Мониторинг папилломавирусной инфекции репродуктивного

Иммунопатология, аллергология, инфектология
Immunopathology, allergology, infectology
2012, №2:8994
ИНФЕКТОЛОГИЯ
УДК 616.98: 618.11002022
Мониторинг папилломавирусной инфекции репродуктивного тракта у
женщин в различных возрастных группах
О.И. Летяева, О.С. Абрамовских, В.Ф. Долгушина, М.А. Зотова, О.А. Гизингер
ГОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития РФ, кафедра дерматовенерологии, НИИ иммунологии г.Челябинск
Monitoring for reproductive papillomavirus infection in women of various age
groups
O.I. Letyaeva, O.S. Abramovskikh, V.F. Dolgushina, M.A. Zotova, O.A. Gizinger
Department of dermatology and venerology of State Medical Academy,
Research institute of Immunology of State Medical Academy, Chelyabinsk, Russia
Аннотация
Summary
Определены частота встречаемости, спектр генотипов и
вирусная нагрузка ВПЧ ВКР у 504 женщин в разные пе
риоды репродуктивного возраста. ВПЧ ВКР выявлялся у
52,2 % женщин с наибольшей частотой встречаемости в
раннем репродуктивном периоде. Особенностью раннего
репродуктивного возраста явилась и высокая частота мик
стинфекции, тогда как в позднем репродуктивном возра
сте сочетание 2 и более типов ВПЧ ВКР составляет 17,2 %.
Независимо от возраста, в разном проценте случаев у
ВПЧпозитивных женщин были выявлены все 12 гено
типов, с преобладанием ВПЧ 16 и 31 типов. Средний по
казатель вирусной нагрузки находился в пределах значи
мой (3 5 lg ВПЧ на 105 клеток) во всех возрастных груп
пах женщин. Малозначимая вирусная нагрузка в 2 раза
чаще встречалась у женщин позднего репродуктивного
возраста, а значимая нагрузка у женщин в возрасте от 20
до 35 лет.
We have traced the prevalence, viral load and genotype spectra
of human papillomavirus with high carcinogenic risk in 504
women during the different periods of reproductive age.
Papillomavirus targets were recorded in 52,2 % of women
with the highest prevalence frequency in the early reproductive
period. The particular feature of early reproductive age also
was high frequency of a mixed infection, whereas at late
reproductive age the combination of 2 and more types of
papillomavirus reached 17,2 %. Irrespective of age, in different
percent of cases at HPVpositive women of reproductive age
12 genotypes, with prevalence HPV of 16 and 31 types have
been all found. The average index of the viral load was in limits
significant (3 5 lg HPV on 105 cells) in all age groups of
women. Less significant virus load was observed 2 times more
frequent in women of late reproductive age, but the
significant load at women at the age from 20 till 35 years was
more frequent.
Ключевые слова
Key words
Вирус папилломы человека, возраст, генотип, вирусная
нагрузка
Human papilloma virus, age, a genotype, viral load
На сегодняшний день одной из наиболее
распространенных инфекций, передаваемых
половым путем (ИППП) вирусной этиологии
является папилломавирусная инфекция
(ПВИ), которая по данным ВОЗ признана
этиологическим агентом рака шейки матки
(РШМ) [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7].
Распространенность генитальной инфекции,
вызываемой вирусом папилломы человека
(ВПЧ), в мире составляет около 440 млн. чело*
век (ВОЗ, 2004). По данным центров контроля
и предупреждения болезней CDC более 20 млн.
человек (>15 % популяции) инфицированы
данными вирусами и ежегодно эта цифра уве*
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2012 N°2
89
Инфектология: Мониторинг папилломавирусной инфекции репродуктивного тракта у женщин...
личивается на 6,2 млн., что объективно отра*
жает распространенность ВПЧ. Согласно дан*
ным эпидемиологических исследований,
встречаемость ВПЧ значительно варьирует в
различных этнико*географических регионах
и во многом определяется социально*эконо*
мическими, поведенческими, медико*гигиени*
ческими условиями [8,9].
Вирусы папилломы человека являются
широко распространенной и гетерогенной
группой вирусов, относятся к семейству папо*
вавирусов (Papovaviridae), группе Human
Papillomavirus (HPV) и входят в состав 5 ро*
дов, объединяющих различные типы вирусов.
Характерная особенность вируса заключает*
ся в способности вызывать пролиферацию
эпителия кожи и слизистых оболочек. В на*
стоящее время известно более 120 различных
типов ВПЧ, 40 из них вызывают поражения
аногенитальной области [10,11]. Все гени*
тальные серотипы ВПЧ отнесены к роду
Alpha*papillomavirus, которая, согласно фи*
логенетической классификации, подразделе*
на на основе различий последовательностей
генов Е6, Е7, L1 на 7 филогенетических групп
генитальных ВПЧ: А5, А6, А7, А8, А9, А11 (45
серотипов). По данным Европейского отделе*
ния Международного общества по изучению
инфекции в акушерстве и гинекологии I*
IDSOG*EUROPE и других исследователей, ВПЧ
подразделяются на генотипы высокого (16, 18,
31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) и низкого
канцерогенного риска (6, 11, 42, 43, 44) [12].
Сведения о частоте инфицированности ВПЧ
высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР)
различных популяционных групп женского на*
селения репродуктивного возраста России про*
тиворечивы и, по данным различных авторов,
варьируют от 8 до 87 % [13,14,15]. Обследова*
ние 12000 тыс. российских женщин показало,
что ВПЧ ВКР обнаруживался почти у каж*
дой пятой пациентки. В России по частоте
встречаемости лидирует ВПЧ 16 типа, однако
эти данные касаются европейской и цент*
ральной части России [16]. Встречаемость
ВПЧ 16 типа значительно варьирует в раз*
личных географических регионах Российской
Федерации от 14 % до 81 %. По остальным
типам ВПЧ ВКР данные разноречивы, однако
с высокой частотой при неопластических про*
цессах встречаются ВПЧ 31, 33, 18, 45 типов [16,
12]. Исследования последних лет показали, что
большинство женщин на протяжении жизни
инфицируются данным вирусом. Вероятность
90
заражения при однократном половом кон*
такте по данным различных авторов состав*
ляет 46 – 67 % [17,18].
Некоторыми авторов отмечена обратная
корреляционная зависимость частоты заболе*
ваемости ПВИ от возраста женщин: наиболее
высокие показатели инфицированности на*
блюдаются в возрастной группе 15 * 30 лет и со*
ставляют 45 – 81 % [19,20]. В этом же возрасте
наиболее часто встречается кондиломатозная
атипия цервикального эпителия, представляю*
щая собой ранние цитологические изменения,
связываемые с ПВИ.
Цель исследования: изучить возрастные осо*
бенности частоты встречаемости, спектра гено*
типов и вирусной нагрузки ВПЧ ВКР у женщин
Челябинской области.
Материалы и методы
Проведено изучение частоты встречаемос*
ти, спектра генотипов и вирусной нагрузки
ДНК ВПЧ ВКР у 504 женщин репродуктивно*
го возраста от 20 до 44 лет. Исследование
было открытое простое рандомизированное.
Все женщины были разделены на 3 возраст*
ные группы: 1 группа (n = 171) – женщины
раннего репродуктивного возраста (20 * 24
лет), средний возраст 22,2 ± 0,9 лет; 2 группа
(n = 217) – женщины среднего репродуктив*
ного возраста (25 * 34 лет), средний возраст
28,7 ± 0,19 лет; 3 группа (n = 116) – женщины
позднего репродуктивного возраста (35 * 44
лет), средний возраст 39,1 ± 0,25 лет.
Материалом для выделения и последующей
амплификации ДНК ВПЧ ВКР послужили со*
скобы эпителия цервикального канала, взя*
тые одноразовыми цитощетками до начала
курса лечения в 1 фазу менструального цик*
ла. В качестве метода выявления, дифферен*
циации и количественного определения ДНК
ВПЧ ВКР использовалась ПЦР с гибридиза*
ционно*флуоресцентной детекцией в режиме
реального времени при помощи диагности*
ческих наборов «Амплисенс ВПЧ ВКР –
СКРИН *ТИТР FRT» и «Амплисенс ВПЧ ВКР *
ГЕНОТИП FRT» производства ФГУН ЦНИИЭ
Роспотребнадзора ( Москва) на четырехка*
нальном амплификаторе «Rotor*Gene» 3000
(«Corbett Research», Австралия). Анализ данных
осуществлялся автоматически с помощью про*
грамм «AmpliSens FRT HR HPV Screen Quant
Results Matrix.xls» и «AmpliSens FRT HR HPV
Genotype RG4x Results Matrix.xls». Результаты
концентрации ДНК ВПЧ выражались в lg
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°2
О.И. Летяева, О.С. Абрамовских, В.Ф. Долгушина и др.
(ВПЧ на 105 клеток). Результаты трактовались
следующим образом: менее 3 lg (ВПЧ на 105 кле*
ток) – малозначимая, от 3 до 5 lg (ВПЧ на 105
клеток) – значимая и более 5 lg (ВПЧ на 10 5
клеток) – повышенная вирусная нагрузка.
Полученные результаты исследования были
обработаны общепринятыми методами вариа*
ционной статистики и представлены в виде
средней арифметической и ее стандартной
ошибки (М ± m). При анализе количественных
признаков оценка достоверности различий
между группами производилась с использова*
нием непараметрического критерия Манна*
Уитни. Статистическая обработка материала
осуществлялась с использованием пакета при*
кладных программ «Statistica 6.0».
Результаты и обсуждение. Проведенные ис*
следования показали, что ВПЧ ВКР обнаружи*
вался у 263 женщин репродуктивного возраста,
что составило 52,2 % от всех обследуемых. В
возрасте от 20 до 24 лет ДНК ВПЧ ВКР выявля*
лась достоверно чаще, чем у женщин среднего
и позднего репродуктивного возраста (p = 0,01
и p = 0,0002 соответственно) (таблица 1).
В 1 группе ВПЧ ВКР обнаруживался у 64,3
% (n = 110), во 2 возрастной группе у 49,9 % (n
= 108) и в 3 возрастной группе у 38,8 % (n =
45) женщин. Сочетание нескольких типов
ВПЧ ВКР чаще встречалось у женщин первой
группы (55,5 %) по сравнению с женщинами 2
и 3 групп (34,3 % и 17,2 %, p = 0,01 и p = 0,0002
соответственно). У женщин позднего репро*
дуктивного возраста преобладала моноинфек*
ция в 82,8 % (n = 37) случаев (таблица 2).
При исследовании спектра генотипов устав*
лено преобладание ВПЧ 16 типа у 28,7 % ВПЧ*
позитивных женщин репродуктивного возрас*
та. Далее генотипы ВПЧ по частоте встречаемо*
сти распределились следующим образом: ВПЧ
31, 51, 56, 18 и 33 типов (11, 2 %, 8,4 %, 8,0 %, 6,8
% и 6,8 % соответственно). Остальные типы
ВПЧ ВКР (35, 39, 45, 52, 58, 59) встречались ме*
нее чем в 6 % случаев. В раннем репродуктив*
ном возрасте ВПЧ 16 типа выявлялся у 27,2 %,
ВПЧ 31 типа у 9,9 %, ВПЧ 51 типа у 9,4 % и ВПЧ
39 типа у 7,9 % женщин. В группе женщин сред*
него репродуктивного возраста ВПЧ 16 типа
обнаруживался у 28,1 %, ВПЧ 31 типа у 10,8 %,
ВПЧ 56 типа у 9,6 % и с одинаковой частотой
ВПЧ 33 и 51 типов у 8,4 % обследуемых. У жен*
щин позднего репродуктивного возраста ВПЧ
16 типа встречался в 35,6 %, ВПЧ 31 типа в 16,8
Таблица 1. Частота выявления ВПЧ ВКР у женщин репродуктивного возраста
Показатель
Стат.
показатели
1 группа
(n = 171)
2 группа
(n = 217)
3 группа
(n = 116)
ВПЧ ВКР +
n
%
n
%
110
64,3 %
61
35,7 %
108
49,9 %*
109*
50,1 %*
45
38,8 %**
71
61,2 %**
ВПЧ ВКР *
Примечание:
* достоверно значимые различия показателей между первой и второй группой;
** достоверно значимые различия показателей между первой и третьей группой
Таблица 2. Частота выявления генотипов ВПЧ ВКР у женщин репродуктивного возраста
Показатель
Стат.
показатели
1 группа
(n = 110)
2 группа
(n = 108)
3 группа
(n = 45)
один тип ВПЧ ВКР
n
%
n
%
49
44,5 %
61
55,5 %
71*
65,7 %*
37*
34,3 %*
37**
82,8 %**
8**
17,2 %**
2 два и более типов
ВПЧ ВКР
Примечание:
* достоверно значимые различия показателей между первой и второй группой;
** достоверно значимые различия показателей между первой и третьей группой
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2012 N°2
91
Инфектология: Мониторинг папилломавирусной инфекции репродуктивного тракта у женщин...
%, ВПЧ 56 типа в 11,9 % и ВПЧ 33 типа в 6,8 %
случаев. Достоверных отличий между группами
по частоте встречаемости генотипов установ*
лено не было (таблица 3).
При исследовании вирусной нагрузки сре*
ди ВПЧ*позитивных женщин репродуктивно*
го возраста определены следующие средние
значения (таблица 4): в 1 группе – 4,5 ± 0,17
lg (ВПЧ на 10 5 клеток), во 2 группе – 4,4 ±
0,16 lg (ВПЧ на 105 клеток), в 3 группе – 4,1
± 0,36 lg (ВПЧ на 105 клеток).
Изучение вирусной нагрузки по группам по*
казало, что у женщин 1 и 2 группы преоблада*
ла значимая нагрузка в 46 % и 47,3 % случаев,
Таблица 3. Частота выявления спектра генотипов ВПЧ ВКР у женщин репродуктивного возраста
Тип
вируса
Стат.
показатели
1 группа
n = 202
2 группа
n = 167
3 группа
n = 59
ВПЧ * 16
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
n
%
55
27,2 %
13
6,4 %
20
9,9 %
11
5,4 %
11
5,4 %
16
7,9 %
12
5,9 %
19
9,4 %
15
7,4 %
11
5,4 %
12
5,9 %
7
3,8 %
47
28,1 %
13
7,7 %
18
10,8 %
14
8,4 %
8
4,8 %
8
4,8 %
9
5,4 %
14
8,4 %
11
6,6 %
16
9,6 %
7
4,2 %
2
1,2 %
21
35,6 %
3
5,1 %
10
16,8 %
4
6,8 %
1
1,7 %
3
5,1 %
2
3,4 %
3
5,1 %
1
1,7 %
7
11,9 %
3
5,1 %
1
1,7 %
ВПЧ * 18
ВПЧ * 31
ВПЧ * 33
ВПЧ * 35
ВПЧ * 39
ВПЧ * 45
ВПЧ * 51
ВПЧ * 52
ВПЧ * 56
ВПЧ * 58
ВПЧ * 59
Примечание: n – количество типоспецифических сигналов.
Таблица 4. Распределение вирусной нагрузки у женщин репродуктивного возраста
Вирусная нагрузка
lg (ВПЧ на 105 клеток)
Стат.
показатели
1 группа
(n=110)
2 группа
(n=108)
3 группа
(n=45)
Среднее значение
Малозначимая
(менее 3 lg)
Значимая
(от 3 до 5 lg)
Повышенная
(более 5 lg)
M±m
n
%
n
%
n
%
4,5 ± 0,17
17
15,8 %
51
46 %
42
38,2 %
4,4 ± 0,16
17
15,8 %
51
47,3 %
40
36,9 %
4,1 ± 0,36
14
31,1 %
15
33,3 %
16
35,8 %
92
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°2
О.И. Летяева, О.С. Абрамовских, В.Ф. Долгушина и др.
малозначимая нагрузка встречалась с одина*
ковой частотой в 15,8 %, а повышенная в 38,2
и 36,9 % случаев, соответственно. В позднем
репродуктивном возрасте немного чаще
(35,8 %) встречалась повышенная вирусная
нагрузка по сравнению со значимой и мало*
значимой вирусной нагрузкой (33,3 % и 31,1
% соответственно). В 2 раза чаще малозначи*
мая нагрузка определялась в позднем репро*
дуктивном возрасте по сравнению с данным
показателем в раннем и среднем репродуктив*
ном возрасте, однако достоверных отличий
по частоте встречаемости вирусной нагрузки
не установлено.
Заключение. ВПЧ ВКР выявлялся у 52,2 %
женщин репродуктивного возраста с наи*
большей частотой встречаемости у женщин
раннего репродуктивного периода. Высокая
частота встречаемости микстинфекции уста*
новлена в раннем репродуктивном возрасте,
тогда как в позднем репродуктивном возрас*
те сочетание 2 и более типов ВПЧ ВКР состав*
ляет 17,2 %. Независимо от возраста, в раз*
ном проценте случаев у ВПЧ*позитивных
женщин были выявлены все 12 генотипов, с
преобладанием ВПЧ 16 и 31 типов. ВПЧ 16
типа обладает максимальным канцерогенным
действием на слизистую оболочку шейки мат*
ки. Средний показатель вирусной нагрузки на*
ходился в пределах значимой (3 * 5 lg ВПЧ на
105 клеток) во всех возрастных группах жен*
щин. Малозначимая вирусная нагрузка в 2
раза чаще встречалась у женщин позднего реп*
родуктивного возраста, а значимая вирусная
нагрузка у женщин в возрасте от 20 до 34 лет.
Таким образом, особенностью раннего реп*
родуктивного возраста является высокая час*
тота встречаемости и сочетание нескольких ге*
нотипов ВПЧ ВКР. В позднем репродуктивном
возрасте уровень встречаемости ПВИ значи*
тельно снижается и преобладает инфицирова*
ние 1 типом ВПЧ ВКР. Вероятными причинами
подобной закономерности могут являться сни*
жение сексуальной активности женщин после
35 лет и развитие иммунитета к определенным
типам вирусов.
Литература
1 . Бебнева, Т.Н. Некоторые клинические аспекты па*
пилломавирусной
инфекции
Гинекология;
2007;.9;1;20*24.
2. Бочкарев Е.Г., Сергеев Ю.В. Молекулярные методы в
диагностике и профилактике папиллломавирусной ин*
фекции и рака шейки матки. Иммунопатология, аллергол,
инфектол. 2007; 3:72*76
3. Bosch, F.X., Manoz M.M., Munoz N. et al. Prevalence of
human papillomavirus in cervical cancer: a worldwide
perspective J. Natl. Cancer Inst. 1995;.87; 796*802.
10. Евстигнеева, Н.П. Молекулярное генотипирование
вируса папилломы человека в Уральском регионе; Совре*
менные проблемы дерматовенерологии, иммунологии и
врачебной косметологии; 2006;1;52*56.
11. Соколовский, Е.В., Игнатовский А.В. Иммуномодули*
рующая терапия папилломавирусной инфекции; Вопро*
сы гинекологии, акушерства и перинатологии; 2005;4;4.;
27*30.
12. Профилактика рака шейки матки: руководство для
врачей. – М.: МЕДпресс*информ, 2007.
4. Kaufman, R.H., Adam Е, Vonka К. HPV*infection and
cervical carcinoma Clin. Obstet. Gynaecol. 2000; 43; 2; 363*
380.
13. Александрова, Ю.Н, Лыщев А.А., Сафронников Н.Р. и
др., Папилломавирусная инфекция у здоровых женщин
Санкт*Петербурга; Вопр. онкологии; 2000;.46;2; 175*179.
5. McGree, D.H, Leichliter J.S, Hogben М. et al. National
survey by specialty of U.S. physicians HPV screening practices
Prev Med.; 2003;.36; 159*163.
14. Кубанов, А.А. Результаты генотипирования вируса
папилломы человека при скрининговом исследовании в
Московском регионе; Вестник дерматологии и венероло*
гии; 2005;1;.51*55.
6. Sherman, M.E., Lorincz A.T., Scott D.R. et al. Baseline
cytology, human papillomavirus testing, and risk for cervical
neoplasia: a 10*year cohort analysis J. Natl. Cancer Inst; 2003;
95; 46*55.
7. Stanley, M.A., Pett M.R, Coleman N. HPV: from infection
to cancer Biochem Soc Trans; 2007;.35;6;1456*1460.
8. Кубанов, А.А. Комплексная иммунологическая и моле*
кулярная диагностика папилломавирусной инфекции у
больных и определение формирования злокачественной
трансформации эпителиальных тканей: автореф. дис. ... д*
ра мед.наук М; 2005;44.
9. KrishnamurthyV., Gunalan G, Sumathy G., et al.
Biochemical changes in neutrophils of cervical cancer patients
treated with 60Co. Current science; 2008; 94; 9; 1195*1199.
15. Новиков, А.И., Кононов А.В., Ваганова.И.Г. Инфек*
ции, передаваемые половым путем, и экзоцервикс: М.:
Медицина; 2002
16. Видяева, И.Г., Уразова Л.Н., Писарева Л.Ф. и др, Час*
тота выявления вируса папилломы человека высокого он*
когенного риска у женщин репродуктивного возраста рес*
публики Тыва; Бюллетень СО РАМН.;2008.;3;131;13*17.
17. Кисина, В.И., Кубанов А.А. Патологические процес*
сы слизистой оболочки шейки матки, ассоциированные с
вирусом папилломы человека; Вестн. дерматологии и ве*
нерологии; 2005;4; 29*32.
18. Brown, D.R., Legge D., Qadadri В. Distribution of human
papillomavirus types in cervicovaginal washings from women
Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2012 N°2
93
Инфектология: Мониторинг папилломавирусной инфекции репродуктивного тракта у женщин...
evaluated in a sexually transmitted diseases clinic; Qadadri
Transm Dis; 2002;.29; 763*768.
талий; Клиническая дерматология и венерология;
2009;2;.32*36.
19. Шперлинг, Н.В., Венгеровский А.И., Пресидская,
О..А., Шперлинг И.А. Опыт применения индинола при
рецидивирующей папилломавирусной инфекции гени*
20. Brown D.R, Shew M.L, Qadadri B. et al. A longitudinal study
of genital human papillomavirus infection in a cohort of closely
followed adolescent women; J Infect Dis; 2005;. 191;182.
Сведения об авторах:
Летяева Ольга Ивановна – врач9дерматовенеролог Консультативно9диагностического центра ЧелГМА, кандидат медицинских наук
Тел.: 8 351 900 40 10, e9mail: olga9letyaeva@yandex.ru
Абрамовских Ольга Сергеевна – старший научный сотрудник НИИ иммунологии ГОУ ВПО ЧелГМА Росздрава, кандидат медицинских наук
Тел.: 8 902 868 62 23, e9mail: abramoschel@mail.ru
Гизингер Оксана Анатольевна, старший научный сотрудник НИИ иммунологии ГОУ ВПО Челябинской государственной медицинской академии Росздрава,
доктор биологических наук.
Телефон, 8(3512)727939958 e9mail: ogizinger@gmail.com
Abramovskikh Olga S. 9 the candidate of medical sciences, superior researcher of Immunology scientific research institute of State Chelyabinsk Medical Academy
Ph.: 8 902 868 62 23, e9mail: abramoschel@mail.ru
Letyaeva Olga I. – the doctor dermatovenerologist Консультативно9диагностического центра ЧелГМА, the candidate of medical sciences
Ph.: 8 351 900 40 10, e9mail: olga9letyaeva@yandex.ru
Gizinger Oxana A. the candidate of biological sciences, superior researcher of Immunology scientific research institute of State Chelyabinsk Medical Academy
Ph.: +7 9048110562 e9mail: OGizinger@gmail.com
Поступила 16.05.2012 г.
94
Immunopathology, Allergology, Infectology 2012 N°2