005918 Область изобретения

005918
Область изобретения
Настоящее изобретение касается новых соединений, которые представляют собой производные
триптамина и их аналоги, фармацевтических композиций, содержащих их, и применения этих соединений для получения лекарственных средств для лечения различных заболеваний.
Предпосылки изобретения
Мелатонин является основным гормоном, секретируемым шишковидным телом у всех позвоночных. У всех изученных в настоящее время млекопитающих, включая человека, доказано ночное увеличение продукции мелатонина шишковидным телом; продукция мелатонина в организме резко тормозится
светом. Мелатонин вовлечен в координацию процессов, зависимых от светового периода, а также физиологических процессов. Способность животных или людей отвечать на мелатониновый сигнал зависит от
рецепторов мелатонина. Мелатонин воздействует на невральные механизмы в ЦНС через рецепторы,
локализованные в мозгу. Кроме того, множество исследований показывают наличие прямого воздействия мелатонина на периферические органы через периферические рецепторы мелатонина. Рецепторы
мелатонина присутствуют в сердце, легких, предстательной железе, половых железах, лейкоцитах крови,
сетчатке, гипофизе, щитовидной железе, почках, в кишечнике и кровеносных сосудах. Паттерны удерживания (сорбции) инъецированного крысам радиоактивного мелатонина демонстрируют накопление
мелатонина в мозге, гипофизе, легких, сердце, половых железах и придаточных половых органах (Withyachumnarnkul et al., Life Sci 12:1757-65, 1986).
В синтезе и секреции мелатонина наблюдается суточный ритм, который изменяется в зависимости
от времен года и с возрастом, например, при половом созревании и старении. Существует строгое доказательство, что мелатонин важен для регуляции множества нервных и эндокринных функций, особенно
тех функций, которые проявляют суточную и годичную ритмичность.
Мелатонин играет роль во многих заболеваниях человека. Известно, что некоторые заболевания
связаны с нарушениями биологического ритма (регулярности цикла сон-бодрствование). Мелатонин
вводят для синхронизации суточных ритмов, которые не совпадают с фазой локального фотопериодического цикла. Например, пациентам с нарушениями ритма чередования сна и бодрствования, связанными
с быстрым пересечением часовых поясов ("jet lag", синдром смены часовых поясов), или с синдромом
позднего засыпания (delayed sleep phase syndrome, DSPS), с нарушениями сна при ночной работе по
сменному графику или с нарушениями, испытываемыми слепыми людьми, могут вводиться мелатонин
или аналоги мелатонина (см. Патенты US 4600723 и 4666086 Шорта (Short) с соавт. и 5242941 Леви
(Lewy) с соавт.).
Однако, очевидно, что мелатонин обладает также прямым седативным/гипнотическим воздействием на нормального человека (например, Waldhauser et al., Psychopharmacology, 100:222-226, 1990; Vollrath et al., Bioscience, 29:327-329, 1981: Dollins et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 99:1824-1828, 1994, Патент US
5403851 Д'Орландо (D'Orlando) с соавт.). До сих пор были идентифицированы всего лишь три подтипа
рецепторов мелатонина: mt-1, МТ-2 и Ме11с (Barrett et al., Biol. Signals Recept, 1999, 8:6-14). МТ-2 локализуется главным образом в центральной нервной системе, mt-1 локализуется в ЦНС, а также в периферических органах, таких как почки и мочеполовой тракт (Dubocovich et al., IUPHAR media, London, UK,
187-93, 1998). Известные в настоящее время подтипы не достаточны для оценки большого количества
эффектов мелатонина, и дополнительные подтипы рецепторов ждут своего открытия.
Как было показано во множестве экспериментов на грызунах, мелатонин обладает как анксиолитической (против страха) (Golus and King, Pharmacol. Biochem. Behav., 41:405-408, 1992, Naranjo-Rodriguez
et al., Soc. Neurosci. Abst. 18:1167, 1992; Golombek et al., Eur. J. Pharmacol, 237:231-236, 1993), так и антиэпилептической активностью (Brallowsky, Electroencephalo. Clin. Neurophysiol. 41:314-319, 1976; Fariello
et al., Neurology, 27:567-570, 1977; Rudeen et al., Epilepsia 21:149-154, 1980; Sugden, J. Pharmacol. Exp.
Ther. 227:587-591, 1983; Golombek et al., Eur. J. Pharmacol., 210:253-258,1992).
Мелатонин эффективен в лечении сильной приступообразной головной боли с периодическими рецидивами и мигрени (Claustrat et al., Headache, 29:241-4, 1989). Мелатонин может играть роль в лечении
психических расстройств, в частности, депрессий, а также маний и шизофрении (см., Dobocovich "Antidepressant Agents", Патент US 5093352; Miles and Philbrick, Biol. Psychiatry, 23:405-425, 1988; Sandyk and
Kay, Schizophr. Bull. 16:653-662, 1990). В некоторых случаях психические расстройства могут иметь в
основе хронобиологическую этиологию (например, сезонные расстройства) и являются кандидатами для
мелатониновой терапии.
Мелатонин вовлечен в регуляцию суточных (циркадных) и годичных изменений температуры тела.
Введение экзогенного мелатонина людям уменьшает температуру тела (Strassman et al., J. Appl. Physiol,
71:2178-2182, 1991; Cagnacci et al., J Clin. Endocrinol. Merab. 75:447-452, 1992). Мелатонин может обладать также анальгезирующими свойствами (Sugden, J. Pharmacol. Exp. Ther. 227:587-591,1983).
Поэтому мелатонинподобные соединения могут использоваться в качестве альтернативных нестероидных противовоспалительных жаропонижающих лекарственных средств, таких как аспирин, ацетаминофен и ибупрофен.
Известно, что уровни мелатонина уменьшаются с возрастом (Sack et al., J. Pineal Res. 4:379-388,
1986; Waldhauser et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 66:648-652, 1988; Van Coavorden et al., Am. J. Physiol.
-1-
005918
260: E651-661, 1991), что может являться причиной некоторых болезней. Нейродегенеративные заболевания, часто связанные со старением, такие как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона, можно лечить с помощью мелатонинэргических соединений (Maurizi, Med. Hypotheses 31:233-242, 1990; Sandyk,
Int. J. Neurosci. 50:37-53, 1990; Skene et al., Brain Rev., 528:170-174,1990).
Было показано, что нарушения сна отвечают на лечение мелатонином (Garfinkel et al., Lancet,
346:541-543, 1995, Патент US 5498423 Зисапеля (Zisapel)). О снотворных эффектах мелатонина (0,3-240
мг) сообщалось после внутривенного, интраназального и перорального введения его людям. Кроме снотворных эффектов, экзогенный мелатонин может воздействовать на сон, через его воздействие на биологические часы, которое регулирует (восстанавливает) фазы сна. Введение мелатонина улучшало сон у
пациентов с синдромом позднего засыпания и синхронизировало сон в соответствии с суточным циклом
(день/ночь) у слепых пациентов. Эффективность мелатонина (0,3-5 мг/перорально) для лечения бессонницы была показана в исследованиях, проведенных в основном на пожилых пациентах, пациентах, обработанных атенололом, и пациентах с хроническими сердечными болезнями, большая часть которых имеет медленные или нарушенные ритмы мелатонина. В некоторых из этих исследований использовали
композиции, которые высвобождают мелатонин в течение ночи, для того чтобы преодолеть быстрое выведение гормона и имитировать (воспроизвести) его эндогенный профиль (Nutrition, 1998, 14: 1-2; The
Aging Male, 1998, 1: 1-8). 3 мг мелатонина, даваемые пациентам с расстройствами сна и деменцией в течение 21 дня, значительно улучшало качество сна и уменьшало количество эпизодов бодрствования, при
этом возбужденное поведение ночью (бродяжничество, sundowning) существенно уменьшалось (Biol.
Signals Recept. 1999, 8(1-2): 126-31).
Недавно авторы обнаружили, что мелатониновая терапия может быть полезна не только для улучшения качества сна, но может также приводить к улучшению общего состояния пациентов-диабетиков,
как показано с помощью уменьшения в уровнях НbА1с после долговременного лечения.
Ежедневное добавление мелатонина самцам крыс линии Sprague-Dawley, начиная со среднего возраста (10 месяцев) и продолжая в пожилом возрасте (22 месяца), с питьевой водой в дозе 4 мг/мл, восстанавливало связанные со старением повышенные уровни относительного (% от веса тела) забрюшинного
и эпидидимального жира, а также уровни инсулина и лептина до уровней, наблюдающихся у молодых
(4-месячных) животных (Rasmussen et al., Endocrinology, 1999, 140(2): 1009-12).
Даже остеопороз может иметь мелатонинэргическую компоненту (Sandyk et al., Int. J. Neurosci.
62:215-225, 1992). Фактически, как предполагают, мелатонин является гормоном против старения, против стресса (Armstrong and Redman, Med. Hypotheses 34:300-309, 1991; Reiter, Bioassays, 14:169-175,
1992). Это может определяться его активностью в качестве ловушки свободных радикалов (Pooggeler et
al., J. Pineal Res. 14:151-168, 1993) или его взаимодействием с иммунной системой (Maestroni and Conti, J.
Neuroimmun. 28:167-176, 1990; Fraschini et al., Acta. Oncol. 29:775-776, 1990, Guerrero and Reiter, Endocr.
Res. 18:91-113, 1992). Мелатонин может защищать от приступа ишемии (Cho et al., Brain Research,
755:335-338, 1997), уменьшать гибель клеток при болезни Альцгеймера (Pappola et al., J. Neurosci.,
17:1683-90, 1997) и снижать риск возникновения синдрома внезапной смерти новорожденных (SIDS) у
младенцев с низкими уровнями эндогенного мелатонина (Израильский Патент 115861/2 и Патент US
5500225 Лаудона (Laudon) с соавт.).
К вышесказанному относятся исследования, которые показывают, что мелатонин обладает онкостатическими свойствами для множества опухолей, при этом наиболее изученным является его положительное влияние на эстрогенные рецепторы раковых клеток молочной железы (Blasak and Hill, J. Neural.
Transm. Suppl., 21:433-449, 1986; Gonzalez et al. Melanoma. Res., 1:237-243, 1991; Lissoni et al. Eur. J. Cancer, 29A: 185-189, 1993; Shellard et al. Br. J. Cancer, 60:288-290, 1989; Philo and Berkowitz, J. Urol.,
139:1099-1102, 1988; см. Патенты US 5196435 Клеменса (Clemens) с соавт. и 5272141 Фрашини
(Fraschini) с соавт.). Возможно также, что мелатонин обладает антипролиферативным воздействием на
нераковые клетки и может использоваться для лечения доброкачественных опухолей или связанных с
повышенной пролиферацией клеток заболеваний, таких как ВРН (доброкачественная дисплазия простаты) (Патент US 5750557 и Патент ЕР 0565296В Зисапеля (Zisapel)) и псориаз.
Основная часть исследований, касающихся мелатонина, была посвящена исследованию его влияния
на репродукцию, в частности, сезонно размножающихся видов животных (таких как хомяки и овцы), у
которых мелатонин, как известно, регулирует плодовитость (фертильность) и половое созревание, зимнюю спячку и цвет меха. Это влияние мелатонина имеет очевидное значение для его применения в отношении сельскохозяйственных животных. Что касается воздействия мелатонина на репродуктивные
эндокринные железы человека, то его используют в контрацептивных и фертильных препаратах, для лечения преждевременного созревания, для лечения предменструального синдрома и гиперпролактинемии
(Pevre et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 47:1383-1386, 1978; Purry et al., Am. J. Psychiatry, 144:762-766,
1987; Waldhauser et al., Clin. Endocrinol. Metab., 73:793-796, 1991; Bispink et al., Pineal Res., 8:97-106, 1990;
Cagnacci et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 73:210-220, 1991; Voordouw et al., J. Clin. Endocrinol. Metab.,
74:107-108, 1992; см. Патенты US 4855305 и 4945103 Коэна (Cohen) с соавт., и 5272141 Фрашини
(Fraschini) с соавт.). Очевидно, что соединения мелатонина могут применяться и для лечения других эндокринных расстройств, в частности, тех, в которые вовлекается гормон роста (Cramer et al., Arzeneim-2-
005918
Forsch, 26:1076-1078,1976; Wright et al., Clin. Endocrinol., 24:375-382, 1986; Paccotti et al., Chronobiologica,
15:279-288, 1988; Valcavi et al., Clin. Endocrinol., 39:139-199, 1993). Мелатонин может использоваться для
уменьшения разрастания предстательной железы (см. указанные выше Патенты US и ЕР Зисапеля (Zisapel)). Пероральное введение мелатонина кастрированным молодым крысам ингибировало андрогензависимый рост брюшной простаты и семенных везикул (Gilad et al., J. of Urol. 159:1069-73, 1998). Недавно авторы продемонстрировали высокую аффинность рецепторов мелатонина в эпителиальных клетках доброкачественной опухоли простаты человека, что может воздействовать на клеточный рост и жизнеспособность (Endocrinology, 137:1412-17, 1996).
Кроме шишковидного тела мелатонин синтезируется также в глазах. Недавно было показано, что
мелатонин участвует в контроле внутриглазного давления и может использоваться для лечения глаукомы
(Samples et al., Curr. Eye Res., 7:649-653, 1988; Rhode et al., Ophthalmic. Res., 25:10-15, 1993).
Рецепторы мелатонина экспрессируются также в почках, и было показано, что мелатонин оказывает
влияние на вазопрессин и мочевыделение (Song et al., FASEB J 11:93-100,1997, Yasin et al., Brain Res.
Bull., 39:1-5,1997).
Очевидно, что существует широкий диапазон терапевтических применений мелатонина. Соответственно, существует необходимость идентификации новых соединений, которые взаимодействуют с мелатонинэргической системой, в качестве возможных терапевтических агентов. Эти соединения могут обладать более длительным периодом воздействия, избирательной локализацией и большей эффективностью
по сравнению с мелатонином.
Новые соединения, касающиеся мелатонина, но по фармакологическим или фармакокинетическим
профилям отличные от мелатонина, возможно, окажутся новыми важными лекарственными средствами.
Например, см. Патент US 5403851, который раскрывает применение замещенных триптаминов, фенилалкиламинов и родственных соединений для лечения множества симптомов, требующих фармацевтического вмешательства, включая расстройства сна, эндокринные болезни, иммуно-системные болезни и т.д.
Патентная Заявка РСТ WO 87/00432 описывает композиции для лечения или профилактики псориаза,
которые содержат мелатонин или родственные соединения. Европейская Патентная Заявка 0330625А2
раскрывает получение мелатонина и его аналогов для различных терапевтических целей, включая введение мелатонина в сочетании с азидотимидином для лечения СПИД. Аналоги мелатонина на основе биоизостерических свойств нафталинового кольца и индольного кольца, были раскрыты в J. Med. Chem.,
1992. 35:1484-1485, ЕР 662471 А2 950712 Депре (Depreux) с соавт., WO 9529173 А1 951102 Ладлоу
(Ladlow) с соавт., Патенты US 5151446 Хорна (Ноrn) с соавт., 5194614 Адрье (Adrieux) с соавт. и 5276051
Лезье (Lesieur) с соавт.
Ингибирование мелатонином высвобождения дофамина из определенных участков мозга было показано in vitro у крыс (Zisapel et al., Brain Res., 1982, 246(1):161-3; Brain Res., 1982, 246(1): 161-3), овец и
хомяков (Malpaux et al., Reprod. Nutr. Dev. 1999;39(3):355-66). Кроме того, мелатонин был способен
уменьшать возбудимость нейронов из черного вещества полосатого тела (Escames et al., Neuroreport,
1996, 7(2):597-600) и увеличивать аффинность D2 дофаминовых рецепторов в полосатом теле крыс
(Hamdi, Life Sci., 1998, 63:2115-20). Таким образом, мелатонин можно использовать для лечения заболеваний, связанных с повышенным высвобождением дофамина или дофаминовой гиперчувствительностью, например, для подавления дискинезии и/или кокаиновой наркомании.
Антагонисты мелатонина также могут использоваться для терапевтических целей. Уменьшение дофаминэргической активности в черном веществе полосатого тела (nigrostriatal), которая вызывается мелатонином, могло бы привести к усилению побочных эффектов при паркинсонизме и акатизии, что в
свою очередь подтверждается исследованиями болезни Паркинсона на животных моделях (Willis and
Armstrong, Brain Res. Brain Res. Rev., 1998, 27(3): 177-242). Таким образом, антагонисты мелатонина могут использоваться для предотвращения воздействия эндогенного мелатонина на пациентов с болезнью
Паркинсона. Антагонисты мелатонина могут использоваться также для предупреждения усталости и
сонливости у людей, работающих в ночную смену, которые обусловлены ночным повышением эндогенного мелатонина; у слепых людей, суточный ритм которых не совпадает с окружающим свето-темновым
циклом, у пациентов с синдромом позднего засыпания, у которых мелатонин секретируется в течение
дневного времени, и у пациентов с синдромом смены часовых поясов.
Существуют данные, которые позволяют предположить, что агонисты и антагонисты мелатонина
могли бы применяться для лечения множества нарушений и болезней. Настоящее изобретение направлено на терапевтически более избирательные соединения, по сравнению с мелатонином.
Соединения N-(2,4-динитрофенил)-5-метокситриптамин ("ML-23") и N-(2,4-динитрофенил)-2-йод5-метокситриптамин, как известно, проявляют антагонистическое воздействие на мелатонин (Zisapel et
at., 1989, Патент US 4880826, Laudon et al., J. Endocrinol., 1988, 116:43-53, Oaknin-Bendahan et al., Neuroreport, 1995, 27, 6:785-8, Nordio et al., Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1989, 191:321-5, Zisapel et al., Eur. J.
Pharmacol., 1987:136, 259-60). Для лучшего понимания настоящего изобретения следует знать, что ранее
никто не предполагал, что другие N-(2,4-динитрофенил)-5-метокситриптамины или их эфирные или тиоэфирные аналоги, могут применяться для взаимодействия с мелатонинэргической системой.
-3-
005918
Предполагается, что полное содержание указанных выше патентов, патентных заявок и литературных статей включено здесь посредством ссылки.
Краткое изложение изобретения
В одном аспекте настоящее изобретение представляет соединения формулы (I)
являющиеся основными, где
каждый из R1, R2 и R3, независимо, представляет собой водород, галоген, C1-4-алкил, C1-4-алкокси,
NR'R", N(R')C(:O)R°, нитрогруппу, арил, арил-С1-4-алкил или арил-C1-4-алкокси, Ro представляет собой
С1-4-алкил или арил, и каждый из R' и R" являются, независимо, Н или C1-4-алкилом, или R' = R" =
ClCH2CH2, или NR'R" представляет собой насыщенное 3-8-членное гетероциклическое кольцо; m означает 0-4; t означает 0-3 и Х означает NH, N-C1-4-алкил, О или S; при условии, что Х не является NH, если
(R1)m является 5-метокси, R2 является Н или l и t = 0, и их соли присоединения кислот.
Термин "арил" означает моновалентный остаток незамещенного или замещенного ароматического
ядра, предпочтительней, бензольного кольца, но он может быть также, например, другим моновалентным карбоциклическим арильным остатком, таким как нафтил, или моновалентным остатком гетероциклического ароматического кольца, таким как фуран, тиофен, пиррол, пиридин, бензофуран или бензотиофен. В случае замещенного арила, заместителем могут быть, например, одна или более гидроксигрупп, С1-4-алкокси, галоген, цианогруппа, нитрогруппа, карбоновая кислота, ее эфир или амид, сульфоновая кислота, ее эфир или амид, сульфон, сульфоксид или галогенированный C1-4-алкил, такой как хлорили дихлорметил, или СF3, аминогруппа, моно(С1-4-алкил)аминогруппа, ди(С1-4-алкил)аминогруппа или
C1-4-алкил.
В другом аспекте изобретение представляет фармацевтическую композицию, которая содержит по
меньшей мере один фармацевтически приемлемый растворитель, консервант, солюбилизатор, эмульгатор, адъювант, и/или носитель, и по меньшей мере одно соединение изобретения, определенное выше,
или его фармацевтически приемлемую соль.
Еще в одном аспекте, изобретение представляет применение по меньшей мере одного соединения
изобретения, определенного выше, и его фармацевтически приемлемых солей, для получения лекарственного средства для взаимодействия с мелатонинэргической системой, например, лекарственного средства, применяемого для репродукции (селекции) животных, или для профилактики или лечения болезней
предстательной железы, импотенции, сердечно-сосудистых болезней, болезней центральной нервной
системы и психических расстройств, нарушений биологического ритма, эндокринных болезней, неопластических состояний, болезней иммунной системы, нарушений, связанных со старением, офтальмологических болезней, сильной приступообразной головной боли с периодическими рецидивами и мигрени.
Еще в одном аспекте, изобретение представляет способ лечения медицинского состояния у млекопитающего (человека или животного), которое поддается лечению лекарственным средством, взаимодействующим с мелатонинэргической системой, включающий лечение этого состояния с помощью эффективного количества по меньшей мере одного соединения из группы соединений, охарактеризованных
в п.1, или его фармацевтически приемлемой соли.
Подробное описание изобретения
Без ущерба для общего определения соединений данного изобретения, предпочтительными подгруппами соединений, имеющих указанную выше формулу, являются следующие соединения:
соединения, в которых m = 0, t = 1, R3 означает N(R')C(:O)R° в 3-положении неконденсированного
бензольного кольца и Х означает NH, NН-С1-4-алкил или О;
соединения, в которых m = 1, t = 1, R1 означает метил или метоксигруппу в 5-положении индольного кольца, R3 означает N(R')C(:O)R° в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH, NH-C1-4-алкил или О;
соединения, в которых m = 0, t = 1, R3 означает NH2 в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH, NH-C1-4-алкил или О;
соединения, в которых m = 1, t = 1, R1 означает метил или метоксигруппу в 5-положении индольного кольца, R3 означает NH2 в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH,
NH-C1-4-алкил или О;
соединения, в которых m = 0 или 1, t = 0, и если m = 1, R1 является метилом в 5-положении индольного кольца.
Фармацевтическая композиция согласно данному изобретению, отличающаяся по меньшей мере
одним из следующих признаков:
-4-
005918
(i) она представлена в форме, пригодной для перорального, ректального, парентерального, трансбуккального, внутрилегочного (например, путем ингаляции) или трансдермального введения;
(ii) она представлена в виде унифицированной лекарственной формы, причем каждая унифицированная доза содержит такое количество указанного выше по меньшей мере одного соединения, которое
находится в диапазоне от 0,0025 до 1000 мг,
(iii) она представляет собой композицию с контролируемым высвобождением, где указанное выше
по меньшей мере одно соединение высвобождается с предопределенной контролируемой скоростью.
В фармацевтических композициях данного изобретения используются такие фармацевтически приемлемые растворители, консерванты, солюбилизаторы, эмульгаторы, адъюванты и носители, которые
обычно используются в фармацевтических и ветеринарных композициях. Представленные фармацевтические композиции предназначены для введения людям и/или животным.
Для перорального введения фармацевтические композиции могут использоваться, например, в виде
таблеток, капсул, эмульсий, растворов, сиропов или суспензий. Для парентерального введения, композиции могут использоваться в виде ампул или же в виде суспензий, растворов или эмульсий в водных или
масляных носителях. При необходимости суспендирования, стабилизации и/или диспергирования агентов будет, конечно, учитываться растворимость или другие характеристики активных соединений, в носителях, которые используются в частных реализациях. Эти композиции могут дополнительно содержать, например, физиологически совместимые консерванты и антиоксиданты.
Фармацевтические композиции могут использоваться в виде суппозиториев со стандартной для них
основой, такой как масло какао или другие глицериды. Альтернативно, эти композиции могут быть доступны в форме депо, которое будет медленно высвобождать эту активную композицию в организме в
течение предопределенного периода времени.
Кроме того, соединения настоящего изобретения могут вводиться с помощью трансбуккальных,
внутрилегочных или транодермальных систем доставки.
Авторы дополнительно уточняют или определяют состояния, которые, как предполагается в настоящее время, могут поддаваться лечению путем введения соединений данного изобретения. Такие состояния включают доброкачественный и злокачественный рост простаты и импотенцию; сердечнососудистые заболевания, включая гипертензию, предупреждение свертывания крови и защиту от приступов ишемии; болезни центральной нервной системы и психические расстройства, например, нарушения сна, эпилепсию и другие судорожные синдромы, страх, психические болезни, нейропатию, нейродегенеративные болезни, например, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и болезнь Хантингтона,
лихорадочное состояние и анальгезию; нарушения биологического ритма, например, синдром смены часовых поясов, суточные нарушения сна, такие как синдром позднего засыпания, проблемы, связанные
ночной работой по сменному графику, и сезонные расстройства, например, сезонные эмоциональные
расстройства (SAD); эндокринные нарушения, например, контрацепцию и бесплодие, преждевременное
созревание, предменструальный синдром, гиперпролактинемию и дефицит гормона роста; неопластические состояния, включая, например, рак и другие, связанные с повышенной пролиферацией клеток, болезни; болезни иммунной системы, включая СПИД; состояния, связанные со старением; офтальмологические болезни; сильную приступообразную головную боль с периодическими рецидивами, мигрень;
позднюю дискинезию, стабилизацию диабета и нарушения, связанные с увеличением веса (лептинопосредованное ожирение), а также селекцию (репродукцию) животных, например, регуляцию плодовитости, созревания, цвета меха.
Более того, настоящее изобретение касается композиций для защиты кожи и косметических целей
для местного применения, таких как (большей частью в качестве иллюстративных примеров) мази, кремы, бальзамы и лосьоны, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (I), обладающее антиоксидантной активностью или радикал-улавливающей активностью, и по меньшей мере один растворитель, носитель и адъювант.
Изобретение будет проиллюстрировано следующими примерами.
Пример 1. N-(2,4-Динитрофенил)триптамин(МL-25)
1 ммоль триптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью 2,5 моль
бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитрофторбензола в 200 мл этанола и
смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают, промывают
и высушивают. Продукт получают с 90% выходом, и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,84), которое хорошо отделяется от исходных веществ в тех
же условиях.
-5-
005918
Пример 2. N-(2,4-Динитрофенил)-5-метилтриптамин(МL-28)
1 ммоль 5-метилтриптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью
2,5 моль бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитрофторбензола в 200 мл этанола и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают, промывают и высушивают. Продукт получают с 85% выходом, и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины с
силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,8), которое хорошо отделяется от исходных веществ
в тех же условиях.
Пример 3. 2,4-Динитро-5-триптиламиноацетанилид (триптиламиноацетанилид) (ML-26)
1 ммоль триптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью 2,5 моль
бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитро-5-фторацетанилида в 200 мл этанола и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают, промывают и высушивают. Продукт получают с 80% выходом, и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,76), которое хорошо отделяется от исходных веществ
в тех же условиях.
Пример 4. 2,4-Динитро-5-(5'-метилтриптил)аминоацетанилид(МL-29)
1 ммоль 5-метилтриптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью
2,5 моль бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитро-5-фторацетанилида в 200
мл этанола, и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают, промывают и высушивают. Продукт получают с 95% выходом и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,7), которое хорошо отделяется от исходных
веществ в тех же условиях.
Пример 5. 2,4-Динитро-5-(5'-метокситриптил)аминоацетанилид(МL-30)
1 ммоль 5-метокситриптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью 2,5 моль бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитро-5-фторацетанилида в
200 мл этанола, и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают, промывают и высушивают. Продукт получают с 85% выходом и с помощью ТСХ (хлороформ,
пластины с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,57), которое хорошо отделяется от исходных веществ в тех же условиях.
-6-
005918
Пример 6. N-(2,4-Динитро-5-аминофенил)триптамин(МL-27)
1 ммоль триптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью 2,5 моль
бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитро-5-фторанилина в 200 мл этанола и
смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают, промывают
и высушивают. Продукт получают с 90% выходом, и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,57), которое хорошо отделяется от исходных веществ в тех
же условиях.
Пример 7. N-(2,4-Динитро-5-аминофенил)-5'-метилтриптамин (ML-31)
1 моль 5-метилтриптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью
2,5 моль бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитро-5-фторанилина в 200 мл
этанола и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают,
промывают и высушивают. Продукт получают с 90% выходом и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины
с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,59), которое хорошо отделяется от исходных веществ в тех же условиях.
Пример 8. N-(2,4-Динитро-5-аминофенил)-5'-метокситриптамин(МL-32)
1 ммоль 5-метокситриптамина растворяли в 100 мл воды и рН раствора подводили до 8,3 с помощью 2,5 моль бикарбоната натрия (NаНСО3). Добавляли 1,5% раствор 2,4-динитро-5-фторанилина в 200
мл этанола и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Целевой продукт осаждают,
промывают и высушивают. Продукт получают с 95% выходом и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины
с силикагелем) определяют одно желтое пятно (Rf = 0,57), которое хорошо отделяется от исходных веществ в тех же условиях.
Пример 9. O-2,4-Динитрофенил-5'-метокситриптофол(МL-33)
К раствору 5-метокситриптофола 1 (700 мг, 3,7 ммоль) в 3 мл дихлорметана (ДХМ) добавляли по
каплям раствор 2,4-динитро-5-фторбензола (205 мг, 4,0 ммоль) в ДХМ и смесь перемешивали в атмосфере аргона. Медленно добавляли триэтиламин (410 мг, 4,1 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи,
после чего растворитель выпаривали и с помощью ТСХ (хлороформ, пластины с силикагелем) определяли одно желтое пятно (Rf = 0,80), которое хорошо отделяется от исходных веществ в тех же условиях.
Грубый продукт растворяли в хлороформе (200 мл) и промывали с помощью 0,1 N HCl (2х200 мл), 1N
NaOH (2х200 мл) и воды (1х200 мл). Органический слой высушивали над MgSO4 и концентрировали в
вакууме. Флэш-хроматография на силикагеле, с хлороформом в качестве элюента, давала чистый 5метокситриптофил-2,4-динитрофениловый эфир (890 мг, 2,5 ммоль, выход 67%) в виде ярко-желтого
порошка.
-7-
005918
Биологическое тестирование соединений изобретения
Эксперимент 1
Таблица 1: Влияние ML соединений изобретения на глутамат-индуцированную окислительную токсичность в клеточной линии из гиппокампа (НТ22).
Изменения в потенциале митохондриальной мембраны оценивали с помощью флуоресцентной пробы 5,5',6,6'-тетрахлор-1,1',3,3'-тетраэтилбензимидазолкарбоцианинйодида (JC-1) согласно Nuydens с соавт. (L of Neuroscience, 92, 1999, 153-9). Иммортализованные клетки из гиппокампа мыши (НТ-22) поддерживали в модифицированной Дульбекко минимальной среде (DMEM) с добавлением 10% фетальной
бычьей сыворотки и пересевали путем трипсинизации. Клетки (3000 на 96-луночную плату) культивировали в течение 24 ч в DMEM, содержащем 5 mM глугамат, и обрабатывали 10-7 М ML соединения. Клетки затем нагружали JC-1 путем замены культуральной среды на фосфатно-солевой буфер (PBS), содержащий 1г/л глюкозы и 10 мкМ JC-1, в течение 10 мин при 37°С и промывали один раз. Флуоресценцию
затем измеряли в счетчике для плат при длинах волн возбуждения/излучения 480/530нм и 530/590нм.
Отношение интенсивностей флуоресценции при двух длинах волн 530/590:480/530 определяет потенциал
митохондриапьной мембраны. Уменьшение этого отношения указывает на деполяризацию митохондриальной мембраны благодаря повреждению, индуцированному с помощью бескислородной или других
патологических ситуаций, приводящих к апоптозу клеток. Эти результаты (табл. 1) демонстрируют пониженное отношение флуоресценции благодаря глутамату, что указывает на нарушение потенциала митохондриальной мембраны в клетках гиппокампа. Мелатонин, ML-23 и четыре соединения изобретения
(ML-25, ML-27, ML-26, ML-30) в значительной степени защищали против глутамат-опосредованного
повреждения в митохондриях, так что отношение флуоресценции оставалось высоким, по сравнению с
клетками, обработанными глутаматом. Среди этих соединений, три соединения (ML-23, ML-25, ML-26)
не уменьшали мембранный потенциал контрольных клеток, в то время как другие соединения (ML-27 и
ML-30) уменьшали его. Другие соединения в этой группе, представленные в табл. 1 (ML-29, ML-32, ML31), уменьшали потенциал митохондриальной мембраны в контрольных клетках, не обеспечивая защиту
против глутамата, а одно соединение (ML-28) увеличивало потенциал в контрольных клетках, но не защищало против глутамат-индуцированного повреждения.
Этот эксперимент демонстрирует прямое ингибирующее действие соединений изобретения на потенциал митохондриальной мембраны, который сходен с эффектом мелатонина.
Таблица 1
Эксперимент 2. Связывание 125I-мелaтoнинa в мембранах мозга хомяка
Два целых мозга хомяка гомогенизировали с помощью тефлон-стеклянного гомогенизатора в 10
объемах/г ткани ледяного Tris-HCl буфера (50 ммоль/л Tris, 5 ммоль/л CaCl2, pH=7,4) и центрифугировали при 10000g в течение 10 мин. Супернатант центрифугировали при 100000g в течение 2 ч для получения грубого синаптосомального осадка (Р2).
Аликвоты суспендированного осадка Р2 (20 мкл) инкубировали при 37°С в присутствии 125Iмелатонина (250 пкМ) в течение 60 мин в Tris-HCl буфере в присутствии или в отсутствие 1нМ-100мкМ
исследуемых соединений (ML соединения и мелатонин). Реакцию связывания прекращали путем добавления 4 мл ледяного Tris-HCl буфера. Мембраны затем собирали с помощью вакуумной фильтрации,
используя GF/C стеклянно-волокнистные фильтры, и промывали 3х4 мл ледяного буфера. Фильтры, содержащие связанный 125I-мелатонин, анализировали в γ-счетчике для определения количества радиоактивности. Результаты (табл. 2) демонстрируют конкуренцию ML соединений за специфическое связывание 125I-мелатонина с мембранной фракцией из мозга крысы. ML-29, ML-30 и ML-31 (10-6M) ингибировали (≥20%) специфическое 125I-связывание мелатонина. ML-27, ML-28 и ML-23 уменьшали специфическое 125I-связывание мелатонина в меньшей степени (∼13%). Мелатонин (10-6М) также уменьшал специфическое связывание 125I-мелатонина в той же степени (20%).
-8-
005918
Таблица 2
Несмотря на то, что данное изобретение описано в отношении определенных реализаций, специалистам в данной области понятно, что могут существовать и другие модификации и варианты. Поэтому
данное изобретение не следует ограничивать только раскрытыми реализациями, а следует воспринимать
в соответствии с духом и объемом формулы изобретения.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I)
являющееся основным, где
каждый из R1, R2 и R3 независимо представляет собой водород, галоген, С1-4-алкил, С1-4-алкокси,
NR'R", N(R')C(:O)R°, нитрогруппу, арил, арил-С1-4-алкил или арил-С1-4-алкокси, R° представляет собой
С1-4-алкил или арил, и каждый из R' и R" являются, независимо, Н или C1-4-алкилом, или R' = R" =
ClCH2CH2, или NR'R" представляет собой насыщенное 3-8-членное гетероциклическое кольцо; m означает 0-4; t означает 0-3 и Х означает NH, N-C1-4-алкил, О или S, при условии, что Х не является NH, если
(R1)m, является 5-метокси, R2 является Н или l и t = 0, и Х не является S, если R2 является Н и m=t=0, и
его соли присоединения кислот.
2. Соединение по п.1, где m = 0, t = 1, R3 означает N(R')C(:O)R° в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH, NH-C1-4-алкил или О.
3. Соединение по п.1, где m = 1, t = 1, R1 означает метил или метоксигруппу в 5-положении индольного кольца, R3 означает N(R')C(:O)R° в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH, NH-C1-4-алкил или О.
4. Соединение по п.1, где m = 0, t = 1, R3 означает NH2 в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH, NH-C1-4-алкил или О.
5. Соединение по п.1, где m = 1, t = 1, R1 означает метил или метоксигруппу в 5-положении индольного кольца, R3 означает NH2 в 3-положении неконденсированного бензольного кольца и Х означает NH,
NH-C1-4-алкил или О.
6. Соединение по п.1, где m = 0 или 1, t = 0, и если m = 1, то R1 означает метил в 5-положении индольного кольца.
7. Соединение по п.1, которое выбрано из следующих соединений:
N-(2,4-динитрофенил)триптамин
N-(2,4-динитрофенил)-5-метилтриптамин
2,4-динитро-5-триптиламиноацетанилид
2,4-динитро-5-(5'-метилтриптил)аминоацетанилид
2,4-динитро-5-(5'-метокситриптил)аминоацетанилид
N-(2,4-динитро-5-аминофенил)триптамин
N-(2,4-динитро-5-аминофенил)-5'-метилтриптамин
N-(2,4-динитpo-5-aминoфeнил)-5'-мeтoкcитpиптaмин
O-2,4-динитрофенил-5'-метокситриптофол.
8. Фармацевтическая композиция для репродукции (селекции) животных, или профилактики или
лечения болезней предстательной железы, импотенции, сердечно-сосудистых заболеваний, болезней
центральной нервной системы и психических расстройств, нарушений биологического ритма, эндокринных болезней, неопластических состояний, болезней иммунной системы, нарушений, связанных со ста-9-
005918
рением, офтальмологических болезней, сильной приступообразной головной боли с периодическими
рецидивами или мигрени, содержащая по меньшей мере один фармацевтически приемлемый растворитель, консервант, солюбилизатор, эмульгатор, адъювант и/или носитель, и по меньшей мере одно соединение формулы (I)
охарактеризованное в п.1, где каждый из R1, R2 и R3 независимо представляет собой водород, галоген, С1o
o
4-алкил, C1-4-алкокси, NR'R", N(R')C(:O)R , нитрогруппу, арил, арил-С1-4-алкил или арил-С1-4-алкокси, R
представляет собой C1-4-алкил или арил, и каждый из R' и R" является, независимо, Н или С1-4-алкилом,
или R' = R" = СlСН2СН2, или NR'R" представляет собой насыщенное 3-8-членное гетероциклическое
кольцо; m означает 0-4; t означает 0-3 и Х означает NH, N-C1-4-алкил, О или S; при условии, что Х не является NH, если (R1)m является 5-метокси, R2 является Н или l и t = 0, или его фармацевтически приемлемую соль.
9. Фармацевтическая композиция по п.8, отличающаяся по меньшей мере одним из следующих
признаков:
(i) она представлена в форме, пригодной для перорального, ректального, парентерального, трансбуккального, внутрилегочного (например, путем ингаляции) или трансдермального введения;
(ii) она представлена в виде унифицированной лекарственной формы, причем каждая унифицированная доза содержит от 0,0025 до 1000 мг по меньшей мере одного соединения формулы (I);
(iii) она представляет собой композицию с контролируемым высвобождением, где по меньшей мере
одно соединение формулы (I) высвобождается с предопределенной контролируемой скоростью.
10. Композиция для защиты кожи и косметических целей для местного применения, содержащая по
меньшей мере одно соединение формулы (I)
охарактеризованное в п.8, обладающее антиоксидантной активностью или радикал-улавливающей активностью, и по меньшей мере один растворитель, носитель и адъювант.
11. Применение соединения формулы (I)
охарактеризованного в п.8, и его фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного
средства, пригодного для репродукции (селекции) животных, или для профилактики или лечения болезней предстательной железы, импотенции, сердечно-сосудистых заболеваний, болезней центральной
нервной системы и психических расстройств, нарушений биологического ритма, эндокринных болезней,
неопластических состояний, болезней иммунной системы, нарушений, связанных со старением, офтальмологических болезней, сильной приступообразной головной боли с периодическими рецидивами или
мигрени.
12. Способ профилактики или лечения болезней предстательной железы, импотенции, сердечнососудистых заболеваний, болезней центральной нервной системы и психических расстройств, нарушений биологического ритма, эндокринных болезней, неопластических состояний, болезней иммунной системы, нарушений, связанных со старением, офтальмологических болезней, сильной приступообразной
головной боли с периодическими рецидивами и мигрени, или лечения млекопитающих (животного) с
целью репродукции (селекции) животных, включающий лечение млекопитающего эффективным количеством по меньшей мере одного соединения формулы (I)
- 10 -
005918
охарактеризованного в п. 8, или его фармацевтически приемлемой соли.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2/6
- 11 -