Отчет о деятельности ФГБУ &quot

Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору
Федеральное государственное бюджетное учреждение
«Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
УТВЕРЖДАЮ
Директор ФГБУ «ВНИИЗЖ»
_______________В.А.Грубый
КРАТКИЙ ОТЧЕТ
о результатах научно-исследовательской деятельности
ФГБУ «ВНИИЗЖ» за 2012 год
Рассмотрен и принят на заседании
ученого совета,
протокол № 8 от «25» декабря 2012 г.
Владимир, 2013 г.
СОДЕРЖАНИЕ
1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
2. ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В РАМКАХ ГОСУДАРСТВЕННОГО ЗАДАНИЯ
Государственные услуги
2.1 Услуга 1 Лабораторные исследования по диагностике и профилактике болезней животных
2.2.Услуга 2. Исследование лекарственных средств для животных, генетически модифицированных кормов и кормовых добавок.
2.3.Услуга 3. Ведение и пополнение Всероссийской коллекции клеточных
культур, штаммов вирусов, микробов и микопатогенов.
2.4. Услуга 4. Лабораторные исследования по показателям безопасности
и качества сырья и продукции животного происхождения.
2.5. Услуга 5. Исследования в области качества и безопасности крупы,
комбикормов и компонентов для их производства, а также побочных
продуктов переработки зерна.
2.6. Услуга 6. Проведение лабораторных исследований в рамках Плана
государственного лабораторного мониторинга остатков запрещенных
и вредных веществ в организме живых животных, продукции животного происхождения и кормах для животных на территории РФ (Приказ
№666 от 30.12.2011).
2.7. Услуга 7 . Государственный лабораторный мониторинг особо опасных болезней животных (Приказ №75 от 22.02.2012).
Государственные работы
ГЗ Работа 1.Совершенствование методов контроля карантинных и
экономически значимых инфекционных болезней животных.
ГЗ Работа 2. Изучение вирусных изолятов и имеющихся штаммов возбудителей инфекционных заболеваний птиц с целью изготовления новых более эффективных вакцин и диагностикумов в соответствии с
эпизоотической ситуацией.
4
10
10
10
3. МЕРОПРИЯТИЯ ПО НИОКР В РАМКАХ ФЦП «НАЦИОНАЛЬНАЯ СИСТЕМА
ХИМИЧЕСКОЙ И БИОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ РФ НА 2009-2013 ГОДЫ».
3.1. Создание новых защитных препаратов на основе выделенных циркулирующих штаммов вируса ящура, высокопатогенного гриппа птиц,
ньюкаслской болезни, бешенства из вновь выделенных изолятов и их
испытание.
3.2. Создание базы данных геномных портретов штаммов возбудителей особо опасных инфекций животных и разработка стандартных
методов генотипирования
3.3. Выделение и изучение эпизоотических изолятов вируса ящура, высокопатогенного гриппа птиц, ньюкаслской болезни КЧС, бешенства,
разработка новых более чувствительных и специфических методов
диагностики, оценки иммунитета и дифференциация вакцинированных от переболевших животных.
3.4. Разработка информационно-аналитической подсистемы индикации и идентификации возбудителей ООИ новых и возвращающихся
инфекций животных и прогнозов биологической опасности развития
48
24
25
27
31
33
36
44
44
46
48
50
54
59
2
эпизоотий в результате заноса, чрезвычайных ситуаций и террористических актов на основе результатов мониторинга с использованием ГИС технологий.
3.5. Разработка средств и методов повышения эффективности вакцинации против инфекционных болезней животных
4. МЕЖГОСУДАРСТВЕННАЯ ЦЕЛЕВАЯ ПРОГРАММА «ИННОВАЦИОННЫЕ
БИОТЕХНОЛОГИИ» РАЗРАБОТКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ
ДИАГНОСТИКИ ЯЩУРА И ВБС.
5.ТЕСТИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА ВАКЦИННОГО
БЕЛКА ВИРУСА ЯЩУРА НА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ.
6. РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ АНАЛИТИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ АНИОННЫХ ПАВ –
КОНДЕНСАЦИОННЫХ ОЛИГОМЕРОВ
7.РАЗРАБОТКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ
ПАТОГЕНОВ СВИНЕЙ МЕТОДОМ ПЦР
8. ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММОВ ВИРУСА ЯЩУРА
(СОГЛАШЕНИЕ № 58-0210-1-141F)
9. ТЕМАТИКА ФГБУ «ВНИИЗЖ» ЗА СЧЕТ СРЕДСТВ ОТ ПРИНОСЯЩЕЙ ДОХОД
ДЕЯТЕЛЬНОСТИ
9.1 Разработка комплексной системы контроля инфекционных болезней
птиц» ( «Ветблагополучие 1-02»)
9.2 Разработка комплексной системы средств и методов по диагностике, профилактике и борьбе с инфекционными болезнями КРС, МРС,
плотоядных и рыб («Ветблагополучие» 2-02»)
9.3 Совершенствование методов контроля инфекционных болезней
свиней, методов лабораторных исследований остатков запрещенных
вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного
происхождения («Ветблагополучие 3-02»)
10. МЕЖДУНАРОДНОЕ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ СОТРУДНИЧЕСТВО
11. ПОВЫШЕНИЕ КВАЛИФИКАЦИИ СПЕЦИАЛИСТОВ
12. ИНФОРМАЦИОННО-АНАЛИТИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ
13. ПЕРЕЧЕНЬ МЕТОДИЧЕСКИХ РАЗРАБОТОК И РЕГИСТРАЦИЯ ПРЕПАРАТОВ.
14. ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
15. УЧАСТИЕ ФГБУ «ВНИИЗЖ» В МЕЖДУНАРОДНЫХ И ОТЕЧЕСТВЕННЫХ
61
63
65
66
67
68
70
70
72
74
77
82
87
91
96
101
ВЫСТАВКАХ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
104
3
1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный центр
охраны здоровья животных» создано в соответствии с приказом Министерства
сельского хозяйства Российской Федерации от 10 июля 2003 г. №1067 на базе
Всесоюзного научно-исследовательского ящурного института (ВНИЯИ), организованного в соответствии с Постановлением ЦК КПСС и Совета Министров
СССР от 7 августа 1958 г. №909-426 и приказом Министерства сельского хозяйства СССР от 20 августа 1958 г. №233-13.
В соответствии с постановлением Правительства Российской Федерации от
8 декабря 2004 г. №754 учреждение передано в ведение Федеральной службы по
ветеринарному и фитосанитарному надзору (Россельхознадзор) с наименованием
- Федеральное государственное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГУ «ВНИИЗЖ»).
В соответствии с приказом Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору от 31.05.2011 № 230 «О переименовании ФГУ «ВНИИЗЖ»
федеральное государственное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья
животных» (ФГУ «ВНИИЗЖ») переименовано в федеральное государственное
бюджетное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ
«ВНИИЗЖ»).
Основные виды деятельности Учреждения
ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» в целях обеспечения деятельности Россельхознадзора в соответствии с Уставом учреждения осуществляет:
- функции Региональной справочной лаборатории МЭБ по ящуру (Мандат
1995 г.), Центра МЭБ по сотрудничеству в области диагностики и контроля болезней животных для стран Восточной Европы, Центральной Азии и Закавказья
(Мандат 1997 г.);
- работы, направленные на обеспечение биобезопасности и благополучия
страны по особо опасным и карантинным болезням животных (по утвержденному перечню – Приказ Минсельхоза России от 17 мая 2005 г. №81);
4
- функции диагностического центра Минсельхоза РФ по губкообразной энцефалопатии КРС (распоряжение Департамента ветеринарии от 27.10.99 г.
№13-4-16/1004) и по исследованию на бешенство (Приказ №32 Департамента
ветеринарии от 19.10.2000 г.);
- функции Национальной референс-лаборатории по гриппу птиц, исследования в рамках Координационного совета по научно-техническому сотрудничеству в области ветеринарии стран СНГ;
- функции референтного центра по научному и методическому обеспечению
деятельности Россельхознадзора, его территориальных управлений и подведомственных ему организаций в области ветеринарии (в соответствии с Уставом).
Разрешительные документы
ФГБУ «ВНИИЗЖ» осуществляет свою деятельность в соответствии со следующими лицензиями, аттестатами и свидетельствами:
- Лицензия на осуществление деятельности, связанной с возбудителями
инфекционных заболеваний №77.99.03.001.Л.000673.04.05. от 15.04.2005 г. до
15.04.2015 г.;
- Лицензия на осуществление деятельности по производству лекарственных
средств № 0-08-1-000017 от 05 июня 2008 г., выданная Федеральной службой по
ветеринарному и фитосанитарному надзору (Россельхознадзор). Срок действия
лицензии до 05 июня 2013 года;
- Лицензия на осуществление фармацевтической деятельности № 0-08-2000018 от 05 июня 2008 г., выданная Федеральной службой по ветеринарному и
фитосанитарному надзору (Россельхознадзор). Срок действия лицензии до 05
июня 2013 года;
- Лицензия на использование радиоактивных веществ при проведении
научно-исследовательских работ (срок действия до 04.2014 г.);
- Аттестат на соответствие ФГУ «ВНИИЗЖ» требованиям, предъявляемым
к производству ветеринарных препаратов и наличия условий для выпуска
(рег.№939 от 30.08.2003 г.);
5
- Аттестат аккредитации испытательной лаборатории (ЦЕТРА) №РОСС RU
0001.21ПП74 на техническую компетентность и независимость с 29 августа 2011
по 29 августа 2016 года;
- Свидетельство об аккредитации №33-01СА/2011 действительно до
3.05.2016 года УФС по ветеринарному и фитосанитарному надзору по Владимирской области в качестве испытательной лаборатории , осуществляющей работы в
области подтверждения соответствия качества и безопасности зерна, крупы, комбикормов и компонентов для их производства, а также побочных продуктов переработки зерна.
Испытательный центр функционирует на основании Положения, ГОСТ Р
ИСО/МЭК 17025-2007 «Общие требования к компетентности испытательных и
калибровочных лабораторий", ГОСТ Р 51000.4-96 «Общие требования к аккредитации испытательных лабораторий», «Правил проведения сертификации химической продукции».
Аттестат аккредитации испытательной лаборатории (центра) № РОСС RU.
0001.22ФВ07 на техническую компетентность испытательной лаборатории ветпрепаратов с 05 сентября 2011 года по 05 сентября 2016 года.
Для
совершенствования
научно-технической
деятельности
в
ФГБУ
«ВНИИЗЖ» была разработана и поддерживается в рабочем состоянии система
менеджмента качества и выдано подтверждение, что система учреждения соответствует требованиям нового стандарта ГОСТ Р ИСО 9001-2008 применительно
к проектированию, разработке, производству лекарственных средств и осуществлению ветеринарной деятельности и подтвержден сертификат за № РОСС.RU
001.13 ФК 11 сроком действия до 07.12.2012 года.
Получен сертификат соответствия системе качества применительно к производству и контролю качества лекарственных средств для ветеринарного применения, который соответствует
ГОСТ Р 522494-2009 (GMP). Действителен до
11.01.2016г.
Свидетельство Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному
надзору об аккредитации ФГБУ «ВНИИЗЖ» в сфере ветеринарного надзора от 31
октября 2011 года по 31 октября 2016 года.
6
Основные направления научных исследований
Основными направлениями деятельности ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2012 году
являлись:
- научно-исследовательские работы, ориентированные на получение новых
научных знаний в области эпизоотологии болезней животных, молекулярной биологии, вирусологии, бактериологии и биотехнологии с целью контроля и обеспечения биологической и продовольственной безопасности РФ в рамках деятельности Россельхознадзора, прикладные исследования, направленные на разработку и
внедрение в производство эффективных средств и методов диагностики, профилактики и лечения инфекционных болезней сельскохозяйственных животных, на
совершенствование существующих и разработанных технологий производства
средств защиты от таких особо опасных и экономически значимых болезней животных, как ящур, бешенство, оспа, грипп птиц и свиней, классическая чума свиней,
ньюкаслская болезнь, инфекционная бурсальная болезнь, инфекционный
бронхит, геморрагическая септицемия крупного рогатого скота, ГЭ КРС и др.
В 2012 году Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья животных» проводил исследования и осуществлял производственную деятельность в соответствии с приказами Россельхознадзора по государственным заданиям, утвержденным темам, договорам и Госконтрактам, заключенным с Заказчиками.
На протяжении последних 12 лет выполняются научно-исследовательские
работы за счет средств от приносящей доход деятельности с целью разработки и
совершенствования комплексной системы средств и методов диагностики, профилактики и борьбы с инфекционными болезнями КРС, МРС, свиней, птиц, плотоядных и рыб (шифр «Ветеринарное благополучие»).
Сотрудниками Центра постоянно проводятся научно-исследовательские работы в рамках договоров с животноводческими хозяйствами различных регионов
РФ по мониторингу эпизоотологической обстановки, внедрению новых методов
диагностики с целью улучшения эпизоотической остановки по особо опасным и
экономически значимым болезням животных в Российской Федерации.
7
Таблица 1
ПЛАН НИР ФГБУ «ВНИИЗЖ» на 2012 год
№
п/п
Наименование НИР
I.
Государственное задание
1.1.
Государственные услуги:
У1.Лабораторные исследования по диагностике и профилактике болезней животных.
У2.Исследование лекарственных средств для животных, генетически модифицированных
кормов и кормовых добавок
У3.Ведение и пополнение Всероссийской коллекции клеточных культур, штаммов вирусов, микробов и микопатогенов.
У4.Лабораторные исследования по показателям безопасности и качества сырья и продукции животного происхождения.
У.5.Исследования в области качества и безопасности зерна, крупы, комбикормов и компонентов для их производства, а также побочных продуктов переработки зерна.
У.6.Проведение лабораторных исследований в рамках Плана государственного лабораторного мониторинга остатков запрещенных и вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного происхождения и кормах для животных на территории РФ.
(Приказ №666 от 30.12.2011 г.).
У.7.Государственный лабораторный мониторинг особо опасных болезней животных
(Приказ №75 от 22.02.2012 г.)
1.2.
2.
2.1.
2.2.
Государственные работы:
Работа 1 Совершенствование методов контроля карантинных и экономически значимых
инфекционных болезней животных
Работа 2 Изучение вирусных изолятов и имеющихся штаммов возбудителей инфекционных заболеваний птиц с целью изготовления новых более эффективных вакцин и диагностикумов в соответствии с эпизоотической ситуацией
Мероприятия по НИОКР в рамках ФЦП «Национальная система химической и биологической безопасности РФ на 2009-2013 годы»,
«Создание и контроль на естественно-восприимчивых животных новых защитных препаратов на основе выделенных циркулирующих штаммов вируса ящура (типов А, О, Азия-1)
для профилактики и ликвидации заболевания; разработка вакцин против высокопатогенного гриппа птиц из выделенных эпизоотических изолятов (Н5 и Н7), изготовление опытных
партий и их испытание; конструирование и испытание ассоциированной вакцины против
высокопатогенного гриппа птиц и Ньюкаслской болезни из эпизоотических изолятов этих
возбудителей; создание и контроль на естественно-восприимчивых животных вакцин против бешенства из вновь выделенных и их испытание»
Госконтракт № 56 от 12.07.2012 г.
«Выделение и изучение эпизоотических изолятов вируса ящура (А, О, Азия-1) и их изменчивости (в том числе на естественно-восприимчивых животных), разработка средств индикации и идентификации, а также оценка иммунитета и дифференциации вакцинированных
и переболевших животных; изучение вновь выделенных штаммов высокопатогенного
гриппа птиц (Н4, Н5, Н7, Н9), разработка новых методов диагностики с использованием
Real-time ПЦР и оценки иммунитета; характеристика новых штаммов возбудителя КЧС,
разработка новых методов диагностики, дифференцицация вакцинированных от переболевших животных с использованием рекомбинантных антигенов; изучение антигенной и
генетической изменчивости штаммов и изолятов вируса бешенства, с использованием моноклональных антител, разработка более чувствительных и специфических методов диагностики». Госконтракт № 58 от 12.07.2012 г.
8
2.3.
2.4.
2.5.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
«Создание базы данных геномных портретов штаммов возбудителей особо опасных инфекций животных и разработка стандартных методов генотипирования»
Госконтракт № 57 от 12.07.2012 г.
«Разработка информационно-аналитической подсистемы индикации и идентификации возбудителей ООИ новых и возвращающихся инфекций животных и прогнозов биологической опасности развития эпизоотий в результате заноса, чрезвычайных ситуаций и террористических актов на основе результатов мониторинга с использованием ГИС технологий». Госконтракт № 59 от 12.07.2012 г.
«Разработка средств и методов повышения эффективности вакцинации против инфекционных болезней животных» Госконтракт № 1738/13 от 13.09.2012 г.
Межгосударственная целевая программа «Инновационные биотехнологии» тема:
«Разработка тест-системы для дифференциальной диагностики ящура и ВБС» Шифр
«2011-16-МЦП/20»
Госконтракт №16.М04.12.0020 от 26.04.11г.
Договор № 783/10 от 19.10.11г. по теме "Тестирование биологической активности препарата вакцинного белка вируса ящура на с/х животных"
Договор по теме "Разработка методов аналитического контроля анионных ПАВ – конденсационных олигомеров" № 830/11 от 01.11.2011 г.
«Разработка экспериментальных тест-систем для обнаружения патогенов свиней»
Договор № 111/02 от 06.02. 2012г.
Соглашение по сотрудничеству № 58-0210-1-141F от 01.09.2011 с МСХ США
«Характеристика штаммов вируса ящура»
Тематика ФГБУ «ВНИИЗЖ» за счет средств от приносящей доход деятельности
Тема №1-02 «Разработка комплексной системы контроля инфекционных болезней птиц»
( Ветблагополучие 1-02)
Тема № 2-02 «Разработка комплексной системы средств и методов по диагностике, профилактике и борьбе с инфекционными болезнями КРС, МРС, плотоядных и рыб»
( Ветблагополучие 2-02)
Тема № 3-02 « Совершенствование методов контроля инфекционных болезней свиней, методов лабораторных исследований остатков запрещенных вредных веществ в организме
живых животных, продуктах животного происхождения»»( Ветблагополучие 3-02)
9
2. ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В РАМКАХ ГОСУДАРСТВЕННОГО
ЗАДАНИЯ
Государственные услуги
2.1. Услуга 1 Лабораторные исследования по диагностике и профилактике
болезней животных
Таблица 2
Количество лабораторных исследований, проведенных по диагностике болезней животных в рамках государственной услуги 1.
Вид исследований
Дополнение
к ГЗ
приказ
№ 591
от 23.11.12
ИТОГО:
10 758
1 100
10 758
1 100
96
1 200
4 500
96
1 200
4 500
1 000
600
1 500
468
1 000
600
1 500
468
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
ПЛАН
1.Лабораторные исследования сывороток крови животных на наличие антител к вирусу ящура
Ящур - ( ИФА)
Ящур - ( NSP- ИФА)
2.Серологический мониторинг с целью выявления
риска заноса или степени распространения болезней
свиней.
АЧС (ПЦР)
Сальмонеллез свиней (ИФА)
Actinobacillus pleuropneumoniae свиней с серотипированием (ИФА)
3. Серологический мониторинг с целью выявления
риска заноса или степени распространения болезней
КРС.
Бруцеллез КРС (ИФА)
Лейкоз КРС (ИФА)
Пастереллез КРС (ИФА)
Микоплазмоз КРС (ИФА)
4. Серологический мониторинг с целью выявления
степени распространения бешенства.
Бешенство - исследование ткани головного мозга (иммуннофлуоресценция)
Бешенство - исследование ткани головного мозга (ИФА)
Бешенство - исследование сывороток крови в РН в культуре клеток
Бешенство - исследование. проб костной ткани и зубов на тетрациклин (флюоресценция)
Бешенство - исследование ткани головного мозга (вирусовыделение)
Бешенство (ПЦР)
9
1
9
1
1 927
43 304
57195
25 954
1 927
43 304
92867
5. Серологический мониторинг с целью выявления
риска заноса или степени распространения микоплазмоза птиц
Мg, Мs птиц (ИФА)
Грипп птиц (ИФА)
НБ птиц (РТГА)
ГЗ У1 ВСЕГО
25 954
35 672
10
2.1.1.Лабораторные исследования сывороток крови животных на наличие антител к вирусу ящура.
Таблица 3
Результаты лабораторных исследований сывороток крови с/х животных на
наличие антител к вирусу ящура типов А, О и Азия-1 в регионах буферной
зоны в рамках государственной услуги 1.
Регион
Астраханская область
Республика Тува (КРС)
Республика Тува (МРС)
Владимирская область
Иркутская область
Сахалинская область
Республика Алтай (КРС)
Республика Алтай (МРС)
Республика Бурятия (МРС)
Московская область (КРС)
Хабаровский край (КРС)
Амурская область (КРС)
Амурская область (МРС)
Забайкальский край (КРС)
Итого
Срок после
вакцинаци
(сутки)
33-323
20-60
31-61
20-214
30-202
26-92
94-131
94-130
105-178
28-40
20-247
13-189
51-212
7-89
Колво
проб
469
258
136
117
294
500
230
120
402
152
308
150
50
400
3586
Наличие иммунных животных к
вирусу ящура типов (%)
А
О
Азия-1
47,1
37,5
57,3
44,6
35,3
37,2
44,1
27,2
42,6
81,0
68,0
75,0
60,5
58,5
61,6
77,0
76,2
77,6
10,0
14,8
13,9
8,3
5,0
7,5
61,9
45,3
64,4
82,2
65,1
80,9
59,1
61,7
62,7
52,0
53,3
58,7
48,0
42,0
56,0
72,2
86,0
85,2
Из данных таблицы 3 следует, что при проведении серомониторинга в
2012г. высокий уровень иммунного КРС (76,2-77,6%) наблюдался среди вакцинированного поголовья в Сахалинской области. Во Владимирской, Московской областях и Забайкальском крае, был отмечен средний уровень иммунных животных
(65,1-86,0%). Несколько ниже уровень иммунных животных (52,0-62,7%) зарегистрирован среди КРС в Иркутской, Амурской областях и Хабаровском крае Низкий уровень иммунных животных (ниже 50%) был зарегистрирован в Астраханской области, Республике Тува. Особенно низкие показатели были отмечены среди КРС и МРС Республики Алтай, где вакцинация животных проводилась однократно.
Дополнительно было исследовано также 1100 сывороток крови КРС на
наличие антител к неструктурным белкам вируса ящура. При исследовании 549
проб сывороток крови КРС из Таджикистана 161 оказалась положительной, из 144
11
исследованных проб из Иркутской области 5 было положительных, из 185 проб
сывороток КРС из Казахстана положительными оказались 12 проб.
2.1.2.Серологический мониторинг с целью выявления риска заноса или
степени распространения болезней свиней.
Всего с целью выявления риска заноса или степени распространения болезней свиней было проведено 5796 исследований: АЧС-96, актинобациллезная
плевропневмония ( Арр) -4500, сальмонеллез-1200.
Африканская чума свиней.
По распоряжению РСХН (телефонограмма №ФА-Ас-2/320т от 05 сентября
2012) проводился мониторинг АЧС в дикой фауне РФ. Методом ПЦР-РВ были
исследованы 96 проб внутренних органов от диких кабанов из охотничьих хозяйств Астраханской, Ярославской, Московской, Тверской областей РФ и Гродненской области Республики Беларусь. В результате проведенных исследований
вирус АЧС в исследованных пробах не обнаружен (табл. 4).
Таблица 4
Результаты исследования биоматериала от диких кабанов на наличие вируса африканской чумы свиней
Регион
Астраханская обл
Ярославская обл
Московская обл
Тверская обл
р. Беларусь Гродненская обл
всего
Количество исследованных
проб
16
19
47
7
7
96
Количество положительных проб
0
0
0
0
0
0
При исследовании образцов мясной продукции, полученных из неблагополучных по АЧС регионов РФ, ДНК вируса АЧС была обнаружена в свиных сосисках, поступивших из ФГУП «Кубанская».
12
Исследования сывороток крови свиней на наличие антител к различным
серотипам Actinobacillus pleuropneumoniae. (Арр)
Actinobacillus pleuropneumoniae является этиологическим агентом актинобациллезной плевропневмонии свиней – заболевания, вызывающего большие потери в промышленном свиноводстве.
Цель данных исследований заключалась в том, чтобы оценить серологическими методами степень распространения A. pleuropneumoniae, а также определить, какие серотипы этой бактерии циркулируют в хозяйствах Белгородской и
Владимирской областей РФ.
ИФА. Исследования проводили методом иммуноферментного анализа с использованием восьми тест-систем фирмы ID-VET (Франция): ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 1-9-11 Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 2
Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 2-6 Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 3-6-8 Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 47 Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 5 Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 10 Indirect, ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 12
Indirec.
Сыворотки крови свиней были из различных хозяйств Белгородской и Владимирской областей РФ.
На наличие антител к различным серотипам АПП было протестировано более 560 сывороток крови свиней из 20 хозяйств Белгородской области и 2 хозяйств Владимирской области. Каждая сыворотка исследовалась в 8 тестсистемах, т.е. всего методом ИФА было проведено 4500 исследований. Результаты исследований отражены в таблице 5.
В 9 из 20 обследованных хозяйств Белгородской области все проверявшиеся
животные были серонегативными ко всем типам A. pleuropneumoniae. Это может
свидетельствовать о том, что данные хозяйства свободны от A. pleuropneumoniae.
Однако, количество исследованных сывороток из этих хозяйств недостаточно для
того, чтобы утверждать это окончательно.
13
В 11 хозяйствах, где были выявлены серопозитивные животные, большинство сывороток показали положительный результат в тест-системах “ID Screen
Actinobacillus pleuropneumoniae 2-6 Indirect” и “ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 3-6-8 Indirect”. В обеих этих тест-системах используется антиген A.
pleuropneumoniae серотипа 6, что, вероятно, и объясняет такие результаты. Таким
образом, можно предполагать, что в этих хозяйствах циркулирует A. pleuropneumoniae серотипа 6. Данный серотип является низковирулентным и не наносит
значимого экономического ущерба свиноводству.
Таблица 5
Результаты исследования сывороток крови свиней на наличие антител к
различным серотипам Actinobacillus pleuropneumoniae (Аpp)
Название хозяйства
Кол-во
исслед.
проб
Количество положительных проб к различным серотипам App
2
2-6
4-7
3-6-8
Белгородская область
0
56
59
5
18
19
1-9-11
5
10
12
12
5
0
0
0
0
19
8
Крюковский СК
Краснояружский
СК
Графовский СК
Белгородский бекон
Грайворонский СК2
Ракитянский СК
Белгородский СК
Никитовский СК
Стригуновский СК
Красногвардейский
СК
Волоконовский СК
Стрелецкий СК
Селекционногибридный центр
Нуклеус
Красногвардейский
СК-1
Красногвардейский
СК-2
Новояковлевский
СК
Калиновский СК
Казацкий СК
Алексеевский бекон
59
19
0
0
10
10
20
0
0
0
10
10
18
0
2
1
10
10
18
4
4
4
0
0
0
0
0
0
4
3
2
47
23
25
10
18
0
0
0
0
0
44
7
16
9
0
1
4
2
2
0
46
21
21
10
0
6
2
4
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
7
4
5
0
0
16
41
20
0
0
0
0
18
0
0
3
0
0
20
0
0
0
0
0
0
0
0
0
4
28
20
0
0
8
0
0
0
18
0
0
0
0
0
0
20
0
0
0
0
0
0
0
0
14
0
0
0
0
0
0
0
0
16
16
18
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
ЗАО по св-ву Владимирское
КФХ Авакян
80
0
Владимирская область
1
0
59
53
1
0
0
48
0
0
0
0
0
0
13
0
14
В этих же 11 хозяйствах некоторые сыворотки оказались положительными в
тест-системах на серотипы 4-7, 1-9-11 и 12. Маловероятно, что в одном хозяйстве
циркулируют по несколько разных серотипов Аpp. Гораздо более вероятно полученные результаты объясняются тем, что между различными серотипами возможны перекрестные реакции. В пользу этого предположения свидетельствует и тот
факт, что все сыворотки, положительные в тест-ситемах 4-7, 1-9-11 и 12, были из
числа серопозитивных к серотипам 2-6 и 3-6-8. Другими словами, одно и то же
животное было серопозитивно в 5 тест-системах. Это явно указывает на перекрест
между тест-системами, и положительные результаты в тест-системах 4-7, 1-9-11 и
12 можно считать ложными.
Таким образом, анализ результатов свидетельствует о том, что в обследованных хозяйствах Белгородской области преобладают низковирулентные серотипы Арр.
Во Владимирской области было обследовано два хозяйства. В коллективном фермерском хозяйстве «Авакян» 13 из 48 исследованных сывороток показали
положительный результат в тест-системе “ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 4-7 Indirect”. Таким образом, можно предполагать, что в этом хозяйстве
циркулирует App серотипа 4 или 7. Серотип 4 относится к числу низковирулентных, а серотип 7, по разным данным, может быть как высоковирулентным, так и
«умеренным».
В ЗАО по свиноводству «Владимирское» антитела к Арр были выявлены в
двух тест-системах: “ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 1-9-11 Indirect” и
“ID Screen Actinobacillus pleuropneumoniae 4-7 Indirect”. Это согласуется с результатами, полученными нами ранее другими методами. Методом ПЦР в этом
хозяйстве обнаруживали две разные геногруппы Арр. Для одной из них удалось
определить серотип бактерии: девятый. Этот серотип является высоковирулентным.
Таким образом, в результате исследования методом ИФА 4500 сывороток
крови свиней из 22 хозяйств Белгородской и Владимирской областей на наличие
15
антител к различным серотипам Actinobacillus pleuropneumoniae установлено, что
9 из 20 обследованных хозяйств Белгородской области свободны от Actinobacillus
pleuropneumoniae, в остальных циркулируют низковирулентные серотипы этой
бактерии. Высоковирулентный серотип A. pleuropneumoniae выявлен в одном из
хозяйств Владимирской области.
Сальмонеллез (паратиф) свиней — инфекционная, широко распространенная
болезнь,
вызываемая
бактериями
рода
Salmonella
(семейство
Enterobacteriaceae). В настоящее время известно 2324 серовара, разделенных по
набору соматических (О) антигенов на 46 серогрупп. Основные возбудители
сальмонеллеза животных относятся к серогруппам В, С и Д.
Заболеваемость и летальность поросят колеблются в больших пределах и
зависят от возраста, породы, сезона года, условий содержания и кормления, типа
хозяйства и других причин. Заболеваемость достигает 50-60%, а летальность поросят при сальмонеллезе от 13,5 до 82,3%.
Прижизненную диагностику осуществляют путем серологических исследований сыворотки крови.
Таблица 6
Результаты серомониторинга по сальмонеллезу свиней за 2012г.
Регионы
Белгородская обл.
Кол-во
проб
494
Тамбовская обл.
Владимирская обл.
Челябинская обл.
Положительные
181
%
полож
36,6
100
15
121
58
14
52
58
93,3
43
Кемеровская обл.
Тверская обл.
140
143
126
47
90
33
Ульяновская обл.
Воронежская обл.
Оренбургская обл.
63
33
59
51
16
3
81
48,5
5
Московская обл.
32
20
63
Всего:
1200
568
47,3
Государственный мониторинг по исследованию сывороток крови свиней на
наличие антител к бактериям рода Salmonella проводили с использованием имму16
ноферментных тест-систем «IDEXX» согласно инструкции производителя. Было
исследовано 1200 сывороток крови свиней, полученных из 10 регионов РФ. Полученные результаты представлены в таблице 6.
Проведенные исследования 1200 сывороток крови свиней, полученных из 10
регионов РФ, на наличие антител к бактериям рода Salmonella показали, что количество положительных результатов в среднем составило 47,3%, что подтверждает актуальность проводимого государственного мониторинга.
2.1.3 Серологический мониторинг с целью выявления риска заноса или
степени распространения болезней КРС.
Всего с целью выявления риска заноса или степени распространения болезней КРС было проведено 3568 исследований (бруцеллез-1000, лейкоз-600).
Бруцеллез – хроническая инфекционная болезнь животных и человека. В
связи с социальной опасностью бруцеллез включен в список карантинных болезней.
Экономический ущерб складывается из недополучения приплода (аборты
могут регистрироваться у 60% животных), яловости, снижения продуктивности,
большие затраты идут на проведение карантинных мероприятий. Заболевание у
человека может привести к инвалидности.
При выполнении ГЗ1 было исследовано 1000 проб сывороток крови КРС,
полученных из 16 регионов РФ на наличие антител к Br. аbortus. С использованием иммуноферментного набора производства «Institut Pasteur» Положительных
проб выявлено не было.
Вирусный лейкоз крупного рогатого скота относят к заболеваниям опухолевой природы – гемобластозам, основным признаком которых является злокачественное разрастание клеток кроветворной ткани и нарушение их созревания.
Возбудителем данной инфекционной патологии является РНК-содержащий онкогенный вирус, относящийся к роду Oncovirus типа С, семейства Retroviridae
Лейкоз наносит огромный экономический ущерб народному хозяйству, который связан с преждевременной выбраковкой высокоценных животных (недополучение продуктов животноводства); гибелью животных и утилизацией туш на
17
мясокомбинатах; затратами неблагополучных хозяйств на оздоровительные мероприятия; ограничениями, накладываемыми на хозяйства в случае их неблагополучия (такие потери особенно ощутимы в племенных хозяйствах); исключением из
племенной работы клинически здоровых животных – потомков больных лейкозом
родителей (утрата ценных генетических линий); изъятием из банка и утилизацией
накопленной спермы племенных быков-производителей, у которых постлетально
подтвержден лейкоз, и затратами на их приобретение и содержание.
В соответствии с ГЗ1 было проведено исследование 600 проб сыворотки
крови КРС, полученных из хозяйств РФ на наличие антител к вирусу лейкоза КРС
методом ИФА с применением тест-систем «Institut Pasteur». Положительный результат был установлен в 7,6% проб, что косвенно свидетельствует о достаточно
благополучной ситуации по данному заболеванию в обследованных хозяйствах.
Пастереллез - инфекционная болезнь многих видов млекопитающих и
птиц, характеризующаяся при остром течении явлениями септицемии, геморрагического диатеза, при подостром и хроническом - крупозной или катаральной
пневмонией, артритами, маститами, кератоконьюктивитами, реже энтеритами.
Возбудитель болезни — бактерия Pasteurella multocida. Экономический
ущерб складывается из падежа больных животных, вынужденного убоя, снижения
прироста массы животных, затрат на лечение, общую и специфическую профилактику и ликвидацию болезни. Эпизоотической особенностью пастереллеза являются энзоотичность и формирование стационарных эпизоотических очагов.
Лабораторную диагностику сывороток крови КРС на наличие антител к
Pasteurella multocida проводили с использованием непрямого варианта ИФА тестсистемы ФГБУ «ВНИИЗЖ». Было исследовано 1500 проб сывороток крови КРС,
полученных из 17 регионов РФ, результаты представлены в таблице 7.
Таблица 7
Результаты исследований сывороток крови КРС на пастереллез
в различных регионах РФ
Регионы
Республика Мордовия
Республика Калмыкия
Тверская область
Владимирская область
Рязанская область
Кол-во исследований
163
130
120
39
183
Положительный результат
111
25
76
38
135
18
Ивановская область
Ленинградская область
Орловская область
Нижегородская область
Курская область
Вологодская область
Астраханская область
Смоленская область
Московская область
Саратовская область
Ярославская область
Оренбургская область
Всего:
107
27
206
85
31
30
173
30
98
51
20
7
1500
102
17
200
68
16
19
170
20
69
29
12
6
1113
Как видно из представленных результатов уровень положительных сывороток на наличие антител к пастереллам, превышает 50% в большинстве регионов
Российской Федерации. Подобные результаты подтверждают данные о широком
носительстве пастерелл у КРС в хозяйствах РФ.
Микоплазмоз - контагиозная болезнь животных, характеризующаяся поражением верхних дыхательных путей, серозно-катаральным воспалением легких,
серозных покровов, кератоконъюнктивитами, артритами у молодняка, абортами у
беременных животных, эндометритами, маститами и рождением мертвого нежизнеспособного приплода. Возбудитель болезни - микоплазмы, относящиеся к семейству Mycoplasmataceae, роду Mycoplasma, видам, вызывающим у животных
соответствующие болезни: М. bovis (пневмоартрит крупного рогатого скота).
За отчетный период было исследовано 468 сывороток крови КРС, полученных из 10 регионов РФ, 322 из которых 68,9% были положительны, т.е. содержали антитела к Mycoplasma bovis, что свидетельствует о достаточно широком распространении этого заболевания в хозяйствах.
2.1.4 Серологический мониторинг с целью выявления степени распространения бешенства.
Всего с целью выявления степени распространения бешенства было проведено 450 исследований.
19
В таблице 8 указаны результаты исследования проб, которые вошли в отчет
о выполнении государственного задания, услуга 1, всего проведено 450 исследований. Все пробы головного мозга исследовали в РИФ, а материал для первичной
диагностики (головной мозг, извлеченный из голов трупов животных) исследовали в реакции выделения вируса в культуре клеток. Из 90 исследованных проб головного мозга животных 10 проб оказались положительными (8 из Московской
области, 2 из Тверской области). Отрицательные в РИФ пробы исследовали методами ИФА и выделения вируса в культуре клеток. Для всех исследованных на
данный момент времени (18.12.12.) проб были получены отрицательные результаты.
Таблица 8
Результаты лабораторных исследований по мониторингу бешенства
Диагностические исследования
Регион/область
РИФ
ИФА
ВВ в КК
Всего Пол. Всего Пол. Всего Пол.
Тетрациклин
Всего
Пол.
РН в КК
Всего Пол.*
Р. Карелия
29
0
29
0
29
0
30
4
28
19
Тверская
37
2
33
0
34
в/р
н/д
-----
1
1
Московская
10
8
2
0
1
0
н/д
-----
н/д
-----
Ростовская
н/д
-----
н/д
-----
н/д
-----
25
2
24
15
Смоленская
14
0
6
в/р
24
в/р
н/д
-----
н/д
-----
Нижегородская
н/д
-----
20
в/р
2
в/р
35
в/р
37
17
в/р
90
в/р
90
52
Всего
90
10
90
в/р
90
* - положительные пробы с активностью ≥0,5 МЕ/мл
н/д – не делали
в/р – в работе (пробы в настоящее время исследуется)
Из 90 проб зубной ткани на данный момент исследовано 82 пробы: 30 проб
из Р. Карелия (4 положительных – 13,3%), 25 проб из Ростовской области (2 положительных – 8%), 27 проб из Нижегородской области (8 положительных –
29,6%).
Пробы крови на текущий момент времени исследованы в полном объеме.
Процент положительных проб по регионам оказался следующим: Р. Карелия –
67,85%, Ростовская область – 62,5%, Нижегородская область – 45,95%.
20
Как видно из представленных данных, особенно по Р. Карелия и Ростовской
области, результаты исследований на тетрациклин (эффективность поедания вакцинных приманок) не соотносятся с результатами исследований на антирабические вируснейтрализующие антитела (эффективность вакцинации).
2.1.5 Серологический мониторинг с целью выявления риска заноса или
степени распространения микоплазмоза птиц
Исследования проводили методом ИФА с использованием наборов компании «SYNBIOTICS». Основными объектами мониторинга были родительские и
прародительские стада кур (племенное поголовье). Всего было проведено 25954
исследования. Поквартальный объем исследований указан в табл.9.
Таблица 9
Диагностические исследования по Микоплазмам галлисептикум ( Mg) и микоплазме синовиа (Ms)
Исследования ИФА
Мg
Проведено исследований
1 квартал
Январь
596
(4.200)
Февраль
956
Март
500
2 квартал
Апрель
2283
(7.350)
Май
883
Июнь
686
3 квартал
Июль
1411
(7.350)
Август
1109
Сентябрь
1128
4 квартал
Октябрь
1560
(7.054)
Ноябрь
1209
Декабрь
889
Итого:
13210
Проведено всего исследований: 25.954 проб
+ проб
71
180
74
151
82
48
152
101
204
255
52
99
1469
Мс
Проведено исследований
598
907
643
2121
808
569
1504
1027
1171
1286
1233
877
12744
+ проб
101
198
91
366
223
67
360
230
240
243
180
106
2405
Серомониторинг по Мg.
Сыворотки для исследований на Mg поступили из 59 птицехозяйств яичного
направления. Серопозитивные пробы получены из 19 птицефабрик, что составило 32,2% от общего количества, хотя некоторые хозяйства применяют вакцину
21
против респираторного микоплазмоза, т.е. возможно выявлены поствакцинальные
антитела.
Сыворотки для исследований на Mg поступили из 45 птицехозяйств мясного
направления. Серопозитивные пробы получены из 17 птицефабрик, что составило
37,8 % от общего количества.
Серомониторинг по Мs.
Исследованы сыворотки из 55 птицехозяйств яичного направления. Серопозитивными пробы получены из 35 тицефабрик, что составило 63,6% от общего количества. Из 43 птицехозяйства мясного направления из различных регионов России и ближнего зарубежья, серопозитивными были пробы из 18 птицефабрик, что
составило 41,8% от общего количества.
На основе результатов серомониторинга птицехозяйств определен перечень
предприятий, инфицированных микоплазмами.
Дополнительно было проведено 1927 исследований сыворотки птиц на
грипп птиц в ИФА и 43304 исследования на ньюкаслскую болезнь в РТГА.
Таблица 10
Дополнительные исследования на грипп птиц в 2012 г.
Астраханская обл.
Дополнительные
исследования
516
Архангельская обл
48
Амурская обл
790
Владимирская обл.
52
Нижегородская обл.
188
Субъект
Ивановская обл.
6
Красноярский край
372
ИТОГО
1927
При проведении мониторинга по особо опасным болезням птиц дополнительно было проведено 1927 исследований на грипп сывороток крови, поступивших из 7 Субъектов РФ, входящих в список регионов по приказу №75. Дополнительно исследовано на наличие антител к вирусу НБ 43304 пробы сывороток из 15
Субъектов РФ, которые не вошли в перечень по приказу №75.
22
Таблица 11
Дополнительные исследования сывороток крови промышленных птиц в
РТГА на НБ, поступивших из птицехозяйств РФ в 2012 г.
№
Субъект РФ
Наименование п/ф
Кол-во проб
1
Белгородская обл.
2
Костромская обл.
3
Курганская область
ЗАО «Вейделевский бройлер» (Вейделевка-1,
Вейделевка-2, Белый колодезь),
ЗАО «Краснояружский бройлер»,
ООО «Белгранкорм» (Ракитное-1, Ракитное-4,
Ракитное-5),
ЗАО «Приосколье»
ООО «Птичное»,
ОАО «Волжская»,
ЗАО «Галичское»,
ЗАО «Сусанинская»,
ЗАО «Костромская»
ОАО Агрофирма «Боровская»
4
Курская область
ООО «Курская»
1784
5
Липецкая область
ОАО «Куриное царство»
687
ФГБУ, ППЗ «Птичное»,
ЗАО «Петелинская»,
ФГУП, ППЗ «Кучинский»,
ЗАО «Моссельпром»
ОНО, ППЗ «Смена»
ЗАО АПК «Орловская Нива»
8437
6
Московская обл.
7
Орловская область
8
Пермский край
3645
1237
3615
1547
11
Ростовская область
ОАО «Комсомольская»
ГУП ППФ «Чермасан»,
ООО ППЗ «Юбилейная»,
ОАО «Туймазинская»,
ООО «Крестьянское подворье»
ЗАО «Марийское»,
СПК «Горномарийское»
ООО «Акашевская»
ОАО «Надежда»
12
Рязанская область
ОАО «Бройлер Рязани»
1061
13
Самарская область
ОАО «Цыпочка»
ОАО «Тульская», СПП, ОАО «Ефремовская»,
ООО «Суворовская»,
ЗАО «Краснобор»
ЗАО «Ангарская»
ОАО «Ярославский бройлер»,
ОАО «Волжанин»,
ООО «Возрождение»
Итого
830
9
Республика Башкортостан
10
Республика Марий Эл
13
Тульская обл.
14
15
Иркутская область
Ярославская область
1054
3854
968
1190
6368
1794
5233
43304
23
Таким образом, в результате проведения лабораторных исследований по диагностике болезней животных в рамках услуги 1 всего было выполнено 92867 исследований (план-35672 и дополнительно- 57195).
2.2. Услуга 2. Исследование лекарственных средств для животных, генетически модифицированных кормов и кормовых добавок
В РФ разрешено использование в питании населения 18 линий ГМО (4 линии сои, 10 линий кукурузы, 2 сорта картофеля, 1 линия риса, 1 линия сахарной
свеклы); использование при производстве кормов – 14 линий ГМО (4 линии сои,
10 линий кукурузы). Сельскохозяйственное выращивание ГМО в России не производится.
В декабре 2007 года вступил в силу Федеральный закон № 234-ФЗ, по которому на упаковках продуктов питания должна присутствовать информация о
наличии в них компонентов, полученных с ГМО, в случае если содержание указанных организмов в таком компоненте составляет более 0,9%. Таким образом,
Закон РФ «О защите прав потребителей был гармонизирован с требованиями Европейского Союза по этикетированию пищевых продуктов, полученных из ГМО,
установленными
Директивой
Европейского
Парламента
от
22.09.2003
№1829/2003 «О генетически модифицированной пище и кормах», которая с апреля 2004 г. ввела в странах Европейского Союза 0,9% пороговый уровень для этикетирования пищевых продуктов, полученных из ГМО.
За 2012 год в рамках государственного задания (ГЗ У2), сотрудниками лаборатории контроля микроорганизмов, химических веществ, ГМО и радионуклидов в продукции методом ПЦР с использованием набора «Амплисенс плантскрин» (пр-во ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзор, г. Москва) исследовано 78 проб
кормов и пищевых добавок на наличие генетически модифицированных объектов.
Анализ основан на выявлении промотора 35S в растительном материале и продуктах его переработки, присутствие которой свидетельствует о генетической модификации генома сои или кукурузы. Выявлена одна положительная проба, со-
24
держащая 35S промотор: кормовая добавка - Хостазим Р-10000PF, производства
Болгарии.
2.3. Услуга 3. Ведение и пополнение Всероссийской коллекции клеточных
культур, штаммов вирусов, микробов и микопатогенов
Основными направлениями деятельности Коллекции штаммов микроорганизмов (КШМ) в 2012 году было:
1. Осуществление работ по депонированию штаммов микроорганизмов.
2. Каталогизация поступающих на хранение в КШМ штаммов.
3. Участие в подготовке разрабатываемых СТО на штаммы диагностические, производственные/вакцинные и контрольные с целью последующего их депонирования.
4. Разработка совместно с депозиторами программ комиссионных испытаний при депонировании штаммов в КШМ, а также всех документов досье каждого
депонируемого штамма.
5. Освежение на естественно восприимчивых животных вирусных штаммов
с целью последующего их депонирования.
С целью депонирования в Коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ
«ВНИИЗЖ» проведены комиссионные испытания вируса ящура типа О штамма
№2101/Казахстан/2010, типа О штамма №2108/Забайкальский/2010, типа О
штамма №2102/Забайкальский/2010 (производственных), а также штамма вируса
инфекционного
бронхита
aMPV/B/05/2009,
MPV
кур
–
RF08-10
07BT,
(IBV08-10),
вируса
метапневмовируса
ньюкаслской
болезни
NDV/chicken/Amursky/1056/08.
Проводится депонирование 2 штаммов: МПВИ птиц aMPV/B /05/2009 и
ВЯ О№2147/Приморский/2012.
Кроме вышеуказанного, совместно с сотрудниками референтной лаборатории ящура и везикулярных болезней были освежены на КРС, исследованы, паспортизированы
и
депонированы
в
КШМ
штаммы
вируса
ящура:
О№2107/Ливан/2010,
25
О№2123/Южная
О№2124/Восточный
Осетия/2011,
О№2047/Саудовская
Казахстан/2011,
Аравия/2008,
О№2119/Киргизия/2011,
А№2092/Ливан/2009.
В соответствии с договором о сотрудничестве со сторонними организациями
в КШМ поступили следующие биоматериалы:
- изоляты вируса КЧС за 1982-2011г. (поставка ВНИИВВиМ от 10.11.11.) –
15 образцов,
- изоляты вируса КЧС за 1990-2012 г. (поставка ВНИИВВиМ от 24.10.12.) –
16 образцов,
За отчётный период в КШМ передано на хранение из лабораторий ФГБУ
«ВНИИЗЖ» паспортизированные штаммы вирусов болезней птиц: оспы кур
«КЭМ-7» (производственный), инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ) птиц «О»
(производственный),
инфекционной бурсальной болезни (ИББ) «Винтерфилд-
2512» (производственный), инфекционной бурсальной болезни (ИББ) «БГ»
(производственный), инфекционной бурсальной болезни (ИББ) «К-58»
(производственный).
По результатам проведённой каталогизации штаммов, находящихся на хранении в КШМ и коллекциях структурных подразделений, на учёте в ФГБУ
«ВНИИЗЖ» в настоящее время находятся 327 штаммов, относящихся
- к 4 родам – вирусы, бактерии, микоплазмы и хламидии;
- к 63 видам, в т.ч. вирусов 48, бактерий 12, микоплазм 2 и хламидий 1;
- к 230 штаммам, в т.ч. вирусов 191, бактерий 35, микоплазм 2 и хламидий 2.
В течение 2012 года сотрудниками ОБТК и КШМ совместно с другими лабораториями и отделом управления качества проведена работа по подготовке 22
стандартов организации (СТО) по изготовлению и контролю посевных материалов из производственных штаммов микроорганизмов, применяемых в ФГБУ
«ВНИИЗЖ», из которых 4 - утверждены и 18 - находятся на согласовании в ФГБУ
«ВГНКИ».
Оформлен «Каталог постоянных клеточных линий и субкультур, хранящихся в криобанке ФГБУ «ВНИИЗЖ». В каталоге представлены паспорта 40 посто26
янных клеточных линий и субкультур (из 64 имеющихся), которые наиболее часто используются в НИР, производстве вакцинных и диагностических препаратов.
В настоящее время Федеральная служба по интеллектуальной собственности Российской Федерации на основании представленных документов, определяющих права и обязанности Коллекции, подтвердила возможность ФГБУ
«ВНИИЗЖ» проводить депонирование штаммов микроорганизмов II-IV групп патогенности, в т.ч. и при оценке патентоспособности соответствующих объектов
изобретений.
2.4. Услуга 4. Лабораторные исследования по показателям безопасности и
качества сырья и продукции животного происхождения
По показателям безопасности и качества проводили исследования пищевой
продукции и кормов на остаточное содержание пестицидов, токсичных элементов, антибактериальных веществ, антигельминтных препаратов, гормонов и токсинов.
В современном промышленном животноводстве и птицеводстве для увеличения производства продукции нередко применяют различные гормональные
стимуляторы роста (прогестерон, тестостерон, эстрадиол-17Р и др.), что может
приводить к их избыточному накоплению в мясе и мясопродуктах. Это представляет серьезную опасность для здоровья человека, поскольку данные соединения
нарушают обменные процессы и гормональный статус организма, влияют на сердечную деятельность, могут обладать канцерогенным эффектом.
В связи с этим во многих странах мира ужесточаются требования по контролю за содержанием гормональных препаратов в продуктах животного происхождения, что предусмотрено соответствующими Директивами ЕЭС 89/662/ЕЕС,
90/425/ЕЕС, 96/23/ЕС.
В нашей стране Департаментом ветеринарии МСХ РФ издано соответствующее Указание (№10-7-1/900 от 04.10.99 г.) по организации Государственного ветеринарного надзора за содержанием гормональных стимуляторов роста и тиреостатиков в продуктах животного происхождения, в котором отражены требования
27
по предупреждению попадания гормонов в продовольственное сырье; требования,
критерии и мероприятия, касающиеся их применения в ветеринарной практике, а
также лабораторный контроль за содержанием этих веществ в продуктах и кормах.
Одним из важнейших событий в области безопасности пищевой продукции
стало открытие в середине 20 века микотоксинов.
Для основных микотоксинов в ряде стран установлены предельно допустимые концетрации (ПДК). В РФ ПДК микотоксинов в пищевых продуктах регламентированы требованиями СанПиНа 2.3.2.1078-01.
За отчетный период 2012 г было проведено 29228 исследований сырье и
продукты животного происхождения по показателям безопасности и качества
(табл.12).
Таблица 12
Результаты исследования пищевых продуктов и сырья по показателям
безопасности и качества
№
п/п
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
Наименование показателя
Исследование по определению количества мезофильных
аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов
(КМАФАнМ)
Исследование по выявлению бактерий группы кишечной
палочки (БГКП)
Сальмонеллы
Listeria monocytogenes
Исследование по выявлению бактерии рода Proteus
Исследование по выявлению бактерии рода Bacillus
Молочнокислые бактерии
Промышленная стерильность консервов гр А и Б
Staphylococcus aureus
Исследование по выявлению cульфитредуцирующих клостридий .
Исследование по определению количества соматических
клеток
Дрожжи и плесени
Бифидобактерии
Ингибирующие в/ва
Исследование на содержание радионуклидов (цезий-137,
стронций-90)
ГМИ
ХАФ
кол-во
исследований
из них положительные
282
40
352
8
301
450
30
58
39
5
180
4
1
180
63
100
5
80
20
7
415
209
571
2
28
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
Антибактериальные вещества
Сульфаниламиды
Хинолоны
Антгельментики
Стильбены
Тиреостатики
Лактоны резорциловой к/ты (зеранол)
β-агонисты (кленбутерол)
Кортикостероиды
Нитрофуран, нитроимидозолы
Исследование по определению содержания микотоксинов
Органолептические показатели (8 шт)
Седативные лекарственные средства
Пиретроиды+карбаматы, ХОС, ПХБ
Никотиноиды, ФОП
Исследование на содержание остаточного количества пестицидов
Исследование по определению содержания токсичных элементов
Исследование по определению содержания нитрозаминов
Исследование по определению содержания влаги
Исследования по определению посторонних включений
Исследование по определению содержания соли
Исследование по определению протеина сырого белка
Исследование по поределению присутствия бенз(а)пирена
Исследование по определению содержания жира в пищевых
продуктах
Исследование по определению содержания жира в молоке
Исследование по определению кислотности в продуктах
питания
Кислотное число
Исследования по определению массовой доли составных
частей
1570
111
111
150
744
53
570
543
139
529
581
114
55
1650
1035
6
3438
4
фосфотаза, диастаза
Исследование по определению содержания костных включений
Исследование по определению содержания крахмала
Исследование по определению массовой доли сахаров
Исследование по определению содержания макро- и микроэлементов: цинк, хром, железо, марганец, никель, кобальт,
серебро, молибден, олово, медь, кальций
Исследование по определению содержания нитратов и
нитритов в продуктах питания и комбикормах
Исследование по определению содержания витаминов в
кормах и продуктах питания
Исследование по определению содержания треонина, лизина, цистина, метионина
Исследование по определению гр. термоустойчивости
Исследование по определению гр. чистоты
Исследование характеристик качества молока по показате-
23
4
3254
133
100
17
254
440
80
415
1
1
350
130
7
110
9
52
19
6001
846
140
25
7
198
200
351
29
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
лям (инструментальный метод)
альбумин в сывортке крови (набор)
глюкоза в сыворотке крови (набор)
мочевая кислота в сыворотке крови (набор)
кислотная емкость в сыворотке крови
триглицериды (набор)
мочевина в сыворотке крови (набор)
АЛТ (набор)
АСТ (набор)
холестерин (набор0
креатинин (набор)
билирубин общий
ВСЕГО
% положительных от общего количества исследований
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
29228
76
20
391
1431
4,9%
По результатам проведенных исследований, выявлены следующие показатели несоответствующие нормативным требованиям РФ:
- мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы
(КМАФАнМ) в 40 образцах (14,18%). Из них 34 образца из Владимирской области, 4 пробы из Ивановской и по 1 образцу из Костромской и Московской областей;
- бактерии группы кишечной палочки выделены из 8 проб (2,27%), 7 из которых принадлежали производителям Владимирской области, и 1 проба из Ивановской области;
- выявлено наличие сальмонелл в 4 образцах (1,33%): 3 – Владимирская и 1
– Костромская области;
-в 1 пробе «Шкурка свиная», производства Дания, выявлены бактерии
Listeria monocytogenes (0,22%);
-в 20 пробах обнаружено превышение количества дрожжей и плесени
(20%);
- в 7 образцах молока выявлено наличие ингибирующих веществ (8,75%);
- выявлено 2 положительные пробы содержащие 35S промотор (ГМО) в
мясных продуктах Владимирских производителей (0,96%),
- в 10 пробах (0,35%) Владимирской области обнаружено остаточное содержание антибактериальных веществ;
30
- в 4 образцах (0,12%) в свиных субпродуктах, производства Дания выявлено остаточное количество пестицида – гептахлора.
По показателям качества пробы несоответствующие нормативным норма
РФ составляют 11,86%. Выявлено несоответствующих 846 образцов по содержанию макро- и микроэлементов.
2.5. Услуга 5. Исследования в области качества и безопасности крупы,
комбикормов и компонентов для их производства, а также побочных
продуктов переработки зерна
Микробиологические исследования кормов для сельскохозяйственных животных проводят с целью определения их безопасности и направлены на предупреждение заболеваний, возникающих при скармливании животным.
Контаминация кормов для сельскохозяйственных животных токсигенными
и патогенными микроорганизмами является причиной не только нарушения метаболических функций животных, снижения привесов, замедления роста и увеличения падежа, но и причиной снижения качества и порчи кормов.
В зависимости от вида поражений и степени развития микроорганизмов могут происходить разложение питательных веществ корма, образование и накопление в нем вредных продуктов метаболизма микроорганизмов и образование их
токсинов.
Исследования кормов животного и растительного происхождения, комбикормов, комбикормового сырья проводили по существующим нормативным документам, в которых определены методы исследований и допустимые величины
определяемых показателей.
За 2012 год в лаборатории контроля микроорганизмов, химических веществ,
радионуклидов и ГМО в продукции ФГБУ «ВНИИЗЖ» было проведено 14259 испытаний кормов. Результаты испытаний интерпретировали в соответствии с минимально допустимыми уровнями (МДУ) в кормах, указанными в «Правилах бактериологического исследования кормов»: бактерии рода Salmonella не допускаются в 50 г, энтеропатогенные кишечные палочки и токсинообразующие анаэро-
31
бы не допускаются в 1 г корма, общая бактериальная обсемененность мясокостной муки не должна превышать 5х105 КОЕ/г.
Кроме микробиологических исследований, проводили исследования кормов
на наличие антибактериальных препаратов, гормонов, микотоксинов, пестицидов,
токсичных элементов.
Образцы кормов для испытаний поступали в Испытательный центр ФГБУ
«ВНИИЗЖ» в рамках государственного задания по проведению исследований в
области качества и безопасности зерна, крупы, комбикормов и компонентов для
их производства, а также побочных продуктов переработки зерна из 17 регионов
РФ: Астраханская, Белгородская, Владимирская, Ивановская, Кировская, Ленинградская, Липецкая, Новгородская, Нижегородская, Орловская, Оренбургская, Рязанская, Ярославская областей, Камчатский край и Республик Мордовия и Чувашия.
В таблице 13 представлены данные о количестве проб несоответствующих
нормативным требованиям РФ по показателям безопасности и качества.
Таблица 13
Результаты исследования в области качества и безопасности крупы, комбикормов и компонентов для их производства, а также побочных продуктов
переработки зерна
Показатели
Безопасность
Качество
Органолептическа
ВСЕГО
Кол-во исследований
8092
5909
255
14256
Из них, положительных
Наименование покаКол-во полозателя
жительных
проб
Общая бактериальная
51
обсемененность
Энтеропатогенные ки23
шечные палочки
Токсинообразующие
37
анаэробы
Микотоксины
90
Токсичные элементы
2
ГМИ
1
Макро- и микроэле147
менты
Нитраты
2
Влага
1
Запах
2
356
% положит.
6,57
4,8
3,43
0,13
10,0
16,42
0,89
0,4
2,47
2,5
32
В результате проведенных исследований было установлено, что в 60 пробах
были обнаружены патогенные микроорганизмы: энтеропатогенные кишечные палочки и токсинообразующие анаэробы. Бактерии рода Salmonella не были обнаружены. В 48 пробах из 346 (13,87%) было установлено превышение по показателю общая бактериальная обсемененность.
Обнаружено 90 образцов корма с превышением ПДК микотоксинов, из них
88 проб содержали Т-2 токсин, 2 пробы – зеараленон.
В шроте и жмыхе подсолнечниковом, производства Астраханской области,
выявлено остаточное количество кадмия.
Не соответствуют нормативным требованиям по показателям качества 153
пробы.
Государственное задание – услуга 5 «Исследования в области качества и
безопасности крупы, комбикормов и компонентов для их производства, а также
побочных продуктов переработки зерна» выполнена в полном объеме.
2.6. Услуга 6. Проведение лабораторных исследований в рамках Плана государственного лабораторного мониторинга остатков запрещенных и вредных
веществ в организме живых животных, продукции животного происхождения и кормах для животных на территории РФ
(Приказ №666 от 30.12.2011)
Микробиологические исследования пищевых продуктов входят в систему
мер по обеспечению безопасности продовольствия. Качество и безопасность продукции животного происхождения во многом определяют здоровье и продолжительность жизни населения страны.
В условиях, связанных с расширением международной торговли продукцией животного происхождения, роль ветеринарно-санитарной экспертизы в целом,
и бактериологических исследований в частности, трудно переоценить.
Безопасность пищевых продуктов оценивается по гигиеническим нормативам, которые включают биологические объекты, потенциально опасные химические соединения, радионуклиды и вредные растительные примеси. Присутствие
33
их в пищевых продуктах не должно превышать допустимых уровней содержания
в заданной массе (объеме) исследуемой продукции.
Цель работы – проведение лабораторных исследований остатков запрещённых и вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного
происхождения для определения остатков запрещённых и вредных веществ на
территории Российской Федерации в соответствии с Приказом Россельхознадзора
№666 от 30 декабря 2011 года о выполнении мероприятий для обеспечения требований Соглашения ВТО по СФС при вступлении России в ВТО.
В результате проведенной работы было исследовано 10464 пробы продуктов животного происхождения, кормов и биоматериалов от живых животных на
сумму 7494195,30 рублей.
+
+
+
+
+
265
350
1418
881
594
324
412
3,34
13,55
8,42
5,68
3,1
3,93
+
+
+
2,53
+
+
1860
+
+
+
+
17,78
+
+
+
+
+
+
+
1488
+
+
+
Карбаматы и
пиретроиды
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Никотиноиды
+
+
+
+
Микотоксины
+
+
+
+
+
+
+
Токсичные элементы
Седативные лек. срва
+
ХОС, ФОС
Антибиотики, ХАФ
+
+
+
Антгельминтики
Гормоны
+
+
+
14,22
%
+
+
+
2872
Мясо, субпродукты
Рыба и рыбная продукция
Нерыбные объекты промысла (ракообразные, моллюски) и продукты их
переработки, земноводные, пресмыкающиеся
Молоко
Молочные продукты
Яйца и продукты переработки
Мед и продукты пчеловодства
Корма и кормовые добавки
Биоматериал
ИТОГО
27,45
Наименование
продукта
Микробиологические
показатели
Таблица 14
Перечень объектов исследования и анализируемых показателей
В 166 образцах пищевых продуктов были выявлены несоответствия нормативным документам РФ (СанПин 2.3.2.1078-01, Требования таможенного Союза).
34
Из 10464 исследований количество выявлений составляет 1,59%. Данные представлены в таблице 15.
Таблица 15
Результаты исследований пищевых продуктов и кормов
Мясо птицы
Мясо баранина
Рыба и рыбная
продукция
Нерыбные
объекты промысла
Молоко
Молочная
продукция
Корма и кормовые добавки
Мёд и продукты пчеловодства
ИТОГО
Выявлено
%
300
10
3,33%
100
1
1%
100
9
9%
5
2
40%
-
50
4
8%
133
2
1,5%
69
13
18,8%
-
-
69
3
4,4%
-
728
70
9,61
574
25
4,35
-
-
-
5
1
20%
100
3
3%
100
1
1%
-
-
ХОС
-
100
2
2%
100
1
1%
-
Токсичные элементы-
-
40
1
2,5%
100
200
6
5
6% 2,5%
100
100
4
1
4%
1%
-
Микотоксины
-
ХАФ
-
β - агонисты
171
9
5,3%
-
БГКП
Стильбены
Мясо свинина
171
20
11,7%
100
5
5%
100
18
18%
5
1
20%
100
7
7%
-
St. aureus
Мясо говядина
Salmonella
Показатели
Всего исследовано
положительных результатов
(% от количества исследований - по этому показателю)
КМАФАнМ
Вид продукции
-
-
-
-
100
4
4%
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
133
22
16,5%
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
200
3
1,5%
-
200
5
2,5%
-
509
36
7,07
100
4
4
200
3
3
240
11
4,58
300
6
2
200
3
1,5
200
5
2,5
8
3
37,5%
8
3
37,5
35
В результате микробиологических исследований было установлено, что
наибольший процент положительных проб, не соответствующих установленным
нормам, обнаружен в группе мясо, субпродукты мясные, молоко и молочная продукция. Контаминация бактериями группы кишечной палочки (БГКП) составила
7,07 %, превышение допустимого количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) – 9,61.
В группе мясо, субпродукты было выявлено 20 образцов, содержащих бактерии рода Salmonella, что составило 4,35%. В 3 пробах корма, также обнаружены
бактерии рода Salmonella. При исследовании рыбы и рыбной продукции выявлено 4% контаминации золотистым стафилококком.
В группе мясо, субпродукты наибольший процент выявлений представлен
по показателям гормоны (3% выявлено стильбенов – диэтилстильбестрол, 4,58% β-агонистов – кленбутерол).
По всем, представленным в таблицах, образцам были отправлены срочные
отчеты в адрес соответствующих организаций. По результатам проведенных испытаний отчет представлен в ФГБУ «ЦНМВЛ».
Таким образом, за отчетный период были проведены лабораторные исследования более 2000 проб продуктов животного происхождения, кормов и биоматериалов от живых животных на сумму 7494195,30 рублей по выявлению остатков запрещенных и вредных веществ с использованием различных методов в рамках приказа Россельхознадзора №666 от 30.12.2011 года по обеспечению требований Соглашения ВТО по СФС при вступлении России в ВТО.
Лабораторные исследования выполнены в полном объеме согласно Плану.
2.7. Услуга 7. Государственный лабораторный мониторинг особо опасных
болезней животных ( Приказ №75 от 22.02.2012).
В соответствии с Приказом №75 от 22 февраля 2012 года в целях реализации мероприятий Россельхознадзора для обеспечения выполнения требований
Соглашения ВТО по СФС при вступлении России в ВТО, а также для осуществления контроля за особо опасными болезнями животных для выработки рекомен36
даций по упреждению, локализации и ликвидации эпизоотий на территории РФ
проводились лабораторные исследования в серологических реакциях и ПЦР по
ряду особо опасных болезней: (ящур, губкообразная энцефалопатия КРС, бешенство, блютанг, оспа овец, чума мелких жвачных, классическая чума свиней, грипп
птиц и ньюкаслская болезнь).
Таблица 16
№ п/п
Наименование
заболевания
1
2
3
4
5
6
7
8
Ящур
ГЭ КРС
Бешенство
Блютанг
Оспа овец
Чума МРС
КЧС
Грипп птиц
Болезнь Ньюкасла
ИТОГО
9
Всего по приказу (скорректированный план)
Кол-во
На сумму,
исследоруб.
ваний
Выполнено
Всего
Кол-во исНа сумму,
следоруб.
ваний за
2012 год
% выполнения
Выполнение плана эпизоотического мониторинга
(Приказ №75 от 22.02.2012) за 12 месяцев 2012 г. ФГБУ «ВНИИЗЖ
30000
2598
400
3607
2905
2905
500
10000
4500000,00
4283478,48
1058866,00
900110,00
435750,00
435750,00
75000,00
1057893,40
30000
2598
400
3607
2905
2905
500
10000
4500000,00
4283478,48
1058866,00
900110,00
435750,00
435750,00
75000,00
1057893,40
100
100
100
100
100
100
100
100
10001
920289,42
10001
920289,42
100
62916
13667137,30
62916
13667137,30
100
В соответствии с Приказом №75 от 22 февраля 2012 года и внесенными изменениями Приказом Россельхознадзора № 688 от 28 декабря 2012 года были
проведены лабораторные исследования в серологических реакциях и ПЦР по ряду
особо опасных болезней: ящур – (30000 исследований в 18 регионах РФ), губкообразная энцефалопатия КРС – (2598 исследований в 20 регионах), бешенство –
(400 исследований в 6 регионах), блютанг – (3607 исследований в 5 регионах),
оспа овец и чума мелких жвачных (5810 исследований из 9 регионов), грипп птиц
и ньюкаслская болезнь (свыше 10000 проб из 15 регионов) и классическая чума
свиней – 500 исследований по Владимирской области в полном объеме и по всем
планируемым регионам.
37
Ящур
Полученные с помощью ИФА результаты 22500 исследований проб сывороток крови от животных 19 субъектов противоящурной буферной зоны РФ свидетельствуют о наличии различных уровней иммунного фона среди животных в
разных хозяйствах/фермах/населенных пунктах, зависящих от многих факторов.
Результаты проведенных исследований 7500 проб сывороток крови на выявление антител к неструктурным белкам вируса ящура дают основание сделать
заключение о том, что обследованные животные, кроме двух населенных пунктов,
неблагополучных по ящуру, не были инфицированы вирусом ящура, не болели и
не являются вирусоносителями.
Полностью оправдало себя исследование сывороток крови животных из
противоящурной буферной зоны на наличие антител к неструктурным белкам вируса ящура, что позволяет дифференцировать поствакцинальные и постинфекционные антитела у животных и, следовательно, выявлять среди вакцинированных
животных случаи скрытого переболевания ящуром и вирусоносительства. Необходимо проведение детального изучения положительной реакции у отдельных
животных из буферной зоны на наличие антител к неструктурным белкам вируса
ящура, в т.ч. качества применяемых вакцин.
Неблагополучная эпизоотическая обстановка по ящуру в мире и реальная
возможность заноса его возбудителя на территорию России диктует необходимость усиления противоящурных мероприятий, что позволит в буферной зоне регулярно оценивать состояние иммунного статуса среди вакцинированных животных, выявлять возможные нарушения при проведении профилактической иммунизации, случаи инфицирования (переболевания) животных и способствовать
своевременному принятию мер по недопущению возникновения и распространения ящура в стране.
Для обеспечения высокого уровня иммунных животных территориальным
управлениям Россельхознадзора и Департаментам (Управлениям) ветеринарии
субъектов РФ необходимо добиваться 100%-ного выполнения планов профилак-
38
тической вакцинации животных на местах с соблюдением рекомендуемых правил
и схем, поддерживать постоянное слежение за благополучием животных.
В 2013 году следует продолжить проведение подобных мониторинговых
исследований в противоящурной буферной зоне РФ. Наряду с этим целесообразно
предусмотреть проведение мониторинговых исследований в Калининградской
области, необходимых для подготовки досье по ящуру для представления документаций в МЭБ для получения официального статуса РФ, как страны с зоной,
свободной от ящура без вакцинации.
Бешенство
В ходе реализации данного плана все исследования были проведены в полном объеме. Результаты исследования всех проб головного мозга заявленными
методами оказались отрицательными. Полученные данные не отражают общую
ситуацию с бешенством животных в выбранных регионах. Исключение составила
Республика Карелия, которая подтвердила статус региона свободного от бешенства животных, что в свою очередь говорит об эффективности антирабических
мероприятий, проводимых в Республике.
Губкообразная энцефалопатия крупного рогатого скота
В ходе реализации данного плана все исследования были проведены в полном объеме. Результаты исследования всех проб заявленными методами оказались отрицательными.
Блютанг
В соответствии с предварительными расчётами с учётом предполагаемой
превалентности инфицированных (2% для стад КРС и 10% дл МРС) проведен мониторинг части местного КРС и МРС, расположенных в Смоленской, Калужской,
Иркутской областях и Республик Бурятия и Тыва.
С целью выполнения данной работы для лабораторного мониторинга использованы серологический и вирусологические методы.
Больше всего положительных проб при исследовании сывороток методом
ИФА было обнаружено в Калужской области – 25%. В Смоленской области из
550 исследованных проб КРС было выявлено 24 положительные пробы (4,4%). В
39
Иркутской области, Р. Бурятия и Р. Тыва положительные пробы были выявлены в
единичных случаях. При проведении ПЦР положительные пробы не были выявлены.
В 2013 г. планируется продолжение проведение мониторинга по блютангу
КРС и МРС а также изучение распространения мокрецов, переносчиков вируса.
Оспа овец и коз
В течение последних 12 лет в России на территории Приморского, Хабаровского и Забайкальского края, а также Еврейской автономной области отмечались
вспышки оспы овец и оспы коз. Предполагаемый источник заболевания – инфицированный материал из Монголии и Китая.
В связи с постоянной опасностью возникновения оспы овец и оспы коз,
наличие очагов оспы на территории сопредельных государств необходимо проводить плановую вакцинацию против оспы всего мелкого рогатого скота на территории Приморского, Хабаровского, Забайкальского края и Еврейской автономной
области в течение не менее 3-х лет.
Необходимо продолжить мониторинг по оспе овец и коз в регионах, примыкающих к границам государств, неблагополучных по этим заболеваниям.
Чума мелких жвачных
В ходе мониторинга чумы МРС проведено исследование 2905 сывороток
крови от овец и коз из девяти регионов России. В результате проведенных исследований животные, имеющие антитела к вирусу чумы МРС, не выявлены. Это
подтверждает, что РФ является свободной от данного заболевания.
Классическая чума свиней
Проведенный анализ указывает, что число и качество проводимых исследований на КЧС растет, что должно способствовать своевременному выявлению,
принятию мер по ликвидации вспышек и предотвращению дальнейшего распространения инфекций. Поэтому проведение исследований на указанные болезни
необходимо продолжать, а для их совершенствования требуется, чтобы:
40
- объемы исследований должны корректироваться в соответствии с подверженностью исследуемых регионов риску заноса, распространения инфекций, числу восприимчивых животных;
- использовать международные подходы к отбору проб, а также при определении репрезентативной выборки для доказательства отсутствия болезни в популяциях животных;
- установить порядок проведения исследований с указанием методов первичной и подтверждающей лабораторной диагностики, упорядочить использование тест-систем, путем отбора наиболее эффективной и не дорогой;
- при расчете затрат на проведение исследований необходимо учитывать затраты на отбор проб и их доставку в лаборатории;
- провести обучение персонала ветеринарных служб методам отбора проб и
требованиям по их доставке в лабораторию.
Грипп птиц
Результатами мониторинговых лабораторных исследований установлены
факты выявления антител к вирусу гриппа птиц А/Н5 среди популяций диких и
синантропных птиц в Астраханской области (ЮФО), Нижегородской области
(ПФО) и Алтайском крае (СФО), что свидетельствует о циркуляции вирусов
гриппа в дикой авифауне и возможном взаимодействии между резервуаром инфекции и синантропными птицами.
Полученные результаты указывают на целесообразность проведения регулярных мониторинговых исследований на предмет выявления гриппозной инфекции среди птиц на территории Российской Федерации с целью раннего выявления
возможных рисков и управления ими.
Необходимость продолжения осуществления мониторинговых исследований на грипп птиц определяется опасностью заноса вируса высокопатогенного
гриппа А и его распространением на территории Российской Федерации, возникновением эпизоотий среди домашних птиц и потенциальной способностью вируса
вызывать заражение млекопитающих, в том числе и человека. Регулярное проведение мониторинга на грипп птиц (эпизоотологического, вирусологического, им41
мунологического) с целью индикации вирусоносительства, определения иммунного фона и изучения напряженности поствакцинального иммунитета позволят
своевременно локализовать эпизоотический очаг, не допустить распространения
инфекции и оперативно провести противоэпизоотические и профилактичеcкие
мероприятия.
Кроме того, в связи с обнаружением в сыворотках крови птиц в ИФА антител к гриппу типа А, целесообразно расширить диапазон мониторинговых исследований и производить дифференциальное субтипирование в РТГА не только на
антигемагглютинины к вирусу гриппа подтипов H5 и H7, но и положительных в
ИФА проб на подтипы H9, H4 и H3, которые имеют эпидемиологическое значение.
Ньюкаслская болезнь
За отчетный период в соответствие с планом эпизоотологического мониторинга (ПЦР) из проб патологического материала от домашних, синантропных и
диких птиц из субъектов РФ - выявлен геном ВНБ в 2-х пробах. Выявление генома вируса НБ (La Sота) на п/ф в Амурской области связано с использованием живой вакцины (шт. La Sота) для профилактики НБ в условиях хозяйства. Детекция
генома НБ в пробе от вальдшнепа (Scolopax rusticola) из Нижегородской области,
указывает на циркуляцию данного вируса в дикой фауне.
По результатам серологического мониторинга в РТГА было установлено:
- поголовье птиц в промышленных хозяйствах закрытого типа имеет напряженный иммунитет к НБ, что связано с поголовной вакцинацией против заболевания;
- высокая серопревалентность по ньюкаслской болезни в ЛПХ у невакцинированного поголовья связана с циркуляцией ленто- и мезогенных штаммов возбудителя;
- умеренная серопревалентность по НБ у диких птиц указывает на то, что
они, вероятней всего, являются естественным резервуаром вирусов ньюкаслской
болезни различной степени патогенности;
42
- выявление антител к ВНБ в сыворотках крови синантропных птиц, в частности, голубей, свидетельствует об угрозе распространения инфекции на поголовье домашних птиц, при отсутствии у последних поствакцинального иммунитета.
Необходимо в дальнейшем продолжить в тех же объектах мониторинг НБ в
регионах, которые были использованы в 2012 году, а также гармонизировать список исследуемых регионов по НБ и гриппу птиц.
43
Государственные работы
Работа 1. Совершенствование методов контроля карантинных и экономически значимых инфекционных болезней животных
Цель работы – совершенствование методов контроля карантинных и
экономически значимых инфекционных болезней животных.
Было проведено изучение вновь выделенных вирусных изолятов и имеющихся штаммов возбудителей инфекционных заболеваний сельскохозяйственных
животных, с целью изучения соответствия имеющихся и изготовления новых более эффективных вакцин и диагностикумов для контроля эпизоотической ситуациейв Российской Федерации.
Работа выполнена с использованием современных вирусологических, серологических и молекулярно-биологических методов исследования.
Был проведен серологический и эпизоотологический мониторинг 58 птицехозяйств из 24 регионов РФ. В результате анализа 2015 проб патматериала изучены свойства свыше 250 выделенных изолятов возбудителей карантинных и экономически значимых вирусных болезней птиц.
Осуществлена идентификация 54 выявленных возбудителей Микоплазмозов
птиц, изучена патогенность для цыплят и эмбрионов, подобраны изоляты с
наибольшей перекрестной защитой для возможного использования в качестве
вакцинных.
Проведены серологические исследования с целью выявления степени распространения бактериальных болезней птиц. В результате анализа 211 проб патматериала изучены 68 изолятов
различных бактерий, 27 вновь выделенных
штаммов заложены для хранения в коллекцию микроорганизмов.
Изучен клеточный иммунный ответ у вакцинированной птицы при заражении высоковирулентным штаммом вируса болезни Марека.
Проведен серологический и эпизоотологический мониторинг болезней рогатого скота в хозяйствах РФ, исследовано свыше 20 тысяч сывороток КРС на 13
возбудителей вирусной и бактериальной природы из 338 хозяйств 39 регионов
44
РФ, в том числе 445 проб из 8 хозяйств пяти регионов РФ от КРС на наличие антител к вирусу Шмалленберга.
Осуществлялось поддержание в активном состоянии штаммов возбудителей особо опасных инфекций и пополнение коллекции новыми штаммами, а также паспортизация клеточных линий, используемых при изучении свойств вновь
выделяемых изолятов различных возбудителей болезней животных. Завершена
работа по созданию «Каталога постоянных клеточных линий и субкультур, хранящихся в криобанке ФГБУ «ВНИИЗЖ»», которые активно используются при
изучении свойств и наработке вновь выделяемых и имеющихся штаммов вирусов.
Проведены бактериологические исследования на выявление и изучение
возбудителей маститов КРС.
Получен и изучены биологические свойства 5 изолятов Mannheimia haemolytica, осуществлен подбор лабораторной модели для оценки токсигенных свойств
изолятов Mannheimia haemolytica и изучения иммунобиологических свойств аналейкотоксина.
С целью выявления степени распространения болезней свиней было проведено 555 тысяч ИФА-тестов на наличие антител к различным инфекционным
агентам и исследовано более 1600 проб патологического материала от свиней из
183 хозяйств. 555 тысяч ИФА-тестов на наличие антител к различным инфекционным агентам. Для выявленных инфекционных агентов проводилось типирование методом ПЦР, при этом было проведено более 9500 ПЦР-анализов.
Выделены из патологического материала в клеточных культурах и идентифицированы изоляты возбудителей вирусных болезней рыб.
Осуществлялось плановое поддержание штаммов и пополнение коллекции
бактериальных культур.
45
Работа.2. Изучение вирусных изолятов и имеющихся штаммов возбудителей инфекционных заболеваний птиц с целью изготовления новых более эффективных вакцин и диагностикумов в соответствии с эпизоотической ситуацией
Основными направлениями деятельности при выполнении госзадания по
НИР в рамках работы 2 были научно-исследовательские работы, направленные
на разработку и внедрение новых эффективных средств и методов диагностики,
профилактики и лечения карантинных и экономически значимых болезней сельскохозяйственных животных на основе данных по изучению молекулярной биологии и основных биологических свойств возбудителей.
Для диагностики болезней птиц разработка новых тест систем проводилась
по таким актуальным инфекциям как болезнь Марека, инфекционного синовита и
респираторного микоплазмоза птиц, лейкоза и оспы кур.
Работа осуществлялась с использованием современных молекулярнобиологических, вирусологических и биотехнологических методов.
Разработаны методические рекомендации по количественной оценке содержания вируса болезни Марека и дифференциации вакцинных штаммов от полевых вариантов с помощью полимеразной цепной реакции.
Метод дифференциации вакцинных штаммов от полевых вариантов с помощью полимеразной цепной реакции разработан для вирус оспы кур. С использованием этого же метода разработан метод выявления генома вируса ретикулоэндотеллиоза птиц.
Осуществлено усовершенствование диагностического антигена для выявления антител к возбудителю инфекционного синовита птиц (Mycoplasma synoviae)
и к возбудителю респираторного микоплазмоза птиц (Mycoplasma gallisepticum) в
реакции латексной агглютинации.
Создание новых тест-систем и совершенствование вакцин по болезням КРС
проводились по ящуру, эфемерной лихорадке, вирусной диареи КРС.
Разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа для обнаружения антител к вирусу эфемерной лихорадки крупного рогатого скота, метод выявления антител к вирусу вирусной диареи крупного рогатого скота в реакции
микронейтрализации для контроля иммуногенных свойств вакцинных препаратов.
46
Усовершенствована технология изготовления противоящурных препаратов
и изучено влияние рекомбинантного интерлейкина-2 на антигенные и иммуногенные свойства противовирусных вакцин.
Осуществлялась оптимизация условий культивирования вирусов, вызывающих такие заболевания КРС как инфекционный ринотрахеит, парагрипп-3, ротавирус, коронавирус, вирусная диарея и др. При этом использовали ряд перевиваемых культур клеток: MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney cells), Таурус-2 (Taurus2 – почка теленка Bos Taurus L) и RBT (Rene BOS Taurus L- почка теленка), почки
эмбриона свиньи версенизированной (СПЭВ); почка новорожденного сирийского
хомячка (ВНК-21), почка сайги (ПС), носовые перегородки теленка (ВТ) и др.
Проводились также исследования по оптимизации условий культивирования вируса болезни Шмалленберга.
Разработаны методические указания по определению антигенной активности бактерин-токсоидной вакцины против пастереллеза КРС и проведена оценка
разработаннй инактивированной эмульгированной вакцины на лабораторных животных и КРС.
Усовершенствована технология изготовления вирусвакцины против чумы
мелких жвачных животных культуральной сухой.
Разработана иммуноферментная тест-система для выявления антител против актинобациллезной плевропневмонии в сыворотках крови свиней и лабораторных животных.
Оптимизированы методы получения и концентрирования токсина возбудителя Actinobacillus plevropneumoniae и проведено изучение иммунобиологических свойств анатоксина на лабораторных животных и свиньях. Осуществлен
подбор лабораторной модели для оценки токсигенных свойств возбудителя атрофического ринита свиней.
Усовершенствован метод иммунизации свиней против гриппа и болезни
Ауески.
Разработана методика выявления генома инфекционного панкреатического
некроза рыб в реал-тайм ПЦР и подобраны оптимальные режимы культивирования вируса инфекционного некроза гемопоэтической ткани рыб.
3. МЕРОПРИЯТИЯ ПО НИОКР В РАМКАХ ФЦП
47
«НАЦИОНАЛЬНАЯ СИСТЕМА ХИМИЧЕСКОЙ И БИОЛОГИЧЕСКОЙ
БЕЗОПАСНОСТИ РФ НА 2009-2013 ГОДЫ»
В рамках федеральной целевой программы «Национальная система химической и биологической безопасности РФ на 2009-2013 годы» в 2011 году выполнялись научно-исследовательские работы по изучению молекулярно-биологических
и генетических характеристик вновь выделенных эпизоотических изолятов возбудителей особо опасных болезней животных (ящур, высокопатогенный грипп птиц,
ньюкаслская болезнь, классическая чума свиней и бешенство) с целью создания
новых средств диагностики и профилактики на основе циркулирующих на территории РФ штаммов этих возбудителей по 5 темам:
3.1. «Создание и контроль на естественно-восприимчивых животных
новых защитных препаратов на основе выделенных циркулирующих штаммов вируса ящура (типов А, О, Азия-1) для профилактики и ликвидации заболевания; разработка вакцин против высокопатогенного гриппа птиц из
выделенных эпизоотических изолятов (H5 и H7), изготовление опытных партий и их испытание; конструирование и испытание ассоциированной вакцины против высокопатогенного гриппа птиц и Ньюкаслской болезни из эпизоотических изолятов этих возбудителей; создание и контроль на естественно-восприимчивых животных вакцин против бешенства из вновь выделенных изолятов и их испытание»
(Гражданско - правовой договор №56 от 12 июля 2012 г.).
Цель работы – разработка новых более эффективных защитных препаратов
для профилактики и ликвидации ящура, гриппа птиц и ньюкаслской болезни на
основе выделенных циркулирующих изолятов этих возбудителей.
Изучены некоторые иммунобиологические свойства эпизоотического изолята типа О № 2147 «Приморский»-2012, который подготовлен в качестве производственного штамма для изготовления инактивированных вакцин и осуществлена сравнительная оценка устойчивости животных, вакцинированных разработанными ранее препаратами против вновь выделенного эпизоотического изолята.
В результате проведенной работы разработаны 2 новых защитных препарата из вновь выделенных изолятов вирусов ящура.
- Вакцина против ящура сорбированная инактивированная культуральная
из штамма О №2147 «Приморский»-2012.
48
- Вакцина против ящура эмульсионная инактивированная культуральная из
штамма О №2147 «Приморский»-2012.
В результате проведенной работы установлено, что против изолята можно
получить защиту у животных, привитых вакциной из этого штамма. Изготовили и
испытали 4 опытных партии вакцины из штамма О № 2147 «Приморский»-2012
(две сорбированные и две эмульсионные). Испытание защитных свойств вакцин
на КРС показали, что разработанные защитные препараты были высоко иммуногенными против гомологичного вируса.
При этом было показано, что ммуногенность эмульсионных вакцин из
штаммов О №2147 «Приморский»-2012 была выше, чем сорбированных.
Разработан новый защитный препарат против гриппа птиц из штамма
A/chicken/Amursky/3/12 H9N2.
Испытуемые вакцины против гриппа птиц обладают высокой антигенной
активностью, иммунный ответ у привитых птиц к 21 суткам после вакцинации
достигает протективного уровня.
Моно образцы вакцин на основе штамма A/chicken/Amursky/3/12 H9N2 обладают высоким протективным потенциалом при заражении птиц вирусом гриппа
птиц A/chicken/Amursky/3/12 H9N2.
Доказана безвредность двух экспериментальных вакцин против гриппа птиц
для кур.
Изучена напряженность клеточного и гуморального иммунитета у животных после иммунизации разработанными вакцинами.
Разработаны вакцины ассоциированные против гриппа птиц Н7 и ньюкаслской болезни (НБ), и гриппа птиц Н5 и НБ инактивированные эмульгированные,
которые обладают выраженной антигенной активностью, индуцируя у иммунизированной птицы через 21 сут образование специфических антител к вирусам
гриппа и НБ в защитных титрах (более 4 лог 2 ).
Испытуемые вакцины против гриппа птиц и НБ обеспечивают 100% защиту
цыплят от гибели и клинических признаков заболевания после парентерального и
перорального, и утят – после перорального контрольного заражения вирулентными штаммами вирусов гриппа соответствующих подтипов на 21 сутки после вакцинации.
49
Продолжительность поствакцинального иммунитета по результатам РТГА у
цыплят к гриппу птиц Н5 составляет 90 сут, а к гриппу птиц Н7 – не менее 130 сут
(срок наблюдений). Снижение уровня антигемагглютининов к вирусу гриппа Н5
до значения ниже протективного требует проведения ревакцинации.
Уровень защиты цыплят, привитых вакциной против гриппа птиц Н5 и НБ,
от гибели и клинических признаков заболевания через 130 сут составляет 80%
при парентеральном заражении вирулентным вирусом гриппа подтипа Н5 и 90% при пероральном. Вакцина против гриппа птиц Н7 и НБ через 130 сут обеспечивает 100% защиту цыплят при обоих способах заражения вирулентным вирусом
гриппа подтипа Н7.
Изучена напряженность клеточного и гуморального иммунитета у животных после иммунизации разработанными ассоциированными вакцинами.
Обе испытуемые вакцины обеспечивает формирование у цыплят напряженного иммунитета к ньюкаслской болезни на протяжении всего периода
наблюдения (130 сут) и 100% защиту от гибели и клинических признаков заболевания при парентеральном заражении вирулентным вирусом НБ через 21 и 130
сут после вакцинации.
Испытуемые образцы ассоциированных вакцин против гриппа птиц и ньюкаслской болезни безвредны для цыплят.
Представлены проекты научно-технической документации на разработанные препараты.
3.2. «Создание базы данных геномных портретов штаммов возбудителей особо опасных инфекций животных и разработка стандартных методов
генотипирования» (Гражданско - правовой договор №57 от 12 июля 2012 г.).
Цель работы - создание базы нуклеотидных последовательностей геномов
возбудителей ящура, высокопатогенного гриппа птиц, болезни Ньюкасла, классической чумы свиней и бешенства, что позволило повысить эффективность контроля за этими болезнями животных.
Для освежения, наработки для дальнейшего изучения были отобраны 7
изолятов вируса ящура О №2100/Монголия/2010 (образец С10), О №2123/Южная
50
Осетия/2011, О №2124/Восточный Казахстан/2011, О №2114/Забайкальский/2011,
поступившие в ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2010-2011гг. и хранившиеся при температуре
минус 400С в виде культуральных и/или афтозных суспензий.
Изоляты вируса ящура типа О, выделенные в различных регионах, были
освежены с минимальным количеством пассажей в культуре клеток и наработаны
в виде культуральных суспензий с титром инфекционной активности, достаточным для выявления в ПЦР в реальном времени и последующего нуклеотидного
секвенирования.
Проведено выравнивание нуклеотидных последовательностей генома вируса ящура серотипа О и осуществлен дизайн и синтез 10 праймеров, предназначенных для амплификации и секвенирования структурной области генома вируса
ящура серотипа О.
В результате проведенных вирусологических работ были получены и охарактеризованы расплодки 6 изолятов вирусов гриппа (A/chicken/Krasnodar/07/07
H5N1,
A/chicken/Moscow/17/07
A/chicken/Kaluga/98/07
H5N1
A/chicken/Krasnodar/776/07 H5N1)
птиц
H5N1,
A/goose/Moscow/83/07
A/chicken/Adygea/100/07
H5N1,
H5N1,
и 6 изолятов вируса ньюкаслской болезни
(NDV/Ck/Rus/Leningrad/261/00,
NDV/Ck/Rus/Amurskaya/237/03,
NDV/Ck/Rus/Primorsky/328/03,
NDV/Ck/Rus/Alania/747/05,
NDV/Pi/Rus/Tula/296/09, NDV/Pi/Rus/Kemerovo/232/10).
Высокая биологическая активность, стерильность полученных изолятов
позволила признать их пригодными для дальнейшего хранения.
Для
определения
первичной
структуры
генома
изолятов
вируса
ВПГП/H5N1, выделенных в России в 2009-2010гг. можно использовать ранее разработанную праймерную систему с учетом внесения изменений в нуклеотидные
последовательности нескольких праймеров этой системы.
В результате анализа отобранных нуклеотидных последовательностей были
выбраны необходимые для амплификации и последующего секвенирования
фрагменты пяти генов. Методом сравнительного анализа последовательностей
51
определили консервативные участки, фланкирующие выбранные фрагменты генома, и осуществили дизайн и синтез синтез 12 модернизированных праймеров.
Для секвенирования полного генома изолята NDV/Pi/Rus/Kemerovo/0267/09
вируса ньюкаслской болезни птиц с учетом некоторых замен в подпраймерных
областях были модернизированы и сконструированы еще дополнительно 17 новых праймеров.
Были осуществлены освежение и наработка 16 имеющихся и вновь выделенных изолятов классической чумы свиней из коллекции ВНИИВВиМ (№ 326
(Курская обл. -1990), № 664 (Белгородская, обл.- 1995),
№ 684 (Московская обл.-1995), №713 (Липецкая обл.- 1996),
№742 (Башкортостан – 1997), №820 (Челябинская обл.- 2003),
№ 843 (Владимирская обл.-2005), № 867(Московская обл.-2006),
№ 870(Волгоградская обл.-2007), № 894(Московская обл.-2008),
№ 926 (Смоленская обл.-2011), № 927 (Волгоградская обл.- 2012),
№ 929 (Саратовская обл.-2012), № 930(Смоленская обл.-2012),
№ 665 ( Башкортостан - 1995), № 719 (Самарская обл.-1996).
Характеристика освеженных изолятов позволила признать их пригодными
для дальнейшего хранения.
Осуществлен дизайн и синтез 44 праймеров, специфичных для геногруппы
1.1 вируса классической чумы свиней. Рассчитанные праймеры позволяют определить полные нуклеотидные последовательности генома изолятов вируса КЧС
путем амплификации и секвенирования 22 перекрывающихся фрагментов генома
длиной 500-700 н.о. Предусмотрено двукратное «прочтение» каждого нуклеотидного основания, что обеспечивает высокую точность определения.
В результате проведенной работы освежены и наработаны методом биологической пробы на мышах в количестве достаточном для выявления в ПЦР и последующего нуклеотидного секвенирования 11 изолятов вируса бешенства из различных регионов Российской Федерации. Полученный вирусный материал (ткань
головного мозга мышей) был заложен на хранение при минус 80 оС. Также были
освежены с минимальным количеством пассажей в культуре клеток и наработаны
52
в виде культуральных суспензий с титром инфекционной активности, достаточным для изучения биологических свойств.
В качестве основы для секвенирования полных геномов российских изолятов вируса бешенства были выбраны и синтезированы 95 праймеров, для секвенирования полного генома российских изолятов вируса бешенств.
В результате проведенных исследований установлены 18 полных нуклеотидных последовательностей генома:
- трех изолятов ВЯ серотипа О: О/Монголия/2010, О/Южная Осетия/2011 и
О/Восточный Казахстан/2011;
-
5
изолятов
вируса
ВПГП
H5N1:
A/chicken/Krasnodar/0019/06,
A/swan/Stavropol/0035/06,
A/turkey/KBR/0042/06,
A/chicken/Dagestan/79/06, A/chicken/Volgograd/236/06;
- генома изолята NDV/Pi/Rus/Kemerovo/762-2/05 вируса ньюкаслской болезни птиц, который является представителем генетической линии VIb/1;
-
трех
полевых
изолятов
вируса
КЧС:
702/Калининград/1996,
805/Владимир/2002 и 449/Туркменистан/1991 и
- 6 изолятов вируса бешенства (№ 230, 343, 613, 244, 1379, 1985).
В результате проведенной работы по оптимизации условий хранения изолятов были изучены условия для изготовления сухих культуральных форм полевых
изолятов вируса бешенства. Ни одна из исследованных протекторных сред не
позволила сохранить активность вирусного материала на исходном уровне.
Хранение вируса в условиях +4оС в течение месяца в защитных средах, содержащих 0,5-1% желатина и 7,5% сахарозы позволило лишь частично сохранить
вирусную активность, со снижением последней в 90 и более раз, что дает основания предположить, что параметры лиофилизации в данном эксперименте, без режима досушивания в условиях повышения температуры процесса, не подходят
для вируса бешенства и требуют дальнейшей доработки.
53
3.3. «Выделение и изучение эпизоотических изолятов вируса ящура (А,
О, Азия-1) и их изменчивости (в том числе на естественно-восприимчивых
животных), разработка средств индикации и идентификации, а также оценка
иммунитета и дифференциации вакцинированных и переболевших животных; изучение вновь выделенных штаммов высокопатогенного гриппа птиц
(H4, H5, H7, H9), разработка новых методов диагностики с использованием
Real-time ПЦР и оценки иммунитета; характеристика новых штаммов возбудителя КЧС, разработка новых методов диагностики, дифференциация
вакцинированных от переболевших животных с использованием рекомбинантных антигенов; изучение антигенной и генетической изменчивости вакцинных штаммов и изолятов вируса бешенства, с использованием моноклональных антител, разработка более чувствительных и специфических методов диагностики»
(Гражданско - правовой договор №56 от 12 июля 2012 г.).
Цель работы - выделение изолятов, изучение их изменчивости, разработка
средств индикации и идентификации, разработка новых методов диагностики с
использованием Real-time ПЦР и оценки иммунитета, а также характеристика новых штаммов возбудителя КЧС, дифференциация вакцинированных от переболевших животных с использованием рекомбинантных антигенов.
В результате проведенных исследований осуществлено выделение и изучение 32 эпизоотических изолята вирусов ящура (7), высокопатогенного гриппа
птиц (6), ньюкаслской болезни (6), классической чумы свиней (3) и бешенства
(10) с применением вирусологических, серологических и молекулярных методов.
С использованием ПЦР и секвенирования определены нуклеотидные последовательности гена VP1
- 7 эпизоотических изолятов вируса ящура типа О, выделенных от КРС и
свиней в 2010г. в различных географических зонах: : О №2100/Монголия/2010 (3
образца), О №2111 Монголия/2011 (5 образцов), О №2114/Забайкальский/2011, О
№2123/Южная Осетия/2011 (2 образца), О №2124/Восточный Казахстан/2011, О
№2147/Приморский/2012, О №2148/Приморский/2012. Проведено сравнение
установленных нуклеотидных и выведенных из них аминокислотных последовательностей.
С помощью молекулярно-диагностических методов ОТ-ПЦР и нуклеотидного секвенирования в исследуемых пробах патологического материала из раз54
личных регионов территории РФ идентифицированы 6 эпизоотических изолятов гриппа птиц подтипа H5N1
A/chicken/Krasnodar/0007/07, A/chicken/Moscow/0017/07,
A/goose/Moscow/0083/07,
A/chicken/Kaluga/0098/07,
A/chicken/Adygea/0100/07,
A/chicken/Krasnodar/0776/07.
Проведено исследование шести изолятов вируса ВПГП с применением комплекса методов молекулярной диагностики, включающего ОТ-ПЦР и секвенирование. С помощью праймерных систем на гены M и NP в пробах патологического
материала выявлен геном ВГП/A. Изучение нуклеотидных последовательностей
фрагментов генов M и NP исследуемых изолятов указывает на их принадлежность
к генетической подгруппе Qinghai вирусов ВПГП/H5N1.
С помощью ОТ-ПЦР и секвенирования полученных фрагментов гена F,
включающих нуклеотидную последовательность, кодирующую сайт расщепления
белка F0, была определена потенциальная вирулентность изолятов ВНБ. По молекулярно-генетическим свойствам выделенные изоляты вируса ньюкаслской болезни птиц
В результате проведенных исследований было выделено и изучено
с помощью молекулярно – биологических методов 6 изолятов вируса ньюкаслской болезни от домашних и диких птиц, полученных в период с 2004 по 2010
год в различных регионах РФ
(NDV/Ck/Rus/Leningrad/261/00, NDV/Ck/Rus/Amurskaya/237/03,
NDV/Ck/Rus/Primorsky/328/03, NDV/Ck/Rus/Alania/747/05,
NDV/Pi/Rus/Tula/0296/09,
NDV/Pi/Rus/Kemerovo/0232/10)
С применением вирусологических, серологических методов. С помощью
молекулярно-биологических методов было подтверждено наличие геномов в вируссодержащих материалах для всех шести изолятов ВНБ и каждый изолят идентифицирован по полученным нуклеотидным последовательностям.
Из проб органов больных свиней выделены на культуре клеток РК-15 три
изолята вируса КЧС: №449 (Туркмения-1991), №702 (Калининград-1996) и №805
55
(Владимир-2002). Определен титр изолятов в пробах. Наличие вируса КЧС в
культуральных пробах подтвержден методом ОТ-ПЦР в реальном времени.
В результате проведенных молекулярно-генетических исследований определена
нуклеотидная
449/Туркмения/1991,
последовательность
фрагмента
702/Калининград/1996,
гена
Е2
изолятов
805/Владимир/2002
и
915/Иваново/2010 вируса КЧС. Проведено сравнение установленных нуклеотидных и выведенных из них аминокислотных последовательностей.
Были выделены десять изолятов вируса бешенства, что подтверждено мето-
дами реакции иммунофлуоресценции, выделения вируса бешенства на культуре
клеток нейробластомы. Эти изоляты вируса бешенства, происходящие из географически близлежащих (Нижегородская и Кировская области) и удаленных друг от
друга регионов Российской Федерации были выбраны для исследования свойств
молекулярно-биологическими методами.
В результате проведенного исследования, включающего выделение изолятов вируса бешенства, очистку из РНК, синтез кДНК, выбор праймеров, амплификацию кДНК и её последующее секвенирование были установлены нуклеотидная последовательность части N-белка изолятов вируса бешенства, и нуклеотидная последовательность, кодирующая C-концевую область G-белка и межгенный
-регион.
Генетические характеристики изученных изолятов вируса бешенства, выделенных в различных регионах РФ, соответствуют ранее изученным вирусам из тех
же регионов, что характерно для вируса бешенства.
Проведен филогенетический анализ семи изолятов вируса ящура, ответственных за вспышки болезни в России и соседних странах в 2010-2012гг. Установлено, что российский изолят O/Забайкальский/РФ/2011 и монгольские изоляты
2010 года относятся к топотипу Юго-Восточная Азия ВЯ серотипа О. Остальные
изоляты принадлежат к разным генетическим линиям топотипа Средний Восток –
Южная Азия: российские изоляты 2012 года и казахстанский изолят 2011г – к генетической линии О-ПанАзия, а изолят О/Южная_Осетия/2011 – к линии ОПанАзия-2.
56
В результате работ, проведенных на данном этапе исследований, определены нуклеотидные последовательности фрагментов четырех генов шести изолятов
вируса ВПГП H5N1 и охарактеризованы филогенетические связи с последовательностями изолятов клада 2.2.
С помощью филогенетического анализа нуклеотидных последовательностей
выделенных изолятов ВНБ было установлено, что они принадлежат генотипам VI
(VIb/2) и VII (VIIb, VIId) класса II.
В результате проведенного филогенетического анализа установлено, что
изоляты
вируса КЧС 449/Туркмения/1991 и 915/Иваново/2010 принадлежали к
подгруппе 2.3, а изоляты 702/Калининград/1996 и 805/Владимир/2002 к подгруппе 1.1.
Проведенные исследования с использованием ПЦР и секвенирования позволили установть нуклеотидные последовательности фрагмента гена N десяти полевых изолятов вируса бешенства, сравнить установленные нуклеотидных последовательностей и осуществить филогенетический анализ полученных данных.
Проведено изучение антигенной и генетической изменчивости более 40
вакцинных штаммов и выделенных изолятов возбудителей ящура, высокопатогенного гриппа птиц, ньюкаслской болезни, классической чумы свиней и бешенства.
Результаты исследований свидетельствуют о значительном антигеном разнообразии изолятов вируса ящура, собранных на территории России и соседних
с нею стран в 2010-2012гг. Изоляты вируса ящура 2010 г. из Монголии, относящиеся к топотипу Юго-Восточная Азия (SEA), антигенно родственны штаммам
О1 Маниса, О/Приморский/2000 и О PanAsia2 (r1≥0,3).
Изолят О №2123/Южная Осетия/2011 топотипа Средний Восток - Южная Азия
(ME-SA), относящийся к сублинии О/PanAsia2, антигенно близко родственен
производственному штамму О PanAsia2 и антигенно отличается от вакцинных
штаммов О1 Маниса и О №1743/Приморский/2000 (r1 = 0,28).
Изолят сублинии О PanAsia 2011 г. из Восточного Казахстана показал близкое антигенное родство со всеми вакцинными штаммами, тогда как изоляты О №
57
2147/Приморский/2012 и О №2148/Приморский/2012, принадлежащие к той же
сублинии,
антигенно
отличались
от
вакцинных
штаммов
О
№1734/Приморский/2000 и О PanAsia2 (r1<0,3), но были антигенно родственны
штамму О1 Маниса.
Вирусы гриппа птиц обладают достаточно высокой степенью генетической
изменчивости. Во многом это объясняется сегментированным геномом вируса и
как следствие происходящей реассортации генов различных ВГП, инфицирующих
одну клетку. Однако изменения происходят и благодаря точечным мутациям в геноме вируса, что способствует его постепенной эволюции.
В результате проведенных исследований в нуклеотидных последовательностях четырех генов изученных вирусов ВПГП выявлены точечные изменения, характерные только для данных изолятов и не повторяющиеся в последовательностях ранее выделенных на территории России ВГП/H5N1. Реассортации с вирусами других генетических линий и кладов отмечено не было, однако не исключается вероятность реассортации непосредственно между ВГП, принадлежащими одной генетической сублинии Qinghai (клад 2.2). Кроме того, возможно достоверно
говорить о постепенной эволюции ВГП клада 2.2, выделенных в 2005-2007 гг.,
обусловленной точечными мутациями в различных сегментах генома вируса.
Было показано, что вирус ньюкаслской болезни обладает высоким уровнем генетического разнообразия, что приводит и к заметным антигенным отличиям изолятов и штаммов. Однако в серологическом отношении все штаммы и изоляты этого патогена принадлежат одному серотипу, что позволяет эффективно
использовать в борьбе с заболеванием давно выделенные, и используемые в качестве живых вакцин авирулентные штаммы, хотя требования к их применению
должны быть ужесточены.
В результате проведённых исследований изучены антигенные и патогенные
свойства 16 изолятов вируса КЧС. В антигеном отношении изоляты гомогенны
и нейтрализуются 2,7 (2,65-2,75) дозами нейтрализующих антител против вакцинного штамма ЛК-ВНИИВВиМ.
58
Изученные полевые изоляты вируса бешенства отличаются от вакцинного
штамма РВ-97 на участках основных антигенных сайтов восемью аминокислотными остатками, что теоретически, может вызывать различия в антигенных свойствах. Стоит отметить, однако, что в настоящее время все вирусы бешенства как
от наземных млекопитающих, так и от летучих мышей в Северной и Южной Америках, принято относить к одному серотипу. Кроме того, было показано, что
классический вирус бешенства и European bat Lyssavirus I, European bat Lyssavirus
II, Duvenhage virus и Australian bat Lyssavirus вызывают образование перекрестных нейтрализующих антител. Поэтому, вероятнее всего, обнаруженные аминокислотные замены не оказывают критического влияния на антигенные свойства
изученных полевых изолятов по сравнению с вакцинным штаммом РВ-97 вируса
бешенства.
Разработано 7 средств индикации идентификации возбудителей ящура, высокопатогенного гриппа птиц, ньюкаслской болезни, классической чумы свиней,
бешенства. Оформлены и утверждены директором учреждения 10 методических
указаний, а также представлен проект НД на диагностическую тест-систему.
Оформлены и утверждены директором учреждения 4 методических указания на разработанные методы оценки иммунитета и дифференциации вакцинированных и переболевших животных.
3.4.
«Разработка
информационно-аналитической
подсистемы
индикации и идентификации возбудителей ООИ новых и возвращающихся
инфекций животных и прогнозов биологической опасности развития
эпизоотий в результате заноса, чрезвычайных ситуаций и террористических
актов на основе результатов мониторинга с использованием ГИС
технологий»
(Гражданско - правовой договор №56 от 12 июля 2012 г.).
Цель работы – стандартизация процесса сбора, анализа информации и создание структуры базы данных информационно-аналитической системы оценки
состояния и деятельности ветеринарной службы субъектов Российской Федерации по соответствующим показателям и параметрам, разработка математических
моделей прогнозирования эпизоотического процесса ООИ.
59
Работа состоит из двух этапов исследований. В процессе выполнения работы по первому этапу был проанализирован международный опыт по оценке ветеринарных служб, рассмотрены методология и инструменты Международного
Эпизоотического Бюро по оценке качества ветеринарных служб, а также контроль
обеспечения требований законодательства относительно безопасности пищевых
продуктов и здоровья животных, действующий в странах-членах Европейского
союза.
Проведён анализ существующих методов оценки состояния и деятельности
ветеринарной службы Российской Федерации. Представлен проект информационно-аналитической системы оценки состояния и деятельности ветеринарных
служб субъектов Российской Федерации, которая позволит оперативно проводить
оценку уровня функционального состояния ветеринарной службы страны. Предложена методика и перспективы внедрения автоматизированной информационной
системы сбора, передачи, обработки и анализа информации о состоянии и деятельности ветеринарных служб субъектов Российской Федерации.
По второму этапу разработан блок математических моделей прогнозирования эпизоотического процесса при возникновении ООИ (модель типа SIER, аэрогенная модель, водная модель). Проведена параметризация входных параметров
по такой инфекции как ящур и показан пример оценки возможного распространения инфекции из первичного очага поражения.
Результатами проведенных исследований явились подготовленные методические указания: 1) по стандартизации информации для оценки состояния и деятельности ветеринарных служб субъектов Российской Федерации, 2) по применению математических моделей прогнозирования эпизоотического процесса при
возникновении ООИ на территории Российской Федерации.
Разработаны компьютерные программы
по алгоритмам математических
моделей и электронные базы о структуре форм для сбора информации о состоянии и деятельности ветеринарных служб субъектов РФ и популяции восприимчивого поголовья сельскохозяйственных животных на территории страны.
60
3.5. « Разработка средств и методов повышения эффективности вакцинации
против инфекционных болезней животных»
Цель работы - изучение защиты цыплят от контрольного заражения после
иммунизации
экспериментальными
мукозальными
вакцинами
против
ньюкаслской болезни птиц в отдаленные сроки после иммунизации, определение
параметров
мукозального,
гуморального,
клеточного
иммунитета
вакцинированной птицы в течение 2 мес. после вакцинации, а также установление
взаимосвязи между различными показателями иммунитета с защитой птиц к
контрольному заражению.
Проведенный анализ опубликованных материалов по применению инактивированных вакцин с мукозальными адъювантами показал перспективность их
использования для профилактической вакцинации птиц, поскольку индуцируемая
ими местная защита слизистых оболочек и системный иммунитет обеспечивали
защиту птиц от инфицирования. Поэтому поиск эффективных адъювантов, которые способны индуцировать продолжительный иммунный ответ и могут быть
использованы при разработке технологии изготовления и применении мукозальных вакцин, будет способствовать повышению эффективности вакцинации против инфекционных болезней птиц.
В результате исследований была проведена оценка параметров иммунного
ответа птиц после введения мукозальных вакцин против ньюкаслской болезни в
течение 2 месяцев после последней вакцинации. Изучение иммунного ответа вакцинированных птиц показало, что 3-х кратная вакцинация препаратами с хитозаном и САР-частицами индуцировала значительное усиление местного специфического ответа и кратковременное усиление гуморального иммунного ответа. При 4х кратной вакцинации препаратом с эмульсигеном®-D помимо формирования
местного иммунитета происходила значительная активация гуморального иммунного ответа, который сохранялся в течение более длительного времени.
В ходе работ была изучена защита у птиц после иммунизации экспериментальными мукозальными вакцинами против ньюкаслской болезни с хитозаном,
САР-частицами и эмульсигеном®-D к контрольному заражению через 2 месяца
61
после последней вакцинации. Было установлено, что на 56 сутки после последней
иммунизации вакцины с хитозаном и CАР-частицами обеспечивали частичную, а
препарат с эмульсигеном®-D полную защиту от контрольного заражения вирулентным вирусом ньюкаслской болезни.
При определении зависимости между параметрами иммунного ответа вакцинированных птиц перед заражением и уровнем защиты от заражения вирулентным вирусом было определено, что в крови и слёзной жидкости вакцинированных
птиц, защищённых от заражения, были выявлены специфические антитела в титре
не менее 4,0-5,0 log2 (в РТГА) и 1:160-320 (IgG в ИФА), соответственно. Через 10
суток после заражения у защищённых от гибели птиц регистрировали сероконверсию специфических гуморальных и мукозальных антител (главным образом
IgG) к вирусу ньюкаслской болезни. У защищённых от заражения вакцинированных птиц наблюдали увеличение объёма CD8+ и MHC II+ клеток в лимфоцитах
селезёнки на 10 сутки после контрольного заражения и снижение объёма CD3+ и
CD4+ Т-лимфоцитов. В периферической крови вакцинированных птиц после заражения объём всех исследуемых субпопуляций иммунокомпетентных клеток
снижался в 1,1-2 раза, а у не вакцинированных птиц в 5-7 раз.
62
4. МЕЖГОСУДАРСТВЕННАЯ ЦЕЛЕВАЯ ПРОГРАММА
«ИННОВАЦИОННЫЕ БИОТЕХНОЛОГИИ»
«РАЗРАБОТКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ
ДИАГНОСТИКИ ЯЩУРА И ВЕЗИКУЛЯРНОЙ БОЛЕЗНИ»
Научно-исследовательские работы по госконтракту №16.М04.12.0020 в
рамках Межгосударственной целевой программы «Инновационные биотехнологии» проводится, начиная с 2011г. В соответствии с календарным планом к госконтракту в 2012г проводились исследования, направленные на разработку метода обнаружения вируса везикулярной болезни свиней с использованием ПЦР в
реальном времени.
С использованием программы ClastalW Multiple Alignnment. проведено выравнивание полных геномных последовательностей вируса ВБС, представленных
в международной базе данных GenBank. Установлены области вирусного генома,
потенциально пригодные для разработки ПЦР в реальном времени. Рассчитаны
оригинальные праймеры и TaqMan-зонд, позволяющие амплифицировать и детектировать консервативный фрагмент гена 2A вируса ВБС. С применением программы BLAST проведена теоретическая проверка их специфичности. Показано,
что выбранные праймеры и зонд специфичны исключительно для вируса ВБС.
Проведен химическй синтез олигонуклеотидов.
Полученные праймеры и зонд были использованы для разработки ПЦР-РВ
по обнаружению вируса ВБС. Определены условия реакции, обеспечивающие ее
максимальную эффективность: оптимальное количество праймеров и ДНК-зонда,
концентрация MgCl2, температурно-временной режим.
Определены специфичность и чувствительность метода. Показано, что
ПЦР-РВ способна обнаруживать все штаммы вируса ВБС из коллекции ФГБУ
«ВНИИЗЖ», неспецифические реакции с другими пикорнавирусами отсутствовали. Аналитическая чувствительность метода составляла 100 ТЦД50/мл.
Подготовлены методические рекомендации по обнаружению вируса ВБС
методом ПЦР в реальном времени.
63
Проведены комиссионные испытания метода обнаружения вируса ВБС с
использованием ПЦР-РВ, которые подтвердили, что метод соответствует требованиям технического задания.
Проведенные исследования детально описаны в «Отчете о научноисследовательской работе по государственному контракту с Министерством образования и науки Российской Федерации №16.М04.12.0020 от 26 апреля 2011 г.»
64
5. ТЕСТИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА
ВАКЦИННОГО БЕЛКА ВИРУСА ЯЩУРА НА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ
ЖИВОТНЫХ
Целью данной работы является определение биологической активности
препаратов полиэпитопного рекомбинантного белка вируса ящура на свиньях: активности и сывороточных иммуноглобулинов, индуцированных при иммунизации
животных препаратами рекомбинантного белка, а также проведение анализа протективного действия разрабатываемых препаратов на свиньях с моделированием
острой инфекции.
В соответствии с техническим заданием и календарным планом проведено
тестирование биологической активности препаратов полиэпитопного рекомбинантного белка вируса ящура на свиньях. Получены данные по антигенной активности полиэпитопного белка, т.е. определена активность антител к вирусу ящура
О/Тайвань/99 у иммунизированных свиней в РМН через 14 суток после однократной иммунизации и через 28 дней после повторного введения антигена. В опыте
на свиньях оценена протективная эффективность полиэпитопного белка вируса
ящура О/Тайвань/99 при контрольном заражении гомологичным вирусом в дозе
104,0ИД50/0,1 мл.
65
6. РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ АНАЛИТИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ АНИОННЫХ
ПАВ – КОНДЕНСАЦИОННЫХ ОЛИГОМЕРОВ.
Сложность анализа полимеров в отличие от анализа низкомолекулярных
органических и неорганических веществ обусловлена большим размером молекул, неоднородностью их по молекулярным массам и наличием разветвленного
строения (неравномерное расположение функциональных групп и т.д.).
Одним из развивающихся методов анализа высокомолекулярных соединений является масс-спектрометрия. Такой метод анализа удобен и эффективен при
определении молекулярно-массового распределения моно- и полидисперсных полимеров. Кроме того, он также применим и для олигомеров с низкими молекулярными массами, для которых другие методы оказываются неэффективными.
Метод MALDI – TOF, основанный на принципе масс-спектрометрии, обеспечивает хорошее разделение ионов олигомеров, позволяет определять природу
концевых групп, включая дифференциацию циклических олигомеров, природу
мономерных звеньев, а также их состав и распределение в сополимерах.
С помощью предложенного метода исследованы 17 промышленных образцов олигомеров полиметиленнафталинсульфокислот (ПМНСк). Значения среднечисловой (1) и средневесовой (2) молекулярных масс олигомера, а также полидисперсности ПД (3) для образцов ПМНСк представлены в табл. Для образцов 51,
64, 85, 87, 89, 91 и 94 наблюдалось самое высокое содержание олигомеров с n = 2
– 4, что может привести к снижению их пластифицирующей и повышению воздухововлекающей способности. Подобный сдвиг в ММР связан со сбоями в технологическом процессе производства.
Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что
предложенный метод определения молекулярно-массового распределения (ММР)
дает наиболее полную картину распределения олигомеров в базовом продукте. На
основании
полученных
данных
по
ММР
можно
предсказать
свойства
выпускаемого продукта.
66
7. «РАЗРАБОТКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ
ОБНАРУЖЕНИЯ ПАТОГЕНОВ СВИНЕЙ МЕТОДОМ ПЦР»
В 2012 году по договору №111/02 с ЗАО «Свинокомплекс Ивановский» были разработаны и переданы заказчику экспериментальные тест-системы для обнаружения методом ПЦР следующих патогенов свиней:
- вируса РРСС;
- цирковируса свиней типа 2;
- Actinobacillus pleuropneumoniae;
- Haemophilus parasuis;
- Pasteurella multocida;
- Mycoplasma hyopneumoniae;
- Mycoplasma hyorhinis;
- Brahyspira hyodisenteria;
- Lawsonia intracellularis;
- Clostridium perfringens;
- энтеротоксигенная Escherihia coli.
67
8. “ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММОВ ВИРУСА ЯЩУРА”
(СОГЛАШЕНИЕ № 58-0210-1-141F)
Исполнителем проекта является ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному
надзору Российской Федерации. Зарубежным партнером выступает Сельскохозяйственная научно-исследовательская служба Министерства сельского хозяйства
США.
ФГБУ «ВНИИЗЖ» привлекается к участию в реализации проекта как Региональная референтная лаборатория МЭБ по ящуру –
ведущее научно-
исследовательское учреждение в России, которое проводит мониторинг, изучение
свойств возбудителя, осуществляет совершенствование методов диагностики и
профилактики.
Основной целью проекта является характеристика современных штаммов
вируса ящура, поступивших из различных регионов России в ФГБУ ВНИИЗЖ.
В соответствии с планом проведено освежение полевых изолятов вируса
ящура (О/Южная Осетия/2011, О/Ливан/2010 и О/Саудовская Аравия/2008) методом культивирования в клетках низкого пассажа и осуществлено повторное выделение полевых изолятов вируса ящура от КРС (О/Южная Осетия/2011,
О/Ливан/2010 и О/Саудовская Аравия/2008) после экспериментального заражения
как минимум 2 коров и представлена характеристика клинических признаков болезни в течение как минимум 10 дней после экспериментального заражения.
Секвенированы области гена VP1 и проведен биоинформационный анализ
каждой из рабочих расплодок (O/South Ossetia/2011, O/Lebanon/2010 и O/Saudi
Arabia/2008).
Определены нуклеотидные последовательности Р1 области генома трех
освеженных изолятов ВЯ, которые прошли 5, 3 и 4 пассажа на культуре клеток,
соответственно.
Показано, что изоляты O/Lebanon/2010 и O/South Ossetia/2011 имеют 99%ный уровень идентичности с изолятом О/Iran/1/2010. Изолят O/Saudi Arabia/2008
имел 97%-й уровень гомологии с израильскими изолятами 2007 года.
68
С использованием программы MEGA версия 3.1 проведен филогенетический анализ установленных нуклеотидных последовательностей. Результаты анализа свидетельствуют о том, что изоляты O/Saudi Arabia/2008, O/Lebanon/2010 и
O/South Ossetia/2011 принадлежат к генетической линии PanAsia-2 топотипа MESA вируса ящура серотипа О. Изолят O/Saudi Arabia/2008 входит в сублинию,
объединяющую изоляты 2006-2008гг из Центральной Азии и Ближнего Востока.
Изоляты O/Lebanon/2010 и O/South Ossetia/2011 вошли в сублинию, которую
формируют изоляты 2010-2011гг.
69
9. ТЕМАТИКА ФГБУ «ВНИИЗЖ» ЗА СЧЕТ СРЕДСТВ ОТ ПРИНОСЯЩЕЙ
ДОХОД ДЕЯТЕЛЬНОСТИ
9. 1. «Разработка комплексной системы контроля инфекционных болезней
птиц» ( «Ветблагополучие 1-02»)
Цель работы – осуществление эпизоотологического и серологического мониторинга, выделение и характеристика изолятов инфекционных заболеваний
птиц, усовершенствование методов диагностики и разработка новых средств профилактики для защиты от особо опасных, карантинных и экономически значимых болезней птиц в соответствии с требованиями «Руководства по стандартам
для методов диагностики и вакцинам МЭБ».
Проведен анализ и систематизация периодической и научной литературы по
болезням птиц, подготовлена справочная и оперативная информация.
С целью выявления риска заноса или степени распространения вирусных и
бактериальных болезней птиц проведен серологический и эпизоотологический
мониторинг птицефабрик в том числе серологический скрининг племенных хозяйств на вирусный гепатит Е.
Для совершенствование методов диагностики болезней птиц разработаны
методические указания по выявлению изолятов реовируса кур методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, по определению титра антител к метапневмовирусу птиц подтипов А и В в непрямом варианте иммуноферментного анализа при тестировании сывороток в одном разведении
Усовершенствован метод культивирования и титрования метапневмовируса
птиц в перевиваемой культуре клеток и разработаны методические указания по
поиску систем культивирования вируса ССЯ-76.
С целью совершенствования и разработки новых технологий изготовления
вакцин против инфекционных болезней птиц проведен поиск безопасных и эффективных адъювантов.
Разработана технология изготовления и контроля инактивированной вакцины против ньюкаслской болезни, реовирусного теносиновита и метапневмовирусной инфекции птиц, а также инактивированной вакцины против реовирусного
теносиновита птиц на основе штамма реовируса«0402».
70
Начаты исследования по разработке средства специфической профилактики ньюкаслской болезни у голубей и предложены методические рекомендаций по
лиофилизации экстраэмбриональной жидкости утиных эмбрионов, содержащей
вирус гепатита утят штамма «ВГНКИ».
Разработаны и представлены в Россельхознадзор «Правила по борьбе с
ньюкаслской болезнью» с учетом прогресса в диагностике и обеспечиваем гармонизации положений данного проекта с международными требованиями, а также 9
комплектов НД по основным направлениям исследовательской работы.
Проведены сличительные международные испытания по диагностике болезней птиц с применением коммерческих иммуноферментных наборов для диагностики болезней птиц производства ведущих фирм.
По результатам участия в международных кольцевых испытаниях были получены 5 сертификатов международного квалификационного тестировании.
По результатам проведенных исследований за текущий год было опубликовано 32 научных работы, в том числе 3 в зарубежных изданиях, Получен 1 патент
и подано 2 заявки на получение патента.
Разработаны прогнозы по эпизоотической ситуации на территории РФ в
2013 году по таким особо опасным и экономически значимым болезням животных
как грипп птиц и ньюкаслская болезнь. Разработано 5 методов диагностики, усовершенсвовано и разработано 8 вакцинных препарата, проведено 164400 исследований.
Было проведено на базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» 10 обучающих семинаров и
курсов повышения квалификации по профилактике и борьбе с инфекционными
болезням животных, для ветеринарных врачей (всего 193 чел.) республиканских, краевых и областных управлений ветеринарии субъектов РФ.
По итогам конкурса за разработку и производство высокоэффективных ветеринарных препаратов на выставке «Золотая осень-2012» ФГБУ «ВНИИЗЖ» было награждено 1 золотой, 3 серебряными и 1 бронзовой медалям, 1 разработка
получила диплом победителя «Владимирская марка».
71
9.2. Разработка комплексной системы средств и методов по диагностике,
профилактике и борьбе с инфекционными болезнями КРС, МРС,
плотоядных и рыб («Ветблагополучие 2-02»)
. Цель работы – осуществление эпизоотологического и серологического мо-
ниторинга, выделение и характеристика изолятов инфекционных заболеваний
КРС, МРС, плотоядных и рыб, усовершенствование методов диагностики и разработка новых средств профилактики для защиты животных от инфекционных
заболеваний вирусной и микробной этиологии в соответствии с требованиями
«Руководства по стандартам для методов диагностики и вакцинам МЭБ».
Проведен анализ и систематизация периодической и научной литературы по
борьбе с инфекционными болезнями КРС, МРС, плотоядных и рыб и подготовлена справочная информация.
Осуществлен эпизоотологический и серологический и мониторинг в животноводческих хозяйствах РФ с целью выявления риска заноса или степени распространения инфекционных болезней КРС, МРС, плотоядных и рыб вирусной и
бактериальной природы.
С целью оценки состояния противоящурного иммунного фона проведен серологический мониторинг в регионах буферной зоны РФ.
С использованием молекулярно-биологических методов исследования получена характеристика штаммов вируса ящура в рамках соглашения с Департаментом сельского хозяйства США .
Разработаны новые методов диагностики по микротитрованию вируса парагриппа-3 КРС в культуре клеток, по определению антигенной активности бактерин-токсоидной вакцины против пастереллеза КРС на КРС и лабораторных животных, а также тест-системы для выявления вируса везикулярной болезни свиней в Real-time ПЦР.
С целью совершенствования и разработки новых технологий изготовления
вакцин против инфекционных болезней изучены комбинированные вакцины против ПГ-3 и пастереллеза КРС, отработан режим концентрирования антигена вируса ящура методом ультрафильтрации.
72
Проведены сличительные межлабораторные испытания
по диагностике
ящура и ВБС, в квалификационном тестировании, организованном Европейским
сообществом Референтных лабораторий по ящуру и ВБС и Всемирной референтной лабораторией ФАО/МЭБ по ящуру.
Кроме того, в 2012 г. Региональной референтной лабораторией МЭБ по
ящуру были подготовлены и проведены сличительные испытания для стран
ближнего зарубежья. При исследовании шифрованных проб на выявление
антигена вируса ящура и определение противоящурных антител получены
корректные результаты.
По результатам проведенных исследований за текущий год было опубликовано 46 научных работы, в том числе 5 в зарубежных изданиях, Получено 4 патента и подано 4 заявки на получение патента.
Разработаны прогнозы по эпизоотической ситуации на территории РФ в
2013 году по таким особо опасным и экономически значимым болезням животных
как ящур, блютанг, оспа овец (коз), чуме мелких жвачных, губкообразной энцефалопатии КРС и бешенству.
Разработано 2 метода диагностики, усовершенствовано и разработано 4
вакцинных препарата, проведено 23132 исследований.
На базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» было проведено 8 обучающих семинаров и курсов повышения квалификации по профилактике и борьбе с инфекционными болезням животных, для ветеринарных врачей (всего 70 чел.) республиканских,
краевых и областных управлений ветеринарии субъектов РФ.
По итогам конкурса за разработку и производство высокоэффективных ветеринарных препаратов на выставке «Золотая осень-2012» ФГБУ «ВНИИЗЖ» было награждено 6 золотыми, и 1 бронзовой медалями, 1 разработка отмечена памятной медалью и дипломом Международного фонда биотехнологий им.
И.Н.Блохиной и 2 разработки получили диплом победителя «Владимирская марка».
73
9.3.
Совершенствование методов контроля инфекционных болезней свиней, методов лабораторных исследований остатков запрещенных вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного происхождения («Ветблагополучие 3-02»)
Цель работы – осуществление эпизоотологического и серологического мо-
ниторинга, выделение и характеристика изолятов инфекционных заболеваний
свиней, усовершенствование методов диагностики и разработка новых средств
профилактики для защиты от особо опасных, карантинных и экономически значимых болезнейсвиней в соответствии с требованиями «Руководства по стандартам для методов диагностики и вакцинам МЭБ».
Совершенствование методов лабораторных исследований остатков запрещенных вредных веществ в организме живых животных и продуктах животного
происхождения.
Проведен анализ и систематизация периодической и научной литературы по
болезням свиней и методам лабораторных исследований остатков запрещенных
вредных веществ в организме живых животных и продуктах животного происхождения, подготовлена справочная и оперативная информация.
С целью выявления риска заноса или степени распространения вирусных и
бактериальных болезней свиней проведен серологический и эпизоотологический
мониторинг.
Изучены изоляты и имеющиеся штаммы ротавируса свиней с целью изготовления новых более эффективных вакцин и диагностикумов в соответствии с
эпизоотической ситуацией.
Для совершенствования методов диагностики ротавируса свиней
разработана реакция микронейтрализации и непрямой гемагглютинации для обнаружения антител против ротавируса свиней в сыворотках крови свиней.
Разработан непрямой вариант ИФА для выявления антител к патогенным
лептоспирам в сыворотках крови свиней
Проведен мониторинг остатков запрещенных и вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного происхождения
74
С целью совершенствования методов лабораторных исследований остатков
запрещенных и вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного происхождения разработаны:
-методические рекомендации по ускоренному определению пестицидов
различных классов в природных и грунтовых водах методом капиллярного электрофореза;
-методические рекомендации по ускоренному определению пестицидов
различных классов в овощах и фруктах методом газожидкостной хроматографии;
- методические рекомендации по одновременному определению микотоксинов различных классов в пищевых продуктах и кормах методом газожидкостной
хроматографии с детектором по захвату электронов;
- методические рекомендации по ускоренному определению бисфенола А и
диэтилстильбэстрола в консервированных пищевых продуктах методом газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов;
- методические рекомендации по определению стрептомицина и дигидрострептомицина в меде и молочной продукции методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на детекторе с диодной матрицей.
С использованием разработанных и общепринятых методов лабораторных
исследований остатков запрещенных и вредных веществ в организме живых животных, продуктах животного происхождения были проведены исследования по
определению:
- пестицидов различных классов в природных и грунтовых водах;
- пестицидов различных классов в овощах и фруктах;
- микотоксинов различных классов в пищевых продуктах и кормах;
- бисфенола А и диэтилстильбэстрола в консервированных пищевых продуктах;
- антибиотиков группы аминогликозидов в молочной продукции и меде
Разработаны и внедрениы подходы по выявлению фактов фальсификации
происхождения пищевой продукции, растительного и животного сырья, и установлению их происхождения.
75
Проведены работы по выявлению фальсификации и идентификация географического происхождения мяса и икры и видовая идентификация мяса методом
ближней инфракрасной спектроскопии.
По результатам участия в международных кольцевых испытаниях с применением серологических методов получен сертификат международного квалификационного тестирования по выявлению антител сероваров Salmonella enterica в
сыворотках свиней.
Участие в международных сличительных испытаниях по генодиагностике
цирковирусной инфекции свиней, ящуру и по серодиагностике РРСС свидетельствуют о том, что разработанные и используемые в ФГБУ «ВНИИЗЖ» диагностические методы отличаются высокой чувствительностью и специфичностью, а
персонал обладает высокой квалификацией.
По результатам проведенных исследований за текущий год было опубликовано 63 научных работы, в том числе в зарубежных изданиях, подана 1 заявка на
получение патента.
Разработаны прогнозы по эпизоотической ситуации на территории РФ в
2013 году по таким особо опасным и экономически значимым болезням животных
как африканская и классическая чума свиней.
Разработано 8 методов диагностики, усовершенствовано и разработано 3
вакцинных препарата. Проведено 559500 исследований по инфекционным болезням свиней и 73324 исследования продуктов животного и растительного происхождения.
На базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» было проведено 15 обучающих семинаров и
курсов повышения квалификации по профилактике и борьбе с инфекционными
болезням животных и противодействию африканской чуме свиней для ветеринарных врачей (всего 680 чел.) республиканских, краевых и областных управлений
ветеринарии субъектов РФ.
По итогам конкурса за разработку и производство высокоэффективных ветеринарных препаратов на выставке «Золотая осень-2012» ФГБУ «ВНИИЗЖ» было награждено 4 золотыми, 1 серебряной, 2 разработки получили диплом победителя «Владимирская марка».
76
10 . МЕЖДУНАРОДНОЕ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ СОТРУДНИЧЕСТВО
Международное научно-техническое сотрудничество осуществлялось по 22
договорам и соглашением (США, Финляндия, Франция, Бельгия, Польша, Англия, Швейцария, Италия, Эфиопия, Украина, Казахстан Республики Беларусь,
Узбекистан, Абхазия и, Республика Таджикистан и др.).
Таблица 17
Перечень действующих договоров и контрактов ФГБУ «ВНИИЗЖ»
по международному научно-техническому сотрудничеству на 2012 год
№
п/п
1
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Наименование НИР
Срок действия
Заказчик
2
Совместная
5
научно-исследовательская работа в области ветеринарной медицины
3
4
Республика Беларусь,
Институт экспериментальной ветеринарии
им. Вышелесского
Проведение
4
НИР по тестированию на птице вакцин против микоплазмоза птиц на
основе разных адъювантов фирмы SEPPIC
Проведение НИР по тестированию на птице вакцин против гриппа птиц на основе
разных адъювантов фирмы SEPPIC
НИР
5 в области диагностики болезней животных, внедрения новых методов исследования, обмена опытом между специалистами.
Сотрудничество
6
в области контроля ветеринарных препаратов, разработки и усовершенствования методов диагностики
инфекционных болезней с/х животных
(ящура, бешенства, гриппа птиц, ньюкаслской болезни птиц, оспы, чумы мелких
жвачных и других особо опасных и экономически значимых болезней животных),
обмен научно-технической информацией,
испытания препаратов и стажировки специалистов.
Сотрудничество в области контроля ветеринарных препаратов, разработки и усовершенствования методов диагностики
инфекционных болезней с/х и домашних
№ 144/02 от
18.02.2011до
расторжения одной из сторон
№ 730/10 от
30.11.2012 на 2
года
№ 731/11 от
30.11.2012 на 2
года
№ 613/07 от
19.07.2012 до
расторжения по
соглашению
сторон
Франция
Компания «SEPPIC»
Франция
Компания «SEPPIC»
Польша,
Государственный Ветеринарный Институт Государственный Исследовательский Институт
№ 382/04 от
01.04.2010г. до
расторжения одной из сторон
Узбекистан,
Узбекская государственная научноконтрольная лаборатория ветеринарных препаратов
№ 324/07 от
26.07.2010г
до расторжения
одной из сторон
Украина,
Государственный научно-контрольный институт биотехнологии и
77
животных
( бешенства, гриппа птиц, ньюкаслской
болезни птиц,инфекционного бронхита
кур, аденовирусных инфекций птиц, инфекционной бурсальной болезни птиц, болезни Марека и других особо опасных и
экономически значимых болезней животных), обмен научно-технической информацией, испытания препаратов и стажировки специалистов.
7. Сотрудничество в области проведения
референтных исследований при
диагностике особо опасных болезней
животных и птиц, контроля ветеринарных
препаратов, разработки и усовершенствования методов диагностики инфекционных
болезней сельскохозяйственных и домашних животных (бешенства, гриппа птиц,
ньюкаслской болезни птиц, инфекционного бронхита кур, аденовирусных инфекций
птиц, инфекционной бурсальной болезни
птиц, болезни Марека и других особо
опасных и экономически значимых болезней животных), обмен научно-технической
информацией, испытания препаратов и
стажировки специалистов.
8. Совместная научно-исследовательская работа в области ветеринарной медицины,
направленной на получение новых данных
по изучению природы возбудителей инфекционных заболеваний животных и совершенствованию методов диагностики.
9. Совместная научно-исследовательская работа в области ветеринарной медицины,
направленной на получение новых данных
по изучению природы возбудителей инфекционных заболеваний животных и совершенствованию методов диагностики.
10. Совместная научно-исследовательская работа в области ветеринарной медицины.
Сотрудничество в области гармонизации
методов контроля противоящурных вакцин, усовершенствования методов диагностики вирусных болезней животных.
Соглашение № 479/06 от 17. 06. 2011
11. Сотрудничество в области контроля ветпрепаратов, разработки методов диагностики инфекционных болезней животных
штаммов микроорганизмов
№ 385/10 от
18.10.2010г
до расторжения
одной из сторон
Республика Казахстан,
Государственное учреждение «Национальный
референтный центр по
ветеринарии» Комитета
государственной инспекции в Агропромышленном комплексе
Министерства сельского хозяйства
№ 800/12 от
12.2010г
до расторжения
одной из сторон
Украина,
Институт экспериментальной и клинической
ветеринарной медицины
(ННЦ ИЭКВМ)
Украина,
Институт птицеводства
Украинской Академии
аграрных наук
№ 149/02 от
21.02.2011г.
до расторжения
одной из сторон
с 17. 06. 2011
до расторжения
одной из сторон
№ 1 от
05.01.2012 до
расторжения по
соглашению
Сторон
Республика Таджикистан
НПП « Биологические
препараты» Таджикской Академии
Сельскохозяйственных
наук
Национальный центр
ветеринарной диагностики Республики Таджикистан
78
12. Совместная научно-исследовательская деятельность в сфере борьбы и профилактики инфекционных болезней животных
13. Совместные исследования, направленные
на совершенствование мер контроля инфекционных болезней животных
14. Сотрудничество в области испытания перспективных препаратов для борьбы с инфекционными заболеваниями сельхозживотных
№ 799/11 от
23.11.2012 до
расторжения по
соглашению
Сторон
от 31.10.2012 до
2017 года
№ 676/08 от
15.08.2012 до
расторжения по
соглашению
Сторон
15. Научное сотрудничество в области диа№ 615/07 от
гностики болезней животных, разработки
20..07.2012 до
вакцин, контроля качества сырья животно- расторжения по
го происхождения, контроля эпизоотичесоглашению
ской ситуации.
Сторон
16. Соглашение о сотрудничестве в производ- № 576/06 от
стве приманок оральной вакцины для лис и 19.06.2012
их распространение
Национальный ветеринарный институт Эфиопии
Агентство безопасности продовольствия
Финляндии
Институт Молекулярной биологии национальной Академии
Наук Республики Армения
Институт экспериментальной зоопрофилактики региона Лацио и
Тоскана (Рим, Италия)
Компания VIRBAC,
Франция
Таблица 18
Проекты Международного научно-технического центра ФГБУ «ВНИИЗЖ»
на 2012 год
№
проекта
3017
3427
3460
3005
Название проекта
Изоляция и идентификация
микоплазм, разработка надежного антигена для детекции
микоплазм и вакцин на основе
масляного адъюванта
Коллабораторы
Подразделение по научным исследованиям в птицеводстве на
Среднем
Юге
Сельскохозяйственной
научноисследовательской службы Министерства сельского хозяйства
США
Совершенствование
систем Агентство по уменьшению угрозы
физической защиты и биоло- МО США (DTRA)
гической безопасности для
обеспечения сохранности биологического материала в Федеральном центре охраны здоровья животных
Изучение
адъювантных Юго-восточная
птицеводческая
свойств различных веществ, научно-исследовательская лабовходящих в состав инактиви- ратория (SEPRL), South Atlantic
рованных вакцин против ви- Area ARS-USDA
русных болезней птиц
Выявление и характеристика Юго-Восточная
научноновых изолятов вируса нью- исследовательская
лаборатория
каслской болезни и вируса болезней птиц (SEPRL)
гриппа птиц
Сроки
01.04. 2005 г.–
01.04.2012 г.
01.08.2006 г.01.03.2013 г.
01.09.2006 г.01.03.2013 г.
01.06.2006 г.01.06.2013 г.
79
ФГБУ «ВНИИЗЖ» является координатором и исполнителем Программы
совместных действий государств-участников СНГ по профилактике и борьбе с
ящуром в государствах Содружества, а также участвует в реализации Комплекса
совместных мер государств-участников СНГ по предупреждению проникновения
и распространения гриппа птиц на территории государств-участников СНГ.
Международные сличительные испытания
Результаты участия в международных сличительных испытаниях в 2012г
свидетельствуют о том, что разработанные и используемые в ФГБУ «ВНИИЗЖ»
диагностические методы отличаются высокой чувствительностью и специфичностью, а персонал обладает высокой квалификацией.
Таблица 19
Проведение международных сличительных испытаний в 2012 году
1.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Инфекционная бурсальная болезнь
ИФА (ВНИИЗЖ)
ИФА Synbiotics
2.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Ньюкаслская болезнь
ИФА (ВНИИЗЖ),
РТГА (ВНИИЗЖ)
3.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Инфекционный
бронхит кур
ИФА (ВНИИЗЖ)
ИФА Synbiotics
4.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Микоплазма галлисептикум/синовиа
ИФА (ВНИИЗЖ)
ИФА Synbiotics
5.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Метапневмовирус
ИФА (ВНИИЗЖ)
Svanova (Швеция)
6.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
Инфекционный ларинготрахеит
Реовирус
ИФА (ВНИИЗЖ)
ИФА Synbiotics
ИФА (ВНИИЗЖ)
ИФА Synbiotics
тест-системы производства ФГБУ «ВНИИЗЖ»
тест-системы производства ФГБУ «ВНИИЗЖ»
7.
8.
9.
Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
10. Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды
РРСС
ПЦР-РВ по выявлению цирковируса
свиней
выявление антител
к неструктурным
белкам вируса
ящура
ИФА (ВНИИЗЖ)
фирмы Pronics
80
11. Международные сличительные испытания, фирма «GD», Нидерланды,
12.
13.
14.
Всемирная референтная лаборатория ФАО/МЭБ по ящуру
Выявление антител
к вирусу РРСС
Выделение вируса
ящура
ИФА (ВНИИЗЖ)
фирмы IDEXX;
На культуре клеток; с
подтверждением:
- ПЦР
- ИФА «ВНИИЗЖ»,
- Пербрайт (Великобритания)
Определение анти- ИФА «ВНИИЗЖ»,
тел к структурным
- Пербрайт (Великои неструктурным
британия),
белкам вируса
- Seditest (тип О),
ящура
РМН
Выявление антигена - ИФА «ВНИИЗЖ»,
вируса ящура в не- Пербрайт (Великоинфекционном мабритания),
териале
- ПЦР в реальном времени
81
11 . ПОВЫШЕНИЕ КВАЛИФИКАЦИИ СПЕЦИАЛИСТОВ
Ведущие специалисты института систематически читали лекции и проводили практические занятия на курсах повышения квалификации и семинарах для
ветеринарных специалистов госветслужбы на базе ФГБУ Центральной научнометодической ветеринарной лаборатории ( г.Москва) и в различных регионах РФ.
На базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2012 году были проведены курсы повышения
квалификации для ветеринарных врачей республиканских, краевых и областных
управлений (департаментов) ветеринарии субъектов Российской Федерации по
эпизоотологии, диагностике, профилактике и мерам борьбы с африканской и
классической чумой свиней, бешенством и прионными болезнями животных в современных условиях.
Было проведено на базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» 15 обучающих семинаров и
курсов повышения квалификации по профилактике и борьбе с инфекционными
болезням животных и противодействию африканской чуме свиней для ветеринарных врачей (всего около 1000 чел.) республиканских, краевых и областных
управлений ветеринарии субъектов РФ.
В текущем году проведено 7 обучающих семинаров для 114 специалистов
по использованию автоматизированных систем «Аргус», «Веста», «Меркурий»,
«Ветис», позволяющих осуществлять в электронном виде административные процедуры, связанные с запросом разрешений на ввоз/вывоз/транзит поднадзорных
ветеринарному надзору грузов и их контролем, автоматизированное составление
отчетов по проводимым исследованиям и справок.
Специалистами Центра совершены свыше 100 командировок в регионы для
участия в семинарах и осуществления мероприятий по вопросам диагностики,
профилактики и борьбы с инфекционными болезнями животных и оказания консультативной помощи непосредственно в хозяйствах.
82
Таблица 20
Повышение квалификации сотрудников ФГБУ «ВНИИЗЖ»
в 2012 г.
№
п/п
1.
2.
ФИО
Место назначения
г. СанктПетербург
Прохватилова Л.Б.
Абраменкова О.И.
3.
Жайворонкова В.А.
4.
Старов С.К.
5.
Старов С.К.
6.
7.
8.
Андрейчук Д.Б.
Метлин А.Е.
Метлин А.Е.
9.
Мищенко А.В.
10.
Ручнова О.И.
11.
Шадрова Н.Б.
Латвия,
г. Елгава,
12.
13.
14.
15.
Чвала И.А.,
Андриясов А.В.
Андрейчук Д.Б.,
Репин П.И.
Атенс, Джорджия, США
Владимир,
Россия
16.
17.
Шульпин М.И.,
Андрейчук Д.Б.
Прага, Чехия
18.
19.
20.
Константинов А.В.
Кукушкина М.С.
Константинов А.В.
г. Москва
г. Нижний
Новгород
г. Москва,
МГМУ
г. Москва,
МГМУ
США
США
г. Белгород,
Россия
г. Троицк,
Уральская государственная
академия ветеринарной медицины
Латвия,
г. Елгава,
г. СанктПетербург
Цель командировки
Повышение квалификации: «Математические
основы, тренинг и моделирование навыков
практической валидации методик лабораторных исследований»
Курсы повышения квалификации «Проверка
средств теплотехнических измерений»
Повышение квалификации
Повышение квалификации
Курсы по диагностике
Курсы по трансграничным болезням
Обучение по программе: Актуальные проблемы ветеринарной медицины и пути их решения в современных условиях
Эпизоотическая ситуация, профилактика заноса и распространения ящура на территории
РФ и Республики Казахстан
Прослеживаемость измерений и исследований
в микробиологии. Лабораторная оценка микробиологических рисков для переработки
сельхозпродукции по принципам НАССР. Биобезопасность
Прослеживаемость измерений и исследований
в микробиологии. Лабораторная оценка микробиологических рисков для переработки
сельхозпродукции по принципам НАССР. Биобезопасность
Программа научного обмена
Специализированная подготовка руководителей и специалистов при работе с опасными
отходами в области обеспечения экологической безопасности
Экспериментальное моделирование и статистический анализ при исследованиях в ПЦР
Разработка и регистрация лекарственных
средств: реализация стратегии «Фарма-2020»
Аудит производства по досье на серию
83
21.
Орлова О.Н.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
Егорова Л.В.
Снеткова М.Г.
Шикина Г.И.
Шурыгина Е.А.
Якупов М.
Бардина Н.С.
28.
Иванова Д.С.
29.
Тарасова А.П.
30.
Жогова Н.Г.
31.
32.
Глейзер Д.А.
33.
Куренкова Е.В.
34.
35.
36.
Егоров А.А
Назаров Н.А
Веткова С.Ф.
37.
Гиндулин Д.Р.
38.
Лозовая М.В.
г. Владимир,
Россия
г. Владимир,
Россия
г. Чанчжоу,
Китай
г. СанктПетербург,
Россия
г. СанктПетербург,
Россия
г. СанктПетербург,
Россия
г. Москва
Украина
39.
Волкова М.Н.
40.
Самсонова И.А.
41.
42.
Пастухова И.Б.
Пискунов А.В.
43.
Пискунов А.В.
44.
45.
Карасева Н.М.
Королев Д.С.
г. Владимир
г. Владимир
г. Москва
г. СанктПетербург,
Россия
г. СанктПетербург,
Россия
г. СанктПетербург,
Россия
г. Владимир,
АНО «Учебный центр
«АРИАДНАII»
Германия,
г. Бремен
ФГБОУ ВПО
Саратовский
государственный университет им. Н.Г
Чернышевско-
Сертификат о прохождении курса обучения
работе на жидкостном хроматографе Flexar.
Повышение квалификации «По курс специализированной подготовки руководителей и
специалистов при работе с опасными отходами в области обеспечения экологической безопасности».
Семинар по инспекции и карантину для должностных лиц из русскоязычных стран
Практика устного перевода
Практика устного перевода
Практика устного перевода
II Международный ветеринарный конгрес
Трансмиссивные болезни животных: актуальные аспекты биобезопасности и контроля
Работа с опасными отходами в области обеспечения экологической безопасности
Курс специализированной подготовки руководителей и специалистов при работе с опасными отходами в области обеспечения экологической безопасности
Участие в обучающем семинаре «Оценка регулирующего воздействия»
Участие в семинаре ЦНТИ «Прогресс»
Участие в семинаре ЦНТИ «Прогресс по архивированию документов»
Участие в семинаре ЦНТИ «Прогресс»
Курс специализированной подготовки руководителей и специалистов при работе с опасными отходами в области обеспечения экологической безопасности, июль 2012 г.
Обучение на масс-спектрометре Maldi Basic
Химия биологически активных веществ
84
го
46.
Якупов М.
г. Владимир,
ФГБУ
«ВНИИЗЖ»
Повышение квалификации по теме «Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры
борьбы с ящуром, оспой, блютангом животных в современных условиях»
47.
Якупов М.
г. Пулавы,
Польша,
Национальный
Институт Ветеринарии
Обучение по темам: «Диагностика классической чумы свиней и диагностика болезни Ауески».
Работа ученого совета в 2012 году
В соответствии с Уставом ФГБУ «ВНИИЗЖ» п.5.2 ученый совет в качестве
органа управления создается для рассмотрения основных вопросов научной деятельности, а также реализации конкурсной системы замещений вакансий. Работа
совета проводится по утвержденному на год плану.
Проведено 9 заседаний ученого совета, на которых рассматривались рабочие вопросы в соответствии с планом работ. Явка членов совета на заседания удовлетворительная и составляет 80-85%.
Заседания ученого совета проводились, как правило, раз в месяц в соответствии с планом работы. На заседаниях ученого совета рассматривались: перспективные направления развития научно-исследовательских и производственных работ; планы и отчеты НИР по отдельным направлениям; нормативная документация на ветеринарные и биологические препараты; планы подготовки и издания
научных трудов; проведение избраний по конкурсам на замещение научных
должностей сотрудников; планы и темы диссертационных работ аспирантов; материалы кандидатских и докторских диссертаций; материалы по выдвижению на
присвоение ученых званий (Приказ №38 от 24.01.2012г. «Об утверждении Порядка оформления и выдачи аттестатов об ученых званиях профессора по кафедре,
доцента по кафедре, профессора по специальности и доцента по специальности и
их дубликатов»); вопросы по выдвижению на представление к Правительственным наградам; информации о стажировках и зарубежных командировках.
85
В работе диссертационного совета нашли отражение Приказ № 2817 от 12
декабря 2011 г. (Рег. №23080 от 31 января 2012 г.) Минобрнауки России «Об
утверждении Положения о совете по защите диссертаций на соискание ученой
степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук», Приказ №37
от 24.01.2012 г. (Рег. №23436 от 11 марта 2012 г.) «Об утверждении Порядка
оформления и выдачи дипломов и дубликатов дипломов доктора наук и кандидата
наук, а также замены дипломов». Диссертационный совет осуществлял свою деятельность, руководствуясь Решениями Президиума ВАК Минобрнауки России
№8/13 от 2.03.2012 г., №9/16 от 16.03.2012 г., №25/52 от 22.06.2012 г. и др.
Таблица 21
40
16
18
6
9
-
6
19
-
Прием в аспирантуру
соиск.
Численность
аспир.
Защищено
диссертаций
докторов
канд.
спец.
в том числе
докторов
канд.
Членов
ученого
совета
Засед. ученого совета
Ученый совет и аспирантура в 2012 г.
5
Основные вопросы,
выносимые на заседания
ученого совета
Планы и отчеты по НИР;
Утверждение тем диссертационных
работ аспирантам и докторантам;
Рассмотрение НД;
Избрание научных сотрудников по
конкурсу на вакантные должности;
Присвоение ученых званий.
В 2012 году защищено 6 кандидатских диссертаций.
Отдельными приказами Минобрнауки полномочия диссертационных советов, составы которых соответствовали новому положению, были продлены на
срок действия номенклатуры специальностей научных работников и переименованы в советы по защите докторских и кандидатских диссертаций, в том числе и
совет Д 220.015.01 при ФГБУ «ВНИИЗЖ» (приказ Рособрнадзора №798-743/77 от
06.04.2007 г.).
Приказом № 105/нк от 11 апреля 2012 г. Минобрнауки России «О советах
по защите докторских и кандидатских диссертаций», которым совет по защите
докторских и кандидатских диссертаций Д 220.015.01 признан соответствующим
86
Положению о совете по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук.
12. ИНФОРМАЦИОННО-АНАЛИТИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ
По заданию Россельхознадзора специалисты информационного центра
ФГБУ «ВНИИЗЖ» готовят и размещают на сайте Россельхознадзора сообщения
об эпизоотической ситуации в мире (ежедневная, еженедельная, ежемесячная информация, полугодовая и годовая), поддерживается ежемесячная информационная сводка по инфекционным заболеваниям, заявляемым странами мира в МЭБ в
двух форматах: по заболеваниям, по странам.
Проводится сбор и подготовка материалов по запросам Россельхознадзора.
1. Отчеты Россельхознадзора (размещены на сайте Росветнадзора
www.fsvps.ru/fpvps/iac)
1.1. Годовой отчёт Россельхознадзора «Состояние ветеринарной службы
Российской Федерации в 2011 г.» в соответствии с приказом №369 – 94 стр.
1.2. Годовой отчет 2011 г. Россельхознадзора «Эпизоотическая ситуация в РФ»
1.3. Отчет за 3 месяца (1-ый квартал) 2012 г. Россельхознадзора «Эпизоотическая ситуация в РФ»
1.4. Отчет за 3 месяца (2-ой квартал) 2012 г. Россельхознадзора «Эпизоотическая ситуация в РФ»
2. Аналитическая деятельность по заданию Россельхознадзора
2.1. За истекший срок подготовлено 103 письменных ответа (аналитических обзоров) по импортно-экспортным операциям РФ животноводческой продукцией и
животным - 1023 стр.
2.2. Отправлены материалы по 86 запросам Россельхознадзора, МЭБ других организаций об эпизоотической ситуации в Российской Федерации, в отдельных регионах страны по отдельным заболеваниям, по диагностике и профилактике этих
заболеваний (801 стр.)
2.3. Таблицы учета вспышек заболеваний по странам - 12 таблиц (51 стр.)
2.4. Отправлено 426 информационных сообщений/отчетов/ALERT по эпизоотологической ситуации в странах мира - 2329 стр.
2.5. Поддержание БД о состоянии ВС России по приказу №369
2.6. Внесены изменения в Единые ветеринарные требования/сертификаты – 109
стр.
2.7. Ежедневное поддержание интерактивной карты Россельхознадзора «Эпизоотическая ситуация в мире» по регистрации ООИ
2.8. Информационное обеспечение раздела «Россия» на сайте Россельхознадзора
http://www.fsvps.ru/fsvps/iac
87
2.9. Составлен анализ данных по внеплановым проверкам по контролю эффективности за деятельностью, предприятий осуществляющих хранение, реализацию и
переработку продуктов свиноводства, а также осуществляющих свою деятельность в сфере общественного питания; анализ о наличие целевых программ по
АЧС; анализ по АЧС в дикой фауне; анализ деятельности ветслужб РФ (по оценке
Россельхознадзора) – 71 стр.
2.10. Подготовлены результаты анализа отчетов территориальных управлений
Россельхознадзора - 265 стр.
2.11. Составлен анализ о состоянии и деятельности ветеринарных служб СевероКавказкого ФО РФ- 45 стр.
2.12. Подготовлены переводы – 1147 стр.
2.13. Оказание консультативной и аналитической помощи ветеринарным службам
регионов:
2.13.1. Рабочее совещание в Администрации Владимирской области по вопросам профилактики АЧС на территории Владимирской области (Владимирская
область, г. Владимир, октябрь 2012 г.) - 1 человек
2.13.2.Участие в заседании Ветеринарного Координационного Совета по свиноводству (г. Казань, 26-28 марта) – 1 человек.
2.13.3. Методическая помощь Территориальному Управлению Россельхознадзора по Краснодарскому краю при ликвидации очага африканской чумы
свиней в г. Краснодар (Краснодарский край, г. Краснодар, 2-7 августа) - 1 человек
3. Аналитические обзоры по эпизоотической ситуации в странах мира и на
территории Российской Федерации
3.1. Сделано сообщений и опубликовано на сайте Россельхознадзора «Ветеринарно-эпидемиологическая обстановка в Российской Федерации и странах мира»:
- ежедневных отчетов - 237 (2133 стр.);
- недельных отчета - 62 (62 стр.);
- месячных отчетов – 12 (120 стр.);
- квартальных отчета - 4 (8 стр.);
- полугодовой отчет - 2 (6 стр.)
3.2. Опубликованы 9 аналитических комментариев по эпизоотической ситуации в
странах мира – 14 стр.
3.3. Составлены 208 карт по эпизоотической ситуации в РФ и 132 карты по эпизоотической ситуации в странах мира. Всего: 340 карт.
3.4. Подготовлена обновленная презентация для проведения семинара «Российская Федерация. Противодействие африканской чуме свиней в 2012 г.»
3.5. Подготовлен прогнозы на 2012 г. по риску возникновения и распространения
на территории Российской Федерации 10-ти заболеваний: АЧС, КЧС, ящура,
КЛО (блютанг), по оспе овец и коз, по чуме мелких жвачных, по высокопатогенному гриппу птиц, по болезни Ньюкасла, по бешенству, по губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота.
88
Справочно-информационное обслуживание сотрудников осуществляется
через справочно-информационный аппарат библиотеки, который состоит из электронного каталога, включающего около 20 тыс. описаний, алфавитного и систематического каталогов и 13 картотек, содержащих более 273 тыс. библиографических описаний. Библиотека оснащена 17 компьютерами с выходом в Интернет.
Сайт научной библиотеки, созданный в 2007 г., активно развивается и пополняется.
Главной составляющей сайта научной библиотеки является электронный
каталог, который предоставляется в распоряжение пользователей по сети Центра
в режиме реального времени. В настоящее время электронный каталог включает
19730 записей.
За истекший год справочно-информационный аппарат пополнился 2144
библиографическими описаниями, введенными в электронный каталог.
В 2012 г. выполнена 3441 библиотечно-библиографическая справка, в том
числе 256 тематических, 143 фактографических, 1237 библиографических, 1594
адресных и 211 методических.
Число обращений к сайту научной библиотеки за 2012 г. составило 5817,
просмотрено 23469 страниц, число посетителей – 1778. Поскольку сайт представлен в Интернете, наряду с пользователями нашего института его посещают пользователи различных регионов России и других стран. В 2012 г. сайт посетили
пользователи из 36 стран. Кроме того, библиотека осуществляет продажу литературы, издаваемой Центром, по заявках учреждений России и стран СНГ.
Прайс-лист на печатную продукцию представлен на сайте ФГБУ «ВНИИЗЖ» и в
настоящее время включает 74 наименования.
В 2012 г. было опубликовано 203 работы: 150 статей, из них 136 – в российских и 14 – в иностранных источниках, 19 книг, 35 методик.
За отчетный период ФГБУ «ВНИИЗЖ» получено 5 патентов, 7 уведомлений
о положительном решении Роспатента о выдаче патентов РФ на изобретения, поступило 3 уведомления от сотрудников ФГБУ «ВНИИЗЖ» о создании при испол-
89
нении служебных заданий предполагаемых изобретений, составлено 7 заявок на
выдачу патентов РФ на изобретения.
В 2012 году ФГБУ «ВНИИЗЖ» поддерживал 55 патентов РФ на изобретения.
Таблица 22
Издания ФГБУ «ВНИИЗЖ» за 2012 г.
Название
1.
2.
3.
4.
5
6.
6.
7.
8.
9.
10
Труды Федерального центра охраны здоровья животных т.10, Владимир,
2012.
Стемпинг аут в эрадикации инфекций: монография. Ч. 1.
Убой и утилизация животных /В. В. Макаров, В. А. Грубый, К. Н. Грудев,
О.И.Сухарев. – Владимир, ВИТ-принт, 2012..
Стемпинг аут в эрадикации инфекций: монография.Ч. 2.Деконтаминция
/ В. В. Макаров, В. А. Грубый, К. Н. Груздев, О.И. Сухарев. - Владимир :
ВИТ-принт, 2012.
МЭБ и трансграничные инфекции животных: монография [Текст] /
В. В. Макаров, В. А. Грубый, К. Н. Груздев, О.И. Сухарев. - Владимир
ВИТ-принт, 2012.
Африканская чума свиней, обзор лит. /О. В. Кухаркина, И. А. Борисова, О. А. Борисова. – Владимир, ФГБУ "ВНИИЗЖ", 2012.
Африканская чума свиней: картографический анализ распространения
заболевания на территории Российской Федерации /
Дудников С. А.,
Петрова О. Н.,. Коренной Ф. И., ФГБУ "ВНИИЗЖ". – Владимир, 2012.
Прогнозы по ряду особо опасных болезней животных в Российской
Федерации на 2012 год (ящур, АЧС, КЧС, КЛО, оспа овец и коз, ЧМЖ,
грипп птиц, ньюкаслская болезнь, ГЭ КРС, бешенство)/ Дудников С.А.,
Гуленкин В.М. и др.
Объекты, поднадзорные государственной ветеринарной службе Владимирской области: ветеринарный атлас / А. В. Бельчихина, М. В.
Дудорова, М. А. Шибаев, С.А. Дудников. – Владимир, 2012.
Заболеваемость в совокупной популяции сельскохозяйственных животных: ретроспективное картографирование за 2010 год: информационный бюл. / О. Н. Петрова, М. В. Дудорова, Е. Е. Ерастова, С.А. Дудников. - Владимир, 2012.
Эпизоотическая ситуация и прогноз по бешенству на территории Владимирской области [Электронный ресурс]: информационный бюл. / А. В.
Бельчихина, М. В. Дудорова, М. А. Шибаев А.С. Оганесян, С.А. Дудников.
- Владимир , 2012.
Краткий обзор эпизоотической ситуации в мире по особо опасным болезням животных. 2010 год [Электронный ресурс]: информационноаналитический обзор / Н. С. Дудникова, А. К. Караулов, А. С. Оганесян,
Колво стр.
286
62
96
162
100
120
245
142
70
55
48
90
11.
12.
13.
14.
М.В. Яриков. - Владимир, 2012.
Нормативное регулирование деятельности ветеринарной службы РФ
[Электронный ресурс]: информационно-аналитический обзор /Баскакова
Н. Е.,Оганесян А.С.,Шибаев М.А - Владимир, 2012.
Аннотированный указатель научной литературы «Актуальные вопросы
ветеринарной медицины» за 2012 г. №№ 1-6
Тематический сборник статей «Шмалленберг - новая болезнь жвачных
животных»
Тематический сборник статей «Ящур» Ч. 1-2
76
880
234
1082
13. ПЕРЕЧЕНЬ МЕТОДИЧЕСКИХ РАЗРАБОТОК И РЕГИСТРАЦИЯ
ПРЕПАРАТОВ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
рассмотренные методкомиссией и ученым советом ФГБУ «ВНИИЗЖ»
и утвержденные директором ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2012 г.
.
1.
Методические указания по выделению вируса бешенства в культуре клеток
нейробластомы мыши
2.
Методические рекомендации по выявлению антител к вирусу вирусной диареи крупного рогатого в реакции нейтрализации микрометодом
3.
Методические указания по выявлению антител в сыворотках крови птиц к
возбудителю инфекционного синовита (Mycoplasma synoviae)
4.
Требования к оформлению методических указаний (рекомендаций)
5.
Методические указания по определению первичной структуры генома изолятов вируса высокопатогенного гриппа птиц A/H5N1 генетической подгруппы
QINGHAI с помощью ОТ-ПЦР и нуклеотидного секвенирования
6.
Методические указания по определению молекулярных детерминант патогенности и рецепторной специфичности изолятов вируса высокопатогенного
гриппа птиц A/H5N1 с помощью ОТ-ПЦР и нуклеотидного секвенирования
7.
Методические указания по дифференциации вакцинных штаммов 3004 и
RISPENS вируса болезни Марека серотипа 1 от полевых вариантов с помощью полимеразной цепной реакции
8.
Методические рекомендации по криоконсервированию клеток фибробластов
эмбрионов кур (ФЭК)
9.
Методические рекомендации по отбору образцов слюны крупного рогатого
скота для исследования на наличие противоящурных секреторных иммуноглобулинов А
91
10. Методические указания по выявлению реовируса кур методом полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени
11. Методические указания по определению последовательности ДНК с помощью реакции секвенирования на генетических анализаторах APPLIED
BIOSYSTEMS 3130 и 3130xl при автоматизации пробоподготовки продуктов
реакции секвенирования с использованием станции FREEDOM EVO-2
100BASE
12. Методические рекомендации по обнаружению и классической оценке содержания афлатоксина В1 в пищевых продуктах и кормах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
13. Методические рекомендации по определению глифосата в природной воде и
пищевых продуктах растительного происхождения методом капиллярного
электрофореза
14. Методические рекомендации по определению органических кислот в соках и
напитках методом фазово-обращенной высокоэффективной жидкостной хроматографии
15. Методические указания по выявлению антигенов вируса бешенства в головном мозге животных в твердофазном прямом сэндвич-варианте иммуноферментного анализа
16. Методические рекомендации по определению трихотеценовых микотоксинов
(ниваленола, дезоксиниваленола, НТ-2 и Т-2 токсинов) в кормах и зерне методом газожидкостной хроматографии
17. Методические рекомендации по определению остаточных количеств бисфенола А и диэтилстильбэстрола в мясе, морепродуктах, консервированных
продуктах и воде методом газожидкостной хроматографии
18. Методические рекомендации по определению остаточных количеств пестицидов различных классов в продуктах растительного происхождения методом газожидкостной хроматографии
19. Методические указания по отбору проб мозга крупного рогатого скота для
диагностического исследования на губкообразную энцефалопатию
20. Методические рекомендации по получению и контролю лиофилизированного
материала содержащего вирус вирусного гепатита утят аттенуированного
штамма «ВГНКИ-К»
92
21. Методические указания по стандартизации информации для оценки состояния и деятельности ветеринарных служб субъектов Российской Федерации
22. Методические указания по применению математических моделей прогнозирования эпизоотического процесса при возникновении вспышек особо опасных инфекций на территории Российской Федерации
23. Методические указания по выявлению антител к ротавирусу свиней в реакции микронейтрализации
24. Методические рекомендации по типированию вируса ящура методом полимеразной цепной реакции
25. Методические рекомендации по обнаружению и дифференциации вирулентных изолятов вируса ньюкаслской болезни методом мультиплексной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
26. Методические рекомендации по выявлению антител к патогенным лептоспирам в сыворотках крови свиней в непрямом варианте иммуноферментного
анализа
27. Методические указания по получению меченых флуороизотиоцианатом иммуноглобулинов специфичных к рибонуклеопротеину для диагностики бешенства в реакции иммунофлуоресценции
28. Методические рекомендации по определению титра антител к метапневмовирусу птиц иммуноферментным методом при тестировании сывороток в одном
разведении
29. Методические рекомендации по определению антигенного соответствия
между эпизоотическими изолятами и производственными штаммами вируса
ящура в перекрестной реакции микронейтрализации
30. Методические указания по определению вируснейтрализующих антител к
вирусу бешенства в сыворотках крови диких плотоядных животных в реакции нейтрализации в культуре клеток BHK-21 (RFFIT)
31. Методические указания по ускоренному определению антирабических вируснейтрализующих антител в сыворотках крови диких плотоядных животных в реакции микронейтрализации
32. Методические указания по диагностике бешенства животных методом иммунохроматографического анализа
93
33. Методические указания по разработке метода диагностики бешенства животных в реакции агглютинации латекса
34. Методические рекомендации по культивированию и титрованию метапневмовируса птиц в перевиваемой культуре клеток Маrс-145
Регистрация препаратов
В 2012 году был зарегистрирован новый лекарственный препарат «Эмбрион-вакцина против оспы птиц из штамма «КЭМ-7» с разбавителем»
( СТО 00495527-0175-2012).
В ноябре 2012 года была заявлена на регистрацию в РФ «Вакцина ассоциированная против ньюкаслской болезни, реовирусного теносиновита и метапневмовирусной
инфекции
птиц
инактивированная
эмульгированная»
(СТО 00495527-0198-2012).
Утверждены НД на диагностикум «Набор для серодиагностики гриппа свиней типа А подтипа Н1N1 в реакции торможения гемагглютинации» ( СТО
00495527-0189-2012).
Были разработаны:
- «Диагностический антиген для выявления антител к возбудителю инфекционного синовита птиц (Mycoplasma synoviae) в реакции латексной агглютинации»
(СТО 00495527-0196-2012);
- «Диагностический антиген для выявления антител к возбудителю респираторнго
микоплазмоза птиц (Mycoplasma gallisepticum) в реакции агглютинации»
(СТО 00495527-0195-2012).
В 2012 году была подтверждена государственная регистрация в РФ 15 лекарственных препаратов и получены бессрочные регистрационные удостоверения.
94
Таблица 23
Перечень лекарственных препаратов, на которые в 2012 г. получены
бессрочные регистрационные удостоверения
№
пп
1
НАИМЕНОВАНИЕ ПРЕПАРАТА
ВАКЦИНА ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР И НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ
ЖИВАЯ СУХАЯ
CТО 00495527-0053-2012
2
ВАКЦИНА ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОЙ БУРСАЛЬНОЙ БОЛЕЗНИ ИНАКТИВИРОВАННАЯ
СОРБИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0019-2012
3
ВАКЦИНА ПРОТИВ СИНДРОМА ГИДРОПЕРИКАРДИТА КУР ИНАКТИВИРОВАННАЯ
СОРБИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0154-2012
ВАКЦИНА ПРОТИВ СИНДРОМА СНИЖЕНИЯ ЯЙЦЕНОСКОСТИ-76
ИНАКТИВИРОВАННАЯ ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0008-2012
4
5
6
7
8
9
10
11
ВАКЦИНА АССОЦИИРОВАННАЯ ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ,
ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР И СИНДРОМА СНИЖЕНИЯ ЯЙЦЕНОСКОСТИ-76
ИНАКТИВИРОВАННАЯ ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0007-2012
ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ИЗ ШТАММА «ЛА-СОТА» СУХАЯ
ЖИВАЯ
СТО 00495527-0021-2012
ВАКЦИНА АССОЦИИРОВАННАЯ ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ И
РЕОВИРУСНОГО ТЕНОСИНОВИТА ПТИЦ ИНАКТИВИРОВАННАЯ ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0158-2012
ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ МАРЕКА «МАРЕКБРОЙЛЕР»
СТО 00495527-0059-2011
ВАКЦИНА ПРОТИВ РОТАВИРУСНОЙ И КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЙ КРУПНОГО
РОГАТОГО СКОТА СОРБИРОВАННАЯ ИНАКТИВИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0060-2012
ВАКЦИНА ПОЛИШТАММОВАЯ ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ ИНАКТИВИРОВАННАЯ ПРОТИВ
ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОЭНТЕРИТА СВИНЕЙ
СТО 00495527-0005-2012
ВАКЦИНА АССОЦИИРОВАННАЯ ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА И
ГЕМОФИЛЕЗНОГО ПОЛИСЕРОЗИТА СВИНЕЙ ИНАКТИВИРОВАННАЯ
ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0014-2012
95
12
ВАКЦИНА ПРОТИВ РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА СВИНЕЙ
ИНАКТИВИРОВАННАЯ ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ
СТО 00495527-0171-2012
13
ВАКЦИНА АНТИРАБИЧЕСКАЯ ИНАКТИВИРОВАННАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ЖИДКАЯ
(ВНИИЗЖ)
СТО 00495527-0172-2012
ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ ОСПЫ ОВЕЦ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ СУХАЯ
СТО 00495527-0029-2012
ВАКЦИНА ПРОТИВ ЯЩУРА УНИВЕРСАЛЬНАЯ СОРБИРОВАННАЯ (МОНО-)
ПОЛИВАЛЕНТНАЯ (ИЗ ВИРУСА, ВЫРАЩЕННОГО В КЛЕТКАХ ВНК-21)
СТО 00495527-0170-2012
14
15
14. ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ
Основная производственная деятельность ФГБУ « ВНИИЗЖ» заключается в
выпуске разработанных диагностических тест – систем и вакцинных препаратов.
Для профилактики, диагностики и других целей в 2012 году было произведено 90 наименований вакцин против различных инфекций в том числе:
- против болезней свиней (РРСС, ТГС, болезнь Ауески, пастерелез, сальмонеллез, актинобацеллез свиней и др.) - 18 наименований;
- против болезней КРС, МРС и плотоядных - 20 наименований;
- против болезней птиц – 38 наименований.
Было произведено свыше 3,5 тысяч диагностических наборов и тест-систем
32 наименований против болезней птиц, свиней, КРС и МРС.
ФГБУ «ВНИИЗЖ» осуществлял поставки различных вакцин и диагностических наборов в Азербайджан, Армению, Грузию, Беларусь, Украину, Казахстан,
Киргизию, Узбекистан, Пакистан, Тайвань, Сирию, Иордан, Саудовскую Аравию,
Южную Осетию и др.
15. УЧАСТИЕ ФГБУ «ВНИИЗЖ» В МЕЖДУНАРОДНЫХ И
ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ВЫСТАВКАХ
ФГБУ «ВНИИЗЖ» принимало участие в международных выставках «Зеленая неделя», Берлин, Германия, а также в выставках с.-х. продукции, которые
проходили в Париже, Франция и Алма-Ате, Казахстан.
96
По итогам конкурса за разработку и производство высокоэффективных ветеринарных препаратов на выставке «Золотая осень-2012» ФГБУ «ВНИИЗЖ» было награждено 8 золотыми, 4 серебряными, 1 бронзовой медалями, 2 разработки
получили
памятные
медали
Международного
фонда
биотехнологий
им.
И.Н.Блохиной, 3 диплома победителя конкурса «Владимирская марка».
97
Список препаратов производства ФГБУ «ВНИИЗЖ»,
удостоенных дипломов и медалей в 2012 г.
№
п/п
Медали,
дипломы
1
2
Выставка
Вакцина противоящурная культуральная инактивированная эмульгированная
Набор для выявления антигена вируса ящура иммуноферментным анализом
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
Набор для определения антител к вирусу чумы мелких жвачных жмвотных
методом иммуноферментного анализа с использованием рекомбинантного антигена
Вирусвакцина против чумы мелких жвачных культуральная сухая
3
4
5
Наименование препарата
ЗОЛОТЫЕ
6
7
8
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
Набор для определения антител к пневмовирусу птиц иммуноферментным ме- «Золотая осень-2012», Москва,
тодом при тестировании сывороток в одном разведении
ВВЦ
Масс-спектрометрический метод идентификации микроорганизмов в пищевой «Биоиндустрия-2012», С.-П.
продукции
Вакцина противоящурная культуральная инактивированная эмульгирован«Биоиндустрия-2012», С.-П.
ная
Вакцина против ящура сорбированная моно-и поливалентная
Выставка-ярмарка
«РосБиоТех-2012», Москва,
Экспоцентр
Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивнореспираторного синдрома и парвовирусной инфекции свиней
1
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
СЕРЕБРЯНЫЕ
2
3
4
Вирусвакцина против болезни Марека «ТРИМАРЕК»
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
Вакцина против синдрома гидроперикардита кур инактивированная сорбиро- Выставка-ярмарка «РосБиованная
Тех-2012», Москва, ЭЦ
Вакцина против ньюкаслской болезни и метапневмовирусной инфекции птиц
Выставка-ярмарка «РосБио-
инактивированная эмульгированная
Тех-2012», Москва, Экспоцентр
Вирусвакцина против оспы овец культуральная сухая
«Золотая осень-2012», Москва,
ВВЦ
1
БРОНЗОВЫЕ
1
Памятная медаль Вирусвакцина против чумы мелких жвачных культуральная сухая
и диплом Международного
фонда биотехнологий им. Акаде- Вирусвакцина против болезни Марека «Марек-3»
мика И.Н. Блохиной
2
1
2
3
Диплом победителя конкурса
«Владимирская
марка»
Выставка-ярмарки «РосБиоТех-2012», Москва, Экспоцентр
Выставка-ярмарки «РосБиоТех-2012», Москва, Экспоцентр
Вакцина против синдрома гидроперикардита кур инактивированная сорбированная
Конкурс
«Владимирская марка»
Вакцина против ящура сорбированная поливалентная (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21) жидкая инактивированная типов А,О,Азия-1
Конкурс
«Владимирская марка»
Набор для определения противоящурных антител в сыворотках крови животных в иммуноферментном анализе
Конкурс
«Владимирская марка»
Всего: 18 медалей и дипломов
99
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В 2012 году Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья животных» проводил исследования и осуществлял производственную деятельность в соответствии с приказами Россельхознадзора по государственным заданиям, утвержденным темам, договорам и Госконтрактам, заключенным с Заказчиками.
Сотрудники ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2012 году участвовали в выполнении 5
госконтрактов в рамках федеральной целевой программы «Национальная система
химической и биологической безопасности РФ на 2009-2013 годы» и 1 госконтракта по межгосударственной программе целевой программе ЕврАзЭС «Инновационные биотехнологии» на 2011-2015 годы.
Международное научно-техническое сотрудничество осуществлялось по 22
договорам и соглашениям.
Выполнялись договора с коммерческими организациями по совершенствованию средств диагностики и профилактики болезней животных («АПХ «Мираторг» Белгогродская область ЗАО Свинокомплекс Ивановский и др.).
Всего по Государственным заданиям было освоено 168,95 млн. рублей, по
договорам и Госконтрактам – 66,6 млн. рублей.
За счет средств от приносящей доход деятельности проводилась разработка комплексной системы средств и методов по диагностике, профилактике и
борьбе с инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных, птиц, плотоядных и рыб («Ветеринарное благополучие»). Затраты составили 110,465 млн.
рублей.
По результатам проведенных научно-исследовательских работ за текущий
год опубликованы 203 работы: 150 статей, из них 136 – в российских и 14 – в иностранных источниках, 19 книг, 34 методических указания, 10 проектов НД,
утверждено 15 промышленных регламентов и стандартов учреждения на разработанную продукцию.
104
Изданы труды центра, сборники методик, обзоры литературы, библиографические указатели литературы, а также подготовлены прогнозы, карты, программы и аналитические справки.
В 2012 году ФГБУ «ВНИИЗЖ» поддерживал 55 патентов РФ на изобретения.
Основная производственная деятельность ФГБУ « ВНИИЗЖ» заключается в
выпуске разработанных диагностических тест – систем и вакцинных препаратов.
Для профилактики, диагностики и других целей в 2012 г. было произведено
90 наименований вакцин против различных инфекций в том числе: против болезней свиней ( РРСС, ТГС, болезнь Ауески, пастерелез, сальмонеллез, актинобацеллез свиней и др.) -18 наименований; против болезней КРС, МРС и плотоядных –
20 наименования; против болезней птиц - 38 наименований.
Было произведено свыше 3500 диагностических наборов (32 наименований
против болезней птиц, свиней, КРС и МРС, рыб и лошадей).
Высокое качество разработанных и выпускаемых вакцин и диагностических
тест-систем ежегодно подтверждается на различных выставках, конкурсах и других мероприятиях:
По итогам конкурса за разработку и производство высокоэффективных ветеринарных препаратов на выставке «Золотая осень-2012» ФГБУ «ВНИИЗЖ» было награждено 8 золотыми, 4 серебряными, 1 бронзовой, 2 разработки получили
памятные медали Международного фонда биотехнологий им. И.Н.Блохиной и
3 диплома победителя «Владимирская марка».
Согласно планам НИР и Приказам Россельхознадзора все исследования выполнены в полном объеме и с положительным результатом.
101