиологическим, тинкториальным и др.
Например, по классификации Красильникова микроорганизмы делятся на
три группы (по внешнему виду):
1 – шаровидные (5 видов), 2 – палочковидные, 3 – извитые.
2. Генотипические признаки. В основе геносистематики лежит изучение
нуклеотидного состава ДНК и наиболее важных характеристик генома
(величина, объем, молекулярная масса и др.).
Существует второй подход к систематике бактерий, преследующий
практические цели, т.е. служит для идентификации бактерий – установления
принадлежности к определенному виду. Для этого созданы определители,
которыми пользуются при определении вида того или иного
микроорганизма. К международным определителям бактерий относится
«Определитель бактерий 9», вышедший в свет в 1993 году.
В зависимости от строения клеточной стенки все бактерии делятся на 4
отдела: грациликуты, фирмикуты, тенерикуты, мендосикуты.
Грациликуты (или тонкокожие) – бактерии с тонкой клеточной
стенкой грамотрицательные бактерии.
Фирмикуты (или тостокожие) – бактерии с толстой клеточной
стенкой, грамположительные бактерии.
Тенерикуты (или нежнокожие) – организмы, не имеющие клеточной
стенки. Микоплазмы.
Мендосикуты – бактерии, большинство из которых хотя и имеют
клеточную стенку, но она не содержит пептидогликан. Некоторые
грамположительные. Другие грамотрицательные сюда относятся
архебактерии.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 12 из 169
2.Морфология и строение бактерий
К постоянным элементам микробной клетки относят: клеточную
стенку, цитоплазматическую мембрану, цитоплазму, нуклеоид (ядерное
вещество), рибосомы, мезосомы.
К непостоянным элементам относят капсулу, эндоспору, жгутики,
ворсинки.
Постоянные элементы. Оболочка состоит из двух слоев: наружной
мембраны, клеточной стенки.
Наружная мембрана – это вязкий слой слизи, состоящий из
полисахаридов (у кокков) или полипептидов (у бацилл). Выполняет
защитную функцию, предохраняет клетку от неблагоприятных факторов
внешней среды (температуры, высушивания, давления и т.д.).
Клеточная стенка – это основной слой (имеется только у бактерий),
он придает клетке форму и определяет ее морфологические особенности.
Отсюда кокки, палочки или извитые формы. Выполняет защитную функцию.
Кроме того, через нее поступают питательные вещества внутрь клетки, т.е.
участвует в обмене веществ. Основу клеточной стенки составляет
пептидогликан или муреин (от лат.murus – стенка), являющийся каркасом
бактериальной клетки и имеющий сетчатую структуру. Химический состав и
ультраструктура клеточной стенки бактерий лежит в основе разного
окрашивания бактерий по методу Грама и деления их на грамположительные
и грамотрицательные. Этот метод предложен в 1884 г. Х.Грамом и
используется для дифференцирования бактерий.
Цитоплазматическая мембрана. Полупроницаемая оболочка,
отделяющая цитоплазму от клеточной стенки. В химическом отношении это
белково-липидный комплекс, состоящий из 50-75% белков и 15-50%
липидов(90% фосфолипидов). Через цитоплазматическую мембрану
осуществляется поступление питательных веществ в клетку и выход
продуктов метаболизма наружу – является осмотическим барьером клетки.
При нарушении осмотического давления наступает кариопикноз
(разбухание) или кариолизис (разрушении).
Цитоплазма – безоболочечная коллоидная часть клетки с зернистой
структурой. Основную массу гранул составляют рибосомы, включения.
Центральную часть цитоплазмы занимает ядерный аппарат – нуклеоид.
Нуклеоид - ядерное вещество, генетический аппарат микробной
клетки. Представлен молекулой ДНК. Нуклеоид обеспечивает видовую
принадлежность, участвует при размножении бактериальной клетки. В
клетках бактерий обнаружены внехромосомные генетические элементы,
называемые плазмидами. Плазмиды это небольшие ковалентнозамкнутые
кольцевые молекулы ДНК, содержащие 1500-40000 пар нуклеотидов.
Плазмиды играют важную роль в эволюции прокариот, так как придают им
дополнительные свойства, способствующие их выживанию.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 13 из 169
Непостоянные элементы. Капсула, спора и жгутики.
Капсула – слизистый слой, расположенный над клеточной стенкой
бактерий. Капсула образуется при попадании патогенного микроба в
организм. Она выполняет защитную функцию.
Спора – это стадия покоя в жизненном цикле бактериальной клетки.
Споры образуются при попадании бактерий во внешнюю среду, в условия
неблагоприятные для жизнедеятельности. Споры устойчивы к физическими
химическим факторам. Различают центральное (возбудитель сибирской
язвы), терминальное (возбудитель столбняка) и субтерминальное
(возбудитель ботулизма) расположение.
Жгутики образованы белком флагелином. Являются средством
передвижения. Количество жгутиков и расположение их на поверхности
клетки разное. Патогенные свойства реализуются за счет адгезии –
прилипания к ворсинкам кишечника. Кроме жгутиков на поверхности клеток
могут быть фимбрии (ворсинки, пили). Это прямые полые цилиндры,
отходящие от цитоплазматической мембраны. Они образованы белком
пилином. Принимают участие в конъюгации.
Таким образом, непостоянные элементы микробной клетки
являются дифференцирующими признаками бактерий.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №2
1. Адгезия
2. Вид, культура чистая, культура смешанная, клон, штамм
3. Систематика (таксономия): классификация микроорганизмов
(грациликуты,
фирмикуты,
тенерикуты,
мендосикуты);
номенклатура, идентификация
4. Постоянные
элементы
бактерий
(клеточную
стенку,
цитоплазматическую мембрану, цитоплазму, нуклеоид (ядерное
вещество),
рибосомы,
мезосомы).
(Грамположительные
бактерии. Грамотрицательные бактерии)
5. Непостоянные элементы бактерий (капсула, эндоспора и
жгутики)
6. Формы микроорганизмов (кокки, бактерии, извитые)
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ:
Систематика, классификация и номенклатура микроорганизмов.
«Вид», «штамм», «клон» микроорганизмов. Постоянные (нуклеоид,
цитоплазма, оболочка) и непостоянные (спора, капсула, жгутики) элементы
бактерий.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА:
Основная
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 14 из 169
1. Бияшев Б.К. Ветеринарная микробиология и иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.11--26.
3. Костенко Т.С., Скаршевская Е.И., Гительсон С.С. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- 14-17.
Дополнительная
4. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
5. Сидоренко О.Д., Ванькова А.А., Войно Л.И. Микробиология: Учебник
для агротехнологов. – М.:ИНФРА-М,2005.-287 с.
6. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.7-19.
7. Ассонов Н.Р. Микробиология.- М.1989.- С.19-51.
Лекция № 3-4:
ТЕМА: Физиология микроорганизмов
План:
1.
2.
3.
4.
5.
Химический состав бактерий
Ферменты микроорганизмов
Типы питания микроорганизмов
Типы дыхания микроорганизмов
Рост и размножение микроорганизмов
Ключевые слова: физиология микроорганизмов, аэробы, анаэробы,
аутотрофы, гетеротрофы, метаболизм, ферменты
Физиология микроорганизмов это раздел микробиологии, изучающий
химический состав, процессы питания, дыхания, роста и размножения.
1. Химический состав микроорганизмов
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 15 из 169
Как и все живые существа бактерии состоят из органогенов –
углерода,
кислорода,
азота
и
водорода.
Химические элементы микробной клетки
Углерод 45-55 %
Азот 8-15%
кислород 30%
Водород 8%
В среднем бактериальная клетка содержит 80% воды и 20 % сухого
вещества. Содержание воды более или менее постоянно. Вода является
растворителем органических и неорганических веществ. В составе бактерий
различают свободную и связанную воду. Свободная вода служит дисперсной
средой для коллоидов, растворителем кристаллических веществ, источником
водородных и гидроксильных ионов. Связанная вода находится в комплексах
(сложные соли, гидраты). Она является структурным растворителем. При
подготовки к спорообразованию количество воды уменьшается до 40%.
Клетка в таком состоянии способна длительно переживать в окружающей
среде.
Сухое вещество содержит минеральные соли, белки, углеводы,
липиды, ферменты, витамины, токсины, пигменты и антибиотики.
Минеральные вещества. Количество их составляет от 2 до 30 % от
сухого вещества.. Минеральные вещества необходимы для поддержания
внутриклеточного осмотического давления, для поддержания положительной
электрозаряженности, для регулирования рН среды и для активизации
ферментов. Самыми важными минеральными веществами являются – Р, К,
Na, Mg, S, Cl, Fe, Ca. Микроэлементы используются клеткой для синтеза
витаминов, активизации ферментов, стимулируют процессы роста и
размножения и др. К ним относят Cu, Ni (никель), Mn, Mo, Zn, Sb (олово).
Белки. Составляют от 40 до 80 % сухого остатка. Они определяют
видовую специфичность микроба, вирулентность, окраску, иммуногенность
(способность вызывать защитные реакции), устойчивость бактерий во
внешней среде. Представлены белки в микробной клетке простыми белками
протеинами (альбумины, глобулины) и сложными беками протеидами. В
состав сложных белков входят нуклеопротеиды (протеины, связанные с
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 16 из 169
нуклеиновыми кислотами), хромопротеиды (обуславливают цвет бактерий),
мукопротеины, гликопротеины (входят в состав клеточной стенки).
Углеводы. Содержат 10-30% сухого остатка клетки. Бактерии
содержат две категории углеводов 1) моно- или дисахара; 2) полисахариды.
Они входят в структуру клеточной стенки. Гр (+) бактерии имеют более
толстую стенку(до 50 нм), в составе которой много гликозидов, тейхоевых
кислот (полисахариды).
Липиды. Составляют от 0,2 до 41 % сухого вещества. У риккетсий,
дрожжей, микобактерий, грибов до 40 % липидов, у других не более 3-7%
(по Радчуку). Липиды обнаруживаются в бактериях в форме крупных
биологически активных молекул, или реже в свободном состоянии в виде
пищевых вакуолей. У бактерий различают следующие классы липидов: 1) в
форме свободных жирных кислот, 2) в форме восков, 3) в форме
фосфолипидов ( у кислотоустойчивых бактерий до 6,5% сухого вещества).
Липиды обуславливают проницаемость, поверхностный электрический заряд.
Они входят в состав токсической фракции ряда микробов. Молекулы
липидов комплектуют цитоплазматическую мембрану и клеточную стенку
бактерий. Липидов много у Гр (-) бактерий, в виде липополисахарида и
липополисахаридо-протеина. Липиды являются резервными веществами и
могут быть использованы как исходные компоненты для синтеза белков.
2. Ферменты микроорганизмов
Ферменты это биологические катализаторы, усиливающие скорость
реакций. Ферменты – глобулярные белки, молекулярная масса которых
колеблется от 15 кД до нескольких тысяч. Это простые белки и сложные
белки, например уреаза. Пепсин, трипсин – простые белки, а
карбоксипептидаза, амилаза, рибонуклеаза – сложные. С помощью
ферментов у микроорганизмов осуществляются процессы метаболизма:
пищеварение, дыхания, выделения. Незначительное количесиво ферментов
превращает большое количество субстрата, оставаясь при этом в свободном
состоянии. Так. Одна часть химозина (сыжужного фермента) может чвернуть
до 12 млн частей молока; 1 г амилазы при определнных условиях может
превратить в сахар 1 т крахмала.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 17 из 169
Ферменты вырабатываются клетками и способны действовать, даже
будучи выделенными из нее, что имеет большое практическое значение. Для
ферментов характерны термолабильность и высокая специфичность.
Например, фермент лактаза расщепляет только сахар лактозу.
Микробная клетка может содержать большое количество ферментов.
Например, у аспергилла обнаружено до 50 ферментов. Поэтому
микроорганизмы могут осуществлять одновременно ряд различных реакций
в среде, где они находятся.
Различают экзо- и эндоферменты.
Экзоферменты выделяются микробной клеткой при жизни в субстрат
(окружающую среду), растворимы в питательной среде и проходят
бактериальные фильтры. Эти ферменты связаны в основном с процессом
питания: расщепляют сложные высокомолекулярные вещества (белки,
крахмал, клетчатку), т.е. подготавливают питательные вещества к усвоению
микробной клеткой.
Эндоферменты прочно связаны с бактериальной клеткой и действуют
только внутриклеточно, осуществляют дальнейшее разложение питательных
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 18 из 169
веществ, и превращение их в составные части клетки. К таким ферментам
относят дегидрогеназы, оксидазы.
Оптимальная температура для действия ферментов 40-50 град по С. при
температуре 100 град. они разрушаются. На их активность влияет и рН
среды.
Название фермента связано с веществом, на которое он действует, с
изменением окончания на «аза» или с природой катализируемой им
химической реакции. На этом основана и современная классификация их. В
настоящее время насчитывается более двух тысяч ферментов. Различают 6
групп ферментов.
1.Оксидоредуктазы – ферменты катализирующие окислительновосстановительные реакции (дегидрогеназы – НАД,НАДФ, ФАД). Ферменты
принимающие участие в переносе электронов водорода, кислорода и др.
2. Трансферазы – ферменты, катализирующие перенос отдельных
радикалов, частей молекул или целых атомных группировок (не водорода) от
одних соединений к другим. (ацетилтрансфераза, фосфотрансфераза)
3.Гидролазы – ферменты, катализирующие реакции расщепления и
синтеза иактх сложных соединений, как белки, жиры и углеводы, с участием
воды.
4. Лиазы - ферменты, катализирующие отщепление от субстратов
определенных химических групп с образованием двойных связей или
присоединение отдельных групп или радикалов по двойным связям.
5. Изомеразы – ферменты, осуществляющие превращение органических
соединений в их изомеры.
6. Лигазы – ферменты, катализирующие синтез сложных органических
соединений из простых.
В микробиологической практике ферментативную активность бактерий
применяют для идентификации и дифференциации бактерий, в
биотехнологии – для получения ферментов, приготовления уксусной,
молочной, щавеливой, лимонной кислот, молочных продуктов (сыр,
ацидофилин,
кумыс),
в
виноделии,
пивоварении,
силосовании.
Ферментативная активность микроорганизмов определяет патогенез и
клиническую картину инфекционных заболеваний.
С помощью ферментов у микроорганизмов осуществляются процессы
метаболизма: пищеварение, дыхания, выделения. Незначительное количество
ферментов превращает большое количество субстрата, оставаясь при этом в
свободном состоянии.
3. Типы питания микроорганизмов
Метаболизм
объединяет
два
взаимосвязанных,
но
и
взаимопротивоположных процесса: анаболизм и катаболизм.
Анаболизм это использование микроорганизмами питательных веществ,
для биосинтеза веществ собственного тела.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 19 из 169
Катаболизм это извлечение энергии из питательных веществ, которая
используется микроорганизмами для своей жизнедеятельности.
Под питанием понимают получение из окружающей среды источников
энергии и веществ, необходимых для биосинтеза клеточных компонентов.
По способам питания микроорганизмы делятся на две группы:
автотрофы и гетеротрофы, что представлено в схеме.
Типы питания
и
Автотрофы
Фотоавтотрофы
Хемоавтотрофы
Гетеротрофы
Сапрофиты
Паразиты
Факультативные
облигатные
1. Аутотрофные микроорганизмы – используют неорганические вещества в
качестве источника углерода – углекислый газ и не нуждаются в сложных
органических соединениях.
2. Гетеротрофные микроорганизмы - получают углерод из органических
углеродсодержащих соединений, которым являются углеводы, углеводороды,
аминокислоты и органические кислоты.
3.Метанотрофы –используют органические вещества неживой природы.
4. Паратрофы – используют органические вещества живой природы.
5.Прототрофы – способны сами синтезировать необходимые вещества из
низкоорганизованных.
6.Ауксотрофы- являются мутантами прототрофов, потерявшими гены;
ответственны за синтез некоторых веществ –витаминов, аминокислот,
поэтому нуждаются в этих веществах в готовом виде.
7. Органотрофы- используют органические вещества в качестве доноров
водорода для восстановления углерода.
8. Литотрофы – используют минеральные вещества в качестве доноров
водорода для восстановления углерода.
9. Фотолитотрофы – используют энергию солнечного света.
10.Фотоорганотрофные
микроорганизмы
–
для
восстановления
углекислого газа могут использовать водород органических соединений.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 20 из 169
11.Хемолитотрофные микроорганизмы –способны усваивать углекислоту и
синтезировать органические вещества за счет химической энергии,
получаемой при окислении различных минеральных веществ.
12.Хемоорганотрофные микроорганизмы – нуждаются в готовых
органических веществах.
В основе питания бактерий лежит осмотическое явление, кроме того,
питание
может
осуществляться
с
помощью
диффузии
и
стереохимического переноса питательных веществ с помощью особых
белков называемых пермеазами.
4. Типы дыхания микроорганизмов
Дыхание микроорганизмов это сложный биологический процесс,
сопровождаемый
окислением
или
восстановлением
различных,
преимущественно органических соединений с последующим выделением
энергии в виде АТФ, необходимой микробам для физиологических нужд.
Дыхание микроорганизмов может осуществляться как в присутствие
кислорода воздуха, так и без него. В связи с этим микроорганизмы разделяют
на аэробы и анаэробы.
Аэробы это микроорганизмы, живущие и размножающиеся за счет
свободного доступа кислорода воздуха.
Анаэробы это микроорганизмы, живущие и размножающие в условиях
отсутствия кислорода.
Имеются и промежуточные формы. По типу дыхания микроорганизмы
подразделяют на 4 группы:
1. Облигатные или строгие аэробы –это микроорганизмы, которые живут
при свободном доступе кислорода (уксуснокислые бактерии, туберкулезная
палочка);
2. Микроаэрофильные бактерии – способны расти и размножаться в
присутствие незначительного количества свободного кислорода воздуха до
1% (актиномицеты, бруцеллы);
3. Факультативные микроорганизмы – живущие как в присутствие, так и в
отсутствие кислорода воздуха. (кандида, верховые дрожжи, энтеробактерии).
Они имеют два набора ферментов.
4. Облигатные или строгие анаэробы развиваются при полном отсутствии
кислорода в окружающей среде (маслянокислые бактерии, возбудитель
столбняка, ботулизма).
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 21 из 169
Типы дыхания
Строгие аэробы
Строгие анаэробы
Микроаэрофилы
Факультативные анаэробы
Механизм дыхания.
Первым этапом дыхательных процессов является отнятие водорода от
субстрата с помощью ферментов – дегидрогеназ (НАД и НАДФ).
Отнимая водород от окисляемого субстрата они переходят в
восстановительную форму (НАД . Н2 и НАДФ . Н2) и переносят водород на
другое вещество (акцептор).
СУБСТРАТ-Н2 + НАД(НАДФ) → окисленный субстрат + НАД .Н2(НАДФ
.Н2)
АКЦЕПТОРОМ водорода для аэробов служит кислород воздуха.
АКЦЕПТОРОМ водорода для анаэробов являются другие вещества
(соли азотной, серной, кислот, углекислоты).
Наибольшее практическое значение из всех типов биологического
окисления имеет брожение. Оно осуществляется только микроорганизмами. В
промышленности с помощью брожения получают множество полезных
химических веществ – спирты, молочную кислоту, щавелевую кислоту,
витамин В12. Кроме химических веществ брожение дает нам ценные
продукты питания – кисломолочные.
Типы биологического окисления.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 22 из 169
Прямое
окисление
Аэробное
дегидрировани
е
Брожение
Анаэробное
дегидрировани
е
5. Рост и размножение микроорганизмов
Под ростом понимают увеличение массы отдельной бактериальной
клетки. Под размножением - увеличение числа особей микроорганизмов.
Бактерии размножаются преимущественно простым поперечным
делением пополам, которое происходит в различных плоскостях. При этом
образуются многообразные сочетания клеток (кисть винограда –
стафилококки, цепочки - стрептококки, соединения по парам – диплококки,
тюки, пакеты – сарцины др.). Процесс деления бактерии проходит ряд
последовательных этапов. Сначала появляется перетяжка, состоящая из
цитоплазматической мембраны, а затем происходит разъединение
образовавшихся дочерних клеток. Параллельно с этим синтезируется
клеточная стенка. Вместе с цитоплазмой в дочерние клетки переходит и
нуклеоид, состоящий из ДНК. ДНК реплицируется в результате разрыва
водородных связей, образуются две спирали ДНК, каждая из которых
включается в состав новой клетки. Затем дочерние односпиральные ДНК
восстанавливают водородные связи и вновь образуются двуспиральные ДНК.
Грибы размножаются в основном в виде спор, дрожжи - почкованием.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 23 из 169
Большинство клеток делится через 20-30 минут. Так, у кишечной
палочки новое поколение образуется через 20-30 минут, у
нитрифицирующих бактерий - через 5-10 ч, а у возбудителей туберкулеза
только через 18-24 ч.
Микроорганизмы размножаются быстро, но не беспредельно. Это
связано с нарушением оптимальных условий роста и размножения
(истощение среды, неблагоприятная температура, свет, продукты
жизнедеятельности). Процесс размножения микроорганизмов на не
сменяемой среде (in vitro) протекает неравномерно (стадийно). Различают
восемь (четыре) стадий (разные авторы по-разному).
1. Начальная фаза (лаг-фаза), или фаза покоя. Культура приспосабливается к
питательной среде.
2. Экспоненциальная
(логарифмическая)
фаза
характеризуется
максимальным увеличением клеток в культуре. Оно идет в
геометрической прогрессии. Большинство клеток молодые и
биологически активные. Питательная среда истощается, продукты
обмена замедляют рост. Кривая роста постепенно принимает
горизонтальное положение.
3. Стационарная фаза, или период зрелости. Кривая идет параллельно оси
абсцисс. Наступает равновесие между числом вновь образованных и
погибших клеток. Количество питательной среды уменьшается,
плотность клеток увеличивается, токсическое действие продуктов
обмена усиливается. Все это ведет к гибели клеток.
4. Фаза отмирания (фаза старости). Происходит уменьшение клеток и
изменение их. Появляются деградированные формы, а также споры.
Через несколько недель или месяцев культура погибает, из-за ядовитого
действия продуктов жизнедеятельности. Знание закономерностей
развития имеет практическое значение при выращивании и сохранении
культур на жидких и плотных питательных средах.
Знание физиологических свойств микроорганизмов позволяет
культивировать (выращивать) их на искусственных питательных средах,
изучать их свойства, определять вид микроба.
Понятийный аппарат к лекциям 3-4 (Тезаурус)
1.Типы питания микроорганизмов (аутотрофные микроорганизмы,
гетеротрофные
микроорганизмы,
метанотрофы,
паратрофы,
прототрофы, ауксотрофы, органотрофы, литотрофы, фотолитотрофы,
фотоорганотрофные микроорганизмы, хемолитотрофные микроорганизмы,
хемоорганотрофные микроорганизмы)
2. Типы дыхания микроорганизмов (облигатные (строгие, абсолютные)
аэробы, микроаэрофилы, факультативные анаэробы, облигатные (строгие,
абсолютные) анаэробы)
3. Пермеазы
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 24 из 169
4. Экзоферменты
5. Эндоферменты
6. Классификация ферментов (оксидоредуктазы, трансферазы, гидролазы,
лиазы, изомеразы, лигазы)
1.
2.
3.
4.
5.
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
Механизм и источники питания микроорганизмов.
Классификация ферментов. Их значение в жизни микроорганизмов.
Значение ферментативной активности микробов в лабораторной
практике.
Механизм дыхания микроорганизмов.
Понятие «рост» и «размножение» микроорганизмов.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев Б.К. Ветеринарная микробиология и иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.35-54.
Дополнительная
3. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
4. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.42-49.
5. Ассонов Н.Р. Микробиология.- М.1989.- С.51-77.
6. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. – Издательство
Московского университета,1978. – С.68-103.
7. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.42-78.
8. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.47-72.
Лекция № 5
Тема: Генетика микроорганизмов
План:
1. Структура и функции генома микроорганизмов
2. Формы изменчивости у микроорганизмов
3. Генетические взаимодействия (самостоятельно)
4. Генная инженерия
Ключевые слова: генетика, геном микробной клетки, фенотипическая
изменчивость, генотипическая изменчивость, мутации, рекомбинативная
изменчивость.
Генетика – наука о наследственности и изменчивости организмов.
1.
Структура и функции генома микроорганизмов
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 25 из 169
Геном – носитель генетической информации. Геном прокариотной
клетки находится в нуклеоиде в виде одной хромосомы, представленой
громадной 2-х спиральной молекулой ДНК, включающей в зависимости от
вида и размера микробной клетки от 50 до 2-3 тысяч генов. В среднем
каждый ген состоит из 1000 пар нуклеотидов. Геном вируса гепатита В имеет
самое маленькое число генов. Геном состоит из 4 генов и имеет
молекулярную массу 1,6 Д. Геном вируса – возбудителя СПИДа представлен
молекулой РНК, который состоит из 9213 нуклеотидов, образующих 9 генов.
Геном бактериофагов – из 9-200 генов, у хламидий – из 400-600 генов, у
риккетсий – из 1000 генов. E.coli имеет молекулярную массу 2,8 х 10 (9) Д и
содержит 2500-3000 генов.
ДНК большинства растений и животных состоит из нескольких
миллиардов пар нуклеотитов. Геном человека составляет 3,5 х 10 (9) пар
нуклеотидов – 3,5 х 10 (6) пар генов.
Молекула ДНК является носителем генетической информации и
состоит из генов, которые располагаются линейно вдоль хромосомы. Каждый
ген представлен определенным участком молекулы ДНК. Специфическая
информация, содержащаяся в гене, определяется последовательностью
оснований в цепи ДНК. «Алфавит», с помощью которого записана эта
информация ДНК, вкдючает четыре «буквы» основания: аденин, гуанин,
тимин и цитозин.
Гены
являются
функциональной
единицей
наследственности. В генах записана информация относительно всех свойств,
присущих клетке. Каждый ген может существовать в виде ряда структурных
форм – аллелей. Совокупность аллелей всех генов клетки составляет генотип.
В настоящее время созданы генетические карты микроорганизмов,
отражающие расположение генов на хромосоме. Бактерии гаплоидны, т.е.
имеют один набор хромосом.
Возникает вопрос, каким же образом сохраняется наследственная
информация при росте и размножении бактерий. Перед делением клетки
происходит репликация генов (удвоение) и на каждой цепи по принципу
комплементарности осуществляется синтез двух новых цепей. Таким
образом, две новые цепи содержат одну родительскую и одну вновь
синтезированную. Эта точная репликация ДНК гарантирует сохранение
генетической информации.
ДНК, будучи носителем генетической информации, тем не менее не
служит матрицей для синтеза полипептидов. Биосинтез белков происходит
на рибосомах, которые свободно располагаются в цитоплазме и не никак не
контактируют с ДНК.
Синтез белка идет в два этапа:
- на первом этапе происходит переписывание (транскрипция) информации
с ДНК на РНК, которую именуют матричная или информационная РНК.
иРНК представляет точную копию ДНК с той лишь разницей, что тимин
ДНК заменен в РНК на уроцил.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 26 из 169
- на втором этапе на рибосомах осуществляется соединение аминокислот в
полипептидную цепь в порядке, определяемом триплетами мРНК
(трансляция (перевод)). В этом процессе кроме мРНК и рибосом
принимают участие тРНК, ряд ферментов и др.факторы. тРНК подносит
триплеты (колоны), каждый из которых кодирует одну аминокислоту и таким
образом
осуществляется
синтез
определенной
нуклеотидной
последовательности, определяющей структуру специфического белка. К
мРНК как правило присоединяется несколько рибосом и такой комплекс
мРНК и рибосом называется полисомами.
Кроме того, некоторая часть генетической информации содержится вне
хромосомы в цитоплазме в виде так называемой плазмиды (замкнутая в
кольцо цепь нуклеиновой кислоты, состоящей не более чем из 40 триплетов и
составляющую примерно 1/100 длины ДНК хромосомной). Плазмиды
разнообразны по генетическим свойствам и молекулярным размерам. М.м.
плазмид от 4,5 х 10 (6) до 9,4 х 10(6).
Плазмиды придают бактериям дополнительные свойства, но не
обязательные. Бактерии могут терять плазмиды, но потеря не влияет на
основные свойства клетки. Плазмиды имеются у многих бактерий.
Наиболее изученными являются:
- половой фактор (F);
- фактор множественной лекарственной устойчивости (R);
-фактор бактериоциногении (Col);
- плазмиды, контролирующие у E.coli синтез энтеротоксина (Hly);
- плазмиды, детерминирующие синтез поверхностных антигенов (К88, К99);
- известны плазмиды, контролирующие метаболические процессы,
ферментацию углеводов, образование H2S, резистентность к действию
тяжелых металлов (ртути) и др.
Например:
плазмида
бактериоциногении
контролирует(
детерминирует) синтез белковых веществ колицинов (антибиотических
веществ), которые подавляют рост и размножение чувствительных к ним
бактерий (близкородственных).
Впервые способность выделять колицины установлена в 1925 г. Gratta
у штамма E.coli, поэтому феномен получил название колициногении и
плазмида – Col. Другие многие бактерии также выделяют белклвоподобные
вещества, летальные для близких видов. Вещества эти называют –
бактериоцины, феномен – бактериоциногении (туберкулоцины, пестицины,
вибриоцины). Колицины, адсорбируются на чувствительных клетках
(лишенных –Col-фактора), не проникают внутрь клетки, вызывают
нарушение метаболизма, приводят клетку к гибели.
У бактерий может быть одновременно до 4 плазмид.
Плазмиды (F-фактор) способные интегрировать в хромосому и
реплицировать вместе с ней получили название эписом.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 27 из 169
Практическое применение плазмид. Плазмиды обладают
способностью передаваться от бактерий при конъюгации. Их называют
конъюгативными. Внедряясь в клетку реципиента, коньюгативные
плазмиды сообщают ей свойства донора. Это свойство применяется при
создании новых штаммов – продуцентов полезных веществ.
Таким образом, геном и плазмида обуславливают все фено- и
генотипические свойства микроорганизмов.
Функции генома – сохранение генетического постоянства ДНК,
проявление внешних признаков.
2.Типы изменчивости у микроорганизмов.
Наследственность бактерий – свойство микробов, обуславливающее
воспроизводства одних и тех же морфологических и других свойств в ряде
поколений, а также обуславливает специфический характер индивидуального
развития.
Изменчивость – свойство противоположное наследственности. У
бактерий она может осуществляться путем изменения генотипа ( мутации
генов, различным сочетанием генов двух бактерий при рекомбинациях) и
фенотипа (различным проявлением признаков, зависящих от внешних
условий - модификационная изменчивость).
У бактерий различают фенотипическую и генотипическую
изменчивость. К фенотипическим изменениям относят адаптацию и
модификацию. Адаптация – приспособление микроорганизмов к
условиям среды. Приспособленные клетки размножаются (при действии
антибиотиков), а остальные погибают, то есть происходит естественный
отбор. В геноме бактерий всегда имеются запасные возможности, т.е.гены,
определяющие выработку адаптивных ферментов. Например, кишечная
палочка, растущая на среде, не содержащей углевод лактозу, не
вырабатывает фермент лактазу, но если пересеять культуру на среду с
лактозой, то она начнет вырабатывать этот фермент. Адаптивные ферменты
позволяют микробам приспосабливаться к определенным условиям
существования.
Модификации – изменение микроорганизмов под влиянием
условий среды. Изменяются только внешние (фенотипические) признаки
клетки (форма, размеры). Так, добавление в среду глицерина и аланина
вызывает полиморфизм у холерного вибриона. При добавлении среду
кальция хлорида клетки кишечной палочки сильно укорачиваются. После
удаления этого вещества из среды палочки вновь принимают исходную
форму.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 28 из 169
Изменениям подвержен и генотип. Генотипическая изменчивость
играет большую роль в эволюции микроорганизмов. Если бы клетки не
обладали способностью к изменению генотипа, то любое неблагоприятное
изменение условий среды привело бы к вымиранию вида. Например,
появление бактериофагов в культуре вызвало бы полную гибель ее, если бы
гены, определяющие фагочувствительность, не подвергались изменениям и
клетки в силу этого не приобрели свойство фагорезистентности.
В основе генетической изменчивости лежат мутации и рекомбинации.
Они происходят в генетическом аппарате клетки - в ДНК и проявляются
стабильностью изменения каких-либо свойств.
Мутации (mutacio – изменение) характеризуются изменением
последовательности нуклеотидов в ДНК, возникающие под влиянием
эндогенных факторов или при действии химических и физических факторов
(мутантов). Измененнные бактерии называются мутантами. Мутации
приводят к стойким передающимся по наследству изменениям свойств
бактерий. Мутации делятся на две группы:
1. Мутации спонтанные
2. Мутации индуцированные
Мутации спонтанные – происходят в природе, независимо от воли и
деятельности человека. Например от действия радиоактивных элементов.
Примером спонтанным мутаций возникающих при
культивировании
бактерий может быть феномен диссоциации, т.е. разъединение бактерий и
возникновение S- и R- форм. Есть и переходные формы: М-(слизистая) и О(переходная) формы. Следует отметить, что большинство патогенных
бактерий имеют S-форму, R-формы являются слабовирулентными. Однако
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 29 из 169
такие бактерии как возбудители сибирской язвы и туберкулеза патогенны в
R-форме.
Свойства клеток колоний S- и R-форм
S-форма
Колонии прозрачные, с гладкой
блестящей поверхностью, круглые, с
ровными краями, выпуклые
Подвижные виды имеют жгутики
У капсульных видов хорошо видна
капсула или слизистый слой
Биохимически более активны
У патогенных видов выражены
вирулентные свойства
Полноценны в антигеном отношении
R-форма
Колонии шероховатые, неправильные
с
неровными
краями,
часто
морщинистые
Жгутики часто отсутствуют
Капсулы
или слизистый слой
отсутствуют
Биохимически менее активны
Слабовирулентные или авирулентные
Неполноценны
в
антигеном
отношении
Чувствительны к фагу
Слабочувствительны к фагу
Взвесь клеток в физиологическом Взвесь быстро оседает. Осадок
растворе гомогенная, стойкая. Клетки крошковидный,
клетки
нормальных размеров
полиморфные.
Мутации индуцированные - такие изменения генотипа, которые
происходят путем определенных воздействий на бактерию различными
мутагенами, для получения клеток с заранее заданными свойствами.
ПРИМЕРЫ. Одним и з первых, кто изучал изменчивость у бактерий
основных при знаков был Л.Пастер. Он показал как можно ослабить
вирулентные свойства у микробов под влиянием физических, химических и
биологических факторов.
Так Луи Пастер в 1881 г. приготовил вакцину против сибирской язвы.
Он выращивал возбудителя при температуре -42,5С (вместо 37С) в течение
12 и 24 дней, что привело к снижению патогенности.
Таким же образом была получена вакцина против бешенства в 1885 г.
путем 133 последовательных заражений кроликов интрацеребрально. Тем
самым он ослабил вирус для людей. При подкожном введении предупреждал
у покусанных бешество (фиксированный вирус – virus fixe). Мутация при
пассаже на кроликах. Пассаж самая распространенная форма
индуцированной мутации применяемой на практике для получения
вакцин. (Пассаж – это многократные пересевы микробов. Мутации при
пассажи –пересев в системах культивирования не свойственных данному
микроорганизму в природе).
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 30 из 169
Путем мутации при пассаже на искусственной питательной среде
была получена вакцина против туберкулеза. Кальмет и Герен во Франции в
1919 г. путем длительных пассажей на картофельной среде с желчью и
глицерином, при Т-38 С
значительно снизили патогенные свойства
возбудителя туберкулеза бычьего вида. Таким образом полученный штамм
был назван вакциной БЦЖ (BCG – от фр.: Bacilla Calmet –Geren)/
Мутации могут быть точечными, которые затрагивают только одну
пару нуклеотидов и могут быть мутации-абберации – они затрагивают
изменение двух и более пар нуклеотидов в структуре генома.
Точечные мутации могут происходить в результате: замены пары
нуклеотидов, в результате выпадения (делеции) пары нуклеотидов, или в
результате вставки пары нуклеотидов. Самая легкая мутация это замена.
Изменения происходят только в одном триплете, т.е. изменяется кодировка
только одной аминокислоты. Мутация замены не всегда приводит к
изменением фенотипа бактерий. Это обусловлено эффектом вырожденности
генетического кода, когда одна и та же аминокислота может кодироваться не
одним, а несколькими триплетами. Генотип изменяется.
Делеция и вставка – это сложные мутации, так как одновременно
меняется кодировка всех последующих аминокислот. Образуются другие
белки. (Плакат)
Мутации абберации – занимают большое место. Они могут
происходить в результате замены, вставки и выпадения двух и более пар
нуклеотидов, а также в результате инверсии. Это такая мутация, когда часть
нуклеотидной последовательности в составе нуклеиновой кислоты
разворачивается на 180С.
Мутации могут иметь различные последствия для бактерий. В
некоторых случаях меняется генотип, фенотипические свойства. В других
случаях, когда нарушатся синтез жизненно важного белка, мутация является
летальной. Мутация может быть условно летальной, если жизненноважный
белок сохраняет свою функцию только при определенных условиях внегней
среды (температура 37-40С).
Мутации по механизму действия могут быть прямыми и
обратимыми. Прямые мутации изменяют фенотип, а обратимые мутации
(реверсии) востанавливают его до такого состояния, каким он был перед
прямой мутацией (L-формы бактерий – утрачивают клеточную стенку под
воздействием различных факторов).
Мутагены – факторы, ведущие к проявлению мутации. Они бывают
физической, химической, биологической природы.
1. Физические мутагены.
1.1 Повышенная температура до 40-50 С. Она способствует
удалению пуринового основания – гуанина из цепочки ДНК. На его место
может встать любое азотистое основание.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 31 из 169
1.2 УФО, рентгеновские лучи способствуют изменению химической
структуры пиримидиновых оснований (аденин, тимин). Под воздействием
этих лучей увеличивается внутримолекулярная энергия пиримидиновых
оснований и между двумя соседними молекулами пиримидиновых оснований
образуются мостики – ковалентные связи. Образуется димер, который не
может играть никакой информативной роли.
2. Химические мутагены.
2.1 Первая группа – это вещества, которые реагируют с нуклеиновой
кислотой только во время ее репликации. Такие химические веществ, а по
своей структуре сходны с пуриновыми и пиримидиновыми основаниями, но
не несут никакой информации и если в момент репликации ДНК такие
вещества окажутся в нуклеоиде, они могут встать в структуру ДНК на место
нуклеотидов.
2.2 Вторая группа – это такие химические вещества, которые
вступают в реакцию с покоящейся молекулой ДНК, но для проявления
мутации необходима последующая репликация ДНК.
Таким образом мутации классифицируются:
По локализации различают мутации:
1.
Генные (точечные)
2.
Хромосомные
3.
Плазмидные.
По происхождению мутации могут быть:
1. спонтанными ( образующиеся самопроизвольно и без видимого внешнего
воздействия);
2. индуцированными (проявляющиеся в результате обработки микробной
популяции мутагенными агентами).
По направлению мутационного изменения мутации подразделяются на:
1. Прямые (возникают в геноме «дикого типа» у бактерий в естественных
условиях обитания. Образовавшиеся особи являются мутантами).
2. Обратные (завершающиеся возвратом от мутантного типа к дикому).
3. Одной из форм мутации является диссоциация (мутация, в результате
которой в популяции микроорганизмов возникают особи, отличающиеся от
исходных внешним видом и структурой колоний, так называемые –S-формы
и R-формы).
3. Генетические взаимодействия (самостоятельно)
Генетические рекомбинации возникают в результате обмена
генетичеким материалом между бактериями. Получаются рекомбинанты,
обладающие свойствами обоих родителей. Рекомбинации осуществляются
путем трансформации, трансдукции, коньюгации.
Трансформация – вставка в струкрупу генома реуипиентной бактерии
свободного участка ДНК из среды, целого генома или части генома другой
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 32 из 169
бактерии (донорной) из среды. В результате трансформации образуется
полиплоидная бактерия.
Коньюгация
–
замена
участка
генома
одной
бактерии
соответствующим участком генома другой бактерии при непосредственном
контакте (половое разхмножение у бактерий).
Трансдукция – вставка в геном бактерий чужеродной генетической
информации, главным образом вирусов (бактериофагов).
4. Генетическая инженерия
Изучение генетики микроорганизмов позволило конструировать
рекомбинантные молекулы ДНК вне живой клетки (70-е г.20ст.)
Молекулярная генетика (50-60г.20ст)
Биотехнология –на стыке микробиологии, генетики и молекулярной
биологии. Биотехнология использует методы генетической и клеточной
инженении для получения биологических веществ с заданными свойствами
по производству антибиотиков, витаминов, вакцин, моноклональных
антител, диагностикумов.
Заключение
Генетическая система бактерий имеет четыре особенности, присущие
только им.
1.
Хромосомы бактерий, располагаются свободно в цитоплазме, не
имеющие мембран, но связаны с определенными рецепторами на
цитоплазматической мембране. Хромосома у E.coli мм, т.е. во много раз
превышает длину бактериальной клетки (1,5-3мкм в среднем).ДНК
компактным образом упакована, в виде спирали свернута.
2.
Бактерии являются гаплоидными организмами, т.е. имеют один
набор генов, которые определяют все основные свойства организма.
Содержание ДНК у них не постоянно (при благоприятных условиях ДНК по
массе может соответствовать 2, 4, 6 – 8 хромосомам). У всех других живых
существ содержание ДНК постоянное, и оно удваивается перед делением.
3.
У бактерий в естественных условиях передача генетической
информации происходит не только по вертикали, т.е. от родительской клетки
дочерним, но и по горизонтали с помощью различных механизмов:
конъюгации, сексдукции, трансдукции, трансформации. Практическое
применение.
4.
У
бактерий
кроме
хромосомного
генома
имеется
дополнительный
плазмидный
геном,
наделяющий
их
важными
биологическими свойствами, нередко – специфическими (приобретенными)
иммунитетом к различным антибиотикам и др. химиопрепаратом.
Понятийный аппарат (тезаурус)
1. Геном
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 33 из 169
Плазмида
Фенотипическая изменчивость (адаптация, модификация)
Генотипическая изменчивость (мутации, рекомбинации)
Мутации (спонтанные, индуцированные, прямые, обратные
(реверсионные), генные (точечные), хромосомные (мутацииабберации), плазмидные, диссоциация)
6. Пассаж
7. Рекомбинативная изменчивость (трансформация, трансдукция,
конъюгация)
8. Генетическая инженерия
2.
3.
4.
5.
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Сформулируйте цели и задачи генетики микроорганизмов.
2. Что вы понимаете под термином «ген»?
3. Что вы понимаете под термином «диссоциация культуры»?
4. Что означает термин «фенотипическая изменчивость»?
5. Что означает термин «генотипическая изменчивость»?
6.Что вы понимаете под термином «мутация»?
7.Что такое трансформация, трансдукция, конъюгация?
8. Что такое колицины (бактериоцины)?
9. Что такое «плазмиды»?
10. Назовите задачи, которые решает генетическая инженерия.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ литература
Основная
Бияшев Б.К. Ветеринарная микробиология и иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
Ветеринарная микробиология
и иммунология /Под ред. проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.94-104.
Дополнительная
Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и
иммунология. – М.: Колос С,2003. – 432 с. (С.67-81).
Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.42-49.
Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. – Издательство
Московского университета,1978. – С.103-142.
Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.109-133.
Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.94-122.
Лекция № 6
ТЕМА: УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ
ПЛАН:
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 34 из 169
1. Типы
биотических
взаимоотношений
микроорганизмов
с
макроорганизмами.
2. Общая характеристика инфекции.
2.1 Определение понятий «инфекция», «инфекционный процесс»,
«инфекционная болезнь».
2.2 Патогенность и вирулентность микробов
3. Формы инфекций и периоды инфекционных болезней
4.Роль микроорганизма, макроорганизма и факторов внешней среды в
возникновении инфекционной болезни.
Ключевые
слова:
инфекция,
инфекционная
болезнь,
микробоносительство, иммунизирующая субинфекция.
1.Типы биотических взаимоотношений микроорганизмов с
макроорганизмами
а) мутуализм
в) комменсализм
с) паразитизм
2. Определение понятий «инфекция», «инфекционный процесс»,
«инфекционная болезнь»
.
Инфекция (лат.infectio – впитывание, заражение) (по Радчуку) –
состояние зараженности, при котором развивается эволюционно
сложившийся
комплекс
биологических
реакций
взаимодействия
макроорганизма и патогенных микроорганизмов.
Инфекция (по Богданову) – сложный биологический процесс,
возникающий в результате проникновения патогенных микробов в организм и
нарушения постоянства его внутренней среды
Инфекционный процесс – динамика реакций взаимодействия микро- и
макроорганизмов.
Наиболее яркой формой проявления инфекции является инфекционная
болезнь.
Отличия инфекционной болезни от неинфекционной.
1.
Инфекционная болезнь вызывается определенным патогенным
возбудителем.
2.
Больной организм становится источником возбудителя инфекции.
3.
В больном организме образуются антитела. Он становится
невосприимчивым к повторному заражению
4.
Контагиозность.
5.
Цикличность в развитии инфекционной болезни (инкубационный
период, период предвестников, разгар болезни, исход болезни).
3.Патогенность и вирулентность микробов
Чтобы возникла инфекционная болезнь, возбудитель должен обладать
патогенностью и вирулентностью.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 35 из 169
Патогенность – видовой генетический признак микроорганизма, его
потенциальная возможность вызывать при благоприятных условиях
инфекционный процесс. Каждый вид, как правило, способен вызывать
определенную инфекционную болезнь. В зависимости от этого свойства все
микроорганизмы подразделяются на патогенные, условно-патогенные и
сапрофиты.
Реализация патогенности идет через вирулентность
Вирулентность – это степень патогенности конкретного
микроорганизма. Вирулентным считается тот микроорганизм, который даже в
исключительно-малых дозах приводит к болезни. Вирулентность это
штаммовый признак, он поддается количественной характеристике.
Вирулентность –это фенотипическое проявление патогенности.
Факторы вирулентности: 1. инвазивные и 2. токсигенные
Инвазивные
факторы – капсула, ферменты (гиалуронидаза,
нейроминидаза), жгутики и другие химические компоненты.
Токсигенные факторы – токсины микроорганизмов: экзотоксины и
эндотоксины.
3. Формы инфекций и периоды инфекционных болезней
Классификация инфекций
А) по этиологии
1) бактериальные
2)вирусные
3) протозойные
4) микозы
5) микст-инфекции
В) По количеству возбудителей
1) моноинфекции
2) полиинфекции
С) По тяжести течения
1) легкие
2) тяжелые
3) средней тяжести
Д) По длительности
1)острые
2) подострые
3) хронические
4)латентные
5) сверхострые
Е) По путям передачи
1) Горизонтальные (воздушно-капельный, алиментарный, контактный,
трансмиссивный, половой)
2) вертикальные (от матери-плоду-транплацентарный, от матери к
новорожденному при рождении)
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 36 из 169
3) артифициальные (искусственные) – при инъекциях, обследованиях,
операциях.
Ж) В зависимости от локализации возбудителя различают:
1) очаговую инфекцию
2) генерализованную инфекцию. Бактеремия, вирусемия, септицемия
(сепсис) – наиболее тяжелая форма.
Выделяют также:
-экзогенные инфекции
-эндогенные инфекции (аутоинфекции)
Понятийный аппарат к теме №6
1. Типы
биотических
взаимоотношений
между
микрои
макроорганизмами (мутуализм, комменсализм, паразитизм)
2. Инфекция
(инфекционная
болезнь,
микробоносительство,
иммунизирующая субинфекция)
3. Инфекционный процесс
4. Патогенность
5. Вирулентность
6. Факторы вирулентности (инвазивные- капсула, ферменты, жгутики и
токсигенные - токсины)
7. Классификация инфекций
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев
Б.К.Ветеринарная
микробиология
и
иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.104-118.
Дополнительная
2. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.83-96.
3. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.135-163.
4.Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.145-157.
Лекция №7
Иммунитет
План
1. Иммунитет. Виды иммунитета.
2. Неспецифические (физиологические, естественные) и специфические
факторы защиты.
Ключевые слова: иммунитет, неспецифические и специфические факторы
защиты.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 37 из 169
1. Иммунитет. Виды иммунитета
Иммунитет (от лат. Immunitas – освобождение или избавление от
чего-либо) состояние невосприимчивости организма к воздействию
патогенных микробов, их токсинов и других чужеродных веществ
биологической природы.
Иммунитет – это способ защиты от тел и веществ, несущих
признаки генетической чужеродности. Таким чужеродными веществами
могут быть патогенные бактерии, чужеродные белки, липополисахариды,
полисахариды, собственные измененные клетки, т.е. организмы человека и
животных точно дифференцируют «свое» и «чужое» и осуществляют защиту
против них. Следовательно, главное значение иммунитета состоит в
распознавании «своего» и «чужого», что жизненно важно, что обеспечивает
постоянство внутренней среды организма – гомеостаз (Бернет –
австралийский ученый,1964г). Иммунитет - одно из проявлений гомеостаза. В
связи с этим иммунитет является свойством всего живого: человека,
животных, растений и даже бактерий.
Система органов и клеток, осуществляющая реагирование на
чужеродные вещества, называется иммунной системой организма.
Иммунная система распределена по всему организму, ее клетки постоянно
рециркулируют по всему телу через кровоток. Она обладает способностью
вырабатывать специфические антитела, различные по своей специфике в
отношении каждого антигена.
По происхождению различают два вида иммунитета: врожденный и
приобретенный.
Врожденный (наследственный, видовой, генетический иммунитет –
передается по наследству. Специфическое видовое свойство.
Приобретенный – возникает при жизни человека, животного.
Приобретенный иммунитет подразделяется на естественный и искусственный.
Естественный иммунитет возникает в результате естественного
заражения и переболевания. Он в свою очередь делиться на активный и
пассивный. Активный – постинфекционный, его продолжительность 1-2
года, иногда пожизненно. Пассивный (колостральный, плацентарный,
трансовариальный) – продолжительность от нескольких недель до нескольких
месяцев.
Искусственный иммунитет возникает с помощью человека. Он
подразделяется на активный и пассивный. Активный искусственный
иммунитет возникает после вакцинации через 7-14 дней и продолжается до 1
года и более. Пассивный искусственный иммунитет возникает после
введения сывороток содержащих защитные вещества – антитела. Такой
иммунитет продолжается не более 15 дней. Пассивный колостральный
иммунитет возникает при иммунизации беременных матерей.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 38 из 169
Иммунитет может быть стерильным и нестерильным . Стерильный
иммунитет возникает, если организм освобождается от возбудителя. Сохраняя
невосприимчивость. Нестерильный иммунитет продолжается до тех пор пока
в организме находится возбудитель.
В зависимости от механизмов защиты иммунитет может быть
гуморальным и клеточным. Гуморальный иммунитет обусловлен
выработкой антител, а клеточный – образованием специфических
(антигенреактивных) Т-лимфоцитов, реагирующих с возбудителем.
Различают: антибактериальный, противовирусный, антитоксический
иммунитет. Местный иммунитет.
2. Неспецифические (физиологические, естественные) и специфические
факторы защиты
Организм человека и животных обладает целым комплексом защитных
приспособлений. Они препятствуют проникновению патогенных микробов и
губительно действуют на них. Эти приспособления называют
неспецифическими (врожденные внутренние механизмы поддержания
постоянства внутренней среды). Они появились, по-видимому, в результате
постоянного контакта организма с микроорганизмами. К ним относят кожу,
слизистые оболочки, лимфатические узлы, фагоцитоз, нормальные
антитела, лизоцим, секреторный иммуноглобулин А, пропердин, лизины,
лактоферрин, комплемент, интерферон.
Кроме неспецифических факторов защиты выделяют специфические,
т.е. под воздействием определенного микроорганизма (антигена) в организме
могут вырабатываться специфические защитные вещества, называемые
антителами и антигенреактивные клетки.
1.
2.
3.
4.
Понятийный аппарат (тезпурус) к теме №7
Иммунитет
Виды иммунитета:
- активный и пассивный;
-врожденный и приобретенный;
- гуморальный и клеточный;
- естественный и искусственный;
- местный;
- стерильный и нестерильный
Неспецифические факторы защиты (кожа, слизистые оболочки,
лимфатические узлы, фагоцитоз, нормальные антитела, лизоцим,
секреторный иммуноглобулин А, пропердин, лизины, лактоферрин,
комплемент, интерферон.)
Специфические факторы защиты (антитела и антигенреактивные Тлимфоциты)
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 39 из 169
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Виды иммунитета
2. Неспецифические факторы защиты
3. Специфические факторы защиты
РЕКОМЕДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев Б.К.Ветеринарная микробиология и иммунология.- Алматы,2007.
– 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.104-118.
Дополнительная
2. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.97-120.
5. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.163-192.
6.Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.177-191.
Лекция №8
Практическое значение учения
об инфекции и иммунитете
План
1. Антигены. Природа и свойства антител. Полноценные антигены и
гаптены. Антигены бактериальной клетки.
2. Антитела. Строение антител. Классификация антител.
3. Взаимодействие антител с антигенами.
Ключевые слова: антитела, антигены
1. Антигенами называют вещества, которые несут признаки
генетической чужеродности и при введении в организм вызывают
развитие специфических иммунологических реакций. Если говорить об
иммунитете, то антигены это вещества стимулирующие образование антител
и вступающие с ними в реакцию.
К антигенам относят микробы и их токсины, чужие эритроциты и
сыворотки, вирусы, микроскопические грибы, яды животных (змей,
скорпионов, пчел), яды растительного происхождения (рицин, кортин). Чаще
антигены белковой природы (полноценные антигены). Но могут быть и
сложные комплексы из полисахаридов, липидов, белков. Антигены из
полисахаридов, липидов называют неполноценными или гаптенами.
В зависимости от места локализации в теле бактерии различают
следующие антигены:
1. капсульный антиген (у бактерий образующих капсулу), поверхностный –
антиген клеточной стенки. Их обозначают: К-антигены.
2. жгутиковый антиген – Н-антиген.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 40 из 169
3. соматический антиген – О-антиген.
2.
Антитела
это
белки,
иммуноглобулины,
которые
вырабатываются иммунной системой организма при воздействии на него
антигенов (микробов).
Иммуноглобулины
–
семейство
сывороточных
белков,
характеризующихся сходством принципов структурной организации и
способностью в качестве антител взаимодействовать с антителами. Различают
5 классов иммуноглобулинов (Jg): JgG, JgМ, JgА, JgД, JgЕ. Молекула
иммуноглобулина может иметь от одного до нескольких полимеров.
Антитела строго специфичны. Антитела способны вступать в реакцию с
антигенами и обезвреживать их действие.
Все антитела отличаются друг от друга, т.е гетерогенны. Считают, что
существует более 100000 антигенов. На каждый антиген синтезируется свое
антитело. Такое многообразие антител обусловлено разным строением их
активных центров.
Активный центр – место на молекуле иммуноглобулина, через которое
происходит соединение с антигеном.
Под валентностью антител понимают количество активных центров,
способных реагировать с антигеном. (Молекула JgG двухвалентна, т.е. имеет
два активных центра; молекула JgМ поливалентна, имеет 10 активных
центров)
Строение антител (молекулы JgG). Молекула иммуноглобулина
имеет две тяжелые и две легкие полипептидные цепи, связанные между собой
дисульфидными мостиками. Легкие цепи (L) являются общими для всех
классов и подклассов. Тяжелые цепи (Н) отличаются по строению у каждого
класса. Легкие цепи подразделяются на два типа: κ (каппа) и λ (лямбда).
Тяжелые цепи обозначают греческими буквами: γ (гамма), μ (мю), α (альфа), δ
(дельта) и ε (эпсилон), что соответствует латинскому обозначению того или
иного класса: JgG, JgМ, JgА, JgД, JgЕ. Гипервариабельные участки легкой и
тяжелой цепей образуют активный центр. Именно этой частью отличаются
антитела друг от друга.
В зависимости от характера реакции с антигенами антитела получили
разные названия: агглютинины, преципитины, опсонины, бактериолизины,
антитоксины.
Агглютинины вызывают склеивание микробов и дают реакцию
агглютинации, так как антигеном в данном случае являются микробы,
имеющие корпускулярное строение.
Преципитины осаждают (преципитируют) белок. Антигеном служит
экстракт бактерийный клеток или тканей и представляет собой прозрачную
жидкость.
Опсонины протравливают микробную клетку и облегчают ее фагоцитоз.
Бактериолизины в присутствии комплемента лизируют (растворяют)
бактерии.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 41 из 169
Антитоксины нейтрализуют действие токсинов.
2.Взаимодействие антител с антигеном происходит за счет наличия у
антител активного центра, который соответствует пространственной
конфигурации антигенной детерминанте. Активный центр должен быть
комплементарным (т.е. соответствовать как перчатка руке) детерминантной
группе антигена, иначе не произойдет их сцепление, взаимодействие.
Активность связывания антител ас антигеном оценивается такими
понятиями как аффинитет и авидность.
Аффинитет – это уровень сродства между активным центром
антител
и
детерминантной
группой
антигена,
т.е.
степень
комплементарности или совпадения конфигураций активного центра и
детерминатной группы.
Авидность – это валентность антител, или количество и
расположение активных центров. Чем выше авидность, тем прочнее связь и
слабее склонность агрегатов к диссоциации.
Заключение. Учение об иммунитете имеет практическое значение.
В иммунопрофилактике (вакцины, сыворотки), иммунотерапии (лечебнопрофилактические сыворотки и иммуноглобулины) и диагностике
(диагностические
иммунные
сыворотки
и
иммуноглобулины,
диагностические антигены и аллергены, бактериофаги) инфекционных
болезней.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №8
1. Антигены (полноценные антигены, гаптены)
2. Антитела, иммуноглобулины (агглютинины, преципитины, гемолизины,
опсонины, бактериолизины, антитоксины, комплементсвязывающие антитела)
3. Активный центр
4. Валентность
5. Антигенная детерминанта
6. Аффинитет
7. Авидность
Рекомендуемая литература
Основная
1. 2.Бияшев Б.К.Ветеринарная микробиология и иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.104-118.
Дополнительная
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
УМКД
042-18-23.1.01 / 03-2013
Ред. №___ от _______
2013г.
Страница. 42 из 169
2. Колычев Н.М., Госманов Р.Г. Ветеринарная микробиология и
иммунология. – М.: Колос С,2003. – 432 с. (С.67-81).
3. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.97-120.
4. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.163-192.
5. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.177-191.
042-14-4-03.01.20.03/03-2008
Редакция №2
стр. 43 из 169
Частная микробиология
Лекция № 9
Методы диагностики инфекционных болезней.
Патогенные кокки
СХЕМА БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Краткая характеристика заболевания (определение, какие виды животных болеют,
в каком возрасте, клинические признаки, патологоанатомические данные)
2. Название возбудителя (семейство, род, вид)
3. Методы диагностики
А) Бактериологическая диагностика
↓
правила взятия и пересылки патологического материала
для исследования
↓
↓
↓
Микроскопия
Выделение чистой культуры
Биопроба
Гр (-) (+)
Питательные среды,
Вид лаборат-го
Спора
потребность
жив-го, метод
Капсула
в кислороде, температура,
заражения, доза.
Жгутики
время культивирования
Сроки гибели.
МФА
↓
Идентификация
(определение видовой или типовой (вариантной) принадлежности микроорганизма
↓
1. Морфология
2. Тинкториальные свойства
3. Характер роста на питательных средах
4. Ферментативные (биохимические) свойства
5. Антигенные (серологические) свойства
6. Патогенные свойства
7. Фаготипирование
8. Токсигенные свойства
9. Антибиотикочуствительность
1.
В) Серологическая диагностика
↓
РА, РСК, РП, РДП, РДСК, РС, РБП, КР
↓
С) Аллергическая диагностика
↓
аллергены, методы введения, доза, учет
4.
5.
План
Иммунитет, средства специфической профилактики (вакцины, сыворотки - их
характеристика)
Лечение
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 44 из 169
1. Принципы диагностики бактериальных инфекций.
2.
Патогенные
стафилококки.
Морфологические,
культуральные,
биохимические свойства.
3.
Патогенные
стрептококки.
Морфологические,
культуральные,
биохимические свойства.
Ключевые слова: бактериологическая диагностика, стафилококки,
стрептококки,
1. Принципы диагностики бактериальных инфекций.
Диагностика инфекционных болезней бактериальной этиологии
осуществляется тремя основными методами:
1. Бактериологическая диагностика
2. Серологическая диагностика
3. Аллергическая диагностика
Цель бактериологического метода диагностики заключается в
выделении чистой культуры микроба из патологического материала и
определении его видовой принадлежности. Бактериологическая диагностика
является обязательным методом диагностики , как при острых, так и при
хронических
инфекционных
заболеваниях.
Для
постановки
бактериологического диагноза в лабораторию направляется патологический
материал (кусочки паренхиматозных органов, соскобы с кожи, трубчатая
кость, остатки корма и т.д. в зависимости от заболевания). Патматериал
должен быть свежим. В летнее время его консервируют 30% водным
раствором глицерина (при вирусных болезнях 50% раствором).
Чистую культуру выделяют тем или иным методом (чистая культура это
культура одного вида микроба выделенного из патологического материала).
Например: микобактерии (возбудители туберкулеза) устойчивы к спирту,
щелочам, кислотам. Поэтому суспензию из патматериала обрабатывают 5-10
% раствором серной кислоты.
После выделения чистой культуры, необходимо определить вид
микроорганизма (т.е. провести идентификацию культуры). Видовую
принадлежность выделенной чистой культуры определяется путем изучения:
1. морфологических свойств,
2. тинкториальных свойств,
3. культуральных свойств,
4. ферментативных свойств
5. токсигенных свойств,
6. патогенных свойств,
7. антигенных свойств,
8. устойчивости к антибиотикам и бактериофагам,
9. постановки МФА, ИФА
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 45 из 169
Целью серологического метода диагностики является определение
наличия типоспецифических антител в сыворотках крови исследуемых
животных. Патологическим материалом служит сыворотка крови.
Серологический метод диагностики используется при хронических инфекциях
(бруцеллез). Обнаружение антител свидетельствует о присутствии антигена
(возбудителя)
в
организме.
Определение
антител
осуществляют
серологическими реакциями – РА, РСК, РДСК, РБП.
Аллергический метод диагностики основан на гиперчувствительности
замедленного
типа
(повышенной
чувствительности
сенсибилизированного организма). Достаточно сенсибилизированному
организму ввести небольшую дозу аллергена и организм реагирует
повышенной чувствительностью в месте введения аллергена (на месте
введения развиваются признаки воспаления). Аллергическая диагностика
используется при хронических инфекциях. Например, при туберкулезе
аллергическая диагностика является ведущим методом прижизненной
диагностики.
2. Патогенные стафилококки. Морфологические, культуральные,
биохимические свойства.
Микроорганизмы, имеющие форму кокков, довольно широко
распространены в природе. Некоторые из них являются патогенными для
животных и человека и вызывают воспалительные процессы, которые часто
сопровождаются образованием гноя. Поэтому их называют гноеродными
кокками.
Патогенные стафилококки. Стафилококки вызывают абсцессы,
флегмоны, фурункулы, мастит, послеродовой эндометрит у коров,
пневмонию, септицемию, энтерит у молодняка, артриты, гнойное воспаление
ран, менингиты, пищевые токсикозы, стафилококкоз птиц.
Классификация. Основные виды.
Семейство: Micrococcaceae
Род: Staphylococcus
Виды:
1.Staphylococcus aureus
2. Staphylococcus epidermidis
3. Staphylococcus saprophyticus
4. Staphylococcus albus
5. Staphylococcus citreus
6. Staphylococcus roseus
Из них патогенным является Staphylococcus aureus. Патогенным для
человека является и Staphylococcus epidermidis.
В патогенезе стафилококковых процессов ведущая роль принадлежит
экзотоксинам и ферментам патогенности, которые оказывают разрушительное
действие на клетки крови (эритроциты, лейкоциты, клетки тканей, на плазму
крови).
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 46 из 169
Устойчивость к неблагоприятным факторам внешней среды высокая (в
высушенном гное до 200 дней, в молоке при 70 С – 1 час, 85 С – 30 минут).
Учитывая высокую устойчивость стафилококков. Их используют в качестве
тест-объекта при испытании новых антибиотиков или дезинфицирующих
веществ.
Морфология. Стафилококки (от греч. Staphyle гроздь + kokkos зерно) –
шаровидные неподвижные бактерии, образующие при размножении
скопления, похожие на грозди. Спор, капсул не образуют. Размеры: 0,5-1,5
мкм. Грамположительные. Факультативные анаэробы.
Культивирование. Первичные посевы проводят на кровяном агаре
(гемолиз), на молочно-солевом агаре (образуют пигмент), на желточносолевом агаре (вокруг колоний появляется зона помутнения с радужным
венчиков по периферии. Затем из характерных колоний делают отсев на
МПА, для получения чистых культур. Чистую культуру идентифицируют
методом микроскопии, ставят реакцию плазмокоагуляции с чистой культурой,
позволяющей дифференцировать патогенные стафилококки от непатогенных.
На кроликах проводят дермонекротическую пробу. Кролику
внутрикожно вводят 0,2 мл 2 млрд взвеси культуры. Наличие некроза на месте
инъекции учитывают на четвертые сутки.
Кроме того, Staphylococcus aureus в отличие от других стафилококков
ферментирует манит в анаэробных условиях.
Для выявления источника стафилококковой инфекции используют
фаготипирование.
Иммунитет
антитоксический,
слабой
напряженности,
непродолжительный. После переболевания накапливаются антитоксины,
которые обуславливают повышенную устойчивость к повторным
заболеваниям
Диагностика заболеваний вызванных патогенными стафилококкими
проводится путем бактериологической диагностики. При определении
видовой принадлежности выделенных стафилококков, акцентируют внимание
на патогенных, ферментативных, токсигенных, антигенных свойствах.
Патогенные стафилококки отличают от непатогенных по ферментативной
активности. Для биопробы используют кроликов. Изучают чувствительность
к антибиотикам. Для профилактики заболеваний вызванных стафилококками
используют очищенный адсорбированный стафилококковый анатоксин и
аутовакцину. Лечение осуществляют антибиотиками.
3.Патогенные стрептококки.
1874г. – Т.Бильрот выделил из тканей людей больных рожей, и при раневых
инфекциях.
1879 г. – Л.Пастер, 1881г. – А.Огстон – описали при сепсисе.
1883г. – Ф.Фелейзен, 1884г. А.Розенбах – выделили и изучили чистую
культуру.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 47 из 169
Стрептококки вызывают неспецифические нагноительные процессы, а
могут быть возбудителями специфических инфекционных заболеваний, таких
как мыт лошадей, мастит коров, диплококковая инфекция.
Характеристика патогенных стрептококков.
Морфология. Стрептококки имеют шаровидную форму, размеры их 0,61 мкм, располагаются парами, цепочками, неподвижны, не образуют спор,
грамположительны. Отдельные виды образуют капсулу.
Культивирование. Стрептококки – факультативные анаэробы,
некоторые разновидности анаэробы. Мезофиллы. На обычных средах растут с
трудом. Хорошо культивируются на сахарном, кровяном, сывороточном агаре
и бульоне при рН среды 7,2-7,6. На плотных средах образуют мелкие, мутные,
сероватые или серовато-белые, зернистые, не резко очерченные колонии. На
кровяном агаре в зависимости от вида стрептококка могут вызывать β-гемолиз
(прозрачная зона) или α-гемолиз (зеленая зона) вокруг колоний вследствие
превращения гемоглобина в метгемоглобин. Некоторые виды стрептококков
не дают гемолиза –- негемолитические стрептококки . На сахарном бульоне
растут с образованием пристеночного и придонного мелкозернистого осадка,
редко мутят бульон.
Ферментативные свойства. Патогенные стрептококки обычно не
разжижают желатин, не восстанавливают нитраты в нитриты. Свертывают
молоко, растворяют фибрин, ферментируют глюкозу, мальтозу, лактозу,
сахарозу, маннит (не всегда), расщепляют салицин, трегалозу с образованием
кислоты.
Токсинообразование. Патогенные стрептококки образуют различные по
своему действию экзотоксины:
1. гемолизин, инактивирующийся при температуре 55 С в течение 30 мин;
обуславливает разрушение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов,
макрофагов; при внутривенном введении кроликам вызывает
гемоглобинемию и гематурию;
2. лейкоцидин, разрушающий лейкоциты; встречается у очень
вирулентных штаммов, обезвреживается при 70 С;
3. летальный токсин (некротоксин) при внутрикожном введении кроликам
приводит к некрозу, обладает некротическим действием и по
отношению к другим тканям, особенно к клеткам печени, при
внутривенном введении кроликам и белым мышам вызывает их
быструю гибель.
Кроме того. патогенные стрептококки образуют ферменты
патогенности: гиалуронидазу, благодаря которой возбудитель проникает в
ткани и органы пораженного организма животного, фибринолизин,
дезоксирибонуклеазу, рибонуклеазу, нейроминидазу, протеиназу, амилазу,
липазу, стрептокиназу.
Антигенная структура. В основу изучения антигенного строения
стрептококков положены данные серологических исследований. Ф.Гриффитс
использовал для этой цели реакцию агглютинации стрептококков. Р.Ленсфилд
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 48 из 169
применила реакцию преципитации с экстрактом из осадка бульонной
культуры.
По антигенной структуре стрептококки выделены в 17 серологических
групп. Из них шесть серологических групп представляют практический
интерес (А, В, С, Д, Е, F).
Группа А – гноеродные стрептококки, вызывающие заболевания людей
ангиной, скарлатиной, рожей и т.д.
Группа В – возбудители мастита у коров.
Группы В, С, Д, Е – возбудители инфекций у животных разных видов.
Антигеном, который позволяет разделить стрептококки на серогруппы,
является полисахарид (С-вещество), входящий в состав клеточной стенки
стрептококков.
Классификация
Семейство: Streptococcaceae
Род: Streptococcus
Виды: Streptococcus egui – возбудитель мыта лошадей
Streptococcus agalactiae – возбудитель мастита у коров
Streptococcus pneumonia – возбудитель диплококковой инфекции
Streptococcus pyogenes - вызывает абсцессы, артриты, флегмоны,
эндометриты, септицемию.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №9
1.Патогенные стафилококки (Staphylococcus aureus, Staphylococcus
epidermidis – морфологические, культуральные, биохимические, патогенные
свойства)
2. Сапрофитные стафилококки (Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus
albus, Staphylococcus citreus, Staphylococcus roseus)
3. Патогенные стрептококки (Streptococcus egui, Streptococcus agalactiae ,
Streptococcus pneumonia, Streptococcus pyogenes - морфологические,
культуральные, биохимические, патогенные свойства)
4. Сапрофитные стрептококки (Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris,
Streptococcus diacetilactis)
5. Бактериологическая диагностика (микроскопия, выделение чистой
культуры, биопроба)
6. Серологическая диагностика
7. Аллергическая диагностика
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Схема бактериологической диагностики инфекционных болезней.
2. Объяснить понятия: идентификация, морфология, тинкториальные
свойства, характер роста на питательных средах, ферментативные
свойства, антигенные свойства, патогенные свойства, фаготипирование,
токсигенные свойства, антибиотикочувствительность.
3. Какие заболевания вызывают патогенные стафилококки и стрептококки?
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 49 из 169
4. Латинские названия возбудителей.
РЕКОМЕДУЕМАЯ ДЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев
Б.К.Ветеринарная
микробиология
и
иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.186-198.
Дополнительная
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
2. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.138-148.
3. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.227-254.
4.Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.253-272.
5. Орлов Ф.М. Словарь ветеринарных клинических терминов. – М.,1985. –
С.310-311.
Лекция №10
Бруцеллы (Brucella)
План
1.Определение болезни. Историческая справка
2. Возбудители бруцеллеза
3. Морфологические, культуральные, биологические свойства бруцелл
4. Методы диагностики бруцеллеза
5. Иммунитет и иммунизация
Ключевые слова: бруцеллез, бруцеллы
1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БОЛЕЗНИ. ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА
Бруцеллёз (Мальтийская лихорадка)– это инфекционное хроническое
заболевание всех видов сельскохозяйственных, многих видов промысловых и
диких животных, вызываемое бруцеллами,
проявляющееся абортами,
задержанием
последа,
эндометритами,
орхитами,
расстройством
воспроизводительной функции, артритами, бурситами, или протекающая
бессимптомно. Бруцеллезом болеют и люди.
Возбудителя мальтийской лихорадки открыл английский бактериолог
Д.Брюс. Однако ему не был известен процесс переноса болезни на человека.
Разгадка пришла позже, когда в 1905г. перевозили морем с о. Мальты в США
65 внешне вполне здоровых коз. Экипаж корабля во время плавания пил
сырое козье молоко, и некоторые матросы заболели лихорадкой. По
прибытии на место в молоке были обнаружены возбудители болезни. Так
выяснилось, что заболевание передается людям через молоко.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 50 из 169
1886-1887 гг. – Д.Брюс впервые выделил возбудителя на о.Мальта из
селезенки солдата умершего от «мальтийской лихорадки». Микроб назван
«мальтийским микрококком» (Micrococcus melitensis).
1897 г. – Б. Банг (Дания) и Стрибольт выделили мельчайшую
бактерию их абортированного плода коровы (B.abortus).
1914 г. – Д.Траум (США) выделил возбудителя от абортировавшей
свиноматки (B.suis – биовар 1).
1918 г. – Эванс изучил известные виды бруцелл и объединил их в род
Brucella в честь Д.Брюса – Bruce.
1956 г. – Br. ovis (Buddle) – возбудитель инфекционного эпидидимита
баранов.
1957 г. – Br. neotomae (Stoenner, Lackman) – возбудитель бруцеллеза
у пустынных крыс.
1966-1968 гг. – Br. canis (Carmichael, Brunner) – возбудитель
бруцеллеза у собак.
Значительный вклад в изучение бруцеллеза внесли следующие ученые:
С.Н. Вышелесский, П.Ф. Здродовский, П.А.Вершилова, М.К. Юсковец, Е.С.
Орлов, В.Е. Корнеева, П.С. Уласевич, П.А. Триленко, Е.В. Козловский
(Россия). В.С.Степин и его ученики, Н.П. Иванов, Т.С.Сайдулдин, К.И.
Минжасов (Казахстан) и др.
2. ВОЗБУДИТЕЛИ БРУЦЕЛЛЕЗА. УСТОЙЧИВОСТЬ БРУЦЕЛЛ
Род Brucella включает 6 видов грамотрицательных бактерий, вызывающих
внутриклеточную инфекцию животных. Каждый из видов представлен
биотипами,
отличающимися
друг
от
друга
биохимическими,
культуральными, антигенными и патогенными свойствами
Род: Brucella
№ Виды бруцелл
1
2
3
BRUCELLA
ABORTUS
BRUCELLA
MELITENSIS
BRUCELLA SUIS
Количество
биоваров
9
Естественные
хозяева
КРС
3
Козы, овцы
4
Свиньи, зайцы,
северные олени
(Br. rangiferi
Восприимчивы к
возбудителю
яки, буйволы,
верблюды,лошади
КРС, верблюды,
свиньи, домашние
кролики,
собаки,сайгаки,
буйволы, зебу,
антилопы, олени.
Человек.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
4
5
6
BRUCELLA OVIS 1
BRUCELLA
1
CANIS
BRUCELLA
1
NEOTOME
Редакция .№1
стр. 51 из 169
tarandi)
Овцы
Собаки
Кустарниковые
крысы
УСТОЙЧИВОСТЬ БРУЦЕЛЛ К РАЗЛИЧНЫМ ФАКТОРАМ
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
Факторы
Температура – 60 С
70 С
90 -100 С
Закисающее и охлажденное молоко, сливки
На одежде
В сырах, масле, брынзе, соленых шкурах
В соленом мясе
В замороженном мясе и на шерсти
В почве, воде, навозе, грубых кормах
В гниющем материале
Прямые солнечные лучи
Растворы креолина, фенола, формальдегида
(1%)
Свежегашеная известь (5%)
Растворы лизола (3%),хлорной извести
(1%), хлорамина (0,01%)
Время гибели
30 мин
5-10 мин
моментально
4-7 сут
14 дней
67 дней
3 месяцев
5 месяцев
4 месяцев
Погибают быстро
3-4 ч
1ч
2ч
3-5 мин
Устойчивость бруцелл к физическим и химическим факторам невысока
3. МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ, КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ, БИОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА БРУЦЕЛЛ
МОРФОЛОГИЯ. Бруцеллы обладают сходными морфологическими,
тинкториальными и культуральными свойствами. Это Гр. (-) – мелкие
кокковидные или палочковидные клетки d=0,5 – 0,7 мкм и длинной 0,6 – 1,5
мкм, неподвижные, спор и капсул не образуют, жгутиков не имеют,
располагаются беспорядочно, иногда парами, аэробы.Специальный метод
окрашивания по Козловскому (красные)
Культивирование. Рост при t = 36 – 37оС, рН 7,0 – 7,2, обычные
питательные среды, но лучше с добавлением сыворотки или крови.
Специальные
питательные
среды:
МППБ,
печёночно-глюкозно-
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 52 из 169
глицериновый агар и бульон, картофельный агар, кровяной, сывороточный
агар. В качестве элективных используют среды с генцианвиолетом и
малахитовой зеленью, элективную среду Кроля, плотные среды с фуксином и
тионином и др. Особенностью Brucella abortus является повышенная
потребность в СО2 (5 - 10%) в атмосфере роста. Бруцеллы растут медленно
через 2 – 4 недели. Колонии бруцелл бесцветные, выпуклые, круглые S –
формы или шероховатые R – формы, нежные и прозрачные в начале, с
возрастом мутнеют. Встречаются М-слизистые варианты колоний.
Установлена L-форма бруцелл.
Рост бруцелл в бульонной среде сопровождается равномерным
помутнением.
На агаре с кровью бруцеллы гемолиза не дают, пигмент не синтезируют
БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА.
Сахаролитическая активность у бруцелл выражена слабо. Они
утилизируют углеводы, но не образуют кислоту и газ в количествах,
достаточных для их идентификации.
Бруцеллы ферментируют глюкозу и арабинозу с образованием кислоты
без газа, восстанавливают нитраты в нитриты. Образуют Н2S, что наиболее
выражено у Brucella suis. Молоко не свертывают, желатин не разжижают.(Не
обладают протеолитическими свойствами.)
Могут продуцировать каталазу, пероксидазу, липазу, фосфотазу.
АНТИГЕННАЯ СТРУКТУРА.
Бруцеллы в S-форме трех основных видов обладают двумя
соматическими антигенами: имеют глубинный О и поверхностный Sантиген. Последний существует в двух вариантах – А и М. Возбудитель в Rформе в той или иной степени утрачивает S-антиген, т.е. диссоциация
связана с утратой А и М-антигенов и уменьшением вирулентности.
Предполагают, что эти антигены представлены сложным глюцидолипидополипептидным комплексом. Они активно индуцируют синтез
антител, выявляемых в реакциях агглютинации, РСК, преципитации и
других. Особенности антигенной структуры бруцелл позволяют получить
моноспецифичесие А- и М-антисыворотки. Кроме того был обнаружен
поверхностный L-антиген, сходный с Vi-антигеном сальмонелл.
Патогенные свойства бруцелл.
Патогенное действие бруцелл связано с образованием токсинов эндотоксинов, а также ферментов вирулентности - гиалуронидазы, каталазы,
уреазы. Бруцеллы высокоинвазивны, могут проникать через неповрежденные
слизистые покровы пищеварительного тракта, легких, глаз и кожу.
Восприимчивы овцы, козы, крупный рогатый скот, буйволы, свиньи,
лошади, мулы, верблюды, северные олени, собаки кошки,, многие дикие
животные (маралы, лоси, косули, сайгаки и др.). Молодняк до половой
зрелости более устойчив. Каждый вид бруцелл поражает животных
определенного вида. Но бруцеллы могут мигрировать, заражая животных
других видов, например B.melitensis – КРС, свиней и лошадей, B.abortus –
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 53 из 169
коз, овец, лошадей, свиней, B.suis – крупный и мелкий рогатый скот,
лошадей. Для человека наиболее опасна B.melitensis.
Бруцеллы вызывают генерализованную инфекцию во время
бактериемии, размножаются в различных тканях, репродуктивных органах.
Из лабораторных животных к заражению чувствительны морские свинки,
мыши. У мышей после заражения иногда развивается септицемия, свинки
абортируют, худеют, у них выпадают волосы, возникает генерализованная
инфекция.
4.МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА
Диагноз ставят комплексным методом. Главными методами
диагностики бруцеллеза являются бактериологический, биологический
(биопроба) серологический, аллергический.
1. Бактериологическую диагностику проводят при аборте или
появлении у животных других признаков (бурситы, гигромы, архиты,
эпидидимиты и пр.) бруцеллеза. Материал для исследования:
абортированный плод с плодными оболочками (от свиноматок берут не
менее 3 плодов) или желудок плода с содержимым( желудок перевязывают
со стороны пищевода и со стороны двенадцатиперстной кишки), а также
кусочки печени и селезенки. Содержимое гигром (бурс). Пробы молока
(последние порции молока по 10-15мл из каждой доли), можно
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 54 из 169
консервировать сухой борной кислотой (0,1 г/10мл). Кровь от
абортировавшего животного. Консервирование материала 30% водным
раствором глицерина.
Бактериологическое исследование включает бактериоскопию мазков из
патматериала, выделение чистой культуры бруцелл на питательных средах и
постановку биопробы на морских свинках.
Мазки окрашивают по Грамму или одному из специальных методов: по
Стампу, Козловскому или Шуляку-Шин. Бруцеллы – мелкие,
грамотрицательные коккобактерии, расположены отдельно, попарно или
кучно, окрашиваются по Козловскому (Стампу, Шуляку-Шину) в красный
цвет.
Для выделения чистых культур делают посевы на специальные и
элективные питательные среды, за которыми наблюдают в течение 30 дней
просматривая визуально каждые 3-4 дня, обращая внимание на характер
роста. На поверхности агара бруцеллы образуют мелкие, блестящие,
выпуклые с ровными краями и гладкой поверхностью просвечивающиеся
колонии, имеющие в отраженном свете голубоватый оттенок, а в падающем –
сероватый. С возрастом колонии мутнеют (это связано с появлением
пигмента) и приобретают более темную окраску.
В бульоне бруцеллы образуют равномерное помутнение и пристеночное
кольцо, возвышающееся над уровнем, а в дальнейшем небольшой осадок на
дне пробирки. В отраженном свете пристеночное кольцо имеет голубоватый
оттенок. Выделенные культуры идентифицируют по тинкториальным,
морфологическим, культуральным свойствам, в реакции агглютинации
на стекле – с позитивной бруцеллезной сывороткой.
Для видовой и биовариантной дифференциации бруцелл учитывают,
потребность в росте первых генераций их культур в углекислоте (5-10%),
способность к образованию сероводорода, рост на средах с тионином и
основным фуксином, агглютинацию моноспецифическими сыворотками,
фагочувствительность, а также способность метаболирования ряда
аминокислот и углеводов.
Биопробу проводят на морских свинках (не менее двух массой по 300400г), предварительно проверенных на бруцеллез (в РА). Суспензию из
патматериала (органов, содержимого желудка, плаценты) (1:10) вводят
подкожно в дозе 1 мл с внутренней стороны бедра морской свинке.
Содержимое гигром подкожно по 0,2-0,3 мл, молоко после
центрифугирования (осадок) – 2-3 мл.
На 15, 25, 40 дни после заражения берут 1-2 мл крови из ушной вены или
из сердца и сыворотку крови исследуют в РА в разведениях 1:10 до 1:80. При
положительной РА (1:10 и выше) морских свинок убивают и материал от них
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 55 из 169
исследуют бактериологически, т.е. делают посевы из лимфоузлов, селезенки,
печени и костного мозга..
Результат исследования на бруцеллез считают положительным
при выделении культуры возбудителя или при получении у морской
свинки положительной РА (1:10 и выше), если из исходного материала
культура не выделена. Срок биологического исследования – до двух
месяцев.
2. На производстве, ведущем методом диагностики является
серологический.
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
Реакции считаются положительными:
РА - от двух до четырех крестов, в разведениях:
1:50 (для мелких животных)
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 56 из 169
1:100 (для крупных животных)
1:10 (для пушных зверей и морских свинок),
реакция положительная, животные больные.
РСК – от двух до четырех крестов, в разведениях:
1:5 (для всех животных),
реакция положительная, животные больные.
РДСК – более чувствительный тест, чем РСК. При инфекционном
эпидедимите баранов используют только РДСК с овисным антигеном. РСК и
РДСК считают положительными при задержке гемолиза на 2-4 креста в
одном или двух разведениях (1:5 или 1:10) и полном гемолизе эритроцитов в
контрольной пробирке (без антигена).
РБП – реакцию проводят при температуре 18-30 С с бруцеллезным
антигеном, окрашенным бенгальским розовым, на пластинках с лунками.
При положительной реакции в течение 4 минут появляются мелкие или
крупные хлопья агглютината розового цвета.
КР – ставят с цельным свежим молоком или консервированным формалином
молоком коров и антигеном – взвесью убитых бруцелл, окрашенных в синий
цвет гематоксилином. При наличии в молоке специфических антител
происходит агрегация антигена. Образовавшийся комплекс адсорбируется
сливками молока и поднимается с ними вверх, образуя четкое, окрашенное
кольцо.
Для выявления бруцелл непосредственно в патологическом материале,
а также в объектах окружающей среды предложен прямой метод
иммунофлюоресценции (РИФ).
3.Аллергический метод диагностики основан на выявлении у
больных
бруцеллезом
животных
повышенной
чувствительности
замедленного типа к специфическому аллергену. Для аллергической
диагностики применяют бруцеллин )ВИЭВ) – стерильный биологический
препарат (жидкость коричневато-желтого цвета без опалесценции),
содержащий продукты жизнедеятельности и специфические вещества,
извлеченные из бруцелл. Бруцеллин вводят под кожу нижнего века на 1 см
ниже его края со тороны наружного угла глаза (пальпебральная проба):
овцам, козам и оленям – 0,5 мл, КРС и буйволам – 1,0 мл. Свиньям
внутрикожно, с наружной стороны ушной раковины, ближе к основанию уха
(0,2мл). У больных животных на месте введения бруцеллина наступает
воспалительная реакция в виде плотной или тестоватой припухлости,
гиперемия. У здоровых животных реакция не наступает.
5. Иммунитет и иммунизация.
Животных, больных бруцеллезом, не лечат из-за отсутствия
эффективных средств. Больные животные представляют серьезную
опасность для здоровья человека, поэтому подлежат убою.
С развитием инфекционного процесса у животных формируется
нестерильный иммунитет, который сохраняется некоторое время и после
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 57 из 169
освобождения организма от бруцелл (стерильный, постинфекционный
иммунитет). Решающее значение в противобруцеллезном иммунитете
имеют клеточные факторы.
Для специфической профилактики бруцеллеза используют живые и
инактивированные вакцины. При выборе вакцинных штаммов учитывают
четыре критерия: остаточную вирулентность, патогенность, длительность
выживания в организме и иммуногенность. Во всем мире наибольшее
распространение получила сухая живая вакцина из штамма Brucella
abortus 19, выделенного из молока коров Баком в 1923 г. в США.
В настоящее время чаще применяют сухую живую вакцину из
слабоагглютиногенного штамма Br.abortus 82. Вакцинируют молодняк
(КРС) в возрасте 5-6 месяцев и за два месяца перед случкой
Для иммунизации овец и коз с 1975 г. применяют
высокоиммуногенную, обладающую антигенными свойствами, сухую
живую вакцину из штамма Рев-1 бруцелл вида мелитензис. Эта вакцина
предложена в 1957 г. Эльбергом и Фонсом (США).
Вакцины используют согласно наставлениям.
1.
2.
3.
4.
5.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме № 10
Возбудители бруцеллеза (Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella
suis, Brucella ovis, Brucella neotomae, Brucella canis)
Бактериологический
метод
диагностики
(морфологические,
культуральные, биохимические, антигенные, патогенные свойства
бруцелл)
Серологический метод диагностики
Серологические реакции (РА, РСК, РДСК, КР, РБП, ИФА)
Биопрепараты
–
вакцины
(сухая
живая
вакцина
из
слабоагглютиногенного штамма Br.abortus 82, сухая живая вакцина из
штамма Brucella abortus 19, сухая живая вакцина из штамма Рев-1).
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Морфологические, культуральные, биологические свойства бруцелл.
2. Методы диагностики. Критерии дифференциальной диагностики
бруцелл
3. Значение серологического метода диагностики.
4. Вакцины, применяемые для профилактики.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1.Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.104-118.
2. Бияшев Б.К.Ветеринарная микробиология и иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
Дополнительная
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 58 из 169
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
2. Скородумов Д.И., Родионова В.Б., Т.С.Костенко. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,2008.-224 с.
3. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.180-187.
4. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.291-297.
5. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.307-311.
Лекция № 11
Энтеробактерии. Общая характеристика рода.
Эшерихии
План
1. Общая характеристика рода.
2. Escherichia coli. Характеристика возбудителя (морфологические,
тинкториальные, культуральные , биохимические, антигенные и патогенные
свойства).
3. Колибактериоз. Методы диагностики.
4. Средства специфической профилактики (биопрепараты).
1. Общая характеристика рода.
Семейство Enterobacteriaceae включает 12 родов: Escherichia, Salmonella,
Proteus, Yersinia, Shigella, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, Edwardsiella,
Erwinia, Hafnia, Serratia. В патологии домашних животных наибольшее
значение имеют роды: Escherichia, Salmonella, Proteus, Yersinia.
Бактерии этого семейства имеют следующие общие свойства: все они
грамотрицательные палочки, не образуют спор, лишены оксидазы,
восстанавливают нитраты в нитриты, ферментируют глюкозу с образованием
или без образования газа, подвижные (перитрихи) или неподвижные, хорошо
растут на обычных средах, факультативные анаэробы.
Дифференциацию энтеробактерий (кишечно-тифозно-паратифозных и
дизентерийных бактерий) производят по ряду признаков: подвижности,
ферментации углеводов, аминокислотному метаболизму, образованию индола
и сероводорода, а также по антигенным свойствам, выявляемым в
серологических реакциях с заведомо известными видоспецифическими,
группоспецифическими
и
типоспецифическими
агглютинирующими
сыворотками.
Патогенные виды и типы вызывают болезни, отличающиеся по
клиническим проявлениям (кишечные инфекции, бактериемии, пневмонии и
массовые аборты у животных, артриты, маститы и др.). Поэтому название
семейства больше соответствует месту их обитания и способам заражения.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 59 из 169
4. Escherichia coli. Характеристика возбудителя (морфологические,
тинкториальные, культуральные , биохимические и патогенные
свойства).
Микроб выделен из испражнений Т. Эшерихом в 1885 г. E.coli –
обитатель толстого кишечника человека и млекопитающих; содержаться
также в кишечнике птиц, рыб, рептилий, амфибий и насекомых. Выделяясь в
изобилии с испражнениями. Постоянно обнаруживаются и во внешней среде
(почва, вода, предметы). Патогенные серотипы вызывают колибактериоз –
весьма распространенную болезнь у новорожденных домашних животных,
иногда у птенцов и эмбрионов птиц.
В род Escherichia входят два вида - E.coli (у животных, человека, птиц) и
E.blatta (у насекомых). E.coli включает более 500 серогрупп,
дифференцирующихся по культуральным, биохимическим и антигенным
признакам.
Морфология. E.coli - полиморфные палочки. Располагаются одиночно.
Длина 1-3 мкм, ширина 0,3-0,6 мкм.. имеются подвижные и неподвижные
особи. Некоторые образуют капсулу (О8,О9,О101). Грамотрицательные. Спор
не образуют. На поверхности клеток имеются пили, на которых
адсорбируются некоторые фаги.
Устойчивость. Эшерихии устойчивы к воздействию факторов внешней
среды. В почве – до 11 месяцев, в навозе – до 11 месяцев,, в воде – до 300
дней. При 60 С – 10 мин, 100 С – моментально. Дезсредства – 2% раствор
активного хлора, 2.5% раствор формальдегида, 2%- р-р гидроокиси натрия,
3% р-р однохлористого йода.
Культивирование. Факультативный анаэроб, 30-37 С, рН7,2-7,6. К
питательным средам неприхотлива. Растет на обычных питательных средах.
На МПА развивается в виде слабовыпуклых полупрозрачных сероватых
колоний, в бульоне вызывает диффузное помутнение с образованием осадка.
Дифференциально-диагностическими средами являются среды Эндо, Левина,
Плоскирева. На дифференциальных средах в зависимости от их состава
образуют различного цвета колонии.
Ферментативные свойства. E.coli обладает высокой ферментативной
активностью, что используется в идентификации микроба. Ферментирует с
образованием кислоты и газа лактозу, глюкозу, манит; сахарозу и дульцит не
постоянно, не изменяет адонит и инозит. Образует индол, не образует
сероводород, желатин не разжижает, на среде Симонса не растет, дает
положительную реакцию с метиловым красным(ярко-розового цвета),
отрицательную реакцию Фогеса – Проскауэра (среда желтого цвета),
восстанавливает нитриты в нитраты, мочевину не расщепляет.
Антигенная структура. Эшерихии имеют О-, К-, Н-антигены.
О-антигены (соматический) термостабильный не разрушается при
темпрературе 120 С(выдерживает кипячение и автоклавирование).
К-антигены – поверхностные или капсульные, представляют собой
комплекс термолабильных (L,B) и термостабильных антигенов (А и М).
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 60 из 169
Н-антиген (жгутиковый) – термолабильный.
Эшерихии подразделяются по характеру О-антигена на 170 серогрупп,
К-антигену -100 серогрупп, Н-антигену – около 60 типов. На основании
антигенной структуры каждая серогруппа обозначается формулой с указанием
антигена и его разновидности, выражаемой арабской цифрой (Кауфман,
Книпшильд,Вэлне). Например, серогруппа О111 имеет формулу –
О111:К58:Н2.
Сочетание
различных
антигенов
определяет
специфичность
серологических типов кишечной палочки, систематика которых имеет важное
эпизоотологическое значение.
Патогенность. Патогенные свойства у эшерихий
обусловлены
следующими факторами: наличием эндотоксина, выработкой энтеротоксинов,
гемолизина, адгезией и выделением колицинов.
E.coli. некоторые штаммы вызывают тяжелое заболевание с высокой
смертностью у телят – сосунов. При парентеральном введение
энтеропатогенных культур кроликам, морским свинкам, белым мышам у них
развивается токсико-септический процесс, приводящий к гибели животных.
5. Колибактериоз. Методы диагностики.
Колибактериоз – остропротекающая инфекционная болезнь молодняка
сельскохозяйственных животных, включая пушных зверей и птиц. Болезнь
протекает
в
септической
(ее вызывают
капсульные
штаммы),
энтеротоксемической (эшерихии с адгезивными свойствами), и энтеритной
формах (эндотоксины, вызывающие диарею).
Основным методом постановки диагноза на колибактериоз является
бактериологический. Для бактериологического исследования в лабораторию
направляют труп животного или, голову, головной мозг), трубчатую кость.
Селезенку, долю печени желчным пузырем, брыжеечные лимфатические
узлы, пораженный участок тонкого кишечника.
Бактериологическое исследование.
1-й день – посевы в МПБ, на МПА, среды Эндо или Левина; микроскопия
мазков из патматериала;
2-й день – пересев колоний в МПБ и после 4ч культивирования посев на
среды Гиса и МПА для приготовления антигена и заражения белых мышей
(цыплят).
3-й день – микроскопия мазков из чистых культур, учет ферментативных
свойств. Заражение лабораторных животных. Изучение антигенных свойств в
реакции агглютинации с типоспецифическими сыворотками для определения
серогрупповой принадлежности..
4-й день. Учет биопробы и развернутой реакции агглютинации.
Определение чувствительности культур к антибактериальным препаратам.
5-й день. Результаты биопробы и чувствитльности культур к препаратам.
6-7-й день. Подведение окончательных результатов биопробы и изучения
ферментативных свойств культур. Оформление экспертизы.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 61 из 169
Если в течение 2суток после заражения белые мышки погибают
(цыплята на 4 сутки), то культура эшерихий считается патогенной.
Патогенные культуры серологической типизации не подвергают.
Бактериологический
диагноз
у
млекопитающих
считают
установленным:
1. при выделении культур эшерихий из селезенки, костного или головного
мозга без определения их патогенности и серологической
принадлежности;
2. при выделении не менее чем из двух органов животного культур
эшерихий, патогенных для белых мышей или принадлежащих к Осерогруппам, признанным патогенными для животных;
3. у птиц – при выделении патогенных для цыплят эшерихий из костного
мозга, крови или печени.
4. Средства специфической профилактики и лечения (биопрепараты).
1. Для формирования колострального иммунитета вакцинируют
стельных коров, супоросных свиноматок, суягных овец, за 1-2 месяца до
отела, опороса, окота - ГОА-формолтиомерсаловой вакиной.
2. Колипротектант ВИЭВ для телят (взвесь убитой нагреванием
культуры эшерихий одной серогруппы, отмытой от токсинов и
консервированной формалином).
3. Поливалентная вакцина против сальмонеллеза и колибактериоза
пушных зверей.
4. Инактивированная вакцина против колибактериоза птиц, применяют
за 7-10 дней до взятия от кур яиц на инкубацию. Для создания
трансовариального иммунитета.
5.Поливалентная иммунная сыворотка (и для лечения).
6. Бактериофаг против паратифа и колибактериоза с питьем.
7. Антибиотики с учетом чувствительности к ним.
Понятийный аппарат
1. Семейство Enterobacteriaceae включает 12 родов: Escherichia,
Salmonella, Proteus, Yersinia, Shigella, Klebsiella, Citrobacter,
Enterobacter, Edwardsiella, Erwinia, Hafnia, Serratia.
2. Escherichia coli – возбудитель колибактериоза (морфологические,
культуральные, биохимичесие и патогенные свойства)
3. Антигенная формула эшерихий (О-антиген, К-антигены, Н-антиген)
4. Сахаролитические свойства (среды Гисса, среды Эндо, Левина,
Плоскирева)
5. Диференциальная диагностика (от сальмонелл)
6. Серологическая идентификация патогенных эшерихий (РА с
типоспецифическими сыворотками)
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 62 из 169
7. Биопрепараты
(вакцины,
диагностические
типоспецифические
сыворотки, гипериммунные сыворотки, бактериофаги)
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Общая характеристика рода.
2. Escherichia coli. Характеристика возбудителя (морфологические,
тинкториальные, культуральные , биохимические, антигенные и патогенные
свойства).
3. Колибактериоз. Методы диагностики.
4. Когда диагноз на колибактериоз считается установленным?
4. Средства специфической профилактики (биопрепараты).
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев Б.К.Ветеринарная микробиология и иммунология.- Алматы,2007. –
417 с.
2. Ветеринарная микробиология
и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-381с.
3. Костенко Т.С., Скаршевская Е.И., Гительсон С.С. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- 272с.
Дополнительная
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
2. Скородумов Д.И., Родионова В.Б., Т.С.Костенко.Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,2008.-224 с.
3. Диагностика
инфекционных
и
протозойных
болезней
сельскохозяйственных животных (Альбом) - М.,1968. – 196с.
4. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- 304с.
5. Ассонов Н.Р. Микробиология.- М.1989.- 351с.
Лекция № 12
Возбудитель сибирской язвы
План
1. Определение болезни. Историческая справка.
2. Характеристика возбудителя (морфологические,
культуральные , биохимические и патогенные свойства).
3. Методы диагностики.
4. Средства специфической профилактики
тинкториальные,
Ключевые слова: сибирская язва, бацилла антракса (B.anthracis),
вакина из штамма 55
1. Определение болезни. Историческая справка.
Сибирская язва – это острое инфекционное заболевание животных.
Характеризуется явлениями септицемии образованием различной величины
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 63 из 169
карбункулов в области подгрудка и живота. Заболевание в настоящее время
встречается в виде спорадических случаев. Болеет человек.
Русское название болезни дал С.С.Андриевский в связи с крупной
эпидемией на Урале и в Сибири в 1789 г. В 1788 г. героическим опытом
самозаражения он доказал идентичность сибирской язвы человека и
животных и окончательно подтвердил ее нозологическую самостоятельность.
Возбудитель сибирской язвы Bacillus anthracis был неоднократно
описан разными авторами – А.Полендер (1849), К.Дален(1850), Ф.Браун
(1854). Брауэль (1857, Россия), профессор Дерптского ветеринарного училища
обнаружил в крови погибших и больных от сибирской язвы овец наличие
нитевидных, неподвижных и неветвящихся телец. Брауэль один из первых
выявил бациллы в крови человека, умершего от сибирской язвы и
экспериментально воспроизвел заболевание у животных при заражении их
кровью. Однако, этиологическая роль возбудителя была установлена Р.Кохом
(1876) и Л.Пастером в 1881. Они выделили чистые культуры и независимо
друг от друга при помощи этих культур воспроизвели заболевание у
животных.
В России первую культуру сибиреязвенного возбудителя получил
В.К.Высокович в 1882 г.
Исследованиями Р.Коха в 1876 г. было доказано, что вегетативные
клетки бациллы обладают способностью образовывать споры.
В 1888 г. Серафини обнаружил капсулу
2. Характеристика возбудителя (морфологические, тинкториальные,
культуральные , биохимические и патогенные свойства).
Семейство:
Bacillacea
Род: Bacillus
Вид: B.anthracis
B.anthracis это крупная палочка длиной 5-8 иногда 10 мкм, диаметром
1,0-1,5 мкм. Концы у живых палочек закруглены, у убитых они как бы
обрублены и слегка вогнуты. Палочки в мазках располагаются парами и очень
часто цепочками, особенно длинными на питательных средах. Напоминая
бамбуковую трость.
Сибиреязвенная палочка красится всеми анилиновыми красителями. По
методу Грама –Гр(+). Жгутиков не имеет, образует спору, капсулу. Бациллы
чрезвычайно устойчивы: в почве сохраняются десятки лет, в воде – в течение
нескольких лет,под действием прямых солнечных лучей погибают через 20 и
более суток. При кипячение разрушаются через 45-60 минут, при
автоклавировании (110 град.С) – через 5 мин, сухой жар (140 град С)
выдерживают до 3 часов. Споры долго сохраняются в шерсти и шкурах
животных, используемых для различной выделки и в засоленном мясе.
Культивирование. Аэроб или факультативный анаэроб, Т=37-38 С, рН
среды 7,2-7,6. К питательным средам не требователен, растет на обычных
средах – МПА, МПБ. На плотных средах образует характерные крупные
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 64 из 169
матовые шероховатые колонии R-формы. Структура колоний имеет сходство
с локонами или львиной гривой. Благодаря цепочечному расположению
палочек, которые образуют нити, отходящие от центра.
На агаре с пенициллином (0,05-0,5 ЕД/мл) через 3 ч роста бациллы
распадаются на отдельные шарики, располагающиеся в виде цепочки, образуя
феномен «жемчужного ожерелья».
В бульоне палочка, находящаяся в R-форме, растет на дне, образуя
осадок в виде комочка ваты, бульон при этом остается прозрачным.
B.anthracis вирулентна в R-форме, при переходе в S-форму она
утрачивает свою вирулентность. На агаре образуют круглые гладкие колонии
с ровными краями, а в бульоне равномерное помутнение. При этом палочки
утрачивают способность располагаться в мазках цепочками и приобретают
вид коккобактерий, располагающихся скоплениями.
Ферментативная активность. B.anthracis довольно активна в
биохимическом отношении. Ферментирует с образованием кислоты без газа
глюкозу, сахарозу, мальтозу, трегалозу, образует сероводород, свертывает
молоко и пептонизирует его, каталазопозитивна. Имеет нитратредуктазу.
Характерно растет в МПЖ. При посеве уколом в столбик 10-12% МПЖ
вызывает послойное разжижение его (рост в виде елочки, опрокинутой вниз
вершиной).
Антигенное строение. Возбудитель сибирской язвы имеет
соматические антигены и капсульный антиген белковой
природы.
Соматический антиген полисахаридной природы, термостабилен, длительно
сохраняется во внешней среде и в трупах погибших животных. На его
обнаружении основана диагностическая реакция кольцепреципитации Асколи
(можно использовать загнивший материал). Сибиреязвенные палочки имеют
антигены общие для рода Bacillus.
Факторами патогенности являются капсула и экзотоксин (фактор
отечности, протективный антиген, летальный антиген).
Патогенность. Болеют травоядные животные. Они заражаются
алиментарно, через корм, питьевую воду, зараженную спорами. Почвенная
инфекция. Реже трансмиссивно – через укусы мух, клещей, слепней. При
контакте больного со здоровым животным возбудитель не передается.
Человек заражается при контакте с сибиреязвенными трупами, при
разделке туш вынужденно убитых животных, при уходе за больными
животными, при контакте с шерстью, кожей, щетиной, зараженными
возбудителями или его спорами. Заражение здорового человека от больного
происходит крайне редко.
Из лабораторных животных наиболее восприимчивы белые мыши,
кролики и морские свинки. Павших животных вскрывают, производят посевы
на обычные питательные среды из всех паренхиматозных органов, крови
сердца и с места введения исследуемого материала. Готовят мазки-отпечатки,
окрашивают по Грамму, на капсулу.
3.Методы диагностики
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 65 из 169
Диагноз на сибирскую язву ставят бактериологическим методом с учетом
клинической картины и патологоанатомических изменений (если вдруг
вскрыли труп).
Трупы при сибирской язве вскрывать нельзя! Так как при контакте с
воздухом моментально образуются споры. Патологическим материалом
является ухо (кровь из надреза уха). Если материал загнивший, то берут
кусочки кожи. При вскрытии можно брать кусочки печени, измененные
лимфоузлы. От трупов свиней берут кусочки воспаленных тканей в области
глотки и заглоточных л/узлов. Материал д.б. свежим или консервированным в
30% растворе глицерина
Методы диагностики:
1. Микроскопическое исследование исходного материала –мазок
отпечаток.
2. Посев на питательные среды
3. Идентификация по культурально-биохимическим свойствам.
4. Заражение лабораторных животных.
5. РП по Асколи. При наличии несвежего материала решающе значение
остается за реакцией преципитации. Эту реакцию широко применяют для
исследования на сибирскую язву кожевенного, овчинно-шубного и
мехового сырья.
Дифференциальная диагностика. Возбудителя сибирской язвы
необходимо отличать от так называемых антракоидов.
Некоторые представители семейства Bacillacea имеют сходсто с
сибиреязвенными бациллами как по морфологическим, так и по
культурально-биологическоим свойствам. Поэтому в целях дифференциации
обращают
внимание
на
ряд
второстепенных
признаков:
сибиреязвеподорбные микробы в отличие от возбудителя сибирской язвы
обладают подвижностью (до начала спорообразования), не образую капсул,
на кровяных средах вызывают гемолиз, на МПБ зачастую дают равномерное
помутнение, а привитые лабораторные животные не погибают.
Сенная бацилла (B.subtilis), палочки грубые, с закругленными
концами. Споры располагаются центрально, диаметр их шире поперечника
палочек.
Картофельная бацилла (B.mesentericus) –палочки толсиые с
закругленными концами. Споры располагаются централь. Диаметр спор не
превышает поперечника палочек.
Капустная бацилла (B.megatherium) крупные, грубые. Размером
9х2,5 мкм. Споры центральные. Диаметр спор не превышает поперечника
палочек.
Корневидная палочка (B.mycoides) 2,5х0,8 мкм. Споры центральные,
диаметр их больше поперечника палочек.
Заключение. Предварительное положительное заключение дается в
тот же день при наличии в мазках из исходного материала типичных для
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 66 из 169
сибирской язвы капсульных бацилл. Окончательное заключение дается в
течение трех суток по получении сибиреязвенной культуры на питательных
средах, гибели зараженных подопытных животных и при наличии
положительного результата по реакции преципитации. При задержке гибели
зараженных животных или их выживании ответ о результатах исследования
дается в течение семи дней с момента поступления патматериала в
лабораторию.
4.Средства специфической профилактики. В настоящее время для
профилактики сибирской язвы у животных применяется вакцина из штамма
55.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме № 12
1. Возбудитель сибирской язвы – Bacillus anthracis
2. Морфологические особенности
- спора – высокая устойчивость
- капсула – защита от фагоцитов
3. Феномен «Жемчужное ожерелье»
4. R-форма колонии
5. Антракоиды (Bacillus mesenthericus, Bacillus subtilis, Bacillus megaterium,
Bacillus mycoides)
6. РП по Асколи
7. Биопрепараты – вакцина из штамма 55, сибиреязвенная диагностическая
сыворотка, сибиреязвенный антиген, гипериммунная сибиреязвенная
сыворотка
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Какие непостоянные элементы имеет возбудитель сибирской язвы?
2. Характер роста возбудителя сибирской язвы на МПА.
3. Устойчивость возбудителя во внешней среде.
4. Значение РП в диагностике сибирской язвы.
5. В чем сущность феномена «жемчужное ожерелье»?
6. Как поступают с трупами павших от сибирской язвы животными?
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев Б.К.Ветеринарная микробиология и иммунология.- Алматы,2007. –
417 с.
2. Ветеринарная микробиология
и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-381с.
3. Костенко Т.С., Скаршевская Е.И., Гительсон С.С. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- 272с.
Дополнительная
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 67 из 169
1. Скородумов Д.И., Родионова В.Б., Т.С.Костенко. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,2008.-224 с.
2. Диагностика
инфекционных
и
протозойных
болезней
сельскохозяйственных животных (Альбом) - М.,1968. – 196с.
3. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- 304с.
4. Ассонов Н.Р. Микробиология.- М.1989.- 351с.
Лекция №13
Патогенные анаэробы
План:
1. Общая характеристика рода клостридий.
2. Характеристика возбудителя эмфизематозного карбункула.
3. Характеристика возбудителей злокачественного отека.
4. Методы диагностики.
5. Средства специфической профилактики.
Ключевые слова: клостридии, анаэробы, эмкар, злокачественный отек
1. Общая характеристика рода клостридий.
Патогенные анаэробы принадлежат к семейству Bacillaceae роду
Clostridium. В эту группу входят возбудители эмкара, ботулизма, столбняка и
злокачественного отека. Они характеризуются рядом общих признаков. Кроме
клостридий к патогенным анаэробам относят и неспоровые фузобактерии
(возбудитель некробактериоза).
Клостридии – большая группа почвенных анаэробных бактерий,
включающая (93 вида), 61 вид ( по Радчуку). Однако, только 12 видов
являются патогенными микробами.
Общие признаки патогенных клостридий:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Сапрофитный
образ жизни
Крупные
полиморфные палочки
Редакция .№1
Перитрихи
стр. 68 из 169
Образуют
споры
Хемоорганотрофы
Патогенные
анаэробы
Продуцируют
экзотоксины
Места обитания:
почва, желудочнокишечный тракт
Высокая
устойчивость
Анаэробы
Имеют общие
антигены
Широкая
распространенность
Патогенные анаэробы. Семейство: Bacillacea, Род: Clostridium.
Семейство: Bacteroidace, Род: Fusobacterium
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 69 из 169
Cl.chauv
oei
F.necro
phorum
Cl.tetani
Cl.septic
um
Cl.botulin
us
Патоге
нные
анаэроб
ы
Cl.hystol
iticum
Cl.novy
i
Cl.perfri
ngens
Cl.sordel
lii
Схема диагностики клостридиозов единая.
2. Характеристика возбудителя эмфизематозного карбункула.
Эмкар – острая неконтагиозная болезнь, характеризующаяся
развитием крепитирующих отеков в массивных группах мышц богатых
гликогеном, хромотой и быстрой гибелью животных.
Болеют чаще упитанные животные, мышцы которых богаты гликогеном,
благоприятствующих развитию возбудителя. Встречается в виде
спорадических случаев.
Инкубационный период 1-2 дня, до 5 дней. Различают острое течение,
типичное проявление, карбункулезную форму. Температура 41-42 С. В местах
с развитыми мышцами (бедро, круп, шея, грудь, подчелюстная область)
появляется быстро увеличивающаяся (8-10 раз) отечная припухлость
(карбункул), плотная, горячая, болезненная, при пальпации слышна
крепитация (треск), а при перкуссии слышен ясный тимпанический звук.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 70 из 169
Заражение животных происходит с кормом, питьевой водой.
Проникновению возбудителя способствуют травмы слизистой оболочки.
Животные погибают через 24-36 часов после появления первых
признаков заболевания.
Патологоанатомические изменения. Мускулатура и подкожная клетчатка
геморагично инфильтрированы, темно-красного цвета, сухие, губчатые,
спузырьками газа.
Клостридии эмкара – палочки с закругленными концами 0,6-1,0 х 2-8
мкм. Располагаются одиночно, парами, полиморфны, могут иметь форму
веретена, лимона, груши, шара и т.д. Безкапсульные, подвижные. Имеют 6-8
боковых жгутиков. Спору образуют в организме и во внешней среде, с
центральным
или
субтерминальным
расположением.
Интенсивнее
окрашиваются по полюсам, в цитоплазме обнаруживается зернистость.
Грамположительные, в старых культурах грамотрицательные.
Патогенность. В естественных условиях болеют КРС и овцы. Редко –
козы, буйволы, олени и лоси. Болеют от 3 мес. До 4 лет. Животные старше 4
лет резистентны за счет иммунизирующей субинфекции, телята до 3 мес.
Возраста – благодаря колостральному иммунитету. Повышенной
чувствительностью обладают упитанные животные. Их мышечная ткань
содержит больше гликогена, необходимого для развития микроба.
Культурально-биохимические свойства. Растет хорошо на средах типа
Китта-Тароцци с добавлением печеночного экстракта и кусочков печени.
Через 16-24 ч вызывает слабое помутнение среды и газообразование. На
желатине и сахарном агаре в глубоком слое растет мелкими колониями в виде
булавочной головки или чечевицеобразной формы с нежными отростками.
Желатину разжижает медленно; ферментирует сахарозу, не ферментирует
салицин (отношение разных штаммов к сахарам не постоянно, однако реакции
на сахарозу и салицин являются индикаторными); молоко свертывает
медленно – на 5-6 день; мозговую среду не изменяет.
На кровяном агаре с глюкозой в чашках Петри растет в виде круглых
плоских приподнятых колоний с ровными краями, напоминающих
перламутровые пуговицы или виноградный лист. Колонии окружены узкой
зоной прозрачного гемолиза.
Токсинообразование. Образуют экзотоксин, как в организме, так и при
выращивании микроба в жидких питательных средах. В составе токсина
обнаружены гемотоксический и некротизирующий компоненты. Возбудитель
эмкара обладает ферментами патогенности – дезоксирибонуклеаза,
гиалуронидаза, кислородолабильный гемолизин.
Антигенная структура. Различают термостабильный О-антиген и
термолабильный Н-антиген Они обладают видовой специфичностью и
являются общими у всех штаммов
Биологические свойства. Из лабораторных животных наиболее
чувствительны морские свинки и хомяки.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 71 из 169
При подкожном и внутримышечном введении морским свинкам суточной
культуры в дозе 0,3-1,0 мл они погибают через 16-48 часов с характерной
патологоанатомической картиной. (серозно-геморагический отек подкожной
клетчатки, мышцы темно-красные). В мазках с перитонеальной поверхности
печени наблюдают палочки микроба, расположенные по одной-две.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются
кусочки пораженных мышц (отечный экссудат, кровь, кусочки
паренхиматозных органов).
Следует помнить, что вскрытие трупов животных, погибших от эмкара,
недопустимо (почвенная инфекция).
Схема исследования: микроскопия мазков, посевы на питательные
среды в анаэробных и аэробных условиях и заражение лабораторных
животных.
Для подавления сопутствующей микрофлоры материал можно
высушивать в термостате, сеять на жидкую элективную среду с добавлением
фенола, кристалвиолета или азида натрия, прогревать при температуре 80 С в
течение 15-20 мин., при этом вегетативные клетки погибают, а споры
сохраняются. Выделяют чистую культуру. Наличие характерных колоний на
агаре и типичных по морфологии палочек дает основание для постановки
предварительного
диагноза.
В
необходимых
случаях
изучают
сахаролитические
и
протеолитические
свойства
культуры.
Для
окончательного диагноза ставят биопробу.
Вирулентностью обладают только свежевыделенные культуры.
Иммунитет и средства специфической профилактики.
Иммунитет
при эмкаре
антитоксический и антимикробный.
Естественного иммунитета у КРС и овец нет, но с возрастом восприимчивость
к данному заболеванию снижается (иммунизирующая субинфекция). После
переболевания животные приобретают длительный активный иммунитет.
Для специфической профилактики используют концентрированную
гидроокисьалюминиевую формолвакцину против эмкара КРС и овец.
Иммунитет проявляется на 14 день и продолжается 6 мес.
3. Характеристика возбудителей злокачественного отека.
Злокачественный отек (газовая инфекция, раневой газовый отек,
газовая гангрена) – острая неконтагиозная раневая инфекция,
вызываемая группой патогенных клостридий.
Клинические признаки: болезненный отек мягких тканей, их разрушение,
образование в пораженных тканях газа, интоксикация организма. Встречается
повсеместно в виде спорадических случаев. Чаще болезнь развивается после
обширных и глубоко проникающих ранений. Болеют животные и человек. У
КРС злокачественный отек наблюдается после тяжелых отелов,
сопровождающихся повреждениями и ранениями родовых путей, после
аборта.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 72 из 169
Злокачественный отек – заболевание полимикробной этиологии. В
развитии инфекционного процесса основную роль играют следующие виды
клостридий:
Лабораторная диагностика. Патматериалом является тканевой
экссудат, кусочки пораженных мышц, паренхиматозные органы, а от трупов
овец. Также часть сычуга и тонкого кишечника с содержимым (для
одновременного исследования на брадзот и энтеротоксемию).
Схема исследования. Микроскопия мазков из патматериала, посевы на
питательные среды, заражение лабораторных животных.
Мазки окрашивают по Граму и Муровцеву. Наличие в препаратах
большого
количества
палочек
ориентирует
на
подозрение
на
клостридиальную инфекцию.
Посевы из свежего материала проводят на среду Китта-Тароццы, а
также в МПБ и на МПА.
Если материал несвежий, то суспензию из патматериала прогревают 1520 мин при температуре 80 С для разрушения вегетативных форм
сопутствующей микрофлоры и затем высевают материал. Одновременно
материал засевают на глюкозно-кровяной агар в чашках. Посевы инкубируют
в анаэробных условиях 24-48 ч, после чего изучают рост на среде КиттаТароццы и глюкозно-кровяном агаре. Определяют морфологию и
подвижность бактерий из культур на среде Китта-Тароцци.
С жидкой среды выделяют чистую культуру посевом на чашки с
глюкозно-кровяным агаром. Наличие характерных колоний и крупных
грамположительных палочек в мазках дает основание для постановки
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 73 из 169
предварительного микробиологического диагноза. Иногда изучают
биохимические показатели выделенной культуры.
Для подтверждения диагноза ставят биопробу. М.свинок заражают
подкожно или внутримышечно взвесью из патматериала в дозе 1 мл и
наюлюдают за ними 7-8 дней. Гибель наступает через 16-48 ч при наличии
возбудителя с характерными патологоанатомическими изменениями.
Для определения вида и серовара возбудителя применяют реакцию
нейтрализации с гомологичными антитоксическими сыворотками.
4. Иммунитет и средства специфической профилактики.
Иммунитет
антитоксический.
Из-за
спородичности
и
полиэтиологичности болезни активная иммунизация не нашла практического
применения. Пассивная иммунопрофилактика рекомендуется – поливалентная
антитоксическая
сыворотка.
Антибиотики
широкого
спектра
и
пролонгированного действия.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №13
1.Патогенные клостридии (Clostridium schauvoe, Cl. perfringens, Cl.
septicum, Cl. hystoliticum, Cl. oedematins, Cl. botulinum, Cl. tetani)
2. Анаэробы
3.Токсинообразование
4. Реакция нейтрализации
5. Иммунитет антитоксический и антимикробный
6. Среда Китта-Тароцци
7. Кровяной агар, гемолиз
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Возбудители эмкара и злокачественного отека, их отличительные
особенности.
2. Питательные среды и условия культивирования анаэробов.
3. Патматериал,
направляемый
для
бактериологического
исследования на злокачественный отек и эмкар.
4. Схема бактериологического исследования при злокачественном
отеке и эмкаре.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев
Б.К.Ветеринарная
микробиология
и
иммунология.Алматы,2007. – 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С.251-284.
Дополнительная
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 74 из 169
2. Скородумов Д.И., Родионова В.Б., Т.С.Костенко. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,2008.-224 с.
3. Диагностика
инфекционных
и
протозойных
болезней
сельскохозяйственных животных (Альбом) - М.,1968. – 196с
4. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.210-244.
Лекция №14
Микобактерии. Общая характеристика рода.
Возбудитель туберкулеза
План:
1. История открытия возбудителя туберкулеза
2. Классификация микобактерий. Характеристика микобактерий
3. Методы диагностики туберкулеза животных и меры специфической
профилактики
Ключевые слова: микобактерии, туберкулез, туберкул
1. История открытия возбудителя туберкулеза.
Туберкулез – это хроническое инфекционное заболевания
млекопитающих животных, птиц и человека, которое характеризуется
образованием в пораженных органах и тканях характерных узелков
туберкулов.
Поражаются следующие органы:
1.Лимфатические узлы
2. Легкие, печень, селезенка
3. Костная ткань, органы мочеполовой системы, кожа
Туберкулез известен с древнейших времен. Еще Гиппократ (4 в. До
н.э.) описал клинические признаки болезни у человека и рекомендовал
способы лечения. Возбудителей туберкулеза человека и крупного рогатого
скота открыл Роберт Кох.
2.Классификация. Характеристика микобактерий
Классификация
Семейство: Mycobacteriaceae
Род: Mycobacterium (mycos – гриб, bacterium – палочка), включает 49 видов,
как патогенных, так и непатогенных.
Виды: Myc.tuberculosis – у людей
Myc. bovis – животных (КРС, лошади, козы и овцы, свиньи, пушные
звери, редко – человек иптица)
Myc. avium – птица, остальные редко
Myc. murium - мыши
Myc.poikilotermum- микобактерии туберкулеза холоднокровных –
рыб, змей, лягушек, черепах
Myc. leprae – возбудитель проказы (хроническое заболевание, при
котором поражаются различные органы и ткани, преимущественно
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 75 из 169
слизистые оболочки, кожа, периферическая нервная система – был
обнаружен новежским врачом Гансеном в 1871 г. в тканях больных людей)
Myc. paratuberculosis – возбудитель паратуберкулеза КРС
В природе наряду с истинными возбудителями существуют так
называемые атипичные микобактерии, которые отличаются по своим
свойствам от туберкулезных и друг от друга. Интерес к атипичным
микобактериям вызван тем, что они встречаются не только в больном
организме, но и в здоровом вызывая сенсибилизацию (повышенную
чувствительность) к туберкулинам. Сенсибилизация к туберкулинам мешает
в диагностике туберкулеза аллергическим методом. Кроме того, атипичные
микробактерии
могут
вызывать
ряд
хронических
заболеваний
(микобактериозы). В настоящее время существует классификация
атипичных микобактерий Раньона (1959), которая основана на двух
признаках – образование пигмента и скорость роста.
Характеристика микобактерий.
Микобактерии
палочковидные,
с
закругленными
концами
полиморфные бактерии, спор, капсул, жгутиков не имеют. Величина – длина
от 1,5 до 4 мкм, ширина от 0,2 до 0,5 мкм. Установлена филогенетическая
близость
туберкулезных
микобактерий
с
лучистыми
грибамиактиномицетами. Это сходство проявляется в медленном развитии
микобактерий на элективных питательных средах, в способе размножения,
полиморфности и способности при определенных условиях иногда
образовывать нитевидные ветвистые формы с колбовидными вздутиями на
концах, что напоминает актиномицеты. Это и явилось причиной замены
названия бациллы Коха на микобактерии туберкулеза.
Грамположительные, но с трудом окрашиваются.
Для быстрого обнаружения используют люминесцентный метод.
В цитоплазме патогенных микобактерий можно обнаружить зерна
Муха, что является дифференцирующим признаком.
В 1910 г. Фонтес обнаружил фильтрующие формы бактерий.
Фильтратом заражал лабораторных животных. В 1945 г. Джексон установил
способность микобактерий переходить в L-формы. Они установлены у всех
видов бактерий.
L-формы – варианты микобактерий, частично или полностью
утратившие клеточную стенку. Причиной утраты клеточной стенки могут
быть биологические факторы- антибиотики, лизоцим. Химические факторы.
Особенностью L-форм является реверсия . т.е. превращение в типичные
микобактерии. Это происходит при благоприятных факторах (стрессы), что
ведет к рецидиву болезни в оздоравливаемых стадах. (В.С.Федосеев,
А.Н.Байгазанов, 1987).
Микобактерии на поверхности имеют муриновый слой из
жировосковых веществ. Высокое содержание липидов обуславливает ряд
свойств.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 76 из 169
Возбудители туберкулеза высоко устойчивы во внешней среде. Птичий
вид сохраняется в почве 17-18 мес., бычий вид в почве – 4 мес., в мокроте 5-6
мес. В культурах погибает через 8-10 мес. В молоке, сырах, масле длительное
время. При температуре 100 град погибает моментально.
Культуральные свойства. Аэроб строгий. Для культивирования
используют специальные среды. Для первичного выделения используют
плотные яичные среды (Петраньяни, Гельберга). Для выделения чистой
культуры используют среду Левенштейна - Йенсена. Микобактерии хорошо
растут на средах с добавлением глицерина. Глицеринофильность впервые
обнаружил в 1887 г. Нокар и Ру. Глицерин оказался лучшим источником
углерода. Добавление его к мясному бульону и агару дает обильный рост
культур. Для культивирования L-форм используют полужидкую среду
Школьниковой в модификации Дорожковой.
На жидких средах микобактерии могут образовывать поверхностный и
донный рост, и характеризуется наличием пленки, рыхлой, матовой,
крошкоподобной
или
сплошной,
морщинистой,
блестящей
и
соответствующего цвета.
На плотных средах микобактерии растут в виде колоний R- и S-форм. Rформы колоний характерны для патогенных видов микобактерий. Колонии
могут быть крошкоподобными мелкими либо крупными, блестящими или
матовыми, в виде единичных обособленных или сплошных скоплений, в виде
морщинистого налета белого или белого с желтоватым оттенком, или же
другого цвета.
Патогенность. Микобактерии бычьего вида патогенны для многих
животных. Из лабораторных животных наиболее чувствительны кролики и м.
свинки, у которых развивается генерализованный туберкулез.
Птичий вид микобактерий вызывает туберкулез у кур, индеек, цесарок,
фазанов, уток. В естественных условиях птичьими микобактериями
заражаются домашние животные (лошади, свиньи, козы, овцы, иногда КРС,
может и человек). Из лабораторных животных генерализованным
туберкулезом болеют кролики септическая форма. М.свинки менее
чувствительны.
3.Методы диагностики туберкулеза животных и меры
специфической профилактики
Основным прижизненным методом диагностики туберкулеза
является аллергический. Для аллергической диагностики предложены
туберкулины – альт-туберкулин, сухой очищенный ППД-туберкулин для
млекопитающих (протеин-пуривиед дериват), ППД-туберкулин для птиц.
Туберкулины представляют собой фильтраты бульонных культур
туберкулезных бактерий бычьего вида или птичьего вида.
Вторым методом диагностики является бактериологический.
Патологическим материалом для прижизненного исследования является
трахеальная слизь, мокрота, молоко, реже кал, сперма и др. От павших или
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 77 из 169
вынужденно убитых животных берут лимфатические узлы, кусочки
пораженных органов – легкие, плевра, кишечник, гной. Можно
консервировать 30% раствором глицерина.
Дифференциацию
микобактерий
проводят
на
основании
микроскопического
метода,
культурального,
биохимического,
серологического, аллергического, биологического и др.
Серологическая диагностика на практике не применяется. Это связано
с общностью антигенных свойств микобактерий.
Иммунитет при туберкулезе клеточный, нестерильный. Вакцину
против туберкулеза предложили в 1924 г. Кальмет и Герен, французские
ученые. В ветеринарной практике вакцину БЦЖ не применяют.
Схема исследования патологического материала на туберкулез
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №14
1. Патогенные микобактерии (Myc.tuberculosis, Myc. вovis, Myc. аvium)
2. Атипичные микобактерии
3. Аллергены - ППД туберкулины
4. Аллергическая диагностика
5. Туберкулы
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 78 из 169
6. Специальные
питательные
среды
(Левенштейна-Йенсена,
Петраньяни, Гельберга, полужидкую среду Школьниковой в
модификации Дорожковой)
7. БЦЖ – вакцина при туберкулезе
ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Классификация микобактерий.
2. L-формы микобактерий.
3. Какие свойства обуславливает жировосковой слой на поверхности
микобактерий?
4. Основной прижизненный метод диагностики туберкулеза.
5. Питательные среды для культивирования микобактерий.
6. Какой формы колонии образуют патогенные микобактерии?
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Основная
1. Бияшев Б.К.Ветеринарная микробиология и иммунология.- Алматы,2007.
– 417 с.
2. Ветеринарная микробиология и иммунология /Под ред.проф.
Н.А.Радчука.-М.,1991.-С. 243-251.
Дополнительная
1. Блейм Т.Н.Сборник тестов по микробиологии. Семей,2005.-112с.
2. Скородумов Д.И., Родионова В.Б., Т.С.Костенко. Практикум по
ветеринарной микробиологии и иммунологии. – М.,2008.-224 с.
3. Диагностика
инфекционных
и
протозойных
болезней
сельскохозяйственных животных (Альбом) - М.,1968. – 196с.
4. Емельяненко П.А. Ветеринарная микробиология. – М.,1982.- С.245-253.
5. Пяткин К.Д.. Кривошеин Ю.С. Микробиология.- М.,1980.-С.343-352.
6. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. М.,1983. –С.348-353.
Лекция № 15 (Обзорная)
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №1
1. Аттенуация
2. Вакцина
3. Вирусология
4. Микробиология
5. Направления микробиологии (общая микробиология, ветеринарная
микробиология, медицинская микробиология, сельскохозяйственная
микробиология, промышленная микробиологи, пищевая микробиология)
6. Патогенные микроорганизмы
7. Предмет микробиологии (бактерии, плесневые грибы, дрожжи,
актиномицеты, риккетсии, микоплазмы)
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 79 из 169
8. Сапрофиты
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №2
1. Адгезия
2. Вид, культура чистая, культура смешанная, клон, штамм
3. Систематика
(таксономия):
классификация
микроорганизмов
(грациликуты, фирмикуты, тенерикуты, мендосикуты); номенклатура,
идентификация
4. Постоянные
элементы
бактерий
(клеточную
стенку,
цитоплазматическую мембрану,
цитоплазму, нуклеоид (ядерное
вещество), рибосомы, мезосомы). (Грамположительные бактерии.
Грамотрицательные бактерии)
5. Непостоянные элементы бактерий (капсула, эндоспора и жгутики)
6. Формы микроорганизмов (кокки, бактерии, извитые)
Понятийный аппарат к лекциям 3-4 (Тезаурус)
1.Типы питания микроорганизмов (аутотрофные микроорганизмы,
гетеротрофные
микроорганизмы,
метанотрофы,
паратрофы,
прототрофы, ауксотрофы, органотрофы, литотрофы, фотолитотрофы,
фотоорганотрофные микроорганизмы, хемолитотрофные микроорганизмы,
хемоорганотрофные микроорганизмы)
2. Типы дыхания микроорганизмов (облигатные (строгие, абсолютные)
аэробы, микроаэрофилы, факультативные анаэробы, облигатные (строгие,
абсолютные) анаэробы)
3. Пермеазы
4. Экзоферменты
5. Эндоферменты
6. Классификация ферментов (оксидоредуктазы, трансферазы, гидролазы,
лиазы, изомеразы, лигазы)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №5
Геном
Плазмида
Фенотипическая изменчивость (адаптация, модификация)
Генотипическая изменчивость (мутации, рекомбинации)
Мутации
(спонтанные,
индуцированные,
прямые,
обратные
(реверсионные), генные (точечные), хромосомные (мутации-абберации),
плазмидные, диссоциация)
Пассаж
Рекомбинативная
изменчивость
(трансформация,
трансдукция,
конъюгация)
Генетическая инженерия
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №6
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 80 из 169
1. Типы
биотических
взаимоотношений
между
микрои
макроорганизмами (мутуализм, комменсализм, паразитизм)
2. Инфекция
(инфекционная
болезнь,
микробоносительство,
иммунизирующая субинфекция)
3. Инфекционный процесс
4. Патогенность
5. Вирулентность
6. Факторы вирулентности (инвазивные- капсула, ферменты, жгутики и
токсигенные - токсины)
7. Классификация инфекций
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №7
1. Иммунитет
2. Виды иммунитета:
- активный и пассивный;
-врожденный и приобретенный;
- гуморальный и клеточный;
- естественный и искусственный;
- местный;
- стерильный и нестерильный
3. Неспецифические факторы защиты (кожа, слизистые оболочки,
лимфатические узлы, фагоцитоз, нормальные антитела, лизоцим,
секреторный иммуноглобулин А, пропердин, лизины, лактоферрин,
комплемент, интерферон.)
4. Специфические факторы защиты (антитела и антигенреактивные Тлимфоциты)
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №8
1. Антигены (полноценные антигены, гаптены)
2. Антитела, иммуноглобулины (агглютинины, преципитины, гемолизины,
опсонины, бактериолизины, антитоксины, комплементсвязывающие антитела)
3. Активный центр
4. Валентность
5. Антигенная детерминанта
6. Аффинитет
7. Авидность
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №9
1.Патогенные стафилококки (Staphylococcus aureus, Staphylococcus
epidermidis – морфологические, культуральные, биохимические, патогенные
свойства)
2. Сапрофитные стафилококки (Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus
albus, Staphylococcus citreus, Staphylococcus roseus)
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 81 из 169
3. Патогенные стрептококки (Streptococcus egui, Streptococcus agalactiae ,
Streptococcus pneumonia, Streptococcus pyogenes - морфологические,
культуральные, биохимические, патогенные свойства)
4. Сапрофитные стрептококки (Streptococcus lactis, Streptococcus cremoris,
Streptococcus diacetilactis)
5. Бактериологическая диагностика (микроскопия, выделение чистой
культуры, биопроба)
6. Серологическая диагностика
7. Аллергическая диагностика
1.
2.
3.
4.
5.
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме № 10
Возбудители бруцеллеза (Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella
suis, Brucella ovis, Brucella neotomae, Brucella canis)
Бактериологический
метод
диагностики
(морфологические,
культуральные, биохимические, антигенные, патогенные свойства
бруцелл)
Серологический метод диагностики
Серологические реакции (РА, РСК, РДСК, КР, РБП, ИФА)
Биопрепараты
–
вакцины
(сухая
живая
вакцина
из
слабоагглютиногенного штамма Br.abortus 82, сухая живая вакцина из
штамма Brucella abortus 19, сухая живая вакцина из штамма Рев-1).
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме № 12
1. Возбудитель сибирской язвы – Bacillus anthracis
2. Морфологические особенности
- спора – высокая устойчивость
- капсула – защита от фагоцитов
3. Феномен «Жемчужное ожерелье»
4. R-форма колонии
5. Антракоиды (Bacillus mesenthericus, Bacillus subtilis, Bacillus megaterium,
Bacillus mycoides)
6. РП по Асколи
7. Биопрепараты – вакцина из штамма 55, сибиреязвенная диагностическая
сыворотка, сибиреязвенный антиген, гипериммунная сибиреязвенная
сыворотка
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №13
1.Патогенные клостридии (Clostridium schauvoe, Cl. perfringens, Cl.
septicum, Cl. hystoliticum, Cl. oedematins, Cl. botulinum, Cl. tetani)
2. Анаэробы
3.Токсинообразование
4. Реакция нейтрализации
5. Иммунитет антитоксический и антимикробный
6. Среда Китта-Тароцци
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 82 из 169
7. Кровяной агар, гемолиз
Понятийный аппарат (тезаурус) к теме №14
1. Патогенные микобактерии (Myc.tuberculosis, Myc. вovis, Myc. аvium)
2. Атипичные микобактерии
3. Аллергены - ППД туберкулины
4. Аллергическая диагностика
5. Туберкулы
6.
Специальные
питательные
среды
(Левенштейна-Йенсена,
Петраньяни, Гельберга, полужидкую среду Школьниковой в
модификации Дорожковой)
7. БЦЖ – вакцина при туберкулезе
3. ЛАБОРАТОРНЫЕ ЗАНЯТИЯ
ТЕМА №1: Микробиологическая лаборатория, ее задачи. Устройство
микроскопа. Иммерсионная система. Морфология бактерий.
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента; окрашенные
препараты различных форм бактерий; иммерсионное масло.
Учебные пособия:
Таблицы: ход лучей в микроскопе; основные формы бактерий;
непостоянные элементы микробной клетки.
Учебники:
Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.5-21.
Целевая установка: ознакомить студентов с морфологией бактерий
Основные вопросы:
1. Строение бактериальной клетки
2. Формы микроорганизмов
3. Ход лучей в иммерсионной системе
4. Строение микроскопа
5. Правила работы в микробиологической лаборатории
Краткое содержание занятия: знакомство со студентами группы,
закрепление рабочих мест, назначение дежурного студента. Знакомство с
правилами работы в бактериологической лаборатории. Знакомство с учебнометодическим комплексом дисциплины «Микробиология и вирусология».
Продемонстрировать основные части микроскопа. По плакату разобрать ход
лучей в иммерсионной и сухой системах микроскопа. Демонстрация работы с
иммерсионной системой микроскопа. Знакомство с морфологией бактерий.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 83 из 169
После демонстрации преподавателя, дежурный студент раздает
каждому студенту по одному готовому (окрашенному) бактериальному
препарату. На бактериальный препарат нанести иммерсионное масло . Затем
на препарат навести иммерсионный объектив (с черной полосой, увеличение
90) микроскопа, поворачивая револьвер до щелчка, и погрузить его в
иммерсионное масло с помощью макрометрического винта. Винт можно
поднимать или опускать до появления изображения, не выходя из
иммерсионного масла. Увиденную форму бактерий зарисовать в рабочей
тетради и обозначить русским и латинским названием.
Используя плакат «Основные формы бактерий» зарисовать в тетради
основные формы бактерий с обозначением названий на русском и латинском
языках.
ТЕМА №2:
Краски и красящие растворы. Техника приготовления
бактерийных препаратов. Простой способ окрашивания.
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента;
иммерсионное масло, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки,
спички, фильтровальная бумага, карандаши по стеклу, краски в растворах,
пробирки с культурой на МПА, сенным настоем и капустным (огуречным)
рассолом. Демонстрация: краски сухие, реактивы для химической фиксации,
фиксажница с водой.
Учебные пособия:
Таблицы: основные формы бактерий; анатомия микробной клетки.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.21-28.
Целевая установка: ознакомиться с красками и методами приготовления их
растворов. Научиться готовить и окрашивать бактериальные препараты
простым методом. Убедиться в вездесущности микроорганизмов.
Основные вопросы:
1. Строение бактериальной клетки
2. Формы микроорганизмов
3. Краски, применяемые для окраски бактерий. Техника приготовления.
4. Техника приготовления мазка из культуры выращенной на плотной
питательной среде.
5. Сущность простого метода окрашивания бактериальных препаратов.
По 3,4,5 вопросам составить конспекты.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Беседа о вездесущности
микроорганизмов. Ознакомление с техникой приготовления бактерийных
препаратов, методами их фиксации и окраски. Демонстрация техники
приготовления препаратов, фиксации химическим и физическим способами,
техники окраски простым способом. Демонстрация сопровождается беседой
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 84 из 169
о цели и методах фиксации, о принципах приготовления красящих растворов,
цели простого метода окраска. Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Приготовить насыщенный спиртовый раствор фуксина. Для этого
краску залить 96% раствором спирта в соотношении 1:10. Для насыщения
спиртовый раствор поместить в термостат и выдержать до полного
растворения. Затем из насыщенного раствора приготовить карболовый
фуксин (Циля). Взять 10 мл насыщенного спиртового раствора основного
фуксина и 100 мл 5% водного раствора фенола. Второй раствор при
постоянном взбалтывании постепенно прилить к первому (а не наоборот).
Готовый раствор профильтровать через бумажный фильтр в бутыль из
темного стекла. Краску использовать для окрашивания бактериальных
препаратов, приготовленных самостоятельно.
После демонстрации техники приготовления и окраски бактериального
препарата каждый студент получает культуру, выращенную на плотной
питательной среде (МПА), из которой готовит бактериальный препарат,
сушит его, фиксирует над пламенем горелки и окрашивает одним из
красителей. Приготовленные препараты микроскопировать. Определить
морфологию бактерий и зарисовать в рабочую тетрадь и обозначить форму.
В тетрадь записать схему: мазок – сушка – фиксация – окраска.
ТЕМА №3:
Сложные методы окраски. Сущность окраски по методу Грама и ЦиляНильсена
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента;
иммерсионное масло, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки,
спички, фильтровальная бумага, карандаши по стеклу, пробирки со смесью
(смыв) культур кишечной палочки и стафилококка, стерильные тампоны
(спички) для приготовления мазков из зубного налета. Краски для метода
Грама. Препарат, окрашенный по методу Циля-Нильсена для демонстрации.
Учебные пособия:
Таблицы: окраска по методу Грама; окраска по методу Циля-Нильсена;
химический состав бактерий; анатомия клетки.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.29-34.
Основные вопросы:
1. Строение бактериальной клетки.
2. Химический состав микробной клетки.
3. Сущность сложных методов окраски бактериальных препаратов.
4. Строение клеточной стенки грамотрицательных и грамположительных
бактерий.
5. Техника окраски по методу Грама.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 85 из 169
6. Сущность окраски по методу Циля-Нильсена.
По 3,4,5,6 вопросам составить конспект в рабочей тетради для лабораторных
занятий. 1 и 2 вопросы повторить.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, опрос по текущей теме,
проверка конспектов; демонстрация техники окраски по методу Грама,
выяснение сущности и значения этого метода при определении вида
микроорганизмов,
диагностике
инфекционных
болезней,
по
демонстрационному препарату - разбор сущности и техники окраски
препаратов по методу Циля-Нильсена; проведение аудиторной контрольной
работы по усвоению метода Грама..
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1. Приготовить бактерийные препараты из смеси культур, зубного
налета и окрасить по методу Грама. Окрашенные препараты просмотреть под
микроскопом, микроскопическую картину зарисовать в рабочую тетрадь
(рисунки должны быть цветными) и подписать. Подчеркнуть значение этого
метода при определении вида микроорганизмов.
2. Изучить демонстрационный препарат, окрашенный по методу ЦиляНильсена. Микроскопировать. Зарисовать и обозначить. Подчеркнуть
значение этого метода.
ТЕМА №4:
Методы обнаружения спор и капсул. Определение подвижности
бактерий
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента;
иммерсионное масло, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки,
спички, фильтровальная бумага, карандаши по стеклу. Демонстрационный
мазок с окрашенными спорами. Набор красок для окраски спор по методу
Виртца (бумага пропитанная малахитовой зеленью и сафранином).
Препараты, приготовленные из органов мышки павшей от сибирской язвы и
окрашенные по методу Ольта.
Учебные пособия:
Таблицы: непостоянные элементы микробной клетки; окраска спор и
капсул; анатомия микробной клетки.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.29-34 .
Целевая установка: уяснить сущность и значение окраски спор, капсул.
Основные вопросы:
1. Строение бактериальной клетки
2. Сущность методов окраски спор
3. Сущность методов окраски капсул
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 86 из 169
4. Значение непостоянных элементов в лабораторной практике
5. На какие группы делятся микроорганизмы в зависимости от
расположения и количества жгутиков? Зарисовать.
6. Методы обнаружения подвижности микробов: метод «висячая капля»;
метод «раздавленная капля»; прямые методы обнаружения жгутиков
(окраска по Морозову).
7. Функции жгутиков.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, опрос по текущей теме,
проверка конспектов, демонстрация техники окраски спор и капсул;
выяснение сущности окраски спор и капсул и значения при определении вида
микроорганизмов, диагностике инфекционных болезней. Проведение
аудиторной контрольной работы по усвоению методов обнаружения спор и
капсул.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1.Изучить готовые бактериальные препараты, окрашенные по методу Ольта с
целью обнаружения капсул. Микроскопировать и зарисовать
2. Готовые препараты окрасить по методу Виртца, для обнаружения спор.
Микроскопировать, зарисовать. Обозначить.
Окраска по методу Виртца. На мазок положить бумагу, пропитанную
малахитовой зеленью. Смочить дистиллированной водой. Нагревать 3-4 раза
в течение 7 минут до появления паров периодически снимая с огня. Краску
смыть и нанести на препарат бумагу, пропитанную раствором сафранина.
Смочить дистиллированной водой и красить 45 секунд. Смыть водой.
Просушить фильтровальной бумагой.
3. Изучить подвижность микроорганизмов методом «раздавленная капля» в
темном поле микроскопа по демонстрационному препарату
4. Изучить мазок, окрашенный по методу Морозова. Микроскопировать.
Зарисовать.
5. Приготовить препарат «висячая капля». Микроскопировать.
ТЕМА №5:
Морфология плесневых грибов,
дрожжей и актиномицет
Материальное обеспечение: ДЛЯ ДЕМОНСТРАЦИИ – микроскопы с
готовыми препаратами плесневых грибов, дрожжей и актиномицет; три вида
плесневых грибов (пеницилл, аспергилл, мукор) на хлебе. Микроскопы,
предметные стекла, покровные стекла, препаровальные иглы, бактериальные
петли, спиртовки, спички, физраствор, иммерсионное масло.
Учебные пособия:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 87 из 169
Таблицы: морфология плесневых грибов, актиномицет и дрожжей;
строение дрожжевой клетки, актиномикоз у крупного рогатого скота.
Учебники:
Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.-С.34-43.
Целевая установка: ознакомится с морфологией грибов и техникой их
микроскопического исследования.
Основные вопросы:
1. Основные виды плесневых грибов (аскомицеты, мукоровые грибы), их
строение и морфология, способы размножения.
2. Несовершенные грибы (кладоспориум, молочная плесень, альтернария,
катенулярия, фома), их строение и морфология, способы размножения.
3. Строение и морфология дрожжей, способы размножения.
4. Строение и морфология актиномицет, способы размножения.
5. Практическое значение плесневых грибов, несовершенных грибов,
дрожжей, актиномицет в биотехнологии. Использование продуктов
жизнедеятельности.
В рабочей тетради дать письменные ответы на поставленные вопросы и
сделать схематические зарисовки морфологии плесневых грибов (пеницилл,
аспергилл, мукор), несовершенных грибов (кладоспориум, молочная плесень,
альтернария, катенулярия, фома), дрожжей и актиномицет – представителей
многоклеточных и одноклеточных организмов
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, опрос по текущей теме,
проверка конспектов, изучение морфологии плесневых грибов по
демонстрационным препаратам, изучение готовых препаратов актиномицет и
дрожжей, демонстрация преподавателем техники приготовления препаратов
из плесневых грибов, самостоятельное приготовление препаратов из
плесневых грибов, проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: Ход выполнения АКР.
Изучить
демонстрационные
препараты
плесневых
грибов,
расположенных под номерами (№1, №2, №3), приготовленные лаборантом,
сопоставить с табличным материалом. В процессе дискуссии определить
принадлежность гриба к определенному роду.
Дежурный студент раздает по два готовых бактериальных препарата
каждому студенту, где они изучают морфологию дрожжей и актиномицет.
Делают зарисовки увиденной картины. Препараты можно смотреть под
объективом на 40.
Рассмотреть три вида плесневых грибов, выращенных на хлебе.
Изучить культуральные свойства грибов. Затем из каждого гриба
приготовить с помощью бактериальных игл препараты на предметном
стекле, накрыть покровным стеклом и рассматривать под объективом на 40 в
затемненном поле микроскопа. Зарисовать.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 88 из 169
Для того чтобы определить род гриба необходимо
плодоносящую часть гриба и сопоставить с табличным материалом.
найти
ТЕМА №6:
Методы стерилизации
Материальное обеспечение: автоклавы, стерилизатор со шприцами и
инструментами, печь Пастера, аппарат Коха, фильтры зейтца, ручной насос
Комовского, лабораторная посуда( пипетки градуированные и пастеровские,
чашки Петри, ступки, пестики, бюксы, пробирк, вата, марля,бумага,
нарезанная для завкртывания чашек Петри и пипеток.
Учебные пособия:
Таблицы: мезофиллы, психрофилы, термофилы
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.-С.43-52.
Целевая установка:
разобрать методы стерилизации (сухим жаром,
влажным жаром). Ознакомиться с устройством и правиламит работы
основных приборов, используемых для «горячей» и «холодной»
стерилизации.
Уяснить понятия «дезинфекция», «асептика» и
«антисептика».
Основные вопросы:
1. Понятия «стерилизация», «дезинфекция», «асептика», «антисептика»,
«пастеризация».
2. Методы влажной стерилизации (кипячении, стерилизация паром под
давлением, дробная стерилизация – текучим паром и тиндализация).
3. Устройство автоклава и правила работы с ним.
4. методы сухой стерилизации ( прокаливание на огне, стерилизация в
печах Пастера).
5. Механическая стерилизация (фильтрование – фильтры Зейтца, свечи
Шамберлана, свечи Беркефельда).
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, разбор методов стерилизации.
Демонстрация оборудования, используемого для стерилизации (автоклавы,
сушильные шкафы, УФЛ) – экскурсия в лабораторию кафедры. Проведение
аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Подготовить посуду к стерилизации – пипетки, чашки Петри, предметные
стекла, колбы. Приготовить ватно-марлевые пробки. Провести стерилизацию
пинцетов и ножниц методом кипячения.
Питательные среды. Компоненты, классификация
Материальное обеспечение: образцы питательных сред: плотные, жидкие,
полужидкие. Обычные, специальные, дифференциальные (Эндо, среды
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 89 из 169
Гисса). Ингредиенты питательных сред (МПА, МПБ, Эндо) – мясная вода,
пептон, сухой агар. Колбы, пробирки с пробками, чашки Петри стерильные,
дистиллированная вода, рН – метр, весы, разновесы
Учебные пособия:
Таблицы:
классификация
питательных
сред.
Требования,
предъявляемые к питательным средам.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С60-67..
Целевая установка.
Разобрать технику приготовления МПА, МПБ,
МПЖ. Самостоятельно приготовить агар Эндо и МПБ из сухих питательных
сред.
Основные вопросы:
1. Характеристика и классификация питательных сред.
2. Требования, предъявляемые к питательным средам.
3. Техника приготовления питательных сред (МПА, МПБ, МПЖ). Их
стерилизация.
4. Среды, применяемые для культивирования дрожжей и плесневых
грибов, анаэробов, молочно-кислых бактерий.
5. Среды для исследования объектов внешней среды.
6. Механизм и источники питания микроорганизмов.
Первые пять вопросов конспектировать.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по вопросам темы
занятия, демонстрация ингредиентов и готовых питательных сред,
проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Приготовить 100 мл мясо-пептонного бульона и 100 мл агара Эндо из
сухих сред и с помощью преподавателя определить рН среды. Разлить МПБ в
пробирки, агар Эндо – в чашки Петри. Нарисовать схему приготовления
питательных сред.
Влияние на бактерии гидростатического давления
Многие микроорганизмы хорошо растут и размножаются в условиях
обычного атмосферного давления. Однако есть микробы обитающие в
глубинах океанов, в нефтяных скважинах, которые существуют при давлении
1.10 в 5 Па (глубина 5 тыс.м). Споры выдерживают давление 2.10 в 6 Па.
Микроорганизмы,
устойчивые
к высокому давлению
называют
барофильными (баротолерантными).
Механизм действия высокого гидростатического давления заключается
в денатурации ряда важных ферментов клетки и нарушении функций
цитоплазматической мембраны.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 90 из 169
В микробиологии появилось направление – баробиология
микроорганизмов, которое изучает влияние гидростатического давления на
микроорганизмы обитающие в глубине морей и океанов. Повышенное
давление в сочетании с высокой температурой используется в автоклаве (10 в
3, 10 в 6 Па и Т +120 С). В таких условиях погибают практически все
микроорганизмы.
Влияние осмотического давления на микроорганизмы
Осмотическое давление обусловлено концентрацией растворенных в
среде веществ. Внутри бактериальной клетки осмотическое давление
соответствует 10-20% сахарозы. Если микроорганизмы попадают в среду с
более высоким осмотическим давлением т.е. в среду с повышенным
содержанием соли или сахара, то происходит потеря воды и гибель клетки –
плазмолиз. Вода устремляется за пределы клетки, чтобы снизить
осмотическое давление. При попадании бактерий в среду с низким
осмотическим давлением, т.е. концентрация вещества вне клетки низкая,
вода, напротив, будет поступать в клетку. Клетка разбухает, клеточная стенка
разрывается, клетка погибает – плазмоптис. При повышении осмотического
давления у многих микробов не возможен рост и размножение.
Однако есть так называемые осмофильные микроорганизмы или
галлофилы (любящие соль), которые живут и размножаются при высоком
осмотическом давлении. Их ферменты активны только при повышенном
содержании хлорида натрия. Ионы натрия необходимы им для усвоения из
окружающей среды питательных веществ. Так, некоторые галлофилы
размножаются при концентрации хлорида натрия 20-30% - Halobacterium,
Micrococcus, Sarcina. Они находятся в солончаковых почвах,в рассолах для
соления рыбы, мяса (т.е. они вызывают порчу этих продуктов).
Стафилококки могут расти в присутствии 15% раствора хлорида натрия. Это
свойство используют для выделения стафилококков на питательных средах.
Действие различных типов излучения на микроорганизмы
1. Действие видимого света (длина волн 300-1000нм). Он угнетает
жизнедеятельность микробов (меньше, чем прямые солнечные лучи),
поэтому микроорганизмы выращивают (культивируют в темноте (в
термостатах). Однако, есть пигментообразующие бактерии, которые активно
образуют пигмент при использовании световой энергии. Микробные
культуры приобретают разный цвет. Микроорганизмы, не имеющие
пигмента можно искусственно сделать чувствительными к видимому свету,
если их окрасить. Это явление называется фотосенсибилизацией, а действие
фотодинамическим.
Прямые солнечные лучи губительно действуют практически на все
микроорганизмы, особенно патогенные. Некоторые сапрофиты более
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 91 из 169
адаптированы к воздействию света (культура пастерелл 7-12 мин;
возбудители туберкулеза 45-90 мин). Прямые солнечные лучи не разрушают
бактериальную клетку, а действуют бактерицидно. В клетке образуются
гидроксильные радикалы, губительно действующие на микробную клетку и
инактивируют ферменты.
2. Действие ультрафиолетовых лучей (100-380нм)
Лучи от 295нм до 300 нм (уточнить) бактерицидно активны. Обладают либо
летальным, либо мутагенным действием.
Механизм действия
ТЕМА №7:
Чистые культуры микробов. Методы выделения. Культивирование
аэробов и анаэробов
Материальное обеспечение: Чашки Петри с МПА для каждого студента,
пробирки с бактериальной куьтурой для посева, пробирка со стерильным
физраствором и ватным тампоном на палочке, бактериологические петли,
спиртовки, стерильные пастеровские пипетки, стерильный шпатель,
карандаши по стеклу, взвесь смешанных культур микроорганизмов. Среда
Китта-Тароццы.
Учебные пособия:
Таблицы: характер роста микроорганизмов на плотных и жидких
питательных средах.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.-С.67-74.
Целевая установка.
Уяснить понятия «чистая культура», «микробная
культура», «аэробы», «анаэробы», «микроаэрофилы», «факультативные
анаэробы». Разобрать основные методы получения чистых культур и
способы создания анаэробных условий для культивирования анаэробов.
Основные вопросы:
6. Понятия «чистая культура», «микробная культура», «аэробы»,
«анаэробы», «микроаэрофилы», «факультативные анаэробы».
7. Методы выделения чистой культуры (механические, физические,
химические, биологические). Их преимущества и недостатки.
8. Культивирование аэробов (термостат, принцип его работы).
9. Культивирование анаэробов. Методы создания анаэробных условий.
Все вопросы конспектировать.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Беседа по вопросам темы, где
преподаватель акцентирует внимание на необходимость выделения культур
микробов одного вида, демонстрирует способы создания анаэробных
условий. Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР .
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 92 из 169
Задание 1.Одна группа студентов готовит смывы с объектов внешней
среды, другая – с поверхности кожи и делают посевы на МПА в чашках
Петри. Третья группа производит посевы на МПА в чашках Петри из
воздуха.
Задание 2. Из микробной и чистой культур приготовить мазки. Окрасить
по методу Грама. Микроскопировать. Зарисовать
ТЕМА № 8:
Культуральные свойства микроорганизмов
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента;
иммерсионное масло, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки,
спички, фильтровальная бумага, карандаши по стеклу, краски в растворах,
каждрму студенту чашка Петри со своими посевами с прошлого занятия.
Пробирки с МПА, МПБ. Демонстрация роста микробов на различных
питательных средах.
Учебные пособия:
Таблицы: колонии разных видов микробов; свойства культур из R - и
S - колоний
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.70-74.
Целевая установка: изучить рост микроорганизмов на плотных (МПА),
жидких (МПБ), полужидких (МПЖ) питательных средах
Основные вопросы:
1. Характер роста бактерий на плотных питательных средах
2. Характер роста бактерий на жидких питательных средах
3. Характер роста бактерий на полужидких средах
4. Что такое «колония», «чистая культура», «смешанная культура», «вид»,
R - и S- формы бактерий?
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы, демонстрация роста различных видов микробов на МПА, МПБ, агаре
Эндо и техники пересева изолированной колонии на скошенный МПА,
проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Студенты получают посевы на чашках Петри с предыдущего занятия и
изучают характер роста микробов, выделенных из разных объектов, на МПА.
Выбирают отдельно выросшую колонию и описывают ее свойства.
Желательно выбрать две колонии R- и S-формы и указать на различия в их
свойствах. Затем из описанной колонии делают посевы на скошенный МПА
и МПБ и готовят бактерийный препарат. Препарат окрашивают по методу
Грама, Микроскопируют, определяют морфологию и тинкториальные
свойства, зарисовывают
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 93 из 169
ТЕМА № 9:
Ферментативные свойства микроорганизмов. Определение вида
микроорганизмов.
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента;
иммерсионное масло, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки,
спички, фильтровальная бумага, карандаши по стеклу, краски в растворах,
набор сред для определения сахаролитических (пестрый ряд) и
протеолитических (МПБ, индикаторные бумаги на индол и сероводород)
свойств. Демонстрация посевов микробов, обладающих протеолитическими,
сахаролитическими, гемолитическими и редуцирующими свойствами.
Чистые культуры на скошенном МПА, выделенные студентами на
предыдущем занятии.
Учебные пособия:
Таблицы: рост микробов (E. coli, Salmonella) на средах Гиса, агаре
Эндо. Классификация микробных ферментов
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.74-80.
Целевая установка: изучить сахаролитические, протеолитические,
гемолитические, редуцирующие свойства микроорганизмов. Ознакомиться с
питательными средами для изучения перечисленных свойств и учетом
результатов.
Основные вопросы:
1. Классификация ферментов. Их значение в жизни микроорганизмов.
2. Значение ферментативной активности микробов в лабораторной
практике.
3. Определение сахаролитических свойств. Питательные среды. Учет
результатов.
4. Определение протеолитических свойств. Питательные среды. Учет
результатов.
5. Определение гемолитических свойств. Питательные среды. Учет
результатов.
6. Определение редуцирующих
свойств. Питательные среды. Учет
результатов.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы (акцентировать внимание на роль микробных ферментов при
определении вида и
ферментах как факторах вирулентности
микроорганизмов), демонстрация ферментативной активности различных
микроорганизмов, проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР .
Из чистых культур микроорганизмов произвести посев на пестрый ряд
(среды Гисса) и МПБ для определения ферментативных свойств. В пробирку
с МПБ под пробку вставить индикаторные бумажки на индол и сероводород.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 94 из 169
На втором занятии в ходе АКР студенты анализируют результаты
посевов на пестрый ряд и МПБ. Определяют сахаролитические и
протеолитические свойства микробов.
Самостоятельно изучают
редуцирующие и гемолитические свойства микробов на метиленовом и
лакмусовом молоке и на агаре с кровью, соответственно. Результаты заносят
в тетрадь в виде таблицы (С.102 – Нецепляев С.В.) и делают заключение о
ходе определения вида микроорганизма.
ТЕМА № 10:
Антибиотики. Бактериофаги. Источники получения. Классификация
Материальное обеспечение: посевы на скошенный МПА с прошлого
занятия, чашка Петри с МПА, пастеровская пипетка, стакан с дезраствором,
карандаш по стеклу, краски в растворах. Набор дисков с антибиотиками,
пинцеты. Чашка с демонстрацией действия антибиотиков. Чистые культуры,
по две пробирки с МПБ, пастеровские пипетки, сальмонеллезный фаг
(колифаг), одна чашка с посевом на МПА для демонстрации действия фага.
Микроскоп для каждого студента; иммерсионное масло, бактериальные
петли, предметные стекла, спиртовки, спички, фильтровальная бумага,
карандаши по стеклу, краски в растворах.
Учебные пособия:
Таблицы: Метод диффузии в агар, метод серийных разведений.
Строение фага, механизм действия фага.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.80-88 .
Целевая установка: уяснить механизм действия антибиотиков на
микроорганизмы, ознакомиться с методами определения активности
антибиотиков, чувствительности и устойчивости к ним (метод диффузии в
агар и метод серийных разведений) микробов. уяснить механизм действия
бактериофагов на бактерии. Усвоить методику определения их активности.
практическое использование фага, диагностическое значение реакции
нарастания титра фага
Основные вопросы:
1.Классификация антибиотиков. Общая характеристика каждой группы.
2. Механизм действия антибиотиков на микроорганизмы. Единица
действия антибиотиков.
3. Методы определения активности антибиотиков.
4. Селекция антибиотикоустойчивых штаммов.
5. Строение бактериофага.
6. Механизм действия бактериофага, специфичность его действия.
7. Определить понятия «умеренный фаг», «лизогенный фаг».
8. Практическое использование бактериофагов.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по вопросам темы,
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 95 из 169
разбор демонстрационного материала, демонстрация преподавателем
определения вида микроба с помощью бактериофага на плотной (методом
дорожки) и жидкой среде,проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Проверить чистоту выделенной культуры на МПА. Для этого приготовить
мазок, окрасить по методу Грама, микроскопировать. Затем приготовить
смыв культур, путем добавления в пробирку 2 мл физраствора. Пастеровской
пипеткой (или обычной градуированной) провести посев культуры на МПА в
чашке Петри. После чего на поверхность посева разложить диски с
антибиотиками. Ход работы зафиксировать в рабочей тетради.
Посеять чистую культуру (при наличии достаточного времени сделать
мазок и окрасить по методу Грама) на две пробирки с МПБ, затем в первую
пробирку внести фаг (соответствующий), вторая пробирка останется
контрольной. Учет результатов на следующем занятии.
ТЕМА № 11:
Молекулярно-генетические методы идентификации
микроорганизмов (ПЦР)
Материальное обеспечение: люминесцентный микроскоп, наборы
флюоресцирующих сывороток для демонстрации (листериозные, рожистые,
сибиреязвенные, бруцеллезные). Культуры микробов соответствующих
сывороток.
Таблицы: схема реакции иммунофлуоресценции, иммуноферментного
анализа. Схема хода лучей в люминесцентном микроскопе.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии
и иммунологии. – М.,1989.- С.134-138.
Целевая установка: ознакомиться с методикой постановки и учета РИФ
(МФА).
Основные вопросы:
1. В чем заключается сущность серологических реакций?
2. Сущность метода флюоресцирующих антител.
3. Варианты МФА, их преимущества и недостатки.
4. Техника постановки
5. Учет и оценка реакции
На 2, 3, 4, 5 вопросы составить конспект.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, учет РА с прошлого
занятия, уяснение сущности
серологических реакций, знакомство с
особенностями иммунофлюоресцентного метода – прямого и непрямого.
Акцентирование внимания на преимуществе этого метода в экспресс
диагностике инфекционных болезней. Дается характеристика компонентов,
методики их приготовления и использования. Подведение итогов по
серологической диагностике инфекционных болезней и идентификации
микробных культур по антигенной структуре. Проведение аудиторной
контрольной работы.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 96 из 169
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Зарисовать схему вариантов метода флюоресцирующих антител.
ТЕМА № 12
Микрофлора воды, воздуха и почвы. Изучение санитарнопоказательных микроорганизмов. Бактерии группы кишечных палочек
(БГКП)
Материальное обеспечение: микроскоп для каждого студента;
иммерсионное масло, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки,
спички, фильтровальная бумага, карандаши по стеклу, краски в растворах.
Посевы почвы в чашке на полосках фильтровальной бумаги со стеклом
(Среда Виноградского) на наличие азотобактера. Аппарат Кротова и одна
чашка с МПА. Набор среды Булира. Один набор с посевом, второй
стерильный, пипетки стерильные на 1.2,5 мл и мензурки. Фильтр Зейтца,
стерильные нитроцеллюлозные фильтры. Чашка Петри со средой Эндо. Вода
речная в колбе. Цилиндры для взятия проб воды водопроводной. Для
каждого студента чашка Петри с МПА. Насос Камовского.
Учебные пособия:
Таблицы: санитарная оценка воды, почвы, воздуха.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.94-104.
Целевая установка:
усвоить правила отбора проб воды, почвы и
отработать методы санитарно-бактериологической оценки воды, воздуха и
почвы.
Основные вопросы:
1. Микрофлора воды, воздуха и почвы.
2. Санитарно-показательные
микроорганизмы.
Требования,
предъявляемые к ним.
3. Культурально-биохимические
свойства
санитарно-показательных
микроорганизмов (кишечная палочка, гемолитический стрептококк).
4. Дифференциация БГКП – ТИМАЦ.
5. Определение ОМЧ, коли-титра, коли-индекса.
6. Методы санитарно-бактериологической оценки воды, почвы, воздуха.
6. Нормативы по содержанию микробов в 1мл воды, в 1г почвы, в 1м
воздуха. Коли-индекс, коли-титр воды, почвы. Содержание гемолитических
стрептококков в 1 м воздуха.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа со студентами о
микроорганизмах почвы, воды и воздуха, о санитарном значении микробов и
методах санитарно-бактериологической оценки почвы, воздуха и воды.
Преподаватель демонстрирует определение коли-титра методом Булира и
коли-индекса методом мембранных фильтров на среде Эндо, а также
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 97 из 169
производит посев из воздуха с помощью аппарата Кротова. Проведение
аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1. Дежурному студенту продемонстрировать порядок взятия проб
водопроводной воды. Из водопроводной (речной) воды приготовить
разведения 1:10, 1:100, 1:1000 и произвести посев на чашки Петри с МПА.
Посевы поместить в термостат для культивирования на 24 ч. Общее
микробное число посчитать на следующее занятие по формуле:
ОМЧ=число выросших колоний Х на степень разведения.
2. Приготовить мазки из посевов почвы для определения азотобактера,
окрасить простым способом, микроскопировать, зарисовать.
3. Каждому студенту сделать посев из воздуха на чашки Петри С МПА
для определения ОМЧ воздуха. Посевы поместить в термостат для
культивирования на 48 ч при температуре 37 С. ОМЧ воздуха определяют по
формуле. ОМЧ=число выросших колоний х 100 : 78,5 х 100, где 78,5 –
площадь чашки Петри.
4. Под контролем преподавателя студенты осваивают метод мембранных
фильтров для определения коли-индекса воды.
ТЕМА № 13
Лабораторные животные в бактериологии. Коллоквиум
Материальное обеспечение: ножницы, пинцеты, дезраствор (крупные
тампоны с карболовой кислотой и спиртом), пастеровские пипетки, МПА,
МПБ. Труп белой мыши, павшей от заражения культурой Escherichia coli
О86, О78. для демонстрации заражения – кролик, белые мыши, морская
свинка, стерилизатор с иглами и шприцами.
Учебные пособия:
Таблицы: методы заражения.
Учебники:
Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.88-94.
Целевая установка: освоить способы заражения и вскрытия лабораторных
животных, методы бактериологического исследования трупов животных.
Основные вопросы:
1. С какой целью проводят экспериментальное заражение животных?
2. Что понимают под патогенностью и вирулентностью?
3. В
каких
условных
единицах
измеряют
вирулентность
микроорганизмов?
4. Виды лабораторных животных, используемых для заражения
микроорганизмами.
5. Способы заражения лабораторных животных.
6. Методика бактериологического исследования трупа животного.
На все вопросы составить конспект.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 98 из 169
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Беседа о патогенности,
вирулентности микробов, о цели и методах заражения животных.
Демонстрация
перорального,
подкожного,
внутримышечного,
внутрибрюшинного, внутривенного, внутрикожного, интранозального
методов заражения на кролике, морской свинке,
белой
мышке.
Демонстрация техники вскрытия трупа лабораторного животного, техники
посева из органов трупа мышки на МПА и МПБ.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание. Из органов трупа белой мышки провести посевы на МПА, МПБ;
приготовить мазки-отпечатки, окрасить по методу Грама, микроскопировать.
Результаты записать в тетрадь.
ТЕМА № 14:
Коллоквиум (Компьютерное тестирование)
Вопросы по модулю 1 и 2
1. Предмет и задачи микробиологии.
2. Основные формы бактерий. Размеры и единицы измерения.
3. Строение бактерий, дрожжей, грибов, актиномицет.
4. Сущность методов обнаружения спор, жгутиков, капсул.
5. Определение
понятий
–
классификация,
таксономия,
номенклатура и идентификация микроорганизмов.
6. Определение понятий «вид», «штамм», «клон», «культура»,
«чистая культура», «смешанная культура», «колония».
7. Техника приготовления бактериального препарата. Простой метод
окраски.
8. Сущность окраски по методу Грама, Циля-Нильсена.
9. Классификация питательных сред и требования предъявляемые к
ним.
10. Техника приготовления МПА, МПБ, МПЖ.
11.Определение
понятий
«стерилизация»,
«дезинфекция»,
«асептика», «антисептика».
12. Мезофиды, психрофилы, термофилы, барофилы, галлофилы,
лиофилизация.
13. Методы стерилизации. Преимущества и недостатки их.
14.Определение понятий «аэробы», «анаэробы», «факультативные
анаэробы», «микроаэрофилы».
15.Питательные среды и требования, предъявляемые к ним.
Классификация питательных сред.
16.Порядок приготовления питательных сред.
17.Действие на микроорганизмы физических, химических и
биологических факторов.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 99 из 169
18.Микрофлора воды, почвы, воздуха. Методы микробиологической
оценки воды, почвы, воздуха
ТЕМА №15
Реакция агглютинации (РА). Реакция преципитации (РП)
Материальное обеспечение: компоненты для постановки РА пробирочным
методом – единый бруцеллезный антиген, позитивная и негативная
бруцеллезные сыворотки. Компоненты для пластинчатой РА – антиген
(культура E.coli), поли- и монорецепторные агглютинирующие сыворотки.
Каждому студенту пипетки, набор пробирок (4шт.), сыворотка и антиген в
штативе. Демонстрация РА в пробирках. стандартные антигены и сыворотки
для РА. Антиген сибиреязвенный, преципитирующая сыворотка.
Демонстрация РДП в агаровом геле с отрицательным и положительным
результатом. Штатив с пробирками Уленгута, пастеровские пипетки, воронки
с асбестовыми фильтрами для фильтрации суспензии из патматериала.
Учебные пособия:
Таблицы: РА, антигенная структура кишечной палочки и сальмонелл
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии
и иммунологии. – М.,1989.- С.105-115, С.117-123.
Целевая установка: изучить сущность и отработать технику постановку и
учета РА пробирочным методом, РП.
Основные вопросы:
1. В чем заключается сущность серологических реакций?
2. Антигенное строение бактерий.
3. Классификация, строение антител, место их образования.
4. Механизм взаимодействия антигена
и антитела. Практическое
использование серологических реакций.
5. Сущность РА и РП.
6. Компоненты реакции агглютинации, преципитации.
7. Техника постановки.
8. Учет реакции.
На 5,6,7,8 вопросы составить конспект.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, уяснение сущности
серологических реакций, демонстрация реакции (РА) разными методами,
демонстрация РДП в агаровом геле, реакции кольцепреципитации,
демонстрация техники извлечения преципитиногена из кожсырья,проведение
аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР (аудиторной контрольной
работы).
Задание 1. Отработать методику постановки РА пробирочным методом.
1. Ознакомиться с компонентами реакции.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 100 из 169
2. Поставить реакцию и учесть результаты на следующем занятии.
Реакцию ставить в трех пробирках, четвертая – контрольная.
3. В рабочей тетради зарисовать схему постановки реакции
агглютинации.
Задание 2. Отработать методику постановки реакции кольцепреципитации в
пробирках Уленгута.
1. Ознакомиться с компонентами реакции.
2. Из материала павшей от сибиреязвенной вакцины белой мыши
приготовить антиген горячим способом.
3. Поставить реакцию и учесть результаты.
4. В рабочей тетради зарисовать схему постановки реакции
кольцепреципитации, реакции диффузной преципитации.
ТЕМА № 16
Реакция связывания комплемента (РСК)
Материальное обеспечение: на каждый стол штатив с пробирками: две
пустые, остальные пять – с компонентами для реакции – сыворотка
испытуемая в разведении 1:10, единый бруцеллезный антиген (1:100),
комплемент, гемолизин в рабочем разведении, эритроциты (1:40). Пипетки на
1мл. Водяная баня. Баночки с физраствором для промывания пипеток. На
стол преподавателя образцы компонентов для реакции. Демонстрация РСК
(положительный и отрицательный результаты).
Учебные пособия:
Таблицы:
РСК, схема титрации комплемента в гемолитической
системе, постановка главного опыта, РСК – результат.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии
и иммунологии. – М.,1989.- С.123-134.
Целевая установка: изучить сущность, отработать технику и учет РСК
Основные вопросы:
1. В чем заключается сущность РСК и ее систем?
2. Характеристика компонентов реакции связывания комплемента
(испытуемая сыворотка, антиген, комплемент, гемолизин, эритроциты
барана). Их подготовка.
3. Цель титрации комплемента.
4. Техника постановки.
5. Учет реакции.
6. Реакция длительного связывания комплемента (РДСК), ее сущность.
Все вопросы конспектировать.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, уяснение сущности реакции,
демонстрация компонентов и реакции, проведение аудиторной контрольной
работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 101 из 169
Задание. Отработать методику постановки реакции связывания комплемента.
1. Ознакомиться с компонентами реакции.
2. Записать схему главного опыта в рабочую тетрадь
3. Поставить реакцию и учесть результаты.
Задание. Провести расчет комплемента (свежего) для постановки 500 проб
РСК, при условии известного титра комплемента.
ТЕМА № 17
Метод флюоресцирующих антител (МФА). Иммуноферментный анализ
(ИФА)
Материальное обеспечение: люминесцентный микроскоп, наборы
флюоресцирующих сывороток для демонстрации (листериозные, рожистые,
сибиреязвенные, бруцеллезные). Культуры микробов соответствующих
сывороток.
Таблицы: схема реакции иммунофлуоресценции, иммуноферментного
анализа. Схема хода лучей в люминесцентном микроскопе.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии
и иммунологии. – М.,1989.- С.134-138.
Целевая установка: ознакомиться с методикой постановки и учета РИФ
(МФА).
Основные вопросы:
6. В чем заключается сущность серологических реакций?
7. Сущность метода флюоресцирующих антител.
8. Варианты МФА, их преимущества и недостатки.
9. Техника постановки
10.Учет и оценка реакции
На 2, 3, 4, 5 вопросы составить конспект.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, учет РА с прошлого
занятия, уяснение сущности
серологических реакций, знакомство с
особенностями иммунофлюоресцентного метода – прямого и непрямого.
Акцентирование внимания на преимуществе этого метода в экспресс
диагностике инфекционных болезней. Дается характеристика компонентов,
методики их приготовления и использования. Подведение итогов по
серологической диагностике инфекционных болезней и идентификации
микробных культур по антигенной структуре. Проведение аудиторной
контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Зарисовать схему вариантов метода флюоресцирующих антител.
Вопросы по модулю 3
Основы учения об инфекции и иммунитете
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 102 из 169
1. Культивирование аэробов и анаэробов.
2. Методы выделения чистой культуры.
3. Понятие о росте и размножении бактерий, бесполое и половое
размножение.
4. Характер роста микроорганизмов на плотных и жидких
питательных средах.
5. Определение ферментативной активности микроорганизмов.
6. Классификация изменчивости. Спонтанные и индуцированные
мутации.
7. Рекомбинации
бактерий.
Трансформация,
конъюгация,
трансдукция.
8. Антибиотико-резистентность
микроорганизмов,
методы
определения чувствительности к антибиотикам.
9. Инфекция, инфекционный процесс, инфекционная болезнь.
10.Понятие о патогенности и вирулентности бактерий, методы
ослабления и усиления вирулентности.
11.Факторы вирулентности микроорганизмов. Инвазивные и
токсигенные свойства микроорганизмов.
12.Определение понятия иммунитет. Иммунная система и ее
функции.
13.Виды иммунитета.
14.Неспецифические факторы защиты.
15.Антигены бактериальной клетки, их основные свойства.
16.В чем заключается сущность серологических реакций?
17.Классификация, строение антител, место их образования, функции
антител.
18.Механизм взаимодействия антигена
и антитела. Практическое
использование серологических реакций.
19.Сущность реакций -РА , РП, РСК, РИФ.
20.Компоненты реакций.
21.Техника постановки серологических реакций.
22.Учет реакций.
ТЕМА № 18 Схема диагностики бактериальных инфекций
Учебные пособия:
Таблицы: схема бактериологической диагностики инфекционных
болезней.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989
Целевая установка: усвоить методы диагностики инфекционных болезней.
Основные вопросы:
1. Бактериологическия диагностика
2. Серологическая диагностика
3. Аллергическая диагностика
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 103 из 169
Краткое содержание занятия: рассматривается каждый этап схемы
бактериологической диагностики
Самостоятельная работа:
Записать схему диагностики в альбом.
СХЕМА БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ
ЗАБОЛЕВАНИЙ
1.Краткая характеристика заболевания (определение, какие виды животных
болеют, в каком возрасте, клинические признаки, патологоанатомические данные)
2. Название возбудителя (семейство, род, вид)
3. Методы диагностики
А) Бактериологическая диагностика
↓
правила взятия и пересылки патологического материала
для исследования
↓
↓
↓
Микроскопия
Выделение чистой культуры
Гр (-) (+)
Спора
Капсула
Жгутики
МФА
Питательные среды,
потребность
в кислороде, температура,
время культивирования
Биопроба
Вид лаборат-го
жив-го, метод
заражения, доза.
Сроки гибели.
↓
Идентификация
(определение видовой или типовой (вариантной) принадлежности микроорганизма
↓
1.Морфология
2.Тинкториальные свойства
6. Характер роста на питательных средах
7. Ферментативные (биохимические) свойства
8. Антигенные (серологические) свойства
9. Патогенные свойства
10. Фаготипирование
11. Токсигенные свойства
12. Антибиотикочуствительность
В) Серологическая диагностика
↓
РА, РСК, РП, РДСК, РС, РБП
↓
С) Аллергическая диагностика
↓
аллергены, методы введения, доза, учет
4. Иммунитет, средства специфической профилактики (вакцины, сыворотки - их
характеристика)
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 104 из 169
5. Лечение
ТЕМА №19
Патогенные кокки
(Staphilococcus aureus, Streptococcus egui, Str.mastitidis,
Str.pneumoniae)
Материальное обеспечение: культуры стафилококков и стрептококков на
МПА и МПБ, кровяном агаре, желточно-солевом агаре. Стафилококки –
Staph. albus, Staph.citreus, Stahp. aureus. Готовые окрашенные мазки (по
Романовскому-Гимзе) – стафилококки в гное, мазки – отпечатки мытного
стрептококка и диплококка. Рост трех видов стафилококков на МПА в
чашках с дисками антибиотиков. Чашки с МПА – посев белого стафилококка
с трафаретами «свет» и «тень», обработанные ультрафиолетовыми лучами.
Каждому студенту – культуры стафилококка и стрептококка.
Учебные пособия:
Таблицы: схема бактериологической диагностики инфекционных
болезней, схема изучения возбудителей стафилококковых и стрептококковых
инфекций, морфология кокковых форм, стафилококк в гное, мытный
стрептококк.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.142-156.
Целевая установка: усвоить правила взятия и пересылки патологического
материала, ознакомиться со свойствами и методами идентификации
патогенных кокков, а также с методами дифференциации патогенных и
непатогенных стафилококков
Основные вопросы:
1. Общая характеристика стафилококков и стрептококков, их
распространение.
2. Патогенные стафилококки и заболевания обуславливаемые ими.
3. Факторы вирулентности стафилококков и методы их обнаружения.
4. Дифференциация патогенных стафилококков от непатогенных.
5. Особенности патогенеза кокковых заболеваний и роль фагоцитоза в
развитии стафилококковой инфекции.
6. Характеристика
заболеваний,
вызываемых
патогенными
стрептококками – Streptococcus egui (мыт лошадей),Streptococcus
mastitidis
(agalactiae)
(мастит),
Streptococcus
pneumoniae
(пневмококковая инфекция, диплококковая септицемия).
7. Характеристика специфических средств профилактики при
диплококковой
септицемии,
стафилококковых
инфекциях
(анавакцины – механизм их действия). Иммунитет при
стрептококковых и стафилококковых заболеваниях.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 105 из 169
На основании изучения основных вопросов по теме составить схемы
бактериологических диагнозов стрептококковых и стафилококковых
инфекций.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Знакомство с основными
культурально-морфологическими свойствами патогенных коков, методами
их дифференциации от непатогенных кокков. Демонстрация роста
стафилококков и стрептококков на питательных средах. Акцентирование
внимания на роли кокков в патологии и связи патогенности с наличием
ферментов – ДНК-азы, плазмокоагулазы, эндо-, экзотоксинов и методах их
обнаружения, на роли стрептококков как санитарно-показательных
микроорганизмов при определении загрязненности воздуха. Демонстрация
биопрепаратов (вакцин против диплококковой септицемии, стафилококковой
аутовакцины и анатоксина, сывороток) Проведение аудиторной контрольной
работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание 1. Изучить морфологические и тинкториальные свойства
патогенных кокков.
Для этого приготовить мазки из стрептококковых и стафилококковых
культур, окрасить по методу Грама, микроскопировать, зарисовать.
Задание 2. Микроскопировать готовые препараты из гноя – мытный
стрептококк, стафилококки в гное.
По результатам оформить протокол.
ТЕМА № 20
Бруцеллы (Brucella abortus, Br. melitensis, Br. suis, Br. ovis, Br. neotome,
Br. canis) . Методы диагностики бруцеллеза
Материальное обеспечение:
1. Для демонстрации рост бруцелл на МПА и МПБ (вакцинный штамм 19
и 82).
2. Смыв бруцелл и белого стафилококка (взвесь в физрастворе) на каждое
рабочее место.
3. Набор реактивов и красок для окраски по Граму и Козловскому.
4. Микроскопы, бактериальные петли, предметные стекла, спиртовки.
5. Компоненты реакций РА, РСК, КР, РБП.
6. Демонстрация РА, РСК, КР, РБП.
7. Вакцины из штаммов 19, 82, РЕВ-1.
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики, схема
диагностики бруцеллеза, серологические реакции (РА, РСК).
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С. 184-193.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 106 из 169
Целевая установка: ознакомиться с морфологическими и культуральнотинкториальными свойствами бруцелл, методами идентификации. Составить
схему микробиологической диагностики.
Основные вопросы:
1. Краткая характеристика бруцеллеза и классификация бруцелл.
2. Особенности морфологических, культурально-тинкториальных свойств
бруцелл.
3. Методы идентификации чистой культуры.
4. Серологическая диагностика. Диагностические титры серологических
реакций для разных видов животных (РА, РСК, КР). Компоненты
реакций, их получение и контроль.
5. Аллергическая диагностика. Характеристика аллергена – бруцеллина.
6. Характеристика бруцеллезных вакцин (штаммы 19, 82, РЕВ-1)
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Знакомство с культуральноморфологическими, тинкториальными свойствами бруцелл, методами их
идентификации. Изучение роста бруцелл на питательных средах. Разбор
сущности и особенностей серологических методов исследования на
бруцеллез. Характеристика компонентов, их получение и контроль при
постановке РА (пробирочным методом), РСК, КР, РБП. Характеристика
бруцеллезного аллергена (бруцеллина). Демонстрация биопрепаратов.
Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание. Изучить морфологические и тинкториальные свойства бруцелл.
Для этого приготовить мазки из смеси культур (бруцеллы и белый
стафилококк), окрасить по методу Грамма (Козловскому), микроскопировать,
зарисовать.
По результатам оформить протокол.
ТЕМА №21
Морфология и биология возбудителя колибактериоза. Эшерихии.
методы диагностики эшерихиозов
Материальное обеспечение: для демонстрации - культуры эшерихий и
сальмонелл на МПА и МПБ, на агаре Эндо, Левина, средах с углеводами
(среды Гисса); на МПА в чашках Петри с действием антибиотиков и
бактериофагов; набор сывороток для РА с культурой эшерихий. На каждый
рабочий стол культуру эшерихий по одной пробирке, стерильную чашку
Петри с МПА и набор антибиотиков.
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики, схема
диагностики колибактериоза, антигенное строение кишечной палочки,
морфология и рост на среде Эндо кишечной палочки и сальмонелл,
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 107 из 169
дифференциация кишечной палочки от сальмонелл по ферментативным
свойствам.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С. 156-164.
Целевая установка: усвоить правила отбора и пересылки паологического
материала
в
лабораторию,
освоить
методику
проведения
бактериологического исследования патматериала (изучить тинкториальные,
морфологические, культуральные свойства эшерихий)
Основные вопросы:
1. Общая характеристика бактерий рода эшерихий, их распространение,
культурально-морфологические совйства.
2. Характеристика антигенов и их значение при дифференциации.
3. Принципы
получения
и
применения
агглютинирующих
диагностических коли-сывороток.
4. Механизм действия и практическое применение коли-фага,
антибиотиков при колибактериозе.
5. Иммунитет при колибактериозе и факторы его обуславливающие
(вакцины).
6. Составить схему бактериологического диагноза колибактериоза.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы - акцентировать внимание на распространении эшерихий в природе,
индикации прижизненной и посмертной, дифференциации патогенных
серотипов по биохимическим, антигенным, биологическим свойствам с
демонстрацией роста на дифференциально-диагностических средах (средах
Гиса, Эндо), серотипирования (РА на стекле) с типоспецифической Околисывороткой. Обратить внимание на гемолитические свойства и
колициногенность эшерихий и значение этих факторов в патогенезе колиинфекции, а также на их чувствительность к антибиотикам и бактериофагу.
Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание 1. Провести посев культуры эшерихий соответствующего
серотипа на МПА в чашке Петри. В чашку Петри с посевом расставить
диски, пропитанные антибиотиком, для определения чувствительности к
ним. (Результат учесть на следующем занятии).
Задание 2. Определить серотип культуры в РА на предметном стекле с
типоспецифическими сыворотками.
Задание 3. Приготовить мазок из культуры эшерихий, окрасить по методу
Грама, микроскопировать, изучить морфологию, тинкториальные свойства,
зарисовать.
По результатам оформить протокол.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 108 из 169
ТЕМА №22
Сальмонеллы (Salmonella). Методы диагностики сальмонеллезов
Материальное обеспечение: для демонстрации - культуры эшерихий и
сальмонелл на МПА и МПБ, на агаре Эндо, Левина, средах с углеводами
(среды Гисса); на МПА в чашках Петри с действием антибиотиков и
бактериофагов; набор О-агглютинирующих сывороток для РА с культурой
сальмонелл и эшерихий; вакцины поливалентные сыворотки. На каждый
рабочий стол культуру сальмонелл по одной пробирке, стерильную чашку
Петри с МПА и набор антибиотиков.
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики; схема
диагностики сальмонеллезов (паратифов); антигенное строение сальмонелл;
морфология и рост на среде Эндо кишечной палочки и сальмонелл;
дифференциация кишечной палочки от сальмонелл по ферментативным
свойствам; классификация сальмонелл по Кауфману-Уайту.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.164-170.
Целевая установка: усвоить правила отбора и пересылки патологического
материала в лабораторию, порядок и методику исследования его для
выделения и идентификации возбудителей сальмонеллезов.
Основные вопросы:
1. Патологический
материал,
направляемый
для
диагностики
сальмонеллеза телят, поросят и овец.
2. Культурально-морфологические свойства сальмонелл. Характер роста
сальмонелл на средах Эндо, Плоскирева и висмут-сульфит-агаре.
3. Методы дифференциации сальмонелл от E.coli.
4. Антигенная структура сальмонелл, принцип их серологической
типизации.
5. Характеристика возбудителя сальмонеллеза(паратифа) телят.
6. Бактериологическая и серологическая диагностика сальмонеллеза
(пуллороза) птиц.
7. Патологический материал и бактериологическая диагностика
сальмонеллеза (паратифа) лошадей.
8. Составить схему бактериологического диагноза сальмонеллезов.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Знакомство с культуральнобиохимическими свойствами сальмонелл, с дифференциацией сальмонелл от
эшерихий. Демонстрация роста на МПА, МПБ, средах Гиса, агаре Эндо,
висмут-сульфит-агаре, бактоагаре Ж. Разбор дифференциальной схемы
сальмонелл по антигенным свойствам. Демонстрация РА на стекле с
паратифозными
агглютинирующими
сыворотками.
Основы
бактериологической диагностики сальмонеллезов. Серодиагностика с
характеристикой компонентов (антигены, антитела). Знакомство с
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 109 из 169
биопрепаратами – вакцинами, сыворотками, принципами их получения,
контроля, применения. Практическое- лечебное и диагностическое значение
сальмонеллезных фагов. Применение АБК,
ПАБК.
Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание 1.Приготовить мазки из культур сальмонелл, окрасить по
Грамму, микроскопировать, определить морфологические и тинкториальные
свойства, зарисовать.
Задание 2. Определить видовую принадлежность культуры в РА с
типоспецифическими сыворотками (сальмонеллезной и эшерихиозной).
По результатам оформить протокол.
ТЕМА № 23
Возбудитель рожи свиней (Erysipelotrix rhusiopatiae). Листерии (Listeria
monocytogenes)
Материальное обеспечение:культуры рожи свиней и листерии на МПА и
МПБ. Труп голубя или белой мыши, павшей от листериоза. Готовые мазки
(фиксированные) из крови голубя. Готовые мазки из культуры листерий.
Каждому студенту две пробирки с ростом культур на МПА – листерий и
возбудителя рожи.
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики;
дифференциация возбудителя рожи от листерий; морфология возбудителей.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной
микробиологии и иммунологии. – М.,1989.- С.170-178.
Целевая установка: ознакомить с правилами взятия, упаковки и пересылки
патологического материала. Изучить свойства возбудителей, методы
бактериологических и серологических исследований, дифференциацию
возбудителей.
Основные вопросы:
1. Латинские наименования возбудителей.
2. Правила взятия и пересылки патологического материала для
бактериологического исследования его на рожу свиней и листериоз.
3. Морфологические,
культуральные,
биохимические
свойства
возбудителей.
4. Критерии дифференциации возбудителей рожи свиней и листериоза.
5. Методы серологической идентификации возбудителей.
6. Биопроба.
7. Биопрепараты (вакцины и сыворотки), получение, контроль,
применение (принцип аттенуации при получении вакцин против рожи).
8. Составить схему бактериологического диагноза рожи свиней и
листериоза. В схеме отразить методы и цель дифференциации.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 110 из 169
темы – разбор схемы бактериологического диагноза при эризипелотриксе и
листериозе, схемы дифференциации возбудителя рожи и листериоза.
Демонстрация роста возбудителей на плотных и жидких питательных средах
с одновременным сравнением роста листерий и возбудителя рожи. Обратить
внимание на получение, контроль и применение биопрепаратов при роже и
листериозе. Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание 1. Окрасить готовые мазки из культуры листерий по Грамму.
Микроскопировать. Изучить морфологические и тинкториальные свойства
возбудителя, зарисовать.
Задание 2. Изучить готовые препараты, приготовленные из крови трупов
голубей, павших от рожи и окрашенных по Романовскому-Гимзе.
Определить морфологические и тинкториальные свойства возбудителя.
Зарисовать.
По результатам оформить протокол.
ТЕМА №24
Пастереллы (Pasterella multocida). Возбудитель зооантропонозной
чумы (Yersinia pestis). Возбудитель псевдотуберкулеза (Yersinia
pseudotuberculosis)
Материальное обеспечение: культуры пастерелл на МПА и МПБ суточные
и на МПБ – недельного возраста. Трупы голубей и мышей, павших от
пастереллеза. Готовые мазки из крови голубя, павшего от пастереллеза,
окрашенные по Романовскому-Гимзе. Вакцины, сыворотки против
пастереллеза различных видов животных и птиц.
Учебные пособия:
Таблицы: общая схема бактериологического диагноза; морфология
пастерелл.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С178-184..
Целевая установка: освоить правила отбора и пересылки патологического
материала для бактериологического исследования на пастереллез. Изучить
морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя
пастереллеза. Ознакомиться с биопрепаратами, применяемыми для
специфической профилактики и лечения пастереллеза.
Основные вопросы:
1.Особенности морфологии и тинкториальных свойств пастерелл.
2. Ферментативные свойства пастерелл.
3. Культуральные свойства пастерелл.
4. Значение биопробы в диагностике пастереллеза.
5. Схема бактериологического исследования на пастереллез.
6. Биопрепараты: вакцины, лечебно-профилактические сыворотки.
7. Составить схему бактериологического диагноза пастереллеза.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 111 из 169
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия. Разбор схемы диагностики:
акцентирование внимания на особенностях морфологической структуры,
тинкториальных, культуральных свойствах возбудителя, на биологических
особенностях пастерелл, восприимчивости лабораторных животных к
различным видам пастерелл, бактерионосительстве при пастереллезе.
Изучение биопрепаратов – вакцин, сывороток применяемых при
пастереллезе. Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
Задание 1.
Вскрыть труп голубя или белой мыши, павших от
пастереллеза, отметить особенности патолого-анатомических изменений.
Провести посев пастеровской пипеткой из органов (сердце, печень,
селезенка) на МПА и МПБ.
Задание 2. Приготовить мазки из культуры пастерелл с МПА, окрасить по
методу
Грама,
микроскопировать,
изучить
морфологические
и
тинкториальные свойства, зарисовать.
Задание 3. Изучить мазки, окрашенные по Романовскому-Гимзе.
Обратить внимание на полярное окрашивание пастерелл. Зарисовать.
По результатам оформить протокол.
ТЕМА № 25
Бацилла антракса. Методы диагностики сибирской язвы
(Bacillus anthracis)
Материальное обеспечение: рост Bacillus anthracis и антракоидов (Bacillus
mesentericus, B.meghaterium, B.sereus, B.subtilis) на МПА, МПБ, МПА с
кровью, МПЖ. Труп белой мыши, павшей от антракса (вакцинный штамм).
Краски для окраски по методу Ольта ( на наличие капсулы). Посуда,
инструменты, компоненты для приготовления антигена для РП и ее
постановки. Стандартный сибиреязвенный антиген, преципитирующая
сибиреязвенная сыворотка, пробирки Уленгута, штатив для них. Воронки,
асбестовая вата, пастеровские пипетки. Демонстрация реакции преципитации
в агаровом геле. Биопрепараты – вакцины, сибиреязвенный гамма-глобулин,
сыворотки, люминесцирующие сибиреязвенные сыворотки. Культуры
Bacillus anthracis на МПА, препараты, окрашенные по методу Ольта, мазки с
феноменом «жемчужное ожерелье» для каждого студента.
Учебные пособия:
Таблицы: общая схема бактериологической диагностики; схема
бактериологической диагностики сибирской язвы; споры, капсулы
возбудителя сибирской язвы; край колонии Bacillus anthracis.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.193-201.
Целевая установка: освоить правила взятия и пересылки патологического
материала для лабораторного исследования на сибирскую язву, изучить
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 112 из 169
методы микроскопического и серологического (РП) исследования
патологического материала на сибирскую язву.
Основные вопросы:
1. Правила взятия патологического материала.
2. Методы бактериологической диагностики сибирской язвы.
3. Морфологические, тинкториальные и культуральные свойства Bacillus
anthracis.
4. Дифференцирование
Bacillus
anthracis
от
сапрофитных
спорообразующих аэробов.
5. Идентификация при помощи сибиреязвенного бактериофага. Феномен
«ожерелья».
6. Серологические методы (РП) обнаружения сибиреязвенного антигена в
исследуемом материале.
7. Биопрепараты, применяемые для профилактики и лечения.
8. Составить схему бактериологического диагноза сибирской язвы.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы: акцентирование внимания на наличие непостоянных элементов у
возбудителя - споры и капсулы, их значение в диагностике. Изучение роста
возбудителя на МПА и МПБ. Дифференциация от антракоидов.
Демонстрация вскрытия трупа белой мыши, павшей от антракса, посева на
МПА и МПБ из органов, изготовления антигена горячим методом,
постановки реакции кольцепреципитации в пробирке Уленгута. Знакомство с
методом экспресс-диагностики сибирской язвы МФА.
Проведение
аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР .
Задание 1. Изучить край колонии культуры Bacillus anthracis в
пробирке под микроскопом (увеличение на 8). Зарисовать край колонии.
Задание 2. Изучить готовый препарат из капсульного штамма,
окрашенный по методу Ольта. Найти капсулу (тело клетки окрашено в
розовый цвет, капсула в желтый цвет). Картину зарисовать.
Задание 3. Микроскопировать готовый мазок, приготовленный из
культуры Bacillus anthracis, выращенной на МПА с пенициллином. Изучить
феномен «ожерелье». Картину зарисовать.
Задание 4. Изучить биопрепараты – вакцины и сыворотки.
Приготовление, контроль, применение.
По результатам оформить протокол.
ТЕМА №26
Патогенные анаэробы. Возбудители эмкара, злокачественного отека,
ботулизма, столбняка
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 113 из 169
(Clostridium schauvoe, Cl. perfringens, Cl. septicum, Cl. hystoliticum, Cl.
oedematins, Cl. botulinum, Cl. tetani)
Материальное обеспечение: труп морской свинки, павшей от эмкара. Рост
возбудителя эмкара на МППБ (среда Кита-Тароццы), среде Вильсона Блера,
молоке, кровяном агаре, трубках Виньона. Готовые мазки-отпечатки из
органов (Cl.schauvoe , Cl.septicum) и препараты из культур (Cl.tetani,
Cl.botulinum). МППБ и пастеровские пипетки для посевов из органов. Белые
мыши с картиной столбняка и ботулизма.
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики; схема
бактериологической диагностики эмкара; рост на кровяном агаре;
дифференциация возбудителя эмкара Cl. schauvoe от Cl.septicum.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.201-218..
Целевая установка: усвоить правила отбора и пересылки патологического
материала
для
бактериологического
исследования,
изучить
морфологические,
культурально-биохимические
свойства
названных
возбудителей, особенности дифференциации.
Основные вопросы:
1. Общая характеристика патогенных анаэробов (род Clostridium, род
Fusobacterium). Питательные среды и условия культивирования
анаэробов.
2. Патологический материал, направляемый для бактериологического
исследования на эмкар, злокачественный отек, ботулизм, столбняк.
3. Возбудители злокачественного отека, их отличительные особенности.
4. Характеристика Cl.schauvoe , его дифференциация от Cl.septicum.
5. Токсинообразование. Значение и постановка реакции нейтрализации в
определении токсинов, образуемых патогенными клостридиями.
6. Принципы получения, контроля и применения вакцин и сывороток при
эмкаре и злокачественном отеке. Ассоциированные вакцины.
7. Возбудители столбняка и ботулизма, их свойства и отличительные
особенности. Характеристика анатоксина и антитоксина.
8. Составить
схему
бактериологического
диагноза
эмкара,
злокачественного отека, столбняка и ботулизма.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы - акцентирование внимания на синергидности анаэробных
возбудителей, изучение особенностей патогенеза и бактериологической
диагностики анаэробных инфекций. Демонстрация вскрытия трупа морской
свинки, посевов из органов, приготовления мазков-отпечатков. Знакомство с
биопрепаратами, особенности получения, контроля и применения.
Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 114 из 169
Задание 1. Микроскопировать готовые мазки – отпечатки из органов от
животных павших от эмкара и злокачественного отека. Изучить морфологию
возбудителей (Cl.schauvoe , Cl.septicum), тинкториальные свойства,
зарисовать.
Задание 2. Изучить морфологические свойства возбудителей (Cl.tetani,
Cl.botulinum) в готовых мазках, окрашенных по методу Грама. Обратить
внимание на сходство и различие возбудителей. Зарисовать.
По результатам оформить протокол.
ТЕМА № 27
Патогенные микобактерии. Возбудитель туберкулеза
(Mycobacterium tuberculosis, M. bovis, M. avium)
Возбудитель паратуберкулеза
(Mycobacterium paratuberculosis)
Материальное обеспечение: для демонстрации - культура Micobacterium
bovis и 2-3 культуры представителей атипичных, сапрофитных микобактерий
на средах: Левенштейна-Йенсена, картофеле с глицерином, МПБ с
глицерином. Каждому студенту два мазка из культуры и патматериала,
краски и реактивы для окраски по Циль-Нильсену. Аллергены –
альттуберкулин, ППД-туберкулин для млекопитающих, ППД-туберкулин для
птиц, КАМ-туберкулин; вакцина – БЦЖ (ВCG).
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики; схема
бактериологической диагностики туберкулеза; морфология микобактерий;
окраска по методу Циля-Нильсена; классификация микобактерий по Раньону;
дифференциальная диагностика микобактерий.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.218-227.
Целевая установка: ознакомиться с правилами взятия проб материала, его
упаковки и пересылки в лабораторию, с методами обработки (подготовки)
патматериала для бактериологического исследования. Усвоить методы
бактериологического анализа поступившего в лабораторию материала.
Разобрать аллергический метод диагностики туберкулеза.
Основные вопросы:
1. Классификация микобактерий
2. Правила взятия патологического материала, его упаковки и пересылки
в лабораторию.
3. Морфологические, тинкториальные свойства
Mycobacterium
tuberculosis, M. bovis, M. avium
4. Питательные
среды для культивирования
микобактерий,
культуральные свойства и идентификация микобактерий туберкулеза.
5. Дифференциация вирулентных микобактерий от кислотоустойчивых
сапрофитов и атипичных форм туберкулезных микобактерий.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 115 из 169
6. Особенности биопробы при диагностике туберкулеза и как
дифференцирующий критерий от возбудителя паратуберкулеза.
7. Методы диагностики туберкулеза.
8. Морфологические, тинкториальные и биологические особенности
возбудителя паратуберкулеза, его дифференциация от возбудителя
туберкулеза.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы. Изучение классификации рода микобактерий. Акцентирование
внимания на роли отдельных представителей рода в патологии человека и
животных, птиц. Изучение культурально-морфологических, тинкториальных,
биохимических
свойств
патогенных,
атипичных,
сапрофитных
микобактерий. Объяснение причины кислото-спиртоустойчивости, сравнение
морфологических особенностей. Полиморфизм микобактерий. L-формы
микобактерий, их роль в патологии. Разбор принципов бактериологичекой и
аллергической диагностики туберкулеза. Разобрать принципы приготовления
аллергенов – туберкулинов, вакцин при туберкулезе. Акцентирование
внимания на парааллергических реакциях при аллергическом диагнозе.
Ознакомление с порядком проведения бактериологического исследования
(по таблице).
Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1.
Изучить характер роста микобактерий туберкулеза на плотных и
жидких питательных средах.
2.
Микроскопировать два готовых препарата, окрашенных по методу
Грамма и по методу Циля-Нильсена. Изучить морфологию,
тинкториальные свойства. Зарисовать.
3.
Описать аллергены. Порядок их применения. Учет реакций.
ТЕМА № 28
Возбудители лептоспироза (Leptospira interrogans). Кампилобактеры
(Campilobacter fetus, Campilobacter jejuni, Campilobacter sputorum,
Campilobacter fecalis )
Материальное обеспечение: культура лептоспир на среде Уленгута и
Терских. Культура вибрионов на полужидких средах. Готовые мазки
лептоспир, окрашенных по методу Гимза с тушью. Демонстрационный
препарат с живыми лептоспирами в микроскопе с темным полем. Вакцины,
сыворотки, антигены при лептоспирозе и кампилобактериозе.
Учебные пособия:
Таблицы:
общая схема бактериологической диагностики; схема
бактериологической диагностики лептоспироза и кампилобактериоза.
Морфология лептоспир. Строение лептоспир.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.229-235, 235-240.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 116 из 169
Целевая установка: ознакомиться с правилами взятия патматериала, его
пересылкой в лабораторию. Изучить морфологические, культуральные и
биологические свойства возбудителей. Усвоить методы бактериологического
и серологического исследований при диагностике лептоспироза и
кампилобактериоза
Основные вопросы:
1. Правила взятия и пересылки патологического материала для
микробиологической
диагностики
лептоспироза
и
кампилобактериоза.
2. Возбудитель лептоспироза, его морфологическая, тинкториальная и
культуральная характеристика.
3. Особенности культивирования и микроскопирования лептоспир.
4. Методы серологической диагностики лептоспироза (РА, РМА),
кампилобактериоза, серологической идентификации лептоспир.
5. Антиген для серологических исследований при лептоспирозе.
6. Латинское
название
возбудителя
кампилобактериоза,
его
морфологические и культуральные особенности.
7. Вакцины,
сыворотки,
применяемые
при
лептоспирозе
и
кампилобактериозе..
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы.
Разобрать
свойства
и
распространение
извитых
форм
микроорганизмов. Отразить их патогенетическую роль в патологии человека
и животных, а также методы дифференциации патогенных вибрионов и
лептоспир
от
сапрофитов.
Ознакомиться
с
культуральными,
морфологическими,
тинкториальными,
биохимическими
свойствами
патогенных вибрионов и вызываемыми ими заболеваниями. Обратить
внимание
на
дифференциацию
вибрионов.
Разобрать
схему
бактериологического
и серологического диагноза. Ознакомиться с
основными свойствами патогенных серовариантов лептоспир и методами их
индикации (РМА). Остановиться на особенностях взятия патологического
материала и его исследования. Проведение аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1.
Микроскопировать
готовые
бактериальные
препараты,
приготовленные из чистых культур лептоспир и кампилобактеров.
Изучить морфологию. Зарисовать.
2.
Поставить РМА с культурой лептоспир и двумя сыворотками
различных антигенных групп (в пластинах). Поместить в термостат
на 60 мин при 37 град.С. Учесть результат, вынув пластину из
термостата. Из лунки каждого разведения сыворотки приготовить
препарат «раздавленная капля». Исследование начинать с
наибольшего
разведения
сыворотки
(наименьшей
его
концентрацией), микроскопировать в «темном поле». Видимую
картину записать в тетради.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 117 из 169
Ознакомиться с биопрепаратами. Дать краткую характеристику
ТЕМА № 29
Возбудители дерматомикозов и микотоксикозов
(Trichophyton, Microsporum, Favus, Aspergillus, Mucor)
Материальное обеспечение: культуры грибов( Trichophyton verrucosum,
Microsporum canis,Candida albicans) на средах Сабуро (Чапека или суслоагаре), патологический материал от животных, больных трихофитией и
микроспорией, препаровальные иглы, микологические крючки, предметные и
покровные стекла. Готовые бальзамированные препараты. Биопрепараты.
Учебные пособия:
Таблицы:
морфология грибов, схема бактериологической
диагностики микозов.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.248-258.
Целевая установка: ознакомить студентов с правилами взятия материала
для исследования и методами микологического исследования на
дерматомикозы (трихофития, микроспория), кандидамикоз и плесневые
микозы.
Основные вопросы:
1. Распространение патогенных грибов в природе и характеристика
заболеваний, вызываемых патогенными грибами.
2. Патологический материал для исследования на дерматомикозы.
3. Отличительные особенности разных родов дерматомицетов.
4. Возбудители кандидамикоза, аспергиллеза, их культивирование.
5. Патогенные свойства грибов рода Candida.
6. Принципы диагностики микозов.
7. Иммунитет при микозах. Средства специфической профилактики, их
характеристика.
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы. Знакомство с морфологическими свойствами возбудителей
трихофитии и микроспории. Изучение демонстрационных препаратов.
Исследование
культуральных
свойств
возбудителей.
Изучение
биопрепаратов,
применяемых
при
дерматомикозах.
Изучение
морфологических и культуральных свойств возбудителя кандидамикоза.
Изучение схемы исследований при микозах. Акцентировать внимание на
особенности взятия материала для исследования. Проведение аудиторной
контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1.
Приготовить препараты методом «раздавленная капля» из
патматериала и культур грибов, вызывающих дерматомикозы.
Микроскопировать под объективом 40. Изучить морфологию.
Описать и зарисовать.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
2.
Редакция .№1
По готовому препарату изучить
кандидамикоза. Описать, зарисовать.
стр. 118 из 169
морфологию
возбудителя
Возбудители микотоксикозов
(Stachybotrys alternans, Fusarium, Dendrodochium toxinum, Claviceps
purpurea)
Материальное обеспечение: культуры грибов родов Stachybotrys, Fusarium,
Dendrodochium на агаре Чапека в чашках Петри; препаровальные иглы,
предметные и покровные стекла.
Учебные пособия:
Таблицы:
морфология грибов, схема бактериологической
диагностики микотоксикозов.
Учебники: Костенко Т.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии и
иммунологии. – М.,1989.- С.258-267.
Целевая установка: ознакомиться с правилами взятия материала для
исследования и методами лабораторной диагностики микотоксикозов.
Основные вопросы:
1. Основные отличия микозов от микотоксикозов.
2. Материал и порядок его исследования при микотоксикозах.
3. Возбудители микотоксикозов, их морфологические, культуральные
свойства.
4. Методы определения токсичности грибов.
5. Основные питательные среды для культивирования грибов при
диагностике микозов и микотоксикозов.
(Все вопросы освещаются в тетради по СРС №14)
Краткое содержание занятия: назначение дежурного, закрепление
теоретического материала прошлого занятия, беседа по основным вопросам
темы. Знакомство с морфологическими свойствами возбудителей
микотоксикозов
(стахиоботриотоксикоза,
дендротохиотоксикоза,
фузариотоксикоза). Изучение демонстрационных препаратов. Исследование
культуральных свойств возбудителей. Изучение схемы исследований при
микотоксикозах.
Уяснить
сущность
токсико-биологического,
микологического и физико-химического исследования. Акцентировать
внимание на особенности взятия материала для исследования. Проведение
аудиторной контрольной работы.
Самостоятельная работа: ход выполнения АКР.
1. Приготовить из культур грибов препараты «раздавленная капля»,
изучить под микроскопом и зарисовать в тетради морфологию
грибов.
2. Ознакомиться со свойствами грибов родов Stachybotrys, Fusarium,
Dendrodochium.
ТЕМА № 30
Итоговое занятие. Компьютерное тестирование
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 119 из 169
Вопросы коллоквиума
1. Возбудитель мыта. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
2. Возбудитель инфекционного мастита. Морфология и свойства
возбудителя. Схема диагностики заболевания.
3. Возбудитель диплококковой септицемии. Морфология и свойства
возбудителя. Схема диагностики заболевания
4. Возбудитель
колибактериоза.
Морфология
и
свойства
возбудителя. Схема диагностики заболевания.
5. Возбудители сальмонеллезов. Морфология и свойства возбудителя.
Схема диагностики заболевания.
6. Возбудитель иерсиниоза. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
7. Возбудитель рожи свиней. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
8. Возбудитель листериоза. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
9. Возбудители пастереллеза млекопитающих. Морфология и свойства
возбудителей. Схема диагностики заболевания.
10.микроорганизмов.
11. Возбудитель пастереллеза (холеры) кур. Морфология и свойства
возбудителя. Схема диагностики заболевания.
12.Возбудитель туляремии. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
13.Возбудители бруцеллеза. Морфология и свойства возбудителей. Схема
диагностики заболевания.
14.Возбудитель инфекционного эпидидимита баранов. Морфология и
свойства возбудителя. Схема диагностики заболевания.
15.Возбудитель сибирской язвы. Морфология и свойства возбудителей.
Схема диагностики заболевания.
16.Возбудители злокачественного отека. Морфология и свойства
возбудителей. Схема диагностики заболевания.
17.Возбудитель эмфизематозного карбункула. Морфология и свойства
возбудителя. Схема диагностики заболевания.
18.Возбудитель столбняка. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
19.Возбудитель ботулизма. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
20.Возбудитель некробактериоза. Морфология и свойства возбудителя.
Схема диагностики заболевания.
21.Возбудитель анаэробной энтеротоксемии овей и коз. Морфология и
свойства возбудителя. Схема диагностики заболевания.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 120 из 169
22.Возбудитель сапа. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
23.Возбудители туберкулеза млекопитающих. Морфология и свойства
возбудителей. Схема диагностики заболевания.
24.Возбудитель туберкулеза птиц. Морфология и свойства возбудителя.
Схема диагностики заболевания.
25.Возбудитель паратуберкулезного энтерита крупного рогатого скота.
Морфология и свойства возбудителя. Схема диагностики заболевания.
26.Возбудитель лептоспироза. Морфология и свойства возбудителя. Схема
диагностики заболевания.
27. Возбудители дерматомикозов и микотоксикозов. Морфология и
свойства возбудителя. Схема диагностики заболевания.
4 Самостоятельная работа студента
Содержание самостоятельной работы студентов (СРС)
№
тем
ы
1
Наименование
темы СРС
Содержание СРС
2
Особенности
морфологии
плесневых
грибов,
дрожжей,
актиномицет,
риккетсий,
хламидий,
микоплазм)
Морфология
и
плесневых грибов
пеницилл, мукор),
актиномицет,
хламидий,
Величина, единицы
Методы выявления
3
Влияние
физических,
химических,
биологических
факторов
на
Действие
физических 10
(температуры,
гидростатического
,
осмотического давления, лучей
света, ультразвука) факторов на
История
Ученые
развития
микробиологии
и вирусологии
К-во
Час.
СРС
7,5
строение 10
(аспергилл,
дрожжей,
риккетсий,
микоплазм.
измерения.
Литерату
ра
Ветеринар
ная
микробиол
огия
и
иммуноло
гия /Под
ред.проф.
Н.А.Радчу
ка.М.,1991.С.26,2731.
С.78-94.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
микроорганизм
ы
4
5
Экология
микроорганизм
ов
Биопрепараты,
применяемые
для
диагностики,
профилактики
и
лечения
инфекционных
заболеваний
Редакция .№1
стр. 121 из 169
микроорганизмы.
Действие
химических
факторов
на
микроорганизмы. Механизмы
действия
физических
и
химических факторов. Действие
антибиотиков (классификация
антибиотиков,
устойчивость
микробов
к
антибиотикам,
применение антибиотиков) и
бактериофагов (строение фагов,
основные
свойства
фагов,
взаимодействие
фага
с
микробной клеткой, применение
бактериофагов)
на
микроорганизмы
Микрофлора
почвы.
воды, 10
воздуха, тела животных.
Характеристика
вакцин, 10
сывороток,
бактериофагов.
Диагностические
иммунные
сыворотки и иммуноглобулины.
Диагностические антигены и
аллергены.
6
Микрофлора
растительных
кормов
и
кормов
животного
происхождения.
Ветеринарносанитарная
оценка
Микрофлора
растительных 10
кормов и кормов животного
происхождения. Ветеринарносанитарная оценка
7
Возбудитель
туляремии
Общая
характеристика 10
заболевания
Культуральноморфологические
и
тинкториальные
свойства
возбудителя Francisella tularensis
67,5
Итого
С.55-68.
С.180-186.
С.182-184.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 122 из 169
Вопросы для экзамена
1. Основные формы бактерий. Размеры и единицы измерения.
2. Основные структурные компоненты бактериальной клетки:
оболочка, цитоплазма, нуклеоид.
3. Значение микроорганизмов в патологии животных, использование
полезных микроорганизмов в животноводстве, промышленности.
4. Строение актиномицет и плесневых грибов, их полезные свойства
и значение в патологии животных.
5. Принципы классификации и таксономии микроорганизмов.
6. Химический состав микроорганизмов
7. Ферменты
микроорганизмов
и
их
классификация
по
специфической активности.
8. Потребность прокариот в питательных веществах. Автотрофный и
гетеротрофный типы питания.
9. Механизм питания микробной клетки.
10.Классификация микроорганизмов по типу дыхания. Биологическая
сущность.
11.Понятие о росте и размножении бактерий. Бесполое и половое
размножение.
12. Питательные среды и требования предъявляемые к ним. Условия
культивирования микроорганизмов.
13. Фазы развития бактериальной популяции.
14. Способы размножения плесневых грибов и дрожжей.
15. Фенотипическая
изменчивость
бактерий
(модификация,
диссоциация).
16. Генотипическая изменчивость бактерий. Спонтанные и
индуцированные мутации.
17. Рекомбинационная изменчивость: трансформация, трансдукция,
конъюгация.
18. Действие на микроорганизмы высоких и низких температур.
19. Действие химических веществ на микроорганизмы. Понятие о
бактериостатическом и бактерицидном действии.
20. Тест - микробы, используемые для оценки качества
обеззараживания животноводческих объектов.
21. Микроорганизмы продуценты антибиотиков. Механизм действия
их на бактериальную клетку.
22. Антибиотикорезистентность микробов, методы определения
чувствительности к антибиотикам.
23. Микрофлора почвы. Патогенные микроорганизмы в почве.
24. Микрофлора воды. Патогенные бактерии в воде. Методика
обнаружения.
25. Микрофлора воздуха животноводческих помещений
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 123 из 169
26. Микрофлора тела животных. Понятие о нормальной микрофлоре
и ее отрицательной функции на макроорганизм.
27. Микрофлора молока и молочных продуктов. Патогенные
микроорганизмы в молоке и способы его обеззараживания.
28. Микрофлора преджелудков жвачных и ее участие в процессе
пищеварения.
29. Участие микроорганизмов в превращении азота: аммонификация,
нитрификация.
30. Характеристика спиртового, уксуснокислого, масляно-кислого
брожений и их возбудителей.
31. Роль микроорганизмов в превращении фосфора, серы, железа.
32. Типы взаимоотношений макро- и микроорганизмов.
33. Пути
внедрения,
локализация
микроорганизмов
в
макроорганизме.
34. Понятие о сепсисе, бактеремии, токсемии.
35. Понятие о микробоносительстве, его значении в инфекционном
процессе.
36. Понятие о патогенности и вирулентности микробов. Методы
ослабления и усиления вирулентности.
37. Определение понятий иммунитет, иммунная система. Их
функции.
38. Формы иммунного реагирования: образование антител и антигенреактивных клеток.
39. Антигены бактериальной клетки, основные свойства.
40. Антитела, природа и функции антител.
41.Реакции антиген-антитело, используемые для идентификации
микробов и диагностики инфекционных болезней.
42.Виды иммунитета.
43. Понятие о естественной резистентности макроорганизма.
Факторы резистентности.
44. Возрастные особенности иммунологического статуса животных.
45. Биопрепараты. Биотехнологические основы производства.
Принципы контроля.
46. Стафилококки. Патогенные свойства, устойчивость.
47. Возбудитель
мыта.
Бактериологическая
диагностика.
Дифференциация.
48. Возбудитель диплококковой инфекции, морфологические
свойства, патогенность, биопрепараты.
49. Возбудитель рожи свиней. Основные морфологические и
бактериологические свойства. Биопрепараты.
50. Возбудитель листериоза. Патогенные свойства. Устойчивость к
низкой температуре. Дифференциация от возбудителя рожи
свиней. Биопрепараты.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 124 из 169
51. Возбудитель туберкулеза животных, общая характеристика рода
микобактерий.
52. Лабораторная диагностика туберкулеза животных.
53. Изменчивость микобактерий. Атипичные микобактерии и их роль
в патологии животных.
54. Аллергическая диагностика туберкулеза, аллергены и их
характеристика.
55. Возбудитель актиномикоза.
56. Возбудитель сибирской язвы. Бактериологическая диагностика,
дифференциация от антрокоидов. Биопрепараты.
57. Возбудитель
эмкара.
Характеристика
возбудителя.
Биопрепараты.
58. Возбудители злокачественного отека.
59. Общая характеристика клостридиозов. Биопрепараты.
60. Возбудитель столбняка. Биопрепараты.
61. Возбудитель некробактериоза. Бактериологическая диагностика.
62. Возбудитель ботулизма. Токсинообразование. Особенности
бактериологической диагностики. Биопрепараты.
63. Возбудитель колибактериоза, основные биологические свойства.
Бактериологическая диагностика, биопрепараты.
64. Возбудители
сальмонеллеза
телят.
Бактериологическая
диагностика. Принципы дифференциации. Биопрепараты.
65. Возбудитель пуллороза птиц, серологическая диагностика.
Биопрепараты.
66. Возбудитель кампилобактериоза, особенности морфологии и
культивирования.
67. Возбудитель
лептоспироза.
Особенности
морфологии.
Серологическая диагностика.
68. Возбудитель
пастереллеза.
Лабораторная
диагностика.
Биопрепараты.
69.Возбудитель бруцеллеза. Виды бруцелл, морфология и
особенности культивирования.
70. Серологическая и аллергическая диагностика бруцеллеза
животных, иммунитет и средства активной профилактики.
71. Возбудитель микоплазмозов животных, особенности морфологии.
Отличие микоплазм от Л – форм бактерий.
72. Патогенные риккетсии и хламидии, бактериологические
особенности.
73. Аспергиллез, особенности диагностики грибковых заболеваний.
74. Возбудители микозов, вызываемых грибами. Материал для
лабораторных исследований, диагностика и специфическая
профилактика.
75. Микотоксикозы, характеристика наиболее известных токсикозов.
76. Микробиологические основы консервирования кормов.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 125 из 169
77. Основоположники микробиологии (Л.Пастер, Р.
Мечников, Д. Ивановский)
78. Ветеринарная микробиология и ее задачи.
79. Характеристика вакцин, применяемых в ветеринарии.
Кох,
И.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ
Для компьютерного тестирования
Морфология и систематика микроорганизмов
1. Кто первым увидел и описал микроорганизмы?
А) Гиппократ
В) Л. Пастер
С) А. Левенгук
D) Р.Кох
Е) И.И. Мечников
2. Кто был основоположником физиологического этапа в развитии
А) Гиппократ
В) Л. Пастер
С) А. Левенгук
D) Д.И. Ивановский
Е) И.И. Мечников
микробиологии?
3.Назовите имя ученого доказавшего, что причиной брожения и гниения являются микроорганизмы:
А) Р.Кох
В) Л. Пастер
С) С.Н. Виноградский
D) Д.И. Ивановский
Е) И.И. Мечников
4. Основоположник почвенной микробиологии:
А) Р.Кох
В) Л. Пастер
С) С.Н. Виноградский
D) Д.И. Ивановский
Е) И.И. Мечников
5. Явление фагоцитоза открыл:
А) П.Эрлих
В) Л. Пастер
С) Д. Ивановский
D) И. Мечников
Е) Н. Гамалея
6. Cтрогие внутриклеточные паразиты:
А) бациллы
В) риккетсии
C) актиномицеты
D) дрожжи
Е) стрептококки
7. Кем был открыт вирус?
А) Л.Пастером
В) Л. Пастером
С) Д. Ивановским
D) И. Мечниковым
Е) Р.Кохом
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
8.Три основные группы бактерий, подразделяющихся по форме
А) монококки, стрептококки, стафилококки
В) кокки, бактерии, вибрионы
С) бактерии, бациллы, клостридии
D) вибрионы, спириллы, спирохеты
Е) стрептококки, бактерии, спириллы
9.К шаровидным формам бактерий относят:
А) клостридии
В) сарцины
С) вибрионы
D) бациллы
Е) стрептобактерии
10.Палочковидные бактерии:
А) сарцины
В) вибрионы
С) клостридии
D) аспергиллы
Е) актиномицеты
11.Извитые формы бактерий:
А) сарцины
В) вибрионы
С) клостридии
D) аспергиллы
Е) актиномицеты
12.Кокки, располагающиеся цепочкой:
А) диплобактерии
В) стретобациллы
С) стрептококки
D) стафилококки
Е) сарцины
13.Бактерии располагающиеся цепочкой:
А) диплобактерии
В) стрептобациллы
С) стрептококки
D) стафилококки
Е) сарцины
14.Микроорганизмы, располагающиеся в виде грозди винограда:
А) стрептобактерии
В) стрептобациллы
С) стрептококки
D) стафилококки
Е) сарцины
15. Сарцины - микроорганизмы, располагающиеся после деления:
А) по одной клетке
В) по две клетки
С) цепочкой
D) пакетами
Е) скоплениями клеток
16.Стафилококки это клетки, располагающиеся после деления:
А) по одной
В) по две
стр. 126 из 169
клеток:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
С) в виде цепочки
D) пакетами
Е) скоплениями
17.Стрептококки расположены:
А) по одной клетке
В) по две клетки
С) в виде цепочки
D) пакетами
Е) скоплениями клеток
18.Попарно соединенные кокки:
А) тетракокки
В) диплобактерии
С) диплобациллы
D) диплококки
Е) стрептококки
19.Палочки с булавовидными утолщениями на концах:
А) бактерии
В) бациллы
С) коринебактерии
D) клостридии
Е) фузобактерии
20.Спирохеты имеют:
А) 5 завитков
В) более 5 завитков
С) менее 5 завитков
D) 1 завиток
Е) 2 завитка
21.К извитым формам относят:
А) сарцины
В) стрептококки
С) стрептобактерии
D) спириллы
Е) стафилококки
22.Вибрионы по форме напоминают:
А) точку
В) запятую
С) двоеточие
D) две запятые
Е) две точки
23.Назовите микроскопический гриб:
А) микрококки
В) спирохеты
С) сарцины
D) клостридии
Е) пеницилл
24.Леечной плесенью называют:
А) аспергилл
В) пеницилл
С) мукор
D) актиномицеты
Е) молочную плесень
25.Кистевидной плесенью называют:
А) аспергилл
стр. 127 из 169
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
В) пеницилл
С) мукор
D) актиномицеты
Е) молочную плесень
26.Основной способ размножения у плесневых грибов:
А) прямое деление
В) почкование
С) спорообразование
D) конъюгация
Е) имплантация
27.Бактерии с пучком жгутиков на одном полюсе:
А) Монотрихи
В) Лофотрихи
С) Перитрихи
D) Амфитрихи
Е) Атрихии
2828. Бактерии со жгутиками по всей поверхности:
А) Монотрихи
В) Лофотрихи
С) Перитрихи
D) Амфитрихи
Е) Атрихии
29.Величина бактерий измеряется:
А) см
В) мм
С) нм
D) мкм
Е) Аْ
30.Бактерии без жгутиков:
А) Монотрихи
В) Лофотрихи
С) Перитрихи
D) Амфитрихи
Е) Атрихии
31.Головчатая плесень:
А) аспергилл
В) пеницилл
С) мукор
D) актиномицеты
Е) молочную плесень
32.Микроорганизмы, образующие споры:
А) стрептобациллы
В) стрептобактерии
С) диплобактерии
D) спирохеты
Е) стрептококки
33.Бактерии с пучками жгутиков на двух полюсах:
А) Монотрихи
В) Лофотрихи
С) Перитрихи
D) Амфитрихи
Е) Атрихии
стр. 128 из 169
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 129 из 169
34.Какую функцию выполняет спора у бактерий?
А) размножения
В) защиты от неблагоприятных факторов внешней среды
С) защиты от иммунных факторов макроорганизма
D) вирулентности
Е) патогенности
35.Бактерии, имеющие один жгутик:
А) лофотрихи
В) амфитрихи
С) монотрихи
D) перитрихи
Е) атрихии
36.Функция споры у микроскопических грибов:
А) размножения
В) защиты от неблагоприятных факторов внешней среды;
С) защиты от иммунных факторов макроорганизма;
D) вирулентности
Е) патогенности
37.Структурный основной элемент плесневых грибов:
А) капсула
В) пили
С) пептидогликан
D) эндоспора
Е) мицелий
38. Укажите признак общий для актиномицетов и плесневых грибов:
А) наличие ворсинок
В) наличие жгутиков
С) отсутствие сформированного ядра
D) наличие мицелия
Е) отсутствие мицелия
39.Признак, общий для бактерий и актиномицет:
А) наличие ворсинок
В) наличие жгутиков
С) отсутствие сформированного ядра
D) наличие мицелия
Е) отсутствие мицелия
40. Какой структурный компонент клетки имеется у дрожжей в отличие от
А) клеточная стенка
В) капсула
С) оформленное ядро
D) нуклеоид
Е) ворсинки
$$$41
Жгутики бактерий образованы белком:
А) пилином
В) пептидогликаном
С) флагелином
D) желатиной
Е) нуклеопротеидом
$$$42
В состав фимбрий бактерий входит белок:
А) пилин
бактерий?
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 130 из 169
В) пептидогликан
С) флагелин
D) желатин
Е) нуклеопротеид
$$$43
Под таксисом понимают способность бактерий:
А) расщеплять сахара
В) к направленным формам движения
С) к антагонизму
D) расщеплять белки
С) ориентироваться в магнитном поле
$$$44
В каком процессе принимают участие секс-пили?
А) трансформации
В) конъюгации
С) трансдукции
D) окрашивания
Е) в обмене веществ
$$$45
Подвижность бактерий определяют:
А) посевом на МПА
В) окрашиванием по методу Грама
С) методом раздавленная капля
D) пробой на редуктазу
Е) посевом на агар Эндо
$$$46
Основная номенклатурная единица бактерий:
А) класс
В) род
С) вид
D) семейство
Е) порядок
$$$47
Наука, занимающаяся вопросами классификации, номенклатуры и идентификации микроорганизмов:
А) таксономия
В) микробиология
С) биология
D) биотехнология
Е) морфология
$$$48
Отнесение микроорганизмов к определенному таксону (виду) на основании конкретных признаков,
называется:
А) идентификация
В) дифференциация
С) классификация
D) нитрификация
Е) агглютинация
$$$49
Совокупность микроорганизмов, имеющих единый генотип, сходных по морфологическим
биологическим свойствам, способных вызывать специфические процессы, определяется как:
А) клон
В) вид
С) смешанная культура
D) чистая культура
и
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 131 из 169
Е) штамм
$$$50
Культура, полученная из одной клетки:
А) клон
В) вид
С) смешанная культура
D) чистая культура
Е) штамм
$$$51
Микроорганизмы, выращенные на питательных средах в условиях лаборатории, называют:
А) клоном
В) видом
С) смешанной культурой
D) культурой
Е) штаммом
$$$52
Какая таксономическая категория следует за царством (regnum)?
А) вид (species)
В) род (genus)
С) семейство (familia)
D) секция (section)
Е) отдел (division)
$$$53
Какая таксономическая категория следует за секцией (section)?
А) вид (species)
В) род (genus)
С) семейство (familia)
D) класс (classis)
Е) отдел (division)
$$$54
Какая таксономическая категория следует за отделом (division)?
А) вид (species)
В) род (genus)
С) семейство (familia)
D) секция (section)
Е) отдел (division
$$$55
Какая таксономическая категория следует за семейством (familia) ?
А) вид (species)
В) род (genus)
С) порядок (ordo)
D) секция (section)
Е) отдел (division)
$$$56
Какая таксономическая категория следует за классом (genus)?
А) вид (species)
В) порядок (ordo)
С) семейство (familia)
D) секция (section)
Е) отдел (division)
$$$57
Какая таксономическая категория следует за порядком (ordo)?
А) вид (species)
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 132 из 169
В) род (genus)
С) семейство (familia)
D) секция (section)
Е) отдел (division)
$$$58
Какая таксономическая категория следует за родом (genus)?
А) вид (species)
В) порядок (ordo)
С) семейство (familia)
D) секция (section)
Е) отдел (division)
$$$59
Смесь неоднородных микроорганизмов, выделенных из исследуемого материала, называют:
А) клоном
В) видом
С) смешанной культурой
D) культурой
Е) штаммом
$$$60
Культура одного и того же вида, выделенная из разных объектов и отличающаяся незначительными
изменениями свойств, называется:
А) клоном
В) чистой культурой
С) смешанной культурой
D) культурой
Е) штаммом
$$$61
Культуру микроорганизмов, полученную из особей одного вида, называют:
А) клоном
В) видом
С) смешанной культурой
D) культурой
Е) чистой культурой
$$$62
Особей одного вида, отличающихся по антигенным признакам, называют:
А) сероваром
В) биоваром
С) фаговаром
D) патоваром
Е) подвидом
$$$63
Наиболее распространенный способ вегетативного размножения дрожжей:
А) деление
В) спорообразование
С) конъюгация
D) почкование
Е) фрагментация
$$$64
Основу клеточной стенки микробной клетки составляет:
А) капсула
В) полипептид
С) липопротеид
D) пептидогликан
Е) нуклеопротеид
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 133 из 169
$$$65
Постоянные элементы микробной клетки:
А) капсула, спора, нуклеоид
В) оболочка, цитоплазматическая мембрана
С) спора, жгутики, капсула
D) оболочка, цитоплазма, нуклеоид
Е) рибосома, плазмиды, цитоплазма
$$$66
Назовите непостоянные элементы микробной клетки:
А) капсула, спора, нуклеоид
В) оболочка, цитоплазматическая мембрана
С) спора, жгутики, капсула
D) оболочка, цитоплазма, нуклеоид
Е) рибосома, плазмиды, цитоплазма
$$$67
Непостоянный компонент микробной клетки:
А) клеточная стенка
В) цитоплазма
С) нуклеоид
D) эндоспора
Е) рибосома
$$$68
Простой способ окрашивания препарата позволяет определить:
А) капсулу
В) строение
С) морфологию
D) тинкториальные свойства
Е) спору
$$$69
Какое явление лежит в основе окрашивания капсул?
А) протрава
В) метахромазия
С) серебрение по Морозову
D) люминесценция
Е) раздавленная капля
$$$70
Как называется подготовка препарата в процессе окрашивания спор?
А) стерилизация
В) дезинфекция
С) метахромазия
D) протрава
Е) фламбирование
$$$71
Различное окрашивание грамположительных и грамотрицательных бактерий обусловлено:
А) строением клеточной стенки
В) строением внутренних структур клетки
С) размером клетки
D) содержанием углеводов
Е) наличием капсулы
$$$72C
Чем отличаются споры от вегетативных клеток?
А) особым составом белков клеточной стенки
В) органоидами
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
С) малым количеством свободной воды в цитоплазме
D) малым количеством связанной воды в цитоплазме
Е) малым количеством свободной воды в клеточной стенке
$$$73
Чем обусловлена термоустойчивость спор?
А) особым составом белков клеточной стенки
В) появлением дипикалиновой кислоты в виде Са-хелата
С) особым составом липидов клеточной стенки
D) малым количеством свободной воды в цитоплазме
Е) образованием термоустойчивых ферментов
Микроскопические грибы, дрожжи
$$$74
Максимальная длина дрожжевой клетки в мкм:
A) до 0,1
B) до 0,5
C) до 20
D) до 50
E) до 100
$$$75
Многоклеточные микроскопические грибы характеризуются:
A) наличием не септированного мицелия
B) наличием септированного мицелия
C) отсутствием мицелия
D) наличием спорангия
E) наличием спорангиеносцев
$$$76
Спорообразование у дрожжей означает:
A) образование ростовых веществ
B) образование ферментов
C) сохранение вида
D) движение
E) размножение
$$$77
Для одноклеточных микроскопических грибов характерно наличие:
A) конидиеносцев
B) стеригм
C) не септированного мицелия
D) септированного мицелия
E) конидиальной головки
$$$78
В состав клеточной стенки микроскопических грибов входит:
A) ацетилсалициловая кислота
B) молочная кислота
C) хитин
D) сера
E) муреин
$$$79
Роды Aspergillus, Penicillium относят к:
A) актиномицетам
B) низшим грибам
C) дрожжам
D) вирусам
E) высшим грибам
стр. 134 из 169
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 135 из 169
$$$80
Дрожжи являются:
A) мицелиальными
B) подвижными
C) одноклеточными
D) многоклеточными
E) септированными
$$$81
Дрожжевая клетка содержит:
A) муреин
B) жгутики
C) дифференцированное ядро
D) недифференцированное ядро
E) хлорофилл
$$$82
В основном дрожжи размножаются
A) конидиями
B) зооспорами
C) почкованием
D) делением мицелия
E) саморепродукцией
$$$83
Антибиотик грибного происхождения:
A) пенициллин
B) стрептомицин
C) грамицидин
D) лизоцин
E) тетрациклин
$$$84
В клеточной стенке эти грибы не содержат целлюлозу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) оомикоты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$82
В клеточной стенке эти грибы содержат хитин
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) оомикоты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$83
Грибы - паразиты хлебных злаков (головня, ржавчина) относятся к классу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) дейтеромицеты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$84
Аспергиллы относятся к классу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 136 из 169
C) дейтеромицеты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$85
Пенициллы относятся к классу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) дейтеромицеты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$86
Фузариум относится к классу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) дейтеромицеты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$87
Съедобные грибы сморчок и трюфель относятся к классу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) дейтеромицеты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
$$$88
Заболевание «Пьяный хлеб» вызывается грибами, относящимися к классу
A) аскомицеты
B) хитридиомицеты
C) дейтеромицеты
D) зигомицеты
E) базидиомицеты
Актиномицеты, микоплазмы, риккетсии
$$$89D
Микроорганизмы, не имеющие клеточной стенки, относятся к группе:
A) бактерий
B) риккетсий
C) дрожжей
D) микоплазм
E) микроскопических грибов
$$$90
Актиномицеты характеризуются наличием:
A) мицелия
B) базидиоспор
C) спорангия
D) конидий
E) жгутиков
$$$91
Актиномицеты являются продуцентами:
A) витаминов
B) гормонов
C) антибиотиков
D) ферментов
E) факторов роста
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 137 из 169
$$$92
Актиномицеты размножаются:
A) конидиями
B) аскоспорами
C) почкованием
D) фрагментацией мицелия
E) жгутиками
$$$93
Микроорганизмы, имеющие в своем составе до 40% липидов, относятся к группе:
A) бактерий
B) риккетсий
C) дрожжей
D) микоплазм
E) микроскопических грибов
$$$94
Риккетсии
A) образуют споры
B) подвижны
C) растут на искусственных питательных средах
D) облигатные внутриклеточные паразиты
E) имеют капсулу
$$$95
А) грамположительные бактерии
В) грамотрицательные бактерии
$$$96
Риккетсии являются возбудителем:
A) ящура
B) оспы
C) актиномикоза
D) гриппа
E) сыпного тифа
$$$97
Актиномицеты являются возбудителем:
A) ящура
B) оспы
C) актиномикоза
D) гриппа
E) сыпного тифа
$$$98
Антибиотик стрептомицин получен с помощью:
A) актиномицетов
B) микроскопических грибов
C) дрожжей
D) стрептококков
E) стафилококков
$$$99
Кто ввел бинарную номенклатуру?
A)Левенгук
B) Кирхер
C) Пастер
D) Линней
E) Кох.
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
$$$100
Прокариоты:
A) бактерии, актиномицеты
B) грибы, инфузории, амебы
C) грибы, водоросли, простейшие
D) простейшие
E) грибы.
$$$101
Эукариоты:
A) бактерий, актиномицеты
B) микоплазмы, хламидии
C) актиномицеты
D) водоросли, простейшие, грибы
E) спирохеты
$$$102
Как называется оболочка, отделяющая цитоплазму от клеточной стенки?
A) капсула
B) мембрана
C) спора
D) пили
E) белок
$$$103
Какие организмы изучает микология?
A) грибы
B) бактерии
C) водоросли
D) актиномицеты
E) вирусы
$$$104
Какие микробы окрашивают по методу Циль-Нильсена?
A) капсулообразующие
B) спорообразующие
C) кислотоустойчивые
D) имеющие жгутики
E) неподвижные
$$$105
Какие микробы окрашивают по методу Михина?
A) капсулообразующие
B) споробразующие
C) кислотоустойчивые
D) имеющих реснички
E) неподвижные
$$$106
Какие микробы окрашивают по методу Мюллера?
A) капсулообразующие
B) спорообразующие
C) кислотоустойчивые
D) имеющих жгутики
E) подвижные
$$$107
Какую функцию выполняют реснички:
A) прикрепления к субстратам
B) двигательную
стр. 138 из 169
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 139 из 169
C) образование белков
D) дыхательную
E) спорообразования
$$$108
Какие возбудители образуют друзы?
A) сальмонеллы
B) риккетсии
C) хламидии
D) грибы
E) актиномицеты
$$$109
Какими свойствами вирусы схожи с бактериями
А) вызывать заразные болезни
В) ростом на искусственных питательных средах
С) ростом на культуре клеток
D) размером
E) репродукцией
$$$110
Какие свойства объединяют вирусы и бактерии
А) инфекционность
В) размер
С) культивирование
D) форма
E) размножение
@@@ Физиология микроорганизмов
111.Основной компонент бактериальной клетки:
А) белки
В) углеводы
С) вода
D) жиры
Е) макроэлементы
112.Раздел микробиологии, изучающий химический состав, процессы питания, дыхания, рост и
размножение микроорганизмов:
А) морфология
В) физиология
С) генетика
D) селекция
Е) инфекция
113.Назовите ведущие органогены микробной клетки:
А) кислород, азот, углерод, фосфор
В) кислород, азот, натрий, углерод
С) кислород, азот, углерод, водород
D) кислород, фосфор, углерод, водород
Е) азот, углерод, водород
114. Вода в микробной клетке составляет:
А) 20%
В) 40%
С) 60%
D) 80%
Е) 100%
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 140 из 169
115. Сухое вещество в микробной клетке составляет:
А) 20%
В) 40%
С) 60%
D) 80%
Е) 100%
116.Ферменты, катализирующие окислительно-восстановительные реакции:
А) оксидоредуктазы
В) трансферазы
С) гидролазы
D) лиазы
Е) изомеразы
117.Ферменты, катализирующие перенос отдельных радикалов, частей молекул или целых атомных
группировок от одних соединений к другим:
А) оксидоредуктазы
В) трансферазы
С) гидролазы
D) лиазы
Е) изомеразы
118.Ферменты, катализирующие отщепление
образованием двойных связей:
А) оксидоредуктазы
В) трансферазы
С) гидролазы
D) лиазы
Е) изомеразы
от
субстратов
определенных
химических
групп
с
119.Ферменты, осуществляющие превращение органических соединений в их изомеры:
А) оксидоредуктазы
В) трансферазы
С) гидролазы
D) лиазы
Е) изомеразы
120.Ферменты, катализирующие реакции расщепления и синтеза сложных соединений с участием воды:
А) оксидоредуктазы
В) трансферазы
С) гидролазы
D) лиазы
Е) изомеразы
121.Ферменты, катализирующие синтез сложных органических соединений из простых веществ,
называются:
А) оксидоредуктазы
В) трансферазы
С) гидролазы
D) лигазы
Е) изомеразы
122. Оптимальная температура для действия ферментов:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
А) 30-40ْ
В) 40-50ْ
С) 60-70ْ
D) 70-80ْ
Е) 20-30ْ
Редакция .№1
стр. 141 из 169
С
С
C
С
С
123.Сахаролитические свойства бактерий определяют на:
А) средах Гисса
В) мясопентонном агаре
С) мясопентонном желатине
D) среде Левенштейна-Иенсена
Е) среде Сабура
124.Протеолитические свойства бактерий определяют на среде:
А) Гисса
В) мясопентонном агаре
С) мясопентонном желатине
D) Левенштейна-Иенсена
Е) Сабура
125.Какой цвет приобретает индикаторная бумага, при расщеплении белков до сероводорода?
А) синий
В) желтый
С) черный
D) розовый
Е) оранжевый
126.Какой цвет приобретает индикаторная бумага, при расщеплении белков до индола?
А) синий
В) желтый
С) черный
D) розовый
Е) оранжевый
127.Что происходит с желатином при протеолитической активности микроорганизмов?
А) свертывание
В) разжижение
С) изменение цвета
D) выпадение в осадок
Е) остается без изменений
128.Что происходит со средами при сахаролитической активности микроорганизмов?
А) свертывание
В) разжижение
С) изменение цвета
D) выпадение в осадок
Е) остается без изменений
129.Микроорганизмы, усваивающие углерод из углекислого газа воздуха и из органических соединений:
А) миксотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) сапрофиты
Е) паразиты
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
130.Микроорганизмы, обладающие способностью усваивать углерод из
А) миксотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) сапрофиты
Е) паразиты
стр. 142 из 169
углекислого газа воздуха:
131.Микроорганизмы, обладающие ферментами, расщепляющими, главным образом,
соединения:
А) миксотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) метанотрофы
Е) хемотрофы
органические
132.Как называются микроорганизмы, обладающие способностью усваивать углерод из мертвых
органических соединений?
А) миксотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) сапрофиты
Е) паразиты
133.Как называются микроорганизмы, получающие энергию в результате окисления неорганических
субстратов?
А) хемотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) фототрофы
Е) паразиты
134.Микроорганизмы, использующие световую энергию для построения органических веществ своего тела:
А) хемотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) фототрофы
Е) паразиты
135.Микроорганизмы, питающиеся за счет других организмов, и причиняющие им вред:
А) миксотрофы
В) аутотрофы
С) гетеротрофы
D) сапрофиты
Е) паразиты
136.Основным источником азотного питания у аутотрофов являются:
А) соли азота
В) аминокислоты
С) белки
D) пептоны
Е) сахара
137.Назовите универсальный источник азота и углерода в питательных средах для культивирования
патогенных микробов:
А) соли азота
В) аминокислоты
С) белки
D) пептоны
Е) сахара
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 143 из 169
138.Основным источником азотного питания у гетеротрофных микроорганизмов являются:
А) соли азота
В) аминокислоты
С) белки
D) пептоны
Е) сахара
139.Бактерии, растущие при низкой концентрации кислорода, называются:
А) аэробы
В) микроаэрофилы
С) факультативные анаэробы
D) анаэробы
Е) макроаэрофилы
140.Как называются бактерии, растущие без доступа кислорода?
А) аэробы
В) микроаэрофилы
С) факультативные анаэробы
D) анаэробы
Е) макроаэрофилы
141.Бактерии, растущие в кислородной среде, относятся к:
А) аэробам
В) микроаэрофилам
С) факультативным анаэробам
D) анаэробам
Е) макроаэрофилам
142.Определите название бактерий, растущих как в кислородной, так и в бескислородной среде:
А) аэробы
В) микроаэрофилы
С) факультативные анаэробы
D) анаэробы
Е) макроаэрофилы
143. В основе механизма аэробного дыхания лежит отщепление от субстрата водорода и присоединения его
к:
А) солям кислот
В) азоту воздуха
С) кислороду воздуха
D) субстрату
Е) водороду воздуха
144.Сущность механизма анаэробного дыхания заключается в отщеплении от субстрата водорода и
присоединения его к:
А) солям кислот
В) азоту воздуха
С) кислороду воздуха
D) субстрату
Е) водороду воздуха
145.Ферменты, участвующие в процессах дыхания:
А) дегидрогеназы
В) аминотрансферазы
С) липазы
D) фосфотазы
Е) карбоксилазы
146.Под “ростом микроорганизмов” понимают:
А) увеличение количества микробных клеток
В) увеличение количества нуклеоидов
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
С) увеличение массы цитоплазмы
D) переход в вегетативную форму
Е) переход в споровую форму
147.Под “размножением микроорганизмов” понимают:
А) увеличение количества микробных клеток
В) увеличение количества нуклеоидов
С) увеличение массы цитоплазмы
D) переход в вегетативную форму
Е) переход в споровую форму
148.У каких бактерий колонии имеют соответствующий цвет?
А) выделяющих токсины
В) растущих на МПА
С) образующих пигменты
D) растущих на МПБ
Е) образующих антибиотики
149.Дифференциально-диагностическая среда:
А) Китта-Тароцци
В) Гисса
С) МПБ
D) Чапека
Е) Хоттингера
150.Для культивирования анаэробов применяется среда:
А) Китта-Тароцци
В) Гисса
С) МПБ
D) Чапека
Е) Хоттингера
151.Для культивирования плесневых грибов используется среда:
А) Китта-Тароцци
В) Гисса
С) МПБ
D) Чапека
Е) бульон Хоттингера
152.Универсальная среда:
А) Китта-Тароцци
В) Эндо
С) МПБ
D) Чапека
Е) Левина
153.Чистую культуру спорообразующих микробов выделяют методом:
А) Дригальского
В) Коха
С) Шукевича
D) химическим
Е) физическим
154.Чистую культуру подвижных видов микробов выделяют методом:
А) Дригальского
В) Коха
С) Шукевича
D) химическим
Е) физическим
стр. 144 из 169
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 145 из 169
155.Среды, применяемые для накопления определенной группы бактерий:
А) Универсальные
В) Элективные (селективные)
С) Дифференциально-диагностические
D) Искусственные
Е) Естественные
156.Микроорганизмы размножающиеся подобно плесневым грибам, спорами:
А) актиномицеты
В) бациллы
С) спирохеты
D) сарцины
Е) микобактерии
157.Среды Сабуро, Чапека относятся к средам:
А) универсальным
В) дифференциально-диагностическим средам
С) селективным
D) специальным
Е) обогащения
158.Среды Гисса являются:
А) универсальными
В) дифференциально-диагностическими
С) селективными
D) специальными
Е) средами обогащения
159.Среда Эндо относится к средам:
А) универсальным
В) дифференциально-диагностическим
С) селективным
D) специальным
Е) обогащения
160.МПА, МПБ - среды:
А) универсальные
В) дифференциально-диагностические
С) селективные
D) специальные
Е) обогащения
161.Бактерии образуют колонии на среде:
А) МПБ
В) МПЖ
С) МППБ
D) Гисса
Е) МПА
162.На какой среде микробы образуют пристеночное кольцо и поверхностную пленку?
А) Китта-Тароццы
В) МПА
С) МПБ
D) Гисса
Е) Кесслера
163.Организмы, нуждающиеся в факторах роста:
А) прототрофы
В) ауксотрофы
С) метилотрофы
D) автотрофы
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 146 из 169
Е) гетеротрофы
164.Микробы, не нуждающиеся в факторах роста:
А) Ауксотрофы
В) Прототрофы
С) Аэробы
D) Паразиты
Е) Анаэробы
165.Чем отличаются эубактерии от архебактерий?
А) отсутствием клеточной стенки
В) наличием клеточной стенки
С) отсутствием пептидогликана
D) наличием пептидогликана
Е) наличием белка флагелина
166.Миксотрофия это способ питания бактерий с использованием:
А) органических веществ и углекислоты
В) белков и витаминов
С) углекислоты и витаминов
D) углеводов и микроэлементов
Е) органических веществ и витаминов
167. Паратрофами называют:
А) факультативные анаэробы
В) факультативные паразиты
С) облигатные анаэробы
D) облигатные паразиты
Е) облигатные аэробы
168.В логарифмическую фазу развития микробной культуры скорость роста бывает:
A) минимальной
B) максимальной
C) периодической
D) не постоянной
Е) культура не растет
169.Фазой покоя у микроорганизмов называют:
A) экспоненциальную фазу
B) начальную (лаг-фазу )
C) стационарную фазу
D) фазу отмирания
E) у микроорганизмов фазы покоя не может быть
170.Обмен веществ в микробной клетке:
A) брожение
B) гниение
C) анаболизм
D) метаболизм
E) катаболизм
171.Бактерии, которые используют углерод мертвого субстрата, называются:
A) сапрофитами
B) автотрофами
C) фототрофами
D) галофилами
E) осмофилами
172.Равновесие между числом вновь образованных и погибших клеток наступает
A) в экспоненциальную фазу
B) в начальную (лаг-фазу)
C) в стационарную фазу
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 147 из 169
D) в фазу отмирания
E) у микроорганизмов такой фазы не может быть
173.Почему кислород токсичен для облигатных анаэробов
A) не содержит цитохромов
B) не имеют фермента каталазы
C) не имеют фермента цитохромоксидазы
D) не образуют спор
E) не образуют капсул
174.Что образуется при дыхании микробов?
A) витамины
B) аминокислоты
C) энергия
D) антибиотики
E) соли
175.Способы питания микробов
A) галозойный
B) анаэробный
C) диффузия
D) галофитный
E) аэробный
176.Элективные питательные среды:
A) МПА, МПБ
B) МПБ, МПЖ
C) среда Хоттингера
D) мясо-пептонный полужидкий агар
E) Кровяной агар, среда Китт-Тароции и Сабуро
177.Микробы, усваивающие атмосферный азот:
A) протеолитические
B) дезаминизирующие
C) нитратно-нитритные
D) азотфиксирующие
E) паратрофные
178.Помещение для лабораторных животных:
А) бокс
В) виварий
С) практикум
D) лаборатория
Е) аудитория
179.Методы заражения белых мышей
А) в яремную вену
В) в подкрыльцовую вену
С) подкожно
D) в сердце
Е) в амнион
@@@ Действие физических, химических и биологических факторов на микроорганизмы
180.Освобождение от микробов разнообразных объектов:
А) пастеризация
В) дезинфекция
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 148 из 169
С) асептика
D) антисептика
Е) стерилизация
181.Уничтожение микроорганизмов при помощи химических веществ:
А) пастеризация
В) дезинфекция
С) асептика
D) антисептика
Е) стерилизация
182.Предотвращение проникновения микроорганизмов в макроорганизм:
А) пастеризация
В) дезинфекция
С) асептика
D) антисептика
Е) стерилизация
183.Полное уничтожение патогенных микроорганизмов в объектах внешней среды:
А) тиндализация
В) стерилизация
С) дезинфекция
D) пастеризация
Е) автоклавирование
184.Обработка продукта при температуре ниже 100ْ С с последующим охлаждением:
А) тиндализация
В) стерилизация
С) дезинфекция
D) пастеризация
Е) автоклавирование
185.Что понимают под термином “фламбирование”?
А) стерилизация текучим паром
В) стерилизация паром под давлением
С) стерилизация ультразвуком
D) стерилизация пламенем
Е) дробное кипячение
186.Дробная стерилизация на водяной бане:
А) тиндализация
В) стерилизация
С) дезинфекция
D) пастеризация
Е) автоклавирование
187.Определение активности антибиотиков основано:
А) на подавлении роста кишечной палочки
В) на подавлении роста золотистого стафилококка
С) на подавлении роста чувствительного тест-микроба
D) на титровании по количеству действующего вещества
Е) на измерении оптической плотности раствора антибиотика
188.Что такое автоклавирование?
А) стерилизация текучим паром
В) стерилизация паром под давлением
С) стерилизация ультразвуком
D) стерилизация пламенем
Е) дробное кипячение
189.Ацидофилы – это микроорганизмы растущие при:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 149 из 169
А) добавлении 5% поваренной соли
В) рН 7,0-7,5
С) рН 5,0-5,5
D) рН 8,0-8,5
Е) рН 1,0-1,5
190.Конверсия бактерий это изменение свойств бактерий под влиянием:
А) химических веществ
В) высокой температуры
С) низкой температуры
D) фагов
Е) антибиотиков
191.Что происходит с бульонной культурой под действием фага?
А) изменение биохимических свойств культуры
В) изменение патогенных свойств микроорганизмов
С) гемолиз культуры, с просветлением культуры
D) лизис культуры, с просветлением культуры
Е) образование осадка
192.Температурный оптимум для психрофилов:
А) 0-5ْ С
В) 5-10ْ С
С) 15-20ْ С
D) 35-45ْ С
Е) 50-60ْ С
193.Температурный оптимум для термофилов:
А) 0-5ْ С
В) 5-10ْ С
С) 15-20ْ С
Д) 35-45ْ С
Е) 50-60ْ С
194.Температурный оптимум для мезофилов:
А) 15-20ْ С
В) 25-30ْ С
С) 30-37ْ С
D) 40-45ْ С
Е) 50-70ْ С
195.Что такое “лиофилизация”?
А) замораживание микробной культуры
В) высушивание микробной культуры из замороженного состояния под
С) высушивание жидкой микробной культуры под вакуумом
D) переход льда из твердого состояния в парообразное
Е) переход льда в жидкое состояние
вакуумом
196.Что происходит с микробной клеткой при воздействии высокой температуры?
А) повреждение генома
В) денатурация белка
С) нарушение синтеза белка
D) изменение в рибосомах
Е) повреждение цитоплазмы
197.Что происходит с микробной клеткой при воздействии ионизирующей радиации?
А) повреждение генома
В) денатурация белка
С) нарушение синтеза белка
D) изменения в рибосомах
Е) повреждение цитоплазмы
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 150 из 169
198.Как называются микроорганизмы устойчивые к высокому гидростатическому давлению?
А) галофилы
В) сапрофиты
С) барофилы
D) мезофилы
Е) термофилы
199.В процессе пастеризации уничтожаются:
А) все микроорганизмы
В) все микроорганизмы, кроме вирусов
С) споровые формы микробов
D) вегетативные формы микробов
Е) микроорганизмы не уничтожаются
200.Как называются микроорганизмы устойчивые к высокому осмотическому давлению?
А) галофилы
В) сапрофиты
С) барофилы
D) мезофилы
Е) термофилы
201.При попадании бактерий в среду с высоким осмотическим давлением происходит:
А) гемолиз
В) плазмолиз
С) плазмоптис
D) анабиоз
Е) протеолиз
202.При попадании бактерий в среду с низким осмотическим давлением происходит:
А) гемолиз
В) плазмолиз
С) плазмоптиз
D) анабиоз
Е) протеолиз
203.Бактериофаги это:
А) бактерии
В) вирусы
С) дрожжи
D) плесневые грибы
Е) актиномицеты
204.Кто впервые выделил бактериофаг?
А) Д. Эрель
В) Л. Пастер
С) И. Гамалея
D) И.И. Мечников
Е) В.Н.Шапошников
205.Лизогенное состояние клетки обусловлено фагом:
А) внеклеточным
В) истинно вирулентным
С) вегетативным
D) умеренным
Е) бактериофагом
206.Профагом называют фаг:
А) соединенный с рибосомой
В) внедряющийся в микроорганизм
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 151 из 169
С) соединенный с ядром
D) соединенный с хромосомой
Е) адсорбированный на клетке
207.Жизнеспособное потомство образуют фаги:
А) зрелые
В) дефектные
С) умеренные
D) профаги
Е) недефектные
208. Место естественного обитания бактериофагов:
А) почва
В) вода
С) воздух
D) кишечный тракт
Е) дыхательная система
209.В местах оседания бактериофагов на микробную культуру образуются:
А) «дырки»
В) «окна»
С) гемолиз
D) колонии
Е) позитивные колонии
210. Назовите явление, отражающее положительное свойство бактериофагов:
А) фаголизис
В) трансформация
С) коньюгация
D) трансдукция
Е) конверсия
211.Фаги, ведущие к гибели микробной клетки:
А) истинно вирулентные
В) умеренные
С) продуктивные
D) продуктивно-умеренные
Е) свободные
212.Бактериофаги обладают высокой активностью в разведении:
А) 10 -1
В) 10 -2
С) 10 -12
D) 10 -10
Е) 10 -11
213. Как действует колифаг на кишечную палочку?
А) разрушает клетки
В) не разрушает клетки
С) улучшает рост микроорганизмов
D) стимулирует синтез антибиотиков
Е) не оказывает влияния
214.Гризиофульвин образуют:
А) Streptomices spheroides
В) Penicillium nigricans
С) Penicillium chrysogenum
D) Penicillium brevicompactum
Е) Aspergillus flavus
215.Первый антибиотик, полученный с помощью актиномицет:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 152 из 169
А) пенициллин
В) терациклин
С) хлортетрациклин
D) стрептомицин
Е) неомицин
216.Антибиотик, являющийся ценным противотуберкулезным препаратом:
А) пенициллин
В) эритромицин
С) стрептомицин
D) олеандомицин
Е) магнамицин
217.Антибиотик, образуемый бактериями:
А) ампициллин
В) метициллин
С) цефалоспорин
D) нафциллин
Е) низин
218.Streptococcus cremoris образует:
А) низин
В) бревин
С) лактомин
D) лизоцим
Е) диплококцин
219. Термин «антибиотик» первым ввел в научную литературу»:
А) Чейн
В) Вавилов
С) Ваксман
D) Флеминг
Е) Ермольева
220. Первый антибиотик открыл:
А) Чейн
В) Флори
С) Ваксман
D) Флеминг
Е) Ермольева
221.Какое воздействие оказывают на микроорганизмы прямые солнечные лучи?
A) бактерицидное
B) бактериостатическое
C) стимулирующее
D) не оказывают влияния
E) бактериолитическое
222.Ацидофильные микрорганизмы:
A) солелюбивые
B) живут в щелочной среде
C) живут в кислой среде
D) живут при высоком давлении
E) живут при высокой температуре
223.Алкалoфильные микроорганизмы:
A) живут в среде с высоким содержанием NaCl
B) живут в щелочной среде
C) живут в кислой среде
D) живут при высоком давлении
E) живут при высокой температуре
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 153 из 169
224.Взаимно благоприятное существование двух организмов называется:
A) метабиоз
B) антагонизм
C) симбиоз
D) паразитизм
E) анаболизм
225.Стимуляция роста одного микроба продуктами жизнедеятельности другого, который затем становится
его спутником, называется:
A) метабиоз
B) антагонизм
C) саттелизм
D) паразитизм
E) анаболизм
226.Одинаковые физиологические процессы разных особей, в результате совместного культивирования
которых происходит увеличение конечных продуктов, называется:
A) синергизм
B) антагонизм
C) саттелизм
D) паразитизм
E) анаболизм
227.Какой вид взаимоотношений привел к открытию антибиотиков?
A) синергизм
B) антагонизм
C) саттелизм
D) паразитизм
E) анаболизм
228.Враждебные взаимоотношения, когда продукты жизнедеятельности одного микроба губительно
действуют на другого, называются:
A) синергизм
B) антагонизм
C) саттелизм
D) паразитизм
E) анаболизм
229.Отношения, когда пользу от сожительства получает лишь один микроб, нанося вред хозяину,
называются:
A) синергизм
B) антагонизм
C) саттелизм
D) паразитизм
E) анаболизм
230.Методы хранения, направленные на поддержание жизненных процессов на сниженном уровне,
называются:
A) биоз
B) абиоз
C) анабиоз
D) ценоанабиоз
E) комменсализм
231.Методы хранения, направленные на приостановление жизнедеятельности микробов в продуктах,
называются:
A) биоз
B) абиоз
C) анабиоз
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 154 из 169
D) ценоанабиоз
E) антагонизм
232.Методы хранения, направленные на уничтожение микробов в продуктах, называются:
A) биоз
B) абиоз
C) анабиоз
D) ценоанабиоз
E) антагонизм
233.Методы хранения, при которых консервирующее вещество вырабатывают сами микроорганизмы:
A) биоз
B) абиоз
C) анабиоз
D) ценоанабиоз
E) антагонизм
234.Действие химических веществ, приводящее к гибели бактерии называется:
A) бактериоцидные
B) бактериостатические
C) бактериолитические
D) детергентное
E) ионизирующие
235.Как называются токсины, утратившие ядовитость под действием формалина?
A) цитотоксины
B) мембранотоксины
C) функциональные блокираторы
D) эритрогены
E) анатоксины
236.Для чего используют стерилизацию?
A) для уничтожения всех микробов, кроме спорообразующихся
B) для полного уничтожения всех микробов
C) для уничтожения дрожжей
D) для уничтожения кишечной палочки
E) для уничтожения микоплазмы
237.Как стерилизуют бактериологические петли?
A) прокаливанием
B) в сушильном шкафу
C) текучим паром
D) в автоклаве
E) кипячением
238. Как стерилизуют питательные среды?
A) прокаливанием
B) в сушильном шкафу
C) текучим паром
D) в автоклаве
E) кипячением
@@@ Экология микроорганизмов
239.Общее микробное число – это количество:
А) кишечных палочек в единице субстрата (1г, 1мл, 1м)
В) микроорганизмов в 1л воды
С) микроорганизмов в единице субстрата (1г, 1мл, 1м)
D) микроорганизмов в 1г объекта
Е) вегетативных бактерий в 1 г объекта
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 155 из 169
240.Санитарно – показательным микроорганизмом является:
A) Streptomyces candidus
B) Escherichia coli
C) Aspergillus niger
D) Streptococcus lactis
E) Clostridium pasteurianum
241.Какие ниже перечисленные микроорганизмы живут на дне морей и океанов?
A) барофильные
B) термофильные
C) алкалофильные
D) галофильные
E) ацидофильные
242.Коли-титр водопроводной воды должен быть:
А) не более 100
В) не менее 300
С) не более 3
D) не менее 1000
Е) не более 300
243.Для определения зеленящих и гемолитических стрептококков в воздухе используют:
А) мясопептонный агар
В) мясопептонный бульон
С) среды Гисса
D) кровяной агар
Е) мясопептонный желатин
244.Какие микробы служат показателями воздушно-капельного загрязнения?
А) БГКП
B) грибы
C) актиномицеты
D) стафилококки, стрептококки
E) микоплазмы
245.Санитарно-показательные микроорганизмы
А) сарцины, тетракокки
B) кишечные палочки, энтерококки, протеи
C) актиномицеты, клостридии
D) дрожжи, грибы
E) спирохеты, вибрионы
246. Какие микроорганизмы являются показателями фекального загрязнения?
А) стафилококки
B) стрептококки
C) протей
D) кишечная палочка
E) термофилы
247.Как обозначают количество кишечных палочек, содержащихся в 1 литре воды?
А) коли-титр
B) классность
C) коли-индекс
D) микробное число
E) показатель загрязненности
248.Содержится ли в органах здоровых животных микрофлора?
A) содержится
B) не содержится
C) поступает с кормом
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 156 из 169
D) поступает с водой
E) поступает из воздуха
249.Микроорганизмы, живущие на корнях растений, называют:
A) паразитами
B) эпифитными
C) ризосферными
D) патогенными
E) фитопатогенными
250.Какой прибор используется при изучении микрофлоры водоемов?
A) барометр
B) батометр
C) арифмометр
D) рН – метр
E) термометр
251.По каким санитарно-показательным микроорганизмам определяется фекальное загрязнение предметов
окружающей среды?
A) по стафилококкам
B) по стрептококкам
C) по патогенным
D) по кишечной палочке
E) по грибам
252.Какого цвета колонии E. coli на среде Эндо?
A) бесцветные
B) синие
C) желтые
D) красные
E) белые
253.Микроорганизмы, живущие на поверхности растений и питающиеся за счет естественных выделений
растений, называют:
A) ризосферными
B) эпифитными
C) патогенными
D) фитопатогенными
E) паразитами
254. Escherichia coli является:
A) грам – положительным организмом
B) грам – отрицательным организмом
C) автотрофом
D) образующим споры
E) облигатным анаэробом
255.Максимальное количество микробов в почве содержится на:
A) поверхности
B) глубине 0 – 5 см
C) глубине 5 – 15 см
D) глубине 15 –20см
E) глубине 20 – 25 см
256.Максимальное количество микробов содержится:
A) в воздухе
B) в почве
C) в воде
D) в ротовой полости человека
E) на коже
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 157 из 169
@@@ Роль микробов в круговороте веществ в природе
257.Для промышленного получения молочной кислоты используются следующие физиологические типы
микроорганизмов:
A) гетероферментативные
B) автотрофные
C) гетеротрофные
D) гомоферментативные
E) паразиты
258.В древние времена с помощью брожения люди научились готовить
A) антибиотики
B) ферменты
C) биомассу
D) кисломолочные продукты
E) стероиды
259.Как называется разрушение белка в анаэробных условиях?
A) брожение
B) гниение
C) дыхание
D) горение
E) окисление
260.Молочнокислый стрептококк шаровидной формы
A) Lactobacterium bulgaricum
B) Lactobacterium acidophilum
C) Bacterium acidopropionici
D) Streptpcoccus lactis
E) Streptpcoccus faecalis
261.Активным возбудителем пропионовокислого брожения является
A) Lactobacterium bulgaricum
B) Lactobacterium acidophilum
C) Bacterium acidopropionici
D) Streptococcus lactis
E) Bacterium acidopropionici
262.Возбудителями маслянокислого брожения являются представители рода
A) Lactobacterium
B) Streptomyces
C) Bacterium
D) Streptococcus
E) Clostridium
263.Уксусно- кислое брожение – это:
A) окисление глюкозы в уксусную кислоту
B) окисление этилового спирта в уксусную кислоту
C) разложение углеводов в анаэробных условиях
D) ни одно из них
E) разложение белков в анаэробных условиях
264.Представители какого рода образуют уксусную кислоту:
A) Azotobacter
B) Acetobacter
C) Clostridium
D) Nitrobacter
E) Aspergillus
265.Какой микроорганизм является продуцентом лимонной кислоты?
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 158 из 169
A) Escherichia coli
B) Streptococcus lactis
C) Aspergillus niger
D) Bacterium acidopropionici
E) Saccharomyces cerevisiae
266.Нитрификация – это:
A) окисление солей аммония до нитритов и нитратов
B) восстановление нитратов до аммония
C) восстановление нитратов до газообразного азота
D) включение атмосферного азота в клеточный азот
E) окисление аммония до нитратов
267.Бактерии рода Azotobacter и Clostridium имеют важное значение как:
A) фиксаторы азота
B) патогенны для человека
C) портят пищевые продукты
D) возбудители молочнокислого брожения
E) возбудители процесса гниения
268."Фиксация азота" – это термин, означающий:
A) превращение солей аммония до белка
B) восстановление белков до газообразного азота
C) превращение газообразного азота в формы, доступные растениям
D) восстановление нитратов до газообразного азота
E) окисление солей аммония до нитритов и нитратов
269.Микробы, использующие для питания атмосферный азот, называются:
A) аммонифицирующие
B) денитрифицирующие
C) нитратные
D) азотфиксирующие
E) нитрифицирующие
270.Нитрагин - это:
A) удобрение с большим содержанием "S"
B) фосфорное удобрение
C) азотное удобрение
D) навоз
E) компост
271.Возбудителем картофельной болезни хлеба является
A) Bacterium megatherium
B) Bacillus subtilis
C) Bacterium prodigiosum
D) Bacterium proteus
E) Fusarium graminearum
272.Капустная бацилла, это
A) Bacillus megatherium
B) Bacillus subtilis
C) Bacillus mycoides
D) Bacillus mesentericus
E) Serratia marcescens
273.Грибовидная бацилла, это
A) Bacillus megatherium
B) Bacillus subtilis
C) Bacillus mycoides
D) Bacillus mesentericus
E) Serratia marcescens
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 159 из 169
274.Чудесная палочка, это
A) Bacillus megatherium
B) Bacillus subtilis
C) Bacillus mycoides
D) Bacillus mesentericus
E) Serratia marcescens
@@@ Генетика микроорганизмов.
275. Поступление ДНК донора из среды в реципиентную клетку происходит путем:
А) трансформации
В) конъюгации
С) трансдукции
276. Обмен генетической информации у бактерий при помощи бактериофагов происходит путем:
А) трансформации
В) конъюгации
С) трансдукции
277.Диссоциация культуры – это:
А) изменение патогенных свойств микроба
В) изменение ферментативных свойств
С) изменение токсигенных свойств
D) изменение редуцирующих свойств
Е) переход из одной формы колонии в другую
278. Белковые вещества, подавляющие рост и размножение чувствительных к ним бактерий:
А) Гемолизины
В) Бактериолизины
С) Агглютинины
D) Преципитины
Е) Колицины
279.Передача ДНК донора клетке-реципиенту при непосредственном контакте именуется:
А) трансформация
В) конъюгация
С) трансдукция
280.Биосинтез белка происходит на:
А) митохондриях
В) нуклеоиде
С) ДНК
D) РНК
Е) рибосомах
281.Функциональная единица наследственности:
А) ДНК
В) мРНК
С) тРНК
D) ген
Е) геном
282.Изменения в структуре генома, происходящие в одной паре нуклеотидов называются:
А) точечные мутации
В) мутации абберации
С) рекомбинации
D) инверсия
Е) трансформация
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 160 из 169
283.Изменения в структуре генома, происходящие в двух и более пар нуклеотидов называются:
А) точечные мутации
В) мутации абберации
С) рекомбинации
D) инверсия
Е) трансформация
284.Разворот нуклеотидной последовательности в ДНК на 180 градусов называется:
А) точечная мутация
В) мутация абберация
С) рекомбинация
D) инверсия
Е) трансформация
285.Делеция это:
А) замена пары нуклеотидов
В) вставка пары нуклеотидов
С) выпадение пары нуклеотидов
D) замена двух пар нуклеотидов
Е) вставка двух пар нуклеотидов
286.Триплет кодирует:
А) белок
В) геном
С) ДНК
D) гуанин
Е) аминокислоту
287.Генетический код бактерий представлен нуклеотидами:
А) АТТА
В) АТАЦ
С) АЦЦТ
D) АТГГ
Е) АТГЦ
288.Внехромосомный геном бактериальной клетки:
А) рибосома
В) хромосома
С) лизосома
D) плазмида
Е) нуклеоид
289.Геном микробной клетки это:
А) совокупность нуклеотидов в ДНК и РНК
В) совокупность нуклеотидов в хромосоме
С) ДНК
D) РНК
Е) совокупность нуклеотидов в плазмиде
290.Фенотипические различия между микроорганизмами, одинаковыми по
А) рекомбинации
В) инверсии
С) абберации
D) мутации
Е) модификации
291.Структуру гена определил:
А) М.Мак-Карти
В) Ф.Гриффитс
С) Г.Мендель
D) Л.Пастер и Дж. Уотсон
генотипу:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 161 из 169
Е) Ф.Крик и Дж. Уотсон
@@@ Инфекция
292.Зараженность макроорганизма, при которой развивается комплекс эволюционно сложившихся
биологических реакций взаимодействия макроорганизма и патогенных микроорганизмов называется:
А) микробоносительство
В) иммунизирующая субинфекция
С) инфекция
D) инфекционная болезнь
Е) инфекционный процесс
293.Зараженность макроорганизма, при которой происходит иммунологическая перестройка, и образуются
антитела, называется:
А) микробоносительство
В) иммунизирующая субинфекция
С) инфекция
D) инфекционная болезнь
Е) инфекционный процесс
294.Зараженность макроорганизма, не сопровождающаяся иммунологической перестройкой, называется:
А) микробоносительство
В) иммунизирующая субинфекция
С) инфекция
D) инфекционная болезнь
Е) инфекционный процесс
295.Внедрение, размножение и распространение микроба в организме и его реакция на микроорганизм,
определяется как:
А) микробоносительство
В) иммунизирующая субинфекция
С) инфекция
D) инфекционная болезнь
Е) инфекционный процесс
296.Форма инфекции проявляющаяся клиническими признаками:
А) инфекционная болезнь
В) микробоносительство
С) вирусоносительство
D) иммунизирующая субинфекция
Е) ремиссия
297.Симбиоз, при котором оба симбионта – хозяин и микроб – получают взаимную выгоду:
А) мутуализмом
В) комменсализмом
С) паразитизмом
D) антагонизмом
Е) эктосимбиозом
298.Симбиоз, при котором один из симбионтов живет за счет другого, не причиняя ему вреда:
А) мутуализмом
В) комменсализмом
С) паразитизмом
D) антагонизмом
Е) эктосимбиозом
299.Симбиоз, при котором один из симбионтов живет за счет другого, при этом причиняет ему вред:
А) мутуализм
В) комменсализм
С) паразитизм
D) антагонизм
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 162 из 169
Е) эктосимбиоз
300.Промежуток времени от момента проникновения микроорганизма в макроорганизм до появления
первых признаков болезни, называется:
А) инкубационный период
В) продромальный период (период предвестников)
С) клинический период
D) исход болезни
Е) выздоровление
301.Проявление основных характерных для данной инфекционной болезни признаков, характеризует:
А) инкубационный период
В) продромальный период (период предвестников)
С) клинический период
D) исход болезни
Е) выздоровление
302.Появление первых, не всегда специфических для данной болезни симптомов, характеризует:
А) инкубационный период
В) продромальный период
С) клинический период
D) исход болезни
Е) выздоровление
303.Патогенность микроорганизма:
А) общий признак присущий всем микробам
В) видовой генетический признак, передающийся по наследству
С) способность вызывать образование антител
D) способность микроба вызывать аллергию
Е) количество микробных клеток, обуславливающих инфекционную болезнь
304.“Инвазивность”:
А) размножение микроба в крови
В) способность микроба образовывать токсин
С) способность микроба преодолевать защитные барьеры в организме
D) степень патогенности конкретного микроорганизма
Е) антителообразующая способность микроорганизма
305.Токсигенность:
А) размножение микроба в крови
В) способность микроба образовывать токсин
С) способность микроба преодолевать защитные барьеры в организме
D) это степень патогенности конкретного микроорганизма
Е) антителообразующая способность микроорганизма
306.«Вирулентность”:
А) размножение микроба в крови
В) способность микроба образовывать токсин
С) способность микроба преодолевать защитные барьеры в организме
D) степень патогенности конкретного микроорганизма
Е) антителообразующая способность микроорганизмов
307.Фактор вирулентности:
А) спора
В) нуклеоид
С) капсула
D) рибосома
Е) оболочка
308. Отравление организма токсинами микробов:
А) бактериемия
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 163 из 169
В) септицемия
С) токсемия
D) септикопиемия
Е) пиемия
309.Состояние, при котором микробы разносятся кровью в органы и ткани и там размножаются:
А) бактериемия
В) септицемия
С) токсемия
D) септикопиемия
Е) пиемия
310.Процесс, характеризующийся размножением микробов в крови, называется:
А) бактериемия
В) септицемия
С) токсемия
D) септикопиемия
Е) пиемия
311.Процесс, при котором распространение патогенных микроорганизмов сопровождается появлением
гнойных очагов в отдельных органах:
А) бактериемия
В) септицемия
С) токсемия
D) септикопиемия
Е) пиемия
@@@ Иммунитет
312.Пассивный иммунитет возникает после:
А) естественного переболевания
В) иммунизации
С) поступления в организм готовых антител
D) лечения антибиотиками
Е) введения вакцины
313.Активный иммунитет формируется после:
А) естественного переболевания
В) поступления в организм молозива
С) поступления в организм готовых антител
D) лечения антибиотиками
Е) трансовариально.
314.Способ защиты макроорганизма от тел и веществ, несущих признаки генетической чужеродности:
А) гиперчувствительность замедленного типа
В) гиперчувствительность немедленного типа
С) иммунологическая толерантность
D) иммунитет
Е) иммунологическая память
315.Центральный орган иммунной системы:
А) селезенка
В) лимфатический узел
С) кровь
D) печень
Е) костный мозг
316.К периферическому органу иммунной системы относится:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 164 из 169
А) костный мозг
В) лимфатический узел
С) макрофаги
D) легкие
Е) тимус
317.Неспецифический фактор защиты:
А) Т- лимфоциты
В) кровь
С) эритроциты
D) макрофаги
Е) антитела
318.Скопления бактерий, заключенные в общую капсулу, называются:
А) стафилококками
В) стрептококками
С) зооглеями
D) макрофагами
Е) стрептобактериями
319.С какой целью используются гипериммунные сыворотки?
А) Для вакцинации животных
B) Для лечения животных
C) Для диагностики инфекционных заболеваний
D) Для иммунизации, лечения и диагностики
E) Для кормовых целей
320. Если организм животного после переболевания освобождается от возбудителя, то иммунитет называют:
A) Стерильным
B) Клеточным
C) Активным
D) Пассивным
E) Гуморальным
321.Способность антигена вызывать иммунный ответ:
A) Чужеродность
B) Иммуногенность
C) Комплементарность
D) Специфичность
E) Антигенность
322.Способность антигена создавать иммунитет:
A) Чужеродность
B) Иммуногенность
C) Комплементарность
D) Специфичность
E) Антигенность
323.Антигенные особенности, благодаря которым антигены отличаются друг от друга:
A) чужеродность
B) молекулярная масса
C) антигенность
D) иммуногенность
E) специфичность
324.Компоненты используемые для постановки реакции агглютинации:
A) Сыворотка, взвесь бактерий
B) Комплемент, эритроциты, сыворотка, гемолизин
C) Сыворотка, антигенный эритроцитарный диагностикум
D) Антиген, антительный эритроцитарный диагностикум
E) Сыворотка, антигенный экстракт
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 165 из 169
325.Для постановки реакции преципитации используют компоненты:
A) Сыворотка, взвесь бактерий
B) Комплемент, эритроциты, сыворотка, гемолизин
C) Сыворотка, антигенный эритроцитарный диагностикум
D) Антиген, антительный эритроцитарный диагностикум
E) Сыворотка, антигенный экстракт
326. Положительная реакция пластинчатой агглютинации характеризуется:
А) Образованием линии преципитации
B) Склеиванием бактерий в конгломераты
C) Отсутствием гемолиза эритроцитов
D) Гемолизом эритроцитов
E) Агглютинацией эритроцитов
327.Аллергены используют для:
A) вакцинации животных
B) лечения животных
C) диагностики инфекционных заболеваний
D) постановки РА
E) постановки РНГА
328.Сколько существует вариантов постановки реакции иммунофлуоресценции?
A) 1
B) 5
C) 3
D) 2
E) 4
329.Вариант постановки МФА с использованием антивидовых флуоресцирующих сывороток называется:
A) Прямым
B) Антикомплементарным
C) Непрямым
D) Иммуноферментным
E) Антипероксидазным
330.Положительная реакция иммунофлуоресценции характеризуется:
A) Образованием окрашенного продукта реакции
B) Контрастным свечением по периферии и тела микробной клетки
C) Повышением оптической плотности реакционной среды
D) Отсутствием свечения окрашенного препарата
E) Отсутствием контрастного свечения периферии и тела микробной клетки
331.Биофабричный комплемент представляет собой:
A) Сыворотку с антителами
B) Сыворотку крови кролика
C) Сыворотку, содержащую антитела против эритроцитов
D) Сыворотку крови морской свинки
E) Физиологический раствор
332. Вакцины, содержащие антигены различных бактерий, называются:
A) рекомбинантными
B) моновалентными
C) поливалентными
D) депонированными
E) ассоциированными
333. Вакцины, в которых антиген адсорбирован или эмульгирован различными веществами, называются:
A) рекомбинантными
B) моновалентными
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 166 из 169
C) поливалентными
D) депонированными
E) ассоциированными
334.Вакцины, содержащие антигены различных серотипов одного вида бактерий, называются:
A) рекомбинантными
B) моновалентными
C) поливалентными
D) депонированными
E) ассоциированными
335.Какую функцию выполняют плазмиды?
A) запасную
B) защитную
C) ферментативную
D) генетическую
E) гормональную
336.Как называется генерализованная форма инфекции?
A) бактериемия
B) септицемия
C) пиемия
D) токсинемия
E) носительство
337.Как называется инфекция, которая возникает в результате проникновения патогенных микробов из
внешней среды?
А) аутоинфекция
B) очаговая
C) местная
D) экзогенная
E) эндогенная
338.Как называется фактор вирулентности бактерий, обуславливающий способность прикрепляться к
эпителиальным клеткам?
А) колонизация
B) адгезия
C) пенетрация
D) инвазия
E) агрессия
339.Какими клетками вырабатываются антитела?
A) фагоцитарными
B) лимфоцитарными
C) макрофагами
D) плазматическими
E) эритроцитами
340.Сколько компонентов надо для постановки реакции агглютинации (РА)?
A) 2 компонента
B) 1 компонент
C) 3 компонента
D) 4 компонента
E) 5 компонентов
341Сколько компонентов надо для постановки реакции преципитации?
А) 1 компонент
B) 2 компонента
C) 3 компонента
D) 4 компонента
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 167 из 169
E) 5 компонентов
342.Какой иммуноглобулин появляется первым после заражения или вакцинации?
А) Ig M
B) Ig A
C) Ig G
D) Ig E
E) Ig D
343.Колостральный иммунитет создается
А) введением крови
B) введением вакцин
C) прохождением антител через плаценту
D) введением сывороток
E) молозивом
344.Какие клетки тормозят образования антител?
А) Т-киллеры
B) Т-хелперы
C) Т-супрессоры
D) лейкоциты
E) эритроциты
345. Какие клетки являются эффекторами гуморального иммунитета?
А) Т-лимфоциты
B) В-лимфоциты
C) плазматические
D) фагоцитарные
E) клетки легких
346.Какими клетками вырабатываются антитела?
А) фагоцитарными
B) лимфоидными
C) плазматическими
D) макрофагами
E) эпителиальными
347.Центральный лимфоидный орган иммунной системы
А) селезенка
B) печень
C) сердце
D) тимус
E) почки
348.Активный иммунитет создается
А) после введения гипериммунной сыворотки
B) после введения антибиотиков
C) после введения аллергенов
D) после введения лизоцима
E) после введения вакцин
349.Кто первый разработал метод предупреждения оспы людей путем заражения?
A) Кох
B) Пастер
C) Левенгук
D) Дженнер
E) Мечников
350.Как называется иммунитет, который передается через яйцо?
А) колостральный
B) трансовариальный
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 168 из 169
C) трансплацетарный
D) поствакциональный
E) молозивный
351.Пассивный иммунитет создается
А) введением вакцин
B) введением бактериофагов
C) введением антибиотиков
D) введением аллергенов
E) введением гипериммунных сывороток
352.Сколько классов иммуноглобулинов?
А) 3
B) 5
C) 4
D) 6
E) 2
353.Как называется центральный лимфоидный орган иммунной системы у птиц?
А) селезенка
B) печень
C) бурса Фабрициуса
D) тимус
E) почки
354.Как называется естественно-приобретенный пассивный иммунитет?
A) колостральный
B) противовирусный
C) гуморальный иммунитет
D) поствакцинный
E) клеточный
355.К неспецифическим факторам защиты организма относится
А) антиген
B) иммуноглобулины
C) иммунологическая реактивность
D) пропердин, комплемент, лизоцим
E) гиперчувствительность замедленного типа
356.Какими препаратами создается активный иммунитет?
A) аллергенами
B) антибиотиками
C) вакцинами
D) гипериммунными сыворотками
E) дезинфектантами
357.Через какой промежуток времени после вакцинации животных появляется иммунитет?
А) 24 часа
B) 48 часов
C) 2 месяца
D) неделя
E) 2-3 недели
358.Центральный орган иммунной системы:
А) селезенка
В) костный мозг
С) печень
D) лимфоузлы
Е) почка
359. С чем связана естественная невосприимчивость:
УМКД
042-14-4-03.01.20.01 / 03-2009
Редакция .№1
стр. 169 из 169
А) врожденной невосприимчивостью
В) образованием антител
С) образованием интерферона
D) функцией Т-клеток
Е) функцией В-клеток
360.В чем суть серологических реакций?
А) в специфическом взаимодействии антигена и антитела
В) в патогенном действии вируса
С) в разрушении антител вирусами
D) в неспецифическом взаимодействии антигена и антитела
Е) в лизисе вирусов физиологическим раствором
361.Какие антитела относятся к секреторным?
А) Ig M
В) Ig A
С) Ig G
D) Ig E
Е) Ig D
362.При иммунизации какими вакцинами могут быть осложнения?
А) субъединичные
В) инактивированные
С) живые
D) генноинженерные
Е) синтетические
363.С какой целью осуществляется разведение ( титрование) сыворотки в серологических реакциях?
А) для растворения антител
В) для определения титра антигена
С) для определения титра физиологического раствора
D) для определения титра антител
Е) для растворения антигена
364.Что такое сыворотка крови реконваленсцентов
А) сыворотка больных в острой форме
В) сыворотка переболевших животных
С) гипериммунная сыворотка
D) сыворотка здоровых животных
Е) сыворотка морской свинки
365.При какой микроскопии используются УФ-лучи?
А) световой
В) фазовоконтрастной
С) электронной
D) люминесцентной
Е) темнопольной
366. Колостральные антитела обнаруживают:
А) в сыворотке крови
В) в молозиве
С) в моче
D) в спиномозговой жидкости
Е) в лимфе