Диссертация на соискание ученой степени доктора
advertisement
1 ФГБОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет» На правах рукописи ЧЕТВЕРТАКОВА ЕЛЕНА ВИКТОРОВНА НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ МЕТОДОВ КОНТРОЛЯ ПРИ СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ГЕНОФОНДА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА КРАСНОЯРСКОГО КРАЯ 06.02.07 – Разведение, селекция и генетика сельскохозяйственных животных (сельскохозяйственные науки) Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук Научный консультант д.с.-х.н., профессор Лущенко А.Е. Красноярск – 2015 2 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1 ФОРМИРОВАНИЕ ПОПУЛЯЦИЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ СКРЕЩИВАНИИ ПОРОД РАЗНОГО ЭКОГЕНЕЗА 1.1 Значение гомеостаза в формировании популяций разных экогенезов 1.2 Положительные и негативные аспекты голштинизации 1.3 Роль быков-спермодоноров улучшающих пород в увеличении генетического груза в популяциях крупного рогатого скота 1.4 Оценка адаптивных возможностей животных 1.5 Сперматогенез у быков-производителей и факторы, влияющие на него 1.6 Маркерно-зависимая селекция в животноводстве 4 10 ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Объект исследования 65 64 2.2 История создания популяции «Красноярскагроплем» 2.3 Методы исследования быков-спермодоноров ОАО 10 15 18 31 39 60 64 65 74 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1 Генетические дефекты спермы и андрологические расстройства у 74 быков-спермодоноров 3.2 Распространение спастического пареза среди быков- 85 спермодоноров 3.3. Распространение ВLAD и CVM-мутаций у быков-спермодоноров 91 ОАО «Красноярскагроплем» 3.4 Связь геномных мутаций с воспроизводительной способностью 95 быков-спермодоноров 3.5 Мониторинг распространения аномалий в стаде крупного рогатого 103 скота Красноярского края 3.6 Влияние эндогенных и экзогенных факторов на биотехнологические 110 показатели спермы быков-производителей 3.6.1 Состояние здоровья и особенности метаболизма быков110 спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем» 3.6.1.1 Лейкограмма быков-спермодоноров 110 3.6.1.2 Особенности обменных процессов у быков-спермодоноров 111 3.6.2 Качество спермы быков-производителей разных пород в 116 зависимости от сезона года 3.6.3 Влияние возраста быков на биотехнологические показатели 125 спермы 3.7 Факторы, влияющие на воспроизводительные способности быков- 131 спермодоноров 3 3.7.1 Причины выбраковки нативной спермы в ОАО «Красноярскагроплем» 3.8 Способность спермы переносить глубокое охлаждение 3.8.1 Анализ факторов, влияющих на переживаемость сперматозоидов быков-производителей 3.8.2 Зависимость переживаемости спермы от разной генеалогической принадлежности 131 3.9 Морфологические исследования нативной и криоконсервированной спермы быков-производителей 3.9.1 Исследование морфологии гамет быков в нативном и криоконсервированном семени быков различных линий в зимневесенний период 157 3.9.2 Морфологические исследования нативной и криоконсервированной спермы быков-производителей в зависимости от экогенеза 183 3.9.3 Влияние возраста быков-производителей на долю аномальных форм спермиев в нативном семени 3.10 Маркерная селекция в животноводстве на примере гена каппаказеина 3.10.1 Взаимосвязь биотехнологических показателей спермопродукции и гена каппа-казеина у быков-спермодоноров 3.10.2 Особенности роста и развития телочек красно-пестрой породы с разными генотипами по локусу гена каппа-казеина 3.10.3 Особенности молочной продуктивности коров-первотелок красно-пѐстрой породы с разными генотипами по гену каппа-казеина Экономический ущерб Заключение Выводы Рекомендации производству БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК ПРИЛОЖЕНИЯ 189 142 143 148 158 190 190 192 195 200 202 209 211 212 244 4 ВВЕДЕНИЕ Актуальность скотоводства темы. Современный характеризуется широким период развития мирового распространением импорта высокопродуктивных животных, интенсивным перемещением их из одной экологической зоны в другую, скрещиванием пород разного экогенеза. Сложившаяся ситуация вынуждает по-новому взглянуть и оценить селекционную значимость генетических различий и внутрипопуляционного полиморфизма. Интенсивная миграция животных обеспечивает поток генов, который разрушает сложившиеся адаптивные генетические комплексы в племенных популяциях. Домашний скот особенно подвержен генетической эрозии и возрастанию уровня инбридинга, что отражается, в конечном итоге, на адаптационных способностях животных, продуктивности и здоровье популяции в целом. Оценить адаптационные возможности ввозимых быков можно через получаемую биопродукцию, т. е. спермопродукцию. В современной селекции крупного рогатого скота особое значение имеет еѐ мужская часть, генотипы которой многократно «тиражируются». Благодаря развитию биотехнологий получения и криоконсервации спермопродукции, искусственному осеменению, трансплантации эмбрионов степень влияния быков-спермодоноров на генофонд популяций крупного рогатого скота возрастает многократно (Завертяев Б.П. и др., 2004). ОАО «Красноярскагроплем» широко использует генофонд импортных быков-спермодоноров голштинской породы для повышения продуктивности красно-пестрой и черно-пестрой пород Красноярского края. При этом быкиспермодоноры не оценены на наличие летальных, сублетальных генов и геномных мутаций. При использовании быков-производителей в крупномасштабной селекции за короткий период можно «растиражировать» не только аллели, способствующие повышению продуктивности животных, но и аллели, которые могут вызывать гибель эмбрионов и потомства на ранних 5 стадиях развития, снижать воспроизводительную функцию у потомков быковносителей мутантных генов, а также ухудшать показатели продуктивности у самих быков-производителей, которые выражаются в снижении биотехнологических показателей качества спермопродукции, морфологических нарушениях в строении сперматозоидов и неспособности их к криоконсервации. В этой ситуации большую роль играет не только работа по повышению продуктивности стад, но и по продлению продуктивного долголетия животных, получению генетически здорового потомства. Данному вопросу в племенном животноводстве Красноярского края уделено крайне мало внимания, но который требует неотлагательного и всестороннего изучения и принятия мер. Скрещивание животных, даже родственных пород, но полученных при разных селекционных системах в различающихся экологических условиях, приводит к деконсолидации наследственности и разрушению генных адаптивных комплексов. Поэтому, при проведении масштабных селекционных работ, подобных голштинизации крупного рогатого скота, особое внимание необходимо уделять оценке качества быков-спермодоноров не только по способности влиять на продуктивность потомков, но и по адаптивному потенциалу на устойчивость к разнообразным стрессовым факторам. Выбытие быков-производителей из племенного использования по причинам, имеющим наследственный характер, увеличение доли абортов и мертворожденных телят среди потомков отдельных быков-производителей, появление потомства с аномальными фенотипами и побудило нас к данному исследованию. Эта проблема становится особенно актуальной в условиях использования производителей при крупномасштабной селекции и интенсивном перемещении из одних зон в другие (Жигачѐв А.И., 1983, 1986, 2000, 2001; Дмитриев И.Г., 1986; Емельянов А.В., 1990; Эрнст Л.К., 1990; Романова Е.М., 1994; Делян А.С., 2000; Иванов В.И., 2002; Конев Н.Н., 2003; Рудко А.А., 2003; Четвертакова Е.В., 2004, 2009). 6 Целью работы явилось научно-практическое обоснование методов контроля при совершентвовании генофонда крупного рогатого скота Красноярского края. Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи: 1. установить факторы, влияющие на репродуктивный потенциал быков- спермодоноров; 2. провести мониторинг генетических аномалий в популяции крупного рогатого скота Красноярского края; 3. установить влияние эндогенных и экзогенных факторов на некоторые показатели спермы быков-спермодоноров; 4. выявить стабильность генома и его связь с биотехнологическими показателями спермы быков-производителей; 5. рассмотреть возможность использования гена каппа-казеина в качестве маркера воспроизводительных способностей быков, показателей роста молодняка и молочную продуктивность коров; 6. разработать методику ранней оценки быков на наличие генетического груза и дать соответствующие рекомендации племенным хозяйствам и предприятиям Красноярского края; Научная новизна: Решена важная научно-практическая проблема, имеющая большое народно-хозяйственное значение. Впервые, на основе объѐмных экспериментальных данных, установлены закономерности влияния на репродуктивный потенциал быков-спермодоноров; – выделены родственные группы быков-спермодоноров, устойчиво передающих в поколениях потомков предрасположенность к спастическому парезу, аномалиям репродуктивной системы, BLAD- и СVM-мутаций; – установлена связь геномных мутаций с показателями воспроизводительной способности быков; – осуществлен мониторинг и установлен факт распространения генетических аномалий в племенных стадах; – установлено влияние некоторых фактов (возраст, породная принадлежность, сезон года) на воспроизводительную способность 7 быков и даны соответствующие рекомендации; – выявлены новые факторы, влияющие на выживаемость спермиев при глубоком охлаждении; – исследованы и охарактеризованы морфологические особенности аномалий нативной и криоконсервированной спермы быков ОАО «Красноярскагроплем» в зависимости от экогенеза, породной, линейной принадлежности, возраста и сезона; – установлено влияние гена каппа-казеина на показатели роста, молочную продуктивность первотелок и спермопродукцию быков; – впервые разработана и апробирована методика ранней диагностики быков на генетический груз и рассчитан экономический ущерб от действия генетического груза в популяции крупного рогатого скота Красноярского края. Практическая исследований. значимость Быки работы (n=81) и реализация Красноярского результатов племпредприятия паспортизированы по воспроизводительным способностям. Выявлены быки – носители наследственных аномалий, которые исключены из племенного использования. Экономические убытки хозяйств Красноярского края от распространения летальных генов в маточных стадах составили 165 931 тыс. р. Из-за раннего выбытия быков красно-пѐстрой породы по причине спастического пареза в период с 2005 по 2012 гг. недополучено семени на сумму 7 928 тыс. р. Установлены факторы, влияющие на воспроизводительные функции быков-спермодоноров: наличие геномных мутаций, оптимальный возраст использования, индивидуальные породные особенности, сезон года. Разработана и апробирована методика проверки и оценки быков на генетический груз. Для усовершенствования рекомендовано дополнительно методики ввести на оценки ОАО спермопродукции «Красноярскагроплем» морфологическую оценку спермы; создать базу данных о проявлении в стадах края генетически аномального потомства, установить их происхождение. В условиях племпредприятий ввести индивидуальный режим эксплуатации 8 быков-спермодоноров. Материалы исследований реализованы в трѐх научно-практических рекомендациях по племенной работе в скотоводстве Красноярского края: «Факторы, влияющие на биотехнологические показатели спермы быковпроизводителей», «Андрологические расстройства и генетические аномалии быков-производителей на предприятии ОАО «Красноярскагроплем»», «Методика проверки и оценки быков-спермодоноров на генетический груз» утвержденных: НТС ФГБОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»; службой племенного животноводства Красноярского края; отделом по племенной работе ОАО «Красноярскагроплем»; лабораторией селекционного контроля ОАО «Красноярскагроплем» и используются в учебном процессе института прикладной биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО КрасГАУ. Апробация результатов исследования: на Всероссийской научной конференции студентов и молодых учѐных, посвящѐнной 45-летию КрасГАУ «Агроэкология и устойчивое развитие регионов» (Красноярск, 1998); II Международной научной конференции «Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья животных» (Ставрополь, 2003); VI Международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства» (Горки, 2003); IV Международной конференции молодых учѐных «Актуальные проблемы современной науки» (Самара, 2003); Юбилейной международной научно-практической конференции «Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве» (Барнаул, 2003); Всероссийской научно-практической конференции «Аграрная наука на рубеже веков» (Красноярск, 2003, 2005, 2006); Всероссийской научно-практической конференции «Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития» (Красноярск, 2009); Всероссийской очно-заочной научно-практической и научно-методической конференции с международным 9 участием «Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития» (Красноярск, 2010); Международной научно-практической конференции «Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития» (Красноярск, 2012, 2013, 2014); конференции «Биотехнология: Международной реальность и научно-практической перспективы в сельском хозяйстве» (Саратов, 2013, 2014); 59-й совет по племенной работе с крупным рогатым скотом Сибири (Чита, 2014). Публикации. Основные результаты опубликованы в 42 научных работах, в том числе: монография – 1, научных статей – 38 из них – 13 статей в изданиях, рекомендованных ВАК, 3 – научно-практических рекомендациях. Основные положения, выносимые на защиту: 1. Связь андрологических болезней и расстройств с внедрением генофонда голштинской породы. 2. Зависимость распространения спастического пареза, BLAD- и CVM- мутаций от использования быков-иммигрантов в племенных популяциях крупного рогатого скота. 3. Внутрипородные морфологические особенности сперматозоидов и аномалий спермы у быков-спермодоноров в зависимости от изучаемых факторов. 4. Индивидуальное влияние глубокого охлаждения на сперматозоиды быков-спермодоноров. 5. Использование гена каппа-казеина в качестве маркера воспроизводительных способностей быков и для показателей роста молодняка и молочной продуктивности дочерей. 6. Влияние хромосомной нестабильности на биотехнологические показателями спермы быков-производителей. Объѐм и структура работы. Диссертация общим объемом 243 с. состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов исследования, результатов исследований и их обсуждения, содержит 24 таблицы, 58 рисунков, заключение, 14 выводов, предложения производству, в библиографическом списке – 453 источника в т. ч. 105 иностранных авторов, 25 приложений. 10 ГЛАВА 1 ФОРМИРОВАНИЕ ПОПУЛЯЦИЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ СКРЕЩИВАНИИ ПОРОД РАЗНОГО ЭКОГЕНЕЗА 1.1 Значение гомеостаза в формировании популяций разных экогенезов Направленная селекция животных является одной из форм эволюционного процесса, который протекает преимущественно под влиянием человека. Основной целью искусственного отбора является повышение продуктивности животных и очень часто при этом используют генофонд лучших мировых пород, отличающийся высокими продуктивными качествами. В ходе эволюции биологические системы приобрели способность противостоять изменениям внешней среды, сохраняя динамическое постоянство внутренней среды и целостность организма – гомеостаз (Меттлер Л., 1972; Пианка Э., 1981, С. 85). Племенные животные, сформировавшиеся в определенных экологических условиях, имеют хорошо сбалансированные обменные процессы, идущие в организме. При перемещении их в условия, резко отличающиеся от условий их происхождения, идѐт смена адаптивных реакций. Адаптацию рассматривают как преобразование в организме биологических процессов в направлении присущего им гомеостазиса в изменяющихся условиях обитания (Беляев Д.К., 1981, С. 53). В состоянии стресса животных могут привести изменения таких факторов как кормление, содержание, смена сезона года, плотность размещения, эксплуатация, перемещение в другие климатические зоны (Плященко С.И., 1979, С. 5; 1987, С. 6; 1983, С. 5). Ганс Селье (1982, С. 77) определял стресс как 11 «…неспецифический ответ на любое требование в любое время». Л.Е. Панин (1983, С. 4) и С.И. Плященко (1987, С. 8) определяли стресс как совокупность общих ответных реакций организма на действие различных по своей природе сильных раздражителей. Стресс является результатом определенной степени изнашивания биологической системы и данная «система» может быть целостным организмом (системный стресс) или одной из его частей (местный стресс) (Селье Г., 1960, С. 204). С помощью стресса, который может рассматриваться как комплекс системных, эволюционно и наследственно обусловленных неспецифических реакций, организм уходит от повреждающего эффекта раздражителя до того, как вызванные им изменения станут необратимыми, поскольку эволюционно и наследственно закрепленный комплекс реакций организма носит характер опережающий, это обеспечивает надежность адаптивного поведения биосистемы в изменяющихся условиях (Селье Г., 1960, С. 50; 1972, С. 23, 29). Таким образом, понятия адаптация, общий адаптационный синдром и учение о стрессе Ганса Селье – необходимо рассматривать в совокупности. Ключевые позиции при развитии первой фазы общего адаптационного синдрома занимают две системы – гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая и гипоталамосимпато-адреналовая (Панин Л.Е., 1983, С. 20; Никитченко И.Н., 1988, С. 15; Плященко С.И., 1987, С. 16; 1991, С. 13). При действии возмущающих факторов живой организм стремится перейти в новое устойчивое состояние, изменяя характер сложившихся внутренних связей. Устойчивость нового состояния определяется системным характером изменений (Панин Л.Е., 1983, С. 8). При длительном воздействии стрессового фактора наблюдается снижение отдельных показателей резистентности у животных (Перегудова С., 1992, С. 15). На первой мобилизующей стадии начинается процесс перестройки системы регуляции. В этот период сопротивляемость организма снижается и, 12 если сила воздействия не превышает компенсаторных возможностей организма, развивается вторая стадия – резистентности и адаптации. В этот период сопротивляемость организма повреждающему действию внешнего фактора повышается. При длительном воздействии чрезвычайного раздражителя компенсаторные возможности организма могут иссякнуть, в этом случае осуществляется переход в третью стадию – истощение, изменения и реакции которой носят необратимый характер, и приводят к гибели животного (Селье Г., 1960, С. 60; 1972, С. 36; 1982, С. 35). С точки зрения физиологии, адаптация – процесс поддержания такого функционального состояния гомеостатических систем и организма в целом, которое обеспечивает способность к сохранение воспроизведению его развития, здорового работоспособность, потомства, максимальную продолжительность жизни в неадекватных условиях среды (Селье Г., 1960, С. 85; Слоним А.Д., 1971, С. 5; 1979, С. 79; 1987; Казначеев В.П., 1980; Плященко С.И., 1983, С. 5; 1987, С. 185; Ротов А.В., 1997). Адаптация сельскохозяйственных животных приводит к реализации фенотипа, оптимального по отношению к состоянию среды. Если речь идет о быстрых перестройках развития и функционирования организма, то оптимум достигается по отношению к текущему состоянию окружающей среды. Когда речь идет о медленных перестройках, выражающихся в изменении генофонда популяций, то для их реализации необходим процесс отбора, и оптимальность фенотипа достигается лишь в смысле средней по времени приспособленности. Возникшие в результате адаптации к изменившимся условиям окружающей среды фенотипические изменения, со временем, фиксируются в популяции на уровне генотипа. Смысл замены модификации генетической детерминацией может быть заключен в том, что для поддержания модификаций необходимы дополнительные затраты ресурсов, тогда как генотип реализует данный фенотип без дополнительных затрат, тем самым высвобождая адаптационные ресурсы (Семеновский Ф.Н., 1982). 13 Перемещение животных из одной экологической зоны в другую, скрещивание особей разного экогенеза при фиксированном происхождении позволяет изучить генетическую природу экологической дифференциации и разнообразия адаптивной реакции животных. Кроме механизмов адаптивной пластичности, обеспечивающих приспособленность организма к изменению условий среды во времени, к изменению интенсивности воздействующих факторов, важное значение имеет экологическая валентность при пребывании организма в новых условиях существования длительное время (Раушенбах Ю.О., 1985, С. 7). Генетическая дезинтеграция стабилизированных систем, например, межпородное скрещивание, приводит к ослаблению гомеостаза, диапазон нормы реакции которого предопределен генотипом животного – чем шире норма реакции, тем больше возможностей в поддержании гомеостаза (Раушенбах Ю.О., 1975, С. 11; Бочков Н.П., 1976). Генетические аспекты проблемы гомеостаза имеют большое значение для понимания генетической природы экологической валентности популяции. Экологическая валентность определяет диапазон способности вида существовать в разнообразных условиях среды и обеспечивается популяционными механизмами адаптивной реакции (Бочков Н.П., 1976). С этим связана широта распространения пород животных, видов, популяций. Разные виды домашних животных, в том числе разные породы, отличаются неодинаковой распространѐнностью. Ряд пород крупного рогатого скота (голштинская, чѐрно-пѐстрая, симментальская) распространены широко, разводятся в разных, иногда очень отличающихся по условиям, экологических зонах. Важно иметь представление о генетической структуре популяции, поддерживаемой определенными генетическими механизмами, с сохранением относительного постоянства концентраций конкретных аллелей в генофонде популяций, в ряде поколений, представление о генетическом гомеостазе 14 популяций. Генетический оптимальной гомеостаз генетической обусловливает структуры сохранение популяции, во времени обеспечивающей приспособленность ее к конкретным условиям существования, созданной в процессе экогенеза (Раушенбах Ю.О., 1985, С. 7). Гомеостатическая устойчивость – степень выраженности гомеостаза, мера способности его сохранения при изменении внешних и внутренних факторов, общая интегративная адаптивная система организма. Таким образом, основной стратегией эволюционного преобразования адаптивной реакции у животных является повышение гомеостатической устойчивости и понижение энергетических затрат на адаптацию. С этим связано преобразование адаптивных механизмов, малоэнергоемкими, корреляционных замещение формирование систем, и их более эффективными стабилизация обусловливающих и функциональных интегративный эффект в сохранении гомеостаза (Раушенбах Ю.О., 1985, С. 10; Кушнир А.В., 1998). Межпородное скрещивание, особенно если породы или породные группы формировались длительное время в различных экологических и селекционных условиях, может приводить к генетической дезинтеграции сложившихся адаптивных комплексов, и, следовательно – вызывать ослабление гомеостаза. Возможны нарушения породных генных ассоциаций, стабильно передающихся по наследству, кроме того включаются сложные механизмы взаимодействия генов и их ассоциаций, что в свою очередь, приводит к появлению животных с различными аномалиями (Алтухов Ю.П. и др., 2004). Если у помесей первого поколения это будет ещѐ незаметно благодаря гетерозису, то при дальнейшем скрещивании их с чистопородными животными улучшающей породы и с высококровных помесей между собой процесс разрушения адаптивных комплексов значительно усиливается. 15 1.2 Положительные и негативные аспекты голштинизации Мировые рекорды по молочной продуктивности принадлежат голштинскому скоту, поэтому данная порода хорошо знакома скотоводам всего мира. В качестве улучшающей породы во многих странах мира используют именно генофонд голштинского скота, который ведѐт своѐ начало, в основном от трѐх быков: Иоганна Рэг Эппл Пабста 0346005, родившегося 24.01.1921 года, Висконсина Адмирал Бак Леда 0697789, родившегося 09.08.1934 года и Рефлекшн Соверинга 0198998, родившегося 29.11.1946 года. Потомки этих быков, в зависимости от результатов их оценки по потомству, получали самое широкое распространение в породе или уходили в «матки» (Крыканова Л.Н., 1989; Прохоренко П.Н., 1985; Алифанов В., 1992, С. 26; Логинов Ж.Г., 1996, С. 6). В нашей стране, для повышения молочной продуктивности некоторых отечественных пород, использование голштинской породы начали с 1956 года (Шкилев Н.П., 2004), массово генофонд голштинов начали использовать с середины 70-80-х годов ХХ века (Мухамедгалиев Ф.М., 1986; Рожков Ю.И., 1986; Крыканова Л.Н., 1989; Кот М.М., 1989; Романова Е.М., 1994; Лебедько Е.Я., 2004). В Красноярский край быки-спермодоноры голштинской породы начали поступать с 1979 года. Спермопродукцию быков этой породы использовали для искусственного осеменения в маточных стадах симментальской и чѐрнопѐстрой пород. В результате длительной селекционной работы с помесями в 1998 году была утверждена красно-пѐстрая порода скота молочного направления продуктивности (Голубков А.И., 1999; 2002; 2003, С. 8; 2008). В целом, большинство авторов отмечают положительные результаты скрещивания, в том числе и увеличение удоев у помесных животных на 7-30 % (Жилов В.Н., 1988; Власов В.И., 1991, С. 17; Гетоков О., 1992, С. 16; Мазуров В.Н., 2004; Адушинов Д., 2006; Прожерин В., 2006). Исследователи так же 16 отмечают, что с повышением кровности по голштинской породе до 75 % степень реализации генетического потенциала увеличивается. Кроме того, у помесных животных практически не встречаются коровы с порочной формой вымени, выше интенсивность молокоотдачи, выше содержание белка, минеральных веществ и сухого вещества в молоке, молодняк характеризуется достаточно высоким приростом живой массы и интенсивностью роста, снижаются затраты корма на единицу продукции, у помесей более крепкие конечности и копытный рог (Всяких А.С., 1976; Прудов А.И., 1986; Карасик Ю.М., 1991; Гетоков О.О., 1991, С. 14; Гетоков О., 1992, С. 16; Маржохов А.Т., 1991; Огуй В.Г., 1991, С. 15; Зубарев П., 1992, С. 27; Шилов А.И., 1995, С. 3; Дунин И.М., 1995, С. 8, 1997, С. 22; Игонькин А., 1996, С. 27; Рябова Л.А., 1996, С. 5; Ижболдина С.Н., 1996, С. 10; Полупан Ю., 1997, С. 27; Тарчоков Т., 1997, С. 24; Лумбунов С., 1998, С. 14; Охапкин С.К., 1999; Усова Т.П., 2000; Першилин К.Г., 2002; Сарапкин В.Г., 2003; Адушинов Д., 2003; Голубков А.И., 2003, С. 33; Кофанов А.И., 2006; Кузнецов А.И., 2008; Кадзаева З., 2009; Белоусов А., 2010). Л. Никифорова (2007), проведя исследования в племенных заводах Брянской области, отмечала, что первотѐлки кровностью 3/8 и ¼ по голштинской породе по удою и жирномолочности были более продуктивными, чем 5/8 и ¾ кровности и худшие показатели были у первотѐлок кровностью ½ по голштинам. По данным некоторых авторов и мясные качества голштинизированных потомков не ухудшались, а в ряде случаев наблюдалось улучшение (Нагдалиев Ф.А., 1998; Радченко В.В., 1998). По такому вопросу как адаптивные качества голштинского скота единого мнения нет. Так, П.Н. Прохоренко и Ж.Г. Логинов (1986) на основании данных о сохранении генетической изменчивости и высокой продуктивности этой породой в различных природно-климатических районах мира делают вывод о высоких акклиматизационных и адаптивных способностях голштинов. Это 17 подтверждают и исследования Л. Кибкало и др. (2009), которые изучая адаптацию и акклиматизацию у голштинских коров в центрально-черноземных регионах России, завезѐнных из Голландии и Германии, отмечали успешную акклиматизацию этих животных на данной территории. Однако в «Рекомендациях по использованию голштино-фризского скота для совершенствования молочных стад и пород» (1984) указывается, что «…голштинофризы обладают слабым типом нервной деятельности, в результате чего имеют низкую стрессустойчивость….» (С. 11), что не может быть совместимо с высокими адаптивными способностями. В отдельных публикациях, посвященных интерьерным исследованиям, указывается, что помеси первого поколения по физиологическим, иммунологическим и биохимическим параметрам в некоторых случаях даже имели преимущества по сравнению со сверстниками исходных улучшаемых пород (Бороздина Н.И., 1976; Романенко Н.И., 1991; Усолкина Н.Н., 1991; Иванов В.М., 1995, С. 26). На основании полученных результатов был сделан вывод о благоприятном влиянии голштинской породы на адаптивные свойства улучшаемого скота (Тарчоков Т.Т., 1996). Вместе с тем, в литературных источниках рядом исследователей отмечаются негативные моменты голштинизации. Некоторые исследователи указывают, что у высококровных по голштинской породе помесей снижается жиро-белковомолочность, отмечается ослабление конституции животных, удлинение сервис-периода, ухудшение индекса осеменения, хозяйственного снижение использования, оплодотворяемости, рождение телят укорочение с срока наследственными аномалиями, снижение сохранности потомства, увеличение количества абортов и мѐртворождений (Жигачѐв А.И., 1983; Абилов А.И. и др., 1989; Тарчоков Т.Т., 1995, С. 3; Хаертдинов Р.А., 1998; Алифанов В.В., 1998; Кононенко Н.В., 1998; Лущенко А.Е., 1999; Морозова О.В., 2000; Делян А.С., 2000; Клименок И.И., 2001; Кочнев И.Н., 2003; Абилов С.Ф., 2005; Ерохин А.С., 2008; 18 Лозовская Г.С., 2008; Костомахин Н., 2008; Четвертакова Е.В., 2012 а; 2012 в; 2012 г; 2012 д). В.И. Иванов и В.Н. Каменчук (2002), при исследовании помесного молодняка телят до 2-х месяцев 1/2 и 3/4 кровности по голштинской породе в Вологодской области, отметили высокую заболеваемость иммунодефицитам. К тому же высокая заболеваемость голштинизированных коров гинекологическими заболеваниями, болезнями конечностей сводит работу селекционеров к нулю (Кононенко Н.В., 1998). Поэтому необходимо вести селекцию не только по продуктивности, но и резистентности животных и выбраковывать из племенного использования животных являющихся носителями генетических заболевания и аномалии. 1.3 Роль быков-спермодоноров улучшающих пород в увеличении генетического груза в популяциях крупного рогатого скота В настоящее время генетическая безопасность страны зависит от своевременного выявления и отстранения племенных животных со скрытыми дефектами от воспроизводства. В популяциях животных, в том числе и крупного рогатого скота в процессе длительной эволюции накоплен определѐнный груз вредных мутаций. Величина этого груза меняется под действием искусственного отбора, при использовании в воспроизводстве отдельных производителей – носителей дефектных генов (Эрнст Л.К., 1990, С. 3). Под генетическим грузом популяции понимают число летальных генов присутствующих в данной популяции в гетерозиготном состоянии, вызывающих при переходе в гомозиготное состояние гибель особей или снижение их жизнеспособности (Басовский Н.З., 1975; Бурнашѐва С.А., 1982; Реймерс Н.Ф., 1991, С. 137). Н.П. Дубинин (1948) под генетическим грузом рассматривал не только летальные гены, переходящие в гомозиготное состояние, но и весь спектр мутаций, понижающий адаптивные свойства особей. 19 В зависимости от практикуемого варианта селекционной программы вклад быков в общее генетическое улучшение породы может составлять от 60 до 80 %, а в связи с ограниченным количеством быков-спермодоноров, участвующих в воспроизводстве, (Falconer D.S., 1963; Басовский Н.З., 1983, 1984; Кленовицкий П.М. и др., 2004) мы можем столкнуться с «эффектом родоначальника», когда небольшая группа или одна особь имеющая патологический ген, перемещаясь в другую зону может способствовать возрастанию частоты патологического гена (Бочков Н.П., 1978, С. 164), поэтому мониторинг генетического груза популяций особенно актуален при искусственном осеменении, так как широкое использование сравнительно небольшого числа быков-спермодоноров может способствовать распространению дефектов в большом массиве скота за короткий период времени (Визнер Э., 1970, 1979; Жигачѐв А.И., 1986, 2000; Петухов В.Л., 1989; Якунаускас С., 1988; Абилов А.И., 1989; Емельянов А.В., 1990; Яковлев А., 2004; Четвертакова Е.В., 2009; Эрнст Л.К., 2011). Усиление генетического груза происходит при суммировании многих факторов. У животных он характеризуется их широкой гетерогенностью, позволяющей скрывать в генотипе нормальных особей вредные рецессивные гены (Жебровский Л.С., 1983). Генетический груз можно обнаружить на всех этапах онтогенеза путѐм учѐта: 1) гибели эмбрионов, т. е. пренатального генетического груза; 2) аномалий у новорожденных и соотношение полов; 3) проявление аномалий в последующие периоды онтогенеза (Vogel F., 1979). В популяциях человека и животных возможен рост генетического груза вследствие давления мутагенов среды. В связи с развитием промышленности, сельского хозяйства, появлением новых лекарств, в окружающую среду вводится всѐ больше самых разнообразных химических и физических агентов. 20 Значительная часть из них индуцирует мутации (Ashby J., 1991; Tennant R.W., 1991; Бочков Н.П., 1971, 1989; Гертман А.М., 2004). Кроме того, в некоторых популяциях возможно изменение генетического груза в результате генетического дрейфа и миграции. На практике это реализуется через завоз производителей или их спермы, эмбрионов, яйцеклеток из других экологических зон. Известны носителями случаи, мутаций когда и импортные распространяли производители генетические оказывались аномалии при использовании в воспроизводстве местной популяции скота. У крупного рогатого скота выявлено свыше 400 генетически обусловленных морфологических и функциональных нарушений (Millar P., 2000). Наибольшее число таких отклонений зафиксировано в голштинской породе. Некоторые мутации характерны только для голштинской породы и, вероятно, возникли недавно именно в этой породе (Жигачѐв А.И. и др., 2008). А.И. Жигачѐв (1983, С. 314) отмечает, что экспорт голштинофризов из США и ФРГ способствовал распространению пупочных грыж у немецкого чѐрно-пѐстрого скота. Высокая частота пупочных грыж обнаружена у телят в отдельных хозяйствах Ленинградской области (Дмитриев И.Г., 1986, С. 28). Пупочные грыжи обнаружены у помесей, полученных при скрещивании голштинов с чѐрно-пѐстрым скотом. Средняя частота этой аномалии у чѐрнопѐстрого скота составила 4,7 %. Исследованиями установлено, что причиной распространения этой аномалии являются именно генетические факторы (Эрнст Л.К., 1981, С. 1105; Жигачѐв А.И., 1983, С. 314; Белоус А.Н., 1986; Анисов А.А., 1989). Пупочные грыжи обнаружены с высокой частотой у голштинов и в США, в Индонезии, Канаде и ряде европейских стран (Koch P., 1957; Эрнст Л.К., 1990, С. 86). Л.М. Першина (1995, С. 5) проведя исследования в хозяйствах Московской области отмечала, что от некоторых производителей отход телят составлял до 35,3 %. 21 А. Жигачѐв и Т. Богачева (1998, С. 19) указывали, что в Ленинградской области у телят, полученных от голштинских быков, встречались и такие аномалии как бесшерстность, укорочение нижней челюсти, заращивание анального отверстия, карликовость и т. д. Ввоз животных позволяет изменить частоту некоторых генов, но, в отдельных случаях, способствует накоплению вредных рецессивных генов в популяциях крупного рогатого скота. Одной из причин выбытия животных из системы воспроизводства является спастический парез. А.И. Жигачѐв (1986) отмечал, что на ряде племпредприятий 5 % быков выбывало из племенного использования именно по этой причине. В Латвии выбыло примерно 1 % быков (Емельянов А.В., 1990, С. 55). О.В. Злотникова и Е.В. Четвертакова (2003), проведя исследования среди бычьего поголовья в Красноярском крае, указывали, что по причине спастического пареза из воспроизводства в крае выбыло 7,6 % быковспермодоноров. Впервые данная аномалия была обнаружена в Восточной Фрисландии среди потомков производителя – родоначальника линии Эльзо ІІ 34, рождения 1903 года. По данным исследователей, у него была конечность с открытым углом скакательного сустава, что передалось некоторым из его 139 дочерей и 89 сыновей. Поэтому спастический парез в остфризкой зоне разведения обозначают как «пятка Эльзо» (Визнер Э., 1979, С. 278). При спастическом парезе отмечаются трудности при вставании, хромота одной или обеих задних конечностей, прямая постановка задних конечностей, прогнутость спины, укорочение пястного сухожильного сочленения и судороги бедренной мускулатуры. Характерными симптомами является нескоординированные движения и дрожь. Одна или обе задние конечности вытягиваются на несколько минут в неподвижной спастической позиции, после чего может начаться мышечная дрожь. В стоячем положении животное часто переступает тазовыми конечностями и делает периодические, постепенно 22 учащающиеся, маятникообразные движения пораженной конечностью. При этом обнаруживают напряжение ахиллова сухожилия и спастическое сокращение икроножной мышцы. Быки передвигаются с трудом, походка шаткая. Наблюдается судорожное приподнятие напряженного хвоста. Во время движения животного поражѐнная конечность волочится, затем слегка изгибается, что сильно затрудняет передвижение. Хромота наиболее выражена, если спазм односторонний. При двустороннем поражении животное часто лежит с вытянутыми конечностями, иногда принимает позу «сидячей собаки». В момент подъѐма скакательные суставы сохраняют разогнутое положение. При попытке повернуться или быстро двигаться поражѐнная конечность и прилегающая к ней часть тела коченеют, так что животное не в состоянии балансировать на поражѐнных конечностях и падает на коленные суставы. Неподвижное стягивание приводящих мышц часто препятствует выпрямлению ноги, и поэтому копыто не касается земли. При пальпировании мышцы на ощупь твѐрдые, но болевая чувствительность на больной конечности не нарушена, все суставы полностью подвижны, пяточная кость плотно прилегает к эпифизу большеберцовой кости. Степень тяжести болезни и еѐ симптомы могут различаться. Спастический парез является одной из распространѐнных генетически обусловленных заболеваний крупного рогатого скота, причиняющая хозяйствам значительный экономический ущерб. (Визнер Э., 1979, С. 280; Воронин И.И., 1979, С. 95). Тоническо-клонические конвульсии мышц задних конечностей иногда распространяются на мышцы передних конечностей, паховые, дорсальные и шейные. Симптомы появляются у нетелей и быков-производителей во время первых садок. У коров прекращается лактация и они становятся бесплодными, быки не способны к прыжку, воспроизводительная функция у них снижается. У телят наблюдается задержка роста и развития. Племенные быки, поражѐнные спастическим парезом, обычно используются более короткий период, чем здоровые производители (Визнер Э., 1979, С. 282). Прогноз неблагоприятный, а 23 лечение больных животных является неэффективным (Воронин И.И., 1979, С. 95). Исследуя этиологию возникновения и распространения спастического пареза учѐные выявили, что основная причина болезни – наследственная предрасположенность вследствие неполностью пенетрантного рецессивного фактора (Gentile A., 2002). Согласно современным данным, рецессивный фактор переносится, главным образом, быками. Кроме того, существуют две формы проявления в зависимости от возраста: ранний парез – проявление вскоре после рождения, либо в первые недели или месяцы жизни и поздний парез – проявление на втором-пятом году жизни (Визнер Э., 1979, С. 282; Жигачѐв А.И., 1986, С. 65). В отечественной литературе, фактически, отсутствуют данные по влиянию генофонда голштинов на распространение спастического пареза в популяциях скота. А.И. Жигачѐв (1986, С. 65) при анализе происхождения заболевших быков выявил, что большая часть этих производителей имеет общего предка. И он рекомендует своевременно диагностировать спастический парез у быков, выбраковывать их, а сперму уничтожать. Широкий обмен генетическим материалом между странами способствует и распространению других мутантных генов, в частности гена, обусловливающего BLAD-мутацию. Впервые BLAD-мутация (Bovine Leucocyte Adhesion Deficiency) была описана у крупного рогатого скота в 1983 году под названием «гранулоцитарный синдром», наследуемая по аутосомно- рецессивному типу. Было доказано, что она аналогична дефициту адгезивности лимфоцитов у человека. Обусловлена точечной мутацией в кодирующей части аутосомного гена CD18, контролирующего ключевую роль в миграции нейтрофилов к очагу воспаления. Нуклеотидная последовательность была установлена у крупного рогатого скота в 1992 (Sangalli S., 1994; Mirck M.H., 1995; Taintuteer D., 1995; Fesus L., 1995; Глазко В.И., 1998; Жигачѐв А.И., 2001, С. 10; Исламова С., 2007). 24 Клинические симптомы проявления мутации в гомозиготном состоянии включают в себя предрасположенность к респираторным инфекциям, диареи, низкую естественную резистентность организма к бактериальным инфекциям. Такие животные не поддаются лечению, имеют замедленный рост, тусклую, взъерошенную шерсть, язвы в полости рта, шаткость зубов, поносы. У них отмечают повышенное содержание зрелых нейтрофилов – более 47000 на 1 млн. по сравнению с нормальным уровнем (около 4000 на 1 млн.) (Жигачѐв А., 1998, С. 18; Глазко В.И., 1998, С. 5; Яковлев А., 2004, С. 31). У гетерозигот фенотипических отклонений выявлено не было (Исламова С., 2007, С. 2). В США 15 % племенных быков голштинской породы являются носителями BLAD-мутации, среди коров этот показатель составил 6 % (Biochard D., 1995). Все животные с данной мутацией являются потомками одного производителя К.М. Иванхое Белл, сперму которого широко использовали в 50-60 гг. в Западной Европе и СНГ (Shuster D.E., 1992). Родоначальником данной мутации является Осборндэйл Айвенго 1189870, родившийся в Голландии в 1952 году (Калашникова Л.А. и др., 1999). Н.С. Марзанов и др. (2003) обследуя поголовье быков центральной станции искусственного осеменения (Московская область) подтвердили, что голштинизированные быки-носители BLAD-мутации являлись также потомками данного производителя. Во Франции в гомозиготном состоянии ген проявился у 6 % новорожденных телят голштинской породы. В Украине, общее количество носителей от проанализированного поголовья составляло 3,2 %, в Германии – до 30 % (Глазко В.И., 1998, С. 6), в Аргентине – 2,88 % (Poli M.A., 1996), Японии –16 % (Nagahata H., 1997), Бразилии – 2,8 % (Ribeiro L.A, 2000), Иране – 3,3 % (Norouzy A., 2005), Индии – 1,59 % (Roy A., 2012), Польше – 3 % (Czarnik U., 2004). В связи с быстрым распространением BLAD-мутации и наносимого им экономического ущерба в странах с развитым молочным скотоводством созданы специальные национальные программы по исключению носителей 25 мутаций BLAD (включая выбраковку потомков К.М. Иванхое Белла) из систем воспроизводства и систем МОЕТ (эмбриопересадок) (Исламова С., 2007, С. 2; Калашникова Л.А. 1999, С. 69). Такая селекционная работа позволила селекционерам США и других стан снизить количество гетерозиготных носителей этого наследственного синдрома (Жигачѐв А.И., 2002). В нашей стране такая программа отсутствует, что способствует бесконтрольному распространению этой аномалии в маточных стадах. Современные технологии позволили выявлять и другой летальный ген вызывающий CVM-мутацию. Впервые этот дефект был открыт в Дании в 1999 году (Agerholm J.S., 2001) и в течение следующих лет он был также найден в США (Duncan R.B., 2001), Великобритании (Revell S., 2001), Нидерландах (Wouda W., 2000), Японии (Nagahata H., 2002), Германии (Konersmann Y., 2003), Швеции (Berglund B., 2004), Дании (Thomsen B., 2006), Индии (Mahdipour M., 2010). Complex vertebral malformation (CVM) вызывает уродства телят (Agerholm J.S., 2001) и аборты у коров в период с 56 дней до 260 (Agerholm1 J.S., 2004). Характеризуется деформацией позвонков в шейном, грудном и поясничном отделах, аномалиями грудины, ненормальностью ребер, аномалиями суставов, а также аномалиями сердца (Agerholm J.S., 2004 a). Проведенные геномные исследования показали, что синдром аутосомнорецессивный (Bendixen C., 2002). По данным А. Яковлева (2004), частота распространения этого дефекта в гетерозиготном состоянии может доходить до 20,0 % и выше. В племенных предприятиях России доля быков носителей CVM-мутации составляет в среднем 2,77% (Эрнст Л.К., 2011, С. 28). В Дании носителями данной мутантной аллели являются 31 % животных (Thomsen B., 2006), Польше – 24,8 % (Rusc A., 2007), Японии -32,5 % (Nagahata H., 2002), Швеции – 23 % (Berglund B., 2004), Германии – 13,2 % (Konersmann Y., 2003). Таким образом, данная генетическая аномалия широко распространена в голштинской породе 26 молочного направления продуктивности и при скрещивании с другими породами крупного рогатого скота способствует распространению мутантной аллели среди них. Указанные наследственные аномалии чаще относят к категории моногенных или олигогенных, так как их внешнее проявление вызвано взаимодействием одной или нескольких пар аллельных или неаллельных генов (Эрнст Л.К., 1990, С. 12). Обычно аномалия наследуется по рецессивному типу и для еѐ фенотипического проявления необходимо наличие одинаковых мутантных генов у обоих родителей. Опасность распространения вредных мутаций как раз и состоит в том, что они могут незаметно накапливаться в популяции при интенсивном использовании в воспроизводстве производителей гетерозиготных носителей летальных и полулетальных генов. Такой производитель передаѐт мутантный рецессивный ген половине своего потомства. Если дочери этого производителя будут скрещиваться с другими производителями – носителями такого же мутантного гена, то в соответствии с законом Г. Менделя, каждый четвертый потомок будет иметь его в гомозиготном состоянии и быть нежизнеспособным (Визнер Э., 1979, С. 68). Но существуют естественные механизмы регуляции гомеостаза популяции, закреплѐнные эволюционно. Согласно общепринятой теории Далька (цитируется из Наук В.А., 1987), аномальные гаметы, образующиеся в ходе сперматогенеза, несут те или иные летальные гены или хромосомные аномалии, и неслучайная дегенерация половых клеток является генетически детерминированной. Частота хромосомных и геномных мутаций значительно выше, чем генных. По данным E.W. Brendston и соавторов (1974), в ходе сперматогенеза у быка потеря клеток сперматогенного ряда является видоспецифической и составляет 50 %. Поскольку в гаметах встречаются не только геномные, но и хромосомные мутации, общий уровень мутационного процесса можно считать высоким. По данным Бочкова Н.П. (1978) высокая гибель гамет и зигот на ранних стадиях достигает 50-70 %. 27 Иногда от здоровых животных рождаются потомки с определѐнными типами аномального строения или отсутствия органа и ткани, нарушениями функций организма. Причиной возникновения одних аномалий являются, в основном, генетические факторы, других – сочетание генетических факторов с определѐнными условиями внешней среды, третьих – внешнесредовые или экзогенные факторы. В соответствии с этим аномалии подразделяют на: 1) генетические; 2) наследственно-средовые; 3) экзогенные (Визнер Э., 1979, С. 21). Предполагается, что они контролируются полилокусной системой генов, фенотипическое проявление этих признаков зависит от количества мутантных генов, обусловливающих аномалию. Для этого типа аномалий существует понятие порога действия генов, что соответствует их числу или силе аддитивного эффекта. Если число генов или их сила действия превышает порог, аномалия проявляется. Если эти показатели ниже порога, животное остаѐтся нормальным. Сила аддитивного действия генов, а, соответственно, фенотипическое проявление аномалий, зависит и от условий среды обитания. При еѐ изменении в худшую сторону, вредный эффект генов проявляется, в оптимальных условиях среды порог для проявления аномалий, очевидно, повышается (Наук В.А., 1987). Экологическая нагрузка на сельскохозяйственных животных под влиянием антропогенных факторов постоянно возрастает. Физические, химические и биологические мутагены могут быть причиной мутаций, нестабильности генома, что проявляется в патологии различной формы (Жигачѐв А.И., 2000, С. 2). Кроме того, степень гомозиготности может увеличиться при скрещивании инбредных животных. Крупный рогатый скот является одним из интенсивно цитогенетически исследуемых видов. Это определяется большим значением для практики, цель которой выявление в кариотипе племенных животных числовых или структурных аберраций хромосом, нередко связанных с нарушением 28 воспроизводительной функции, уродствами и болезнями (Куликова С.Г., 1989; Эрнст Л.К., 1990, С. 124). Хромосомная нестабильность в разной степени присуща практически всем особям и служит характеристикой спонтанного мутационного процесса в популяциях (Панов Б.Л., 1997; Куликова С.Г., 1996; Petukhov V.L., 2001). Основными причинами образования хромосомной нестабильности являются нарушения работы ферментов, которые отвечают за структурную целостность генома (Акифьев А.П., 1984), изменением в системах репарации или репликации хромосом (Дубинин Н.П., 1984) и угнетением иммунитета (Скорова С.В., 1982). В нашей стране на протяжении нескольких десятилетий идет скрининг племенных быков на предмет выявления носителей транслокаций. Цитогенетический контроль быков необходим для того, чтобы не допустить распространения аномалий хромосом, снижающих воспроизводительную способность скота (Морозова О.В., 2000 а, С. 17). Установлено, что высокая частота встречаемости цитогенетических аномалий в клетках периферической крови статистически достоверно коррелирует с количеством аномальных сперматозоидов у крупного рогатого скота и, следовательно, может служить показателем вероятности снижения репродуктивной функции животных (Rudes J., 1991). Такая же взаимосвязь была установлена у человека (Migliore L., 2006). Не меньший интерес представляют геномные мутации, в частности, полиплоидия. Она описана у некоторых беспозвоночных, у которых распространен гермафродитизм и партеногенез. У позвоночных в естественных условиях она была обнаружена среди абортных субстратов. У млекопитающих не описано жизнеспособное полиплоидное потомство (Визнер Э., 1979, С. 43). Исключение составляет гибридизации двух аллоплоидия видов. которая Стерильность или является продуктом фертильность гибрида определяется степенью сходства гаплоидных наборов хромосом родительских 29 видов. Однако в крови практически всех животных встречаются полиплоидные лимфоциты. Их концентрация варьирует от 4 до 10,0 %. Повышение нормы в 48 раз говорит либо об уже развившемся процессе лейкоза, либо о факторе предрасположенности к заболеванию (Бурба Л.Г., 1983; Бурба Л.Г., 1988; Глазко Т.Т., 1993, С. 5). В результате нерасхождения хромосом в процессе деления может возникнуть анеуплоидия, то есть изменение числа хромосом не кратное гаплоидному набору. Это может быть трисомия (2n+1) по определенной хромосоме, моносомия (2n-1), нулисомия (2n-2), удвоенная моносомия (2n-1-1), тетрасомия (2n+2), двойная трисомия (2n+1+1), двойная тетрасомия (2n+2+2) (Визнер Э., 1979, С. 44). В кариотипах животных с нарушениями воспроизводительной функции выявлены основные формы аномалий хромосом – полиплоидии, разрывы и пробелы хромосом (Эрнст Л.К., 1990, С. 174). По данным Е.В. Камалдинова и др. (2011), проводивших исследования на якутском и чѐрно-пѐстром скоте Западной Сибири, полиплоидия, анеуплоидия, фрагменты и разрывы хромосом встречались в обоих группах скота, но степень хромосомной нестабильности у якутского скота в целом была выше, чем у чѐрно-пѐстрого. Авторы отмечали, что высокая нестабильность у якутского скота может сохранить служить гомеостаз приспособленческим механизмом, в условиях экстремальных позволяющим без снижения воспроизводительных и продуктивных качеств. Ф. Бакай (2009) и А. Бакай (2012) связывают высокий уровень анеуплоидии у голштинских коров с нарушениями воспроизводительных качеств, а также отмечают, что структурные нарушения хромосом вызывают мертворождения, аборты, удлинение сервис-периода. Ими установлены положительные корреляции между структурными нарушениями хромосом и индексом осеменения, уровнем аббераций и межотельным периодом, уровнем 30 анеуплоидии и индексом осеменения. Следует рассмотреть такие понятия как генокопия и фенокопия. Под генокопией понимают фенотипически сходные аномалии, имеющие разную генотипическую детерминацию (Реймерс Н.Ф., 1991). В тех случаях, когда фенотип генетической аномалии может быть «скопирован» факторами внешней среды у особей с определѐнным генотипом, такие аномалии называются фенокопиями (Реймерс Н.Ф., 1991, С. 453). Образование фенокопий происходит под действием одновременно генетических и средовых факторов. Причину фенокопий связывают с более сильной чувствительностью к тератогенным веществам гетерозиготных носителей рецессивных мутаций, или сочетанным влиянием генов – модификаторов и факторов среды. Отсутствующий у гетерозиготных индивидуумов второй мутантной аллели может восполняться определѐнными факторами внешней среды. Аналогичная ситуация может создаваться в условиях гемизиготного носительства, когда возникает характерный для гомозигот фенотип (Романова Е.М., 1994, С. 179). В генетике наследственных аномалий, дефектор и уродств важное значение имеют такие понятия, как пенетрантность и экспрессивность. При полной пенетрантности доминантный или гомозиготно-рецессивный аллель проявляется у каждой особи, если он присутствует в генотипе. В случае неполной пенетрантности доминантный ген фенотипически не проявляется у определѐнной доли гетерозигот, у гомозиготных рецессивных форм, и при гемизиготности. Неполная пенетрантность может быть связана со значительной вариацией действия генов или же внешних воздействий, например, пенетрантность стерильности колеблется от 0,42 до 0,62 (Петухов В.Л., 1985). Экспрессивность гена – это степень его фенотипического проявления, как мера силы его действия, определяемая по степени развития признака. Экспрессивность гена у обоих полов может быть разной или одинаковой, постоянной или варьирующей (Реймерс Н.Ф., 1991, С. 500). Использование ограниченного количества производителей коммерческих 31 пород, на больших массивах скота, приводит к потере ценных аллелей местных пород (Уханов С.В. и др., 1993). В.И. Глазко и соавторы (2001) считают, что важным является сохранение генофонда локальных пород по целому ряду причин, и, в частности, в связи с генетической эрозией большинства коммерческих, широко распространѐнных пород, с использованием стремительного ограниченного распространения вместе с числа их производителей генофондом и некоторых генетических дефектов. Таким образом, широкое использование импортных производителей иного экогенеза, не имеющих всесторонней генетической оценки, наряду с положительными качествами, такими как высокая продуктивность, могут способствовать распространению генетических аномалий, которые за короткий период времени могут свести на нет многолетнюю работу селекционеров. Чтобы избежать генетической эрозии, надо осуществлять генетический контроль гомеостаза популяции. 1.4 Оценка адаптивных возможностей животных В современных условиях ведения животноводства возрастает влияние антропогенных факторов на организм животных. Поэтому возрастает роль стресса как биологического явления. Механизм развития стресс-синдрома наиболее хорошо изучен в свиноводстве. Синдром стресса имеет большую частоту встречаемости у гибридных животных и наносит значительный экономический ущерб данной отрасли (Никитченко И.Н., 1988; Смирнов В.С., 1991, С. 8). Поэтому в свиноводстве проводится активная селекционная работа по устранению стрессчувствительности. К сожалению, в скотоводстве этому вопросу не уделялось достаточного внимания. Доказано, что стрессчувствительные особи имеют неуравновешенный, неустойчивый метаболизм (Никитченко И.Н., 1988, С. 132). Ганс Селье (1960, С. 73; 1982, С. 34) при исследовании стрессов у 32 животных отмечал гипертрофию надпочечников, уменьшение размеров тимуса, задержку и ослабление сперматогенеза, удлинение половых циклов, снижение устойчивости к болезням, снижение иммунитета, связанного с избыточным образованием кортикоидов, прекращение роста и лактации. В настоящее время факт наследственной обусловленности устойчивости к стрессу подтвержден многими исследователями (Кокорина Э.П., 1986; Чечерова Е.Е., 1992; Заднепрянский И.П., 1995, С. 24). Механизм реализации наследственной предрасположенности к стрессчувствительности стрессустойчивости опосредован спецификой или метаболических процессов организма, которые в свою очередь определяются наследственной программой, т. е. комплексом генов, формирующих генотип (Антомонов Ю.Г., 1987). На сельскохозяйственных животных постоянно воздействует комплекс неблагоприятных факторов, обусловленный особенностями технологии получения продукции. К ним относят передвижения по конвейеру со сменой рациона и микроклимата, перегруппировки животных, транспортировку, вакцинации, ветеринарные неблагоприятные воздействия обработки могут и вызвать др. Такие одновременно комплексные поражения нескольких органов и систем. Влияние стрессов на продуктивность животных зависит от силы воздействия неблагоприятных факторов и уровня резистентности организма. При низкой резистентности организма животного и значительной силе воздействия повреждающих факторов после фазы шока начинается патологический процесс и проявляются первые клинические признаки болезни. Высокая резистентность организма и незначительная сила воздействия повреждающего фактора обусловливает физиологическое течение стресса, но даже в этом случае стресс наносит значительный ущерб животноводству, который складывается из ухудшения здоровья, снижения плодовитости, уменьшения продуктивности, качества продукции, повышения заболеваемости и падеж животных (Никитченко И.Н., 1988, С. 21). В основе повышения резистентности организмов лежат доказательства 33 роли наследственных факторов в детерминации заболеваний, а также возможность изменения генетической структуры сельскохозяйственных популяций. Характер обусловленности таких количественных признаков, как продуктивность и адаптивные способности, не позволяет осуществить прямую оценку генотипа организма (Морозова О.В., 2000 а, С. 25). С бурным развитием физиологии, иммуногенетики, биохимии многими исследователями предпринимаются попытки выявления показателей, достоверно информирующих о потенциале продуктивности и резистентности животных. При отборе животных для дальнейшего разведения возрастает значение возможности более ранней комплексной оценки молодых животных. И таких традиционных оказывается показателей как живая недостаточно для точного масса, конституция, прогнозирования экстерьер потенциала продуктивности (Эйдригевич Е.В., 1966, С. 5, 1978, С. 8; Эрнст Л.К., 1982; Жебровский Л.С., 1987). Поэтому многие ученые обратились к интерьерным факторам. Показательным и удобным объектом интерьерных исследований является кровь как метаболически активная ткань, связывающая между собой все органы и ткани и участвующая в поддержании гомеостаза всего организма. Система крови является наиболее информативной системой, наглядно отражающей состояние организма в конкретный момент времени (Морозова О.В., 2000 а, С. 25). Была показана зависимость содержания общего белка, его фракций, гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, бактерицидной активности крови от генотипа животных (Бороздина Н.И., 1991). Многочисленными наблюдениями были выявлены преимущества помесей F1 над чистопородными животными по продуктивности и резистентности (Абовян Ю.Г., 1991, С. 20; Лисенков А.А., 1991, С. 39; Бурдин Ю.М., 1991; Дунин И.М., 1998). Исходя из этого можно сделать вывод, что повышенная продуктивность и 34 устойчивость этих животных обеспечивается высоким уровнем обмена веществ, который в свою очередь обусловлен взаимодействием генов гетерозиготного генотипа (Морозова О.В., 2000 а, С. 26). Проведѐнные среди голштинизированных животных исследования показали, что с повышением доли кровности по голштинской породе, узкоспециализированной и высокопродуктивной, упомянутые показатели хотя и снижались по сравнению с помесями F1, но достоверно были выше по сравнению с чистопородными животными улучшаемых пород вследствие кумулятивного действия генов (Романенко Н.И., 1991). Н.Н. Усолкин (1991) изучая сезонность изменений факторов крови отмечал снижение общего белка осенью и весной, концентрации эритроцитов – от зимы к осени. С.П. Савченко (1988) отмечал, что при обусловленности изменения уровня биохимических показателей крови на 50-100 % по сезоном года в связи со сменой типа кормления и содержания в динамике лактации была обнаружена их связь с удоем, прямо пропорциональная – с содержанием общих липидов, общего белка, холестерина, обратно пропорциональная – содержанию глюкозы. Н.М. Костомахиным (1991, С. 28) было установлено незначительное изменение гематологических и иммунологических показателей с возрастом и сезоном года. Другие авторы отмечают возрастные особенности показателей крови у крупного рогатого скота (Абовян Ю.Г., 1991, С. 20; Маркушин А.Т., 1991; Лебенгарц Я.З., 1994). Выявлена связь содержания разных классов иммуноглобулинов в крови с уровнем хозяйственно полезных признаков у коров (Костомахин Н.М., 2000; Маренков В.Г., 2000). С.И. Плященко и В.Т. Сидоров (1979, С. 182) доказали наследование естественной резистентности у сельскохозяйственных животных и рекомендовали вести селекцию по данному признаку. Предпринимались попытки селекции животных на повышение 35 неспецифической резистентности, ряд факторов которой в той или иной степени связан с устойчивостью к болезням, например, заболеваемость коров клиническими маститами была выше в 2,6-5,5 раза у животных с низкой интенсивностью фагоцитоза, низкими титрами лизоцима в молоке, сыворотке крови и нормальных антител (Никоноров П.Н., 1981). Г.Г. Скрипченко и Н.Б. Беляева (1989) у заболевших коров эндометритом обнаружили повышение бактерицидной активности, иммуноглобулинов класса G и снижение активности b-лизинов, общего белка и глобулинов. В.Т. Сидоров (1984) отмечал у телят подверженных желудочнокишечным заболеваниям более высокое содержание гемоглобина, лейкоцитов и гематокрита и снижение фагоцитарной активности, титра нормальных антител и пропердина по сравнению со здоровыми животными. Резистентность является физиологической функцией, которая реализуется по генетически заданной программе на всех функциональных уровнях – от внутриклеточных молекулярных процессов до организма в целом и ведущую роль в этом играет иммунная система. Иммунитет организма обеспечивается факторами специфического и неспецифического иммунитета (Никитченко И.Н., 1988, С. 23). Специфический иммунитет образуется на основе неспецифического, факторы защиты которого активны уже с момента рождения. Неспецифическая резистентность хотя и носит генетический характер, но еѐ уровень бывает разным. Степень реализации генетического потенциала зависит от условий кормления и содержания, возраста животного, сезона года. Животные грубой конституции отличаются неприхотливостью, выносливостью и хорошим здоровьем и наоборот, животные нежной конституции менее устойчивы ко многим заболеваниям (Чечерова Е.Е., 1992). Резистентность организма является частью общей племенной ценности сельскохозяйственных животных. Поэтому важной проблемой является выделение гематологических показателей, маркирующих такие хозяйственное 36 значимые признаки, как продуктивность, скорость прироста массы тела и др., тем более что эти признаки косвенно связаны с устойчивостью организма к неблагоприятным факторам среды (Морозова О.В., 2000 а, С. 27). Значительная доля болезней животных и в частности крупного рогатого скота имеет пороговый характер, т. е. они проявляются у животного с предрасположенностью в том случае, когда воздействие внешних факторов неадекватно его широте нормы реакции. У такого животного в относительно обычных условиях возникает реакция напряжения, в последующем развивающаяся в хронический стресс, период латентности которого находится в зависимости от функциональных резервов организма. Далее в «слабом звене» организма проявляются клинические признаки заболевания (Морозова О.В., 2000 а, С. 28). В связи с этим, при селекции на резистентность необходимо учитывать величину адаптивного потенциала, в том числе и уровень стрессоустойчивости организма, так как по мнению некоторых авторов, стрессоустойчивость имеет более высокую наследуемость, чем устойчивость к отдельному заболеванию (Кокорина Э.П., 1986; Никитченко И.Н., 1988, С. 132; Чумаченко В.Е., 1990). Эффективность селекции еще больше может возрасти при использовании отбора по косвенным признакам, которые коррелируют с резистентностью. Животные с более совершенными нервной, эндокринной и иммунной системами лучше и быстрее приспосабливаются к условиям окружающей среды (Чумаченко В.Е., 1990). Поэтому для планомерной и целенаправленной борьбы со стрессами у животных необходимо в комплекс мероприятий включать выявление стрессчувствительности животных и определение стадии течения стресс-реакции с целью прогнозирования ее исхода. Всестороннее изученные показатели дадут информацию о состоянии животного в текущий момент времени, об его индивидуальной реакции на внешние раздражители, о наличии какого-либо патологического изменения в организме, произошедшего от взаимодействия генотипа и стресс-факторов. При 37 воздействии на организм животных каких-либо стресс-факторов происходят изменения в количественном и качественном составе их крови. Однако об этих изменениях достоверно можно судить лишь по комплексной характеристике, включающей в том числе и эти косвенные показатели. Для более точного определения адаптационных способностей животных были разработаны методы оценки стрессустойчивости. Применяемые методы основаны на принципе фиксации показателей после функциональной нагрузки (Морозова О.В., 2000 а, С. 28). Оценку характера течения стресс-реакции и прогнозирования ее исхода проводят комплексно – по клиническому состоянию животного, динамике продуктивности, скорости роста. Одним из наиболее простых клиникодиагностических методов является определение количества эозинофилов в крови и подсчет лейкоцитарной формулы. Это связано с тем, что стрессовое состояние организма сопровождается эозинопенией, лимфопенией и нейтрофилезом (Никитченко И.Н., 1988, С. 23). Интенсификация обмена веществ при стресс-реакциях вызывает изменения в соотношении многих продуктов обмена, поэтому косвенными показателями стрессового состояния животных могут быть содержание общего белка, соотношение альбуминов и глобулинов, количество щелочной фосфотазы, ферментов АЛТ и АСТ, йода, натрия, калия, хлора, лимонной кислоты, холестерина, аминокислот и т. д. (Никитченко И.Н., 1988, С. 23; Колокольцев Ю.К., 1990; Алексеева Л., 2005). Холестерин в животном организме регулирует проницаемость мембран клеток, участвует в образовании желчных кислот, половых гормонов и коры надпочечников, витамина В в коже. Образуется в печени (Хохрин С.Н., 2004, С. 108). По данным В.И. Пасечника (1982) холестерин повышает прочность мембран клеток. По данным И.И. Каткова и Ф.И. Осташко (1984, С. 229) высокое содержание в мембране сперматозоида холестерина способствует устойчивости к электрическому пробою, а также возрастанию устойчивости 38 спермиев к температурному шоку (Darrin-Bennet A., 1974; Белоус А.М., 1987, С. 42). Аминокислоты являются конечным продуктом расщепления протеина кормов в пищеварительном тракте, входят в состав ферментов, гормонов и т. д. (Хохрин С.Н., 2004, С. 74). Лизин принимает участие в синтезе тканевых белков, триптофан – в обновлении белков плазмы крови, метионин – в процессах переаминирования, что приводит к образованию новых соединений: холина, креатина, адреналина, ниацина и др., является основным фактором (наравне с холином) регуляции жирового обмена, особенно в печени (Хохрин С.Н., 2004, С. 79). Аргинин служит катализатором синтеза мочевины, креатина мышц, инсулина, участвует в образовании спермы. Гистидин участвует в энергетическом обмене организма, в синтезе гемоглобина и эритроцитов крови (Хохрин С.Н., 2004, С. 79). Лецитин входит в состав мембран сперматозоидов (Осташко Ф.И., 1995, С. 18). Тирозин играет значительную роль в обмене веществ и для синтеза тирозина и адреналина (Хохрин С.Н., 2004, С. 80). Резервная щелочность крови является одним из важных интерьерных показателей кислотно-щелочного состояния организма от которого зависит нормальная жизнедеятельность животного. Этот показатель дает представление о состоянии карбонатного буфера крови и реактивности организма и имеет диагностическое значение (Солдатов А.П., 1969, С. 20). Кальций и фосфор является составной частью всех клеток организма и обеспечивают их жизнедеятельные функции (Солдатов А.П., 1969, С. 21). Большие перспективы имеет использование в селекционном процессе системы красной крови и выработки критериев адекватной оценки ее реакции на внешние воздействия. Таким образом, кровь является источником информации об адаптивных способностях животных. По состоянию системы красной крови можно судить о состоянии всего 39 организма, в том числе о его реактивности и адаптационных способностях. Кроме того, эта система красной крови может предупредить о появлении тех или иных патологических отклонений в организме. Изучив литературные данные, можно сделать следующие выводы: дезинтегрирующее действие искусственного отбора вызвало необходимость изучения и селекции на повышение адаптивного потенциала крупного рогатого скота; механизм адаптации обеспечивает относительную гомеостатическую устойчивость организма вне зависимости от стресс-факторов и определяется генотипом; доступным и удобным информативным объектом изучения адаптационных способностей сельскохозяйственных животных является кровь; изменение в системе красной крови свидетельствует о реакции организма на воздействие какого-либо внешнего раздражителя (стресс-фактора). Такой же интегральной системой, по состоянию которой можно судить об адаптивных резервах организма быка-спермодонора, является их репродуктивная система. Именно эта система вместе с иммунитетом в первую очередь страдают при развитии у животных длительной стрессовой реакции, так как при этом на преодоление негативного влияния стресс-фактора отвлекается значительное количество энергетических и пластических ресурсов организма. У стрессустойчивых животных эти отклонения обычно недолговременны или незначительны. 1.5 Сперматогенез у быков-производителей и факторы, влияющие на него Самый лучший по происхождению, экстерьеру и конституции бык представляет племенную ценность только в том случае, если он имеет достаточную половую активность и способность давать семя хорошего 40 качества (Эйснер, 1963, С. 73). Cовременное животноводство характеризуется коренной реконструкцией существующих и созданием новых пород с высоким генетическим потенциалом продуктивности, пригодностью к интенсивным технологиям и устойчивостью к заболеваниям (Четвертакова Е.В., 2009, С. 27). Применение искусственного осеменения, крупномасштабная селекция и биотехнология позволяют за короткий срок значительно изменить породный состав стад целых регионов, интенсивно использовать лучших производителей для создания животных с устойчивыми наследственными задатками по основным продуктивным признакам. В связи с этим необходимо более полно оценивать производителей по признакам жизнеспособности, воспроизводительной способности, устойчивости к заболеваниям, нарушения которых могут быть обусловлены изменениями в наследственных структурах (Дмитриев И.Г., 1986, С. 28; Жигачѐв А.И., 1986; 2000, С. 2; 2001, С. 10). Гаметы быков-производителей – сперматозоиды образуются в семенниках, которые выполняют две функции: генеративную, связанную со сперматогенезом и стероидогенную, связанную с выработкой стероидных гормонов, которая осуществляется клетками Лейдинга, Сертоли, и, возможно, другими элементами сперматогенного эпителия. Сведения о клетках Сертоли хотя и расширились, однако всѐ же ещѐ не до конца выяснен механизм их стимулирующего действия на сперматогенез. Они поставляют питательные вещества и кислород развивающимся спермиям, а также удаляют из них конечные продукты метаболизма. Секретируют жидкость, в которой спермии проходят по канальцам. В разных участках извитого канальца сперматогенные клетки, погружѐнные в протоплазму синцития, представляют собой разные стадии образования спермиев (Ожин Ф.В., 1983; Семаков В.Г., 1985; Райцина С.С., 1985, С. 148; Карт Ф., 1987; Hafez E.S.E., 1993; Тейлор Д., 2005). Развитие мужских гамет состоит из трех больших периодов: 1) развитие первичных половых клеток; 41 2) пресперматогенез; 3) собственно сперматогенез. Процесс сперматогенеза у млекопитающих представляет собой длинную серию цитологических преобразований, совершающихся в клетках сперматогенного эпителия и приводящих к образованию клетки-сперматозоида, способного к автономному существованию и оплодотворению яйцеклетки. Продолжительность сперматогенеза является величиной постоянной для данного вида животных и не зависит от действия эндогенных и экзогенных факторов (Соколовская И.И., 1974; Бурнашѐва С.А., 1982, Райцина С.С., 1985; Завертяев Б.П., 1989; Гладкова А.И., 1995, С. 720). Развитие первичных половых клеток происходит у зародыша млекопитающего вне гонады. В этот период мужские и женские половые клетки морфологически не различаются, за исключением их хромосомных наборов. Эти половые клетки делятся митотически и обладают амебоическим движением, что позволяет им достичь гонады. В течение первого периода развития диплоидные половые клетки делятся путѐм митоза. Сперматогонии образуются у самцов в эмбриональном периоде развития и входят в состав извитых семенных канальцев. С наступлением половой зрелости происходит редукция и число хромосом уменьшается вдвое. На третьем этапе, в ходе которого сперматиды подвергаются цитологическим трансформациям, формируется акросома, происходит конденсация ядра, формирование жгутика и потеря цитоплазматической капли; этими преобразованиями заканчивается образование сперматозоида (Милованов В.К., 1962, 1972; Инге-Вечтомов С.Г., 1989; Михайлов И.Н., 1990; Sadler T.W., 2000; De Felici M., 2009). Процесс развития сперматозоидов происходит непрерывно и повсеместно в извитых канальцах семенника (Соколовская И.И., 1981 б, С. 67). Местом скопления, дозревания и хранения спермиев служит придаток семенника. Внутри канала придатка недостаток кислорода и слабокислая реакция среды, поэтому спермии находятся в состоянии анабиоза и, тем самым, сохраняют 42 свою энергию. Важнейшей особенностью обменных процессов сперматозоидов является то, что они не способны к ассимиляции. Спермии, являясь конечным продуктом эпителия семенников, сами к дальнейшему делению и росту не способны. Продолжительность сперматогенеза быка составляет 62-63 дня (Завертяев Б.П., 1987; Курбатов А.Д., 1988, С. 25). Однако окончательное созревание сперматозоида происходит в половых путях самки (Lee T.L., 2009). Сперма млекопитающих состоит из спермиев, образующихся в семеннике и плазмы, являющейся смесью секретов придаточных желѐз. Сперматозоиды являются главной частью спермы. Важную роль играет плазма спермы, так как она содержит различные химические вещества и соединения, обеспечивающие буферность, изотоничность, осмотическое давление и кислотность (Милованов В.К., 1972, С. 286; Наук В.А., 1991). Семенная плазма помогает сперматозоидам выделиться из каудального участка придатка семенника, где они накоплены в огромных количествах и лишены возможности активно перемещаться, представляет им жидкую среду, где они могут плавать. Она имеет слабощелочную реакцию, что снимает торможение подвижности, вызванное слабокислой средой придатка. Плазма препятствует слипанию гамет, маскирует собственные антигены головки сперматозоида, сохраняет их до поры до времени от контакта с поверхностью слизистой полового пути самки (Шергин Н.П., 1967, С. 67; Соколовская И.И., 1981 а). У быка-производителя спермии составляют 14 % объѐма эякулята, секрет желѐз – до 40 %, секреты куперовых и уретральных желѐз – до 30 %, секрет придатка – 5-10 %, секрет предстательной железы – 5-6 % эякулята (Ожин Ф.В., 1983). Нативная сперма быка должна иметь нейтральную кислотность (7,0) или слабокислую кислотность (6,7-6,9) (Солсбери Г.У., 1966; Bidot F.A., 1975; Белоус А.М., 1986, С. 20). В придатке семенника жидкость имеет кислотность от 5,57 до 6,9. Кислая реакция обусловливает неподвижность или слабую подвижность спермиев в придатке (Ожин Ф.В., 1983). В норме рН семенной 43 жидкости быка колеблется в пределах 6-6,6 и является оптимальным для поддержания жизненных процессов в спермиях (Белоус А.М., 1986, С. 24). Для нормального функционирования сперма должна содержать липиды, хлористые и лимоннокислые соли натрия и калия. В сперме обнаружены кальций, калий, магний, железо, медь. Калий находится в головке и средней части сперматозоида, кальций – во всех частях сперматозоида, марганец в большом количестве – около ядра, железо и медь – в ядре, средней части и хвосте (Коган С.Л., 1969, С. 45; Сердюк С.И., 1977). Сперматозоид состоит из головки, шейки, тела и хвоста. Головка спермия имеет форму пластинки, слегка изогнутой на переднем конце и несколько вогнутой в средней части. Поверхность головки покрыта мембраной, которая продолжается на шейку, тело, хвост спермия (Милованов В.К., 1962, С. 206; Соколовская И.И., 1974; Курбатов А.Д., 1988, С. 26; Антонюк В.С., 1988, С. 18). В сперматогенезе из гранул комплекса Гольджи формируется акросома, которая находится под мембраной и прикрывает на 2/3 головку в передней еѐ части (Райцина С.С., 1985, С. 140). Акросома является специфической для сперматозоидов органеллой представляет собой видоизменѐнную лизосому (Allison A.C., 1970; Соколовская И.И., 1981; Бурнашѐва С.А., 1982). Она содержит белки, сахара, фосфотиды и нуклеиновые кислоты, кроме того содержит набор гидролитических ферментов, необходимых для оплодотворения яйцеклетки и начальных этапов развития эмбрионов: гиалуронидазу, трипсиноподобную протеиназу, щелочную и кислую фосфотазы, β-глюкоуронидазу, β-амилазу (Flechon J.E., 1975). Ферменты осуществляют гидролиз лучистого венца яйцеклетки и способствуют проникновению спермиев через зону Pellucida в яйцеклетку. Акросома в отличие от других структур спермия насыщена водой, что является одной из причин еѐ высокой чувствительности к охлаждению и замораживанию (Осташко Ф.И., 1978; 1995; Габер С.Е., 1983; Курбатов А.Д., 1988, С. 28). Акросома, а также цитологическая мембрана, являются наиболее лабильными 44 структурами спермия, и они в первую очередь повреждаются при неблагоприятных изменениях среды (Соколовская И.И., 1976; Белоус А.М., 1986, С. 17; Антонюк В.С., 1988; Наук В.А., 1991, С. 44). Значительную часть головки спермия занимает ядро. В нѐм находится хроматин, представляющий собой нуклеопротеид, состоящий из ДНК и ядерного белка. В головке спермия содержится большое количество аргинина, он защищает цепь ДНК от повреждений при эякуляции и движении спермиев (Осташко Ф.И., 1978, С. 35). У сперматозоидов быка на головку приходится 51 % общей массы, на шейку и тело – 16 %, на хвост – 33 %. Шейка, тело, хвост сперматозоида представляют части единой моторной системы гаметы и резко отличаются от головки по составу. В основании головки имеется углубление, в котором расположены структуры шейки сперматозоида. Шейка сперматозоида расположена сразу за ядром, эта часть сперматозоида очень чувствительна к внешним воздействиям. В зоне шейки находятся одна или две центриоли. Основу шейки, тела и хвоста составляет осевая нить, состоящая из фибрилл (Паршутин Г.В., 1983). Исходя из того, что головке свойственна функция оплодотворения, а хвосту – движение, допускают, что спермии, потерявшие способность двигаться, могут сохранять оплодотворяющую способность. У спермиев быка подвижность сохраняется в течение 250-500 часов, в зависимости от среды, а оплодотворяющая способность резко снижается уже через 48 часов. Степень подвижности сперматозоидов очень высокая, так у быка она составляет 120 мкм/с, барана – 50 мкм/с, человека – 30-50 мкм/с (Иванов И.Ф., 1969; Данилова Л.В., 1983). Процесс образования сперматозоидов осуществляется в извитых канальцах семенника, процесс созревания сперматозоидов завершается в эпидидимисе (Salisbury G.W., 1977; Гладкова А.И., 1995, С. 716). В нѐм сперматозоиды приобретают оплодотворяющую способность. Процесс 45 транспортировки сопровождается морфологическими и физиологическими изменениями сперматозоидов, и, прежде всего, изменениями формы акросомы, потерей цитоплазматических капель и приобретением способности двигаться вперѐд (Габер Е.С., 1983, С. 67). В эпидидимисе проходит процесс физиологического созревания, в результате чего клетки становятся способны достигать места оплодотворения, проникать в яйцеклетку и вносить в еѐ геном, могущий осуществлять эмбриональное развитие. Способность передвижения сперматозоидов, достигаемая в эпидидимисе, включает в себя: начало флагелляции, биение жгутика и координацию биения жгутика, которые создают направленное движение сперматозоида (Yanagimachi R., 1972; Casillas E.R., 1973; Flechon J.E., 1975; Johnson M.H., 1975; Zaneveld L.J.D., 1975; Гладкова А.И., 1995, С. 716; Sadler T.W., 2000). Часто процесс сперматогенеза нарушается, что приводит к отклонениям в морфологическом строении сперматозоидов (Бурнашѐва С.А., 1982). Поэтому крайне важным является оценка быков-спермодоноров по качеству получаемой спермопродукции, выявление как единичных случаев нарушения сперматогенеза, так и отслеживание определѐнных закономерностей в родословных мужской половины. Состав популяции сперматозоидов имеет специфические индивидуальные особенности и в норме остаѐтся стабильным. Частоты встречаемости классов различных атипичных форм фактически постоянны т. е., очевидно, что это чѐтко наследуемый признак (Данилова Л.В., 1978, С. 123). Термин «полиморфизм сперматозоидов» показывает, что у одного животного встречается не один, а два или более типов сперматозоидов. Один из них нормален и способен к оплодотворению, тогда как атипичные сперматозоиды являются результатом аберраций клеточной дифференцировки (Рузен-Ранге Э., 1980, С. 187; Данилова Л.В., 1978, С. 123). Исследователи подтвердили, что полиморфизм спермиев генетически детерминирован. В процессе сперматогенеза идѐт отсеивание непригодных для размножения гамет (Beatty 46 R.A., 1970). В результате нарушения сперматогенеза на различных стадиях могут появляться аберративные обнаруживается помимо сперматозоиды. типичных У многих аберративные видов или животных атипичные сперматозоиды. В сперматогенезе отмечают 3-4 пика дегенерации на стадии ранних сперматогониев во время мейоза, во время консолидации хроматина иногда на стадии поздних сперматид (Габер Е.С., 1983, С. 98; Данилова Л.В., 1978, С. 122). Максимум дегенерации приходится, главным образом, на сперматогониальную стадию, ранний мейоз, ранние стадии дифференцировки сперматид (Данилова Л.В., 1978, С. 122; Рузен-Ранге Э., 1980, С. 185). Общая потеря клеток во время сперматогенеза от стадии ранних сперматогониев до стадии спермацитов у разных видов количественно и качественно варьируют, точные данные в литературе приводятся редко, по данным Эдгарда Рузен-Ранге (1980, С. 185), у быка потери ранних сперматозоидов составляют 33 %, поздних – 27 %, в первом делении мейоза – 6 %, во втором – 20 %. Гетерогенность сперматозоидов различных классов по длине головки, средней части, особенностям жгутика или акросомы наследственно обусловлено. Кроме гетерогенности и полиморфности сперматозоидов в пределах нормы реакции, заданной генотипом, встречаются генетические аномалии сперматозоидов (Beatty R.A., 1970). Аномалии сперматозоидов ассоциируют с мужским бесплодием и стерильностью в большинстве видов животных и человека. Эти нарушения варьируют от морфологических дефектов, которые легко диагностируются при клинических исследованиях, до нарушений на уровне хромосом и ДНК, которые можно выявить только специальными методами исследования. Морфологические нарушения спермиев могут отрицательно влиять на оплодотворение и исход беременности у самок (Williams W.W., 1925; Saacke R.G., 1972; Wiltbank J.N., 1986; Barth A.D., 1989; Chandler J.E., 1990; Zamboni L., 47 1992; Saacke R.G., 2001). Генетические дефекты сперматозоидов мало изучены. В литературе, как отечественной, так и зарубежной, этому вопросу уделяется незначительное внимание, встречаются отдельные краткие сообщения по данной проблеме. Этому вопросу посвящены работы J. Honcock (1949), F. Schulte, J. Erlich (1954) которые обнаружили на головках спермиев тѐмные компактные утолщения. Быки – носители этой аномалии оказались стерильными. В этот же период времени Дональд и Хэнкок (1953) сумели показать, что эта аномалия наследуется как аутосомный простой рецессивный признак (цитируется по Визнер Э., 1979, С. 361). На основании изучения спермопродукции быков различных пород Blace (1945) полагал наследственный характер таких дефектов, как эксцентрически прикреплѐнные хвосты, узость головки. По данным N. Gaint (1976), частота спермиев с аномальными головками в парах отец-сын составила 0,48, а спермиев с проксимальными цитоплазматическими вздутиями – 0,40 (Визнер Э., 1979, С. 361). В Дании у быков гернзейской и герефордской пород обнаружен дефект отсутствие головок у спермиев. В Англии значительная часть отобранных по происхождению быков не допускается к использованию по причине большого количества спермиев с оторванными головками. Эта аномалия наследуется, так как она проявляется чаще у скота одной породы и в определѐнных родственных группах (Визнер Э., 1979, С. 361). E. Blom (1966) обнаружил ненормальную скрученность хвоста у джерсейского скота, в результате у них наблюдается низкая осеменяющая способность. В результате обследования спермы установлена прямая связь частоты морфологических нарушений у отцов и сыновей (r = 0,94). В сперме одного из быков было обнаружено 9,44 % спермиев с эксцентрическим прикреплением хвоста к головке, у быков была плохая оплодотворяющая способность (Дмитриев И.Г., 1986; Эрнст Л.К., 1990, С. 50). 48 H.H. Koefoed-Johnsen и др. (1980), A.D. Barth и C.L. Waldner (2002) проведя исследования среди быков датских джерсеев описали наследственные дефекты хвоста (разорванные хвосты), гигантские головки, дефекты акросомы, которые наследовались по аутосомно-рецессивному типу. При дезинтеграции сперматозоидов речь идѐт об отделении головок с утолщением средней части. При продвижении через дистальные отделы придатка семенника происходит отделение головок. В средней части находится перемещающаяся капля цитоплазмы. К этой группе дефектов относится также изолированное утолщение средней части. Предполагается, что эти аномалии обусловлены аутосомными простыми рецессивами, ограниченными полом факторами (Визнер Э., 1979, С. 361). Бекер и Уилкокс (1969) (из Визнер Э., 1979, С. 361) делят группу наследственных аномалий сперматозоидов, вызывающих стерильность следующим образом: АНОМАЛИИ СПЕРМАТОЗОИДОВ дефекты деформация хвоста и средней части акросомы образование эксцентрическое петель прикрепление дезинтеграция сперматозоидов хвоста Рисунок 1 – Классификация наследственных аномалий сперматозоидов (по Бекеру и Уилкоксу, 1969) (Визнер Э., 1979, С. 361) 49 К числу известных генетических дефектов спермы относят тѐмные компактные утолщения на головках, которые легко выявляются при микроскопических исследованиях; узкость головки, отсутствие головки, эксцентрично прикреплѐнные концы – эти генетические дефекты относят к первой группе генетических аномалий – дефектов акросом. Вторая группа генетических дефектов – скрученность спермиев; третья – аплазия и гипоплазия производных вольфа протока, она выражается в нарушении сперматогенеза – олигоспермии, аспермии и различных дефектах спермиев. Средняя частота этой аномалии составляет 12,9 %. В последние годы увеличивается число быков с аплазией семенников, так, если в 1960-1964 гг. было зарегистрировано 3,4 % аномальных животных, то в 1965-1974 гг. – 13,2 %, а в 1975-1979 гг. –15,9 % (Эрнст Л.К., 1990, С. 51; Воронин И.И., 1979, С. 84). За последний период времени таких данных в литературе не встречается. Дегенеративные клетки имеются в семенниках большинства самцов и их количество увеличивается с возрастом (р 0,01). У быков с плохим качеством спермы установлено, что 40-80 % сперматозоидов имеют дефект в средней части (неравное распределение митохондрий). Это явление чаще всего сопровождается изгибом хвоста сперматозоидов. И.Г. Дмитриев и А.И. Жигачѐв (1986) полагают, что дефекты средней части сперматозоидов возникают в семеннике. Количество патологических форм сперматозоидов увеличивается в теле и хвостовой части придатка семенника. Классификация форм сперматозоидов в зависимости от их морфологического строения приведена на рисунке 2. Большинство исследователей считают, что морфологически аномальные сперматозоиды не могут оплодотворять яйцеклетку. Однако не исключено, что некоторые морфологически изменѐнные формы способны к оплодотворению, и с этим может быть связана гибель эмбриона на разных стадиях развития (Коган С.Л., 1969, С. 39; Габер Е.С. и др., 1983, С. 129; Shamsuddin M., 1993; Shamsuddin M., 1994). Ряд морфологических изменений спермиев является 50 наследственным признаком аутосомного рецессивного типа наследования. Такие морфологические изменения зафиксированы в международном списке летальных дефектов (Емельянов А.В., 1990, С. 55). Рисунок 2 – Нормальные и патологические формы спермиев 1 – нормальные; 2 – гигантские и карликовые; 3 – с деформацией головки; 4 – с надломом шейки; 5 – отдельные головки (нормальные по форме) и бесхвостые спермии; 6 – с закручиванием хвоста; 7 – с каплей и утолщением; 8 – прочие патологические формы (цитируется по Паршутину Г.В., 1983, С. 145) 51 В связи с этим возникает серьѐзная необходимость обследования быковспермодоноров и их спермы, так как ущерб от недополучения потомков и рождения потомков со сниженной плодовитостью и жизнеспособностью может быть гораздо выше улучшающего эффекта по продуктивности, если производитель – носитель вредных генов. И, в зависимости от частоты заболеваемости и глубины проявления процесса, исключать или ограничивать дальнейшее использование. Особенно строго следует проверять импортных производителей, так как племенные свидетельства не содержат полной характеристики генотипа. Л.С. Жебровский и Г.С. Матвеева (2006) отмечают значительные индивидуальные различия по показателям воспроизводительной способности быков-производителей. На качество спермопродукции оказывает влияние генотип животного и факторы внешней среды. Некоторые авторы отмечают, что чистопородные животные обладают более высоким уровнем общей адаптационной пластичности по сравнению с животными, полученными в результате поглотительного скрещивания (Иванова Е.В., 1998, С. 49). Одним из важных факторов, влияющих на сперматогенез, является сезон года. В.А. Наук (1984) и И.А. Порфирьев (2003) отмечают, что минимальный объѐм эякулята получают в зимний период, более высокий – весной и максимально высокий – летом, в осенние месяцы отмечается снижение по сравнению с летними. В.П. Кононов и О.Н. Дьякевич (1995, С. 22), проведя исследования в условиях Московской области, изучив связи оплодотворяемости по сезоном осеменения коров и сезонам взятия спермы у быков установили, что снижение результативности при осеменении коров было в весенне-летний период при использовании спермы от быков взятой в это же время. Лучшие результаты осеменения были зимой от спермы взятой от быков в этот же период года. 52 В более поздних исследованиях В.П. Кононов и О.Н. Дьякевич (1997) подтверждают, что семя быков зимнего периода взятия обладает более высокой биологической полноценностью, чем взятое летом. Количество взятых эякулятов минимально в апреле-сентябре, максимальное в ноябре-марте. Проведя исследования по влиянию сезона года на показатели спермопродукции А.А. Анисов и С.Н. Костив (1989) отмечали, что активность спермиев быков-спермодоноров была наибольшей в осенне-зимний и наименьшей – в весенне-летний сезоны года. В жаркие дни, особенно в дневное время, угнетаются половые рефлексы, при температуре воздуха выше +25 0С и при -3 0С уменьшается объѐм эякулята, увеличивается количество мѐртвых и патологических спермиев. По данным И.А. Порфирьева с соавторами (2003) доля патологических спермиев выше в зимний период, меньше – летом. П.Г. Полумисков и соавторы (1995, С. 28) отмечали снижение половой активности при температуре +30 0С, скорости ветра 2-5 м/сек и влажности воздуха 35-40 %. О влиянии сезона года на сперматогенез сообщалось и в работах G. Igboeli и A.M. Rakha (1971), R.W. Everett (1978, 1982), M.J. Fields (1979), B. Kim (1983), B.I. Orji (1983), Базовой Ю.В. и др. (2014). B.I. Orji и соавторы (1984) отмечали снижение подвижности и концентрации спермиев и увеличением доли морфологически аномальных форм сперматозоидов и отсутствием фруктозы в летний период. M. Mathevon и др. (1998) сообщили, что от быков голштинской породы получали больше спермы с высокой концентрацией и подвижностью зимой и весной. Влияние температурного режима на качество спермопродукции рассматривали В.С. Мохнач и И.А. Орловский (1972). Они отмечали, что оптимальной для сперматогенеза быков является суточная температура от +15 до +20 0С, при этой температуре быки дают эякуляты лучшего качества. Температурный режим влияет на воспроизводительные качества (Gwazdauskas F.C., 1984). Высокие температуры окружающей среды отрицательно влияют на сперматогенез (Murugaiyah M., 1992) и уровень тестостерона (Murray M.T., 53 1997). J. Chacon и др. (1999) отмечали, что температура, как и влажность, положительно коррелируют с долей аномальных форм спермиев, таких как аномалии хвоста и проксимальными цитоплазматическими каплями. Отрицательное влияние на сперматогенез оказывает повышение влажности в холодное время года и снижение – в жаркое, в частности было установлено отрицательное влияние низкой относительной влажности на подвижность спермиев быков (Антонюк В.С., 1988). B. Fuerst-Waltl и др. (2006) проведя исследования спермы быков в двух австрийских центрах отметили, что температура имела важное, но противоречивое последствие для качества спермопродукции. Ими было установлено, что температура окружающей среды в интервале от +5 до +15 0С является оптимальной для сперматогенеза. J. Chacon и др. (2002) не выявили никакой связи между подвижностью спермиев и изменением температуры окружающей среды. D.C. Meyerhoeffer и др. (1985) и C.J. Vogler и др. (1991) указывали на отрицательное влияние изменения температур на качество спермы, которое выражалось в снижении жизнеспособности гамет до и после криоконсервации, увеличении доли спермиев с аномалиями и снижении подвижности сперматозоидов. Терморегуляция семенников имеет важное значение для получения спермы хорошего качества (Waites G.M.H., 1970; Setchell B.P., 1978), поэтому для нормального сперматогенеза температура в мошонке должна поддерживаться при температуре на 2-5 0С ниже чем температура тела животного (Ross A.D., 1979). Некоторые исследователи отмечают токсическое влияние некоторых веществ на спермопродукцию быков-производителей. Так P.J. Chenoweth с соавторами (1995) изучая спермопродукцию быков породы брахман, установили, что с введением в рацион хлопкового шрота в сперме увеличилась доля аномальных сперматозоидов. Так было установлено, что токсическое действие оказывал госсипол, содержащейся в шроте. После исключения его из 54 рациона животных сперматогенез восстанавливался на 3-11 неделю. Такое же негативное влияние на сперматогенез могут оказывать некоторые терапевтические агенты, например, стероидные гормоны, которые снижают активность гипофиза в производстве гонадотропина, некоторые антибиотики (Chenoweth P.J., 1995; Barth A.D., 1998), бактериальные токсины (Margareta W., 1989) и вирусные инфекции (Sur J.H., 1997). Несбалансированное кормление быков-производителей также отрицательно сказывается на сперматогенезе через эндокринную систему. Введение белковых продуктов в рацион производителей способствует не только поддержанию живой массы животного, но и размеров семенников и выхода спермы (Ndama P.H., 1983). Дефицит витамина А действует непосредственно на зародышевые клетки, что приводит к потере всех клеток, кроме сперматогониев и клеток Сертоли. При недостатке в рационах витамина А перерождается эпителиальная ткань, происходит воспаление глаз, снижается сопротивляемость организма к инфекционным заболеваниям, нарушается координация движения, у коров снижаются воспроизводительные функции, у быков-производителей нарушается сперматогенез (снижается подвижность спермиев, появление патологических форм, возрастает чувствительность спермиев к температурному шоку), у молодых животных задерживается рост. При хроническом дефиците витамина А может наступить атрофия семенников и придаточных половых желез, наступить импотенция (Душейко А.А., 1989, С. 241; Лоу К., 1995, С. 126; Хохрин С.Н., 2004, С. 138; Рогожин В.В., 2009, С. 99). Предшественником витамина А является каротин (Лоу К., 1995, С. 14; Метревели Т.В., 2005, С. 93). Недостаток каротина приводит к импотенции, уменьшению количества спермиев, снижение их подвижности, появлению патологических форм, атрофии семенников и придаточных половых желез. Витамин Е участвует в кроветворении, обеспечении функции органов размножения, в обмене веществ мышечной и нервной тканей, оказывает 55 влияние на деятельность гипофиза и щитовидной железы. Недостаток витамина Е может привести к дегенерации семенников и мышечной дистрофии (Лоу К., 1995, С. 140; Хохрин С.Н., 2004, С. 143; Метревели Т.В., 2005, С. 99; Рогожин В.В., 2009, С. 101). Недостаток кальция, марганца, цинка, йода, калия и селена могут привести к бесплодию. Недостаток кобальта, железа, цинка, меди могут стать причиной анемии, отсутствия аппетита и потери живого веса, и, таким образом оказать отрицательное влияние на воспроизводительную функцию производителей (Van Niekerk F.E., 1989). Исследования, проведенные на крысах и мышах, установили, что селен необходим для нормального развития хвоста сперматозоида и этот же элемент может иногда принимать участие в снижении фертильности быка (Olsen G.E., 2004). Дефицит микроэлементов в организме животных сопровождается снижение активности ферментов, гормонов, нарушаются процессы всех видов обмена веществ. При длительном недостатке микроэлементов могут наступить морфологические изменения в органах и тканях, снижаются их функции, поражаются репродуктивные органы, наступает бесплодие у самок рассасываются эмбрионы (Самохин В.Т., 1990, С. 382). Кальций в организме животных служит основным материалом для построения костной ткани, входит в состав всех клеток организма, регулирует реакции крови и тканевой жидкости, возбудимости мышечной и нервной ткани, свертывании крови. Обмен кальция тесно связан с функциями желез внутренней секреции и витаминами (Хохрин С.Н., 2004, С. 116; Рогожин В.В., 2009, С. 104). Фосфор, как и кальций, составляет основу костной ткани. Входит в состав ядерного вещества всех клеток в форме нуклеопротеидов. Играет роль в обмене углеводов, жировом обмене. Отношение кальция к фосфору в среднем составляет 1,5:2. Фосфор имеет большое значение для процесса сперматогенеза. Недостаток данного макроэлемента способствует увеличению дегенеративных 56 половых клеток и вызывает патологические изменения в семенниках (Хохрин С.Н., 2004, С. 119; Рогожин В.В., 2009, С. 107). Железо участвует в окислительно-восстановительных процессах (Белоус А.М., 1991, С. 4). При недостатке железа нарушаются физиологические функции, снижается уровень переносчиков кислорода, снижаются окислительно-восстановительные и иммунно-биологические процессы (Белоус А.М., 1991, С. 74). Недостаток железа ведет к задержке роста и снижению продуктивности животных (Хохрин С.Н., 2004, С. 123; Рогожин В.В., 2009, С. 106). Марганец повышает активность щелочной фосфатазы (Слесарев И.К., 1987, С. 7). Стимулирует тканевое дыхание, участвует в синтезе витамина С, необходим как катализатор при использовании в организме витамина В1. Увеличивает живучесть и подвижность сперматозоидов (Хохрин С.Н., 2004, С. 126; Рогожин В.В., 2009, С. 106). Магний входит в состав всех клеток организма. Участвует в большинстве реакций обмена веществ, в регуляции передачи нервных импульсов и в сокращении мышц (Хохрин С.Н., 2004, С. 119; Рогожин В.В., 2009, С. 105). Цинка много в плазме и предстательной железе. Он необходим для нормального роста, развития, полового созревания, поддержания репродуктивной функции самцов. Цинк принимает участие в сперматогенезе. Он входит в состав внутриядерных ферментов, катализирующих ключевые этапы синтеза ДНК и РНК, поэтому цинк улучшает процессы деления и дифференцировки сперматозоидов. Недостаток цинка вызывает нарушение формирования семенников (Слесарев И.К., 1987, С. 22; Хохрин С.Н., 2004, С. 125; Рогожин В.В., 2009, С. 107). Медь участвует в процессах кроветворения в качестве биокатализатора стимулирует образование гемоглобина. Оказывает влияние на функцию желез внутренней секреции. Поступая с пищей, медь всасывается в кишечнике, связывается с белком сыворотки крови – альбумином, затем поглощается 57 печенью, откуда в составе белка церулоплазмина возвращается в кровь и доставляется к органам и тканям. При недостатке меди появляются незрелые формы эритроцитов (Хохрин С.Н., 2004, С. 124; Рогожин В.В., 2009, С. 107). Натрий поддерживает осмотическое давление, участвует в водном, белковом и жировом обмене. Хлористый натрий является материалом для образования желудочного сока. При недостатке натрия теряется аппетит, снижается синтез жира и протеина, происходит задержка роста у молодых животных (Хохрин С.Н., 2004, С. 121; Рогожин В.В., 2009, С. 104). Другим фактором, оказывающим значительное влияние на сперматогенез, является возраст и живая масса при выращивании быков. И.З. Сирацкий (1972; 1993, С. 46) проведя исследования на быках симментальской породы, показал, что имеется тесная связь между живой массой и объѐмом эякулята, живой массой и общим количеством спермиев в эякуляте. Кроме того, он отмечает у быков этой породы особенности спермопродукции, связанные с возрастом. Объѐм эякулята и общее количество спермиев в эякуляте увеличивались до восьми летнего возраста и на таком уровне оставались до двенадцати летнего возраста. Концентрация и оплодотворяющая способность спермиев увеличивалась к шести летнему возрасту, активность – к девяти летнему, резистентность и способность к замораживанию – к двенадцати летнему возрасту. Активность спермиев достигала максимума в двух-трѐх летнем возрасте. Оплодотворяющая способность увеличивалась до трех-четырѐх летнего возраста и оставалась на высоком уровне до десяти-двенадцати летнего возраста. В.С. Мымрин (1991, С. 55) указывает на значительное влияние породных особенностей быков на биотехнологические показатели спермы. А.А. Анисов и С.Н. Костив (1989) отмечали наибольшую активность спермиев в свежеполученной сперме у быков швицкой и чѐрно-пѐстрой пород в возрасте от полутора до пяти лет. Самая высокая концентрация спермиев была отмечена в возрасте трѐх-четырѐх лет. 58 А.П. Солдатов и соавторы (1969, С. 37) проведя исследования среди быков швицкой породы также отмечали увеличение объема разового эякулята с возрастом на 0,7 мл (Р>0,95), но в возрасте старше восьми лет наблюдали снижение воспроизводительных способностей (Солдатов А.П., 1969, С. 98). Кроме того они отмечали влияние породы и индивидуальных особенностей на показатели спермопродукции быков (Солдатов А.П., 1969, С. 37). Исследования проведенные N.S. Tomar с соавторами (1985) показали, что процент морфологически ненормальных спермиев увеличивается с возрастом быков. Md. Jalal Uddin Sarder (2008) доказал, что сперма быков старше 4 лет содержит самый высокий процент спермиев с нарушениями строения головки. Значительная доля аномалий средней части хвоста спермия была выявлена у быков в возрасте от 6 лет и старше. Наибольшая доля аномальных спермиев была у быков младше 4 лет и самая низкая в возрасте старше 10 лет. Некоторые авторы отмечают, что с возрастом меняется подвижность спермиев (Everett R.W., 1982). Возраст быков достоверно коррелирует с объемом эякулята (Gamer D.L., 1996), концентрацией и общим выходом семени (Hoflack G., 2006). П.С. Сохатский (1996, С. 24) доказал зависимость подвижности спермиев, концентрации сперматозоидов в эякуляте от возраста матерей быков. В связи с широким использованием искусственного осеменения крупного рогатого скота возникла необходимость глубокого охлаждения и длительного хранения спермопродукции, способность сперматозоидов поэтому к важным показателем криоконсервированию. В является процессе замораживания-оттаивания спермы быков погибает более 5 % половых клеток (Жуковская Н., 1997, С. 25). На переживаемость спермиев после глубокого охлаждения оказывают влияние такие факторы как кормление и содержание быков, компоненты входящие в состав сред для глубокого охлаждения, способность мембран гаметы переносить криоконсервирование и другие. Одной из причин, снижающих переживаемость спермиев, А.Д. Бугров и А.С. 59 Сидашѐва (1991) называют повышенный уровень мѐртвых клеток в эякуляте, чем выше их уровень, тем ниже активность, переживаемость и абсолютный показатель живучести живых спермиев. Мѐртвые половые клетки токсично воздействуют на живые спермии после криоконсервации. Сперма быков после замораживания-оттаивания имеет низкую переживаемость и более высокую чувствительность к воздействию мѐртвых половых клеток по сравнению с нативной спермой. А.М. Белоус с соавторами (1979), исследуя влияние куриного желтка на половые клетки животных, отмечали, что лизолецитины, содержащиеся в нѐм, повреждают акросомы клеток, оказывая токсичное действие. Основным криопротектором при замораживании спермы животных является глицерин. Однако наряду с положительным криозащитным действием он может отрицательно влиять на биологическую полноценность спермиев (Белоус А.М., 1979; 1986, С. 128; 1987; Грищенко В.И., 1990; Наук В.А., 1985, С. 47; 1989). Кроме того, глицерин ускоряет акросомную реакцию спермиев, что может снизить фертильность криоконсервированной спермы (Smith A.U., 1950; Руденко С.В., 1985; Ерохин А.С., 1998). В.И. Грищенко и соавторы (1990) обращают внимание на то, что глицерин в концентрации выше 4 % вызывает нарушение мембраны спермиев у животных. Имеется мнение о влиянии сезона года на холодостойкость спермы, где основными причинами снижения криорезистентности спермы весной является ухудшение качества кормов и ветеринарно-гигиенических условий содержания животных (Осташко Ф.И., 1978, С. 105). Образование сперматозоидов у быков является сложным и относительно длительным процессом, на который могут оказывать влияние в большей или меньшей степени разные факторы внешней среды. По степени влияния факторов внешней среды на течение сперматогенеза можно судить об адаптивных резервах быка-спермодонора. При равных условиях содержания и кормления животные с оптимальным сочетанием адаптивных генов будут 60 давать спермопродукцию более высокого качества. Следовательно, изменчивость данных параметров может быть использована в качестве дополнения к традиционным показателям оценки быков. Использование в воспроизводстве ограниченного числа быков- спермодоноров может привести к концентрации нежелательных рецессивных генов, вызывающих генетические дефекты спермы и андрологические расстройства. Так как жизненность потомства, его энергия роста, находятся в прямой связи с живучестью гамет (Соколовская И.И., 1957, С. 242), поэтому наряду с оценкой быков по экстерьеру и происхождению на начальном этапе необходимо учитывать их индивидуальные интерьерные особенности. Изучению этих вопросов в условиях Средней Сибири уделялось мало внимания. Их мы рассмотрели на примере быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем». 1.6 Маркерно-зависимая селекция в животноводстве Одним из основных мероприятий в племенной работе является выбор наиболее ценных быков-производителей, на основе изучения их наследственных особенностей, передаваемых потомству (Исламова С., 2006). Но оценка быков общепринятыми методами недостаточно полно и точно характеризует их генотип, поэтому ведутся изыскания новых эффективных способов оценки генотипов животных. В животноводстве, например, изучая эритроцитарные антигены, отмечают связь аллели В-системы с более высокой молочной продуктивностью у коров (Хайруллина Н.И., 2007). В исследованиях Л.В. Тимофеева и др. (2004, 2005), проведенных на хряках разных пород, отмечается положительная связь активности спермиев и объема эякулята с некоторыми генотипами по системам групп крови. Работы по изучению иммуногенетических маркеров и полиморфных белков дали положительные результаты, однако, выявленные 61 корреляции с хозяйственно полезными признаками, в основном, являются спецификой отдельных стад и пород животных. Поэтому ученые-селекционеры продолжают вести поиск новых систем генетического маркирования (Калашникова Л.А., 1999, С. 4). В настоящее время в практике животноводства широко применяют методы генетических исследований. ДНК-диагностика позволяет выявить маркеры продуктивных качеств животных на любом этапе онтогенеза, что значительно повышает (Гончаренко Г.М., эффективность 2009; селекционно-племенной Хабибрахманова Я.А., 2009). работы Интеграция молекулярной генетики в прикладную науку сделала возможным оценку генетического потенциала продуктивности животных не только на основании данных фенотипа, но и на уровне ДНК (Зиновьева Н.А., 2002; Эрнст Л.К., 2008), поэтому наряду с математическими методами оценки племенной ценности (селекционные BLAP-индексы) ДНК-технологии находят все более широкое применение во всем мире, в том числе и России (Калашникова Л.А., 2000). Преимущество методов молекулярной генетики при изучении характера наследования количественных и качественных признаков обусловлено возможностью быстрой идентификации генотипа независимо от вида, породы, возраста и пола животного, что значительно ускоряет селекционный процесс (Горячева Т.С., 2010). Молекулярно-генетические маркеры позволяют получить информацию о полиморфизме генов и исследовать, какие варианты отдельных генов имеют преимущественное распространение у животных, несущих желательные аллели в конкретных средовых условиях. На основе такой информации можно направлено формировать генофонды с желательными генными сочетаниями (Калашникова Л.А., 1999, С. 3). Выявление новых генов позволяет начать поиск взаимосвязи между обнаруженным геном и различными признаками, в том числе продуктивными. 62 Такие исследования проводятся по гену, отвечающему за синтез фракций каппа-казеина белка молока (Иолчиев Б.С., 1999; Юхманова Н., 2004). В настоящее время выявлено 10 аллелей этого гена – A, B, C, E, F, G, H, I, X, A1 (Зиновьева Н.А., 2001). Наиболее распространенными в породах крупного рогатого скота являются аллели А и В. В фенотипе гетерозиготных особей наблюдается кодоминантный тип наследования признака (Немцов А.А., 2006). Исследователи отмечают, что лучшие технологические свойства молока, а также высокое качество продуктов выявлено у коров с генотипом ВВ (Немцов А.А., 2007; Тамаров Р.В., 2008; Калашникова Л.А., 2009; Селионова М., 2011; Четвертакова Е.В., 2012 б). Частота встречаемости генотипов по гену каппа-казеина значительно варьирует в зависимости от породы и региона. При этом наименьшая частота встречаемости аллеля В отмечена у животных голштинской породы и чернопестрой (Дунин И.М., 1998; Стрекозов Н.И., 1997; Часовщикова М.А., 2011). Так как основную роль в совершенствовании племенных и продуктивных качеств крупного рогатого скота молочного направления продуктивности принадлежит быкам-производителям (Пархоменко Б., 2011), поэтому в современных условиях селекции, при использовании ограниченного количества производителей на больших массивах маточного поголовья, следует оценивать быков на носительство желательных аллелей в том числе и гену каппа-казеина, так как отмечено положительное влияние аллеля В на показатели молочной продуктивности (Денисенко Е.А., 2004; Горячева Т.С., 2010, С. 53, 2011; Павлова И.Ю., 2011), технологические свойства молока (Калашникова Л.А., 2006; Тюлькин С., 2011), рост и развитие телочек (Четвертакова Е.В., 2012 в, 2013; Волохов И.М., 2012). Частота аллеля В в бычьих популяциях незначительная. По данным И.Ю. Павловой с соавторами (2011, С. 8) частота аллеля В у быков-производителей холмогорской породы составляет – 0,235. А. Тинаев с соавторами (2009) изучив полиморфизм гена каппа-казеина у быков черно-пестрой породы в племенных 63 предприятиях России установили, что частота аллели В составляет в среднем 0,18, наиболее часто данная аллель встречается в генотипе быков «Мордовиягосплем» – 0,5 и редко в «Невское» – 0,03. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что племенные предприятия не учитывали генотип животных по гену каппаказеина при подборе быков, что и привело к снижению данной аллели в бычьих популяциях. Использование быков гомозиготных по аллелю В и гетерозиготных может увеличить частоту данного аллеля в маточных стадах, тем самым повысить молочную продуктивность, технологические свойства молока, положительно повлиять на рост и развитие телят. В связи с этим для увеличения доли быков с желательными генотипами по гену каппа-казеина необходимо тестировать матерей отобранных для заказных спариваний. 64 ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Объект исследования Объектом исследования «Красноярскагроплем» послужили красно-пѐстрой, быки-спермодоноры чѐрно-пѐстрой, ОАО симментальской голштинской и коровы красно-пѐстрой породы ФГУП «Курагинское» Курагинского района, ОАО ПЗ «Красный маяк» Канского района Красноярского края. Исследования проводились в период с 1996 по 2013 год. Кроме того, в анализе использовались архивные материалы по быкам-спермодонорам с 1979 года. 2.2 История создания популяции быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем» Разводимый в Красноярском крае крупный рогатый скот не отличался желательными показателями продуктивности, поэтому с целью улучшения морфофункциональных свойств вымени и увеличения молочной продуктивности с 1979 года в край стали завозить спермопродукцию и быковспермодоноров голштинской породы (Голубков А.И., 2003, С. 8). Коровы данной породы по молочной продуктивности значительно превосходят все молочные породы. Они имеют желательную форму вымени и хорошо приспособлены к различным климатическим условиям (Крыканова, Л.Н., 1989). Крупномасштабно голштинизация в крае началась с 1985 года, до этого времени специалисты предприятия ОАО «Красноярскагроплем» работали, в основном, с быками-производителями симментальской породы. Одновременно с голштинскими быками завозились и быки чѐрно-пѐстрой породы. Основной массив быков-спермодоноров голштинской породы был 65 завезѐн из Германии, Дании, Канады, Венгрии, Австрии, Швейцарии. Значительная часть быков чѐрно-пѐстрой породы поступала из госплемзаводов Ленинградской, Московской, Тамбовской, Воронежской, Сахалинской областей и Украины (с разной долей кровности по голшинской породе 3/4, 5/8). Таким образом, ввозимые животные сформировались в качественно иных природно-климатических условиях, отличных от условий Красноярского края, под воздействием иной культуры селекционно-племенной работы. В результате воспроизводительного скрещивания быков голштинской породы и маточного поголовья симментальской породы была выведена новая красно-пѐстрая порода скота молочного направления продуктивности. Порода была зарегистрирована в Государственном реестре селекционных достижений 15.10. 1998 г (Голубков А.И., 2003, С. 7). В настоящее время в банке ОАО «Красноярскагроплем» имеется достаточный запас спермопродукции, полученный от быков-производителей разных пород как импортной, так и местной селекции. Спермопродукция реализуется не только на территории Красноярского края, но и в Томскую, Амурскую, Иркутскую области, Якутию, Хакасию, Алтай и Хабаровский край. Племзаводы «Назаровский», «Таѐжный», «Краснотуранский», «Канский» являются основными поставщиками бычков местной селекции, получаемых в результате заказного спаривания. Схема исследования представлена на рисунке 3. 2.3 Методы исследования В первую очередь были обследованы быки-спермодоноры ОАО «Красноярскагроплем», так как эти животные оказали наибольшее влияние на формирование материнских популяций. Основным материалом для исследования была сперма. В дополнение к лабораторным методам, кратко описанным ниже, при выполнении исследований нами были использованы первичные данные стандартных форм зоотехнического учета (форма 1-мол, 66 журналы регистрации спермопродукции, отчеты по бонитировке); они включали следующую информацию: линейную принадлежность, условные генотипы, возраст и экогенез быков, качество спермопродукции, оцененной в соответствии с действующими ГОСТами: ГОСТ 23745-79 «Сперма быков неразбавленная свежеполученная», ГОСТ 20909.3-75 «Сперма быков неразбавленная. Методы морфологических исследований», ГОСТ 26030-83 «Сперма быков замороженная», характер нарушений сперматогенеза, причины выбытия. Определение доли аномальных форм (ДАС) спермиев производили в мазках нативной и криоконсервированной спермы в зимний и весенний периоды. Приготовление препаратов для микроскопирования осуществлялось в соответствии с ГОСТом 20909.3-75. Мазки спермы микроскопировали при увеличении 600, при необходимости – 1350 раз. Выделяли спектр аномалий: 1) оторванные головки (ОГ), 2) загнутые хвосты (ЗХ), 3) деформация головки (ДГ), 4) разрыв головок (РГ), 5) разрыв хвостов (РХ), 6) слипание хвостами (СХ), 7) тератологические формы (ТР), 8) слипание головками (СГ). Микросъѐмку препаратов проводили в лаборатории научных исследований кафедры экологической генетики института агроэкологических технологий ФГБОУ ВПО КрасГАУ. Сперма оценивалась не только по количеству морфологически измененных нормальных сперматозоидов, но и по их качественным, патофизиологическим свойствам, куда входят подвижность, переживаемость, концентрация. Переживаемость семени после замораживания-оттаивания оценивалась в соответствии с ГОСТом 26030-83 «Сперма быков – замороженная». Использовался «Журнал учѐта использования производителя и показатели его спермопродукции» (форма 1 – ио), «Лабораторный журнал учѐта качества спермы производителя за период его использования» (форма 2 – ио). 67 Научно-практическое обоснование методов контроля присовершенствовании генофонда крупного рогатого скота Красноярского края Объект исследования Быки-спермодоноры красно-пестрой, голштинской (краснопестрой и черно-пестрой популяции), симментальской и чѐрнопестрой пород отечественной и импортной селекции Коровы красно-пестрой породы МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, ИЗУЧАЕМЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ (с учѐтом генотипа, сезона, возраста, экогенеза) МОРФО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ: Переживаемость семени; 1. Некроспермия; 2. Аспермия; 3. Олигоспермия; 4. Папилломы; 5. Импотенция. Аномалии сперматозоидов. МОЛЕКУЛЯРНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ: BLAD- мутация; CVM-мутация; Каппа-казеин. АНДРОЛОГИЧЕСКИ Е БОЛЕЗНИ И РАССТРОЙСТВА: ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ: Анеуплоидия; Полиплоидия; Структурные нарушения; Транслокации Рисунок 3 – Схема исследования БИОХИМИЧЕСКИЕ: Каротин; Общий белок; Кальций; Фосфор; Щелочной резерв; Липиды; Холестерин; Макромикроэлементы; Аминокислоты. Экономический ущерб. Рекомендации производству. ГЕНЕТИКО-СТАТИСТИЧЕСКИЕ Среднее; Стандартная ошибка; Стандартное отклонение; Достоверность; Частота аллелей (закон ХардиВайнберга). 1. 2. 3. 4. 5. РЕТРОСПЕКТИВНЫЙ МЕТОД: Спастический парез; Мониторинг распространения наследственных аномалий. 68 За основу оценки качества семени была взята классификация Kühnelt (1953) (Коган С.Л., 1969, С. 51). Нормоспермия характеризуется наличием в эякуляте большого числа жизнеспособных сперматозоидов. Число, подвижность и морфология сперматозоидов в 1 мл находятся в пределах нормы. Олигоспермия характеризуется уменьшенным числом сперматозоидов в эякуляте. Аспермия характеризуется отсутствием в эякуляте сперматозоидов, а также клеток сперматогенеза. Некроспермия характеризуется неподвижными сперматозоидами и является наиболее сильной степенью нарушения подвижности сперматозоидов. Нами была разработана методика оценки быков на генетически груз, которая использовалась в работе (рис. 4). Был проведен генеалогический анализ для случаев, выявленных аномалий. Предполагалось, что выявленные аномалии гамет могут носить не случайный характер, а могут являться особенностью линий или конкретных ветвей. Устойчивость к температурному шоку при замораживании- оттаивании также могла носить не случайный характер, а быть генетически обусловленной. Основным методом генеалогического анализа аномалий является семейно-групповой метод в пределах одного или нескольких поколений животных. В целях профилактики распространения генетических аномалий у потомства важным является определение типа наследования аномалии. Тип наследования определялся на основании анализа родословных, в которых указывают характер аномалии. Родословные начинали составлять с животного, у которого была выявлена аномалия (пробанд). При составлении родословной отражали не всю родословную, а только ту ветвь, в которой имеются аномальные особи. 69 ОЦЕНКА БЫКОВ НА ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ГРУЗ I ЭТАП ОЦЕНКА БЫЧКОВ ПОСЛЕ РОЖДЕНИЯ: II ЭТАП ОЦЕНКА СПЕРМАТОГЕНЕЗА БЫЧКОВ 1. Генеалогический метод; 2. Метод ДНК-тестирования; 3. Цитогенетический метод (кариологический анализ) (робертсоновские транслокации (РТ); химеризм по половым хромосомам; полиплоидия; анеуплоидия; структурные нарушения хромосом). Аномалии сперматогенеза: 1. Олигоспермия; 2. Аспермия; 3. Некроспермия. Морфологические нарушения в строении сперматозоидов в нативном и глубоко охлажденном семени: 1. Аномалии головки спермия (деформация головки, разрыв головок, слипшиеся головками); 2. Аномалии шейки и хвоста спермия (загнутые хвосты, разрыв хвоста, слипшиеся хвостами, оторванные головки); 3. Тератологические формы. Рисунок 4 – Схема методики проверки и оценки быков на генетический груз 70 Анализируя родословные с аномальными животными, определяли, имеются ли общие предки, если имеется общий предок, то это давало основание предполагать наследственную причину аномалии. Так как мы исследовали сперматозоиды, поэтому имели дело с передачей наследственности по отцовской линии. Предположительно, аномалии половой системы отнесли к группе признаков, которые определяются полом, связанных с Y-хромосомой и реализующиеся в фенотипе при гемизиготном носительстве (Романова Е.М., 1994, С. 178). В некоторых случаях проявление генетической аномалии зависит в равной степени, как от генотипа особи, так и условий внешней среды. Предполагается, что они контролируются полилокусной системой генов. Для этой категории аномалий существует понятие порога действия генов. Если число генов и их сила действия превышают порог, аномалия проявляется, если нет животное, остаѐтся нормальным. Сила действия генов зависит от условий среды обитания. При изменении условий обитания в худшую сторону вредный эффект генов проявляется (Эрнст Л.К., 1990). В ходе работы были проанализированы причины выбытия быковпроизводителей, принадлежащих к разным генеалогическим линиям. В исследование были включены линии Монтвик Чифтейн 95679 (М. Чифтейн), Розейф Ситейшн 267150 (Рз. Ситейшн), Вис Бек Айдиал 933122 (В.Б. Айдиал), Пабст Говернер 882933 (П. Говернер), Силинг Трайджун Рокит 252803 (С.Т. Рокит), Рефлекшн Соверинг 198998 (Рф. Соверинг), быки симментальской породы российской (Сим. рос. селекции) и немецкой селекции первой группы (Сим. нем. селекции 1), завезѐнных в хозяйство в 1995 году и второй группы (Сим. нем. селекции 2), поступивших в 1996 году. При изучении динамики частоты аномалий половой системы и спастического пареза использовался ретроспективный метод, были выделены четыре периода: первый период (1979-1984 гг.) характеризуется использованием быков симментальской породы отечественной репродукции; второй (1985-1991 гг.) – интенсивным использованием потомства быков голштинской и чѐрно- 71 пѐстрой породы импортной селекци; третий (1992-1996 гг.) – использованием быков симментальской породы немецкой селекции; четвертый (1997-2013 гг.) – преимущественным использованием быков местной селекции (помесей чѐрнопѐстрая х голштинская, симментальская х голштинская, красно-пѐстрая х голштинская). Оценку на BLAD и CVM-мутации, полиморфизм гена каппа-казеина крупного рогатого скота из крови и спермы проводили в лаборатории молекулярной генетики ВНИИплем (г. Москва), методами ДНК-технологий (Калашникова Л.А. и др., 1999). В сыворотке и красной крови: каротин – фотометрическим и щелочной резерв – диффузионным методами (Методические указания по применению унифицированных биохимических методов исследования крови, мочи, молока, 1981); общий белок, кальций и фосфор – стандартными наборами ЗАО «ВекторБест»;, кетоновые тела, липиды, содержание макро- и микроэлементов, аминокислот определяли на приборе Bio Chem SA (производитель High Technologi USA (интермедиа) в Красноярской краевой ветеринарной лаборатории (г. Красноярск) и Институте экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока (ИЭВСиДВ, г. Новосибирск). Окраску крови проводили по Паппенгейму (Карпуть И.М., 1986). Микроскопировали при увеличении в 200 и 400 раз. Чтение мазка крови проводили на кафедре «Анатомии, патологической анатомии и хирургии» института прикладной биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО КрасГАУ четырѐхпольным методом по Филипченко (Солдатов В.И., 1990). Цитогенетические исследования проводили в лаборатории генетики свиней ВНИИплем (г. Москва) по общепринятым методикам. Учитывались такие аномалии кариотипа как анеуплоидия, полиплоидия, структурные нарушения, транслокации. Для определения соотношения генотипов в группах быков применяли формулу Харди-Вайнберга: p2 + 2pq + q2 = 1 (1) 72 p2 – число гомозот-доминантов (АА), равное квадрату частоты (аа), равное квадрату частоты доминантного гена; q2 – число гомозигот-рецессивов рецессивного гена; 2pq – число гетерозиготных особей, равное удвоенному произведению частоты обеих аллелей. Мониторинг распространения аномалий в популяции крупного рогатого скота осуществлялся в племенном репродукторе ФГУП «Курагинское» Россельхозакадемии Курагинского района и хозяйствах Красноярского края. Для определения стоимости приплода в денежном выражении применяли формулу: Спц=1,5 * П * Зц (2) Спц – стоимость приплода, руб.; Зц – закупочная цена 1ц молока базисной жирности, руб.; П – продуктивность животных, кг (методические рекомендации по определению стоимости приплода крупного рогатого скота и экономического ущерба от яловости коров, 1986). Продуктивность коров на 2012 год составила 4538 кг (http://www.krskstate.ru/agro/stat/0/id/11779). Влияние гена каппа-казеина на рост телочек и молочную продуктивность коров-первотелок изучали в ОАО ПЗ «Красный маяк» Канского района Красноярского края. Статистические обработку данных проводили математическими методами по Н.А. Плохинскому (1970) с применением программы Microsoft Excel. 73 ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Использование в воспроизводстве лучшего мирового генофонда крупного рогатого скота, отличающегося высокой продуктивностью, является актуальным не только в Красноярском крае, но и во всей Сибири. Как отмечают распространение специалисты генотипов в области животноводства, быков-спермодоноров одной из широкое выдающихся мировых пород голштинской имеет как положительные, так и отрицательные моменты (Всяких А.С., 1976; Панин Л.Е., 1983; Петухов В.Л., 1985; Прудов А.И., 1986; Дмитриев И.Г., 1986; Жигачѐв А.И., 1983, 1986, 2000, 2001; Дубинин Н.П., 1994; Романова Е.М., 1994; Игонькин А., 1996; Кригер Н.В., 1998; Делян А.С., 2000; Усова Т.П., 2000; Морозова О.В., 2000; Иванов В.И., 2002; Першилин К.Г., 2002; Кочнев Н.Н., 2003; Рудко А.А., 2003; Фомина Л.В., 2003; Голубков А.И., 2003; Адушинов Д., 2003; Четвертакова Е.В., 2006, 2009, 2012 а). Источником передачи наследственной информации являются гаметы. Процесс образования мужских гамет – сперматозоидов, представляет собой длинную серию цитологических преобразований. Сперматогенез может нарушаться в результате действия как генетических, так и средовых факторов. Нарушения сперматогенеза могут выражаться некроспермией, олигоспермией, аспермией, морфологическими нарушениями спермиев. Поэтому для предотвращения распространения данных нарушений среди бычьего поголовья крайне важно своевременно выявлять такие случаи нарушения сперматогенеза и устанавливать причины их возникновения. Крупный рогатый скот, разводимый в Красноярском крае, не отличался высокими продуктивными качествами, поэтому для улучшения его продуктивности с 1979 года в край стали завозить спермопродукцию и быковспермодоноров лучшей мировой породы – голштинской. Коровы этой породы по молочной продуктивности значительно превосходят все молочные породы. Они 74 имеют желательную форму вымени, хорошо приспособлены к различным климатическим условиям (Логинов Ж.Г., 1996, С. 6). Крупномасштабная голштинизация в Красноярском крае началась с 1985 года, до этого времени специалисты предприятия ОАО «Красноярскагроплем» работали, в основном, с быками-производителями симментальской породы. Вместе с голштинскими быками завозились и быки чѐрно-пѐстрой породы. Быки-спермодоноры голштинской породы поступали из Германии, Дании, Канады, Венгрии, Австрии, Швейцарии. Быки чѐрно-пѐстрой породы поступила из госплемзаводов Ленинградской, Московской, Тамбовской, Воронежской, Сахалинской областей, а также Украины. Таким образом, ввозимые животные в Красноярский край сформировались в качественно иных природно-климатических условиях, значительно отличающихся от условий края. В настоящее время в банке ОАО «Красноярскагроплем» имеется достаточный запас спермопродукции, полученный от быков- производителей разных пород как импортной, так и местной селекции. Главными поставщиками бычков местной селекции являются племзаводы «Назаровский», «Таѐжный», «Краснотуранский» и «Канский». 3.1 Генетические дефекты спермы и андрологические расстройства у быков-спермодоноров В процессе длительной эволюции в популяциях животных накоплен определенный груз вредных мутаций, который может усиливаться под влиянием неблагоприятных факторов внешней среды. В настоящее время проблема генетически обусловленных аномалий и заболеваний животных приобретает все большую значимость. Одной из причин выбытия быков из племенного использования является снижение половой потенции. Г.Д. Пепина (1969) и А.И. Жигачѐв (2001) отмечают, что в отечественном скотоводстве ежегодно выбывают 20-21 % производителей по этой причине, средний срок использования быков составляет обычно 5-6 лет. 75 А.В. Емельянов (1990, С. 54) отмечал, что в Латвии по причине андрологических болезней и расстройств выбыло из племенного использования 27,7 % быков. Данные болезни могут передаваться потомкам обоих полов, а у самок проявляться в виде нарушений воспроизводительной функции. По данным В.А. Коробко (1990) из-за расстройства половой функции из племенных предприятий Украины выбывало до 30,3 % быков-спермодоноров, по данным И.З. Сирацкого (1993, С. 46) по причинам снижения воспроизводительных способностей среди быков симментальской породы выбывало – 34,45 %. По данным Е.В. Четвертаковой (2003, С. 210; 2013 а, С. 7) в разные периоды исследования из племенного использования быков Красноярского края выбывало от 8,9 % до 12,5 % производителей. При анализе динамики частоты аномалий половой системы у быковспермодоноров ОАО «Красноярскагроплем», обеспечивающего спермопродукцией не только хозяйства Красноярского края, но и Томскую, Иркутскую, Амурскую области, Якутию, Хакасию, Алтайский и Хабаровский края применялся ретроспективный метод исследования. Были выделены 4 периода исследования: первый период (1979-1984 гг.) характеризуется использованием быков симментальской породы отечественной репродукции; второй (1985-1991 гг.) – интенсивным использованием потомства быков голштинской и чѐрно-пѐстрой породы импортной селекци; третий (1992-1996 гг.) – использованием быков симментальской породы немецкой селекции; четвертый (1997-2013 гг.) – преимущественным использованием быков местной селекции (помесей чѐрно-пѐстрая х голштинская, симментальская х голштинская, красно-пѐстрая х голштинская). Анализировались родословные быков-спермодоноров генеалогических линий: М. Чифтейн, Рз. Ситейшн, В.Б. Айдиал, П. Говернер, С.Т. Рокит, Рф. Соверинг, быки симментальской породы российской (Сим. рос. селекции) и немецкой селекции первой группы (Сим. нем. селекции 1), завезѐнных в хозяйство в 1995 году и второй группы (Сим. нем. селекции 2), поступившие в 1996 году. 76 Среди 1151 быков, выбывших за весь исследуемый период, с 1979 по 2012 гг. по причине генетических дефектов спермы и андрологических болезней выбыло 144 животных, что составило 12,5 % (табл. 1). Таблица 1 Причины выбытия быков-производителей из стада ОАО «Красноярскагроплем» с 1979 по 2012 гг. Причины выбытия Прочие Достаточно семени Аномалии половой функции Заболевания конечностей Спастический парез Инфекции Болезни желудочно-кишечного тракта Буйный нрав Непереживаемость семени Итого Выбыло быков-спермодоноров к общему поголовью всего, выбывших гол. животных, % 482 41,9 203 17,6 144 12,5 124 10,8 84 7,3 51 4,4 37 3,2 24 2,1 2 1151 0,2 100,0 Обращает на себя внимание тот факт, что по причине достаточного накопления семени выбыло только 17,6 % быков-производителей, а 82,4 % быков выбыло по другим причинам. Значительное количество быков (482 гол.) выбыло по «прочим» причинам, которые, в основном, включают в себя зоотехнический брак и выранжировку. В структуре аномалий половой функции по которой выбыли быки в разные периоды исследования основную долю составили некроспермия, олигоспермия и аспермия (рис. 5). Как видим, отмечается тенденция к росту количества выбывших животных по причине некроспермии: если в первый период процент выбытия быков по данной причине составил 27,3 %, то в четвѐртом периоде этот показатель значительно увеличивается до 66,7 %. Наблюдается тенденция к росту выбытия быков по причине аспермии. Некроспермия, олигоспермия, аспермия относятся к третьей группе наследственных дефектов спермы аплазии семенных протоков 77 Вольфа. По литературным данным, средняя частота этой аномалии составляет 12,9 % (Эрнст Л.К., 1990, С. 51). 80 66,7 60 40 20 36,3 40 40 30 27,3 18,2 20 15 9,1 9,1 3,3 6,7 10 15 20 19 4,8 9,5 0 0 % 1 период некроспермия 2 период олигоспермия 3 период аспермия импотенция 4 период папилломы Рисунок 5 – Структура генетических дефектов спермы и андрологических расстройств у быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем», % Анализ принадлежности быков к генеалогическим линиям, позволил установить, что самой неблагополучной линией по данным аномалиям является линия М. Чифтейна, так как по этой причине выбыло 32,0 % от общего количества выбывших животных (рис. 6). 3% 10% 8% 32% 13% 8% 7% 19% П. Говернер М. Чифтейн В.Б. Айдиал Р. Ситейшн Р. Соверинг С.Т. Рокит Сим. нем. селекции Сим. рос. селекции Рисунок 6 – Доля быков-спермодоноров с генетическими дефектами спермы и андрологическими расстройствами 78 Построение генеалогической схемы родственных групп, обнаруживших аномалии, позволило более точно установить, в каком именно ответвлении родословной у быков наиболее часто проявляются аномалии половой функции. В результате анализа установили, что 80 % быков принадлежат к родословной ветви красно-пѐстрых быков. Основная доля быков с аномалиями отмечена среди сыновей Рейна 470, принадлежащего к ветви Гленафтона Зэг Эппл Хагена 280634 (рис. 7). Рейн 470 Акробат 8757 КСС-1346 Амур 3105 ☼ Анод 5236 КСс-1339 ◊ Арбуз 3125 КСС-1329 ▲ Бант 2153 КСС-1345 Вестник 8876 КСС-1354 ● Вылет 708 КСС-1325 ▲ Вяз 8357 КСС-1333 ● Вихрь 8437 КСС-1340 Жучок 2201 Жемчуг 2352 ☼ Изюм 2194 Импорт 395 Кулон 8479* Лужок 3171 КСС-1331 ▲ Муравей 2391 Микрон 2246* Мурат 8522 КСС-1341 ● Нил 2335 КСС-1321 Невод 3071* Неман 3072 ■ Окрик 5220 КСС-1338 ● Пирс 284 Салют 8687 КСС-1349 Сазан 2534 Соловей 2271 Янтарь 9032 КСС-1355 ▲ Ярус 8636 КСС-1342* Рисунок 7 – Ветвь Гленафтон Зэг Эппл Хаген 280634 линии М. Чифтейн Причины выбытия быков: *- импотенция; ◊ - олигоспермия; ▲ - некроспермия; ☼ - аспермия; ■ - папилломы; ● - спастический парез 79 Из 28 быков-производителей, эксплуатирующихся в племенном предприятии, у 12 быков отмечены андрологические болезни и расстройства (табл. 2), что составляет 43,0 % потомства. Наиболее часто у сыновей Рейна, линии М. Чифтейн, встречается снижение половой потенции 33,3 % и некроспермия далее по убывающей следуют аспермия 33,3 % от всех случаев аномалий, 16,8 %, олигоспермия 8,3 %. Столь широкое распространение аномалий половой системы в потомстве Рейна свидетельствует о том, что это явление неслучайно и явно обусловлено наследственной предрасположенностью. Таблица 2 Структура генетических дефектов спермы и андрологических расстройств у сыновей Рейна 470 линии М. Чифтейн Генетические дефекты спермы и андрологические заболевания и расстройства Снижение половой потенции Аспермия Некроспермия Олигоспермия Папилломы Итого Количество выбывших быков, гол. Доля выбывших быков к общему числу аномалий, % 4 2 4 1 1 12 33,3 16,8 33,3 8,3 8,3 100 В условиях использования быков в естественной случке эти аномалии могут и не проявиться, но обнаруживают себя в условиях интенсивного использования быков в качестве доноров спермы. Потомки от сыновей Рейна, имеющих эти заболевания, в дальнейшем не использовались в системе разведения на ОАО «Красноярскагроплем». Следует отметить случаи аномалий половой системы в ветви Гановер Хилл Трипсы Треад 1629391 линии М. Чифтейн. Наиболее широко в Красноярском крае были представлены потомки Хилтона. Из семнадцати его сыновей, использующихся в племенной работе, один выбыл по причине снижения половой потенции. Наиболее явное проявление аномалий отмечалось у внуков Хилтона (рис. 8), в большей степени у потомков его сына Хюнса. 80 Гусар 2220 Хор 9483756 Герой 2165 Хариус 2170 Кацар Ред 4912 Архив 4012 ● Ахилл 4010 Луидор 4005 ● Хилтон 4901, 1883 Добрек 28 ◊ Треф 3692 ● Быстрый 9312 Севок 3488 Захват 31506 Гид 73255 Зенит 6633 Азов 2548 ● Ёрш 401 Юг 297 Родной 4168 Родонит 15039▲ Норд 4032* Минус 4001 ● Дон 965 Хитон 2169 Ход 8071 Хобой 4008 ● Восток 8241* Нежный 6649 Резвый 8205 Фокус 673 Хорд 8063 ● Генерал 90597 ● Зоркий 2612 Эхолот 4024 Абажур 9788 Барс 6405 Бархат 9852 Вулкан 9651 Восход 5617 Гладиолус 9808 Кустик 3879 Милок 9732 ■ Молот 9731 Хюнс 6029327 Магомет 9856* Муравей 6265* Налѐт 9857 Сургуч 9783 Удел 9807 ▲ Ураган 3827 Чибис 3819 Янтарь 9872 ■ Ястреб 9844 Рисунок 8 – Ветвь Гановер Хилл Трипсы Треад 1629391, 502304 линии М. Чифтейн (*- импотенция; ◊ - олигоспермия; ▲ - некроспермия; ☼ - аспермия; ■ - папилломы; ● - спастический парез) 81 В племенной работе использовались 54 потомка быка Хилтона. Наибольшее количество потомков выбыло из-за снижения половой потенции (табл. 3). Видимо данная родственная группа быков имеет наследственную предрасположенность к генетическим дефектам спермы и андрологическим расстройствам, которые выражаются некроспермии, олигоспермии, аспермии и снижением половой потенции. Таблица 3 Структура генетических дефектов спермы и андрологических расстройств сыновей и внуков Хилтона 4901, 1883 линии М. Чифтейн Генетические дефекты спермы и андрологические заболевания и расстройства Снижение половой потенции Некроспермия Олигоспермия Папилломы Итого Количество выбывших быков, гол. Доля выбывших быков к общему числу аномалий, % 4 2 1 2 9 44,4 22,2 11,1 22,2 100 Возможно, одной из причин аномалий являются фенокопии, проявление которых обусловлено пороговыми раздражителями, к которым относятся условия кормления, содержания, климатические особенности местности. В ветви чѐрно-пѐстрых быков линии М. Чифтейн аномалии половой функции встречались в ветви Л.Ф. Хоупа 273935 и были выражены некроспермией – у Пловца 305. Найденого 204 и импотенцией – у быка Месяца 996. В ветви К.М. Айвенго Белла 167366 этой же линии некроспермией – у быков Варианта 28005, Тумана 771 и азооспермией – у быка Кинжала 685. Аномалии половой функции встречались и в других ветвях этой генеалогической линии. В родословной голштинских чѐрно-пѐстрых быков из линии С.Т. Рокит по причине аномалий половой системы выбыло восемь быков-спермодоноров. Из трѐх сыновей Суперстара 345653, принадлежащего к ветви Ройбрук Старлайт 308691, два быка выбыли по причине некроспермии. Из десяти сыновей Экми 82 93/320384 два выбыли по причине снижения половой потенции. Встречаются аномалии половой функции и в ветви Ройбрук Темпо 330643, которые выражены некроспермией – у быка Тибета 15871 и быка Одуванчика 1847. В ветви голштинских красно-пѐстрых быков этой же линии по причине аномалий половой функции выбыло пять быков, четыре из которых принадлежали ветви Гленафтон Эн Ханкера 343514, 503283. По причине некроспермии выбыли быки Стриж ЕТ 3964 и Барьер 16236. Бык Лувр 4648 и аспермии – бык Смирный ЕТ 35256. В ветви голштинских чѐрно-пѐстрых быков линии Рз. Ситейшн выявлены два быка с олигоспермией, оба являются сыновьями быка Апельсина 167. В схеме ветви красно-пѐстрых быков этой же линии выявлено 16 случаев генетических дефектов спермы и аномалий половой системы. Нельзя не отметить случаи таких аномалий в ветви быка Кристана 310451. Из 37 его потомков 12 (32,4 %) выбыло по этой причине (табл. 4). Таблица 4 Структура генетических дефектов спермы и андрологических расстройств у потомков быка Кристана 310451 линии Рз. Ситейшн Генетические дефекты спермы и андрологические заболевания и расстройства Снижение половой потенции Некроспермия Олигоспермия Аспермия Итого Количество выбывших быков, гол. Доля выбывших быков к общему числу аномалий, % 1 6 3 2 12 8,3 50,0 25,0 16,7 100 Наиболее часто встречается некроспермия и олигоспермия 50,0 и 25,0 % соответственно. Обращает на себя внимание ветвь Ахорна Ситейшн Рэда 502018, 1430145, в частности сыновья и внуки Файерстера 4752. Из 11 быковспермодоноров выбыло по этой причине три быка, что составило 27,3 %. Из шести быков ветви Бескавен Ноблеман 278750 по причине некроспермии и олигоспермии выбыло по одному быку, которые являлись сыновьями Сони Ютси 83 Реда 361904. В ветви красно-пѐстрых быков линии Рф. Соверинг наиболее часто случаи аномалий половой функции, выраженные некроспермией, встречались среди сыновей Кедра 2192 ветви Роланда Рефлекшн Соверинга 229512 – у быков, Клевера 4677, Крема 9902, Ключа 8147. Следует отметить, что данные производители принадлежат к красно-пѐстрой породе. Заказные спаривания маток с быками-производителями голштинской породы способствовали переходу и концентрации аллелей в генофонд новой красно-пѐстрой породы Красноярского края. Кроме того у еще одного потомка данного производителя – быка Кента 44754 при анализе генома были выявлены нарушения выраженные анеуплоидией+полиплоидией+структурными абберациями, что может говорить о нестабильности генома. Фрагмент родословной представлен на рисунке 9. Клевер 4677 (некроспермия) Крем 9902 (некроспермия) Кедр 2192 Ключ 8147 (некроспермия) Кент 44754 (анеуплоидия+полиплоидия+структурные абберации) Рисунок 9 – Фрагмент родословной красно-пѐстрых быков линии Рф. Соверинг Среди сыновей быка Глобуса 699, этой же ветви, некроспермия встречается у быка Катка 15933, а хромосомная нестабильность выявлена у быка Глянца 38154 которая выражена анеуплоидией+полиплоидией. Встречаются и другие аномалии половой функции и в других ветвях данной линии. В ветви чѐрно-пѐстрых быков линии Рф. Соверинг аномалии половой функции встречаются практически во всех ветвях, но наиболее часто среди потоков Г. Блектора 1929410, 502870. Некроспермия была установлена – у быков Восторга 5738 и Вечера 17910. Следует отметить, что данные производители 84 принадлежат к производителей чѐрно-пѐстрой для породе повышения и использование продуктивных качеств голштинских способствовало распространению аномалий половых функций и среди быков этой породы. Кроме того встречаются быки с импотенцией. В ветвях красно-пѐстрой линии В.Б. Айдиал данные аномалии встречаются редко. В ветви чѐрно-пѐстрых быков этой линии аномалии половой функции встречаются среди потомков Астронавта 17, 1680962 и наиболее часто в ветви Р.О.Р. Эппл Элевейшн 1491007. Так как быки чѐрно-пѐстрой ветви данной линии используются в скрещивании с чѐрно-пѐстрой породой, угроза распространения этих аномалий среди быковоспроизводящей группы коров племенных заводов может возрасти, что мы и наблюдаем среди потомков быков этой линии в чѐрнопѐстрой породе. В ветви красно-пѐстрых быков Линии П. Говернер встречаются быки с некроспермией среди внуков Кавемана 1842371. По причине некроспермии выбыл из воспроизводства бык Видный 3382. У быка Контура 3352 обнаружена анеуплоидия. Среди потомков быка Ириса 4164, используемых в воспроизводстве, некроспермия была установлена у его сыновей – Истока 26430 и Итога 4606. Среди быков симментальской породы выявлены аномалии половой функции у производителей немецких родственных групп: Хаксля 2356 – у сыновей Хана 679 – Ханкуля 24301 и Хмеля 24461 аномалии выражены некроспермией; быка Префекта 32840 (в данном случае следует отметить, что от быка со спастическим парезом получен потомок с некроспермией. В литературе нет данных по влиянию спастического пареза на аномалии половой функции и изза небольшого количества потомков использующихся в качестве спермодоноров установить связь между данными аномалиями не представляется возможным); быков Метза 47574 и Редада 6514. Среди быков красно-пѐстрой породы линии Шейлимара 2656070 некроспермия встречается среди потомков сыновей Этана 55165 – у быков Эмира 85 4269, Ловца 9872 и Эвереста 4643 и Маяка 784 потомка быка Малта 4046. С началом ввоза быков-производителей и в дальнейшем использование их потомков в селекции был отмечен рост доли выбывших животных по причине: некроспермии (с 27,3 % в первый и до 66,7 % в четвѐртый период); аспермии 9,1 % до от 19,0 % соответственно. Доля выбывших быков по причине олигоспермии была значительной во второй и третий периоды 20,0 % и 15,0 % соответственно, но снизилась до 4,8 % в четвѐртый период. Произошел переход и концентрация аллелей вызывающих аномалии половой функции у быков от производителей голштинской породы в генофонд красно-пѐстрой и чѐрно-пѐстрой пород. Генофонд голштинских быков способствовал усилению генетического груза среди популяции крупного рогатого скота Красноярского края. Об усилении влияния генофонда голштинской породы на генофонд красно-пѐстрой породы говорит тот факт, что в родословных матерей быков с некроспермией встречаются быки-производители голштинской породы, выбывшие из племенного использования по причинам аномалий половой функции. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что отсутствие глубокой всесторонней генетической экспертизы в современной селекционной работе может привести к распространению аномалий половой функции среди быков-спермодоноров голштинской, красно-пѐстрой, чѐрно-пѐстрой и симментальской пород. 3.2 Распространение спастического пареза среди быков-спермодоноров В данных исследованиях проводился анализ распространения спастического пареза в племенных популяциях крупного рогатого скота Красноярского края и влияния генофонда голштинских и симментальских производителей (импортной селекции) на его распространение. Как мы уже отмечали в первой главе спастический парез является одной из 86 распространѐнных аномалий крупного рогатого скота, причиняющих хозяйствам значительный экономический ущерб. Фенотипическое проявление данного заболевания характеризуется трудностями при вставании, хромотой одной или обеих задних конечностей, прямой постановкой задних конечностей, прогнутостью спины, укорочением пястного сухожильного сочленения и судорогами бедренной мускулатуры. Степень тяжести болезни и еѐ симптомы различаются. Племенные быки, поражѐнные спастическим парезом, обычно используются более короткий период, чем здоровые производители (Визнер Э., 1979, С. 280; Воронин И.И., 1979, С. 95). Нами была проанализирована частота проявления спастического пареза среди быков ОАО «Красноярскагроплем» за период с 1979 по 2012 год. В качестве первичных данных о причинах выбытия, происхождении, породности быков использовали записи из племенных карточек (форма 1-мол). При анализе учитывалась принадлежность пробанда симментальской (без учета линий) или голштинской породе линий П. Говернер, Рз. Ситейшн, М. Чифтейн, С.Т. Рокит, Рф. Соверинг, В.Б. Айдиал, к помесям этих двух пород, а также к красно-пѐстрой и чѐрно-пѐстрой породам. В случае выявления у животного заболевания спастическим парезом проводился анализ родословной. Кроме того, мы учитывали их экогенез. До начала 80-х годов ХХ века в Красноярском крае основные массивы стад молочного и молочно-мясного направления были представлены симментальской породой. С целью улучшения продуктивных качеств скота в край начали завозить голштинских быков, преимущественно, немецкой и датской селекции. Но ввозимые животные не проверялись на носительство наследственных аномалий и болезней. Анализ динамики заболевания быков ОАО «Красноярскагроплем» показал, что в среднем по причине заболевания спастическим парезом в год выбывало 7,3 % быков. Причѐм, если за 1979-1984 гг. среди симментальских быков доля выбывших по причине заболевания спастическим парезом составила в среднем 3,3 %, то с 1985 года доля выбывших по этой причине начинает возрастать за счѐт ввозимых производителей голштинской породы, а также их 87 помесного потомства. Использование голштинских производителей чѐрнопѐстрой популяции в маточных стадах чѐрно-пѐстрой породы, способствовало распространению этого заболевания и среди быков данной породы. Так как красно-пѐстрая порода была выведена с помощью сложного воспроизводительного скрещивания быков голштинской породы с матками симментальской породы, данный аллель получил своѐ распространение и среди быков этой породы (рис. 10). Всего среди выбывших из-за заболевания спастическим парезом за период исследования голштинские, симментальские, красно-пѐстрые и чѐрно-пѐстрые производители составили 62,0 %, 28,6 %, 7,1 % и 2,3 % соответственно. Средний возраст при выбраковке быков по причине заболевания спастическим парезом составил 4,8 года (56 месяцев), т. е. животные выбывали из стада в период наивысшей продуктивности. Для выявления основного источника описываемого наследственного дефекта было проанализировано, откуда поступили заболевшие животные. Оказалось, что 38,0 % быков в разное время были импортированы из Германии, причѐм только четыре быка были симментальской породы, остальные больные быки оказались высококровными помесями по голштинской породе. Из-за возросшего спроса на быков симментальской породы с 1995 года ОАО «Красноярскагроплем» снова стало ввозить быков данной породы. Быкипроизводители завозились из Германии. И в этой группе вновь были выявлены животные с данным заболеванием. По причине спастического пареза из завезѐнной группы быков выбыло 23,8 %. Были выявлены быки, имеющие общих предков: Новый 985215, Номер 5023133, которые являются сыновьями быка Хумберга 24844, принадлежащего к родственной группе Префекта 32840. Заболевания спастическим парезом отмечалось и в других родственных группах. 88 Рисунок 10 – Динамика частоты спастического пареза среди быков ОАО «Красноярскагроплем» 89 Кроме того, следует отметить тот факт, что 24,6 % животных происходили из популяции ОАО ПЗ «Бородинский» Республики Хакасия. При этом 14,0 % из них были симментальской породы, а 10,6 % помеси симменталхголштинской с разной долей кровности. По-видимому, в материнском стаде ОАО ПЗ «Бородинский» высока гетерозиготность по данному наследственному заболеванию, что возможно и спровоцировало резкое возрастание частоты данного заболевания среди помесей симменталхголштинов. Следует отметить, что формирование стада ОАО ПЗ «Бородинский» шло в основном под влиянием генотипов ввозимых быков. Не полная пенетрантность не даѐт возможности раскрыть реальные масштабы распространения этого дефекта в популяции. Проведя линейный анализ быков установили, что наиболее неблагополучной линией по заболеваемости спастическим парезом являются быки линии М. Чифтейн – 38,0 % (рис. 11) от всех заболевших животных, причѐм из них 44,0 % составили сыновья, внуки и правнуки быка Хилтона 4901. 18,7% 38,0% 14,8% М. Чифтейн Р. Соверинг С.Т. Рокит 6,2% Р. Ситейшн 12,3% В.Б. Айдиал 12,5% П. Говернер Рисунок 11 - Частота заболевания спастическим парезом среди быков разных генеалогических линий Из 17 его сыновей 5 (29,4 %) были выбракованы по заболеванию спастическим парезом. Кроме того, при генеалогическом анализе выявлено два случая, когда заболевание проявилось у отца и сына (рис. 12). 90 ХИЛТОН 4901- ЛУИДОР 4005 ● АЗОВ 2548 ● 1883** ХОРД 8063 ● ГЕНЕРАЛ 90597 ● Рисунок 12 – Фрагмент схемы родословной линии М. Чифтейн ● – заболевшие спастическим парезом животные; ** – нет сведений При более глубоком анализе родословной быка Генерала установили, что по материнской линии прадедом является бык Хилтон 4901, т. е., имеет место инбридинг в степени II-III, что могло способствовать накоплению и проявлению рецессивных генов. Можно предположить, Хилтон 4901-1883 является гетерозиготным носителем гена предрасположенности к спастическому парезу. Нужно отметить, что среди 18 сыновей Хюнса 6029327, сына Хилтона, не было ни одного заболевшего спастическим парезом. Для того чтобы определить соотношение генотипов в группе быковспермодоноров потомков быка Хилтона применили формулу Харди-Вайнберга. В результате произведѐнных расчѐтов определили, что частота рецессивного генотипа составила 15,4 %, а частота гетерозиготных носителей в группе быков 47,6 %, т. е. половина потомков данного быка является носителем данной рецессивной аномалии. У потомков быка Рейна 470 той же линии частота рецессивного генотипа составила 13,8 %, а гетерозиготных носителей 46,7 %. Как видим величина генетического груза быков линии М. Чифтейн по данному заболеванию очень велика. Так как сперма этих быков использовалась на большом поголовье коров, существует большая вероятность распространения спастического пареза в маточных стадах. Анализ родословных быков выбывших по причине спастического пареза показал, что многие заболевшие быки являются потомками быков-спермодоноров Рекса 502052 линии Рф. Соверинг (в 7,1 % случаев) и быка Вуза 1611 91 симментальской породы (в 8,5 % случаев), с материнской и отцовской сторон. На ОАО «Красноярскагроплем» отсутствуют полные сведения о проданных в другие хозяйства быках, поэтому нет возможности оценить реальные масштабы распространения данного вида генетического груза в популяциях крупного рогатого скота Средней Сибири. Таким образом, в результате исследования установили, что доля выбытия быков по причине заболевания спастическим парезом за исследуемые периоды значительно возросла. Основную долю выбывших быков составили голштинские производители 62,0 % и 28,6 % симментальские быки. Использование генофонда голштинских и симментальских производителей импортной селекции способствовало распространению данного аллеля среди быков красно-пѐстрой (7,1 %) и чѐрно-пѐстрой (2,3 %) пород. Кроме того, было установлено, что основными источниками описываемого наследственного дефекта оказались быки, импортированные из Германии и животные, происходившие из популяции ОАО ПЗ «Бородинский» Республики Хакасия. 3.3 Распространение ВLAD и CVM-мутаций у быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем» В племенных предприятиях по искусственному осеменению отбор быковпроизводителей проводится в несколько этапов: по происхождению предков, собственному развитию в постнатальный период, фертильности и качеству получаемой спермопродукции (Мымрин В., 2012, С. 2). Принятая в нашей стране система основана на оценке продуктивных качеств дочерей быков. Биологические особенности крупного рогатого скота позволяют сделать выводы о племенной ценности быков-спермодоноров во временном периоде равном пяти годам (Янчуков И., 2011). Поэтому быки-производители, не оцененные на носительство генетических аномалий, могут значительно повлиять на генетический груз популяции крупного рогатого скота и свести работу селекционеров по повышению продуктивных качеств скота к нулю. 92 Спермопродукция, получаемая в племенных предприятиях по искусственному осеменению, от быков носителей генетических аномалий может быть реализована в другие регионы страны. Так как большинство генетических аномалий обусловлено влиянием аутосомных рецессивных факторов, то это может способствовать накоплению рецессивных генов и при спаривании особейносителей, способствовать их проявлению. В данном случае встает вопрос о генетической безопасности популяции животных. Возникающие генетические аномалии, до недавнего времени, сложно было или невозможно тестировать у особей-носителей, но с развитием молекулярной генетики стало возможно выявлять носителей до времени его племенного использования. При положительном ответе на носительство – выбраковывать из воспроизводства. Современные технологии позволили выявить BLAD и CVM -мутации среди крупного рогатого скота голштинской породы, наследуемые по аутосомнорецессивному типу с полной пенетрантностью (Sangalli S., 1994; Mirck M.H., 1995; Taintuteer D., 1995; Fesus L., 1995). Фенотипическое проявление данной аномалии у животных, геногеография данных мутаций описана в первой главе. Так как Красноярского основным края «Красноярскагроплем», и поставщиком некоторые было спермопродукции Российские обследовано регионы, поголовье в хозяйства является быков на ОАО предмет носительства данных летальных генов. Методами ДНК-технологий в лаборатории молекулярной генетики ВНИИплем была проведена оценка генотипа быков на носительство CVM- и BLAD-мутаций среди 278 быков принадлежащих к симментальской породе (n=65), голштинской красно-пестрой популяции (n=38), голштинской чѐрнопѐстрой популяции (n=22), красно-пѐстрой (n=110), чѐрно-пѐстрой породы (n=43). Проведенные исследования среди быков ОАО «Красноярскагроплем» на носительство BLАD-мутации (BL-мутация) выявило эту аномалию – у Муската 8520 (линия С.Т. Рокит) и Мундира 92094 (линия С.Т. Рокит). Изучив генеалогию данных быков, установили их принадлежность к голштинской породе красно- 93 пѐстрой популяции, причѐм бык Мускат является отцом быка Мундира (рис. 13). ЛАНГЕ 344046 →МУСКАТ 8520 →МУНДИР 92094 (красно-пѐстрая голштинская) Рисунок 13 – Фрагмент схемы родословной быков носителей BL-мутации Анализ места происхождения этих быков показал, что Мускат рожден в ОАО ПЗ «Бородинский» Республика Хакасия, а бык Мундир в ЗАО ПЗ «Краснотуранский». Так как эта аномалия наследуется по аутосомно- рецессивному типу можно сделать вывод о том, что быковоспроизводящее поголовье в ОАО ПЗ «Бородинский» отягчено наличием этого рецессивного аллеля, поэтому необходимо для быковоспроизводящей группы коров ввести тестирование на BL-мутацию. Анализ генотипов быков на CVM-мутацию выявил наличие этой аллели в гетерозиготном состоянии у быка Багульника 2063 (линия В.Б. Айдиал) чѐрнопѐстрой породы и быка Диктанта 29475 красно-пѐстрой породы (линия Рф. Соверинг). В результате анализа родословной быка Багульника установили наличие умеренного инбридинга на производителя О. Айвенго 11899870 US0001189870 голштинской породы чѐрно-пѐстрой популяции в степени III-IV. Диктант 29475 был рожден также в ЗАО ПЗ «Краснотуранский», общих предков в родословной не обнаружено. Это еще раз подтверждает необходимость тестирования на аномалии быковоспроизводящую группу коров. Оценка воспроизводительной способности коров, осемененных спермой быков носителей BLАD- и CVM-мутаций не показала отличий по основным показателям (табл. 5). Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что использование быков-спермодоноров голштинской и других коммерческих пород, без глубокого анализа их генотипа, способствовало проникновению и распространению данных аутосомных летальных мутаций в генофонде краснопѐстрой и чѐрно-пѐстрой пород. 94 Таблица 5 – Показатели воспроизводительной способности коров и телок по Красноярскому краю Быкипроизводите ли Искусственно осеменено коров и телок, гол всего Быки свободные от CVM и 177501 BLADмутаций Мускат 8520 64434 (BL) в т. ч. тѐлок Плодотворно осеменено коров и телок, голов всего % Получено живых телят, гол всего в т. ч. бычков тѐлочек Мертворожд ения Аборты Выбыло стельных голов % гол % голо в % 21287 146116 82,3 135431 68528 66903 3743 2,6 3044 2,1 3898 2,7 8763 53380 82,8 49307 24949 24358 1465 2,7 1196 2,2 1412 2,6 Мундир 92094 (BL) 7622 991 6311 82,8 5810 2940 2870 182 2,9 149 2,4 170 2,7 Багульник 2063 (CVM) 33840 4409 31595 93,4 29475 14914 14561 715 2,3 583 1,8 822 2,6 95 3.4 Связь геномных мутаций с воспроизводительной способностью быков-спермодоноров Так как воспроизводство животных в современных условиях базируется на использовании искусственного осеменения это даѐт возможность сократить поголовье производителей и сосредоточить их в племенных предприятиях по искусственному осеменению. В результате не только увеличивается влияние отдельных производителей на повышение продуктивности потомства, но и возрастает опасность широкого распространения скрытых генетических дефектов, носителями которых они могут быть (Четвертакова Е.В., 2014 а). Современная селекционная работа предусматривает ввод в популяцию новых животных, например, импорт быков для улучшения местных пород животных. В результате происходит изменение генных частот. В популяцию могут быть введены не только желательные гены, но и такие, которые обусловливают аномалии, снижение жизнеспособности, воспроизводительных качеств и т. д. К сожалению, используемые сейчас методы аттестации быков по качеству потомства не дают полной информации о генотипе, особенно о дефектах хромосомных наборов. В таких условиях, чтобы не допустить массового распространения наследственной патологии, необходим цитогенетический мониторинг племенных быков. Цитогенетический подход, выбранный нами, является важным инструментом в решении кардинальных общегенетических и экологических проблем. Цитогенетический мониторинг позволяет оперативно контролировать изменения, происходящие в кариотипе племенных животных в ходе селекции. Создается возможность для определения частоты и характера нарушений отдельных хромосом; изучения закономерностей микроэволюции кариотипа в ходе селекции. Постоянный мониторинг изменений генетической структуры популяций позволяет улавливать изменения и прогнозировать их дальнейшие последствия. 96 Наряду с индуцированными мутациями в популяциях высок уровень спонтанного мутагенеза. К перестройкам спонтанного происхождения можно отнести сбалансированные и несбалансированные структурные перестройки хромосом. Носители сбалансированных нормальный фенотип, структурных однако, они перестроек дают хромосом значительный имеют процент несбалансированных по набору хромосом гамет. Неспецифические хромосомные аберрации, возникающие в митозе и мейозе, характеризуют фенотип хромосомной нестабильности (Ярыгин В.И. и др., 2000, С. 152). Анализ распространения данного фенотипа при создании новых пород и породных типов скота позволяет дать эколого-генетическую характеристику формирующейся популяции быков-спермодоноров, используемых в системе разведения Красноярского края. Поэтому целью данного раздела было проведение исследования цитогенетической аттестации племенных быков краснопѐстрой породы, спермопродукция которых используется в племенном скотоводстве Красноярского края и других регионах России. Кариотип крупного рогатого скота в норме включает 60 хромосом. Все хромосомы у этого вида представлены акроцентриками, постепенно убывающими в размерах. Х-хромосома – крупный субметацентрик, У-хромосома – самый мелкий элемент хромосомного набора (Графодатский А.С. и др., 1988, С. 128). Некоторыми авторами описано два морфологических варианта У-хромосом: акроцентрическая и субметацентрическая (Kieffer N.M., 1968; Pinheiro L.E.L., 1980). У большинства У-хромосома представлена элементом с чѐтко выраженной двуплечей структурой. Половые хромосомы у самок – XX и у самцов – XY. В литературе имеются данные о цитогенетическом исследовании популяций крупного рогатого скота в регионах Украины, Урала, Московской области где анализировались животные сычевской, костромской, лебединской и чѐрнопѐстрой пород (Жигачѐв А.И., 1984; Качура В.С., 1985, Бакай А. и др., 2012). По результатам этих исследований было установлено, что породы существенно отличаются по спектру аномалий кариотипа. В ранее проведенных нашей лабораторией исследованиях было 97 установлено, что у трѐх быков ОАО «Красноярскагроплем» из 105 имелись отклонения от стандарта вида: один из них был гетерозиготным носителем РТ 1/29 – бык Ураган 8445 (линия Рз. Ситейшн 267150) потомок Лестера 967, другой имел химеризм по половым хромосомам – представитель линии М. Чифтейн 95676 бык Венок 19; у быка Юриста 533 той же линии наблюдалась полиплоидия, которая обнаружилась в 40,0 % клеток. По форме своего проявления это были триплоидные клетки, содержащие 3n хромосом. В дальнейшем бык Юрист 533 проявил положительную реакцию в РИД на лейкоз и был выбракован с племпредприятия. Потомки быка Лестера имели различные отклонения – в том числе и полиплоидию, у быка Сильного 82654 и быка Глобуса 8459 была выявлена низкая оплодотворяющая способность спермы, как предполагали авторы, в следствие несбалансированного генома (Кригер Н.В., 1991; 1994, С. 53; Злотникова О.В. и др., 2003 а, С. 70). В исследованиях Морозовой О.В. (2000, С. 97) были выявлены быки, принадлежащие линии П. Говернера Иркут 9355, с Робертсоновской транслокацией РТ 1/29 и Ирис 4164 в соматических клетках которого наблюдался высокий уровень следующих хромосомных аберраций – 91,0 % клеток с 2-4 ассоциациями хромосом в каждой; 26,0 % клеток с хроматидными и хромосомными разрывами; тенденция к «закольцовыванию» акроцентрических хромосом, что может свидетельствовать о нарушениях в теломерных участках. Такое свойство хромосом, по данным ряда авторов, может способствовать формированию, например, хромосомных транслокаций. Бык Иркут является потомком, полученным от скрещивания животных голштинской и симментальской пород. Он был получен с использованием инбридинга III-III на голштинского быка Гановер Ред 1629391, а с материнской стороны в родословной встречаются представители симментальской линии Сигнала, известной в литературе своей насыщенностью РТ 1/29 (Жигачѐв А.И., 1989). Воспроизводительные качества быков можно считать интегральной характеристикой их адаптивного потенциала, так как при воздействии на 98 организм экстремальных (т. е. по силе воздействия превосходящих возможности организма адаптироваться с минимальными потерями) факторов в первую очередь страдают иммунная и репродуктивная системы (Четвертакова Е.В. и др., 2009, С. 61). Хромосомная нестабильность, характеризующаяся повышенным процентом полиплоидных клеток, анеуплоидией, разрывами и ассоциациями хромосом в соматических клетках, может свидетельствовать о нарушениях в системе иммунного ответа и впоследствии проявлять себя в потомстве повышенным числом конституциональных нарушений (Четвертакова Е.В. и др., 2009, С. 63). Неспособность организма компенсировать негативное действия факторов как экзогенных так и эндогенных в первую очередь выражается во всевозможных отклонениях в воспроизводительной системе по принципу «слабого звена», таким образом, снижая адаптивную ценность животного (Четвертакова Е.В. и др., 2009, С. 63). Следовательно, воспроизводительные качества быков можно считать интегральной характеристикой их адаптивного потенциала, т. е. свойств их нейрогуморальной и иммунной систем сохранять целостность организма (Четвертакова Е.В. и др., 2009, С. 63). Рядом авторов была установлена отрицательная связь уровня спонтанной кариотипической изменчивости крупного рогатого скота с различным уровнем продуктивности и воспроизводительных функций (Семѐнов А.В., 1986; Бакай А.В., 1988). Кариологические обследования быков красно-пѐстрой породы ОАО «Красноярскагроплем» были проведены в лаборатории генетики ВНИИплем с использованием культуры лимфоцитов периферической крови по общепринятым методикам. Были выявлены группы быков с анеуплоидией, полиплоидией и структурными нарушениями. Следует отметить, что у некоторых быков одновременно встречалось несколько нарушений кариотипа. Всего было обследовано 46 быков и у 11 были установлены нарушения: анеуплоидия – 2 быка; структурные нарушения – 4 быка; анеуплоидия + структурные нарушения – 99 2 быка; анеуплоидия + полиплоидия – 2 быка; анеуплоидии + полиплоидия + структурные нарушения – 1 бык. Количество клеток с анеуплоидией колебалось у разных быков от 14,6 % до 25,0 %; полиплоидных от 1,1 % до 1,4 %; со структурными нарушениями от 7,1 % – до 12,5 % (приложение А). Для оценки воспроизводительных качеств быки с разными аномалиями кариотипа сравнивали со сверстниками без аномалий кариотипа (табл. 6). Таблица 6 – Воспроизводительная способность быков с аномалиями кариотипа Показатели спермопродукции, в среднем от одного быка получено Группы семени за брак концент количество объем быков год, мл нативного рация, садок, эякулята. мл (пределы семени, мл млрд./мл штук колебаний) 1 группа 190±33,9 38,3±7,2 1,13±0,04 54,4±8,9 3,39±0,20 (контроль) (41,5-361,5) (7,5-73,6) (0,96-1,49) (17-104,6) (2,42-4,42) 2 группа 253±64,0 34,5±9,9 1,17±0,02 71,5±13,9 3,44±0,25 (114-377) (17-62) (1,09-1,21) (37-101) (2,97-4,05) 3 группа 70±6,0** 12,0±2,0** 0,92±0,12 26,2±0,75* 2,68±0,12** (64-76) (10-14) (0,8-1,05) * (2,55-2,81) (25,5-27) 4 группа 240±91,0 96,7±6,0*** 1,14±0,18 60,7±20,7 3,77±0,003 (149-332) (90,6-102,7) (0,96-1,32) (40-81,3) (376-3,77) 5 группа 257±4,2 86,9±7,9*** 1,02±0,03* 74,2±6,2 3,37±0,34 (252-261) (79-94,8) (0,98-1,05) (68-80,3) (3,12-3,8) 6 группа 444 138,5 1,21 98,2 4,1 (40-649) (26-185) (1,15-1,26) (18-156) (2,22-5,56) 1 группа - без аномалий кариотипа; 2 группа - структурные нарушения; 3 группа – анеуплоидия; 4 группа - анеуплоидия+структурные нарушения; 5 группа - анеуплоидия+полиплоидия; 6 группа - анеуплоидия+полиплоидия+структурные нарушения. * - Р>0,95; ** - Р>0,99; *** - Р>0,999 При сравнении быков 1 группы с быками с высокой долей анеуплоидных клеток (3 группа) установили, что в среднем семени от них получали на одного быка меньше на 120 мл (Р>0,99), они неохотнее шли на садку на 28,2 раз (Р>0,99) и концентрация сперматозоидов у них была меньше на 0,71 млрд./мл. (Р>0,99), но нативного семени от них выбраковывали меньше, чем от быков 1 группы на 26,3 100 мл. (Р>0,99). Применение дисперсионного анализа, для выявления доли влияния данного фактора на воспроизводительные показатели быков, показало, что концентрация сперматозоидов на 24,95 % зависит от данного фактора, брак семени на 17,03 %, количество полученного семени на 16,15 % и объем эякулята на 15,68 %. От быков-производителей 4 и 5 группы семени отбраковывали больше на 58,3 мл (Р>0,999) и 48,5 мл (Р>0,999), чем от быков 1 группы. Доля влияния данного факторов в этих группах оказалась высокой 49,77 % в четвертой и 40,51 % в пятой группе. У быка-спермодонора из 6 группы пределы колебаний по изучаемым показателям оказались значительными (табл. 6). Доля влияния данного фактора (геномные перестройки) на отбраковку нативного семени составила 61,59 %. Важным показателям в условиях искусственного осеменения является способность спермиев к криоконсервации. Поэтому мы проанализировали способность спермиев у быков с разными кариологическими нарушениями переносить низкотемпературное охлаждение: 1 группа – структурные нарушения; 2 группа – анеуплоидия; 3 группа – анеуплоидия + структурные нарушения; 4 группа – анеуплоидия + полиплоидия; 5 группа – анеуплоидия + полиплоидия + структурные нарушения. Количество глубоко охлажденных спермодоз на одного быка производителя в год показано на рисунке 14. 12000 9653 доз, штук 10000 8000 6000 Заморожено доз в среднем на одного быка, штук 5410 4394 3507 4000 2000 1000 0 1 2 3 4 5 группа Рисунок 14 – Количество глубокоохлажденных спермодоз на одного быка-производителя в среднем в год, штук 101 Доля отбракованных спермодоз от быков с кариологическими нарушениями приведены на рисунке 15. 5 4,5 4,5 4,4 4 доля,% 3,5 3 2,5 2,02 2 4 5 2 Отбраковано, % от одного быка 1,5 1 0,5 0,5 0 1 2 3 группа Рисунок 15 – Доля отбракованных спермодоз на одного быка в среднем в год, % Достоверных различий между группами быков с геномными перестройками по способности спермиев к криоконсервации установлено не было, хотя доля отбракованных эякулятов была больше в группе быков со структурными нарушениями и быками с анеуплоидией + структурными нарушениями в кариотипе 4,5 % и 4,4 % соответственно. Одним из значимых показателей является индекс осеменения, который показывает какое количество осеменений было затрачено на одно плодотворное осеменение маток в хозяйствах края. Оптимальным считается 1,5, хорошим – 1,61,8, удовлетворительным – 1,9-2,0 и плохим – 2,1 и более (Болгов А.А., 2003). В группе быков со структурными нарушениями индекс осеменения у быка Ходока 8910 составил – 1,76; быка Предлога 9237 – 1,1; быка Мороза 21746 – 2,3, так как бык Спринт 658 был продан в ГСХП «Бурятское» данных по осеменениям в нашем крае в ОАО «Красноярскагроплем» не было. Как видим данный показатель в группе значительно варьирует и может зависеть от ряда других факторов. У быков с анеуплоидией не удалось рассчитать данный показатель, так как 102 бык Контур 3352 дал положительную реакцию в ИРТ (инфекционный ринотрахеит) и был выведен из племенного использования, а бык Монитор 37905 был продан в племенное предприятие другого региона. У быков с анеуплоидией и структурными нарушениями индекс осеменения был плохим и составил у быка Хавбека 670 – 2,01, быка Музыканта 9726 – 2,37. У быков с анеуплоидией и полиплоидией он составил у Глянца 38154 –1,54, Рокота 22062 – 2,11. У быка Кента 44754 были выявлены высокий уровень анеуплоидии – 25 %, полиплоидии 1,4 % и клеток со структурными нарушениями – 12,5 %. Индекс осеменения составил – 2. Таким образом, нами выявлено ухудшение ряда параметров воспроизводительной системы у быков, имеющих аберрации в кариотипе. С увеличением количества и форм кариологических нарушений снижается качество спермопродукции и значительную часть полученного биоматериала приходится выбраковывать. От быков с анеуплоидией (3 группа), при сравнении с быками первой группы, получали меньше семени в расчете на одного быка на 120 мл ((Р>0,99), отмечено снижение половой активности в результате чего они реже шли на садку (Р>0,99), снижена концентрация сперматозоидов на 0,71 млрд./мл. (Р>0,99). Применение дисперсионного анализа показало, что концентрация спермиев у быков со структурными нарушениями на 24,95 % зависит от этого фактора. Нативного семени отбраковывали больше от быков с анеуплоидией+структурные нарушения (4 группа) на 58, 3 мл (Р>0,999) и от быков с анеуплоидией+полиплоидия на 48,5 мл. (Р>0,999), по сравнению с быками без аномалий кариотипа (1 группа). Доля влияния данного фактора на выбраковку нативного семени составила в четвѐртой и пятой группах 49,77 % и 40, 51 % соответственно. Геномные перестройки не повлияли на способность сперматозоидов к криоконсервации. Индекс осеменения быков с разными хромосомными перестройками, в 103 основном, был плохим. Индекс осеменения в группе быков со структурными нарушениями кариотипа колебался от 1,1 у быка Предлога до 2,3 у быка Мороза. У быков с анеуплоидией+структурные нарушения индекс осеменения был плохим у всех быков. У быка с анеуплоидией + полиплоидией + структурные нарушения индекс осеменения также был плохим. Таким образом, мониторинг популяции крупного рогатого скота на геномные аномалии в Красноярском крае, позволит выявлять изменения и прогнозировать их последствия. 3.5 Мониторинг распространения аномалий в стаде крупного рогатого скота Красноярского края Эмбриональная смертность обусловлена комплексом внешних и внутренних фактов (Анзоров В.А. и др., 2003), поэтому реализация репродуктивного потенциала выражается в конечном итоге в способности животных производить жизнеспособное потомство. Поэтому в несколько этапов нами были проведены исследования в стаде коров в ФГУП «Курагинское» Россельхозакадемии Курагинского района Красноярского края в котором часто встречались мѐртворождения, аборты, высокий процент повторных осеменений и рождение животных с фенотипическими аномалиями. Нами на первом этапе работы было проанализировано поступление спермопродукции с племенных предприятий Красноярского края и Хакасии. Выяснилось, что большая часть спермопродукции поступала из ОАО «Красноярскагроплем». В соответствии с планом ротации, на момент исследования, в хозяйстве использовались быки линии П. Говернер Висмут 0011, Умелый ЕТ 9601, Фотон 2412, Пунш 2346, спермопродукция которых имела низкую переживаемость семени. Мы проанализировали данные о результативности осеменений (табл. 7) коров и нетелей спермой этих быков-спермодоноров. 104 Таблица 7 – Количество первично и повторно осеменѐнных коров и тѐлок в ФГУП «Курагинское» Россельхозакадемии Доля аномальных Осеменено форм спермиев, % Индекс в в т.ч. Быкив осемен нативн повторно производители криоконсер всего, ения ом вированно гол. семен голов % м семени и 1996 год Висмут 0011 * * 459 137 29,8 1,4 Умелый ЕТ-9601 * * 245 28 11,4 1,1 Другие 200 13 6,5 1,1 1997 год Висмут 11 14,0 35,0 237 23 9,7 1,1 Умелый ЕТ-9601 20,0 27,0 48 21 43,7 1,8 Фотон 2412 16,0 34,3 144 38 26,4 1,4 Другие 529 112 21,1 1,3 1998 год Висмут 11 * * 229 68 29,7 1,4 Умелый ЕТ-9601 * * 31 22 71,0 3,4 Фотон 2412 * * 191 39 20,4 1,3 Пунш 2346 * * 9 7 77,8 4,5 Другие 635 131 20,6 1,2 - доля аномальных форм спермиев не определялась; «другие быки» – сперма быков-спермодоноров, закупленная не в ОАО «Красноярскагроплем» Было установлено, что в 1996 году доля повторно осемененных коров и тѐлок спермой быка Висмута 0011 составила 29,8 % от первично осеменѐнных, спермой быка Умелого – 11,4 %, по сравнению с другими быкамиспермодонорами (приложение Б). В 1997 году спермой быка Умелого было осеменено 48 коров, из них повторно 43,7 %, быка Фотона – 144 коровы и нетели и повторно 26,4 %, быка Висмута – 237 голов и повторно – 9,7 %. Причины значительной доли повторных осеменений животных могли быть связаны с высокой долей аномальных форм спермиев, что могло привести к снижению оплодотворяющей способности. Определение доли аномальных форм сперматозоидов в нативной сперме быков Висмута и Фотона показало, что их количество было в пределах нормы, но 105 значительно увеличилось в криоконсервированной сперме. Основную долю составили спермии с аномалиями хвоста и спермии слипшиеся головками как в нативной, так и криоконсервированной сперме (Четвертакова Е.В., и др. 2009). Так как аномальные спермии не способны к оплодотворению в результате увеличивается доля не оплодотворившихся животных. В 1998 году спермой быка Фотона было осеменено 191 коров и нетелей и 20,4 % из них повторно, быка Умелого – 31 коров и нетелей скота и 71,0 % повторно, быка Пунша – 9 голов и 77,8 % повторно, быка Висмута – 229 голов из них 29,7 % повторно. Как видим, сперма быков данной ветви родословной обладает не только низкой переживаемостью, но и в данном хозяйстве значительно увеличивался расход спермодоз на одно плодотворное осеменение. На следующем этапе работы мы учитывали количество абортов и мѐртворождений за ряд лет. Данные представлены на рисунке 16. В 1996 году от общего количества мертворожденных 48,5 % составили телята, полученные от быка Висмута, в 1997 году их доля увеличилась до 69,2 %, затем снизилась – до 27,6 %, в 1998 и – до 7,1 % в 1999 году. Кроме того, в 1998 году доля абортировавших коров от этого быка составила 43,0 %. У быка-производителя Пунша была отмечена высокая доля аномальных форм сперматозоидов в криоконсервированной сперме, а в хозяйстве доля абортировавших коров составила 44,4 %. Так как аномальные формы спермиев способны к оплодотворению, то возможно при аномалии зиготы увеличивается процент абортировавших коров. Соотношение полов мѐртворожденных телят, полученных от разных быков было примерно одинаковым, но от быка Венка 19 линии М. Чифтейн, полученного в ГПЗ «Бородинский», все мѐртворожденные телята (10 голов) были тѐлочками. В более ранних исследованиях (Кригер Н.В., 1994, С. 53) у этого быка была выявлена кариотипическая нестабильность, он являлся носителем химеризма по половым хромосомам. Как правило, от таких быков рождается больше тѐлочек. Кроме того, видимо, наследственность данного производителя отягощена рецессивным летальным фактором. 106 7,67 2012 год 1,58 9,37 3,2 8,8 2010 год 2,6 2,09 0,27 1,69 2008 год 0,1 мѐртворож дения 3,18 0,5 2,32 2006 год 0,19 аборты 3,22 1,04 1,33 2004 год 0,62 3,45 1 2,71 2002 год 0,07 4,1 0,1 5,9% 2000 год 1,47% 3,04% 1,52% 2,65% 1998 год 1,28% 1,36% 1,57% 3,65% 1996 год 1,22% 0 2 4 6 8 10 Рисунок 16 – Доля абортов и мѐртворождений от беременностей в ФГУП "Курагинское", % Отмечается рост мѐртворождений в целом по хозяйству к 2000 году, затем этот показатель незначительно снижается и сохраняется до 2009 года, но с 2010 г увеличивается до 8,8 % и практически не снижается к 2012 г. Доля абортировавших коров незначительно меняется и остаѐтся практически на одном уровне на протяжении всего исследуемого периода. Частота мертворождений и 107 абортов возрастала в тех случаях, когда имел место инбридинг II-I, II,III-I. Например, в результате анализа мертворожденных телят было установлено, что бык Висмут встречается со стороны матери мертворожденных телят в 26 случаях и со стороны отца в 46 случаях, бык Тагил (5/8 красно-пѐстрый голштин) с материнской стороны в 16 случаях и отца – 18. Это может свидетельствовать о повышении гомозиготности по мутантным рецессивным аллелям, которые привели к увеличению случаев мертворождений. В исследуемом стаде за период наблюдений, наибольшее количество: мертворожденных телят было зафиксировано от быков линий М. Чифтейн – 23,6 % (бык Хороший 9580 – 34,9 % от общего количества быков данной линии; бык Репс 20 – 14,4%); Рз. Ситейшн – 20,6 % (бык Ритм 764117329 – 28,0 %); П. Говернер –16,7 % (быки Дюшес 3193 – 32,6 %, Тагил 5438 – 30,7 % и Висмут 0011 – 21,2 %); В.Б. Айдиал – 16,0 % (быки Моникс 1880-7355175 – 32,7 % и Чип 1529909600 – 29,6 % – следует отметить, что оба быка-производителя поступили из Канады); С.Т. Рокит – 12,82% (бык Взлѐт 9769 (976) – 28%); Рф. Соверинг – 10,3% (бык Дуэт 1942 – 23%); абортов – М. Чифтейн – 25,8 % (бык Хороший 9580 – 37,5 %); П. Говернер – 20,2 % (быки Дюшес 3193 – 28,0 % и Тагил 5438 – 24,0 %); Рф. Соверинг – 20,1 % (быки Модист 4233 – 36,0 % и Бенефис 1692 – 24,0 %); В.Б. Айдиал – 12,1 % (бык Моникс 1880 – 26,7 %); С.Т. Рокит – 11,3 % (быки Взлѐт 9769 – 28,6 % и Веселый 2866 – 28,6 %). Кроме этих показателей рассматривали случаи фенотипических аномалий. Были выявлены случаи рождения телят (3♀ : 2♂), от быка-производителя Хорда 8063 (О. Хилтон) линии М. Чифтейн, которые погибли в течение двух дней после рождения. У них наблюдалось неполное очищение зубов от дѐсен, мягкость зубов, телята не могли стоять на ногах. От быка Зефира 9111 линии Рф. Соверинг родился теленок с задержкой роста передних конечностей. Были выявлены телята с недоразвитием желудочно-кишечного тракта (n=2) (бык Зефир 9111), пороками сердца (n=1) (бык Висмут 0011). Был случай асимметрично связанных двоен. Паразит ответвлялся от оси тела аутозита (сформировавшейся особи) в области 108 холки, в виде добавочных пар конечностей. В совхозе «Солонцы», который расположен в пригороде г. Красноярска, родился телѐнок с аномалией, выражающейся в отсутствии рѐбер с седьмого по семнадцатое, в результате чего внутренние органы свободно свешивались и удерживались только брюшной стенкой (рис. 17). Рисунок 17 – Телѐнок с аномалией осевого скелета (отсутствие ребер с 7-го по 17-е) При вскрытии телѐнка аномалий в развитии внутренних органов обнаружено не было. Других телят (в данном стаде) с подобными нарушениями выявлено не было. В литературе подобная аномалия у крупного рогатого скота не описана. Возможно, нарушение произошло на ранней стадии эмбрионального развития под действием неблагоприятных факторов внешней среды. Однако проявлению такого действия фактора должна была способствовать генетически детерминированная чувствительность эмбриона к нему. Таким образом, проведѐнные исследования говорят о том, что ввоз быковпроизводителей способствовал не только улучшению массивов молочного скота, обогащению генофонда желательными аллелями, но к сожалению и 109 способствовал накоплению и распространению генетических дефектов в маточных стадах. Число мертворождений с внедрением генофонда улучшающих пород увеличилось в данном племенном репродукторе с 3,65 % в 1996 году до 7,67 % в 2012 и абортов с 1,22 % до 1,58 % соответственно. Наибольшее число мертворождений зафиксировано от быков линии М. Чифтейн и в частности быка Хорошего 9580 – 34,9% (от общего количества мертворождений от быков данной линии) и быков линии Рз. Ситейшн – 20,62 %, причем значительная доля мертворождений от всех случаев в этой линии приходилась на потомство быка Ритма 764117329 – 28,0 %. Абортировали коровы в основном также от быков линии М. Чифтейн – 25,8 % (37,5 % случаев приходилось на быка Хорошего 9580), П. Говернер – 20,2% (28,0 % и 24,0 % случаев на быков Дюшеса 3193 и Тагила5438 соответственно) и Рф. Соверинг – 20,1 % (36,0 % случаев на быка Модиста 1880). Кроме того были зафиксированы случаи рождения телят с фенотипическими аномалиями от быков линии М. Чифтейн – Хорда 8063 и Рф. Соверинг – Зефира 9111 и Висмута 0011. В связи с этим необходимо проводить мониторинг генетических заболеваний с целью предотвращения распространения аномалий в популяциях крупного рогатого скота. 110 3.6 Влияние эндогенных и экзогенных факторов на биотехнологические показатели спермы быков-производителей 3.6.1 Состояние здоровья и особенности метаболизма быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем» 3.6.1.1 Лейкограмма быков-спермодоноров Исключительной особенностью крови как функциональной системы является то обстоятельство, что она объединяет работу многих физиологических систем организма. Кровь является интегральным показателем состояния организма (Козинец Г.И. и др., 2002, С. 16). Оценку характера течения стресс-реакции можно провести используя подсчет лейкоцитарной формулы (Никитченко И.Н., 1988, С. 23). В клинической практике лейкоцитарная формула имеет большое значение, т. к. при любых изменениях в организме процентное содержание одних видов клеток белой крови увеличивается или уменьшается за счѐт увеличения или уменьшения в той или иной степени других. По ней можно судить о ходе болезненного процесса, появлении осложнений. У внешне здоровых животных изменение лейкограммы служит признаками заболеваний (Алексеева Л., 2005, С. 25). Изменение клеточного состава периферической крови наблюдается не только при патологии, но и при различных состояниях организма. На показатели крови могут влиять физическая нагрузка, сезонные изменения, рацион и т. д. (Козинец Г.И. и др., 2002, С. 27). Повышение эозинофилов в крови рассматривается как проявление защитной функции организма. Понижение эозинофилов обычно считается признаком пониженной иммунной сопротивляемости организма. (Алексеева Л., 2005, С. 26). 111 Повышенное содержание нейтрофилов (нейтрофилез) обычно сочетается с возрастанием числа лейкоцитов в крови и наблюдается при острых бактериальных воспалительных процессах, различных интоксикациях, шоковых состояниях и т. д. Снижение количества нейтрофилов (нейтропения) обычно сочетается с лимфоцитозом. лейкопенией Это и может происходит при сопровождаться вирусных относительным инфекциях, некоторых хронических воспалительных заболеваниях (Козинец Г.И. и др., 2002, С. 47). Лейкограмма быков-спермодоноров приведена в таблице 8. Таблица 8 – Лейкограмма быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем», % Нейтрофилы Показатели Лимф. Баз. Мон. Эоз. Норма 47-66 0-2 3-10 18-30 3-10 0-1 Факт 56,22 0,34 4,13 5,15 19,5 10,5 1,36 0,15 2,5 2-7 с. п. ю. М. Н/а 0 лимф. – лимфоциты; баз. – базофилы; мон. – моноциты; эоз. – эозинофилы; с. – сегментоядерные; п. – палочкоядерные; ю. – юные; м. – метамиелоцит; н/а. – не определена Показатели лейкограммы быков, в среднем, находятся в пределах допустимой нормы. У быков красно-пѐстрой породы: Волана (С.Т. Рокит), Героя (Рз. Ситейшн) и Жемчуга (В.Б. Айдиал) чѐрно-пѐстрой породы обнаружены метамиелоциты, что может говорить о воспалительном процессе в организме животных (приложение В). Таким образом, данные лейкограммы быков показывают удовлетворительное состояние организма. 3.6.1.2 Особенности обменных процессов у быков-спермодоноров Косвенными показателями стрессового состояния животных могут быть содержание общего белка, соотношение альбуминов и глобулинов, количество щелочной фосфотазы, ферментов АЛаТ и АСаТ, макро- и микроэлементов и др. (Никитченко И.Н., 1988, С. 23; Колокольцев Ю.К., 1990; Алексеева Л., 2005). 112 Макро- и микроэлементы играют значительную роль в организме быковспермодоноров. По их количеству и соотношению друг к другу можно судить о состоянии здоровья животного и течении сперматогенеза. Для характеристики обменных процессов у быков-спермодоноров по сезонам года были проведены исследования сыворотки крови в КГКУ «Крайветлаборатория» (приложение Г). Данные приведены в таблице 9. Таблица 9 – Биохимические исследования сыворотки крови быков-спермодоноров по сезонам года Порода быков Кальций моль/л (2,1-3,6) Черно-пестрая (n=12) Красно-пестрая (n=34) Голштинская красно-пестрая (n=2) Голштинская черно-пестрая (n=2) Симментальская (n=3) Все быки (n=53) Черно-пестрая (n=11) Красно-пестрая (n=29) Голштинская красно-пестрая (n=1) Голштинская черно-пестрая (n=2) Симментальская (n=3) Все быки (n=46) 2,91± 0,15 2,62± 0,10 2,37± 0,52 2,41± 0,04 2,81± 0,18 2,68± 0,08 2,67± 0,13 2,81± 0,09 3,06 Фосфор моль/л Общий белок г/л (62-86) (1,4-2,5) Весна 2,27± 80,24± 0,11 2,25 78,39± 2,27±0,05 1,25 Щелочной резерв V% СО2 (46-66) Каротин мг/% (0,4-1) 1,93± 0,005 77,15± 2,85 41,14± 2,89 44,89± 0,41 40,55± 3,35 2,25± 0,14 2,07± 0,13 2,25± 0,004 86,75± 0,45 80,3± 8,06 79,2± 1,04 40,35± 0,45 47,2± 0,79 43,84± 0,74 0,20± 0,005 0,3± 0,03 0,22± 0,007 90,21± 3,01* 90,55± 1,84*** 44,98± 0,52 45,54± 0,32 0,11± 0,005*** 0,11± 0,006*** 2,31± 0,09 2,30± 0,03 Осень 2,39 2,45± 2,24± 0,35 0,13 2,78± 2,12± 0,51 0,1 2,77± 2,29± 0,07 0,03 * - Р>0,95; ** - Р>0,99; *** - Р>0,999 98,7 100,50± 4,0 89,47± 8,1 91,01± 1,4*** 47,5 44,9± 0,1 44,8± 1,37 45,38± 0,25* 0,24± 0,02 0,21± 0,007 0,19± 0,02 0,1 0,1± 0,005** 0,09± 0,01*** 0,11± 0,004*** 113 Содержание кальция и фосфора находится в пределах физиологической нормы. Но кальциево:фосфорное соотношение нарушено у быков всех пород. Содержанию общего белка весной находится в пределах физиологической нормы, но осенью превышает показатели весенних результатов на 11,81 г/л (Р>0,999) и превышает верхнюю границу физиологической нормы на 5,01 г/л. Щелочной резерв, как в весенний период, так и осенний был ниже физиологической нормы. К осени возрос на 1,54 V% СО2 (Р>0,95), но тем не менее был меньше нижней границы физиологической нормы. По содержанию каротина осенний период характеризуется резким снижением данного показателя у быков всех пород (табл. 9). Так как от некоторых быков-спермодоноров в весенний период отбраковывали значительное количество нативного семени по причинам некроспермии, аспермии, олигоспермии, слишком маленького объема эякулята, провели дополнительные исследования крови и сыворотки крови (табл. 10). Таблица 10 – Исследования сыворотки крови на белковые фракции и витамины у быков с высокой долей отбраковки нативного семени Показатель Норма Витамин А 30-90 мкг% Фактическое 42,69 значение ±0,018 Витамин Альбумин αβγЕ глобулин глобулин глобулин 0,13-0,14 мкг% 0,21± 0,004 30-50 % 38,29± 0,43 12-20 % 16,22± 0,23 25-40 % 10-16 % 26,636± 0,60 18,882± 0,60 Содержание витаминов А и Е находится в пределах физиологической нормы. Содержание белковых фракций, кроме γ-глобулина, также находится в пределах физиологической нормы. Повышенное содержание γ-глобулина в сыворотке крови можно объяснить вакцинацией, проведенной в весенний период (приложение Д). Результаты исследований крови на липиды, холестерин и макромикроэлементы приведены в таблице 11. 114 Таблица 11 – Результаты исследования крови быков-производителей с высокой долей отбраковки нативного семени Показате ль Липиды Холест Na ерин K Mg Fe Mn Cu Zn Норма 273303 мг% 50170 мг% 1,72,5 г/кг 0,51,3 г/кг 0,020,03 г/кг 316495 мг/кг 0,150,25 мг/кг 1,42,8 мг/кг 173,9± 5,97 1,41± 1,15± 0,04± 356,9± 0,03 0,10 0,001 8,96 0,91,1 мг/к г Фактичес 262,3± кое 5,13 значение 0,13± 0,9± 1,43± 0,01 0,05 0,20 Обращает на себя внимание тот факт, что количество липидов в крови ниже физиологической нормы на 10,7 мг%. Липиды входят в состав мембраны сперматозоидов и при их недостаточном количестве сперматозоиды теряют адаптационную способность к устойчивости при воздействии факторов внешней среды. Количество холестерина несколько превышает физиологическую норму (приложение Е). По содержанию макро- и микроэлементов фактические значения лежат в пределах физиологической нормы, кроме натрия (табл. 11). Далее мы проанализировали содержание аминокислот в крови быков исследуемой группы (табл. 12) (приложение Ж). Таблица 12 – Содержание аминокислот в крови быков с высокой долей отбраковки нативного семени Фактическое значение аланин валин изолейцин тирозин гистидин лизин 1,10,25 1,7 % % 0,35 % 0,51 % 0,76 % 0,14 % 0,31 % 0,42 % глутамин треонин 0,25 0,8 % 0,25 % % пролин Норма аспарагин Показатель глицин Аминокислоты 0,23 0,74± 0,27± 1,76± 0,29± 0,31± 0,59± ± 0,003 0,003 0,01 0,11 0,004 0,01 0,00 2 0,23± 0,12± 0,25± 0,81± 0,004 0,007 0,002 0,006 115 В крови быков-спермодоноров доля большинства аминокислот меньше нормы. Так как аминокислоты являются конечным продуктом расщепления протеина кормов в пищеварительном тракте животных можно говорить о недостаточном белковом питании быков-спермодоноров. Таким образом, можно сделать следующие выводы: – показатели лейкограммы характеризуют физиологическое состояние быков-спермодоноров как удовлетворительное; – содержание кальция и фосфора в сыворотке крови быков находится в пределах физиологической нормы, однако кальциево:фосфорное соотношение нарушено; – содержанию общего белка весной находится в пределах физиологической нормы, но осенью превышает показатели весенних результатов на 11,81 г/л (Р>0,999) и превышает верхнюю границу физиологической нормы на 5,01 г/л; – щелочной резерв, как в весенний период, так и осенний был ниже физиологической нормы; – содержание витаминов А и Е находится в пределах физиологической нормы; – содержание белковых фракций, кроме γ-глобулина, также находится в пределах физиологической нормы. – количество липидов в крови ниже физиологической нормы на 10,7 мг%; – количество холестерина превышает превышает физиологическую норму; – по содержанию макро- и микроэлементов фактические значения лежат в пределах физиологической нормы; – доля большинства аминокислот в крови ниже физиологической нормы. 116 3.6.2 Качество спермы быков-производителей разных пород в зависимости от сезона года Гаметогенез у быков-производителей является длительным, мультифакторным процессом. Формирование жизнеспособных спермиев зависит как от врожденных функциональных способностей организма быка, так и от ряда экзогенных факторов (Соколовская И.И.,1974; Бурнашева С.А. и др., 1982). Одним из важных факторов, влияющих на сперматогенез является сезон года. Мнение исследователей о влиянии сезона года на показатели спермопродукции быков разных пород рассмотрены в первой главе. Быки-спермодоноры разных пород могут неодинаково реагировать на сезонные изменения и соответственно давать спермопродукцию отличающуюся по качеству. Подобные исследования в условиях Средней Сибири ранее не были проведены, поэтому мы оценили качество спермы быков разных пород по сезонам года. Объектом исследования была спермопродукция быков-спермодоноров пяти пород: красно-пѐстрой (n=41), чѐрно-пѐстрой (n=19), красно-пѐстрой голштинской (n=8), чѐрно-пѐстрой голштинской (n=5) и симментальской (n=3), принадлежащих ОАО «Красноярскагроплем». Учитывались такие показатели как: 1) получено семени всего на одного быка-производителя, мл; 2) получено семени в среднем на одного быка, мл; 3) брак нативного семени (мл; %); 4) среднее количество эякулятов, полученное на одного быка, штук; 5) средний объем эякулята, мл; 6) средняя концентрация млрд./мл. В зимний период от быков красно-пестрой породы оценено 75, чѐрнопѐстрых – 27, голштинских красно-пѐстрых –17, чѐрно-пѐстрых голштинов – 6 и симментальских – 5 эякулятов. Весной оценено 125 эякулятов быков краснопестрой породы, 41 – чѐрно-пѐстрой, 16 – красно-пѐстрых голштинов, 9 – чѐрнопѐстрых голштинов и 8 – симментальской. Летом от быков красно-пѐстрой породы получено и оценено 111 эякулятов, чѐрно-пѐстрой – 40, красно-пѐстрых голштинов – 21, чѐрно-пѐстрых голштинов – 8 и симменталов – 6. Осенью 98 117 эякулятов от быков красно-пѐстрой породы, 36 – чѐрно-пѐстрой, 15 – краснопѐстрых голштинов, 6 – чѐрно-пѐстрых голштинов и 9 – симменталов. Данные полученные по качеству спермы в зимний период представлены в таблице 13. Таблица 13 – Биотехнологические показатели спермопродукции быков-производителей в зимний период Порода Получе Брак Пол но нативной уче семени спермы но в сем среднем ени на всег одного мл % о, быка, мл мл Красно-пѐстрая 1607 21,43± Колич ество Средн Средня эякул ий я ятов Сv, объем Сv, концен Сv, на % эякул % трация % одног ята, млрд./ о мл мл. быка, штук 315 19,6 4,76± 52,1 4,39± 23,9 1,17± 0,29 0,12 0,06 43,6 1,44 Чѐрно-пѐстрая 556 20,59± 2,59 123 22,1 4,85± 56,5 4,05± 23,9 0,88± 0,53 0,19 0,10 57,9 Краснопѐстрые голштины 431 25,35± 3,37 57 13,2 5,59± 52,6 4,72± 27,3 1,32± 0,71 0,31 0,09 29,5 Чѐрно-пѐстрые 56 голштины 9,33± 1,81 12 21,4 2,17± 45,2 4,25± 16,5 0,86± 0,40 0,28 0,19 53,5 Симмен тальская 36,60± 6,90 24 13,1 8,20± 26,5 4,34± 19,6 1,15± 0,97 0,38 0,09 17,4 183 Из полученного семени в зимний период большую долю отбраковали от быков чѐрно-пѐстрой и чѐрно-пѐстрой голштинской пород соответственно – 22,1% и 21,4 %. Хорошим качеством отличалась сперма быков симментальской породы (табл. 13). В среднем на одного быка красно-пѐстрой породы было получено семени больше на 12,1 мл чем от чѐрно-пѐстрых голштинских (Р>0,999), но на 15,17 мл (Р>0,95) меньше чем от симментальских производителей. В результате дальнейших исследований установили, что от быков симментальской породы 118 получено семени на 16,01 мл (Р>0,95) больше, чем от быков черно-пестрой породы, на 27,27 мл (Р>0,999) чѐрно-пѐстрых быков голштинской породы. При сравнении с другими породами достоверных различий не установлена. Но тенденция к росту получаемого семени от быков симментальской породы есть, т. е. спермопродукцию от быков этой породы в зимний период получали стабильно. Также симментальские быки по количеству полученных эякулятов в зимний период превышали быков чѐрно-пѐстрой и красно-пѐстрой голштинской пород на 3,35 (Р>0,95) и 2,61 (Р>0,95) эякулята соответственно. Самый низкий коэффициент изменчивости по этому показателю был также в группе быков симментальской породы. По среднему объему эякулята на одного производителя достоверных различий между быками разных пород установлено не было. В зимний период средняя концентрация спермиев в 1 мл спермы менялась от породы к породе. По этому показателю быки красно-пестрой породы на 0,29 млрд./мл (Р>0,95) превышали сперму быков черно-пестрой породы и на 0,69 млрд./мл (Р>0,999) голштинскую черно-пеструю породу. Быки черно-пестрой породы уступали по этому показателю на 0,44 млрд./мл быкам голштинской породы красно-пестрой группы. Средняя концентрация сперматозоидов спермы красно-пестрых голштинов на 0,46 млрд./мл (Р>0,95) превышала сперму быков той же породы черно-пестрой ветви. Таким образом, воспроизводительная способность быков симментальской породы была выше при сравнении с быками других пород по количеству полученного семени на одного быка-спермодонора, количеству полученных эякулятов на одного производителя. В этой группе быков доля отбраковки нативного семени была самая низкая, но объем эякулята и концентрация спермиев в 1 мл была выше у красно-пѐстрых быков голштинской породы. В весенний период от быков красно-пѐстрой породы в среднем на одного спермодонора было получено семени меньше чем от красно-пѐстрых производителей голштинской породы на 9, 61 мл (Р>0,95), на 11,11 мл (Р>0,99) чем от симментальских, но на 14,3 мл (Р>0,999) больше чем от чѐрно-пѐстрых 119 голштинских быков, которые уступали по этому показателю на 16,02 мл (Р>0,999) быкам черно-пѐстрой породы. При сравнении по этому показателю голштинских чѐрно-пѐстрых быков с быками других пород отметили, что они уступали на 23,91 (Р>0,999) красно-пѐстрым быкам голштинской и на 25,41 мл (Р>0,999) симментальской породам (табл. 14). Таблица 14 – Биотехнологические показатели спермопродукции быковпроизводителей в весенний период Порода Краснопѐстрая Пол учен о семе ни всег о, мл Получе Колич Брак ество но Средн Средня семени нативно эякул ий я й в ятов Сv, объем Сv, концен Сv, среднем спермы на % эякул % трация % на одног ята, млрд./ одного о мл мл. быка, мл % быка, мл штук 2815 22,52± 1,4 431 15,3 5,55± 64,5 3,99± 27,1 1,15± 0,32 0,1 0,04 40,5 Чѐрно-пѐстрая 994 24,24± 2,47 148 14,9 5,93± 50,9 4,30± 86,7 0,91± 0,47 0,58 0,07 51,6 Краснопѐстрые голштины 32,13± 4,57 62 12,1 7,56± 43,5 4,14± 23,4 1,13± 0,82 0,24 0,15 51,3 Чѐрно-пѐстрые 74 голштины 8,22± 2,33 21 28,4 2,44±0 77,0 3,15± 17,8 0,44± ,63 0,19 0,18 120,5 Симмента льская 33,63± 4,01 27 10, 8,75± 28,4 3,82± 9,9 0 0,88 0,13 15,6 514 269 1,28± 0,07 Весной от быков симментальской породы, как и в зимний период, получено семени в среднем на одного производителя больше по сравнению с быками других пород, а отбраковано нативного семени меньше. Эякулятов на одного быка-спермодонора было получено также больше от производителей симментальской породы – 8,75 штук, а меньше – от черно-пестрых голштинских быков – 2,44 штуки (табл. 14). 120 От быков красно-пестрой породы эякулятов получено на 2,01 (Р>0,95) меньше, чем от быков голштинской породы красно-пѐстрой группы и на 3,2 (Р>0,999) эякулята по сравнению с быками симментальской породы. Черно-пестрые голштины по этому показателю уступали на 3,11 (Р>0,999) эякулята красно-пѐстрым, 3,49 (Р>0,999) чѐрно-пѐстрым, 5,12 (Р>0,999) краснопѐстрым голштинам и на 6,31 (Р>0,999) быкам симментальской породы. При сравнении быков по среднему объем эякулята установили, что у чѐрнопѐстрых голштинских быков эякулят был меньше на 0,84 мл. (Р>0,999) чем у красно-пѐстрых, на 0,99 мл (Р>0,99), чем у красно-пѐстрых голштинов и на 0,67 (Р>0,99) мл, чем у быков симментальской породы. Быки симментальской породы по этому показателю уступали на 0,32 мл (Р>0,999) красно-пѐстрым быкам голштинской породы. Самая высокая концентрация в весенний период отмечена у быков симментальской породы 1,28 млрд./мл, а самая низкая у чѐрно-пѐстрых голштинских быков 0,44 млрд./мл. При сравнении пород по этому показателю установили, что чѐрно-пѐстрые голштинские быки уступали по концентрации быкам красно-пѐстрой породы на 0,71 млрд./мл (Р>0,999), чѐрно-пѐстрым на 0,47 (Р>0,95), на 0,69 (Р>0,99) красно-пѐстрым голштинам и на 0,84 (Р>0,999) быкам симментальской породы. Сперма быков симментальской породы на 0,37 млрд./мл (Р>0,999) содержала спермиев больше, чем сперма спермодоноров чѐрно-пѐстрой породы. Таким образом, в весенний период количество полученного семени по сравнению с зимним сезоном изменилось незначительно. Увеличилось количество получаемых эякулятов на одного быка. От быков симментальской породы, как и в зимний период, получали больше семени с более высокой концентрацией, чем от быков других пород. По сравнению с другими породами в весенний период у чѐрно-пѐстрых быков увеличился объем эякулята. При анализе биотехнологических показателей спермопродукции быков разных пород в летний период установили, что в среднем от одного быка получали спермы больше, чем в весенний период. В среднем на одного быка 121 красно-пѐстрой породы было получено спермы меньше на 4,85 мл (Р>0,95), чем от быков чѐрно-пѐстрой, на 7,86 мл (Р>0,999), чем от красно-пѐстрых голштинских и на 13,22 мл (Р>0,999) чем от спермодоноров симментальской породы (табл. 15). Таблица 15 – Биотехнологические показатели спермопродукции быковпроизводителей в летний период Полу чено семен и всего, мл Полу Брак Колич чено нати ество семен вной Средн Средня эякул и в спермы ий я ятов средн Сv, объем Сv, концен Сv, на ем на % эякул % трация % одног одног ята, млрд./ о мл % о мл мл. быка, быка, штук мл 2658 23,95± 507 19,1 5,46± 53,4 4,16± 26,2 1,18± 1,40 0,28 0,10 0,05 41,5 Чѐрно-пѐстрая 1152 28,80± 192 16,7 6,38± 35,7 4,52± 19,5 1,19± 1,78 0,36 0,14 0,04 23,5 Краснопѐстрые голштины 668 31,81± 81 3,63 12,1 6,00± 44,7 4,68± 23,1 1,34± 0,59 0,24 0,09 30,6 Чѐрно-пѐстрые 125 голштины 15,63± 33 3,44 26,4 3,75± 63,5 4,05± 23,2 0,79± 0,84 0,33 0,17 62,0 Симмента льская 37,17± 42 2,59 18,8 9,67± 18,1 3,85± 8,1 0,71 0,13 11,1 Порода Краснопѐстрая 223 1,26± 0,06 Чѐрно-пѐстрые голштинские быки дали семени меньше на 8,32 мл (Р>0,95) по сравнению с быками красно-пестрой породы, на 23,17 мл (Р>0,999), чем чѐрнопѐстрые быки, на 16,18 мл при сравнении с красно-пѐстрыми голштинами и на 21,4 мл (Р>0,999) по сравнению с быками симментальской породы. Наибольшее количество эякулятов в летний период, так же как и в зимневесенний, было получено от быков симментальской породы на 4,21 (Р>0,999) чем от красно-пѐстрых быков, на 3,29 (Р>0,999) чем от чѐрно-пѐстрых, на 3,67 122 (Р>0,999) чем от красно-пѐстрых голштинских быков и на 5,92 (Р>0,999) чем от чѐрно-пѐстрых быков голштинской породы. Чѐрно-пѐстрые голштинские быки по этому показателю уступали 2,63 эякулята (Р>0,99) быкам чѐрно-пѐстрой породы и на 2,25 (Р>0,95) красно-пѐстрым голштинским. По среднему объему эякулята в летний период наблюдались незначительные колебания от породы к породе. Самый большой объем эякулята был у быков красно-пѐстрой голштинской породы – 4,68. По этому показателю они на 0,52 мл (Р>0,95) превышали быков красно-пѐстрой породы и на 0,83 мл (Р>0,99) быков симментальской породы, а симментальские быки на 0,67 мл (Р>0,999) уступали быкам чѐрно-пѐстрой породы. По средней концентрации спермы в 1 мл в летний период также наблюдались межпородные различия. Самая высокая концентрация отмечена у красно-пестрых голштинов 1,34 млрд./мл, а самая низкая у чѐрно-пѐстрых быков той же породы – 0,79 млрд./мл. При сравнении пород по этому показателю отметили, что красно-пестрые быки голштинской породы на 0,39 млрд./мл превышали сперму быков краснопѐстрой породы (Р>0,95) и на 0,55 млрд./мл (Р>0,99) чѐрно-пѐстрых голштинских быков. Самая низкая концентрация сперматозоидов была в сперме быков чѐрнопѐстрой голштинской породы. По этому показателю они уступали быкам краснопѐстрой на 0,39 млрд./мл (Р>0,95), на 0,4 млрд./мл чѐрно-пѐстрой (Р>0,95) и на 0,47 млрд./мл (Р>0,95) быкам симментальской пород. Таким образом, в летний период по количеству полученного семени и эякулятов на одного быка выгодно отличались от других пород быки симментальской породы, но следует отметить, что в этот период по сравнению с другими сезонами увеличилась доля брака нативного семени. Сперма краснопестрых быков голштинской породы по таким показателям, как средний объем эякулята и концентрация семени, превосходила показатели спермы быков других пород. Осенью количество спермы на одного быка снизилось по сравнению с 123 летним сезоном. Достоверных различий по количеству полученных эякулятов между породами установлено не было. В среднем объем эякулята быков чѐрнопѐстрой породы на 0,5 мл (Р>0,95) был больше, чем у быков симментальской породы, других достоверных межпородных различий по данному показателю установлено не было (табл. 16). Таблица 16 – Биотехнологические показатели спермопродукции быковпроизводителей в осенний период Порода Краснопѐстрая Пол учен о семе ни всег о, мл Получ Брак Колич ено нативной ество Средн Средня семени спермы эякул ий я в ятов Сv, объем Сv, концен Сv, средне на % эякул % трация % м на одног ята, млрд./ одного мл % о мл мл. быка, быка, мл штук 2485 25,36± 444 1,58 17, 5,52± 53,1 4,32± 25,9 1,26± 9 0,30 0,11 0,05 38,1 Чѐрно-пѐстрая 1038 28,83± 144 2,71 13, 6,00± 46,7 4,65± 23,6 1,25± 9 0,47 0,18 0,05 23,2 Краснопѐстрые голштины 412 21,47± 75 5,91 18, 5,40± 72,4 4,89± 31,3 1,05± 2 1,01 0,4 0,16 58,1 Чѐрно-пѐстрые 124 голштины 20,67± 27 4,49 21, 4,50± 41,6 4,60± 30,4 0,93± 8 0,76 0,57 0,11 27,9 Симмента льская 25,00± 33 5,24 14, 6,00± 57,7 4,15± 13,2 1,25± 7 1,15 0,18 0,09 20,8 225 Следует отметить, что осенью снизилось количество полученного семени от быков симментальской породы и уменьшилось количество эякулятов по сравнению с другими сезонами. В этот период у них наблюдается некоторое снижение биотехнологических показателей спермопродукции. По концентрации сперматозоидов сперма быков красно-пестрой породы превышала на 0,01 млрд./мл (Р>0,95) сперму быков черно-пестрой породы, на 124 0,33 млрд./мл (Р>0,99) черно-пестрых голштинов, а быки черно-пестрой породы имели концентрацию спермы в среднем на 0,32 млрд./мл (Р>0,99) больше, чем черно-пестрые быки голштинской породы. Анализ изменчивости признаков по всем сезона года показал значительную изменчивость по количеству полученных эякулятов, среднему объему эякулята и средней концентрации спермиев в 1 мл. В зимний период от быков симментальской породы получали семени в расчете на одного производителя больше на 15,17 мл (Р>0,95), чем от быков красно-пѐстрой породы, на 16,01 мл (Р>0,95), чем от производителей чѐрнопѐстрой и на 27,27 (Р>0,999) по сравнению с быками голштинской породы чѐрнопѐстрой группы. По количеству полученных эякулятов симментальские быки также превышали показатели быков чѐрно-пѐстрой на 3,35 штук (Р>0,95) и голштинской породы красно-пѐстрой группы на 2,61 штук (Р>0,95). Самая низкая концентрация сперматозоидов в 1 мл спермы была у быков голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 0,86 млрд./мл., что на 0,69 млрд./мл. (Р>0,999) меньше чем у быков красно-пѐстрой породы, 0,46 млрд./мл. (Р>0,95) чем у быков гоштинской породы красно-пѐстрой ветви. В весенний период от симментальских быков-производителей также, как и в зимний период получали семени в среднем на одного быка больше, чем от производителей других пород – на 11,11 мл (Р>0,99) красно-пѐстрой породы, 23,91 мл (Р>0,999) чѐрно-пѐстрой и 25,41 мл (Р>0,999) голштинской породы красно-пѐстрой группы. По количеству полученных эякулятов быки симментальской породы также имели преимущество по сравнению с быками на – 3,2 штук (Р>0,999) голштинской породы красно-пѐстрой группы, 2,01 штук (Р>0,95) красно-пѐстрыми и 6,31 штук (Р>0,999) голштинской породы чѐрнопѐстрой группы. В данный период самая высокая концентрация сперматозоидов в одном мл спермы была отмечена также у быков симментальской породы – 1,28 млрд./мл, а самая низкая у голштинской породы черно-пестрой группы – 0,44 млрд./мл. Быки-производители голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы по данному показателю уступали быкам красно-пѐстрой породы на – 0,71 млрд./мл. 125 (Р>0,999), чѐрно-пѐстрым – 0,47 млрд./мл. (Р>0,95), 0,69 млрд./мл. (Р>0,99) голштинским быкам красно-пѐстрой группы и 0,84 млрд./мл. (Р>0,999) симментальским производителям. В летний сезон меньше всего семени в расчете на одного быка было получено от производителей голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 15,63 мл, что на 8,32 мл ниже чем от быков красно-пѐстрой (Р>0,95), 23,17 мл (Р>0,999), чѐрно-пѐстрой, 21,4 мл (Р>0,999) симментальской породы. По количеству полученных эякулятов в летний период, так же как и в зимне-весенний, преимущество имели быки симментальской породы. От них было получено больше эякулятов чем от быков красно-пѐстрой породы на – 4,21 штук (Р>0,999), чѐрно-пѐстрой 3,29 штук (Р>0,999), голштинской породы красно-пѐстрой группы 3,67 штук (Р>0,999) и голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы 5,92 штук (Р>0,999). Самая низкая концентрация сперматозоидов в 1 мл спермы была у быков голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 0,79 млрд./мл, что на 0,39 млрд./мл (Р>0,95) меньше, чем у быков красно-пѐстрой, 0,4 млрд./мл (Р>0,95) чѐрно-пѐстрой и 0,47 млрд./мл (Р>0,95) симментальской породы. В осенний сезон, также как и летний, самая низкая концентрация сперматозоидов в 1 мл спермы была у быков голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 0,93 млрд./мл, что на 0,33 млрд./мл. (Р>0,99) меньше, чем у быков красно-пѐстрой породы, и 0,32 млрд./мл. (Р>0,99) по сравнению с быками чѐрнопѐстрой породы. Таким образом, следует отметить быков симментальской породы, у которых изменчивость этих признаков все сезоны года была ниже, чем у других пород, что может говорить о стабильной воспроизводительной способности этих быков. 3.6.3 Влияние возраста быков на биотехнологические показатели спермы Влияние возраста быков на сперматогенез изучали многие ученые, например, Святовец выделяет у быков три условных пожизненных периода сперматогенеза: первый – становление половых функций (возраст от 18-20 месяцев до 4 лет), характеризуется повышением объѐма эякулята и концентрации 126 спермиев: второй – период активных половых функций (возраст от 4 до 10 лет), у быков отмечается стабильность количественных и качественных показателей спермопродукции: третий – угасание половых функций (возраст старше 10 лет), характеризуется снижением количества и качества спермы (цитируется по Маркушин, А.П. 1983). И.З. Сирацкий (1972, 1993) и В.С. Мымрин (1991) отмечают, что активность спермиев достигает максимума в 2-3-летнем возрасте. Оплодотворяющая способность спермиев увеличивается у быков-спермодоноров до 3-4 летнего возраста и остаѐтся на высоком уровне до 10-12-летнего возраста, а концентрация спермиев в 7-10-летнем возрасте, независимо от породной принадлежности, как правило, снижается. Общее количество спермиев в эякуляте быков, например, симментальской породы увеличивается до 9-летнего возраста, чѐрно-пѐстрой – до 10-летнего. Исследования, проведенные на станциях искусственного осеменения в Ленинградской области Н.З. Басовским и Б.П. Завертяевым (1975) показали, что быки черно-пестрой породы в возрасте от 1-2 лет за одну садку дают семени 3,5-4 мл, от 4-6 лет – 4,5-5,5 мл, в 8-летнем возрасте и старше – 4,5-5 мл. Число сперматозоидов в эякуляте в зависимости от возраста изменялось на 4-6 %. Е.В. Четвертакова и Е.В. Иванова (1998), исследуя спермопродукцию быков-производителей голштинской породы в Красноярском крае в возрасте от двух до семи лет установили, что наибольшее количество аномальных форм спермиев было в свежеполученной сперме быков до 2-летнего возраста, в размороженной сперме у быков в возрасте старше шести лет. Проведя исследования по количеству и качеству спермы, долголетию племенной службы быков Ф.В. Ильев (1981), С.В. Волкова и др. (2008) утверждают, что использование быков-спермодоноров в племенных предприятиях определяется не столько их возрастом, сколько состоянием здоровья, крепостью конституции, режимами использования и содержания. Как видим оптимальный возраст племенного использования быковпроизводителей по-мнению разных ученых может отличаться. 127 Исследования проводились в ОАО «Красноярскагроплем». Объектом исследования были быки объединѐнные в возрастные группы: первая – до 2-х лет (n=23); вторая – 2,1-3 года (n=34); третья – 3,1-4 года (n=26); четвертая – 4,1-5 лет (n=11); пятая – 5,1-6 лет (n=11); шестая – 6,1-7 лет (n=3) и их спермопродукция. Учитывались такие показатели как: 1) получено семени всего, мл; 2) среднее количество эякулятов, полученное на одного быка, штук; 3) средний объѐм эякулята, мл; 4) средняя концентрация млрд./мл. Показатели спермопродукции учитывались в соответствии с их переходом из одной возрастной группы в другую. В результате проведенных исследований, было установлено, что наименьшее количество семени, при перерасчете на одного быка, было получено от производителей первой группы – 71,4 мл. От быков второй, третьей, четвертой, пятой и шестой групп семени было получено больше на 71,6 мл (Р>0,99), 63,1 мл (Р>0,95), 47,7 мл, 86,9 мл (Р>0,99) и 82,6 мл чем от мл быков первой группы соответственно (рис. 18). 180 158,3 160 143 140 154 134,5 119,1 120 100 80 71,4 получено семени, мл 60 40 20 0 1-ая 2-ая 3-я 4-ая 5-ая 6-ая группа Рисунок 18 – Получено семени от быков разных возрастных групп, мл Таким образом, быки в возрасте до двух лет характеризуются нестабильными половыми функциями, в результате чего от них было получено минимальное количество семени. 128 Такую же закономерность мы наблюдали при анализе групп быков по количеству полученных от них эякулятов. Быки первой группы уступали быкам всех возрастных групп: на 2,77 шт. (Р>0,999) второй, 1,94 шт. (Р>0,99) третьей, 2,34 (Р>0,99) четвертой, 2,03 шт. пятой и 0,52 шт. шестой группам (рис. 19). 7 6,24 5,81 6 5,41 5,5 5 штук 4 3,99 количест в о эякулят ов 3,47 3 2 1 0 1-ая 2-ая 3-ая 4-ая 5-ая 6-ая группа Рисунок 19 – Получено эякулятов от быков разных возрастных групп, штук От быков второй группы было получено наибольшее количество эякулятов 6,24 шт. В возрасте от трех до шести лет от быков получали практически одинаковое количество эякулятов. От быков старше шести лет получали на 2,25 шт. (Р>0,95) меньше чем получено от быков второй группы. Таким образом, можно сделать вывод, что в условиях Красноярского края от быков первой и шестой групп эякулятов получают меньше, чем от производителей других возрастных групп, это в первом случае связано со становлением половых функций и адаптации к условиям получения семени, а во-втором случае с началом угасания половых функций производителей. 129 По объѐму эякулята в группах быков наблюдалось колебание от 3,88 мл у быков первой группы до 4,72 мл у спермодоноров пятой группы. Быки первой группы уступали по этому показателю быкам второй 0,456 мл (Р>0,95) и на 0,84 мл (Р>0,99) пятой группе. Быки третьей группы также уступали на 0,77 мл (Р>0,95) быкам пятой группы (рис. 20). 5 4,72 4,5 4 4,47 4,33 4,16 3,93 3,88 3,5 мл 3 2,5 объем эякулята 2 1,5 1 0,5 0 1-ая 2-ая 3-я 4-ая 5-ая 6-ая группа Рисунок 20 – Средний объем эякулята быков разных возрастных групп, мл Таким образом, быки в возрасте от 5 до 6 лет отличаются усилением секреторных функций придаточных половых желез, что согласуется с исследованиями А.П. Маркушина (1983). Количество замороженных спермодоз зависит не только от объема, но главным образом от количества спермиев в эякуляте. Поэтому следующим этапом был сравнительный анализ групп быков по концентрации спермиев в 1 мл спермы. Он показал, что концентрация спермиев незначительно меняется у быков возрасте до шести лет. У быков старше этого возраста концентрация снижалась до 0,91 млрд./мл. У быков шестой группы этот показатель на 0,31 млрд./мл (Р>0,95) меньше по сравнению с показателем у быков первой группы (рис. 21), при сравнении с данными по другим группам достоверных отличий не выявлено. 130 1,4 млрд/мл 1,24 1,2 1,18 1,09 1,01 1,07 1 0,91 0,8 группа 0,6 0,4 0,2 0 1-ая 2-ая 3-я 4-ая 5-ая 6-ая группа Рисунок 21 – Концентрация сперматозоидов в сперме быков разных возрастных групп, млрд./мл Исследования, проведенные на быках разных половозрастных группах показали, что от быков в возрасте до 2-х лет семени получают в перерасчете на одного быка в месяц меньше, чем от быков второй, третьей, четвертой, пятой и шестой групп на 71,6 мл (Р>0,99), 63,1 мл (Р>0,95), 47,7 мл, 86,9 мл (Р>0,99) и 82,6 мл соответственно, что связано с периодом становления половых функций. Быки первой и шестой групп неохотнее шли на садку, что отразилось на количестве полученных от них эякулятов, что в первом случае связано с периодом становления, а во втором с угасанием половых функций. Концентрация сперматозоидов в 1 мл семени снижалась у быков старше шести лет на 0,31 млрд./мл (Р>0,95)по сравнению с быками первой группы. Таким образом, проведенные исследования биотехнологических показателей спермы быков разных возрастных групп в условиях Красноярского края показали, что быки-производители в возрасте до двух лет характеризуются пониженными биотехнологическими показателями спермопродукции, от двух до шести лет имеют стабильные показатели, а снижение биотехнологических показателей спермопродукции наблюдается у быков в возрасте старше шести лет. 131 3.7 Факторы, влияющие на воспроизводительные способности быков-спермодоноров В предыдущих главах нами было показано, что привнесение в генофонд относительно устойчивых популяций крупного рогатого скота генетического материала, сформировавшегося в иных природно-климатических и селекционных условиях, может увеличивать генетический груз в популяциях, а также приводить к дестабилизации сложившихся адаптивных комплексов генов, что проявляется, как правило, не сразу, а спустя некоторое время. Снижение адаптивной ценности с эволюционной точки зрения сопровождается ухудшением воспроизводительной способности особи, что уменьшает в итоге еѐ вклад в генофонд популяции. Этот естественный механизм защищает популяцию от «ненужных» в данных условиях генов. В искусственных же условиях, создаваемых человеком, недоучѐт адаптивных способностей отбираемых для воспроизводства, особенно племенного, животных приводит к экономическим потерям в виде повышенной заболеваемости, снижения качества продукции, сокращения продолжительности жизни и т. д. Воспроизводительные функции могут служить интегральной характеристикой уровня адаптивной ценности быков-спермодоноров, то есть соответствия их организма предъявляемым требованиям, по условиям жизни и технологии получения спермы. Спермопродукция является очень удобным и информативным материалом для оценки адаптивного потенциала быков. Качество спермопродукции может зависеть от ряда факторов, таких как способность сперматозоидов к глубокому охлаждению, линейной принадлежности быков, экогенеза, и возраста. 3.7.1 Причины выбраковки нативной спермы в ОАО «Красноярскагроплем» Исследования состояли из нескольких этапов. На первом этапе исследования нами была проанализирована причина выбраковки нативного семени. 132 Прежде чем изучить структуру причин выбраковки эякулятов, нами была исследована погодовая и сезонная динамика получения и выбраковки эякулятов быков-спермодоноров исследуемой группы в течение трѐх лет. Динамика количества полученных эякулятов в течение исследуемого периода представлена в таблице 17 (приложение И). В ходе исследования, выявлялись причины выбраковки спермы в зависимости от сезонов (приложение К). Таблица 17 – Распределение эякулятов, в зависимости от сезона года первый год Сезон кол-во, штук % второй год кол-во, штук % третий год кол-во, штук % Зима 1426 24,9 1338 23,4 1145 24,3 Весна 1066 18,6 1487 26,1 1405 30,0 Лето 1596 27,9 1397 24,5 1196 25,4 Осень 1641 28,6 1486 26,0 955 20,3 Всего 100 5708 100 4701 100 5729 На количество полученных эякулятов от быков-производителей может влиять режим эксплуатации применяемый на предприятии. На разных предприятиях по искусственному осеменению он может отличаться. И.И. Воронин (1979) отмечает, что во время одной садки самцы выделяют часть общего запаса готовых, вполне созревших спермиев. Во вторую садку обычно выделяется сперма, лучшая по подвижности и с более высокой концентрацией, чем в первую садку. Как правило, сперму берут от быка один раз в 3 или 4 дня, причѐм каждый раз допускают 2 садки, которую проводят через 5-10 минут после первой. Г.В. Паршутин и др. (1983) отмечают, что от взрослых быков обычно получают сперму один раз через 3 дня дуплетной садкой с интервалом 5-7 минут. Быков в возрасте до 18 месяцев допускают две садки в декаду. 133 У исследуемой группы быков-спермодоноров доля выбракованных эякулятов варьировала в разные годы и сезоны от 10,4 до 19,6 %. Следует отметить, что за исследуемый период (три года) в среднем за год значение данного параметра возросло с 12,7 до 17,0 % (таб. 18). При анализе сезонной зависимости доли выбракованных эякулятов определѐнных чѐтких закономерностей выявлено не было. Так, в первый год исследования наибольший процент эякулятов низкого качества наблюдался весной и осенью, во второй – летом и осенью и в третий – зимой и осенью. Таким образом, в течение всего периода исследования значительную долю эякулятов отбраковывали в основном в осенний сезон. Таблица 18 – Распределение выбракованных эякулятов по годам и сезонам, % первый год Сезон года второй год третий год кол-во, штук % кол-во, штук % кол-во, штук % Зима 149 10,4 156 11,7 224 19,6 Весна 149 13,4 210 14,1 207 14,7 Лето 190 11,9 218 15,6 198 16,6 Осень 240 14,6 237 16,0 171 17,9 Всего 728 12,7 821 14,4 800 17,0 Далее мы проанализировали причины выбраковки нативного семени. Спермопродукция выбраковывалась по причинам некроспермии, аспермии, олигоспермии которые обусловлены нарушениями сперматогенеза. Кроме этих категорий были выделены причины выбраковки нативной спермы и обозначены как «другие причины», которые включали в себя эякуляты с примесями воды, грязи, крови, хлопьев. За основу оценки качества семени была взята классификация Kühnelt (1953) (из Коган С.Л. 1969, С. 51). 134 – Нормоспермия характеризуется наличием в эякуляте большого числа жизнеспособных сперматозоидов. Число, подвижность и морфология сперматозоидов в 1 мл находятся в пределах нормы. – Олигоспермия характеризуется уменьшенным числом сперматозоидов в эякуляте. – Аспермия характеризуется отсутствием в эякуляте сперматозоидов, а также клеток сперматогенеза. – Некроспермия характеризуется неподвижными сперматозоидами и является наиболее сильной степенью нарушения подвижности сперматозоидов. Проанализировав причины выбраковки нативной спермы за три года, мы выявили, что в течение исследуемого периода основными причинами были некроспермия и аспермия. Доля эякулятов, выбракованных по причине аспермии была высокой и составила в 1997 – 25,9 %, в 1998 – 65,7 %, в 1999 – 54,9 % (рис. 22). Прослеживается тенденция к росту случаев выбракованной спермы по этой причине. % 65,7% 63,3% 54,9% 70 60 42,3% 50 40 31,3% 26% некроспермия аспермия 30 6,4% 20 4% 0,5% 2,5% олигоспермия 0,2% 2,6% 10 другие причины 0 первыйгод второй год третий год Рисунок 22 – Структура причин выбраковка нативной спермы быковспермодоноров ОАО «Красноярскагроплем, % 135 Л.К. Эрнст (1981, С. 51) указывает, что аспермия, олигоспермия, морфологические дефекты сперматозоидов у быков-производителей относятся к числу наследственных аномалий системы воспроизводства, в частности, аплазии и гипоплазии производных вольфова протока. Некоторые исследователи считают, что главной причиной аспермии является закупорка в семенных канальцах хвоста придатка. Такие нарушения сперматогенеза могут возникнуть в результате механических воздействий, т. е. травм, изменений температурного режима, алиментарных факторов и других причин. Аспермия может наступить при повреждении семенников, что приводит к нарушению процесса нормального сперматогенеза. Травмы половых органов, в зависимости от характера и силы, могут привести только к поражению придатков (травматическое воспаление, некроз, фиброз) с закупоркой семявыносящих путей. При этих условиях семенники могут продолжать нормально функционировать, но при поражении кровеносных сосудов, питающих семенник, а также нервных окончаний может наступить нарушение трофики, приводящее к атрофии (Коган С.Л., 1969, С. 67). Доля олигоспермии в выбраковке спермы в первый год составила 6,4 % и к третьему году снизилось до 0,2 % (рис. 22). Большой удельный вес в этиологии олигоспермии имеют инфекционно-токсические факторы, особое значение имеет сбалансированность рациона по протеину (Коган С.Л. 1969, С. 73; Чечешкин, А.В. 1982). В целом, за исследуемый период значительное количество эякулятов выбраковывалось по причине некроспермии. В начальный период исследования их удельный вес составил – 63,6 %, в 1998 – 31,3 % и в 1999 году – 42,2 %. Высокая доля выбракованных эякулятов по причине некроспермии в первый год может быть связана с периодом адаптации быков, завезѐнных из Германии, к климатическим условиям Красноярского края, технологии содержания и кормлению. Некроспермия может быть обусловлена, в первую очередь, наследственностью или вызвана факторами внешней среды. В ОАО «Красноярскагроплем» спермопродукцию от быков-спермодоноров 136 получали один раз в неделю триплетной садкой. Далее мы проанализировали, сколько было получено эякулятов в зависимости от номера садки по сезонам в первый год иследования. Значительную долю составили эякуляты, полученные за первую садку. Количество эякулятов за третью садку на 25,7 % меньше, чем эякулятов, за первую садку, и на 14,3 %, чем за вторую садку. Как видно из рисунка 23, сезоны года по-разному влияли на количество полученных эякулятов. штук 60 50 40 51,9 45,5 44,4 43,1 36,6 36,5 27,8 30 зима 34,4 весна 20,4 19 20,3 20,1 лето 20 осень 10 0 эякулят №1 эякулят №2 эякулят №3 Рисунок 23 – Распределение полученных эякулятов в зависимости от номера взятия по сезонам в первый год, % На следующем этапе мы проанализировали, какие эякуляты, в зависимости от номера садки, чаще всего выбраковывались. Данные отображены на рисунке 24. Наибольшее количество выбракованных составили эякуляты, полученные за первую и вторую садку в весенний – 16,1 % и 17,8 % и осенний периоды – 18,6 % и 15,7 % соответственно, что может быть связано с напряжѐнным состоянием всех систем организма в эти переходные периоды. Эякуляты, полученные при третьей садке чаще всего браковали летом – 7,7 % и осенью – 5,4 %, доля их выбраковки была минимальной в весенний период и составляла 2,3 %. 137 Рисунок 24 – Доля выбракованных эякулятов в зависимости от номера садки в первый год, % Наблюдалась тенденция к снижению процента выбраковки от первого эякулята к третьему. Но вторых эякулятов получили в первый год на 24,0 %, третьих – на 56,0 % меньше, чем первых. Далее мы проанализировали, какое количество эякулятов, в течение второго года было получено в зависимости от номера садки. Данные отображены на рисунке 25. Рисунок 25 – Распределение полученных эякулятов в зависимости от номера взятия по сезонам за второй год, % 138 Так же, как и в первом случае, значительную долю составляли эякуляты, полученные за первую садку. Доля эякулятов от третьей садки от общего количества эякулятов по сезонам составила в зимний период – 20,0 %, весенний – 19,9%, летний – 20,1 % и осенний – 23,8 %. Вторых и третьих эякулятов было получено меньше, чем первых. Кроме того, увеличивалась доля выбраковки эякулятов от первой садки (рис. 26). Рисунок 26 – Доля выбракованных эякулятов по сезонам года в зависимости от номера садки за второй год, % Вероятно, третья садка истощает силы быков-спермодоноров, и в результате увеличивается доля выбракованных эякулятов, полученных за первую садку, либо частота отказов от садки. По сезонам значительных колебаний не отмечалось. Наибольшее количество эякулятов первой и второй садок выбраковывали летом – 20,5 % и 13,2 % и осенью – 19,8 % и 13,5 % соответственно. Эякулятов, полученных за третью садку больше всего браковали в осенний период – 13,3 %. Количество вторых и третьих эякулятов, также как и в предыдущем периоде исследования, получили меньше по сравнению с эякулятом от первой садки на 15,8 % и 51,0 % соответственно (рис. 27). В данном случае мы полагаем, что применяемый режим эксплуатации быков-спермодоноров не приемлем для всего поголовья. Надо учитывать 139 индивидуальные особенности производителей при их эксплуатации. Так как, вероятно, третья садка может истощать силы быков, что сказывается на качестве получаемой продукции. На третий год исследования наблюдалась такая же тенденция, как и в предыдущий. Доля эякулятов, полученных за первую садку, в среднем за год составила 40,3 %. Весной было получено эякулятов от первой – 39,7 % и второй садок – 36,0 %. Число эякулятов, полученных за третью садку, составило в весенний период – 24,3 %. Количество вторых садок составило 35,8 % в среднем за год и третьих – 23,9 % за год от общего среднего. Рисунок 27 – Распределение полученных эякулятов в зависимости от номера взятия по сезонам за третий год, % Количество садок в зависимости от сезона колебалось незначительно. Доля выбракованных эякулятов за третий год отображена на рисунке 28. 140 Рисунок 28 – Доля выбракованных эякулятов в зависимости от номера садки за третий год, % Чаще всего выбраковывали эякуляты от первой садки в зимний – 24,5 % и осенний – 23,0 % периоды. Такая же тенденция отмечена при выбраковке эякулятов от второй садки. Значительное количество эякулятов от третьей садки было выбраковано в зимний – 15,7 % и летний – 14,4 % периоды. Вторых эякулятов было получено на 11,0 % меньше, чем первых, а третьих на 40,0 %. По мнению В.П. Кононова и О.Н. Дьякивича (1997) по количеству взятых от быков эякулятов можно судить как о влиянии сезона года на их половую потенцию, так и об индивидуальных различиях по этому показателю. По их мнению, семя быков-спермодоноров зимнего периода взятия обладает более высокой биологической полноценностью, чем взятое летом. Так как от момента формирования спермиев до их появления в эякуляте проходит два месяца. Следовательно, последствия влияния факторов, связанных с сезоном года и так или иначе действующих на сперматогенез, будут выявлены спустя этот период, тогда как факторы, действующие на половую потенцию, проявятся немедленно. Авторы указывали, что снижение половой нагрузки на производителей способствует повышению качественных характеристик эякулятов. Само по себе снижение частоты использования быков повышает их репродуктивный потенциал не вообще, а только в пределах компенсации депрессии, вызванной какими-то 141 неблагоприятными условиями летнего периода. И рекомендуют в летний сезон сократить частоту взятия семени у производителей, что будет повышать их воспроизводительную функцию, а также снижать долю семени более низкого качества, полученного летом. К тому же частая эякуляция ухудшает качество спермы, так как приводит к появлению незрелых форм спермотозоидов в эякуляте (Курбатов, А.Д. 1988), которые плохо переносят криоконсервацию. Таким образом, в результате проведѐнного анализа отмечается, что некроспермия и аспермия, олигоспермия занимали значительную долю в выбраковке эякулятов в течение всего исследуемого периода. Был отмечен рост доли выбраковки эякулятов по причине аспермии от первого года исследования к третьему от 26,0 % – до 54,9 %, но наблюдалась тенденция к снижению выбраковки эякулятов по причине олигоспермии с 6,4 % в первый год – до 0,2 % в заключительный период Установлено, что основной причиной выбраковки эякулятов является некроспермия. Доля от общих причин выбраковки оставалась высокой на протяжении трех лет исследования. Количество эякулятов, полученных от первых и вторых садок, значительно превышают количество эякулятов, полученных от третьих садок. Количество выбракованных эякулятов было меньше зимой и весной, а летом и осенью их доля увеличивалась, это может быть последствием влияния факторов, связанных с сезоном года. На основании результатов, полученных в ходе исследований, можно сделать вывод о том, что унифицированный режим эксплуатации для всех быков нежелателен. Кроме того, от быков-спермодоноров немецкой селекции чаще всего получали только две садки, это говорит о снижении адаптивного резерва и это отразилось на количестве полученных эякулятов за весь исследуемый период. 142 3.8 Способность спермы переносить глубокое охлаждение Важным адаптивным свойством спермы является переносимость ею криоконсервации, уровень которой можно оценить по переживаемости спермиев после глубокого охлаждения. Сперма разных быков-производителей неодинаково выдерживает замораживание при сверхнизких температурах. После замораживания погибают до 40-70 % сперматозоидов (Зверева Г.В., 1964; Quinn P.J., 1969; Милованов В.К., 1970; Скорняков Б.А., 1972; Bakst M.R., 1979; Jones R.C., 1979; Столбов В.М., 1983; Крейндлин Ю.Г., 1984; Наук В.А., 1985, С. 50; Белоус А.М., 1987; Наук В.А., 1989, 1991; Жуковская Н., 1997, С. 25; Балахонов А.В., 1999). В процессе глубокого охлаждения семени происходит отбор наиболее устойчивых спермиев, которые, выживая, повышают количество доброкачественного материала, т. е. часть спермиев, с теми или иными нарушениями погибает во время охлаждения (Kakar S.S., 1981; Белоус А.Н., 1986; Балахонов А.В., 1999 С. 115). Для косвенной характеристики оплодотворяющей способности криоконсервированной спермы используют оценку подвижности спермиев после размораживания, уровень которой должен быть согласно ГОСТу не ниже трѐх баллов. Если активность ниже указанной, то должна браковаться вся партия спермодоз. В процессе криоконсервации происходит множественное изменение акросомы и средней части хвоста. Защита гамет от повреждения зависит от состава и фазового состояния мембранных липидов. Установлено экспериментально, что состав мембранных липидов генетически детерминирован (Наук В.А., 1987; Нарижный А.Г., 1993). Липидные компоненты мембран определяют характер и размеры криоповреждений клеток, которые можно рассматривать Структурные как специфическую дефекты мембраны реакцию могут на служить холодовое местом воздействие. атаки разных повреждающих факторов – осмотических сил, лиотропных ионов, катализаторов, токсинов и других факторов, что приводит к вторичным биохимическим повреждениям (Белоус А.М., 1979; 1982). 143 3.8.1 Анализ факторов, влияющих на переживаемость сперматозоидов быков-производителей Течение сперматогенеза, а, следовательно, и результат – нормально сформированные жизнеспособные спермии, зависит как от врождѐнных функциональных способностей организма животного, так и от ряда экзогенных факторов. Выявление доли влияния каждого такого фактора на сперматогенез поможет оптимизировать условия содержания и эксплуатации быков- спермодоноров, и, в результате – получать от них высококачественную сперму, повысить экономическую эффективность производства спермодоз. Нами оценивалось влияние разных факторов, в том числе возраста быковспермодоноров, на переживаемость спермиями криоконсервирования. Для этого были сформированы 5 опытных групп: в первую вошли быки (n=20), которые на начало периода (1996 г) были в возрасте 1,1-2 года; во вторую – вновь поступившие быки-иммигранты, которым в 1997 году было 1,5-2 года (n=26); в третью – быки в возрасте 2,1-3 года в первый год исследования (n =16); в четвѐртую группу - быки, возраст которых в 1996 году достиг 3,1-4 года (n =24) и в 5-ю группу вошли быки, возраст которых в 1996 году достиг 4,1-5 лет, (n =5). Для изучения динамики переживаемости семени результаты еѐ оценки (балл) по каждой партии группировали в зависимости от сезона взятия эякулятов за каждый год отдельно, затем усредняли. На рисунке 29 показаны изменения среднего балла подвижности спермиев после криоконсервации у быков опытных групп в течение периода исследования. Необходимо отметить общую тенденцию снижения переживаемости спермы в 1997 году у всех опытных групп, что вероятнее всего, связано с неблагоприятными условиями года. Наиболее благоприятным был 1999 год, так как во всех опытных группах средний балл подвижности спермиев после криоконсервации составил в основном 3-3,5 балла. 144 Рисунок 29 – Изменение переживаемости семени быков по сезонам Переживаемость спермы быков разных групп по сезонам представлена в таблице 19. В первый год наблюдения переживаемость семени быков первой группы к осени достоверно снизилась (Р>0,95). В следующем году наиболее низкий балл по переживаемости был весной. В 1998 году наблюдалась такая же ситуация, как и в 1997 году. Однако на четвѐртый год наблюдения тенденция изменилась. Весной средний балл по переживаемости был наиболее высоким. Переживаемость семени достоверно возросла у быков в возрасте от 3,1 до 4 лет. У быков второй группы переживаемость семени в 1997 году наиболее низкой была в весенний период, а к осени достоверно возросла (Р>0,999). Большая часть быков из этой группы поступила из Германии в конце 1996 года. Вероятно, низкий показатель по исследуемому параметру, в среднем по всей группе, связан с периодом адаптации животных к новым климатическим условиям, а также условиям кормления и содержания. Это подтверждается работами Л.В. Фоминой (2003), А.А. Рудко (2003), которые указывают на продолжительный период адаптации завезѐнных быков-спермодоноров и низкие 145 показатели качества спермопродукции. Таблица 19 – Переживаемость спермы быков-спермодоноров разных групп по сезонам года, балл Год Опытная группа 1998 зима, Сезон весна, лето, осень, 1 1,1-2 года 2,99 0,09 2,96 0,11 2,74 0,13 2,56 0,16 3 2,1-3 года 3,30 0,08 3,00 0,13 3,01 0,11 2,69 0,12 4 3,1-4 года 2,98 0,11 3,08 0,10 2,95 0,10 2,29 0,12 5 4,1-5 лет 3,03 0,04 3,07 0,26 2,37 0,27 2,33 0,13 1 2,1-3 года 2,37 0,14 2,08 0,14 2,56 0,14 2,49 0,16 2* 1,1-2 года 2,38 0,11 1,95 0,14 2,39 0,11 2,79 0,08 3 3,1-4 года 2,73 0,11 2,59 0,08 2,58 0,16 2,64 0,20 4 4,1-5 лет 2,51 0,13 2,18 0,13 2,53 0,09 2,75 0,09 5 5,1-6 лет 2,30 0,33 2,39 0,17 2,53 0,24 2,74 0,12 1 3,1-4 года 2,75 0,09 2,26 0,12 2,49 0,18 3,27 0,16 2 2,1-3 года 3,17 0,10 2,75 0,08 2,60 0,12 3,00 0,13 3 4,1-5 лет 2,68 0,41 2,48 0,50 3,03 0,11 3,27 0,16 4 5,1-6 лет 2,66 0,18 2,33 0,15 2,59 0,19 2,92 0,25 5 6,1-7 лет 1,35 0,68 - - - 1 4,1-5 лет 2,86 0,11 3,40 0,11 3,09 0,19 3,34 0,10 2 3,1-4 года 3,17 0,09 3,40 0,15 3,30 0,18 3,09 0,27 3 5,1-6 лет 3,27 0,32 3,51 0,30 - - 4 6,1-7 лет 2,56 0,21 3,31 0,18 3,08 0,30 3,39 0,35 1996 1997 Возраст 1999 * – группа быков, поступившая в конце 1996 года На второй год эксплуатации по группе в среднем показатель возрастает, 146 хотя сезонные изменения остались такими же, как и в предыдущем году. В последний год исследования переживаемость по сезонам соответствовала требованиям стандарта, а сезонные отличия были недостоверны. Во второй группе, также как и в первой, переживаемость семени достоверно возрастает к 3,1-4 годам (Р>0,999) (табл. 19). В 1996 году у быков 3-ей группы переживаемость семени к осени достоверно снизилась (Р>0,99) и в следующем году оставалась ниже 3 баллов по всем сезонам. Наиболее низкая переживаемость семени была отмечена весной и летом, хотя достоверных сезонных отличий не было установлено. В 1998 году в возрасте 4,1-5 лет переживаемость семени к осени достоверно возросла (Р>0,99). На заключительном этапе большая часть быков выбыла из племенного использования в летний период, поэтому отражены только зимний и весенний. Сперма по исследуемому параметру отвечала требованиям стандарта (табл. 19). Переживаемость семени быков данной группы достоверно увеличилась к возрасту 3,1-4 года (Р>0,95). В этой группе следует выделить быков, у которых переживаемость семени весь исследуемый период в среднем по сезонам была ниже 3 баллов – Короля и Викинга. В четвѐртой группе быков отмечены значительные сезонные колебания по исследуемому параметру, переживаемость семени в 1996 году достоверно снизилась к осени (Р>0,999). В 1997 году в среднем по всем сезонам переживаемость семени была ниже 3 баллов, особенно весной, но к осени достоверно возросла (Р>0,99). В возрасте 5,1-6,0 лет сохраняется такая же тенденция, хотя межсезонные отличия были недостоверны. На заключительном этапе исследования переживаемость семени достоверно увеличилась к весне (Р>0,95). В данной возрастной группе также выявлены быки, у которых независимо от сезона года и возраста сперма после криоконсервации имела переживаемость ниже 3 баллов – быки Зоркий 2612, Фотон 2412, Беляш 942, Весѐлый 3000828667. Вероятно, сперма этих быков не обладает достаточной пластичностью к криоконсервации. В целом в четвѐртой группе быков к возрасту 147 6,1-7 лет переживаемость семени достоверно возрастает (Р>0,95). В пятой группе на начальном этапе исследования, наиболее неблагоприятными были летний и осенний периоды (табл. 19), переживаемость семени к осени достоверно снизилась (Р>0,95). В 1997 году в этой группе, также как и в других, переживаемость семени не превышала 3 баллов по всем сезонам, и только к осени наблюдалась тенденция к возрастанию переживаемости семени, хотя межсезонные отличия не были достоверными. В 1998 году в возрасте 6,1-7 лет в зимний период сперма не соответствовала ГОСТу по переживаемости у всех быков. Весной, после выбраковки, в группе осталось два быка, летом один. Следует отметить быков Коралла 1008 и Вальса 2846, у которых переживаемость семени в период с 1996 по 1998 годы от сезона к сезону, независимо от возраста практически не менялась, и в среднем была ниже 3 баллов. Можно предположить, что сперма этих быков плохо переносит криоконсервирование, а сезон и возраст не оказали влияния на способность гамет переносить замораживание-оттаивание. Переживаемость семени у других быков колебалась от сезона к сезону. Различия по возрасту были не достоверны. На момент исследования в возрасте от 5,1 лет был 1 бык – Важный 9009, переживаемость семени, которого в 1996 году в зимний, весенний, летний периоды соответствовала норме, а осенью снизилась до 2 баллов и в дальнейшем в возрасте от 6 лет и старше от сезона к сезону не превышала 3 балла. Кроме того, в 1996 году в возрасте от 7,1 лет был также один бык – Томкат 116. Переживаемость семени у этого быка не менялась от сезона к сезону с изменением возраста и в течение всего исследуемого периода соответствовала требованиям ГОСТа. Выделили 1997 год, в котором переживаемость семени по всем возрастным группам была низкой, вероятно, это связано с факторами кормления, которые негативно повлияли на сперматогенез, и в конечном итоге, на качество спермопродукции быков-спермодоноров. Таким образом, можно сделать вывод, что в период становления половых функций (возраст от 18-20 месяцев до 4 лет) сперма быков более подвержена 148 температурному шоку, чем сперма быков в период активных половых функций (возраст от 4 до 10 лет). По мнению Т.П. Ильинской и В.С. Антонюк (1975), качество спермы и долголетие племенной службы быков определяется не столько их возрастом, сколько состоянием здоровья, крепостью конституции, условиями использования и содержания. Таким образом, наиболее низкая переживаемость семени была отмечена в весенне-летний период, а сперма быков-спермодоноров зимнего периода взятия обладает более высокой биологической полноценностью, чем взятое летом. Поэтому рекомендуем в летний период сократить частоту взятия спермы у производителей, чтобы повысить их воспроизводительную функцию, и снизить долю семени более низкого качества, полученного летом. 3.8.2 Зависимость переживаемости спермы от разной генеалогической принадлежности Переживаемость спермы быков-спермодоноров зависит от различных факторов внешней и внутренней среды организма. Одним из основных параметров, определяющих жизнеспособность сперматозоидов, является состояние мембранных структур, входящих в их состав, который генетически детерминирован (Нарижный, А.Г. 1978; Наук, В.А. 1987). Это обусловило различную реакцию спермы быков на температурные воздействия. Проводя исследования, мы сделали предположение о наследственной предрасположенности данного признака у быков разных линий к температурному шоку и широте нормы реакции. Для этого провели анализ родословных быков разных линий и пород по данному показателю. Переживаемость семени быков линии П. Говернера (n=11) представлена на рисунке 30. 149 Рисунок 30 – Переживаемость семени быков-спермодоноров линии П. Говернера При анализе быков данной линии были выявлены животные, которые в исследуемый период имели средний балл по переживаемости ниже трѐх: Висмут, Фотон, Грозовой, Умелый. Все быки принадлежали ветви Санисайд Стендаут Кэвелли 1620273. Ветвь представлена на рисунке 31. Хелли Ет 21400, 80675 Ховард Хом Кадеман 1842371 Санисайд Стендаут Кэвелли 1620273 Е.Д. Тонто Кэвелли 22235 Фурион 1268 Ирис 4164 ● Херсон ▲ Ж. Кавеман Ред 12382 Клеманс 3067 Кольт 69 Мик 1 Висмут 11 ● Венец Фунтик 3442 Дивный 9928 Пунш 2346 ● Иркут 9355 Флориан 31 Василѐк 8675 Север 8729 Тагил 5438 Грозовой 2597 Фотон 2412 ▲ Надменный 2457 Казей 1832676 Банк 8847 Санисайд Кид Ред 1810994 Рути Ред 394772 Оникс 8 Кингит Леадер 1926790 У. Леад Вайле Ред 2193217 Умелый ЕТ - 9601 Важный 9009 Рисунок 31 – Ветви Санисайд Стендаут Кэвелли 1620273 линии П. Говернера (▲- некроспермия; ●- спастический парез) 150 Вероятно, сперма быков этой ветви не обладает достаточным адаптационным резервом к криоконсервированию. Переживаемость семени быков линии М. Чифтейн (n=20) представлена на рисунке 32. Рисунок 32 – Переживаемость семени быков-спермодоноров линии М. Чифтейн Наиболее неблагоприятным годом по исследуемому показателю также являлся 1997 год. В линии выделены родственные группы быков, которые имели переживаемость семени ниже стандарта, и быков, у которых переживаемость семени была стабильной на протяжении 4-х лет. В течение исследуемого периода быки Треф 3692, Быстрый 9312, Севок 3488 (сыновья быка Хариуса 2170) имели переживаемость больше 3 баллов. Видимо, сперма сыновей быка Хариуса 2170 обладает хорошим адаптационным резервом к криоконсервированию. У быков данной линии переживаемость семени менялась от сезона к сезону. У сыновей быка Моби 260: Кувшинчика 74334, Карата 3786 – переживаемость семени была ниже стандарта. Сыновья быка Пиклонда 102 Поклонник 346 и Пловец 305 также весь исследуемый период имели переживаемость семени ниже стандарта. Низкими значениями по исследуемому параметру отличалась и сперма быка Зоркого 2612. Переживаемость семени быков линии С.Т. Рокит (n=6) отображена на 151 рисунке 33. У быков данной линии переживаемость семени по годам в среднем с 1996 по 1998 годы была ниже 3 баллов. Следует отметить быка Весѐлого, у которого переживаемость семени в начальный период соответствовала стандарту, но с 1997 года не поднималась выше 2 баллов. Рисунок 33 – Переживаемость семени быков-спермодоноров линии С.Т. Рокит Низкая переживаемость семени отмечена также у быка Одуванчика 5057, который выбыл в дальнейшем по причине некроспермии. Кроме того, в сперме этих быков отмечен высокий уровень аномальных форм спермиев, как в нативной, так и криоконсервированной сперме. Переживаемость семени быков линии В.Б. Айдиал (n=9) представлена на рисунке 34. Переживаемость семени быков этой линии изменялась от сезона к сезону по годам. Низкая переживаемость семени отмечена у быков Беляша и Вымпела в среднем за весь исследуемый период – 2,19 и 2,51 балла соответственно. 152 Рисунок 34 – Переживаемость семени быков-спермодоноров линии В.Б. Айдиал У этих быков доля аномальных форм спермиев резко возрастала в криоконсервированной сперме. Вероятно, сперма этих быков плохо адаптирована к режиму «замораживания – оттаивания». У быков этой линии переживаемость семени, так же, как и у быков других линий, была самой низкой в 1997 году. Переживаемость семени быков линии Р. Соверинг (n=14) представлена на рисунке 35. Рисунок 35 – Переживаемость семени быков-спермодоноров линии Р. Соверинг Самая низкая переживаемость семени быков также была отмечена в 1997 году. Переживаемость семени быков данной линии колебалась от сезона к сезону и из года в год, как в среднем по группе, так и индивидуально. Следует выделить 153 быков Гипса и Визитѐра, являющихся внуками быка Валианта, у которых переживаемость семени в среднем за весь период не превышала 3 баллов. В данной группе на протяжении всего исследуемого периода переживаемость спермиев быков Стрижа и Хваткого не превышала 3 баллов. У этих быков отмечен высокий уровень аномальных форм спермиев в нативной сперме и их резкое увеличение в криоконсервированной. Переживаемость семени быков линии Р. Ситейшн (n=3) в динамике лет представлена на рисунке 36. Рисунок 36 – Переживаемость семени быков-спермодоноров линии Р. Ситейшн Переживаемость семени с 1996 года по 1998 год не превышала 3 баллов, среди этих быков был Коралл 1008, сын которого Потешный 505 в свою очередь обладал лучшими показателями адаптации семени к условиям замораживания. Переживаемость семени быков симментальской породы немецкой селекции 1-ой группы (n=8) представлена на рисунке 37. 154 Рисунок 37 – Переживаемость семени быков-спермодоноров симментальской породы немецкой селекции первой группы Переживаемость семени у быков данной группы была в среднем ниже требований стандарта на протяжении всего периода исследования. Но в группе не было быков, у которых весь период сперма не соответствовала бы стандарту. Вероятно местные климатические условия, а также другие условия содержания и кормления по-разному действовали на быков данной группы. В одних случаях повышая адаптационные качества спермы, а в других, наоборот, снижая их. Переживаемость семени быков симментальской породы немецкой селекции 2-ой группы (n=13) в динамике лет представлена на рисунке 38. Рисунок 38 – Переживаемость семени быков-спермодоноров симментальской породы немецкой селекции второй группы У быков данной группы переживаемость семени значительно варьировала 155 на протяжении всего исследуемого периода. Следует отметить, что в 1997 году в среднем по группе (также как и в других группах) переживаемость семени не превышала три баллов. К 1998 году в зимний период переживаемость соответствовала требованиям стандарта, но весной, летом и осенью была ниже нормы. Переживаемость семени быков-спермодоноров, полученной в 1999 году соответствовала требованиям ГОСТа. Вероятно, низкая переживаемость семени в предыдущие годы связана с периодом адаптации быков к новым условия кормления, содержания, местному климату. Симментальские быки российской селекции были представлены двумя производителями – Королѐм 5807 и Вальсом 2846. Данные отображены на рисунке 39. Рисунок 39 – Переживаемость семени быков-спермодоноров симментальской породы российской селекции В 1996-1997 годах переживаемость семени быка Короля 5807 соответствовала требованиям стандарта, но резко снизилась в 1999 году. Такая же закономерность прослеживалась у быка Вальса 2846. Оба быка выбыли по причине аспермии. Таким образом, при анализе линий по данному показателю явных различий между ними выявлено не было, хотя были выделены некоторые родственные 156 группы быков внутри линий, которые имели переживаемость семени ниже требований стандарта: – линия П. Говернера – Висмута, Фотона, Грозового, Умелого, принадлежащих ветви Санисайд Стендаут Кэвелли 1620273. – линия М. Чифтейн – сыновей Моби 260: Кувшинчика, Карата; сыновей Пиклонда 102: Поклонника и Пловца. – линия Р. Соверинг: Гипса и Визитѐра, являющихся внуками Валианта. Выделена группа быков, у которых сперма отличается хорошей способностью к криоконсервированию. К ним относятся быки линии М. Чифтейн (сыновей Хариуса 2170): Треф, Быстрый, Севок. Также выявлены быки, у которых низкая переживаемость семени сочеталась с высоким уровнем аномальных форм спермиев: Весѐлый, Одуванчик, Беляш, Вымпел, Стриж, Хваткий. Для поиска причин низкой переживаемости семени был проведѐн ряд исследований по параметрам обмена, в частности – липидам. Они выполняют важную роль в качестве структурных компонентов клеточных мембран, входят в состав митохондрий в комплексе с белками, где протекают окислительные процессы и значительная часть процессов промежуточного обмена, микросом и других клеточных структур. Это так называемый протоплазматический жир, состав и содержание которого довольно постоянно. В отдельном исследовании, проведѐнном сотрудниками лаборатории биотехнологии зооинженерного факультета КрасГАУ, отслеживалась динамика некоторых параметров обмена веществ у животных, проходящих период адаптации после их транспортировки из Германии, по сравнению с быками адаптированными к местным условиям. Определяли общие липиды в сыворотке крови быков. Были выделены группы животных местной селекции и быки-иммигранты. В первой группе животные распределились таким образом – у 44,0 % быков содержание липидов было ниже нормы и у 56,0 % – в норме. Во 2-ой группе у 93,3 % быков содержание общих липидов в сыворотке крови было ниже нормы, у 6,7 % – в 157 норме. Весной тенденция не изменилась. При анализе в разные сезоны года разница между группами была достоверной (Р 0,99), что говорит о значительной доле влияния периода адаптации на величину содержания общих липидов (Кригер Н.В., 1998; Синяев Д.П., 1998). Отсюда можно сделать предположение, что пониженное содержание общих липидов может привести к нарушению формирования клеточных мембран у гамет продуцируемых вновь завезенными животными. Следовательно, качество получаемой спермы может быть снижено в силу того, что мембраны не обладают высокой устойчивостью к воздействию низких температур. В частности, способности спермиев к криоконсервированию. Данное отклонение также может быть симптомом различных нарушений обмена веществ и как следствие – снижение воспроизводительной способности быков-спермодоноров, неполной реализации генетического потенциала. 3.9 Морфологические исследования нативной и криоконсервированной спермы быков-производителей Воспроизводство животных в современных условиях базируется на использовании искусственного осеменения, что неизбежно приводит к значительному сокращению числа производителей. В результате не только увеличивается влияние отдельных особей на повышение продуктивности, но и возрастает опасность широкого распространения скрытых генетических дефектов, носителями которых могут быть некоторые из них (Четвертакова Е.В. и др., 2009, С. 29). В селекционной работе очень часто наблюдается ввод в популяцию новых животных, например, импорт быков для улучшения местных популяций и как следствие происходит изменение генных частот. В популяцию могут быть введены не только желательные гены, но и такие, которые обусловливают аномалии, снижение воспроизводительные способности и др. К сожалению, используемые сейчас методы аттестации быков по качеству потомства не дают полной информации о генотипе. 158 Внутрилинейное разведение с применением умеренного или близкого инбридинга в племенных хозяйствах дает возможность не только стабилизировать ценные продуктивные качества предка путем накопления его доминантных аллелей, но и проверить носительство скрытых вредных рецессивных аллелей, определить мутационный груз породы и популяции. Нами был выбран цитологический подход, так как цитологический мониторинг позволяет оперативно реагировать на изменения происходящие в ходе селекции. Создается возможность определения частоты и характера нарушений сперматогенеза. Постоянный мониторинг изменений генетической структуры популяций позволяет улавливать изменения и прогнозировать их дальнейшие последствия, выявлять наследственные аномалии спермиев и своевременно выбраковывать быков-носителей аномалий из племенного использования (Четвертакова Е.В. и др., 2003 а, С. 323; 2009 а; 2013 б, С. 11). В нашей работе был проведен анализ морфологии гамет быков, установлены закономерности наследования морфологических нарушений в строении спермиев. 3.9.1 Исследование морфологии гамет быков в нативном и криоконсервированном семени быков различных линий в зимне-весенний период В современных условиях селекции требования к используемым быкампроизводителям резко возрастают, поскольку их генотипы тиражируются на крупных маточных стадах. Результативность искусственного осеменения определяется качеством используемой спермопродукции, которая зависит от доли морфологически нормальных сперматозоидов (Четвертакова, Е.В., 2012 г). В ходе работы была проанализирована спермопродукция на наличие патологических форм сперматозоидов в линиях быков в зимне-весенний период. Анализировалась спермопродукция быков линий М. Чифтейн, Р. Соверинг, В.Б. Айдиал, П. Говернер, С.Т. Рокит и быки симментальской породы российской и немецкой селекции. 159 У быков линии М. Чифтейн в среднем по группе в нативной сперме зимнего периода доля аномальных форм спермиев (ДАС) превышала требования ГОСТа на 7,4 %. Наибольшую долю аномалий составляли спермии с загнутыми хвостами, доля которых возрастала в криоконсервированной сперме на 1,9 % (Р>0,99), с деформацией головок на 4,6 % (Р>0,999), слипшихся головками на 3,6% (Р>0,95). В криоконсервированной сперме ДАС возрастала до 33,1 % в основном за счѐт таких же нарушений. Высокий уровень аномальных форм спермиев был обнаружен у быка Дарѐного 99. В нативной сперме которого ДАС составляла 28,0 %, а в криоконсервированной возрастала – до 47,4 % (приложение Л). Обратили на себя внимание быки Ватин и Вес. У которых ДАС в нативной сперме была в пределах нормы, но резко возрастала в криоконсервированной сперме до 41,2 % и 48,5 % соответственно. Основную долю составили спермии с закрученными – 22,1 % и разрушенными – 19,1 % хвостами. У Веса ДАС превышала требования ГОСТа на 1,3 %, а в криоконсервированной сперме количество аномальных форм увеличилось до 48,5 %. В криоконсервированной сперме появляются спермии с оторванными головками – 6,4 %, увеличивается до 18,6% доля спермиев с загнутыми хвостами, с разрушенными хвостами – до 8,8%, слипшихся головками – до 13,7 % (рис. 44 и 45). Постоянно высокой ДАС как в нативной, так и криоконсервированной сперме (ДАС свыше 40,0 %) отличались быки Вихрь 334, Родной 4168, Лимон 906, Карат 3788. К группе быков, у которых ДАС как в нативной, так и криоконсервированной сперме соответствовала норме, отнесли быка Трефа 3692. У быка Зоркого 2612 отмечался высокий уровень спермиев с оторванными головками в нативной сперме – 10,7 % и в криоконсервированной сперме – 17,1%. Доля быков со спермой, соответствующей норме, составила 18,7% по нативной и 12,5 % по криоконсервированной сперме. В весенний период в среднем по группе быков линии М. Чифтейн количество аномальных спермиев снижается, по сравнению с зимним периодом, но остаѐтся высоким как в нативной, так и криоконсервированной сперме – 20,2% 160 и 29,2 % соответственно. В криоконсервированной сперме увеличивается доля спермиев с разрушенными головками на 0,8 % (Р>0,99), разрушенными хвостами на 7,2 % (Р>0,999), слипшихся хвостами на 1,4 % (Р>0,99). В весенний период, как в нативной, так и криоконсервированной сперме ДАС снижалась, но оставалась стабильно высокой у быков Вихря 334 – 30,4 % и 22,3 %, Родного 4168 – 31,6 % и 18,7 %, Карата 3788 – 20,0 % и 36,4 % соответственно. Формы нарушений представлены на рисунке 41. У быка Лимона 906 в нативной сперме ДАС не превышала норму, но резко возрастала в криоконсервированной сперме – до 37,1 %. У быка Севка 3988 ДАС соответствовала норме. У быка Трефа 3692 весной ДАС в нативной сперме соответствовала требованиям ГОСТа, но в криоконсервированной превышала норму на 7,0 %, в основном за счѐт увеличения доли спермиев с разрушенными хвостами (до 11,8 %). Быки Севок и Треф являются сыновьями быка Хариуса 2170 и отличаются низким содержанием аномальных форм спермиев и высокой переносимостью гамет криоконсервирования. Доля быков со спермой, соответствующей норме, в весенний период по нативной сперме составила 56,2 % и по криоконсервированной – 6,2 %. Данные по морфологическому строению спермиев быков данной линии представлены в приложении Л. В линии быков Рф. Соверинг доля аномальных спермиев (ДАС) в нативной сперме в зимний период в среднем по этой группе соответствовала требованиям ГОСТа и составляла 17,5 %, но значительно увеличивалась в криоконсервированной сперме. Доля сперматозоидов с оторванными головками возросла с 1,5 % в нативной сперме до 6,1 % в криоконсервированной сперме, с загнутыми хвостами – с 8,9 % до 9,2 %, с разрушенными хвостами – с 1,5 % до 3,9%, слипшихся головками – с 3,4 % до 7,0 % соответственно (табл. 20). В данной группе следует выделить быка Визитѐра 16, у которого ДАС в нативной сперме составила 9,2 %, но резко возросла после криоконсервации – до 56,2 %, причѐм увеличилась доля спермиев с загнутыми – до (24,5 %) – и разорванными до (31,7 %) хвостами соответственно, но в сперме, как в нативной, так и криоконсервированной не было склеившихся и тератологических сперматозоидов 161 (приложение М). У быка Гипса 1381 ДАС в нативной сперме также соответствовала требованиям ГОСТа и не превышала 8,0 %, но значительно возросла в криоконсервированной (до 70,0 %). Увеличение произошло в основном за счѐт спермиев с оторванными головками, доля которых составила 50,2 %, а также спермиев с загнутыми хвостами – 15,4 %, слипшихся спермиев не наблюдалось. Оба быка являются внуками быка Валианта 502383. Таким образом, у быков Гипса и Визитѐра 16 выявлена низкая переносимость гамет к криоконсервированию, и, причѐм, наиболее уязвимыми оказались структуры жгутиков. Высокой ДАС в нативной и криоконсервированной сперме отличался бык Дуплет 5527 – 33,7 % и 45,0 % соответственно. У быков этой линии встречается весь спектр, учитываемых нами аномалий спермиев. Особенно следует отметить такую аномалию, как слипание головками. Если в нативной сперме этот порок качества составил 0,17 %, то в криоконсервированной он возрос до 20,1 %. Уровень спермиев с загнутыми хвостами был высок как в нативной, так и криоконсервированной сперме, и практически не менялся – 16,6 % и 15,2 % соответственно (табл. 20). В весенний период у быков линии Рф. Соверинг спектр аномалий, которые проявляются чаще, не изменился, однако снизился уровень аномальных спермиев как в нативной, так и криоконсервированной сперме – до 16,9 % и до 26,2 % соответственно. Основную долю в нативной и криоконсервированной сперме составили: оторванные головки – 1,9 % и 4,5%, загнутые хвосты – 5,5 % и 4,6 %, с разрушенными хвостами – 1,6 % и 5,8 %, спермии слипшиеся головками 5,6 % и 6,6 % (табл. 20). Весной увеличивается количество спермиев с разрешенными хвостами на 4,25 % (Р>0,95). Встречаются карликовые сперматозоиды. 162 Таблица 20 – Структура морфологических нарушений в строении сперматозоидов быков разных линий %, (Х±mх) Формы сперми ев Линейная принадлежность быков-спермодоноров М. Чифтейн n=16 нативн криоконсе ое семя рвированн ое семя 1 2 3 4 5 6 7 8 4,22 ±0,9 11,2 ±2,9 0,50 ±0,2 0,70 ±0,2 2,9 ±1,0 0,9 ±0,3 1,4 ±0,7 3,6 ±0,8 3,00 ±0,6 13,1 ±2,7 5,07 ±0,2*** 0,7 ±0,3 5,7 ±1,4 1,6 ±0,7 1,13 ±0,6 7,2 ±1,4* Рф. Соверинг n=13 нативн криоконсе ое семя рвированн ое семя 1,47 ±0,4 8,85 ±2,6 0,41 ±0,2 1,2 1±0,5 1,51 ±0,6 0,34 ±0,2 0,32 ±0,1 3,37 ±0,9 6,08 ± 3,7 9,2 ± 2,0 0,55 ± 0,4 3,89 ± 2,4 3,87 ± 1,1 0,56 ± 0.3 0,56 ± 0,25 6,97 ± 1,7 В.Б. Айдиал n=9 нативн криоконсе ое семя рвированн ое семя Зимний сезон 2,09 ± 0,9 8,22 ± 2,5 0,11 ± 0,007 0,89 ± 0,4 1,29 ± 0,7 0,42 ± 0,2 0,72 ± 0,3 3,94 ± 1,8 1,51 ± 0,7 11,1 ± 54,0 0,72 ± 0,6 1,06 ± 0,5 5,94 ± 1,8* 0,85 ± 0,4 0,36 ± 0,1 7,06 ± 1,6 П. Говернер n=11 нативн криоконсе ое семя рвированн ое семя 2,48 ± 0,7 8,36 ± 2,5 0,13 ± 0,1 2,38 ± 2,2 3,14 ± 1,0 0,52 ± 0,2 1,72 ± 0,8 3,25 ± 0,7 5,38 ± 3,7* 15,3 ± 3,9 0,1 ± 0,05 2,57 ± 2,4 7,65 ± 2,2 0,54 ± 0,3 0,33 ± 0,16 4,68 ± 1,5 С.Т. Рокит n=6 нативн криоконсе ое семя рвированн ое семя 4,38 ± 1,8 17,74 ± 5,7 0,24 ± 0,2 1,86 ± 1,2 2,36 ± 0,9 0,1 ± 0,1 1,01 ± 0,4 3,35 ± 1,2 3,43 ± 1,8 13,27 ± 1,9 0,23 ± 0,2 3,25 ± 1,7 9,18 ± 4,6 0,11 ± 0,1 0,36 ± 0,3 8,03 ± 0,3** 163 Окончание таблицы 20 1 2 3 4 5 6 7 8 2,4 ± 0,5 6,9 ± 1,1 0,3 ± 0,1 0,7 ± 0,21 2,1 ± 0,3 0,8 ± 0,2 0,7 ± 0,3 6,1 ± 0,7 3,1 ± 0,6 5,7 ± 1,1 0,4 ±0,1 1,5 ± 0,21** 9,3 ±1,2*** 2,2 ±0,4** 0,6 ±0,2 6,5 ±0,9 1,92 ± 0,4 5,47 ± 1,4 0,3 ± 0,1 1,24 ± 0,3 1,57 ± 0,6 0,57 ± 0,2 0,3 ± 0,1 5.56 ± 0,8 Весенний сезон 4,47 ± 1,4 1,19 ± 2,46 ± 0,7 0,3 4,55 ± 1,1 6,79 ± 4,79 ± 1,4 2,1 0,69 ± 0,3 0,26 ± 0,53 ± 0,3 0,1 1,98 ± 1,2 0,76 ± 1,3 ±0,4 0,3 5,82 ± 1,7* 1,88 ± 6,34 ±1,8* 0,6 1,17 ± 0,4 1,46 ± 1,16 ±0,2 0,8 0,98 ± 0,4 0,45 ± 0.42 ±0,2 0,2 6,57 ± 1,0 5,37 ± 7,14 ±1,1 0,9 2,17 ±0,7 4,13 ±0,6 0,27 ±0,08 0,51 ±0,1 2,25 ±0,6 0,52 ±0,2 0,48 ±0,2 4,23 ±0,7 2,08 ±0,6 9,93 ±1,6** 0,51 ±0,3 1,08 ±0,2* 10,18 ±2,4** 1,77 ±0,6 0.59 ±0,3 5,79 ±1,3 1,87 ±0,7 5,33 ±1,1 0,21 ±0,1 1,29 ±0,6 2,64 ±0,5 0,21 ±0,12 0,99 ±0,5 6,13 ±1,9 1,86 ±0,5 7,98 ±1,8 0,42 ±0,1 1,62 ±0,7 7.29 ±2,2 0,65 ±0,4 1,29 ±1,0 8,09 ±1,5 1 – оторванные головки; 2 – загнутые хвосты; 3 – деформация головки; 4 – разрыв головок; 5 – разрыв хвоста; 6 – слипшиеся хвостами; 7 – тератологические формы; 8 – слипшиеся головками. * - (Р> 0,95); ** - (Р> 0,99); ***- (Р> 0,999) 164 Доля быков с ДАС, не превышающей 18,0 %, в зимний период составила 61,5 % по нативной сперме и снизилась до 15,4 % по криоконсервированной. К быкам с наименьшей ДАС относятся быки Лекторий 5264 и Тигр 4258. У этих животных ДАС как в нативной, так и криоконсервированной сперме соответствовала ГОСТам. У быка Модиста 4233 ДАС в нативной сперме соответствовала ГОСТу, но возрасла в криоконсервированной сперме и превышала норму на 2,1 %. Быки Модист и Тигр являются сыновьями быка Эдди 73287. Весной у быков Лектория 5265 и Тигра 4258 ухудшается качество криоконсервированной спермы. Ф.И. Осташко (1978) показал, что основной причиной снижения криорезистентности спермы в весенний период является ухудшение качества кормов и ветеринарно-гигиенических условий содержания. Бык Томкат 116 весь период эксплуатации характеризовался стабильными половыми функциями, высоким качеством семени. У быков Визитѐра, Восхода, Гипса, Пряника, Теремка ДАС в нативной сперме соответствует ГОСТу, но значительно повышается в криоконсервированной сперме до 33,3 %, 36,1 %, 32,7 %, 42,5 %, 35,2 % соответственно. Доля быков с ДАС в нативной сперме, соответствующей ГОСТу, несколько увеличилось (до 69,2 %), в криоконсервированной осталось на уровне 15,4 %. У быков линии В.Б. Айдиал в зимний период ДАС в нативной сперме в среднем соответствовала ГОСТу, но превышала на 10,7 % в криоконсервированной. Значительную долю аномалий, как в нативной, так и в криоконсервированной сперме составляли спермии с ЗХ – от 8,2 % до 11,2%, и СГ – от 3,9 % до 7,1 %. В криоконсервированной сперме, в сравнении с нативной, значительно возрастала доля спермиев с разрушенными хвостами – от 1,3 % до 5,9 % (Р>0,95). Быки Вампир, Вершок и Вымпел, которые имели ДАС как в нативной, так и криоконсервированной сперме значительно выше нормы. Плохую способность спермиев к криоконсервированию в зимний период показал бык Беляш (ДАС – 31,4 %). Основную долю аномальных гамет у него в криоконсервированной сперме составили спермии с оторванными головками – 165 7,2% и спермии, слипшиеся головками – 11,5 %. Встречались спермии с загнутыми хвостами (рис. 43) (приложение Н). В зимний период можно выделить быков с ДАС, соответствующей ГОСТу, как в нативной, так и криоконсервированной сперме: Велюра, Мартена 3412, Мирного 5274. Доля быков в зимний период со спермой, соответствующей норме по ДАС в нативной сперме составила 66,7 %, в криоконсервированной 33,3 %. В весенний период в среднем по линии В.Б. Айдиал ДАС в нативной сперме составила 18,2 %. Виды аномалий спермиев в данной линии не изменялись. В криоконсервированной сперме ДАС снижалась по сравнению с зимним периодом в 1,5 раза – до 24,0 %, но превышала норму на 6 %. Как и в зимний период, наиболее часто встречались аномалии спермиев с загнутыми хвостами – 6,8 %. В криоконсервированной сперме, также как и в зимний период, увеличивалась доля спермиев с разрушенными хвостами на 4,46 % (Р>0,95). Весь период исследования достаточно высокой ДАС отличался бык Беляш 942. В криоконсервированной сперме у него ДАС увеличилась до 41,6 %, особенно возросло количество спермиев, слипшихся головками – 11,2 %, спермиев с оторванными головками – 4,4 %, доля спермиев с загнутыми хвостами, как в нативной так и криоконсервированной сперме, практически не изменялась – от 10,8 % до 11,8 % соответственно. У быка Вампира в нативной сперме ДАС была в пределах допустимой нормы, но значительно возросла в криоконсервированной – до 30,0 %, в основном за счѐт спермиев с закрученными – 10,7 % – и разрушенными – 6,3 % хвостами. Оставалась стабильно высокой доля спермиев, слипшихся головками как в нативной – 8,2 %, так и в криоконсервированной – 10,1 % сперме. ДАС у быков Вершка и Вымпела попрежнему оставалась высокой. От таких быков как Мирный и Велюр за весь период исследования получали спермопродукцию, отвечающую требованиям ГОСТа по анализируемому показателю. У быка Мартена ДАС в криоконсервированной сперме незначительно превысила норму за счѐт увеличения спермиев, слипшихся головками, до 7,8 %. В криоконсервированной сперме у всех быков 166 увеличивалась доля спермиев, слипшихся головками, что может свидетельствовать о потере заряда на поверхности мембран. Доля быков со спермой, соответствующей ГОСТу по ДАС, составила по нативной сперме 66,7 % и по криоконсервированной 33,3 %. Быки Беляш и Вымпел являются правнуками быка Р.О.Р. Эппл Элевейшн 1491007. Как в зимний, так и весенний период доля спермиев с закрученными хвостами в нативной и криоконсервированной сперме оставалась высокой у обоих быков. В криоконсервированной сперме у всех быков линии В.Б. Айдиал увеличивалась доля спермиев слипшихся головками, что свидетельствует о потере заряда на поверхности мембран. У быков линии П. Говернер в нативной сперме в зимний период в среднем ДАС составляла 22%, в криоконсервированной сперме – 38,8 %. Наиболее часто встречались аномалии хвоста, слипание головками и спермии с оторванными головками, причѐм последний порок значительно возрастал после размораживания с 2,48 % до 5,38 % (Р>0,95). Вероятно, изменился состав и фазовое состояние мембранных липидов, так как они определяют характер и размеры криоповреждения клеток (Наук В.А.,1987; Нарижный А.Г., 1993). Высокой ДАС как в нативной, так и в криоконсервированной сперме отличаются быки Ирис 4164, Витязь, Висмут, Умелый. У Ириса в нативной сперме ДАС составила 58,3 %, основную долю составили спермии с РГ и РХ – 24,8 %, 21,1 % соответственно, а так же спермии с ЗХ – 9,4 %. Кроме того, в размороженной сперме значительно возросло (до 13,7 %) количество СГ спермиев и (до 21,6 %) спермиев с закрученными хвостами. У быков Витязя, Висмута, Умелого основная доля аномалий приходилась на спермии с закрученными хвостами, и составляла 25,9 %, 12,5 %, 20,5 % соответственно. У быков Иркута, Пунша нативная сперма по ДАС соответствовала норме, но доля аномалий резко возрастала после размораживания – до 45,3 % у быка Иркута и до 73,1 % – у быка Пунша. Основную долю аномалий составляли спермии с загнутыми и разрушенными хвостами. У быка Фотона 2412 ДАС в нативной сперме в зимний период составила 7,0 %, но также возрастала после 167 размораживания до 36,4 %, причѐм наибольшая доля аномалий приходилась на спермии, СГ – 15,8 %, с ЗХ – 12,7 % и РХ– 6,1 % и на спермии с оторванными головками (рис. 45). В дальнейшем этот бык выбыл по причине некроспермии (приложение П). Быки Висмут, Иркут и Пунш имеют общего предка Ховарда Хома Кодемана 1842371, который является отцом Висмута и дедом Иркута и Пунша. У быков Грозового 2597 и Тагила 5438 ДАС в нативной и криоконсервированной сперме была в пределах нормы. В зимний период ДАС в нативной сперме находится в пределах допустимой нормы у 7 быков, в размороженной – только у двух быков. В весенний период в группе быков линии П. Говернера в нативной сперме в среднем по группе ДАС составляла 14,6 %, но значительно возрастала в криоконсервированной – до 31,9 %. В этот период ДАС в среднем по группе снижалась как в нативной, так и в размороженной сперме. В нативной сперме доля аномальных форм спермиев находилась в пределах нормы, но после размораживания она так же, как и зимой, возрастала – до 31,9 %, что свидетельствует о плохой переносимости спермой криоконсервации. В весенний период в криоконсервированной сперме быков этой линии возрастала доля спермиев с ЗХ на 5,8 % (Р>0,99), РГ на 0,57 % (Р>0,95), с РХ на 7,93 (Р>0,99), спермиев со слипшимися головками на 1,56 % (Р>0,99). Весной, также как и зимой, ДАС в нативной сперме быков Пунша и Ириса соответствовала ГОСТу, но значительно возрастала в криоконсервированной – до 37,4 % и 44,4 % соответственно. Основную долю аномалий у них составляли спермии с загнутыми хвостами. У быка Грозового 2597 ДАС соответствует норме. В весенний период до 81,1 % увеличилась доля быков, у которых нативная сперма соответствует требованиям ГОСТа, что может быть связано с увеличением светового дня, но по криоконсервированной сперме их доля снижается до 1,0 %. Несмотря на благоприятные условия внешней среды, увеличение светового дня, более длительного моциона, ДАС в криоконсервированной сперме остаѐтся высокой и значительно превышает требования ГОСТа. У быков линии С.Т. Рокит в среднем по группе в зимний период ДАС в 168 нативной сперме составила 31,0 %, в криоконсервированной – 34,5 %. Основная доля аномалий приходится на спермии с оторванными головками – 4,4 % (в нативной) и 3,4 % (в криоконсервированной), закрученными хвостами – 17,7 % и 13,3%, разрушенными хвостами – 2,4 % и 9,2 %, слипшимися головками – 3,3 % и 8,03 % (Р>0,99) соответственно. Стабильно высокий уровень аномалий отмечается в сперме быков Весѐлого (в нативной сперме ДАС изменяется от 45,1 % до 51,3 %), Одуванчика – от 52,0 % до 47,0 % соответственно. У быка Весѐлого наибольшая доля аномалий в криоконсервированной сперме приходится на спермии с разрушенными хвостами – 31,6 %. У быка Одуванчика стабильно высокий уровень спермиев с оторванными головками как в сперме нативной – 11,9 %, так и криоконсервированной – 12,4 %. Большую долю в нативной сперме быков линии С.Т. Рокит составляют спермии с загнутыми хвостами – 25,8 %, в криоконсервированной – 18,2 %. Значительно увеличилось количество спермиев с разрушенными хвостами от 7,6 % (в нативной) до 9,9 %(в криоконсервированной), слипшихся головками – от 1,0 % до 5,1 % соответственно (рис. 46). У быков Викинга и Водорода ДАС в нативной сперме в пределах допустимой нормы, в криоконсервированной ДАС увеличивается до 27,2 % и 24,3 % соответственно (приложение Р). Эти быки являются сыновьями быка Догай Энханкера Реда 9718. В зимний период количество быков с ДАС, соответствующей требованиям ГОСТа, составила 33,3 % в нативной сперме, но в криоконсервированной сперме у всех быков доля аномальных спермиев (ДАС) превышала требования стандарта. В весенний период в среднем по группе быков линии С.Т. Рокит 252803 ДАС значительно снижается – в нативной до 18,7 %, в криоконсервированной сперме – до 29,2 % (табл. 20). Увеличилась доля быков, сперма которых отвечает требованиям ГОСТа по ДАС, по нативной – до 66,7 %, по криоконсервированной сперме – до 16,7 %. Следует отметить, что весной почти в два раза увеличилась доля спермиев со слипшимися головками в криоконсервированной сперме и составила в среднем по группе 8,1 %. 169 Но в то же время отмечается снижение уровня спермиев с закрученными хвостами по сравнению с зимним периодом на 12,4 % в нативной и на 5,4 % в криоконсервированной сперме. Весной у быка Весѐлого значительно снизилась ДАС, но, тем не менее, осталась достаточно высокой как в нативной – 20,9 %, так и в криоконсервированной сперме – 20,8 %. У быка Одуванчика увеличилась доля нормальных спермиев до 82,0 %, но в криоконсервированной сперме она снизилась – до 70,0 %. У быка Викинга ДАС в криоконсервированной сперме увеличилась до 42,8 %. У быка Взлѐта ДАС в нативной и криоконсервированной сперме соответствует норме. Быки Викинг, Водород, Взлѐт (отец Дагай Энханкер Ред 9718) и Весѐлый – внуки Гленафтона Энханкера 343514, 503283). Морфологические нарушения спермы быков данных линий представлены на рисунках 47-49. У быков линии Рз. Ситейшн в зимний период средняя ДАС по группе составила 20,0 % в нативной и 29,5 % в криоконсервированной сперме. В весенний период ДАС в сперме снизилась до 19,0 %, но возросла до 33,4 % в криоконсервированной. В этой группе у отца и сына отмечается сходный характер динамики исследуемого показателя. У быка Потешного 505 в нативной сперме в зимний период ДАС не превышала норму, но возрастала после размораживания до 31,8 %. Такая же закономерность и в сперме весеннего периода, хотя в целом ДАС весной ниже, чем зимой. У быка Коралла (является отцом быка Потешного), также как и у сына, ДАС резко возрастает в криоконсервированной сперме по сравнению с нативной, как в зимний, так и весенний период. Наибольшую ДАС в зимний период в среднем по группе в нативной сперме составляли спермии с загнутыми хвостами – 5,4%, а также спермии, слипшиеся головками – 5,7 %; в криконсервированной сперме количество спермиев с загнутыми хвостами увеличилось до 8,9 %, спермиев, слипшихся головками, – до 8 %, а также значительно возросло количество спермиев с разрушенными хвостами (до 4,3 %) (приложение С). 170 Рисунок 40 – Сперма быка Веса (разрушенные хвосты), криоконсервированное семя, увеличение 600 3 2 1 Рисунок 41 – Сперма быка Родного 4168 КСС 1495 (1 – круглая головка, 2 – агглютинация, 3 – загнутые хвосты), нативное семя, увеличение 600 171 1 Рисунок 42 – Сперма быка Гипса 1381 КСГФ 153 (1 – патология хвоста и головки), нативное семя, увеличение 600 1 Рисунок 43 – Сперма быка Беляша 942 КСГФ 151 (1 – загнутые хвосты), нативное семя, увеличение 600 172 2 1 Рисунок 44 – Сперма быка Ириса 4164 КСС 1494 (1 – агглютинация, 2 – лизис головок), криоконсервированное семя, увеличение 600 Рисунок 45 – Сперма быка Фотона 2412 КСС 1469 (оторванные головки), криоконсервированное семя, увеличение 600 173 Рисунок 46 – Сперма быка Весѐлого 300082667 КСГФ 154 (агглютинация), криоконсервированное семя, увеличение 600 Рисунок 47 – Сперма быка кувшинчика 74331/8995 КСС 1487, (полное разрушение сперматозоидов), криоконсервированное семя, увеличение 600 174 Рисунок 48 – Сперма быка Быстрого 9312 / 8393 КСС 1476 (спермий с двумя хвостами, лизис головки), нативное семя, увеличение 600 Рисунок 49 – Сперма быка Ренита 09. 15956320 (1– агглютинация), нативное семя, увеличение 600 175 Рисунок 50 – Сперма быка Макета (загнутые хвосты), криоконсервированное семя, увеличение 600 1 2 Рисунок 51 – Сперма быка Макета (1 – агглютинация, 2 – загнутые хвосты), криоконсервированное семя, увеличение 600 176 В весенний период ДАС в криоконсервированной сперме значительно возросла за счѐт спермиев с загнутыми хвостами (до 6,7 %), с разрушенными хвостами – до 9,0 %, слипшихся головками – до 8,2 %. У быков Коралла и Потешного доля спермиев с разрушенными хвостами в зимний период не превышала 2,0 % как в нативной, так и криоконсервированной сперме, но у быка Ритма этот показатель изменяется от 2,3 % до 11,0 %, а весной от 4,9 % до 12,1 %. Быки симментальской породы российской селекции отличаются высокой ДАС в нативной и криоконсервированной сперме в зимний и весенний период (табл. 21) (приложение Т). Наибольшая доля дефектов приходится на аномалии и слипание спермиев. В зимний период в нативной сперме отмечено 28,7 % спермиев с загнутыми хвостами, весной их доля снижается до 22,6 %. В размороженной сперме повышается доля спермиев, слипшихся головками, до 11,7 % весной и до 12,8 % зимой. В дальнейшем быки выбыли из племенного использования по причине аспермии. Быки симментальской породы немецкой селекции представлены двумя группами: 1 – быки завоза 1995 года; 2 – быки завоза 1996 года. У быков первой группы количество аномальных форм в зимний период в нативной сперме было в пределах нормы, но возросло до 24,8 % в криоконсервированной сперме (приложение У). В этот сезон значительно возрастает количество спермиев слипшихся головками с 2,6 % в нативном семени и до 6,43 % в криоконсервированном (Р>0,95) Следует отметить быка Ранета 0993196, у которого ДАС в нативной сперме составила 37,0 % и оттаянной – 28,6 %. У быка Бодрого 0976262 ДАС в нативной сперме превысила норму на 1,5 % и резко возросла в криоконсервированной сперме (до 34,5 %). В среднем по группе стабильно количество спермиев с оторванными головками, как в нативной – 4,4 %, так и размороженной – 4,7 % сперме. Наибольшая доля спермиев с оторванными головками была обнаружена у быка Ранета 0993196 в нативной сперме – 20,2 %, у него же выявлены спермии с аномалиями хвоста – 15,5 %. В криоконсервированной сперме значительную долю составили также спермии с аномалиями хвоста – в среднем 18,1 %. 177 Таблица 21 – Структура морфологических нарушений в строении сперматозоидов быков симментальской породы %, (Х±mх) Формы спермиев 1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8 Симментальская порода Российская селекция n =2 Немецкая селекция 1-я группа n=8 2 группа n=13 нативное криоконсервированное криоконсе криоконсе семя семя нативное семя рвированное нативное семя рвированное семя семя Зимний сезон 1,38 0,90 4,45 2,3 4,74 0,8 28,71 9,38 3,43 1,0 5,71 1,1 0 5,67 0,31 0,1 1,23 0,6 0 3,21 0,90 0,3 1,24 0,7 3,85 12,40 2,88 1,1 4,07 1,5 0 3,37 0,95 0,4 0,96 0,5 3,78 0 0,55 0,2 0,41 0,1 1,54 11,69 2,60 0,7 6,43 1,2* Весенний сезон 1,09 1,83 2,86 0,5 6,21 1,8 3,14 0,9 4.80 1,1** 17,77 4,94 6,09 1,8 6,63 1,2 12,05 2,6 14,31 2,6 1,52 0,28 1,06 0,3 0,89 0,4 0,29 0,08 0,72 0,1** 1,26 2,33 1,53 0,4 1,64 0,5 1,81 1,5 2,97 0,6 5,40 9,03 2,69 1,3 5,21 1,3 2,95 0,4 5,25 0,8* 0,32 5,43 1,29 0,2 1,83 0,4 1,80 0,2 3,36 0,7* 2,94 0,63 0,50 0,2 0,78 0,4 0,34 0,1 0,69 0,3 4,71 12,85 4,13 0,9 5,88 1,3 8,91 1,3 10,61 1,1 1 – оторванные головки; 2 – загнутые хвосты; 3 – деформация головки; 4 – разрыв головок; 5 – разрыв хвоста; 6 – слипшиеся хвостами; 7 тератологические формы; 8 - слипшиеся головками. * - (Р> 0,95); ** - (Р> 0,99); ***- (Р> 0,999) 178 Большое количество спермиев с разрушенными хвостами обнаружено в сперме быка Бодрого 0976262 – 8,0 %. Быки Борец 0985196 и Бодрый являются сыновьями быка Бонзара 033763/03. В сперме этих быков доля спермиев слипшихся головками, превышала средний показатель по группе в нативной сперме на 2,0 %, в криоконсервированной – на 1,6 %. В весенний период, как в нативной, так и криоконсервированной сперме ДАС в среднем по группе возрастала. В криоконсервированной сперме увеличилось количество спермиев с оторванными головками до 6,2 %. По сравнению с зимним периодом увеличилось количество спермиев с загнутыми хвостами – до 6,1% в нативной сперме и до 6,6% в криоконсервированной. Весной ДАС у быка Бодрого в нативной сперме составила 34,5 %, в криоконсервированной – 29,3 %, у быка Динамита 0987130 28,5% и 35,6 % соответственно. Следует отметить, что в дальнейшем быки Бодрый 0976262 и Динамит 0987130 выбыли из племенного использования по причине некроспермии. Доля спермиев, слипшихся головками, была высока по всей группе и составила в нативной сперме 4,1 %, криоконсервированной – 5,9 %. Доля быков с ДАС, соответствующей ГОСТу, в зимний период составила 75,0 % по нативной сперме и 12,5 % по размороженной. Весной снизилось количество быков с ДАС, соответствующей норме, до 57,0 % по нативной сперме, а в криоконсервированной ДАС превысила норму у всех быков. Быки второй группы симментальской породы немецкой селекции в зимний период проходили карантин после транспортировки из Германии. Весной в среднем по группе ДАС была очень высока в нативной сперме – 31,3 %, в криоконсервированной – 42,7 %. Наиболее часто встречались спермии с загнутыми хвостами: от 12,0 % в свежеполученной – до 14,3 % в размороженной сперме, спермии, слипшиеся головками (рис. 50-51) – от 8,9% до 10,6%, оторванными головками с 3,14 до 4,8 % (Р>0,99); деформацией головок с 0,29 до 0,72 % (Р>0,99); разрушенными хвостами с 2,95 до 5,25 % (Р>0,95); слипшиеся головками с 1,8 до 3,36 % (Р>0,95) соответственно (приложение Ф). Резко из 179 группы выделялись быки Макет, у которого ДАС в нативной сперме составила 60,7 % и в криоконсервированной 68,1 % и Малец, ДАС составила 50,6 % и 68,1 % соответственно Данные быки являются сыновьями быка Мальфа 26857. Для них характерно наличие спермиев с загнутыми хвостами: у быка Макета – 27,8 %, быка Мальца – 29,7 %, а также доля спермиев, слипшихся головками, в нативной сперме у быка Макета – 17,3 %, у быка Мальца – 14,7 %, в размороженной сперме – 17,2 % и – 12,0 % соответственно. В нативной сперме ДАС соответствовала норме у быков Розера 690, Ропота 15961574, Ролика 11554176, но резко возрастала в размороженной сперме и значительно превышала норму. Быки Ранет 993196 и Ратник 979136, принадлежащие к первой группе, и быки Розер 690, Ренит 675, Радий 692, принадлежащие ко второй группе, относятся к родственной группе Редада 6514 и являются правнуками этого быка. Эта группа быков отличается высокой ДАС в криоконсервированной сперме – 40 %. Основная доля аномальных спермиев приходилась на спермии с оторванными головками – 8,1 %, а в среднем по группе –5,3 %, и с разрушенными хвостами – 7,6 %, в среднем по группе – 5,2 %. Вероятно, высокий уровень аномальных форм спермиев связан с периодом адаптации быков к новым условиям климата, кормления и содержания. Весной в нативной сперме у 11,0 % быков, принадлежащих к разным линиям и породам, встречаются С-образные спермии, их количество составило 2,8 %, но они полностью отсутствуют в размороженной сперме. В литературе не встречается описание этого дефекта, к тому же эта аномалия носила ярко выраженный сезонный характер, и, по-видимому, связана с условиями кормления, а также с индивидуальными особенностями животных по-разному реагировать на воздействие внешних факторов. У 8,8 % быков обнаружены незрелые формы спермиев, что может свидетельствовать о напряжѐнном сперматогенезе, связанном с режимом эксплуатации. У быков Дарѐного 99 и Иркута 9355 встречались в акросоме спермиев чѐрные точки. Такие дефекты акросомы неоднократно встречались у крупного рогатого скота, в особенности у быков 180 фризской породы в Голландии, Дании и Англии. Спереди на головке спермия находится чехлик. У 50–85,0 % сперматозоидов на чехлике имелись маленькие, похожие на пузырьки, тѐмные пятна. Дональд и Хэнкок (1953) сумели показать, что эта аномалия наследуется как аутосомный простой рецессивный признак. У таких производителей снижена подвижность спермиев, в результате оплодотворение не возможно (цитируется по Визнер Э., 1979, С. 362). Таким образом, основную долю аномалий, по всем линиям и породам, составили спермии с оторванными головками, загнутыми и разрушенными хвостами, со слипшимися головками. Доля этих аномалий незначительно колеблется в сторону либо увеличения, либо уменьшения в отдельных линиях, но чѐтко выражены у отдельных быков. Хенкок и Роллисон (цитируется по Визнер Э., 1979, С. 362) предполагают, что такая аномалия как оторванные головки наследуются по аутосомно-рецессивному типу. Отмечено, что гаметы быков-спермодоноров разных линий при криоконсервировании обнаружили индивидуальные особенности. Выявленные нарушения структуры гамет свидетельствуют об отсутствии у некоторых быков достаточного адаптационного резерва для обеспечения предъявляемых эксплуатационных требований. Установлено, что в процессе замораживанияоттаивания возрастает доля склеившихся спермиев. Агглютинация спермиев возникает от различных причин. Нейтрализация отрицательного заряда спермиев происходит при увеличении кислотности спермы и накоплении в ней ионов некоторых металлов (Паршутин, Г.В., 1983). У быков линии М. Чифтейн в зимний сезон доля спермиев с загнутыми хвостами возрастала в криоконсервированном семени на 1,9 % (Р>0,99), с ДГ на 4,6% (Р>0,99), весной увеличивалась доля спермиев с РГ на 0,8 % (Р>0,99), РХ на 7,2 % (Р>0,999), СХ на 1,4 % (Р>0,99). У быков линии В.Б. Айдиал в зимний период возрастала доля спермиев с РХ на 4,6% (Р>0,95), в весенний сезон увеличивалась доля спермиев с РХ на 4,46 (Р>0,95) по сравнению с нативным семенем. У быков-производителей линии П. Говернер в зимний сезон возрастала доля 181 спермиев с оторванными головками на 2,9 % (Р>0,95) по сравнению с нативным, весной увеличивалась доля спермиев с загнутыми хвостами на 5,8 % (Р>0,99), разрушенными головками на 0,57 (Р>0,95), РХ на 7,93 (Р>0,99), СГ на 1,56% (Р>0,99). У быков линии С.Т. Рокит в зимний сезон в криоконсервированном семени возрастает доля спермиев слипшихся головками на 4,73 % (Р>0,99). У быков второй группы немецкой селекции в весенний сезон в криоконсервированном семени возрастает доля спермиев с ОГ на 1,66 % (Р>0,99), с ДГ на 0,43 % (Р>0,99), с РХ на 2,3 % (Р>0,95) и спермиев СГ на 1,56 % (Р>0,95). Сперма быков симментальской породы немецкой селекции, принадлежащих ко второй группе, отличалась плохой адаптационной способностью к криоконсервированию. Вероятно, высокий уровень аномальных форм спермиев связан с кормовым стрессом, снижающим продуктивность животных. Кормовой стресс развивался одновременно с адаптационным стрессом и при попадании в организм условно патогенной микрофлоры, мог наступить полиэтиологический стресс, который вызвал значительные расстройства организма, ослабление защитных сил, значительно повлиять на обмен веществ, а по мнению С.И. Плященко (1987) молодые животные с недостаточно развитым механизмом адаптации больше подвержены пищевым стрессам, чем взрослые животные. У быков симментальской породы немецкой селекции выделяются сыновья быка Бонзара 033763103 – Борец 0985196 и Бодрый 0976262 с высокой долей спермиев слипшихся головками. Отмечено, что в весенний период количество патологических форм спермиев снижается по сравнению с зимним, как в нативной, так и в криоконсервированной сперме. Получение спермы более высокого качества весной вероятно связано с увеличением светового дня, более длительным моционом (Пепина Г.Д., 1970). Факт агглютинации спермиев является показателем некачественной спермы. Заряд и его величина определяются наличием сиаловых кислот на углеводных фрагментах мембранных гликопротеидов и липидов. Отсутствие 182 сиаловых кислот или снижение их количества может быть первичным или вторично развившимся, опосредованным процессом. Первичное отсутствие сиаловых кислот на поверхностях мембран может быть следствием ускоренного созревания гамет в условиях напряжѐнного сперматогенеза (Романова Е.М., 1994, С. 146). Склеивание жгутиками может происходить в результате аутоимунных процессов при ослаблении гематотестикулярного барьера, когда организм работает против собственных гамет, как против чужеродных (Соколовская И.И., 1981; Паршутин Г.В., 1983). Нарушения структуры гамет могут быть обусловлены генетическими, алиментарными факторами, техническим режимом эксплуатации, средами, используемыми при замораживании, а также технологией замораживания гамет. В результате проведѐнных исследований выявили, что доля аномальных спермиев с загнутыми хвостами и свободными головками встречается часто и во всех линиях. Можно предположить, что эти аномалии могут быть обусловлены заболеваниями придатков семенников (Ильинская Т.Г., 1975), или иметь генетическое происхождение, так как оторванные головки относят к первой группе дефектов, загнутые хвосты – ко второй (Визнер Э., 1979, С. 361). Также были обозначены группы быков, имеющих общее происхождение, и сперма которых отличалась низким содержанием аномальных форм спермиев в зимний и весенний период как в нативной, так и криоконсервированной сперме: – в линии Рф. Соверинг быки: Тигр 4258, Модист 4233, Лекторий 5262, Томкат 116; – в линии С.Т. Рокит быки: Викинг 3000413990 и Водород 3000409051. Кроме того, выявлены быки-спермодоноры, состоящие в родстве, спермии которых имеют низкую способность к криоконсервированию – Гипс 1381 и Визитѐр 16 (Рф. Соверинг). 183 3.9.2 Морфологические исследования нативной и криоконсервированной спермы быков-производителей в зависимости от экогенеза Для современного промышленного скотоводства очень важным является такое свойство животного, как устойчивость к разнообразным факторам окружающей среды. Животные должны обладать широким диапазоном толерантности, то есть высокой адаптивной пластичностью. Этого можно достичь только в результате жѐсткого отбора животных с устойчивой репродуктивной функцией (Четвертакова Е.В. и др., 2009, С. 154). Для оценки быков-спермодоноров требуется значительный временной промежуток для того, чтобы получить потомство и оценить его по таким показателям продуктивности как содержание белка и жира в молоке, величину удоя, мясные качества. Всестороннюю оценку генотипа быков проводят сравнительно редко, и в результате генотип, имеющий аномальные рецессивные гены, может быть распространен на значительном поголовье скота. Дефектные гены могут влиять на сперматогенез, вызывая некроспермию, аспермию, олигоспермию и морфологические нарушения сперматозоидов. В результате чего снижается качество спермы, в отдельных случаях, практически до нуля, снижается оплодотворяющая способность спермы, а яйцеклетки, оплодотворѐнные неполноценными спермиями, формируют неполноценные эмбрионы, которые гибнут на ранних стадиях развития. Значительное поголовье племенного скота поступает из других экологических зон. Важно произвести оценку быков на ранних этапах их развития и в короткие сроки. Для экспресс оценки генотипов животных может быть использован метод морфо-функциональной оценки спермы быков на содержание аномальных форм сперматозоидов. Сперма быков-спермодоноров, имеющая высокую долю аномальных форм, снижает возможность оплодотворения, кроме этого такая нативная спермы плохо переносит криоконсервирование (Шапиев И.Ш., 2000, С. 28). Давно известно, что для более объективной оценки качества 184 спермопродукции помимо широко используемых на практике параметров – концентрация, подвижность, выживаемость спермиев – необходимо применять критерии оценки морфологии спермиев. Только в этом случае может быть получен более точный прогноз оплодотворяющей способности спермы. Подвижность спермиев после замораживания-оттаивания считается первичным показателем качества спермы, но не все спермии с достаточно высокой подвижностью обладают оплодотворяющей способностью. поступательного движения спермиев не неповреждѐнных спермиев в количестве общем позволяет Наличие определить клеток, долю сохранивших подвижность (Шапиев И.Ш., 2000, С. 29). Кроме того, количественный и качественный анализ спермиев может помочь выявить быков – носителей некоторых наследственных аномалий и своевременно исключить их из племенного использования. Стабильность того или иного хозяйственно-полезного признака может зависеть от ряда факторов: экогенетических особенностей особи, условий эксплуатации, параметров среды обитания. В данном случае оценивались особенности сперматогенеза быковспермодоноров, привезенных на ОАО «Красноярскагроплем» из различных природно-климатических зон и имеющих различный экогенез. Из популяции быков-спермодоноров, принадлежащих ОАО «Красноярскагроплем», было сформировано четыре группы: первая – быки, рожденные в хозяйствах Красноярского края (n=35); вторая – быки, рожденные в хозяйствах Европейской части России (n=15); третья – быки, завезѐнные из Венгрии (n=15); четвѐртая – быки, завезѐнные из Германии (n=31). Морфологические исследования спермиев проводились в зимне-весенний период. Определялась доля аномальных спермиев (ДАС) в нативной и криоконсервированной сперме быков-спермодоноров. Исследования морфологии спермиев проводились в эякулятах, годных к криоконсервированию. Оценка стабильности исследуемого параметра проводилась на основании его изменчивости в нативной и криоконсервированной сперме, а также от сезона к 185 сезону. В зимние месяцы доля аномальных спермиев в нативной и криоконсервированной сперме в среднем у разных групп достоверно не отличалась и превышала 18,0 % (максимально допустимый ГОСТом предел) (табл. 22). Зимой достоверной разницы между быками первой и остальными группам по исследуемому показателю установлено не было (приложения Х-Щ). Весной быки местной селекции и группа Венгерских производителей показывали ДАС в пределах нормы. Быки второй группы превышали ДАС по сравнению с быками первой группы на 1,81 % и четвѐртой – на 7,72 % (Р>0,95). Таблица 22 – Доля аномальных спермиев в нативной и криоконсервированной сперме быков разного экогенеза в зависимости от сезона, % Χ ± mx Группа быков Сезон года Сперма зима весна нативная 24,53±2,50 18,08 ±1,15 криоконсервированная 32,34 ±2,63 27,67 ±1,15 нативная 28,57± 2,67 19,89 ±1,26 2* криоконсервированная 35,71± 4,81 27,50± 2,35 нативная 23,47± 2,77 17,23 ±2,19 3* криоконсервированная 36,68 ±5,08 29,19 ±2,33 нативная 20,09 ±4,49 25,80± 2,90 4* криоконсервированная 30,18± 4,32 36,22 ±2,48 1* – Красноярский край; 2* – Европейская часть России; 3* – Венгрия; 1* 4* – Германия Рассматривая изменения ДАС от нативного семени к криоконсервированному у быков первой группы в зимний период отметили увеличение на 7,81 % (Р>0,95), весной увеличение на 9,59 % (Р>0,999). Весной ДАС была меньше в нативном семени на 6,45 % (Р>0,95) по сравнению с зимним периодом. В криоконсервированном семени прослеживается тенденция к снижению ДАС в весенний сезон. 186 ДАС во второй группе быков в зимний период от нативного семени к глубоко охлаждѐнному возрастала на 7,14 %, весной на 7,6 % (Р>0,99). ДАС также снижалась в нативном семени на 8,8 % (Р>0,99), криоконсервированном на 8,2 % от зимнего сезона к весеннему. В группе быков, завезѐнных из Венгрии, зимой в нативном семени ДАС была меньше на 13,2 % (Р>0,95), чем в криоконсервированном. Весной эта закономерность сохранилась. В четвертой группе быков ДАС как в нативном так и криоконсервированном семени превышала требования ГОСТа в оба периода и возрастала от нативного семени к криоконсервированному (табл. 22). Необходимо отметить, что в целом по всем группам, кроме четвертой, наблюдается снижение исследуемого параметра в весеннем сезоне, по сравнению с зимним, что может быть связано с благотворным влиянием на гормональную систему животных увеличение длины светового дня (Охапкин С.К., 1999). Высокая ДАС у четвѐртой группы быков, вероятно, была связана с периодом адаптации к новым условиям. Так как у большей части животных в весенний период наблюдается резкое увеличение ДАС после криоконсервации, можно предположить неблагоприятное влияние факторов в зимний период, так как от момента образования сперматоцитов до появления спермиев в эякуляте проходит два месяца, то и влияние факторов, связанных c сезоном и, так или иначе, действующих на сперматогенез, проявляется спустя только два месяца. Одним из основных условий реализации полноценной качественной спермопродукции является соответствие ГОСТу 26030-83 «Сперма быков замороженная», одним из критериев является определенная доля аномальных форм спермиев –18,0 % (ГОСТ 20909.3 – 75). Те же нормативы определены для спермы неразбавленной свежеполученной (ГОСТ 23745-79). На рисунке 52 показано изменение в группах доли быков со спермой, соответствующей указанным ГОСТам, в зимний период. 187 67% 70 60% 60 50 % 41,4% 33,3% 40 30 17,3% 20% 11% 20 6,7% 10 0 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа нативная криоконсервированная Рисунок 52 – Доля быков по группам со спермой, соответствующей ГОСТу в зимний период, % Наибольшая доля быков с ДАС в нативной сперме, соответствующей требованиям, была во 2-ой и 4 группах. Но их доля значительно снижалась при анализе криоконсервированной спермы. На рисунке 53 показано изменение в группах доли быков со спермой, соответствующей требованиям ГОСТа в весенний период. Характерно, что в весенний период в 1-й и 4-й группах резко уменьшается количество быков, ДАС которых в криоконсервированной сперме соответствует требованиям ГОСТа. Выделилась 4-я группа, в которой не было ни одного быка со спермой, хорошо переносящей криоконсервацию. Можно предположить, что это связано с продолжающейся акклиматизацией животных. Очень стабильной по этому параметру оказалась 2-я группа, вероятно быки-спермодоноры, полученные в Европейской части России, быстрее адаптируются к местным климатическим условиям. 188 % 80 73,3% 69% 70 60 44% 40% 50 40 20% 30 13,3% 20 3,5% 0% 10 0 1 группа 2 группа нативная 3 группа 4 группа криоконсервированная Рисунок 53 – Доля быков по группам со спермой, соответствующей ГОСТу в весенний период, % В исследуемых группах выделились животные, характеризующиеся высоким уровнем ДАС вне зависимости от воздействия криоконсервации и сезона года: во 2-й группе – Мирный 5274, в 3-й – Велюр Е 30006400168. Следует отметить, что оба быка принадлежат линии В.Б. Айдиал. ДАС меняется во всех группах, как в зимний, так и весенний период (табл. 22). Можно сделать вывод, что различие между группами обусловлено не столько влиянием экогенеза, сколько индивидуальными особенностями быков- спермодоноров. Индивидуальные особенности могут быть обусловлены не только генотипом, но и условиями его реализации в дорепродуктивный период онтогенеза. Таким образом, при оценке воспроизводительных качеств быков необходимо использовать уровень изменчивости доли аномальных спермиев под влиянием различных факторов. 189 3.9.3 Влияние возраста быков-производителей на долю аномальных форм спермиев в нативном семени На следующем этапе исследования была поставлена задача выяснить, как влияет возраст быков на долю аномальных форм спермиев в эякуляте. Количество патологических форм спермиев меняется с возрастом быков, Г.Д. Святовец допускает количество патологических форм у быков в возрасте от 12 до 14 месяцев – 30,0 %, от 15 до 16 месяцев – 25,0 %, от 17 до 18 месяцев – 20,0% (цитируется из Воронин И.И. 1979, С. 20). И.И. Воронин (1979, С. 81) отмечает, что количество патологических форм спермиев у взрослых быковпроизводителей не должно превышать 17-18,0 %. Влияние возраста быков на количество патологических форм спермиев в сперме в литературе описано недостаточно. Нами было сформировано пять групп быков в возрасте: до 2 лет; 2,1-3 года; 3,1-4 года; 4,1-5 лет; 5,1-6 лет. Распределение доли аномальных форм сперматозоидов в нативной сперме в зависимости от возраста быков-спермодоноров представлено на рисунке 54. Рисунок 54 – Доля аномальных форм сперматозоидов в нативной сперме быков в зависимости от возраста, % 190 Наивысшая доля аномальных форм спермиев отмечена у быков в возрасте от 2 до 4 лет и изменяется от 28,8 % до 19,3 %. В этом возрасте идѐт становление функций организма, в том числе половых, при этом велика вероятность появления в спермопродукции высокой доли незрелых, легко повреждаемых форм спермиев. Период активных сперматогенезом. В половых функций популяции характеризуется стабильным быков-спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем» в возрасте от 4,1 до 6 лет количество патологических форм спермиев снижается, но несколько превышает норму, установленную ГОСТом. Таким образом, проведя исследования зависимости ДАС от возраста быковспермодоноров, отметили, что ДАС не соответствует требованиям ГОСТа по всем возрастным группам, но тенденция снижения доли патологических форм спермиев соответствует физиологическим особенностям быков-спермодоноров. 3.10 Маркерная селекция в животноводстве на примере гена каппа-казеина 3.10.1 Взаимосвязь биотехнологических показателей спермопродукции и гена каппа-казеина у быков-спермодоноров На анализе полученных результатов, сделано предположение, что ген каппа-казеина может влиять на показатели спермопродукции быков- спермодоноров. Для этого были сформированы группы в зависимости от генотипа и проведен сравнительный анализ по таким показателям как: получено семени в среднем от одного быка за год, мл.; средний объем эякулята, мл.; концентрация сперматозоидов, млрд./мл (табл. 24) (приложение Ю, Я). Таблица 24 – Показатели спермопродукции быков-спермодоноров в зависимости от генотипа Генотип быков по гену каппа-казеина АА (n=41) АВ (n= 23) ВВ (n=3) Показатели спермопродукции получено семени средний объем концентрация в среднем от 1 эякулята. мл спермиев, быка, мл млрд./мл 490,93±60,80 3,99±0,09 1,00±0,04 566,86±101,35 4,34±0,17 1,08±0,04 822,00±197,00 4,64±0,30 1,20±0,04 191 Сравнивая показатели спермопродукции быков, гомозиготных по гену каппа-казеина А с быками гетерозиготными по данному гену, отметили тенденцию к увеличению показателей у гетерозиготных производителей. При сравнении быков гомозиготных по аллелю А с быками имеющих генотип ВВ установили, что от быков с генотипом ВВ семени в среднем на одного производителя получали на 332 мл больше, чем от быков с генотипом АА. Средний объем эякулята был больше также у быков, гомозиготных по аллелю В и составил 4,64 мл, что на 0,65 мл (P>0,99) больше, чем у быков с генотипом АА. Такую же закономерность мы наблюдали и по концентрации спермиев в одном мл спермы. У быков с генотипом ВВ концентрация спермиев была выше на 0,2 млрд./мл (P>0,99), чем у быков с генотипом АА. Сравнивая быков, гетерозиготных по гену каппа-казеина с гомозиготами по аллелю В, также отмечена тенденция к увеличению показателей спермопродукции у быков гомозиготных по аллелю В. От них получали больше семени на 256 мл, был больше объем эякулята на 0,3 мл и выше концентрация сперматозоидов на 0,12 млрд./мл (P>0,95). Таким образом, быки-спермодоноры имеющие в генотипе аллель В отличаются более высокими показателями спермопродукции. У гомозиготных быков по гену каппа-казеина В средний объѐм эякулята превышает на 0,65 мл (Р>0,99) и концентрацию сперматозоидов на 0,2 млрд./мл (Р>0,99) данные показатели быков гомозиготных по аллелю А. Быки с генотипом ВВ также превышают показатели спермопродукции и у гетерозиготных животных – средний объѐм эякулята на 0,3 мл и концентрацию сперматозоидов 0,12 млрд./мл (Р>0,95). Можно сделать вывод, что аллель В у быков-производителей влияет на такие показатели спермопродукции, как объем эякулята и концентрацию сперматозоидов. 192 3.10.2 Особенности роста и развития телочек красно-пестрой породы с разными генотипами по локусу гена каппа-казеина Наследственностью обусловлены все свойства организма животных, на развитие которых оказывает влияние окружающая среда, поэтому при ведении племенной работы с животными, в том числе и молочным скотом, необходимо знать индивидуальные особенности развития, так как интенсивность роста влияет на последующую молочную продуктивность. Одним из основных и объективных методов, позволяющих судить о росте животного в разные возрастные периоды, является изменение живой массы, обусловленное генотипом особи (Четвертакова Е.В. и др., 2014). С развитием новых технологий стало возможным для ускорения селекционного процесса применять методы молекулярной генетики, которые дают возможность быстро идентифицировать генотип особи (Гончаренко Г.М., 2008, С. 47) и в зависимости от него прогнозировать продуктивность животных на ранних сроках развития. Поэтому целью на данном этапе нашей работы было установление влияния генотипов по гену каппа-казеина на показатели роста и развития телок краснопѐстрой породы енисейского типа от рождения до 18-месячного возраста. Для этого в лаборатории молекулярной генетики ВНИИплем, методами ДНКтехнологий были определены генотипы 106 телок красно-пѐстрой породы енисейского типа ОАО Племзавода «Красный Маяк» Канского района Красноярского края. Было установлено, что 63 телочки имеют генотип АА, 38 – АВ и 5 – ВВ и в зависимости от этого было сформировано три опытные группы. Условия кормления и содержания были одинаковые, все животные содержались в пределах одного хозяйства. Анализ живой массы показал, что при рождении телочки с генотипом по гену каппа-казеину АВ имели живую массу 38 кг, что на 1 кг больше телочек с генотипом АА и на 1,5 кг телочек с генотипом ВВ (табл. 23). В возрасте трѐх месяцев телочки с генотипом АА уступали по живой массе на 2 кг телочкам с генотипом АВ (Р>0,99) и на 3 кг телочкам с генотипом ВВ 193 (Р>0,999) и в возрасте 6 месяцев телочки с генотипом АВ и ВВ имели более высокую живую массу по сравнению с телочками генотипа АА. Установили, что телочки с генотипом АА уступали тѐлочкам с генотипом АВ на 3 кг и с генотипом ВВ на 6 кг (Р>0,999). Таблица 23 – Динамика роста живой массы телок красно-пѐстрой породы енисейского типа с различными генотипами по локусу гена каппа-казеина Возраст, мес. При рождении 3 6 9 12 15 18 Генотип по каппа-казеину АА (n=63) M±m Cv, % АВ (n=38) M±m Cv, % BB (n=5) M±m Cv, % 37,0±0,30 5,8 38,0±0,43 5,7 36,5±0,72 2,11 105,0±0,62 164,0±1,13 228,0±1,71 280,0±1,90 353,3±1,98 390,9±2,20 4,7 5,3 5,5 4,8 5,2 4,9 107,0 ±0,43 167,0±1,02 230,0±1,02 283,0±3,11 357,0±2,70 393,0± 2,60 3,8 4,9 5,2 3,8 4,1 4,6 108,0±0,78 170,0±0,83 233,0±2,81 286,0±1,49 360,8±2,07 398,2±5,70 0,84 0,58 1,46 0,61 4,80 4,60 В девятимесячном возрасте эта тенденция сохраняется, хотя достоверных различий по этому показателю между группами установлено не было. В возрасте 12-месяцев телочки с генотипом ВВ тяжелее своих сверстниц, имеющих генотип АА на 6 кг (Р>0,99) и на 3 кг телочек с генотипом АВ. Эту же закономерность мы наблюдали и в 15-месячном возрасте. Телочки, имеющие генотип ВВ на 7,5 кг (Р>0,99) были тяжелее, чем телочки генотипа АА и 3,7 кг телочек с генотипом АВ. В возрасте 18-месяцев телки с генотипом АВ и ВВ имели живую массу 393,0 и 398,2 кг , что на 2,1 и 7,3 кг больше, чем у животных с генотипом АА. По данным взвешивания телочек от рождения до 18-месячного возраста, была определена интенсивность роста. Этот показатель так же имеет большое значение, так как быстрорастущие животные расходуют меньше питательных веществ на единицу прироста и быстрее достигают хозяйственной зрелости, чем животные с замедленным ростом (Клейменов и др., 1989). Данные по среднесуточным приростам приведены на рисунке 55. 194 Рисунок 55 – Среднесуточный прирост живой массы телок енисейского типа красно-пѐстрой породы с различными генотипами по локусу гена каппа-казеина Таким образом, проведенные исследования позволили сделать выводы о том, что телочки с генотипом АА в возрасте 3-месяцев по живой массе уступали телочкам с генотипом АВ на 2 кг (Р>0,99) и телочкам с генотипом ВВ на 3 кг (Р>0,99), в 6-месячном на 6 кг (Р>0,999) телочкам с генотипом ВВ, в 12-месячном возрасте на 6 кг (Р>0,99) и в 15-месячном на 7,5 кг (Р>0,99) также телочкам с генотипом ВВ. Животные имеющие аллель гена каппа-казеина В в генотипе отличаются более интенсивной динамикой роста живой массы, что может позволить животным с желательными генотипами за более короткий срок достичь желательной живой массы и создать предпосылки для получения высоких удоев в период лактации. По интенсивности роста достоверных различий между опытными группами установлено не было, хотя телочки с генотипом ВВ на протяжении всего периода исследования отличались более высокими среднесуточными приростами по 195 сравнению с телочками других генотипов. В результате проведенных исследований установили, что телочки с генотипом ВВ отличаются более высокой динамикой роста по сравнению с телочками генотипов АА и АВ. Выявлена тенденция превосходства среднесуточных приростов у телочек с генотипом ВВ. Ген по локусу каппаказеина не оказывает отрицательного влияния на показатели роста и развития телочек красно-пестрой породы. 3.10.3 Особенности молочной продуктивности коров-первотелок красно-пѐстрой породы с разными генотипами по гену каппа-казеина Одной из пород крупного рогатого скота молочного направления продуктивности, разводимой в Красноярском крае, является красно-пѐстрая порода, которая была выведена путем воспроизводительного скрещивания коров симментальской породы с красно-пѐстрыми голштинскими быками. Животные красно-пѐстрой породы имеют выраженный молочный тип, хорошо развитое туловище, достаточно крепкое телосложение, превосходят симментальских коров по морфологическим свойствам вымени и имеют более высокие удои (Голубков А.И., 2003, С. 225). Однако в молоке коров краснопѐстрой породы снизилось содержание белка в молоке. Эту же тенденцию отмечают и у коров чѐрно-пѐстрой породы, улучшенную быками голштинской породы (Гончаренко Г.М., 2008, С. 48). Современная селекционная работа, основываясь на достижениях молекулярной генетики, позволяет определять гены, которые связаны с молочной продуктивностью и выявлять предпочтительных с точки варианты зрения генов и генотипов, наиболее селекционеров. Проведение селекции животных по генотипу может значительно повысить эффективность всей селекционной работы как отдельно стада, так и породы в целом. Одним из важных маркеров белковомолочности является ген каппа-казеина (Гончаренко Г.М., 2008, С. 47; Горячева Т.С., 2010, С. 51; 2011, С. 61; Павлова И.Ю., 2011, С. 196 6; 2011 а, С. 7). На данном этапе работы мы оценивали коров-первотѐлок по показателям молочной продуктивности в зависимости от генотипа по гену каппа-казеина. В качестве объекта исследования были коровы-первотелки красно-пѐстрой породы ОАО «Красный маяк» Канского района Красноярского края в количестве 105 голов. В зависимости от генотипа коров было сформировано три группы: АА – 63, АВ – 38 и с генотипом ВВ – 4 головы (приложение Э). Все животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления в пределах одного хозяйства. Мы учитывались удои за 305 дней лактации, содержание белка и жира в молоке. Так как в настоящее время в селекции молочного скота стало возможным применение методов ДНК-технологий, это позволило быстро определять генотип особей и использовать аллели как маркеры в селекции. Для прогнозирования молочной продуктивности наибольшее значение имеют генотипы животных по генам молочных белков, так как генотипы животных по гену каппа-казеина связаны с белковомолочностью (Павлова И.Ю., 2011 а, С. 7). В литературе встречаются противоречивые данные о влиянии гена каппаказеина на удой коров. Т.С. Горячева и Г.М. Гончаренко (2010, С. 53), проводя анализ молочной продуктивности коров черно-пестрой породы ПЗ «Пашинский» Новосибирской области, отмечают увеличение удоев у коров с генотипом ВВ по сравнению с коровами имеющими генотипы АА и АВ. Проведя исследования коров симментальской породы в республике Алтай, Т.С. Горячева (2011, С. 63) отмечает, что в ОПХ «Чуйское» коровы с генотипам АВ имели более высокие показатели по жирномолочности по сравнению со своими сверстницами генотипов АА и ВВ, а в СПК «Амурский» наилучшими были коровы с генотипом по гену каппа-казеина В. Исследования Р.В. Тамаровой и Ю.В. Шилова (2008, С.4), проведенные в ПЗ ОПХ «Михайловское» Ярославской области показали, что коровы ярославской породы с генотипом АА и АВ по удою превышали своих сверстниц гомозиготных по гену В, но уступали им по содержанию жира и белка 197 в молоке. В нашей исследуемой группе животных частота аллеля А составила 0,78, а В – 0,22. Данные аллели наследуются кодоминантно. Удой коров-первотелок показан на рисунке 56. 5807,49 кг 5865,78 5900 5800 5700 5600 5352 5500 АА 5400 АВ 5300 5200 ВВ 5100 5000 АА АВ ВВ Генотип Рисунок 56 – Удой коров-первотелок красно-пестрой породы за 305 дней лактации в зависимости от генотипа по гену каппа-казеина При сравнении групп первотелок по удою за 305 дней лактации установили, что коровы, гомозиготные по гену каппа-казеина А, имеют удой в среднем меньше, чем коровы с генотипом АВ на 58 кг, но больше, чем коровы гомозиготные по гену В на 455 кг (Р>0,95). Сравнение коров, имеющих генотип АВ с гомозиготными животными по гену В показало, что животные с генотипом АВ также имеют более высокую молочную продуктивность, чем с генотипом ВВ на 513 кг (Р>0,95). Сравнивая группы коров-первотелок по содержанию жира в молоке установили, что коровы с генотипом ВВ превосходили своих сверстниц с генотипом АА на 0,11 % (Р>0,95) и коров с генотипом АВ на 0,08 % (рис. 57). 198 Рисунок 57 – Содержание жира в молоке коров-первотелок в зависимости от генотипа по гену каппа-казеина По содержанию белка в молоке достоверных различий между коровами разных генотипов выявлено не было, хотя есть тенденция к увеличению этого показателя у коров, гомозиготных по гену каппа-казеина В на 0,02 % по сравнению с коровами генотипов АА и АВ (рис. 58). Рисунок 58 – Содержание белка в молоке коров-первотелок в зависимости от генотипа по гену каппа-казеина 199 Таким образом, проанализировав полученные результаты установили, что коровы-первотелки красно-пестрой породы с генотипами по гену каппа-казеина АА и АВ имеют более высокую молочную продуктивность за 305 дней лактации по сравнению с коровами генотипа ВВ на 455 кг (Р>0,95) и 513 кг (Р>0,95) соответственно, но по содержанию жира уступают коровам этой группы на 0,11 % (Р>0,95) и 0,008% и белка в молоке и на 0,02% и 0,02% соответственно. Частота аллеля А составляет – 0,78, а В – 0,22. 200 ЭКОНОМИЧЕСКИЙ УЩЕРБ Экономический ущерб рассчитан по быкам красно-пѐстрой породы (n=13), выбывших по причине спастического пареза в период с 2005 по 2012 гг. От них было глубоко охлаждено в среднем на одного быка 34 021 спермодоза. Стоимость одной спермодозы составляет 102 рубля. Быки выбывают из племпредприятия при накоплении 40 000 спермодоз, следовательно, недополучено 40000 – 34 021 = 5 979 спермодоз на одного быка. Количество недополученных спермодоз на 13 быков составило 13 х 5979 =77 727 спермодоз. Данное количество умножаем на стоимость одной дозы 77 727 х 102 =7 928 154 руб., т. е. недополучено семени на сумму 7 929 тыс. р. Так как ген BL-мутации наследуется как аутосомный рецессивный признак, у данных быков он не имел фенотипического проявления, но при концентрации в стаде переходит в гомозиготное состояние, вызывает гибель телят или аборты на разных стадиях эмбрионального развития. При спаривании гетерозиготных быков с гомозиготными коровами будет осуществляться следующая комбинация: Доминантные гомозиготы АА и гетерозиготы Аа возникают с одинаковой частотой 0,5. Отсюда относительная частота генотипов в популяции 50 % АА + 50 % Аа = 100 %, т. е. можно предположить, что 28 677 коров являются носителями этой мутации. Данные быки в воспроизводстве использовались в течение 22 лет и при спаривании с гетерозиготными коровами будет осуществляться следующая комбинация: Доминантные гомозиготы в этом случае возникают с частотой 0,25 АА, гетерозиготы с частотой 0,5 Аа, а рецессивные гомозиготы с частотой 0,25 аа. За 22 года спермой быков-носителей данной мутации было осеменено 57355 коров. Следовательно: 57355 гол. х 0,25 АА = 9193 головы, 57355 гол. х 0,5Аа = 28677 голов, 57355 гол. х 0,25 аа = 14339 голов, т. е. 14339 голов из данной группы свободны от рецессивного аллеля, 28 677 являются носителями и 14 339 – гомозиготы по мутантному аллелю. Это подтверждает количество 201 мертворождений и абортов на разных стадиях эмбрионального развития (1 203 мертворожденные + 20 580 аборты) 21 783 недополученного потомства. Предполагаемое количество мертворожденных и абортов по причине BL-мутации составило 14 339 голов. Стоимость одного новорожденного теленка рассчитана по формуле Спц=1,5*П*Зц (метод. рекомендации, 1986). Средняя продуктивность коров по сельскохозяйственным предприятиям Красноярского края на 2012 год составила 4538 кг. Средняя закупочная цена 1 ц молока базисной жирности – 1700 р. Спц=1,5*4 538*1 700 = 11 572 рубля. Исходя из этого потери для хозяйств Красноярского края составили 14 339 х 11 572 р.=165 931 тыс. р. Таким образом, убытки племпредприятия от досрочной выбраковки быковпроизводителей из-за заболевания спастическим парезом составили 7 9289 тыс. р. Потери хозяйств от действия летальных аллелей составили 165 931 тыс. р. 202 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Современные распространению технологии воспроизводства генотипов выдающихся способствуют производителей, широкому увеличению продуктивных качеств местного скота. Однако, наряду с положительными генами распространяются и аллели, вызывающие отрицательные мутации, накапливающиеся в стадах в гетерозиготном состоянии. ОАО «Красноярскагроплем» получает и поставляет спермопродукцию как в Красноярский край, так и за его пределы. Широкое применение спермы быков способствует распространению летальных аллелей, как в маточных стадах, так и в бычьей группе. По способности животных проявлять высокий уровень воспроизводительных свойств в меняющихся условиях жизни можно оценивать его адаптивную ценность. К сожалению, на сегодняшний день не проводятся исследования по оценке влияния генотипа этих быков на адаптивные способности их потомков, так как отсутствует система учѐта их выживаемости, уровня здоровья (заболеваемости), продолжительности продуктивной жизни, воспроизводительным способностям. С другой стороны, исследования подобного типа осложняются не всегда достоверными сведениями о происхождении особей, кроме того, выше перечисленные параметры в немалой степени зависят от внешних условий. Из поголовья быков племпредприятия за период в 24 года лишь 14,0 % выбыло из-за накопления достаточного количества семени, т. е. у остальных животных в процессе эксплуатации обнаружились различные нарушения здоровья. В том числе у 10,0 % быков выявились аномалии половой системы, у 11,2 % – заболевания конечностей, у 7,3 % – диагностировали спастический парез. При этом, возраст выбраковки составил 4,6 лет, то есть большинство быков выбыло либо в возрасте становления половых функций, либо в период их расцвета. Обнаружено повышение частоты заболеваемости быков спастическим 203 парезом, в связи с увеличением использования в воспроизводстве быков голштинской породы. Большинство заболевших животных происходило из ОАО ПЗ «Бородинский». Значительная доля заболевших быков принадлежала генеалогической линии М. Чифтейна – 38,0 %, причѐм, 44,0 % из быков этой линии составили потомки быка Хилтона. Многие быки линии Рф. Соверинг являются потомками быков Рекса и Вуза (симментальская порода) с материнской и отцовской сторон. Тестирование на BLAD- и CVM-мутации позволило выявить носителей летальных аллелей. BLAD-мутация – в линии С.Т. Рокит у отца и сына Муската (ОАО ПЗ «Бородинский») и Мундира (ЗАО ПЗ «Краснотуранский»). CVMмутация выявлена у быка Багульника чѐрно-пѐстрой породы, принадлежащего к линии В.Б. Айдиал (получен в результате умеренного инбридинга на производителя О. Айвенго голштинской породы чѐрно-пѐстрой популяции в степени III-IV) и быка Диктанта красно-пѐстрой породы линии Рф. Соверинг. Производители выбывают не только по достаточному накоплению семени, но и по причине генетических дефектов спермы и андрологических расстройств: некроспермия до 66,7 %, аспермия до 19,0 %; олигоспермия до 4,8 %. При скрещивании произошел переход и концентрация аллелей, вызывающих аномалии половой функции у быков от производителей голштинской породы в генофонд красно-пѐстрой и чѐрно-пѐстрой пород. В линии М. Чифтейн по причине аномалий половой системы выбыло 32,0 % быков. Основная доля аномалий приходится на сыновей быка Рейна 470 и потомков быка Хилтона. В линии голштинских чѐрно-пестрых быков Рз. Ситейшн – 32,4 % на потомков быка Кристана 310451. Возрастание генетического груза проявляется повышением частоты спонтанных абортов, а также мертворождений. Мониторинг распространения аномалий в популяциях крупного рогатого скота ФГУП «Курагинское» показал, что число мертворожденных телят увеличилось с 3,65 % в 1996 году до 7,67 % в 2012 и абортов, с 1,22 % до 1,58% соответственно. Наибольшее число мертворожденных телят зафиксировано от 204 быков линии М. Чифтейн – 23,6 % (бык Хороший – 34,9%) и быков линии Рз. Ситейшн – 20,62 %, (бык Ритм – 28,0%). Чаще абортировали коровы также от быков линии М. Чифтейн – 25,8% (бык Хорошего 37,5 %), П. Говернер – 20,2% (28,0 % и 24,0 % случаев на быков Дюшеса и Тагила соответственно) и Рф. Соверинг – 20,1% (36,0 % случаев на быка Модиста). Выявлена тенденция к ухудшению ряда параметров воспроизводительной функции у быков, имеющих аберрации в кариотипе. С увеличением количества и форм кариологических нарушений снижается качество спермопродукции. От быков со структурными нарушениями получено меньше семени в расчете на одного быка на 120 мл (Р>0,99), отмечено снижение половой активности, в результате чего они реже шли на садку (Р>0,99), снижена концентрация сперматозоидов на 0,71 млрд./мл (Р>0,99). Нативного семени отбраковывали больше от быков с анеуплоидией+структурные нарушения на 58, 3 мл (Р>0,999) и от быков с анеуплоидией+полиплоидия на 48,5 мл (Р>0,999). Геномные перестройки не повлияли на способность сперматозоидов к криоконсервации. Анализ влияния сезонов года на биотехнологические параметры спермопродукции показал, что быки симментальской породы характеризуются стабильной воспроизводительной способностью во все периоды года. В зимний период от быков симментальской породы получали семени в расчете на одного производителя больше на 15,17 мл (Р>0,95), чем от быков красно-пѐстрой породы, на 16,01 мл (Р>0,95) – чем от производителей чернопѐстрой и на 27,27 (Р>0,999) – по сравнению с быками голштинской породы чѐрно-пестрой группы. По количеству полученных эякулятов симментальские быки также превышали показатели быков чѐрно-пѐстрой на 3,35 штук (Р>0,95) и голштинской породы красно-пѐстрой группы на 2,61 штук (Р>0,95). Самая низкая концентрация сперматозоидов в 1 мл спермы была у быков голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 0,86 млрд./мл, что на 0,69 млрд./мл (Р>0,999) меньше, чем у быков красно-пѐстрой породы, 0,46 млрд./мл (Р>0,95), чем у быков гоштинской породы красно-пѐстрой ветви. 205 В весенний период от симментальских быков-производителей получали семени в среднем на одного быка больше, чем от производителей других пород – на 11,11 мл (Р>0,99) красно-пѐстрой породы, 23,91 мл (Р>0,999) – чѐрно-пѐстрой и 25,41 мл (Р>0,999) – голштинской породы красно-пѐстрой группы. По количеству полученных эякулятов быки симментальской породы также имели преимущество по сравнению с быками на – 3,2 штук (Р>0,999) голштинской породы краснопѐстрой группы, 2,01 штук (Р>0,95) – красно-пѐстрыми и 6,31 штук (Р>0,999) – голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы. Быки-производители голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы по концентрации сперматозоидов уступали быкам красно-пѐстрой породы на 0,71 млрд./мл (Р>0,999), чѐрно-пѐстрым – 0,47 млрд./мл (Р>0,95), 0,69 млрд./мл (Р>0,99) – голштинским быкам красно-пѐстрой группы и 0,84 млрд./мл (Р>0,999) – симментальским производителям. В летний период меньше всего семени в расчете на одного быка было получено от производителей голштинской породы черно-пестрой группы – 15,63 мл, что на 8,32 мл ниже, чем от быков красно-пестрой (Р>0,95), 23,17 мл (Р>0,999) – черно-пестрой, 21,4 мл (Р>0,999) – симментальской породы. По количеству полученных эякулятов быки симментальской породы превосходили быков красно-пѐстрой породы на 4,21 штук (Р>0,999), чѐрно-пѐстрой – 3,29 штук (Р>0,999), голштинской породы красно-пестрой группы – 3,67 штук (Р>0,999) и голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 5,92 штук (Р>0,999). Самая низкая концентрация сперматозоидов в 1 мл спермы была у быков голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 0,79 млрд./мл, что на 0,39 млрд./мл (Р>0,95) меньше, чем у быков красно-пѐстрой, 0,4 млрд./мл (Р>0,95) – чѐрно-пѐстрой и 0,47 млрд./мл (Р>0,95) – симментальской породы. В осенний период самая низкая концентрация сперматозоидов в 1 мл спермы была у быков голштинской породы чѐрно-пѐстрой группы – 0,93 млрд./мл, что на 0,33 млрд./мл (Р>0,99) меньше, чем у быков красно-пѐстрой породы, и 0,32 млрд./мл (Р>0,99) – по сравнению с быками чѐрно-пѐстрой породы. Производители в возрасте до двух и старше шести лет характеризуются сниженными биотехнологическими показателями спермопродукции. 206 От быков в возрасте до 2-х лет семени получают в перерасчете на одного быка в месяц меньше, чем от быков второй (2,1-3 года), третьей (3,1-4 года), четвертой (4,1-5 лет), пятой (5,1-6 лет) и шестой (6,1 и старше) групп на 71,6 мл (Р>0,99), 63,1 мл (Р>0,95), 47,7 мл, 86,9 мл (Р>0,99) и 82,6 мл соответственно, что связано с периодом становления половых функций. Быки первой и шестой групп неохотнее шли на садку, что отразилось на количестве полученных от них эякулятов, что в первом случае связано с периодом становления, а во втором – с угасанием половых функций. Концентрация сперматозоидов в 1 мл семени снижалась у быков старше шести лет на 0,31 млрд./мл (Р>0,95) по сравнению с быками первой группы. На переживаемость спермиев оказывает влияние генотип особи. Были выделены некоторые родственные группы быков внутри линий, которые имели переживаемость семени ниже требований стандарта: линия П. Говернера Висмута, Фотона, Грозового, Умелого, принадлежащих ветви Санисайд Стендаут Кэвелли; линия М. Чифтейн сыновей Моби: Кувшинчика, Карата; сыновей Пиклонда: Поклонника и Пловца; линия Р. Соверинг: Гипса и Визитѐра, являющихся внуками Валианта. Выделена группа быков, у которых сперма устойчива к криоконсервированию быки линии М. Чифтейн (сыновей Хариуса): Треф, Быстрый, Севок. Также выявлены быки, у которых низкая переживаемость семени сочеталась с высоким уровнем аномальных форм спермиев: Весѐлый, Одуванчик, Беляш, Вымпел, Стриж, Хваткий. Основную долю аномалий, по всем линиям и породам, составили спермии с оторванными головками, загнутыми и разрушенными хвостами, со слипшимися головками. У быков линии М. Чифтейн, в зимний сезон, доля спермиев с загнутыми хвостами возрастала в криоконсервированном семени на 1,9 % (Р>0,99), с ДГ – на 4,6 % (Р>0,99), весной увеличивалась доля спермиев с РГ на 0,8 % (Р>0,99), РХ – на 7,2 % (Р>0,999), СХ – на 1,4 % (Р>0,99). У быков линии В.Б. Айдиал в зимний период возрастала доля спермиев с РХ на 4,6% (Р>0,95), в весенний сезон увеличивалась доля спермиев с РХ на 4,46 (Р>0,95) по сравнению с нативным семенем. 207 У производителей линии П. Говернер в зимний сезон возрастала доля спермиев с оторванными головками на 2,9 % (Р>0,95) по сравнению с нативным, весной увеличивалась доля спермиев с загнутыми хвостами на 5,8 % (Р>0,99), разрушенными головками – на 0,57 (Р>0,95), РХ – на 7,93 (Р>0,99), СГ – на 1,56% (Р>0,99). У быков линии С.Т. Рокит в зимний сезон в криоконсервированном семени возрастает доля спермиев, слипшихся головками на 4,73 % (Р>0,99). У быков второй группы немецкой селекции в весенний сезон в криоконсервированном семени возрастает доля спермиев с ОГ на 1,66 % (Р>0,99), с ДГ – на 0,43 % (Р>0,99), с РХ – на 2,3 % (Р>0,95) и спермиев СГ – на 1,56 % (Р>0,95). У сыновей Бонзара – Борца и Бодрого высокая доля спермиев СГ. В весенний период количество патологических форм спермиев снижается по сравнению с зимним, как в нативной, так и в криоконсервированной сперме. Выделены группы быков, имеющих общее происхождение, сперма которых отличалась низким содержанием аномальных форм спермиев в зимний и весенний период как в нативной, так и криоконсервированной сперме: в линии Рф. Соверинг: Тигр, Модист, Лекторий, Томкат; в линии С.Т. Рокит: Викинг и Водород. Кроме того, выявлены быки-спермодоноры, состоящие в родстве, спермии которых имеют низкую способность к криоконсервированию – Гипс и Визитѐр (Рф. Соверинг). Использование гена каппа-казеина в качестве маркера воспроизводительной способности быков-спермодоноров, роста, развития молодняка и молочной продуктивности дал положительный результат. Ген каппа-казеина целесообразно использовать в качестве маркера воспроизводительных способностей быков. Быки-спермодоноры, имеющие в генотипе аллель В, отличаются более высокими показателями спермопродукции. У гомозиготных быков по гену каппа-казеина В средний объѐм эякулята превышает на 0,65 мл (Р>0,99) и концентрацию сперматозоидов – на 0,2 млрд./мл (Р>0,99) аналогичные показатели быков гомозиготных по аллелю А. Быки с генотипом ВВ превышают показатели 208 спермопродукции и у гетерозиготных животных в среднем по объѐму эякулята на 0,3 мл и концентрации сперматозоидов – 0,12 млрд./мл (Р>0,95). Животные имеющие аллель гена каппа-казеина В в генотипе отличаются более интенсивной динамикой роста живой массы во все периоды роста, что может позволить животным с желательными генотипами за более короткий срок достичь желательной живой массы и создать предпосылки для получения высоких удоев в период лактации, что согласуется с исследованиями Е.В. Четвертаковой (2012; 2013) и И.М. Волохова (2012). Телочки с генотипом АА в возрасте трех месяцев по живой массе уступали телочкам с генотипом АВ на 2 кг (Р>0,99) и телочкам с генотипом ВВ – на 3 кг (Р>0,99), в 6-месячном – на 6 кг (Р>0,999) телочкам с генотипом ВВ, в 12-месячном возрасте – на 6 кг (Р>0,99) и в 15-месячном на 7,5 кг (Р>0,99) также телочкам с генотипом ВВ. Ген каппа-казеина целесообразно использовать в качестве маркера молочной продуктивности. Коровы-первотелки красно-пестрой породы с генотипами по гену каппа-казеина АА и АВ имеют более высокую молочную продуктивность за 305 дней лактации по сравнению с коровами генотипа ВВ на 455 кг (Р>0,95) и 513 кг (Р>0,95) соответственно, но по содержанию жира уступают коровам этой группы на 0,11 % (Р>0,95) и 0,008 % и белка в молоке – на 0,02% и 0,02% соответственно, что согласуется с исследованиями Т.С. Горячевой (2010; 2011), И.Ю. Павловой (2011). Таким образом, проведѐнные исследования говорят о том, что ввоз быковпроизводителей способствовал не только улучшению массивов молочного скота, обогащению генофонда желательными аллелями, но и способствовал накоплению и распространению генетических дефектов в маточных стадах. Поэтому необходимо проводить мониторинг генетических заболеваний с целью предотвращения распространения аномалий в популяциях крупного рогатого скота. 209 ВЫВОДЫ 1. На основе объѐмных экспериментальных данных установлено, что быковоспроизводящее поголовье содержит в гетерозиготном состоянии аллели мутантных генов. 2. С началом использования быков-производителей улучшающих пород и их потомков в селекции отмечен рост выбывших животных по причине генетических дефектов и расстройств половой функции. 3. По причине заболевания спастическим парезом выбыло 7,3 % быков. Доля отбраковки голштинских, симментальских, красно-пѐстрых и чѐрно-пѐстрых производителей составила 62,0 %, 28,6 %, 7,1 % и 2,3 % соответственно. Средний возраст при выбраковке быков составил 4,8 года (56 месяцев). Наиболее часто данное заболевание встречалась среди быков линии М. Чифтейн – 38,0 % от всех заболевших животных, причѐм из них 44,0 % составило потомство быка Хилтона 4901. 4. BLАD-мутация была выявлена среди быков голштинской породы краснопѐстрой популяции линии С.Т. Рокит быков Муската и Мундира. CVM-мутация выявлена у быка Багульника 2063 чѐрно-пѐстрой породы, линии В.Б. Айдиал и быка Диктанта 29475 красно-пѐстрой породы линии Рф. Соверинг. 5. С увеличением количества и форм кариологических нарушений закономерно снижается качество спермопродукции. От быков-производителей с анеуплоидией+структурными нарушениями и анеуплоидией+полиплоидией семени отбраковывали больше на 58,3 мл (Р>0,999) и 48,5 мл (Р>0,999) соответственно, чем от быков без аномалий кариотипа. 6. Широкое использование быков голштинской породы способствовало распространению генетических аномалий, что привело к увеличению числа мертворождений и абортов. 7. Физиологические показатели крови быков-спермодоноров находились в пределах допустимой нормы. Исключение составляет содержание общего белка, 210 которое превысило верхнюю границу физиологической нормы в осенний период на 5,01 г/л. (Р>0,999) и щелочной резерв, который весь период исследования был ниже физиологической нормы. 8. Быки симментальской породы характеризуются стабильной воспроизводительной способности во все сезоны года. 9. Быки-производители в возрасте до двух и старше шести лет достоверно характеризуются сниженными воспроизводительными функциями. 10. Основными причинами выбраковки нативного семени в ОАО «Красноярскагроплем» были некроспермия и аспермия. Наибольшее количество выбракованных составили эякуляты, полученные за первую и вторую садку в весенний – 16,1 % и 17,8 % и осенний периоды – 18,6 % и 15,7 % соответственно. Количество выбракованных эякулятов было меньше зимой и весной, а летом и осенью их доля увеличивалась. 11. На переживаемость сперматозоидов быков-производителей оказывает влияние возраст быков, сезон года и генотип особи. 12. Основную долю аномалий, по всем линиям и породам, составили спермии с оторванными головками, загнутыми и разрушенными хвостами, со слипшимися головками. В весенний период количество патологических форм спермиев снижается по сравнению с зимним, как в нативной, так и в криоконсервированной сперме. 13. Наивысшая доля аномальных форм спермиев отмечена у быков в возрасте от двух до четырѐх лет – от 28,8 % до 19,3 % соответственно. В возрасте от 4,1 до 6 лет количество патологических форм спермиев снижается до 18,7 %. 14. В качестве маркера воспроизводительных способностей быков, роста молодняка, молочной продуктивности коров целесообразно использовать ген каппа-казеина. 211 ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ На основании проведенных исследований рекомендуем специалистам племенного предприятия и хозяйствам края: 1. Для снижения генетического груза в популяции крупного рогатого скота использовать методику проверки и оценки быков-спермодоноров на генетический груз. 2. Родственные группы быков, имеющих генетические дефекты спермы, не использовать для поучения спермопродукции. 3. С целью выявления в линиях быков, выбывших по причине спастического пареза, при закупке из других регионов проводить генеалогический анализ. 4. Быков старше шести лет, в условиях хозяйств края, целесообразно использовать с учѐтом индивидуальных показателей. . 212 БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. Абилов, А.И. Аутоиммунность быков и воспроизводительные функции / А.И. Абилов, А.А. Кочетков, И.И. Соколовская, Р.Н. Ойвадис, В.К. Стоянов // Зоотехния. – 1989. – №5. – С. 61-63. Абилов, С.Ф. Молочная продуктивность скота в Азербайджане при межпородном скрещивании/ С.Ф. Абилов, А.И. Абилов, Н.В. Сивкин //Достижения науки и техники АПК. – 2005. – №12. – С. 24-25. Абовян, Ю.Г. Иммунобиохимические показатели естественной резистентности телят / Ю.Г. Абовян// Зоотехния. – 1991. – №1. – С. 1921. Адушинов, Д. Создание чѐрно-пѐстрого скота молочного типа / Д. Адушинов, А. Мухамадеева //Молочное и мясное скотоводство. – 2003. – №2. – С. 25-26. Адушинов, Д. Эффективность голштинизации черно-пестрого скота в Восточной Сибири/ Д. Адушинов// Молочное и мясное скотоводство. 2006. – №3. – С. 17-19. Акифьев, А.П. Хромосомный мутагенез при наследственных болезнях человека с нарушенной репарацией ДНК/ А.П. Акифьев, Е.К. Хандогина, Г.Р. Мутовин// Успехи генетики. – 1984. – №12. – С. 182219. Алексеева, Л. Лейкограмма – показатель физиологического состояния коров / Л. Алексеева// Молочное и мясное скотоводство. – 2005. – №3. – С. 24-26. Алифанов, В. Роль помесных быков при голштинизации/ В. Алифанов, Д. Алифанова //Молочное и мясное скотоводство. – 1992. – №3. – С. 26-27. Алифанов, В.В. Совершенствование симментальского скота методом голштинизации / В.В. Алифанов //Зоотехния. – 1998. – №5. – С. 4-5. Алтухов, Ю.П. Динамика популяционных генофондов при антропогенных воздействиях/ Ю.П. Алтухов, Е.А. Салменкова, О.Л. Курбатова и др.; под ред. Ю.П. Алтухова. – М.: Наука, 2004. – 619 с. Анзоров, В.А. О причинах и методах снижения эмбриональной смертности у крупного рогатого скота/ В.А. Анзоров, А.М. Чомаев, О.А. Зейналов, В.А. Титова, С.Н. Хилькевич, И.Х. Хисметов //Сельскохозяйственная биология. – 2003. – №4. – С. 57-62. Анисов, А.А. Влияние половых рефлексов на качество спермы быков/ А.А. Анисов, С.Н. Костив //Зоотехния. – 1989. – №8. – С. 64-65. Антомонов, Ю.Г. Биологические механизмы надѐжности/ Ю.Г. Антомонов //Надѐжность и гомеостаз биологических систем. – Киев. – 1987. – С. 35-39. Антонюк, В.С. Биотехнологические способы повышения эффективности оплодотворения сельскохозяйственных животных /В.С. Антонюк. – Минск: Ураджай, 1988. – 198 с. Базова, Ю.В. Влияние глубокого охлаждения на морфологические 213 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. показатели спермы быков красно-пѐстрой породы /Ю.В. Базова, Е.В. Четвертакова// Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития: мат-лы XIII международной науч.-практич. конф. Ч. II: Наука: опыт, проблемы, перспективы развития /Крас. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2014. – С. 242-243. Бакай, А. Связь кариологических показателей с воспроизводительными качествами коров/ А. Бакай, А. Бакай, А. Кровикова // Главный зоотехник. – 2012. – №3. – С. 11-16. Бакай, А.В. Влияние уровня кариотипической изменчивости на репродуктивные способности коров черно-пестрой породы /А.В. Бакай // Цитогенетика и биотехнология: матер. 2-ой Всесоюз. конф. по цитоген. с.-х. животных Ленинград-Пушкин, 1988. – Л.: 1989. – 163 с. Бакай, Ф. Анализ геномных мутаций у коров с нарушениями репродуктивных функций/ Ф. Бакай, А. Бакай, К. Пирязев // Главный зоотехник. – 2009. – №9. – С. 21-24. Балахонов, А.В. Преодоление бесплодия /А.В. Балахонов. – СПб: С-Петербургский университет, 1999. – 256 с. Балашов, Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении животных / Н.Г. Балашов. – М.: Колос, 1980. – 272 с. Басовский, Н.З. Популяционная генетика в селекции молочного скота / Н.З. Басовский. – М.: Колос, 1983. – 272 с. Басовский, Н.З. Популяционно-генетические основы селекции молочного скота / Н.З. Басовский. – Л.: ВНИИРГЖ, 1984. – 214 с. Басовский, Н.З. Селекция скота по воспроизводительной способности / Н.З. Басовский, Б.П. Завертяев. – М.: Россельхозиздат, 1975. – 143 с. Белоус, А.М. Замораживание и криопротекция: учебное пособие / А.М. Белоус, Е.А. Гордиенко, Л.Ф. Розанов. – М.: Высшая школа, 1987. – 80 с. Белоус, А.М. Криоконсерванты /А.М. Белоус, М.И. Шраго, Н.С. Пушкарь. – Киев: Наукова Думка, 1979. – 198 с. Белоус, А.М. Криоконсервация репродуктивных клеток /А.М., Белоус, В.И. Гришенко, Ю.С. Паращук. – Киев: Наукова Думка, 1986. – 208 с. Белоус, А.М. Молекулярные механизмы криоповреждения мембран / А.М. Белоус, В.А. Бондаренко, Т.П. Бондаренко //Криобиология и медицина. – 1979. – С. 3-12. Белоус, А.М. Структурные изменения биологических мембран при охлаждении /А.М. Белоус, В.А. Бондаренко. – Киев: Наукова Думка, 1982. – 256 с. Белоус, А.М. Физиологическая роль железа/А.М. Белоус, К.Т. Конник. Киев: Наукова Думка, 1991. – 104 с. Белоусов, А. Особенности голштинского скота голландской селекции/ А. Белоусов, Д. Юсупов, П. Зенков, А. Сулейманов //Молочное и мясное скотоводство. – 2010. – №3. – С. 9-10. Беляев, Д.К. Дестабилизирующий отбор как фактор доместикации. – В кн. тр. XIV междунар. генет. конгр. М.: Наука, 1981. – С. 53. 214 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 44. 45. 46. 47. Болгов, А.А. Повышение воспроизводительной способности молочных коров: учеб. пособие /А.А. Болгов, Е.П. Карманова. Петрозаводск, 2003. – 216 с. Борилкевич, В.Е. Методические оценки напряженности организма при комплексных воздействиях. Методы и средства оценки состояния человека в процессе деятельности /В.Е. Борилкевич, Г.М. Котлер. А.Г. Рац, И.Г. Синицин. – Л.: Изд-во ЛГУ, 1984. – С. 44-52. Бороздина, Н.И. Биохимические показатели крови коров-первотелок – дочерей холмогорского быка Легиона 7958 и голштинского Астронавта 17 (F1, F2) / Н.И. Бороздина и др.// Вопр. генет. с.-х. жив. Гомеостаз. М.: Медицина, 1976. – С. 178. Бочков, Н.П. Генетика человека: Наследственность и патология / Н.П. Бочков. – М.: Медицина, 1978. – 377 с. Бочков, Н.П. Генетические механизмы гомеостаза организма. Гомеостаз /Н.П. Бочков. – М.: Медицина, 1976. – 178 с. Бочков, Н.П. Наследственность человека и мутагены внешней среды / Н.П. Бочков, А.Н. Чеботарев. – М.: Медицина, 1989. – 272 с. Бочков, Н.П. Хромосомы человека и облучение / Н.П. Бочков. – М.: Атомиздат, 1971. – 168 с. Бугров, А.Д. Влияние мѐртвых половых клеток на качество спермы быков и хряков /А.Д Бугров, А.С. Сидашѐва// Зоотехния. – 1991. – №12. – С. 50-53. Бурба, Л.Г. Лейкозы и злокачественные опухоли животных/ Л.Г. Бурба, А.Ф. Валихов, В.А. Горбатов и др.; под ред. В.П. Шишкова, Л.Г. Бурбы. – М.: Агропромиздат, 1988. – 400 с. Бурба, Л.Г. Степень инфицированности животных вирусом лейкоза крупного рогатого скота в связи с возрастом, гематологическими показателями и породой /Л.Г. Бурба, В.С. Кузмичев // Теоретические и практические вопросы ветеринарии. Тарту, 1983. – С. 75-80. Бурдин, Ю.М. Продуктивные качества симментал х голштинских помесей / Ю.М. Бурдин, А.А. Текеев// Зоотехния. – 1991. – №10. – С. 11-13. Бурнашѐва, С.А. Современные проблемы сперматогенеза /С.А. Бурнашѐва, И.С. Габаева, Л.В. Данилова, Е.Ф. Князева. – М.: Наука, 1982. – 229 с. Визнер, Э. Болезни крупного рогатого скота /Э. Визнер, Д. Лѐч. – М.: Колос, 1970. – 424 с. Визнер, Э. Ветеринарная патогенетика / Э. Визнер, З. Виллер. – М.: Колос, 1979. – 424 с. Власов, В.И. Голштинизированный красный степной скот в условиях Крыма / В.И. Власов, А.Н. Тогушов// Зоотехния. –1991. – №4. – С. 15-18. Волкова, С.В. Влияние возраста быков и времени года на качество спермы/ С.В. Волкова, В.В. Алифанов, С.В. Алифанов //Современные проблемы науки и образования. – 2008. – №6. – С. 5. 215 48. 49. 50. 51. 52. 53. 54. 55. 56. 57. 58. Волохов, И.М. Продуктивные качества скота красно-пестрой породы различных генотипов по каппа-казеину / И.М. Волохов, О.В.Пащенко, А.В. Морозов //Зоотехния. – №5. – 2012. – С. 4-5. Воронин, И.И. Болезни быков-производителей /И.И. Воронин. – Киев: Урожай, 1979. – 120 с. Всяких, А.С. Импортный скот в СССР / А.С. Всяких, М.С. Куринский. – М.: Колос, 1976. – 286 с. Габер, Е.С. Сперматогенез и его регуляция /Е.С. Габер, Л.В. Данилова, Е.Ф. Князева, А.А. Костомарова, В.А. Наук, Ж.Л. Петросьян, С.С. Райцина, Н.Н. Ротт. – М.: Наука, 1983. – 231 с. Гертман, А.М. О незаразной патологии крупного рогатого скота при загрязнении окружающей среды тяжелыми металлами/ А.М. Гертман, К.Х. Папуниди //Сельскохозяйственная биология. – 2004. – №4. – С. 85-88. Гетоков, О. Молочная продуктивность коров различных генотипов/ О. Гетоков //Молочное и мясное скотоводство. – 1992. – №2. – С. 15-16. Гетоков, О.О. Скрещивание швицкого скота с голштинским в кабардино-Балкарии / О.О. Гетоков //Зоотехния. – 1991. – №1. – С. 1315. Гладкова, А.И. Роль андрогенного статуса отца в постнатальном развитии мужского потомства /А.И. Гладкова, В.В.Натаров, В.Н. Золотухина // Успехи современной биологии. М.: Наука, 1995. – т. 115. – вып. 6. –С. 714-728. Глазко, В.И. Генетическая структура локальных пород крупного рогатого скота Украины /В.И. Глазко, Л. Звежховски, Р.В. Облак, С.И. Тарасюк // Цитология и генетика. – 2001. – т. 35. – №2. – С. 19-25. Глазко, В.И. Мутация BLAD (иммунодефицита) у крупного рогатого скота/ В.И. Глазко // Зоотехния. – 1998. – №8. – С. 5-7. Глазко, Т.Т. Изменчивость различных цитогенетических характеристик у групп черно-пестрого скота/ Т.Т. Глазко, И.А. Созинов, В.И. Глазко//Цитология и генетика. – 1993. – т. 27. – №6. – С. 3-8. 59. Голубков, А.И. Красно-пѐстрая порода скота Сибири/ А.И.Голубков, И.М. Дунин, К.К. Аджибеков, Л.А. Калашникова, А.А. Голубков, Е.Г. Сиротинин; под общ. ред. А.И. Голубкова. Красноярск, 2008. – 296 с. 60. Голубков, А.И. Основные направления и задачи племенной работы в молочном скотоводстве Красноярского края /А.И. Голубков //Повышение эффективности селекционно-племенной работы в животноводстве. – Материалы науч.-практ. конф. Краснояр. гос. аграр. ун-та. Красноярск, 1999. – С. 8-11. Голубков, А.И. Откормочные и мясные качества бычков симментальской и красно-пѐстрой пород /А.И. Голубков, А.Е. Лущенко //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2002. – №3-4. – С. 75-81. 61. 216 62. 63. 64. 65. 66. 67. 68. 69. 70. 71. 72. 73. 74. 75. Голубков, А.И. Создание и разведение красно-пѐстрой породы молочного скота в Красноярском крае: монография / А.И. Голубков. – Красноярск: Изд-во ПОЛИКОМ, 2003. – 235 с. Гончаренко, Г.М. Генетическая структура популяций сельскохозяйственных живоных Западной Сибири и использование маркеров в селекции//автореф. дис. ….докт. биол. наук: 06.02.01/ Галина Моисеевна Гончаренко. – Новосибирск, 2009. – 36 с; Гончаренко, Г.М. Генетические маркеры и их значение для селекционно-племенной работы /Г.М. Гончаренко// Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2008. – №6. – С. 47-53. Горячева, Т.С. Генетические варианты к-казеина и пролактина в связи с молочной продуктивностью коров черно-пестрой породы/ Т.С. Горячева, Г.М. Гончаренко //Сельскохозяйственная биология. – 2010. – №4. – С. 51-53. Горячева, Т.С. Полиморфизм к-казеина и его влияние на молочную продуктивность коров симментальской породы в республике Алтай/ Т.С. Горячева //Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2011. – №11-12. – С. 60-63. ГОСТ 23745-79 Сперма быков неразбавленная свежеполученная. Технические требования и методы испытаний. Государственный комитет СССР по стандартам. – М.: Издательство стандартов, 1979. – 4 с. ГОСТ 26030-83 Сперма быков замороженная. Технические условия. Государственный комитет СССР по стандартам. – М.: Издательство стандартов, 1984. – 4 с. Графодатский, А.С. Хромосомы сельскохозяйственных и лабораторных млекопитающих /А.С. Графодатский, С.И. Раджабли. – Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1988. – 128 с. Грищенко, В.И. Криобиология и проблема бесплодия /В.И. Грищенко, Ю.С. Паращук, Ф.В. Дахно, Г.Г. Юрченко. – Киев: Наукова Думка, 1990. – 135 с. Данилова, Л.В. Сперматогенез и его регуляция /Л.В. Данилова, Е.С. Габец. – М.: Наука, 1983. – 98 с. Данилова, Л.В. Ультраструктурное исследование сперматогенеза /Л.В. Данилова. – М.: Наука, 1978. – 208 с. Делян, А.С. Отход телят в потомстве отдельных быков-производителей черно-пестрой и голштинской пород /А.С. Делян // Сельскохозяйственная биология. – 2000. – №2. – С. 75-78. Дѐмин, Ю.С. Цитогенетика Робертсоновской транслокации у млекопитающих /Ю.С. Дѐмин, Л.Д. Сафронова, Н.Д. Паневина // Докл. АН СССР, 1983. – 272.1. – С. 204. Денисенко, Е.А. Молочная продуктивность и технологические свойства молока коров черно-пестрой породы с различными генотипами каппа-казеина в зоне Сибири: автореф. дис. …канд. биол. наук: 06.02.01/ Елена Александровна Денисенко. – М.: Лесные Поляны, 217 76. 77. 78. 79. 80. 81. 82. 83. 84. 85. 86. 87. 88. 89. 90. 91. 92. 93. 2004. – 22 с. Дмитриев, И.Г. Оценка быков на носительство вредных генов / И.Г. Дмитриев, А.И. Жигачѐв // Животноводство. – 1986. – №6. – С. 28-30. Дубинин, Н.П. Генная теория злокачественного роста / Н.П. Дубинин // Успехи современной биологии. – 1984. – №57 (2): С. 163-178. Дубинин, Н.П. Некоторые проблемы современной генетики / Н.П. Дубинин. – М.: Наука, 1994. – 224 с. Дубинин, Н.П. Экспериментальное исследование интеграции наследственных систем в процессах эволюции популяций / Н.П. Дубинин // Общ. биол. – 1948. 9, 3. – С. 203-244. Дунин, И. Влияние голштинской породы на убойные и мясные качества бестужевского скота/ И. Дунин, С. Карамаев // Молочное и мясное скотоводство. – 1997. – №2. – С. 21-23. Дунин, И.М. Бурый скот России / И.М. Дунин, С.Н. Харитонов, А.Н. Ермилов и др. – М.: 1998. – 101 с. Дунин, И.М. Современные аспекты племенного дела в молочном скотоводстве /И.М. Дунин // Зоотехния. – 1998. – С.2-8. Дунин, И.М. Создание новой красно-пѐстрой породы молочного скота/ И.М. Дунин // Зоотехния. – 1995. – №3. – С. 7-9. Душейко, А.А. Витамин А обмен и функции: монография/А.А. Душейко. – Киев, Наукова Думка, 1989. – 288 с. Емельянов, А.В Генетические аспекты наследуемости болезней крупного рогатого скота /А.В. Емельянов// Ветеринария. – 1990. – №3. – С. 54-56. Ерохин, А.С. Действие эфиров глицерина на криоустойчивость спермы баранов /А.С. Ерохин, Т.М. Епишина, И.Е. Чернова // Доклады РАСХН. – 1998. – №3. – С. 39-41. Ерохин, А.С. Селен и репродуктивная функция животных / А.С. Ерохин. – М.: ВНИИплем, 2008. – 142 с. Жебровский, Л.С. Воспроизводительные способности быковпроизводителей разных генотипов / Л.С. Жебровский, Г.С. Матвеева // Зоотехния. – 2006. – №7. – С.26-30. Жебровский, Л.С. Генофонд сельскохозяйственных животных и его использование в селекции / Л.С. Жебровский, А.В. Бабунов, К.М. Иванов. – Л.: Колос, Ленин-ое отд-ние, 1983. – 350 с. Жебровский, Л.С. Селекционная работа в условиях интенсификации животноводства /Л.С. Жебровский. – Л.: Агропромиздат, Ленин-ое отд-ние, 1987. – 246 с. Жигачѐв, А. Системы контроля за вредными мутациями / А. Жигачѐв, Т.Богачева, С. Фогель // Молочное и мясное скотоводство. – 1998. – №6-7. – С. 18-21. Жигачѐв, А.И. Наследственная патология и еѐ значение для разведения животных /А.И. Жигачѐв // Ветеринария. – 1986. – №6. – С. 65-66. Жигачѐв, А.И. Наследственные аномалии и их контроль у КРС / А.И. Жигачѐв, И.Л. Суллер // Практик. 2002. – 2-4: 46-53. 218 94. 95. 96. 97. 98. 99. 100. 101. 102. 103. 104. 105. 106. 107. Жигачѐв, А.И. О накоплении груза мутаций в породах крупного рогатого скота при интенсивных технологиях воспроизводства и улучшения по целевым признакам / А.И. Жигачѐв, Л.К. Эрнст, А.С. Богачѐв // Сельскохозяйственная биология. – 2008. – №6. – С. 25-32. Жигачѐв, А.И. О частоте траслокации 1/29 хромосом в спонтанной выборке крупного рогатого скота / А.И. Жигачѐв, Н.С. Никитин, В.В. Черкасов // Докл. ВАСХНИЛ. –1984. – №4. – С. 21-22. Жигачѐв, А.И. Оценка производителей на скрытые генетические дефекты /А.И. Жигачѐв // Зоотехния. – 2001. – №2. – С. 10-12. Жигачѐв, А.И. Распространение аббераций хромосом в отдельных родственных группах симментальского скота / А.И. Жигачѐв, Т.В. Богачева, В.Г. Марусяк // Цитогенетика и биотехнология: Матер. 2-й Всер. конф. по цитогенет. с.-х. животных. – Ленинград-Пушкин. – 1988. Л.: 1989. – С. 27-29. Жигачѐв, А.И. Роль генетических факторов в возникновении пупочных грыж у крупного рогатого скота / А.И. Жигачѐв // Генетика. –1983. – т. 19. – №2. – С. 312-315. Жигачѐв, А.И. Цитогенетический контроль быков /А.И. Жигачѐв //Зоотехния. – 1989. – №6. – С. 24-26. Жигачѐв, А.И. Эколого-генетический мониторинг в животноводстве / А.И. Жигачѐв, Т.В. Богачѐва, Н.И. Хороших // Зоотехния. – 2000. – №3. – С. 2-4. Жилов, В.Н. Результаты скрещивания чѐрно-пѐстрого скота с голштино-фризским в Вологодской области /В.Н. Жилов, А.В. Матвеев // Промышленная технология производства молока в Северных районах. – Л., 1988. – С. 11-16. Жуковская, Н. Влияние антиоксидантов на криоустойчивость спермы быков / Н. Жуковская, И. Чернова // Молочное и мясное скотоводство. – 1997. – №4. – С. 25-26. Завертяев, Б.П. Биотехнология в воспроизводстве и селекции крупного рогатого скота/ Б.П. Завертяев. – Л.: Агропромиздат, Ленин-ое отд-ние, 1989. – 255 с. Завертяев, Б.П. Повышение многоплодия в скотоводстве / Б.П. Завертяев. – М.: Россельхозиздат, 1987. – 190 с. Заднепрянский, И.П. Гормональный статус бычков разного типа /И.П. Заднепрянский, О.Г. Тавстуха // Зоотехния. – 1995. – №12. – С. 22-24. Зверева, Г.В. Электронно-микроскопические и биологические исследования сохранения семени быка / Г.В. Зверева // Доклады советских учѐных к V Междунар. конгр. по биологии размножения и искусственного осеменения животных. – Москва, 1964. – С. 20-21. Зиновьева, Н.А. Применение ДНК-диагностики для анализа генов – кандидатов локусов количественных признаков сельскохозяйственных животных / Н.А. Зиновьева, Е.А. Гладырь, Д.А. Фролкин и др. // Животноводство ХХI век. науч. тр. ВИЖ. Дубровицы, 2001. – 61: 218224. 219 108. Зиновьева, Н.А. Роль ДНК-маркеров признаков продуктивности сельскохозяйственных животных / Н.А. Зиновьева, О.В. Костюнина, Е.А. Гладырь, А.Д. Банниткова, В.Р. Харзинова, П.В. Ларионова, К.М. Шавырина, Л.К. Эрнст // Зоотехния. – 2002. – №1. – С. 8-10. 109. Злотникова, О.В. Анализ динамики распространения спастического пареза среди быков-производителей / О.В. Злотникова, Е.В. Четвертакова // Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве. Юбилейная междунар. научнопрактич. конф. 24-25 апреля, сб. статей часть IV: Барнаул, 2003. – С. 157-159. 110. Злотникова, О.В. Качество спермопродукции быков-производителей – носителей хромосомных аббераций/ О.В. Злотникова, Е.В. Четвертакова, Н.В. Кригер // Актуальные проблемы современной науки». Матер. 4-й междунар. конф. молодых учѐных и студентов. Естественные науки. Части 21-23. Секции: сельское хозяйство, агрономия, зоотехния, лесное хозяйство. Самара: Изд-во СамГТУ, 2003а. – С. 69-72. 111. Зубарев, П. Продуктивность голштинских помесей /П. Зубарев, А. Игонькин // Молочное и мясное скотоводство. – 1992. – №1. – С. 27-29. 112. Иванов, В.И. Иммунодефициты у помесей голштино-фризской породы /В.И. Иванов, В.Н. Каменчук // Ветеринария. – 2002. – №12. – С. 37-43. 113. Иванов, В.М. Стрессоустойчивость и резистентность помесных первотѐлок /В.М. Иванов, В.Н. Бондарев // Зоотехния. – 1995. – №3. – С. 26-27. 114. Иванов, И.Ф. Цитология, гистология, эмбриология: Учеб. пособие / И.Ф. Иванов, П.А. Ковальский. – М.: Колос, 1969. – 695 с. 115. Иванова, Е.В. Оценка общей адаптационной пластичности быковпроизводителей / Е.В. Иванова, Е.В. Четвертакова, О.В. Морозова // Агроэкология и устойчивое развитие регионов. Мат-лы. Всеросс. научной конф. студентов и молодых учѐных, посвященной 45-летию КрасГАУ. Часть 2. Красноярск, 1998. – С. 49. 116. Игонькин, А. Оценка быков разной кровности по голштинской породе /А. Игонькин, А. Королѐва, О. Вечканова, Г. Косцов // Молочное и мясное скотоводство. – 1996. – №4. – С. 26-28. 117. Ижболдина, С.Н. Продуктивность голштинизированных коров в условиях Удмуртии / С.Н. Ижболдина, О.А. Краснова //Зоотехния. – 1996. – №12. – С. 9-10. 118. Ильев, Ф.В. Оценка племенных качеств сельскохозяйственных животных: монография / Ф.В. Ильев. – Кишинѐв: Картя молдовеняскэ, 1981. – 102 с. 119. Ильинская, Т.Г. Физиологические основы рационального использования производителей сельскохозяйственных животных / Т.Г. Ильинская, В.С. Антонюк. – Минск: Уроджай, 1975. – 112 с. 120. Инге-Вечтомов, С.Г. Генетика с основами селекции: учеб. пособие /С.Г. Инге-Вечтомов. – М.: Высшая школа, 1989. – 591 с. 220 121. Иолчиев, Б.С. Взаимосвязь системы каппа-казеина с молочной продуктивностью коров / Б.С. Иолчиев, В.И. Сельцов // Зоотехния. – 1999. – №6. – С. 4-5. 122. Исламова, С. Порода и антигенный состав крови быковпроизводителей/ С. Исламова, Ф. Исламов // Молочное и мясное скотоводство. – 2006. – №5. – С. 34-35. 123. Исламова, С. Применение ДНК-технологий в селекции / С. Исламова, Ф.Исламов, И. Долматова, Р. Биккинин // Молочное и мясное скотоводство. – 2007. – №5. – С. 2-4. 124. Кадзаева, З. Технологические свойства коров разной кровности по голштинам / З. Кадзаева // Молочное и мясное скотоводство. – 2009. – №2. – С. 8-9. 125. Казначеев, В.П. Донозоологическая диагностика в практике массовых обследований населения / В.П. Казначеев, Р.М. Баевский, А.П. Берсенева.– Л.: Медицина, 1980. – 260. 126. Калашникова, Л.А. Влияние генотипа каппа-казеина на молочную продуктивность и технологические свойства молока коров холмогорской породы / Л.А. Калашникова, В.Г. Труфанов // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. – 2006. – №4. – С. 43-44. 127. Калашникова, Л.А. Влияние полиморфизма генов молочных белков и гормонов на молочную продуктивность коров чѐрно-пѐстрой породы/ Л.А. Калашникова, Я.А. Хабибрахманова, А.Ш. Тинаев // Доклады Российской академии с.-х. наук. – 2009. – №3. – С. 49-52. 128. Калашникова, Л.А. ДНК-технологии оценки сельскохозяйственных животных / Л.А. Калашникова, И.М. Дунин, В.И. Глазко, Н.В. Рыжова, Е.П. Голубина. – ВНИИплем, 1999. – 148 с. 129. Калашникова, Л.А. Селекция ХХI века: использование ДНКтехнологий / Л.А. Калашникова, И.М. Дунин, В.И. Глазко. Лесные поляны, ВНИИплем, 2000. – 31 с. 130. Камалдинов, Е.В. Фонд эритроцитарных антигенов и хромосомная нестабильность у якутского скота/ Е.В. Камалдинов, О.С. Короткевич, В.Л. Петухов // Сельскохозяйственная биология. – 2011. – №2. – С. 51-55. 131. Карасик, Ю.М. Голштинизация молочного скота и выращивание высокоценных быков на Украине/ Ю.М. Карасик, В.М. Серокуров // Зоотехния. – 1991. – №3. – С. 2-8 132. Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных / И.М. Карпуть. – Минск: Ураджай, 1986. – С. 18-20. 133. Карт, Ф. Гормональная регуляция у млекопитающих / Ф. Карт, Д.У. Линкольн. – М.: Мир, 1987. – 303 с. 134. Катков, И.И. Роль механических напряжений при криоповреждениях мембран спермиев сельскохозяйственных животных и человека / И.И. Катков, Ф.И. Осташко // Тезисы II Всесоюзной конференции по криобиологи и криомедицине. – Харьков, 1984. – т. 2. – С. 229. 221 135. Качура, В.С. Частота Робертсоновской транслокации у крупного рогатого скота на Украине / В.С. Качура, А.А. Мелешко // Цитология и генетика. – 1985. – т. №1. – С. 43-48. 136. Кибкало, Л. Влияние акклиматизации и адаптации на продуктивность импортных коров / Л. Кибкало, Н. Гончарова, Н. Ткачѐва // Молочное и мясное скотоводство. – 2009. – №4. – С. 23-24. 137. Клейменов, Н.И. Системы выращивания крупного рогатого скота / Н.И. Клейменов, В.Н. Клейменов, А.Н. Клейменов. – М.: Росагропромиздат, 1989. – 320 с. 138. Кленовицкий, П.М. Генетика и биотехнология в селекции животных / П.М. Кленовицкий, Н.С. Марзанов, В.А. Багиров, М.Г. Каситов. – М.: ЭКСПАЛОР, 2004. – 285 с. 139. Клименок, И.И. Взаимосвязь воспроизводительной способности с продуктивным долголетием у голштинизированного скота Сибири /И.И. Клименок, Г.Л. Рогальский // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2001. – С. 3-4. 140. Коган, С.Л. Патология сперматогенеза / С.Л. Коган. – Л.: Медицина, 1969. – 215 с. 141. Козинец, Г.И. Клетки крови – современные технологии их анализа / Г.И. Козинец, В.М. Погорелов, Д.А. Шмаров, С.Ф. Боев, В.В. Сазонов. – М.: Триада-Фарм, 2002 – 200 с. 142. Кокорина, Э.П. Условные рефлексы и продуктивность животных / Э.П. Кокорина. – М.: Агропромиздат, 1986. – 334 с. 143. Колокольцев, Ю.К. Селекция на резистентность с учѐтом комплекса биохимических показателей / Ю.К. Колокольцев, Д.К. Карыбаева // Пробл. теор. и прикл. генет. в Казахстане: матер. Респуб. конф АлмаАта, 18-22 ноября, 1990 / Алма-Ата, 1990. – С. 131-132. 144. Кононенко, Н.В. Адаптационные способности импортного скота в Приазовье / Н.В. Кононенко, И.И. Самий, Н.И. Буюклу // Зоотехния. – 1998. – №4. – С. 20-22. 145. Кононов, В.П. Половая активность быков по сезонам года / В.П. Кононов, О.Н. Дьякевич // Зоотехния. – 1997. – №5. – С. 20-22. 146. Кононов, В.П. Репродуктивный потенциал коров и быков в зависимости от сезона года/ В.П. Кононов, О.Н. Дьякевич// Зоотехния. – 1995. – №8. – С. 22-23. 147. Коробко, В.А. Технологические резервы увеличения заготовки спермопродукции от быков-производителей на крупных племпредприятиях: автореф. дис. …канд.с.-х. наук: 06.02.01 / Владимир Алексеевич Коробко. – Харьков, 1990. – 24 с. 148. Костомахин, Н. Адаптационные способности и продуктивные качества скота голштинской породы/ Н. Костомахин, В. Ястребов // Главный зоотехник. – 2008. – №1. – С. 15-22. 149. Костомахин, Н.М. Биохимический контроль за полноценностью кормления нетелей и коров /Н.М. Костомахин // Зоотехния. – 1991. – 222 150. 151. 152. 153. 154. 155. 156. 157. 158. 159. 160. 161. №1. – С. 27-29. Костомахин, Н.М. Корреляционная зависимость между факторами иммунной защиты и хозяйственно полезными признаками у крупного рогатого скота /Н.М. Костомахин // Проблемы стабилизации и развития сельского хозяйства Казахстана, Сибири и Монголии: мат-лы 3-й Междунар. науч.-практ. конф. Алматы, 18-19 июля 2000 г. / РАСХН. Сиб. отдел. Новосибирск, 2000. – С. 124-125. Кот, М.М. Племенные качества быков чѐрно-пѐстрой и голштинской пород при чистопородном разведении и скрещивании /М.М. Кот, В.Т. Хороших // Известия Тимирязевской с.-х. академии. – 1989. – №6. – С. 104-112. Кофанов, А.И. Молочная продуктивность помесей голштинской породы с симментальской в условиях Бурятии / А.И. Кофанов // Аграрная наука. – 2006. – №4. – С. 28. Кочнев, Н.Н. Проблема генетической безопасности популяции сельскохозяйственных животных /Н.Н. Кочнев //Сельскохозяйственная биология. – 2003. – №4. – С. 21-25. Крейндлин, Ю.Г. Режимы замораживания семени быков при различных технологиях / Ю.Г. Крейндлин // Вопросы воспроизводства сельскохозяйственных животных. – М., 1984. – С. 41-45. Кригер, Н.В. Особенности биохимической составляющей адаптивной реакции генофонда животных / Н.В. Кригер, О.В. Морозова, Ю.В. Двойнева, Д.П. Синяев // Реконструкция гомеостаза: матер. междунар. симпозиума: в 4 т. т.4 / под общ. ред. В.П. Нефѐдова. Красноярск, 1998. – С. 75-79. Кригер, Н.В. Цитогенетические исследования быков-производителей, используемых в системе разведения в Красноярском крае / Н.В. Кригер, О.А. Мыскова, Е.М. Романова // Рег. конф. «Молодѐжь – аграрному производству», 12-15 ноября 1991. – Красноярск, 1991. – С. 25. Кригер, Н.В. Цитогенетический контроль в эколого-генетическом мониторинге при крупномасштабной селекции: дис. … канд. биол. наук: 03.00.16; 03.00.15 / Наталья Владимировна Кригер. – Красноярск, 1994. – С. 53 Крыканова, Л.Н. Эффективность использования голштинской породы крупного рогатого скота в европейских странах / Л.Н. Крыканова. Обзор МС «Агропроминформ». – 1.6.4.1989. – 68 с. Кузнецов, А.И. Чѐрно-пѐстрый скот Прибайкалья и методы его совершенствования: монография / А.И. Кузнецов, А.И. Голубков, Д.С. Адушинов. – Красноярск, 2008. – 144 с. Куликова, С.Г. Соматические хромосомные абберации у крупного рогатого скота / С.Г. Куликова, Л.К.Эрнст, В.Л. Петухов // Докл. РАСХН, 1996. 6: 33-34. Куликова, С.Г. Цитогенетический контроль аномальных телят при создании нового типа черно-пестрого скота / С.Г. Куликова, В.Л. 223 162. 163. 164. 165. 166. 167. 168. 169. 170. 171. 172. 173. 174. Петухов // Науч.-техн. семин. «Современное состояние и перспективы по созданию новых пород крупного рогатого скота, приспособленных к условиям промышленной технологии». – Харьков, 11-13 октября, 1989. М., 1989. – С. 84-85. Курбатов, А.Д. Криоконсервация спермы с.-х. животных / А.Д. Курбатов, Е.М. Платонов, Н.В. Корбан, Л.Г. Мороз, В.А. Наук. – Л.: ВО Агропромиздат: Ленинградское отделение, 1988. – 256 с. Кушнир, А.В. Сравнительный анализ эколого-генетических и физиологических основ устойчивости животных к экстремальным условиям среды (на примере крупного рогатого скота и северного оленя): автореф. дисс. … д. биол. наук: 03.0015, 03.00.16 / Анатолий Владимирович Кушнир. – Красноярск, 1998. – 53 с. Лебедько, Е.Я. Изменение молочной продуктивности с возрастом у коров красно-пѐстрой породы / Е.Я. Лебедько, Л.И. Никифорова // Достижения науки и техники АПК. – 2004. – №3. – С. 30-31. Лебенгарц, Я.З. Возрастные особенности иммунологической реактивности и обмена веществ крупного рогатого скота / Я.З. Лебенгарц // Сельскохозяйственная биология. – 1994. – №6. – С. 66-76. Лисенков, А.А. Долголетие коров при разных технологиях производства молока / А.А. Лисенков // Зоотехния. – 1991. – №6. – С. 38-39. Логинов, Ж.Г. Голштинский скот и методы его совершенствования /Ж.Г. Логинов //Зоотехния. – 1996. – №8. – С. 6-10. Лозовская, Г.С. Генетические ресурсы воспроизводительной способности черно-пестрого скота / Г.С. Лозовская, В. Майоров // Молочное и мясное скотоводство. – 2008. – №1. – С. 5-6. Лоу, К. Всѐ о витаминах / К. Лоу. – М.: КРОН-ПРЕСС, 1995. – 320 с. Лумбунов, С. Симменталоголштинские помеси в условиях Бурятии / С. Лумбунов, Е. Кострова, Р. Игнатьев // Молочное и мясное скотоводство. – 1998. – №2. – С. 12-16. Лущенко, А.Е. Продуктивность и продуктивное долголетие голштиносимментальских помесей /А.Е. Лущенко, В.И. Безгин, С.В. Бодрова // Повышение эффективности селекционно-племенной работы в животноводстве. – Мат-лы науч.-практич. конф. Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 1999. – С. 11-14. Мазуров, В.Н. Результативность скрещивания холмогорского скота с голштинской породой / В.Н. Мазуров, З.С. Сазонова, Л.А. Пименова // Достижения науки и техники АПК. – 2004. – №12. – С. 18. Маренков, В.Г. Пожизненная продуктивность коров в связи с их иммунологическим статусом /В.Г. Маренков, Т.В. Макеева // Проблемы стабилизации и развития сельского хозяйства Казахстана, Сибири и Монголии: Мат-лы 3-й Междунар. науч.-практ. конф. Алматы, 18-19 июля 2000 г/ РАСХН. Сиб. отдел. Новосибирск, 2000. – С. 129. Маржохов, А.Т. Генетический сдвиг при гетероэкологическом 224 175. 176. 177. 178. 179. 180. 181. 182. 183. 184. 185. 186. 187. 188. варианте создания нового типа молочного скота в КБА ССР/ А.Т. Маржохов, Х. Маримшанов // Повыш. прод. и плем. качеств с.-х. животных. – Ставрополь, 1991. – С. 56-68. Маркушин, А.П. Сроки использования с.-х. животных / А.П. Маркушин. – М.: Россельхозиздат, 1983. – 157 с. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике /В.В. Меньшиков. – М.: Наука, 1987. – 365 с. Методические указания по применению унифицированных биохимических методов исследования крови, мочи, молока в ветеринарных лабораториях. Мин СХ СССР, главное управление ветеринарии ВАСХН им. В.И. Ленина, отделение ветеринарии. М., 1981. – 86 с. Методические рекомендации по определению стоимости приплода крупного рогатого скота и экономического ущерба от яловости коров. Всесоюзный НИИ разведения и генетики сельскохозяйственных животных. Л., 1986. – 17 с. Метревели, Т.В. Биохимия животных: учебное пособие / Т.В. Метревели; под ред. Н.С. Шевелева. – СПб.: Лань, 2005. – 296 с. Меттлер, Л. Генетика популяций и эволюция / Л. Меттлер, Т. Грегг. – М.: Мир, 1972. – 324 с. Милованов, В.К. Биология воспроизведения и искусственное осеменение с.-х. животных / В.К. Милованов. – М.: Сельхозиздат, 1962. – 696 с. Милованов, В.К. О природе криогенных повреждений живчиков барана / В.К. Милованов, А.Н. Варнавский, В.А. Наук // Вестник сельхоз. науки. – 1970. – №10. – С. 86-93. Милованов, В.К. Технология искусственного осеменения и биология воспроизведения с.-х. животных / В.К. Милованов. – М.: Колос, 1972. – 320 с. Миркин, Б.М. Оптимизация структуры агроэкосистем: содержание, проблемы и подходы к реализации / Б.М. Миркин, Р.М. Хазиахметов, А.И. Соломещ // Общая биология. – 1992. – №1. – С. 18. Михайлов, И.Н. Акушерство, гинекология и искусственное осеменение с.-х. животных: учеб. Пособие / И.Н. Михайлов. – М.: Агропромиздат, 1990. – 527 с. Морозова, О.В. Особенности популяционных процессов при голштинизации крупного рогатого скота в Красноярском крае: дис. … канд. биол. наук: 03.00.16 / Олеся Владиславовна Морозова. Краснояр. гос. аграр. ун-т. Красноярск, 2000. – 159 с. Морозова, О.В. Особенности популяционных процессов при голштинизации крупного рогатого скота в Красноярском крае: автореф. дис. … канд. биол. наук: 03.00.16 / Олеся Владиславовна Морозова. Краснояр. гос. аграр. ун-т. Красноярск, 2000. – 16 с. Мохнач, В.С. Влияние некоторых метеорологических факторов на спермопродукцию быков-производителей / В.С. Мохнач, И.А. 225 189. 190. 191. 192. 193. 194. 195. 196. 197. 198. 199. 200. 201. 202. Орловский // Биология размножения и селекции молочного скота с использованием количественной и качественной оценки спермопродукции. – Горки, 1972. – т. 92. – С. 44-52. Мухамедгалиев, Ф.М. Популяционная генетика сельскохозяйственных животных / Ф.М. Мухамедгалиев // Труды института экспериментальной биологии АН КазССР. –1986. – вып. 18. – С. 3-9. Мымрин, В. Использование геномных индексов для отбора быковпроизводителей / В. Мымрин, О. Ткачук, Н. Шавшукова // Зоотехния. – 2012. – №5. – 2-3. Мымрин, В.С. Воспроизводительные качества быков голштинской породы / В.С. Мымрин // Зоотехния. – 1991. – №3. – С. 55-57. Нагдалиев, Ф.А. Особенности голштинизированного чѐрно-пѐстрого скота на Алтае / Ф.А. Нагдалиев, В.Н. Гетманец // Зоотехния. –1998. – №6. – С. 5-6. Нарижный, А.Г. Влияние антиоксидантов и способов криоконсервации на пероксидацию липидов в сперме / А.Г. Нарижный, А.С. Ерохин, М.Ф. Рочев // Докл. Росс. Акад. с.-х. наук. – 1993. – №6. – С. 32-35. Нарижный, А.Г. Применение редуцирующих веществ и антиоксидантов для улучшения методов длительного хранения семени быков: Автореф. дис. … канд. с.-х. наук / А.П. Нарижный. – Дубровицы, 1978. – С. 4-8. Наук, В.А. Действие внешних факторов на спермопродукцию быков / В.А. Наук // Животноводство. – 1984. – №6. – С. 46-48. Наук, В.А. Криоконсервация спермы животных – техническая основа крупномасштабной селекции / В.А. Наук //5 съезд Всесоюзного общества генетиков и селекционеров. – М.: 1987. – 142 с. Наук, В.А. Структура и функция спермиев с.-х. животных при криоконсервации: монография / В.А. Наук. – Кишинев: Штиинца, 1991. – 197 с. Наук, В.А. Структурные и биохимические криоповреждения биомембран гамет самцов с.-х. животных / В.А. Наук // Криобиология. – 1985. – №2. – С.47-49. Наук, В.А., Проблемы и перспективы консервации генома с.-х. животных / В.А. Наук, Г.В. Боранчук, А.М. Гуськов // Сельскохозяйственная биология. – 1989. – №2. – С. 25-32. Немцов, А.А. Полиморфизм гена каппа-казеина симментальских животных отечественной и австрийской селекции / А.А. Немцов, Н.А. Зиновьева, И.Ф. Юмагузин, В.П. Горяминский, Н.Ш. Гарипова // Достижения науки и техники АПК. – 2007. – №2. – С. 31-33. Немцов, А.А. Полиморфизм по гену каппа-казеина быков различных пород на головном племпредприятии Башкортостана / А.А. Немцов, И.Ф. Юмагузин, Е.Н. Коновалова, Н.А. Зиновьева, Н.Ш. Гарипова // Сельскохозяйственная биология. – 2006. – №4. – С. 65-67. Никитченко, И.Н. Адаптация, стрессы и продуктивность сельскохозяйственных животных / И.Н. Никитченко. С.И. Плященко, 226 203. 204. 205. 206. 207. 208. 209. 210. 211. 212. 213. 214. 215. 216. 217. А.С. Зеньков. – Минск: Ураджай. – 1988. – 200 с. Никифорова, Л. Эффективность голштинизации в племхозяйствах Брянской области / Л. Никифорова // Молочное и мясное скотоводство. – 2007. – №4. – С. 17-18. Никоноров, П.Н. Значение резистентности скота в условиях промышленной технологии / П.Н. Никоноров // Докл. ВАСХНИЛ. – 1981. – т. 1. – С. 26-28. Огуй, В.Г. Опыт голштинизациии симментальского скота /В.Г. Огуй, Н.Г. Бондаренко, Р.П. Быкова, Л.П. Пикаш // Зоотехния. – 1991. – №4. – С. 14-15. Ожин, Ф.В. Справочник по искусственному осеменению с.-х. животных: учеб. пособие / Ф.В. Ожин, Г.В. Паршутин, И.И. Родин, В.Г. Семаков, Н.П. Шергин. – М.: Россельхозиздат, 1983. – 271 с. Осташко, Ф.И. Биотехнология воспроизведения крупного рогатого скота / Ф.И. Осташко. Киев: Аграрна наука, 1995. – 183 с. Осташко, Ф.И. Глубокое замораживание и длительное хранение спермы производителей / Ф.И. Осташко. – Киев: Урожай, 1978. – 255 с. Охапкин, С.К. Порода и породообразование / С.К. Охапкин. – М.: 1999. – С. 15-31. Павлова, И.Ю. Оценка племенных ресурсов быков-производителей холмогорской породы по генам молочных белков / И.Ю. Павлова, Л.А. Калашникова, В.Л. Ялуга, Т.А. Рухлова // Зоотехния. – 2011 а. – №3. – С. 6-9. Павлова, И.Ю. Полиморфизм быкопроизводящих коров холмогорской породы по генам молочных белков / И.Ю. Павлова, Л.А. Калашникова, В.Л. Ялуга, Т.А. Рухлова // Зоотехния. – 2011. – №6. – С. 6-7. Панин, Л.Е. Биохимические механизмы стресса: монография / Л.Е. Панин. – Новосибирск: Наука, 1983. – 233 с. Панин, Л.Е. Энергетические аспекты адаптации / Л.Е. Панин. – Л.: Медицина, 1978. – 190 с. Панов, Б.Л. Цитогенетический статус крупного рогатого скота чернопестрой породы / Б.Л. Панов, С.Г. Куликова, А.Л. Сенцова // в сб.: Проблемы селекции сельскохозяйственных животных. Новосибирск, 1997. – С. 116-119. Пархоменко, Б. Оценка быков-производителей с учетом белковомолочности / Б. Пархоменко // Молочное и мясное скотоводство. – 2011. – №3. – С.11-13. Паршутин, Г.В. Искусственное осеменение с.-х. животных: Учеб. пособие / Г.В. Паршутин, Н.Н. Михайлов, И.Е. Козло. – М.: Колос, 1983. – 223 с. Пасечник, В.И. Электрострикционные измерения вязкоупорных свойств бислойных липидных мембран / В.И. Пасечник // Итоги науки и техники. Биофизика мембран. М.: ВИНИТИ, 1982. – т. 2. – С. 267307. 227 218. Пепина, Г.Д. Влияние породы, возраста, сезона года и происхождения быков-производителей на физиологические показатели спермопродукции /Г.Д. Пепина, Н.З. Басовский //Биологические основы размножения и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. – Пушкин, 1970. – вып. 14. С. 97101. 219. Перегудова, С. Естественная резистентность телок в зависимости от типов конституции / С. Перегудова // Молочное и мясное скотоводство. – 1992. – №2. – С. 13-15. 220. Першилин, К.Г. Молочные реки Сибири / К.Г. Першилин // Новое сельское хозяйство. – 2002. – №4. – С. 40-41. 221. Першина, Л.М. Влияние быков на сохранность потомства /Л.М. Першина // Зоотехния. – 1995. – №5. – С. 5-6. 222. Петухов, В.Л. Ветеринарная генетика с основами вариационной статистики: Учеб. пособие / В.Л. Петухов, А.И. Жигачѐв, Г.А. Назарова. – М.: ВО Агропромиздат, 1985. – 367 с. 223. Петухов, В.Л. Генетические основы селекции животных / В.Л. Петухов, Л.К. Эрнст. – М.: ВО Агропромиздат, 1989. – 448 с. 224. Петухова, Я.И. Аутоиммунный клеточный механизм физиологического разрушения эритроцитов / Я.И. Петухова. – Новосибирск: Наука, 1979. – 135 с. 225. Пианка, Э. Эволюционная экология / Э. Пианка. – М.: Мир, 1981. – 400 с. 226. Плохинский, Н.А. Биометрия / Н.А. Плохинский. – М.: Изд-во МГУ, 1970. – 367 с. 227. Плященко, С.И. Естественная резистентность организма животных/ С.И. Плященко, В.Т. Сидоров. Л.: Колос: Ленин-ое отд-ние, 1979. – 184 с. 228. Плященко, С.И. Предупреждение стрессов у сельскохозяйственных животных / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров. – Минск: Ураджай, 1983. – 136 с. 229. Плященко, С.И. Стрессы – благо или зло? / С.И. Плященко. – Минск: Ураджай, 1991. – 173 с. 230. Плященко, С.И. Стрессы у сельскохозяйственных животных / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров. – М.: Агропромиздат, 1987. – 192 с. 231. Полумисков, П.Г. Половая активность быков в условиях засушливой зоны Ставрополья / П.Г. Полумисков, С.Н. Слипченко, Н.М. Джафаров // Зоотехния. – 1995. – №10. – С. 27-28. 232. Полупан, Ю. Сочетаемость пород при воспроизводительном скрещивании / Ю. Полупан, В. Близниченко, А. Коваленко, С. Кухнин, О. Сагоконь // Молочное и мясное скотоводство. – 1997. – №3. – С. 26-28. 233. Пономаренко, Л.Д. Исследование динамики численности нормальных киллеров аутологических эритроцитов как ответственной реакции организма на стресс-воздействие: дис. … канд. биол. наук: 228 234. 235. 236. 237. 238. 239. 240. 241. 242. 243. 244. 245. 246. 247. 248. 03.00.16/Людмила Давидовна Пономаренко. Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 1997. – 22 с. Порфирьев, И.А. Репродуктивные качества и адаптационная способность быков-производителей голштинской и красной датской пород в условиях Алтайского края /И.А. Порфирьев, Сот Сун, И.Е. Рабинович // Сельскохозяйственная биология. – 2003. – №4. – С. 62-68. Прожерин, В.П. Племенная оценка голштинских быков при использовании в популяции холмогорского скота /В.П. Прожерин, Б.П. Завертяев // Молочное и мясное скотоводство. – 2006. – №4. – С. 19-22. Прохоренко, П.Н. Голштинофризская порода скота / П.Н. Прохоренко, Ж.Г. Логинов. – Л.: Агропромиздат. Ленин-ое отд-ние, 1986. – 238 с. Прохоренко, П.Н. Межпородное скрещивание в молочном скотоводстве / П.Н. Прохоренко, Ж.Г. Логинов. – М.: Россельхозиздат, 1986. – 191 с. Прудов, А.И. Использование голштинских производителей для совершенствования молочных пород скота / А.И. Прудов, И.М. Дунин // Эффективность использования голштинского скота ВНИИПЛЕМ. – М.: 1986. – С. 4-13. Радченко, В.В. Продуктивные качества голштинского молодняка зарубежной селекции / В.В. Радченко, Ю.М.Лютый, В.П. Ткаченко // Зоотехния. – 1998. – №7. – С. 25-28. Райцина, С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции /С.С. Райцина. – М.: Наука, 1985. – 207 с. Раушенбах, Ю.О. Экогенез домашних животных / Ю.О. Раушенбах. – М.: Наука, 1985. – 199 с. Раушенбах, Ю.О. Эколого-генетическая природа функциональной организации (структуры) адаптивной реакции животных. Тепло- и хладоустойчивость домашних животных / Ю.О. Раушенбах. – Новосибирск: Наука, 1975. – 297 с. Реймерс, Н.Ф. Популяционный биологический словарь / Н.Ф. Реймерс. М.: Наука, 1991. – 536 с. Рекомендации по использованию голштино-фризского скота для совершенствования молочных стад и пород. – М., 1984. – 42 с. Рогожин, В.В. Биохимия животных: учебник/В.В. Рогожин. – СПб.: ГИОРД, 2009. – 552 с. Рожков, Ю.И. Генетический полиморфизм животных, его адаптивное значение и роль в селекции / Ю.И. Рожков, С.К. Охапкин // Сельскохозяйственная биология. – 1986. – № 1. – С. 14-24. Романенко, Н.И. Физиолого-биохимический статус симметалхголштинских коров / Романенко Н.И. [и др.] // Вопр. генет. с.-х. жив. // Всерос. НИИ плем. дела. М., 1991. – С. 112-118. Романова, Е.М. Эколого-генетическое прогнозирование в реализации крупномасштабных селекционных программ / Е.М. Романова. – Красноярск: Редакционно-издательский центр «Гротеск», 1994. – 237 с. 229 249. Ротов, А.В. Адаптационные характеристики человека (Оценка и прогнозирование) / А.В. Ротов, Я.С. Пеккер, М.А. Медведев, О.Г. Берестнева. – Томск: Изд-во Томского ун-та, 1997. – 137 с. 250. Руденко, С.В. Нарушение планарной упаковки плоского липидного биослоя при взаимодействии с глицерином / С.В. Руденко // Криобиология. – 1985. – №3. – С. 30-32. 251. Рудко, А.А. Воспроизводительная способность импортных быковпроизводителей в условиях Красноярского края: автореф. дис. … канд. с.-х. наук: 06.02.01 / Анатолий Адамович Рудко. – Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2003. – 17 с. 252. Рузен-Ранге, Э. Сперматогенез у животных / Э. Рузен-Ранге. – М.: Мир, 1980. – 254 с. 253. Рябова, Л.А. Совершенствование скота холмогорской породы печерского типа / Л.А. Рябова // Зоотехния. – 1996. – №11. – С. 4-6. 254. Савченко, С.П. Сезонная динамика гуморальных факторов естественной резистентности у коров чѐрно-пѐстрой породы / С.П. Савченко // Разведение, кормление, технология содержания и продуктивность жвачных животных в условиях Западной Сибири. – 1988. – С. 55-59. 255. Самохин, В.Т. Микрокомпоненты и продуктивность животных / В.Т. Самохин, Н.И. Кузнецов, В.И. Шушлебин // Микрокомпоненты в биологии и их применение в сельском хозяйстве и медицине. – Тезисы докладов XI Всесоюзной конференции. – Самарканд, 1990. – С. 381383. 256. Сарапкин, В.Г. Детализированная селекция чѐрно-пѐстрого скота в Пензенской области / В.Г. Сарапкин, В.Ф. Зубриянов // Зоотехния. – 2003. – №4. – С. 5-8. 257. Селионова, М. Полиморфизм гена каппа-казеина и его влияние на признаки продуктивности коров-первотелок разных пород / М. Селионова, Г. Ковалева // Главный зоотехник. – 2011. – №4. – С. 13-16. 258. Селье Г. Стресс без дистресса/ Г. Селье. – М.: Прогресс, 1982. –127 с. 259. Селье, Г. Концепция стресса, как мы еѐ представляем в 1976 году / Г. Селье // Новое о гормонах и механизме их действия. – Киев: Наукова Думка, 1977. – С. 27-51. 260. Селье, Г. На уровне целого организма / Г. Селье. – М.: Наука, 1972. – 121 с. 261. Селье, Г. Очерки об адаптационном синдроме / Г. Селье. – М.: Медгиз, 1960. – 254 с. 262. Семаков, В.Г. Рациональное использование быков-производителей / В.Г. Семаков. – М.: ВНИИТЭИСХ, 1985. – 48 с. 263. Семѐнов, А.В. Связь кариотипической изменчивости с хозяйственнополезными признаками крупного рогатого скота / А.В.Семѐнов // Деп. во ВНИИТЭИ-агропром, 1986. – №388. ВС-86 деп. 264. Семеновский, Ф.Н. Математическое моделирование экологических процессов / Ф.Н. Семеновский, С.М. Семѐнов. – Л.: Гидрометиоиздат, 230 265. 266. 267. 268. 269. 270. 271. 272. 273. 274. 275. 276. 277. 278. 1982. – 279 с. Сердюк, С.И. Искусственное осеменение в промышленном свиноводстве / С.И. Сердюк. – М:. Колос, 1977. – 160 с. Сидоров, В.Т. Естественная резистентность телят при желудочнокишечных заболеваниях / В.Т. Сидоров // Ветеринария. – 1984. – №10. – С. 57-59. Синяев, Д.П. Выявление критических параметров адаптации Bos taurus различного экогенеза / Д.П. Синяев, Ю.В. Двойнева, О.В. Морозова // Агроэкология и устойчивое развитие регионов. – Красноярск, 1998. – С. 59-60. Сирацкий, И.З. Влияние условий выращивания на воспроизводительную способность быков / И.З. Сирацкий // Зоотехния. – 1996. – №2. – С. 28-31. Сирацкий, И.З. Зависимость качества спермопродукции от породы и возраста быков-производителей / И.З. Сирацкий // Молочное и мясное скотоводство. – 1972. – №6. – С. 28. Сирацкий, И.З. Изменчивость и наследственная обусловленность воспроизводительной способности быков-производителей симментальской породы / И.З. Сирацкий // Цитология и генетика. – 1993. – т. 27. – №6. – С.45-52. Скопичев В.Г. Физиология животных и этология: учебное пособие / В.Г. Скопичев, Т.А. Эйсымонт, Н.П. Алексеев и др.; под ред. Т.С. Молочаевой. – М.: КолосС, 2005. – 720 с. Скорняков, Б.А. Электронно-микроскопические изучение взаимодействия замораживания на целостность половых клеток спермы быков / Б.А. Скорняков // Науч.-произ. конф. по теории и практике воспроизводства с.-х. животных. – Харьков, 1972. – С. 71-72. Скорова, С.В. Влияние иммунологических реакций организма на частоту структурных мутаций хромосом: автореф. дис. … канд. биол. наук: / Софья Васильевна Скорова. – Новосибирск, 1982. – 24 с. Скрипченко, Г.Г. Гуморальные факторы естественной резистентности у коров при заболевании эндометритом / Г.Г. Скрипченко, Н.Б. Беляева // Актуальные вопросы селекционно-племенной работы в животноводстве. – М., 1989. – С. 22-28. Слесарев, И.К. Минеральное питание крупного рогатого скота /И.К. Слесарев, А.С. Зеньков. Минск: Ураджай, 1987. – 63 с. Слоним, А.Д. Экологическая физиология животных. Часть 1. Общая экологическая физиология и физиология адаптаций / А.Д. Слоним. – Л. Наука, 1979. – 440 с. Слоним, А.Д. Церебровисцеральные отношения, суточная периодика и нервные механизмы адаптации / А.Д. Слоним // Регуляция висцеральных функций: Закономерности и механизмы. – Л.: Наука, 1987. – С. 203-215. Слоним, А.Д. Экологическая физиология животных: учеб. пособие / А.Д. Слоним. – М.: Высшая школа, 1971. – 448 с. 231 279. Смирнов, В.С. Конституция, адаптация и продуктивность свиней / В.С. Смирнов // Зоотехния. – 1991. – №6. – С. 6-9. 280. Соколовская, И.И. Зоотехническая иммунология воспроизведения / И.И. Соколовская // Животноводство. – 1976. – №5. – С. 53-58. 281. Соколовская, И.И. Иммунология воспроизведения животных / И.И. Соколовская, В.К. Милованов. – М.: Колос, 1981 б. – 264 с. 282. Соколовская, И.И. О значении акросомы в оценке семени самцов / И.И. Соколовская // Животноводство. – 1981 а. – №9. – С. 46-47. 283. Соколовская, И.И. Проблемы оплодотворения сельскохозяйственных животных / И.И. Соколовская. М.: Советская наука, 1957. – 313 с. 284. Соколовская, И.И. Участки отдельных структур живчика в процессе оплодотворения / И.И. Соколовская, Р.Н. Ойвадис, В.С. Осадчук // Сельскохозяйственная биология. – 1974. – IX. – №5. – С. 746-751. 285. Солдатов, А.П. Воспроизводительные способности быков / А.П. Солдатов, П.Е. Поляков, В.И. Мельников. – М.: Россельхозиздат, 1969. – 119 с. 286. Солдатов, В.И. Методические указания к проведению лабораторных занятий по клинической диагностике / В.И. Солдатов. – Красноярск, 1990. – С. 15. 287. Солсбери, Г.У. Теория и практика искусственного осеменения коров в США / Г.У. Солсбери, Н.Л. Ван-Демарк. – М.: Колос, 1966. – 526 с. 288. Сохатский, П.С. Влияние возраста матерей на воспроизводительную способность бычков / П.С. Сохатский // Зоотехния. – 1996. – №9. – С. 23-25. 289. Столбов, В.М. Влияние введения витаминов в разбавитель на качество спермы быков после замораживания-оттаивания / В.М. Столбов, Д.Л. Риморова // Криоконсервация гамет и эмбрионов с.-х. животных: сб. науч. ст. / ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных; под ред. Б.И. Протасова. – Ленинград, 1983. – С. 54-57. 290. Стрекозов, Н.И. Интенсификация молочного скотоводства России / Н.И. Стрекозов, В.К. Чернушенко, В.И. Цысь. – Смоленск. – 1997. – 240 с. 291. Тамаров, Р.В. Молочная продуктивность коров михайловского типа и ярославских чистопородных с разными генотипами каппа-казеина / Р.В. Тамаров, Ю.В. Шилов // Зоотехния. – 2008. – №2. – С. 2-5. 292. Тарчоков, Т.Т. Адаптивные качества голштинизированных коров различных генотипов / Т.Т. Тарчоков // Зоотехния. – 1996. – №5. – С. 4-5. 293. Тарчоков, Т.Т. Голштинизация в предгорной зоне Кабардино-Балкарии / Т.Т. Тарчоков // Молочное и мясное скотоводство. – 1997. – №4. – С. 23-24. 294. Тарчоков, Т.Т. Голштинизация швицкого и чѐрно-пѐстрого скота в Кабардино-Балкарии / Т.Т. Тарчоков // Зоотехния. – 1995. – №9. – С. 3. 295. Тейлор, Д. Биология / Д. Тейлор, Н. Грин, У. Стаут; в 3-х т. т. 3: пер. с анг. / под ред. Р. Сопера – 3-е изд., – М.: Мир, 2005. – 451 с. 232 296. Тимофеев, Л.В. Активность спермиев и объем эякулята хряков различных пород и иммуногенотипов по Е-, Н-, К-системам групп крови / Л.В. Тимофеев, М.А. Шкатов // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. – 2005. – №2. – С. 35-38. 297. Тимофеев, Л.В. Объѐм и качество спермопродукции хряков разных пород и линий в зависимости от иммуногенов по системам групп крови / Л.В. Тимофеев, М.А. Шкатов, Н.М. Шкатова // Сельскохозяйственная биология. – 2004. – №4. – С. 73-76. 298. Тинаев, А. Племенные ресурсы быков-производителей чѐрно-пѐстрой породы / А. Тинаев, Л. Калашникова, Т. Ганченкова // Молочное и мясное скотоводство. – 2009. – №1. – С. 5-7. 299. Тюлькин, С. Технологические свойства молока коров с разными генотипами каппа-казеина / С. Тюлькин, Т. Ахметов, М. Нургалиев // Молочное и мясное скотоводство. – 2011. – №8. – С. 4-5. 300. Усова, Т.П. Влияние подбора на продуктивные качества коров / Т.П. Усова // Зоотехния. – 2000. – №6. – С. 2-4. 301. Усолкина, Н.Н. Показатели естественной резистентности у животных при скрещивании и гибридизации / Н.Н. Усолкина, А.Г. Юферова, К.Б. Кольцова // Производство молока и мяса в условиях Северного Зауралья. – Новисибирск, 1991. – С. 33-41. 302. Уханов, С.В. Генетические ресурсы КРС: редкие и исчезающие отечественные породы / С.В. Уханов, Ю.А. Столповский, Л.В. Банникова, Л.А. Зубарева, З.И. Иванова, З.К. Вердиев. – М.: Наука, 1993. – 171 с. 303. Фомина, Л.В. Изучение процесса адаптации импортных быковпроизводителей с использованием метода биотестирования: автореф. дис. … канд. с.-х. наук: 03.00.16 / Людмила Владимировна Фомина. – Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2003. – 16 с. 304. Хабибрахманова, Я.А. Полиморфизм генов молочных белков и гормонов крупного рогатого скота: автореф. дис. …канд. биол. наук: 06.02.01 / Язиля Аминовна Хабибрахманова. – Лесные Поляны, 2009. – 23 с. 305. Хаертдинов, Р.А. Генетическая изменчивость молочных белков у помесей холмогорскойхвенгерской голштинской пород / Р.А. Хаертдинов // Зоотехния. – 1998. – №3. – С. 5-6. 306. Хайруллина, Н.И. Влияние сочетания локусов эритроцитарных антигенов быков-производителей на генетическую структуру стада крупного рогатого скота / Н.И. Хайруллина, Н.Г. Фенченко, З.М. Ярмухаметова, Р.М. Ахмадуллин // Зоотехния. – 2007. – №6. – С. 5-6. 307. Хохрин, С.Н. Кормление сельскохозяйственных животных: учебное пособие /С.Н. Хохрин. – М.: КолосС, 2004. – 692 с. 308. Часовщикова, М. Взаимосвязь генетических вариантов каппа-казеина с молочной продуктивностью коров / М. Часовщикова // Молочное и мясное скотоводство. – 2011. – №8. – С. 6-7. 309. Часовщикова, М.А. Мониторинг генетической структуры стада 233 310. 311. 312. 313. 314. 315. 316. крупного рогатого скота черно-пестрой породы Тюменской области на основе ДНК-диагностики маркеров продуктивности / М.А. Часовщикова, О.М. Шевелева // Достижения науки и техники АПК. – 2011. – №8. – С. 54-55. Четвертакова, Е.В. Андрологические расстройства и генетические аномалии быков-производителей на предприятии ОАО «Красноярскагроплем» / Е.В. Четвертакова, А.Е. Лущенко / Научнопрактические рекомендации, Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2013 а. –28 с. Четвертакова, Е.В. Влияние геномных мутаций на воспроизводительную способность быков рода BOS TAURUS / Е.В. Четвертакова // Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития: мат-лы XIII международной науч.-практич. конф. Ч. II: Наука: опыт, проблемы, перспективы развития / Крас. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2014 а. – С. 267-270. Четвертакова, Е.В. Влияние генофонда импортного скота на распространение спастического пареза в бычьих популяциях племпредприятий Средней Сибири / Е.В. Четвертакова // Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития: мат-лы. международной науч.-практич. конф. Часть II: Наука, проблемы, перспективы развития / Крас. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2013 в. – С. 224-227. Четвертакова, Е.В. Влияние генофонда импортного скота на структуру генетических дефектов спермы у быков ОАО « Красноярскагроплем» / Е.В. Четвертакова // Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития: мат-лы. международной науч.-практич. конф. Часть II: Наука и образование: опыт, проблемы, перспективы развития / Крас. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2013 г. – С. 227-230. Четвертакова, Е.В. Влияние зимне-весеннего периода года на долю аномальных форм сперматозоидов в нативной и криоконсервированной сперме голштинских быков-спермодоноров / Е.В. Четвертакова // Вестник КрасГАУ. – 2012 г. – №8. – С. 118-122. Четвертакова, Е.В. Динамика частоты аномалий половой системы у быков-производителей / Е.В. Четвертакова, О.В. Злотникова // Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья животных» мат-лы II Междун. науч. конф. Ставрополь. 17-19 июня 2003. Ставрополь, 2003. С. 208-209. Четвертакова, Е.В. Доля аномальных форм спермотозоидов в нативной и криоконсервированной сперме быков разных линий в зимнеевесенний период / Е.В. Четвертакова // Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития: Всерос. науч.практич. конф. Ч. 2. (секц. 6) /Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2009 а. – С. 224-226. 234 317. Четвертакова, Е.В. Исследование спермы быков-производителей голштинской породы ГСХП «Красноярское» на выявление патологических форм спермиев / Е.В. Четвертакова, Е.В. Иванова // Агроэкология и устойчивое развитие регионов. Мат-лы. Всеросс. научной конф. студентов и молодых учѐных, посвященной 45-летию КрасГАУ. Часть 2. Красноярск, 1998. – С. 64-65. 318. Четвертакова, Е.В. Маркерная селекция в молочном скотоводстве красноярского края / Е.В. Четвертакова, Лущенко А.Е., Ерѐмина И.Ю. // Главный зоотехник. 2014 – №9. – С. 3-7. 319. Четвертакова, Е.В. Мониторинг генетических заболеваний в популяции крупного рогатого скота Красноярского края / Е.В. Четвертакова, А.Е. Лущенко // Вестник КрасГАУ. – 2012 а. – №6. – С. 120-126. 320. Четвертакова, Е.В. Особенности молочной продуктивности коровпервотелок красно-пѐстрой породы с разными генотипами по гену каппа-казеина / Е.В. Четвертакова // Вестник КрасГАУ. – 2012 б. – №9. – С. 133-135. 321. Четвертакова, Е.В. Особенности роста и развития телочек краснопестрой породы с разными генотипами по локусу гена каппа-казеина / Е.В. Четвертакова, А.И. Голубков, И.Ю. Еремина // Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития: мат-лы. междунар. науч.-практич. конф. Часть II: наука: проблема, перспективы развития. – Крас.гос.аграр.ун-т. – Красноярск, 2012 в. – С. 315-317. 322. Четвертакова, Е.В. Полиморфизм гена каппа-казеина и его влияние на рост и молочную продуктивность коров красно-пестрой породы / Е.В. Четвертакова, А.И. Голубков // Биотехнология: реальность и перспективы в сельском хозяйстве: материалы междунар. науч.практич. конф. – Саратов: изд-во «КУБиК», 2013. – С. 129-131. 323. Четвертакова, Е.В. Распространение BLAD и CVM-мутаций у быков– спермодоноров ОАО «Красноярскагроплем» /Е.В. Четвертакова//Наука и образование: опыт, проблемы перспективы развития: мат-лы. международной науч.-практич. конф. ЧастьII: Наука, проблемы, перспективы развития / Крас. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2013 д. – С. 230-231. 324. Четвертакова, Е.В. Распространение андрологических болезней и расстройств у быков-спермодоноров ФГУП «Красноярскгосплем» /Е.В. Четвертакова // Аграрная наука на рубеже веков: материалы регион. науч.-практич. конф. Ч. 2. (секц. 8-17) / Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2006. – С. 288-290. 325. Четвертакова, Е.В. Репродуктивный потенциал и генотипические особенности репродуктивной системы быков-спермодоноров в Красноярском крае: автореф. дис. … канд. с.-х. наук:06.02.01 / Елена Викторовна Четвертакова. – Красноярск, 2004. –16 с. 235 326. Четвертакова, Е.В. Уровень аномальных спермиев как критерий стабильности воспроизводительных функций быков разного экогенеза/ Е.В. Четвертакова, Злотникова О.В. // Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства. Матер. VI Международ. науч.производ. конф. Горки – Беларусь, 19-20 июня 2003 а. Горки, 2003. – С. 323-326. 327. Четвертакова, Е.В. Факторы, влияющие на биотехнологические показатели спермы быков-производителей / Е.В. Четвертакова, А.Е. Лущенко / Научно-практические рекомендации, Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2013 б. – 32 с. 328. Четвертакова, Е.В. Эколого-генетические аспекты реализации репродуктивного потенциала быков-спермодоноров: монография / Е.В. Четвертакова, О.В. Злотникова. – Краснояр. гос. аграр. ун-т. – Красноярск, 2009. – 188 с. 329. Чечерова, Е.Е. Конституциональные особенности коров разной кровности, полученных при скрещивании черно-пестрой и голштинской пород / Е.Е. Чечерова, М.М. Кот, А.П. Лисицин // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии, 1992. – №2. – С. 136-143. 330. Чечешкин, А.В. Биохимия с.-х. животных: учеб. пособие / А.В. Чечешкин, И.Д. Головацкая, П.Л Калиман. – М.: Высшая школа, 1982. – 511 с. 331. Чумаченко, В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных / В.Е. Чумаченко. – Киев: Урожай, 1990. – 144 с. 332. Шапиев, И.Ш. Исследования в биологии воспроизводства и искусственное осеменение с.-х. животных / И.Ш. Шапиев, В.Б. Дмитриев // Зоотехния. – 2000. – №8. – С. 28-29. 333. Шергин, Н.П. Биохимия сперматозоидов с.-х. животных / Н.П. Шергин. – М.: Колос, 1967. – 240 с. 334. Шилов, А.И. Молочная продуктивность симметал х монбельярд х голштинских помесей / А.И. Шилов // Зоотехния. – 1995. – №5. – С. 35. 335. Шкилев, Н.П. Использование канадских голштинов в племзаводе «Пушкинский» / Н.П. Шкилев, Л.Л. Коваль // Зоотехния. – 2004. – №12. – С. 4. 336. Эйдригевич, Е.В. Интерьер сельскохозяйственных животных / Е.В. Эйдригевич, В.В. Раевская. – М.: Колос, 1978. – 255 с. 337. Эйдригевич, Е.В. Интерьер сельскохозяйственных животных / Е.В. Эйдригевич, В.В. Раевская. – М.: Колос, 1966. – 208 с. 338. Эйснер, Ф.Ф. Оценка быков по качеству потомства / Ф.Ф. Эйснер. – М.: Сельхозиздат, 1963. – 191 с. 339. Эрнст, Л.К. Биологические проблемы животноводства в ХХI веке / Л.К. Эрнст, Н.А. Зиновьева. – М.: РАСХН, 2008. – 501 с. 340. Эрнст, Л.К. Крупномасштабная селекция в скотоводстве / Л.К Эрнст. 236 341. 342. 343. 344. 345. 346. 347. 348. 349. 350. 351. 352. 353. М.: Колос, 1982. – 179 с. Эрнст, Л.К. Профилактика генетических аномалий крупного рогатого скота / Л.К. Эрнст, А.И. Жигачѐв. – Л.: Агропромиздат, 1990. – 238 с. Эрнст, Л.К. Роль генетических факторов в возникновении пупочных грыж у крупного рогатого скота / Л.К. Эрнст, А.И. Жигачѐв // Генетика. – т. 17. – №6. – 1981. – С. 1103-1105. Эрнст, Л.К. Характеристика региональных популяций быковпроизводителей по генам наследственных заболеваний / Л.К. Эрнст, Е.А. Гладырь, П.В. Горелов, Е.А. Демидова, Р.Р. Шайдулин, Т.Х. Фаизов, Г.С. Шарафутдинов, Ф.С. Сибагатуллин, Н.А. Зиновьева // Достижения науки и техники АПК. – №10. – 2011. – С. 28-29. Юхманова, Н. Влияние каппа-казеина на качество молока и его сыропригодность /Н. Юхманова, Л. Калашникова // Молочное и мясное скотоводство. – 2004. – №8. – С. 24-25. Яковлев, А. Определение носителей генетических дефектов среди быков-производителей / А. Яковлев, В. Терлецкий, О. Митрофанова, Н. Дементьева // Молочное и мясное скотоводство. – 2004. – №6. – С. 31-32. Янушаускас, К. Цитологические исследования племенных быков / К. Янушаускас, В. Якутие, И. Мицейкене // Проблемы экологического мониторинга и генетические аспекты орнитофауны и других организмов. – Тезисы конференции. Вильнюс, 1988. – С. 115-116. Янчуков, И. Организация оценки быков-производителей по потомству в Подмосковье / И. Янчуков, А. Ермилов, С. Харитонов // Молочное и мясное скотоводство. – 2011. – №5. – С. 5-7. Ярыгин, В.И. Биология: учебник / В.И. Ярыгин, В.И. Васильева, И.Н. Волков, В.В. Синельщикова; под ред. В.И. Ярыгина. – М.: Высшая шк., 2000. – 440 с. Agerholm J.S., Bendixen C., Andersen O. and Arnbjerg J. Complex vertebral malformations in Holstein calves. J. Vet. Diagn. Invest. – 2001. – 13. – P. 283-289. Agerholm JS, Andersen O, Almskou MB, Bendixen C, Arnbjerg J, Aamand GP, et al. Evaluation of the inheritance of the complex vertebral . malformation syndrome by breeding studies. 2004 a. – Acta Vet Scand 45: P. 133–137. Agerholm1 J.S., Andersen O., Almskou M. B., Bendixen C., Arnbjerg J., Aamand G. P.,. Nielsen U.S, Panitz F, Petersen A.H. Evaluation of the Inheritance of the Complex Vertebral Malformation Syndrome by Breeding Studies. Acta vet. scand. 2004. – 45. – P. 133-137. Allison A.C., Hartree E.F. Lysosomal enzymes in the acrosome and their possible role in fertilization J. Reprod. and Fert. – 1970. – V. 21. – Р. 501515. Ashby J., Tennat R.W. Definitive relationships among chemical structure, carcinogeniciti and mutagenicity for 301 chtmecals tested by thy US NTP // Mutat. Res. 1991. Vol. 257. – №3. – P. 229-306. 237 354. Bakst M.R., Sexton T. J. Fertilizing capacity and ultrastructure of fowl and turkey spermatozoa before and after freezing. – J. Reprod. and Fert. – 1979. – Vоl. 55. – Р. 1-7. 355. Barth A.D. Influence of abnormal sperm morphology on conception rates in cattle. / Proc Soc Theriogenol. 1989. – P. 13–39. 356. Barth A.D. Waldner, C.L. Factors Affecting Breeding Soundness Classification of Beef Bulls in Saskatchewan. Can Vet J 2002; 43: P. 274284. 357. Barth A.D., Wood M.R. The effect of streptomycin, oxytetracycline, tilmicosin and phenylbutazone on spermatogenesis in bulls. Can Vet J 1998; 39: P. 103-106. 358. Beatty R.A. The genetics of the mammalian gamete \\ Biol. Rev.-45. – 1970. – Р. 73-120. 359. Bendixen C., Svendsen S., Jensen H., Panitz F., Aasberg A., Holm L.E., Horn .P, Hоj A., Thomsen B., Jeppesen M., Nielsen V.H., Jonker M.: Genetic test for the identification of carriers of complex vertebral malformations in cattle. World Intellectual Property Organization, 2002. Publication No. WO 02/40709 A2. 360. Berglund B., Persson A., Stalhammar H. Effects of complex vertebral malformation on fertility in Swedish Holstein cattle. Acta Vet Scand 2004. – 45: P. 161–165. 361. Berglund B., Persson A., Stalhammar H. Effects of complex vertebral malformation on fertility in Swedish Holstein cattle. Acta Vet Scand 2004. – 45:161-165 362. Bidot F.A. The relation between pH and spermquality. – Rev. CENIC: ciens. biol. 1975. – 6. – №2. – P. 161-169. 363. Biochard D., Coquereau J.A., Amigues, Y et. al. Effekt of bovine leucocyte adhesion deficiency genetic defect in Holstein cattle under farm conditions // 46th Ann. Veet. Eur. Fssoc. Animal Prod. – Prague. – 1995. 364. Brendston W.E. Desjardinc The cycle of the seminiferous epitelium and spermatogenesis in the bevine testis // Am. J. Anat. –1974. – №140. – Р. 167-180. 365. Casillas E.R. Accumulation of carnitine by bovine spermatozoa during maturation in the epididymis. – J. Biol. Chem., 1973. – Vol. 248. – P. 82278232. 366. Chacon J., Perez E., Muller E., Soderquist L. Rodriguez-Martinez H.. Breeding soundness evaluation of extensively managed bulls in Costa Rica. Theriogenology, 1999. – 52: 21–231. 367. Chacon J., Pеrez, E. Roriguez-Martinez H. Seasonal variations in testicular consistency, scrotal circonference and spermiogramme parameters of extensively reared Brahman (Bos indicus) bulls in the tropics. Theriogenology, 2002. – 58: 41-50. 368. Chandler J.E., Adkinson R.W. Genetic and non-genetic contributions to variation in spermatozoal morphology of mature Holstein bulls. In: Proceeding of the NAAB 13th Technical Conference on AI and Reprod. – 238 369. 370. 371. 372. 373. 374. 375. 376. 377. 378. 379. 380. 381. 382. 383. 384. 385. 1990. – P. 57–62. Chenoweth P.J. Risco C.A., Larsen R.E., et al. Effects of dietary gossypol in cottonseed meal on aspects of semen quality and sperm production in young Brahman bulls. Bovine Practitioner 1995; 29: 51-52. Czarnik U., Zabolewicz T., Galinski M., Pareek C.S., Walawski K. Silent point mutation polymorphism of the bovine CD18 encoding gene. J Appl Genet 2004, 45:73-76. Daleq A. Cuto- morpholoqie normale du testicule et spermatoqenese oher les mama feres //Met. Acad. r. Med. Belq. – 46. P. 831 – 834. Darrin-Benntt, A. The phospholipids and phospholipid bound fatty acids and aldehydes of dog and fowl spermatozoa //J. Repr. Fert. – 1974. – №41. – Р. 471-474. De Felici M. Primordial germ cell biology at the beginning of the XXI century. Int J Dev Biol 2009. – 53, 891. Duncan, R.B., Carrig, C.B., Agerholm, J.S. Bendixen, C. Complex vertebral malformation in a Holstein calf: report of a case in the USA. J Vet Diagn Invest, 2001. – 13: 333–336. Everett R.W. Bean B. Environmental influences on sperm output. Journal of Dairy Science, 1982.65:1303-1310. Everett R.W., Bean B. Environmental influences on sperm output. Journal of Dairy Science, 1982. – 65:1303-1310. Everett R.W., Bean B., Foote R.H. Sources of variation of semen output. Journal of Dairy Science, 1978. 61: 90-95. Falconer D.S., Skjervold H. The jhtimum size of progeny groups and optimum use of young bulls in A.I. breeding// Acta Agric. Scand. 1963. – №3. – Р. 131-140. Fesus L., Zoiolnai A. Bovine leucocyte adhesion deficiency in Hungarian Holstein – Frisian cattle//Hung. Agr.Res. – 1995. – 4. – №2. – Р. 27-29. Fields M.J., Burns W.C., Warnick, A.C. Age, season and breed effects on testicular volume and semen traits in young beef bulls. Journal of Animal Science, 1979. 48: 1299–1304. Flechon J.E., Morstin J. Localisation des glicoproteines et des charges negatives it positives dans le revetement de surface des spermatozoides ejaceles de lapin et de taureau. – Ann. histochim. –Vol. – 20. – 1975. – P. 291-300. Fuerst-Waltl B., Schwarzenbacher H., Perner C., Sölkner J. Effects of age and environmental factors on semen production and semen quality of Austrian Simmental bulls. Animal Reproduction Science, 2006 .95: 27-37. Gamer D.L., Johrson L.A., Ahen C.H., Palencia D.D., Chambers C.S. 1996. Comparison of seminal quality in Holstein bulls as yearlings and as mature sires. Theriogenology, 45: 923-934. Gentile A. La Paresi Spastica nel bovino di razza Romagnola. Atti Soc It Buiatria 2002, 34:191-198. Gwazdauskas F.C. Effects of climate on reproduction in cattle. Journal of Dairy Science, 1984. 68(6): 1568-1578. 239 386. Hafez E.S.E. Reproduction of Farm Animals (5th edn). Philadelphia, Lea & Febiger. USA. 1993. 387. Hoflack G., Opsomer G., Van Soom A., Maes D., Kruif A., Duchateau L. Comparison of sperm quality of Belgian Blue and Holstein Friesian bulls. Theriogenology, 2006. 66: 1834–1846. 388. Igboeli G., Rakha A.M. Seasonal changes in the ejaculate characteristics of Angoni (Short Horn Zebu) bulls. Journal of Animal Science, 1971. – 33: 651-654. 389. Johnson M.H. The macromolecular organization of membranes and its bearing on events leading up to fertilization. J. Reprod. and Fert. – 1975. – Vоl. 44. – Р. 167-184. 390. Jones R.C., Stewart D.Z. The effects of cooling to 5 °C and freezing and thawing on the ultrastructure of bull spermatozoa. J. Reprod. and Fert. – 1979. – Vоl. 56. – Р. 233-238. 391. Kakar S.S., Anand S.R. Changes in adenosine 5| -tripnosphate adenylate energy change and adenosine 3|, 5| – cyclic monophosphate during the freezing of buffulo semen. J. Reprod. and Fert. – 1981. – Vоl. 62. – Р. 543548. 392. Kieffer N.M., Cartwright T.C. Sex chromosomes polymorphism in domestic cattle // J. Heredity. – 1968. – vol.59. – P. 35-37. 393. Kim C.K., Chung Y.C., Ki S.H. Studies in reproductive capacity of Korean native bulls. Effect of age, season and collection frequency on semen characteristics in bulls. Proc Vth World Conf Anim Prod Japanese Society of Zootechnical Science, Tokyo, 1983. 2: 155-156. 394. Koch P., Fischer H., Schumann F. Erbpathologie der landwirtschafllichen Haustiere. Berlin, Hamburg, 1957. 395. Koefoed-Johnsen H.H., Andersen J.B., Andresen E., et al. The Dag defect of the tail of the bull sperm. Studies on the inheritance and pathogenesis. Theriogenology 1980; 14: 471-475. 396. Konersmann Y., Wemheuer W., Brenig B. Herkunft, verbreitung und bedeutung des CVM gendefekts in der Holstein Friesian population.Züchtungskd 2003. 75:9-15. 397. Konersmann Y., Wemheuer W., Brenig B. Origin, distribution and relevance of the CVM defect within the Holstein-Friesian population. Zuchtungskunde, 2003.75: 9–15. 398. Lee T.L., Pang A.L., Rennert O.M. Chan, W.Y. Genomic landscape of developing male germ cells. Birth Defects Res C Embryo Today 2009. – 87, 43-63. 399. Mahdipour M., Sharma A., Dubey P.P, Kumar V., Misra, B., Singh, A. Identification of Complex Vertebral Malformation using polymerase chain reaction–primer introduced restriction analysis in Karan Fries bulls. Current Trend in Biotch. Pharm. 2010. – 4 (4): 850-854 400. Margareta W., Kindahl H., Larsson K. Clinical, endocrinological and spermatological studies after endotoxin in the ram. J Vet Med 1989; 36: 90103. 240 401. Mathevon M., Buhr M.M., Dekkers, J.C.M. Environmental, management and genetic factors affecting semen production in Holstein bulls. Journal of Dairy Science, 1998. – 81: 3321-3330. 402. Md. Jalal Uddin Sarder. Effects of age, body weight, body condition and scrotal circumference on sperm abnormalities of bulls used for artificial insemination (AI) programme in Bangladesh/Univ. j. zool. Rajshahi Univ. Vol. 27. – 2008. P. 73-78. 403. Meyerhoeffer D.C., Wettemann R.P., Coleman S.W., Wells M.E. Reproductive criteria of beef bulls during and after exposure to increased ambient temperature. Journal of Animal Science, 1985. 60, 2: 352-357. 404. Migliore L., Colognato R., Naccarati A. E.a. Relationship between genotoxiciti biomarkers in somatic and germ cells:findings from a biomonitoring study. Mutagenesis. 2006, 21 (2): 149-152. 405. Millar P., Lauvergnej J., Dolling C. Mendelian inheritance in cattle. Waseningen, 2000, 9: 101. 406. Mirck M.H., Bannisseht-Wijsmuller Th. Von, Timmermans-Besselink W.J.H. et.al. Optimization of the PCR test for the mutation causing bovint leucocyte adhesion deficiency // Cell and Mol. Biol. – 1995. – 41. – №5. – Р. 695-698. 407. Murray M.T. Male infertility: a growing concern. American Journal of Natural Medecine. 1997. 4:9-16. 408. Murugaiyah M. Changes in the semen characteristics of Kambing Katjan crossbreed buck under hot and humid environmental temperatures In. Lokeshan RR, editor Recent Advances in Goat Production New Delhi: Proc 5th Int Conf Goats: 1992. – P. 1126-1129. 409. Nagahata H, Mirura T., Tagaki K., Ohtake M., Noda H., Yasuda T., K. Nioka. Prevalence and allele frequency estimation of bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) in Holstein- Friesian cattle in Japan. J Vet Med Sci, 1997. 59 (4): 233-238. 410. Nagahata H., Oota H., Nitanai A., Oikawa S., Higuchi H., Nakade T. Complex vertebral malformations in a stillborn Holstein calf in Japan. J. Vet. Med. Sci. 2002. 64, 1107-1112 411. Nagahata H., Oota H., Nitanai A., Oikawa S., Higushi H., Nakade T., Kurosawa T., Morita M., Ogawa H. Complex vertebral malformation in a stillborn Holstein calf in Japan. J Vet Med Sci 2002, 64:1107-1112. 412. Ndama P.H., Entwhistle K.W., Lindsay J.A. Effect of protected protein supplements on some testicular traits in Brahman cross bulls. Theriogenology 1983, 20: 639-650. 413. Norouzy A., Nassiry M.R., Eftekharishahrody F., Javadmanesh A., Mohammad M.R. Abadi, Sulimova G.E. Identification of bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) carriers in Holstein and Brown Swiss AI bulls in Iran. Russ J Gen, 2005.41(12): 1697-1701 414. Olsen G.E., Winfrey V.P., Hill K.E., Burk R.F. Sequential development of flagellar defects in spermatids and epididymal spermatozoa of seleniumdeficient rats. ReproductionCambridge 2004; 127 (3): 335-342. 241 415. Orji B.I., Igboeli G., Nwakalor L.N. Semen characteristics of Muturu bulls, Bos brachyceros. Theriogenology, 1984. 22 (2): 197-203. 416. Orji B.I., Onuora G.I., Nwakalor L.N., Igboeli G. Effect of season and ejaculate number on the chemical composition of N'dama bull semen. Proc Vth World Conf Anim Prod Japanese Society of Zootechnical Science, Tokyo, 1983. 2: 175-176. 417. Petukhov V.L., Kochneva M.L., Korotkevich O.S. Diploidy frequency of somatic cells from polluted and clear zone. Proc/ The 53 nd Annual Meeting of the European Association for Animal Production. Budapest, Wageningen-Press, 2001: 30. 418. Pinheiro L.E.L., Moraes J.C.F., Erdtmann B., et al / Two types of Y chromosomes in a brasilian cattle breed // Caryologia. – 1980. Vol.33. – P. 25-32. 419. Poli M.A., Dewey R., Semorile L., Lozano M.E., Albarino C.G., Romanowski V., Grau O. PCR screening for carriers of bovine leukocyte adhesion deficiency (BLAD) and Uridine monophosphate synthase (DUMPS) in Argentine Holstein cattle. Zentralbl Vet A, 1996. 43(3): 163168. 420. Quinn P.J., White J.C., Cleland K.W. Chemical and ultrastructural changes in ram spermatozoa after washing, cold shock and freezing. J. Reprod. and Fert. – 1969. – Vоl. 18. – Р. 209-220. 421. Revell S. Complex vertebral alformations in a Holstein calf in the UK. Vet Rec 2001149: 659-660. 422. Ribeiro L.A., Baron E.E., Martinez M.L., Coutinho L.L. PCR screening and allele frequency estimation of bovine leukocyte adhesion deficiency in Holstein and Gir cattle in Brazil. Genet Mol Biol, 2000.23 (4): 831-834. 423. Ross A.D., Entwistle K.W. The effect of scrotal insulation on spermatozoal morphology and the rates of spermatogenesis and epididymal passage of spermatozoa in the bull. Theriogenology. 1979. 11:111−129. 424. Roy A., Kotikalapudi R., Patel R.K., Anantaneni R., Katragadda S. New cases of Bovine Leukocyte Adhesion Deficiency (BLAD) carriers in Indian Holstein cattle. Inter J Vet Sci, 2012.1(2): 80-82. 425. Rudes J., Horinova Z., Gustavson I. e.a. Somatic chromosome mutations and morphological adnormalities in sperms of boars. Hereditas, 1991, 115: 139-143. 426. Rusc A., Kaminski S. Prevalence of complex vertebral malformation carriers among Polish Holstein-Friesian bulls. J Appl Genet 2007. 48: 247252. 427. Saacke R.G. What is a BSE–SFT standards: the relative importance of sperm morphology: an opinion. Proc Soc Theriogenol 2001;81–7. 428. Saacke R.G., White J.M. Semen quality tests and their relationship to fertility. In: Proceeding of the 4th NAABTech Conference on AI and Reprod. 1972. P. 22. 429. Sadler T.W. Langman’s medical embryology eight edition, Lippincott Williams & Wilkins. 2000. Page 24-34. 242 430. Sadler T.W. Langman’s medical embryology eight edition, Lippincott Williams & Wilkins. 2000. Page 24-34. 431. Salisbury G.W., Hart R.G., Lodge J.R. The spermatozoon. – Perspect. Biol. and Med. – Vоl. 20. – 1977. – Р. 372-393. 432. Sangalli S., Blasi M., Ianza A., Gregorio P.Di. Genotype analyses on DNA of zootechnically interesting specits breed in Italy//Anim. Genet. – 1994. – 25. – Suhhl № 2. – Р.39. 433. Setchell B.P. The scrotum and thermoregulation. In: The Mammalian Testis (1st Ed.). 1978. P. 90. Cornell Univ. Press, Ithaca, NY. 434. Shamsuddin M., Rodriguez-Martinez H. A simple, non- traumatic culture method for the selection of spermatozoa for in vitro fertilization in the bovine. Anim. Reprod. Sci. 1994. 36: 61-75. 435. Shamsuddin M., Rodriguez-Martinez H., Larsson B. Fertilizing capacity of bovine spermatozoa selected after swim up in hyaluronic acid containing medium. Reprod. Fertil. Develop. 1993.5: 307-315. 436. Shuster D.E., Kehli M.E., Ackermann M.R., Gilbert R.O. Identification and prevalence of a genetic defect that causes leucocyte adhesion deficiency in Holstein cattle // Proc. Natl. Acad. Sci. – USA. – 1992. – P. 9225-9229. 437. Smith A.U., Polge C. Storage of spermatozoa at low temperatures. Vet. Rec. – Vоl. 62. – 1950. – P. 115-16. 438. Sur J.H., Doster A.R., Christian J.S., et al. Porcine reproductive and respiratory syndrome virus replicates in testicular germ cells, alters spermatogenesis, and induces germ cell death by apoptosis. J Virology 1997; 71(12): 9170-9179. 439. Taintuteer D., Grobet L., Brouwerrs B., Bruyas J.F. et.al. A propos de trios observations cliniques // Revmed.vet. (Fr.) – 1995. –146. – 33. – Р. 189-193. 440. Tennant R.W., Ashby J. Classification according to chemical structure mutagenicity to Salmjmtlla and level carcinoginicity of a further 39 chemicalstested for carcinogenecity by the U.S / National Texicology Program // Jbid. 1991. Vol. 257. – № 3. – P.209-227. 441. Thomsen B., Horn P., Panitz F., Bendixen E., Petersen A.H., Holm L., Nielsen V.H., Agerholm J.S., Arnbjerg J., Bendixen C. A missense mutation in the bovine SLC35A3 gene, encoding a UDP-N- acetylglucosamine transporter, causes complex vertebral malformation. Genome Res 2006.16: 97–105. 442. Tomar N.S., Sharma K.C. Shukla S.N. Semen production in relation to the age of Holstein Friesian × Harina bulls. Indian Vet. J. 1985. 62: 499-501 443. Van Niekerk F.E. Van Niekerk C.H. The influence of experimentally induced copper deficiency on the fertility of rams. J South African Vet Assoc 1989; 60: 28-31. 444. Vogel F. Motulsky A.G. Human genetics. – B. ect.: Springer, 1979. – 700 p. 445. Vogler C.J., Saacke R.G., Bame J.H., DeJarnette J.M., McGilliard M.L. Effects of scrotal insulation on viability characteristics of cryopreserved bovine semen. Journal of Dairy Science, 1991. 74: 3827-3835. 243 446. Waites, G.M.H. Johnson A.D., Gomes W.R., VanDemark N.L. Temperature regulation and the testis. In: The Testis, Vol. 1, 1970. P. 241−265. Academic Press, New York, NY. 447. Williams W.W., Savage A. Observations on the seminal micropathology of bulls. Cornell Vet 1925; 15:353–75. 448. Wiltbank J.N., Parrish N.R. Pregnancy rates in cows and heifers bred to bulls selected for semen quality.Theriogenology 1986. 779–83. 449. Wouda W., Visser I.J., Borst G.H., Vos J.H., Zeeuwen A.A., Peperkamp, N.H. Developmental anomalies in aborted and stillborn calves in The Netherlands. Veterinary Record, 2000.147: 612-612. 450. Yanagimachi R., Woda Y.D., Fujimoto M., Nicolson G.L. The distribution of negative surface charges on mammalian spermatozoa. – Amer. J. Anat. Vol. 135. – 1972. – Р. 497-519. 451. Zamboni L. Sperm structure and its relevance to infertility. Arch Pathol Lab Med 1992;116:325–44. 452. Zaneveld L.J.D., Polakoki K.M., Schumacher G.F.B. The proteolytic enzyme systems of mammalian genital tract secretion and spermatozoa. – Proteases and Biol. Contr. Cold Spring Harbor. – 1975. – Р. 683-706. 453. http://www.krskstate.ru/agro/stat/0/id/11779 244 ПРИЛОЖЕНИЯ 245 Приложение А Спермопродукция быков с кариологическими нарушениями Кличка быка 1 Мороз Спринт Ходок Предлог Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Контур Монитор Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет получено семени, мл всего 2 176,33 114,00 377,00 346,00 253,33 64,05 Показатели брак средняя сред. нативного конц. количество объѐм семени, % млрд./мл садок эякулята 4 5 6 7 быки со структурными нарушениями кариотипа 23,00 12,64 1,18 62,33 2,97 17,00 14,91 1,20 37,00 3,08 36,00 10,46 1,10 100,75 3,66 62,00 18,16 1,22 86,00 4,05 34,50 14,04 1,17 71,52 3,44 9,99 1,65 0,03 13,96 0,25 .брак семени. мл 3 128,09 263,00 114,00 377,00 1013,33 4,00 19,97 45,00 17,00 62,00 138,00 4,00 3,29 7,71 10,46 18,16 56,17 4,00 76,00 64,00 70,00 6,00 14,00 10,00 12,00 2,00 18,42 15,63 17,02 1,40 8,49 12,00 64,00 76,00 140,00 2,00 2,83 4,00 10,00 14,00 24,00 2,00 1,98 2,80 15,63 18,42 34,05 2,00 0,05 27,93 0,12 63,75 1,10 37,00 1,22 100,75 4,69 286,08 4,00 4,00 быки с анеуплоидией 0,80 27,00 1,06 25,50 0,93 26,25 0,13 0,75 0,18 0,26 0,80 1,06 1,86 2,00 1,06 1,50 25,50 27,00 52,50 2,00 заморожено доз, всего 8 4574,33 2215,00 9441,50 из них из них отбраковано, отбраковано, доз % 9 10 5410,28 2127,57 0,00 310,00 246,67 422,50 244,79 89,33 0,00 14,00 3,24 3,43 5,17 3,05 0,51 1,08 2,97 4,05 13,77 4,00 3685,06 7226,50 2215,00 9441,50 16230,83 3,00 178,66 422,50 0,00 422,50 979,17 4,00 6,09 14,00 0,00 14,00 20,66 4,00 2,81 2,56 2,68 0,13 940,00 1060,00 1000,00 60,00 100,00 0,00 50,00 50,00 10,64 0,00 5,32 5,32 0,18 0,26 2,56 2,81 5,37 2,00 84,85 120,00 940,00 1060,00 2000,00 2,00 70,71 100,00 0,00 100,00 100,00 2,00 7,52 10,64 0,00 10,64 10,64 2,00 246 1 2 Музыкант Хавбек Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 331,67 149,67 240,67 91,00 4 5 6 7 быки с анеуплоидией и структурными нарушениями 90,67 25,05 0,96 81,33 3,77 102,67 63,83 1,32 40,00 3,77 96,67 44,44 1,14 60,67 3,77 6,00 19,39 0,18 20,67 0,00 128,69 182,00 149,67 331,67 481,33 2,00 8,49 12,00 90,67 102,67 193,33 2,00 Рокот Глянец Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 261,00 252,67 256,83 4,17 94,83 79,00 86,92 7,92 Кент Среднее 444,75 444,75 5,89 8,33 252,67 261,00 513,67 2,00 3 27,42 0,25 29,23 38,78 0,36 41,33 25,05 0,96 40,00 63,83 1,32 81,33 88,88 2,29 121,33 2,00 2,00 2,00 быки с анеуплоидией и полиплоидией 37,87 0,98 68,00 34,32 1,06 80,33 36,10 1,02 74,17 1,77 0,04 6,17 8 Окончание приложения 9 10 5505,00 1510,00 3507,50 1997,50 110,00 200,00 155,00 45,00 0,61 13,33 6,97 6,36 0,00 0,01 3,77 3,77 7,54 2,00 2824,89 3995,00 1510,00 5505,00 7015,00 2,00 63,64 90,00 110,00 200,00 310,00 2,00 8,99 12,72 0,61 13,33 13,95 2,00 3,81 3,12 3,47 0,34 4337,17 4451,67 4394,42 57,25 145,00 33,33 89,17 55,83 2,45 1,47 1,96 0,49 80,96 114,50 4337,17 4451,67 8788,83 2,00 78,96 111,67 33,33 145,00 178,33 2,00 0,69 0,98 1,47 2,45 3,91 2,00 9653,50 9653,50 193,33 193,33 1,16 1,16 11,20 2,51 0,05 8,72 0,48 15,83 3,55 0,07 12,33 0,68 79,00 34,32 0,98 68,00 3,12 94,83 37,87 1,06 80,33 3,81 173,83 72,19 2,04 148,33 6,93 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 быки с анеплоидией+ полиплоидией+структурными нарушениями 138,50 39,22 1,22 98,25 4,12 138,50 39,22 1,22 98,25 4,12 247 Приложение Б Данные по мѐртворождениям и абортам крупного рогатого скота в ФГУП «Курагинское» Осеменено Осеменено АбортироМѐртворожденных повторно валось Кличка быка первично гол. гол. % гол. % гол. % 1 2 3 4 5 6 7 8 1996 год 459 137 77,0 10 90,9 16 48,5 Висмут Умелый 245 28 15,7 0 0 0 0 Грозовой 0 0 0 0 0 1 3,0 Подъѐм 50 8 4,5 0 0 0 0 Вулкан 0 0 0 0 0 2 6,1 Мамонт 114 0 0 0 0 3 9,1 Другие быки 36 5 2,8 1 9,9 11 33,3 904 178 100 11 100 33 100 ВСЕГО 1997 год Фотон 144 38 19,7 0 0 0 0 Нежный 226 41 21,1 0 0 0 0 Умелый 48 21 10,8 0 0 0 0 Висмут 237 23 11,8 0 0 9 69,2 Мамонт 0 0 0 0 0 1 7,7 Другие быки 300 71 36,6 15 100 3 23,1 958 194 100 15 100 13 100 ВСЕГО 1998 год Фотон 191 39 14,6 1 7,1 6 20,7 Нежный 367 58 21,8 0 0 0 0 Умелый 31 22 8,2 1 7,1 6 20,7 Пунш 9 7 2,6 4 28,6 0 0 Висмут 229 68 25,5 6 43,0 8 27,6 Мамонт 11 0 0 2 14,2 4 13,8 Другие быки 257 73 27,3 0 0 5 17,2 1095 267 100 14 100 29 100 ВСЕГО 1999 год Нежный 298 76 24,8 6 43,0 12 42,8 Фотон 101 29 9,5 1 7,1 3 10,7 Мускат 61 12 3,9 3 21,5 3 10,7 Висмут 0 0 0 1 7,1 2 7,1 Тагил 129 36 11,8 1 7,1 0 0 Ратник 70 28 9,1 1 7,1 0 0 Кувшинчик 68 17 5,6 0 0 0 0 248 1 2 Радий Венок Другие быки ВСЕГО 21 25 149 922 Ратник Радий Тагил Фотон Нежный Кувшинчик Венок Висмут Взлѐт Ватин Родной Ритм Другие быки ВСЕГО 88 0 495 0 0 0 0 0 85 24 85 92 80 949 ВСЕГО 976 ВСЕГО 1438 ВСЕГО 1101 Продолжение приложения Б 3 4 5 6 18 59,0 0 0 9 2,9 1 7,1 81 26,5 0 0 306 100 14 100 2000 год 28 11,8 1 7,14 0 0 0 0 80 34,0 7 50,0 13 5,5 1 7,14 0 0 0 0 0 0 1 7,14 0 0 2 14,3 0 0 0 0 26 11,0 1 7,14 10 4,2 0 0 35 14,8 0 0 16 6,8 0 0 28 1,9 1 7,14 236 100 14 100 2001 год 676 69,2 1 0,1 2002 год 220 15,3 1 0,07 2003 год 621 56,4 11 1 ВСЕГО 975 341 ВСЕГО 963 415 ВСЕГО 1035 560 ВСЕГО 1005 777 ВСЕГО 1006 510 2004 год 35,4 6 2005 год 43,1 10 2006 год 54,1 2 2007 год 77,3 5 2008 год 50,7 1 711 2009 год 64,5 3 ВСЕГО 1102 7 8 0 0 8 28 0 0 28,7 100 8 0 20 8 9 4 1 0 0 2 0 0 4 56 14,3 0 35,7 14,3 16,1 7,1 1,8 0 0 3,6 0 0 7,1 100 40 4,1 39 2,71 38 3,45 0,62 13 1,33 1,04 31 3,22 0,19 24 2,32 0,5 32 3,18 0,1 17 1,69 0,27 23 2,09 249 1 ВСЕГО ВСЕГО ВСЕГО 2 720 793 805 Окончание приложения Б 3 4 5 6 2010 год Нет данн ых Нет данн ых Нет данн ых 7 8 21 2,6 72 8,8 2011 год 29 3,2 85 9,37 2012 год 14 1,58 68 7,67 250 Приложение В Лейкограмма быков-производителей Кличка быка 1 Вагон Винтаж Диксон Меч Напев Барс Букет Ветер Волан Вопрос Восторг Выход Герой Дастинг Денди День Джаз Дивизион Динар Дисконт Дисней Дождь Допинг Допрос Допуск Дриблинг Кол-во клеток 2 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Лимфо циты 3 Базо филы 4 69 58 51 60 47 51 65 53 40 60 50 48 25 67 55 64 47 64 28 63 60 53 62 42 63 47 Моно циты 5 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 Эозино филы 6 3 3 6 3 7 2 4 2 0 6 2 7 0 3 0 6 7 6 6 4 1 4 5 5 5 7 4 1 15 3 4 8 2 10 3 7 10 6 0 4 7 4 4 3 0 14 6 6 3 3 8 4 Нейтрофилы сегмен палочко тоядерные ядерные 7 8 10 30 15 17 23 19 12 21 27 17 21 27 39 16 24 16 23 9 27 15 27 21 26 30 14 23 7 4 12 8 12 8 14 9 21 10 9 9 27 10 6 3 12 12 30 4 6 16 4 13 9 12 юные 9 1 3 0 1 2 7 0 0 6 0 3 1 5 0 3 2 2 1 6 0 0 0 0 1 1 2 Метам иелоцит 10 не определена 11 0 0 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 1 1 8 5 4 2 4 0 0 4 2 1 0 4 5 5 5 3 0 0 0 0 5 0 5 251 1 Жасмин Жемчуг Жетон Идеал Канат Канзас Климат Напев Скиф Спрайт Тибет Тонус Турист Турнир Узор Успех Шаман Штык Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) 2 3 Окончание приложения В 4 5 6 1 4 2 1 3 6 0 4 9 0 5 3 0 12 3 0 0 6 1 6 5 3 4 5 1 4 2 0 3 4 0 4 14 1 2 10 0 12 3 0 0 4 0 5 3 1 4 2 0 3 4 0 3 3 0,34 4,14 5,16 7 8 9 12 12 16 26 14 24 19 19 12 16 15 21 14 19 26 12 16 18 19,55 14 12 5 4 9 9 12 6 14 10 4 9 9 15 4 14 10 15 10,50 0 5 1 0 1 0 0 1 0 0 0 3 1 1 0 0 0 0 1,36 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0,16 2 3 2 0 5 0 2 5 2 0 0 4 5 4 0 2 0 7 2,57 0,53 0,96 0,84 0,28 0,10 0,35 2,66 0,00 12,00 182,00 44,00 3,52 0,00 15,00 227,00 44,00 6,38 9,00 39,00 860,00 44,00 5,60 3,00 30,00 462,00 44,00 1,88 0,00 7,00 60,00 44,00 0,64 0,00 3,00 7,00 44,00 2,31 0,00 8,00 113,00 44,00 0,81 1,07 1,94 1,70 0,57 0,20 0,70 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100,00 65 57 63 62 56 61 55 57 65 67 63 50 56 57 62 65 67 54 56,23 0,00 1,46 0,09 0,40 0,00 100,00 100,00 4400,00 44,00 9,66 25,00 69,00 2474,00 44,00 0,61 0,00 3,00 15,00 44,00 0,00 2,94 0,18 10 11 252 Приложение Г Биохимические исследование крови быков по данным КГКУ «Крайветлаборатория» Кличка быка 1 Вопрос Рейтинг Жетон Жасмин Жемчуг Ветер Шаман Скиф Винтаж Тонус Барс Восторг Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) Вопрос Рейтинг Жетон Жасмин Ветер Шаман Скиф Винтаж Тонус Барс Восторг Кальций ммоль/л 2.1-3.6 Фосфор ммоль/л 1.4-2.5 Общий белок 62-86 2 3 чѐрно-пѐстрая порода Весенний сезон 3,27 2,78 3,55 2,44 3,14 2,28 3,19 2,12 3,79 2,4 2,48 2,09 2,54 2,06 2,26 1,66 2,79 2,14 2,99 2,6 2,02 1,81 2,92 2,96 2,91 2,27 0,150 0,10 0,52 0,38 0,27 0,14 2,02 1,66 3,79 2,96 34,94 27,34 12 12 4 Щелочной резерв 46-66 Каротин 0.4-1 5 6 71,9 77,8 92,7 82,3 94,8 79,8 67,8 76 76,1 76,6 83,9 83,2 80,24 2,25 7,81 61,13 67,8 94,8 962,9 12 45 43,9 37,6 46,6 35,8 49,3 13 46 47,5 49,3 36,7 43 41,147 2,862 10,025 100,5106 13 49,3 493,7 12 0,33 0,24 4,96 чѐрно-пѐстрая порода Осенний сезон 2,5 2,4 73,8 2,14 2,43 104,2 2,84 2,21 99,9 2,26 1,96 84,8 3,52 2,3 80,9 2,82 2,01 87,1 2,08 2,63 80,8 2,69 1,76 96,1 2,58 2,68 98,3 2,98 2,43 85,9 2,93 2,66 100,6 6,3618 0,036 45,7 43,9 41,2 0,09 0,11 0,1 0,1 0,12 0,14 0,09 0,12 0,14 0,12 0,12 45,7 44,8 45,7 44,8 44,8 47,5 45,7 0,17 0,19 0,25 0,36 0,16 0,28 0,24 0,26 0,29 0,26 0,25 0,19 0,241 0,016 0,057 0,0032 0,16 0,36 2,9 12 253 Продолжение приложения Г 1 2 3 4 Среднее 2,667273 2,315455 90,21818 Стандартная ошибка 0,126922 0,091625 3,014716 Стандартное отклонение 0,420953 0,303887 9,998682 Интервал 1,44 0,92 30,4 Минимум 2,08 1,76 73,8 Максимум 3,52 2,68 104,2 Сумма 29,34 25,47 992,4 Счет 11 11 11 Уровень надежности(95,0%) 0,2828 0,204154 6,717206 Красно-пѐстрая порода Весенний сезон Допуск 2,16 2,2 79,5 День 2,25 2 82,6 Идеал 3,36 2,25 86,8 Меч 2,68 2,45 82,7 Штык 3,02 2,62 84,3 Импульс 2,02 2,09 71,8 Герой 1,12 2,12 63,7 Климат 3,76 2,23 79,8 Диксон 3,86 2,62 77,5 Букет 3,2 1,74 69,9 Дождь 3,88 2,54 86,3 Дымок 3,24 2,19 81,8 Денди 2,26 2,19 82,8 Вагон 2,68 2,27 87,1 Турист 2,77 2,28 89,5 Волан 1,66 2,23 71,2 Выход 2,52 2,45 86,3 Турнир 2,98 2,53 84,2 Тур 2,94 1,92 74,1 Тибет 2,54 2,24 95,10 Джаз 2,22 2,30 71,30 Депозит 2,47 2,62 69,30 дриблинг 2,26 2,47 76,30 Дисконт 2,22 2,98 77,90 Дастинг 2,64 2,54 80,40 Допинг 3,05 2,80 75,70 Спрайт 2,67 2,12 68,40 Диктант 2,64 2,23 81,30 Джокер 2,28 1,78 68,80 5 6 44,98 0,113636 0,51614 0,00527 1,632176 0,017477 6,3 0,05 41,2 0,09 47,5 0,14 449,8 1,25 10 11 1,167589 0,011741 48,4 41,2 46,6 45,7 44,8 47,5 43,9 41,2 43,9 43,9 43,9 39,9 41,7 45,2 47 40,8 46,1 47 42,1 49,30 44,80 47,50 48,40 44,80 43,90 46,60 44,80 43,90 42,10 0,2 0,24 0,18 0,2 0,2 0,26 0,22 0,2 0,24 0,2 0,16 0,17 0,15 0,26 0,2 0,22 0,26 0,27 0,17 0,28 0,17 0,16 0,20 0,15 0,21 0,22 0,31 0,24 0,11 254 Продолжение приложения Г 1 2 3 4 Узор 1,91 2,28 79,60 Добрый 1,95 2,39 76,60 Дивизион 2,65 1,19 74,90 Успех 2,57 2,16 82,50 Дисней 2,62 2,43 65,40 Среднее 2,619118 2,278059 78,39412 Стандартная ошибка 0,10287 0,055828 1,255064 Стандартное отклонение 0,59983 0,325533 7,318219 Дисперсия выборки 0,359796 0,105972 53,55633 Интервал 2,76 1,786 31,4 Минимум 1,12 1,194 63,7 Максимум 3,88 2,98 95,1 Сумма 89,05 77,454 2665,4 Счет 34 34 34 Уровень надежности(95,0%) 0,209291 0,113584 2,553447 Красно-пѐстрая порода Осенний сезон Букет 2,82 2,17 97,6 Вагон 3,07 2,41 90,9 Волан 3,62 2,40 102,5 Выход 2,08 1,87 111 Герой 2,63 2,26 86,7 Дастинг 3,18 2,30 97,70 Денди 2,32 2,44 95,2 День 3,35 2,05 91,3 Депозит 2,53 2,25 88,90 Джаз 2,83 2,33 88,40 Джокер 2,92 2,50 96,00 Дивизион 2,70 2,64 81,60 Диксон 3,71 2,32 93,30 Дисконт 2,31 2,56 82,50 Дисней 2,12 2,07 94,00 Добрый 2,69 2,69 88,20 Дождь 2,07 2,3 110,5 Допинг 2,75 2,38 74,20 Допуск 3,27 2,07 85,60 дриблинг 3,71 2,57 92,10 Дымок 3,01 2,32 100,5 Импульс 2,63 2,50 99,8 Климат 2,12 1,89 94,1 5 44,80 48,40 47,50 43,90 44,80 44,89118 0,417239 2,432902 5,919011 9,4 39,9 49,3 1526,3 34 6 0,21 0,29 0,28 0,21 0,23 0,213824 0,007831 0,045661 0,002085 0,2 0,11 0,31 7,27 34 0,84888 0,015932 41,2 47,5 43,9 44 47,5 46,00 45 47,5 43,00 46,60 46,00 45,70 47,50 43,90 44,00 47,50 42,1 46,60 46,60 46,60 47,5 46,00 47,5 0,12 0,08 0,13 0,11 0,17 0,11 0,13 0,1 0,07 0,12 0,12 0,06 0,12 0,10 0,09 0,08 0,09 0,14 0,07 0,11 0,12 0,11 0,11 255 Продолжение приложения Г 1 2 3 4 5 Спрайт 2,37 2,13 79,80 46,00 Тибет 3,55 2,06 81,40 44,80 Турист 3,81 2,3 65,4 45,7 Узор 2,55 2,10 86,40 45,00 Успех 2,55 2,54 80,10 44,90 Штык 2,22 2,38 90,3 44,8 Среднее 2,81 2,30 90,55 45,55 Стандартная ошибка 0,10 0,04 1,84 0,32 Стандартное отклонение 0,53 0,21 9,92 1,71 Дисперсия выборки 0,28 0,05 98,34 2,91 Интервал 1,74 0,82 45,60 6,30 Минимум 2,07 1,87 65,40 41,20 Максимум 3,81 2,69 111,00 47,50 Сумма 81,49 66,80 2626,00 1320,90 Счет 29,00 29,00 29,00 29,00 Уровень надежности(95,0%) 0,20 0,08 3,77 0,65 Голштинская порода чѐрно-пѐстрая популяция Весенний сезон Канат 2,4 2,11 87,2 40,8 Канзас 2,48 2,4 86,3 39,9 Среднее 2,44 2,255 86,75 40,35 Стандартная ошибка 0,04 0,145 0,45 0,45 Стандартное отклонение 0,056 0,2051 0,63 0,63 Дисперсия выборки 0,0032 0,04205 0,405 0,405 Интервал 0,08 0,29 0,9 0,9 Минимум 2,4 2,11 86,3 39,9 Максимум 2,48 2,4 87,2 40,8 Сумма 4,88 4,51 173,5 80,7 Счет 2 2 2 2 Уровень надежности(95,0%) 0,5082 1,84 5,71 5,71 Голштинская порода чѐрно-пѐстрая популяция Осенний сезон Канат 2,1 2,11 96,5 45 Канзас 2,8 2,37 104,5 44,8 Среднее 2,45 2,24 100,5 44,9 Стандартная ошибка 0,35 0,13 4 0,1 Стандартное отклонение 0,49 0,18 5,656 0,141 Дисперсия выборки 0,245 0,0338 32 0,02 Интервал 0,7 0,26 8 0,2 6 0,23 0,11 0,14 0,12 0,07 0,11 0,11 0,01 0,03 0,00 0,17 0,06 0,23 3,24 29,00 0,01 0,21 0,2 0,205 0,005 0,007 5E-05 0,01 0,2 0,21 0,41 2 0,063 0,1 0,11 0,105 0,005 0,007 0,00005 0,01 256 1 Продолжение приложения Г 2 3 4 2,1 2,11 96,5 2,8 2,37 104,5 4,9 4,48 201 2 2 2 5 Минимум 44,8 Максимум 45 Сумма 89,8 Счет 2 Уровень надежности(95,0%) 4,447 1,651 50,82 1,270 Голштинская порода красно-пѐстрая популяция Весенний сезон Динар 1,85 1,94 80 37,2 Допрос 2,9 1,93 74,3 43,9 Среднее 2,375 1,935 77,15 40,55 Стандартная ошибка 0,525 0,005 2,85 3,35 Стандартное отклонение 0,742 0,007 4,030 4,737 Дисперсия выборки 0,55125 5E-05 16,245 22,445 Интервал 1,05 0,01 5,7 6,7 Минимум 1,85 1,93 74,3 37,2 Максимум 2,9 1,94 80 43,9 Сумма 4,75 3,87 154,3 81,1 Счет 2 2 2 2 Уровень надежности(95,0%) 6,67 0,063 36,21 42,56 Голштинская порода красно-пѐстрая популяция Осенний сезон Динар 3,06 2,39 98,7 47,5 Симментальская порода весенний сезон Напев 3,06 2,25 92,1 48,4 Дирол 2,91 2,16 64,9 47,5 Договор 2,46 1,81 84 45,7 Среднее 2,81 2,073 80,333 47,2 Стандартная ошибка 0,180 0,134 8,063 0,793 Стандартное отклонение 0,31 0,23 13,96 1,374 Дисперсия выборки 0,097 0,054 195,043 1,89 Интервал 0,6 0,44 27,2 2,7 Минимум 2,46 1,81 64,9 45,7 Максимум 3,06 2,25 92,1 48,4 Сумма 8,43 6,22 241 141,6 Счет 3 3 3 3 Уровень надежности(95,0%) 0,775 0,577 34,69 3,415 Симментальская порода осенний сезон Напев 3,77 2,08 105,6 46,6 6 0,1 0,11 0,21 2 0,063 0,22 0,17 0,195 0,025 0,035 0,00125 0,05 0,17 0,22 0,39 2 0,317 0,1 0,28 0,36 0,25 0,296 0,032 0,056 0,003 0,11 0,25 0,36 0,89 3 0,141 0,08 257 Окончание приложения Г 1 2 3 4 Дирол 2,08 1,96 79,3 Договор 2,49 2,32 83,5 Среднее 2,78 2,12 89,46 Стандартная ошибка 0,508 0,105 8,157 Стандартное отклонение 0,881 0,183 14,128 Дисперсия выборки 0,77 0,03 199,62 Интервал 1,69 0,36 26,3 Минимум 2,08 1,96 79,3 Максимум 3,77 2,32 105,6 Сумма 8,34 6,36 268,4 Счет 3 3 3 Уровень надежности(95,0%) 2,18 0,455 35,09 5 45,7 42,1 44,8 1,374 2,381 5,67 4,5 42,1 46,6 134,4 3 6 0,12 0,08 0,093 0,0133 0,0234 0,00053 0,04 0,08 0,12 0,28 3 5,915 0,057 258 Приложение Д Показатели крови быков с высокой долей отбракованного нативного семени (по данным ИЭВСиДВ) Кличка быка вит А вит Е Показатели альфабетагаммаальбумин глобулин глобулин глобулин норма 30-90 мкг% Жетон Штык Барс Канат Джаз Джокер Меч Климат Волан Допрос Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) 42,73 42,7 42,63 42,7 42,71 42,6 42,7 42,73 42,77 42,6 42,687 0,130,14 30-50 мкг% % Сыворотка крови 0,2 36,71 0,2 37,51 0,21 39,3 0,19 37,9 0,2 37,46 0,21 39,06 0,21 39,11 0,19 41,13 0,21 37,2 0,24 37,21 0,206 38,259 0,0186 0,0045 0,057 0,0033 42,6 42,77 426,87 10 0,0413 12---20 % 25-40 % 10—16 % 16,5 16,04 16,05 16,07 15,42 16,96 16,74 14,67 16,99 16,81 16,225 27,27 27,3 24,51 26,57 28,25 25,33 26,1 29,01 28,84 23,18 26,636 19,52 19,16 20,14 19,47 18,87 18,65 18,05 15,19 16,97 22,8 18,882 0,4300 0,234 0,600 0,630 0,014 0,00020 0,19 0,24 2,06 10 1,3598 1,8490 36,71 41,13 382,59 10 0,742 0,551 14,67 16,99 162,25 10 1,897 3,6002 23,18 29,01 266,36 10 1,99 3,977 15,19 22,8 188,82 10 0,0108 0,9727 0,531 1,3573 1,426 259 Приложение Е Показатели крови быков с высокой долей отбракованного нативного семени (по данным ИЭВСиДВ) Кличка быка норма Показатели липиды холестерин 273303 50-170 мг% мг% натрий калий 0,51,7-2,5 1,3 г/кг г/кг кровь 1,36 1,32 1,34 1,09 1,38 0,91 1,48 1,15 1,47 0,73 1,64 1,90 1,49 1,20 1,32 1,20 1,43 1,11 1,28 0,85 Жетон Штык Барс Канат Джаз Джокер Меч Климат Волан Допрос 270,05 257,04 261,10 253,91 261,97 300,29 267,93 257,97 236,03 256,85 193,44 178,65 169,45 190,67 170,60 161,32 178,41 170,65 194,80 130,63 Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) 262,31 173,86 1,42 5,14 5,98 16,24 магний 0,020,03 г/кг железо 316495 мг/кг марганец 0,15-0,25 мг/кг медь 0,91,1 мг/кг цинк 1,42,8 мг/кг 0,04 0,04 0,04 0,04 0,03 0,04 0,04 0,04 0,03 0,04 375,12 362,11 353,86 370,66 302,45 389,92 377,92 379,95 322,07 335,87 0,13 0,14 0,14 0,14 0,15 0,08 0,13 0,13 0,14 0,15 1,01 0,94 0,89 1,02 0,69 1,41 1,03 1,00 0,92 0,88 1,27 1,57 1,38 1,63 0,34 2,70 2,02 1,64 1,20 0,64 1,15 0,04 356,99 0,13 0,98 1,44 0,03 0,10 0,00 8,97 0,01 0,06 0,21 18,90 0,11 0,32 0,00 28,37 0,02 0,18 0,66 263,69 236,03 300,29 2623,14 10,00 357,17 130,63 194,80 1738,62 10,00 0,01 1,28 1,64 14,19 10,00 0,10 0,73 1,90 11,46 10,00 0,00 0,03 0,04 0,38 10,00 804,58 302,45 389,92 3569,93 10,00 0,00 0,08 0,15 1,33 10,00 0,03 0,69 1,41 9,79 10,00 0,44 0,34 2,70 14,39 10,00 11,62 13,52 0,08 0,23 0,00 20,29 0,01 0,13 0,47 260 Приложение Ж Показатели крови быков с высокой долей отбракованного нативного семени (по данным ИЭВСиДВ) Кличка быка норма Жетон Штык Барс Канат Джаз Джокер Меч Климат Волан Допрос Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) аспарагин 0,80 % треонин 0,25 % глутамин 1,1-1,7 % пролин 0,55 % 0,74 0,75 0,75 0,76 0,75 0,72 0,74 0,74 0,75 0,76 0,75 0,00 0,01 0,00 0,72 0,76 7,46 10,00 0,28 0,27 0,26 0,27 0,26 0,30 0,27 0,27 0,27 0,26 0,27 0,00 0,01 0,00 0,26 0,30 2,71 10,00 1,76 1,77 1,77 1,81 1,66 1,81 1,76 1,79 1,76 1,74 1,76 0,01 0,04 0,00 1,66 1,81 17,63 10,00 0,13 0,12 0,01 0,49 0,00 1,15 0,46 0,41 0,12 0,08 0,30 0,11 0,35 0,12 0,00 1,15 2,97 10,00 глицин 0,25 % кровь 0,24 0,24 0,24 0,23 0,25 0,22 0,24 0,23 0,24 0,24 0,24 0,00 0,01 0,00 0,22 0,25 2,37 10,00 0,01 0,01 0,03 0,25 0,01 Показатели аланин валин 0,35 0,51 % % изолейцин 0,28 % лейцин 0,76 % тирозин 0,14 % гистидин 0,31 % лизин 0,42 % 0,31 0,32 0,30 0,31 0,29 0,34 0,30 0,31 0,32 0,30 0,31 0,00 0,01 0,00 0,29 0,34 3,10 10,00 0,61 0,61 0,60 0,60 0,50 0,60 0,60 0,61 0,59 0,60 0,59 0,01 0,03 0,00 0,50 0,61 5,92 10,00 0,24 0,23 0,23 0,24 0,20 0,25 0,25 0,25 0,24 0,24 0,24 0,00 0,01 0,00 0,20 0,25 2,37 10,00 0,51 0,55 0,54 0,55 0,53 0,50 0,54 0,50 0,55 0,57 0,53 0,01 0,02 0,00 0,50 0,57 5,34 10,00 0,12 0,10 0,10 0,14 0,13 0,17 0,14 0,12 0,13 0,10 0,13 0,01 0,02 0,00 0,10 0,17 1,25 10,00 0,24 0,25 0,25 0,26 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,25 0,25 0,00 0,01 0,00 0,23 0,26 2,48 10,00 0,83 0,79 0,81 0,79 0,79 0,80 0,78 0,83 0,83 0,80 0,81 0,01 0,02 0,00 0,78 0,83 8,05 10,00 0,01 0,02 0,01 0,02 0,02 0,01 0,01 261 Приложение И Причины выбраковки эякулятов Сезон 1 Причина выбраковки 2 ЗИМА некроспермия ВСЕГО олигоспермия ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия зимний аспермия сезон другие причины ВСЕГО ВЕСНА некроспермия Количество эякулятов штук % 3 4 5 зимний сезон 1997 г 1 65 63,1 2 32 31,1 3 6 5,8 103 100 1 10 71,4 2 4 28,6 3 0 0 14 100 1 8 38,1 2 10 47,6 3 3 14,3 21 100 1 8 72,7 2 1 9,1 3 2 18,2 11 100 103 69,1 14 9,4 21 14,1 11 7,4 Номер эякулята 149 весенний сезон 1997 г 1 2 3 ВСЕГО олигоспермия ВСЕГО 1 2 3 77 50 2 129 6 1 0 7 Количество выбракованной спермы, мл 6 81,5 56 10 147,5 19 7 0 26 14 19 7 40 27 3 7 37 147,5 26 40 37 100 250,5 59,7 38,8 1,5 100 85,7 14,3 0 100 160,5 97 4 261,5 9 1 0 10 262 2 аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия весенни аспермия й сезон другие причины ВСЕГО Продолжение приложения И 3 4 5 1 5 62,5 2 3 37,5 3 0 0 8 100 1 1 20,0 2 1 20,0 3 3 60,0 5 100 129 86,6 7 4,7 8 5,4 5 3,3 6 9 10 0 19 3 2 7 12 261,5 10 19 12 149 100 302,5 69 32 12 113 7 5 0 12 22 26 12 60 61,1 28,3 10,6 100 58,3 41,7 0 100 36,7 43,3 20,0 100 156 69 37 262 10 7 0 17 58 68 34 160 4 0 1 5 113 12 60 5 80,0 0 20,0 100 59,5 6,3 31,6 2,6 13 0 5 18 262 17 160 18 190 100 457 летний сезон 1997 г ЛЕТО некроспермия 1 2 3 ВСЕГО олигоспермия 1 2 3 ВСЕГО аспермия 1 2 3 ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия летний аспермия сезон другие причины ВСЕГО 1 2 3 263 1 2 Продолжение приложения И 3 4 5 осенний сезон 1997 г ОСЕНЬ некроспермия 1 2 3 ВСЕГО олигоспермия 1 2 3 ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия осенний аспермия сезон другие причины ВСЕГО ЗИМА некроспермия 1 2 3 1 2 3 ВСЕГО олигоспермия 1 2 3 ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины 69 39 10 118 9 4 1 14 50 43 7 100 5 3 0 58,4 33,1 8,5 100 64,3 28,6 7,1 100 50,0 43,0 7,0 100 62,5 37,5 0 155 93 21 269 11 6 2 19 96 78 16 190 18 6 0 8 118 14 100 8 100 49,2 5,8 41,7 3,3 24 269 19 190 24 100 502 75,0 20,5 4,5 100 100 0 0 100 49,0 29,8 21,2 100 71,4 14,3 75 19 6 100 1 0 0 1 131,5 96 88 315,5 20 4 240 зимний сезон 1998 г 1 2 3 1 2 3 1 2 6 33 9 2 44 1 0 0 1 51 31 22 104 5 1 264 3 3 ВСЕГО некроспермия олигоспермия Итого за зимний аспермия сезон другие причины ВСЕГО ВЕСНА некроспермия ВСЕГО олигоспермия ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия весенни аспермия й сезон другие причины ВСЕГО ЛЕТО некроспермия ВСЕГО олигоспермия Продолжение приложения И 4 5 6 1 14,3 2 7 100 26 44 28,2 100 1 0,6 1 104 66,7 315,5 7 4,5 26 100 442,5 67,7 27,4 4,9 100 100 0 0 100 48,4 32,4 19,2 100 0 100 0 100 38,9 0,5 59,2 1,4 170,5 73,5 14 258 2 0 0 2 144,5 137,5 99 381 0 15 0 15 258 2 381 15 100 656 77,2 21,3 1,5 100 0 0 0 169 43 1,5 213,5 0 0 0 156 весенний сезон 1998 г 1 55 2 22 3 4 81 1 1 2 0 3 0 1 1 61 2 40 3 24 125 1 0 2 3 3 0 3 81 1 125 3 210 летний сезон 1998 г 1 52 2 15 3 1 68 1 0 2 0 3 0 265 2 ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия летний аспермия сезон другие причины ВСЕГО ОСЕНЬ некроспермия Продолжение приложения И 3 4 5 0 0 1 71 49,3 2 49 34,6 3 23 16,1 143 100 1 4 57,4 2 2 28,6 3 1 14,3 7 100 68 31,2 0 0 143 65,6 7 3,2 6 0 242,5 158 88,5 489 6 4 2 12 213,5 0 489 12 218 100 714,5 70,3 25,0 4,7 112,3 53 13 64 100 178,3 2 0 0 2 67 56 44 167 4 0 0 4 64 2 167 4 100 0 0 100 40,1 33,5 26,3 100 100 0 0 100 27,0 0,8 70,5 1,7 3 0 0 3 188,5 227 200,7 616,2 14 0 0 14 178,3 3 616,2 14 237 100 811,5 осенний сезон 1998 г 1 45 2 16 3 3 ВСЕГО олигоспермия 1 2 3 ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия осенний аспермия сезон другие причины ВСЕГО 1 2 3 1 2 3 266 1 ЗИМА Продолжение приложения И 2 3 4 5 зимний сезон 1999 г 1 88 62,0 2 40 28,2 некроспермия 3 14 9,8 ВСЕГО 142 100 1 0 0 олигоспермия 2 0 0 3 1 100 ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины 1 2 3 1 2 3 ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия зимний аспермия сезон другие причины ВСЕГО ВЕСНА 6 278,1 141 8 427,1 0 0 1 1 100 1 24 28 26 78 1 1 1 3 142 1 78 3 30,8 35,9 33,3 100 33,3 33,3 33,3 100 63,4 0,5 34,8 1,3 80,5 147 128 355,5 4 2 9 15 427,1 1 355,5 15 224 весенний сезон 1999 г 1 60 2 16 некроспермия 3 14 ВСЕГО 90 1 0 олигоспермия 2 0 3 0 ВСЕГО 0 1 55 аспермия 2 32 3 27 100 798,6 66,7 17,8 15,5 100 0 0 0 0 48,2 28,1 23,7 216 57 58 331 0 0 0 0 186 127 122 ВСЕГО 114 100 435 2 66,7 11 другие 1 267 причины 3 2 3 ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия весенни аспермия й сезон другие причины ВСЕГО ЛЕТО некроспермия ВСЕГО олигоспермия ВСЕГО аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия летний аспермия сезон другие причины ВСЕГО ОСЕНЬ некроспермия ВСЕГО олигоспермия ВСЕГО Продолжение приложения И 4 5 6 1 33,3 3 0 0 0 3 100 14 90 43,5 331 0 0 0 114 55,1 435 3 1,4 14 207 летний сезон 1999 г 1 40 2 13 3 3 56 1 1 2 0 3 0 1 1 55 2 36 3 39 130 1 5 2 5 3 1 11 56 1 130 11 198 осенний сезон 1999 г 1 34 2 13 3 3 50 1 0 2 0 3 0 0 100 780 71,4 23,2 5,4 100 100 0 0 100 42,3 27,7 30,0 100 45,5 45,5 9,0 100 28,3 0,5 65,6 5,6 142 36 8 186 1 0 0 1 194 168 181 543 14 14 2 30 186 1 543 30 100 760 68,0 44,0 6,0 100 0 0 0 0 114 26 10 150 0 0 0 0 268 2 аспермия ВСЕГО другие причины ВСЕГО некроспермия Итого за олигоспермия осенний аспермия сезон другие причины ВСЕГО Окончание приложения И 3 4 5 1 55 47,0 2 36 30,8 3 26 22,2 117 100 1 2 50,0 2 1 25,0 3 1 25,0 4 100 50 29,2 0 0 117 68,4 4 2,3 6 197 137 98 432 10 0,5 7 17,5 150 0 432 17,5 171 599,5 100 269 Приложение К Выбраковка спермы в зависимости от номера эякулята Сезон Эякулят №1 Всего Выбраковано, получено, штук % штук Зима Весна Лето Осень Всего 633 554 687 746 2620 91 89 102 133 415 14,4 16,1 14,8 17,8 15,8 Зима Весна Лето Осень Всего 589 645 618 597 2449 90 117 127 118 452 15,3 18,1 20,5 19,8 18,4 Зима Весна Лето Осень Всего 461 559 478 395 1893 113 117 101 91 422 24,5 20,9 21,1 23,0 22,3 Эякулят №2 Всего Выбраковано, получено, штук штук 1997 год 522 47 296 55 583 63 565 89 1966 254 1998 год 481 41 546 65 498 66 535 72 2060 244 1999 году 416 69 504 49 420 54 342 50 1682 222 Эякулят №3 % Всего получено, штук Выбраковано, штук % 9,0 18,6 10,8 15,7 12,9 271 216 326 330 1143 11 5 25 18 59 4,1 2,3 7,7 5,4 5,2 8,5 11,9 13,2 13,5 11,8 268 296 281 354 1199 25 28 25 47 125 9,3 9,4 8,9 13,3 10,4 16,6 9,7 12,8 14,6 13,2 268 342 298 218 1126 42 41 43 30 156 15,7 12,0 14,4 13,8 13,8 270 Приложение Л Морфологические исследования спермы быков-производителей Линия М. Чифтейн Кличка быка 1 Веер Зоркий Треф Дарѐный Летун Ватин Вес Влажный Вихрь Родной Лимон Карат Севок Изумруд Владыка Поклонник Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Веер Зоркий Треф Дарѐный Летун Ватин Вес Влажный Вихрь Родной Лимон Карат Севок Изумруд Владыка Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (Зимний сезон. Нативное семя) 78,481 6,46 4,92 1,266 1,547 3,23 1,54 0,84 1,69 80,294 10,692 1,57 0,629 1,572 0 0,62 0,63 3,98 87,349 5,421 0,60 1,084 0,240 0,84 1,80 0,36 2,29 72,023 4,729 10,78 3,592 1,512 1,51 0,189 1,32 4,35 82,707 3,75 5,76 0 0 0,75 0 0 7,02 86 0,851 5,714 0,571 1,14 2,42 0,143 0,29 2,86 80,741 0 14,44 0 2,22 1,11 0 0 1,48 72,981 2,17 18,94 0 0 0,931 0 4,97 0 64,479 12,3 16,22 0 0 5,405 0 1,54 0 47,577 7,489 40,97 0 0 3,964 0 0 0 65,174 0 0 0 0 16,41 0 11,4 6,97 65,591 0 33,69 0 0 0,358 0 0 0,36 80,562 3,912 6,96 0 0,244 0 2,078 0 6,23 79,199 2,31 6,93 0,308 0,462 0,924 2,46 0,15 7,24 74,625 5,24 5,567 0,321 0,214 5,78 1,49 0,54 6,21 75,068 2,168 5,42 0 1,355 2,439 3,79 0,27 9,49 74,553 4,2238 11,16 0,486 0,657104 2,8816 0,884 1,4 3,76 2,5102 0,9212 2,9 0,231 0,190417 1,0083 10,041 3,6846 11,6 0,925 0,761667 4,0333 39,772 12,355 40,97 3,592 2,222222 16,418 47,577 0 0 0 0 0 87,349 12,355 40,97 3,592 2,222222 16,418 1192,9 67,581 178,5 7,772 10,51367 46,105 16 16 16 16 16 16 Зимний сезон, криоконсервированное семя 74,9 4,37 6,11 1,1 1,09 2,62 82,9 4,99 1,13 0 0 0 90,9 0 5,76 0 0 1,996 52,6 0 31,7 0 1,20 10,84 73,7 6,11 6,11 0 0 0 58,8 0 22,1 0 0 19,12 51,5 6,37 18,6 0,5 0 8,824 78,4 0,5 0 1,5 0 9,548 64 2,83 27,6 2,8 0 2,12 61,6 4,2 23,7 0 0 0 62,1 1,36 13,8 0,8 2,71 12,47 61,4 2,76 4,25 0,2 4,88 12,74 67,4 0 29 3,6 0 0 63,4 4,84 9,41 0 0 0 55,5 4,22 3,25 1 0,974 7,468 0,293 0,74 0,78 1,173 3,794 0 3,794 14,15 16 2,95 11,4 0 11,4 22,4 16 3,11 9,49 0 9,49 60,2 16 2,83 0,48 0 0 0 0 0,49 0 0 0 2,439 0,42 0 6,45 11,03 2,4 8,05 0,22 0,4 0 0 0 0 0 0 0,54 0 0 0 6,49 4,59 2,42 1,11 3,21 14,1 0 13,7 10,1 0,71 10,5 3,79 13,4 0 15,9 10,1 271 1 Поклонник Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Веер Зоркий Треф Дарѐный Летун Ватин Вес Влажный Вихрь Родной Лимон Карат Севок Изумруд Владыка Поклонник Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Веер Зоркий Треф Дарѐный Летун Ватин Вес Влажный Вихрь Родной 2 71,8 66,9 2,77 11,1 39,4 51,5 90,9 1071 16 88,24 82,79 85,37 73,08 86,77 82,24 89,28 69,25 69,58 68,41 82,86 80,68 82,42 87,17 80,95 68,27 79,83 Продолжение приложения Л 3 4 5 6 5,52 7,06 0 0 3 13,1 0,7 0,679 7 8 9 2,761 1,53 0 5,656 1,6062 1,13 10 11,3 7,18 0,3379 1,495 0,7616 0,62 1,43 2,37 10,7 1,1 1,3517 6,37 31,7 3,6 4,8832 0 0 0 0 6,37 31,7 3,6 4,8832 48,1 210 12 10,864 16 16 16 16 Весенний сезон. Нативное семя 2,19 1,37 1,23 0,2736 8,15 0,91 0 0 5,37 2,44 0 0 0,77 8,46 0,13 2,3077 0,34 3,95 0,34 0,5155 1,22 8,92 0,24 1,3788 0 2,14 0,39 1,1696 1,75 12,3 0 0 0,66 14,9 0 0,4376 3,86 13,9 0 2,7273 0,71 5,45 0,16 0,3949 0,89 8,59 0 1,61 4,22 6,21 1,99 0 2,55 4,45 0,32 0,2121 2,45 3,99 0,26 0 3,47 12,8 0 0,2667 2,41 6,92 0,32 0,7059 5,981 3,0465 2,49 19,12 11,039 8,05 0 0 0 19,12 11,039 8,05 90,5 25,7 18,1 16 16 16 5,71 15,9 0 15,9 115 16 0,59 2,68 0,3 1,231 0 0,488 4,744 1,546 1,703 2,729 2 4,814 2,045 1,343 3,936 0 1,166 3,861 2,4 2,125 1,1 0,9 2,8 1,5 0,9 0,2 0,4 0 0 0 0,2 0,2 1,1 0,3 0,6 2,9 0,8 1,4 3,6 0,8 0,1 0 0,2 0,4 4,8 0 0 0,2 0 0 0 0,1 0 0,7 3 3,6 2,8 8,8 5,7 3,9 3,5 10 9,6 9,1 8,6 4,1 4,1 3,8 7,7 9,9 6,1 0,384 0,2 0,4 0,7 7,535 2,18 4,62 0,54 0,874 1,536 21,01 8,15 14 1,99 2,7273 4,814 68,27 0 0,91 0 0 0 89,28 8,15 14,9 1,99 2,7273 4,814 1277 38,6 111 5,06 11,294 34,01 16 16 16 16 16 16 Весенний сезон. Криоконсервированное семя 54,2 8,15 1,81 1,1 1,26 25,18 62,4 6,07 11,7 0,5 1,69 14,32 75,1 2,36 6,3 0,3 2,62 11,81 75,4 5,18 9,71 0 0,97 6,796 71,8 6,81 9,29 0 0 0 70,1 1,41 6,27 1,1 2,35 9,404 73,5 1,17 4,23 0 0,93 13,15 68,2 1,18 9,71 0,9 1,47 4,118 77,8 0,51 1,02 0,5 2,37 5,932 81,3 0 0,35 0,3 1,04 2,269 0,9 2,9 0 2,9 13 16 1,4 4,8 0 4,8 12 16 2,8 7,2 2,8 10 98 16 2,35 0,72 0,26 0 0,92 0,94 4,69 2,35 3,38 3,14 1,09 0 0,26 0,32 0,62 1,1 0 0,88 0,17 1,57 4,89 2,67 1,05 1,62 10,5 7,37 2,35 11,2 8,31 9,95 1,884 0,54 1,15 0,14 0,2185 272 1 Лимон Карат Севок Изумруд Владыка Поклонник Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 2 62,9 63,6 82,4 79,3 69,7 65,2 70,8 Окончание приложения Л 3 4 5 6 0,38 6,81 0,4 1,32 2,72 2,95 0 2,49 1,39 1,86 0,5 2,01 4,89 1,79 0,2 2,61 3,11 2,14 0,8 0,97 3,94 14,8 0 0 3,08 5,67 0,4 1,50 7 22,87 19,75 4,48 3,1 3,107 2,121 9,276 8 1,13 2,61 0,46 2,44 6,21 3,03 2,16 9 0,19 0 0,31 0,49 3,3 0 0,64 10 3,97 5,9 6,66 5,22 10,7 10,9 6,45 1,95 0,63 1,09 0,1 0,21 1,962 0,42 0,21 0,88 7,81 28,2 54,2 82,4 1133 16 2,5 8,15 0 8,15 49,3 16 4,35 14,5 0,35 14,8 90,7 16 0,4 1,1 0 1,1 6,5 16 0,85 2,62 0 2,62 24,15 16 7,848 25,18 0 25,18 148,4 16 1,70 0,85 6,21 3,3 0 0 6,21 3,3 34,69 10,3 16 16 3,53 10,1 1,05 11,2 103 16 273 Приложение М Морфологические исследования спермы быков-производителей Линия Рф. Соверинг Кличка быка Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (Зимний сезон. Нативное семя) Верный 81,41 5,29 8,82 1,35 0 0 0 0 3,12 Визитѐр 90,81 0 5,10 0 4,08 0 0 0 0 Витраж 77,08 1,22 13,23 0,54 0,81 2,59 0,81 0,41 3,27 Волос 78,63 1,23 5,88 0 2,32 2,47 0 0,15 9,28 Восход 82,82 0,38 6,87 0 0 7,25 0 1,15 1,52 Гипс 91,96 0,25 4,52 0 0,25 1,50 0 0,25 1,25 Дуплет 66,33 3,31 16,58 1,99 6,46 3,81 0 1,33 0,16 Лекторий 94,51 2,14 1,90 0 0 0 0 0 1,43 Модист 89,02 2,62 1,90 0 0 0 1,90 0,72 3,81 Пряник 61,13 0 35,63 0 0 0 0 0 3,23 Теремок 74,38 0,61 11,27 1,23 1,02 1,43 0 0 10,04 Тигр 97,56 0,86 0 0 0 0 0,34 0 1,21 Томкат 87,02 1,17 3,39 0,14 0,73 0,59 1,32 0,15 5,45 Среднее 82,52 1,47 8,86 0,41 1,21 1,51 0,34 0,32 3,37 Стандартная ошибка 3,02 0,42 2,60 0,19 0,55 0,59 0,17 0,13 0,88 Стандартное отклонение 10,89 1,53 9,36 0,68 1,98 2,14 0,63 0,46 3,19 Интервал 36,43 5,29 35,63 1,99 6,47 7,25 1,91 1,33 10,04 Минимум 61,13 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 97,57 5,29 35,63 1,99 6,47 7,25 1,91 1,33 10,04 Сумма 1072,71 19,14 115,12 5,27 15,70 19,67 4,40 4,15 43,84 Счет 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) Верный 72,60 2,40 14,42 6,25 0,00 1,92 0,00 0,00 2,40 Визитѐр 43,77 0,00 24,53 0,00 31,70 0,00 0,00 0,00 0,00 Витраж 77,16 0,35 3,46 0,35 0,00 11,42 0,35 0,00 6,92 Волос 73,32 3,02 8,56 0,00 1,34 1,85 0,00 0,00 11,91 Восход 64,48 0,00 16,39 0,00 0,00 10,93 0,00 0,00 8,20 Гипс 30,03 50,17 15,36 0,00 0,00 3,75 0,00 0,68 0,00 Дуплет 55,02 4,84 15,22 0,35 0,69 3,11 0,35 0,35 20,07 Лекторий 94,15 1,11 3,34 0,00 0,00 0,00 0,00 1,39 0,00 Модист 79,82 1,97 1,32 0,00 0,00 10,96 0,00 0,44 5,48 Пряник 71,67 2,90 0,68 0,00 12,12 0,00 1,37 0,68 10,58 Теремок 62,70 6,29 10,34 0,00 3,60 2,02 0,90 0,22 13,93 Тигр 86,42 1,17 1,17 0,00 0,70 3,04 3,28 3,28 0,94 Томкат 77,26 4,81 4,44 0,18 0,37 1,29 1,29 0,18 10,17 Среднее 68,34 6,08 9,17 0,55 3,89 3,87 0,58 0,56 6,97 Стандартная ошибка 4,82 3,71 2,09 0,48 2,50 1,19 0,27 0,25 1,74 Стандартное отклонение 17,40 13,39 7,52 1,72 9,00 4,29 0,96 0,91 6,29 Интервал 64,12 50,17 23,85 6,25 31,70 11,42 3,28 3,28 20,07 Минимум 30,03 0,00 0,68 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 94,15 50,17 24,53 6,25 31,70 11,42 3,28 3,28 20,07 Сумма 888,41 79,04 119,23 7,13 50,52 50,31 7,53 7,23 90,60 274 Окончание приложения М 2 3 4 5 6 7 Счет 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 (Весенний сезон. Нативное семя) Верный 87,04 5,27 2,42 0,95 0,00 0,00 Визитѐр 76,00 4,02 5,22 0,40 4,92 1,00 Витраж 73,89 0,39 20,37 0,39 0,39 0,78 Волос 82,20 0,73 5,61 0,00 1,46 1,46 Восход 87,72 0,27 2,46 0,68 0,95 0,41 Гипс 86,22 2,35 6,01 0,15 0,73 1,17 Дуплет 78,19 1,34 4,70 0,00 0,67 0,67 Лекторий 71,99 3,50 7,66 0,22 1,75 8,97 Модист 85,76 2,43 1,29 0,81 1,78 0,49 Пряник 88,46 0,71 1,77 0,12 0,71 2,59 Теремок 84,74 0,67 6,12 0,22 1,56 1,00 Тигр 87,24 2,10 5,56 0,00 1,05 1,20 Томкат 90,44 1,20 1,90 0,00 0,19 0,63 Среднее 83,07 1,92 5,47 0,30 1,24 1,57 Стандартная ошибка 1,68 0,43 1,36 0,09 0,35 0,64 Стандартное отклонение 6,05 1,55 4,92 0,33 1,24 2,31 Интервал 18,45 5,00 19,07 0,95 4,92 8,97 Минимум 71,99 0,27 1,29 0,00 0,00 0,00 Максимум 90,44 5,27 20,37 0,95 4,92 8,97 Сумма 1079,88 24,98 71,09 3,94 16,17 20,39 Счет 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Верный 78,62 7,13 7,13 1,97 0,00 0,00 Визитѐр 66,67 1,05 4,48 0,60 1,05 14,05 Витраж 79,02 1,97 2,95 0,00 0,00 9,18 Волос 74,82 0,48 9,26 0,00 1,66 2,14 Восход 63,98 1,82 3,65 1,82 1,37 18,84 Гипс 67,28 20,84 6,33 0,00 0,00 1,58 Дуплет 78,30 2,36 9,67 0,00 0,00 0,47 Лекторий 88,10 3,33 1,43 0,95 0,48 1,27 Модист 78,49 3,55 5,91 0,00 1,42 3,55 Пряник 57,51 4,66 1,04 0,00 16,06 5,18 Теремок 64,78 2,78 4,22 0,22 3,78 14,67 Тигр 80,24 5,78 3,04 0,00 0,00 3,34 Томкат 81,18 2,32 0,00 3,37 0,00 1,39 Среднее 73,77 4,47 4,55 0,69 1,99 5,82 Стандартная ошибка 2,44 1,46 0,83 0,30 1,21 1,74 Стандартное отклонение 8,81 5,26 3,01 1,07 4,37 6,28 Интервал 30,58 20,37 9,67 3,37 16,06 18,84 Минимум 57,51 0,48 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 88,10 20,84 9,67 3,37 16,06 18,84 Сумма 959,00 58,06 59,11 8,93 25,81 75,67 Счет 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 1 8 13,00 9 10 13,00 13,00 0,00 0,30 0,00 0,00 0,27 0,44 0,67 0,66 3,40 0,47 0,33 0,30 0,51 0,57 0,24 0,88 3,40 0,00 3,40 7,35 13,00 0,00 0,60 0,00 0,00 0,27 0,44 0,00 0,66 0,97 0,12 0,00 0,90 0,00 0,30 0,10 0,37 0,97 0,00 0,97 3,96 13,00 4,32 7,53 3,79 8,54 6,96 2,49 13,76 4,60 3,07 5,06 5,35 1,65 5,13 5,56 0,87 3,15 12,11 1,65 13,76 72,24 13,00 0,00 1,05 0,33 0,00 0,30 0,00 0,00 1,11 4,96 1,55 1,33 1,82 2,79 1,17 0,40 1,43 4,96 0,00 4,96 15,25 13,00 0,00 0,30 0,98 0,00 4,56 0,79 0,00 0,00 1,89 1,81 0,11 1,52 0,81 0,98 0,36 1,28 4,56 0,00 4,56 12,78 13,00 5,16 10,76 5,57 11,64 3,65 3,17 9,20 3,33 0,24 12,18 8,11 4,26 8,13 6,57 1,03 3,71 11,94 0,24 12,18 85,39 13,00 275 Приложение Н Морфологические исследования спермы быков-производителей Линия В.Б. Айдиал Кличка быка 1 Беляш Вампир Вар Велюр Вершок Вымпел Лирик Мартен Мирный Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ 2 3 4 5 6 7 8 (Зимний сезон. Нативное семя) 87,05 0,00 11,40 0,00 0,52 0,00 0,52 68,39 2,13 7,60 0,00 2,43 0,30 0,30 84,23 0,00 6,76 0,00 0,00 5,86 0,00 98,43 0,00 0,78 0,00 0,00 0,00 0,00 64,98 2,11 24,89 0,00 0,00 4,22 0,00 79,05 6,72 6,92 0,59 3,75 0,79 0,00 88,18 1,36 2,50 0,23 0,00 0,45 1,82 83,44 6,47 0,26 0,13 1,29 0,00 1,16 87,14 0,00 12,86 0,00 0,00 0,00 0,00 82,32 2,09 8,22 0,11 0,89 1,29 0,42 3,44 0,90 2,54 0,07 0,45 0,73 0,22 10,31 2,71 7,63 0,20 1,36 2,18 33,45 6,72 24,64 0,59 3,75 5,86 64,98 0,00 0,26 0,00 0,00 0,00 98,43 6,72 24,89 0,59 3,75 5,86 740,89 18,79 73,97 0,95 8,00 11,62 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) Беляш 68,58 7,25 8,76 0,00 3,32 0,00 Вампир 69,40 0,27 16,67 0,00 0,00 6,56 Вар 74,84 0,49 5,92 0,33 3,13 9,54 Велюр 95,64 0,65 0,00 0,00 0,00 0,97 Вершок 39,79 0,00 38,03 5,28 0,00 4,93 Вымпел 53,28 1,42 20,23 0,00 2,28 18,23 Лирик 69,75 1,68 5,46 0,84 0,42 1,68 Мартен 85,19 0,93 4,63 0,00 0,00 4,63 Мирный 85,68 0,87 0,65 0,00 0,43 6,94 Среднее 71,35 1,51 11,15 0,72 1,06 5,94 Стандартная ошибка 5,70 0,74 4,04 0,58 0,47 1,85 Стандартное отклонение 17,09 2,22 12,13 1,74 1,42 5,55 Интервал 55,85 7,25 38,03 5,28 3,32 18,23 Минимум 39,79 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 95,64 7,25 38,03 5,28 3,32 18,23 Сумма 642,13 13,56 100,35 6,45 9,58 53,48 Счет 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 (Весенний сезон. Нативное семя) Беляш 78,99 0,78 10,83 0,21 1,28 2,28 Вампир 84,85 0,76 3,94 0,00 0,91 0,91 Вар 82,34 0,45 4,00 0,00 0,23 5,21 Велюр 91,02 2,82 1,23 0,18 0,18 0,88 ТР 9 СГ 10 0,52 0,00 1,52 17,33 0,00 3,15 0,00 0,78 2,95 0,84 0,40 1,78 0,23 5,23 0,91 6,34 0,00 0,00 0,72 3,94 0,33 1,84 0,65 1,82 0,00 1,82 3,80 9,00 0,98 5,51 2,95 17,33 0,00 0,00 2,95 17,33 6,52 35,45 9,00 9,00 0,60 0,00 0,99 1,45 0,00 0,00 4,20 0,00 0,43 0,85 0,45 0,00 11,48 0,27 6,83 0,99 3,78 0,81 0,48 0,00 11,97 0,00 4,56 0,84 15,13 0,31 4,32 0,00 4,99 0,36 7,06 0,14 1,58 1,36 4,20 0,00 4,20 7,68 9,00 0,41 4,75 0,99 14,64 0,00 0,48 0,99 15,13 3,22 63,54 9,00 9,00 0,43 0,30 1,13 0,18 0,00 0,15 0,15 0,35 5,20 8,18 6,49 3,17 276 1 2 75,05 58,40 87,21 87,37 91,41 81,85 3,43 Окончание приложения Н 3 4 5 1,08 8,89 1,30 1,43 21,31 0,20 0,77 2,30 0,00 2,59 1,00 0,42 0,00 7,56 0,00 1,19 6,79 0,26 0,32 2,15 0,14 6 0,00 2,66 0,00 1,59 0,00 0,76 0,31 7 4,12 1,43 0,51 1,59 0,00 1,88 0,58 8 0,00 7,17 1,53 1,34 1,03 1,46 0,74 9 2,17 0,41 0,26 0,59 0,00 0,45 0,22 10 7,38 6,97 7,42 3,51 0,00 5,37 0,89 Вершок Вымпел Лирик Мартен Мирный Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение 10,30 0,95 6,45 0,42 0,93 1,73 2,21 0,67 2,67 Интервал 33,01 2,82 20,31 1,30 2,66 5,21 7,17 2,17 8,18 Минимум 58,40 0,00 1,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 91,41 2,82 21,31 1,30 2,66 5,21 7,17 2,17 8,18 Сумма 736,65 10,69 61,07 2,31 6,85 16,93 13,11 4,07 48,31 Счет 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Беляш 58,41 4,42 11,80 2,95 3,24 5,60 1,18 1,18 11,21 Вампир 70,35 0,32 10,73 0,32 0,63 6,31 0,95 0,32 10,09 Вар 70,86 0,52 2,76 0,34 2,93 17,24 1,03 1,03 3,28 Велюр 84,44 7,11 1,33 0,00 0,00 0,00 1,33 0,44 5,33 Вершок 83,06 0,49 1,47 0,00 1,47 5,37 2,28 0,00 5,86 Вымпел 74,84 2,39 7,81 0,65 2,17 8,46 0,22 0,00 3,47 Лирик 77,69 3,76 1,88 0,54 0,54 0,81 1,08 0,81 12,90 Мартен 80,92 2,53 4,37 0,00 0,46 1,84 2,07 0,00 7,82 Мирный 82,11 0,59 1,03 0,00 0,29 11,44 0,29 0,00 4,25 Среднее 75,85 2,46 4,80 0,53 1,30 6,34 1,16 0,42 7,14 Стандартная ошибка 2,78 0,77 1,41 0,31 0,40 1,83 0,23 0,16 1,18 Стандартное отклонение 8,33 2,32 4,23 0,94 1,21 5,50 0,69 0,48 3,55 Интервал 26,04 6,80 10,77 2,95 3,24 17,24 2,06 1,18 9,63 Минимум 58,41 0,32 1,03 0,00 0,00 0,00 0,22 0,00 3,28 Максимум 84,44 7,11 11,80 2,95 3,24 17,24 2,28 1,18 12,90 Сумма 682,68 22,12 43,17 4,80 11,73 57,07 10,43 3,78 64,22 Счет 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 9,00 277 Приложение П Морфологические исследования спермы быков-производителей Линия П. Говернер Кличка быка 1 Умелый Витязь Фотон Ирис Висмут Важный Грозовой Дивный Тагил Иркут Пунш Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (Зимний сезон. Нативное семя) 75,90 1,81 20,48 0,00 0,00 0,00 1,81 0,00 0,00 66,27 0,78 25,88 0,00 0,00 0,00 0,00 7,06 0,00 93,06 0,00 0,00 0,00 0,69 1,39 0,35 1,04 3,47 41,74 0,00 9,50 0,00 24,79 21,07 0,00 0,41 2,48 77,24 1,28 12,50 0,00 0,00 3,53 0,00 0,96 4,49 84,99 2,44 7,13 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,44 84,63 5,52 0,60 0,00 0,00 0,00 0,84 0,24 8,16 84,58 8,02 0,63 0,00 0,31 0,00 1,88 1,35 3,23 84,69 2,38 1,67 0,00 0,00 0,87 0,79 7,85 1,74 82,55 5,09 8,00 1,45 0,36 0,00 0,00 0,00 2,55 82,32 0,00 5,79 0,00 0,00 7,72 0,00 0,00 4,18 78,00 2,48 8,38 0,13 2,38 3,14 0,51 1,72 3,25 4,16 0,80 2,55 0,13 2,24 1,93 0,22 0,87 0,71 13,80 2,65 8,46 0,44 7,44 6,40 0,73 2,88 2,36 51,32 8,02 25,88 1,45 24,79 21,07 1,88 7,85 8,16 41,74 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 93,06 8,02 25,88 1,45 24,79 21,07 1,88 7,85 8,16 857,98 27,33 92,18 1,45 26,16 34,58 5,66 18,92 35,74 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) Важный 77,83 1,30 14,35 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6,52 Висмут 63,32 1,57 7,21 0,00 0,31 18,81 0,00 0,31 8,46 Витязь 15,34 42,17 0,00 0,00 26,84 15,65 0,00 0,00 0,00 Грозовой 87,75 0,22 4,16 0,00 0,00 1,53 3,06 0,44 2,84 Дивный 71,60 6,57 7,98 0,47 0,00 5,87 0,00 0,70 6,81 Ирис 54,39 0,21 21,63 0,43 0,86 7,92 0,86 0,00 13,70 Иркут 54,65 1,16 23,72 0,23 0,23 6,28 0,23 0,47 13,02 Пунш 26,88 4,62 47,69 0,00 0,00 20,52 0,00 0,00 0,29 Тагил 89,29 0,00 7,50 0,00 0,00 1,43 0,00 0,00 1,79 Умелый 69,03 1,33 19,47 0,00 0,00 0,00 1,77 0,00 8,41 Фотон 63,60 0,00 12,72 0,00 0,00 6,14 0,00 1,75 15,79 Среднее 61,24 5,38 15,13 0,10 2,57 7,65 0,54 0,33 7,06 Стандартная ошибка 6,95 3,73 3,96 0,06 2,43 2,25 0,30 0,16 1,66 Стандартное отклонение 23,07 12,38 13,12 0,18 8,05 7,45 1,01 0,53 5,49 Интервал 73,95 42,17 47,69 0,47 26,84 20,52 3,06 1,75 15,79 Минимум 15,34 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 89,29 42,17 47,69 0,47 26,84 20,52 3,06 1,75 15,79 Сумма 673,66 59,16 166,42 1,13 28,24 84,16 5,92 3,67 77,64 Счет 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 278 1 Умелый Важный Висмут Витязь Грозовой Дивный Ирис Иркут Пунш Тагил Фотон Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Окончание приложения П 2 3 4 5 6 (Весенний сезон. Нативное семя) 85,35 0,00 3,50 0,64 0,64 80,20 3,53 6,18 0,25 0,88 84,56 0,56 7,09 0,42 1,53 89,09 0,59 3,00 0,66 0,73 93,23 0,80 0,69 0,00 0,00 88,65 6,04 0,60 0,00 0,00 82,29 0,15 9,43 0,00 1,02 87,05 1,31 4,50 0,19 0,19 83,49 1,18 4,72 0,47 0,24 91,08 2,14 0,63 0,38 0,00 74,90 7,55 5,10 0,00 0,41 85,45 2,17 4,13 0,27 0,51 1,57 0,76 0,86 0,08 0,15 7 2,23 2,14 0,97 1,54 1,72 0,00 1,74 1,31 7,78 2,01 3,27 2,25 0,61 8 9 10 0,00 0,50 0,14 0,59 1,95 0,60 0,87 0,56 0,00 0,25 0,20 0,52 0,17 0,00 0,38 0,14 0,15 0,57 0,48 0,00 0,00 0,47 2,26 0,82 0,48 0,20 7,64 5,93 4,59 3,66 1,03 3,62 4,50 4,88 1,65 1,26 7,76 4,23 0,70 5,21 2,52 2,84 0,26 0,50 2,01 0,55 0,65 2,32 18,34 7,55 8,83 0,66 1,53 7,78 1,95 2,26 6,72 74,90 0,00 0,60 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 1,03 93,23 7,55 9,43 0,66 1,53 7,78 1,95 2,26 7,76 939,90 23,84 45,45 3,00 5,63 24,72 5,67 5,27 46,52 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Важный 85,52 2,16 0,67 0,00 2,00 3,16 1,66 0,00 4,83 Висмут 64,43 2,84 3,09 0,00 0,52 25,77 1,29 0,00 2,06 Витязь 60,33 0,33 7,97 0,33 2,60 20,98 0,98 2,93 3,58 Грозовой 74,21 0,79 8,13 0,79 0,40 3,77 7,54 1,19 3,17 Дивный 72,52 2,80 6,36 0,00 1,27 10,43 1,78 0,00 4,83 Ирис 62,59 0,18 16,73 0,36 0,72 6,47 0,72 0,00 12,23 Иркут 62,10 1,47 15,89 0,24 0,24 6,85 0,24 0,49 12,47 Пунш 55,62 7,02 18,26 0,28 1,12 17,42 0,28 0,00 0,00 Тагил 66,72 4,16 9,36 0,17 0,69 13,00 3,47 0,69 1,73 Умелый 77,04 1,17 12,45 0,00 0,00 0,00 1,56 0,00 7,78 Фотон 67,68 0,00 10,27 3,42 2,28 4,18 0,00 1,14 11,03 Среднее 68,07 2,08 9,93 0,51 1,08 10,18 1,77 0,59 5,79 Стандартная ошибка 2,59 0,63 1,68 0,30 0,26 2,48 0,65 0,27 1,33 Стандартное отклонение 8,59 2,09 5,57 0,99 0,87 8,21 2,14 0,91 4,42 Интервал 29,91 7,02 17,59 3,42 2,60 25,77 7,54 2,93 12,47 Минимум 55,62 0,00 0,67 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 85,52 7,02 18,26 3,42 2,60 25,77 7,54 2,93 12,47 Сумма 748,77 22,91 109,18 5,60 11,84 112,03 19,52 6,44 63,72 Счет 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 11,00 279 Приложение Р Морфологические исследования спермы быков-производителей Линия С.Т. Рокит Кличка быка 1 Весѐлый Взлѐт Викинг Водород Одуванчик Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Весѐлый Взлѐт Викинг Водород Одуванчик Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Весѐлый Взлѐт Викинг Водород Одуванчик Черѐд Среднее Стандартная ошибка Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ 2 3 4 5 6 (Зимний сезон. Нативное семя) 54,924 6,061 36,36 0 0 66,667 0 28,64 0 0 81,832 0 6,499 0,59 0,59084 84,06 5,369 3,691 0,84 0 47,971 11,93 25,78 0 7,63723 78,403 2,904 5,445 0 2,90381 68,976 4,378 17,74 0,24 1,85531 РХ 7 СХ 8 ТР 9 СГ 10 1,5152 0 5,3176 0 4,7733 2,5408 2,3578 0 0 0,59 0 0 0 0,1 1,14 2,82 0,3 0,84 0,95 0 1,01 0 1,9 4,3 5,2 1 7,8 3,4 1,24439 0,9391 0,1 0,4 1,2 15,004 4,503 14,18 0,38 3,04813 2,3003 36,089 11,93 32,67 0,84 7,63723 5,3176 47,971 0 3,691 0 0 0 84,06 11,93 36,36 0,84 7,63723 5,3176 413,86 26,27 106,4 1,43 11,1319 14,147 6 6 6 6 6 6 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) 48,72 0,85 18,23 0,00 0,00 31,62 78,92 0,57 11,68 0,28 0,28 4,56 72,77 0,67 5,80 1,12 2,68 6,47 75,66 2,30 14,14 0,00 0,00 6,91 52,55 12,42 18,15 0,00 9,87 0,00 64,24 3,78 11,63 0,00 6,69 5,52 65,48 3,43 13,27 0,23 3,25 9,18 0,24 0,59 0 0,59 0,59 6 0,98 2,82 0 2,82 6,04 6 2,9 7,8 0 7,8 20 6 0,00 0,00 0,67 0,00 0,00 0,00 0,11 0,00 0,00 0,22 0,00 1,91 0,00 0,36 0,57 3,70 9,60 0,99 5,10 8,14 4,68 1,50 6,1255 5,12 12,55 30,20 48,72 78,92 392,85 6,00 79,12 88,41 87,65 87,14 81,86 63,78 81,33 3,82 1,838 5,788 1,87 1,69 4,60 0,11 0,31 4,57 4,69 0,45 4,15 11,85 12,43 1,12 9,87 0,57 5,80 0,00 0,00 12,42 18,23 1,12 9,87 20,60 79,64 1,40 19,52 6,00 6,00 6,00 6,00 (Весенний сезон. Нативное семя) 5,31 6,23 0,00 0,00 1,44 2,22 0,18 0,72 0,41 3,90 0,81 1,06 1,06 5,14 0,15 0,61 0,82 4,23 0,10 0,93 2,21 10,26 0,00 4,43 1,88 5,33 0,21 1,29 11,27 31,62 0,00 31,62 55,09 6,00 0,27 0,67 0,00 0,67 0,67 6,00 0,77 3,68 1,91 9,03 0,00 0,57 1,91 9,60 2,13 28,09 6,00 6,00 2,75 1,62 2,03 3,78 1,44 4,23 2,64 0,00 0,30 0,73 0,00 0,21 0,00 0,21 1,10 5,49 0,00 5,11 0,41 3,01 1,06 1,06 3,40 7,01 0,00 15,09 0,99 6,13 0,47 0,12 0,52 0,73 1,92 0,15 1,13 0,18 0,12 0,65 1,98 280 1 Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Весѐлый Взлѐт Викинг Водород Одуванчик Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 2 Окончание приложения Р 3 4 5 6 7 9,35 1,79 2,76 0,31 1,58 1,15 24,63 4,91 8,04 0,81 4,43 2,78 63,78 0,41 2,22 0,00 0,00 1,44 88,41 5,31 10,26 0,81 4,43 4,23 487,96 11,26 31,98 1,25 7,74 15,85 6 6 6 6 6 6 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) 79,14 1,25 0,53 0,18 0,89 5,17 81,58 0,34 10,67 0,17 0,17 3,61 57,20 0,82 7,61 0,41 4,32 15,43 64,59 2,97 13,51 1,08 0,00 12,43 70,51 2,00 8,60 0,46 1,38 2,92 71,77 3,78 6,96 0,20 2,98 4,17 70,80 1,86 7,98 0,42 1,62 7,29 3,70 9,06 24,38 57,20 81,58 424,80 6,00 0,54 8 9 10 0,29 0,73 0,00 0,73 1,24 6 1,28 4,86 3,40 14,03 0,00 1,06 3,40 15,09 5,97 36,77 6 2,32 0,00 0,00 0,81 0,77 0,00 0,65 0,53 9,98 0,00 3,44 0,62 13,58 0,27 4,32 6,30 7,07 0,00 10,14 1,29 8,09 1,78 0,14 0,69 2,16 0,37 1,01 1,58 1,32 4,36 3,43 12,98 0,34 0,53 3,78 13,51 11,16 47,89 6,00 6,00 0,35 0,91 0,17 1,08 2,50 6,00 1,70 4,32 0,00 4,32 9,75 6,00 5,28 12,51 2,92 15,43 43,74 6,00 0,90 2,32 0,00 2,32 3,90 6,00 2,47 3,87 6,30 10,14 0,00 3,44 6,30 13,58 7,72 48,53 6,00 6,00 281 Приложение С Морфологические исследования спермы быков-производителей Линия Рз. Ситейшн Кличка быка 1 Коралл Потешный Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Коралл Потешный Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ 2 3 4 5 6 7 8 (Зимний сезон. Нативное семя) 74,67 7,32 7,69 0,00 0,00 0,00 0,00 87,80 0,72 2,30 0,86 0,43 1,72 3,16 77,46 4,34 6,36 0,00 2,31 0,00 5,78 79,98 4,12 5,45 0,29 0,91 0,57 2,98 4,00 1,91 1,62 0,29 0,71 0,57 1,67 6,92 3,30 2,81 0,50 1,23 0,99 13,13 6,60 5,40 0,86 2,31 1,72 74,67 0,72 2,30 0,00 0,00 0,00 87,80 7,32 7,69 0,86 2,31 1,72 239,93 12,37 16,35 0,86 2,74 1,72 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) 70,73 3,90 9,76 0,00 0,00 1,95 68,22 3,74 8,88 1,17 0,00 0,00 72,47 4,86 8,10 0,00 0,00 10,93 70,48 1,23 4,17 0,35 8,91 0,48 0,39 0,00 0,39 0,00 4,29 3,37 2,89 5,78 0,00 5,78 8,94 3,00 ТР 9 СГ 10 0,00 10,32 0,14 2,87 0,00 3,76 0,05 5,65 0,05 2,35 0,08 4,07 0,14 7,45 0,00 2,87 0,14 10,32 0,14 16,95 3,00 3,00 1,46 0,00 12,20 8,64 0,00 9,35 0,00 1,21 2,43 3,37 0,40 2,67 0,40 7,99 2,90 2,13 0,60 0,83 0,67 0,00 5,83 4,63 0,70 5,02 4,25 1,12 1,66 1,17 0,00 10,93 8,64 1,21 9,77 68,22 3,74 8,10 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2,43 72,47 4,86 9,76 1,17 0,00 10,93 8,64 1,21 12,20 211,43 12,50 26,73 1,17 0,00 12,88 10,11 1,21 23,97 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 (Весенний сезон. Нативное семя) 74,00 2,75 7,63 0,25 1,13 2,13 1,38 0,00 10,75 88,11 0,34 3,85 0,17 1,68 2,68 0,00 0,00 3,18 80,60 3,90 4,87 0,00 0,00 5,31 2,66 0,27 2,39 80,90 2,33 5,45 0,14 0,93 3,37 1,34 0,09 5,44 4,08 1,05 1,13 0,07 0,49 0,98 0,77 0,09 2,66 Коралл Потешный Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение 7,06 1,82 1,95 0,13 0,85 1,70 Интервал 14,11 3,56 3,77 0,25 1,68 3,19 Минимум 74,00 0,34 3,85 0,00 0,00 2,13 Максимум 88,11 3,90 7,63 0,25 1,68 5,31 Сумма 242,71 6,98 16,35 0,42 2,80 10,12 Счет 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Коралл 63,69 4,54 12,30 1,46 2,78 4,39 Потешный 73,84 0,73 3,91 0,00 3,67 10,51 1,33 2,66 0,00 2,66 4,03 3,00 0,15 4,61 0,27 8,36 0,00 2,39 0,27 10,75 0,27 16,32 3,00 3,00 0,15 0,00 10,69 2,93 0,00 4,40 282 1 Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Окончание приложения С 2 3 4 5 6 7 62,24 5,44 3,93 0,91 0,30 12,08 66,59 3,57 6,71 0,79 2,25 9,00 3,65 1,44 2,79 0,43 1,01 2,35 6,32 2,50 11,60 4,70 62,24 0,73 73,84 5,44 199,76 10,71 3,00 3,00 4,84 8,39 3,91 12,30 20,14 3,00 0,74 1,46 0,00 1,46 2,37 3,00 1,74 4,06 3,37 7,69 0,30 4,39 3,67 12,08 6,75 26,99 3,00 3,00 8 9 4,83 0,60 2,64 0,20 1,36 0,20 2,36 4,69 0,15 4,83 7,91 3,00 10 9,67 8,25 1,95 0,35 3,37 0,60 6,29 0,00 4,40 0,60 10,69 0,60 24,76 3,00 3,00 283 Приложение Т Морфологические исследования спермы быков-производителей Симментальские быки российской селекции Кличка быка Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ (Зимний сезон. Нативное семя) ВАЛЬС 55,70 0,84 40,51 0,00 0,00 0,00 0,00 2,95 0,00 Король 65,77 1,92 16,92 0,00 0,00 7,69 0,00 4,62 3,08 Среднее 60,73 1,38 28,71 0,00 0,00 3,85 0,00 3,78 1,54 Стандартная ошибка 5,04 0,54 11,79 0,00 0,00 3,85 0,00 0,83 1,54 Стандартное отклонение 7,12 0,76 16,68 0,00 0,00 5,44 0,00 1,18 2,18 Интервал 10,07 1,08 23,58 0,00 0,00 7,69 0,00 1,66 3,08 Минимум 55,70 0,84 16,92 0,00 0,00 0,00 0,00 2,95 0,00 Максимум 65,77 1,92 40,51 0,00 0,00 7,69 0,00 4,62 3,08 Сумма 121,47 2,77 57,43 0,00 0,00 7,69 0,00 7,57 3,08 Счет 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) ВАЛЬС 56,64 1,95 18,75 11,33 0,00 7,81 0,00 0,00 3,52 Король 50,00 0,00 0,00 0,00 6,41 16,99 6,73 0,00 19,87 Среднее 53,32 0,98 9,38 5,66 3,21 12,40 3,37 0,00 11,69 Стандартная ошибка 3,32 0,98 9,38 5,66 3,21 4,59 3,37 0,00 8,18 Стандартное отклонение 4,70 1,38 13,26 8,01 4,53 6,49 4,76 0,00 11,57 Интервал 6,64 1,95 18,75 11,33 6,41 9,17 6,73 0,00 16,36 Минимум 50,00 0,00 0,00 0,00 0,00 7,81 0,00 0,00 3,52 Максимум 56,64 1,95 18,75 11,33 6,41 16,99 6,73 0,00 19,87 Сумма 106,64 1,95 18,75 11,33 6,41 24,80 6,73 0,00 23,39 Счет 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 (Весенний сезон. Нативное семя) ВАЛЬС 63,20 0,59 22,26 1,78 0,00 4,15 0,00 2,08 5,93 Король 66,77 1,58 13,29 1,27 2,53 6,65 0,63 3,80 3,48 Среднее 64,99 1,09 17,77 1,52 1,27 5,40 0,32 2,94 4,71 Стандартная ошибка 1,78 0,49 4,48 0,26 1,27 1,25 0,32 0,86 1,23 Стандартное отклонение 2,52 0,70 6,34 0,36 1,79 1,76 0,45 1,22 1,74 Интервал 3,57 0,99 8,96 0,51 2,53 2,49 0,63 1,72 2,45 Минимум 63,20 0,59 13,29 1,27 0,00 4,15 0,00 2,08 3,48 Максимум 66,77 1,58 22,26 1,78 2,53 6,65 0,63 3,80 5,93 Сумма 129,98 2,18 35,55 3,05 2,53 10,80 0,63 5,87 9,42 Счет 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) ВАЛЬС 64,17 2,82 6,91 0,56 1,69 8,89 8,04 0,85 6,06 Король 61,16 0,85 2,97 0,00 2,97 9,18 2,82 0,42 19,63 Среднее 62,67 1,83 4,94 0,28 2,33 9,03 5,43 0,63 12,85 Стандартная ошибка 1,51 0,99 1,97 0,28 0,64 0,15 2,61 0,21 6,78 Стандартное отклонение 2,13 1,40 2,79 0,40 0,90 0,21 3,69 0,30 9,59 Интервал 3,02 1,97 3,95 0,56 1,27 0,30 5,21 0,42 13,57 Минимум 61,16 0,85 2,97 0,00 1,69 8,89 2,82 0,42 6,06 Максимум 64,17 2,82 6,91 0,56 2,97 9,18 8,04 0,85 19,63 Сумма 125,33 3,67 9,88 0,56 4,66 18,07 10,86 1,27 25,70 Счет 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 284 Приложение У Морфологические исследования спермы быков-производителей Симментальские быки, первый завоз из Германии Кличка быка Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (Зимний сезон. Нативное семя) Динамит 83,98 0,77 2,00 0,00 1,85 4,31 0,92 0,31 5,86 Бодрый 80,48 2,62 3,62 0,20 0,60 8,05 0,20 0,00 4,23 Борец 82,87 1,38 3,29 0,17 0,17 1,38 3,98 2,08 4,67 Наутилус 84,18 1,64 6,72 0,90 2,84 0,00 1,04 0,90 1,04 Новый 92,11 2,47 2,00 0,59 0,71 0,24 1,06 0,12 0,71 Номер 89,60 4,79 1,32 0,00 0,00 1,65 0,33 0,50 1,82 Ранет 62,96 20,20 8,42 0,34 0,00 7,07 0,00 0,34 0,67 Ратник 94,44 1,70 0,09 0,28 1,04 0,38 0,09 0,19 1,79 Среднее 83,83 4,45 3,43 0,31 0,90 2,89 0,95 0,55 2,60 Стандартная ошибка 3,44 2,29 0,99 0,11 0,35 1,13 0,46 0,24 0,71 Стандартное отклонение 9,73 6,48 2,81 0,30 1,00 3,20 1,30 0,67 2,02 Интервал 31,48 19,43 8,32 0,90 2,84 8,05 3,98 2,08 5,18 Минимум 62,96 0,77 0,09 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,67 Максимум 94,44 20,20 8,42 0,90 2,84 8,05 3,98 2,08 5,86 Сумма 670,62 35,57 27,46 2,48 7,20 23,08 7,63 4,42 20,78 Счет 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) Ранет 71,38 10,14 7,61 0,00 0,00 10,51 0,36 0,00 0,00 Бодрый 65,47 5,52 7,73 4,70 1,93 7,46 0,00 0,00 7,18 Борец 78,08 1,50 2,10 0,30 0,90 8,11 0,00 0,00 9,01 Динамит 72,93 4,15 6,33 0,00 0,00 4,15 1,31 0,44 10,70 Наутилус 70,56 4,31 6,10 3,59 5,92 0,00 3,95 0,54 5,03 Новый 74,39 4,32 10,50 1,01 1,15 0,43 1,01 0,72 6,47 Номер 88,07 3,90 1,52 0,22 0,00 0,65 1,08 0,65 3,90 Ратник 80,70 4,11 3,80 0,00 0,00 1,27 0,00 0,95 9,18 Среднее 75,20 4,75 5,71 1,23 1,24 4,07 0,96 0,41 6,43 Стандартная ошибка 2,47 0,87 1,08 0,66 0,72 1,46 0,47 0,13 1,22 Стандартное отклонение 6,98 2,45 3,06 1,85 2,02 4,12 1,32 0,37 3,44 Интервал 22,60 8,64 8,99 4,70 5,92 10,51 3,95 0,95 10,70 Минимум 65,47 1,50 1,52 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Максимум 88,07 10,14 10,50 4,70 5,92 10,51 3,95 0,95 10,70 Сумма 601,56 37,96 45,70 9,81 9,91 32,57 7,71 3,29 51,47 Счет 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 (Весенний сезон. Нативное семя) Бодрый 65,40 4,24 8,93 2,46 2,23 9,60 1,34 0,00 5,80 Борец 82,29 4,38 2,87 2,02 1,69 0,17 2,36 0,67 3,54 Динамит 71,51 0,70 15,64 0,00 0,98 2,65 0,56 0,56 7,40 Наутилус 82,98 1,84 6,38 0,99 3,26 0,00 1,84 0,14 2,55 Новый 86,76 3,26 2,24 0,92 0,71 3,36 1,32 0,71 0,71 Номер 88,79 3,16 1,74 0,76 0,44 0,33 0,87 1,41 2,50 Ранет 81,07 2,44 4,89 0,31 1,37 2,75 0,76 0,00 6,41 Среднее 79,83 2,86 6,10 1,07 1,53 2,69 1,29 0,50 4,13 Стандартная ошибка 3,17 0,50 1,86 0,33 0,37 1,27 0,24 0,19 0,92 Стандартное отклонение 8,40 1,31 4,92 0,88 0,98 3,35 0,64 0,51 2,45 285 Окончание приложения У 1 2 3 4 5 6 7 Интервал 23,39 3,69 13,90 2,46 2,83 9,60 Минимум 65,40 0,70 1,74 0,00 0,44 0,00 Максимум 88,79 4,38 15,64 2,46 3,26 9,60 Сумма 558,80 20,02 42,69 7,46 10,68 18,86 Счет 7,00 7,00 7,00 7,00 7,00 7,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Ранет 69,72 15,14 8,52 0,00 0,00 6,62 Бодрый 70,71 5,54 5,01 3,69 0,00 5,28 Борец 79,48 2,59 5,66 0,24 1,89 5,66 Динамит 64,42 2,56 8,97 0,00 2,88 8,33 Новый 80,59 4,42 3,21 1,20 2,01 1,47 Номер 71,12 3,95 1,22 1,52 4,26 3,34 Ратник 60,19 13,11 8,90 0,00 1,17 11,01 Наутилус 71,20 2,34 11,55 0,44 0,88 0,00 Среднее 70,93 6,21 6,63 0,89 1,64 5,21 Стандартная ошибка 2,41 1,78 1,22 0,45 0,51 1,27 Стандартное отклонение 6,82 5,04 3,44 1,27 1,45 3,59 Интервал 20,40 12,80 10,33 3,69 4,26 11,01 Минимум 60,19 2,34 1,22 0,00 0,00 0,00 Максимум 80,59 15,14 11,55 3,69 4,26 11,01 Сумма 567,43 49,66 53,04 7,09 13,08 41,72 Счет 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 8 1,80 0,56 2,36 9,06 7,00 9 1,41 0,00 1,41 3,50 7,00 10 6,69 0,71 7,40 28,93 7,00 0,00 1,06 0,94 1,28 2,54 2,74 2,58 3,51 1,83 0,42 1,18 3,51 0,00 3,51 14,64 8,00 0,00 0,00 0,00 0,48 0,54 3,34 0,00 1,90 0,78 0,43 1,22 3,34 0,00 3,34 6,26 8,00 0,00 8,71 3,54 11,06 4,02 8,51 3,04 8,19 5,88 1,33 3,75 11,06 0,00 11,06 47,06 8,00 286 Приложение Ф Морфологические исследования спермы быков-производителей Симментальские быки, второй завоз из Германии Кличка быка Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ (Весенний сезон. Нативное семя) Макет 39,24 1,48 31,65 0,00 5,91 2,74 1,69 0,00 17,30 Малец 49,41 3,26 24,04 0,89 2,67 2,67 1,48 0,89 14,69 Радий 79,00 0,41 3,38 0,41 1,84 2,05 2,77 0,31 9,84 Ренит 54,63 4,30 22,54 0,15 1,17 3,72 1,75 0,58 11,16 Розер 87,52 1,60 0,53 0,00 0,89 3,74 3,21 0,18 2,32 Ролик 87,58 1,24 2,80 0,00 0,93 3,11 2,48 0,00 1,86 Ромб 72,44 1,48 10,63 0,87 1,24 5,07 0,37 0,12 7,79 Ропот 83,06 5,37 1,93 0,14 0,41 1,10 1,65 0,41 5,92 Росток 77,03 0,60 11,61 0,36 1,09 2,54 0,97 0,12 5,68 Халлинг 71,66 0,57 11,77 0,00 0,34 1,60 0,80 0,91 12,34 Хан 67,24 3,95 17,63 0,26 0,92 0,00 3,16 0,00 6,84 Херес 60,57 13,09 6,38 0,34 4,78 5,29 1,17 0,08 8,31 Хурал 63,99 3,43 11,73 0,42 1,34 4,69 1,84 0,75 11,81 Среднее 68,72 3,14 12,05 0,29 1,81 2,95 1,80 0,34 8,91 Стандартная ошибка 4,12 0,94 2,65 0,08 0,47 0,43 0,25 0,09 1,26 Стандартное отклонение 14,84 3,39 9,57 0,30 1,69 1,56 0,89 0,34 4,55 Минимум 39,24 0,41 0,53 0,00 0,34 0,00 0,37 0,00 1,86 Максимум 87,58 13,09 31,65 0,89 5,91 5,29 3,21 0,91 17,30 Сумма 893,34 40,80 156,60 3,83 23,54 38,32 23,35 4,37 115,86 Счет 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Макет 31,87 2,94 34,17 0,00 8,81 3,35 1,68 0,00 17,19 Малец 46,03 2,70 25,19 0,75 4,95 6,00 1,95 0,45 11,99 Радий 59,13 2,55 6,77 1,40 3,19 5,49 4,98 0,38 16,09 Ренит 47,64 5,87 23,28 0,65 2,10 4,71 2,97 0,87 11,89 Розер 62,92 3,93 1,40 0,28 3,09 10,11 10,11 0,56 7,58 Ролик 77,45 2,73 4,33 1,14 2,05 5,24 3,64 0,23 3,19 Ромб 57,70 3,44 15,41 1,97 2,46 10,16 0,16 0,33 8,36 Ропот 70,26 9,48 3,10 0,33 0,65 1,63 4,41 0,33 9,80 Росток 59,30 0,83 15,91 0,83 1,24 5,37 2,69 0,41 13,43 Халлинг 61,79 1,61 14,46 0,18 0,71 2,86 1,79 3,57 13,04 Хан 60,44 5,55 18,76 0,74 1,66 0,09 5,73 0,18 6,84 Херес 53,23 15,36 6,80 0,68 5,98 7,34 1,36 0,41 8,84 Хурал 56,83 5,40 16,46 0,45 1,71 5,94 2,25 1,26 9,71 Среднее 57,28 4,80 14,31 0,72 2,97 5,25 3,36 0,69 10,61 Стандартная ошибка 3,13 1,08 2,69 0,15 0,65 0,81 0,71 0,26 1,07 Стандартное отклонение 11,28 3,89 9,69 0,54 2,34 2,92 2,56 0,92 3,86 Интервал 45,58 14,54 32,77 1,97 8,15 10,07 9,95 3,57 14,00 Минимум 31,87 0,83 1,40 0,00 0,65 0,09 0,16 0,00 3,19 Максимум 77,45 15,36 34,17 1,97 8,81 10,16 10,11 3,57 17,19 Сумма 744,59 62,39 186,04 9,39 38,61 68,30 43,72 8,98 137,96 Счет 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00 287 Приложение Х Морфологические исследования спермы быков-производителей Венгрия (место происхождения) Кличка быка 1 Вампир Вар Ватин Веер Велюр Вершок Вес Весѐлый Взлѐт Викинг Висмут Витраж Витязь Водород Вымпел Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Вампир Вар Ватин Веер Велюр Вершок Вес Весѐлый Взлѐт Викинг Висмут Витраж Витязь Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ 2 3 4 5 6 (Зимний сезон. Нативное семя) 68,4 84,2 86 78,5 98,4 65 80,7 54,9 66,7 81,8 77,2 77,1 66,3 84,1 79,1 76,6 2,77 17,3 3,15 2,86 1,69 0,78 0,84 1,48 0 1,88 4,28 4,49 3,27 0 5,2 1,78 3,27 1,09 10,7 2,58 10,7 0,41 1,17 2,009 115 6,67 114 0,17 1,37 4,036 43,5 6,72 35,6 1,27 3,75 5,856 54,9 0 0,78 0 0 0 98,4 6,72 36,4 1,27 3,75 5,856 1148 33 199 4,41 12,5 30,89 15 15 15 15 15 15 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) 0,4 0,2 1,5 0 1,5 3,4 15 1,84 3,39 7,06 0 7,06 19,5 15 4,2 17,7 17,3 0 17,3 49 15 0 1 0 2,8 1,5 0 0,5 0 0 0,7 0 0,3 0 0,27 0,99 0 2,4 0,81 0 0 0 0 0,22 0,31 0 0 6,83 3,78 0 4,59 0,48 12 13,7 0,57 3,7 9,6 8,46 6,92 0 0 0,33 0 1,09 0 5,28 0,49 0 0,28 1,12 0 0,35 0 2,43 0 1,14 1,55 0 0 2,22 0 0 0,59 0 0,82 0 0 3,75 0,83 0,3 СГ 10 1,52 0 0,29 0,84 0 2,95 0 1,14 2,82 0,3 0,96 0,41 7,06 0,84 0,4 1,3 0,48 16,7 5,92 22,1 6,11 0 38 18,6 18,2 11,7 5,8 7,21 3,46 0 0 0 0,57 1,27 0 0 0 0 0 0,59 0 0,55 0 0,84 0,59 0,29 0,11 ТР 9 0,3 0 0,1 1,5 0 0 0 0 0 0,6 0 0,8 0 0 0 0,2 0,1 0,27 0,49 0 4,37 0,65 0 6,37 0,85 0,57 0,67 1,57 0,35 42,2 7,6 6,76 5,71 4,92 0,78 24,9 14,4 36,4 28,6 6,5 12,5 13,2 25,9 3,69 6,92 13,3 2,76 СХ 8 0,304 5,856 2,429 3,235 0 4,219 1,111 1,515 0 5,318 3,526 2,592 0 0 0,791 2,06 0,519 69,4 74,8 58,8 74,9 95,6 39,8 51,5 48,7 78,9 72,8 63,3 77,2 15,3 2,13 0 0,86 6,47 0 2,11 0 6,06 0 0 1,28 1,23 0,78 5,37 6,72 2,2 0,67 РХ 7 0 3,13 0 1,09 0 0 0 0 0,28 2,68 0,31 0 26,8 6,557 9,539 19,12 2,62 0,969 4,93 8,824 31,62 4,558 6,473 18,81 11,42 15,65 288 1 Продолжение приложение Х 2 3 4 5 6 75,7 2,3 14,1 0 0 53,3 1,42 20,2 0 2,28 63,3 4,14 12,5 0,6 2,44 5,05 2,75 2,62 0,35 1,77 7 6,908 18,23 11,08 2,115 8 0 0 0 0 0,5 0,33 0,2 0,17 10 0,99 4,56 5,08 1,14 8,191 67,09 30,65 0,969 31,62 166,2 15 0,8 0,65 0,6 0,42 2,8 2,4 0 0 2,8 2,4 6,8 5,01 15 15 4,43 19,6 13,7 0 13,7 76,2 15 Вампир 84,8 0,76 3,94 0 0,91 0,909 Вар 82,3 0,45 4 0 0,23 5,208 Ватин 82,2 1,22 8,92 0,24 1,38 1,703 Веер 88,2 2,19 1,37 1,23 0,27 1,231 Велюр 91 2,82 1,23 0,18 0,18 0,88 Вершок 75,1 1,08 8,89 1,3 0 4,121 Вес 89,3 0 2,14 0,39 1,17 2,729 Весѐлый 79,1 5,31 6,23 0 0 2,747 Взлѐт 88,4 1,44 2,22 0,18 0,72 1,622 Викинг 87,7 0,41 3,9 0,81 1,06 2,031 Висмут 84,6 0,56 7,09 0,42 1,53 0,974 Витраж 73,9 0,39 20,4 0,39 0,39 0,783 Витязь 89,1 0,59 3 0,66 0,73 1,537 Водород 87,1 1,06 5,14 0,15 0,61 3,782 Вымпел 58,4 1,43 21,3 0,2 2,66 1,434 Среднее 82,8 1,31 6,65 0,41 0,79 2,113 Стандартная ошибка 2,19 0,34 1,62 0,11 0,18 0,346 Стандартное отклонение 8,49 1,33 6,26 0,42 0,71 1,342 Дисперсия выборки 72 1,77 39,2 0,17 0,5 1,8 Интервал 32,6 5,31 20,1 1,3 2,66 4,424 Минимум 58,4 0 1,23 0 0 0,783 Максимум 91 5,31 21,3 1,3 2,66 5,208 Сумма 1241 19,7 99,8 6,16 11,8 31,69 Счет 15 15 15 15 15 15 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) 0,3 1,1 0,2 1,1 0,2 0 0,4 0 0,3 0,7 0,1 0 0,6 0 7,2 0,8 0,5 0,15 0,15 0,24 1,37 0,35 2,17 0,39 1,1 0 0,41 0,14 0 0,15 1,06 0,41 0,54 0,16 8,18 6,49 3,89 3,01 3,17 7,38 3,51 5,49 5,11 3,01 4,59 3,79 3,66 1,06 6,97 4,62 0,51 1,8 3,2 7,2 0 7,2 12 15 0,62 0,38 2,17 0 2,17 8,08 15 1,96 3,83 7,12 1,06 8,18 69,3 15 Вампир Вар Ватин Веер Велюр Вершок Вес Весѐлый 0,9 1 0,9 2,4 1,3 2,3 4,7 2,3 0,32 1,03 1,1 1,09 0,44 0 0 0,53 10,1 3,28 7,37 4,89 5,33 5,86 2,35 9,98 Водород Вымпел Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 19,6 10,7 10,2 1,35 6,84 383 114 103 1,83 46,7 80,3 42,2 38 5,28 26,8 15,3 0 0 0 0 95,6 42,2 38 5,28 26,8 950 62,1 188 8,94 36,6 15 15 15 15 15 (Весенний сезон. Нативное семя) 70,3 70,9 70,1 54,2 84,4 83,1 73,5 79,1 0,32 0,52 1,41 8,15 7,11 0,49 1,17 1,25 10,7 2,76 6,27 1,81 1,33 1,47 4,23 0,53 0,32 0,34 1,1 1,09 0 0 0 0,18 0,63 2,93 2,35 1,27 0 1,47 0,94 0,89 6,309 17,24 9,404 25,18 0 5,375 13,15 5,169 9 289 1 Взлѐт Викинг Висмут Витраж Витязь Водород Вымпел Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Окончание приложения Х 2 3 4 5 81,6 0,34 10,7 0,17 57,2 0,82 7,61 0,41 64,4 2,84 3,09 0 79 1,97 2,95 0 60,3 0,33 7,97 0,33 64,6 2,97 13,5 1,08 74,8 2,39 7,81 0,65 71,2 2,14 5,52 0,38 2,45 0,62 1,04 0,11 6 0,17 4,32 0,52 0 2,6 0 2,17 1,35 0,33 7 3,614 15,43 25,77 9,18 20,98 12,43 8,46 11,85 2,011 8 0 0 1,3 0,3 1 0,8 0,2 1,3 0,3 0 0,62 0 0,98 2,93 0,27 0 0,62 0,2 10 3,44 13,6 2,06 5,57 3,58 4,32 3,47 5,68 0,85 9,5 90,2 30,3 54,2 84,4 1068 15 1,28 1,65 4,32 0 4,32 20,3 15 7,787 60,63 25,77 0 25,77 177,7 15 1,2 1,5 4,7 0 4,7 20 15 0,77 0,59 2,93 0 2,93 9,31 15 3,28 10,7 11,5 2,06 13,6 85,2 15 2,41 5,81 7,84 0,32 8,15 32,1 15 4,04 16,3 13 0,53 13,5 82,7 15 0,41 0,17 1,1 0 1,1 5,66 15 9 290 Приложение Ц Морфологические исследования спермы быков-производителей Германия (место происхождения) Кличка быка 1 Бодрый Борец Динамит Наутилус Новый Номер Ранет Ратник Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ СХ ТР СГ 2 3 4 5 6 7 8 9 10 (Зимний сезон. Нативное семя) 80,48 2,62 3,62 0,2 0,6 8,05 0,2 0 4,23 82,87 1,38 3,29 0,17 0,17 1,38 3,98 2,076 4,67 83,98 0,77 2 0 1,85 4,31 0,92 0,308 5,86 84,18 1,64 6,72 0,9 2,84 0 1,04 0,896 1,79 92,11 2,47 2 0,59 0,71 0,24 1,06 0,118 0,71 89,6 4,79 1,32 0 0 1,65 0,33 0,495 1,82 62,96 20,2 8,42 0,34 0 7,07 0 0,337 0,67 94,44 1,7 0,09 0,28 1,04 0,38 0,09 0,189 1,79 77,46 4,34 6,36 0 2,31 0 5,78 0 3,76 83,12 4,43 3,76 0,28 1,06 2,56 1,49 0,491 2,81 3,114 2,02 0,94 0,1 0,35 1,05 0,67 0,219 0,62 9,342 6,06 2,81 0,3 1,04 3,14 2,01 87,28 36,7 7,87 0,09 1,09 9,88 4,06 31,48 19,4 8,32 0,9 2,84 8,05 5,78 62,96 0,77 0,09 0 0 0 0 94,44 20,2 8,42 0,9 2,84 8,05 5,78 748,1 39,9 33,8 2,48 9,52 23,1 13,4 9 9 9 9 9 9 9 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) Бодрый 65,47 5,52 7,73 4,7 1,93 7,46 0 Борец 78,08 1,5 2,1 0,3 0,9 8,11 0 Динамит 72,93 4,15 6,33 0 0 4,15 1,31 Наутилус 70,56 4,31 6,1 3,59 5,92 0 3,95 Новый 74,39 4,32 10,5 1,01 1,15 0,43 1,01 Номер 88,07 3,9 1,52 0,22 0 0,65 1,08 Ранет 71,38 10,1 7,61 0 0 10,5 0,36 Ратник 80,7 4,11 3,8 0 0 1,27 0 Ритм 72,47 4,86 8,1 0 0 10,9 0 Среднее 74,89 4,76 5,98 1,09 1,1 4,83 0,86 Стандартная ошибка 2,197 0,76 0,99 0,59 0,65 1,49 0,43 Стандартное отклонение 6,59 2,29 2,97 1,78 1,94 4,48 1,28 Дисперсия выборки 43,43 5,27 8,82 3,18 3,76 20,1 1,63 Интервал 22,6 8,64 8,99 4,7 5,92 10,9 3,95 Минимум 65,47 1,5 1,52 0 0 0 0 Максимум 88,07 10,1 10,5 4,7 5,92 10,9 3,95 Сумма 674 42,8 53,8 9,81 9,91 43,5 7,71 Счет 9 9 9 9 9 9 9 (Весенний сезон. Нативное семя) Бодрый 65,402 4,241 8,929 2,5 2,23 9,5982 1,339 Борец 82,293 4,384 2,867 2 1,69 0,1686 2,361 0,656 0,431 2,076 0 2,076 4,418 9 1,86 3,46 5,18 0,67 5,86 25,3 9 0 0 0,437 0,539 0,719 0,651 0 0,949 1,215 0,501 0,146 7,18 9,01 10,7 5,03 6,47 3,9 0 9,18 2,43 5,99 1,16 0,439 0,192 1,215 0 1,215 4,509 9 3,48 12,1 10,7 0 10,7 53,9 9 0 5,804 0,67 3,541 291 1 Продолжение приложения Ц 2 3 4 5 6 71,508 0,698 15,64 0 0,98 82,979 1,844 6,383 1 3,26 86,762 3,259 2,24 0,9 0,71 88,792 3,156 1,741 0,8 0,44 81,069 2,443 4,885 0,3 1,37 80,602 3,897 4,872 0 0 79,926 2,99 5,945 0,9 1,34 2,7511 0,449 1,616 0,3 0,37 7 2,6536 0 3,3605 0,3264 2,7481 5,3144 3,0212 1,1446 8 0,559 1,844 1,324 0,871 0,763 2,657 1,465 0,27 Динамит Наутилус Новый Номер Ранет Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение 7,7812 1,27 4,571 0,9 1,05 3,2374 0,763 Дисперсия выборки 60,547 1,614 20,9 0,8 1,11 10,481 0,582 Интервал 23,39 3,686 13,9 2,5 3,26 9,5982 2,099 Минимум 65,402 0,698 1,741 0 0 0 0,559 Максимум 88,792 4,384 15,64 2,5 3,26 9,5982 2,657 Сумма 639,41 23,92 47,56 7,5 10,7 24,17 11,72 Счет 8 8 8 8 8 8 8 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) Бодрый 70,712 5,541 5,013 3,7 0 5,277 1,055 Борец 79,481 2,594 5,66 0,2 1,89 5,6604 0,943 Динамит 64,423 2,564 8,974 0 2,88 8,3333 1,282 Наутилус 71,199 2,339 11,55 0,4 0,88 0 3,509 Новый 80,589 4,418 3,213 1,2 2,01 1,4726 2,544 Номер 71,125 3,951 1,216 1,5 4,26 3,3435 2,736 Ранет 69,716 15,14 8,517 0 0 6,6246 0 Ратник 60,187 13,11 8,899 0 1,17 11,007 2,576 Ритм 62,236 5,438 3,927 0,9 0,3 12,085 4,834 Среднее 69,963 6,122 6,33 0,9 1,49 5,9781 2,164 Стандартная ошибка 2,3362 1,573 1,115 0,4 0,48 1,3546 0,497 Стандартное отклонение 7,0087 4,718 3,344 1,2 1,43 4,0638 1,49 Дисперсия выборки 49,122 22,26 11,18 1,4 2,04 16,514 2,22 Интервал 20,402 12,8 10,33 3,7 4,26 12,085 4,834 Минимум 60,187 2,339 1,216 0 0 0 0 Максимум 80,589 15,14 11,55 3,7 4,26 12,085 4,834 Сумма 629,67 55,1 56,97 8 13,4 53,803 19,48 Счет 9 9 9 9 9 9 9 (Весенний сезон. Нативное семя 1-я группа+2 группа) Малец 49,41 3,26 24 0,89 2,67 2,67 1,48 Бодрый 65,4 4,24 8,93 2,46 2,23 9,6 1,34 Борец 82,29 4,38 2,87 2,02 1,69 0,17 2,36 Динамит 71,51 0,7 15,6 0 0,98 2,65 0,56 Макет 39,24 1,48 31,6 0 5,91 2,74 1,69 Наутилус 82,98 1,84 6,38 0,99 3,26 0 1,84 Новый 86,76 3,26 2,24 0,92 0,71 3,36 1,32 Номер 88,79 3,16 1,74 0,76 0,44 0,33 0,87 Радий 79 0,41 3,38 0,41 1,84 2,05 2,77 Ранет 81,07 2,44 4,89 0,31 1,37 2,75 0,76 Ренит 54,63 4,3 22,5 0,15 1,17 3,72 1,75 9 0,56 0,14 0,71 1,41 0 0,27 0,47 0,17 10 7,402 2,553 0,713 2,503 6,412 2,391 3,915 0,829 0,48 0,23 1,41 0 1,41 3,77 8 2,346 5,504 6,689 0,713 7,402 31,32 8 0 0 0,48 1,9 0,54 3,34 0 0 0,6 0,76 0,38 8,707 3,538 11,06 8,187 4,016 8,511 0 3,044 9,668 6,303 1,244 1,14 1,3 3,34 0 3,34 6,86 9 3,731 13,92 11,06 0 11,06 56,73 9 0,89 0 0,675 0,559 0 0,142 0,713 1,415 0,307 0 0,584 14,7 5,8 3,54 7,4 17,3 2,55 0,71 2,5 9,84 6,41 11,2 292 1 Розер Ролик Ромб Ропот Росток Халлинг Хан Херес Хурал Ритм Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Малец Бодрый Борец Динамит Макет Наутилус Новый Номер Радий Ранет Ратник Ренит Розер Ролик Ромб Ропот Росток Халлинг Хан Херес Хурал Ритм Среднее Стандартная ошибка Продолжение приложения Ц 2 3 4 5 6 87,52 1,6 0,53 0 0,89 87,58 1,24 2,8 0 0,93 72,44 1,48 10,6 0,87 1,24 83,06 5,37 1,93 0,14 0,41 77,03 0,6 11,6 0,36 1,09 71,66 0,57 11,8 0 0,34 67,24 3,95 17,6 0,26 0,92 60,57 13,1 6,38 0,34 4,78 63,99 3,43 11,7 0,42 1,34 80,6 3,9 4,87 0 0 72,99 3,08 9,72 0,54 1,63 7 3,74 3,11 5,07 1,1 2,54 1,6 0 5,29 4,69 5,31 2,98 8 3,21 2,48 0,37 1,65 0,97 0,8 3,16 1,17 1,84 2,66 1,67 9 0,178 0 0,124 0,413 0,121 0,914 0 0,084 0,754 0,266 0,387 10 2,32 1,86 7,79 5,92 5,68 12,3 6,84 8,31 11,8 2,39 7,01 2,964 0,6 1,85 0,14 0,32 0,49 0,18 0,086 0,99 13,58 2,73 8,46 0,66 1,47 2,27 0,84 0,393 4,53 184,5 7,47 71,5 0,44 2,16 5,13 0,71 0,154 20,5 49,55 12,7 31,1 2,46 5,91 9,6 2,84 1,415 16,6 39,24 0,41 0,53 0 0 0 0,37 0 0,71 88,79 13,1 31,6 2,46 5,91 9,6 3,21 1,415 17,3 1533 64,7 204 11,3 34,2 62,5 35,1 8,137 147 21 21 21 21 21 21 21 21 21 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя. 1-я группа+ 2 группа) 46,03 70,71 79,48 64,42 31,87 71,2 80,59 71,12 59,13 69,72 60,19 47,64 62,92 77,45 57,7 70,26 59,3 61,79 60,44 53,23 56,83 62,24 62,47 2,7 5,54 2,59 2,56 2,94 2,34 4,42 3,95 2,55 15,1 13,1 5,87 3,93 2,73 3,44 9,48 0,83 1,61 5,55 15,4 5,4 5,44 5,34 25,2 5,01 5,66 8,97 34,2 11,5 3,21 1,22 6,77 8,52 8,9 23,3 1,4 4,33 15,4 3,1 15,9 14,5 18,8 6,8 16,5 3,93 11 0,75 3,69 0,24 0 0 0,44 1,2 1,52 1,4 0 0 0,65 0,28 1,14 1,97 0,33 0,83 0,18 0,74 0,68 0,45 0,91 0,79 4,95 0 1,89 2,88 8,81 0,88 2,01 4,26 3,19 0 1,17 2,1 3,09 2,05 2,46 0,65 1,24 0,71 1,66 5,98 1,71 0,3 2,36 6 5,28 5,66 8,33 3,35 0 1,47 3,34 5,49 6,62 11 4,71 10,1 5,24 10,2 1,63 5,37 2,86 0,09 7,34 5,94 12,1 5,55 1,95 1,06 0,94 1,28 1,68 3,51 2,54 2,74 4,98 0 2,58 2,97 10,1 3,64 0,16 4,41 2,69 1,79 5,73 1,36 2,25 4,83 2,87 0,45 0 0 0,481 0 1,901 0,535 3,343 0,383 0 0 0,87 0,562 0,228 0,328 0,327 0,413 3,571 0,185 0,408 1,259 0,604 0,72 12 8,71 3,54 11,1 17,2 8,19 4,02 8,51 16,1 0 3,04 11,9 7,58 3,19 8,36 9,8 13,4 13 6,84 8,84 9,71 9,67 8,85 2,451 0,89 1,83 0,18 0,45 0,72 0,47 0,211 0,92 293 Окончание приложения Ц 1 Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 2 3 4 5 6 7 8 9 11,5 4,19 8,6 0,84 2,11 3,36 2,22 0,992 132,2 48,72 31,87 80,59 1374 22 17,6 14,5 0,83 15,4 117 22 74 33 1,22 34,2 243 22 0,71 4,46 3,69 8,81 0 0 3,69 8,81 17,4 52 22 22 11,3 12,1 0 12,1 122 22 4,94 10,1 0 10,1 63,2 22 0,984 3,571 0 3,571 15,85 22 10 4,3 18,5 17,2 0 17,2 195 22 294 Приложение Ш Морфологические исследования спермы быков-производителей Кличка быка 1 Барбарис Бриллиант Быстрый Вихрь Волос Грозовой Дивный Зоркий Ирис Иркут Карат Коралл Летун Мартен Модист Одуванчик Поклонник Потешный Пряник Пунш Родной Севок Стриж Теремок Тигр Треф Умелый Фотон Хваткий Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Кличка Барбарис Бриллиант Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ 2 3 4 5 6 (Зимний сезон. Нативное семя) 71,834 5,895 6,114 0,7 0,22 68,724 0,823 20,99 0 0 77,208 1,709 11,4 0,9 4,84 64,479 12,36 16,22 0 0 78,638 1,238 5,882 0 2,32 84,634 5,522 0,6 0 0 84,583 8,021 0,625 0 0,31 80,294 10,69 1,572 0,6 1,57 41,736 0 9,504 0 24,8 82,545 5,091 8 1,5 0,36 65,591 0 33,69 0 0 74,672 7,317 7,692 0 0 82,707 3,759 5,764 0 0 83,441 6,468 0,259 0,1 1,29 89,021 2,625 1,909 0 0 47,971 11,93 25,78 0 7,64 75,068 2,168 5,42 0 1,36 87,805 0,717 2,296 0,9 0,43 61,134 0 35,63 0 0 82,315 0 5,788 0 0 47,577 7,489 40,97 0 0 80,562 3,912 6,968 0 0,24 83,111 1,778 4,444 0 0,89 74,385 0,615 11,27 1,2 1,02 97,565 0,87 0 0 0 87,349 5,422 0,602 1,1 0,24 75,904 1,807 20,48 0 0 93,056 0 0 0 0,69 63,455 0,664 21,59 0 0 78,403 2,904 5,445 0 2,9 75,53 3,73 10,6 0,23 1,7 2,418 0,67 2,07 0,08 0,85 РХ 7 СХ 8 6,5502 0,4115 0 5,4054 2,4768 0 0 0 21,074 0 0,3584 0 0,7519 0 0 4,7733 2,439 1,7217 0 7,717 3,9648 0 0,4444 1,4344 0 0,8434 0 1,3889 0 2,5408 2,14 0,76 1,092 0,44 0 3,7 0 0 0 1,54 0 0,15 0,84 0,24 1,875 1,35 0,629 0,63 0 0,41 0 0 0 0 0 0 0 0 1,164 0,91 1,909 0,72 0 0,95 3,794 0,27 3,156 0,14 0 0 0 0 0 0 2,078 0 1,333 0,22 0 0 0,348 0 1,807 0,36 1,807 0 0,347 1,04 0 0 0 0 0,74 0,436 0,19 0,138 13,24 3,68 11,4 0,44 4,67 4,17 175,3 13,5 129 0,19 21,8 17,4 55,83 12,4 41 1,45 24,8 21,1 41,74 0 0 0 0 0 97,57 12,4 41 1,45 24,8 21,1 2266 112 317 6,9 51,1 64,3 30 30 30 30 30 30 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ 74,85 2,73 3,64 0,3 2,73 6,36 53,28 5,6 13,9 0,73 6,08 9,49 1,04 1,09 3,79 0 3,79 22,2 30 ТР 9 СГ 10 7,205 5,35 3,989 0 9,288 8,163 3,229 3,983 2,479 2,545 0,358 10,32 7,018 6,339 3,819 0,955 9,485 2,869 3,239 4,18 0 6,235 7,778 10,04 1,217 2,289 0 3,472 14,29 7,804 4,93 0,66 0,758 0,575 3,704 0 3,704 13,09 30 3,62 13,1 14,3 0 14,3 148 30 СХ ТР 0,61 0,303 2,68 0 СГ 8,48 8,27 295 1 Быстрый Вихрь Волос Грозовой Дивный Зоркий Ирис Иркут Карат Коралл Летун Мартен Модист Одуванчик Поклонник Потешный Пряник Пунш Родной Севок Стриж Теремок Тигр Треф Умелый Фотон Хваткий Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Барбарис Баритон Бриллиант Быстрый Вихрь Волос Грозовой Дивный Продолжение приложения Ш 2 3 4 5 6 67,12 1,02 20,7 1,36 5,76 63,96 2,83 27,6 2,83 0 73,32 3,02 8,56 0 1,34 87,75 0,22 4,16 0 0 71,6 6,57 7,98 0,47 0 82,93 4,99 1,13 0 0 54,39 0,21 21,6 0,43 0,86 54,65 1,16 23,7 0,23 0,23 61,36 2,76 4,25 0,21 4,88 70,73 3,9 9,76 0 0 73,66 6,11 6,11 0 0 85,19 0,93 4,63 0 0 79,82 1,97 1,32 0 0 52,55 12,4 18,2 0 9,87 71,78 5,52 7,06 0 0 68,22 3,74 8,88 1,17 0 71,67 2,9 0,68 0 12,1 26,88 4,62 47,7 0 0 61,56 4,2 23,7 0 0 67,42 0 29 3,62 0 76,9 2,72 5,98 0 1,09 62,7 6,29 10,3 0 3,6 86,42 1,17 1,17 0 0,7 90,91 0 5,76 0 0 69,03 1,33 19,5 0 0 63,6 0 12,7 0 0 40 0 0 0 37,8 64,24 3,78 11,6 0 6,69 67,62 3,09 12 0,38 3,12 2,537 0,5 1,97 0,16 1,33 13,9 2,73 10,8 0,85 7,29 193,2 7,43 117 0,73 53,2 64,03 12,4 47,7 3,62 37,8 26,88 0 0 0 0 90,91 12,4 47,7 3,62 37,8 2028 92,7 361 11,3 93,7 30 30 30 30 30 (Весенний сезон. Нативное семя) 89,8 84,5 78,6 80,7 69,6 82,2 93,2 88,6 1,63 1,91 1,16 0,78 0,66 0,73 0,8 6,04 1,46 0,68 7,4 5,31 14,9 5,61 0,69 0,6 0,49 0,14 1,31 0,52 0 0 0 0 1,14 2,18 2,77 2,59 0,44 1,46 0 0 7 8 0 2,12 1,85 1,53 5,87 0 7,92 6,28 12,7 1,95 0 4,63 11 0 2,76 0 0 20,5 0 0 3,53 2,02 3,04 2 0 6,14 12,8 5,52 4,33 0,9 0 0 0 3,06 0 0,48 0,86 0,23 0,42 1,46 0 0 0 0 1,53 8,64 1,37 0 0 0 1,36 0,9 3,28 0 1,77 0 2,22 0 1,03 0,32 9 1,695 0 0 0,438 0,704 8,052 0 0,465 0 0 0 0,309 0,439 1,911 0 0 0,683 0 0 0 0,272 0,225 3,279 0,222 0 1,754 0 0 0,692 0,289 10 2,37 0,71 11,9 2,84 6,81 2,42 13,7 13 13,4 12,2 14,1 4,32 5,48 5,1 11,3 9,35 10,6 0,29 10,5 0 8,15 13,9 0,94 1,11 8,41 15,8 7,22 8,14 7,7 0,88 4,95 24,5 20,5 0 20,5 130 30 1,75 3,07 8,64 0 8,64 30,9 30 1,584 2,509 8,052 0 8,052 20,75 30 4,81 23,1 15,8 0 15,8 231 30 2,602 2,725 4,391 1,036 4,814 1,463 1,72 0 0,3 2,7 0,3 1,8 0 0 1,9 0,6 0 0 0,23 0,65 0 0 0,57 0,48 2,6 5,18 3,85 6,61 9,63 8,54 1,03 3,62 296 1 Зоркий Ирис Иркут Карат Коралл Кувшинчик Ласковый Летун Мартен Модист Одуванчик Пловец Поклонник Потешный Пряник Пунш Родной Севок Стриж Творец Теремок Тигр Треф Умелый Фотон Хваткий Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Барбарис Баритон Бриллиант Быстрый Вихрь Волос Грозовой Дивный Зоркий Ирис Продолжение приложения Ш 2 3 4 5 6 82,8 8,15 0,91 0 0 82,3 0,15 9,43 0 1,02 87,1 1,31 4,5 0,19 0,19 80,7 0,89 8,59 0 1,61 74 2,75 7,63 0,25 1,13 87,1 0,68 2,89 0 0,51 76,6 2,3 1,05 0,42 2,93 86,8 0,34 3,95 0,34 0,52 87,4 2,59 1 0,42 1,59 85,8 2,43 1,29 0,81 1,78 81,9 0,82 4,23 0,1 0,93 76,5 1 7,85 0 2 68,3 3,47 12,8 0 0,27 88,1 0,34 3,85 0,17 1,68 88,5 0,71 1,77 0,12 0,71 83,5 1,18 4,72 0,47 0,24 68,4 3,86 13,9 0 2,73 82,4 4,22 6,21 1,99 0 81,2 1,56 4,52 0 0,93 85,3 0,35 2,09 1,57 0,52 84,7 0,67 6,12 0,22 1,56 87,2 2,1 5,56 0 1,05 85,4 5,37 2,44 0 0 85,4 0 3,5 0,64 0,64 74,9 7,55 5,1 0 0,41 83,8 0,54 7,64 0,15 0,39 63,8 2,21 10,3 0 4,43 81,9 2,04 5,15 0,29 1,15 1,14 0,35 0,64 0,08 0,18 7 0 1,742 1,313 3,936 2,125 3,401 12,97 1,546 1,589 0,485 1,443 3,138 2,4 2,68 2,591 7,783 2,045 0 3,115 4,014 1,002 1,201 0,488 2,229 3,265 1,158 4,225 2,59 0,407 6,77 2,05 3,81 0,47 1,04 2,41 45,8 4,21 14,5 0,22 1,08 5,809 29,5 8,15 14,3 1,99 4,43 12,97 63,8 0 0,6 0 0 0 93,2 8,15 14,9 1,99 4,43 12,97 2867 71,2 180 10,3 40,3 90,64 35 35 35 35 35 35 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) 78,8 2,05 6,14 0 1,71 9,556 78,4 1,57 1,39 0 2,26 4,522 64,1 0,6 15 0,4 0,8 12,38 73,9 0 1,61 0,97 6,13 9,355 77,8 0,51 1,02 0,51 2,37 5,932 74,8 0,48 9,26 0 1,66 2,138 74,2 0,79 8,13 0,79 0,4 3,77 72,5 2,8 6,36 0 1,27 10,43 62,4 6,07 11,7 0,49 1,7 14,32 62,6 0,18 16,7 0,36 0,72 6,475 8 0,9 0,9 0,6 0,2 1,4 0 0,4 0,9 1,3 3,4 0,2 0,3 2,9 0 0,5 0 0 1,1 1,2 1,9 0,3 0,3 2,8 0 0,2 0,5 0 0,9 0,2 9 3,62 0 0 0 0 0,34 0 0 0,59 0,97 3,4 0,29 0 0 0,12 0,47 0 0 0,31 0,35 0 0,9 0,81 0 0,82 0,08 0 0,43 0,14 10 3,62 4,5 4,88 4,11 10,8 5,1 3,35 5,67 3,51 3,07 7,01 8,99 9,87 3,18 5,06 1,65 9,09 4,1 7,17 3,84 5,35 1,65 2,76 7,64 7,76 5,79 15,1 5,59 0,51 1 0,9 3,4 0 3,4 30 35 0,83 0,69 3,62 0 3,62 15 35 3,02 9,1 14,1 1,03 15,1 196 35 1 2,3 0 0,8 3,4 0 7,5 1,8 0,7 0,7 0 0,17 2,99 0,65 0,17 0 1,19 0 0 0 0,68 9,39 3,79 6,61 8,31 11,6 3,17 4,83 2,67 12,2 297 1 Иркут Карат Коралл Кувшинчик Ласковый Летун Мартен Модист Одуванчик Пловец Поклонник Потешный Пряник Пунш Родной Севок Стриж Творец Теремок Тигр Треф Умелый Фотон Хваткий Черѐд Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 2 62,1 63,6 63,7 82,2 80,8 71,8 80,9 78,5 70,5 67 65,2 73,8 57,5 55,6 81,3 82,4 77,3 74,9 64,8 80,2 75,1 77 67,7 66,1 71,8 71,8 1,27 7,51 56,4 26,7 55,6 82,4 2511 35 Окончание приложения Ш 3 4 5 6 1,47 15,9 0,24 0,24 2,72 2,95 0 2,5 4,54 12,3 1,46 2,78 0,8 3,2 0 0,64 1,48 0,99 0 2,96 6,81 9,29 0 0 2,53 4,37 0 0,46 3,55 5,91 0 1,42 2 8,6 0,46 1,38 1,83 7,07 0 2,88 3,94 14,8 0 0 0,73 3,91 0 3,67 4,66 1,04 0 16,1 7,02 18,3 0,28 1,12 0 0,35 0,35 1,05 1,39 1,86 0,46 2,01 3,17 5,28 0,26 1,58 1,08 5,73 2,51 0 2,78 4,22 0,22 3,78 5,78 3,04 0 0 2,36 6,3 0,26 2,62 1,17 12,5 0 0 0 10,3 3,42 2,28 0,36 8,71 0 10,7 3,78 6,96 0,2 2,98 2,31 7,17 0,39 2,35 0,34 0,84 0,12 0,53 1,98 3,94 7,02 0 7,02 81 35 5 25 17,9 0,35 18,3 251 35 0,73 0,53 3,42 0 3,42 13,7 35 3,13 9,79 16,1 0 16,1 82,1 35 7 6,846 19,75 4,392 4,96 4,762 0 1,839 3,546 2,919 7,853 2,121 10,51 5,181 17,42 2,269 4,489 3,166 6,989 14,67 3,343 11,81 0 4,183 8,711 4,175 6,708 0,811 8 0,2 2,6 0,1 1,3 3,4 0,9 2,1 5 0,8 0,3 3 2,9 1,6 0,3 3,1 0,5 1,6 4,1 1,3 1,8 0,3 1,6 0 0,7 0 1,7 0,3 9 0,49 0 0 0,16 0 0,62 0 1,89 6,3 0,26 0 0 1,81 0 1,57 0,31 0,79 0,36 0,11 1,52 0,26 0 1,14 0,18 0 0,66 0,21 10 12,5 5,9 10,7 6,72 5,58 10,5 7,82 0,24 7,07 12,8 10,9 4,4 12,2 0 9,95 6,66 6,86 4,3 8,11 4,26 1,05 7,78 11 4,54 10,1 7,01 0,63 4,799 23,03 19,75 0 19,75 234,8 35 1,7 2,7 7,5 0 7,5 58 35 1,21 1,47 6,3 0 6,3 23 35 3,74 14 12,8 0 12,8 245 35 298 Приложение Щ Морфологические исследования спермы быков-производителей Европейская часть России (место происхождения быков) Кличка быка 1 Беляш Важный Визитѐр Владыка Влажный Гипс Дарѐный Дуплет Изумруд Король Лекторий Лимон Лирик Мирный Тагил Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Беляш Важный Визитѐр Владыка Влажный Гипс Дарѐный Дуплет Изумруд Король Лекторий Лимон Лирик Формы сперматозоидов, % норма ОХ ЗХ ДГ РГ РХ 2 3 4 5 6 7 (Зимний сезон. Нативное семя) СХ 8 ТР 9 СГ 10 87,05 84,99 90,82 74,63 72,98 91,96 72,02 66,33 79,2 65,77 94,52 65,17 88,18 87,14 84,69 80,36 0 2,44 0 5,25 2,17 0,25 4,73 3,32 2,31 1,92 2,15 0 1,36 0 2,38 1,89 11,4 7,13 5,1 5,57 18,9 4,52 10,8 16,6 6,93 16,9 1,91 0 2,5 12,9 1,67 8,19 0 0 0 0,32 0 0 3,59 1,99 0,31 0 0 0 0,23 0 0 0,43 0,52 0 4,08 0,21 0 0,25 1,51 6,47 0,46 0 0 0 0 0 0 0,9 0 0 0 5,78 0,93 1,51 1,51 3,81 0,92 7,69 0 16,4 0,45 0 0,87 2,66 0,52 0 0 1,5 0 0 0,19 0 2,47 0 0 0 1,82 0 0,79 0,49 0,518 0 0 0,535 4,969 0,251 1,323 1,327 0,154 4,615 0 11,44 0,227 0 7,851 2,214 0 5,44 0 6,21 0 1,26 4,35 0,17 7,24 3,08 1,43 6,97 5,23 0 1,74 2,87 2,614 0,43 1,57 0,26 0,48 1,15 0,21 0,898 0,72 10,12 1,68 6,07 1,01 1,87 4,45 0,8 3,477 2,77 102,5 2,82 36,8 1,02 3,51 19,8 29,34 5,25 18,9 3,59 6,47 16,4 65,17 0 0 0 0 0 94,52 5,25 18,9 3,59 6,47 16,4 1205 28,3 123 6,44 13,5 39,9 15 15 15 15 15 15 (Зимний сезон. Криоконсервированное семя) 68,58 7,25 8,76 0 3,32 0 77,83 1,3 14,3 0 0 0 43,77 0 24,5 0 31,7 0 55,52 4,22 3,25 0,97 0,97 7,47 78,39 0,5 0 1,51 0 9,55 30,03 50,2 15,4 0 0 3,75 52,61 0 31,7 0 1,2 10,8 55,02 4,84 15,2 0,35 0,69 3,11 63,44 4,84 9,41 0 0 0 50 0 0 0 6,41 17 94,15 1,11 3,34 0 0 0 62,06 1,36 13,8 0,81 2,71 12,5 69,75 1,68 5,46 0,84 0,42 1,68 0,64 2,47 0 2,47 7,28 15 12,09 11,44 0 11,44 33,21 15 7,69 7,24 0 7,24 43,1 15 0,6 0 0 11 0 0 0 0,35 6,45 6,73 0 2,44 4,2 0 0 0 6,494 0 0,683 0,402 0,346 0 0 1,393 0,542 0,84 11,5 6,52 0 10,1 10,1 0 3,21 20,1 15,9 19,9 0 3,79 15,1 299 1 Мирный Тагил Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Беляш Важный Визитѐр Владыка Влажный Гипс Дарѐный Дуплет Изумруд Король Лекторий Лимон Лирик Мирный Тагил Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Беляш Важный Визитѐр Владыка Влажный Гипс Продолжение приложения Щ 2 3 4 5 6 85,68 0,87 0,65 0 0,43 89,29 0 7,5 0 0 65,07 5,21 10,2 0,3 3,19 7 6,94 1,43 4,95 8 9 0,43 0 0 0 2,15 0,713 10 4,99 1,79 8,19 4,628 3,26 2,37 0,13 2,09 1,41 0,88 0,427 1,83 17,93 12,6 9,17 0,49 8,08 5,46 3,42 1,652 7,08 29,9 17 0 17 74,2 15 11,7 2,73 11 6,494 0 0 11 6,494 32,2 10,7 15 15 50,1 20,1 0 20,1 123 15 321,3 160 84,1 0,24 65,3 64,12 50,2 31,7 1,51 31,7 30,03 0 0 0 0 94,15 50,2 31,7 1,51 31,7 976,1 78,1 153 4,48 47,9 15 15 15 15 15 (Весенний сезон. Нативное семя) 79 0,78 10,8 0,21 1,28 80,2 3,53 6,18 0,25 0,88 76 4,02 5,22 0,4 4,92 81 2,45 3,99 0,26 0 69,3 1,75 12,3 0 0 86,2 2,35 6,01 0,15 0,73 73,1 0,77 8,46 0,13 2,31 78,2 1,34 4,7 0 0,67 87,2 2,55 4,45 0,32 0,21 66,8 1,58 13,3 1,27 2,53 88,1 3,33 1,43 0,95 0,48 82,9 0,71 5,45 0,16 0,39 87,2 0,77 2,3 0 0 91,4 0 7,56 0 0 91,1 2,14 0,63 0,38 0 81,2 1,87 6,18 0,3 0,96 2,279 2,144 1,004 3,861 2 1,173 4,744 0,671 1,166 6,646 1,27 1,343 0,512 0 2,01 2,055 0,4 0,5 0,3 0,6 0 0,4 1,5 0,7 0,3 0,6 1,1 0,2 1,5 1 0,3 0,6 0 0,38 0,6 0,13 4,75 0,44 0,13 0 0 3,8 0 0,24 0,26 0 2,26 0,87 5,2 5,93 7,53 7,72 10 2,49 8,85 13,8 3,82 3,48 3,33 8,61 7,42 0 1,26 5,96 1,96 0,3 0,97 0,09 0,35 0,457 0,1 0,39 0,95 7,6 1,18 3,74 0,36 1,36 1,772 0,5 1,51 3,67 57,7 1,39 14 0,13 1,85 3,139 24,6 4,02 12,7 1,27 4,92 6,646 66,8 0 0,63 0 0 0 91,4 4,02 13,3 1,27 4,92 6,646 1217 28,1 92,8 4,47 14,4 30,82 15 15 15 15 15 15 (Весенний сезон. Криоконсервированное семя) 58,4 4,42 11,8 2,95 3,24 5,605 85,5 2,16 0,67 0 2 3,161 66,7 1,05 4,48 0,6 1,05 14,05 69,7 3,11 2,14 0,78 0,97 3,107 68,2 1,18 9,71 0,88 1,47 4,118 67,3 20,8 6,33 0 0 1,583 0,2 1,5 0 1,5 9,6 15 2,27 4,75 0 4,75 13 15 13,4 13,8 0 13,8 89,4 15 1,2 1,7 1 6,2 2,4 0 1,18 0 0,3 3,3 0,88 0,79 11,2 4,83 10,8 10,7 11,2 3,17 300 1 Дарѐный Дуплет Изумруд Король Лекторий Лимон Лирик Мирный Тагил Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Дисперсия выборки Интервал Минимум Максимум Сумма Счет 2 75,4 78,3 79,3 61,2 72 62,9 77,7 82,1 66,7 71,4 Окончание приложения Щ 3 4 5 6 5,18 9,71 0 0,97 2,36 9,67 0 0 4,89 1,79 0,16 2,61 0,85 2,97 0 2,97 3,5 7,66 0,22 1,75 0,38 6,81 0,38 1,32 3,76 1,88 0,54 0,54 0,59 1,03 0 0,29 4,16 9,36 0,17 0,69 3,9 5,73 0,45 1,32 7 6,796 0,472 3,1 9,181 8,972 22,87 0,806 11,44 13 7,217 8 0 0 2,4 2,8 0,7 1,1 1,1 0,3 3,5 1,6 9 0,32 0 0,49 0,42 0,66 0,19 0,81 0 0,69 0,67 10 1,62 9,2 5,22 19,6 4,6 3,97 12,9 4,25 1,73 7,66 2,07 1,28 0,98 0,2 0,26 1,59 0,4 0,21 1,3 8,01 4,96 3,8 0,76 1,02 6,159 1,7 0,81 5,05 64,2 27,1 58,4 85,5 1071 15 24,6 20,5 0,38 20,8 58,4 15 14,5 11,1 0,67 11,8 86 15 0,57 2,95 0 2,95 6,68 15 37,93 22,4 0,472 22,87 108,3 15 2,8 6,2 0 6,2 24 15 0,66 3,3 0 3,3 10 15 25,5 18 1,62 19,6 115 15 1,04 3,24 0 3,24 19,9 15 301 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 Приложение Э Показатели молочной продуктивности коров-первотѐлок ОАО ПЗ «Красный маяк» Канского района Показатели молочной продуктивности n/n удой за 305 дней лактации % жира % ,белка 1 2 3 4 генотип по гену каппа-казеина АА 4740 3,99 3 7288 3,79 2,99 5708 3,89 2,98 5634 3,98 3,04 6708 3,99 3,01 4543 3,99 2,93 4459 3,81 2,91 5933 3,84 2,92 6351 3,92 3,01 6424 3,87 2,91 5798 3,97 2,94 5168 3,96 2,96 6247 3,73 2,98 6729 3,73 2,9 6308 3,97 2,97 5520 3,95 3,03 5240 3,87 2,95 7387 3,83 2,97 5221 3,89 2,92 4977 3,75 2,96 5282 3,8 2,97 6163 3,9 3 4117 3,86 2,94 4100 4,01 3,01 4232 3,9 2,9 4077 4 2,97 5253 3,98 2,94 6119 3,84 2,96 5107 3,96 3,09 4787 3,98 3,03 6383 4,01 3,03 4458 3,8 2,8 7340 3,97 2,99 5334 3,92 2,99 6603 3,79 2,96 5219 3,95 2,96 302 1 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Интервал Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) 1 Продолжение приложения Э 2 7111 5424 5817 5410 5088 5962 6342 5187 5673 5348 6597 7445 7282 6999 5214 6545 5043 5435 7107 6557 5238 7163 5434 6171 6692 6077 6554 5807,49 114,57 909,443 3368 4077 7445 365872 63 229,04 генотип по гену каппа-казеина АВ 5960 3 3,89 3,95 3,85 3,98 3,95 3,93 3,88 3,76 3,91 3,85 3,89 3,9 3,97 3,87 3,94 3,97 3,96 3,96 3,97 3,92 3,96 3,83 3,85 3,85 3,92 4 3,92 3,905 0,00931 0,0739 4 2,97 2,97 3,01 3 3,06 2,93 2,94 3,03 2,98 2,94 2,89 3,01 2,99 2,96 3,06 2,96 2,96 2,96 3,01 2,98 2,99 2,93 2,95 3 2,95 3,07 2,97 2,97285 0,006 0,048 0,28 3,73 4,01 246,02 63 0,0186 0,29 2,8 3,09 187,29 63 0,012 3,98 3,02 303 Продолжение приложения Э 2 2 6584 3 5555 4 5419 5 6102 6 5759 7 8105 8 6035 9 6037 10 4031 11 5423 12 6118 13 5802 14 5498 15 5080 16 6220 17 5150 18 5585 19 4654 20 5361 21 4088 22 5780 23 6309 24 5356 25 6114 26 6706 27 7241 28 5010 29 5549 30 5611 31 6036 32 7521 33 7832 34 6497 35 5354 36 5384 37 6890 38 5144 Среднее 5865,78 Стандартная ошибка 143,767 Стандартное отклонение 886,242 Интервал 4074 Минимум 4031 1 3 3,82 3,76 4,06 3,98 3,99 3,91 3,9 3,9 4,03 3,94 3,92 3,75 4,08 3,98 4,02 3,9 3,92 3,62 3,89 3,86 3,98 3,96 3,92 3,98 3,94 3,81 4,02 4,01 4,07 3,91 4,1 3,9 3,85 4 3,9 3,87 3,85 3,9284 0,0158 0,0979 0,48 3,62 4 2,94 2,96 2,87 3,08 3 2,98 2,95 3,1 2,97 3,01 2,89 3,02 2,99 3 2,83 2,93 2,99 2,92 3 2,83 2,99 2,96 2,97 3,06 3,02 2,98 3 3,05 3,02 2,94 2,92 2,91 2,92 3 3,06 3 2,97 2,975 0,0099 0,061 0,27 2,83 304 1 Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) Окончание приложения Э 2 8105 222900 38 291,3005 генотип по гену каппа-казеина ВВ 1 4841 2 5433 3 5438 4 5696 Среднее 5352 Стандартная ошибка 181,064 Стандартное отклонение 362,129 Интервал 855 Минимум 4841 Максимум 5696 Сумма 21408 Счет 4 Уровень 576,229 надежности(95,0%) 3 4 4,1 149,28 38 0,0321 3,1 113,05 38 0,0202 4,07 4,12 3,99 3,85 4,0075 0,05893 0,1178 0,27 3,85 4,12 16,03 4 0,1875 2,99 3,02 2,95 3,02 2,995 0,0165 0,03316 0,07 2,95 3,02 11,98 4 0,0527 305 Приложение Ю Качество спермопродукции быков в зависимости от гена каппа-казеина Показатели качества спермопродукции Кличка быка получено семени объем концентрация всего мл эякулята, мл млрд/мл 1 2 3 4 симментальская порода генотип по каппа-казеину АВ Марс 406 4,19 1,15 Маневр 270 3,56 0,97 Хаммер 563 4,54 1,06 Факел 34 2,83 0,76 Раджа 182 4,1 0,94 Среднее 291 3,844 0,976 Стандартная ошибка 90,989 0,298 0,065 Стандартное отклонение 203,45 0,6668 0,146 Минимум 34 2,83 0,76 Максимум 563 4,54 1,15 Сумма 1455 19,22 4,88 Счет 5 5 5 Уровень 252,62 0,827 0,181 надежности(95,0%) генотип по каппа-казеину АА Корт 765 4,8 1,09 Майор 509 4,3 1,32 Среднее 637 4,55 1,205 Стандартная ошибка 128 0,25 0,115 Стандартное отклонение 181,01 0,353 0,162 Минимум 509 4,3 1,09 Максимум 765 4,8 1,32 Сумма 1274 9,1 2,41 Счет 2 2 2 Уровень 1626,39 3,176 1,461 надежности(95,0%) голштинская красно-пѐстрая генотип по каппа-казеину АВ Дизайн 938 4,17 1,25 Довод 430 3,45 0,98 Дубль 1705 4,99 1,36 Дизель 842 4,3 1,05 Среднее 978,75 4,2275 1,16 Стандартная ошибка 265,9772 0,315499 0,087845 Стандартное отклонение 531,9545 0,630998 0,175689 306 1 Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) Продолжение приложения Ю 2 3 430 3,45 1705 4,99 3915 16,91 4 4 846,4583 1,004058 генотип по каппа-казеину АА Дуэт 1434 4,3 Дюшес 1672 5,08 Делец 837 4,62 Доклад 870 3,9 Допрос 1079 4,06 Среднее 1178,4 4,392 Стандартная ошибка 162,8676 0,210485 Стандартное отклонение 364,1831 0,470659 Минимум 837 3,9 Максимум 1672 5,08 Сумма 5892 21,96 Счет 5 5 Уровень 452,193 0,5844 надежности(95,0%) красно-пѐстрая порода генотип по каппа-казеину АА Итог 291 3,1 Вильнюс 866 4,38 Видный 381 3,53 Крекер 478 5,15 Клевер 597 3,3 Крест 589 4,32 Енисей 812 3,8 Рефлекс 731 4,15 Хороший 720 5,3 Холод 767 4,32 Предлог 724 4,05 Фужер 904 4,45 Эверест 929 4,28 Эмир 409 3,99 Фантом 500 3,85 Импульс 376 3,96 Вагон 261 4,35 Волан 155 3,88 4 0,98 1,36 4,64 4 0,279561 1,27 1,08 1,1 1,29 1,37 1,222 0,056515 0,126372 1,08 1,37 6,11 5 0,156912 0,46 1,37 0,73 1,13 1,04 1,22 1,06 1,17 1,23 1,31 1,21 1,2 1,08 1,03 0,97 1,41 0,97 0,95 307 Продолжение приложения Ю 1 2 3 Меч 327 4,09 Восторг 264 4,19 Допуск 106 4,24 Турист 119 3,61 Дымок 176 4,09 Дождь 217 4,34 Динар 66 3,3 Турнир 41 2,73 Космос 341 4,4 Хомут 188 3,6 Среднее 440,53 4,026 Стандартная ошибка 52,33 0,103 Стандартное отклонение 276,95 0,550 Минимум 41 2,73 Максимум 929 5,3 Сумма 12335 112,75 Счет 28 28 Уровень надежности(95,0%) 107,39 0,213 4 1,16 0,98 0,92 1,27 1,06 1,09 0,76 0 0,99 0,63 1,014 0,055 0,293 0 1,41 28,4 28 0,113 генотип по каппа-казеину АВ Валдай Идеал Витэк Кэш Ватикан Выход Ресурс Мук Статус Денди Муром Летчик Среднее Стандартная ошибка Стандартное отклонение Минимум Максимум Сумма Счет Уровень надежности(95,0%) 1323 992 463 526 1528 1019 413 186 79 31 60 152 564,33 151,15 523,62 31 1528 6772 12 332,69 5,86 4,66 4,1 4,3 4,8 5,1 3,98 6 4,16 2,88 3,3 4,5 4,47 0,264 0,915 2,88 6 53,64 12 0,581 1,19 0,96 1,06 1,01 1,3 1,19 0,85 0,97 0,69 1,25 1,38 1,37 1,1016 0,061 0,21 0,69 1,38 13,22 12 0,136 308 Продолжение приложения Ю 1 2 3 4 генотип по каппа-казеину ВВ Кедрач 1019 4,94 Родник 625 4,34 Среднее 822 4,64 Стандартная ошибка 197 0,3 Стандартное отклонение 278,60 0,424264 Минимум 625 4,34 Максимум 1019 4,94 Сумма 1644 9,28 Счет 2 2 Уровень надежности(95,0%) 2503,122 3,811861 голштинская чѐрно-пѐстрая генотип по каппа-казеину АА Канат 42 3 Канзас 48 3,43 Среднее 45 3,215 Стандартная ошибка 3 0,215 Стандартное отклонение 4,242641 0,304056 Минимум 42 3 Максимум 48 3,43 Сумма 90 6,43 Счет 2 2 Уровень 38,11861 2,731834 надежности(95,0%) черно-пѐстрая порода генотип по каппа-казеину АА Визит 21 3 Барс 262 3,8 Воск 251 3,92 Вызов 3 3 Среднее 134,25 3,43 Стандартная ошибка 70,7123 0,249466 Стандартное отклонение 141,4246 0,498932 Интервал 259 0,92 Минимум 3 3 Максимум 262 3,92 Сумма 537 13,72 Счет 4 4 Уровень 225,0381 0,793912 надежности(95,0%) 1,24 1,16 1,2 0,04 0,056 1,16 1,24 2,4 2 0,508 0,59 0,68 0,635 0,045 0,06364 0,59 0,68 1,27 2 0,571779 0 0,95 1,04 0,94 0,7325 0,2452 0,490399 1,04 0 1,04 2,93 4 0,780335 309 Окончание приложения Ю 1 2 3 генотип по каппа-казеину АВ Вечер 308 4,28 Тонус 358 5,87 Среднее 333 5,075 Стандартная ошибка 25 0,795 Стандартное отклонение 35,35534 1,1243 Интервал 50 1,59 Минимум 308 4,28 Максимум 358 5,87 Сумма 666 10,15 Счет 2 2 Уровень 317,6551 10,10143 надежности(95,0%) 4 0,99 1,23 1,11 0,12 0,169706 0,24 0,99 1,23 2,22 2 1,524745 310 Приложение Я Качество спермопродукции быков в зависимости от гена каппа-казеина Показатели качества спермопродукции Кличка быка получено семени объем концентрация всего мл эякулята, мл млрд/мл 1 2 3 4 генотип по каппа-казеину АА Корт Майор Дуэт Дюшес Делец Доклад Допрос Итог Вильнюс Видный Крекер Клевер Крест Енисей Рефлекс Хороший Холод Предлог Фужер Эверест Эмир Фантом Импульс Вагон Волан Меч Восторг Допуск Турист Дымок Дождь Динар Турнир Космос 765 509 1434 1672 837 870 1079 291 866 381 478 597 589 812 731 720 767 724 904 929 409 500 376 261 155 327 264 106 119 176 217 66 41 341 4,8 4,3 4,3 5,08 4,62 3,9 4,06 3,1 4,38 3,53 5,15 3,3 4,32 3,8 4,15 5,3 4,32 4,05 4,45 4,28 3,99 3,85 3,96 4,35 3,88 4,09 4,19 4,24 3,61 4,09 4,34 3,3 2,73 4,4 1,09 1,32 1,27 1,08 1,1 1,29 1,37 0,46 1,37 0,73 1,13 1,04 1,22 1,06 1,17 1,23 1,31 1,21 1,2 1,08 1,03 0,97 1,41 0,97 0,95 1,16 0,98 0,92 1,27 1,06 1,09 0,76 0 0,99 311 Продолжение приложения Я 1 2 3 Хомут 188 3,6 Канат 42 3 Канзас 48 3,43 Визит 21 3 Барс 262 3,8 Воск 251 3,92 Вызов 3 3 Среднее 490,9268 3,999024 Стандартная ошибка 60,8764 0,092214 Стандартное отклонение 389,7991 0,590461 Интервал 1669 2,57 Минимум 3 2,73 Максимум 1672 5,3 Сумма 20128 163,96 Счет 41 41 Уровень 123,0358 0,186372 надежности(95,0%) генотип по каппа-казеину АВ Марс 406 4,19 Маневр 270 3,56 Хаммер 563 4,54 Факел 34 2,83 Раджа 182 4,1 Дизайн 938 4,17 Довод 430 3,45 Дубль 1705 4,99 Дизель 842 4,3 Валдай 1323 5,86 Идеал 992 4,66 Витэк 463 4,1 Кэш 526 4,3 Ватикан 1528 4,8 Выход 1019 5,1 Ресурс 413 3,98 Мук 186 6 Статус 79 4,16 Денди 31 2,88 Муром 60 3,3 Летчик 152 4,5 Вечер 308 4,28 Тонус 358 5,87 4 0,63 0,59 0,68 0 0,95 1,04 0,94 1,002927 0,049533 0,317169 1,41 0 1,41 41,12 41 0,100111 1,15 0,97 1,06 0,76 0,94 1,25 0,98 1,36 1,05 1,19 0,96 1,06 1,01 1,3 1,19 0,85 0,97 0,69 1,25 1,38 1,37 0,99 1,23 312 Окончание приложения Я 1 2 Среднее 556,8696 Стандартная ошибка 101,3546 Стандартное отклонение 486,0796 Интервал 1674 Минимум 31 Максимум 1705 Сумма 12808 Счет 23 Уровень 210,1966 надежности(95,0%) Кедрач 1019 Родник 625 Среднее 822 Стандартная ошибка 197 Стандартное отклонение 278,6001 Интервал 394 Минимум 625 Максимум 1019 Сумма 1644 Счет 2 Уровень 2503,122 надежности(95,0%) 3 4,344348 0,177907 0,853212 3,17 2,83 6 99,92 23 0,368957 4 1,085217 0,039761 0,190689 0,69 0,69 1,38 24,96 23 0,08246 4,94 4,34 4,64 0,3 0,424264 0,6 4,34 4,94 9,28 2 3,811861 1,24 1,16 1,2 0,04 0,056569 0,08 1,16 1,24 2,4 2 0,508248 313 314 315 316