Иммунология №5 2013 IM-1305-236 ВЛИЯНИЕ КОИНФЕКЦИИ

Иммунология №5 2013
IM-1305-236
ВЛИЯНИЕ КОИНФЕКЦИИ ВИРУСОМ ГЕПАТИТА С НА АКТИВАЦИЮ И
АПОПТОЗ Т-ЛИМФОЦИТОВ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ,
ПОЛУЧАЮЩИХ АНТИРЕТРОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ
В.А. Черешнев1, К.В. Шмагель2, Л.Б. Королевская2, Е.В. Сайдакова2, Н.Г.
Шмагель3, С.В. Слободчикова2, С.Я. Зверев3, А.В. Таранин4
1ФГБУН Институт иммунологии и физиологии Уральского отделения Российской
академии наук, 620049, Ека-теринбург; 2ФГБУН Институт экологии и генетики
микроорганизмов Уральского отделения Российской акаде-мии наук, 614081,
Пермь; 3Пермский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и
инфекционными заболеваниями, 614088, Пермь; 4ФГБУН Институт молекулярной
и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, 630090,
Новосибирск
Исследована роль активации и апоптоза Т-лимфоцитов в развитии
иммунологической неотвечаемости на антиретровирусную терапию (АРТ) у
ВИЧинфицированных пациентов с коинфекцией вирусом гепатита С (ВГС). Все
пациенты были разделены на 2 группы. 1-я группа – ВИЧ+/ВГС+ с числом CD4+ Тклеток > 350 в 1 мкл (наличие иммунологического ответа на АРТ); 2-я группа –
ВИЧ+/ВГС+ с числом CD4+ Т-клеток < 350 в 1 мкл (иммунологические
неответчики). Контролем служили 2 группы ВИЧинфицированных больных с
аналогичным количеством CD4+ Т-лимфоцитов в крови, но без ВГСкоинфекции, а
также относительно здоровые добровольцы без ВИЧ и ВГСинфекций.
Установлено, что для ВГС/ВИЧинфекции характерны: 1) более низкое, чем при
ВИЧмоноинфекции содержание CD4+ Т-лимфоцитов; 2) высокая активация CD8+
Т-клеток; 3) усиление апоптоза CD8+ Т-лимфоцитов. Полученные данные
свидетельствуют о том, что коинфицирование ВГС, повидимому, может вносить
дополнительный вклад в нарушение восстановления иммунитета при проведении
АРТ у ВИЧинфицированных пациентов. При этом следует отметить, что
повышение активации и апоптоза CD8+ Т-лимфоцитов у ВИЧинфицированных
пациентов с ВГСкоинфекцией не объясняет причину развития иммунологической
неотвечаемости на лечение. Механизмы, лежащие в ее основе, требуют
дальнейшего исследования.
Ключевые слова : ВИЧ-инфекция, вирус гепатита С, антиретровирусная терапия,
активация иммунной систе-мы, апоптоз, отсутствие иммунологического ответа
IM-1305-242
ВКЛАД ГОМЕОСТАТИЧЕСКОЙ ПРОЛИФЕРАЦИИ И СВЯЗАННЫХ С НЕЙ
ПРОЦЕССОВ В ВОССТАНОВЛЕНИЕ ПОПУЛЯЦИИ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ T-
КЛЕТОК В УСЛОВИЯХ ЛИМФОПЕНИИ, ИНДУЦИРОВАННОЙ ОБЛУЧЕНИЕМ
А.Н. Митин, М.М. Литвина, В.В. Комогорова, Н.И. Шарова, А.А. Ярилин
ФГБУ – ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, 115478, г. Москва
В работе рассмотрены феноменология и некоторые механизмы восстановления
популяции периферических Т-клеток (Т-клетки селезенки и лимфатических узлов)
после действия сублетальных доз ионизирующей радиации. Существенных
различий в динамике восстановления основных и минорных субпопуляций Тклеток не выявлено. Принципиальная особенность восстановления
периферических Т-клеток по сравнению с регенерацией тимуса состоит в ее
непрерывности, отсутствии вторичной атрофии, что обеспечивает поддержание
(пусть на сниженном уровне) защиты организма от патогенов. Из двух механизмов
восстановления популяции периферических Т-лимфоцитов – тимопоэза и
гомеостатической пролиферацией самих Т-клеток – в данной работе рассмотрена
роль второго механизма. Показано 2–4-кратное повышение доли
пролиферирующих (Ki-67+) Т-клеток на протяжении всего восстановительного
периода (с 4-х по 60-е сутки после облучения), что служит проявлением
гомеостатической пролиферации Т-клеток. Спектр наивных Т-клеток и Т-клеток
памяти проанализирован по экспрессии маркерных молекул CD62L и CD44.
Содержание наивных Т-клеток (CD62LhiCD44lo) остается ниже уровня контроля
до конца периода наблюдения (60-е сутки), тогда как уровень CD44hi Т-клеток
памяти достигает исходного уже на 20-е сутки, а затем превосходит его.
Предполагается, что по крайней мере частично такая ситуация является
следствием фенотипической конверсии наивных Т-клеток, вступающих в
гомеостатическую пролиферацию, в Т-клетки памяти центрального типа
(CD62LhiCD44hi), о чем свидетельствует также повышение в ходе
восстановительных процессов доли CD62LhiCD44hi-клеток, слабо
экспрессирующих молекулу CD49d. Эти клетки рассматриваются как суррогатные
Т-клетки памяти, с накоплением которых связывают развитие в последующем
аутоиммунных процессов.
Ключевые слова : Т-лимфоциты, лимфатические узлы, селезенка, ионизирующая
радиация, гомеостатическая пролиферация, регенерация, проточная цитометрия
IM-1305-247
ВЛИЯНИЕ КИССПЕПТИНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ
МОНОЦИТОВ
О.Л. Горбунова, С.В. Ширшев, С.А. Заморина
Лаборатория иммунорегуляции ФГБУН Институт экологии и генетики
микроорганизмов Уральского отделения РАН, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13;
тел. (342)2808431, факс (342)2809211; e-mail: olia15_77@mail.ru
Исследовано влияние недавно открытого гормона кисспептина, который
детектируется в периферической крови только в период беременности, на
функциональную активность моноцитов. Выявлено, что кисспептин в
концентрации, соответствующей III триместру беременности, стимулирует
фагоцитарную активность моноцитов и во всех исследуемых концентрациях
повышает продукцию активных форм кислорода в реакции спонтанной и
стимулированной люминолзависимой хемилюминесценции. Показано, что
кисспептин в концентрации, соответствующей II триместру беременности,
понижает активность внутриклеточной миелопероксидазы (МПО) моноцитов,
повышая при этом активность секреторной МПО и липополисахарида
индуцированной индоламин-2,3-диоксигеназы. Таким образом, впервые показано,
что ранее не учитываемый гормон кисспептин является важным регулятором
функций моноцитов во время беременности.
Ключевые слова : кисспептин, моноциты, фагоцитоз, люминолзависимая
хемилюминесценция, миелопероксида-за, индоламин-2,3-диоксигеназа
IM-1305-251
ПРОТЕКТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ АУТОКРИННЫХ ФАКТОРОВ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ
T-ЛИМФОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ ХИМИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ
Г.В. Луценко, М.В. Гречихина, Л.Г. Дьячкова, А.М. Сапожников
ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А.
Овчинникова РАН, 117997, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10
Исследовали влияние аутокринных факторов клеток цитотоксической линии CTLL2 на их жизнеспособность и энергетический метаболизм в условиях химической
интоксикации, создаваемой с использованием азида натрия (NaN3) или хлорида
кобальта (CoCl2). Показано, что аутокринные факторы, содержащиеся в 50%
кондиционированной среде клеток CTLL-2, способны восстанавливать уровень
АТФ в этих клетках, сниженный в условиях химической гипоксии, которая
получена при их инкубации в течение 3 ч в присутствии 10 мМ NaN3 или 200 мкМ
CoCl2. Результаты цитометрического анализа количества клеток CTLL-2,
проведенного после 20 ч культивирования в условиях химической гипоксии (200
мкМ CoCl2), показали, что более 90% клеток подвергаются гибели по пути
апоптоза или некроза. Добавление к клеткам 50% кондиционированной среды,
богатой аутокринными факторами, снижало уровень погибших клеток до 10%.
Сделан вывод о том, что аутокринные факторы цитотоксических клеток CTLL-2 в
условиях химической гипоксии способны оказывать протективное действие на
клетки за счет переключения энергетического метаболизма на анаэробный
гликолиз.
Ключевые слова : аутокринные факторы, цитотоксические Т-лимфоциты,
химическая гипоксия, апоптоз, не-кроз, проточная цитометрия
IM-1305-254
ВЛИЯНИЕ ПРОТИВОПАРКИНСОНИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ГИМАНТАН НА
УРОВЕНЬ ЦИТОКИНОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
А.В. Таллерова, Е.А. Иванова, И.Г. Капица, Л.П. Коваленко, Е.А. Вальдман, Т.А.
Воронина
ФГБУ НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН, 125315, г. Москва
Известно, что воспаление способно провоцировать и усугублять развитие
нейродегенеративных заболеваний. В посмертных образцах мозга пациентов с
болезнью Паркинсона обнаруживают повышенный уровень провоспалительных
цитокинов. При моделировании паркинсонического синдрома (ПС) у грызунов
установлено, что введение токсинов, вирусных и бактериальных агентов в кору,
гиппокамп, стриатум и черную субстанцию вызывает активацию микроглии,
плотность которой в несколько раз больше в дофаминергических структурах
мозга, что приводит к снижению концентрации дофамина в стриатуме и гибели
дофаминергических нейронов. Данная работа посвящена изучению выраженности
системной воспалительной реакции у крыс с двумя типами экспериментальной
патологии – 6-гидроксидофамининдуцированным и
липополисахаридиндуцированным ПС – и оценке влияния на нее нового
противопаркинсонического препарата гимантан, а также исследованию действия
препарата на острую воспалительную реакцию на модели конканавалин Аиндуцированного отека у мышей.
Ключевые слова : болезнь Паркинсона, гимантан, воспаление, цитокины
IM-1305-258
ФОРМИРОВАНИЕ И ПОДДЕРЖАНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОГО КЛЕТОЧНОГО
ИММУННОГО ОТВЕТА НА ВАКЦИНАЦИЮ ПРИОРИКС
А.П. Топтыгина1, Е.Л. Семикина2, В.А. Алешкин1
1Лаборатория цитокинов, ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, 125212,
Москва, 2Объединенная клинико-диагностическая лаборатория ГУ Научный центр
здоровья детей РАМН
Двадцать детей (9 мальчиков и 11 девочек) в возрасте от 1 до 2 лет (группа 1) и
20 детей (10 мальчиков и 10 девочек) в возрасте от 6 до 7 лет (группа 2) были
привиты (группа 1) или ревакцинированы (группа 2) тривалентной живой
аттенуированой вакциной, содержащей вирусы кори, краснухи и эпидемического
паротита, – Приорикс. Лимфоциты периферической крови (ЛПК) были
изолированы на градиенте плотности до вакцинации, через 1 и 6 нед после и
разделены на две части. Первую часть ЛПК окрашивали CFSE и инкубировали в
присутствии антигенов вирусов кори или краснухи 8 дней. Вторую часть ЛПК
инкубировали при тех же условиях 15 ч и метили CD8 (FITC) и CD107a (РЕСу5)
антителами. Интенсивность флюоресценции оценивали с помощью проточного
цитометра. В группе 1 антигены вирусов кори и краснухи не индуцировали
митозов до вакцинации и через неделю после нее, как и в отрицательном
контроле, однако через 6 нед более 40% ЛПК демонстрировали
антигениндуцированную пролиферацию. Специфическая дегрануляция CD8highклеток также отсутствовала до вакцинации и через неделю после, но достигала 4–
5% через 6 нед после прививки. В группе 2, напротив, до прививки 27–28% ЛПК
проходили 1–2 митоза. Через неделю специфическая пролиферация ЛПК
снижалась, а через 6 нед достигала 40%. Специфическая CD8high пролиферация
была около 2,5% до ревакцинации, повышалась до 3,5–4% через неделю и
стабилизировалась на 3% через 6 нед. Показано, что оба использованных нами
метода (антигениндуцированная пролиферация и дегрануляция CD8high )
способны выявлять антигенспецифические Т-клетки памяти, формирующиеся в
ответ на прививку.
Ключевые слова : Т-клетки памяти, специфический клеточный иммунный ответ,
дегрануляция CD8high, про-лиферативная реакция Т-лимфоцитов
IM-1305-257
ФОРМИРОВАНИЕ И ПОДДЕРЖАНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОГО КЛЕТОЧНОГО
ИММУННОГО ОТВЕТА НА ВАКЦИНАЦИЮ ПРИОРИКС
А.П. Топтыгина1, Е.Л. Семикина2, В.А. Алешкин1
1Лаборатория цитокинов, ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского, 125212,
Москва, 2Объединенная клинико-диагностическая лаборатория ГУ Научный центр
здоровья детей РАМН
Двадцать детей (9 мальчиков и 11 девочек) в возрасте от 1 до 2 лет (группа 1) и
20 детей (10 мальчиков и 10 де-вочек) в возрасте от 6 до 7 лет (группа 2) были
привиты (группа 1) или ревакцинированы (группа 2) тривалентной живой
аттенуированой вакциной, содержащей вирусы кори, краснухи и эпидемического
паротита, – Приорикс. Лимфоциты периферической крови (ЛПК) были
изолированы на градиенте плотности до вакцинации, через 1 и 6 нед после и
разделены на две части. Первую часть ЛПК окрашивали CFSE и инкубировали в
присутствии анти-генов вирусов кори или краснухи 8 дней. Вторую часть ЛПК
инкубировали при тех же условиях 15 ч и метили CD8 (FITC) и CD107a (РЕ-Су5)
антителами. Интенсивность флюоресценции оценивали с помощью проточного
цитоме-тра. В группе 1 антигены вирусов кори и краснухи не индуцировали
митозов до вакцинации и через неделю после нее, как и в отрицательном
контроле, однако через 6 нед более 40% ЛПК демонстрировали антигениндуцированную пролиферацию. Специфическая дегрануляция CD8high-клеток также
отсутствовала до вакцинации и через неделю после, но достигала 4–5% через 6
нед после прививки. В группе 2, напротив, до прививки 27–28% ЛПК проходили 1–
2 митоза. Через неделю специфическая пролиферация ЛПК снижалась, а через 6
нед достигала 40%. Специфическая CD8high пролиферация была около 2,5% до
ревакцинации, повышалась до 3,5–4% через неделю и стабилизировалась на 3%
через 6 нед. Показано, что оба использованных нами метода
(антигениндуцированная пролиферация и дегрануляция CD8high ) способны
выявлять антигенспецифические Т-клетки памяти, формирующиеся в ответ на
прививку.
Ключевые слова : Т-клетки памяти, специфический клеточный иммунный ответ,
дегрануляция CD8high, про-лиферативная реакция Т-лимфоцитов
IM-1305-262
ИЗМЕНЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ CD4+- И CD8+T-ЛИМФОЦИТОВ В
ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ И СЕЛЕЗЕНКЕ У МЫШЕЙ ЛИНИИ ASC
(ANTIDEPRESSANTS SENSITIVE CATALEPSY) С НАСЛЕДСТВЕННОЙ
ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬЮ К ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНОМУ ПОВЕДЕНИЮ
М.М. Геворгян1, Е.Л. Альперина1, А.В. Куликов2, Г.В. Идова1
1ФГБУ НИИ физиологии СО РАМН, г. Новосибирск, 630117, ул. Тимакова, 4;
2ФГБУН Институт цитологии и ге-нетики СО РАН, 630090, г. Новосибирск, пр.
Лаврентьева, 10
Выявлены различия субпопуляционного состава периферической крови и
селезенки у мышей линии ASC (Antidepres-sants Sensitive Catalepsy) с
наследственно обусловленным депрессивноподобным поведением и мышей
родительской линии CBA, не имеющей признаков депрессии. Мыши линии ASC
характеризуются разнонаправленным изменением соотношения CD4+- и CD8+Tлимфоцитов до и после иммунизации: снижением индекса иммунореактивности у
интактных животных и его увеличением в ответ на введение T-зависимого
антигена (эритроциты барана).
Ключевые слова : CD4+- и CD8+T-лимфоциты, проточная цитофлюорометрия,
депрессивно-подобное поведение
IM-1305-265
ВЛИЯНИЕ ВИРУСА ЭПШТЕЙНА–БАРР НА ИММУННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ
СИНОВИАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ
В.В.Киреев, А.К. Джапаров, Д.А. Мусаходжаева
Институт иммунологии АН РУз, 700060, г. Ташкент, Республика Узбекистан
В данной работе показано, что в инфицированной синовиальной жидкости (СЖ)
вирусом Эпштейна–Барр (ВЭБ) у больных ревматоидным артритом (РА)
повышено относительное количество CD8+, CD16+ и CD20+ по сравнению с
аналогичными показателями неинфицированной СЖ и нормой. А в
неинфицированной ВЭБ СЖ у больных РА повышено относительное количество
CD25+, CD95+, CDHLADR+ и уровень циркулирующих иммунных комплексов.
Относительный уровень CD3+, CD4+, IgА, IgМ и IgG и степень снижения
комплексов ФАН существенно не отличаются между собой в инфицированной и
неинфицированной ВЭБ СЖ.
Ключевые слова : ревматоидный артрит, вирус Эпштейна–Барр, синовиальная
жидкость, иммунофенотипы лимфоцитов, иммуноглобулины
IM-1305-267
ВЛИЯНИЕ ГЛЮКОЗЫ И ИНСУЛИНА НА СЕКРЕЦИЮ ЦИТОКИНОВ
МОНОНУКЛЕАРАМИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ IN VITRO
И.В. Кологривова, Т.Е. Суслова, О.А. Кошельская, И.В. Винницкая, О.А. Трубачева
ФГБУ Научно-исследовательский институт кардиологии СО РАМН, 634012, г.
Томск
Целью настоящего исследования стало изучение влияния разной концентрации
инсулина и глюкозы на секрецию цитокинов с различными биологическими
эффектами у здоровых лиц и пациентов с сахарным диабетом (СД) 2-го типа (СД2). Мы показали, что для пациентов с СД-2 характерно повышение содержания
интерлейкина IL-4, IL-6, IL-10, фактора некроза опухоли α (TNFα) и IL-17A в
сыворотке периферической крови. У здоровых лиц при высоком содержании
глюкозы in vitro увеличивалась секреция IL-23, трансформирующего фактора
роста β (TGFβ) и TNFα мононуклеарами. У пациентов с СД-2 повышение
концентрации глюкозы в среде не оказывало влияния на секрецию цитокинов. При
добавлении инсулина в физиологической концентрации в среду культивирования
с глюкозой у здоровых лиц снижалась секреция IL-23, IL-6 и TGFβ
мононуклеарами, в то время как клетки пациентов с СД-2 оказались инертными к
воздействию инсулина.
Ключевые слова : цитокины, сахарный диабет 2-го типа, глюкоза, инсулин
IM-1305-271
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АТРОФИИ ТИМУСА ПРИ СТРЕССЕ
И.С. Старская1, 2, А.В. Полевщиков1–3
1НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, 197376, г. Санкт-Петербург;
2Санкт-Петербургский государ-ственный университет, 199034, г. Санкт-Петербург;
3Дальневосточный федеральный университет, 690950, г. Владивосток
Несмотря на многолетнюю историю изучения тимуса, вопрос
стрессиндуцированной атрофии тимуса является не до конца изученным и
требует внимания. В обзоре подробно рассмотрен морфологический анализ
тимуса в норме и при стрессе, включая изменения структуры органа,
микроциркуляторного русла, состава клеточных популяций как непосредственно в
ходе атрофии тимуса, так и при его восстановлении, а также представлены
возможные механизмы, ответственные за стрессиндуцированную атрофию
тимуса.
Ключевые слова : тимус, атрофия, стресс, глюкокортикоиды, гистология
IM-1305-277
ЕСТЕСТВЕННЫЕ АНТИТЕЛА КАК КЛЮЧЕВОЙ ЭЛЕМЕНТ МЕХАНИЗМА,
ПОДДЕРЖИВАЮЩЕГО ГОМЕОСТАЗ В ИММУННОЙ СИСТЕМЕ
М.М. Зиганшина1, Н.В. Бовин2, Г.Т. Сухих1
1ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И.
Кулакова Минздрава России, 117997, г. Москва; 2ФГУ Институт биоорганической
химии им. М.М. Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, 117997, г. Москва
Tак называемые естественные антитела (ЕАТ) являются частью гуморальной
составляющей врожденного иммунитета, представленной в основном
низкоаффинными антителами, присутствующими в организме без явной
антигенной стимуляции. Мишенями ЕАТ являются как экзо-, так и эндогенные
антигены, в том числе и бактериального происхождения, что определяет функцию
ЕАТ как элементов первой линии иммунной защиты против патогенов. Кроме того,
показано участие ЕАТ в клиренсе продуктов катаболизма. Уровень ЕАТ в крови
довольно высок, а репертуар стабилен в течение всей жизни; отклонения
свидетельствуют о развитии патологии. Все это указывает на важную роль ЕАТ в
гомеостазе. ЕАТ являются важным регуляторным компонентом сети
идиотипантиидиотипических взаимодействий, оказывающим стимулирующее или
супрессорное влияние на все звенья иммунной системы. В обзоре
рассматриваются гипотезы образования ЕАТ, их функции, роль в иммунном
ответе, а также значение при некоторых патологиях.
Ключевые слова : естественные антитела, тканевой гомеостаз, иммунорегуляция,
идиотип-антиидиотипичес-кие взаимодействия, естественные скрытые антитела
IM-1305-282
ОПУХОЛЕВЫЕ МОДЕЛИ В ИЗУЧЕНИИ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
И.В. Холоденко, И.И. Доронин, Р.В. Холоденко
ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А.
Овчинникова РАН, 117997, г. Москва
Рак наряду с сердечнососудистыми и цереброваскулярными заболеваниями,
является наиболее опасной патологией в современном мире. Для изучения
молекулярных механизмов развития онкологических заболеваний и разработки
новых противораковых агентов крайне важными являются исследования,
проводимые на животных моделях. Такие модели должны быть максимально
релевантны соответствующему заболеванию человека, для того, чтобы
протестированные на них препараты после попадания в клинику были не только
эффективны, но и безопасны. В представленном обзоре собрана информация о
наиболее актуальных в доклинических исследованиях мышиных моделях
онкологических заболеваний, их недостатках и преимуществах.
Ключевые слова : онкологические заболевания, мышиные модели, рак