Влияние фонового резонансного излучения на уровень

Экспериментальные и клинические исследования
Влияние фонового резонансного излучения на уровень гликогена
в печени при хронической описторхозной инвазии
Поддубная О.А., Белобородова Э.И., Левицкий Е.Ф.
Influence of background resonance radiation on hepatic glycogen level
in chronic opisthorchiasis invasion
Poddoubnaya O.A., Beloborodova E.I., Levitsky Ye.F.
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
 Поддубная О.А., Белобородова Э.И., Левицкий Е.Ф.
Хронический описторхоз — паразитарное заболевание человека с признаками снижения реактивности организма. Один из спосо­
бов оценки реактивности заключается в качественном и количественном анализе гликогена в клетках печени. Уменьшение уровня глико­
гена выступает признаком снижения адаптационных возможностей и проявляется дизрегуляцией приспособительных реакций. Экспери­
ментальные исследования in vivo (модель хронического описторхоза) выявили благоприятное влияние фонового резонансного излуче­
ния на уровень гликогена в печеночной клетке, что косвенно свидетельствует о повышении реактивности организма, а это, в свою очередь,
может способствовать сохранению полноценного морфофункционального состояния печени и предупредить возможное перенапряжение
ее резервных возможностей.
Ключевые слова: описторхоз, реактивность, гликоген печени.
Chronic opisthorchiasis is human parasitologic disease with signs of decreased reactivity of the organism. One of the ways to assess
the organism reactivity is qualitative and quantitative analysis of glycogen in hepatic cells. Decreased glycogen level is a sign of decreased
adaptation possibilities and manifests in disregulation of adaptation reactions. Experimental studies in vivo (model of chronic opisthorchia­
sis) revealed favorable influence of the background resonance radiation on the glycogen level in hepatic cell which indirectly points to in­
creased reactivity of the organism which in turn may contribute to the maintenance of hepatic morphologic-functional status of full value
and to prevent possible overstrain of its reserve possibilities.
Key words: opisthorchiasis, reactivity, hepatic glycogen.
УДК 616.995.122.21:612.352.1
Введение
Описторхоз — паразитарно-аллергическое заболевание
с вовлечением в процесс желчевыделительной системы, пе­
чени и поджелудочной железы. В свете современных дан­
ных хронический описторхоз следует рассматривать как си­
стемное заболевание человека, вызываемое трематодой
Opisthorchis felineus (seu viverrini), паразитирующей в про­
токах печени, желчном пузыре и поджелудочной железе,
оказывающей аллергическое, механическое, нейрогенное
воздействие с возможным присоединением вторичной ин­
фекции, с поражением гельминтом органов его постоянного
обитания, расположенных на путях его миграции, с измене­
нием реактивности организма в целом [10, 16, 17].
В настоящее время существует множество способов и
методов оценки реактивности организма. К числу наиболее
распространенных следует отнести тест на реактивность,
принцип которого состоит в комплексной оценке основных
витальных показателей (частота пульса, дыхания и другие)
до и после выполнения физической нагрузки с последую­
щим выявлением взаимосвязи со степенью развивавшейся
гипоксии. Нередко используются методы оценки реактивно­
сти, основанные на анализе лабораторных и клинических
показателей пациента [2, 3, 12]. Однако большинство из них
опираются на субъективный анализ представлений о том
или ином звене адаптационных и компенсаторных механиз­
мов организма. Часто для оценки реактивности организма
применяются громоздкие, сложные подсчеты (схемы), под­
час требующие проведения дополнительного дорогостоя­
щего исследования, что возможно лишь в специализиро­
ванных учреждениях.
Бюллетень сибирской медицины, № 2, 2007
37
Поддубная О.А., Белобородова Э.И., Левицкий Е.Ф.
Влияние фонового резонансного излучения на уровень гликогена в печени...
Одним из способов оценки реактивности организма,
позволяющих доказать изменение реактивности при патоло­
гических состояниях печени и определить степень влияния
проводимых лечебных мероприятий на этот показатель, яв­
ляется способ, основанный на качественном и количествен­
ном анализе гликогена в клетках печени [2, 14]. Несмотря на
достаточную информативность данного способа, при его ис­
пользовании отсутствует раздельная зональная характери­
стика гепатоцитов с содержанием гликогена, что является
существенным моментом.
Согласно литературным данным, зональная гетеро­
генность гепатоцитов есть динамическая, функциональная
и морфологическая структура как в норме, так и при пато­
логии. Гепатоциты, прилегающие к портальному тракту,
принадлежат к печеночным клеткам 1-й зоны; прилегаю­
щие к центральной вене — к печеночным клеткам 3-й
зоны, а занимающие промежуточное положение между 1-й
и 3-й — ко 2-й зоне [8]. Данное обстоятельство связано с
выполнением клетками разных зон принципиально раз­
личных функций, что, несомненно, отражается на харак­
тере распределения гликогена в цитоплазме печеночных
клеток. При этом для оценки реактивности по уровню гли­
когена имеет значение как количество печеночных клеток
с различным содержанием гликогена, так и равномерность
его распределения. Так, высокое содержание и равномер­
ное распределение гликогена в печеночных клетках сви­
детельствует о высокой функциональной активности без
каких-либо элементов напряженности и соответствует ре­
акции повышенной активации высоких уровней реактивно­
сти; умеренно высокое содержание с равномерным рас­
пределением соответствует реакции спокойной активации
высоких уровней реактивности; умеренно высокое содер­
жание с неравномерным распределением соответствует
реакции спокойной активации низких уровней реактивно­
сти; умеренное содержание с равномерным распределе­
нием соответствует реакции тренировки высоких уровней;
умеренное содержание с неравномерным распределени­
ем соответствует реакции тренировки низких уровней и
т.д. [2].
Уменьшение содержания гликогена выступает призна­
ком снижения адаптационных возможностей и проявляется
дисрегуляцией приспособительных реакций. Изменение ре­
активности организма нередко сопровождается развитием
ряда иммунодефицитных состояний, провоцирует целый
комплекс гиперергических и неблагоприятных реакций [4]. В
38
этой связи возникает необходимость в установлении поло­
жительного влияния проводимого лечения на реактивность
организма больных хроническим описторхозом, что можно
расценивать как прогностически благоприятный объективный
признак.
В клинической практике сегодня с целью дегельминтиза­
ции широко применяются как препараты растительного проис­
хождения (экорсол) [9, 10], так и немедикаментозные средства.
Эффективное (85,5%) растительное средство экорсол хоро­
шо переносится пациентами, но к его назначению имеется
ряд противопоказаний. К современным немедикаментозным
методам лечения относят терапию фоновым резонансным
излучением (ФРИ-терапия) и КВЧ-терапию. Отмечается вы­
сокая чувствительность организма человека к указанным
факторам и их благоприятное влияние на его функциональ­
ное состояние [1, 6, 7, 14, 15].
Целью проводимых исследований было изучение влия­
ния немедикаментозного лечения на уровень неспецифиче­
ской резистентности организма в эксперименте.
Материал и методы
Проведены экспериментальные исследования in vivo с
применением способа оценки реактивности организма по
уровню гликогена в печени при различных методах лечения
хронического описторхоза. Использовался модернизирован­
ный способ, который заключался в том, что реактивность ор­
ганизма определялась не только по относительному содер­
жанию гепатоцитов с высоким содержанием гликогена, но и
по отношению таковых в разных зонах с выведением пока­
зателя реактивности (процентное отношение гепатоцитов с
высоким содержанием гликогена 2-й и 3-й зон к гепатоцитам
с высоким содержанием гликогена 1-й зоны). Это позволило
оценить динамику показателя реактивности организма от
реакций тренировки и стресса, возможностей при показа­
теле реактивности 0,5—0,31 до реакции активации (после
лечения), что свидетельствует о высокой функциональной ак­
тивности без каких-либо элементов напряженности, при по­
казателе реактивности 0,5—0,7 и более.
Проведен комплексный сравнительный морфологиче­
ский анализ ткани печени золотистых хомячков (Crecetus
padus) (n = 25), зараженных описторхозом. Заражение осу­
ществлялось путем кормления опытных животных в течение
7—10 дней ельцами (Leuciscus idus), выловленными в
р. Томь и исследованными микроскопически на наличие ме­
Бюллетень сибирской медицины, ¹ 2, 2007
Экспериментальные и клинические исследования
тацеркариев. После контрольного вскрытия, не ранее чем
через 30—35 дней после заражения (наступление половой
зрелости и яйцепродукции), доказано эффективное зараже­
ние экспериментальных животных, об интенсивности инва­
зии судили по числу живых марит описторхов. Учитывались
результаты вскрытий зараженных животных на всех этапах
исследований in vitro и in vivo: были вскрыты 25 хомяков, ин­
тенсивность инвазии у которых составляла в среднем 94,5.
Для проведения ФРИ-терапии использовался фоновый
резонансный излучатель с записанным на него спектром
электромагнитного излучения половозрелой мариты опи­
сторхиса (далее — излучатель), изготовленный предприяти­
ем-производителем согласно инструкции к аппарату КВЧИК-терапии «Cem Tech» (прежнее название «Стелла-1») [5].
Лечение начинали не ранее чем через 1,5—2 мес от на­
чала эксперимента, а забор материала для морфологиче­
ских исследований осуществляли через 7—10 дней после
проведенного лечения. В эксперименте использовано по 20
фрагментов печени из каждой исследуемой группы.
Были рассмотрены биоптаты двух групп контроля. Первая
контрольная группа (1-я группа) была представлена фрагмен­
тами печени здоровых (незараженных) стерильных лабора­
торных животных, вторая группа контроля (2-я группа) — фраг­
ментами печени хомячков, зараженных описторхозом, но не
получавших лечение.
Опытные группы (основные): 3-я группа — ткань пе­
чени после лечения экорсолом (1,0 мл 1%-го водного
раствора, вводимого через металлический зонд 3 раза в
день в течение 7 дней), 4-я группа — ткань печени после
лечения нелекарственным средством — излучателем. Не­
медикаментозный способ дегельминтизации применяли
для лечения зараженных хомячков, помещая излучатель в
емкость с питьевой водой, которую затем давали экспери­
ментальным животным на протяжении 7 дней. Механизм
противоописторхозного действия ФРИ-терапии с исполь­
зованием излучателя, способного генерировать спектр ко­
лебаний описторхиса, ранее перенесенный на излучатель,
обусловлен противофазным воздействием на гельминтов,
находящихся желчных протоках печени окончательного
хозяина. При этом и сам излучатель, и вода как один из
лучших носителей информации с предварительно поме­
щенным в нее излучателем оказывают противоопистор­
хозное действие.
Фрагменты печени сразу после забора фиксировались в
12%-м нейтральном формалине. Препараты готовили по
стандартной методике, заливали в парафин. Срезы толщи­
ной 5—6 мкм окрашивали по Мак-Манусу (ШИК-реакция)
[11].
Определялось относительное содержание гликогена в ге­
патоцитах 1-й и 2—3-й зон. С использованием метрической
системы (сетка) в Adobe Photoshop определяли содержание
гликогена (области с одинаковой плотностью цвета после
окраски субстрата — от ярко-розового до малинового) в гепа­
тоците. Содержание субстрата гликогена более 75% от пло­
щади цитоплазмы оценивалось как высокое (соответствует
реакции повышенной активации), от 50 до 75% — как уме­
ренное (соответствует реакции тренировки), менее 50% —
как низкое (соответствует реакции стресса). Для унификации
исследования в пределах каждого микропрепарата оценка
проводилась в десяти полях каждого третьего поля зрения.
Четыре группы фрагментов печени, включая две контроль­
ные, прошли «слепое» исследование (фрагменты печени
нумеровали по принципу сквозной нумерации и только по­
сле описания морфолога расшифровывали по сериям ис­
следования).
Для исключения погрешности визуальной оценки уровня
гликогена по плотности и цвету морфологическая оценка
всех препаратов проводилась на одном мониторе и одной
установке, включающей световой микроскоп «Karl Zeiss Jena»
(Германия), цифровую фотокамеру «Epson-200» (Япония), с
использованием программы Photoshop 6.0. Изображение поля
зрения вводили в компьютер с помощью видеокамеры. Конеч­
ное линейное и оптическое увеличение после переноса
изображения в компьютер составило ×800, ×1600.
При проведении статистической обработки получен­
ных результатов использованы методы описательной стати­
стики (определение среднего значения M и ошибки средне­
го m), непараметрический U-критерий Манна—Уитни для
независимой выборки.
Результаты и обсуждение
При проведении терапии с использованием антигель­
минтного препарата растительного происхождения экорсола
и фонового резонансного излучения установлено, что коли­
чество гепатоцитов с высоким содержанием гликогена не за­
висело от используемого лечебного комплекса и у пролечен­
ных животных (3-я и 4-я группы) достоверно повышалось по
сравнению с нелечеными (p < 0,05) (таблица).
Бюллетень сибирской медицины, ¹ 2, 2007
39
Поддубная О.А., Белобородова Э.И., Левицкий Е.Ф.
Влияние фонового резонансного излучения на уровень гликогена в печени...
Предлагаемый показатель реактивности, рассчитанный
по отношению гепатоцитов с высоким содержанием гликогена
2-й и 3-й зон к гепатоцитам с высоким содержанием гликогена
1-й зоны, аналогичен широко известному индексу реактивно­
сти, предложенному Л.Х. Гаркави и соавт. (1875), который рас­
считывается по отношению лимфоцитов к сегментоядерным
нейтрофилам в периферической крови (менее 0,30 — реак­
ция стресса; 0,31—0,50 — реакция тренировки; 0,51—0,70
— реакция спокойной активации; более 0,70 — реакция по­
вышенной активации) [3]. Эти данные позволяют рекомендо­
вать использование индекса реактивности, что по сравне­
нию с морфологическими исследованиями
Количество и отношение гепатоцитов с высоким содержанием гликогена 2—3-й и 1-й зон печени в исследуемых группах (М ± m)
Группа
1-я (здоровые)
2-я (зараженные, нелеченые)
3-я (пролеченные экорсолом)
4-я (пролеченные ФРИ)
ГВСГ1, %
89,9 ± 9,0
40,0 ± 5,3*
77,0 ± 8,5*
75,0 ± 8,1*
ГВСГ2—3, %
Показатель реактивности
ГВСГ2—3/ГВСГ1
65,0 ± 6,7
15,0 ± 6,9*
58,0 ± 6,0*
55,0 ± 5,9*
0,72
0,37
0,75
0,73
П р и м е ч а н и е. ГВСГ1, ГВСГ2—3 — гепатоциты с высоким содержанием гликогена 1-й и 2—3-й зон соответственно; * — при p < 0,05, срав­
ниваемые группы: 2-я группа с 1-й группой; 3-я и 4-я группы со 2-й группой.
Анализ результатов морфологического исследования
препаратов печени выявил следующие закономерности: по­
казатель реактивности у здоровых хомяков (1-я группа) со­
ставил 0,72, тогда как у зараженных описторхозом, но неле­
ченых (2-я группа) — 0,37, что соответствует уровню стати­
стической значимости различий (p < 0,05). Это свидетель­
ствует о негативном влиянии описторхозной инвазии на уро­
вень неспецифической реактивности организма окончатель­
ного хозяина. В основных группах (3-я и 4-я) после проведе­
ния лечения показатель реактивности составил 0,75 и 0,73
соответственно. Показатель реактивности в группах пролечен­
ных и здоровых хомяков не отличался (p > 0,05), что свиде­
тельствует о благоприятном влиянии проводимых лечебных
мероприятий на состояние физиологической реактивности
организма в целом.
Полученные результаты позволяют сделать вывод: про­
тивоописторхозное лечение, в том числе немедикамен­
тозными средствами, оказывает благоприятное влияние на
показатели реактивности организма окончательного хозяи­
на, что способствует сохранению полноценного морфофунк­
ционального состояния печени и предупреждает перенапря­
жение ее резервных возможностей.
более доступно для оценки уровня неспецифической реак­
тивности организма при проведении лечебных мероприятий
у больных хроническим описторхозом, а возможно, косвенно
судить о влиянии лечебных мероприятий на состояние пече­
ни и ее резервные возможности.
Заключение
40
Таким образом, полученные результаты свидетельству­
ют о положительном влиянии проводимой терапии на реак­
тивность организма больных хроническим описторхозом,
переводя его из состояния стресса и тренировки в состоя­
ние повышенной активации, что соответствует физиологиче­
ской норме с высокой функциональной активностью без ка­
ких-либо элементов напряженности.
Литература
1. Антистрессорная терапия с использованием фонового резо­
нансного излучения: Пособие для врачей / Сост. А.А. Синиц­
кий, Д.В. Твердохлиб, Н.О. Азарова. М., 2002. 16 с.
2. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Кузьменко Т.С. Антистрессорные ре­
акции и активационная терапия. М.: ИМЕДИС, 1998. 656 с.
3. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Роль адаптационных
реакций в патологических процессах и простые критерии этих
реакций у людей // Регуляция энергетического обмена и устой­
чивость организма. Пущино, 1975. С. 172—190.
4. Зайчик А.Ш., Чуриков Л.П. Основы общей патологии. СПб.: ЭЛ­
СБИ-СПб., 2002. 618 с.
5. Инструкция по применению аппарата КВЧ-ИК портативного со
сменными излучателями «Сеm Тесh» / Сост. И.С. Истомина,
Ю.А. Ткаченко, А.М. Кожемякин. М., 2004. 5 с.
6. Использование терапии фоновым резонансным излучением
для купирования болевого синдрома при нейровертеброгенных
заболеваниях: Методические рекомендации / Сост. И.Л. Блин­
ков, Л.Е. Гедымин, Е.Ф. Левицкий и др. М., 1999. 14 с.
7. Левицкий Е.Ф., Лаптев Б.И., Сидоренко Г.Н. Электромагнит­
ные поля в курортологии и физиотерапии. Томск: Изд-во Том.
ун-та, 2000. 128 с.
8. Логинов А.С., Аругин Л.И. Клиническая морфология печени.
М.: Медицина, 1985. 240 с.
9. Мозжелин М.Е., Кадуков Д.В. Экорсол. Томск: ООО «Гарт»,
2001. 20 с.
10. Пальцев А.И., Дарянина С.А. Фитотерапия хронического опи­
Бюллетень сибирской медицины, ¹ 2, 2007
Экспериментальные и клинические исследования
сторхоза. Новосибирск: Изд-во СО РАН. Филиал «Гео», 2004.
142 с.
11. Пирс Э. Гистохимия. М.: Иностр. лит., 1962. 964 с.
12. Повышение сопротивляемости организма с помощью адапта­
ционных реакций тренировки и активации на разных уровнях
реактивности организма (активационная терапия): Методиче­
ские рекомендации / Л.Х. Гаркави, Е.Б. Квакина, М.А. Уколова и
др. Ростов н/Д, 1983. 34 с.
13. Серов В.В., Севергина Л.О. Морфологические критерии оценки
этиологии, степени активности и стадии хронизации при вирус­
ных гепатитах В и С // Арх. патологии. 1996. № 4. С. 61—64.
14. Способ профилактики повреждений печени, вызываемых
эфирным наркозом в эксперименте: Пат. РФ № 2153904 // Ру­
дин М.В., Рыжов А.И., Белоусов Е.В., Кожемякин А.М. М., 2000.
15. Способ и устройство для лечения патологических состояний
организма: Пат. РФ 2141304 / А.М. Кожемякин, И.Л. Брандт,
В.И. Михайлов. 1999.
16. Хронический описторхоз и пищеварительная система / Э.И. Бе­
лобородова, М.И. Калюжина, Ю.А. Тиличенко и др. Томск: Издво Том. ун-та, 1996. 116 с.
17. Яблоков Д.Д. Описторхоз человека. Томск: Изд-во Том. ун-та,
1979. С. 12—94.
Поступила в редакцию 21.10.2005 г.
Бюллетень сибирской медицины, ¹ 2, 2007
41