Фенотипы лекция Минск
advertisement
А.М. Попов Иммунофенотип клеток нормального костного мозга. Опухоле-ассоциированные иммунофенотипы при острых лейкозах Федеральный Научно-Клинический Центр Детской Гематологии, Онкологии и Иммунологии им. Дмитрия Рогачева Задачи иммунофенотипирования ОЛ Доказать, что исследуемые клетки опухолевые Классифицировать ОЛ Задачи иммунофенотипирования ОЛ Доказать, что исследуемые клетки опухолевые Классифицировать ОЛ Фенотип, ассоциированный с опухолевой принадлежностью клеток Нормальный костный мозг T-лимфоциты CD45 В-лимфоциты В-линейные предшественники 2 В-линейные предшественники 1 Плазмоциты Предшественники гранулоцитов Моноциты Предшественники моноцитов Нейтрофилы SSC Log Эозинофилы Эритробласты Лейкоз-ассоциированные иммунофенотипы Наиболее часто описываемые аберрации иммунофенотипа при ОЛ Повышенная экспрессия антигенов (CD10, CD34, CD19, CD58, TdT, CD99) Сниженная экспрессия антигенов (CD45, CD38, CD22, CD19) Коэкспрессия миелоидных антигенов (CD13, CD33, CD15) Гомогенная экспрессия антигенов (любых) Асинхронная экспрессия маркеров разных стадий дифференцировки (например, CD34 с CD20 при ВП-ОЛЛ или отсутствие CD2 при наличии CD3 при T-ОЛЛ) Эктопическая экспрессия антигенов (например, экспрессия TdT CD3cyt(+)-клетками костного мозга) Нормальное созревание В-лимфоцитов SSC CD45 CD34 CD20 CD45 CD10 SSC CD10 TdT CD99 CD38 SSC CD44 CD20 CD58 CD11a BCP 1 BCP 2 BCP 3 Зрелые В-лимфоциты Средняя интенсивность флюоресценции Экспрессия антигенов нормальными и опухолевыми клетками CD10 CD34 В-лф CD10(-) BCP CD10(+) В-лф CD10(-) BCP CD10(+) CD45 CD58 CD20 В-лф CD10(-) BCP CD10(+) CD38 CD10 CD20 CD10 CD45 CD10 CD34 CD10 CD38 CD10 CD11a CD58 CD44 Рецидив CD10(+) ОЛЛ на фоне нормальной регенерации CD45 CD45 SSC CD45 CD10 CD10 CD10 Нормальное созревание миелоидных клеток CD11b CD11b CD15 CD66b CD14 CD15 CD16 CD65 CD13 CD64 CD14 CD33 Острый миелоидный лейкоз CD11b CD15 CD66b CD65 CD11b CD16 Острый миелоидный лейкоз CD13 CD13 CD64 CD33 CD64 CD11b CD14 CD33 CD66b CD11b CD11b Острый миелоидный лейкоз CD66b Острый мегакариобластный лейкоз CD61 SSC CD45 CD45 Острый миелоидный лейкоз CD11b CD11b CD66b CD66b SSC CD45 Нормальные Т-клетки костного мозга iCD3 CD7 CD3 CD8 CD3 CD2 CD5 CD4 CD2 iCD3 CD3 TdT CD3 CD2 CD8 CD4 iCD3 TdT CD1a TCRγδ Экспрессия миелоидных антигенов лимфобластами CD33 CD15 SSC CD13 CD117 CD65 Экспрессия лимфоидных антигенов миелобластами CD19 CD2 SSC CD7 CD5 CD22 TdT Экспрессия лимфобластами антигенов другой лимфоидной линии BCP-ALL T-ALL CD10 SSC CD7 T-ALL CD79a CD10 Нормальное созревание В-лимфоцитов CD20 CD10 Нормальное созревание В-лимфоцитов CD45 Пациент М. (54,8% бластов) SSC CD10 CD45 CD10 CD45 CD10 CD20 CD34 Пациент Б. Диагноз Рецидив SSC SSC CD45 CD45 Пациент Б. (периферическая кровь) SSC SSC CD45 CD45 Пациент Б. (периферическая кровь) CD8 CD19 CD3 CD4 Пациент Б. (периферическая кровь) CD8 CD19 CD3 CD4 CD10 CD7 Пациент Б. (периферическая кровь) CD8 CD19 CD3 CD4 CD10 CD10 CD7 Костный мозг Диагноз CD7 Пациент Б. (периферическая кровь) CD8 CD19 CD3 CD4 CD10 CD10 CD7 Костный мозг Диагноз CD10 CD7 CD7 Костный мозг Рецидив День 36 CD10 День 15 День 0 Пациент К. 1,828% 0,0099% CD38 CD58 CD20 CD45 Пациент Д. 01.2014 CD10 07.2013 CD58 Пациент Д. 07.2013 CD13 01.2014 CD19 CD13 CD33 CD19 CD33 CD13 CD33 Выявление химерного транскрипта ETV6-RUNX1 -7 DS мес ETV6-RUNX1 K+ M Пациент С. 1,59% CD34 CD19 CD58 CD45 CD10 CD20 CD38 Пациент С. CD10 09.2014 01.2015* CD58 CD58 CD20 CD20 *Данные предоставлены Л.В. Байдун Выявление опухолевых клеток в СМЖ при Влинейном ОЛЛ Пациент Г. CD34 CD45 КМ СМЖ CD19 Выявление опухолевых клеток в СМЖ при Т-ОЛЛ Пациент M. Пациент С. CD2 CD99 КМ СМЖ CD3 CD45 Выявление опухолевых клеток в СМЖ при ОМЛ Пациент Д. NG2 CD65 CD33 КМ СМЖ CD45 Пациент Б. (спинномозговая жидкость) CD7 SSC CD45 CD99 CD8 CD99 CD4 CD3 Пациентка С. CD10 CD45 CD38 CD20 CD34 CD34 CD58 CD20 Пациент Б. CD58 CD11a CD38 CD34 CD20 CD10 CD45 Пациент Б. CD20 CD34 CD11a CD58 CD38 CD10 CD45 CD10 Пациент П. CD45 CD34 CD19 CD58 CD20 CD38 Пациент П. CD34 CD20 CD10 Пациент П. CD19 CD45 CD34 CD20 CD58 Нормальное созревание миелоидных клеток под воздействием Г-КСФ CD11b CD15 Г-КСФ Норма CD11b CD66b CD16 CD65 Нормальное созревание миелоидных клеток под воздействием Г-КСФ CD14 CD16 Г-КСФ Норма CD16 CD13 CD16 CD64 Особенности регенерирующего костного мозга Нормальный КМ Восстанавливающийся КМ CD11b CD11b CD66b CD66b CD15 CD15 CD65 CD65 Особенности регенерирующего костного мозга Нормальный КМ Восстанавливающийся КМ CD10 CD10 CD20 CD20 CD10 CD10 CD34 CD34 CD10 CD20 CD34 HRX 7 дней HRY CD10 CD10 CD20 CD20 CD34 HRX CD34 7 дней HRY CD20 CD34 HRX CD34 7 дней CD10 CD10 CD10 CD20 CD20 CD34 HRY 15-й день CD10 Диагноз Изменения иммунофенотипа (опухолевые клетки) CD45 CD34 CD58 «Странные» фенотипы, возникающие под действием терапии CD19 МРО «Странные» иммунофенотипы МРО FACS Perm 2 МРО МРО CD19 CD19 Fix&Perm CD19 Фенотип, ассоциированный с определенными генетическими нарушениями Иммунофенотип ОЛЛ при наличии перестроек MLL SSC SSC SSC SSC SSC FSC CD33 CD45 SSC SSC CD19 SSC CD13 CD22 SSC MPO SSC TdT CD79a CD10 CD10 CD3 cyt CD10 CD20 CD10 CD34 Lambda CD58 Kappa CD45 Lambda cyt Kappa cyt CD19 CD19 CD19 CD15 CD65 CD19 CD133 NG2 Иммунофенотип ОЛЛ при t(12;21) SSC SSC SSC SSC SSC FSC CD19 SSC SSC CD33 SSC CD13 CD10 SSC CD45 CD79a SSC SSC CD117 CD10 MPO TdT CD10 CD58 CD45 CD20 μ cyt Kappa Lambda cyt CD19 CD133 CD10 CD34 Lambda CD22 Kappa cyt Иммунофенотип ОЛЛ при t(8;14) CD45 CD10 SSC CD34 CD20 CD38 CD11a TdT CD58 Lambda Kappa IgM Kappa Lambda Иммунофенотип ОМЛ при наличии перестроек MLL SSC CD45 CD33 CD13 CD19 CD14 CD99 CD117 CD22 CD7 NG2 CD15 CD34 CD56 CD4 CD133 Иммунофенотип ОМЛ при inv16 CD33 CD117 SSC CD45 CD14 CD15 CD13 CD7 CD11b CD66b CD34 Lysozyme CD64 CD11c CD4 MPO Иммунофенотип ОМЛ при t(8;21) CD33 CD117 SSC CD45 CD14 CD15 CD13 CD7 CD11с CD64 CD34 Lysozyme CD19 iCD79a MPO iCD3 Острый миелоидный лейкоз при синдроме Дауна CD33 CD13 CD117 CD7 SSC CD45 CD34 CD61 CD42a Спасибо за внимание!
