Зупрево® 18% - MSD Animal Health
advertisement
Все под контролем Зупрево® 18% – новый взгляд на лечение и профилактику респираторных заболеваний КРС 2 Все под контролем 1 Содержание 1 2 3 4 2 Тилдипирозин – механизм действия нового макролида ������������������������������������������������������������������������������������ 5 Зупрево® 18%: важнейшие свойства уникального препарата ����������������������������������������������������������������������� 11 Профилактическая эффективность препарата Зупрево® 18% против респираторных 3 заболеваний КРС в опыте с заражением Mannheimia haemolytica ����������������������������������� 19 Зупрево® 18%: эффективность при лечении ОРЗ КРС у телят в сравнении с тулатромицином �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 27 Рекомендации по применению Зупрево® 18% ���������������������������������������������������������������������� 34 4 Reprint of the papers presented at the symposium: Zuprevo® - A new paradigm in the treatment and prevention of BRD. 6th European College of Bovine Health Management, 7-9 September 2011, Liege, Belgium. 3 1 4 Все под контролем 1 1. Тилдипирозин — механизм действия нового макролида Stephen Douthwaite, Jacob Poehlsgaard и Ralf Warrass 2 3 4 5 Тилдипирозин — механизм действия нового макролида 1 Stephen Douthwaite 1, Jacob Poehlsgaard 1 and Ralf Warrass 2 1 Отделение биохимии и молекулярной биологии, Университет Южной Дании, Campusvej 55, DK-5230 Odense M, Дания. 2 Отдел разработки лекарств Intervet Innovation GmbH группы компаний MSD Animal Health, Zur Propstei, D-55270, Швабенхейм, Германия. Реферат макролактонное кольцо, состоящее из 12–16 атомов, замещённое несколькими (до трёх) фрагментами Недавно компания MSD Animal Health получила сахаров. Наиболее успешными макролидами в боль- регистрационное удостоверение Европейского ничных и полевых условиях являются химические про- Союза на препарат Зупрево 18% для лечения и про- изводные природных прекурсоров, характеризующи- филактики респираторных заболеваний крупного еся стабильностью, эффективностью, безопасностью ® рогатого скота. Активный ингредиент тилдипиро- и удобством применения. Последней разработанной зин — первый на рынке трёхосновный макролид молекулой является тилдипирозин — новая лекар- с 16-членным кольцом. Гибкость липофильно-гидро- ственная субстанция для лечения респираторных фильных свойств трёх основных центров тилдипи- заболеваний свиней и крупного рогатого скота. Пока- розина отвечает за его высокую растворимость, зано, что тилдипирозин особенно эффективен против быстрое распределение в тканях, высокий уровень инфекций дыхательных путей, вызываемых грамотри- накопления в тканях лёгких и прекрасную антими- цательными бактериями — Mannheimia haemolytica, кробную активность против бактерий, вызывающих Pasteurella multocida, Histophilus somni, Bordetella респираторные заболевания крупного рогатого bronchiseptica, Actinobacillus pleuropneumoniae скота. Антимикробная активность тилдипирозина и Haemophilus parasuis. обеспечивается за счёт эффективного проникновения через бактериальную клеточную стенку В настоящее время тилдипирозин является единствен- и связывания с бактериальной рибосомой. С помо- ным на рынке трёхосновным макролидом с 16-членным щью экспериментов по химическому футпринтингу кольцом. В химической структуре тилдипирозина и молекулярному моделированию мы сравнили сохранён центральный макролактонный тилонолидный процесс прикрепления тилдипрозина и других фрагмент из природного препарата тилозина, однако макролидов (тилозина, тилмикозина, тулатроми- имеется ряд отличий, наиболее очевидным из которых цина) к рибосомам и обнаружили, что, помимо является наличие двух пиперидиновых заместителей общих центров прикрепления, молекула тилдипи- (рис. 1). Один пиперидин добавлен в положении розина обладает уникальными механизмами свя- 20 тилонолидного кольца, а другой замещает собой зывания. Анализ транскрипции/трансляции in vitro сахар мицинозу в положении 23. Кроме того, дисаха- показал, что тилдипирозин является высокоэффек- рид микаминоза–микароза у атома С5 был укорочен тивным ингибитором рибосомального синтеза с удалением сахара микарозы. В образовавшейся пептидов с IC 50 = 0,23 (±0,01) мкМ. Это суще- таким образом структуре содержится три основных ственно лучше, чем, например, у тилмикозина, центра со значениями рКа 9,8, 8,8 и 8,1. Структура тил- у которого IC50 составляет 0,36 (±0,02) мкМ. дипирозина обладает как липофильными, так и гидрофильными свойствами, зависящими от рН среды и вза- Макролиды представляют обширную группу природ- имодействия с мембранами и белками. Это наделяет ных соединений, обладающих широким спектром молекулу рядом положительных свойств, включая терапевтической активности, наиболее хорошо изу- более высокую растворимость, улучшенную способченной и наиболее важной из которых в настоящее ность к проникновению в ткани и накоплению в очаге время является антимикробная активность. С химиче- инфекции (тканях лёгких). Кроме того, эффективное ской точки зрения структура макролидов включает 6 проникновение тилдипирозина через внешнюю мем- Все под контролем брану грамотрицательных бактерий является одним из макролид с 16-членным циклом, тилмикозин, имеет свойств, обеспечивающих особенно высокую эффек- IC50 = 0,36 ± 0,02 мкМ (см. табл. 1). тивность данного средства против таких патогенных микроорганизмов, как M. haemolytica и P. multocida. 16-членные макролиды IC50* (среднее ± стандартное отклонение) Тилдипирозин 0,23 ± 0,01 мкМ Тилмикозин 0,36 ± 0,02 мкМ 1 * Концентрация, при которой ингибируется 50% синтеза протеина. Таблица 1. Ингибирование рибосомального синтеза пептидов, определённое в спаренной транскрипционной/трансляционной системе с рибосомами E. coli. Установление того факта, что тилдипирозин является эффективным ингибитором синтеза белка, привело к вопросам о том, какие молекулярные взаимодействия Рисунок 1. Химическая структура трёхосновного макролида с 16-членным кольцом тилдипирозина с участием тилдипирозина происходят на участке инги- В то время как улучшенная способность к проникнове- мов молекулярных взаимодействий других макролидов. нию в клетку является важной характеристикой, успеш- На эти вопросы мы отвечали в два этапа: во-первых, ное антимикробное соединение также должно являться в структуре рибосомы с помощью химического фут- эффективным ингибитором бактериального метабо- принтинга были отмечены сайты контакта с макролид- лизма. Аналогично другим макролидам, тилдипирозин ными препаратами, а затем эти данные использовались ингибирует процесс трансляции — синтеза новых в расчётных методах при молекулярно-динамическом пептидов и белков бактериальными рибосомами моделировании, призванном визуализировать то, как (см. рис. 2). лекарственные молекулы занимают свой сайт связыва- бирования в рибосоме и отличаются ли они от механиз- ния на рибосоме и как они ориентируются. В случае тилозина получена в высоком разрешении структура кристалла лекарства, связанного с соответствующим участком рибосомы. Мы использовали эти данные для тРНК Сайт связывания тилдипирозина мРНК проверки и валидации нашего метода молекулярно-динамического моделирования. Наша независимым образом полученная модель связывания тилозина с рибосомой была сопоставлена с кристаллической структурой на рис. 3, причём были получены в высокой степени согласованные данные. Данные футпринтинга указывают, что макролидные Рисунок 2. Структура бактериальной рибосомы. Р указывает на пептидил-трансферазный центр в 50S-субъединице рибосомы, в котором аминокислоты переносятся по одной от тРНК к растущему пептиду. Красная стрелка указывает на канал, через который синтезируемый пептид покидает рибосому. Жёлтым кругом выделен сайт связывания тилдипирозина. Адаптировано по материалам Poehlsgaard, J. & Douthwaite, S. (2005). Antibiotic targets on the bacterial ribosome. Nature Reviews Microbiology. 3: 870- 881. препараты тилдипирозин, тилмикозин и тилозин связываются в одном и том же участке рибосом Pasteurella и E. coli, причём последняя служит стандартной моделью для исследований такого типа. Все макролиды взаимодействуют с рибосомной РНК и нуклеотидами А2058 и А2059, расположенными в канале большой Используя трансляционную систему in vitro с рибосо- субъединицы рибосомы. Данное наблюдение было ожи- мами грамотрицательной бактерии Escherichia coli, мы даемым исходя из ранее проведённых исследований показали, что синтез белка ингибировался тилдипиро- механизма действия других макролидных соединений зином на 50% при концентрации последнего 0,23 мкМ (напр. Poulsen, et al. 2000. J Mol Biol, 304: 471–481); тем (IC50 = 0,23 ± 0,01 мкМ); при этом показано, что другой не менее, контакты тилдипирозина с соседними нукле7 отидами отличались по сравнению с контактами других исследуемых макролидов. 1 5-микароза Два пиперидиновых кольца в тилдипирозине обеспечи- 5-микаминоза вают возможность уникальных взаимодействий (рис. 4). Важно, что пиперидин в положении 20 ориентирован в просвет рибосомного канала в месте, которое не 23-мициноза r-белок L4 занято какими-либо заместителями ни у одного другого макролида. Из этого положения 20-пиперидин потенциально может блокировать рост вновь синтезируемой пептидной цепочки, когда она проходит по каналу. Эта r-белок L34 модель согласуется с данными об IC50, которые указы- Выход вают на более высокую активность тилдипирозина Рисунок 3. Сайт связывания макролида в рибосомном канале. Проверка принципа в основе экспериментального подхода. Приведена кристаллическая структура тилозина (показано розовым цветом, база данных структур белков: 1K9M) и наложенный на неё сайт связывания тилозина, минимизированный расчётными методами (показан красным). Важные нуклеотиды, выявленные методом футпринтинга и кристаллографических исследований, пронумерованы и показаны светло-серым цветом; указаны рибосомные белки (р-белки), близкие к сайту связывания макролида. Верхняя стрелка указывает в направлении начала канала в пептидилтрансферазном центре (РТС), а нижняя стрелка показывает на путь выхода вновь синтезированной пептидной цепочки из канала. Масштаб показан отрезком в 10 ангстрем. 5-микароза 23-пиперидин 23-мициноза r-белок L22 Выход 5-микароза r-белок L4 Рисунок 4. Вид рассчитанного комплекса тилозина (красный) и тилдипирозина (жёлтый) с другого ракурса. Указаны важные различающиеся заместители двух макролидов. 8 (в сравнении с тилмикозином) с точки зрения ингибирования синтеза белка на бактериальных рибосомах, что отражает улучшенное структурное соответствие этого нового трёхосновного макролида с 16-членным кольцом с его молекулярной мишенью. Все под контролем Notes 1 9 2 10 Все под контролем 1 2 2. Зупрево® 18%: важнейшие свойства уникального препарата Rainer Röpke, Monika Menge, Markus Rose, Andreas Ehinger, Cornelia Bohland, Cornelia Wilhelm, Eva Zschiesche, Susanne Kilp, Wibke Metz и Mark Allan 3 4 11 Зупрево® 18%: важнейшие свойства уникального препарата Rainer Ropke, Monika Menge, Markus Rose, Andreas Ehinger, Cornelia Bohland, Cornelia Wilhelm, Eva Zschiesche, Susanne Kilp, Wibke Metz, Mark Allan Intervet Innovation GmbH, группа компаний MSD Animal Health Реферат периоду выведения 47 дней. Так им образом, Зупрево ® 18% представляет собой новый макролид Недавно MSD Animal Health получила регистрацион- в удобной форме выпуска с уникальной фармакоки- ное удостоверение Европейского Союза (ЕС) на пре- нетикой, широким терапевтическим диапазоном парат Зупрево 18% для лечения и профилактики и относительно коротким периодом выведения. ® респираторных заболеваний крупного рогатого скота. 2 Его активный ингредиент тилдипирозин — первый Тилдипирозин — действующее вещество препарата трёхосновный макролид с 16-членным кольцом. Раз- Зупрево® 18% — представляет собой первую зареги- работанный специально для КРС состав представляет стрированную трёхосновную разновидность макроли- собой готовый к применению стерильный водный рас- дов с 16-членным кольцом и разработан исключительно твор, содержащий 180 мг тилдипирозина/мл и пред- для применения в ветеринарии. Основное преимуще- назначенный для введения в виде однократной под- ство над ранее разработанными соединениями обу- кожной инъекции (4 мг/кг массы тела), не более 10 мл словлено улучшенной фармакокинетикой тилдипро- в одно место введения, что достаточно на животное зина. Недавно компания MSD Animal Health получила массой 450 кг. Уникальная фармакокинетика препа- регистрационное удостоверение на применение пре- рата Зупрево ® 18% характеризуется быстрым всасы- парата Зупрево ® 18% при респираторных заболева- ванием из места введения и длительным сохране- ниях крупного рогатого скота. Данные о Зупрево® 18%, нием высоких концентраций в лёгких и бронхиальной представленные в настоящей статье, опубликованы жидкости. Средняя максимальная концентрация в Экспертном отчёте Комитета по ветеринарным лекар- в плазме (С мах) достигается уже через 23 минуты ственным препаратам (CVMP) (Европейское агентство (Тмах) после инъекции, а терминальное время полу- по лекарственным средствам — EMA, 2011 г.). выведения из плазмы (Т1/2) составляет приблизительно 9 дней. Объём распределения после в/в вве- Тилдипирозин выпускается в виде готового к примене- дения, составляющий 50 л/кг, исключительно велик нию стерильного водного раствора для парентераль- в сравнении с другими макролидами пролонгирован- ного введения, одной дозы которого достаточно для ного дейст-вия, в то время как его клиренс, состав- борьбы с респираторными заболеваниями крупного ляющий 144 мл×ч/кг, относительно мал. МИК90 тил- рогатого скота и свиней. Рассчитанный для КРС состав, дипирозина составляет 1 мкг/мл для M. haemolytica содержащий 180 мг тилдипирозина/мл, гарантирует и P. multocida и 4 мкг/мл для H. somni. Концентрация удобную дозировку молодым телятам и взрослым тилдипирозина в тканях лёгких превышала МИК90 для животным. Это позволяет вводить препарат животным H. somni в течение приблизительно 16 дней, а МИК90 массой до 450 кг одной инъекцией. Рекомендованная для M. haemolytica и P. multocida — в течение как мини- доза 4 мг тилдипрозина / кг массы тела вводится под- мум 28 дней. Широкий терапевтический диапазон кожно (п/к) в объёме 2,2 мл / 100 кг (1 мл / 45 кг) массы Зупрево 18% был подтверждён в исследованиях, тела (МТ) для лечения и профилактики респираторных в которых рекомендованная доза 4 мг тилдипиро- заболеваний крупного рогатого скота (ОРЗ КРС), вызы- зина/кг массы тела превышалась вплоть до 10 раз. ваемых M. haemolytica, P. multocida и H. somni. Благо- Более того, о безопасности для потребителя свиде- даря низкой вязкости препарат легко вводится, что тельствует высокое допустимое суточное потребление подтверждено в испытаниях при -10 °С. ® тилдипирозина (6000 мкг/чел./сут), соответствующее 12 Все под контролем Зупрево® 18% характеризуется широким терапевти- Зупрево® 18% после в/в введения, составляющий 50 л/кг, ческим диапазоном, подтвержденным исследовани- исключительно велик в сравнении с препаратами тула- ями безопасности для животных, в которых рекомен- тромицин (около 1 л/кг, Nowakowski et al., 2004), гами- дованная доза была превышена до 10 раз, а препарат тромицин (около 25 л/кг, Huang et al., 2010) и тилмико- хорошо переносился после внутривенного (в/в) вве- зин 300 (15,3 л/кг, Lombardi et al., 2010). В то же время дения КРС. О безопасности Зупрево 18% для потре- клиренс Зупрево® 18% (144 мл × ч/кг) меньше, чем кли- бителя свидетельствует высокая допустимая суточная ренс препаратов т улатромицин (180 мл × ч/кг, доза (ДСД) тилдипирозина (6000 мкг/чел./сут), опре- Nowakowski et al., 2004), гамитромицин (712 мл × ч/кг, делённая по результатам комплексного набора токси- Huang et al., 2010) и тилмикозин 300 (686 мл × ч/кг, кологических и микробиологических исследований Lombardi et al., 2011). Эти наблюдения подтверждаются безопасности; ДСД приблизительно в 10 раз превы- длительным поддержанием концентраций препарата шает ана логичный показатель т улатромицина Зупрево® 18% в тканях лёгких в сравнении с препара- (660 мкг/чел./сут, тулатромицин: Европейский отчет по тами тулатромицин и гамитромицин, что показано на оценке лекарственного препарата (EPAR)) и гамитро- рис. 4–6. ® мицина (600 мкг/чел./сут (EPAR)). Это отражается в более коротком периоде выведения, составляющем МИК90 тилдипирозина определялась для патогенных для Зупрево 18% 47 дней, в сравнении с другими микроорганизмов, чаще всего вызывающих ОРЗ КРС. макролидами (49 дней, тулатромицин: EPAR; 64 дня, Она составила 1 мкг/мл для M. haemolytica и P. multocida гамитромицин: EPAR). и 4 мкг/мл для H. somni. Значения МИК90 определялись ® 2 при стандартных условиях испытаний Института клиОт других макролидов препарат Зупрево 18% отлича- нических и лабораторных стандартов (CLSI) для эпи- ется в первую очередь своим уникальным фармакоки- демиологически неродственных изолятов, полученных нетическим профилем. Фармакокинетика у крупного рогатого скота (дикий тип) в различных Зупрево® 18% после п/к инъекции тщательно исследо- странах Европы. Как и у других макролидов, в частно- валась при введении в разных дозах, в разных матри- сти, тулатромицина, гамитромицина и тилмикозина, цах, а также в сравнении в/в и п/к инъекций. Важней- концентрация тилдипирозина в плазме была ниже шими фармакокинетическими качествами Зупрево ® МИК90 (Nowakowski et al., 2004; Godinho, 2008; Huang et 18% являются быстрое всасывание,обширное распре- al., 2010; Modric et al., 1998; Shryock et al., 1996). Поэ- деление и длительное время полувыведения. Средняя тому можно сделать вывод, что типичные методы фар- максимальная концентрация в плазме (Смах) достига- макодинамического ана лиза, под ходящие д ля ется уже через 23 минуты (Тмах) после п/к введения 4 мг бета-лактамных антибиотиков, хинолонов и аминогли- тилдипирозина / кг МТ. В сравнении с опубликован- козидов не подходят для описания активности новых ными графиками зависимости концентрации в плазме макролидов (Nightingale, 1997). Другие потенциальные от времени для тулатромицина (Nowakowski et al., 2004) фармакодинамические свойства этой группы лекар- ® и гамитромицина (Huang et al., 2010), концентрация тил- ственных средств включают стимуляцию цитокиновых дипирозина в плазме выше и стабильнее, что показано сетей и активацию программируемой клеточной на рис. 1–3. Это отражается в терминальном времени смерти (апоптоза) (Lees et al., 2006). Эти виды актив- полувыведения Зупрево 18% из плазмы (Т1/2), состав- ности — в дополнение к непосредственным антибак- ляющем приблизительно 9 дней, что существенно териальным эффектам — могут оказывать дополни- выше аналогичного показателя для препаратов тула- те л ь н о е и л и с и н е р ге т ич е с ко е д е й с т в и е п р и тромицин (около 4 дней, Nowakowski et al., 2004), Зак- инфекционных заболеваниях лёгких. ® тран (> 2 дней, Huang et al., 2010) и тилмикозина (около 1 дня, Lombardi et al., 2010). Концентрация тилдипирозина в тканях лёгких превышает МИК90 H. somni в течение приблизительно 16 дней Известно, что макролиды накапливаются в тканях лёг- и МИК90 M. haemolytica и P. multocida — в течение как ких в концентрациях, во много раз превышающих минимум 28 дней, что существенно больше в сравне- концентрацию в плазме. Объём распределения нии с препаратами тулатромицин и гамитромицин, как 13 теля респираторных заболеваний, являющиеся мише- зано, что клиническая эффективность препарата нями тилдипирозина, прикрепляются к клеткам брон- Зупрево 18% сохраняется в течение 21 дня. Прогнозы хиального эпителия Концентрация и остаются во внеклеточном в лёгких относительно эффективности, базирующиеся на кон- 1 пространстве. Поэтому чтобы продемонстрировать центрации в гомогенатах лёгочной ткани, подлежат Draxxin воздействие препарата на бактерии в очаге инфекции, 0,1 научному обсуждению (Toutain, 2009). Все 3 возбуди- была подвергнута анализу бронхиальная жидкость, Таблицы и рисунки Концентрация в плазме 0,01 Концентрация в плазме 0,001 0,1 Зупрево 18% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Время (дни) 0,01 Концентрация в плазме 0,1 0,1 Время (дни) 0,01 0,01 0,01 Концентрация в лёгких 1 0,001 ® 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20Zuprevo 21 22 23 24 Время (дни) 0,1 0,01 Концентрация в лёгких 100 0,001 10 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 1 Время (дни) 0.1 Зупрево® 18% 0,01 0,001 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 тулатромицин 18 19 20 21 22 23 24 Время (дни) 0,01 Концентрация в плазме Концентрация в плазме 0 1 2 3 4 5 6 7 1 0.1 Концентрация в лёгких 0,01 100 0,001 Зупрево® 18% 0,1 0,01 Концентрация в лёгких 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 100 Время (дни) 10 тулатромицин 1 0,1 0,01 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 тулатромицин Тулатромицин: Nowakowski et al (2004) Veterinary Therapeutics, 5, 60–74 0,01 0,01 1 Время (дни) 10 0,001 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 гамитромицин Время (дни) 100 0,001 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 0,1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10Время (дни) 0,1 0,1 Draxxin® Zactran® Рисунок10 4. 0График временной зависимости концентрации 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 тулатромицин тилдипирозина (Зупрево ® 18%) в лёгочной ткани после п/к введения Время (дни) 1 рекомендуемой дозы препарата. Концентрация в плазме 1 0,001 0,001 0 1 0,001 1 Концентрация, мкг/г Концентрация, мкг/г Концентрация, мкг/мл Концентрация, Концентрация, мкг/мл мкг/мл Концентрация, мкг/млКонцентрация, Концентрация,мкг/мл мкг/мл ® Zactran® 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Концентрация 9 10 11 12 13 14 15в16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 лёгких ® Рисунок 1. 1График временной зависимости концентрации 0,001 тилдипирозина (Зупрево ® 18%) в плазме после п/к введения ® 18% 0 1дозы 2 3 препарата. 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 тулатромицин 18Зупрево 19 20 21 22 23 24 рекомендуемой Концентрация в плазме Рисунок 2. График временной зависимости концентрации гамитромицин 0,001 тулатромицина в плазме после п/к введения рекомендуемой дозы 0 1 2 3 3 4 5 6 6 7 8 9 9 10 11 12 12 13 14 15 17 18 20 21 23 24 0 1 2 4 5 7 8 10 11 13 14 15 16 16 17 18 19 19 20 21 22 22 23 24 препарата. 0,1 Концентрация, мкг/мл Zuprevo® 1 Концентрация, мкг/г 2 Зупрево® 18% 0,1 Время (дни) Тулатромицин: Nowakowski et al (2004) Veterinary Therapeutics, 5, 60–74 Рисунок 5. График временной зависимости концентрации тулатромицина в лёгочной ткани после п/к введения рекомендуемой дозы препарата. Время(дни) (дни) Время 0,01 Концентрация в плазме 1 0,001 0,1 гамитромицин 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Время (дни) 0,01 Концентрация в лёгких Концентрация, мкг/г Концентрация, мкг/мл Концентрация, мкг/мл 1 Концентрация, мкг/г Концентрация, мкг/г ® Концентрация, мкг/г показано в табл. 1. В полевых испытаниях в ЕС пока- 100 10 гамитромицин 1 0.1 0,01 0,001 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 0,001 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Время (дни) Время (дни) Зактран ®: Huang et al (2010) Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics, 33, 227–237; Giguere et al (2011) American Journal of Veterinary Research, 72, 326–330 Consolidated lung concentrations 14 Рисунок 6. График временной зависимости концентрации 10 гамитромицина в лёгочной ткани после п/к введения рекомендуемой дозы препарата. 1 1 µg/mL Концентрация, мкг/г Рисунок 3. График временной зависимости концентрации гамитромицина в плазме после п/к введения рекомендуемой дозы препарата. 100 0.1 Zuprevo® 0,01 Draxxin® Zactran® 0,001 Все под контролем полученная из живых особей крупного рогатого скота триклеточной и внеклеточной среде. Так как известно, без анестезии в ряд моментов времени. Был использо- что макролиды накапливаются в фагоцитах (Gladue et ван метод, основанный на методиках, описанных al., 1989; Scorneaux & Shryock, 1998), концентрация тил- Halstead et al. (1991) и позволяющий безопасным обра- дипирозина, определённая в бронхиальной жидкости, зом собирать образцы бронхиальной жидкости, не отражает в том числе и эту часть накопленного в лёг- загрязнённые кровью и не требующие учёта разбав- ких препарата. Бронхоальвеолярный смыв (БАЛ) опи- ления. Образцы бронхиальной жидкости отбирались сан в ряде работ как метод определения концентрации последовательно после введения препарата у одних препарата во внеклеточной среде в жидкости эпите- и тех же животных без анестезии. Средняя концентра- лиальной выстилки лёгких (ЖЭВ) и во внутриклеточ- ция тилдипирозина в бронхиальной жидкости превы- ной среде в клетках бронхоальвеолярной смывной шала МИК90 M. haemolytica и P. multocida в течение жидкости. Однако аналитическая процедура остаётся 21 дня и приближалась к МИК90 H. somni в течение при- предметом дискуссий (Zeitlinger et al., 2005; Kiem & близительно 3 дней. Временная зависимость средней Schentag, 2008); таким образом, для точного описания концентрации тилдипирозина в плазме, бронхиальной ФК/ФД взаимосвязей для макролидов, использую- жидкости и тканях лёгких представлена на рис. 7. щихся в ветеринарии, в том числе для тилдипирозина, 2 требуются дополнительные исследования. В то время как степень связывания тилдипирозина с белками в бронхиальной жидкости крупного рога- Обобщая все вышесказанное, можно сделать вывод, того скота составляет всего 30%, признаётся, что кон- что Зупрево® 18% представляет собой новый макролид центрация препарата, определённая в бронхиальной с уникальной фармакокинетикой, широким терапевти- жидкости вышеописанным методом, равна совокуп- ческим диапазоном и относительно коротким перио- ному содержанию лекарственной субстанции во вну- дом выведения, имеющий удобную форму выпуска. Количество дней с концентрацией препарата в лёгочной ткани выше МИК90 M. haemolytica (МИК90) P. multocida (МИК90) H. somni (МИК90) > 28 (1 мкг/мл) > 28 (1 мкг/мл) ~ 16 (4 мкг/мл) Тулатромицин ~ 10a (2 мкг/млb) > 15a, d (1 мкг/млb) ~ 0,5e (4 мкг/млb) Гамитромицин ~ 15c (0.5 мкг/млc) ~ 12c (1 мкг/млc) ~ 12c (1 мкг/млc) Зупрево 18% (тилдипирозин) ® Nowakowski et al (2004) Veterinary Therapeutics, 5, 60–74. Godinho (2008) Veterinary Microbiology, 129, 426–432. c Giguere et al (2011) American Journal of Veterinary Research, 72, 326–330. d Cox et al (2010) International Journal of Applied Veterinary Medicine, 8, 129–137. е Рассчитано с помощью ПО WinNonlin ® на основе данных, опубликованных в Nowakowski et al (2004) Veterinary Therapeutics, 5, 60–74. a b Таблица 1. Консолидированные данные о продолжительности (количестве дней) поддержания концентрации в лёгочной ткани, превышающей МИК90 для M. haemolytica, P. multocida и H. somni для тилдипирозина (Зупрево ® 18%), тулатромицина и гамитромицина после п/к введения рекомендованной дозы препарата. мкг тилдипирозина/мл или мкг/г 100 10 1 Лёгочная ткань Бронхиальная жидкость (in vivo) 0,1 Плазма крови 0,01 0,001 0 3 6 9 12 15 Время (дни) 18 21 24 27 30 Рисунок 7. Консолидированные графики временной зависимости концентрации тилдипирозина (Зупрево ® 18%) в лёгочной ткани, бронхиальной жидкости (in vivo) и плазме после п/к введения рекомендованной дозы препарата. 15 Литература: 1. Cox, S.R., McLaughlin, C., Fielder, A.E., Yancey, M.F., Bowersock, T.L., Garcia-Tapia, D., Bryson, L., Lucas, M.J., Robinson, J.A., Nanjiani, I. & Brown, S.A. (2010) Rapid and prolonged distribution of tulathromycin into lung homogenate and pulmonary epithelial lining fluid of Holstein calves following a single subcutaneous administration of 2.5 mg/kg body weight. International Journal of Applied Research in Veterinary Medicine, 8, 129 – 137. 2. Draxxin: EPAR – Scientific Discussion: http://www.ema.europa.eu/ema/index.jsp?curl=pages/medicines/veterinary/medicines/000077/vet_med_000113.jsp&murl=menus/medicines/medicines.jsp&mid=WC0b01ac058001fa1c. 3. EMA (2011) CVMP Assessment Report. Zuprevo (EMEA/V/C/002009). http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_ library/EPAR_-_Public_assessment_report/veterinary/002009/WC500106577.pdf. 4.Halstead, S.L., Walker, R.D., Baker, J.C., Holland, R.E., Stein, G.E. & Hauptman, J.G. (1991) Pharmacokinetic evaluation of ceftiofur in serum, tissue chamber fluid and bronchial secretions from healthy beef-bred calves. Canadian Journal of Veterinary Research, 56: 269 – 274. 5.Huang, R.A., Letendre, L.T., Banav, N., Fischer, J. & Somerville, B. (2010) Pharmacokinetics of gamithromycin in cattle with comparison of plasma and lung tissue concentrations and plasma antibacterial activity. Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics, 33, 227 – 237. 6.Giguère, S., Huang, R., Malinski, T.J., Dorr, P.M., Tessman, R.K. & Sommerville, B.A. (2011) Disposition of gamithromycin in plasma, pulmonary epithelial lining fluid, bronchoalveolar cells, and lung tissue in cattle. American Journal of Veterinary Research, 72, 326 – 330. 7.Gladue, R.P., Bright, G.M., Isaacson, R.E. & Newborg, M.F. (1989) In vitro and in vivo uptake of azithromycin (CP-62,993) by phagocytic cells: possible mechanism of delivery and release at sites of infection. Antimicrobial Agents Chemotherapy, 33, 277 – 282. 8.Godinho, K.S. (2008) Susceptibility testing of tulathromycin: Interpretative breakpoints and susceptibility of field isolates. Veterinary Microbiology, 129, 426 – 432. 9.Kiem, S. & Schentag, J.J. (2008) Interpretation of antibiotic concentration ratios measured in epithelial lining fluid. Antimicrobial Agents Chemotherapy, 52, 24 – 36. 10.Lees, P., Concordet, D., Aliabadi, F.S. & Toutain, P.L. (2006). Drug selection and optimization of dosage schedules to minimize antimicrobial resistance. In Antimicrobial Resistance in Bacteria of Animal Origin. Ed Aarestrup, F.M., pp. 49 – 60. ASM Press, Washington, D.C., USA. 11.Lombardi, K.R., Portillo, T., Hassfurther, R. & Hunter, R.P. (2011) Pharmacokinetics of timicosin in beef cattle following intravenous and subcutaneous administration. Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics, doi:10.1111/j.1365 – 2885.2011.01268.x. 12.Nightingale, C.H. (1997) Pharmacokinetics and pharmacodynamics of newer macrolides. Pediatric Infectious Disease Journal, 16, 438 – 443. 13.Nowakowski, M.A., Inskeep, P.B., Risk, J.E., Skogerboe, T.L., Benchaoui, H.A., Meinert, T.R., Sherington, J. & Sunderland, S.J. (2004) Pharmacokinetics and lung tissue concentrations of tulathromycin, a novel triamilide antibiotic in cattle. Veterinary Therapeutics, 5, 60 – 74. 14.Scorneaux, B. & Shryock, T.R. (1999) Intracellular accumulation, subcellular distribution, and efflux of tilmicosin in bovine mammary, blood, and lung cells. Journal of Dairy Science. 82, 1202 – 1212. 15.Shryock, T.R., White, D.W., Staples, J.M. & Werner, C.S. (1996) Minimum inhibitory concentration breakpoints and disk diffusion inhibitory zone interpretive criteria for tilmicosin susceptibility testing against Pasteurella spp. associated with bovine respiratory disease. Journal of Veterinary Diagnostic Investigations, 8, 337 – 344. 16.Toutain, P.L. (2009) PK/PD approach for antibiotics: tissue or blood drug levels to predict antibiotic efficacy. Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics, 32 (Suppl. 1), 19 – 21. 17.Zeitlinger, M., Mueller, M. & Joukhadar, C. (2005) Lung microdialysis – a powerful tool for the determination of exogenous and endogenous compounds in the lower respiratory tract (mini-review). The AAPS Journal, 7, E600 – E608. 18.Zactran: EPAR – Summary for the public: http://www.ema.europa.eu/ema/index.jsp?curl=pages/medicines/veterinary/medicines/000129/vet_med_000198.jsp&murl=menus/medicines/medicines.jsp&mid=WC0b01ac058001fa1c. 2 16 Все под контролем Notes 2 17 3 18 Все под контролем 1 2 3. Профилактическая эффективность препарата Зупрево® 18% против респираторных заболеваний КРС в опыте с заражением Mannheimia haemolytica 3 Markus Rose, Wibke Metz, Joachim Ullrich, Eva Zschiesche, Silke Sczesny, Mark Allan и Rainer Röpke 4 19 Профилактическая эффективность препарата Зупрево® 18% против респираторных заболеваний КРС в опыте с заражением Mannheimia haemolytica Markus Rose, Wibke Metz, Joachim Ullrich, Eva Zschiesche, Silke Sczesny, Mark Allan and Rainer Rоpke Intervet Innovation GmbH, группа компаний MSD Animal Health Реферат смертности, а также затрат на лечение (Babcock et al. 2010; Schneider et al. 2009). Вспышки респираторных Профилактическая терапия антибиотиками — важ- патологий наиболее часто происходят после стресса, ный элемент программы охраны здоровья стада, вызванного транспортировкой и совместным содержа- нацеленный на минимизацию заболеваемости респи- нием у молодых, только что отнятых телят, часто постураторными заболеваниями крупного рогатого скота пающих из множества различных ферм, с неизвестным (ОРЗ КРС) и сопутствующих расходов. Недавно ком- ветеринарным анамнезом или иммунным статусом (Step пания MSD Animal Health получила регистрационное et al. 2008; Taylor et al. 2010). Пик заболеваемости ООРЗ удостоверение Европейского Союза на препарат КРС у этих телят приходится на первые несколько Зупрево ® 18% для лечения и профилактики респира- недель после нача ла совместного содержания торных заболеваний крупного рогатого скота. Актив- (Edwards, 2010), однако распространённость инфекций, ный ингредиент, тилдипирозин, представляет собой вызывающих эту болезнь, может оставаться высокой первый трёхосновный макролид с 16-членным коль- приблизительно до 80-го дня откорма (Snowder et al., цом, характеризующийся быстрым всасыванием из 2006). Так как смешивание телят является распростра- места подкожного введения и длительным сохране- нённой практикой, то полная ликвидация возбудителей 3 нием высоких концентраций в лёгких и бронхиальной респираторного тракта представляется маловероят- жидкости. Эти фармакокинетические свойства ной (Snowder et al., 2006). делают Зупрево 18% оптимальным вариантом для ® профилактики ОРЗ КРС, что и показано в исследова- Острые респираторные заболевания КРС — это мнонии с заражением Mannheimia haemolytica. Этим гофакторные заболевания, имеющие как инфекцион- исследованием подтверждается, что тилдипирозин ную так и неинфекционную природу (Lekeux 1995; (4 мг/кг, Зупрево 18%) предотвращает падеж и по Stoeber 2002; Edwards 2010; Taylor et al. 2010): ® результатам оценки клинической картины и концен- • возбудители вирусной природы (РСВ КРС, ПГ-3, ВГ-1, трации бактерий в легочной ткани эффективность ВД КРС); Зупрево ® 18% превосходит физраствор и тулатроми- • возбудители бактериальной природы (M. haemolytica, цин (2,5 мг/кг). P. multocida, H. somni, M. bovis); • экзо- и эндогенные факторы (напр. уход, физиоло- Роль профилактической терапии в борьбе с острыми респираторными заболеваниями крупного рогатого скота (ООРЗ КРС) гия, условия окружающей среды). Возбудители вирусной природы часто играют инициирующую роль, являясь предрасполагающим фактором к вторичной бактериальной инфекции КРС. Однако M. haemolytica известна также как первичный патоген 20 ООРЗ КРС сохраняет своё значение для современного и традиционно является наиболее часто обнаружива- скотоводства, учитывая высокую заболеваемость в ста- емым видом болезнетворных бактерий (Taylor et al., дах, наносящую существенный экономический ущерб 2010). При бактериальной инфекции заболевание за счёт снижения продуктивности больных животных, обычно переходит в фибринозную или гнойную брон- Все под контролем хопневмонию с клиническими симптомами выражен- лактики ОРЗ КРС в ситуациях, когда важно обеспе- ного диспноэ и лихорадкой, кашлем, выделениями из чить быстрое действие антибиотика и сохранение носа и снижением аппетита, сопровождающимися эффекта в течение продолжительного времени, чтобы умеренным или тяжёлым угнетением (Stoeber 2002). предотвратить дальнейшее распространение заболе- Однако при убое очаги поражения лёгких могут обна- вания в стаде. Принцип профилактической эффектив- руживаться у большинства нелечённых особей, что ности Зупрево® 18% был продемонстрирован в модели указывает на важность выявления животных с субкли- ООРЗ КРС с заражением Mannheimia haemolytica. ническими инфекциями и на сложность визуального (Edwards, 2010). Опыт с заражением Mannheimia haemolytica Профилактика — важный элемент программы охраны Материалы и методы: в экспериментах по подбору здоровья стада, нацеленный на минимизацию заболе- доз использовали 18 здоровых бычков голштинской ваемости ООРЗ КРС, смертности и сопутствующих чёрно-пёстрой породы, которые были распределены расходов. по трём группам по 6 животных в каждой. В 0-й день обнаружения скрытых респираторных патологий животные получили следующие препараты посредстНормативы ЕС требуют подтвердить наличие данного вом подкожной (п/к) инъекции: заболевания в стаде, прежде чем начинать профилак- • Группа 1: Зупрево® 18%, 4 мг тилдипирозина / кг МТ тическое лечение, однако в РФ практически нет ферм, • Группа 2: тулатромицин, 2,5 мг тулатромицина / кг МТ где бы данные патологии не были бы обнаружены • Группа 3: физраствор, 2 мл / 100 кг МТ. лабораторно. Так у некоторой доли скота в стаде клинические симптомы могут проявляться, в то время как В соответствии с хорошо изученной исследователь- другие, у которых открытая форма заболевания отсут- ской моделью (Shoo, 1989), через 5 дней после лечения ствует, могут быть поражены субклинической инфек- (5-й день) все животные были заражены посредством цией. В одном из недавних исследований, в котором интратрахеального введения приблизительно 1–2 × 109 температуру тела измеряли с помощью датчиков колониеобразующих единиц (КОЕ) M. haemolytica 7/2 в рубце / сетке, эпизоды повышения температуры воз- серотипа А1 (МИК тилдипирозина 0,25 мкг/мл) (рис. 1). никли за 4–177 часов до начала лечения, основанного Данный патогенный штамм, предоставленный Мордан- на клинических симптомах ОРЗ КРС (Timsit et al., 2010). ским исследовательским институтом, выделен у боль- Поэтому для предотвращения необратимого пораже- ного пастереллёзной пневмонией и успешно исполь- ния лёгких и тяжёлого экономического ущерба крайне зовался в других исследованиях с заражением. важно раннее начало антимикробной терапии, обе- Уход и лечение всех животных соответствовали немец- спечивающей быстрое начало действия и значитель- ким нормативам по защите животных. ную продолжительность эффек та, способное Клинические параметры (температура тела, общий покрыть критически важный начальный период характер поведения, аппетит, частота и качество дыха- откорма после транспортировки и смешивания и пре- тельных движений) оценивались один раз в день до дотвратить распространение заболевания в стаде. заражения и два раза в день после него персоналом, 3 не осведомлённым о назначенном лечении. Слепое Тилдипирозин, активный ингредиент препарата вскрытие было запланировано на третий день после Зупрево® 18%, представляет собой новый трёхоснов- заражения (8-й день). Лёгкие оценивались с точки зре- ный макролид с 16-членным кольцом, зарегистриро- ния уплотнения (%) и отношения массы лёгких к массе ванный как для лечения, так и для профилактики ОРЗ тела (%). Проводились бактериологические исследова- КРС. Он характеризуется быстрым всасыванием из ния материала соскобов из бронхов и лёгочной ткани места подкожного введения и длительным сохране- (предел количественного определения (ПКО) 103 КОЕ/г). нием высоких концентраций в очаге инфекции (ЕМА 2011). Эти фармакокинетические свойства делают Статистический анализ проведён с помощью ПО SAS®. Зупрево ® 18% оптимальным вариантом для профи- Единицей лечения и статистической единицей была 21 особь животного. Изменение параметров, включённых достоверно снижены в сравнении с группами 2 и 3 в клиническое исследование, отображалось графиче- (тулатромицин и физраствор). Группы 2 и 3 (тулатро- ски и подвергалось статистической обработке. Группы мицин и физраствор) по этим клиническим перемен- животных сравнивались попарно в рамках дисперси- ным достоверно не различались. онного анализа с повторными измерениями, причём время и взаимодействие «группа – время» рассматри- Патология: На рис. 8 показан пример лёгкого из вались как внутрисубъектные эффекты, а группа — группы 3 (контрольные животные, получавшие физ- как межсубъектный эффект. Для обеспечения уровня раствор), тяжело поражённого бронхопневмонией. значимости при множественных сравнениях а = 0,05 Степень уплотнения лёгочной ткани (рис. 9) и отноше- локальный уровень значимости для эффектов лечения ние массы лёгкого к массе тела (рис. 10) в группе 1 был выбран а = 0,005 (поправка Бонферрони). (Зупрево® 18%) были достоверно ниже, чем в группе 2 Терапевтические группы сравнивались по параметрам и 3 (тулатромицин и физраствор). Достоверного раз- лёгких, полученным при вскрытии. При попарном личия между группами 2 и 3 (тулатромицин и физрас- сравнении групп для выявления достоверных разли- твор) не выявлено. чий использовалась процедура множественных сравнений. Множественный критерий размаха Райана– Бактериология: В соскобах из бронхов, получен- Эйнота–Габриэля–Уэлша использовался в качестве ных при вскрытии, рост M. haemolytica ни у одного множественного критерия контроля максимальной животного, получавшего Зупрево® 18%, не обнаружен частоты экспериментальных ошибок (а = 0,05). (n = 0/6). Существенный рост M. haemolytica был обнару жен в соскоба х из бронхов всех животных 3 Клинические наблюдения: ход заболевания у живот- в группе 3, получавшей физраствор (n = 6/6), и у всех ных, получавших лечение физраствором и препаратом животных, кроме одного, в группе 2, получавшей тула- Тул ат р о м и ц и н, от р а ж ает т я же с т ь з а р а же н и я тромицин (n = 5/6) (табл. 1). M. haemolytica в данном исследовании. Пять из шести В образцах лёгочной ткани животных, получавших животных из группы 3 (физраствор) и одно животное Зупрево ® 18%, количество M. haemolytica было ниже из группы 2 (тулатромицин) умерло или было усып- ПКО, равного 10 3 КОЕ/г (n = 3/6), или относительно лено до запланированной аутопсии из гуманных сооб- небольшим (n = 3/6, 105 –107 КОЕ/г). Количество микро- ражений, в то время как в группе 1 (Зупрево® 18%) ни организмов в лёгочной ткани было существенно выше одно животное не умерло (рис. 2–3). Индексы общего у всех животных группы 3, получавшей физраствор характера поведения, аппетита и дыхания (рис. 4–6) (n = 6/6; 109 –1010 КОЕ/г), и группы 2, получавшей тула- указывали на наличие симптомов респираторных забо- тромицин (n = 6/6; 107–109 КОЕ/г) (табл. 1). леваний в группах 2 и 3 (тулатромицин и физраствор) после заражения и до окончания экспериментального Клиническое, патологическое и бактериологическое этапа; в отличие от них, в группе 1 (Зупрево 18%) пик исследование показало, что профилактическая эффек- этих индексов пришёлся на день заражения или на тивность препарата Зупрево® 18% в этой острой модели следующий день, после чего индексы быстро снизи- ОРЗ КРС с заражением M. haemolytica была выше лись до нормальных значений. Температура тела в сравнении с эффективностью физраствора и препа- в группе 1 (Зупрево 18%) после заражения слегка рата тулатромицин. Профилактическое лечение препа- увеличилась; в группах 2 и 3 (тулатромицин и физ- ратом Зупрево® 18% обеспечило более существенное раствор) температура тела повысилась сильнее снижение количества бактерий в лёгочной ткани. Сни- (рис. 7). Потребление корма после инфицирования жение количества M. haemolytica до уровня ниже ПКО в группах 2 и 3 (тулатромицин и физраствор) отсут- в лёгочной ткани у 50% животных и в бронхиальной жид- ® ® ствовало или было снижено. В группе 1 (Зупрево 18%) кости у 100% животных указывает на бактерицидный с первого дня после заражения и до конца исследова- эффект Зупрево® 18% (активный ингредиент тилдипи- ния суточный рацион потреблялся полностью. Темпе- розин) в отношении M. haemolytica и подтверждает его ратура тела, индексы общего характера поведения, значительную продолжительность действия при высо- аппетита и дыхания в группе 1 (Зупрево 18%) были ких концентрациях в очаге инфекции. ® ® 22 Все под контролем Таблицы и рисунки Мониторинг общего характера поведения, температуры тела, аппетита, частоты и качества дыхательных движений* 3,0 2,5 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин 0 1 2 3 4 5 7 6 8 Индекс 2,0 День исследования Группа 3: физраствор 1,5 1,0 Заражение Лечение Necropsy & Bacteriology 0,5 0,0 Инфекция путём интратрахеального введения ≈1–2 × 10 9 колониеобразующих единиц (КОЕ) M. haemolytica 7/2 серотипа А1 (МИК тилдипирозина 0,25 мкг/мл). 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Время (дни) Значение индекса 0: норма. Значение индекса 1: лёгкое угнетение. Значение индекса 2: умеренное угнетение.; Значение индекса 3: сильное угнетение. Значение индекса 4: сильное измождение / лежащее положение (животные усыплялись). Группа 1 достоверно отличается от групп 2 и 3. * Персонал не осведомлён о назначенном лечении. Рисунок 1. План исследования. 6 5 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин 4 Группа 3: физраствор Рисунок 4. Индекс общего характера поведения (средние значения; дни 0–8). 3 3,2 2 2,8 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин 2,4 1 Заражение 0 0 1 2 3 4 Время (дни) 5 6 7 8 Индекс Смертность / незапланированная эвтаназия Заражение Группа 3: физраствор 2,0 1,6 1,2 0,8 Рисунок 2. Смертность. Заражение 0,4 3 0,0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Время (дни) Смертность / незапланированная 6 5 4 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин Группа 3: физраствор 3 2 1 0 Рисунок 3. Смертность (общая). Значение индекса 0: аппетит в норме (животное подходит к кормушке). Значение индекса 1: аппетит слегка снижен. Значение индекса 2: аппетит снижен. Значение индекса 3: аппетит отсутствует. Группа 1 достоверно отличается от групп 2 и 3. Рисунок 5. Индекс аппетита (средние значения 0-й день — 8-й день). 23 2,8 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин 2,4 Индекс Степень уплотнения Степень уплотнения лёгочной ткани лёгочной (%) ткани (%) 3,2 Группа 3: физраствор 2,0 1,6 1,2 0,8 0,4 1 2 3 4 5 6 7 8 Время (дни) Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин * Группа 3: физраствор * 3 дня после инфекции Массовое отношение Массовое отношение лёгких и всего лёгких тела и всего тела 2 Рисунок 6. Индекс качества дыхания (средние значения; дни 0–8). 41 Температура тела (°С) Группа 3: физраствор Рисунок2,29. Степень уплотнения лёгочной ткани (средние значения; %). Значение индекса 0: норма. Значение индекса 1: лёгкое диспноэ. Значение индекса 2: умеренное диспноэ. Значение индекса 3: сильное диспноэ. Группа 1 достоверно отличается от групп 2 и 3. Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин 40 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин 3 дня после инфекции 15 10 Группа 15 достоверно отличается от групп 2 и 3. 0 Заражение 0,0 0 50 45 40 35 30 50 25 45 20 40 15 35 10 30 5 25 0 20 Группа 3: физраствор 1,8 2,2 1,62 1,4 1,8 1,2 1,6 Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин Группа 3: физраствор Группа 1: Зупрево® 18% Группа 2: тулатромицин Группа 3: физраствор * 1,41 1,2 3 дня после инфекции * 1 3 дня после инфекции 39 Группа 1 достоверно отличается от групп 2 и 3. Рисунок 10. Массовое отношение лёгких и всего тела (средние значения; %). 38 Заражение 37 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Время (дни) 3 Группа 1 достоверно отличается от групп 2 и 3. Рисунок 7. Температура тела (средние значения 0-й день – 8-й день). Матрица Бронхиальная жидкость Лёгочная ткань Препарат Рост M. haemolytica* Группа 1: Зупрево® 18% – (6 / 6) Группа 2: тулатромицин +++ или ++++ (5 / 6) Группа 3: физраствор ++++ (6 / 6) Группа 1: Зупрево® 18% < ПКО (3 / 6); 105 –107 (3 / 6) Группа 2: тулатромицин 107–109 (6/6) Группа 3: физраствор 109 –1010 (6/6) * Бронхиальная жидкость. «–» — рост отсутствует. «+++» — рост без слияния. «++++» — рост со слиянием. Лёгочная ткань: КОЕ/г; предел количественного определения (ПКО) = 10 3 КОЕ/г. Таблица 1. Бактериологическое исследования бронхиальной жидкости и лёгочной ткани. Рисунок 8: Лёгкое, тяжело поражённое бронхопневмонией (пример из группы 3 — контрольные животные, получавшие физраствор). 24 Все под контролем Литература: 1.Babcock AH et al. (2010). Temporal distributions of respiratory disease events within cohorts of feedlot cattle and associations with cattle health and performance indices. Prev Vet Med 97, 198 – 219. 2.Step DL et al. (2008). Effects of commingling beef calves from different sources and weaning protocols during a forty-two-day receiving period on performance and bovine respiratory disease. J Anim Sci 86, 3146 – 3158. 3.Edwards TA (2010). Control methods for bovine respiratory disease for feedlot cattle. Vet Clin Food Anim 26, 273 – 284. 4.Schneider MJ et al. (2009). An evaluation of bovine respiratory disease complex in feedlot cattle: Impact on performance and carcass traits using treatment records and lung lesions scores. J Anim Sci 87, 1821 – 1827. 5.Taylor JD et al. (2010). The epidemiology of bovine respiratory disease: What is the evidence for predisposing factors? Can Vet J 51, 1095 – 1102. 6.Snowder GD et al. (2006). Bovine respiratory disease in feedlot cattle: Environmental, genetic, and economic factors. J Anim Sci 84, 1999 – 2008. 7.Lekeux P (1995). Bovine respiratory disease complex: A European perspective. Bovine Practitioner 29, 71 – 75. 8.Stoeber M (2002). Krankheiten der Atmungsorgane, des Zwerchfells und der Brustwand: Enzootische Bronchopneumonie. In: G Dirksen, H-D Gründer, M Stoeber (eds.) Innere Medizin und Chirurgie des Rindes, 4th ed, Blackwell, pp. 310 – 322. 9.Timsit E et al. (2010). Early detection of bovine respiratory disease in young bulls using reticulo-rumen temperature boluses. Vet J doi:10.1016/j.tvjl.2010.09.012. 10.EMA (2011). CVMP Assessment Report. Zuprevo (EMEA/V/C/002009). http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_ library/EPAR_-_Public_assessment_report/veterinary/002009/WC500106577.pdf. 11.Shoo MK (1989). Experimental bovine pneumonic pasteurellosis: A review. Vet Record 124, 141 – 144. Notes 3 25 4 26 Все под контролем 1 2 3 4. 4 Зупрево® 18%: эффективность при лечении ОРЗ КРС у телят в сравнении с тулатромицином Kerstin E. Müller, Franziska Schmidt, Nadja Rohdich, Eva Zschiesche и Rainer Röpke 27 Зупрево® 18%: эффективность при лечении ОРЗ КРС у телят в сравнении с тулатромицином Kerstin E. Muller 1, Franziska Schmidt 1, Nadja Rohdich 2, Eva Zschiesche 2 and Rainer Ropke 2 1 Clinic for Ruminants and Swine, Faculty of Veterinary Medicine, Freie Universitat Berlin, Berlin, Germany 2 Intervet Innovation GmbH, a member of the MSD Animal Health Group Реферат вание респираторного тракта, вызванное сложным взаимодействием факторов внешней среды, орга- Респираторные заболевания крупного рогатого скота низма хозяина и возбудителей заболеваний (Нацио- у телят остаются одной из основных проблем ското- нальная библиотека медицины США®). Эти факторы водства по всему миру. являются источниками негативного действия на иммун- Многофакторная этиология респираторных болезней ную систему и другие механизмы защиты организ- порождает сложности для фермеров и ветеринарных ма-хозяина, приводя к усилению распространения врачей. Эффективное лечение ОРЗ КРС, основанное возбуди телей инфек ции. Д ля теля т выяв лено на надежных способах диагностики, имеет важней- несколько периодов риска, когда животные подвер- шее значение для восстановления и сохранения здо- жены развитию респираторных заболеваний: неона- ровья стад. Недавно компания MSD Animal Health тальный период, период отъёма и период исчезнове- получила регистрационное удостоверение на препа- ния материнских антител. Кроме того, телята мясных рат Зупрево 18% для лечения и профилактики респи- пород характеризуются дополнительными периодами раторных заболеваний крупного рогатого скота. Его риска, обусловленными смешиванием животных активный ингредиент тилдипирозин — первый трёхос- в течение первых 10 дней после поступления на откор- новный макролид с 16-членным кольцом. Тилдипиро- мочные хозяйства и при перегруппировке животных. зин характеризуется быстрым всасыванием из места Помимо этих критических периодов были выявлены подкожного введения и длительным сохранением многие факторы, вносящие вклад в возникновение высоких концентраций в лёгких и бронхиальной жид- вспышек. Они включают факторы, связанные с орга- кости. Эти фармакокинетические свойства делают низмом-хозяином (анатомическая и функциональная Зупрево 18% особенно хорошим средством профи- слабость дыхательных путей КРС, генетика), макро- лактики ОРЗ КРС, что и показано в полевом иссле- и микроклимат (температура, влажность, скорость довании на телятах с ОРЗ КРС. В данном исследова- движения воздуха, наличие токсичных газов, пыли), нии показана эффек тивность и безопасность факторы ухода (уход за новорождёнными, гигиена, Зупрево 18% при лечении ОРЗ КРС в течение пери- питание, состояние здоровья стада) и наличие опреде- ода наблюдения продолжительностью 21 день. лённых микроорганизмов (рис. 1). Среди вирусов, важ- Зупрево 18% характеризовался наиболее быстрым ных для этиологии, важнейшую роль играет вирус диа- началом эффективности. В целом результаты эффек- реи КРС (ВД КРС), респираторно-синцитиальный тивности достоверно не уступали результатам, полу- вирус КРС (РСИ КРС) и герпесвирус КРС-1 (ИРТ) ченным с препаратом Тулатромицин. (Thiery, 2007). То же справедливо и для таких бактерий, ® ® ® ® 4 как (Pasteurella) Mannheimia haemolytica, Pasteurella Комплекс респираторных болезней крупного рогатого скота — этиология, диагностика и лечение multocida, Bibersteinia trehalosi, Histophilus somni, Arcanobacterium pyogenes и микоплазма (M. bovis) (Griffin et al., 2010). Большинство микроорганизмов входят в состав нормальной микрофлоры верхних дыха- 28 Комплекс респираторных заболеваний крупного рога- тельных путей КРС. Благодаря определённым механиз- того скота определяется как многофакторное заболе- мам последние бак терии способны доби т ься Все под контролем доминирующего положения по отношению к другим того скота (ОРЗ КРС). В предыдущих полевых бактериям и ослабить защитные механизмы хозяина. исследованиях основной критерий эффективности Имеется ряд приёмов, позволяющих отобрать образцы оценивался в течение 14 дней после лечения; тем не из дыхательных путей КРС для выявления организмов, менее дополнительные критерии эффективности участвующих в развитии ОРЗ КРС (Cooper, Brodersen, в этих исследованиях указывали на то, что эффектив- 2010). Менее инвазивные процедуры включают полу- ность сохранялась в течение 21 суток периода наблю- чение соскобов из носа, мокроты, соскобов из трахеи дений. и образцов крови. Транстрахеальный смыв, трахеобронхиальный смыв, бронхоальвеолярный смыв Данное исследование было спланировано для под- и биопсия лёгкого относятся к более инвазивным при- тверждения эффективности препарата Зупрево® 18%, ёмам. Процедура транстрахеального смыва является применяемого подкожно в виде однократной дозы 4 мг подходящим инструментом для выявления видов бак- тилдипирозина / кг массы тела (МТ) для лечения ОРЗ терий, участвующих в развитии инфекции, так как КРС в полевых условиях при продолжительности доказано, что нижние дыхательные пути здоровых наблюдения 21 день. Эффективность сравнивалась телят стерильны (Fischer et al., 1987; Heckert et al., 1997) с эффективностью зарегистрированного препарата (рис. 2). Телята, страдающие респираторными патоло- тулатромицин (2,5 мг/кг МТ). Исследование проводи- гиями, могут быть разделены на четыре степени в зави- лось в соответствии с надлежащей клинической прак- симости от клинических проявлений (Reinhold, 2001): тикой, VICH GL9 (CVMP/VICH/595/98-FINAL). к степени I (субклинической) относятся активные животные с нормальным дыханием при аускультации; Материалы и методы степень II (компенсированная) характеризуется нали- Исследование было слепым с положительным контро- чием симптомов заболевания дыхательных путей, крат- лем и проводилось в одном исследовательском центре ким периодом пирексии и сохранённым аппетитом; в Германии. степень III (некомпенсированная) описывает телят, В исследование было включено 104 телёнка (в воз- страдающих диспноэ, потерей аппетита, усиленными расте 11–56 дней), по 52 в каждой группе. В исследо- или даже бронхиальными звуками при аускультации; вание включены телята, у которых на 0-й день отме- а степень IV (необратимая) включает телят, у которых чены следующие симптомы ОРЗ КРС (табл. 2): отмечается диспноэ, анорексия, бронхиальные звуки • Ректальная температура ≥40 °С. дыхания или даже отсутствие последних в обширных • Аномальное дыхание (индекс тяжести нарушений областях лёгочного поля (табл. 1). Для каждой из четырёх стадий существует рекомендованный курс лечения (Reinhold, 2001): телятам с 1-й степенью специфиче- дыхания ≥ 1). • Аномальное общее состояние (индекс тяжести общего состояния ≥1). ского лечения не требуется, при 2-й степени требуется антибактериальная терапия, при 3-й степени — комби- Животные были случайным образом распределены нация антибиотиков и противовоспалительных препа- для лечения либо Зупрево® 18% (4 мг тилдипирозина/ ратов, предпочтительно — нестероидных противовос- кг МТ), либо тулатромицином (2,5 мг/кг МТ). Препараты палительных средств. При 4-й степени (необратимой) вводились в виде однократной подкожной инъекции. выздоровление телят после КОРЗ КРС маловероятно Клинический осмотр проводился ежедневно с 0-го до ввиду обширного необратимого поражения лёгких, 10-го дня и в 21-й день. С 0-го по 2-й день осмотр про- вследствие этого таких животных следует выбраковы- водился три раза в день (с интервалом приблизительно вать (табл. 1). в 6 часов), а с 3-го по 10-й день — один раз в день. 4 С 11-го по 20-й день животные осматривались еже- Полевое испытание дневно для определения общего состояния здоровья. При рецидиве симптомов ОРЗ КРС проводился под- Препарат Зупрево 18% (активный ингредиент — тил- робный осмотр. Место введения осматривали до лече- дипирозин) эффективен для лечения естественно воз- ния, а также на 1-й, 2-й, 3-й, 10-й и 21-й день после никшего респираторного заболевания крупного рога- лечения. ® 29 На 0-й день всем животным для бакпосева был прове- популяция). Краткосрочный коэффициент успешности дён транстрахеальный смыв. На 0-й и 21-й день опре- лечения (успех лечения на 10-й день) составлял 87,3% делялась масса тела животного и собиралась инфор- (36 из 43) в группе, получавшей Зупрево® 18%, и 84,4% мация о потенциальных сопутствующих вирусных (38 из 45) в группе, получавшей Тулатромицин (прото- и микоплазматических инфекциях всех животных путём кольная популяция). Коэффициент долгосрочной неэф- изучения парных образцов сыворотки. Концентрация фективности лечения на 11–21 день после краткосроч- гаптоглобина определялась путём фотометрического ного (10-й день) успеха (неэффективность на позднем анализа в образцах сыворотки, отбиравшихся на 0-й, этапе) составлял 13,9% (5 из 36) в группе Зупрево® 18% 1-й, 2-й, 3-й, 10-й и 21-й день. В период с 0-го по 21-й и 26,3% (10 из 38) в группе тулатромицина. По всем день проводился мониторинг потребления корма. 3 критериям Зупрево® 18% не уступал тулатромицину (табл. 3). Лечение считалось неэффективным, а животные исключались из исследования, если выполнялись сле- В группе, получавшей Зупрево® 18%, летальных исхо- дующие критерии: дов не было, однако 2 животных, получавших тулатро- • в период со 2-го по 10-й день: ректальная темпера- мицин, умерли (1 в ПП, 1 в популяции, которой было тура ≥ 40 °С и индекс тяжести нарушений дыхания назначено лечение по принципу назначение-лечение ≥ 2 или индекс общего состояния ≥ 2; (intention-to-treat, ITT)). • в период с 11-го по 20-й день: ректальная температура ≥ 40 °С и индекс тяжести нарушений дыхания Ректальная температура (рис. 3), индексы тяжести ≥ 2 или индекс общего состояния ≥ 1; нарушений дыхания и общего состояния (рис. 4) • на 21-й день: ректальная температура ≥ 40 °С или и частоты дыхательных движений существенно снижа- индекс тяжести нарушений дыхания >1 или индекс лись в обеих группах (ПП) начиная с 1-го дня. Средне- общего состояния ≥ 1. суточный привес и индекс тяжести поражения лёгких в разных группах достоверно не отличались (ПП). В случае исключения животного из исследования в период с 0-го по 21-й день по причинам, связанным Перед лечением из дыхательных путей исследуемых с ОРЗ КРС (неэффективность лечения, неэффектив- животных методом ТТЛ были выделены Mannheimia (M.) ность на поздних этапах), у этих животных повторно haemolytica (18,3%), Pasteurella (P.) multocida (31,7%), отбирались образцы на бакпосев методом смыва и Histophilus (H.) somni (1,0%) (ITT). На момент исключе- в день выбраковки. ния изоляты распределялись следующим образом: 8,3% M. haemolytica, 33,3% P. multocida, 0,0% H. somni Вскрытие проведено 6 животным в конце исследова- (ITT). Mycoplasma (M.) bovis выделена не была; тем не ния на 21-й день: 3 получавшим Зупрево 18%, а 3 — менее 4 животных перенесли сопутствующую инфек- тулатромицин. Отобраны образцы лёгочной ткани на цию M. bovis, о чём свидетельствовала сероконверсия бакпосев и определён индекс тяжести поражения (ITT). Определена минимальная бактериостатическая лёгких. концентрация (МИК) тилдипирозина (табл. 4). Основным критерием эффективности был коэффици- Концентрация гаптоглобина отражала статус заболе- ент успешности лечения на 21-й день, определявшийся вания в обеих группах животных (данные не представ- как доля животных, оставшихся в исследовании на 21-й лены). В ходе исследования потребление корма в груп- день. пах не различалось. ® 4 Результаты Среднее время начала эффективности (т.е. появление Долгосрочный коэффициент успешности лечения первых эффектов лечения, о чём свидетельствует рек- (успех лечения на 21-й день) составлял 72,1% (31 из 43) тальная температура < 39,5 °С и индекс общего состо- в группе, получавшей Зупрево 18%, и 62,2% (28 из 45) яния = 0) составляло 26,8 ч в группе Зупрево ® 18% в группе, получавшей тулатромицин (протокольная и 39,4 ч в группе тулатромицина (ПП) (табл. 5). ® 30 Все под контролем Болевая реакция при инъекции не отмечена у 86,5% Выводы животных в группе Зупрево 18% и 65,4% в группе Препарат Зупрево® 18%, вводимый подкожно в виде тулатромицина (ITT). У 9,6% животных в группе однократной дозы 4 мг/кг МТ, был эффективен Зупрево® 18% и у 13,5% в группе тулатромицина име- и безопасен при лечении ОРЗ КРС в течение пери- лись реакции в месте введения (ITT). Зафиксировано ода наблюдений продолжительностью 21 день. 16 нежелательных явлений (сопутствующие заболева- Зупрево® 18% характеризовался наиболее быстрым ® ния, напр. отит, диарея, хромота, омфалит): 12 в группе началом эффективности. В целом результаты эффек- Зупрево® 18% и 4 в группе тулатромицина. тивности достоверно не уступали результатам, полу- Для всех, кроме одного (оценённого как «неизвест- ченным с препаратом тулатромицин. ное»), связь с исследуемым препаратом была маловероятной. Таблицы и рисунки Макрои микроклимат Уход забота о новорождённых скученность кормление (отъём) снижение колострального иммунитета гигиена Организм генетика иммунная система общее состояние Микроорганизмы Рисунок 1. Этиология ОРЗ КРС. 4 Рисунок 2. Метод транстрахеального смыва (ТТС). 31 День 9 День 10 День 8 День 7 День 6 День 5 День 4 День 3 День 2, Time 3 День 2, Time 2 День 2, Time 1 День 1, Time 3 День 1, Time 2 День 1, Time 1 День 0, Time 3 День 0, Time 2 38,0 День 0, Time 1 Рек 38,5 День исследования 2.4 День исследования Субклиническое (животное активно, звуки дыхания в норме) 0.4 0.0 День 10 День 9 День 8 День 7 День 6 День 5 Необратимое (тяжёлое диспноэ, анорексия, бронхиальные или даже отсутствующие звуки дыхания) Усыпление День 5 День 4 День 3 День 2, Time 3 День 2, Time 2 День 2, Time 1 День 1, Time 3 День 1, Time 2 День 1, Time 1 День 0, Time 3 День 0, Time 2 День 4 Антибиотики и НПВС * * Бронхосекретолитики при наличии показаний. День 0, Time 1 День 3 Некомпенсированное (диспноэ, снижение аппетита, усиленные или бронхиальные звуки дыхания) День 10 0.8 Антибиотики * День 9 1.2 Компенсированное (симптомы заболевания дыхательных путей, аппетит сохранён, краткий период лихорадки) День 8 IV Лечение не требуется Зупрево® 18% тулатромицин День 7 III Препарат День 6 Средний индекс общего состояния Описание I 1.6 День 2, Time 3 Рисунок 4. Индекс общего состояния. Степень 2.4 II День 2, Time 2 День исследования Рисунок 3. Ход ректальной температуры. 2.0 День 2, Time 1 День 1, Time 3 День 1, Time 2 День 9 0.4 0.0 День 10 День 8 День 7 День 6 День 5 День 4 День 3 День 2, Time 3 День 2, Time 2 День 2, Time 1 День 1, Time 3 День 1, Time 2 День 1, Time 1 День 0, Time 3 38,0 День 0, Time 2 38,5 0.8 День 1, Time 1 39,0 1.2 День 0, Time 3 39,5 Зупрево® 18% тулатромицин 1.6 День 0, Time 2 40,0 2.0 День 0, Time 1 Средний индекс общего состояния Зупрево® 18% тулатромицин 40,5 День 0, Time 1 Ректальная температура, °С 41,0 Таблица 1. Тяжесть респираторного заболевания КРС исходя из клинических симптомов и рекомендуемого лечения (Reinhold 2001). День исследования День исследования День 0 Действие Клинический осмотр Включение Взвешивание Распределение на группы Группа А Лечение Зупрево® 18%: 4 мг тилдипирозина/кг МТ Группа В Лечение тулатромицином: 2,5 мг/кг МТ Образец Оценка места введения ТТЛ и отбор образцов сыворотки 1 Да 3 Клинический осмотр 2х 4 День 1 — День 2 Клинический осмотр 3 х Клинический осмотр 3 х Сыворотка, день 1, 2 2 Да 3 День 3 — День 10 Клинический осмотр один раз в день (плановый осмотр) Сыворотка, день 3, 10 2 Дни 3, 10 День 11 — День 20 Общие наблюдения состояния здоровья, осмотр при необходимости (внеплановый осмотр) День 2 — День 21 Выбраковка из-за ОРЗ КРС Клинический осмотр, взвешивание День 21 Вскрытие 3 животных 4 Вскрытие 3 животных 4 Конец этапа с участием животных Отбор образца сыворотки для определения антител и гаптоглобина. 2 Отбор образца сыворотки для определения гаптоглобина. 3 Один раз в день. 4 Животные, завершившие исследование при успехе лечения. 1 Таблица 2. План исследования. 32 В случае осмотра ТТЛ Отбор образца сыворотки 1 Лёгочная ткань Да Все под контролем Параметр Зупрево ® 18% тулатромицин Долгосрочный успех лечения, день 21 (успех лечения на 21-й день) 72,1 %* (31 из 43) 62,2 %* (28 из 45) Краткосрочный успех лечения, день 10 (успех лечения на 10-й день) 83,7 %* (36 из 43) 84,4 %* (38 из 45) Долгосрочная неэффективность лечения (дни 11–21) после краткосрочного (день 10) успеха (неэффективность на поздних этапах, день 11–21) 13,9 %* (5 из 36) 26,3 %* (10 из 38) * Достоверно не уступает препарату тулатромицин. Таблица 3. Результаты по эффективности. Параметр МИК тилдипирозина, мкг/мл M. haemolytica (N = 21) P. multocida (N = 42) H. somni (N = 1) Минимальная МИК 0,25 0,25 2 Максимальная МИК 0,5 2 2 Таблица 4. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) тилдипирозина. Время начала эффективности, ч* Параметр Среднее Стандартное отклонение Мин. Макс. Зупрево® 18% (N = 31) 26,8 18,9 5,8 96,0 тулатромицин (N = 28) 39,4 42,8 10,8 216,0 * На первый эффект лечения указывает значение ректальной температуры <39,5 °С и суммарный оценочный показатель = 0. Таблица 5. Время начала эффективности (протокольная популяция). Литература: 1.Cooper, V.L., Brodersen, B.W. (2010): Respiratory Disease Diagnosis of Cattle. The Vet. Clin. North Am. 26(2): 409 – 416. 2.Fischer, W., Amtsberg, G., Luitjens, B. (1987): Vergleichende Untersuchungen zur Keimbesiedlung der Nasen- und Tracheobronchial­schleimhaut bei bronchopneumonisch erkrankten Kälbern und Jungrindern. Tierärztl. Umsch. 42(6): 476 – 480. 3.Griffin, D. Chengappa, M.M., Kuszak, J., McVey, D. (2010): Bacterial Pathogens of the Bovine Respiratory Disease Complex. The Vet. Clin. North Am. 26(2): 381 – 394. 4.Heckert, H.-P., Rohn, M., Hofmann W. (1997): Diagnostische Probenentnahmen bei infektiösen Atemwegserkrankungen der Rinder. Der Praktische Tierarzt 78(12): 1056 – 1065. 5.Reinhold, P. (2001): Untersuchungen zur Bestimmung pulmonaler Funktionen beim Rind. Habilitationsschrift Freie Universität Berlin. 6.Thiry, E. (2007): Clinical Virology of Ruminants. Wolters-Kluwer, France pp. 19 – 54. 4 33 Рекомендации по применению Зупрево® 18% Для профилактики острых респираторных заболеваний Схема 1 (корректное назначение при проявлении респираторных симптомов у телят в возрасте 0–21 день). При рождении Рождение Зупрево ® 18% — 1 мл/гол. в/м 21 день Схема 2 (корректное назначение при проявлении респираторных симптомов у телят сразу после вакцинации*). При вакцинации Вакцинация против респираторных патологий Рождение Зупрево ® 18% — 1 мл / 45 кг ж.м. в/м 3 месяца * Возможно одновременное применение (в разных шприцах) с живыми вирусными или инактивированными вирусными и бактериальными вакцинами. Не следует применять одновременно с живыми бактериальными вакцинами. Схема 3 (корректное назначение при проявлении респираторных симптомов у телят после перегруппировки, перевода с одиночного содержания в групповое). При перегруппировке (в день перевода) Рождение 3 месяца 34 Зупрево ® 18% — 1 мл / 45 кг ж.м. в/м Все под контролем Схема 4 (корректное назначение при проявлении респираторных симптомов у телят после перевозки, продажи и т.д.). При перевозке (в день погрузки) Рождение Зупрево ® 18% — 1 мл / 45 кг ж.м. в/м 6 месяцев Для лечения острых респираторных заболеваний Схема 1 (корректное назначение при проявлении легких респираторных симптомов у телят на ранних стадиях или в комплексе с НПВС (при повышении t тела). При респираторной патологии (курс лечения — 1 инъекция) Рождение Зупрево ® 18% — 1 мл / 45 кг ж.м. в/м 3–6 месяцев 35 Все под контролем Зупрево ® 18% (Zuprevo ® 18%) В 1,0 см 3 препарата содержится 180 мг тилдипирозина. По внешнему виду препарат представляет собой прозрачный раствор от светло-желтого до желтого цвета. Препарат выпускают расфасованным в стеклянные флаконы номинальным объемом 20 см3, 50 см 3, 100 см 3 и 250 см3. Препарат хранят в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей месте, при температуре от плюс 2 °С до плюс 25 °С. Срок годности препарата 2 (два) года от даты изготовления, при соблюдении условий хранения и транспортирования. После первого вскрытия флакон с препаратом хранят в течение 28 дней. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА Тилдипирозин представляет собой полусинтетический макролид с 16-членным циклом. Данное соединение отличается от многих других макролидов тем, что оно имеет большую длительность действия. Макролиды ингибируют биосинтез основных белков путем селективного связывания с бактериальной рибосомной РНК и действуют путем блокировки удлинения пептидной цепи. Спектр противомикробной активности тилдипирозина включает: Mannheimia (Pasteurella) haemolytica, Pasteurella multocida, Histophilus somni (Haemophilus somnus). In vitro тилдипирозин обладает бактериостатическим действием в отношении Pasteurella multocida и бактерицидным в отношении Mannheimia (Pasteurella) haemolytica, Histophilus somni. После подкожного применения однократной дозы Зупрево ® 18% у крупного рогатого скота (4 мг/кг) тилдипирозин абсорбцируется со средней максимальной концентрацией в плазме на уровне 0,711 мкг/мл в течение 23 мин (Tmax). В легких средние концентрации тилдипирозина достигают максимального уровня 14,8 мкг/г в течение 24 часов и медленно снижаются до 3,0 мкг/г через 21 день после применения препарата Зупрево ® 18%. В бронхиальной жидкости (in vivo) уровни тилдипирозина достигают максимальной концентрации 3,5 мкг/г через 24 часа после применения препарата Зупрево ® 18% и медленно снижаются до 1,0 мкг/г вплоть до 21 дня после применения. После однократной инъекции Зупрево ® 18% длительность действия препарата составляет 21 день. Выводится тилдипирозин из организма животных преимущественно с мочой и фекалиями. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА Зупрево ® 18% применяют для лечения и профилактики респираторных заболеваний у крупного рогатого скота, вызываемых микроорганизмами, чувствительными к тилдипирозину. Дозы и способ применения: препарат вводят подкожно, однократно, в дозе 4 мг тилдипирозина/ кг массы тела, что соответствует 1,0 см 3 препарата на 45 кг живой массы животного. В одно место вводить не более 10 см 3 препарата. Рекомендуется лечить животных на ранних стадиях заболевания и оценивать реакцию на лечение в течение 2–3 дней после инъекции. Если клинические признаки респираторного заболевания персистируют или обостряются, лечение следует изменить с использованием другого антибиотика. В месте инъекции препарата может возникнуть небольшая припухлость, исчезающая самостоятельно в течение 16 дней. Не применять для животных с повышенной чувствительностью к компонентам препарата. Препарат нельзя применять с противомикробными средствами со сходным механизмом действия, например с другими макролидами или линкозамидами. Не применять препарат у лактирующих коров. Не применять у стельных коров или нетелей в течение 2 месяцев до ожидаемой даты отела, если продуцируемое молоко предназначено для употребления в пищу. Период ожидания. Убой крупного рогатого скота на мясо разрешается через 47 дней после последнего применения препарата. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ При работе с препаратом следует соблюдать общепринятые правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные для работы с ветеринарными лекарственными средствами. Тилдипирозин может вызвать сенсибилизацию при контакте с кожей человека. При случайном попадании препарата на кожу следует промыть это место водой с мылом, при попадании в глаза — немедленно промыть глаза чистой водой. При случайной самоинъекции следует обратиться к врачу и показать ему упаковочный листок-вкладыш или этикетку препарата. ПОРЯДОК ПРЕДЪЯВЛЕНИЯ РЕКЛАМАЦИЙ В случае возникновения осложнений после применения препарата его использование прекращают и потребитель обращается в Государственное ветеринарное учреждение, на территории которого он находится. Ветеринарными специалистами этого учреждения производится изучение соблюдения всех правил по применению препарата в соответствии с инструкцией. При подтверждении выявления отрицательного воздействия препарата на организм животного ветеринарными специалистами отбираются пробы в необходимом количестве для проведения лабораторных испытаний, пишется акт отбора проб и направляется в Государственное учреждение «Белорусский государственный ветеринарный центр» для подтверждения на соответствие нормативным документам. ПРЕДПРИЯТИЕ-ИЗГОТОВИТЕЛЬ Изготовитель: «Интервет Интернэшнл Гмбх» (Intervet International GmbH) (Германия). Инструкция подготовлена Представительством компании «Интервет Интернэшнл Б.В.» (Нидерланды) в Республике Беларусь. ООО «Интервет» Тел: +7 (495) 956 71 40/44 Факс: +7 (495) 956 71 41/45 www.msd-animal-health.ru