44 ПроГеСТерон В ПЛаЦенТе При БереМенноСТи

44
▪ медицинские науки ▪
УДК 612.63.031.3:618.36:616.523-036.11
ПРОГЕСТЕРОН В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ,
ОСЛОЖНЕННОЙ ОБОСТРЕНИЕМ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ
ИНФЕКЦИИ
И.В. Довжикова
Учреждение СО РАМН «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН», г. Благовещенск
cfpd@amur.ru
При гистохимическом исследовании ворсинчатых хорионов и зрелых плацент
от беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, обнаружено снижение интенсивности работы 3β-гидроксистероиддегидрогеназы, отвечающей за синтез прогестерона в плаценте, и 3α-гироксистероиддегидрогеназы, инактивирующей
данный гормон. Нарушение процессов гормонообразования прямо отразилось на содержании прогестерона в гомогенате ворсинчатых хорионов и плаценты.
Ключевые слова: прогестерон, плацента, герпес, 3β-гидроксистероиддегидрогеназа,
3α-гироксистероиддегидрогеназа.
PROGESTERONE IN PLACENTA AT PREGNANCY,
COMPLICATED BY HERPES-VIRUS INFECTION
EXACERBATION
I.V. Dovzhikova
FarEeastern Scientific Center of Respiratory Physiology and Pathology Siberian
Branch RAMN, Blagoveschensk, Russia
cfpd@amur.ru
At histochemical study of villous chorions and term placentas from pregnant women with
herpetic infection exacerbation it was found that 3β-hydroxysteroid dehydrogenase activity
and 3α-hydroxysteroid dehydrogenase activity are decreased. Disturbance of steroid
hormone synthesis has an effect on progesterone concentration in placental and villous
chorion homogenate.
Keywords: progesterone, placenta, herpes, 3β-hydroxysteroid dehydrogenase, 3αhydroxysteroid dehydrogenase.
В последние годы была признана роль
сопровождаемая гормональным дисбалан-
герпес-вирусной инфекции в развитии раз-
сом. Мы считаем, что необходимо не только
личной акушерской и перинатальной пато-
зарегистрировать происходящие изменения,
логии. При ее обострении у женщин форми-
но и раскрыть патогенез развивающейся па-
руется фетоплацентарная недостаточность,
тологии.
фундаментальные исследования №4, 2010
45
▪ медицинские науки ▪
Важнейшим гормоном, подготавливаю-
и лабораторно
диагностированного
обо-
щим организм к беременности и обеспе-
стрения герпес-вирусной инфекции. По зна-
чивающим ее нормальное течение, явля-
чимым параметрам (возраст, акушерско-
ется прогестерон. Он оказывает защитное
гинекологический анамнез, наличие других
действие на оплодотворенную яйцеклетку
хронических соматических заболеваний)
и матку, поскольку снижает активность
на момент
нервно-мышечного аппарата матки. Проге-
группы достоверно не различались.
обследования
сравниваемые
стерон способствует росту матки при бере-
Диагностику герпес-вирусной инфекции
менности, развитию железистой ткани мо-
осуществляли путем определения антител
лочных желез, поддерживает в центральной
класса М и G к вирусу простого герпеса 1
нервной системе доминанту беременности,
иммуноферментным методом с помощью
стимулирует синтез стероидных гормонов,
стандартных
оказывает иммунодепрессивное действие,
Бест» (Новосибирск) на аппарате спек-
подавляя реакцию отторжения плодного
трофотометр «Stat-Fax 2100» (USA). Ис-
яйца [1, 6, 7].
следование прогестерона в плацентарном
тест-систем
ЗАО «Вектор-
Синтез прогестерона во время гравидар-
гомогенате проводили методом иммуно-
ного периода осуществляется плацентой.
ферментного анализа, используя наборы
Постепенно, с 5-й недели внутриутробного
ЗАО «Алкор Био» (Санкт-Петербург, Рос-
развития она становится основным постав-
сия), на спектрофотометре «Stat-Fax 2100»
щиком гормона. Прогестерон синтезируется
(США).
из холестерина. Ферментом, обеспечиваю-
Плаценту
забирали
в течение
щим его необходимую концентрацию, яв-
10– 15 мин. после родов. Ее поверхность от-
ляется
мывали большим количеством физиологи-
I типа.
данный
3β-гидроксистероиддегидрогеназа
Энзимом,
гормон,
инактивирующим
считается
3α-гидро­
ксистероиддегидрогеназа II типа [8, 10].
ческого раствора (ФР). Плодовая часть плаценты срезалась скальпелем пластинками
площадью до 2–3 см, толщина срезаемого
Целью нашей работы был анализ нару-
слоя не превышала 1 мм. Кусочки ткани от-
шений метаболизма прогестерона при бе-
мывали от клеток крови в 200 мл ФР, пере-
ременности,
мешивая 15 мин на магнитной мешалке.
осложненной
обострением
Для получения экстрактов кусочки плацен-
герпес-вирусной инфекции.
Материалы и методы исследования
ты взвешивали, растирали и гомогенизиро-
Материалом
послу-
вали до однородной кремообразной массы.
жили 38 образцов ворсинчатого хориона,
К полученному гомогенату добавляли ФР в
взятого при проведении медицинских абор-
объеме, равном изначальному весу ткани
тов на сроке 5-10 недель беременности,
(на 1 г — 1 мл ФР). Взвесь помещали в пла-
и 35 зрелых плацент, полученных во время
стиковые пробирки Falcon и подвергали за-
родов, от практически здоровых женщин,
мораживанию при -20ºС в течение суток.
которые составили контрольную группу,
Размороженный
и беременных с признаками клинического
ровали при 4000 об/мин при температуре
для исследования
гомогенат
центрифуги-
фундаментальные исследования №4, 2010
46
▪ медицинские науки ▪
+4ºС. Надосадочную жидкость использова-
вития; 1,63± 0,098 усл. ед. при сроке 7–8 не-
ли для проведения ИФА.
дель; 1,97± 0,078 усл. ед. при 9–10 недель-
Выявление 3β-гидроксистероиддегидро­
ной стадии и 4,68± 0,067 усл. ед. в зрелой
геназы и 3α-гидроксистероиддегидрогеназы
плаценте. Таким образом, активация герпес-
производилось по методу З. Лойда [4]. Ко-
вирусного процесса оказала воздействие
личество образующихся продуктов реакции
на интенсивность работы фермента, синте-
проводили путем подсчета на программе
зирующего прогестерон в плаценте.
компьютерной цитофотометрии методом из-
Мы изучили содержание данного гормона
мерения на стандартную единицу площади
в гомогенате ворсинчатых хорионов и пла-
0,1 (зонд) в 100 различных точках объекта.
цент. Плацента сама синтезирует гормоны,
Результаты исследования и обсуждение
3β-гидроксистероиддегидрогеназа явля-
поэтому такая оценка позволит лучше отразить процессы синтеза, секреции и превращения гормонов, происходящие в ней.
ется одним из ключевых ферментов гормо-
При
физиологически
протекающей
нообразования. С помощью гистохимиче-
гестации
ской реакции было обнаружено, что энзим,
на
который на основании субстратной спец-
нмоль/мл
ифичности мы отнесли к I типу, хорошо
160,0±21,13 нмоль/мл при сроке 7–8 не-
выявлялся в синцитио- и цитотрофобласте
дель,
хориальных ворсин начиная с 5–6 неде-
9–10 недель и до 240,5±9,05 нмоль/ мл взре-
ли гестации. Цитофотометрически его со-
лой плаценте (38-40 недель). При обостре-
держание составило 2,33 ± 0,067 усл. ед.
нии герпес-вирусной инфекции во время
По мере увеличения срока интенсивность
беременности содержание данного гормона
гистохимической реакции, выявляющей 3β-
в гомогенате ворсинчатого хориона резко
гидроксистероиддегидрогеназу, возрастала,
изменялось. Так, при сроке развития 5-6 не-
но гистотопография ее не менялась. Цито-
дель количество прогестерона уменьшилось
фотометрический показатель увеличился
до 23,4±5,71 нмоль/мл (р<0,001), при сроке
при беременности 7-8 недель до 3,56±0,113
7-8 недель — до 32,9±4,11нмоль/мл (р<0,01),
усл. ед. и до 4,90 ± 0,091 усл. ед. при 9-10
при сроке 9-10 недель — до 48,3±4,33
недельной стадии развития; в зрелой пла-
нмоль/мл (р<0,001), в зрелой плаценте —
центе 39-40 недель гестации достиг 7,23 ±
до 183,9±7,18 нмоль/мл (р<0,05). Это созда-
0,098 усл. ед.
вало большую опасность для беременности
концентрация
линейно
возрастало
при сроке
5–6
прогестерос 152,2±38,92
недель
до 171,2±22,16 нмоль/мл
до
при сроке
Активность 3β-гидроксистероиддегидро­
ввиду того, что достаточный уровень про-
геназы в плацентарных и хориальных вор-
гестерона необходим для сохранения ге-
синах от женщин, перенесших обострение
стации. Продукция прогестерона, особенно
герпес-вирусной инфекции во время бере-
в начале гестации, настолько важна, что ее
менности, была резко снижена. Цитофото-
недостаток часто приводит к десинхрониза-
метрически она оценивалась равной 1,08 ±
ции развития эндометрия и является в боль-
0,034 усл. ед. при 5-6 недельной стадии раз-
шинстве случаев основной причиной пре-
фундаментальные исследования №4, 2010
▪ медицинские науки ▪
47
ждевременного прерывания беременности
давление активности фермента под влияни-
[2, 3, 5, 6, 9].
ем инфекционного процесса.
Причиной уменьшения количества про-
Заключение
гестерона при осложненной герпесом бере-
В результате исследований обнаружено,
менности, по нашему мнению, стало сниже-
что герпес-вирусная инфекция отрицательно
ние активности стероидогенеза в плаценте.
влияет на интенсивность процессов обмена
В
ме
прогестероновом
задействована
метаболиз-
прогестерона в плаценте, снижая активность
и 3α-гироксистеро­
работы энзимов, обеспечивающих как син-
иддегидрогеназа, преобразующая гидрок-
тез, так и его инактивацию в данном органе.
сильные группы стероида и тем самым
Выявленное нарушение прямо отразилось
участвующая в регуляции его активности
на содержании прогестерона в плаценте,
[8]. Локализация энзима хорошо выявля-
который оказывает влияние на метаболизм
лась в синцитиотрофобласте и цитотрофо-
в организме беременной, создает условия
бласте ворсин. Цитофотометрически его со-
для физиологического роста и развития пло-
держание в контрольной группе составило
да, а также процесса родовой деятельности.
3,26±0,233 усл. ед. на стадии 5-6 недель раз-
Признано, что изменение его уровня при-
вития. По мере развития беременности
водит к развитию угрозы прерывания бере-
интенсивность гистохимической реакции
менности. Поэтому уменьшение количества
возрастала до 3,75±0,572 усл. ед. на стадии
гормона негативно отражается на гравидар-
7-8 недель; до 4,01±0,676 усл.ед. на стадии
ном гомеостазе.
9-10 недель и до 4,99±0,343 усл.ед. в зрелой
Список литературы
плаценте (38-40 недель). Гистотопография
1. Богданович Р.Н., Берестовая Т.А., Лу-
фермента оставалась прежней. Выявленный
кьянов П.А. Значение определения гормо-
факт свидетельствовал о росте активности
нов фетоплацентарной системы и трофобла-
энзима, что объяснялось увеличением об-
стического β1-гликопротеина у беременных
мена стероидных гормонов во время геста-
с угрозой невынашивания для диагности-
ции.
ки плацентарной недостаточности // Рос-
Анализ ворсинчатых хорионов от женщин,
перенесших обострение герпес-вирусной
сийский вестник акушера-гинеколога. —
2005. — Т. 5, № 6. — С. 3–7.
инфекции во время беременности, показал
2. Гаспарян Н. Д., Карева Е. Н. Современ-
уменьшение продукта гистохимической ре-
ные представления о механизме регуляции
акции на 3α-гидроксистероиддегидрогеназу
сократительной деятельности матки // Рос-
в синцитиотрофобласте и цитотрофобласте.
сийский вестник акушера-гинеколога. —
Цитофотометрически его содержание сни-
2003. — №2. — URL: http://www.mediasphera.
зилось до 1,41±0,213 усл. ед. на сроке 5-6
ru/journals/akuvest/detail/271/4111/ (дата об-
недель гестации; до 1,89 ± 0,347 усл. ед.
ращения: 29.09.09).
на сроке 7-8 недель; до 2,33±0,675 усл. ед.
3. Некоторые аспекты этиологии и пато-
на сроке 9-10 недель и до 2,67±0,233 усл.
генеза эмбриональных потерь в I триместре
ед. в зрелой плаценте, что указывало на по-
гестации / Ю.Э. Доброхотова, Р.И. Озерова,
фундаментальные исследования №4, 2010
48
▪ медицинские науки ▪
Ж.А. Мандрыкина и др. // Российский вест-
11. Bogdanovich R.N., Berestovaya T.A.,
ник акушера-гинеколога. — 2008. — № 5. —
Lukyanov P.A. Significance of measurements
С. 15–18.
of fetoplacental
4. Лойда З., Госсрау Р., Шиблер Т. Гисто-
hormones
and trophoblas-
tic β1–glycoprotein in pregnant females with
химия ферментов. Лабораторные методы. —
threatening
М.: Мир, 1982. — 259 с.
of placental insufficiency // Rossiysky vestnik
5. Пустотина О.А. Плацентарная недостаточность и угроза прерывания беремен-
miscarriage
for the
diagnosis
akushera-ginekologa. — 2005. — V. 5, № 6. —
P. 3–7.
ности — обоснование применения препа-
12. Gasparyan N.D. Kareva E.N. Modern
ратов прогестерона // Российский вестник
notions about regulation mechanism contrac-
акушера-гинеколога. — 2006. — № 2. —
tile activity of the uterus // Rossiysky vestnik
С. 51-54.
akushera-ginekologa. — 2003. — №2. — URL:
6. Свирская Е.В. Гестагены при беременности// 9 месяцев — 2008. — № 3. — URL:
http://www.ginecolog.by/statya.php?st=83
(дата обращения: 21.04.09).
http://www.mediasphera.ru/journals/akuvest/
detail/271/4111/ (дата обращения: 29.09.09).
13. Some aspect of the etiology and pathogenesis of embryonic depletions in the first tri-
7. Шмагель К.В., Черешнев В.А. Сте-
mester of gestation / Yu. E. Dobrochotova, R.I.
роидные гормоны: физиологическая роль
Ozerova, Zh.A. Mandrykina [et. al.] // Rossi-
и диагностическое значение в период бере-
ysky vestnik akushera-ginekologa. — 2008. —
менности // Успехи физиол. наук. — 2004. —
№ 5. — P. 15–18.
Т. 35. — № 3. — С. 61 — 71.
8. Human 3α-hydroxysteroid dehydrogenase
isoforms (AKR1C1-AKR1C4) of the aldo-keto
14. Lojda Z., Gossrau R., Schiebler T.H. Enzyme Histochemistry. A Laboratory manual. —
М.: Mir, 1982. — 259 p.
reductase superfamily: functional plasticity
15. Pustotina O.A. Placental insufficiency
and tissue distribution reveals roles in the in-
and treat of pregnancy loss-arguments for use
activation and formation of male and female
of progesterone drugs // Rossiysky vestnik
sex hormones / T.M. Penning, M.E. Burczyn-
akushera-ginekologa. — 2006. — № 2. —
ski, J.M. Jez [et al.] // Biochem. J. — 2000. —
P. 51–54.
Vol. 351. — P. 67–77.
9. Methotrexate treatment of unruptured
16. Svirskaya. Hestagen at pregnancy //
9 months — 2008. — № 3. — URL: http://
ectopic pregnancy: A report of 100 cases /
www.ginecolog.by/statya.php?st=83
T.G. Stovall, F.W. Ling, L.A. Gray [et al.] //
обращения: 21.04.09).
Obstet. Gynecol. — 1991. — Vol. 77. —
Р. 749–753.
(дата
17. Shmagel К.V. Chereshnev V.А. Steroid
hormones: physiological role and diagnostic
10. Strauss J.F., Martinez F., Kiriakidou M.
importance at period of pregnancy // Uspekhi
Placental steroid hormone synthesis: unique
fiziologicheskikh nauk. — 2004. — V. 35,
features and unanswered questions // Biol-
№ 3. — P. 61–71.
ogy of reproduction. — 1996. — V. 54. —
P. 303– 311.
фундаментальные исследования №4, 2010
18. Human 3α-hydroxysteroid dehydrogenase isoforms (AKR1C1-AKR1C4) of the al-
▪ медицинские науки ▪
49
do-keto reductase superfamily: functional plas-
T.G. Stovall, F.W. Ling, L.A. Gray [et al.] //
ticity and tissue distribution reveals roles in the
Obstet. Gynecol. — 1991. — Vol. 77. —
inactivation and formation of male and female
Р. 749– 753.
sex hormones / T.M. Penning, M.E. Burczyn-
20. Strauss J.F., Martinez F., Kiriakidou M.
ski, J.M. Jez [et al.] // Biochem. J. — 2000. —
Placental steroid hormone synthesis: unique
Vol. 351. — P. 67-77.
features and unanswered questions // Biol-
19. Methotrexate treatment of unruptured
ectopic pregnancy: A report of 100 cases /
ogy of reproduction. — 1996. — Vol. 54. —
P. 303– 311.
фундаментальные исследования №4, 2010