Инновационное оборудование для визуализации клеток

Агентство Химэксперт
2013 г.
ХИМЭКСПЕРТ БОЛЕЕ 10 ЛЕТ ЯВЛЯЕТСЯ ОФИЦИАЛЬНЫМ
ДИСТРИБЬЮТОРОМ LIFE TECHNOLOGIES (США)
LIFE TECHNOLOGIES включает 8 ЛИДИРУЮЩИХ БРЕНДОВ
Applied Biosystems
золотой стандарт в секвенировании и ПЦР
Ion Torrent
лидер в секвенировании нового поколения
Invitrogen
лучшие реагенты и расходные материалы для работы с ДНК
Ambion
лучшие реагенты и расходные материалы для работы с РНК
Gibco
клеточные культуры и среды
Molecular Probes
реагенты и растворы для флуоресцентного детектирования
Novex
разделение белков и блоттинг
TaqMan
реагенты и красители для ПЦР
ИННОВАЦИОННОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
ДЛЯ ВИЗУАЛИЗАЦИИ КЛЕТОК
Системы Evos для флуоресцентной микроскопии
и микроскопии в проходящем свете
Акустический проточный цитофлюориметр ATTUNE
Макаренко Ирина Викторовна, к.б.н.
«Агенство Химэксперт» (г. Москва)
СИСТЕМЫ EVOS®
EVOS® XL Core | EVOS® XL | EVOS® Floid® | EVOS® FL | EVOS® FL Auto
ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ И МИКРОСКОПИЯ В ПРОХОДЯЩЕМ СВЕТЕ
ЧТО ТАКОЕ СИСТЕМЫ EVOS®
СИСТЕМЫ ВИЗУАЛИЗАЦИИ EVOS® - это:

Совмещение всех аспектов цифровых инвентированных флуоресцентных микроскопов без потери функций и
эффективности анализа (рутинный и высокоспециализированный анализ от клеточных культур до комплексного
белкового анализа и мультифлюоресценции).

Простота в манипуляциях в отличие от флуоресцентных микроскопов (быстрое получение изображения и
высвобождение времени на анализ).

Новая конфигурация Light Cube (включают LED и фильтры на выбор) сокращает путь света, что обуславливает
лучшую детекцию флуоресцентного сигнала.

Hard-coated фильтры - получение изображений высоко разрешения, даже от слабофлюоресцирующих объектов.

Комплексное программное обеспечение для анализа и автоматизации процесса (фокусировка, запоминание
расположения образца, смена объективов, переход между фильтрами и др.)

Стоимость систем EVOS® в разы ниже стоимости аналоговых по функциональности флуоресцентных микроскопов,
что обусловлено несопоставимой долгосрочностью службы источника флюоресценции LED, а также оптимальной
комплектацией объективов и фильтров для работы.
ОСНОВНЫЕ ОТЛИЧИЯ ОТ ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫХ МИКРОСКОПОВ
ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫЕ СИСТЕМЫ EVOS®
Источник флюоресценции:
запатентованный светодиод LED - высокоинтенсивный,
свыше 50 000 часов службы ≈ 17 лет,
экологически безопасный.
Не требуется.
Регулируемая интенсивность LED минимизирует
фотоблики. Избыток красителя не проблема.
В комплектацию входит оптимальный набор объективов,
либо самостоятельно набирается пользователем.
Возможность проведения сравнительного количественного
анализа изображений (полученных в разные дни) без
сложной калибровки (необходимой для микроскопов с
ртутными лампами).
ФЛЮОРЕСЦЕНТНЫЕ МИКРОСКОПЫ
Ограниченный срок службы источников флуоресценции:
ртутная лампа (300 часов),
галогеновый осветитель (1500 часов)
Требуется тщательный контроль срока службы источника
флюоресценции и соблюдение режимов нагрев/охлаждение,
а также «темная комната» для работы.
Фотоблики - типичная проблема, возникающая в случае
добавления флуоресцентного красителя в избытке.
Количество объективов в комплектации определяет высокую
стоимость флюоресцентного микроскопа.
В 85 % исследований используется только 20х объектив!
Нет возможности.
МИКРОСКОПИЯ В ПРОХОДЯЩЕМ СВЕТЕ
ФЛЮОРЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ
(светлое поле и фазовый контраст)
(каналы: флюоресценция и проходящий свет)
XL ® CORE
Базовый цифровой
инвертированный
микроскоп высокочеткое
изображение, контроль теплый/холодный цвет
ПРИМЕНЕНИЕ
КАНАЛЫ
ФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ
Рутинные клеточные,
тканевые культуры
Пассирование стволовых
клеток
Анализ тканевых срезов
Окрашивание по Грамму
EVOS ® XL
Современный цифровой
инвертированный микроскоп
для получения изображений
высокой четкости
Колориметрия клеток
Анализ жизнеспособности
клеток, Подсчет клеток
Рост и дифференцировка
стволовых клеток
Пассирование стволовых
клеток
DAB и H&E визуализация
Окраска гематоксилином,
эозином,диаминобензидином
Тime-lapse (интервальная
сьемка изображения)
0
0
1.25х - 100х
4-позиционный револьвер
1.25х - 100х
5-позиционный револьвер
EVOS FLOID ®
Упрощенная система для
быстрого получения
высококачественного
флюоресцентного
изображения из широкого
спектра объектов
Печать изображений
Рутинная флуоресцентная
визуализация объектов
Обучающие лаборатории:
простота в использовании,
отличный инструмент для
обучения флуоресцентной
микроскопии начинающих
специалистов
3 фиксированные
голубой, зеленый, красный
20х
фиксированный
EVOS ® FL
EVOS ® FL AUTO
Система для сложной
мультифлюоресценции
объектов
Инструментарий для анализа
(мощное программное
обеспечение
Полностью автоматизированная флюоресцентная
система, Автофокусировка
Анализ формы, функций, фаз
в одном!
Анализ белков
Клеточные культуры
Подсчет клеток
Изображение In Situ
гибридизация проб
Патология клеток
Эффективность трансфекции
и многое другое
Автоматизированное
сканирование плашек
Подсчет клеток
Полный скрининг всего
изображения во времени
Мультифлуоресценция
Анализ плотности клеток
Тime-lapse (интервальная
сьемка изображения)
Мозаичное «сшивание»
изображений
4
Интуитивно доступна в
работе
4
1.25х - 100х
1.25х - 100х
5-позиционный револьвер
5-позиционный револьвер
Выбор:
Двойная: Монохромная ССD)
КАМЕРА
Цветная (CMOS)
Цветная (CMOS)
Монохромная (ССD)
цветная или монохромная
Цветная (CMOS)
(ССD)
ЭПИФЛЮОРЕСЦЕНЦИЯ
ЗАПАТЕНТОВАННЫЙ ИСТОЧНИК ФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ: светодиод LED - высокоинтенсивный, регулируемая интенсивность, свыше 50 000 часов службы (17 лет), экобезопасный
ОБЪЕКТИВЫ
КОМПЛЕКТАЦИЯ и СТОИМОСТЬ СИСТЕМ EVOS®
СИСТЕМЫ EVOS®
EVOS FLOID ®
Система для флуоресцентной
микроскопии
EVOS® FL Color Imaging System
Камера: цветная (CCD)
EVOS® FL Imaging System
Камера: монохромная (ССD)
EVOS ® FL AUTO
Автоматизированная система
для флуоресцентной микроскопии
EVOS XL ® CORE
Система для микроскопии в
проходящем свете
EVOS ® XL
Система для микроскопии в
проходящем свете
Дополнительные
позиции
(необходимо)
Принтер,
бумага для цветной
печати
Light Cube
фильтры + LED
Объективы
Цена, USD
за позицию
DAPI, FITC,Texas Red
20 х
фиксированный
32 500
Не включены
Не включены
37 200
Объективы, Фильтры
Не включены
Не включены
89 800
Объективы, Фильтры
Не включены
9 505
Объективы
Каналы
флюоресценции:
нет
Каналы
флюоресценции:
нет
Не включены
18 200
ОПЦИАЛЬНО :
Объективы: Plan Achromat, Plan Fluorite, Plan Apochromat
Широкий выбор LWD (Long working distance) объективов,
объективы с коррекцией покровного стекла
Фильтры на выбор: Light Cube ( включают LED, фильтры и коллимирующую
оптику)
Аксессуары для систем EVOS®
800- 14 000
4 500 – 6 000
По запросу
Объективы
ОБЪЕКТИВЫ
ФИЛЬТРЫ (Light Cube)
запатентованные стандартные и специальные
Настольная система
визуализации клеток
Floid
МИКРОСКОП + ВИДЕОКАМЕРА + КОМПЬЮТЕР +
ШИРОКОЭКРАННЫЙ ЖИДКОКРИСТАЛЛИЧЕСКИЙ
МОНИТОР
Изображение с высоким разрешением за 1-2 минуты.
Не требуются темная комната, предварительный прогрев и
охлаждение источника света, а также смена фильтров во
время работы.
Универсальный предметный столик приспособлен для
микроскопических слайдов, стекол, чашек Петри, 6-ти и 96луночных планшет, больших культуральных флаконов.
Высокая чувствительность камеры позволяет получать
изображение от слабо флуоресцирующих образцов.
Полностью открытая система.
Настольная система визуализации клеток Floid
• Справочник «Molecular Probes®»
более 160-ти
наиболее часто используемых валидированных
реагентов,
протоколы окрашивания объектов исследования и получения
изображений.
• Применение Floid в клеточной биологии: клеточный цикл,
апоптоз, цитоскелет, клеточная пролиферация, оксидативный
стресс, жизнеспособность клеток, биология нуклеиновых кислот,
клеточные органеллы, флуоресцентномеченные белки, GFP-анализ,
мечение антителами, индикаторы ионов, трафик в клетке и др.
Изображения, полученные на FLoid™
14 | Life Technologies Proprietary & Confidential | 9/23/2013
ВАЛИДИРОВАННЫЕ РЕАГЕНТЫ ОТ
“MOLECULAR PROBES®”
Alexa Fluor® красители
•
•
•
•
Alexa Fluor® - яркие и фотостабильные красители
Широкий диапазон спектра: от ближнего УФ до инфракрасного
Более 20 цветов
Спектральная совместимость красителей позволяет проводить многоцветную
визуализацию (до 4 цветов)
ВОЗМОЖНОСТИ “MOLECULAR PROBES®”
для клеточных исследований
• Жизнеспособность
• Мембранный потенциал
• Деление и пролиферация: клеточный цикл, цитотоксичность, пролиферация
• Состояние:
оксидативный стресс, апоптоз, аутофагия
• Базовые функции:
эндоцитоз/экзоцитоз/фагоцитоз, цитоскелет/структура,
функции митохондрий, подвижность и морфология, ионный
гомеостаз (Са, Mg, Zn и другие ионы металлов), рецепторы,
передача сигнала, липиды и др.
• Детекция определенных белков: первичные антитела, вторичные антитела, и др.
• Ядро и нуклеиновые кислоты
• Органеллы (живые и фиксированные клетки)
• Индикаторы рН
• Ангиогенез
Нанокристаллы - Технология Qdot®
•
•
•
•
Диапазон спектра: от зеленого до инфракрасного
Живые и/или фиксированные клетки
Самые фотостабильные
Совместимы с органическими красителями
• In vivo изображения, Клеточный трекинг
• Электронная микроскопия
• Маркеры в хирургии
Широкое применение Qdot® технологии
525
545
565
585 605
625 655
Pre-clinical in vivo imaging
Surgical guidance
Receptor
tracking
WesternDot™
Kits
Pathology/IHC
Flow
Cytometry
Live Cell Tracking
Fixed Cell
Microscopy
(Qtracker® Kits)
Акустический проточный
цитофлюориметр ATTUNE
ПРИБОР СПОСОБЕН СФОКУСИРОВАТЬСЯ НА КАЖДОЙ КЛЕТКЕ НЕЗАВИСИМО ОТ СКОРОСТИ ПОТОКА
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Новая технология дополнительной акустической фокусировки
Высочайшая пропускная способность среди всех предлагаемых приборов (до 1 000 млк/мин)
Скорость детекции до 20 000 частиц в секунду
Размер анализируемых частиц и клеток 1 -45 мкм
Объем образца 25 мкл - 4 мл (не нужно концентрировать, лизировать образцы)
Скорость потока 25-1000 мкл/мин
Чувствительность 100 молекул FITC , 50 молекул R-PE на 1 клетку (не уступает традиционным цитометрам)
Детекция по 8 параметрам одновременно: 6 красителей, а также прямое и боковое рассеивание
2 лазера – 2 комплектации: (фиолетовый 405 нм и синий 488 нм) или (синий 488 нм и красный 638 нм)
Смена дихроичных фильтров и спектральной полосы пропускания системы осуществляется пользователем
Разрешающая способность 6 порядков
Возможность для пользователя устанавливать скорость потока
(достижение оптимального разрешения пика)
Упрощенная компенсация флюоресценции
Возможна тонкая настройка фотоумножителя пользователем
Низкое потребление жидкостей (около 1 л в день)
Компактность прибора (установка в ламинарном шкафу)
201 800,00 USD
ПРЕИМУЩЕСТВА АККУСТИЧЕСКОЙ ФОКУСИРОВКИ
АКУСТИЧЕСКАЯ ФОКУСИРОВКА В ATUNNE
Каждая клетка проходит точно через центр лазерного луча
независимо от соотношения объемов образца и проточной жидкости
РЕЗУЛЬТАТ:
 Анализ клеточных субпопуляций с максимальным разрешением
 10 кратная и выше скорости анализа по сравнению с другими цитометрами
 Возможность детекции редких событий (анализ ценных и разбавленных образцов)
ТРАДИЦИОННАЯ ГИДРОДИНАМИЧЕСКАЯ ФОКУСИРОВКА
Клетки проходят через разные участки сечения лазерного луча
РЕЗУЛЬТАТ:
 Разброс значений сигнала
 Низкое разрешение клеточных субпопуляций
ЧАСТИЧНОЕ РЕШЕНИЕ:
Уменьшение объема образца к объему проточной жидкости
РЕЗУЛЬТАТ: уменьшение пропускной способности
ВОЗМОЖНОСТЬ АНАЛИЗА РЕДКИХ СОБЫТИЙ
Высокая чувствительность и точность
ВЫБОР РЕАГЕНТОВ
Конфигурация лазеров в приборе:
1) синий 488 нм и фиолетовый 405 нм
2) синий 488 нм и красный 638 нм (красный лазер, фильтры: 660/20 нм, 789/60 нм)
ВОЗМОЖНОСТИ: стандартный и специализированный анализ
•
Абсолютный подсчет клеток
•
Анализ клеточного цикла
•
Апоптоз
•
Фагоцитоз
•
Онкодиагностика (обнаружение эндотелиальных клеток 0,01-0,0001% всех мононуклеарных клеток)
•
Детекция редких событий
•
Иммунология (иммунофенотипирование клеток периферической крови
No-Lyse, No-Wash Method for Mouse Immunophenotyping)
•
Различные внутриклеточные маркеры
•
Клеточная пролиферация
•
Стволовые клетки
•
Анализ жизнеспособности клеток , Соотношение живых/мертвых клеток
•
Детекция фосфопротеинов
•
Анализ флюоресциирующих белков (GFP & RFP)
•
Микробиология (подсчет, окрашивание, жизнеспособность, и др)
•
Исследование растений (оценка ядерной ДНК)
•
Исследование биологических образцов моря (фотосинтезирующий пикопланктон, бактериопланктон)
•
Подсчет пикопланктона
•
FISH
ДРУГИЕ НАШИ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
АМПЛИФИКАТОРЫ
СИСТЕМЫ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ / ЦИФРОВАЯ ПЦР НА ЧИПАХ
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АНАЛИЗАТОРЫ (СЕКВЕНАТОРЫ)
СЕКВЕНИРОВАНИЕ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ:
ПОЛУПРОВОДНИКОВОЕ СЕКВЕНИРОВАНИЕ (ION TORRENT)
ПОЛНОГЕНОМНОЕ СЕКВЕНИРОВАНИЕ (SOLID)
АВТОМАТИЗИРОВАННОЕ ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
НАСТОЛЬНЫЕ ПРИБОРЫ ОТ INVITROGEN