Противовирусные эффекты двух Ganoderma lucidum
advertisement
Рейши Шиитаке Кордицепс Агарик Научные исследования 2014 года Рейши Исследования январь-сентябрь 2014 г. Противовоспалительное и гемоксигеназа-1, индуцируя деятельности lanostane тритерпены изолированы от гриба Ganoderma lucidum в RAW264.7 клетки. Ganoderma lucidum является популярным лекарственных грибов, используемых в традиционной медицине для профилактики или лечения ряда заболеваний. В настоящей работе изучено противовоспалительное и гемоксигеназа (HO)-1 индуцирующих влияний 12 lanostane тритерпены из G. lucidum в RAW264.7 клетки. Из них семь тритерпены, бутил lucidenateE2, бутил lucidenateD2 (GT-2), бутил lucidenate P, бутил lucidenateQ, Ganoderiol F, метил ganodenate J и бутил lucidenate индуцированных N хо-1 самовыражения и подавляло липополисахарида (ЛПС-индуцированного оксида азота (NO) производства. Ингибируя HO-1 мероприятие отменено ингибирующее влияние этих тритерпены на производство не в LPS-стимулированных RAW264.7 клетки, что позволяет предположить вовлечение в хо-1 в противовоспалительного эффектов этих тритерпены. Далее мы изучали противовоспалительное и хо-1 индуцирующих влияний GT-2. Митоген-активируемой протеин киназы, ингибиторы или N-ацетилцистеин, антиоксидант, не подавлять GT-2опосредованного HO-1 индукции; однако, LY294002, фосфатидилинозитол 3-киназы (PI3K) ингибитор, заблокированных GT-2-индуцированной HO-1 мРНК и белка выражение. GT-2 увеличивается ядерную транслокацию ядерного фактора-E2-related factor 2 (регулируемый белком nrf2) и сногсшибательность, регулируемый белком nrf2 с помощью малых интерферирующих РНК заблокирован GT-2-опосредованного HO-1 индукции, предполагая, что GT-2-индуцированную HO-1 выражение через PI3K/AKT-регулируемый белком nrf2 пути. В соответствии с представлением, что хо1 обладает противовоспалительными свойствами, GT-2 ингибирует производство фактора некроза опухоли-α и интерлейкина-6, а также индуцируемая No-синтазы и циклооксигеназы-2 выражения. Эти результаты показывают, что хо-1 побуждая к деятельности этих lanostane тритерпены может быть важной в понимании романа, механизм противовоспалительной активности. г. lucidum. Toxicol Appl Pharmacol. 2014 Sep 16. pii: S0041-008X(14)00340-8. doi: 10.1016/j.taap.2014.09.007. [Epub ahead of print] Anti-inflammatory and heme oxygenase-1 inducing activities of lanostane triterpenes isolated from mushroom Ganoderma lucidum in RAW264.7 cells. Choi S1, Nguyen VT2, Tae N1, Lee S1, Ryoo S3, Min BS2, Lee JH4. Author information 1Department of Biochemistry, College of Natural Sciences, Kangwon National University, Chuncheon, Gangwon-Do 200-701, Republic of Korea. Ganoderma lucidum is a popular medicinal mushroom used in traditional medicine for preventing or treating a variety of diseases. In the present study, we investigated the anti-inflammatory and heme 1 oxygenase (HO)-1 inducing effects of 12 lanostane triterpenes from G. lucidum in RAW264.7 cells. Of these, seven triterpenes, butyl lucidenateE2, butyl lucidenateD2 (GT-2), butyl lucidenate P, butyl lucidenateQ, Ganoderiol F, methyl ganodenate J and butyl lucidenate N induced HO-1 expression and suppressed lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) production. Inhibiting HO-1 activity abrogated the inhibitory effects of these triterpenes on the production of NO in LPS-stimulated RAW264.7 cells, suggesting the involvement of HO-1 in the anti-inflammatory effects of these triterpenes. We further studied the antiinflammatory and HO-1 inducing effects of GT-2. Mitogen-activated protein kinase inhibitors or Nacetylcysteine, an antioxidant, did not suppress GT-2-mediated HO-1 induction; however, LY294002, a phosphoinositide 3-kinase (PI3K) inhibitor, blocked GT-2-induced HO-1 mRNA and protein expression. GT-2 increased nuclear translocation of nuclear factor-E2-related factor 2 (Nrf2) and knockdown of Nrf2 by small interfering RNA blocked GT-2-mediated HO-1 induction, suggesting that GT-2 induced HO-1 expression via the PI3K/AKT-Nrf2 pathway. Consistent with the notion that HO-1 has anti-inflammatory properties, GT-2 inhibited the production of tumor necrosis factor-α and interleukin-6, as well as inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 expression. These findings suggest that HO-1 inducing activities of these lanostane triterpenes may be important in the understanding of a novel mechanism for the antiinflammatory activity of G. lucidum. CARI III ингибирует рост опухоли в Меланому-подшипник мышиной модели через индукцию G0/G1 клеточного цикла. Гриб-производные натуральных продуктов были использованы для предотвращения или лечения рака на протяжении тысячелетий. В данном исследовании мы проанализировали противоопухолевый эффект, из CARI (активации клеток-исследовательский институт) III, который состоит из смеси грибного мицелия из Phellinus linteus, выращенных на проросшие коричневого риса, Inonotus obliquus, выращенных на проросшие коричневого риса, Antrodia camphorata, выращенных на проросшие коричневого риса и Ganoderma lucidum. Здесь мы показали, что D-III, оказываемое противоопухолевой активностью, сравнимой с Dox против меланомы in vivo. B16F10 клеток были внутрибрюшинно вводят в мышей C57BL6 развитие твердых внутрибрюшных опухолей. Триста миллиграммов CARI III/кг/день перорально. приводит к уменьшению опухоли вес, сопоставимый с доксорубицином (Dox)-обработанная группа. Увеличение продолжительности жизни (ILS% = 50.88%) наблюдалось в CARI III-административные группы, опухоли по сравнению с контрольной группой. CARI III демонстрирует анти-пролиферативной активности против меланомы B16F10 клеток путем индуцирования G0/G1 клеточного цикла. CARI III подавляет экспрессию циклин D1, CDK4 и CDK2 и индуцирует р21. Поэтому, CARI III может быть потенциальным химические добавки меланомы пациентов. Molecules. 2014 Sep 12;19(9):14383-95. doi: 10.3390/molecules190914383. CARI III Inhibits Tumor Growth in a Melanoma-Bearing Mouse Model through Induction of G0/G1 Cell Cycle Arrest. Park HJ. Author information Department of Food Science and Biotechnology, College of BioNano Technology Gachon University, Sungnam Gyeonggi-do 461-701, Korea. nimpi79@hanmail.net. Mushroom-derived natural products have been used to prevent or treat cancer for millennia. In this study, we evaluated the anticancer effects of CARI (Cell Activation Research Institute) III, which consists of a blend of mushroom mycelia from Phellinus linteus grown on germinated brown rice, Inonotus obliquus grown on germinated brown rice, Antrodia camphorata grown on germinated brown rice and Ganoderma lucidum. Here, we showed that CARI III exerted anti-cancer activity, which is comparable to Dox against melanoma in vivo. B16F10 cells were intraperitoneally injected into C57BL6 mice to develop solid intraabdominal tumors. Three hundred milligrams of the CARI III/kg/day p.o. regimen reduced tumor weight, comparable to the doxorubicin (Dox)-treated group. An increase in life span (ILS% = 50.88%) was observed in the CARI III-administered group, compared to the tumor control group. CARI III demonstrates antiproliferative activity against B16F10 melanoma cells through inducing G0/G1 cell cycle arrest. CARI III 2 inhibits the expression of cyclin D1, CDK4 and CDK2 and induces p21. Therefore, CARI III could be a potential chemopreventive supplement to melanoma patients. Гипотензивный эффекты и ангиотензин-Превращающего фермента Ингибиторных пептидов Рейши (Ганодерма линчжи) авто-Сброженного экстракта. Рейши (Ганодерма линчжи) был использован в качестве традиционной медицине на протяжении тысячелетий. Однако, сравнительно мало известно об этом гриба белков и их биологической активностью. В этом исследовании мы использовали рейши's собственных протеаз для гидролиза белка и получил авто-переваривается рейши (ADR), экстракт. Экстракт был подвергнут in vitro анализах и ведении спонтанных гипертензивных крыс (SHRs), чтобы определить его потенциал для использования в качестве гипотензивного препарата. Биопроб, руководствуясь фракционирования и de novo секвенирования были использованы для выявления активных соединений. После 4 h администрации ADR, систолическое давление SHRs значительно снизилась до 34,3 мм рт. ст. (на 19,5%), а эффект сохранялся до 8 ч управления снижается, достигая, как низкий, как на 26,8 мм рт. ст. (сокращение на 15%-по сравнению с базовой линией, снижение на 26,8 мм рт. ст. - это меньше, чем снижение на 34,3 мм рт. ст. поэтому оно должно давать меньший % снижение). Одиннадцать пептиды были определены и четыре из них показали свойства ингибирования против туза с IC50 значения, начиная с 73,1 мкм-162.7 мкм. Результаты показали, что ADR может быть хорошим источником гипотензивные пептиды, которые могут быть использованы для антигипертензивных препаратов или включение в функциональные продукты питания. Molecules. 2014 Aug 29;19(9):13473-85. doi: 10.3390/molecules190913473. Hypotensive Effects and Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitory Peptides of Reishi (Ganoderma lingzhi) Auto-Digested Extract. Tran HB1, Yamamoto A2, Matsumoto S3, Ito H4, Igami K5, Miyazaki T6, Kondo R7, Shimizu K8. Author information 1Faculty of Agriculture, Kyushu University, Fukuoka 812-8581, Japan. haibangtran@gmail.com. Reishi (Ganoderma lingzhi) has been used as a traditional medicine for millennia. However, relatively little is known about this mushroom's proteins and their bioactivities. In this study, we used reishi's own proteases to hydrolyze its protein and obtained auto-digested reishi (ADR) extract. The extract was subjected to in vitro assays and administered to spontaneous hypertensive rats (SHRs) to determine its potential for use as a hypotensive medication. Bioassay-guided fractionation and de novo sequencing were used for identifying the active compounds. After 4 h administration of ADR, the systolic pressure of SHRs significantly decreased to 34.3 mmHg (19.5% change) and the effect was maintained up to 8 h of administration, with the decrease reaching as low as 26.8 mmHg (15% reduction-compare to base line a decrease of 26.8 mmHg is less than a decrease of 34.3 mmHg so it should give a smaller % reduction). Eleven peptides were identified and four of them showed potent inhibition against ACE with IC50 values ranging from 73.1 μM to 162.7 μM. The results showed that ADR could be a good source of hypotensive peptides that could be used for antihypertensive medication or incorporation into functional foods. КГц-cp (сырой полисахарид, экстракт, полученный из слияния Ganoderma lucidum и Polyporus umbellatus) грибница) индуцирует апоптоз путем повышения внутриклеточного уровня кальция и активация Р38 и NADPH-оксидазы-зависимой генерации активных форм кислорода в SNU-1 клеток. КГц-cp сырой полисахарид, экстракт, полученный после ядерного синтеза, Ganoderma lucidum и Polyporus umbellatus) грибница (кГц). Он подавляет рост раковых клеток. Методы: КГц-cp был извлечен экстракцией растворителем. Анти-пролиферативной активности кГц-cp было подтверждено с помощью Аннексина-V/PI-проточной цитометрии анализа. Внутриклеточное увеличение содержания кальция и измерения внутриклеточных активных форм кислорода (АФК) были выполнены с помощью проточной цитометрии и инвертированный микроскоп. SNU-1 клетки были обработаны p38, Bcl-2 и Nox семьи siRNA. мирнк, трансфицированных клеток был нанят, чтобы 3 исследовать экспрессию апоптотических, рост и выживание генов в SNU-1 клеток. Вестерн-блот анализ проводили для подтверждения экспрессии генов. Результаты: В настоящем исследовании, кГц-cp индуцированного апоптоза преимущественно в трансформированных клетках и имел лишь минимальное влияние на не-трансформированных клеток. Кроме того, кГц-cp найден индуцировать апоптоз путем увеличения внутриклеточного Ca2+ концентрация ([Ca2+]i) и активация P38 генерировать активные формы кислорода (АФК) с помощью NADPH-оксидазы и митохондрии. КГц-cp-индуцированного апоптоза был каспазы зависимых и произошло через митохондриальный путь. ROS генерации NADPH-оксидазы была решающим фактором кГц-cp-индуцированного апоптоза, и хотя митохондриальных АФК производства было также, оказалось, происходят вторичные ROS генерации NADPH-оксидазы. Активация NADPHоксидазы было показано транслокации регуляторных субъединиц p47phox и p67phox в состав клеточной мембраны и было необходимо для ROS поколения кГц-cp. КГц-cp вызвало резкий и устойчивый рост [Ca2+]i, что активации P38. P38 был, как считается, играют ключевую роль в активации NADPH-оксидазы, поскольку ингибирование экспрессии или активности отменен мембраны транслокации p47phox и p67phox субъединиц и ору поколения. Выводы: В целом, эти данные указывают на то, что Khz-cp преимущественно индуцирует апоптоз раковых клеток и сигнальных механизмов влечет за собой увеличение [Ca2+]i, P38 активации, и ору поколения через НАДФН-оксидазы и митохондрий. BMC Complement Altern Med. 2014 Jul 10;14:236. doi: 10.1186/1472-6882-14-236. Khz-cp (crude polysaccharide extract obtained from the fusion of Ganoderma lucidum and Polyporus umbellatus mycelia) induces apoptosis by increasing intracellular calcium levels and activating P38 and NADPH oxidase-dependent generation of reactive oxygen species in SNU-1 cells. Kim TH, Kim JS, Kim ZH, Huang RB, Chae YL, Wang RS1. Author information 1Department of Radiotherapy, The First Affiliated Hospital, Guangxi Medical University, Nanning, China. 13807806008@163.com. BACKGROUND: Khz-cp is a crude polysaccharide extract that is obtained after nuclear fusion in Ganoderma lucidum and Polyporus umbellatus mycelia (Khz). It inhibits the growth of cancer cells. METHODS: Khz-cp was extracted by solvent extraction. The anti-proliferative activity of Khz-cp was confirmed by using Annexin-V/PI-flow cytometry analysis. Intracellular calcium increase and measurement of intracellular reactive oxygen species (ROS) were performed by using flow cytometry and inverted microscope. SNU-1 cells were treated with p38, Bcl-2 and Nox family siRNA. siRNA transfected cells was employed to investigate the expression of apoptotic, growth and survival genes in SNU-1 cells. Western blot analysis was performed to confirm the expression of the genes. RESULTS: In the present study, Khz-cp induced apoptosis preferentially in transformed cells and had only minimal effects on non-transformed cells. Furthermore, Khz-cp was found to induce apoptosis by increasing the intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) and activating P38 to generate reactive oxygen species (ROS) via NADPH oxidase and the mitochondria. Khz-cp-induced apoptosis was caspase dependent and occurred via a mitochondrial pathway. ROS generation by NADPH oxidase was critical for Khz-cp-induced apoptosis, and although mitochondrial ROS production was also required, it appeared to occur secondary to ROS generation by NADPH oxidase. Activation of NADPH oxidase was shown by the translocation of the regulatory subunits p47phox and p67phox to the cell membrane and was necessary for ROS generation by Khz-cp. Khz-cp triggered a rapid and sustained increase in [Ca2+]i that activated P38. P38 was considered to play a key role in the activation of NADPH oxidase because inhibition of its expression or activity abrogated membrane translocation of the p47phox and p67phox subunits and ROS generation. 4 CONCLUSIONS: In summary, these data indicate that Khz-cp preferentially induces apoptosis in cancer cells and that the signaling mechanisms involve an increase in [Ca2+]i, P38 activation, and ROS generation via NADPH oxidase and mitochondria. Фон Рак развивается из-за аномальной клеточной пролиферацией или неисправен апоптоза, что приводит к неконтролируемому росту [1]. Таким образом, новые методы лечения, которые направлены на пролиферацию и апоптоз раковых клеток необходимы. При нормальных условиях, запрограммированная смерть клетки возникает после воздействия патологического фактора. Апоптоз включает в себя ячейки, сжатие, конденсация ядер и хроматина и фрагментация ДНК, приводят безошибочно клеточной морфологии. Апоптоз инициируется внешними сигналами через серию кислота цистеин протеаз, в том числе важных регуляторных факторов, таких как каспаз. Цитохром cопосредованной Casp3 активации могут быть использованы определенным и ограниченным набором внешних апоптоза раздражители. Неисправные сигнализации при регуляции клеточной гибели может привести к аномальной пролиферации клеток и может вызвать рак. Поэтому, ремонте дефектных механизмов гибели клеток или разработке лекарственных препаратов или пищевых компонентов, которые индуцируют клеточную дифференциацию может быть перспективным подходом для создания противоопухолевых агентов [2,3]. В частности, многие исследования проводятся для выявления естественных продуктов, которые могут быть использованы в качестве противоопухолевых препаратов и на которые не были токсичность и побочные эффекты, связанные с химиотерапевтическими препаратами. Несколько биологически активных ингредиентов, которые показывают эффективной противоопухолевой активностью были получены от съедобных и лекарственных грибов [4-6], и противоопухолевый эффекты Ganoderma lucidum были описаны в различных исследованиях [7-10]. Кроме того, Polyporus umbellatus) индуцирует G2/M клеточного цикла и апоптоз в-клетки HepG2, тем самым вызывая подавление роста [11]. КГц-cp-это экстракт смесь из мицелия G. lucidum и P. umbellatus) ядерного синтеза (рис. 1а). Противоопухолевый эффект слияния G. lucidum и P. umbellatus) ранее уже было продемонстрировано [12,13]. В этом исследовании мы исследовали механизм, лежащий в основе кГц-индуцированная гибель клеток в клетки желудка. Окислительный стресс является широко вовлечен в апоптоз, и не апоптотической гибели клеток [14-16]. Основными источниками внутриклеточных активных форм кислорода (АФК), включают NADPH-оксидазы и митохондриальной электрон-транспортной цепи (этц.). Когда рос производства, либо митохондриями или NADPH-оксидазы, становится избыточным, естественные клеточные системы антиоксидантной защиты захлебывается, которая приводит к оксидативному стрессу. Раковые клетки более чувствительны к окислительному стрессу, чем здоровые клетки, а в некоторых противоопухолевых препаратов, таких как цисплатин, мышьяка триоксид (как2O3), и 2methoxyestradiol оказывают свое действие путем индуцирования производства рос [17-19]. Большинство имеющихся данных показывает, что АФК, образующиеся в процессе гибели клеток генерируются митохондрий в ответ на ухудшение дыхательной цепи митохондрий [20-23]. Хотя митохондриальных АФК производство рассматривается в качестве неотъемлемой составляющей апоптотической программы, роль NADPH-оксидаза как первичный источник АФК в ходе индукции апоптоза сообщается также [24-26]. Устойчивое повышение внутриклеточного Ca2+ концентрация ([Ca2+]я) связана с индукцией апоптоза [27]. Когда цитоплазматический [Ca2+]я увеличивается, митохондрии занимают Ca2+ и функции Ca2+ буфер; однако чрезмерное накопление митохондрий Ca2+ вызывает апоптоз, по крайней мере, частично путем индукции АФК поколения через митохондрий и др. Увеличение цитоплазматической [Ca2+]я также для активации NADPH-оксидазы, которая была хорошо документирована в нейтрофилах [28]. В некоторых типах клеток, активации протеинкиназы с через внутриклеточные Ca2+ приводит к фосфорилирование p47phox субъединицы фермента и последующего собрания [29]. В настоящей работе мы исследовали роль кГц-cp клеточного апоптоза и обнаружил, что Khz-cp вызывает устойчивое увеличение [Ca2+]я что привело к рос генерации NADPH оксидазы через P38 и, наконец, клеточного апоптоза. 5 Обсуждение В настоящем исследовании, кГц-cp срабатывает каспаз-зависимого и митохондрииопосредованного апоптоза в гибели в раковых клетках человека. КГц-cp-индуцированного апоптоза проводился на выборочной основе для трансформированных клеток, и кГц-cp лишь минимально влияет Курение на всей территории трансформированных клеток, что позволяет предположить, что это потенциальный противораковый терапевтический агент. Внутренние окислительного стресса в трансформированных клеток может сделать их более восприимчивыми к апоптоза, индуцированного кГц-cp. Кроме того, раковые клетки могут иметь дефектные восстановления глутатиона (GSH) резервов. Однако, уровни GSH в ткани опухоли выше, чем в нормальных тканях [34], и истощение GSH резервов часто стремиться повысить чувствительность раковых клеток к рос-индуцированной гибели клеток, из которых следует, что ГШ присутствует в раковых клетках, защищает их от окислительного стресса. КГц-cp-индуцированного апоптоза, как было замечено каспазы зависит, как указано в активации каспаз и ингибирование апоптоза путем предварительной обработки с пан-ингибитор каспаз z-VADfmk (рис. 2А, Б). Участие митохондрий-опосредованный путь был подтвержден релиз митохондриального цитохрома c и ингибирования апоптоза было подтверждено гиперэкспрессия Bcl2 (рис. 2c, d). Окислительный стресс связан с апоптотическими и не апоптотической гибели клеток, хотя pro-окислительных условиях не являются обязательным условием для апоптоза [35]. Настоящее исследование показывает, что индукция апоптоза кГц-cp требуется ROS поколения как NADPHоксидазы и митохондрий. Несколько исследований были замешаны АФК, генерируемые из митохондрий в индукции апоптоза; тем не менее, результаты настоящего исследования указывают на то, что NADPH-оксидазы-производные ROS, были очень важны для кГц-cp-индуцированного апоптоза (рис. 4a, b). Хотя митохондриальных АФК поколения также была необходима для кГц-cpиндуцированного апоптоза (рис. 4c), эффект от него был вторичным первоначального производства рос на NADPH-оксидазы поскольку поколение митохондриальных АФК произошло после этой цитоплазматической рос и был предотвращен путем предварительной обработки с NADPH oxidase ингибиторы (рис. 3g, h). Из 7 членов человеческой NADPH оксидазы семьи, Nox2 и Nox4 были найдены, чтобы быть ответственным за Рось поколения, индуцированных кГц-cp лечение в SNU-1 клеток (рис. 3Д, Е). Принято считать, что кальций сигнализация играет важную роль в процессе апоптоза [29,36]. Crosstalk между ROS и кальция сигнальные пути могут привести синергетический эффект по митохондриальной permeabilization и гибели клеток. Настоящее исследование показало, что увеличение [Ca2+]я индуцированное кГц-cp лечение позволило ROS генерации NADPH-оксидазы. [Ca2+]я увеличился до генерации АФК, и Ca2+ энтеросорбенты, такие как EGTA и BAPTA-AM отменено активации НАДФН-оксидазы и ору поколения (рис. 5, b, c). Однако, ингибиторов НАДФН-оксидазы не повлиять на увеличение [Ca2+]я индуцированное кГц-cp лечения (данные не показаны). Активация NADPH-оксидазы на повышенных [Ca2+]я в нейтрофилы, хорошо известен и описан для других типов клеток [37,38]. P38 был определен как посредник Ca2+-NADPH-зависимой оксидазы активации. P38 был активирован в течение 15 мин кГц-cp лечение в ЦС2+-зависимым способом (рис. 6а) более того, лечение с P38 siRNA или химических ингибиторов предотвратить кГц-cp-индуцированных АФК поколения (рис. 6d-g). Большинство исследований место ROS вверх по течению активации P38 [39,40], однако, в этом исследовании, ROS генерации NADPH оксидазы был найден, чтобы быть опосредовано активацией Р38. Выводы В этом исследовании мы исследовали кГц, что индуцирует апоптоз путем повышения внутриклеточного уровня кальция и активация JNK и NADPH-оксидазы-зависимой генерации АФК [12]. Мы показали, что Khz-cp индуцирует митохондрии-опосредованного апоптоза преимущественно в трансформированных клетках, и сигнальный путь кГц-cp-индуцированного апоптоза предполагает увеличение [Ca2+]яактивация Р38, и ору поколения через НАДФН-оксидазы и митохондрий (рис. 7). Background Cancer develops because of abnormal cellular proliferation or defective apoptosis that leads to uncontrolled growth [1]. Therefore, new treatments that target the proliferation and apoptosis of cancer 6 cells are necessary. Under normal conditions, programmed cell death occurs after exposure to pathological factors. Apoptosis involves cell shrinkage, condensation of nuclei and chromatin, and DNA fragmentation, all of which result in unmistakable cellular morphology. Apoptosis is initiated by external signals through a series of cysteine acid proteases, including important regulatory factors such as caspases. Cytochrome c– mediated Casp3 activation may be utilized by a specific and restricted set of external apoptosis stimuli. Defective signaling during the regulation of cell death can result in the abnormal proliferation of cells and can cause cancer. Therefore, repairing defective cell death mechanisms or developing drugs or food components that induce cell differentiation may be a promising approach for the generation of anticancer agents [2,3]. In particular, many studies are being performed to identify natural products that can be used as anticancer drugs and that do not have the toxicity and adverse effects associated with chemotherapeutic drugs. Several biologically active ingredients that show effective anticancer activity have been derived from edible or medicinal mushrooms [4-6], and the anticancer effects of Ganoderma lucidum have been described in various studies [7-10]. Additionally, Polyporus umbellatus induces G2/M cell cycle arrest and apoptosis in HepG2 cells, thereby causing growth suppression [11]. Khz-cp is an extract mixture from the mycelia of a G. lucidum and P. umbellatus nuclear fusion (Figure 1A). The anticancer effect of the fusion of G. lucidum and P. umbellatus has been previously demonstrated [12,13]. In this study, we investigated the mechanism underlying Khz-induced cell death in gastric cells. Oxidative stress is widely implicated in apoptotic and non-apoptotic cell death [14-16]. The major sources of intracellular reactive oxygen species (ROS) include NADPH oxidase and the mitochondrial electron transport chain (ETC.). When ROS production, either by the mitochondria or by NADPH oxidase, becomes excessive, the natural cellular antioxidant defense system is overwhelmed, which results in oxidative stress. Cancer cells are more susceptible to oxidative stress than healthy cells, and some anticancer agents such as cisplatin, arsenic trioxide (As2O3), and 2-methoxyestradiol exert their effects by inducing ROS production [17-19]. Much of the available data indicate that the ROS that accumulate during cell death are generated by the mitochondria in response to impairment of the mitochondrial respiratory chain [20-23]. Although mitochondrial ROS production is regarded as an integral component of the apoptotic program, the role of NADPH oxidase as a primary source of ROS during the induction of apoptosis has also been reported [2426]. Sustained elevation of the intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) is associated with the induction of apoptosis [27]. When the cytoplasmic [Ca2+]i increases, the mitochondria take up Ca2+ and function as a Ca2+ buffer; however, excessive accumulation of mitochondrial Ca2+ triggers apoptosis, at least in part by inducing ROS generation via the mitochondrial ETC. An increase in cytoplasmic [Ca2+]i can also activate NADPH oxidase, which has been well documented in neutrophils [28]. In some cell types, the activation of protein kinase C via intracellular Ca2+ leads to the phosphorylation of the p47phox subunit and subsequent enzyme assembly [29]. In the present study, we investigated the role of Khz-cp in cellular apoptosis and found that Khz-cp induced a sustained increase in [Ca2+]i that resulted in ROS generation by NADPH oxidase via P38 and, finally, cellular apoptosis. Discussion In the present study, Khz-cp triggered caspase-dependent and mitochondria-mediated apoptotic death in human cancer cells. Khz-cp-induced apoptosis was selective for transformed cells, and Khz-cp only minimally affected non-transformed cells, which suggests that it is a potential anticancer therapeutic agent. Intrinsic oxidative stress in transformed cells may render them more susceptible to apoptosis induced by Khz-cp. Alternatively, cancer cells may have defective restoration of glutathione (GSH) reserves. However, the GSH levels in tumor tissues are higher than those in normal tissues [34], and depleting GSH reserves often sensitizes cancer cells to ROS-induced cell death, which suggests that the GSH present in cancer cells protects them from oxidative stress. Khz-cp-induced apoptosis was observed to be caspase dependent, as indicated by the activation of caspases and inhibition of apoptosis by pretreatment with the pan-caspase inhibitor z-VAD-fmk (Figure 2a, b). The involvement of a mitochondria-mediated pathway was confirmed by the release of mitochondrial cytochrome c, and inhibition of apoptosis was confirmed by the overexpression of Bcl-2 (Figure 2c, d). Oxidative stress is associated with apoptotic and non-apoptotic cell death, although pro-oxidative conditions are not a prerequisite for apoptosis [35]. The present study shows that the induction of apoptosis by Khz-cp required ROS generation by both NADPH oxidase and mitochondria. Several studies 7 have implicated ROS generated from mitochondria in the induction of apoptosis; however, the results of the present study indicate that NADPH oxidase-derived ROS were critical for Khz-cp-induced apoptosis (Figure 4a, b). Although mitochondrial ROS generation was also necessary for Khz-cp-induced apoptosis (Figure 4c), its effect was secondary to that of the initial ROS production by NADPH oxidase because the generation of mitochondrial ROS occurred after that of cytoplasmic ROS and was prevented by pretreatment with NADPH oxidase inhibitors (Figure 3g, h). Of the 7 members of the human NADPH oxidase family, Nox2 and Nox4 were found to be responsible for the ROS generation induced by Khz-cp treatment in SNU-1 cells (Figure 3d, e). It is widely accepted that calcium signaling plays an important role in apoptosis [29,36]. Cross-talk between ROS and calcium signaling pathways may lead to synergistic effects on mitochondrial permeabilization and cell death. The present study showed that an increase in the [Ca 2+]i induced by Khz-cp treatment resulted in ROS generation by NADPH oxidase. The [Ca 2+]i increased before the generation of ROS, and Ca2+ chelators such as EGTA and BAPTA-AM abrogated the activation of NADPH oxidase and ROS generation (Figure 5b, c). However, the inhibitors of NADPH oxidase did not affect the increase in [Ca 2+]i induced by Khz-cp treatment (data not shown). The activation of NADPH oxidase by elevated [Ca 2+]i in neutrophils is well known and has also been reported for other cell types [37,38]. P38 was identified as the mediator of Ca2+-dependent NADPH oxidase activation. P38 was activated within 15 min of Khz-cp treatment in a Ca2+-dependent manner (Figure 6a) Furthermore, treatment with P38 siRNA or chemical inhibitors prevented Khz-cp-induced ROS generation (Figure 6d–g). Most studies place ROS upstream of P38 activation [39,40] however, in this study, ROS generation by NADPH oxidase was found to be mediated by the activation of P38. Conclusions In this study, we investigated that Khz induces apoptosis by increasing intracellular calcium levels and activating JNK and NADPH oxidase-dependent generation of ROS [12]. We showed that Khz-cp induces mitochondrion-mediated apoptosis preferentially in transformed cells, and the signaling pathway of Khz-cpinduced apoptosis involves an increase in [Ca2+]i, activation of P38, and ROS generation through NADPH oxidase and mitochondria (Figure 7). Анти-эпилептических эффект Ganoderma lucidum полисахариды путем ингибирования внутриклеточного накопления кальция и стимуляции экспрессии CaMKII α эпилептических нейронов гиппокампа. Исследовать механизм анти-эпилептических эффект Ganoderma lucidum полисахариды (GLP), изменения внутриклеточного кальция и CaMK II α выражение в модели эпилептические нейроны были исследованы. Метод: Первичных нейронов гиппокампа были разделены на: 1) контрольная группа, нейроны культивировали с Neurobasal среднего, в течение 3 часов; 2) Модель I группы: нейроны инкубировали с Mg(2+) бесплатная среды в течение 3 часов; 3) модель II группы: нейроны инкубировали с Mg(2+) бесплатная среды в течение 3 часов, затем культивируются с нормальной средой в течение последующих 3 часов; 4) GLP I группы: нейроны инкубировали с Mg(2+) бесплатно среде, содержащей GLP (0,375 мг/мл) за 3 часа; 5) GLP II группы: нейроны инкубировали с Mg(2+) бесплатная среды в течение 3 часов, затем культивируются с нормальной питательной среде, содержащей GLP в течение последующих 3 часов. В CaMK II α экспрессии белков оценивали с помощью вестерн-блот. Ca(2+) оборот в нейронах была оценена с помощью Fluo-3/AM, который был добавлен на замену средне-и Ca(2+) оборота наблюдалось под лазерного сканирующего конфокального микроскопа. Результаты: В CaMK II α выражение в модели групп была меньше, чем в контрольных группах, однако, в GLP групп было выше, чем наблюдалось в модели группы. Ca(2+) по интенсивности флуоресценции в GLP I группе была значительно ниже, чем в модели I группы после 30 секунд, в то время как в НЛП, группа II, он был существенно снижен по сравнению с моделью II группы после 5 минут. 8 Вывод: GLP могут препятствовать кальция перегрузки и продвижения CaMK II α выражение для защиты эпилептических нейронов. PLoS One. 2014 Jul 10;9(7):e102161. doi: 10.1371/journal.pone.0102161. eCollection 2014. Anti-epileptic effect of Ganoderma lucidum polysaccharides by inhibition of intracellular calcium accumulation and stimulation of expression of CaMKII α in epileptic hippocampal neurons. Wang SQ1, Li XJ2, Qiu HB3, Jiang ZM2, Simon M4, Ma XR1, Liu L1, Liu JX1, Wang FF1, Liang YF1, Wu JM1, Di WH1, Zhou S5. Author information 1Department of Pathophysiology, School of Basic Medical Sciences, Jiamusi University, Jiamusi, P. R. China. 4Department of Life Science, Institute of Biomedical and Environmental Science and Technology, University of Bedfordshire, Luton, United Kingdom. PURPOSE: To investigate the mechanism of the anti-epileptic effect of Ganoderma lucidum polysaccharides (GLP), the changes of intracellular calcium and CaMK II α expression in a model of epileptic neurons were investigated. METHOD: Primary hippocampal neurons were divided into: 1) Control group, neurons were cultured with Neurobasal medium, for 3 hours; 2) Model group I: neurons were incubated with Mg(2+) free medium for 3 hours; 3) Model group II: neurons were incubated with Mg(2+) free medium for 3 hours then cultured with the normal medium for a further 3 hours; 4) GLP group I: neurons were incubated with Mg(2+) free medium containing GLP (0.375 mg/ml) for 3 hours; 5) GLP group II: neurons were incubated with Mg(2+) free medium for 3 hours then cultured with a normal culture medium containing GLP for a further 3 hours. The CaMK II α protein expression was assessed by Western-blot. Ca(2+) turnover in neurons was assessed using Fluo-3/AM which was added into the replacement medium and Ca(2+) turnover was observed under a laser scanning confocal microscope. RESULTS: The CaMK II α expression in the model groups was less than in the control groups, however, in the GLP groups, it was higher than that observed in the model group. Ca(2+) fluorescence intensity in GLP group I was significantly lower than that in model group I after 30 seconds, while in GLP group II, it was reduced significantly compared to model group II after 5 minutes. CONCLUSION: GLP may inhibit calcium overload and promote CaMK II α expression to protect epileptic neurons. Противовирусные эффекты двух Ganoderma lucidum тритерпеноиды против энтеровирусной инфекции 71. Энтеровирус 71 (ЭВ71) является основным возбудителем для рук, ног и рта (ВППРК), и смертельное неврологическое и системных осложнений у детей. Однако, в настоящее время нет клинических утвержден противовирусный препарат доступным для профилактики и лечения вирусных инфекций. Здесь мы оценивали противовирусная активность двух Ganoderma lucidum тритерпеноиды (Глц), Lanosta-7,9(11),24-trien-3-one,15;26-дигидрокси (GLTA) и Ganoderic кислоты Y (GLTB), против ЭВ71 инфекции. Результаты показали, что два природных соединений дисплей значительный анти-ЭВ71 деятельность без цитотоксичность человеческого рабдомиосаркомы (RD), клеток оценивали с помощью 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium бромид (МТТ), cell proliferation assay. Механизмы, с помощью которых две соединений влияют ЭВ71 инфекции были дополнительно осветили три режима воздействия с использованием Рибавирина, общий противовирусный препарат, в качестве положительного контроля. Результаты свидетельствуют, что GLTA и GLTB предотвратить ЭВ71 инфекции через взаимодействующих с вирусной частицы, блок адсорбции вируса на клетках. Кроме того, взаимодействие между ЭВ71 вириона и соединений были основаны методами компьютерного молекулярного докинга, в которой показано, что GLTA и GLTB могут связывать вирусный капсид белков в гидрофобный карман (F-сайта), и таким образом может блокировать 9 uncoating из ЭВ71. Кроме того, мы продемонстрировали, что GLTA и GLTB значительно ингибируют репликацию вирусной РНК (удобный) ЭВ71 репликации через блокирование ЭВ71 uncoating. Таким образом, GLTA и GLTB может представлять два потенциальных терапевтических агентов для контроля и лечения ЭВ71 инфекции Biochem Biophys Res Commun. 2014 Jul 4;449(3):307-12. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.05.019. Epub 2014 May 15. Antiviral effects of two Ganoderma lucidum triterpenoids against enterovirus 71 infection. Zhang W1, Tao J1, Yang X1, Yang Z2, Zhang L3, Liu H3, Wu K1, Wu J4. Author information 1State Key Laboratory of Virology and College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China. Enterovirus 71 (EV71) is a major causative agent for hand, foot and mouth disease (HFMD), and fatal neurological and systemic complications in children. However, there is currently no clinical approved antiviral drug available for the prevention and treatment of the viral infection. Here, we evaluated the antiviral activities of two Ganoderma lucidum triterpenoids (GLTs), Lanosta-7,9(11),24-trien-3-one,15;26dihydroxy (GLTA) and Ganoderic acid Y (GLTB), against EV71 infection. The results showed that the two natural compounds display significant anti-EV71 activities without cytotoxicity in human rhabdomyosarcoma (RD) cells as evaluated by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) cell proliferation assay. The mechanisms by which the two compounds affect EV71 infection were further elucidated by three action modes using Ribavirin, a common antiviral drug, as a positive control. The results suggested that GLTA and GLTB prevent EV71 infection through interacting with the viral particle to block the adsorption of virus to the cells. In addition, the interactions between EV71 virion and the compounds were predicated by computer molecular docking, which illustrated that GLTA and GLTB may bind to the viral capsid protein at a hydrophobic pocket (F site), and thus may block uncoating of EV71. Moreover, we demonstrated that GLTA and GLTB significantly inhibit the replication of the viral RNA (vRNA) of EV71 replication through blocking EV71 uncoating. Thus, GLTA and GLTB may represent two potential therapeutic agents to control and treat EV71 infection. lucidum индуцирует митохондрий-опосредованного апоптоза в остеосаркома клеток MG63. Разработать новые противораковые агенты, мы подготовили сульфатированного полисахарида (SCGLP1) из плодовых тел Ganoderma lucidum, и эффект SCGLP1 на остеосаркома MG63 линия клеток была исследована. Наш результат показал, что лечение с SCGLP1 обусловило значительное ингибирующее действие на пролиферацию и жизнеспособность клеток из клеток MG63 в дозо - и время-зависимый характер и вызвано апоптотической смерти клеток MG63 за счет увеличения G0/Г1 фаза ареста, но были незначительные цитотоксическое действие на человеческий нормальный остеобластов (NHOst) клеток. Вестерн-блот анализ выявил, что SCGLP1-индуцированного апоптоза было связано с увеличением экспрессии белков межклеточного Bax и Bad, сниженной экспрессией антиапоптотических Bcl-2 и Bcl-XL, потеря митохондриального мембранного потенциала (Δψm), высвобождение из митохондрий цитохрома С В цитозоль, и расщепление каспазы-9 и каспазы-3, и поли(ADP-рибоза) полимеразы (PARP). Кроме того, установлено, что пан-ингибитор каспаз z-VAD-fmk) заблокировал SCGLP1-индуцированный апоптоз клеток MG63. Данные указывают на то, что SCGLP1индуцированного апоптоза в первую очередь, связана с каспазы-3 и каспазы-9-зависимого пути апоптоза. Tumour Biol. 2014 Jul 6. [Epub ahead of print] A chemically sulfated polysaccharide derived from Ganoderma lucidum induces mitochondrialmediated apoptosis in human osteosarcoma MG63 cells. Sun Z1, Huang K, Fu X, Zhou Z, Cui Y, Li H. 1Department of Medical Oncology, First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, 450052, Zhengzhou, China, zhchsun@yeah.net. To develop new anticancer agents, we prepared a sulfated polysaccharide (SCGLP1) from the fruiting bodies of Ganoderma lucidum, and the effect of SCGLP1 on human osteosarcoma MG63 cell line was investigated. Our result showed that treatment with SCGLP1 resulted in a significant inhibitory effect on cell 10 proliferation and cell viability of MG63 cells in a dose- and time-dependent manner and caused apoptotic death in MG63 cells through an increase in G0/G1 phase arrest, but had minor cytotoxic effect on human normal osteoblast (NHOst) cells. Western blot analysis identified that SCGLP1-induced apoptosis was associated with an increased protein expression of proapoptotic Bax and Bad, decreased expression of antiapoptotic Bcl-2 and Bcl-XL, loss of mitochondrial membrane potential (Δψm), the release of mitochondrial cytochrome c to cytosol, and cleavage of caspase-9, caspase-3, and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP). In addition, pretreatment with the pan-caspase inhibitor (z-VAD-fmk) blocked the SCGLP1-induced apoptosis in MG63 cells. The data indicate that SCGLP1-induced apoptosis is primarily associated with caspase-3- and caspase-9-dependent apoptotic pathway. Эффект Кордицепса экстракт и смесь Ganoderma lucidum/Agaricus Blazi Murill выписки на человека рака эндометрия клеточных линий in vitro. Эндометриальная карцинома является наиболее распространенной гинекологической злокачественности. Тем не менее, отсутствие лечебной терапии, особенно для пациентов, у которых диагностируется на поздней стадии, повторяющийся или агрессивного заболевания, которые имеют плохой прогноз. Кордицепс Sinensis, Ganoderma lucidum и Agaricus Blazi Murill три грибки широко используется в традиционной китайской медицине, и последствия, в качестве адъювантов в терапии опухолей были продемонстрированы. Однако, функция и последствия этих грибов в отношении рака эндометрия не известны. Трех клеточных линий рака эндометрия, Исикава, Hec-1A и AN3-CA (образовано от рака эндометрия grade I, II и III, соответственно), были использованы для определения влияния экстракты грибов на рак эндометрия клетки и функции для анализа молекулярного механизма. Все экстракты грибов оказал ингибирующее действие на жизнеспособность клеток и пролиферации наиболее вероятно, оказываемое посредством индукции аутофагии. Наши данные позволяют предположить, что эти грибы экстракты могут быть использованы в качестве адъювантов эндометрия в терапии опухолей. Int J Oncol. 2014 Jul;45(1):373-82. doi: 10.3892/ijo.2014.2414. Epub 2014 May 5. The effect of Cordyceps extract and a mixture of Ganoderma lucidum/Agaricus Blazi Murill extract on human endometrial cancer cell lines in vitro. Hahne JC, Meyer SR, Dietl J, Honig A. Department of Gynecology, Medical University of Würzburg, D-97080 Würzburg, Germany. Endometrial carcinoma is the most common gynaecological malignancy. Nevertheless there is a lack of curative therapies, especially for patients diagnosed with late stage, recurrent or aggressive disease, who have a poor prognosis. Cordyceps Sinensis, Ganoderma lucidum and Agaricus Blazi Murill are three fungi widely used in traditional Chinese medicine, and effects as adjuvants in tumour therapy have been demonstrated. However, the function and effects of these fungi in regard to endometrial cancer are not known. Three endometrial cancer cell lines, Ishikawa, Hec-1A and AN3-CA (derived from endometrial cancers grade I, II and III, respectively), were used to determine the effect of the fungi extracts on endometrial cancer cell function and to analyze the molecular mechanism. All fungi extracts had an inhibitory effect on cell viability and proliferation most probably exerted through induction of autophagy. Our data suggest that these fungi extracts may be used as adjuvants in endometrial tumour therapy. Подавление продукции Трансформирующего фактора роста β1, Интерлейкина-10 и фактора роста сосудистого эндотелия в B16F10 клеток Ganoderma lucidum полисахариды. Трансформирующий фактор роста β (TGF-β), интерлейкин-10 (IL-10)и фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) три часто изучаемых цитокинов, играющих важную роль в инициации и прогрессии опухоли. Кроме того, их стимулирующее воздействие на развитие опухолей, трех цитокинов, иммуносупрессивных эффектов, которые способствуют инициации и прогрессии опухоли. Ganoderma lucidum полисахариды (Gl-PS) с множественной биологической активностью, могут иметь эффект на клетках меланомы B16F10, чтобы побудить сильнее противоопухолевый иммунный ответ организма, что доказано исследованиями. Gl-PS может иметь угнетающее воздействие на производство этих трех цитокинов, которые до сих пор не продемонстрировали. В данном исследовании Мы проверили эти 11 эффекты Gl-PS при инкубации Gl-PS с клетки злокачественных опухолей, таких как B16F10 клеток, клеточной линии меланомы, и LA795 клеток, в клеточной линии карциномы легкого. RT-ПЦР и иммуноферментный анализ показали, что продукция TGF-β1, IL-10 и VEGF в клетках меланомы B16F10 и LA795 клеток карциномы легкого было подавлено Gl-PS на обеих мРНК и белка уровней, предполагая, что на подавление продукции TGF-β, IL-10 и VEGF в клетках меланомы B16F10 и LA795 клеток карциномы легкого по Gl-PS может способствовать терапии меланомы и рака легких наряду с индукцией сильнее противоопухолевого иммунного ответа. J Interferon Cytokine Res. 2014 Sep;34(9):667-75. doi: 10.1089/jir.2012.0101. Epub 2014 Mar 27. Suppression of the Production of Transforming Growth Factor β1, Interleukin-10, and Vascular Endothelial Growth Factor in the B16F10 Cells by Ganoderma lucidum Polysaccharides. Sun LX1, Lin ZB, Duan XS, Qi HH, Yang N, Li M, Xing EH, Sun Y, Yu M, Li WD, Lu J. 11 The Affiliated Hospital of Chengde Medical College , Chengde, Hebei Province, China . Transforming growth factor β (TGF-β), interleukin-10 (IL-10), and vascular endothelial growth factor (VEGF) are three of the commonly studied cytokines playing an important role in tumor initiation and progression. Besides their promotional effects on tumor progression, the three cytokines have immunosuppressive effects that facilitate tumor initiation and progression as well. Ganoderma lucidum polysaccharides (Gl-PS) with multiple bioactivities may have the effect on B16F10 melanoma cells to induce stronger antitumor immune response that has been demonstrated. Gl-PS may have the suppressive effects on the production of these three cytokines, which has yet to be demonstrated. In this study, we tested these effects of Gl-PS by incubating Gl-PS with malignant tumor cells such as B16F10 cells, a melanoma cell line, and LA795 cells, a lung carcinoma cell line. RT-qPCR and enzyme-linked immunosorbent assay showed that the production of TGF-β1, IL-10, and VEGF in B16F10 melanoma cells and LA795 lung carcinoma cells was suppressed by Gl-PS at both mRNA and protein levels, suggesting that the suppression on production of TGF-β, IL-10, and VEGF in B16F10 melanoma cells and LA795 lung carcinoma cells by Gl-PS may contribute to the therapy on melanoma and lung carcinoma along with the induction of stronger antitumor immune response. Tumour Biol. 2014 Jul 6. [Epub ahead of print] A chemically sulfated polysaccharide derived from Ganoderma lucidum induces mitochondrialmediated apoptosis in human osteosarcoma MG63 cells. Sun Z1, Huang K, Fu X, Zhou Z, Cui Y, Li H. 1Department of Medical Oncology, First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, 450052, Zhengzhou, China, zhchsun@yeah.net. To develop new anticancer agents, we prepared a sulfated polysaccharide (SCGLP1) from the fruiting bodies of Ganoderma lucidum, and the effect of SCGLP1 on human osteosarcoma MG63 cell line was investigated. Our result showed that treatment with SCGLP1 resulted in a significant inhibitory effect on cell proliferation and cell viability of MG63 cells in a dose- and time-dependent manner and caused apoptotic death in MG63 cells through an increase in G0/G1 phase arrest, but had minor cytotoxic effect on human normal osteoblast (NHOst) cells. Western blot analysis identified that SCGLP1-induced apoptosis was associated with an increased protein expression of proapoptotic Bax and Bad, decreased expression of antiapoptotic Bcl-2 and Bcl-XL, loss of mitochondrial membrane potential (Δψm), the release of mitochondrial cytochrome c to cytosol, and cleavage of caspase-9, caspase-3, and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP). In addition, pretreatment with the pan-caspase inhibitor (z-VAD-fmk) blocked the SCGLP1-induced apoptosis in MG63 cells. The data indicate that SCGLP1-induced apoptosis is primarily associated with caspase-3- and caspase-9-dependent apoptotic pathway. Химически сульфатированных полисахаридов, полученных из Ganoderma lucidum индуцирует митохондрий-опосредованного апоптоза в остеосаркома клеток MG63. Разработать новые противораковые агенты, мы подготовили сульфатированного полисахарида (SCGLP1) из плодовых тел Ganoderma lucidum, и эффект SCGLP1 на остеосаркома MG63 линия клеток была исследована. Наш результат показал, что лечение с SCGLP1 обусловило значительное ингибирующее действие на пролиферацию и жизнеспособность клеток из клеток MG63 в дозо - и время-зависимый характер и вызвано апоптотической смерти клеток MG63 за счет увеличения G0/Г1 12 фаза ареста, но были незначительные цитотоксическое действие на человеческий нормальный остеобластов (NHOst) клеток. Вестерн-блот анализ выявил, что SCGLP1-индуцированного апоптоза было связано с увеличением экспрессии белков межклеточного Bax и Bad, сниженной экспрессией антиапоптотических Bcl-2 и Bcl-XL, потеря митохондриального мембранного потенциала (Δψm), высвобождение из митохондрий цитохрома С В цитозоль, и расщепление каспазы-9 и каспазы-3, и поли(ADP-рибоза) полимеразы (PARP). Кроме того, установлено, что пан-ингибитор каспаз z-VAD-fmk) заблокировал SCGLP1-индуцированный апоптоз клеток MG63. Данные указывают на то, что SCGLP1индуцированного апоптоза в первую очередь, связана с каспазы-3 и каспазы-9-зависимого пути апоптоза. Drug Deliv. 2014 Jun 25:1-9. [Epub ahead of print] Nanogel for dermal application of the triterpenoids isolated from Ganoderma lucidum (GLT) for frostbite treatment. Shen CY1, Xu PH, Shen BD, Min HY, Li XR, Han J, Yuan HL. 1Department of Pharmacy, 302 Military Hospital , Beijing , China. Objective: The purpose of this study was to formulate stable Ganoderma lucidum (GLT) nanogels suitable for topical delivery with a view to improve the therapeutic effect for frostbite. Methods: GLT nanosuspensions were formulated using the high-pressure homogenization technique and then suitably gelled for characterized. In order to confirm the advantages of GLT nanogel for dermal application, skin permeation studies in vitro and pharmacodynamic evaluation in vivo were studied and compared with GLTcarbopol gel. Results: The particle size analysis and SEM studies revealed that GLT nanosuspensions were still stably kept their particle size after suitably gelled by carbopol preparation. The drug content, pH, and spreadability of the GLT nanogel was found to be 99.23 ± 1.8%, 6.07 ± 0.1, and 26.42 (g·cm)/s, which were within acceptable limits. In vitro permeation studies through rat skin indicated that the amount of GLT permeated through skin of GLT nanogel after 24 h was higher than GLT-carbopol gel, and GLT nanogel increased the accumulative amount of GLT in epidermis five times than GLT-carbopol gel. No oedema and erythema were observed after administration of GLT nanogel on the rabbits' skin. Pharmacodynamic study showed that GLT nanogel was more effective than GLT-carbopol gel in treatment of frostbite. Conclusion: The GLT nanogel possess superior therapeutic effect for frostbite compared with the GLT-carbopol gel, which indicates that nanogels are eligible for the use as a suitable nanomedicine for dermal delivery of poorly soluble drugs such as GLT. Nanogel для кожного применения тритерпеноиды изолированы от Ganoderma lucidum (GLT) для лечения обморожения. Аннотация цель: целью данного исследования является разработка стабильной Ganoderma lucidum (GLT) наногелей подходящий для актуальных доставки с целью улучшения терапевтического эффекта обморожение. Методы: GLT nanosuspensions были сформулированы с использованием высокого давления гомогенизации технику и затем соответствующим образом гелевый для охарактеризованы. Для того, чтобы подтвердить преимущества GLT nanogel для кожного применения кожа проникновение исследованиях in vitro и фармакодинамических оценки in vivo были изучены и сравнены с GLT-гель carbopol. Результаты: анализ размера частиц и SEM исследования показали, что GLT nanosuspensions были по-прежнему стабильно держал их размер частиц после соответствующе гелевый по carbopol подготовки. Препарат содержимого, рН, и spreadability из GLT nanogel оказался 99.23 ± 1.8%, 6.07 ± 0,1, а 26.42 (г·см)/s, которые были в допустимых пределах. In vitro проникновение исследований, за счет кожи крыс указал, что сумма GLT пронизывает кожу GLT nanogel после 24 ч был выше, чем GLT-гель carbopol, и GLT nanogel увеличение накопительной суммы GLT в эпидермисе пять раз больше, чем GLT-гель carbopol. Нет отека и эритемы наблюдались после приема GLT nanogel на кроликов кожи. Фармакодинамические исследования показали, что GLT nanogel было более эффективным, чем GLT-гель carbopol в лечении обморожения. Вывод: GLT nanogel обладают улучшенный терапевтический эффект при отморожениях по сравнению с GLT-гель carbopol, который указывает на то, что наногелей подходящ для использования в качестве подходящий наномедицины 13 для кожного поставка плохо растворимые в воде препараты, такие как GLT. Recent Pat Inflamm Allergy Drug Discov. 2014;8(2):104-17. Suppression of inflammatory and allergic responses by pharmacologically potent fungus Ganoderma lucidum. Bhardwaj N, Katyal P, Sharma AK1. Author information 1Department of Biotechnology, M. M. University, Mullana (Ambala), Haryana, India-133207. anibiotech18@gmail.com. Acute inflammation is the result of a complex signal transduction pathway that protects and heals our body and is necessary for our good health and normal wellbeing. Whereas, chronic inflammation can be correlated well with the onset of a plethora of autoimmune disorders; rheumatoid arthritis, systemic lupus and polymyalgia, rheumatic and other diseases like asthma, inflammatory bowel diseases, cardiovascular disorders, ulcerative colitis and Crohn's disease. Also, it has been reported to be associated with the onset of various cancers. An effective anti-inflammatory drug should be able to inhibit the development of chronic inflammation without interfering in normal homeostasis. A number of herbal drugs have been identified in the past that can target inflammatory cytokines. Among these, Ganoderma lucidum: a powerful medicinal mushroom has been found to possess immune-modulating and immune-potentiating capabilities and has been characterized as a wonder herb. This review mainly focuses on the molecular mechanism of antiinflammatory and antiallergic action of this mushroom and also sheds light on various patent studies related to its pharmacological action. Подавление воспалительных и аллергических реакций с мощным фармакологическим свойствам гриба Ganoderma lucidum. Острое воспаление является результатом сложного пути передачи сигнала, который защищает и исцеляет наши тела и необходим для нашего здоровья и нормального самочувствия. Принимая во внимание, что хроническое воспаление может быть хорошо коррелируют с наступлением множество аутоиммунных нарушений; ревматоидный артрит, системная красная волчанка и ревматическая, ревматических и других заболеваний, как астма, воспалительные заболевания кишечника, сердечнососудистые заболевания, язвенный колит и болезнь крона. Также, как сообщается, будет связан с началом различных видов рака. Эффективным противовоспалительным препаратом, должны быть способны подавлять развитие хронического воспалительного процесса, не вмешиваясь в нормальный гомеостаз. Ряд растительных препаратов были выявлены в прошлом, которые могут целевых воспалительных цитокинов. Среди этих, Ganoderma lucidum: мощный лекарственный гриб, как было обнаружено, обладают иммуномодулирующим и иммунной потенцирующее возможности и характеризуется как чудо трава. В этом обзоре в основном ориентирована на молекулярный механизм противовоспалительное и противоаллергическое действие этого гриба, а также проливает свет на различных патентных исследований, связанных с его фармакологического действия. Int J Med Mushrooms. 2014;16(2):179-87. Inhibitory activity of Lingzhi or Reishi medicinal mushroom, Ganoderma lucidum (higher Basidiomycetes) on transformed cells by human papillomavirus. Hernández-Márquez E1, Lagunas-Martínez A1, Bermudez-Morales VH1, Burgete-García AI1, León-Rivera I2, Montiel-Arcos E3, García-Villa E4, Gariglio P4, Madrid-Marina V V1, Ondarza-Vidaurreta RN5. Author information 1Center of Research on Infectious Disease, National Institute of Public Health, 655 University Ave, CP. 62100, Cuernavaca, Morelos, Mexico. In this study, we investigated the effects of the aqueous extracts of Lingzhi or Reishi medicinal mushroom, Ganoderma lucidum, obtained from three localities (China; and Morelos and Michoacan, Mexico) on cervical cells transformed by human papillomavirus (HeLa and SiHa) and C-33A cancer cells. The cells were plated in DMEM medium supplemented, and were incubated in the presence of different concentrations of G. lucidum for 24 h. Cell proliferation was determined by MTT colorimetric assay and viability by trypan blue assay. Inhibitory dose was determined (IC50) of the three different extracts of G. lucidum in the culture cell 14 lines mentioned above. The apoptosis process was confirmed by nuclear DNA fragmentation and the cell cycle was determined by flow cytometry. The results showed that aqueous extracts G. lucidum obtained from three localities produced inhibition in the proliferation of VPH transformed cells; they also induced apoptosis and cell cycle arrest in HeLa, SiHa, and C-33A cancer cells. Therefore, it was found that aqueous extracts G. lucidum obtained from three different locations produced inhibitory effect on cancer cells and may have a potential therapeutic use for the prevention and treatment of this disease. Ингибиторная активность Линчжи или Рейши лекарственных грибов, Ganoderma lucidum (высших базидиальных грибов) на трансформированных клеток вирусом папилломы человека. В данном исследовании нами было изучено влияние на водные экстракты Линчжи или Рейши лекарственных грибов, Ganoderma lucidum, получены из трех населенных пунктов (Китай); и Морелос, штат Мичоакан, Мексика) с шейки матки клеток, трансформированных вирусом папилломы человека (HeLa и SiHa) и C-33A раковых клеток. Клетки высаживали в среде DMEM, дополненной, и инкубировали в присутствии различных концентраций G. lucidum в течение 24 ч. Пролиферацию клеток определяли с помощью МТТ-колориметрический анализ и жизнеспособность трипановым синим анализа. Ингибирующая доза была определена (IC50) три различные экстракты G. lucidum в культуре клеточных линий, упомянутых выше. Апоптоз, процесс был подтвержден ядерной фрагментации ДНК и клеточного цикла определяли методом проточной цитометрии. Результаты показали, что водные экстракты G. lucidum получены из трех населенных пунктов, произведенного ингибирование пролиферации VФ трансформированных клеток; они также индуцированного апоптоза и клеточного цикла в HeLa, SiHa, и C-33A раковых клеток. Таким образом, было установлено, что водные экстракты G. lucidum , полученные из трех разных местах, производимых ингибирующее действие на раковые клетки и могут иметь потенциальное терапевтическое использование для профилактики и лечения этого заболевания. Evid Based Complement Alternat Med. 2014;2014:305149. do4/305149. Epub 2014 Mar 4. Ganoderma lucidum Polysaccharides Reduce Lipopolysaccharide-Induced Interleukin-1 β Expression in Cultured Smooth Muscle Cells and in Thoracic Aortas in Mice. Liang CJ1, Lee CW2, Sung HC3, Chen YH4, Chiang YC5, Hsu HY6, Tseng YC7, Li CY8, Wang SH1, Chen YL1. The expression of inflammatory cytokines on vascular walls is a critical event in vascular diseases and inflammation. The aim of the present study was to examine the effects of an extract of Ganoderma lucidum (Reishi) polysaccharides (EORPs), which is effective against immunological disorders, on interleukin- (IL-) 1 β expression by human aortic smooth muscle cells (HASMCs) and the underlying mechanism. The lipopolysaccharide- (LPS-) induced IL-1 β expression was significantly reduced when HASMCs were pretreated with EORP by Western blot and immunofluorescent staining. Pretreatment with 10 μ g/mL EORP decreased LPS-induced ERK, p38, JNK, and Akt phosphorylation. But the increase in IL-1 β expression with LPS treatment was only inhibited by pretreatment with the ERK1/2 inhibitor, while the JNK and p38 inhibitors had no effect. In addition, EORP reduced the phosphorylation and nuclear translocation of nuclear factor- (NF-) κ B p65 in LPS-treated HASMCs. Furthermore, in vivo, IL-1 β expression was strongly expressed in thoracic aortas in LPS-treated mice. Oral administration of EORP decreased IL-1 β expression. The level of IL-1 β expression in LPS-treated or in LPS/EORP-treated group was very low and was similar to that of the saline-treated group in toll-like receptor 4-deficient (TLR4(-/-)) mice. These findings suggest that EORP has the anti-inflammatory property and could prove useful in the prevention of vascular diseases and inflammatory responses. Ganoderma lucidum полисахариды снизить Липополисахарид-Индуцированной Интерлейкин-1 β выражение в культуре клетки гладких мышц, в грудной Aortas в мышей. Выражение воспалительных цитокинов на стенках сосудов является критическим событием в сосудистых заболеваний и воспаления. Целью настоящего исследования явилось изучение влияния экстракта Ganoderma lucidum (Рейши) полисахариды (EORPs), который действует против иммунологических нарушений, на интерлейкинов (IL-) 1 β выражение человека аорты гладкомышечных клеток (HASMCs) и базовый механизм. В липополисахарид- (ЛПС) индуцированное ил-1 β выражение было значительно снижено при HASMCs были подавить с EORP с помощью вестерн15 блот и иммунофлуоресцентного окрашивания. Установлено, что 10 μ г/мл EORP снизилась ЛПСиндуцированного ЭРК, p38, JNK, и Akt фосфорилирования. Но повышение IL-1 β выражение с LPS лечение было только тормозится предварительной обработки с ERK1/2 ингибитора, в то время как JNK и p38 ингибиторы не произвело никакого эффекта. Кроме того, EORP сократили фосфорилирования и ядерной транслокации ядерного фактора (NF-) F B p65 в LPS-лечение HASMCs. Кроме того, in vivo, IL-1 β выражение было сильно выраженный в грудном aortas в LPS-мышей. Пероральное введение EORP снизилась IL-1 β выражение. Уровень ил-1 β выражение в LPS-лечить или ЛПС/EORP группе, получавшей была очень низкой, и был похож на засоленных группе, получавшей в толл-подобный рецептор 4-дефицитных (TLR4(-/-)) мышей. Эти результаты показывают, что EORP обладает противовоспалительным свойством и может оказаться полезным и в профилактике сердечнососудистых заболеваний и воспалительных реакций. 1. Introduction The inflammatory processes have a key role not only in the initiation and progression of atherosclerosis, but also in the stability of the established atherosclerotic plaques [1, 2]. Cytokines of the interleukin-1 (IL-1) family play a pivotal role in regulating the immunoinflammatory responses, and extensive studies have been performed to determine whether IL-1 modifies the inflammatory response [3, 4]. IL-1β upregulates a substantial increase in the expression of adhesion molecules by vascular smooth muscle cells (VSMCs) in vitro, and these factors promote monocyte recruitment and infiltration into the arterial wall [5, 6] and induce VSMC migration and proliferation [3, 7, 8]. In vivo studies have shown increased levels of IL-1β mRNA in human atherosclerotic lesions [9] and of IL-1β mRNA and protein in VSMCs of atherosclerotic arteries from non-human primates [10]. Although the relationship between IL-1β and cardiovascular disease has been extensively studied, IL-1β expression and its related mechanism in LPS-induced human aortic smooth muscle cells (HASMCs) and in inflammatory vascular walls have not been studied in detail. Moreover, reducing IL-1β expression might be a beneficial approach for inhibiting the development of vascular inflammation and atherosclerosis [11]. Ganoderma lucidum (G. lucidum, Reishi), a popular home remedy, has long been known for its beneficial effects on human health and longevity and is used to treat chronic hepatopathy, hypertension, hyperglycemia, and neoplasia [12, 13]. Ganoderma lucidum intake caused an increase in plasma antioxidant capacity, and that 10 d supplementation was associated with a trend towards a decrease of plasma lipids in human subjects [14, 15]. Studies on the role of G. lucidum in regulating various body functions have revealed that G. lucidum polysaccharides are the bioactive constituents responsible for many of their health benefits, such as its antioxidant, anticancer, anti-inflammatory, and immunomodulatory activities [16–18]. The effects of G. lucidum on the immune system have been linked to the regulation of cytokine expression and differentiation of macrophages [19, 20] and the maturation of cultured murine bone marrow-derived dendritic cells [21]. G. lucidum have also been shown to suppress TNF-α expression from lipopolysaccharide(LPS-) stimulated murine RAW 264.7 cells [22], reduce IL-1β secretion from activated microglia after LPS treatment [23], and prevent albumin-induced oxidative damage and chemokines synthesis in human proximal tubular epithelial cells [24]. Regulation of inflammatory cytokine expression requires a complex array of intracellular signaling pathways involving mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and transcriptional factors [25, 26]. Although these multiple signaling molecules have received considerable attention, little is known about the effects of an extract of Reishi polysaccharides (EORPs) on IL-1β expression and the mechanisms of these effects, and a better understanding of this might provide important insights into the prevention of cardiovascular diseases and inflammation. We were therefore interested in understanding the mechanism of action of EORP on human aortic smooth muscle cells (HASMCs) stimulated by inflammatory cytokines and whether it affects the IL-1β expression, an important event in vascular diseases and inflammation. In addition, we studied the effects of EORP on IL-1β expression in thoracic aortas in LPS-treated mice. Our results showed that EORP attenuated IL-1β expression both in vitro and in vivo and that this effect was mediated, at least in part, through inhibition of extracellular signal-regulated kinase (ERK) phosphorylation, nuclear factor NF-κB activation, and TLR4 activation. 1. Введение Воспалительные процессы играют ключевую роль не только в инициации и прогрессировании атеросклероза, а также в обеспечении безопасности и стабильности в установленном атеросклеротических бляшек [1, 2]. Цитокинов интерлейкина-1 (IL-1) семьи играют ключевую роль в 16 регулировании immunoinflammatory ответы, и обширные исследования были выполнены, чтобы определить, является ли IL-1, изменяет воспалительного ответа [3, 4]. IL-1b upregulates существенное увеличение экспрессии адгезивных молекул на гладкомышечные клетки сосудов (VSMCs) in vitro, и эти факторы способствуют моноцитарно вербовки и засылки в артериальную стенку [5, 6] и побудить VSMC миграции и пролиферации [3, 7, 8]. В исследованиях in vivo показали увеличение уровня IL-1b мРНК в человеческой атеросклеротических поражений [9] и IL-1b мРНК и белка в VSMCs атеросклеротических поражений артерий от человекообразных приматов [10]. Хотя взаимосвязь между IL-1b и сердечно-сосудистых заболеваний была тщательно изучена, ил-1b выражения мнений и связанных с механизмом ЛПС-индуцированного аорты человека гладкомышечных клеток (HASMCs) и при воспалительных сосудистой стенки не были детально изучены. Более того, снижение IL-1b выражение может быть выгодно для тормозящим развитие сосудистого воспаления и атеросклероза [11]. Ganoderma lucidum (G. lucidum, Рейши), популярным домашним средством, давно были известны своим благотворным воздействием на здоровье и продолжительность жизни человека и используется для лечения хронической болезни печени, гипертензия, гипергликемия, и неоплазии [12, 13]. Ganoderma lucidum потребления вызвано увеличение в плазме крови антиоксидантов, и 10 d добавки была связана с тенденцией к снижению липидов плазмы крови у человека [14, 15]. Изучение роли G. lucidum в регуляции различных функций организма показали, что G. lucidum полисахариды являются биологически активные компоненты, которые отвечают за многие их пользе для здоровья, такие как антиоксидант, противоопухолевой, противовоспалительной и иммуномодулирующей активности [1618]. Последствия G. lucidum на иммунную систему, были связаны с цитокиновой регуляции экспрессии и дифференциации макрофагов [19, 20] и созревание искусственного костного мозга мыши, полученных дендритные клетки [21]. G. lucidum также было показано, что для подавления TNFa выражение из липополисахарид- (ЛПС) стимулировали мышиных сырья 264.7 клеток [22], снизить IL-1b секрета из активированного микроглии после LPS лечения [23], и предотвратить альбумининдуцированного окислительного повреждения и хемокинов синтез человека в проксимальных трубчатые эпителиальных клеток [24]. Регуляции воспалительных цитокинов выражение требует сложный комплекс внутриклеточных сигнальных путей, сопровождающихся митоген-активированный протеин киназы (MAPKs) и транскрипционных факторов [25, 26]. Хотя эти несколько сигнальных молекул уделялось большое внимание, очень мало известно о влиянии экстракт Рейши полисахариды (EORPs) на ил-1b выражение и механизмы этих явлений, и лучшее понимание этого может предоставить важную информацию о профилактике сердечно-сосудистых заболеваний и воспаления. Поэтому мы были заинтересованы в понимании механизма действия EORP по правам аорты гладкомышечных клеток (HASMCs) стимулируется воспалительных цитокинов и влияет ли она на ил1b выражение, важным событием в сосудистых заболеваний и воспаления. Кроме того, мы изучили воздействие EORP на ил-1b выражение в грудной aortas в LPS-мышей. Наши результаты показали, что EORP ослабляется IL-1b выражение как in vitro, так и in vivo и, чтобы это воздействие было опосредованным, по крайней мере частично, за счет ингибирования внеклеточного сигнала регулируемой киназы (ЭРК) фосфорилирования, ядерный фактор NF-κB активации, и TLR4 активации. 4. Discussion Herein, we demonstrated that EORP treatment effectively blocked IL-1β expression both in vitro in LPSstimulated HASMCs and in vivo in thoracic aortas of LPS-treated mice. EORP decreased IL-1β expression in LPS-treated HASMCs, and the effect might be mediated through inhibition of ERK phosphorylation, NF-κB activation, and TLR4 receptor pathway. Reishi extract was chosen for testing, as it has long been known as a healthy food and used as traditional Chinese medicines. Its beneficial effects are thought to be due to its anti-inflammatory, antitumor, antioxidant, and immunomodulatory actions [16–18]. A Ganoderma extract prevented albumin-induced oxidative damage of proximal tubular epithelial cells in an experimental setting, mimicking the proteinuric state [24], and reduced LPS-induced superoxide anion production by macrophages [29]. The triterpene extract from G. lucidum (GLT) suppressed the inflammatory response in vitro and in vivo by downregulating the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase 2 (COX-2) and the production of TNF-α and IL-6 in LPS-induced endotoxemic mice [22]. Ganoderma lucidum extracts inhibited the production of microglia-derived proinflammatory and cytotoxic factors, including nitric oxide, TNF-α, and IL-1β in 17 activated microglia [23]. G. lucidum polysaccharide-linked peptide reduced the production of proinflammatory cytokines (interleukin-6 and monocyte chemoattractant protein-1) by activated rheumatoid synovial fibroblasts [30]. Our previous report demonstrated an EORP-associated protective mechanism against bacteria infection involving the clearance of LPS by macrophages [31]. We also demonstrated that EORP attenuates endotoxin-induced ICAM-1 expression in cultured smooth muscle cells and in the neointima in mice [27]. Moreover, EORP prevented PDGF-stimulated smooth muscle cell proliferation in vitro and neointimal hyperplasia in the endothelial-denuded artery in vivo [32]. The present study is the first to report that EORP strongly reduces the expression of IL-1β protein in LPS-treated HASMCs. The activation of various intracellular pathways by inflammatory stimuli, such as LPS, is required for the production of these adhesion molecules and proinflammatory chemokines [28]. LPS-induced inflammatory responses, such as ICAM-1 expression in HASMCs, are regulated via TLR4 expression [33]. Most notably, the TLR4-mediated signaling pathway for LPS, leading to the activation of various intracellular kinases, including MAPKs and transcription factors, appears to be critical for the development of vascular inflammation and diseases [26]. Our study showed that LPS caused strong activation of three MAPK subtypes in HASMCs, as reported in a previous study [34]. However, the involvement of their activation in the protective mechanism of EORP remains unclear. In the present study, the increase in IL-1β expression induced by LPS was markedly suppressed in the presence of an ERK inhibitor (PD98059) but not a p38 inhibitor (SB203580) or a JNK inhibitor (SP600125). IL-1β expression was also inhibited by ERK-specific siRNA. EORP decreased LPSinduced ERK phosphorylation. Thus, one of the mechanisms by which EORP reduces LPS-induced IL-1β expression involves a reduction in ERK1/2 activation. Consistent with our results, a G. lucidum extract inhibited the oxidative stress-induced phosphorylation of ERK1/2 in breast cancer cells, resulting in suppression of IL-8 secretion and finally in inhibition of cell migration [35]. Another study showed that a G. lucidum extract inhibited prostate cancer-dependent angiogenesis by inhibition of phosphorylation of ERK1/2 and Akt kinases [36]. EORP has been shown to inhibit LPS-induced inflammatory cytokine in murine RAW264.7 cells by suppression of the phosphorylation of ERK1/2 and JNK [22]. Active lipids of Ganoderma lucidum spores are able to enhance apoptosis in THP-1 cells through inhibition of ERK1/2 and Akt and activation of JNK1/2 signaling pathways [32], whereas triterpenes from Ganoderma lucidum induce autophagy in colon cancer through the inhibition of P38 MAPK [37]. Our previous studies showed that EORP reduces LPS-induced the ICAM-1 expression by the decrease of ERK1/2 activation [27], and prevents the PDGF-stimulated HASMCs proliferation through inhibition of JNK activation [32]. The differences between the above results in terms of the pathways involved may be related to the different cell types used and the cytokines examined. NF-κB is one of the most ubiquitous transcription factors and regulates the genes involved in cellular proliferation, inflammatory responses, and cell adhesion [25]. NF-κB transcriptional activity can be modulated by the phosphorylation of MAPKs. LPS-induced IL-1β, TNF-α, IL-6, COX-2, and iNOS in Raw264.7 macrophages via the NF-κB activation [38]. These findings raised the possibility that EORP reduces IL-1β expression through a reduction in NF-κB activity. Our study demonstrated that the EORP-induced decrease in IL-1β expression was mediated through inactivation of NF-κB binding activity. Pretreatment with an NF-κB inhibitor also suppressed the LPS-induced increase in IL-1β expression. This is consistent with a previous report that a G. lucidum extract inhibited the proliferation of human breast cancer cells by downregulation of NF-κB signaling [39]. Ganoderma lucidum polysaccharide peptide (GL-PP) reduced the production of proinflammatory cytokines in activated rheumatoid synovial fibroblast by inhibiting the NF-κB transcription pathway [30]. Another study also showed that a Ganoderma lucidum polysaccharides (Gl-PS) prevented pancreatic islets from alloxan-induced damage by inhibiting activation of NF-κB [40]. NF-κB is activated by signals possibly involving phosphorylation of the IκB subunit and its dissociation from the inactive cytoplasmic complex, followed by translocation of the active p50/p65 dimer to the nucleus [41]. We demonstrated that the EORP-induced decrease in IL-1β expression was mediated through inhibition of NF-κB p65 phosphorylation and translocation. LPS-induced systemic inflammatory responses increase neointimal formation after balloon injury and stent implantation, and inflammatory cytokines are produced by VSMCs in the neointima [42]. In the present study, EORP was shown to significantly reduce IL-1β expression in thoracic aortas in LPS-treated mice. On the basis of the probable involvement of IL-1β expression in migration and proliferation of SMCs, our findings suggest an additional mechanism by which EORP treatment may be important in preventing the 18 progression of cardiovascular disorders and inflammation. It has been well known that the LPS induces the production of proinflammatory molecules through TLR4-activated signaling pathway, and IL-1 was the one of proinflammatory molecules [43]. Another study also showed that IL-1β expression is mediated by both TLR4 and Nod1 pathways in the cultured HAPI cells stimulated by LPS [44]. In addition, LPS-induced TLR4 protein expression and mRNA stabilization in HASMCs are mediated by NADPH oxidase-related ROS production and MAPK signaling pathways [45]. Consistent with the previous studies, LPS significantly induced TLR4 expression in HASMCs. Moreover, LPS did not affect IL-1β expression in thoracic aortas in TLR4−/− mice. There was no difference of IL-1β expression in all groups of TLR4−/− mice by using immunohistochemistry, cytokine ELISA, and Western blot. Based on these findings, we suggested that EORP suppressed the LPSinduced IL-1 expression through inhibition of TLR4 activation. In conclusion, this study provides the first evidence that EORP reduces IL-1β expression in LPS-treated HAMSCs both in vitro and in vivo. The present data suggest that these effects might be mediated through inhibition of ERK phosphorylation and NF-κB activation. The results of the present study suggest a possible therapeutic role for G. lucidum extract in cardiovascular disorders and in inflammatory diseases. 4. Обсуждение В данном документе, мы показали, что EORP лечение эффективно блокируется, IL-1b выражение как in vitro, так ЛПС стимулировало HASMCs и in vivo в грудной aortas LPS-мышей. EORP снизилась IL-1b выражение в LPS-лечение HASMCs, и эффект может быть опосредованы через ингибирование ЭРК фосфорилирования, NF-κB активации, и TLR4 рецепторному пути. Экстракт Рейши была выбрана для тестирования, поскольку он издавна был известен как здоровую пищу и использовали в качестве традиционной китайской медицины. Ее благотворное воздействие, как считается, из-за его противовоспалительное, противоотечное, антиоксидантное и иммуномодулирующее действие [16-18]. В Линчжи, экстракт предотвратить альбумининдуцированного окислительного повреждения проксимальных трубчатые эпителиальных клеток в экспериментальной установки, подражая proteinuric государства [24], и снижение ЛПСиндуцированного супероксид-анион макрофагами [29]. Тритерпеновых выписка из G. lucidum (GLT) подавляет воспалительные реакции в условиях in vitro и in vivo downregulating выражение индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) и циклооксигеназы 2 (ЦОГ-2) и продукции ФНО-A и ил-6 в ЛПС-индуцированного endotoxemic мышей [22]. Ganoderma lucidum экстракты подавляет производство микроглии-производные провоспалительных и цитотоксических факторов, в том числе оксида азота, ФНО-A и ил-1b в активированных микроглии [23]. G. lucidum полисахарид-пептида, связанного снизил производство провоспалительных цитокинов (интерлейкин-6 и моноциты, хемоаттрактантом белка-1) активным ревматоидным синовиальной фибробластов [30]. В нашем предыдущем докладе продемонстрировал EORP связанных защитный механизм против бактериальной инфекции с участием оформление пластинок макрофагов [31]. Мы также продемонстрировали, что EORP ослабляет эндотоксин-индуцированного ICAM-1 выражение в культуре клетки гладкой мускулатуры и в neointima у мышей [27]. Кроме того, EORP предотвратить PDGF-стимулирует пролиферацию гладкомышечных клеток in vitro и neointimal гиперплазии в эндотелиальных-оголенных артерии in vivo [32]. Настоящее исследование является первым сообщить, что EORP сильно снижает экспрессию IL-1b белка в LPS-лечение HASMCs. Активация различных внутриклеточных путей при воспалительных раздражители, такие как ЛПС, необходимых для производства этих молекул адгезии и провоспалительных хемокинов [28]. ЛПСиндуцированного воспалительных реакций, таких как ICAM-1 выражение в HASMCs, регулируются через TLR4 выражение [33]. В первую очередь, TLR4-опосредованной сигнальный путь для LPS, ведущих к активизации различных внутриклеточными киназами, в том числе MAPKs и факторы транскрипции, по-видимому, решающее значение для развития сосудистого воспаления и заболевания [26]. Наши исследования показали, что LPS вызвало сильное активации трех MAPK подтипы в HASMCs, как сообщалось в предыдущем исследовании [34]. Однако вовлечение их активации в защитный механизм EORP остается неясным. В настоящем исследовании, повышение IL1b выражение ЛПС-индуцированного был заметно подавлен в присутствии ЭРК ингибитора (PD98059), но не p38 ингибитора (SB203580) или JNK ингибитора (SP600125). IL-1b выражение было также тормозится ЭРК конкретных siRNA. EORP снизилась ЛПС-индуцированного ЭРК фосфорилирования. Таким образом, одним из механизмов, с помощью которых EORP снижает ЛПС19 индуцированного IL-1b выражение сопровождается уменьшением ERK1/2 активации. В соответствии с нашими результатами, G. lucidum экстракт не угнетали оксидативный стресс-индуцированных фосфорилирования ERK1/2 в клетках рака молочной железы, что ведет к угнетению выработки IL-8 секрецию и, наконец, в торможению миграции клеток [35]. Другое исследование показало, что G. lucidum экстракт не угнетали рак предстательной железы-зависимые путем подавления ангиогенеза фосфорилирования ERK1/2 и Akt киназ [36]. EORP было показано, подавляют ЛПС-индуцированного воспалительных цитокинов в мурине RAW264.7 клеток путем подавления фосфорилирования ERK1/2 и JNK [22]. Активных липидов Ganoderma lucidum споры способны усилить апоптоза в кд-1 клетки за счет ингибирования ERK1/2 и Akt и активации JNK1/2 сигнальных путей [32], в то время как тритерпены от Ganoderma lucidum вызывать аутофагии в рак толстой кишки через торможение P38 MAPK [37]. Наши предыдущие исследования показали, что EORP снижает ЛПС-индуцированного в ICAM-1 выражение снижением ERK1/2 активации [27], и предотвращает PDGF-стимулированной HASMCs путем ингибирования пролиферации JNK активации [32]. Различия между результатами в плане путей, вовлеченных могут быть связаны с различными типами клеток, используемых цитокинов исследовали. NF-κB является одним из самых повсеместно факторы транскрипции и регулирует гены, вовлеченные в клеточной пролиферации, воспалительные реакции и клеточной адгезии [25]. NF-κB транскрипционной активности можно модулировать, фосфорилирование MAPKs. ЛПСиндуцированного IL-1b, ФНО-a, ил-6, Кокс-2, и iNOS в Raw264.7 макрофагов через NF-κB активации [38]. Эти выводы поднял вопрос о возможности EORP снижает IL-1b выражение счет сокращения NFκB деятельности. Наши исследования показали, что EORP-индуцированной снижение IL-1b выражение было опосредовано инактивации NF-κB активности вяжущего. Установлено, что NF-κB ингибитор также подавляются ЛПС-индуцированного повышение IL-1b выражение. Это согласуется с предыдущим отчетом, что G. lucidum экстракт ингибирует пролиферацию клеток рака молочной железы человека угнетением NF-κB сигнализации [39]. Ganoderma lucidum полисахарид пептида (GLПП) снизил производство провоспалительных цитокинов в активном ревматоидном синовиальной фибробластов, подавляя NF-κB транскрипции пути [30]. Другое исследование также показало, что Ganoderma lucidum полисахариды (Gl-PS) предотвратить островков поджелудочной железы от alloxanиндуцированного повреждения, подавляя активации NF-κB [40]. NF-κB активируется с помощью сигналов, возможно, с участием фосфорилирование IκB субъединицы и его отмежевание от неактивных цитоплазматической комплекс, сопровождаемый транслокации активного Р50/Р65 димера в ядро [41]. Мы показали, что EORP-индуцированной снижение IL-1b выражение было опосредовано ингибирование NF-κB p65 фосфорилирования и транслокации. ЛПС-индуцированного системного воспалительного ответа увеличивают neointimal после формирования шар травмы и имплантации стента, и воспалительные цитокины продуцируются VSMCs в neointima [42]. В настоящем исследовании, EORP было показано, значительно сократить IL-1b выражение в грудной aortas в LPS-мышей. На основе вероятного участия IL-1b выражение в миграции и пролиферации Умкд, наши исследования показывают, дополнительный механизм, с помощью которого EORP лечение может быть важную роль в предотвращении прогрессирования сердечнососудистые заболевания и воспаления. Это было хорошо известно, что LPS индуцирует продукцию провоспалительных молекул через TLR4-активировать сигнальный путь, и IL-1 был одним из провоспалительных молекул [43]. Другое исследование также показало, что IL-1b выражение опосредуется как TLR4 и Nod1 пути культивированный ХАПИ клетки стимулируются ЛПС [44]. Кроме того, ЛПС-индуцированного TLR4 экспрессии белка и мРНК стабилизации в HASMCs посредничестве НАДФН-оксидазы, связанных с производства рос и MAPK сигнальных путей [45]. В соответствии с предыдущими исследованиями, LPS значительно индуцированных TLR4 выражение в HASMCs. Кроме того, LPS не влияют на ил-1b выражение в грудной aortas в TLR4-/- мыши. Разницы никакой не было, IL-1b выражение во всех группах TLR4-/- мыши с помощью иммуногистохимических, цитокинов ELISA и Western blot. Основываясь на этих результатах, мы предположили, что EORP подавил ЛПСиндуцированного IL-1 выражении путем ингибирования TLR4 активации. В заключение в данном исследовании приводятся первые доказательства того, что EORP снижает IL1b выражение в LPS-лечение HAMSCs как in vitro, так и in vivo. В настоящее время данные позволяют предположить, что эти эффекты могут быть опосредованы через ингибирование ЭРК 20 фосфорилирования и NF-κB активации. Результаты настоящего исследования свидетельствуют о возможных терапевтических роль G. lucidum экстракт-сосудистых заболеваний и воспалительных заболеваний. BMC Complement Altern Med. 2013 Dec 26;13:370. doi: 10.1186/1472-6882-13-370. Antidepressant-like effects of a water-soluble extract from the culture medium of Ganoderma lucidum mycelia in rats. Matsuzaki H, Shimizu Y, Iwata N, Kamiuchi S, Suzuki F, Iizuka H, Hibino Y, Okazaki M1. 1Laboratory of Pharmacology, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Josai University, 1-1 Keyakidai, Sakado, Saitama 350-0295, Japan. okazaki@josai.ac.jp. Ganoderma lucidum is a popular medicinal mushroom used for promoting health and longevity in Asian countries. Previously, we reported that a water-soluble extract from a culture medium of Ganoderma lucidum mycelia (MAK) exerts antioxidative and cerebroprotective effects against ischemia-reperfusion injury in vivo. Here, we evaluated the antidepressant and anxiolytic activities of MAK in rats. METHODS: MAK (0.3 or 1 g/kg, p.o.) was administered in the experimental animals 60 min before the forced swimming, open-field, elevated plus-maze, contextual fear-conditioning, and head twitch tests. Additionally, the mechanisms involved in the antidepressant-like action of MAK were investigated by the serotonin precursor 5-hydroxy-L-tryptophan (5-HTP)- or 5-HT2A agonist (±)-1-(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)-2aminopropane hydrochloride (DOI)-induced head twitch responses. RESULTS: Treatment with MAK (1 g/kg) exhibited antidepressant-like effects in the forced swimming test, attenuated freezing behavior in the contextual fear-conditioning test, and decreased the number of head twitches induced by DOI, but not with 5-HTP. No significant response was observed in locomotion or anxiety-like behavior, when the animals were evaluated in the open-field or elevated plus-maze test, respectively. CONCLUSIONS: These data suggest that MAK has antidepressant-like potential, which is most likely due to the antagonism of 5-HT2A receptors, and possesses anxiolytic-like effects toward memory-dependent and/or stress-induced anxiety in rats. Антидепрессант-как последствия водорастворимый экстракт из питательной среды Ganoderma lucidum мицелием в крыс. Ganoderma lucidum популярный лекарственный гриб используется для укрепления здоровья и долголетия в азиатских странах. Ранее мы сообщали, что водорастворимый экстракт из культуры среднего Ganoderma lucidum мицелием (MAK) оказывает антиоксидантное и cerebroprotective эффекты от ишемии-реперфузии in vivo. Здесь мы оценивали антидепрессивное и анксиолитическое деятельности Мак в крыс. Методы: MAK (0.3 или 1 г/кг, p.o.) вводили в эксперименте на животных, 60 мин до принудительной плавание, открытое поле, приподнятый крестообразный-лабиринт, контекстная страх кондиционирования, и голова дергаться тесты. Кроме того, механизмов, участвующих в антидепрессант-как действие Мак, были изучены предшественник серотонина 5-гидрокси-Lтриптофан (5-HTP)или 5-HT2A-агонист (Б)-1-(2,5-диметокси-4-iodophenyl)-2-aminopropane гидрохлорид (DOI)-индуцированной голову дергаться ответы. Результаты: Лечение с помощью ключа MAK (1 г/кг) выставил антидепрессант эффекты в принудительном плавательный тест, слабые заморозки поведение в контекстной страх-кондиционер тест, и уменьшилось количество голова дергается, индуцированных DOI, но не с 5-HTP. Без существенных ответ наблюдался в передвижении или тревоги, как поведение, когда животные были оценены в открытом поле или приподнятый крестообразный лабиринте, соответственно. Выводы: Эти данные свидетельствуют, что Мак обладает антидепрессивной, как потенциал, который, скорее всего, из-за антагонизм 5-HT2A рецепторы, обладает анксиолитические эффекты к памятизависимые и/или стресс-индуцированных тревожности у крыс. BackgroundMajor depressive disorder is a common, recurrent mental disease characterized by a 21 negative mood and loss of interest or pleasure in the normal activities of daily life. It is often accompanied by a broad range of symptoms, including a decline in cognitive function, sleep disturbance and recurrent suicidality, which affects the quality-of-life (QoL) and mortality of patients. Experimental and clinical studies have suggested that major depression may be caused at least in part by the metabolic dysregulation of monoaminergic (particularly serotonin and noradrenaline) systems in the brain [1]. Drugs that increase the levels of monoamines, such as tricyclic antidepressants (TCAs), selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs), and serotonin and noradrenaline reuptake inhibitors (SNRIs), are the mainstays of depression therapy. However, these conventional, commercially available antidepressants provide only partial remission and frequently produce adverse effects [2]. Therefore, not all of the neurological pathogeneses of depression can be explained by the metabolic dysfunction of monoamines. As a result of these limitations, there is an appreciable unmet medical need for rapid, safe, and more effective antidepressants. Recently, plant extracts have drawn the attention of researchers because of the importance in discovering novel antidepressant agents. Several herbal medicines (e.g., Panax notoginseng[3], Asparagus racemosus[4], Rosmarinus officinalis[5], and St. John’s wort [6]) have been reported to have antidepressant activity comparable with prescription medicines but with fewer side effects. Ganoderma lucidum (G. lucidum) is a popular medicinal fungus known as Lingzhi mushroom in China. It has long been known for its beneficial effects on human health and longevity in Asian countries. G. lucidum has been shown to have several pharmacological effects (e.g., antitumor, immunomodulatory, antiinflammatory, antidiabetic, antioxidative), which are supported by studies on various bioactive compounds isolated from the fruiting bodies and mycelia of this fungus [7]. A water-soluble extract prepared from the culture medium of G. lucidum mycelia (MAK) has a 17-year history of making appreciable contributions to consumers’ health as a safe, functional food. The extract contains various types of constituents, such as polysaccharides, including β-glucans, triterpenes, and lignin derived from the culture medium and its digestion products by the mycelia. MAK has been reported to have antitumor [8] and radioprotective effects [9]. Previously, we demonstrated that MAK has antioxidant activities and neuroprotective effects in vivo. Orally administered MAK can prevent ischemia–reperfusion-induced oxidative damage to neuronal cells, and reduce the size of cerebral infarcts in animal models [10,11]. However, until now, the antidepressant-like effects of MAK have not been assessed. Therefore, the study aimed to assess the antidepressant-like and anxiolytic-like activities of MAK in rats. We performed the forced swimming test together with open-field test to evaluate antidepressant-like activity, and the elevated plus-maze test and contextual fear-conditioning test to evaluate anxiolytic-like activity of MAK. Furthermore, to ascertain if the antidepressant-like effect of MAK is mediated by the serotonergic system, we examined the effect of MAK on 5-hydroxy-L-tryptophan (5-HTP)- or (±)-1-(2,5dimethoxy-4-iodophenyl)-2-aminopropane hydrochloride (DOI)-induced head-twitch responses. Фон Большое депрессивное расстройство-это общие, повторяющиеся психическое заболевание, характеризующееся отрицательным настроение и потеря интереса или удовольствия в нормальной повседневной деятельности. Это часто сопровождается широкий спектр симптомов, в том числе снижение когнитивных функций, нарушения сна и повторяющийся суицидальности, которая влияет на качество жизни (КЖ) и смертность больных. Экспериментальные и клинические исследования показали, что депрессия может быть вызвана, по крайней мере, отчасти и метаболическими нарушениями моноаминергических (в частности серотонина и норадреналина) систем мозга [1]. Препараты, которые повышают содержание моноаминов, такие как трициклические антидепрессанты (Тца), селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (Сиозс), и обратного захвата серотонина и норадреналина (Сиозн), являются основой терапии депрессии. Однако, эти обычные, коммерчески доступные антидепрессанты обеспечить только частичную ремиссию и зачастую приводят к возникновению негативных последствий [2]. Следовательно, не все неврологических pathogeneses депрессии могут быть объяснены с помощью метаболической дисфункции моноаминов. Как следствие этих ограничений, существует заметная неудовлетворенных медицинских потребностей для быстрой, безопасной и более эффективной антидепрессанты. Недавно, растительные экстракты привлекли внимание исследователей, что важное значение в 22 раскрытии роман вещества-антидепрессанты. Несколько травяных лекарственных средств (напр., Panax notoginseng[3], Asparagus racemosus[4], Rosmarinus officinalis[5], и зверобой, [6]) сообщалось о том, что антидепрессивной активностью, сопоставимые с лекарства, отпускаемые по рецепту, но с меньшим числом побочных эффектов. Ganoderma lucidum (G. lucidum) - популярный лекарственный гриб, известный как гриба Линчжи в Китае. Он уже давно известны своим благотворным воздействием на здоровье человека и продолжительность жизни в странах Азии. G. lucidum было показано несколько фармакологических эффектов (напр., противоопухолевое, иммуномодулирующее, противовоспалительное, антидиабетические, антиоксидантные), которые поддерживаются исследования на различных биологически активных соединений, изолированные от органов плодоношения, а грибница этого гриба [7]. Водорастворимый экстракт, приготовленный из среды культивирования G. lucidum мицелием (MAK) имеет 17-летнюю историю изготовления внесших заметный вклад в здоровье потребителей в качестве безопасной, функциональной пищи. Экстракт содержит различные типы компоненты, такие, как полисахариды, включая бета-глюканы, тритерпены, и лигнина, получаемый из культуры среднего и продуктов ее переработки, с мицелием. Мак, как сообщается, обладают противоопухолевым [8] и радиопротекторный эффект [9]. Ранее мы показали, что Мак обладает антиоксидантными деятельности и нейропротекторный эффект in vivo. Перорально Мак может предотвратить ишемии-реперфузии-индуцированного окислительного повреждения нейронов, клеток, и уменьшить размер церебральных инфарктов в животных моделях [10,11]. Однако, до сих пор, антидепрессант-эффекты, как Мак, не были оценены. Таким образом, целью данного исследования было оценить антидепрессант-как и анксиолитическое, как деятельности Мак в крыс. Мы выполняли принудительные плавательный тест вместе с тесте " открытое поле", чтобы оценить антидепрессивной активности, так и надземных плюс лабиринте и контекстной страх-кондиционер тест, чтобы оценить анксиолитической активности Мак. Кроме того, чтобы убедиться в том, что антидепрессивный эффект и Мак опосредована серотонинергической системы, мы исследовали влияние активации 5-гидрокси-L-триптофан (5-HTP)или (б)-1-(2,5-диметокси-4-iodophenyl)-2-aminopropane гидрохлорид (DOI)-индуцированной голову дергаться ответы. DiscussionIn the present study, we provided evidence, for the first time, that acute oral administration of MAK (a functional food derived from G. lucidum mycelia) exerts a significant antidepressant-like effect in rats, and that this effect can be observed in the forced swimming test. The forced swimming test is the most widely used paradigm for screening potential antidepressants in rodents. A significant correlation between the efficacy and effectiveness of therapy has been demonstrated in the forced swimming test [12]. Various antidepressants, such as TCAs, SSRIs, and SNRIs, have been demonstrated to reduce immobility without altering locomotor activity [18]. The present study showed that MAK significantly reduced immobility in the forced swimming test. Psychostimulants, such as amphetamine and caffeine, also reduce immobility in the forced swimming test with increasing general activity [12], so MAK was evaluated for its effects on locomotor activity in the open-field test to exclude a false-positive effect. At a dose that showed a significant decrease in immobility in the forced swimming test (1 g/kg), MAK did not change locomotor activity. These results suggest that the MAK-induced decrease in immobility in the forced swimming test is caused by an antidepressant-like effect rather than a locomotor-enhancing effect. To evaluate the anxiety-like effect of MAK, the contextual fear-conditioning test and elevated plus-maze test as memory-dependent and -independent tasks, respectively, were undertaken [19,20]. In the contextual fear-conditioning test, the MAK (1 g/kg)-treated group showed a significant decrease in freezing behavior compared with the control group. By contrast, MAK did not affect the index of anxiety (% open arm entries and % time spent in open arm) or locomotor activity (closed arm entries) in the elevated plus-maze test. Conditioned fear-induced freezing behavior has been demonstrated to be decreased by representative anxiolytic agents such as benzodiazepines [21] and SSRIs [22]. Similarly, the percentage of time spent in the open arms in the elevated plus-maze test is increased by treatment with clinically effective anxiolytic agents but is decreased by anxiogenic agents [23]. However, the elevated plus-maze test is known to exhibit remarkable variability, and sometimes paradoxical patterns in experimental results using 5-HT-related agents have been obtained [24,25]. Indeed, the elevated plus-maze test could not detect the anxiolytic-like effects of 5-HT2 receptor antagonists such as ketanserin, mianserin, and MDL-100907 in previous studies [26,27]. 23 Collectively, the elevated plus-maze test might not have been suitable to assess the anxiolytic effect of MAK, which may possess anxiolytic-like effects toward memory-dependent and/or stress-induced anxiety. The head-twitch response is defined as a rapid movement of the head and neck. It is a useful index for assessing the effects of drugs on central serotonergic activity in vivo in rodent experiments. The stereotypical behavior is induced by the serotonin precursor 5-HTP via an increase of serotonin levels in the synaptic clefts [28] and the subsequent indirect activation of 5-HT2A receptors [29]. This response has been reported to be enhanced by acute inhibition of 5-HT reuptake by SSRIs [30]. By contrast, DOI, which has an approximately equal affinity for 5-HT2A, 5-HT2B and 5-HT2C receptors, is considered to induce a headtwitch response by a direct agonistic effect on 5-HT2A receptors, because a DOI-induced head-twitch response is blocked by selective 5-HT2A antagonists but not by 5-HT2B/2C antagonists [29,31] and is not modified by SSRIs [17,31]. The present study confirmed that the oral administration of the SSRI fluvoxamine (10 mg/kg), which inhibits the 5-HT reuptake and increases extracellular 5-HT concentration in the brain [32], augments the head twitches induced by 5-HTP but does not change those induced by DOI. In contrast, MAK significantly decreased the number of head twitches induced by DOI without altering that induced by 5-HTP. These results suggest that MAK exerts a 5-HT2A receptor inhibitory effect rather than a 5-HT reuptake-inhibitory effect. The results for MAK are similar to those from a previous study that indicated that the antidepressant nefazodone (which is a potent 5-HT2A antagonist with a low affinity for serotonin transporters) significantly attenuated the head twitches induced by DOI but did not affect those induced by 5-HTP [17]. Previous studies have shown that the 5-HT1A agonist 8-OH-DPAT also attenuates the DOIinduced head twitch response in rats and mice [31]. However, it is unlikely that the effect of MAK involves the 5-HT1A mechanisms, because we observed no serotonin syndrome-like behaviors (such as flat body posture, hind limb abduction, and forepaw treading) that are induced primarily by an agonism at 5-HT1 receptor subtypes [31] in the MAK-treated rats. Studies on the action of G. lucidum on serotonin receptors are lacking, but a recent study focusing on the antipruritic effect of a methanol extract of the fruiting body of G. lucidum showed that the extract inhibits the scratching behavior induced by intradermal administration of serotonin or a 5-HT2 receptor agonist alpha-methyl-5-HT in mice [33]. Taken together, the findings of the present study suggest that the antidepressant-like effect of MAK might be mediated (at least in part) by 5-HT2A receptor inhibition in the brain. On the other hand, the antidepressant mechanism of MAK may also involve the noradrenergic system in addition to the serotonergic system. Future studies will also address the role of the noradrenergic system in the mechanism of action of MAK. Studies in humans and in animal models of depression have provided evidence that oxidative stress and subsequent inflammatory neurodegenerative responses have an important pathophysiological role in depression [34]. Neuronal cells are known to be especially prone to oxidative damage because of their higher oxygen consumption and inadequate antioxidant defense systems to reactive oxygen species [35]. Several studies have demonstrated lowered antioxidant defenses (such as decreases in the levels of antioxidants and antioxidant enzymes) and increased oxidative stress (such as increased levels of lipid peroxidation and DNA damage) in patients with major depression [34]. Moreover, antidepressant drugs have been demonstrated to ameliorate oxidative disturbances in depressed patients [36] and chronically stressed animals [37]. Previously, we reported that MAK exerts radical-scavenging activity and suppresses lipid peroxidation in a concentration-dependent manner in vitro[38]. Additionally, oral administration of MAK (1 g/kg/day) for 2 weeks has been shown to normalize the augmentation of oxidative stress and antioxidant enzyme (superoxide dismutase, catalase, and glutathione peroxidase) activities in streptozotocin-induced diabetic rat brains [10]. Furthermore, we demonstrated that MAK could prevent ischemia–reperfusion-induced oxidative damage and subsequent inflammatory responses in neuronal cells, and reduce the size of cerebral infarcts in animal models [10,11]. Therefore, the antioxidant and neuroprotective activities of MAK could contribute (at least in part) to its antidepressant-like effects. However, it is uncertain how such anti-oxidative effects brought about by acute administration of MAK affect the behaviors in the tests we observed in this report. MAK has a 17-year history of making appreciable contributions to consumers’ health as a safe, functional food. In the past, there was no report suggesting that MAK had potential acute or long-term toxicities in 24 consumers. The safety of MAK has been confirmed by in vitro toxicological evaluation and animal toxicity studies. Additionally, we showed previously that chronic treatment of MAK (1 g/kg for 9 weeks) had no effect on body-weight gain, levels of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, triglycerides and total cholesterol in the serum, or the histochemistry in the brains, livers and kidneys of healthy mice [38]. Therefore, single administration of 1 g/kg MAK used in the present study is considered to have little or no toxicity. MAK is composed of bagasse and defatted rice bran that is overgrown with G. lucidum mycelia, which is considered to contain various bioactive substances, including triterpenes, polysaccharides and water-soluble lignin. Recently, triterpenes from Bacopa monnieri[39] and Centella asiatica[40] as well as polysaccharides from Panax ginseng[41] were shown to have antidepressant-like effects in animals. Accordingly, MAK may also contain active constituents that exert similar pharmacological effects. Future works need to be conducted to identify the substances that contribute to the antidepressant effects of MAK. Обсуждение В настоящей работе мы представили доказательства, впервые, что острая пероральная администрации MAK (функциональных пищевых продуктов, полученных от G. lucidum грибница) оказывает значительное антидепрессивный эффект и крыс, и что этот эффект может наблюдаться в принудительном плавательный тест. Принудительное купание тест является наиболее широко используемой парадигмы для скрининга потенциальных антидепрессантов у грызунов. Значительная корреляция между эффективностью и эффективность терапии была продемонстрирована в принудительном плавательный тест [12]. Различные антидепрессанты, такие как TCAs, Сиозс, и Иозсн, было показано, сократить неподвижность без изменения локомоторной активности [18]. Настоящее исследование показало, что Мак значительно снижается в вынужденной неподвижности плавательный тест. Психостимуляторов, таких как амфетамин и кофеин, а также снизить неподвижность в принудительном плавательный тест с повышением общей деятельности [12], так что Мак был оценен по его воздействие на двигательную активность в тесте " открытое поле " исключить ложно-положительный эффект. В дозе, которые показали значительное снижение в неподвижности в принудительном плавательный тест (1 г/кг), Мак не изменение двигательной активности. Эти результаты позволяют предположить, что Мак-снижение индуцированной в неподвижности в принудительном плавательный проверка вызвана антидепрессивный эффект, нежели опорноусиление эффекта. Для оценки тревоги-как эффект Мак, контекстная страх-кондиционер тест и приподнятый крестообразный лабиринте памяти-зависимые и независимые задачи, соответственно, были предприняты [19,20]. В контекстной страх-кондиционер тест, MAK (1 г/кг)в группе, получавшей показали значительное снижение в замораживания поведении по сравнению с контрольной группой. Наоборот, Мак не влияет на индекс тревожности (% открытом плече записи и % времени провел в открытом плече) или двигательной активности (закрытое руку записей) в надземных плюс лабиринте. Кондиционером страх-индуцированной поведение замораживания продемонстрировал снизился на представителя анксиолитическое агентов, таких как бензодиазепины [21] и Сиозс [22]. Аналогичным образом, доля времени, проводимого в распростертыми объятиями в приподнятый крестообразный лабиринте увеличивается на лечение клинически эффективным анксиолитическое агентов, но снизился на anxiogenic агентов [23]. Однако, приподнятый крестообразный лабиринте, как известно, проявляют замечательные изменчивости, и порой парадоксальные структуры в экспериментальных результатов с помощью 5-HT, связанных с агенты были получены [24,25]. Действительно, приподнятый крестообразный лабиринте мог не обнаружить анксиолитические эффекты 5-HT2 антагонисты рецепторов, таких как кетансерин, миансерин, и леев-100907 в предыдущих исследованиях [26,27]. В совокупности, приподнятый крестообразный лабиринте, возможно, не были пригодны для оценки анксиолитический эффект MAK, которые могут обладать анксиолитические эффекты к памяти-зависимые и/или стресс-индуцированных беспокойство. Глава дергаться ответ определяется как быстрое движение головы и шеи. Это полезно индекс для оценки воздействия препаратов на центральной серотонинергической активности in vivo в экспериментах на грызунах. Стереотипное поведение, вызванные предшественник серотонина 5-HTP через увеличение уровня серотонина в синаптической щели, [28] и последующих косвенные активация рецепторов 5-HT2A [29]. Этот ответ, как сообщается, будет усилено острой ингибирования 5-HT обратного захвата путем Сиозс [30]. Наоборот, DOI, который имеет примерно равное сродство к 25 5-HT2A, 5-HT2B и 5-НТ2С рецепторов, считается в том, чтобы заставить головы дергаться ответ путем прямого агонистического в силу с 5-HT2A-рецепторов, потому что дой-индуцированной голову дергаться ответ блокируется путем селективного 5-HT2A-антагонисты, но не на 5-HT2B/2C антагонисты [29,31] и не изменяется при Сиозс [17,31]. Настоящее исследование подтвердило, что оральное СИОЗС флувоксамин (10 мг/кг), который ингибирует 5-HT обратного захвата и увеличивает внеклеточного 5-HT концентрации в мозге [32], увеличивает голова дергается, индуцированных 5-HTP, но не меняют те, индуцированных DOI. В отличие от этого, Мак значительно уменьшилось количество голова дергается, индуцированных DOI без изменения, которые привели к 5-HTP. Эти результаты позволяют предположить, что Мак оказывает 5-HT2A рецепторов ингибирующее действие, а не 5-HT обратного захвата ингибирующее действие. Результаты Мак, аналогичные предыдущие исследования, которые показали, что антидепрессант нефазодон (который является мощным 5-HT2A антагонист с низким сродством к серотонина перевозчиков) значительно ослабило голова дергается, индуцированных DOI но не влияет на те, индуцированных 5-HTP [17]. Предыдущие исследования показали, что агонист 5-НТ1А 8-OH-DPAT также ослабление дой-индуцированной голову дергаться в ответ крыс и мышей [31]. Однако, маловероятно, что эффект Мак включает в себя 5-HT1A механизмы, потому что мы не наблюдали серотониновый синдром поведение (например, телевизор с Положением тела, задние конечности похищения, и передняя лапа ступая), которые вызваны в первую очередь агонизм на 5-HT1-рецепторов подтипы [31] в Мак-крыс. Исследования действия G. lucidum на серотониновые рецепторы, не хватает, но недавнее исследование, ориентируясь на противозудное действие метанольный экстракт плодовое тело G. lucidum показали, что экстракт тормозит царапин поведение, индуцированных внутрикожное введение серотонина и 5-НТ2рецепторов агонист Альфа-метил-5-HT у мышей [33]. Взятые вместе, результаты данного исследования свидетельствуют о том, что антидепрессивный эффект и Мак может быть опосредовано (по крайней мере, частично) на 5-HT2A ингибирования рецепторов в мозге. С другой стороны, механизм антидепрессивного Мак может также включать норадренергическую систему в дополнение к серотонинергической системы. Будущие исследования будут также рассмотрены роль норадренергические системы в механизме действия Мак. Исследования на людях и на животных моделях, депрессии, были получены доказательства того, что окислительный стресс и последующее воспалительных нейродегенеративных ответы имеют важное патофизиологические роль в депрессии [34]. Нейрональные клетки, как известно, особенно склонны к окислительного повреждения из-за своего высокого потребления кислорода и неадекватных систем антиоксидантной защиты для активных форм кислорода [35]. Несколько исследований показали, опустил антиоксидантной защиты (например, снижения уровня антиоксидантов и антиоксидантных ферментов) и вырос окислительного стресса (например, повышение уровня перекисного окисления и повреждения ДНК) у пациентов с большой депрессией [34]. Кроме того, антидепрессантами были продемонстрированы улучшения нарушений окислительного в депрессивных пациентов [36] и хронически подчеркнул животных [37]. Ранее мы сообщали, что Мак оказывает радикальное-очистки активность и подавляет перекисное окисление липидов в концентрационном-зависимым способом in vitro[38]. Кроме того, пероральное введение MAK (1 г/кг/сут) в течение 2-х недель, как было показано, для нормализации функционального дополнения окислительного стресса и антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы) деятельности в streptozotocin-индуцированной диабетической крысиные мозги [10]. Кроме того, мы продемонстрировали, что Мак может предотвратить ишемии-реперфузиииндуцированного окислительного повреждения и последующих воспалительных реакций в нейронах, и уменьшить размер церебральных инфарктов в животных моделях [10,11]. Поэтому, антиоксидантного и нейропротекторного действия Мак могла бы содействовать (по крайней мере, частично) его антидепрессант-подобных эффектов. Однако, неизвестно, сколько таких антиоксидантные эффекты, вызванные острой администрации Мак повлиять на поведение в тестах, которые мы наблюдали в этом отчет. MAK 17-летнюю историю изготовления внесших заметный вклад в здоровье потребителей в качестве безопасной, функциональной пищи. В прошлом было никакого отчета, предполагая, что Мак был потенциал острой или долгосрочной токсичности у потребителей. Безопасность Мак подтверждена in vitro токсикологическая оценка и животных на токсичность. Кроме того, ранее было 26 показано, что лечение хронических MAK (1 г/кг в течение 9 недель) не оказывало никакого влияния на тело массы, уровня аспартат-аминотрансферазы, аланин-аминотрансферазы, триглицеридов и общего холестерина в сыворотке крови, или гистохимии в мозг, печень и почки у здоровых мышей [38]. Поэтому, однократно 1 г/кг Мак, используемые в настоящем исследовании рассматривается имеют мало или вообще не токсичность. Мак состоит из жмыхов и рисовые отруби, крупа, заросшие G. lucidum мицелием, который, как считается, содержат множество биологически активных веществ, в том числе тритерпены, полисахариды и водорастворимые лигнина. Недавно, тритерпены от Bacopa monnieri[39] и Центеллы азиатской[40], а также полисахариды из женьшеня[41] было показано, что антидепрессант-как побочные эффекты у животных. Соответственно, Мак может также содержат активные компоненты, которые оказывают аналогичным фармакологическим действием. Будущие работы должны быть проведены, чтобы определить вещества, способствующие антидепрессивное действие Мак. Int J Mol Sci. 2014 May 22;15(5):9103-16. doi: 10.3390/ijms15059103. Chemical Characterization and Antitumor Activities of Polysaccharide Extracted from Ganoderma lucidum. Liang Z1, Yi Y2, Guo Y3, Wang R4, Hu Q5, Xiong X6. Ganoderma lucidum polysaccharide (GLP) is a biologically active substance reported to possess antitumor ability. Nonetheless, the mechanisms of GLP-stimulated apoptosis are still unclear. This study aims to determine the inhibitory and apoptosis-inducing effects of GLP on HCT-116 cells. We found that GLP reduced cell viability on HCT-116 cells in a time- and dose-dependent manner, which in turn, induced cell apoptosis. The observed apoptosis was characterized by morphological changes, DNA fragmentation, mitochondrial membrane potential decrease, S phase population increase, and caspase-3 and -9 activation. Furthermore, inhibition of c-Jun N-terminal kinase (JNK) by SP600125 led to a dramatic decrease of the GLPinduced apoptosis. Western blot analysis unveiled that GLP up-regulated the expression of Bax/Bcl-2, caspase-3 and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP). These results demonstrate that apoptosis stimulated by GLP in human colorectal cancer cells is associated with activation of mitochondrial and mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways. Химические характеристики и Противоопухолевую активность полисахаридов, извлеченные из Ganoderma lucidum. Ganoderma lucidum полисахарид (GLP) - это биологически активное вещество, сообщил обладают противоопухолевой способности. Тем не менее, механизмы GLP-стимулирует апоптоз-прежнему остаются неясными. Данное исследование направлено на определение ингибирующих и апоптозиндуцированные эффекты GLP на HCT-116 клеток. Мы обнаружили, что GLP пониженная жизнеспособность клеток на HCT-116 клеток во времени и дозо-зависимый характер, что, в свою очередь, индуцирует апоптоз клеток. Наблюдаемые апоптоз был характеризуются морфологическими изменениями, фрагментации ДНК, мембранный потенциал митохондрий снижение, S-фазы роста населения и каспазы-3 и -9 активации. Кроме того, торможение c-Jun N-терминала киназы (JNK) SP600125 привело к резкому сокращению GLP-индуцированного апоптоза. Вестерн-блот-анализ представила, что GLP до регулируемой экспрессии белка Bax/Bcl-2, каспазы-3 и поли (АДФ-рибоза) полимеразы (PARP). Эти результаты показывают, что апоптоз стимулируется GLP в человеческих клеток колоректального рака связано с активацией митохондриальной и митоген-активированный протеин киназы (MAPK) пути. Anti-cancer activities of Ganoderma lucidum: active ingredients and pathways ChiH.J.Kao1 Amalini C.Jesuthasan1, KarenS.Bishop2,Marcus P. Glucina3,and LynnetteR.Ferguson1 Статья здесь: http://functionalfoodscenter.net/files/63502376.pdf Противораковые деятельность Ganoderma Lucidum: активные ингредиенты и пути РЕЗЮМЕ Ganoderma Lucidum, как правило, называют Линчжи, был использован в Азии для здоровья 27 продвижение на протяжении веков. В противораковые эффекты G. Lucidum были продемонстрированы в как в пробирке и в естественных исследований. Кроме того, наблюдаемые виды деятельности противораковые из Ganoderma есть предложено его использование по онкологических больных наряду химиотерапии. Основные две биологически активные компоненты G. лукидум в целом можно разделить на тритерпенов и полисахариды. Несмотря тритерпенов и полисахаридов широко известных как основной Активные ингредиенты, различные биологические пути, по которым они проявляют свое действие противораковой остаются плохо определены. Таким образом, понимание механизмов действия могут привести к более Широкое использование Ganoderma в качестве противоракового средства. Целью данной работы является обобщение различных биологически активных механизмов, которые были Предлагаемый для противораковых свойств тритерпенов и полисахаридов, выделенных из G. лукидум. Литература поиск опубликованных работ по NCBI с ключевыми словами "Ganoderma" и "Рак" была выполнена. Среди тех, исследований, которые специально изучалась по борьбе с раком были выбраны для включения в этот деятельность Ganoderma тритерпенов и полисахаридов бумага. Мы нашли пять потенциальных механизмов, которые связаны с анти-рак Деятельность Ganoderma тритерпенов и трех возможных механизмов Ganoderma полисахариды. Кроме того, G. Lucidum был использован в сочетании с известными противораковыми агенты, направленные на улучшение противораковые эффективностью. Это говорит о том биоактивные пути Ganoderma может хвалить, что противораковых агентов. В этой статье мы представляем несколько потенциальных борьбе с раком Механизмы Ganoderma тритерпенов и полисахаридов, которые могут быть использованы для Развитие Ganoderma в качестве противоракового средства. ВВЕДЕНИЕ: Ganoderma Lucidum (Г. лукидум), как правило, называют Линчжи в Китае, является грибок, который широко используется на протяжении веков для общего укрепления здоровья и долголетия в Азиатские страны. Это, как известно, имеют многочисленные фармакологические эффекты, включая иммуномодулирующее, противовоспалительное, анти-рак, антидиабетический, антиоксидантным и радикально- вывоз мусора, и омолаживающие эффекты [ 1]. Большинство грибы 90% воды по массе. Для G. Lucidum, остальные 10% состоит из 26-28% углеводов, 3-5% сырого жира, 59% сырой клетчатки, и 7-8% сырого протеина [2]. Кроме того, G. Lucidum содержит широкий спектр биологически активных компонентов, таких как терпеноиды, стероиды, фенолы, гликопротеины и полисахариды [3 , 4]. Многие авторы показали, что тритерпены и полисахариды являются основными физиологически активные компоненты G. лукидум [3, 4]. В этом обзоре мы сосредоточились на различных биологически активных путей думали, связаны с анти-раковые деятельность G. LUCIDUM, в частности, две основные активные ингредиенты: тритерпены и полисахариды. Тритерпены Тритерпены являются одним из возможных фармацевтически активных соединений, способствующих лекарственные деятельность G. лукидум [5, 6]. Тритерпены являются подтипом терпена, класс природные соединения, состоящие из одного или более изопреновых звеньев. Терпены широко распространены по всему миру растений. Многие подтипы терпенов как было обнаружено, имеют анти- противовоспалительное tumourigenic и гиполипидемическое деятельности [7 ]. Тритерпены содержат шесть звеньев изопрена. В изопрены могут образовывать линейные цепи или откидной и образуют кольцевую структуру. Ganoderic кислота является подтип тритерпенов с четырьмя циклическими и двух линейных изопренов. Есть более 140 видов тритерпенов и тритерпеноидов выявленных в G. Lucidum [8] . Тритерпены в основном изолированы от спор G. лукидум и показали замечательный фармакологические и терапевтические мероприятия на нескольких заболеваний человека, включая рак [5 , 6]. Добыча тритерпенов, как правило, с помощью метанол, этанол, ацетон, хлороформ, эфир или смесь этих растворителей [ 9] . Исследования показали, что многие подтипы тритерпеновых выписок из G. лукидум может непосредственно индуцировать апоптоз нескольких клеточных рак человеческого линий [ 5]. 28 цитотоксический эффект варьируется в широких пределах между различными подтипами тритерпенов [5 ]. Некоторые подвиды тритерпенов показали сильный цитотоксические эффекты при низких концентрациях в различных клеточных линиях рака человека, к ним относятся: Ganoderic кислота Т является наиболее распространенным тритерпеновых кислоты, найденные в G. лукидум и шоу значительные противораковые эффекты в как в пробирке и в естественных условиях исследования [10, 11, 12]. В исследовании Chen и другие (2010), Ganoderic кислота Т было показано, ингибировать инвазию опухоли путем ингибирования Matrix МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ (ММП) -9 выражение [ 10] . Ganoderic кислота D было показано, непосредственно связываются 14-3-3ζ белка в исследовании Юэ и соавт. (2008), и это связывание может способствовать апоптоза наблюдается в HeLa клетки [1 3]. Ganoderiol F (GA-F) является тетрациклический тритерпеновый найти в Ganoderma видов [1 4, 15]. GA-F показал цитотоксичности в пробирке против карциномы легких Льюис (ООО), Мет-, саркомы-180 и Т-47D клеточные линии [15 , 16 ]. Кроме того, противоопухолевое действие Г.А.-F была продемонстрирована ин виво на крысах с имплантированными LLC опухолевых клеток [17] . Дополнительный формы тритерпенов выделенные из G. Lucidum показали цитотоксичность в следующей человека линии раковых клеток: P388, HeLa, BEL-7402, и SGC-7901 [ 18, 19]. Есть несколько механизмов, с помощью которых тритерпены вносят вклад в борьбе с раком деятельности Г. лукидум как показано на рисунке 1: Рисунок 1: обзор путей противораковых пострадавших от тритерпенов и полисахаридов из G. LUCIDUM [* CTL цитотоксические Т-лимфоциты; ECM внеклеточному матрица; Ил интерлейкина; ММП матричные металлопротеиназы; NK естественных клеток-киллеров; РКС протеинкиназы С; ROS активных форм кислорода; TNF Фактор некроза опухоли; VEGF фактора роста эндотелия сосудов] Арест клеточного цикла Раковые клетки имеют дерегулированный клеточный цикл, ведущий к неконтролируемой клеточной пролиферации. Анти-рак агенты могут арестовать клеточный цикл в G0/G1, S или G2 / M фазе, уменьшая скорость пролиферации [20] . Исследования показали, что тритерпеновые выдержки из G. лукидум может арестовать клеточный цикл в G1 фазы [ 21, 22]. Вероятный механизм действия для клеточного цикла ареста в фазе G1 через вниз-регулирование Cyclin D1 через модуляции бетакатенина пути [ 23]. Циклин D1 является регулятор циклин зависимой киназы (CDK), который имеет решающее значение для G1 / S перехода в клетке цикл [24] . Циклин D1 промотор содержит транскрипционный фактор (ФТС) / сайты Леф-связывающие которые может быть активирован ßcatenin/Lef-1/TCF [ 25] . Примерно 30% клеток рака толстой кишки имеют сверхэкспрессии циклина D1 в результате аномальной сигнализации SS-катенина [ 26] . Ganodermanontriol, Г. лукидум тритерпеновый экстракт, ингибирует пролиферацию клеток рака толстой кишки НСТ116 и НТ-29 путем ингибирования экспрессии бета-катенина [ 22] . В дополнение к клеточного цикла ареста в фазе G1, тритерпеновые экстракты могут также ингибировать клетки на G2 / M переход [ 27] . Лечение тритерпеновых обогащенного этанолом растворимых фракций (Wees-G6) может подавить активность протеинкиназы С (PKC), что приводит к длительной фазе G2. РКС является класс серин-треонин протеинкиназ, которые избирательно активированы в течение G2 фазе клеточного цикла [28 ]. РКС участвует в регуляции ядерной пластинки разборки во время G2 фаза [ 29] . Исследования показали, что применение ингибиторов РКС может также вызвать остановку клеточного цикла в фаза G2 [ 30, 31]. Кроме того, Wees-G6 может снизить уровень циклин В киназа, которая решающее значение для перехода от G2 к M фазе [27 ]. Wees-G6 также активирует C-Jun N-терминал киназы (JNK) и р38 киназы, оба из которых являются митоген-активированной протеинкиназы (МАРК) которые отвечали бы клеточного стресса [ 27] . JNK является критическим регулятором транскрипции и могут активировать опухолевые супрессоры, такие как р53 [3 2, 33, 34]. В целях дальнейшей поддержки использования тритерпенов как Терапевтический противораковое средство, Джонсон и Lapadat. (2002) наблюдали остановку клеточного цикла в тритерпеновый обращению Хух-7 гепатоцеллюлярной карциномы человека, но не эффект был замечен в нормальный линия человеческих клеток печени [32] . Для того чтобы найти причину тритерпенового вызванной G2 фазы клеточного цикла арестовать, Ли и др.. (2005) определили ингибирование синтеза ДНК через ингибирование топоизомеразы как вероятная причина Ganoderic кислоты X-индуцированной остановке клеточного цикла [35] . Цитотоксичность 29 Цитотоксичные соединения могут также непосредственно запускать апоптоз, ведущий к запрограммированной гибели клеток [ 36, 37] . Исследования показали, что тритерпены индуцируют апоптоз в клеточных линиях рака человека через Митохондрии-зависимый путь, с последующим активации каспазы каскада [ 38, 39]. Внутренняя апоптоза, также известный как митохондрий в зависимости от апоптоза путь, включает снижение митохондриального потенциала, с последующим высвобождение м цитохрома с из митохондрий [ 40, 41]. Выпуск цитохрома с в цитозоль вызывает каспазы каскад приводит к апоптозу. Каспазы каскад включает каспазы 9 и каспазы 3 которые выявляется повышение выражение в человеческих раковых клеток, обработанных G. лукидум тритерпены [11, 42]. Высвобождение цитохрома с из митохондрий зависит от проницаемости митохондриальная наружной мембраны, которая тесно регулируется В-клеточной лимфомы 2 (Bcl-2) Белки семейства [43] . Белков семейства Bcl-2 может быть либо про-апоптотических или анти-апоптоза. Bcl- 2 Антиапоптозный в то время как Bcl-2-ассоциированный белок (X) Bax и Bcl-2-зависимой смертности промотора (Плохо) являются проапоптотического. Соотношение баланса Bax/Bcl-2 определяет высвобождение цитохрома с после апоптоза стимулом [44 ]. Увеличение соотношение количества Bax/Bcl-2 стимулирует апоптоз. Исследования показывает, что лечение G. LUCIDUM тритерпены увеличивает соотношение Bax/Bcl-2 в человека раковые клетки за счет увеличения выражение Bax то время как вниз регулирования Bcl-2 выражение [ 42] . Однако, различные подтипы тритерпенов оказывают различное влияние на Вах и Bcl-2. В исследовании, проведенном Тан и др.. (2006) лечение Ganoderic кислоты T было показано, дорегулировать экспрессию Bax в то время как Bcl-2 выражение остался неизменным [ 11] . В 14-3-3 белки представляют собой семейство консервативных регуляторных белков, они участвуют во многих клеточный процесс, включая прогрессии клеточного цикла и апоптоза через регулирующий протеинкиназы сигнальные каскады [45] . Мишенью 14-3-3 белка является Бад белок проапоптотического. Связывание 14-3-3 белка понравилась ингибирует Bad-индуцированной гибели клеток [46 ]. Исследования показали, что Ganoderic кислоты могут непосредственно связываться с 143-3 белка препятствуя таким образом свою деятельность [13, 39]. Снижение метастатический потенциал Метастазы рака представляет собой сложный процесс, с помощью которого раковые клетки отделились от первичной опухоли и проникают в другие ткани и тем самым образуют вторичные опухоли. Метастазы рака, при отсутствии лечения, резко снижает скорость полимеризации и выживания. Есть несколько ключевых белков, участвующих в рак метастазы, которые могут регулироваться G. LUCIDUM тритерпены. Матриксных металлопротеиназ это семейство белков, которые разрушают внеклеточный матрикс и может способствовать метастаз рака [4 7]. Исследования показали, что Ganoderic кислота извлекается из G. лукидум подавлены вторжение 95-D, LLC, и НСТ-116 метастатических раковых клеток путем ингибирования ММР-9 выражением [ 48, 49]. Интерлейкин (IL) -8 и других ангиогенных факторов, таких как сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF) может индуцировать ангиогенез и способствовать метастазов [ 50] . Экспрессия IL-8 может быть дорегулируется окислительным стрессом и сверхэкспрессии IL-8 связан с метастатическим фенотип клеток рака молочной железы [51 , 52]. Окислительный-индуцированного IL-8 был уменьшен выражение в линия клеток рака молочной железы после лечения G. лукидум [53] . Анти-Воспаление Воспаление было связано как возбудителя в 20% случаев рака [ 54, 55]. Хронический избыточная экспрессия провоспалительных цитокинов, таких как VEGF, IL-6 и фактор некроза опухоли (ФНО)-α, может способствовать канцерогенез [56, 57]. Dudhgaonkar др.. (2009) показали, что Администрация G. Экстракт лукидум тритерпеновый подавляется воспалительный секрецию цитокинов в макрофагов клетки, таким образом, снижение уровня воспаления [ 58] . Антиоксидант Окислительный стресс, как известно, одной из основных причин повышенного риска рака. Свободные радикалы и активные формы кислорода (ROS) генерируются в качестве побочных продуктов метаболических процессов с участием окислительно-восстановительные ферменты и биоэнергетика переноса электронов, и воздействие некоторых экзогенных химических веществ [59 ]. 30 Свободные радикалы и АФК может повредить белки и ДНК внутри клеток, приводящих к окислительному стресс, который можно противопоставить антиокислительных ферментов и механизмов репарации. Однако Избыток окислительный стресс может подавлять врожденные защитные системы, ведущие к различным физиологические расстройства, включая рак [ 59]. Раковые клетки генерируют повышенные уровни бесплатно радикалы относительно нормальных клеток, в дальнейшем, способствующие рак Progressio N-[5 9]. Все больше и больше данные свидетельствуют о том, что это рак, индуцирующего окислительное повреждение может быть предотвращено или ограничено с помощью антиоксидантов. Антиоксиданты могут опосредовать свое действие непосредственно реагировать с АФК, закалки их или хелатных ионов каталитического металла [60] . Smina др.. (2011) показали, что тритерпены, извлеченные из G. лукидум имеют антиоксидантное недвижимость в пробирке и могут уменьшить окислительное повреждение непосредственно очистку свободных радикалов генерируется в камере [61 ]. Кроме того, введение мышам тритерпенов увеличилась Деятельность антиоксидантными ферментами и снижения радиационного окислительных повреждений ДНК у мышей Спленоциты [ 61, 62]. Способность тритерпенов чтобы собирать свободные радикалы и повышения врожденное анти- окислителя ферменты указывает, что тритерпены являются высокоэффективным антиоксидантом. Полисахариды Полисахариды являются длинные молекулы цепи сахара объединились гликозидными облигаций. Различный виды полисахаридов, с молекулярной массой в пределах от 4 × 10 5 до 1 × 10 6 Да, были определены в G. лукидум; в основном в теле и мицелия плодоношения, и некоторые из них были найдены в споры [ 1] . Структурный анализ показывает, что полисахариды G. лукидум все гетерополимеры [ 63] . Глюкоза формирует основную долю молекул сахара; с ксилоза, манноза, галактоза, и фукоза в различных конформаций. Высказывается гипотеза, что полисахариды, извлеченные из различные части G. лукидум вызвать различные иммунные реакции с различными иммунными потенций [63] . Отличается разветвление конформации и характеристики растворимости влияет на анти- tumourigenic свойства этих полисахаридов [64] . β-D-глюканы, состоящие из (1-3) -, (1-4) - и (1-6)-β-D связей, как известно, имеют более сильную активность против опухоли и лучшее поглощение чем других полисахаридов в G. лукидум [64] . Вместе с высокой концентрацией высоких полисахаридов молекулярным весом, гриб также состоит из матрицы из полисахарида хитина, который является в значительной степени переваривается и частично отвечает за физическую твердости гриба [ 65] . Существуют три механизма, с помощью которого Ganoderma полисахариды оказывают свое противораковые эффект, как показано на рисунке 1: Улучшение иммунного ответа В отличие от тритерпенов, многочисленные исследования показали, что полисахариды оказывают свое анти- Эффект рака путем усиления иммунной системы хозяина, а не через прямое цитотоксическое действие [66, 67, 68]. Это включает в себя стимуляцию макрофагов, естественных киллеров (NK) клетки, и цитотоксических Т- лимфоциты (CTL) деятельности вместе с их секреторных продуктов, таких как TNF, химически активного азота и кислорода промежуточные продукты, и интерлейкины [69] . В исследовании, проведенном Ван и соавт. (1997), это было показали, что полисахариды, извлеченные из свежих плодовых тел G. лукидум может стимулировать производство IL-1β, IL-6, TNF-α и интерферона-γ (IFN-γ) в человеческих моноцитов-макрофагов и Т-лимфоциты [ 68] . Широко известно, что макрофаги играют важную роль во многих начальных обороны механизмы через фагоцитоза и секреции иммунных цитокинов в ответ на микро- экологические сигналы [ 70, 71]. Г. лукидум иммуномодулирующие вещества, (протеогликан изолирован от плодового тела группы G. лукидум), включите мозга, полученных макрофаги костей в зависимости от дозы. Эти активированные макрофаги показали заметное увеличение их фагоцитоз активность и увеличение производства IL-1β и оксида азота [72] . Главного комплекса гистосовместимости (МНС) является одним из видов белка экспрессируется на всех ячейки поверхности. Основной функцией MHC является отображение молекулярную фракцию белков, которые сформирована внутри клетки, процесс, известный как презентации антигена [73] . Раковые клетки, которые имеют аномальные белки или изменения в размере экспрессии белка, 31 могут быть обнаружены путем иммунных клеток через презентации антигена, что приводит к CTL опосредованному апоптозу. Раковые клетки могут снизить Выражение молекул МНС, чтобы убежать CTL опосредованный апоптоз [7 ] 4. НК-клеток может обнаружить и индуцировать апоптоз раковых клеток с низкой экспрессией МНС [ 75] . Фракцию-3 (F3), фукозу, содержащий гликопротеин извлекается из G. лукидум,стимулировали пролиферации клеток селезенки мыши и экспрессии различных цитокинов, включая IL-1, IL-2, и IFN-γ [76] . Исследование Chien и др.. (2004) показали, что лечение F3 мононуклеарных клеток извлекается из пуповинной крови человека стимулировали их дифференцировку в макрофаги и НК-клеток в 2,9 и 1,5 раза соответственно [77 ]. Другое исследование показало, что F3 обработанных человеком острая моноцитарный лейкоз (ТНР-1) клеточная линия выставлены повышенной дифференциации макрофагов с помощью каспазы и активация р53 [ 78]. Эта дифференциация была продемонстрирована изменений в клетке присоединение, остановка клеточного цикла, увеличение экспрессии маркеров дифференцировки и вниз регулирование миелопероксидазы (МПО) [78 ]. Фермент МПО синтезируется только в миелоидной и моноцитов клетки и вниз-регулирование МРО-активности является характерной чертой в макрофагов дифференциация [ 79] . Эти результаты показали, что полисахариды, полученные из G. лукидум эффективно мог увеличить клеточную иммунную активность в пробирке, а также в естественных условиях, путем модуляции цитокин производство. Анти-окислительного активности Лу и др.. (2001) показали, что диетический лечение с использованием Ganoderma мицелий, полученных Экстракт полисахарид может быть использован для подавления образования толстой аномальным очагов крипт у крыс, возможно, через уменьшение окислительного повреждения, вызванную АФК [8 0, 81]. Кроме того, амино- полисахарид доля G. лукидум называется "G009" инактивирует гидроксильные радикалы и супероксид анионы и уменьшает разрывы цепи ДНК в зависимости от дозы [8 ] 2. Это исследование показало, что G009 ингибирует железа, вызванной перекисное окисление липидов в гомогенатах головного мозга крыс и показали дозу- зависимой инактивации гидроксильных радикалов и супероксидных анионов. Он также сократил прядь поломки в ДНК, вызванные ультрафиолетовым излучением фотолиза в дифференцированной HL-60 (человека промиелоцитарный лейкемия) клетки [ 82] . Подавление ангиогенеза Ангиогенез физиологический процесс с участием развитие новых кровеносных сосудов из уже существующих судов. Нормальная регуляция ангиогенеза регулируется тонкого баланса между факторами, которые вызывают развитие кровеносных сосудов, и такие, которые ингибируют этот процесс. Нарушение этого баланса приводит к патологического ангиогенеза. Опухолевые клетки, как известно, индуцировать ангиогенез при секретирующих различные факторы роста, такие как VEGF, которые индуцируют капилляр рост в опухоль, снабжая ее необходимыми питательными веществами и создавая возможности для расширения опухоли и метастазирование. Исследования показали, что Г. лукидум обладает антиангиогенную активность, а также может препятствовать производство оксида азота, вызывая агент ангиогенеза избыточно экспрессируется в опухолях [ 83] . Исследование Цао и др.. (2006) показали, что полисахарид пептид (GL-PP), выделенных из G. лукидум ингибирует пролиферацию пуповинной сосудистых эндотелиальных клеток человека (HUVEC) в зависимости от дозы [ 84] . В клетках карциномы легкого человека, высокая доза Гл-ПП для 18 часов в условиях гипоксии привело к уменьшению количества секретируемого VEGF. В HUVECs, GlPP привело к сокращению Bcl-2 экспрессии и увеличением экспрессии Bax, который индуцирует апоптоз в эндотелиальных клетках сосудов. Поэтому Gl-ПП могут ингибировать ангиогенез через ингибирования секреции проангиогенных факторов и ингибирование пролиферации эндотелиальных клеток сосудов [84] . Вполне возможно, что эффект цитотоксичность и ингибирование пролиферации наблюдалось в обоих полисахаридные и тритерпеновые экстракты могут иметь одинаковые биологически активных 32 путей. Исследование Стэнли и соавт. (2005) обнаружили, что Г. лукидум предотвращает капиллярное формообразование, Важным шагом в ангиогенеза связано с ростом и развитием рака [ 85] . Г. лукидум значительно ингибирует капилляров морфогенез путем ингибирования секреции кровеносных сосудов факторы VEGF и фактор Преобразование роста (TGF)-β1. Г. лукидум было показано, ингибирует Рак простаты ангиогенез путем модуляции МАРК и протеинкиназы B сигнализации и изменения фосфорилирование внеклеточной регулируемой киназы 1/2 и Akt киназ [85] . Методы экстракции Целые споры, плодовые тела и культивируемых мицелий группы G. LUCIDUM а также его тритерпены и полисахариды экстракты были широко проверены на их различных свойств противоопухолевых. Различные источники G. лукидум и различной процедуры экстракции для получения требуемой Компоненты были использованы в различных исследований. Процесс извлечения является необходимым шагом для очистить гриб, устраняя ненужные компоненты, которые производятся естественный процесс выращивание гриба, сохраняя основные биологически активные компоненты в нем. Многочисленные средства добычи были разработаны с целью получения экстрактов с лучшими выходами и снижения затрат [86] . Как правило, большинство полисахариды извлекаются с помощью осаждения водяного экстракт алкоголя методы [ 87, 88]. Растворимость и извлечение эффективность в воде зависит от молекулярной массу полисахаридной и температура воды, с более низкой молекулярной массой и горячей воды показывая повышенную эффективность [89] . Однако этот метод имеет свои недостатки, такие как уменьшается Доходность, долгое время добыча и высокая температура добыча, и, следовательно, новые технологии разрабатывается, чтобы преодолеть эти недостатки. Новые технологии с использованием ультразвука, микроволновая печь и ферментативные способы недавно были разработаны для повышения выхода в более короткие извлечения раз [87] . Вытяжки с использованием этанола, как сообщается, будет самым простым подходом для поддержания активность тритерпеновых экстрактов и наращивать свое производство [90 ]. Тритерпены, как правило, экстрагировали с использованием органических растворителей, таких как метанол, этанол, хлороформ или эфир с последующим различные способы разделения [89] . Ультразвуковые методы в настоящее время используются для повышения уровень добычи тритерпенов, уничтожив плотную структуру в клетках [87] . Есть, однако, очень мало исследований, сравнивающих различные процедуры извлечения на Эффективность отдельных биологически активных компонентов. Однако исследование, Лу и соавт. (2004) рассмотрел этанола и воды выдержки из плодовых тел и спор в G. лукидум помощью MTT (3 (4, 5-диметилтиазолил-2) -2,5-дифенилтетразолия) клеточной пролиферации и в результате IC50s показаны в таблице 1 [ 91] . Тонг и др. (2009) провел сравнение цитотоксической активности, вызванной G. лукидум экстракты плодоношения-тела, полученные горячей воды и методов извлечения метанола. Результаты показали, что добыча метанол производится двукратное увеличение цитотоксической активности в J558 (BALB / C миеломы мыши) клеток [ 92] . Это показывает, что органический растворитель, а не методу водного экстрагировани, имеет более сильное цитотоксическая активность на раковых клетках. Тритерпеновые является основной активный ингредиент извлекается из органического растворитель и полисахарид является основным активные ингредиенты, выделенные из воды. Это говорит о том тритерпены, что может иметь более сильное цитотоксическое действие, чем полисахариды. Однако дополнительное сравнительные исследования с использованием различных клеточных линий должны проводиться, чтобы подтвердить эти данные. Ganoderma Lucidum в сочетании с другими методами лечения рака Лучевая терапия обычно используется в лечении рака для того, чтобы привести к повреждению ДНК опухолевые клетки, ингибируют пролиферацию и индуцировать апоптоз. Основной побочный эффект использования излучения терапия повреждения ДНК к окружающим здоровым тканям. Таким образом, защита незлокачественные ткани от излучения является жизненно важным для снижения побочных эффектов [ 93]. 33 Многие из последних цитопротекторных агентов, способных защиты нормальных тканей против радиационно-повреждение есть некоторые нежелательные и серьезные побочные эффекты, которые ограничивают их терапевтический приложения [94 ]. Тем не менее, Г. лукидум было доказано, обладают радио-защитная эффекты в нормальные клетки и активизации восстановления клеточного иммунного-компетенции от гамма-облучения[95, 96]. Chen и соавт. (1995) изучали влияние G. лукидум в ремонте радиационно-индуцированного повреждения в подгруппе Т-лимфоцитов в селезенке после гамма-облучения мышей [97] . Мышей обрабатывали с облучения всего тела от гамма-облучения с последующим введением 400 мг / сут / кг массы тела G. лукидум [97] . Это было по сравнению с контролем, излучение, обработанных только мыши, а также радиационно-обработанных мышей, которым вводили крестин, полисахарида, выделенного из basidomycetes из Coriolus лишай. Результаты показали, что после 28 дней, облученные мыши, обработанные с G. Lucidum имели самый высокий относительный вес тимуса с большим числом CD4 и CD8 Спленоциты и увеличение лейкоцитов. Это показало, что Г. лукидум эффективна (даже больше, чем Coriolus лишай экстрактов) в увеличения извлечения сотовой иммунокомпетенция от гамма-облучения. Другое исследование, выполненное Pillai и соавт. (2006), показали, что Г. лукидум предотвращает ДНК повреждение, индуцированное излучение. Швейцарские белых мышей, которые были подвержены гамма-лучей и обработанные с G. LUCIDUM экстракты плодоношения-тела, были оценены на радио-защитная эффектов [93] . Результаты показал, что администрация G. Экстракт лукидум привело к 90% защиты ДНК плазмиды и предотвратить 98% перекисного окисления липидов. Из этого исследования можно сделать вывод, что Г. лукидум защищает ДНК от радиационных однонитевых разрывов и тем самым обладает значительное радио-защитная активность [93] . Цисплатин, первый клинический химиотерапевтический агент рак, принадлежащий к классу платины- содержащие противораковые препараты, широко используется для лечения целого ряда опухолей. Тем не менее, ее преимущества противодействует почечной недостаточностью со снижением клубочковой фильтрации, которая является распространенным побочным эффект цисплатина [9 8]. Это нефротоксичность была полагают, связано с ослаблением почечная антиоксидантом система обороны. С Г. лукидум было доказано, обладают в пробирке анти- свойства окислителя, было проведено исследование для изучения профилактики нефротоксичности индуцированный по борьбе с раком наркотиков цисплатин [99 ]. Швейцарские альбиносов мышей лечили экстрактов плодоношения тел группы G. лукидум (250 и 500 мг / кг массы тела) в устной форме один час перед инъекцией цисплатин в высокая доза (уровень обычно используется в клинической практике и нашли производить нефротоксичность и цитотоксичность) [99 , 100]. Нефротоксичность измеряли путем определения сывороточного креатинина и уровни мочевины и почечная статус антиоксидантом и результаты показали, что она значительно снижается повышенные креатинина и мочевины в сыворотке крови уровни [99] . Почечная антиоксидантом система обороны (например, супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы деятельности и) уровни восстановленного глутатиона после обработки цисплатином были восстановлены в нормальной и терапевтические эффекты цисплатина были сохранены [ 99] . Эти исследования показывают, что Г. LUCIDUM помогает в сокращении токсичности в результате различных популярные режимы лечения рака и, следовательно, может играть важную роль в комбинированной терапии для лечения рака. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Ganderma лукидум широко используется на протяжении веков для многочисленных фармакологических преимущества, в том числе иммуномодулятора, противовоспалительного, антирак, антидиабетический, анти- окислительные и радикально-вывоз мусора, и омолаживающие эффекты и только в последние два десятилетия имеет научной информации стали доступны, который поддерживает некоторые из этих претензий. Потенция G. лукидум зависит главным образом от его химических составляющих, а именно тритерпенов и полисахаридов , которые составляют плодового тела, мицелий или споры. Его свойства противораковые были продемонстрировано в различных линий раковых клеток человека и мыши. Однако механизмы ответственность за противораковым действием группы G. лукидум на раковые клетки остаются неубедительными. Это обзорная статья определила пять потенциальных механизмов, связанных с противораковых мероприятий 34 тритерпеноидов и три для полисахаридов. Тритерпены было показано, чтобы вызвать остановку клеточного цикла в фазе G1 в пухрегулирование циклина D1, а в фазе G2, подавляя активность РКС. Он также индуцированной апоптоз в раковых клеточных линиях через митохондрий в зависимости от путей с последующей активацией каспазы каскад. Тритерпены также предотвратить метастазирование опухоли, регулируя ММП и ИЛ-8 и подавляется воспалительный секреции цитокинов в макрофагов. Наконец, тритерпены были найдены действовать в качестве антиоксиданта на очистку свободных радикалов и повышение врожденные антиоксидантными ферменты. Полисахариды, как было показано для повышения иммунного ответа хозяина, стимулируя производство макрофагов, НК-клеток и Т-лимфоцитов. Как тритерпены, полисахариды могут действовать в качестве антиоксиданта за счет уменьшения окислительного повреждения, вызванной ROS и предотвращения ДНК прядь перерывов. Оно также предотвращает опухоли, полученных ангиогенеза путем уменьшения распространения HUVEC и путем ингибирования секреции ангиогенных факторов, таких как VEGF и TGF-β1. В заключение Г. лукидум может представлять практический и перспективный подход для рака профилактика и лечение рака на основе уже имеющихся данных в пробирке и в естественных условиях исследования. Тем не менее, дальнейшие экспериментальные, эпидемиологические и клинические исследования должны быть проведены, чтобы определить другие молекулярные мишени; решить отношения между G. лукидум потребление и рак риски; и исследовать оптимальную дозирования, эффективности и самостоятельно и в сочетании с безопасности химиотерапия / лучевой терапии. В дополнение к противораковой активностью, G. лукидум был использован для общее укрепление здоровья и долголетия. Противовоспалительные и иммунитетом, способствующих Эффекты, описанные в этом обзоре потенциально могут содействовать лечения других заболеваний, таких как Болезнь артрит, ВИЧ, и Крона [ 1, 101]. Biochem Biophys Res Commun. 2014 May 15. pii: S0006-291X(14)00873-0. 10.1016/j.bbrc.2014.05.019. [Epub ahead of print] Antiviral effects of two Ganoderma lucidum triterpenoids against enterovirus 71 infection. Zhang W1, Tao J1, Yang X1, Yang Z2, Zhang L3, Liu H3, Wu K1, Wu J4. doi: Enterovirus 71 (EV71) is a major causative agent for hand, foot and mouth disease (HFMD), and fatal neurological and systemic complications in children. However, there is currently no clinical approved antiviral drug available for the prevention and treatment of the viral infection. Here, we evaluated the antiviral activities of two Ganoderma lucidum triterpenoids (GLTs), Lanosta-7,9(11),24-trien-3-one,15;26dihydroxy (GLTA) and Ganoderic acid Y (GLTB), against EV71 infection. The results showed that the two natural compounds display significant anti-EV71 activities without cytotoxicity in human rhabdomyosarcoma (RD) cells as evaluated by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) cell proliferation assay. The mechanisms by which the two compounds affect EV71 infection were further elucidated by three action modes using Ribavirin, a common antiviral drug, as a positive control. The results suggested that GLTA and GLTB prevent EV71 infection through interacting with the viral particle to block the adsorption of virus to the cells. In addition, the interactions between EV71 virion and the compounds were predicated by computer molecular docking, which illustrated that GLTA and GLTB may bind to the viral capsid protein at a hydrophobic pocket (F site), and thus may block uncoating of EV71. Moreover, we demonstrated that GLTA and GLTB significantly inhibit the replication of the viral RNA (vRNA) of EV71 replication through blocking EV71 uncoating. Thus, GLTA and GLTB may represent two potential therapeutic agents to control and treat EV71 infection. Противовирусное действие двух Ganoderma lucidum тритерпеноиды против энтеровирус 71инфекции. Энтеровирус 71 (ЭВ71) является основным возбудителем для рук, ног и рта заболевания (ВППРК), и роковой неврологических и системных осложнений у детей. Однако, в настоящее время нет клинических разрешенных к применению противовирусных лекарств, доступных для профилактики и лечения вирусных инфекций. Здесь мы оценивали противовирусная активность два Ganoderma 35 lucidum тритерпеноиды (Глц), Lanosta-7,9(11),24-ен-3-один,15;26-дигидрокси (GLTA) и Ganoderic кислоты Y (GLTB), против ЭВ71 инфекции. Результаты показали, что два природных соединений дисплей значительные анти-ЭВ71 деятельность без цитотоксичность в человеческой рабдомиосаркома (RD), клеток оценивали по 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-ил)-2,5-diphenyltetrazolium бромида (МТТ) пролиферации клеток анализа. Механизмы, с помощью которых две соединений влияют ЭВ71 инфекции были дополнительно осветили три режима воздействия с помощью Рибавирин, общий противовирусный препарат, в качестве положительного контроля. Эти результаты позволяют предположить, что GLTA и GLTB предотвратить ЭВ71 инфекции через взаимодействует с вирусной частицы блокировать адсорбции вируса к клеткам. Кроме того, взаимодействие между ЭВ71 вирионов и соединений были основаны на компьютере молекулярного докинга, в которой показано, что GLTA и GLTB может привязать к вирусного капсида белка в гидрофобные карман (F сайта), и, таким образом, могут блокировать uncoating из ЭВ71. Более того, мы показали, что GLTA и GLTB значительно ингибируют репликацию вирусной РНК (удобный) ЭВ71 репликации через блокирование ЭВ71 uncoating. Таким образом, GLTA и GLTB может представлять два потенциальных терапевтических агентов для контроля и лечения ЭВ71 инфекции. Int J Oncol. 2014 Jul;45(1):373-82. doi: 10.3892/ijo.2014.2414. Epub 2014 May 5. The effect of Cordyceps extract and a mixture of Ganoderma lucidum/Agaricus Blazi Murill extract on human endometrial cancer cell lines in vitro. Hahne JC, Meyer SR, Dietl J, Honig A. Department of Gynecology, Medical University of Würzburg, D-97080 Würzburg, Germany. Endometrial carcinoma is the most common gynaecological malignancy. Nevertheless there is a lack of curative therapies, especially for patients diagnosed with late stage, recurrent or aggressive disease, who have a poor prognosis. Cordyceps Sinensis, Ganoderma lucidum and Agaricus Blazi Murill are three fungi widely used in traditional Chinese medicine, and effects as adjuvants in tumour therapy have been demonstrated. However, the function and effects of these fungi in regard to endometrial cancer are not known. Three endometrial cancer cell lines, Ishikawa, Hec-1A and AN3-CA (derived from endometrial cancers grade I, II and III, respectively), were used to determine the effect of the fungi extracts on endometrial cancer cell function and to analyze the molecular mechanism. All fungi extracts had an inhibitory effect on cell viability and proliferation most probably exerted through induction of autophagy. Our data suggest that these fungi extracts may be used as adjuvants in endometrial tumour therapy. Эффект Кордицепса, экстракт смеси и Ganoderma lucidum/Agaricus Blazi Murill выписка по правам рака эндометрия клеточных линий in vitro. Карцинома эндометрия наиболее распространенных гинекологических злокачественных новообразований. Тем не менее, отсутствие лечебной терапии, особенно для пациентов, диагностированных с поздней стадии, рецидивирующий или агрессивным, которые имеют плохой прогноз. Кордицепс Sinensis, Ganoderma lucidum и Agaricus Blazi Murill три грибы широко используется в традиционной китайской медицине, и последствия, в качестве адьювантов в терапии опухолей были продемонстрированы. Однако, функции и эффекты этих грибов в отношении рака эндометрия не известны. Три клеточных линий рака эндометрия, Исикава, Hec-1A и AN3-CA (производный от рака эндометрия класса I, II и III соответственно), были использованы для того, чтобы определить влияние грибов экстракты на функции клеток рака эндометрия и анализа молекулярного механизма. Все грибы экстракты было тормозящее влияние на жизнеспособность клеток и распространения наиболее вероятно, оказываемое посредством индукции аутофагии. Наши данные позволяют предположить, что эти грибы выписки могут быть использованы в качестве адьювантов в терапии опухолей эндометрия. Evid Based Complement Alternat Med. 2014;2014:979613. doi: 10.1155/2014/979613. Epub 2014 Apr 1. Improving Training Condition Assessment in Endurance Cyclists: Effects of Ganoderma lucidum and 36 Ophiocordyceps sinensis Dietary Supplementation. Rossi P1, Buonocore D1, Altobelli E2, Brandalise F1, Cesaroni V1, Iozzi D1, Savino E2, Marzatico F1. 1Department of Biology and Biotechnology, "L. Spallanzani," Pavia University, Via Ferrata 9, 27100 Pavia, Italy. The main reasons for taking daily dietary supplements are to maintain good health, to improve homeostasis, and to create conditions for reducing the risk of disease. Due to growing market demand, the search for effective, nontoxic, natural compounds with antioxidant and ergogenic properties has increasingly become a matter of interest. This paper describes how a specific combination of fungal supplements can help improve the performance of endurance athletes. We report the effects of a brief 3-month trial of two fungal supplements, Ganoderma lucidum and Cordyceps sinensis (3 capsules of O. sinensis and 2 capsules of G. lucidum per day), in 7 healthy male volunteers, aged between 30 and 40 years, who are all amateur cyclists that participate in "Gran Fondo" cycling races. This trial investigated the effects of fungal supplements on the level of physical fitness of the athletes by monitoring and comparing the following biomarkers just before and after physical exertion: the testosterone/cortisol ratio in the saliva and oxidative stress (DPPH free radical scavenging activity). A decrease of more than 30% in the testosterone/cortisol ratio after race compared to before race was considered as a risk factor for nonfunctional overreaching (NFO) or the overtraining syndrome (OTS). The results show that, after 3 months of supplementation, the testosterone/cortisol ratio changed in a statistically significant manner, thereby protecting the athletes from NFO and OTS. Antioxidant activity was measured by quantifying the scavenging ability of the human serum on the synthetic free radical DPPH. After 3 months of fungal supplementation, the data demonstrate an increased scavenger capacity of free radicals in the athletes' serum after the race, thereby protecting the athletes from oxidative stress. Совершенствование подготовки оценки состояния в выносливости велосипедистов: эффекты Ganoderma lucidum и Ophiocordyceps sinensis диетических добавок. Основные причины ежедневно принимают пищевые добавки, чтобы сохранить хорошее здоровье, улучшить гомеостаза, и создание условий для снижения риска заболеваний. Из-за растущего спроса на рынке, поиск эффективных, нетоксичен, природных соединений, обладающих антиоксидантной и эргогеническим свойства становятся все более интересно. Этот документ описывает, как конкретные комбинации грибные добавки могут помочь повысить производительность выносливость спортсменов. Мы отчета последствия краткое 3-месячный испытательный срок на два грибные добавки, Ganoderma lucidum и Кордицепс sinensis (3 капсулы О. sinensis и 2 капсулы G. lucidum в день), в 7 здоровых добровольцев мужского пола, в возрасте между 30 и 40 лет, кто-любителей всех велосипедистов, которые участвуют в "Gran Fondo" велосипедных гонок. Это испытание было изучено влияние грибные добавки на уровень физической подготовленности спортсменов мониторинга и сравнивая следующие биомаркеров просто до и после физических нагрузок: тестостерон/кортизол отношение в слюне и окислительного стресса (dpph-антирадикальное действие). Снижение более чем на 30% в тестостерон/кортизол отношение после гонки по сравнению перед гонкой было рассматривать как фактор риска для атрофированы, вытягивание (NFO) или синдром перетренированности (OTS). Результаты показывают, что после 3 месяцев лечения, тестостерон/кортизол соотношение изменилось в статистически значимым образом, тем самым защищая спортсменов из NFO и OTS. Антиоксидантная активность была измерена путем количественной оценки очистки способность сыворотки крови человека на синтетических свободных радикалов ДФПГ. После 3 месяцев грибковых добавок, данные свидетельствуют о повышенном старьевщик потенциала свободных радикалов в олимпийской сыворотке после гонки, тем самым, защитить спортсменов от окислительного стресса. 1. Introduction Fatigue and underperformance are common in athletes and can affect more than 65% at the peak of their career. The European College of Sport Science has defined these symptoms as nonfunctional overreaching (NFO) and the overtraining syndrome (OTS) [1–3]. Athletes increase their training load in order to improve their performance. However, a maladapted response to excessive exercise, without adequate rest, can lead to nonfunctional performance, such as a discrepancy between the stress incurred during training or competing and the athlete's ability to recover after exercise. The most commonly encountered effects are underperformance, reduced tolerance to training load, decreased coordination, and increased heart rate. 37 NFO is a performance decrement that requires 72 hours of recovery, while OTS is a performance decrement that requires days or weeks of recovery after maximal physical exercise [1–3]. It is clinically difficult to differentiate between NFO and OTS as the difference is based on the time it takes for athletes to recover and not necessarily on the degree or type of symptoms. Thus, a period of complete rest is often required before it is possible to diagnose one syndrome or the other. Many authors consider overreaching and overtraining as a continuum, while others suggest that NFO precedes OTS [3]. It would be very useful to understand the mechanisms underlying underperformance in order to assess, manage, and educate the athlete. The overtraining syndrome (OTS) disturbs many body systems (neurologic, endocrinologic, and immunologic systems). Many hypotheses have been presented to explain the pathogenesis of the OTS [2]. The hypothalamic hypothesis suggests that deregulation of the hypothalamus and hormonal axes activates the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in endurance athletes, but data in the literature are contradictory. Furthermore, this hypothesis suggests that endurance athletes may experience changes in levels of cortisol, adrenocorticotropic hormone, testosterone, and other hormones. Unfortunately, literature data prove contradictory in terms of the pattern of hormonal changes involved [4– 7]. One of the indices that is used to evaluate the stress induced by physical exercise is the ratio between the levels of testosterone and cortisol (T/C), both in basal conditions and after exercise. The T/C ratio is used to define the general metabolic trend in an organism: a decrease indicates a catabolic tendency, while an increase indicates an anabolic trend. In particular, data from the scientific literature show that a decrease of less than 30% in the T/C ratio indicates an effective workout, while a decrease of more than 30% from baseline in the T/C ratio is a risk factor for overtraining [7]. The oxidative stress hypothesis suggests that excessive oxidative stress causes muscle damage and fatigue. A small amount of data indicates that markers of oxidative stress are higher at rest in overtrained athletes and increase with exercise. Many fungal species have recently been reported to display antioxidant and ergogenic properties, demonstrating what has already been claimed by Traditional Chinese Medicine (TCM) [8, 9]. One of the most popular fungi in this group is Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst., better known in western countries by the Japanese term “Reishi”; it is defined in Traditional Chinese Medicine (TCM) as the “mushroom of immortality.” Ganoderma lucidum preferentially grows on broadleaved trees, such as oak or chestnut, mainly as a saprotroph and only rarely as a parasite. This species has been reported to have multiple beneficial values because it contains a vast number of bioactive compounds, the most pharmacologically active of which being triterpenes and polysaccharides [10–14]. Another two of these bioactive compounds are adenosine monophosphate, thought to help lower blood pressure and remove blood vessel blockage, and superoxide dismutase, an antiaging substance. The main medicinal properties of this fungus are immune response modulating, anticancer, antihypertensive, antioxidant, antiaging, anti-inflammatory, antiviral, and cardio- and nephroprotection [15, 16]. Another important medicinal fungal species is Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G. H. Sung, J. M. Sung, Hywel-Jones & Spatafora, more commonly known as Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc. According to the last taxonomic revision, it is an ascomycete, endemic to the Tibetan Plateau and surrounding Himalayas. The fungus is parasitic and colonizes the larvae of a moth, Hepialus armoricanus, forming a complex that includes the remains of the parasitic larva and the stroma of the fungus (sclerotia). In its growth phase, the fungus gradually turns into a fruiting body. Ophiocordyceps sinensis is used in Traditional Chinese Medicine (TCM) to promote health, longevity, and athletic power because of its tonic effect, reducing fatigue. Recent studies have demonstrated that the chemical constituents extracted from this species have various protective effects on the nervous system, cardiovascular diseases, proliferation of tumor masses, lipid metabolism, and infection [17]; moreover, it has antiaging properties [18]. One of the constituents isolated from O. sinensis, cordycepin (3′-deoxyadenosine), is a derivative of the nucleoside adenosine, differing only in the absence of an oxygen molecule in the 3′ position of the ribose. Athletes who perform endurance training undergo oxidative stress and potentially suffer from the overtraining syndrome. The aim of the present study was to evaluate the effects of two fungal supplements, used in TCM, on the athletic performance of road cyclists. Considering the different properties of the two fungal species mentioned above, we suggested that the athletes in our study group take this specific combination of dietary supplements. 1. Введение 38 Усталость и отставания являются общими спортсмены и может повлиять на более чем 65% на пике своей карьеры. Европейского колледжа спортивных наук определила эти симптомы нефункциональным, вытягивание (NFO) и синдром перетренированности (OTS) [1-3]. Спортсмены повысить их учебную нагрузку в целях повышения их производительности. Однако, maladapted ответ на чрезмерные физические нагрузки, без достаточного отдыха, может привести к нефункциональным производительности, таких как расхождение между стрессом, понесенные во время тренировки или соревнования и способность спортсмена для восстановления после тренировки. Наиболее часто встречающиеся эффекты отставания, снижение толерантности к учебной нагрузке, снижение координации и учащение пульса. NFO-это снижению работоспособности, что требует 72 часов на восстановление, в то время как OTSэто снижению работоспособности, что требует нескольких дней или недель на восстановление, после предельных физических упражнений [1-3]. Клинически трудно провести различие между NFO и OTS как разница базируется на времени, необходимом для спортсменов, чтобы восстановить и не обязательно на степень или типа симптомов. Таким образом, период полного покоя-это часто необходимо, чтобы ее можно диагностировать один синдром или другие. Многие авторы считают, растрачивая и перетренированности как континуум, в то время как другие считают, что NFO предшествует ОТС " [3]. Было бы очень полезно, чтобы понять механизмы, лежащие в основе отставания в целях оценки, управления и воспитать спортсмена. Этот синдром перетренированности (OTS) нарушает многие системы организма (неврологические, эндокринологические, и иммунологических систем). Много гипотез были представлены объяснить патогенезе ОТС " [2]. Гипоталамо гипотеза предполагает, что дерегулирование гипоталамуса и гормональные осей активирует гипоталамо-гипофизарнонадпочечниковой системы в выносливости спортсменов, но данные в литературе, являются противоречивыми. Кроме того, эта гипотеза предполагает, что на выносливость могут возникнуть изменения уровня кортизола, АКТГ, тестостерона и других гормонов. К сожалению, в литературе данные свидетельствуют противоречивые точки зрения шаблон гормональных изменений, происходящих [4-7]. Одним из показателей, который используется для оценки уровня стресса, индуцированного физические упражнения-это отношение между уровнем тестостерона и кортизола (T/C), как в базальных условиях и после тренировки. T/C коэффициент используется для определения общей метаболической тенденция в организме: снижение указывает на то, катаболический тенденцию, в то время как рост указывает анаболический тенденция. В частности, данные научной литературы показывает, что уменьшение менее чем на 30% В Т/ц отношение указывает на эффективную тренировку, в то время как спад-более чем на 30% от исходного уровня в т/ц отношение является фактором риска перетренированности [7]. Окислительного стресса гипотеза предполагает, что чрезмерное окислительный стресс вызывает повреждение мышц и усталость. Небольшой объем данных указывает на то, что маркеров оксидативного стресса выше на отдых в уставшими от тренировок спортсменов и увеличение физических упражнений. Многие виды грибов недавно сообщалось дисплей антиоксидант и эргогеническим свойства, продемонстрировав, что уже были заявлены в традиционной китайской медицине (ткм) [8, 9]. Один из самых популярных грибов в этой группе Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst., более известный на Западе-японский термин “Рейши”; оно определено в традиционной китайской медицине (ткм), как “гриб бессмертия”. Ganoderma lucidum растет преимущественно на лиственных деревьев, таких как дуб или каштановые, в основном, в качестве saprotroph и лишь изредка, как паразит. Этот вид был, по сообщениям, несколько выгодных значения, поскольку он содержит огромное количество биологически активных соединений, наиболее фармакологически активным из которых является тритерпены и полисахаридов [10-14]. Еще два из этих биологически активных соединений, аденозинмонофосфат, думал помочь снизить кровяное давление и удаления засорения кровеносных сосудов, и супероксиддисмутазы, antiaging вещества. Основные лечебные свойства этого гриба иммуномодулирующим, противоопухолевым, антигипертензивное, антиоксидант, antiaging, противовоспалительное, противовирусное, и кардио - и nephroprotection [15, 16]. Еще одним важным лекарственных видов грибковых Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G. H. сена, J. M. сена, Хайвел-Jones & Spatafora, более известный как Кордицепс sinensis (Berk.) Sacc. Согласно 39 последним таксономических ревизий, это ascomycete, эндемичных для тибетского нагорья и прилегающих Гималаев. Гриб является паразитическим и заселяет личинки моли, Hepialus armoricanus, образуя комплекс, который включает в себя остатки паразитические личинки и стромы гриба (склероции). В фазе роста, гриб постепенно превращается в плодовое тело. Ophiocordyceps sinensis используется в традиционной китайской медицине (ткм) укрепления здоровья, долголетия, и атлетической силы в связи с его тонизирующее действие, уменьшая усталость. Недавние исследования показали, что химические компоненты, извлеченные из этой породы имеют различные защитное действие на нервную систему, сердечно-сосудистых заболеваний, распространение опухолевых масс, метаболизм липидов и инфекции [17]; кроме того, он имеет antiaging свойства [18]. Одной из составляющих изолирован от O. sinensis, кордицепина (3'-deoxyadenosine), - это производные нуклеозидов аденозин, отличаясь лишь в отсутствие кислорода в молекуле 3 " должность рибозы. Спортсмены, которые выполняют тренировка на выносливость подвергаются окислительному стрессу и потенциально страдают от синдрома перетренированности. Целью настоящего исследования было оценить влияние двух грибные добавки, используемые в традиционной китайской медицине, на спортивные показатели автомобильного велосипедистов. Учитывая различные свойства двух видов грибковых упоминалось выше, мы предположили, что спортсмены нашей исследовательской группы принять это уникальное сочетание биологически активных добавок. 4. Discussion This paper investigates the problem of underperformance in athletes by referring to two different hypotheses in the pathogenesis of nonfunctional overreaching and overtraining: the hypothalamic hypothesis and the oxidative stress hypothesis. We tested the effect of the dietary fungal supplements Ophiocordyceps sinensis and Ganoderma lucidum both on the levels of testosterone and cortisol in the saliva of road cyclists and on the scavenger ability of free radicals in their serum. The link between hormonal status and oxidative stress has not been considered in previous publications. Excessive oxidative stress is an important mediator of a decline in steroid hormone production mediated by activated p38 mitogen-activator protein kinase (p38MAPK) [25]. The “stress response” paradigm is comparable to adrenal hyperfunction, according to which psychophysical stress and sensible activation of the hypothalamic-hypophyseal-adrenal axis cause oxidative damage. In animal models of restraint stress, adrenal hyperfunction leads to a decrease in antioxidant enzymes (SOD, Cat, GSH transferase, and reductase) and a reduction of GSH and urate in serum. In the same animal model, lipid peroxidation and carbonyl contents significantly increase in the brain, liver, and heart suggesting a causal role of stress hormones in oxidative processes induced during the adaptive response [26, 27]. Oxidative stress and inflammation are associated with fatigue and bad recovery and are risk factors for overreaching in intense exercise. Antioxidant treatment may have a positive effect on markers of oxidative stress, inflammation, and cortisol response [28]. Furthermore, there is a correlation between sex hormones and plasmatic total antioxidant capacity (TAC), and TAC significantly correlated with total testosterone [29]. The generation of reactive oxygen and nitrogen species (RONS) in response to intense exercise can occur via several pathways, including mitochondrial respiration (electron leakage from electron transport chain and subsequent production of the superoxide radical), which is the main metabolic mechanism involved in the performance of cyclists. An alteration in the redox state in favor of the generation of RONS is necessary in order to initiate signaling pathways; however, when acute or chronic free radicals are produced, the antioxidant defense system can be overwhelmed, thereby disrupting normal redox-sensitive signaling and causing a permanent shift in “redox homeostasis” [30, 31]. The development of procedures to ameliorate the production of undesirable RONS may become one of the core research areas in this field. It is common practice for athletes to use antioxidant dietary supplements as they are known to prevent the adverse effects of exercise-induced oxidative stress, hasten the recovery of muscle function, and improve performance [32, 33]. The most commonly used supplements include vitamin E, vitamin C, βcarotene, coenzyme Q10, lipoic acid, N-acetylcysteine, allopurinol, quercetin, resveratrol, and several other polyphenolic compounds or a combination of the above. However, free radicals not only cause damage but they also have a role in cell signaling. RONS produced during exercise act as signals that regulate molecular events that are important in muscle cell adaptations to exercise [34]. The practical consequence is that 40 antioxidant administration prevents such adaptations. Antioxidants, especially in high doses, have recently been shown to increase markers of exercise-induced oxidative stress or to inhibit the beneficial physiological or muscle adaptations induced by ROS [34, 35]. The practical implication is that by decreasing the effects of RONS using antioxidants, beneficial cell adaptations may be hindered during exercise. Our data suggest that athletes may have a viable alternative to taking antioxidant dietary supplements, namely, micotherapy supplements containing nutriceuticals that do not greatly interfere with antioxidant exercise-induced adaptations, thereby improving systemic redox. The fungal species Ophiocordyceps sinensis is mainly used in TCM as a tonic. It has been suggested that its antioxidant effects improve performance. The molecular mechanism responsible for the effects this fungus has on physical fitness has not yet been clarified. A pilot study [36] carried out using a fermented product of standardized O. sinensis on 20 healthy elderly subjects describes a 10% increase of the metabolic threshold (from 0.84 to 0.93 L/min) and of the ventilatory threshold (8.5%). In rats, oral administration of O. sinensis causes a statistically significant increase in the period of endurance (from 1.79 to 2.9 times) compared to the control group [36]. In the gastrocnemius muscle of the rat, higher levels of some molecules were measured, with metabolic functions at muscular level [37]. Ophiocordyceps sinensis is a powerful hydrogen donor, and the protection effect of oxidative damage is due to its free radical scavenger ability. The protective effects of O. sinensis against oxidative damage to lipids, proteins, and low-density lipoproteins (LDL) are not due to the presence of cordycepin and adenosine but due to the presence of polyphenols and flavonoids [38]. Antioxidant properties have also been reported in assays for lipid oxidation of the polysaccharide fraction from the mycelium of O. sinensis [39]. Sporophore water and ethanol extracts of Ophiocordyceps sinensis possess potent antioxidant properties [40]. The other fungal species in this study, Ganoderma lucidum, contains many bioactive compounds amongst which triterpenes have displayed antioxidant effects and exert a scavenging action on free radicals (superoxide, peroxyl, DPPH) in vitro [41, 42]. It is noteworthy that some differences between European or Chinese strains and sporophores have been registered [43, 44]. The administration of extracts of triterpenes for 1 month has been shown to enhance the activity of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase, GPX in mice, in vivo [41, 42]. Even at low concentrations, triterpenes have been found to be effective in preventing DNA damage and in reducing apoptosis. They also reduce the formation of reactive oxygen species (ROS) and increase the activity of endogenous antioxidant enzymes in splenic lymphocytes subjected to irradiation. This suggests that triterpenes isolated from G. lucidum are able to protect cells from radiationinduced damage, indicating possible applications in the field of therapy [38, 39]. Furthermore, crude ethanol and water extracts from Ganoderma are a rich source of antioxidant compoundssuch as phenols, ascorbic acid, β-carotene, and lycopene and display antioxidant properties in some different assays, namely, the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and the metal chelating activity against ferrous ions. We divided the athletes who participated in this study into two groups, according to their testosterone/cortisol ratio before and after race: well-trained athletes (2 subjects) and athletes at risk of overtraining (5 subjects). There was no difference between the before and after race testosterone levels in the two well-trained athletes during the placebo phase, whereas there was a 2-fold increase in the before race basal testosterone level after fungal supplementation compared to the placebo condition and a 4-fold increase in the after race level. Cortisol levels did not change in a statistically significant manner before and after fungal supplementation or before and after race. The T/C ratio and scavenger activity of free radicals improved in both athletes. After 3 months of fungal supplementation, the T/C ratio and the scavenger activity of free radicals increased in a statistically significant way in the other 5 athletes, who were potentially at risk of OTS during the placebo phase (as a result of incorrect or insufficient training), thus protecting them from overreaching and/or overtraining. In the placebo condition, after race levels of testosterone decreased compared to before race, while after race levels of cortisol increased compared to before race. After fungal supplementation, before race basal testosterone levels increased compared to before race levels in the placebo condition, and before race levels increased even more compared to the placebo condition, reaching 41 a 3-fold increase. Before race basal cortisol levels did not change after fungal supplementation, but after race levels increased after fungal supplementation compared to levels in the placebo condition, demonstrating that the fungal supplements protected the athletes at risk of overtraining. The statistically significant increase in FRSA after race after fungal supplementation and the statistically significant difference in after race values after fungal supplementation compared to the placebo condition suggest that the 7 athletes are protected from an increase in free radical production during physical exercise. We cannot distinguish between the two states of underperformance, because the difference is based on time before recovery and not on the degree or type of symptoms [2]. We can therefore conclude that a 3-month period of O. sinensis and G. lucidum dietary supplementation may protect endurance athletes from nonfunctional overreaching/overtraining. An interesting future development of this research would be to analyze inflammatory parameters in order to understand the role fungal supplementation plays on the immune system. The study should continue to select standardized fungal dietary supplements, but it should be expanded to include a larger number of endurance athletes, due to the variability in their athletic condition [45]. 4. Обсуждение В работе исследуется проблема отставания спортсменов в виду два разных гипотез в патогенезе атрофированы, вытягивание и перетренированности: гипоталамо-гипо-и окислительного стресса гипотеза. Мы протестировали влияние диетических грибные добавки Ophiocordyceps sinensis и Ganoderma lucidum как на уровни тестостерона и кортизола в слюне дороги для велосипедистов и на старьевщик способность свободных радикалов в их сыворотке крови. Связь между гормонального статуса и окислительный стресс не были рассмотрены в предыдущих публикациях. Чрезмерное окислительный стресс является важным посредником снижение продукции стероидных гормонов при посредничестве активированный p38 митоген-активатор протеинкиназы (p38MAPK) [25]. “Стресс-реакции” парадигма сопоставима гиперфункция надпочечников, согласно которому психофизические нагрузки и разумный активации гипоталамо-гипофизарной-надпочечниковой системы вызывать окислительное повреждение. На животных моделях пресечения стресс, гиперфункция надпочечников приводит к снижению антиоксидантных ферментов (СОД, кошка, ГШтрансферазы, и редуктазы) и снижение ГШ и уратов в сыворотке крови. В то же модели животных, перекисного окисления липидов и содержание карбонильных значительно увеличится в мозг, печень и сердце предлагаю, причинную роль гормонов стресса в окислительных процессов, индуцированных в процессе адаптивного ответа [26, 27]. Окислительный стресс и воспаление, связанные с усталостью и плохим восстановления и являются факторами риска, вытягивание в интенсивных тренировок. Антиоксидант лечение может оказать положительное влияние на показатели окислительного стресса, воспаление, и кортизола ответ [28]. Кроме того, существует корреляция между половых гормонов и плазматических общая антиоксидантная активность (TAC), TAC и существенно коррелирует с общего тестостерона [29]. К генерации активных форм кислорода и азота видов (нейронов) в ответ на интенсивные физические упражнения могут возникнуть через несколько путей, в том числе митохондриального дыхания (electron от утечки электрон-транспортной цепи и последующее производство супероксидного радикала), который является основным метаболический механизм, участвующих в исполнении велосипедистов. Изменение окислительно-восстановительного состояния в пользу поколения нейронов необходимо для того, чтобы инициировать сигнальных путей; однако, при острой или хронической свободные радикалы вырабатываются, системы антиоксидантной защиты могут быть перегружены, тем самым нарушает нормальную редокс-чувствительных сигнализации и вызывая необратимые изменения в “окислительно-восстановительные гомеостаза” [30, 31]. Разработка процедур, чтобы улучшить производство нежелательных нейронов может стать одним из основных направлений исследований в этой области. Это обычная практика для спортсменов антиоксидантные пищевые добавки, поскольку они, как известно, предотвратить отрицательные последствия упражнение-индуцированного окислительного стресса, ускорить восстановление функции мышц и повышения производительности [32, 33]. Наиболее часто используемые добавки включают витамин Е, витамин С, бета-каротин, коэнзим Q10, 42 липоевая кислота, N-ацетилцистеин, аллопуринол, кверцетин, ресвератрол, и несколько других полифенольных соединений или их комбинации. Тем не менее, свободные радикалы не только нанести ущерб, но они также играют определенную роль в клеточной сигнализации. Нейронов, производимых во время упражнения действуют в качестве сигналов, которые регулируют молекулярных событий, которые играют важную роль в адаптации к мышечной клетке упражнений [34]. На практике это приводит к тому, что антиоксидант администрации предотвращает такие приспособления. Антиоксиданты, особенно в высоких дозах, недавно было показано, что увеличение маркеры упражнение-индуцированного окислительного стресса или препятствовать положительный физиологический или мышечной адаптации, вызванных АФК [34, 35]. Практическим следствием является снижение воздействия электронов с помощью антиоксиданты, благотворно адаптации клеток могут быть нарушены во время тренировки. Наши данные показывают, что спортсмены могут иметь жизнеспособную альтернативу принимать антиоксидантные пищевые добавки, а именно, micotherapy добавок, содержащих nutriceuticals, что не сильно конфликтовать с антиоксидантными упражнения вызванного адаптации, тем самым улучшая системных редокс. Грибковые видов Ophiocordyceps sinensis, в основном, используется в традиционной китайской медицине как тонизирующее средство. Было высказано предположение, что его антиоксидантные свойства повышения производительности. Молекулярный механизм, ответственный за последствия этого гриба " о физической культуре пока не уточняется. Пилотное исследование [36] осуществляется с помощью кисломолочных продуктов стандартизированных O. sinensis на 20 здоровых пожилых лиц описывает 10% повышение обменных порог (от 0,84 до 0,93 л/мин) и вентиляторной порог (8.5%). В крысы, перорально О. sinensis вызывает статистически значимое увеличение срока выносливость (от 1,79 до 2,9 раза) по сравнению с контрольной группой [36]. В икроножных мышцах крысы, более высокие уровни некоторых молекул были измерены с метаболических функций на уровне мышечной [37]. Ophiocordyceps sinensis находится мощный донор водорода, и защитного эффекта окислительного повреждения из-за его свободных радикалов способности. Защитные эффекты О. sinensis от окислительного повреждения липидов, протеинов, липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) не из-за присутствия кордицепина и аденозина, но из-за присутствия полифенолы и флавоноиды [38]. Антиоксидантными свойствами обладают также сообщалось в анализах для окисления липидов полисахарида фракции из мицелия O. sinensis [39]. Sporophore водные и спиртовые экстракты из Ophiocordyceps sinensis обладают мощными антиоксидантными свойствами [40]. Другие виды грибов в этом исследовании, Ganoderma lucidum, содержит много биологически активных соединений, среди которых тритерпены демонстрировали антиоксидантный эффект и оказывают очистки действий на свободных радикалов (супероксид пероксил, ДФПГ) in vitro [41, 42]. Примечательно, что некоторые различия между европейской или китайской штаммов и спороношений были зарегистрированы [43, 44]. Администрация извлекает из тритерпены в течение 1 месяца, как было показано, для повышения активности антиоксидантных ферментов, таких как супероксиддисмутаза (СОД), каталазы (кат)и глутатион-пероксидазы, GPX мышей in vivo [41, 42]. Даже при низких концентрациях, тритерпены были признаны эффективными в предотвращении повреждения ДНК и в снижении апоптоза. Они также уменьшают образование активных форм кислорода (АФК) и повышают активность эндогенных антиоксидантных ферментов лимфоцитов селезенки, подвергшихся облучению. Это говорит о том, что тритерпены изолированы от G. lucidum способны защищать клетки организма от радиационноиндуцированного повреждения, указывающие на возможные приложения в области терапии [38, 39]. Кроме того, сырой этанола и водных экстрактов из Ganoderma являются богатым источником антиоксидантов compoundssuch как фенолы, аскорбиновая кислота, бета-каротин и ликопин и отображения антиоксидантными свойствами, в несколько разных анализах, а именно, 2,2-дифенил-1picrylhydrazyl (ДФПГ) антирадикальное деятельности и металла хелатирующие деятельности против ионы двухвалентного. Мы разделили спортсмены, принявшие участие в данном исследовании на две группы, согласно их тестостерон/кортизол отношение до и после гонки: хорошо подготовленных спортсменов (2 предмета) и спортсменов на риск перетренированности (5 предметов). 43 Нет никакой разницы между " до " и " после гонки уровни тестостерона в два хорошо подготовленных спортсменов в ходе плацебо фазы, в то время как там было в 2 раза увеличить перед гонкой базальный уровень тестостерона после грибные добавки по сравнению с плацебо состояние и 4-кратный рост после гонки уровне. Уровень кортизола не изменить в статистически значимым образом до и после грибковых добавок и до и после гонки. T/C отношение и старьевщик активность свободных радикалов улучшение в обоих спортсменов. После 3 месяцев грибные добавки, т/ц отношение и старьевщик активность свободных радикалов увеличилось статистически значимые пути и в других 5 спортсменов, которые были подвержены риску ОТС " в ходе плацебо фазы (в результате неправильного или недостаточного обучения), тем самым защищая их от претензии и/или перетренированности. В плацебо состоянии, после гонки уровень тестостерона снизился по сравнению с до гонки, а после гонки уровень кортизола увеличилась по сравнению перед гонкой. После грибные добавки, перед гонкой базального уровня тестостерона увеличилась по сравнению перед гонкой уровнях в плацебо состоянии, и перед гонкой уровень вырос даже больше, по сравнению с плацебо состояние, достигнув 3-кратное увеличение. Перед гонкой базального кортизола не изменилась и после того грибные добавки, но после гонки уровень вырос после грибные добавки по сравнению с уровнем в плацебо состояние, демонстрируя, что грибные добавки охраняемых спортсменов на риск перетренированности. Статистически значимый рост FRSA после гонки после грибные добавки и статистически существенное различие в после гонки значения после грибные добавки по сравнению с плацебо состоянии предположить, что 7 спортсменов защищены от увеличения выработки свободных радикалов во время физических упражнений. Мы не можем провести различие между двумя государствами неудовлетворительной, потому что разница, основанные на времени, прежде чем выполнять восстановление, а не на степень или типа симптомов [2]. Таким образом, мы можем заключить, что в 3-месячный период. sinensis и G. lucidum пищевых добавок может защитить спортсменов от атрофированы, вытягивание/перетренированности. Интересное будущее развитие данного исследования было проанализировать воспалительных параметров, чтобы понять, какую роль грибные добавки играет на иммунную систему. Исследование должно продолжать выберите стандартизированных грибковых биологически активных добавок, но он должен быть расширен, чтобы включить большее число спортсменов, из-за изменчивости в свои спортивные условие [45]. Evid Based Complement Alternat Med. 2014;2014:252171. doi:/252171. Epub 2014 Apr 1. The Effect of Mushroom Beta-Glucans from Solid Culture of Ganoderma lucidum on Inhibition of the Primary Tumor Metastasis. Chen SN1, Chang CS1, Hung MH1, Chen S2, Wang W2, Tai CJ3, Lu CL1. 1College of Life Science, National Taiwan University, Section 4, Roosevelt Road, Taipei 10617, Taiwan. This study evaluates the effect of mushroom beta-glucans (MBGS) derived from solid culture of Ganoderma lucidum on tumor inhibition by examining size of the primary tumor and rate of metastasis in Lewis lung carcinoma (LLC) bearing mice (C57BL/6), given oral administration of MBGS with radiation therapy. A previous result showed that MBGS enhances NK cell-mediated cytotoxicity in mice without LLC bearing in advance. Furthermore, applications of MBGS in conjunction with radiation therapy were effective in controlling tumor growth, and rate of metastasis, life threatening, and can potentially serve as a protective factor for wounds and hair loss that resulted from the overgrowth of primary tumor in LLC bearing mice. Влияние грибов бета-Глюканов из твердых культуры Ganoderma lucidum на торможение основной метастазов опухоли. Это исследование оценивает влияние грибного бета-глюканов (пограничные службы Молдовы), полученных от твердых культуры Ganoderma lucidum на опухолевые торможения путем изучения Размер первичной опухоли и скорость метастазов в карциномы легкого Льюис (LLC) подшипник мышей (C57BL/6), даны устные администрации пограничные службы Молдовы с лучевой терапией. Предыдущий результат показал, что пограничные службы Молдовы повышает НК-клеточной 44 опосредованной цитотоксичности у мышей без ООО " подшипник заранее. Кроме того, применение пограничные службы Молдовы в сочетании с лучевой терапией были эффективны в контроле опухолевого роста, и темпы метастазов, угрожающих жизни и может служить в качестве защитного фактора для ран и потери волос в результате избыточный рост первичной опухоли в ООО " подшипник мышей. 1. Introduction Mushrooms have been valued for their health benefits and medicinal effects for centuries. One of the special components found from mushrooms is beta-glucan, which is predominantly composed in the fungal cell wall and is mostly composed of beta-D-glucose. In many researches, beta-glucan effectively stimulates the host immune response to defend against bacterial, viral, fungal, or parasitic infections [1]. Moreover, it is known as biological response modifier since it primarily achieves its disease protective activity through modulating the host immune system [2]. The stimulation of beta-glucan to macrophages, neutrophils, and natural killer (NK) cells is proved by binding to the receptor (dectin-1) of these cells and modulates the systems [3, 4]. In clinical applications, beta-glucan is usually used as an adjuvant to enhance the effectiveness of the medicine [5, 6]. To sum up the experimental and clinical results, the potential anticancer activity from beta-glucan has been proven, and thus beta-glucan has been gaining prominence in clinical research during the past few years [6, 7]. The rapidly grown cancer cells turn into tumors, which compete with other somatic cells for space and nutrient. The tumor oppresses normal tissues, affects the normal function of surrounding tissues, and invades adjacent blood vessels or the lymphatic system which leads to metastasis [8]. In fact, many cancer patients do not decease from the exacerbation of the primary tumors. Instead the most common cause of death is from the establishment of secondary tumors in other areas through metastasis. When these tumor cells successfully proliferate in the new host environment, a secondary tumor is formed, which completes the metastatic process and is a potential risk factor during current cancer therapy and patients life threaten [9]. Natural killer (NK) cells have the ability to distinguish self- versus non-self-cells through the MHC- (major histocompatibility complex-) class I molecules on the cell surface [10]. The MHC-class I molecules on selfcells inhibit the NK cell-mediated cytotoxicity. Atypical cells or infected cells will try to evade being identified by the host immune system through reducing or eliminating the cell surface presentation of MHC-class I molecules. Since most cancer cells are derived from the abnormal proliferation of self-cells, a normal immune system will not necessarily distinguish and eradicate the cancer cells effectively. Therefore the addition of cytotoxic function, such as NK cell-mediated cytotoxicity in eliminating cancer cells, plays an important role in cancer therapy [11]. This study estimated the NK cell-mediated cytotoxicity of mice which is treated by MBGS and, furthermore, used the tumor-bearing murine model of inducing the metastasis from the primary tumor by radiation [12] and observes for the effectiveness of MBGS in conjunction with the radiation therapy to control cancer metastasis. 1. Введение Грибы были оценены по их пользе для здоровья и лекарственного воздействия на протяжении веков. Одной из специальных компонентов, найденных с грибами бета-глюкан, который преимущественно состоит в клеточной стенки гриба и состоит в основном из бета-D-глюкозы. Во многих исследованиях, бета-глюкан, эффективно стимулирует иммунный ответ для защиты от бактериальных, вирусных, грибковых, или паразитарных инфекций [1]. Кроме того, он известен как модификатор биологического ответа, поскольку он в основном достиг своей болезни охранной деятельности посредством модулирования иммунной системы хозяина [2]. Стимуляция бета-глюкан, чтобы макрофаги, нейтрофилы и естественных киллеров (NK-клеток) доказано, связываясь с рецепторами (dectin-1) этих клеток и модулирует систем [3, 4]. В клинических приложений, бетаглюкан, как правило, используется в качестве вспомогательного средства для повышения эффективности медицины [5, 6]. Подводя экспериментальные и клинические результаты, потенциальной противоопухолевой активности бета-глюкан была доказана, и, таким образом, бетаглюкан, получил широкую известность в клинических исследованиях в течение последних нескольких лет 7]. Стремительно выросли раковые клетки превращаются в опухоли, которые конкурируют с другими 45 соматических клеток в пространстве и питательных веществ. Опухоль угнетает нормальных тканей, влияет на нормальное функционирование окружающих тканей, и вторгается в соседних сосудов или лимфатическую систему, что приводит к метастазированию [8]. В самом деле, многие больные раком не болезнь с обострением первичной опухоли. Вместо того, чтобы наиболее распространенной причиной смерти от создания вторичных опухолей в других областях через метастазов. Когда эти клетки опухоли успешно размножаться в новой принимающей среде, вторичные опухоли образуется, которая завершает метастатического процесса и является потенциальным фактором риска при текущей терапии рака и угрожать жизни пациентов [9]. Естественных киллеров (NK-клеток) имеют способность отличать себя - против non-self-клеток через MHC- (главного комплекса гистосовместимости-) класс I молекул на поверхности клеток [10]. MHC-I класса молекул on self-клеток, подавляют НК-клеточной опосредованной цитотоксичности. Атипичные клетки или зараженных клеток будет уклоняться от будучи отождествленным со стороны иммунной системы хозяина по сокращению или ликвидации клеточной поверхности презентация MHC-I класса молекул. Поскольку большинство раковых клеток, полученных из ненормальным распространения собственной клетки, нормальной иммунной системой, не обязательно различать и уничтожить раковые клетки эффективно. Поэтому в дополнение цитотоксических функции, такие как нагорнокарабахский клеточной опосредованной цитотоксичности в ликвидации раковых клеток, играет важную роль в терапии рака [11]. В этом исследовании оценке НК-клеточной опосредованной цитотоксичности мышей, которые обрабатывают пограничные службы Молдовы и, кроме того, используется опухоли-подшипник мышиная модель вызывая метастазы от первичной опухоли путем излучения [12] и наблюдает за эффективность пограничные службы Молдовы в сочетании с лучевой терапией борьбы с раковыми метастазами. 4. Discussion Beta-glucan was known to enhance and stimulate the immune system and express antitumoral activities in animal models [3, 4, 16]. Compared to the other beta-glucans extracted from the yeast or oats that promoted similar antimetastatic activities, beta-glucans from the mushroom were comprised of short β (1, 6) branches coming off a β (1, 3) backbone, thereby lacking the extra β (1, 3) branch extending from the β (1, 6) branch point [17, 18]. In addition to the structural difference, chemical viabilities including molecular weight and water solubility also made the beta-glucans from mushrooms more bioavailable and favorable for adjunct therapeutic applications [19–22]. NK cells are specialized large granular lymphocytes of the innate immune system responsible for eliminating virus-infected and tumor cells [23]. Also, these cells triggered spontaneous cytotoxicity that plays a critical role in immune surveillance and cancer therapy [24]. In 2000, research indicated that the cytotoxic anticancer agents have immunomodulating effects, which has been shown to enhance the activation of macrophages with associated increases of cytokines, can exert immunity-dependent curative effects in mouse tumor models [25]. In the present study, the potential adjunct therapeutic effects of MBGS treatment in a murine tumor-bearing model have been observed. The antimetastatic effect, as demonstrated in the present study, might be a result of an increase in NK-cell mediated cytotoxicity, as previously suggested by Di Luzio and Williams [26]; Ŝandula et al. [27]; and Chen et al., 2011 [17]. The NK cell-mediated cytotoxicity increases significantly after four days of MBGS treatment in mice. Additionally, a continuous daily MBGS treatment effectively maintains NK cell-mediated cytotoxicity. Despite the lack of statistical significant difference in primary tumor size between the group that received a combination of MBGS and radiation therapy and the group that received only the radiation therapy, the combination treatment group demonstrates a promising result for the overall treatment performance when factors such as damages inflicted on the outer epithelial layer, rate of tumor metastasis, and the average length of survival are compared in this study. In 1981, effective results of single injection of 100 or 200 mg/kg or daily injections of 20 or 50 mg/kg of schizophyllan after removal of the primary tumor markedly inhibited pulmonary metastases [28]. As in the murine tumor-bearing model, the incidence of metastasis was 100% in both the control and radiation therapy group, 80% in the group receiving MBGS treatment and 20% in the group receiving both MBGS treatment and radiation therapy. These results suggest that the glucans, such as MBGS acts as an effective adjunct therapy to radiation therapy in reducing metastatic potential of the primary tumor. This is further 46 confirmed during the necropsy by the large numbers of metastatic tumor nodules found in the lung tissues from both groups that did not receive MBGS treatments. We believe that the increase of NK cell-mediated cytotoxicity is highly associated with the protective effect in reducing the incidence of metastasis. As another marker for the treatment efficacy, we observed an increasing trend in the length of survival in the treatment groups, with the control group being the shortest (24 days) and the group receiving a combination of MBGS treatment and radiation therapy being the longest (35 days). Moreover, the group that received the combination treatments survived 7 additional days than those who received radiation therapy only (28 days), suggesting an improved posttreatment prognosis using MBGS as an adjunct therapeutic agent with radiation therapy to increase the length of survival. Furthermore, aside from lethargy, fatigue, and unintentional weight loss, which are common clinical manifestations for the cancer bearing mice, we have also observed open wounds and severe alopecia inflicted by the rapid growth of the primary tumor, from which the symptoms cannot be alleviated by the radiation therapy. However, within groups that received MBGS treatments, there are minimal hair loss and less severe wounds observed on the surface of the primary tumor. Findings from Kougias et al. indicate that in addition to macrophages, neutrophils and NK cells, membrane receptors for beta-glucan, are present in the human dermal fibroblasts [29], which promote wound repair and re-epithelialization of a full-thickness skin by stimulating human dermal fibroblast collagen biosynthesis through a nuclear factor-1 dependent mechanism [30, 31]. In addition, as suggested by prior researches, interferon-γ (IFN-γ), one of the primary cytokine produced by NK cells responsible for cancer immunosurveillance and immunoediting, can effectively active macrophage and dendritic cell to promote immunotherapeutic approaches to control and/or eliminate cancers [32]. As demonstrated from the result of this study, we suggested that the inhibition of the primary tumor metastasis was related to the expression of IFN-γ. This hypothesis was further confirmed by an unpublished data from a follow-up study which has shown a comparable outcome with respect to the current one. Radiation therapy is one of the mainstays in cancer therapies to date. During the treatments process, high energy waves are projected to the cancerous growth, causing damage within the cells and ultimately cause the tumor to shrink. However, one of the disadvantages of radiation therapy is that the effectiveness is limited only to the localized tumor rather than a metastatic cancer, and a combination of immunotherapy and radiation therapy is recommended for the best posttreatments prognosis [33]. In this study, we look at the potential mechanism of MBGS treatments in reducing the rate of tumor growth and enhancing NK cellmediated cytotoxicity against LLC tumor in mice. In addition, the results have further suggested that MBGS treatments reduce the rate of metastasis and improve the effectiveness of radiation therapy by providing additional length of survival for the tumor-bearing mice. Обсуждение Бета-глюкан, как известно, укрепляют и стимулируют иммунную систему и Ускоренная противоопухолевую активность в моделях на животных [3, 4, 16]. По сравнению с другими бетаглюканы, извлеченные из дрожжей или овса, которые способствовали похожие антиметастатической деятельности, бета-глюканов из гриба состояли из коротких ' (1, 6) филиалов сходит ' (1, 3) позвоночника, таким образом, не имея лишних ' (1, 3) филиал простирается от бета (1, 6) филиал точки [17, 18]. В дополнение к структурное различие, химической viabilities в том числе молекулярной массы и воды растворимость сделал бета-глюканов из грибов больше биологически доступными и выгодными для адъюнкт-терапевтических применений [19-22]. NK-клеток специализированы большие гранулярные лимфоциты врожденной иммунной системы, ответственные за устранение вирус-инфицированным и опухолевых клеток [23]. Кроме того, эти клетки вызвало спонтанное цитотоксичность, которая играет важную роль в иммунной наблюдения и лечения рака [24]. В 2000 году исследования показали, что цитотоксических противоопухолевых агентов иммуномодулирующие эффекты, которые, как было показано, улучшить активация макрофагов и связанное с этим увеличение цитокинов, может оказывать иммунитет-зависимые лечебный эффект при мыши опухоль моделей [25]. В настоящем исследовании потенциальных адъюнкт-терапевтических эффектов пограничные службы Молдовы лечение в мышиных опухолиподшипник модели были соблюдены. В антиметастатической эффекта, как показано в настоящем исследовании, могут быть результатом увеличения НК-клеточной опосредованной цитотоксичности, как это ранее предлагалось ди Луцио и Уильямс [26]; Ŝandula et al. [27]; Chen et al., 2011 [17]. НК47 клеточной опосредованной цитотоксичности значительно возрастает после четырех дней пограничные службы Молдовы лечения мышей. Кроме того, непрерывный ежедневный пограничные службы Молдовы лечение эффективно поддерживает НК-клеточной опосредованной цитотоксичности. Несмотря на отсутствие статистически значимое различие в первичной опухоли размером между группе, получавшей комбинацию пограничные службы Молдовы и лучевая терапия в группе, получавшей только лучевой терапии, комбинированной терапии группа демонстрирует многообещающие результаты для общей производительности при лечении таких факторов, как ущерб, нанесенный эпителиальный слой, скорость метастазов опухоли, и о средней продолжительности выживания, участвующих в исследовании. В 1981 году, эффективных результатов однократных инъекций 100 или 200 мг/кг или ежедневных инъекций 20 или 50 мг/кг schizophyllan после удаления первичной опухоли заметно тормозится метастазами в легких [28]. Как в мышином опухоли-подшипник модель, частота метастазирования был 100% в контроле и лучевой терапии группы, 80% в группе, получавшей лечения и пограничные службы Молдовы 20% в группе, получавшей как пограничные службы Молдовы лечения и лучевой терапии. Эти результаты позволяют предположить, что глюканы, такие как пограничные службы Молдовы выступает в качестве эффективного средства терапии лучевой терапии в снижении метастатический потенциал первичной опухоли. Это также подтверждается при вскрытии в связи с большим количеством метастатических опухолевых узлов, найденных в легких тканей из обеих групп, которые не получили пограничные службы Молдовы процедуры. Мы считаем, что повышение НКклеточной опосредованной цитотоксичности высоко, связанные с защитный эффект в снижении заболеваемости метастазов. Как еще один показатель эффективности терапии, мы наблюдается тенденция увеличения продолжительности выживания в группах лечения, в контрольной группе-наименьшая (24 дня), и в группе, получавшей комбинацию пограничные службы Молдовы лечение и лучевая терапия является самой длинной (35 дней). Кроме того, группы, которые получали комбинированное лечение, выжил 7 дополнительные дни, чем те, кто получил лучевой терапии только (28 дней), что указывает на улучшение posttreatment прогноз помощью пограничные службы Молдовы в качестве дополнительного терапевтического средства при лучевой терапии на увеличение продолжительности выживания. Кроме того, в стороне от вялость, усталость, и непреднамеренная потеря веса, которые являются общими клиническими проявлениями рак подшипник мышей, мы тоже наблюдали, открытые раны и тяжелые алопеция, причиненный в результате быстрого роста первичной опухоли, от которых симптомы не могут быть решены с помощью лучевой терапии. Однако, в рамках групп, которые получили пограничные службы Молдовы процедуры, существуют минимальные потери волос и менее тяжелые ранения, наблюдаемые на поверхности первичной опухоли. Результаты Kougias et al. указывают на то, что в дополнение к макрофаги, нейтрофилы и NK-клеток, мембранных рецепторов, бета-глюкан, присутствуют в человеческом дермальных фибробластов [29], которые способствуют ремонта раны и заново эпителизации на всю толщину кожи, стимулируя человека дермальных фибробластов биосинтез коллагена через ядерного фактора-1 зависимый механизм [30, 31]. Кроме того, как полагает предварительного исследования, интерферон-гамма (IFN-G), одной из основных цитокинов, производимых NK-клетки, отвечающие за рак иммунобиологического надзора и immunoediting, может эффективно активных макрофагов и дендритных клеток к поощрению подходов к иммунотерапии управления и/или искоренить рак [32]. Как показали результаты этого исследования, мы предположили, что ингибирование первичной опухоли, метастазы связи с выражением гамма-интерферона. Эта гипотеза подтверждается еще неопубликованные данные из последующие исследования, которые показали, сопоставимые результаты применительно к текущей. Лучевая терапия является одним из основных в терапии рака на сегодняшний день. В ходе процедуры процесса, высокие волны энергии, по прогнозам рост раковой опухоли, вызывающие повреждения в клетках и, в конце концов, приводят к сокращению опухоли. Однако, одним из недостатков лучевой терапии заключается в том, что эффективность ограничена только локализованные опухоли, а не метастатического рака, и сочетание иммунотерапии и лучевой терапии рекомендуется для лучшего posttreatments прогноз [33]. В этом исследовании, мы смотрим на потенциальный механизм пограничные службы Молдовы процедуры в снижении темпов роста 48 опухоли и повышение НК-клеточной опосредованной цитотоксичности в отношении ООО опухоли у мышей. Кроме того, результаты имеют также предположил, что пограничные службы Молдовы процедуры сокращения темпов метастазирования и повышения эффективности лучевой терапии, предоставляя дополнительную длину выживания для опухоль-подшипник мышей. J Tradit Chin Med. 2014 Apr;34(2):173-7. Inhibitive effect on apoptosis in splenic lymphocytes of mice pretreated with lingzhi (Ganoderma lucidum) spores. Wang Q, Huang Y, Wu B, Mei J, Zhang H, Qi B. To investigate how the pretreatment of mice with Ganoderma spores affected the apoptosis of their splenic lymphocytes induced by dexamethasone after 19 days treatment. METHODS: Sixty Kunming mice were randomly divided into six groups: blank control groupdrenched with normal saline; a drug control group drenched with 150 mg/mL Ganoderma spores; a model group treated with saline; a low dose group with 50 mg/mL Ganoderma spores; a moderate dose group with 100 mg/mL Ganoderma spores; and a high dose group with 150 mg/mL Ganoderma spores. The effect of Ganoderma spores on apoptosis in spleen lymphocytes was analyzed. All groups were treated for 19 days. On day 20, the model group and the 3 treatment groups were intraperitoneally injected dexamethasone to induce apoptosis. Splenic index and apoptosis indes were employed to measure cell apoptosis. RESULTS: The results showed that Ganoderma spores reduced the splenic index to different degrees in each group and the best effect was seen in the high dose group (P < 0.05).Terminal dexynucleotidyl transferase (TdT)mediated 2'-Deoxyuridine 5'-Triphosphate nick end labeling staining revealed that the apoptotic index in all groups administered Ganoderma spores differed significantly from the model group, and a dose-response was observed. Flow cytometric analysis indicated that spleen lymphocyte apoptosis in the model group was extensive. Each dose of Ganoderma spores inhibited dexamethasone-induced apoptosis in spleen lymphocytes, and a dose-response was observed as well. The highest dose of Ganoderma spores decreased Malondialdehyde content in serum induced by dexamethasone (P < 0.05). CONCLUSION: The findings imply that the pretreatment of the mice with Ganoderma spores could reduce the apoptosis rate induced by dexamethasone in their splenic lymphocytes. Тормозящее влияние на апоптоз лимфоцитов селезенки мышей подавить с линчжи (Ganoderma lucidum) споры. Чтобы выяснить, как до лечения мышей с Ganoderma спор повлиял на их апоптоз лимфоцитов селезенки, индуцированных дексаметазон после 19 дней лечения. Методы:Шестьдесят Куньмин мышей были случайным образом разделены на шесть групп: blank управления groupdrenched с физраствором; контроля над наркотиками группы облитое 150 мг/мл Ganoderma споры; модель группе относились к физиологическим раствором; в группе с низкой дозы 50 мг/мл Ganoderma споры; умеренная доза группы со 100 мг/мл Ganoderma споры; и высокой дозы группы с 150 мг/мл Ganoderma споры. Эффект Ganoderma споры на апоптоз лимфоцитов селезенки и анализируется. Все группы получали лечение в течение 19 дней. На 20-й день, модели группы и 3 группах лечения были внутрибрюшинно вводили дексаметазон, чтобы индуцировать апоптоз. Селезенки и индекса апоптоза indes были использованы для оценки апоптоза клеток. Результаты:Результаты показали, что Ganoderma споры снижение селезенки индекс в той или иной степени в каждой группы и лучший эффект наблюдался в высокой дозе группы (P < 0,05).Terminal dexynucleotidyl трансферазы (TdT), опосредованно 2 " -Deoxyuridine 5'-Трифосфата ник конце маркировки окрашивание выяснилось, что апоптотического индекса во всех группах вводят Ganoderma споры существенно отличалась от модели группы, и " доза-реакция наблюдалась. Поток cytometric анализ показал, что апоптоза лимфоцитов селезенки в модели группа была обширной. Каждая доза Ganoderma споры подавлял дексаметазон-индуцированный апоптоз лимфоцитов селезенки и " доза-реакция наблюдалась также. Высшие дозы Ganoderma споры уменьшилось содержание малонового диальдегида в сыворотке крови, индуцированной дексаметазон (P < 0,05). 49 Вывод:Выводы означают, что подготовка мышей с Ganoderma споры могут снизить апоптоза ставка индуцированных дексаметазон в их лимфоцитов селезенки. Int J Oncol. 2014 Jun;44(6):2009-15. doi: 10.3892/ijo.2014.2375. Epub 2014 Apr 9. The mushroom Ganoderma lucidum suppresses breast-to-lung cancer metastasis through the inhibition of pro-invasive genes. Loganathan J1, Jiang J1, Smith A1, Jedinak A1, Thyagarajan-Sahu A1, Sandusky GE2, Nakshatri H3, Sliva D 1. 1Cancer Research Laboratory, Methodist Research Institute, Indiana University Health, Indianapolis, IN 46202, USA. Breast cancer metastasis is one of the major reasons for the high morbidity and mortality of breast cancer patients. In spite of surgical interventions, chemotherapy, radiation therapy and targeted therapy, some patients are considering alternative therapies with herbal/natural products. In the present study, we evaluated a well-characterized extract from the medicinal mushroom Ganoderma lucidum (GLE) for its affects on tumor growth and breast-to-lung cancer metastasis. MDA-MB-231 human breast cancer cells were implanted into the mammary fat pads of nude mice. GLE (100 mg/kg/every other day) was administered to the mice by an oral gavage for 4 weeks, and tumor size was measured using microcalipers. Lung metastases were evaluated by hematoxylin and eosin (H&E) staining. Gene expression in MDA-MB-231 cells was determined by DNA microarray analysis and confirmed by quantitative PCR. Identified genes were silenced by siRNA, and cell migration was determined in Boyden chambers and by wound-healing assay. Although an oral administration of GLE only slightly suppressed the growth of large tumors, the same treatment significantly inhibited the number of breast-to-lung cancer metastases. GLE also downregulated the expression of genes associated with invasive behavior (HRAS, VIL2, S100A4, MCAM, I2PP2A and FN1) in MDA-MB-231 cells. Gene silencing of HRAS, VIL2, S100A4, I2PP2A and FN1 by siRNA suppressed migration of MDA-MB-231 cells. Our study suggests that an oral administration of GLE can inhibit breast-to-lung cancer metastases through the downregulation of genes responsible for cell invasiveness. The anti-metastatic benefits of GLE warrant further clinical studies. Гриба Ganoderma lucidum подавляет молочной железы-рак легкого, рак метастазы через ингибирование pro-инвазивные генов. Рак молочной железы, метастазы является одной из основных причин высокой заболеваемости и смертности больных раком молочной железы. Несмотря на хирургическое вмешательство, химиотерапия, лучевая терапия и таргетной терапии, некоторые пациенты рассматривают альтернативные методы лечения с травяными/натуральные продукты. В настоящем исследовании мы оценили хорошо характеризуется извлечения из лекарственного гриба Ganoderma lucidum (GLE) для влияет на рост опухоли молочной железы-рак легкого, рак метастазы. MDA-MB-231 клеток рака молочной железы человека были имплантированы в молочных жиров колодки голых мышей. GLE (100 мг/кг/каждый день) вводили мышам оральной питья в течение 4 недель, и размер опухоли измеряли с помощью microcalipers. Метастазы в легких были оценены затвердевает и эозином (H&E) изменение окраски. Экспрессия генов в MDA-MB-231 клеток определяли с помощью ДНК анализа микрочипов и подтверждены количественным ПЦР. Выявлены гены были замолчать siRNA, и миграция клеток определяли в Бойден палат и ранозаживляющее анализа. Несмотря на то, что пероральное введение GLE только слегка подавляет рост больших опухолях же лечение значительно ингибирует количество молочной железы-рак легких с метастазами. GLE также указанных экспрессию генов, связанных с инвазивными поведение (HRA, VIL2, S100A4, MCAM, I2PP2A и FN1) в MDA-MB-231 клеток. Сайленсинг генов из HRAS, VIL2, S100A4, I2PP2A и FN1 по siRNA подавлено миграции MDA-MB231 клеток. Наши исследования показали, что пероральный прием GLE может препятствовать молочной железы-рак легкого, рак метастазы через подавление генов, ответственных за сотовый инвазивности. В антиметастатических преимущества GLE дальнейших клинических исследований. PLoS One. 2014 Apr 4;9(4):e94040. doi: 10.1371/journal.pone.0094040. eCollection 2014. 50 The multifaceted effects of polysaccharides isolated from Dendrobium huoshanense on immune functions with the induction of interleukin-1 receptor antagonist (IL-1ra) in monocytes. Lin J1, Chang YJ2, Yang WB3, Yu AL4, Wong CH5. 1Institute of Biochemical Sciences, National Taiwan University, Taipei, Taiwan; Genomics Research Center, Academia Sinica, Taipei, Taiwan. 5Genomics Research Center, Academia Sinica, Taipei, Taiwan; The Scripps Research Institute, La Jolla, California, United States of America. Dendrobium huoshanense is a valuable and versatile Chinese herbal medicine with the anecdotal claims of cancer prevention and anti-inflammation. However, its immunological activities are limited to in vitro studies on a few cytokines and immune cell functions. First, we investigated the effects of polysaccharides isolated from DH (DH-PS) on inducing a panel of cytokines/chemokines in mice in vivo and human in vitro. We found that DH polysaccharides (DH-PS) induced TH1, TH2, inflammatory cytokines and chemokines in mouse in vivo and human cells in vitro. Secondly, we demonstrated that DH-PS expanded mouse splenocytes in vivo including CD4(+) T cells, CD8(+) T cells, B cells, NK cells, NKT cells, monocytes/macrophages, granulocytes and regulatory T cells. Notably, DH-PS induced an anti-inflammatory molecule, IL-1ra, in mouse and human immune cells, especially monocytes. The serum level of IL-1ra elicited by the injection of DH-PS was over 10 folds of IL-1β, suggesting that DH-PS-induced anti-inflammatory activities might over-ride the inflammatory ones mediated by IL-1β. The signaling pathways of DH-PSinduced IL-1ra production was shown to involve ERK/ELK, p38 MAPK, PI3K and NFκB. Finally, we observed that IL-1ra level induced by DH-PS was significantly higher than that by F3, a polysaccharide extract isolated from another popular Chinese herbal medicine, Ganoderma lucidum. These results indicated that DH-PS might have potential applications for ameliorating IL-1-induced pathogenic conditions. Многогранных последствий полисахариды изолированы от править huoshanense на функции иммунной системы с индукцией интерлейкин-1 антагонист рецепторов (IL-1ra) в моноцитов. Править huoshanense-это уникальный и универсальный китайской травяной медицины с анекдотическим претензии по профилактике рака и борьбе с воспалением. Однако, его иммунологические действия ограничиваются исследованиями in vitro на нескольких цитокинов и иммунной функции клеток. Во-первых, нами было изучено влияние полисахаридов изолированы от DH (DH-PS) на вызывая панели цитокинов/хемокинов в мышей in vivo и человека in vitro. Мы обнаружили, что DH полисахариды (DH-PS), вызванное TH1, TH2, воспалительных цитокинов и хемокинов в мышь в человеческих клеток in vivo и in vitro. Во-вторых, мы показали, что DHрасширенный мышь PS спленоциты in vivo в том числе CD4(+) т-клеток CD8(+) т-лимфоциты, влимфоциты, NK-клетки, NKT-клетки, моноциты/макрофаги, гранулоциты и регуляторных т-клеток. В частности, DH-PS индуцированных противовоспалительное молекулы IL-1ra, в мышиных и человеческих клетках иммунной системы, особенно моноцитов. В сывороточного уровня IL-1ra, выходящая в результате инъекции DH-PS более 10 складки IL-1b, предполагая, что DH-PSиндуцированной противовоспалительная активность может перекрывают воспалительных те, при посредничестве IL-1b. Сигнальные пути DH-PS-индуцированной IL-1ra производство было показано привлечь ЭРК/лося, p38 MAPK, и PI3K NFκB. Наконец, мы заметили, что IL-1ra уровень индуцированных DH-PS был значительно выше, чем по F3, полисахарид, экстракт изолирована от другой популярной китайской травяной медицины, Ganoderma lucidum. Эти результаты показали, что DH-PS может иметь потенциальные области применения для улучшения IL-1-индуцированной патогенных условиях. Dendrobium huoshanense (DH) is a versatile and valuable Chinese herbal medicine that has been used for a long period of time in China. The main bioactive molecules are polysaccharides and alkaloids. Since it is highly valuable but rare, strategies have been developed to enhance its growth and increases in polysaccharides production [29]. Using crude extracts of polysaccharides isolated from DH, we previously showed the in vitro induction of G-CSF and a few other cytokines in mouse splenocytes [30]. Our present study further extended the investigation to cover a comprehensive panel of cytokines and chemokines induced by DH-PS in immune cells of human in vitro and mouse in vivo. Our results clearly showed that the administration of DH-PS in mice modulated immune functions through modest activation and/or expansion of various immune cells including NK cells/activated NK cells, NKT cells/activated NKT cells, regulatory T 51 cells, B cells/activated B cells, CD4+ T cells/activated CD4+ T cells and CD8+ T cells/activated CD8+ T cells. This was accompanied by the production of Th1 (IL-12 p40), Th2 cytokines (IL-6 and IL-10), chemokines (KC, MCP-1, MIP-1β, RANTES) and inflammatory cytokines (TNF-α). We also provided the first evidence that many cytokines and chemokines were induced by DH-PS in human PBMC (IL-1α, IL-1β, IL-12 p40, IL-6, IL-10, TNF-α, MIP-1α GM-CSF and IL-1ra) and monocytes (IL-1α, IL-1β, IL-12 p40, IL-6, IL-10, TNF-α, RANTES, MCP1, MIP-1α, GM-CSF and IL-1ra). Notably, both IL-6 and IL-10 which have been shown to stimulate the production of IL-1ra were also induced by DH-PS. These findings were reminiscent of the potent immunemodulating effects induced by Ganoderma lucidum (Reishi), another popular Chinese herbal medicine. It was reported that polysaccharides isolated from Ganoderma lucidum (Reishi) enhanced the proliferation of Con A-stimulated mouse splenocytes [31]. We also showed that F3 stimulated the expansions of several types of immune cells including regulatory T cells [32]. But unlike DH-PS, F3 appeared to induce fewer regulatory T cells than DH-PS and larger amounts of IFN-r and IL-12 p70 which were below the detection limit upon the treatment with DH-PS, suggesting that DH-PS might exert greater anti-inflammatory activities. Taken together, DH-PS might exert its immune modulations not only by directly stimulating cytokine secretions but also through promoting the expansions and/or activations of immune cells. Another important anti-inflammatory molecule found to be induced by DH-PS was IL-1ra which was an acute phase protein [33] and often elevated in the peripheral blood of patients with sepsis [34], chronic rheumatic diseases [35], [36], [37] and following surgical trauma [38], [39]. The beneficial effects of IL-1ra on inflammatory disorders had been demonstrated in many experimental animal models of disease by administration of recombinant IL-1ra [26], [40], [41]. In fact, recombinant IL-1ra had been in clinical use for sepsis syndrome [42], [43] and rheumatoid arthritis. Many molecules including cytokines (IL-6 and IL-10, for example) and β-glucans [26] which were the backbone components of the main bioactive polysaccharides of G. lucidum were reported to induce IL-1ra production. Here, we demonstrated for the first time that DH-PS induced the production of IL-1ra both in vivo and in vitro. The rapid induction of IL-1ra by DH-PS in both mouse and human suggested a direct stimulation by DH-PS. Many types of immune cells were known to secrete IL-1ra including macrophages, mast cells, neutrophils and monocytes, and our results showed that DH-PS stimulated the production of IL-1ra in monocytes but not neutrophils. We also found that unlike in vitro cell experiments, the level of IL-1ra in sera declined rapidly at 18 hrs after the treatment of DH-PS. This is consistent with the known short biological half-life of IL-1ra in vivo with rapid renal clearance and excretion in the urine [44]. In addition, DH-PS promoted THP-1 cell expansions dose-dependently, suggesting that DH-PS might also stimulate the proliferation of cells. Since certain glycans were the ligands for Toll-Like Receptors (TLRs) which were important for the activation of monocytes and involved in the transcription of IL-1ra [25], [45], it will be interesting to delineate whether and which TLRs are the receptors for DH-PS in the future. There were several intracellular signaling mechanism reported to be involved in the regulation of IL-1ra expression. For examples, NF-κB and C/EBP had been shown to be involved in the expression of IL-1ra gene in hepatocytes [33], and MAPK (ERK1/ERK2) was associated with the IL-1ra induction stimulated by LPS [46], [47]. Serine/threonine phosphatases also participated in IL-1ra production when monocytes were contacted by stimulated T cells [48]. In addition, STAT6 was involved in IL-4 mediated IL-1ra production [49] and PI3K was reported to be essential for the IFN-β-mediated IL-1ra production [50]. Our results suggested that ERK/ELK, p38 MAPK, PI3K and NF-κB were involved in DH-PS mediated production of IL-1ra since their specific inhibitors decreased the expression of IL-1ra mRNA and the IL-1ra production in protein level. Our results suggested several possible signaling pathways involved in DH-PS-induced IL-1ra secretion. Ganoderma lucidum (Reishi) has been known for its benefits in human health with the possession of antitumor and immune-modulating activities [51], [52], [53], [54]. The polysaccharides isolated from Reishi were composed of a branched (1->6)-β-D-glucan moiety. The main structure of polysaccharides isolated from DHPS had been confirmed as acetylated glucomannan [30] which is different from Reishi. The effects of Reishi on the immune system had been attributed to cytokine inductions [55]. We compared the cytokine profiles of human monocytes cultured with DH-PS or F3 and found that both DH-PS and F3 induced several cytokines and chemokines including IL-1β, TNF-α, GM-CSF, IL-12 p40, RANTES, MCP-1, MIP-1α, IL-6 and IL10. However, IL-12 p70 and IFN-γ were induced only by F3, suggesting a more TH1 bias activity of F3 compared with DH-PS since IL-12 p70 and IFN-γ had been reported to contribute to the differentiation of type 1 T helper cell [56]. The ability of F3 to induce the production of IL-1ra has also been reported [27]. 52 However, we found that DH-PS induced higher IL-1ra and lower IL-1β than F3 in human CD14+ cells and THP1 cells Collectively, our findings of lower levels of IL-12 p70, IFN-γ, IL-1β, larger amounts of IL-1ra and more regulatory T cells induced by DH-PS suggested that DH-PS might possess better anti-inflammatory activities than F3. Thus, DH-PS might be more potent than F3 for alleviation of inflammatory disorders. Since the main structure of DH-PS had been reported as acetylated glucomannan, it will be worthwhile to further identify the specific glycan moieties responsible for its anti-inflammatory effects and its therapeutic potential in certain immune disease models. Править huoshanense (DH) - это универсальный и ценные китайской травяной медицины, который использовался на протяжении длительного периода времени в Китае. Основные биологически активных молекул полисахаридов и алкалоидов. Поскольку это весьма ценный, но редкие, были разработаны стратегии для повышения его росту и увеличению производства полисахаридов [29]. С помощью грубой экстракты полисахариды изолированы от DH, ранее нами было показано in vitro индукции G-CSF и несколько других цитокинов в мышь спленоциты [30]. Настоящее исследование продлено расследование с целью охвата широкого панели цитокинов и хемокинов, индуцированных DH-PS в иммунных клеток человека in vitro и мыши in vivo. Наши результаты ясно показали, что администрация DH-мышей PS модулированных иммунной функции через свои скромные активации и/или расширение различных иммунных клеток, в том числе NK-клеток/активированных киллеров, NKT-клеток/активирован NKT-клетки, регуляторных т-клеток, в-клеток и активации в-лимфоцитов, CD4+ т-клеток и активации лимфоцитов CD4+ т-клеток и CD8+ т-клеток и активации CD8+ т-клеток. Это сопровождается продукции Th1 (IL-12 р40), цитокинов Th2 (IL-6 и IL-10), хемокинов (KC, MCP-1, MIP-1b, RANTES) и противовоспалительных цитокинов (TNF-a). Мы также представил первые доказательства того, что многие цитокины и хемокины были вызваны DH-PS в человеческой МКПК (IL-1A, IL-1b, IL-12 p40, IL-6, IL-10, TNF-a, MIP-1A GM-CSF и IL-1ra) и моноцитов (IL-1A, IL-1b, IL-12 p40, IL-6, IL-10, TNF-a, RANTES, MCP-1, MIP-1A", " GM-CSF и ил-1ra). Примечательно, что как IL-6 и IL-10, которые были показаны по стимулированию производства IL-1ra были также индуцированные DH-PS. Эти выводы были напоминает мощный иммуномодулирующий эффекты, вызванные Ganoderma lucidum (Рейши), другой популярной китайской травяной медицины. Сообщалось, что полисахариды изолированы от Ganoderma lucidum (Рейши) способствовало распространению Con-стимулированной мыши спленоциты [31]. Мы также показали, что F3 стимулировал расширение несколько типов иммунных клеток, в том числе регуляторных т-клеток [32]. Но в отличие от DH-PS, F3, казалось, вызывать меньше регуляторных т-клеток, чем DH-л.с. и более крупные суммы ИФН-r и IL-12 p70, которые были ниже предела обнаружения на лечение с DH-PS, предполагая, что DH-PS может оказать большее противовоспалительная активность. Взятые вместе, DH-PS может оказать иммунной модуляции не только напрямую стимулируя секрецию цитокинов, но и путем поощрения расширения и/или активации иммунных клеток. Еще одним важным противовоспалительное молекулы вызванных DH-PS был IL-1ra, который был белков острой фазы [33] и часто поднимается в периферической крови больных с сепсисом [34], хронические ревматические болезни[35], [36], [37] и после хирургической травмы [38], [39]. Благотворные эффекты IL-1ra на воспалительного характера, как это было продемонстрировано во многих экспериментах на животных моделях заболеваний администрацией рекомбинантного IL1ra[26], [40], [41]. В самом деле, рекомбинантный IL-1ra были в клинической практике для сепсис, синдром [42], [43] и ревматоидный артрит. Многие молекулы, в том числе цитокинов (IL-6 и IL-10, например), и бета-глюканы [26], которые были системообразующих компонентов основных биологически активных полисахаридов G. lucidum были зарегистрированы, чтобы побудить IL-1ra производства. Здесь мы показали первый раз, что DH-PS индуцированной продукции IL-1ra как in vivo и in vitro. Быстрое всасывание IL-1ra DH-PS как мышь и человек предложил прямую стимуляцию DHPS. Многие типы иммунных клеток были известны для выработки IL-1ra в том числе и макрофагов, тучных клеток, нейтрофилов и моноцитов, и наши результаты показали, что DH-PS стимулированной продукции IL-1ra в моноцитов, но не нейтрофилов. Мы также обнаружили, что в отличие от in vitro клеток экспериментов, уровень IL-1ra в сыворотке крови быстро снижается на 18 часов после обработки DH-PS. Это согласуется с известным короткий биологический период полувыведения IL-1ra in vivo с быстрым почечного клиренса и экскреции с мочой [44]. Кроме того, DH-PS способствовало THP-1 ячейка расширения доза-зависимо, предполагая, что DH-PS может также стимулировать 53 пролиферацию клеток. Поскольку некоторые углеводы были лигандов Toll-подобные рецепторы (TLRs), которые были важны для активации моноцитов и участвующих в транскрипции IL-1ra [25], [45], это будет интересно определить, какие TLRs являются рецепторы для DH-PS в будущем. Там были несколько внутриклеточной сигнализации механизм сообщалось, участвующих в регуляции IL-1ra выражение. Для примеров, NF-κB и C/EBP было показано, участвующих в экспрессии IL-1ra Гена в гепатоцитах [33], и MAPK (ERK1/ERK2) был связан с IL-1ra индукции стимулируется ЛПС [46], [47]. Серин/треонин фосфатаз также участвовал в IL-1ra производства, когда моноцитов связались by stimulated т-клеток [48]. Кроме того, STAT6 был вовлечен в IL-4, опосредованная IL-1ra производства [49] и PI3K сообщили, что необходимо для ИФН-бета-опосредованной IL-1ra производства [50]. Наши результаты позволяют предположить, что ЭРК/лося, p38 MAPK, PI3K и NF-κB были вовлечены в DH-PS опосредованное продукции IL-1ra с их специфическими ингибиторами снизилась экспрессии IL-1ra мРНК и IL-1ra производства на уровне белка. Наши результаты позволяют предположить несколько возможных сигнальных путей, вовлеченных в DH-PS-индуцированной IL-1ra секреции. Ganoderma lucidum (Рейши) был известен своей выгоды в области здравоохранения, с обладанием противоопухолевым и иммуномодулирующим деятельности[51], [52], [53], [54]. Полисахаридов, изолированные от Рейши были в составе разветвленной (1->6)-бета-D-глюкана части. Основная структура полисахаридов изолированы от DH-PS был утвержден в качестве ацетилированного глюкоманнан [30], который отличается от Рейши. Последствия Рейши на иммунную систему, было отнесено к цитокинов индукции [55]. Мы по сравнению цитокинов профили моноцитов человека культурен с DH-PS " или " F3 " и обнаружили, что оба DH-PS и F3, вынудили ряд цитокинов и хемокинов в том числе ил-1b, TNF-a, GM-CSF, IL-12 p40, RANTES, MCP-1, MIP-1A, IL-6 и IL-10. Однако, IL12 p70 и гамма-интерферона были вызваны только F3, что говорит о более TH1 смещения активности по сравнению с F3 DH-PS с ил-12 p70 и ИФН-G, как сообщалось, был способствуют дифференцировке т-хелперов 1 типа клеток [56]. Способность F3, чтобы индуцировать продукцию IL-1ra сообщается также [27]. Однако, мы обнаружили, что DH-PS индуцированных выше, IL-1ra и ниже-ил-1b, чем F3 в человеческой CD14+ клеток и THP-1 клетки коллективно, наши выводы более низкие уровни ил-12 p70, гамма-интерферона, IL-1b, большего количества IL-1ra и более регуляторных т-клеток, индуцированных DH-PS предположил, что DH-PS может обладать лучше, противовоспалительная активность, чем F3. Таким образом, DH-PS может быть более мощным, чем F3 для снижения воспалительных заболеваний. Поскольку основная структура DH-PS было зарегистрировано как ацетилированный глюкоманнан, представляется целесообразным, чтобы в дальнейшем определить конкретные glycan метаболитов, ответственных за противовоспалительное действие и ее терапевтический потенциал в некоторых иммунных заболеваний моделей. Appl Microbiol Biotechnol. 2014 Feb 28. [Epub ahead of print] Production and functional characterization of a novel fungal immunomodulatory protein FIP-SN15 shuffled from two genes of Ganoderma species. Cong WR1, Xu H, Liu Y, Li QZ, Li W, Zhou XW. 1Plant Biotechnology Research Center, Shanghai Key Laboratory of Agro-biotechnology, Key Laboratory of Urban Agriculture (South) Ministry of Agriculture, School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai, 200240, People's Republic of China. Fungal immunomodulatory protein (FIP), extracted from higher basidiomycetes, is a kind of small molecule protein with extensive biological functions, including anti-tumor and anti-allergy, stimulating immune cells to produce a variety of cytokines, etc. Compared with FIP-glu, FIP-SN15, a novel gene shuffled from the genes of Ganoderma sinensis and Ganoderma lucidum FIP, was used as the object in this study. Based on the construction of prokaryotic expression vectors, both pET30a-FIP-glu and pET30a-FIP-SN15 were expressed in Escherichia coli. Then the recombinant proteins are respectively analyzed by Western blot, Q-TOF MS, and bioinformatics techniques. Finally, effects of reFIPs on cell cycle and apoptosis of human glioblastoma cell line U-251 MG were studied by fluorescence activated cell sorting (FACS). The results showed that the recombinant proteins FIP-SN15 and FIP-glu could be successfully expressed in E. coli, the yield of which was 35.95 and 36.67 mg/L, respectively. The recombinant protein FIP-SN15 consisted of 54 111 amino acids, and four peptides were identified by Q-TOF MS with a coverage of 91.9 %. The secondary and tertiary structure of FIP-SN15 were also predicted by bioinformatics method which suggest that reFIPSN15 was a new member of FIPs family. FACS analysis showed that 10 μg/mL FIP-SN15 and FIP-glu could induce U-251 MG cells apoptosis, the apoptotic rates were increased by 6.03 and 22.01 %, respectively. The results of reFIPs on U-251 MG cell cycle indicated that reFIPs could inhibit cell cycle progression by retardation of G1/S transition. The efforts in this assay would lay the foundation for further development of reFIPs products and research on the anti-tumor mechanisms of FIP-SN15. Производство и функциональной характеристикой романа грибковых иммуномодулирующее белка ФИП-SN15 перемешиваются из двух генов, Ganoderma видов. Грибковые иммуномодулирующее белка (ФИП), извлеченные из высших базидиальных грибов, является своего рода маленькая молекула белка с обширные биологические функции, в том числе и противоопухолевым и борьбе с аллергией, стимулирующие иммунные клетки для производства различных цитокинов и др. По сравнению с ФИП-glu), FIP-SN15, роман Гена перемешиваются от гены Ganoderma sinensis и Ganoderma lucidum ФИП, был использован в качестве объекта данного исследования. Основываясь на строительство прокариотических векторов экспрессии, как pET30aФИП-glu и pET30a-ФИП-SN15 были выражены в клетках Escherichia coli. Тогда рекомбинантных белков соответственно проанализированы методом вестерн-блот, Q-TOF-MS, и методы биоинформатики. Наконец, эффекты reFIPs на клеточного цикла и апоптоза человеческих клеток глиобластомы линии U251 мг были изучены с помощью флуоресцентного активированный сортировки клеток (FACS). Результаты показали, что рекомбинантных белков ФИП-SN15 и ФИП-glu с успехом может быть выражено в E. coli, доходность которых был 35.95 и 36.67 мг/л, соответственно. Рекомбинантный белок ФИП-SN15 состояла из 111 аминокислот, и четыре пептиды, были определены Q-TOF-MS с покрытием 91.9 %. Вторичная и третичная структура ФИП-SN15 было предсказано по биоинформатике метод, который позволяет предположить, что reFIP-SN15 был новый член FIPs семьи. FACS анализ показал, что 10 мкг/мл ФИП-SN15 и ФИП-glu могло побудить U-251 мг апоптоза клеток, апоптотической цены были увеличены на 6.03 и 22.01 %, соответственно. Результаты reFIPs на U-251 мг клеточного цикла показали, что reFIPs могут препятствовать клеточного цикла прогрессии замедление G1/S transition. Усилия в этом анализе должна заложить основу для дальнейшего развития reFIPs продукции и исследование противоопухолевой механизмы ФИП-SN15. Crit Rev Biotechnol. 2014 Mar 24. [Epub ahead of print] Therapeutic potential of culinary-medicinal mushrooms for the management of neurodegenerative diseases: diversity, metabolite, and mechanism. Phan CW1, David P, Naidu M, Wong KH, Sabaratnam V. 1Mushroom Research Centre, Institute of Biological Sciences, Faculty of Science, University of Malaya , Kuala Lumpur , Malaysia . Mushrooms have long been used not only as food but also for the treatment of various ailments. Although at its infancy, accumulated evidence suggested that culinary-medicinal mushrooms may play an important role in the prevention of many age-associated neurological dysfunctions, including Alzheimer's and Parkinson's diseases. Therefore, efforts have been devoted to a search for more mushroom species that may improve memory and cognition functions. Such mushrooms include Hericium erinaceus, Ganoderma lucidum, Sarcodon spp., Antrodia camphorata, Pleurotus giganteus, Lignosus rhinocerotis, Grifola frondosa, and many more. Here, we review over 20 different brain-improving culinary-medicinal mushrooms and at least 80 different bioactive secondary metabolites isolated from them. The mushrooms (either extracts from basidiocarps/mycelia or isolated compounds) reduced beta amyloid-induced neurotoxicity and had antiacetylcholinesterase, neurite outgrowth stimulation, nerve growth factor (NGF) synthesis, neuroprotective, antioxidant, and anti-(neuro)inflammatory effects. The in vitro and in vivo studies on the molecular mechanisms responsible for the bioactive effects of mushrooms are also discussed. Mushrooms can be considered as useful therapeutic agents in the management and/or treatment of neurodegeneration diseases. However, this review focuses on in vitro evidence and clinical trials with humans are needed. Терапевтический потенциал кулинарного-лекарственные грибы для управления нейродегенеративных заболеваний: разнообразие, метаболит, и механизм. Аннотация грибы уже давно используются не только как пищу, но и для лечения различных недугов. 55 Хотя и в зачаточном состоянии и накопленные данные, указывающие, что кулинарные-лекарственные грибы могут играть важную роль в предотвращении многих связанных с возрастом неврологические дисфункции, в том числе болезни Альцгеймера и Паркинсона и других заболеваний. Поэтому усилия были посвящены поиску более видов грибов, которые могут улучшить памяти и когнитивных функций. Такие грибы, включают Hericium erinaceus, Ganoderma lucidum, Sarcodon spp., Antrodia camphorata, Pleurotus giganteus, Lignosus rhinocerotis, Grifola frondosa), и многое другое. Здесь мы рассматриваем более 20 различных мозг-улучшение кулинарии-лекарственные грибы, и, по крайней мере, 80 различных биологически активных вторичных метаболитов изолирован от них. Грибы (либо выписки из basidiocarps/мицелием или выделенных соединений) Сокращенное бета-амилоидаиндуцированной нейротоксичность и имел анти-ацетилхолинэстеразы, рост нейритов стимуляции, фактор роста нервов (NGF) синтез, нейропротекторный, антиоксидантное, и анти(нервно)воспалительные явления. In vitro и in vivo исследования молекулярных механизмов, ответственных за эффекты биологически активных грибов, а также обсуждается. Грибы могут рассматриваться как полезные лечебные средства в управлении и/или лечения нейродегенеративные заболевания. Однако, в обзоре рассмотрены in vitro доказательств и клинических испытаний, необходим человек. Int J Biol Macromol. 2014 Apr;65:431-5. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2014.01.067. Epub 2014 Feb 11. The adjuvanticity of Ganoderma lucidum polysaccharide for Newcastle disease vaccine. Zhang P1, Ding R2, Jiang S3, Ji L2, Pan M2, Liu L2, Zhang W2, Gao X2, Huang W2, Zhang G2, Peng L2, Ji H2. The adjuvant activity of GLP was investigated in vitro and in vivo. In vitro experiment, the effects of GLP on chicken peripheral lymphocytes proliferation were compared by MTT assay. The results showed that GLP could significantly enhance lymphocytes proliferation singly or synergistically with ConA. The interferongamma (IFN-γ) mRNA levels of chicken peripheral lymphocytes stimulated by GLP synergistically with ConA were measured using fluorescent quantitative PCR. The results showed that GLP could promote interferon-γ mRNA levels in peripheral lymphocytes. In vivo experiment, 175 14-day-old chickens were randomly divided into 7 groups. The chickens except blank control (BC) group were vaccinated with Newcastle disease vaccine, repeated vaccination at 28 days old. At the same time of the first vaccination, the chickens in experimental groups were orally administrated with 5 different doses of GLP respectively, whereas vaccination control (VC) and BC groups were treated with physiological saline, once a day for three successive days. On Day 7, 14, 21 and 28 after the first vaccination, the peripheral lymphocytes proliferation and serum ND antibody titer were determined. The results showed that GLP could significantly promote lymphocyte proliferation and enhance serum antibody titer. The results indicated that GLP may be a novel immunomodulator. Добавление Ganoderma lucidum полисахарид для вакцина против болезни Ньюкасла. На вспомогательную деятельность по GLP была исследована in vitro и in vivo. Эксперимент In vitro эффекты на GLP курица периферических лимфоцитов распространения сравнивались с помощью МТТ-теста. Результаты показали, что НЛП можно было бы значительно повысить пролиферации лимфоцитов, отдельно или совместно с Кона. Интерферон-гамма (IFN-G) уровни мРНК курицы периферических лимфоцитов стимулируется GLP синергически с Кона были измерены с помощью флуоресцентных количественный ПЦР-тест. Результаты показали, что GLP могут способствовать интерферон-гамма уровни мРНК в периферических лимфоцитов. В экспериментах in vivo, 175 14 суточных цыплят были случайным образом разделены на 7 групп. Куры, кроме пустой элемент управления (BC) группы были вакцинированы вакцина против болезни Ньюкасла, повторная вакцинация в 28 дней. В то же время первой вакцинации, цыплят опытных групп были перорально вводят 5 различных дозировок GLP соответственно, принимая во внимание, что вакцинация управления (VC) и BC группы рассматривались с физиологическим раствором, один раз в день в течение трех последовательных дней. На день 7, 14, 21 и 28 после первой вакцинации, периферических лимфоцитов и распространения сыворотке ND титр антител определяли. Результаты показали, что GLP могут существенно стимулировать пролиферацию лимфоцитов и повышение титра антител в сыворотке. Результаты показали, что GLP может быть роман иммуномодулятор. 56 Cell Physiol Biochem. 2014;33(2):289-99. doi: 10.1159/000356669. Epub 2014 Jan 31. Protection against lung cancer patient plasma-induced lymphocyte suppression by Ganoderma lucidum polysaccharides. Sun LX1, Li WD, Lin ZB, Duan XS, Li XF, Yang N, Lan TF, Li M, Sun Y, Yu M, Lu J. 1The Affiliated Hospital of Chengde Medical College, Chengde, China. This study was conducted to determine the potential of Ganoderma lucidum polysaccharides (Gl-PS) in protection against lung cancer patient plasma-induced suppression of lymphocytes. Lung cancer is a major cause of disease and loss of life in the United States and worldwide. Cancer cells release immunosuppressive mediators, such as PGE2, TGF-β, IL-10, and VEGF, to inhibit the immune response to escape from immune surveillance. Gl-PS has been shown to counteract this immune inhibition in an animal cell culture model, and thus to facilitate tumor control. The present study explored whether or not such an effect could also be demonstrated in human lung cancer patients. METHODS: Immunofluorescence, flow cytometry, MTT, immunocytochemistry, and western blot analysis were used to assess lymphocyte activation with PHA. RESULTS: The plasma of lung cancer patients suppressed proliferation, CD69 expression, and perforin and granzyme B production in lymphocytes upon activation by PHA, effects that were partially of fully reversed by Gl-PS. CONCLUSION: Lung cancer patient plasma-induced suppression of lymphocyte activation by phytohemagglutinin may be antagonized fully or partially by Gl-PS, an observation suggesting the potential of Gl-PS in cancer therapy. Защита от рака легких пациента плазменного лимфоцитов подавления Ganoderma lucidum полисахариды. Это исследование было проведено, чтобы определить потенциал Ganoderma lucidum полисахариды (Gl-PS) в защите от рака легких пациента плазменного борьбе лимфоцитов. Рак легких является основной причиной заболеваний и гибели людей в Соединенных Штатах и во всем мире. Раковые клетки релиз иммуносупрессивной посредников, таких как pge2 и др, TGF-B, IL-10, и VEGF, подавлять иммунный ответ, чтобы спастись от иммунного надзора. Gl-PS, как было показано, чтобы противодействовать этой угнетение иммунной в животной клетки, модели культуры, и, следовательно, способствовать опухоль управления. В настоящем исследовании были изучены ли такой эффект мог бы также быть продемонстрирован у человека рак легких пациентов. Методы:Иммунофлюоресценции, проточная цитометрия, МТТ, иммуноцитохимии, и вестерн-блотанализа были использованы для оценки активации лимфоцитов с PHA. Результаты:В плазме крови больных раком легкого подавлено распространения, CD69 выражение, и perforin и granzyme B производства при активации лимфоцитов на ФГА, эффекты, которые были частично или полностью отменено, Gl-PS Вывод:Рак легких пациента плазменного борьбе активации лимфоцитов при phytohemagglutinin может быть разделяло полностью или частично Gl-PS, наблюдения, предполагая, что потенциал Gl-PS в терапии рака. Int J Food Sci Nutr. 2014 Feb;65(1):42-7. doi: 10.3109/09.2013.832173. Epub 2013 Sep 11. A detailed comparative study between chemical and bioactive properties of Ganoderma lucidum from different origins. Stojković DS1, Barros L, Calhelha RC, Glamočlija J, Cirić A, van Griensven LJ, Soković M, Ferreira IC. 1Department of Plant Physiology, Institute for Biological Research "Siniša Stanković", University of Belgrade , Belgrade , Serbia . A detailed comparative study on chemical and bioactive properties of wild and cultivated Ganoderma lucidum from Serbia (GS) and China (GCN) was performed. This species was chosen because of its worldwide use as medicinal mushroom. Higher amounts of sugars were found in GS, while higher amounts of organic acids were recorded in GCN. Unsaturated fatty acids predominated over saturated fatty acids. GCN revealed higher antioxidant activity, while GS exhibited inhibitory potential against human breast and cervical 57 carcinoma cell lines. No cytotoxicity in non-tumour liver primary cell culture was observed for the different samples. Both samples possessed antibacterial and antifungal activities, in some cases even better than the standard antimicrobial drugs. This is the first study reporting a comparison of chemical compounds and bioactivity of G. lucidum samples from different origins. Подробное сравнительное исследование между химически и биологически активные свойства Ganoderma lucidum из различных источников. Подробное сравнительное исследование химического и биоактивных свойств дикорастущих и культивируемых Ganoderma lucidum из Сербии (GS) и Китай (ГЦН) была выполнена. Этот вид был выбран потому, что во всем мире используют в качестве лекарственного гриба. Большее количество Сахаров были найдены в секторе, в то время как большее количество органических кислот были записаны в GCN. Ненасыщенные жирные кислоты преобладали над насыщенных жирных кислот. GCN показали повышение антиоксидантной активностью, в то время как ГЦБ выставлены ингибиторного потенциала против человеческой груди и рака шейки матки клеточных линий. Нет цитотоксичность в non-опухоли печени первичной культуре клеток наблюдалось для разных образцов. Оба образцы обладали антибактериальной и противогрибковой активностью, в некоторых случаях даже лучше, чем стандартный антимикробных препаратов. Это первое исследование, отчетности, сравнение химического состава и биологической активности G. lucidum образцов из различных источников. Innate Immun. 2014 Apr;20(3):301-11. doi: 10.1171753425913491789. Epub 2013 Jun 26. Ganoderma lucidum stimulates NK cell cytotoxicity by inducing NKG2D/NCR activation and secretion of perforin and granulysin. Chang CJ1, Chen YY, Lu CC, Lin CS, Martel J, Tsai SH, Ko YF, Huang TT, Ojcius DM, Young JD, Lai HC. Ganoderma lucidum (G. lucidum) is a medicinal mushroom long used in Asia as a folk remedy to promote health and longevity. Recent studies indicate that G. lucidum activates NK cells, but the molecular mechanism underlying this effect has not been studied so far. To address this question, we prepared a water extract of G. lucidum and examined its effect on NK cells. We observed that G. lucidum treatment increases NK cell cytotoxicity by stimulating secretion of perforin and granulysin. The mechanism of activation involves an increased expression of NKG2D and natural cytotoxicity receptors (NCRs), as well as increased phosphorylation of intracellular MAPKs. Our results indicate that G. lucidum induces NK cell cytotoxicity against various cancer cell lines by activating NKG2D/NCR receptors and MAPK signaling pathways, which together culminate in exocytosis of perforin and granulysin. These observations provide a cellular and molecular mechanism to account for the reported anticancer effects of G. lucidum extracts in humans. Ganoderma lucidum стимулирует НК-клеточной цитотоксичности, побуждая NKG2D/NCR активации и секрецию perforin и granulysin Ganoderma lucidum (G. lucidum) - лекарственный гриб и использовался в Азии как народное средство для укрепления здоровья и долголетия. Последние исследования показывают, что G. lucidum активирует NK-клеток, но молекулярный механизм, лежащий в основе этого эффект не изучен до сих пор. Для ответа на этот вопрос мы подготовили водный экстракт G. lucidum и осмотрел ее влияние на NK-клеток. Мы наблюдали, что G. lucidum лечения увеличивается НК-клеточной цитотоксичности, стимулируя секрецию perforin и granulysin. Механизм активации предполагает повышение экспрессии NKG2D и естественной цитотоксичности рецепторов (NCR), а также увеличение внутриклеточного фосфорилирования MAPKs. Наши результаты указывают на то, что G. lucidum индуцирует NKлимфоцитов цитотоксичность в отношении различных клеточных линий рака путем активации NKG2D/NCR рецепторов и MAPK сигнальных путей, которые вместе кульминацией экзоцитоза perforin и granulysin. Эти наблюдения дают клеточные и молекулярные механизмы для учета сообщили противоопухолевый эффект, G. lucidum экстрактов в организме человека. Carbohydr Polym. 2014 Mar 15;103:319-24. do6/j.carbpol.2013.12.044. Epub 2013 Dec 21. 58 The polysaccharides from fermented Ganoderma lucidum mycelia induced miRNAs regulation in suppressed HepG2 cells. Shen J1, Park HS2, Xia YM3, Kim GS2, Cui SW4. 1State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Chemical Engineering, Jiangnan University, 1800 Lihu Avenue, Wuxi, Jiangsu 214122, China. 2College of Veterinary Medicine, Gyeongsang National University, Jinju, Gyeongnam 660-701, Republic of Korea. 4Guelph Food Research Centre, Agriculture and Agri-Food Canada, Guelph, ON N1G 5C9, Canada. Medicinal mushroom polysaccharides such as Ganoderma lucidum polysaccharides (GLPs) have been commonly hypothesized to suppress tumor cells proliferation through immune effects. To verify this hypothesis through investigating comprehensive miRNA expression in polysaccharide treated cancer cells, an anticancer mycelia GLP was employed to disclose miRNA differential expression of human hepatocarcinoma cells (HepG2), by using a miRNA microarray assay based on Sanger miR-Base Release 16. The experiment and the analysis result indicates that among the 61 differential expressed miRNAs (p ≤ 0.01), 17 of them were regulated significantly. GLP can inhibit HepG2 cells directly through regulation of hepatocarcinoma genes. A newly found miR-3131 exhibited the strongest upregulation (92-folds, Log2 = 6.53, p = 0.000016). The miRNAs responded synergistically in both hepatocarcinoma and immune-related aspects. Полисахариды из сброженных Ganoderma lucidum грибница, индуцированных произошедшие регулирования в подавлено клеток HepG2. Лекарственный гриб полисахариды, такие как Ganoderma lucidum полисахариды (Глпс) были широко предположили, для подавления опухолевых клеток посредством иммунной эффекты. Для проверки этой гипотезы путем всестороннего расследования мирна выражение в полисахарид лечить раковые клетки, противоопухолевое мицелием (GLP работал раскрывать мирна дифференциальным выражением человеческого гепатокарциномой клеток (HepG2), с помощью мирна микрочипов на основе анализа Sanger " мир " -базовый релиз 16. Эксперимент и анализ результатов показывает, что среди 61 дифференциальных выразил микро-РНК (p = < 0.01), причем 17 из них были урегулированы значительно. GLP могут препятствовать клеток HepG2 непосредственно через регулирование гепатокарциномой генов. Недавно нашел мир-3131 выставил сильнейший регуляция (92-складки, Log2 = 6.53, p = 0.000016). В микро-РНК ответил синергетически, в обоих гепатокарциномой и иммунной аспектам. Int J Nanomedicine. 2014;9:109-19. doi: 10.2147/IJN.S54796. Epub 2013 Dec 19. Triterpene-loaded microemulsion using Coix lacryma-jobi seed extract as oil phase for enhanced antitumor efficacy: preparation and in vivo evaluation. Qu D, He J, Liu C, Zhou J, Chen Y. Key Laboratory of New Drug Delivery System of Chinese Materia Medica, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine, Jiangsu, People's Republic of China. Ganoderma lucidum triterpene-loaded microemulsions (TMEs) using Coix lacryma-jobi (adlay) seed oil as oil phase were prepared, characterized, and evaluated for enhanced antitumor activity. Ternary phase diagrams for the TMEs were constructed and the optimal preparation was developed. Transmission electron microscopy and dynamic light scattering showed that this formulation had a well defined spherical shape, a homogeneous distribution, a small size, and a narrow polydispersity index. The drug-loading rate was determined to be 9.87% by ultraviolet spectrophotometry, and acceptable stability under various stimulations in vitro was confirmed. Importantly, the TME formulation showed a significantly greater antiproliferative effect towards human lung carcinoma (A549) cells and murine lung tumor (Lewis) cells in comparison with suspension formulations containing triterpene and adlay seed oil as a positive control. The half-maximal inhibitory concentration of the TMEs was about 0.62 mg crude drug per mL, being 2.5-fold improved relative to that of the corresponding suspension formulation, but no significant cytotoxicity was observed for the bare microemulsion in A549 cells and Lewis cells. In vivo, the TME formulation showed markedly enhanced antitumor efficacy in a xenograft model of Lewis lung cancer after intragastric administration. Compared with cyclophosphamide, the TME formulation showed similar antitumor activity 59 but less general toxicity. These results indicate the feasibility of using a microemulsion to increase the solubility of triterpene and adlay. TMEs hold promise as an efficient drug delivery system for the treatment of lung cancer. Тритерпеновые загружены микроэмульсии, используя жи lacryma-jobi семян экстракт, как масляной фазы для повышения противоопухолевой эффективности: подготовка и in vivo оценки. Ganoderma lucidum тритерпеновые загружены микроэмульсии (Этс) с помощью жи lacryma-jobi (adlay) масло как масло этапа были подготовлены, характеризуется и оценивается для повышения противоопухолевой активностью. Фазовые диаграммы тройных для Этс были построены и оптимальная подготовка была разработана. Просвечивающей электронной микроскопии и динамического рассеяния света показали, что этот препарат был также определен сферической формы, однородное распределение, небольшой размер и узкую полидисперсности индекса. Препарат-Скорость загрузки, как было определено 9.87% ультрафиолетового спектрофотометрии и приемлемой стабильности в различных стимуляции in vitro, были подтверждены. Главное, TME формулировка показали значительно большую, антипролиферативным действием в отношении прав рака легких (А549) мышиные клетки и опухоли легкого (Льюис) клеток в сравнении с подвеской составы, содержащие тритерпеновые и adlay масло семян в качестве положительного контроля. Половина максимального ингибирующая концентрация Этс было около 0,62 мг лекарственного / мл, 2,5-кратное повышение относительной что приостановление соответствующей формулировки, но не было никаких существенных цитотоксичность наблюдалась голые в микроэмульсии клеток А549 и Льюис клеток. In vivo, TME рецептуры показал, заметно усиливается противоопухолевой эффективности в ксенотрансплантат модели Льюиса рака легких после внутрижелудочного введения. По сравнению с циклофосфамид, TME формулировка показали аналогичные противоопухолевой активностью, но менее общая токсичность. Эти результаты указывают на целесообразность использования в микроэмульсии для повышения растворимости тритерпеновых и adlay. Этс обещают в качестве эффективной системы доставки лекарств для лечения рака легких. Шиитаке Исследования октябрь 2013 г. - сентябрь 2014 г. Щелочи-растворимые в воде полисахариды, изолированные от Lentinus edodes, индуцирует Апоптоз и G2/M клеточного цикла в H22 клеток посредством Деполимеризации Микротрубочек. Целью исследования была оценка pro-apoptotic эффекты полисахаридов, полученных из Lentinus edodes и дальше выяснены механизмы этого действия. Наши результаты показали, что отмеченные морфологические изменения апоптоза наблюдалось после лечения L. edodes полисахаридов [Lentinan (LTN)]. Кроме того, ЛТН-индуцированного апоптоза клеток характеризовалась быстрой стимуляции активных форм кислорода производства, потеря митохондриального мембранного потенциала и увеличение внутриклеточной концентрации Ca2+ . Кроме того, результаты haematoxylin и эозином и TUNEL-анализ также подтвердил, что LTN-индуцированного апоптоза in vivo. Кроме того, проточная цитометрия, анализ показал, что ГТС может арест клеточного цикла в фазе G2/M, и иммунофлюоресценции показал LTN вызвало разрушение микротрубочек. Эти результаты позволяют предположить, что разрушение клеточных микротрубочек сети, арест клеточного цикла в фазе G2/M и индукция апоптоза может быть одной из возможных механизмов противоопухолевого эффекта LTN. Phytother Res. 2014 Aug 11. doi: 10.1002/ptr.5209. [Epub ahead of print] Alkali-Soluble Polysaccharide, Isolated from Lentinus edodes, Induces Apoptosis and G2/M Cell Cycle Arrest in H22 Cells Through Microtubule Depolymerization. You RX1, Liu JY, Li SJ, Wang L, Wang KP, Zhang Y. Author information 1Department of Pharmacy, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, No. 1277, Jiefang Road, Wuhan, 430022, China. The aim of the study was to evaluate the pro-apoptotic effects of polysaccharides derived from Lentinus edodes and further elucidated the mechanisms of this action. Our results demonstrated that marked 60 morphological changes of apoptosis were observed after treatment of L. edodes polysaccharides [Lentinan (LTN)]. Moreover, LTN-induced cell apoptosis was characterized by a rapid stimulation of reactive oxygen species production, the loss of mitochondrial membrane potential and an increase in intracellular concentration of Ca2+ . In addition, the results of the haematoxylin and eosin and TUNEL assay further confirmed that LTN-induced apoptosis in vivo. Furthermore, flow cytometry analysis showed that LTN could arrest the cell cycle at G2/M phase, and immunofluorescence showed LTN caused disruption of microtubule. These results suggest that disruption of cellular microtubule network, arrest of the cell cycle at G2/M phase and induction of apoptosis may be one of the possible mechanisms of anti-tumour effect of LTN. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd. Lentinan: клиническое преимущество в управлении системных злокачественных новообразований. Sunagawa др. предоставили интересные данные в их недавней статье. Лентинан может также оказать значительное противоопухолевые эффекты в отношении других системных злокачественных новообразований. Например, лентинан является клинической пользы в лечении злокачественных опухолей пищевода. При использовании в сочетании с другими химиотерапевтическими агентами, такими как тегафур, его заметно улучшилось качество жизни по этим предметам в дополнение, иммунный статус этих больных раком была улучшена, как свидетельствует увеличение в сыворотке крови IL-6 уровней. Улучшение в масштабе производительности счет Карновского также рассматривалось в то же время. Кроме того, клиническая эффективность комбинированного лечения была значительно выше, чем у одиночного агента лечения. Лентинан также клинической пользы от острой миелоидной лейкемии. Например, уровень выживаемости были значительно улучшены, когда лентинан был использован в сочетании с химиотерапевтическими агентами, такими как цитарабина. Кроме того, раковая кахексия был заметно ослаблен у этих пациентов. Одновременное увеличение IL-10 уровней также был замечен. Клиническое преимущество лентинан также была замечена в гепатоцеллюлярной карциномы. Например, показатели выживаемости были значительно улучшены в печени больных раком, которые вводили тончайшие разошлись Лентинан содержащих пищевые добавки. Прогноз этих больных могут быть оценены с помощью Лентинан связывания CD14 моноцитов. Отлично разошлись лентинан содержащих пищевых добавок также было показано для улучшения показателей выживаемости у больных раком поджелудочной железы. Кроме того, качество жизни заметно улучшилось у этих пациентов. Эти результаты были подтверждены Shimizu соавт. в недавнем исследовании. Дальнейшие исследования, в том числе многоцентровых проспективных рандомизированных контролируемых исследований и испытаний с большего числа пациентов и с более длительным периодом периодов, которые необходимы для проверки этих результатов. Надеюсь в ближайшие несколько лет мы увидим на активизации научных исследований в этой области. Surg Today. 2014 Jul;44(7):1389. doi: 10.1007/s00595-013-0641-2. Epub 2013 Jun 21. Lentinan: clinical benefit in the management of systemic malignancies. Kapoor S. Author information , 74 Crossing Place, Mechanicsville, VA, USA, shailendrakapoor@yahoo.com. Sunagawa et al. have provided interesting data in their recent article. Lentinan may also exert significant anti-neoplastic effects against other systemic malignancies. For instance, lentinan is of clinical benefit in the management of esophageal malignancies. When used in conjunction with other chemotherapeutic agents, such as tegafur, it markedly improved the quality of life in these subjects In addition, the immune status of these cancer patients was improved, as illustrated by the increase in the serum IL-6 levels. Improvement in the Karnofsky performance scale score was also seen at the same time. In addition, the clinical efficacy of the combination treatment was much greater than that of the single agent treatment. Lentinan is also of clinical benefit 61 against acute myeloid leukemia. For instance, the survival rates were significantly improved when lentinan was used in conjunction with chemotherapeutic agents such as cytarabine. In addition, cancer cachexia was markedly attenuated in these patients. A simultaneous increase in the IL-10 levels was also seen. A clinical benefit of lentinan has also been seen in hepatocellular carcinomas. For instance, the survival rates were significantly improved in hepatic cancer patients who were administered superfine dispersed lentinan-containing food supplements. The prognosis of these patients could be assessed using lentinan-binding CD14 monocytes. Superfine dispersed lentinan-containing food supplementation has also been shown to improve the survival rates in patients with pancreatic carcinoma. In addition, the quality of life was markedly improved in these patients. These results have been confirmed by Shimizu et al. in a recent study. Further investigations, including multicenter, prospective, randomized controlled trials and trials with larger numbers of patients and with longer follow-up periods, are needed to verify these results. Hopefully the coming few years will see increased research in this regard. Nutr J. 2014 Apr 22;13(1):35. [Epub ahead of print] Dietary supplementation with rice bran fermented with Lentinus edodes increases interferon-gamma activity without causing adverse effects: a randomized, double-blind, placebo-controlled, parallel-group study. Choi JY, Paik DJ, Kwon DY, Park Y. The purpose of this study was to investigate the hypothesis that dietary supplementation with rice bran fermented with Lentinus edodes (rice bran exo-biopolymer, RBEP), a substance known to contain arabinoxylan, enhances natural killer (NK) cell activity and modulates cytokine production in healthy adults. METHODS: This study was designed in a randomized, double-blind, placebo-controlled, and parallel-group format. Eighty healthy participants with white blood cell counts of 4,000-8,000cells/muL were randomly assigned to take six capsules per day of either 3 g RBEP or 3 g placebo for 8 weeks. Three participants in the placebo group were excluded after initiation of the protocol; no severe adverse effects from RBEP supplementation were reported. NK cell activity of peripheral blood mononuclear cells was measured using nonradioactive cytotoxicity assay kits and serum cytokine concentrations included interferon (IFN)-gamma, tumor necrosis factor (TNF)-alpha, interleukin (IL)-2, IL-4, IL-10, and IL-12 were measured by Bio-Plex cytokine assay kit. This study was registered with the Clinical Research Information Service (KCT0000536). RESULTS: Supplementation of RBEP significantly increased IFN-gamma production compared with the placebo group (P = 0.012). However, RBEP supplementation did not affect either NK cell activity or cytokine levels, including IL-2, IL-4, IL-10, IL-12, and TNF-alpha, compared with the placebo group. CONCLUSIONS: The data obtained in this study indicate that RBEP supplementation increases IFN-gamma secretion without causing significant adverse effects, and thus may be beneficial to healthy individuals. This new rice bran-derived product may therefore be potentially useful to include in the formulation of solid and liquid foods designed for treatment and prevention of pathological states associated with defective immune responses. Пищевые добавки, рисовые отруби, ферментированные с Lentinus edodes увеличивает интерферон-гамма-активность, не вызывая побочных эффектов: рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, в параллельных исследования. Цель настоящего исследования-исследовать гипотезу о том, что пищевые добавки, рисовые отруби, ферментированные с Lentinus edodes (рисовые отруби экзо-биополимер, RBEP), вещество, как известно, содержат arabinoxylan, повышает естественных киллеров (NK) и модулирует активность клеток продукции цитокинов у здоровых взрослых. Методы:данное исследование было разработано в рамках рандомизированного, двойногослепого, плацебо-контролируемого, и параллельно-формате группы. Восемьдесят здоровых участников с белых кровяных клеток и тромбоцитов 4000-8,000cells/muL были рандомизированы для съемки шести капсул в день или 3 g RBEP или 3 g плацебо в течение 8 недель. Три участников в группе 62 плацебо, были исключены после инициирования протокола; никаких серьезных побочных эффектов от RBEP добавок сообщалось. НК-клеточной активности мононуклеарных клеток периферической крови измеряли с помощью нерадиоактивных цитотоксичность опробования комплектов и сывороточной концентрации цитокинов в интернет интерферон (ИФН)-гамма, фактора некроза опухоли (ФНО)-Альфа, интерлейкина (ил)-2, IL-4, IL-10, IL-12 измерялись Bio-Plex цитокинов набо для анализа. Это исследование было зарегистрировано с клинические исследования информационной службы Результаты:добавок RBEP значительно увеличилось IFN-гамма продукции по сравнению с группой плацебо (P = 0,012). Однако, RBEP добавки не влияет ни NK активности клеток или уровни цитокинов, в том числе IL-2, IL-4, IL-10, IL-12, и TNF-alpha, по сравнению с группой плацебо. Выводы:полученные данные свидетельствуют о том, что RBEP добавок повышает IFN-гамма секреции без причинения значительного неблагоприятного воздействия, и, таким образом, может быть полезно и для здоровых людей. Этот новый рисовых отрубей-производный продукт, следовательно, могут быть потенциально полезно включать в разработке твердых и жидких пищевых продуктов, предназначенных для лечения и профилактики патологических состояний, связанных с нарушениями иммунной реакции. Discussion This was the first randomized, double-blind, placebo-controlled, parallel-group study investigating the immune-modulatory effects of RBEP in healthy adults. This group study revealed that RBEP supplementation significantly increased IFN-γ levels compared with a placebo group, but RBEP supplementation did not appear to enhance NK cell activity as compared to placebo group. Importantly, RBEP supplementation did not cause any significant adverse effects in the present study. In contrast to these results, previous studies have reported that an enzymatically modified version of rice bran increases NK cell activity; this finding is potentially important because NK cells play important roles in the immune system, including defending against cancer [2,9,10,13,15]. Furthermore, RBEP supplementation in mice has been shown to exhibit anticancer effects by enhancing NK cell activity [2]. Arabinoxylan, mainly xylose polymer from rice bran, have also been reported to increase NK cell activity in patients with various cancers [9,13] and in mice bearing Ehrlich ascites [10] and renal carcinoma [16]. The most likely reason for these discrepancies is that the present study examined healthy subjects, whereas the previous studies all examined the effects of RBEP in the context of cancer. McDermott et al. [17] concluded that arabinoxylan supplementation was not effective for treating chronic fatigue syndrome, an assessment thought to indirectly measure NK cell activity. Cancer patients have been suggested to have reduced NK cell activity compared with healthy individuals [18,19]; thus, significant effects on NK cell activity in healthy individuals may be difficult to observe. In the present study, NK cell activity was significantly increased within the RBEP group after supplementation compared with the same group before supplementation; however, this effect was no longer significant when the RBEP group was compared with the placebo group. Only one previous study in healthy adults reported that supplementation of an arabinoxylan obtained from rice bran increased NK cell activity, although this study did not include a placebo control [11]. In agreement with the results obtained in the present study, previous studies have reported that an arabinoxylan isolated from rice bran significantly increased IFN-γ levels in patients with multiple myeloma [9], in mice bearing Ehrlich ascites [10], and in in vitro studies [11,12,20]. Furthermore, polysaccharides from Angelica sinensis and from the root of Sanguisorba officinalis have been shown to increase IFN-γ production in spleen cells [21] and tumor-bearing mice [22], respectively. This immune-enhancing action of arabinoxylan has been proposed to be related to the increased IFN-γ secretion accompanying NK cell activation [11]. However, IFN-γ is produced not only by NK cells, but also by T and B cells [23]. Previous studies have also reported that RBEP supplementation activates macrophages, both in vivo and in vitro[5,8]. An arabinoxylan obtained from rice bran, the green leaves of Litsea glutinosa, and wheat bran have been shown to increase macrophage activity, either in vitro[24,25] or in tumor-bearing mice [26]. In addition, an arabinoxylan isolated from rice bran increased CD4+ T cell function in human monocyte-derived dendritic cells [20], and increased T and B cell proliferation in both humans with and without cancer [13,27]. Previous studies have consistently reported that polysaccharides from evening primrose, Curcuma xanthorrhiza, and Angelica sinensis increase macrophage activity and/or T cell proliferation, either in vivo or in vitro[21,28,29]. These data, in combination with the data presented in this study, suggest that the 63 increased production of IFN-γ resulting from RBEP supplementation may be mediated by either macrophages, B cells, or T cells, and it is probably not mediated by NK cells. Kim et al. showed that RBEP supplementation did not exhibit hematopoietic toxicity in a mouse model of solid tumors, thereby providing important evidence that RBEP is safe and could potentially be used to both prevent and treat cancer [2]. Increased WBC counts have been observed in patients with inflammation [30], and have been shown to be associated with high cancer mortality [31]. In the present study, REBP supplementation led to a negligible decrease in WBC count; however, participant WBC counts remained within the normal range, and thus this finding is clinically non-significant. Обсуждение Это было первое рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, в параллельных исследование иммунной системы, модуляторные эффекты RBEP в здоровых взрослых людей. Этой группе показало, что RBEP добавок значительно увеличилось гамма-интерферона уровнях по сравнению с плацебо-группой, но RBEP добавок, не явился для повышения активности NKлимфоцитов по сравнению с плацебо-группой. Главное, RBEP добавки не вызывают каких-либо значительных негативных последствий в настоящем исследовании. В отличие от этих результатов предыдущих исследований было выявлено, что ферментативно модифицированная версия рисовых отрубей NK-лимфоцитов, повышает активность; этот вывод является потенциально важным, потому что NK-клетки играют важную роль в иммунной системе, которая включает в себя защиту против рака [2,9,10,13,15]. Кроме того, RBEP добавок на мышах было показано, что экспонат противоопухолевый эффект усиления активности NK-лимфоцитов [2]. Arabinoxylan, в основном, ксилозы полимер, из рисовых отрубей, также наблюдалось повышение активности NK-лимфоцитов у больных с различными формами рака [9,13] и у мышей, несущих асцитного [10] и карцинома почек [16]. Наиболее вероятной причиной этого несоответствия является то, что в настоящем исследовании здоровых испытуемых, в то время как предыдущие исследования все изучили воздействие RBEP в контексте рака. Макдермотт et al. [17] делается вывод о том, что arabinoxylan добавок не был эффективен для лечения синдрома хронической усталости, оценка мысль косвенно измерить NK активность клеток. Больных раком были предложены имеют снижение активности NK-лимфоцитов по сравнению со здоровыми людьми [18,19]; таким образом, значительное воздействие на NK активности клеток в здоровых людей может быть сложно наблюдать. В настоящем исследовании, NK активности клеток значительно увеличивается в RBEP группы после добавки по сравнению с той же группы перед добавок; однако этот эффект был больше не существенно, когда RBEP группа была по сравнению с группой плацебо. Только один предыдущем исследовании на здоровых взрослых сообщил, что дополнение о arabinoxylan, полученный из рисовых отрубей повышенной активности NK-лимфоцитов, хотя это исследование не включали плацебо [11]. В согласии с результатами, полученными в ходе настоящего исследования, предыдущие исследования показали, что arabinoxylan изолированы от рисовых отрубей значительно увеличилось гамма-интерферона уровня в пациентов с множественной миеломой, [9], у мышей, несущих асцитного [10], и в исследованиях in vitro [11,12,20]. Кроме того, полисахариды из Angelica sinensis и от корня кровохлебки лекарственной, как было показано увеличение гамма-интерферона производства в клетками селезенки [21] и опухоли мышей, несущих [22], соответственно. Этот иммунитет, усиливая действие arabinoxylan был предложен быть связано с повышенным гаммаинтерферона секреции сопровождающих НК активации клеток [11]. Однако, гамма-интерферона производится не только NK-клеток, а также т-и в-клеток [23]. Предыдущие исследования также сообщают, что RBEP добавок активирует макрофаги, как in vivo, так и in vitro[5,8]. В arabinoxylan, полученный из рисовых отрубей, зеленые листья Litsea glutinosa, и пшеничных отрубей, как было показано, увеличивается активность макрофагов, либо в условиях in vitro[24,25] или в опухоли мышей, несущих [26]. Кроме того, arabinoxylan изолированы от рисовых отрубей увеличение CD4+ т-клеток функции в человеческом моноцитарные дендритных клеток [20], и увеличение Т И Б пролиферации клеток, в которых и люди, и без рака [13,27]. В предыдущих исследованиях постоянно сообщали, что полисахариды из примулы, куркума xanthorrhiza, и Angelica sinensis увеличить активность макрофагов и/или T-клеточной пролиферации, либо in vivo или in vitro[21,28,29]. Эти данные в сочетании с данными, представленные в этом исследовании, 64 предполагает, что рост производства ИФН-G в результате RBEP добавок может быть опосредован либо макрофагов, лимфоцитов, или т-клеток, и это, вероятно, не посредничестве NK-клеток. Kim et al. показал, что RBEP добавок не имеют гемопоэтических токсичности в мышиной модели твердых опухолей, тем самым обеспечивая важное свидетельство того, что RBEP безопасно и потенциально могут быть использованы для предотвращения и лечения рака [2]. Увеличение WBC графов наблюдались у пациентов с воспалением [30], и было показано, что связано с высокой смертности от рака [31]. В настоящем исследовании, REBP добавки привело к незначительное снижение лейкоцитов, однако, участник WBC графов оставался в пределах нормы, и, таким образом, этот вывод не является клинически незначимый. Exp Ther Med. 2013 Dec;6(6):1409-1413. Epub 2013 Oct 8. Lentinus edodes promotes fat removal in hypercholesterolemic mice. Yang H1, Hwang I, Kim S, Hong EJ, Jeung EB. 1Laboratory of Veterinary Biochemistry and Molecular Biology, College of Veterinary Medicine, Chungbuk National University, Cheongju, Chungbuk 361-763, Republic of Korea. Lentinus (L.) edodes (shiitake mushroom) is used as a traditional medicine in Asia. One of the components of L. edodes, eritadenine (an adenosine analog alkaloid), has been shown to reduce cholesterol levels. The hypocholesterolemic action of eritadenine appears to be achieved through the modification of hepatic phospholipid metabolism. In the present study, the effects of L. edodes in a mouse model of hypercholesterolemia were investigated. Hypercholesterolemia was induced by the consumption of a highfat diet (HFD). The animals were divided into six groups, which were fed a normal diet, HFD alone, HFD containing eritadenine [10 mg/kg of body weight (BW)] or HFD with 5, 10 or 20% L. edodes, respectively, for 4 weeks (from 5 to 9 weeks of age). The mice in the six groups had similar BW gains. Total serum cholesterol (T-CHO), low-density lipoprotein (LDL) and triglyceride (TG) levels were increased in the HFD-fed group compared with those in the normal diet group. However, the levels of high-density lipoprotein (HDL) were not significantly altered. In mice treated with L. edodes (5, 10 or 20%), the T-CHO, LDL and TG serum levels were reduced in a dose-dependent manner. The mRNA expression of cholesterol 7-α-hydroxylase 1 (CYP7A1) was decreased in hypercholesterolemic mice and increased by eritadenine and L. edodes (5, 10 and 20%) supplementation. In liver tissues, it was observed that lipid accumulation was reduced by treatment with eritadenine and L. edodes. In addition, it was revealed that the formation of atherosclerotic plaques due to the HFD was also suppressed by eritadenine and L. edodes. The results of the study indicated that the consumption of an HFD may inhibit CYP7A1 expression in the liver by increasing serum T-CHO, LDL and TG levels. L. edodes may help regulate lipid metabolism, suggesting that this fungus ameliorates hypercholesterolemia in mice by regulating CYP7A1 expression in the liver. Lentinus edodes удаления жира способствует повышенным уровнем холестерина в мышей. Lentinus (л.) edodes (шиитаке) используется в качестве традиционной медицине в Азии. Одним из компонентов L. edodes, eritadenine (аденозин аналоговых алкалоидов), снижает уровень холестерина. В hypocholesterolemic действие eritadenine появляется, чтобы быть достигнуто путем изменения печени метаболизм фосфолипидов. В настоящем исследовании эффектов L. edodes в мышиной модели гиперхолестеринемия были исследованы. Гиперхолестеринемию, вызванные потреблением высокое содержание жира (HFD). Животные были разделены на шесть групп, которых кормили обычным рационом, HFD в одиночку, HFD, содержащих eritadenine [10 мг/кг массы тела (BW)] или HFD с 5, 10 или 20% L. edodes, соответственно, в течение 4 недель (от 5 до 9-недельного возраста). Мышей в шесть групп были подобные BW прибыли. Общий холестерин сыворотки (т-CHO), липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) и триглицеридов (тг) уровней увеличились в HFD кормили группы по сравнению с таковым в обычный рацион группы. Однако, уровни липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) были существенно не изменяется. У мышей, получавших L. edodes (5, 10 или 20%), T-чо, LDL и триглицеридов в сыворотке крови были снижены в дозо-зависимый характер. Экспрессии мРНК холестерина 7-а-гидроксилазы 1 (CYP7A1) уменьшилась на повышенным уровнем холестерина, мышей и увеличился на eritadenine и L. edodes (5, 10 и 20%) добавок. В тканях печени, было отмечено, что накопление липидов был сокращен на лечение с eritadenine и L. edodes. Кроме того, было выявлено, что формирование атеросклеротических бляшек из-за HFD также была подавлена 65 eritadenine и L. edodes. Результаты исследования показали, что потребление HFD могут препятствовать CYP7A1 выражение в печени путем увеличения сыворотке T-чо, ЛПНП и триглицеридов. L. edodes может помочь в регулировании липидного обмена, предполагая, что этот гриб улучшает гиперхолестеринемии у мышей с помощью регулирования CYP7A1 выражение в печени. J Agric Food Chem. 2013 Oct 16;61(41):9849-5. doi: 10.1021/jf403291w. Epub 2013 Oct 8. Structure and inducing tumor cell apoptosis activity of polysaccharides isolated from Lentinus edodes. Wang KP1, Zhang QL, Liu Y, Wang J, Cheng Y, Zhang Y. In this study, five novel polysaccharides SLNT1, SLNT2, JLNT1, JLNT2, and JLNT3 were isolated from the fruit body of Lentinus edodes. Chemical and physical analyses showed that the five polysaccharides consist of glucose with the structure of β-(1→3)-d-glucose main chains and β-(1→6)-d-glucose side chains. Moreover, all of them had triple-helical conformation and different molecular weight distributions. Animal studies further demonstrated that the antitumor effects were remarkably improved by SLNT1 and JLNT1 treatments with the inhibitory rates of 65.41% and 61.07% in H22-bearing mice, respectively. Additionally, both of them significantly increased the levels of serum IL-2 and TNF-α production and induced the tumor cell apoptosis. Taken together, our findings revealed that the involved antitumor mechanisms possibly in part were mediated not only by enhancing the immunity but also by directly killing the tumor and the induction of tumor cell apoptosis in H22-bearing mice. Структура и индуцируя апоптоз опухолевых клеток активность полисахаридов изолированы от Lentinus edodes. В этом исследовании, пять романа полисахариды SLNT1, SLNT2, JLNT1, JLNT2, и JLNT3 были изолированы от фруктов тело Lentinus edodes. Химические и физические анализы показали, что пять полисахариды состоят из глюкозы со структурой B-(1перед 3)-d-глюкозы главной цепи и бета-(1перед 6)-d-глюкозы боковых цепей. Кроме того, все они имели тройной спиральной конформации и различных молекулярно-массовое распределение. В исследованиях на животных показано, что противоопухолевый эффекты были значительно улучшены путем SLNT1 и JLNT1 процедуры с тормозящее ставки 65.41% и 61.07% в H22-подшипник мышей, соответственно. Кроме того, оба они значительно повышают уровень сывороточного IL-2 и TNF-a производства и индуцирует апоптоз опухолевых клеток. Взятые вместе, наши исследования показали, что задействованы механизмы противоопухолевого, возможно, частично были опосредованы не только путем повышения иммунитета, но и непосредственно убивает опухоли и индукцию апоптоза опухолевых клеток в H22подшипник мышей. Appl Biochem Biotechnol. 2013 Nov;171(6):1444-53. doi: 10.010-013-0441-6. Epub 2013 Aug 18. A novel polysaccharide from Lentinus edodes Mycelia exhibits potential antitumor activity on laryngeal squamous cancer cell line Hep-2. Cao X1, Liu R, Liu J, Huo Y, Yang W, Zeng M, Yang C. 1School of Life Science, Liaoning University, Shenyang, 110036, China. A novel polysaccharide [Lentinus edodes mycelia polysaccharide 2 (LMP2)] with a molecular weight of 2.27 × 10(4) Da was isolated from the Lentinus edodes mycelia and purified by Sephadex G-200 and diethylaminoethyl-32 column chromatography. HPLC results indicated that LMP2 contained mannose, arabinose, galactose, xylose, and rhamnose with a relative molar ratio of 1:0.74:3.23:1.18:10.98. Its antitumor activity was evaluated in vitro by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, colony formation assay, and transwell assay. LMP2 showed a remarkable inhibitory effect on the proliferation of Hep-2 cells, and at the concentration of 200 mg/ml, the inhibition ratio was 37.2 % after 72 h. Furthermore, colony formation of Hep-2 cells was reduced significantly after treatment with LMP2. Invasion of Hep-2 cells was inhibited significantly by LMP2. These results suggested that LMP2 could be explored as a potential antitumor material for laryngeal carcinoma. 66 Роман полисахарид из Lentinus edodes Грибница экспонатов потенциальной противоопухолевой активностью на плоскоклеточном раке гортани клетках линии Hep-2. Роман полисахаридов [Lentinus edodes грибница, полисахарид 2 (LMP2)] с молекулярным весом 2,27 х 10(4) да, был изолирован от Lentinus edodes мицелием и очищенной Сефадексе G-200 и diethylaminoethyl-32 колоночной хроматографии. ВЭЖХ результаты показали, что LMP2, содержащиеся маннозы, арабинозы, галактозы, ксилозы, и rhamnose с относительной молярном соотношении 1:0.74:3.23:1.18:10.98. Его противоопухолевой активностью in vitro оценивалась по 3(4,5-dimethylthiazol-2-ил)-2,5-diphenyltetrazolium бромид анализа, формирование колонии анализа, и transwell анализа. LMP2 показали замечательное тормозящее влияние на пролиферацию клеток Hep2, и при концентрации 200 мг/мл, ингибирование отношение достигла 37,2%, через 72 ч. Кроме того, колонии формирование Hep-2 клетках значительно сократилось после лечения с LMP2. Вторжение на Hep-2 клетках было законсервировано значительно LMP2. Эти результаты позволяют предположить, что LMP2 могут быть рассмотрены в качестве потенциальных противоопухолевых материал для карциномы гортани. J Agric Food Chem. 2014 May 19. [Epub ahead of print] An antiproliferative protein from the culture supernatant of Lentinula edodes C91-3 Mycelia. Li X, Zhong M, Liu B, Wang X, Liu L, Zhang W, Huang M. We purified and isolated a novel protein (LFP91-3A2) with anti-tumor effect from Lentinula edodes C91-3 liquid mycelial culture supernatant. LFP91-3A2 was purified by (NH4)2SO4 precipitation, ion-exchange chromatography (DEAE-cellulose) and gel filtration chromatography (Sephacryl S-200HR). SDS-PAGE and MALDI-TOF/MS analysis Mascot search showed LFP91-3A2 is a new protein with apparent molecular weight of 26KDa. The effect on tumor cell proliferation was assessed by using MTT assay in vitro, the LFP91-3A2 reduced tumor cell growth obviously at a dose dependent manner (5-15μg/ml) (p < 0.05), while exhibited no toxic effect on normal chick embryo fibroblasts. The anti-proliferative mechanism of LFP91-3A2 were found to be associated with inducing cell apoptosis by flow cytometry analysis and transmission electron microscopy. The LFP91-3A2 is a novel protein from Lentinula edodes with tumor-suppressive activity via inducing apoptosis of tumor cell without toxicity on normal cell and may be benefit to nature products in clinical treatment. Антипролиферативное белка от культуры супернатанта из Lentinula edodes C91-3 Мицелием. Мы очистили и изолированный новый белок (LFP91-3A2) с противоопухолевым эффектом от Lentinula edodes C91-3 жидких мицелиальных культуры супернатанта. LFP91-3A2 был очищен (NH4)2SO4 осадков, ионообменной хроматографии (DEAE-целлюлоза) и гель-фильтрации хроматографии (Sephacryl S-200HR). SDS-PAGE и MALDI-TOF/мс анализа талисман поиск показал, LFP91-3A2 новый белок, очевидно, молекулярный вес 26KDa. Влияние на пролиферацию опухолевых клеток оценивали с помощью МТТ-теста in vitro, LFP91-3A2 снижение рост опухолевых клеток, очевидно, в зависимости от дозы способом (5-15μg/мл) (p < 0,05), в то время как проявили никакого токсический эффект на обычных куриных эмбрионов фибробластов. Антипролиферативным механизм LFP91-3A2, как выяснилось, были связаны с индуцируя апоптоз клеток методом проточной цитометрии анализ и просвечивающей электронной микроскопии. В LFP91-3A2) - роман белка из Lentinula edodes с опухолью супрессорной активности через индуцирует апоптоз опухолевых клеток, не токсичность на нормальные клетки и может быть польза для природы продукты в клиническом лечении. Gan To Kagaku Ryoho. 2013 Nov;40(12):2200-2. [A case of advanced gastric cancer with para-aortic lymph node metastasis successfully treated with preoperative S-1/Lentinan chemotherapy followed by curative gastrectomy]. [Article in Japanese] Nishikawa K1, Iwase K, Aono T, Yoshida H, Nomura M, Tamagawa H, Matsuda C, Deguchi T, Kawada J, Higashi S, Deguchi K, Noguchi Y, Okumura Y, Nomura M, Fushimi H, Takagi M, Fukui A, Fujitani K, Endo S, Tanaka Y. We report a case of advanced gastric cancer successfully treated with preoperative S-1/Lentinan 67 (LTN)chemotherapy followed by curative gastrectomy. The patient was a 75-year-old man with right hypochondralgia. Endoscopic examination revealed a huge type 2 gastric cancer in the middle body of the stomach. Abdominal computed tomography (CT) revealed multiple perigastric lymph node metastases and bulky para-aortic lymph node metastases. The clinical diagnosis was cT 4N3M1( LYM) with cStage IV. We thought a complete resection would be difficult, so he was treated with S-1( 80 mg/m2 day 1-28/q6w) and LTN (2 mg weekly) in May 2010. After 3 courses, the primary lesion was markedly reduced, and gastric endoscopic biopsy showed no malignant lesion. After 4 courses, abdominal CT showed no lymph node swelling at the perigastric and para-aortic areas. After 5 courses, distal gastrectomy with D2 lymphadenectomy was performed. The histological diagnosis was ypT2( MP) N0M0, Stage IB. Histological features of the primary tumor and lymph nodes were judged to be Grade 2 and Grade 3, respectively. After surgery, S-1/LTN treatment was continued for 1 year. During this period, there were no serious adverse events. The patient has been in good health without recurrence for 28 months after surgery. [Случай распространенного рака желудка с парааортальных лимфатических узлов метастазов успешно лечится с предоперационной S-1/Lentinan химиотерапии с последующим лечебным гастрэктомия]. [Статья в японской] Мы сообщаем о случае местно-распространенного рака желудка успешно лечится с предоперационной S-1/Lentinan (ГТС)химиотерапии с последующим лечебным резекции желудка. Пациент был 75-летний мужчина с правой hypochondralgia. Эндоскопическое обследование показало огромную 2 типа рака желудка в середине тела желудка. Брюшной полости, компьютерной томографии (кт) выявлены многочисленные окружающий пищеварительный тракт метастазами в лимфатические узлы и громоздкие парааортальных лимфатических узлов метастазов. Клинический диагноз был кт 4N3M1( LYM) с cStage IV. Мы думали, полной резекции будет сложно, поэтому к нему относились с S-1( 80 мг/м2 / сутки 1-28/q6w) и LTN (2 мг в неделю) в мае 2010 года. После 3 курсов, первичное поражение было заметно снижается, желудка и эндоскопической биопсии показал, не злокачественные поражения. После 4 курсов, кт органов брюшной полости показало никаких отек лимфатических узлов на окружающий пищеварительный тракт и парааортальных областях. После 5 курсов, дистальная резекция желудка с D2 лимфаденэктомия была выполнена. Гистологическая диагностика был ypT2( МП) N0M0, стадии IB. Гистологические особенности первичной опухоли и лимфатические узлы были признаны класса 2 и класса 3, соответственно. После операции, S-1/ЛТН лечение продолжалось в течение 1 года. В течение этого периода не было никаких серьезных неблагоприятных событий. Пациент в добром здравии без рецидивов в течение 28 месяцев после операции. Кордицепс Исследования февраль 2014 г. - сентябрь 2014 г. В случае метастатического рака мочевого пузыря в обоих легких, получавших корейской медицины в одиночку. В этом случае доклад направлен на изучение влияния корейской медицины терапии (КМТ), включая Оральный фитотерапия и травы небулайзерная терапия в лечении метастатического рака мочевого пузыря в легких. 74-летний мужчина был поставлен диагноз метастатического рака мочевого пузыря в обоих легких в августе 2013 года. Он отказался от какого-либо химиотерапии и поступил к нам в больницу в значительно прогрессировала, состояние на 11 января 2014 года. С тех пор он лечился с КМТ до 17 мая 2014 года. Основные пероральные лекарства на травах были Hyunamdan изготовлены из тепло-обработанного женьшеня, Hangamdan S изготовлен из Кордицепса militaris, Panax ginseng radix, для производства экстракта commiphora myrrha, calculus bovis, Маргарита, Boswellia carteri, radix Panax notoginseng и Cremastra appendiculata клубня, и 68 небулайзерная терапия с Soram ингалятор решение женьшеня и Кордицепса sinensis дистиллята. Их эффект оценивали с учетом изменения основных симптомов и с помощью последовательного рентген грудной клетки. Размер и количество множественных метастатических узелков в обоих легких были заметно уменьшились и пропали симптомы. Эти результаты позволяют предположить, что КМТ может быть эффективным методом для лечения метастатического рака мочевого пузыря в легких. Case Rep Oncol. 2014 Jul 30;7(2):534-40. doi: 10.1159/000365884. eCollection 2014. A case of metastatic bladder cancer in both lungs treated with korean medicine therapy alone. Lee DH1, Kim SS1, Seong S1, Woo CR1, Han JB2. Author information 1Soram Korean Medicine Hospital, Seoul, South Korea. This case report is aimed to investigate the effects of Korean medicine therapy (KMT) including oral herbal medicine and herb nebulizer therapy in treating metastatic bladder cancer in the lungs. A 74-yearold man was diagnosed with metastatic bladder cancer in both lungs in August 2013. He refused any chemotherapy and was admitted to our hospital in a much progressed state on January 11, 2014. Since then, he was treated with KMT until May 17, 2014. The main oral herbal medicines were Hyunamdan made of heat-processed ginseng, Hangamdan S made of Cordyceps militaris, Panax ginseng radix, Commiphora myrrha, calculus bovis, margarita, Boswellia carteri, Panax notoginseng radix and Cremastra appendiculata tuber, and nebulizer therapy with Soram nebulizer solution made of wild ginseng and Cordyceps sinensis distillate. Their effect was evaluated considering the change of the main symptoms and using serial chest Xray. The size and number of multiple metastatic nodules in both lungs were markedly decreased and the symptoms had disappeared. These results suggest that KMT can be an effective method to treat metastatic bladder cancer in the lungs. Кордицепс militaris экстракт защищает человеческих Дермальных фибробластов против Окислительный стресс-Индуцированного апоптоза и преждевременного старения. Окислительного стресса, индуцированного активных форм кислорода (АФК) является основной причиной дегенеративных заболеваний, включая старение и болезни. В данном исследовании мы исследовали, может ли Кордицепс militaris экстракт (CME) in vitro защитное действие на перекись водорода-индуцированного окислительного стресса в человеческих кожных фибробластов (HDFs). Наши результаты показали, что 2,2-дифенил-1-picrylhydrazyl (ДФПГ) антирадикальное деятельности CME была увеличена доза-зависимым способом. Мы обнаружили, что перекись водорода лечение в HDFs увеличилось ROS генерации и гибели клеток по сравнению с контролем. Однако, CME улучшение выживания HDFs против перекись водорода-индуцированного окислительного стресса через ингибирование внутриклеточных АФК производства. CME лечения приостанавливают водорода пероксид-индуцированной апоптотической гибели клеток и апоптотических ядерной конденсации в HDFs. Кроме того, CME предотвратить водорода пероксид-индуцированной SA-β-gal-позитивных клеток, предполагая, CME может ингибировать окислительный стресс-индуцированного преждевременного старения. Таким образом, эти результаты свидетельствуют о том, что CME может иметь защитное действие против окислительного стресса, индуцированного преждевременного старения с помощью очистки ROS. Nutrients. 2014 Sep 16;6(9):3711-26. doi: 10.3390/nu6093711. Cordyceps militaris Extract Protects Human Dermal Fibroblasts against Oxidative Stress-Induced Apoptosis and Premature Senescence. Park JM1, Lee JS2, Lee KR3, Ha SJ4, Hong EK5. Author information 1Department of Bioengineering and Technology, Kangwon National University, Chuncheon 200701, Korea. three0313@nate.com. Oxidative stress induced by reactive oxygen species (ROS) is the major cause of degenerative disorders including aging and disease. In this study, we investigated whether Cordyceps militaris extract (CME) has in vitro protective effects on hydrogen peroxide-induced oxidative stress in human dermal fibroblasts (HDFs). Our results showed that the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of CME was 69 increased in a dose-dependent manner. We found that hydrogen peroxide treatment in HDFs increased ROS generation and cell death as compared with the control. However, CME improved the survival of HDFs against hydrogen peroxide-induced oxidative stress via inhibition of intracellular ROS production. CME treatment inhibited hydrogen peroxide-induced apoptotic cell death and apoptotic nuclear condensation in HDFs. In addition, CME prevented hydrogen peroxide-induced SA-β-gal-positive cells suggesting CME could inhibit oxidative stress-induced premature senescence. Therefore, these results suggest that CME might have protective effects against oxidative stress-induced premature senescence via scavenging ROS. Индукция апоптоза Кордицепс militaris фракции в человеческой хронической миелоидной лейкемии к562, участвующих с митохондриальной дисфункцией. Кордицепс militaris широко используется для различных этно заболеваний, включая рак и воспаление осложнения в традиционной китайской медицине. Цель: Исследовать in vitro противоопухолевой активностью, Кордицепс militaris фракции (CMF) и молекулярный механизм, лежащий в основе он индуцирует апоптоз в человеческих хронической миелоидной лейкемии к562. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: CMF был подготовлен в соответствии с нашим предыдущим отчетом. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью МТТ-теста. Уровень апоптоза, распределение клеточного цикла и потери мембранный потенциал митохондрий измеряли с помощью проточной цитометрии. Каспазы деятельности анализировали методом вестерн-блот и скорости потребления кислорода был записан с помощью Oxytherm системы. Результаты: Результаты показали, что CMF срабатывает торможение роста в клетках к562 с лишь незначительной токсичностью по нормальной человеческой линии клеток и ингибирует пролиферацию клеток линии к562 в дозо - и время-зависимым образом с IC50 значения 34,1 ± 2.0 мкг/мл после 48 ч инкубации. Это наиболее вероятно в результате клеточного цикла в S-фазе и индукцию апоптоза. Кроме того, CMF индуцированную активацию каспазы-3 и последующего расщепления поли-АДФ-рибоза-полимераза (ПАРП). Каспаза сигналы могут исходить от митохондриальной дисфункции, которая была поддержана нахождения снизилась митохондрий transmembrance потенциал и нижней скорости потребления кислорода. Вывод: CMF обладал противоопухолевый эффект in vitro на клетках к562 и CMF-индуцированного апоптоза могут быть вовлечены в митохондриальной дисфункции и ценное, чтобы научные исследования и разработки в качестве потенциального противоопухолевого агентства. Pharmacogn Mag. 2014 Jul;10(39):325-31. doi: 10.4103/0973-1296.137374. Induction of apoptosis by Cordyceps militaris fraction in human chronic myeloid leukemia K562 cells involved with mitochondrial dysfunction. Tian T1, Song L2, Zheng Q2, Hu X1, Yu R1. Author information 1Biotechnological Institute of Chinese Materia Medica, Guangzhou, China. BACKGROUND: Cordyceps militaris is widely used for various ethno medical conditions including cancer and inflammation complications in traditional Chinese medicine. OBJECTIVE: To investigate the in vitro antitumor activity of Cordyceps militaris fraction (CMF) and the molecular mechanism underlying the apoptosis it induces in human chronic myeloid leukemia K562 cells. 70 MATERIALS AND METHODS: CMF was prepared according to our previous report. Cell viability was assessed by MTT assay. The rate of apoptosis, distribution of cell cycle and loss of mitochondrial membrane potential were measured by flow cytometry. Caspase activities were analyzed by Western blot and oxygen consumption rate was recorded using the Oxytherm system. RESULTS: The results demonstrated that CMF triggered growth inhibition in K562 cells with only minor toxicity on a normal human cell line and inhibited the proliferation of K562 cells in a dose- and time-dependent manner with IC50 value of 34.1 ± 2.0 μg/ml after 48 h incubation. This most likely resulted from cell cycle arrest at the S phase and the induction of apoptosis. In addition, CMF induced activation of caspase-3 and subsequent cleavage of poly ADP-ribose polymerase (PARP). The caspase signals may originate from mitochondrial dysfunction, which was supported by the finding of decreased mitochondria transmembrance potential and the lower oxygen consumption rate. CONCLUSION: CMF possessed the in vitro antitumor effect on K562 cells and CMF-induced apoptosis might be involved by the mitochondrial dysfunction and valuable to research and develop as a potential antitumor agency. Введение Новые препараты, особенно те из растительных источников, перспективных методов для лечения различных злокачественных новообразований. На основе древней и современной китайской травяной медицины, литературы, существует множество противораковых растений или травяные составы, которые могли бы служить ориентиром для выявления новых противоопухолевых соединений или источник альтернативной терапии рака. Общепризнано, что эти препараты обладают низкой токсичностью, поэтому они могут быть лучшей альтернативой выбора в лечении рака.[1] Кордицепс militaris это гусеница в форме традиционной китайской медицины, который был использован для пациентов, страдающих от онкологических заболеваний в Восточной медицине. Это ascomycete, который поражает куколок в земле, и что остается червя зимой и превращается в гриб летом. В последние годы широкий спектр химических соединений, составляющих анализа и фармакологической активности сообщил для C. militaris, в деятельность которой входят иммуномодуляции,[2] с противоопухолевым,[3] противовоспалительное,[4] и др., Свидетельств in vivo и in vitro эксперименты показали, что экстракты C. militaris могут ингибировать пролиферацию человеческих опухолевых клеточных линий, в том числе толстой кишки 205, ПК-3 и в-клетки HepG2.[5] эти выдержки выставляются противоопухолевое действие в основном через индукцию апоптоза в опухолевых клетках, ингибирование ангиогенеза и подавление инвазии и метастазирования. Хотя экстрактов C. militaris как было показано, чтобы быть очень эффективным для ингибирования различных солидных опухолей, несколько исследований указали на их эффекты и возможные механизмы, связанные с человеческим хронической миелоидной лейкемии. В ходе нашего обширного расследования программу на культуре C. militarisроман, эффективный и точный метод отпечатков пальцев с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографиифотодиодов детектированием (ВЭЖХ-DAD) был характерен для контроля качества культивированного C. militaris.[6] В настоящем исследовании, нами было изучено влияние C. militaris фракция (CMF) на клетках к562 in vitro для первого времени. Мы проанализировали цитотоксичность, клеточная фаза ареста и апоптоза, а также митохондриальной функции, связанной с митохондриального мембранного потенциала и потребления кислорода. Результаты показали, что CMF значительно ингибирует пролиферацию и индуцированной каспаз-зависимого апоптоза, связанные с митохондриальной дисфункции в клетках к562, и указал, что CMF имеет потенциал, чтобы быть эффективной химиотерапии агента. Обсуждение В последнее время наблюдается глобальная тенденция к использованию природных веществ, присутствующих в травы как лекарство. Тока химиотерапевтические агенты, как известно, уничтожить как раковые и нераковые клетки.[14] Таким образом, существует настоятельная необходимость поиска новых противоопухолевых препаратов, которые могут убивать раковые клетки с минимальной токсичностью для незлокачественных клеток. Есть примерно 13,000, лечебные методы в Китае и более 100 000 целебных рецептов, записанных в античной литературе. Несомненно, эти препараты 71 традиционной китайской медицины являются богатые природные ресурсы для поиска новых лекарственных препаратов. Также есть некоторые доказательства того, что цитостатического эффекта множественных соединений в целом растительных экстрактов на раковые клетки часто лучше, чем эффект от их конкретных биологически активных соединений.[15] Было высказано предположение, что существует несколько активных ингредиентов в китайских лекарственных трав, которые могут подавлять злокачественные новообразования фактически через один или более из следующих механизмов метастазирования опухоли: (i) индукция дифференцировки клеток, (ii) прекращение синтеза ДНК или блокирование деления клеток, индукции апоптоза клеток.[16,17] Хотя многие исследования показали, что C. militaris эффективен при лечении рака, несколько исследований на предмет воздействия на человека от хронического миелоидного лейкоза в деталях. В настоящем исследовании нами было изучено влияние CMF на пролиферацию и индукцию апоптоза клеток линии к562, и попытался определить возможные механизмы его противоопухолевый эффект. В in vitro цитотоксичность анализ показал, что CMF показала сильное антипролиферативное действие на клетки K562 с IC50 значение 34,1 ± 2.0 после 48 ч инкубации. Кроме того, CMF др меньшую токсичность по нормальной человеческой клеточной линии L-02. В результате клеточного цикла анализа оценивается путем проточный цитометр показал, что CMF могло побудить S-фазы ареста и апоптоза в клетках к562. Вестерн-блот анализ показал, что CMF мог причинить существенно активации скола caspsed-3, который сопровождается очевидным расщепление PARP. Эти данные подтвердили участие каспаз в CMF-запускается необратимый апоптоз в клетках к562. Известно, что митохондрии играют важную роль в регуляции апоптотической гибели клеток, так и внутренняя, и внешняя апоптоза пути могут сходиться на уровне митохондрий и триггер митохондриальной мембраны permeabilization.[18] Для определения базового механизма апоптоза, индуцированного CMF, митохондриальных transmembrance потенциала и скорости потребления кислорода из CMF-обработанных клетках были тогда по сравнению с необработанными клетками. Согласно результатам, митохондрии функция может быть нарушена снизилась митохондрий transmembrance потенциал после CMF лечение, с указанием нижней скорости потребления кислорода. Эти данные свидетельствуют, что CMF-индуцированного апоптоза могут быть вовлечены в митохондриальной дисфункции. Поэтому, CMF, возможно, в будущем, у потенциальных терапевтических применений для хронического миелоидного лейкоза. INTRODUCTION New drugs, particularly those from herbal sources, are promising modalities for treatment of a variety of malignancies. Based on the ancient and modern Chinese herbal medicine literatures, there are many anticancer plants or herbal formulations, which could provide a guide for identification of new anticancer compounds or a source of alternative cancer therapy. It is widely accepted that those drugs have low toxicity, so they may be a better alternative choice in treatment of cancer.[1] Cordyceps militaris is a caterpillar-shaped Chinese traditional medicine, which has been used for patients suffering from cancer in oriental medicine. It is an ascomycete that invades the pupae in the ground and that remains a worm during the winter and transforms into a mushroom in the summer. In recent years, a wide range of chemical compounds, constituents analysis and pharmacological activities has been reported for C. militaris, whose activities include immunomodulation,[2] antitumor,[3] anti-inflammation,[4] etc., Evidence from both in vivo and in vitro experiments demonstrated that extracts of C. militaris can inhibit the proliferation of human tumor cell lines, including colon 205, PC-3 and HepG2 cells.[5] These extracts exhibited antitumor effects mainly through induction of apoptosis in tumor cells, inhibition of angiogenesis and suppression of invasion and metastasis. Although the extracts of C. militaris have been shown to be very effective in inhibiting a variety of solid tumors, few studies have reported their effects and the possible mechanisms associated with human chronic myeloid leukemia. During the course of our extensive investigating program on cultured C. militaris, a novel, efficient and accurate fingerprint method using high-performance liquid chromatography-photodiode array detection (HPLC-DAD) was reported for the quality control of cultured C. militaris.[6] In the present study, we investigated the effects of C. militaris fraction (CMF) on K562 cells in vitro for the first time. We analyzed the cytotoxicity, cell-phase arrest and apoptosis, as well as mitochondrial function related to mitochondrial membrane potential and oxygen consumption. The results showed that CMF significantly inhibited the 72 proliferation and induced caspase-dependent apoptosis associated with mitochondrial dysfunction in K562 cells, and indicated that CMF has the potential to be an effective chemotherapy agent. DISCUSSION Recently, there has been a global trend toward the use of natural substances present in herbs as medicine. Current chemotherapeutic agents are known to destroy both cancerous and non-cancerous cells.[14] Thus, there is an urgent need to find new anticancer drugs that can kill cancerous cells with minimal toxicity to non-cancerous cells. There are roughly 13,000 medicinal methods in China and over 100,000 medicinal recipes recorded in the ancient literature. Undoubtedly, these traditional Chinese medicines are the abundant natural resources to search for new drugs. There is also some evidence that the cytostatic effect of multiple compounds in a whole plant extracts on cancer cells is often better than the effect of their particular biologically active compounds.[15] It has been suggested that there are multiple active ingredients in Chinese medicinal herbs which may inhibit the malignancies effectively through one or more of the following mechanisms of tumor metastasis: (i) induction of cells differentiation, (ii) interruption of DNA synthesis or blockage of cell division, and induction of cell apoptosis.[16,17] Although many studies have demonstrated that the C. militaris is effective in treating cancers, few researches focus on its effect on human chronic myeloid leukemia in detail. In the present study, we investigated the effects of CMF on the proliferation and induction of apoptosis of K562 cells, and tried to determine the possible mechanisms of its antitumor effect. The in vitro cytotoxicity analysis indicated that CMF showed a strong anti-proliferative effect on K562 cells with IC50 value of 34.1 ± 2.0 after 48 h incubation. In addition, CMF displayed less toxicity on normal human cell line L-02. The result of cell cycle analysis evaluated by flow cytometer showed that CMF could induce S phase arrest and apoptosis in K562 cells. Western blot analysis showed that CMF could cause significantly activation of cleaved caspsed-3, which was accompanied by an evident cleavage of PARP. These data proved the involvement of the caspase in CMF-triggered irreversible apoptosis in K562 cells. It is known that mitochondria play an essential role in the regulation of apoptotic cell death, since both the intrinsic and extrinsic apoptosis pathways can converge at the mitochondrial level and trigger mitochondrial membrane permeabilization.[18] To determine the underlying mechanism of apoptosis induced by CMF, the mitochondrial transmembrance potential and the oxygen consumption rate of CMFtreated cells were then compared with those of the untreated cells. According to the results, the mitochondria function may be disrupted by decreased mitochondria transmembrance potential after CMF treated, indicating with the lower oxygen consumption rate. These data suggested that CMF-induced apoptosis might be involved by the mitochondrial dysfunction. Therefore, CMF may, in the future, have potential therapeutic applications for chronic myeloid leukemia. In vitro оценка Кордицепс militaris в качестве потенциального радиопротектора. Излучения, является важным компонентом терапии для широкого спектра онкологических заболеваний. Однако, это вызывает повреждение ДНК и гибель клеток в нормальные клетки и результаты в неблагоприятных побочных эффектов. Кордицепс militaris (C. militaris), традиционный лекарственный гриб, производит биологически активных соединений, кордицепина (3'deoxyadenosine) и имеет несколько фармакологических активностей, таких как противоопухолевой, антиметастатической, антиоксидантным и иммуномодулирующим действием. Настоящее исследование было предпринято, чтобы выяснить : может ли CM-AE, экстракт получен от C. militaris оказывает защитное действие против радиационно-индуцированных повреждений ДНК. Защитные эффекты CM-AE были по сравнению с теми, кордицепина. CM-AE эффективно увеличить свободное антирадикальное активности и снижение радиационно-индуцированные выделения плазмидной ДНК разрывов ДНК в in vitro исследований. CM-AE значительно ингибирует генерацию активных форм кислорода (АФК) и клеточных повреждений ДНК в 2 гр облученных китайского хомяка яичников (чо)K1 клеток. Кроме того, лечение CM-AE индуцированной аналогичного уровня фосфорилированных H2AX в клетках, что отражает первоначальную ДНК двунитевых разрывов в облученных клетках по сравнению с необлученной CHO-K1 клетки. Однако, кордицепина не посмотреть бесплатно антирадикальное деятельности и не защищают от радиационно-индуцированных ДНК плазмиды или повреждения клеточной ДНК. Эти результаты позволяют предположить, что бесплатно 73 антирадикальное деятельности CM-AE вносит свой вклад в ее ДНК, радиопротекторный эффекты, и, что защитные эффекты CM-AE намного более эффективны для тех, кордицепина. Данные, представленные в данном исследовании, могут содержать полезную информацию для скрининга мощным радиопротекторным материалов. Int J Mol Med. 2014 Nov;34(5):1349-57. doi: 10.3892/ijmm.2014.1901. Epub 2014 Aug 18. In vitro evaluation of Cordyceps militaris as a potential radioprotective agent. Jeong MH1, Park YS2, Jeong DH2, Lee CG2, Kim JS2, Oh SJ2, Jeong SK2, Yang K2, Jo WS2. Author information 1Department of Microbiology, Dong-A University College of Medicine, Busan 619-953, Republic of Korea. Radiation is an important component of therapy for a wide range of malignant conditions. However, it triggers DNA damage and cell death in normal cells and results in adverse side-effects. Cordyceps militaris (C. militaris), a traditional medicinal mushroom, produces the bioactive compound, cordycepin (3'deoxyadenosine) and has multiple pharmacological activities, such as antitumor, antimetastatic, antioxidant and immunomodulatory effects. The present study was undertaken to investigate whether CM-AE, an extract obtained from C. militaris exerts protective effects against radiation-induced DNA damage. The protective effects of CM-AE were compared with those of cordycepin. CM-AE effectively increased free radical scavenging activity and decreased radiation-induced plasmid DNA strand breaks in in vitro assays. CM-AE significantly inhibited the generation of reactive oxygen species (ROS) and cellular DNA damage in 2 Gy irradiated Chinese hamster ovary (CHO)-K1 cells. Moreover, treatment with CM-AE induced similar levels of phosphorylated H2AX in the cells, which reflects the initial DNA double-strand breaks in the irradiated cells compared with the non-irradiated CHO-K1 cells. However, cordycepin did not show free radical scavenging activity and did not protect against radiation-induced plasmid DNA or cellular DNA damage. These results suggest that the free radical scavenging activity of CM-AE contributes towards its DNA radioprotective effects and that the protective effects of CM-AE are much more potent to those of cordycepin. The data presented in this study may provide useful information for the screening of potent radioprotective materials. Физико-химические свойства и цитотоксический потенциал Кордицепс sinensis метаболитов. Данное исследование было проведено для оценки деятельности антиоксидант, биохимических свойств и биологической активности одного из энтомопатогенных грибов Кордицепс sinensis. Анализ грибковых метаболитов указывают, что избыток свободного сахара глюкозы; высокий компонент органических кислот лимонной кислоты с 10-дневной культурной среды и глутамата был преобладающим аминокислот наблюдаются с 3-дневной культуральной среды. Максимальная общая полифенолы и флавоноиды обнаружены в 15-дневной культуральной среды. Для теста цитотоксичности, трех клеточных линий рака, HepG2 (печень), MCF-7 (рак молочной железы) и А549 (легких) были использованы. СК50 значения высочайшей токсичности HepG2 клеток линии наблюдались с 10-день, культивируемых в среде, наибольшая токсичность MCF-7 и А549 наблюдалось на 5-день, культивируемых в среде. Это первое исследование, отчетность по сильным антиоксидантом и цитотоксический потенциал C. sinensis. Среды культивирования C. sinensis, таким образом, может быть использован в качестве эффективного антиоксидантного и противоопухолевого лечения естественного происхождения. Nat Prod Res. 2014 Aug 19:1-5. [Epub ahead of print] Physico-chemical properties and cytotoxic potential of Cordyceps sinensis metabolites. Lee EJ1, Jang KH, Im SY, Lee YK, Farooq M, Farhoudi R, Lee DJ. Author information 1a Department of Crop Science and Biotechnology , Dankook University , Cheonan , Republic of Korea. This study was conducted to estimate the antioxidant activities, biochemical properties and biological activities of one of the entomopathogenic fungi, Cordyceps sinensis. Analysis of fungal metabolites indicated that the most abundant free sugar was glucose; the highest component of organic acids was citric acid from 10-day culture medium and the glutamate was the predominant amino acid observed from 3-day 74 culture medium. Maximum total polyphenols and flavonoids were detected in the 15-day culture medium. For cytotoxicity test, three cancer cell lines, HepG2 (liver), MCF-7 (breast) and A549 (lung) were used. The IC50 values of the highest toxicity of HepG2 cell lines were observed from 10-day cultured medium, whereas the highest toxicity of MCF-7 and A549 was observed on 5-day cultured medium. This is the first study reporting on the strong antioxidant and cytotoxic potential of C. sinensis. Culture medium of C. sinensis may thus be used as an effective antioxidant and anticancer treatment of natural origin. Выделение, характеристика и Противоопухолевая активность роман Heteroglycan из Культивированного мицелия из Cordyceps sinensis. Роман heteroglycan, Кордицепс sinensis полисахарид-1 (молекулярная масса 1 17 × 10(5) Da), является изолированной и очищенной от мицелием гриба C. sinensis получены с помощью твердотельных культуры. Структурная характеристика химического анализа GC-MS, ИК -, и ЯМРспектроскопии показали, что C. sinensis полисахарид, 1 был в основном состоит из (1 → 6)-связанных α-D-Glc-α-D-Gal, с незначительными β-(1 → 4)-D-Xyl и β-(1 → 4)-D-Man остатков, вероятно, расположенном в боковой цепи с малым количеством α-(1 → 3)-L-Rha остатка. В биологических анализах, C. sinensis полисахарид-1 значительно ингибирует пролиферацию саркома-180 клеток и апоптоза, в зависимости от дозы образом. Дальнейшие исследования помогут пролить свет на противоопухолевый механизм C. sinensis полисахарид 1 и поощрять его использование для разработки новых, эффективных противоопухолевых препаратов. Planta Med. 2014 Aug;80(13):1107-12. doi: 10.1055/s-0034-1382960. Epub 2014 Aug 15. Isolation, Characterization, and Antitumor Activity of a Novel Heteroglycan from Cultured Mycelia of Cordyceps sinensis. Mei YX, Yang W, Zhu PX, Peng N, Zhu H, Liang YX. Author information State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, College of Life Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan, P. R. China. A novel heteroglycan, Cordyceps sinensis polysaccharide 1 (molecular weight 1 17 × 10(5) Da), was isolated and purified from mycelia of the fungus C. sinensis obtained by solid-state culture. Structural characterization by chemical analysis, GC-MS, FTIR, and NMR spectroscopy showed that C. sinensis polysaccharide 1 was mainly composed of (1 → 6)-linked α-D-Glc and α-D-Gal, with minor β-(1 → 4)-D-Xyl and β-(1 → 4)-D-Man residues probably located in the side chains with a trace amount of α-(1 → 3)-L-Rha residue. In biological assays, C. sinensis polysaccharide 1 significantly inhibited proliferation of sarcoma 180 cells and induced apoptosis in a dose-dependent manner. Further studies will elucidate the antitumor mechanism of C. sinensis polysaccharide 1 and promote its utilization for the development of novel, effective anticancer drugs. Кордицепина вниз-регулирует множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ)/HIF-1α через регулировочный AMPK/mTORC1 сигнализации в GBC-SD желчного пузыря раковые клетки. Рак желчного пузыря является наиболее распространенной злокачественной опухоли желчных протоков, с низкой 5-летней выживаемости и плохой прогноз. Роман эффективные методы лечения крайне необходимы для терапии данного заболевания. Здесь мы показали, что кордицепина, биологически активных соединений в род Cordyceps, индуцированное торможение роста и апоптоза в культивируемых желчного пузыря раковые клетки (Mz-ChA-1, QBC939 и GBC-SD линий). Мы обнаружили, что кордицепина ингибирует mTOR комплекс 1 (mTORC1) активации и вниз регулируется множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ)/стабилизаторы гипоксия-индуцируемого фактора 1α (HIF-1α) выражение посредством активации амф-активированной протеинкиназы (AMPK) сигнализации в рак желчного пузыря GBC-SD клеток. Наоборот, AMPKα1-shRNA истощения резко тормозится кордицепина-индуцированных молекулярных изменений, а также GBC-SD апоптоз клеток. Кроме того, наши результаты показали, что комбинированное лечение с малой концентрацией кордицепина может заметно повысить chemosensitivity GBC-SD клеток гемцитабин и 5-фторурацил (5-фу), и механизм могут быть отнесены к активации AMPK и МЛУ деградации. В резюме, кордицепина индуцирует торможение роста и апоптоза в желчном пузыре раковых клеток 75 посредством активации AMPK сигнализации. Кордицепина может быть новый перспективный препарат или химио-адъювант для рака желчного пузыря. Int J Mol Sci. 2014 Jul 18;15(7):12778-90. doi: 10.3390/ijms150712778. Cordycepin down-regulates multiple drug resistant (MDR)/HIF-1α through regulating AMPK/mTORC1 signaling in GBC-SD gallbladder cancer cells. Wu WD1, Hu ZM2, Shang MJ3, Zhao DJ4, Zhang CW5, Hong DF6, Huang DS7. Author information 1Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery, Zhejiang Provincial People's Hospital, Hangzhou 310014, China. wuweidingapple@126.com. Gallbladder cancer is the most common malignancy of the bile duct, with low 5-year survival rate and poor prognosis. Novel effective treatments are urgently needed for the therapy of this disease. Here, we showed that cordycepin, the bioactive compound in genus Cordyceps, induced growth inhibition and apoptosis in cultured gallbladder cancer cells (Mz-ChA-1, QBC939 and GBC-SD lines). We found that cordycepin inhibited mTOR complex 1 (mTORC1) activation and down-regulated multiple drug resistant (MDR)/hypoxia-inducible factor 1α (HIF-1α) expression through activating of AMP-activated protein kinase (AMPK) signaling in gallbladder cancer GBC-SD cells. Contrarily, AMPKα1-shRNA depletion dramatically inhibited cordycepin-induced molecular changes as well as GBC-SD cell apoptosis. Further, our results showed that co-treatment with a low concentration cordycepin could remarkably enhance the chemosensitivity of GBC-SD cells to gemcitabine and 5-fluorouracil (5-FU), and the mechanism may be attributed to AMPK activation and MDR degradation. In summary, cordycepin induces growth inhibition and apoptosis in gallbladder cancer cells via activating AMPK signaling. Cordycepin could be a promising new drug or chemo-adjuvant for gallbladder cancer. 1. Введение Рак желчного пузыря-это наиболее часто злокачественные опухоли желчных протоков [1]. Это очень агрессивные и смертельные новообразования, связанные с высокой смертностью и плохой прогноз [2,3,4]. Несмотря на недавние успехи в диагностических и терапевтических подходов, общая 5-летняя выживаемость в целом низкая [2]. Из-за отсутствия специфических симптомов и признаков, эту злокачественную опухоль обычно обнаруживается на поздней/позднем этапе [2,3,4]. По сути, сравнительно немногие пациенты с раком желчного пузыря диагностируются до операции [2,3,4]. Хирургическая резекция является единственным лечебной терапии для рака желчного пузыря в клинической практике, однако, большая доля пациентов развиваются рецидивы или даже метастазы после операции и/или традиционной химиотерапии или лучевой терапии [5,6]. Поэтому новых эффективных лечебных препаратов и вспомогательных веществ, срочно, этой разрушительной болезни. Кордицепина (или 3'-deoxyadenosine), биологически активных соединений, присутствующих в виды рода Кордицепс [7,8,9,10], было показано, оказывают большое разнообразие анти-опухоли способностей, в том числе ингибирование пролиферации клеток, индукции апоптоза, ингибирование агрегации тромбоцитов, миграции клеток [7,8,9,10,11,12,13]. Тем не менее, потенциальная роль кордицепина в желчного пузыря, раковых клеток и молекулярные механизмы, лежащие в основе не полностью решены. AMP-активированной протеинкиназы (AMPK), эволюционно консервативных серин/треонин протеинкиназы, является ключевым энергетическим датчика во всех эукариотических клетках [14]. Недавние исследования показали, что активация AMPK может также стимулировать апоптоз раковых клеток и подавлять рост клеток [15,16]. По сути, многие противораковые препараты, в том числе винкристин [17,18], таксол [19,20], темозоламид [21], и доксорубицин [22,23] активация AMPKзависимого пути апоптоза клеток. Далее, урсоловая кислота [24], EGCG [25], кверцетин [26] и других противоопухолевых экстрактов растений было показано, ингибируют различные раковые клетки посредством активации AMPK signalings. Между тем, активация AMPK важно перекиси водорода (H2O2)-индуцированного апоптоза в культивируемых нейронов [27] и кератиноцитов кожи [28]. В этом отчете мы исследовали ингибирующее роль кордицепина в культивируемых желчного пузыря, раковых клеток и изучены молекулярные механизмы, лежащие в основе. Мы представляем доказательства того, что активация AMPK по кордицепина индуцирует mTORC1 в активации и стабилизаторы гипоксия-индуцируемого фактора 1α (HIF-1α)/множественной лекарственной 76 устойчивостью (МЛУ) деградации, который является посредником GBC-SD рака желчного пузыря торможению роста и апоптоза. 3. Обсуждение В комплекс mTOR 1 (mTORC1), комплекс, состоящий из mTOR, " Раптор " и mSIN1, контролирует белок перевод, роста клеток, ангиогенеза и метаболизма [36]. MTORC1 избыточная активация обнаружен рак желчного пузыря и многие другие онкологические заболевания [36,37,38,39]. Активация mTORC1 результаты в фосфорилирование ряда нижестоящих мишеней (т.е., S6K1 и 4EBP1), участвующих в прогрессирование рака и устойчивость к апоптозу. MTORC1 активации может индуцировать транскрипцию мРНК ряда ключевых онкогенных белков, в том числе циклин D1 и HIF1α [36,37,38,39], последняя является фактором транскрипции, который играет центральную роль в биологических процессах в условиях гипоксии. HIF-1α является более выраженное у рака желчного пузыря, который коррелирует с плохим прогнозом [40,41]. Недавние исследования показали, что активация AMPK может подавить рост опухолевых клеток посредством активации mTORC1 [22,42,43], который осуществляется посредством двух способов: а) путем фосфорилирования и активации TSC2 (Туберозный склероз белка 2) [44], mTORC1 негативный регулятор [44], и путем фосфорилирования и инактивации Raptor (нормативно-связанный белок mTOR) [45]. В этой работе, мы обнаружили, что кордицепина подавлял mTORC1 и активации HIF-1α выражение в GBC-SD клетки, в которых было почти отменено судом AMPKα1 shRNA истощения. Таким образом, мы полагаем, что кордицепина активирует AMPK, и в-активирует mTORC1, возможно, внизрегулировать HIF-1α выражение в GBC-SD клеток. Одним из механизмов лекарственной устойчивости раковых клеток-это аномалия из противоопухолевых препаратов, транспорта, опосредованного членов ABC надсемейство транспортных белков (т.е. MDR) [31]. МЛУ и других ABC транспортеры работают как насосы измеряем активное снижение внутриклеточной концентрации анти-раковых препаратов [31]. Исследования показали, что MDR более выраженное у рака желчного пузыря, и ассоциируется с плохим прогнозом [32]. MDR истощение/вниз-регулирование могло бы увеличить chemosensitivity желчного пузыря раковые клетки [46]. В этом исследовании мы обнаружили, что mTORC1 активации важно для МЛУ выражение в GBC-SD клеток, и RAD001, а также два AMPK активаторы (AICAR и A769662) указанных МЛУ выражение. Далее, кордицепина-индуцированной МЛУ деградации был в значительной степени ингибируется AMPK истощение, указывая, что AMPK активации кордицепина тормозит mTORC1-вниз, регулируют МЛУ в GBC-SD клеток. Противоопухолевый эффекты кордицепина, были рассмотрены различные группы как in vitro и ксенотрансплантатов у мышей [47,48,49]. Далее, кордицепина может оказывать анти-ангиогенеза способности [48]. Наши in vitro результаты на рис. 4 показал, что кордицепина потенцированные противоопухолевой эффективности химио-препаратов (гемцитабин и 5-FU) в GBC-SD клеток [34,35]. Базовый механизм может быть из-за кордицепина-индуцированной активации AMPK. Учитывая факты, что гемцитабин 5-фу и как часто используемых анти-рак желчного пузыря агентов [34,35], и кордицепина, биологически активных соединений, изолированных из китайского растения, показывает низкую токсичность для мыши нормальных тканях [48]мы предлагаем кордицепина, что также может взаимодействовать с гемцитабин/5-фу против человеческого рака желчного пузыря. Однако, дальнейшие исследования, включая исследования на животных и возможные клинические испытания необходимы, чтобы поддержать эту гипотезу. 5. Выводы Вкратце, результаты этой работы показывают, что кордицепина вниз-регулирует МЛУ/HIF-1α через регулировочный AMPK/mTORC1 сигнализации в GBC-SD желчного пузыря раковые клетки. Далее, кордицепина может увеличить химио-чувствительность известных химиопрепаратов (т.е., гемцитабин и 5-FU), указывая, что кордицепина может быть новый перспективный препарат или химио-для адъювантной терапии рака желчного пузыря. 1. Introduction Gallbladder cancer is the most frequent malignancy of the bile duct [1]. It is a highly aggressive and lethal neoplasm associated with high mortality rate and poor prognosis [2,3,4]. Despite recent progresses in diagnostic and therapeutic approaches, the 5-year overall survival is generally low [2]. Due to the absence of specific symptoms and signs, this malignancy is usually detected at an advanced/late stage [2,3,4]. As a 77 matter of fact, relatively few patients with gallbladder cancer are diagnosed prior to surgery [2,3,4]. The surgical resection is the only curative therapy for gallbladder cancer in clinical practices; however, a large proportion of patients will develop recurrences or even metastasis following surgery and/or traditional chemotherapy or radiotherapy [5,6]. Therefore, novel effective therapeutic drugs and adjuvants are urgently needed for this devastating disease. Cordycepin (or 3'-deoxyadenosine), the bioactive compound present in species of the genus Cordyceps [7,8,9,10], has been shown to exert a large variety of anti-tumor abilities, including cell proliferation inhibition, apoptosis induction, platelet aggregation inhibition, cell migration [7,8,9,10,11,12,13]. However, the potential role of cordycepin in gallbladder cancer cells and the underlying molecular mechanisms are not fully addressed. AMP-activated protein kinase (AMPK), an evolutionarily conserved serine/threonine protein kinase, is an key energy sensor in all eukaryotic cells [14]. Recent studies have shown that AMPK activation could also promote cancer cell apoptosis and inhibit cell growth [15,16]. As a matter of fact, many anti-cancer drugs including vincristine [17,18], taxol [19,20], temozolomide [21], and doxorubicin [22,23] activate AMPKdependent cell apoptosis pathway. Further, ursolic acid [24], EGCG [25], quercetin [26] and other antitumor plant extracts were shown to inhibit different cancer cells through activating AMPK signalings. Meanwhile, activation of AMPK is important for hydrogen peroxide (H2O2)-induced apoptosis in cultured neurons [27] and skin keratinocytes [28]. In this report, we investigated the inhibitory role of cordycepin in cultured gallbladder cancer cells and studied the underlying molecular mechanisms. We present evidence that AMPK activation by cordycepin induces mTORC1 in-activation and hypoxia-inducible factor 1α (HIF-1α)/multiple drug resistant (MDR) degradation, which mediates GBC-SD gallbladder cancer cell growth inhibition and apoptosis. 3. Discussion The mTOR complex 1 (mTORC1), a complex composed of mTOR, Raptor and mSIN1, controls protein translation, cell growth, angiogenesis, and metabolism [36]. MTORC1 over-activation is detected in gallbladder cancer and many other cancers [36,37,38,39]. Activation of mTORC1 results in phosphorylation of a number of downstream targets (i.e., S6K1 and 4E-BP1) involved in cancer progression and apoptosis resistance. MTORC1 activation could induce the mRNA transcription of a number of key oncogenic proteins including cyclin D1 and HIF-1α [36,37,38,39], the latter is a transcription factor that plays a central role in biologic processes under hypoxic conditions. HIF-1α is over-expressed in gallbladder cancer, which is correlated with the poor prognosis [40,41]. Recent studies have shown that AMPK activation could suppress tumor cell growth through in-activating mTORC1 [22,42,43], which is mediated through two following ways: by phosphorylation and activation of TSC2 (Tuberous sclerosis protein 2) [44], the mTORC1 negative regulator [44], and by phosphorylation and inactivating of Raptor (regulatory associated protein of mTOR) [45]. In this work, we found that cordycepin inhibited mTORC1 activation and HIF-1α expression in GBC-SD cells, which was almost reversed by AMPKα1 shRNA depletion. Thus, we propose that cordycepin activates AMPK, and in-activates mTORC1 to possibly down-regulate HIF-1α expression in GBC-SD cells. One of the mechanisms of drug resistance in cancer cells is abnormity of the anticancer drug transport, mediated by members of the ABC superfamily of transport proteins (i.e., MDR) [31]. MDR and other ABC transporters work as efflux pumps to actively decrease the intracellular concentration of anti-cancer drugs [31]. Studies have shown that MDR is over-expressed in gallbladder cancer, and is associated with poor prognosis [32]. MDR depletion/down-regulation could increase the chemosensitivity of gallbladder cancer cells [46]. In this study, we found that mTORC1 activation is important for MDR expression in GBC-SD cells, and RAD001 as well as two AMPK activators (AICAR and A769662) downregulated MDR expression. Further, cordycepin-induced MDR degradation was largely inhibited by AMPK depletion, indicating that AMPK activation by cordycepin inhibits mTORC1 to down-regulate MDR in GBC-SD cells. The anti-tumor effects of cordycepin have been examined by different groups both in vitro and in mice xenografts [47,48,49]. Further, cordycepin could exert anti-angiogenesis ability [48]. Our in vitro results in Figure 4 demonstrated that cordycepin potentiated the anti-tumor efficiency of chemo-agents (gemcitabine and 5-FU) in GBC-SD cells [34,35]. The underlying mechanism might be due to cordycepin-induced AMPK activation. Given the facts that gemcitabine and 5-FU are both commonly used anti-gallbladder cancer agents [34,35], and cordycepin, the bioactive compound isolated from Chinese herb, shows low toxicity to 78 mouse normal tissues [48], we propose that cordycepin could also synergize with gemcitabine/5-FU against human gallbladder cancer. However, further studies, including animal studies and possible clinical trials are needed to support this hypothesis. 5. Conclusions In brief, the results of this work suggest that cordycepin down-regulates MDR/HIF-1α through regulating AMPK/mTORC1 signaling in GBC-SD gallbladder cancer cells. Further, cordycepin could increase the chemosensitivity of known chemo-drugs (i.e., gemcitabine and 5-FU), indicating that cordycepin could be a promising new drug or chemo-adjuvant for gallbladder cancer therapy. Анти-грипп эффект Кордицепс militaris через иммуномодуляции в DBA/2 мышь модели. В иммуномодуляторное, а также анти-грипп эффекты Кордицепса экстракт, были исследованы с помощью DBA/2 мышь модели. Три разных концентрациях Кордицепс экстракт красного женьшеня, экстракт или питьевой воды были пероральном введении мышам в течение семи дней, а затем мыши были интраназально заражены 2009 пандемии гриппа H1N1. Изменениями массы тела и выживаемости были измерены в день после заражения. В плазме IL-12, TNF-α, а частота естественных киллеров (NK-клеток) были измерены на 4 день после инфицирования. DBA/2 штамм был сильно подвержены вирусом H1N1. Мы также обнаружили, что Кордицепс экстракт было против гриппа эффект, что было связано со стабильной массы тела и уменьшению смертности. Анти-вирусный эффект Кордицепса выписка по гриппозной инфекции было опосредствовано предположительно, увеличение ил-12 самовыражения и большего числа NK-клеток. Однако высокая ФНО-α в выражение после заражения вирусом H1N1 у мышей, не получавших лечение с Кордицепс экстракт предложил двустороннего эффекта экстракта на хост иммунной регуляции. J Microbiol. 2014 Aug;52(8):696-701. doi: 10.1007/s12275-014-4300-0. Epub 2014 Jul 18. Anti-influenza effect of Cordyceps militaris through immunomodulation in a DBA/2 mouse model. Lee HH1, Park H, Sung GH, Lee K, Lee T, Lee I, Park MS, Jung YW, Shin YS, Kang H, Cho H. Author information 1College of Pharmacy, Duksung Women's University, Seoul, 132-714, Republic of Korea. The immune-modulatory as well as anti-influenza effects of Cordyceps extract were investigated using a DBA/2 mouse model. Three different concentrations of Cordyceps extract, red ginseng extract, or drinking water were orally administered to mice for seven days, and then the mice were intranasally infected with 2009 pandemic influenza H1N1 virus. Body weight changes and survival rate were measured daily postinfection. Plasma IL-12, TNF-α, and the frequency of natural killer (NK) cells were measured on day 4 postinfection. The DBA/2 strain was highly susceptible to H1N1 virus infection. We also found that Cordyceps extract had an anti-influenza effect that was associated with stable body weight and reduced mortality. The anti-viral effect of Cordyceps extract on influenza infection was mediated presumably by increased IL-12 expression and greater number of NK cells. However, high TNF-α expression after infection of H1N1 virus in mice not receiving treatment with Cordyceps extract suggested a two-sided effect of the extract on host immune regulation. Участие аутофагии в кордицепина-индуцированного апоптоза в человеческой карциномы простаты LNCaP клеток. Кордицепина, активный ингредиент, насекомых, грибка Кордицепс spp., показывает сильные антиоксидантные и противораковые мероприятия. Несколько молекулярных механизмов, отнесенных к его тормозящее действие на широкий спектр опухолевых клеток; однако механизм, вызывая гибель раковых клеток-это еще не понятая. Для текущего исследования, в дальнейшем мы исследовали механизм, ответственный за таргетинг кордицепина-индуцированной гибели клеток и его связь с аутофагии в человеческой карциномы простаты LNCaP клеток. Наши результаты показывают, что кордицепина привело к значительному сокращению в LNCaP выживаемость клеток путем индукции апоптотической гибели клеток. Кордицепина лечения вызывал Зависимое от дозы увеличение про-апоптоза Bax и снижение анти-апоптоза Bcl-2, запуск коллапсу митохондриального мембранного потенциала и активации каспазы-9 и-3. Кордицепина-индуцированной гибели клеток 79 также была связана с индукцией ФАС и смерти рецептора 5, активация каспазы-8, и усечение Bid (tBid), предполагая, что tBid может служить для подключения активация обоих митохондрийопосредованной внутренней и смерти рецептор-опосредованного внешними апоптотических путей. Общий ингибитор каспаз z-VAD-fmk, полностью отменены, кордицепина-индуцированной гибели клеток, демонстрируя, что кордицепина-индуцированного апоптоза зависит от активации каспаз. Кордицепина также стимулировало аутофагии, которая свидетельствует рост микротрубочекassociated protein легкие цепи-3 (LC3) puncta, накопление LC3-II, и повышение autophagic потока; однако, блокада autophagic потока autophagic ингибитор bafilomycin A1 способствовало клеткипереход к апоптотической гибели клеток. Эти результаты показывают, что кордицепинаиндуцированной аутофагии функционирует как механизм выживания, и, что аутофагия-это потенциальные стратегии для лечения рака предстательной железы, который устойчив к воздействию pro-apoptotic therapeutics. Environ Toxicol Pharmacol. 2014 Jul;38(1):239-50. doi: 10.1016/j.etap.2014.06.003. Epub 2014 Jun 14. Involvement of autophagy in cordycepin-induced apoptosis in human prostate carcinoma LNCaP cells. Lee HH1, Kim SO2, Kim GY3, Moon SK4, Kim WJ5, Jeong YK6, Yoo YH7, Choi YH8. 1Daegu Gyeongbuk Institute of Science & Technology, Daegu 711-873, Republic of Korea. Cordycepin, an active ingredient of the insect fungus Cordyceps spp., shows strong antioxidant and anticancer activities. Several molecular mechanisms have been attributed to its inhibitory effects on a wide range of tumor cells; however, the mechanism causing cancer cell death is still obscure. For the current study, we further investigated the mechanism responsible for targeting cordycepin-induced cell death and its association with autophagy in human prostate carcinoma LNCaP cells. Our results show that cordycepin resulted in significant reduction in LNCaP cell survival by inducing apoptotic cell death. Cordycepin treatment caused a dose-dependent increase of pro-apoptotic Bax and decrease of anti-apoptotic Bcl-2, triggering collapse of the mitochondrial membrane potential and activation of caspase-9 and -3. Cordycepin-induced cell death was also associated with induction of Fas and death receptor 5, activation of caspase-8, and truncation of Bid (tBid), suggesting that tBid might serve to connect activation of both the mitochondrial-mediated intrinsic and death receptor-mediated extrinsic apoptotic pathways. The general caspase inhibitor, z-VAD-fmk, completely abolished cordycepin-induced cell death, demonstrating that cordycepin-induced apoptosis was dependent on the activation of caspases. Cordycepin also stimulated autophagy, which was evidenced by an increase in microtubule-associated protein light chain-3 (LC3) puncta, accumulation of LC3-II, and elevation of autophagic flux; however, blockage of autophagic flux by the autophagic inhibitor bafilomycin A1 promoted cell-switching to apoptotic cell death. These findings suggest that cordycepin-induced autophagy functions as a survival mechanism and that autophagy is a potential strategy for treating prostate cancer that is resistant to pro-apoptotic therapeutics Экстракт Cordyceps militaris ингибирует ангиогенез in vitro и подавляет рост опухолей человеческих клеток злокачественной меланомы. Ангиогенез необходим для развития опухоли и метастазирования. Среди нескольких ангиогенных факторов, рецептора фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF) является важным для полученные из опухоли ангиогенез и часто overexpressed в солидных опухолях. Таким образом, многих противоопухолевых стратегий в отношении VEGF были разработаны, чтобы препятствовать развитию рака ангиогенеза, предложив успешного лечения солидных раков. Однако, существует ряд проблем, таких как вредных эффектов на нормальные усилению кровотока в клинических испытаниях. Учитывая это, мы использовали Кордицепс militaris в качестве противоопухолевого подход благодаря своей биологической безопасности в условиях in vivo. Травяные лекарственного гриба Кордицепс militaris, как сообщается, посмотреть потенциальными противоопухолевыми свойствами, в том числе анти-ангиогенный потенциал; однако, его свойства бетона, который еще не полностью показали. В данном исследовании мы ставили целью выяснения биологической роли Кордицепс militaris экстракт в клетках опухоли, особенно в области регулирования ангиогенеза и роста опухоли человека злокачественных клеток меланомы линии. Мы показали, что Кордицепс militaris экстракт удивительно подавление роста опухоли посредством индукции апоптотической гибели клеток в культуре, что ссылки на отмене продукцию сосудистого эндотелиального фактора роста в клетках 80 меланомы. За этим последовало смягчение Akt1 и GSK-3β активации, в то время как p38α фосфорилирования уровней были увеличены. Экстракт лечение в мышиной модели xenografted клеток меланомы человека привели к резкому противоопухолевый эффект с down-регуляции экспрессии VEGF. Результаты показывают, что подавление роста опухоли Кордицепс militaris экстракт, по меньшей мере, опосредовано его анти-angiogenicity и индукции апоптоза мощностей. Кордицепс militaris экстракт может быть мощный противоопухолевый фитопрепарат для солидных опухолей. Int J Oncol. 2014 Jul;45(1):209-18. doi: 10.3892/ijo.2014.2397. Epub 2014 Apr 24. Extract of Cordyceps militaris inhibits angiogenesis and suppresses tumor growth of human malignant melanoma cells. Ruma IM1, Putranto EW1, Kondo E2, Watanabe R2, Saito K2, Inoue Y3, Yamamoto K1, Nakata S2, Kaihata M4, Murata H1, Sakaguchi M1. 1Department of Cell Biology, Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, Okayama University, Okayama 700-8558, Japan. Angiogenesis is essential for tumor development and metastasis. Among several angiogenic factors, vascular endothelial growth factor receptor (VEGF) is important for tumor-derived angiogenesis and commonly overexpressed in solid tumors. Thus, many antitumor strategies targeting VEGF have been developed to inhibit cancer angiogenesis, offering insights into the successful treatment of solid cancers. However, there are a number of issues such as harmful effects on normal vascularity in clinical trials. Taking this into consideration, we employed Cordyceps militaris as an antitumor approach due to its biological safety in vivo. The herbal medicinal mushroom Cordyceps militaris has been reported to show potential anticancer properties including anti-angiogenic capacity; however, its concrete properties have yet to be fully demonstrated. In this study, we aimed to elucidate the biological role of Cordyceps militaris extract in tumor cells, especially in regulating angiogenesis and tumor growth of a human malignant melanoma cell line. We demonstrated that Cordyceps militaris extract remarkably suppressed tumor growth via induction of apoptotic cell death in culture that links to the abrogation of VEGF production in melanoma cells. This was followed by mitigation of Akt1 and GSK-3β activation, while p38α phosphorylation levels were increased. Extract treatment in mouse model xenografted with human melanoma cells resulted in a dramatic antitumor effect with down-regulation of VEGF expression. The results suggest that suppression of tumor growth by Cordyceps militaris extract is, at least, mediated by its anti-angiogenicity and apoptosis induction capacities. Cordyceps militaris extract may be a potent antitumor herbal drug for solid tumors. Полисахарид, экстракт Кордицепса sobolifera ослабление почечной травмы в endotoxemic крыс. Экстракты, полученные из Кордицепса были показаны упорядоченность различных фармакологических эффектов, в том числе иммуномодулирующей, противоопухолевой, гипогликемическое, антиоксидантное деятельности. Данное исследование было направлено для уточнения роли CS-P, полисахаридные фракции, изолированной из Кордицепса sobolifera, в модулирующем nephrofunctional ущерба в крысиной модели эндотоксемии. CS-P (500 мг/кг массы тела) была пероральном введении крысам в течение 4 недель до брюшины инъекции липополисахарида (LPS, 10 мг/кг массы тела). Предварительная обработка с CS-P значительно ослабляется вредное почечной функции, вызванной ЛПС, т.е., повышенное содержание в крови азота мочевины и креатинина, а также белка в моче. Гистопатологические обследования тканей почки, также показал, что CS-P улучшило ЛПС-индуцированных патологических отклонений. Индукция индуцируемая No-синтаза и перепроизводство азотной кислоты LPS были также значительно снижены за счет CS-P через ингибирование ядерного фактора-κB активации. Кроме того, CS-P предварительной обработки подавил плазменные уровни фактора некроза опухоли-альфа и интерлейкина-6. Одновременно, CS-P добавок мощно подавлял LPS-индуцированное повышение перекисного окисления липидов и заметно усиливается системы антиоксидантной защиты путем восстановления уровня супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы и каталазы в почках. В настоящее время результаты позволяют предположить, что CS-P предварительной обработки может защитить против LPS-срабатывает воспалительной реакции и почечной травмы у крыс. Food Chem Toxicol. 2014 Jul;69:281-8. doi: 10.1016/j.fct.2014.04.009. Epub 2014 Apr 19. 81 Polysaccharide extract of Cordyceps sobolifera attenuates renal injury in endotoxemic rats. Chiu CH1, Chyau CC1, Chen CC2, Lin CH1, Cheng CH3, Mong MC4. 1Research Institute of Biotechnology, Hungkuang University, 1018, Sec. 6, Taiwan Boulevard, Shalu Dist., Taichung 43302, Taiwan. Extracts derived from Cordyceps have been demonstrated to possess various pharmacological effects, including immunomodulatory, antitumor, hypoglycemic, and antioxidant activities. This study was aimed to clarify the role of CS-P, a polysaccharide fraction isolated from Cordyceps sobolifera, in modulating nephrofunctional damage in a rat model of endotoxemia. CS-P (500 mg/kg body weight) was orally administered to rats for 4 weeks before the peritoneal injection of lipopolysaccharide (LPS, 10 mg/kg body weight). Pre-treatment with CS-P significantly attenuated the deleterious renal functions caused by LPS, i.e., elevated blood urea nitrogen and creatinine as well as urine protein. Histopathological examination of kidney tissues also demonstrated that CS-P improved LPS-induced pathological abnormalities. The induction of inducible nitric oxide synthase and the overproduction of nitric acid by LPS were also significantly reduced by CS-P via inhibiting nuclear factor-κB activation. In addition, CS-P pre-treatment suppressed the plasma levels of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6. Concurrently, CS-P supplementation potently suppressed the LPS-induced rise of lipid peroxidation and markedly enhanced the antioxidant defense system by restoring the levels of superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and catalase in kidney. The present results suggested that CS-P pre-treatment could protect against LPS-triggered inflammatory responses and renal injury in rats. Кордицепина предотвратить IL-β-индуцированную экспрессию медиаторов воспаления в человека артроз хондроцитов. Кордицепина, нуклеозидные производные изолированы от Кордицепс, как сообщается, оказывают противовоспалительное, противоотечное, антидиабетические и renoprotective эффекты. Остеоартроз (ОА) представляет собой дегенеративное заболевание суставов с воспалительным компонентом, который управляет деградации внеклеточного матрикса хряща. Это исследование с целью оценить влияние кордицепина на человека OA хондроцитов. Методы: В этом исследовании человеческого OA хондроцитов были подавить с кордицепина на 10, 50 или 100 мкм и впоследствии стимулировали интерлейкин-1β (IL-1β) (5 нг/мл) в течение 24 ч. Производство простагландина Е2 (PGЕ2) и оксида азота (NO) оценивали по Грисс реакция и иммуноферментный анализ (ИФА). Экспрессию генов матриксных металлопротеиназ (ММП)-13, IL-6, индуцируемая No-синтаза (iNOS) и циклооксигеназы (ЦОГ-2) измеряли с помощью real-time полимеразной цепной реакции (ПЦР). ММП-13 и IL-6 белков в культуральной среде определяли с помощью цитокинов-специфического ELISA. Западная иммуноблотинга были использованы для анализа iNOS и COX-2 белка в культуральной среде. Ядерный фактор каппа-в (NF-κB) в регуляции работы были изучены с помощью Western иммуноблотинга. Результаты: Установлено, что кордицепина значительно ингибирует производство PGЕ2 и нет, индуцированной IL-1β. Кордицепина также значительно снизилось, IL-1β-стимулированной экспрессии генов и продукции ММР-13, IL-6, iNOS и COX-2 в OA хондроцитов. Установлено, что кордицепина ослабляется, IL-1β-индуцированной активации NF-κB путем подавления деградации его ингибиторный белок ядерного фактора каппа легкие полипептидные gene enhancer в B-клеток, ингибитор Альфа (IκB-α) в цитоплазме. Выводы: Мы показываем впервые противовоспалительной активностью кордицепина в человеческой OA хондроцитов. Таким образом, с помощью этого уникального профиля действия, кордицепина может оказаться потенциально привлекательного и нового терапевтического/профилактического средства для OA. Int Orthop. 2014 Jul;38(7):1519-26. doi: 10.1007/s00264-013-2219-4. Epub 2013 Dec 12. 82 Cordycepin prevented IL-β-induced expression of inflammatory mediators in human osteoarthritis chondrocytes. Ying X1, Peng L, Chen H, Shen Y, Yu K, Cheng S. 1Department of Orthopaedic Surgery, The Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, 109 Xue yuan xi Road, Wenzhou, 325000, China, yingxiaozhou@sina.com. Cordycepin, a nucleoside derivative isolated from Cordyceps, has been reported to exert antiinflammatory, antitumor, antidiabetic and renoprotective effects. Osteoarthritis (OA) is a degenerative joint disease with an inflammatory component that drives the degradation of cartilage extracellular matrix. This study aimed to assess the effects of cordycepin on human OA chondrocytes. METHODS: In this study, human OA chondrocytes were pretreated with cordycepin at 10, 50 or 100 μM and subsequently stimulated with interleukin-1β (IL-1β) (5 ng/ml) for 24 h. Production of prostaglandin E2 (PGE2) and nitric oxide (NO) were evaluated by the Griess reaction and an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Gene expression of matrix metalloproteinase (MMP)-13, IL-6, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclo-oxygenase (COX-2) was measured by real-time polymerase chain reaction (PCR). MMP-13 and IL-6 proteins in culture medium were determined using cytokine-specific ELISA. Western immunoblotting was used to analyse the iNOS and COX-2 protein production in culture medium. Nuclear factor kappa-B (NF-κB) activity regulation was explored using Western immunoblotting. RESULTS: Pretreatment with cordycepin significantly inhibited the production of PGE2 and NO induced by IL-1β. Cordycepin also significantly decreased the IL-1β-stimulated gene expression and production of MMP-13, IL-6, iNOS and COX-2 in OA chondrocytes. Pretreatment with cordycepin attenuated IL-1β-induced activation of NF-κB by suppressing degradation of its inhibitory protein nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor, alpha (IκB-α) in the cytoplasm. CONCLUSIONS: We show for the first time the anti-inflammatory activity of cordycepin in human OA chondrocytes. Thus, with this unique profile of actions, cordycepin may prove to be a potentially attractive and new therapeutic/preventive agent for OA. Chin Med. 2014 May 8;9:15. doi: 10.1186/1749-8546-9-15. eCollection 2014. Cordyceps cicadae induces G2/M cell cycle arrest in MHCC97H human hepatocellular carcinoma cells: a proteomic study. Wang H1, Zhang J2, Sit WH2, Lee CY2, Wan JM2. 1Food and Nutrition Division, School of Biological Sciences, The University of Hong Kong, Pokfulam Road, Hong Kong, SAR, China ; School of Biology and Pharmaceutical Engineering, Wuhan Polytechnic University, Wuhan, Hubei, China. Cordyceps cicadae is a medicinal fungus that is often used for treating cancer. However, the anticancer mechanisms of C. cicadae are largely unknown. This study aims to investigate the anticancer mechanisms of C. cicadae against hepatocellular carcinoma cells in vitro using a proteomic approach. METHODS: Human hepatocellular carcinoma MHCC97H cells were treated with a water extract of C. cicadae (0, 100, 250, 500, and 1000 μg/mL) for 48 h and harvested for cell viability assays. The significant differences in protein expression between control and C. cicadae-treated cells were analyzed by two-dimensional gelbased proteomics coupled with matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry. Flow cytometry analysis was employed to investigate the cell cycle and cell death. The anticancer molecular mechanism was analyzed by whole proteome mapping. RESULTS: The water extract of C. cicadae (0, 100, 250, 500, and 1000 μg/mL) inhibited the growth of MHCC97H cells in a dose-dependent manner via G2/M phase cell cycle arrest with no evidence of apoptosis. Among the identified proteins with upregulated expression were dynactin subunit 2, N-myc downstream-regulated gene 1, heat shock protein beta-1, alpha-enolase isoform 1, phosphatidylinositol transfer protein, and WD repeat-containing protein 1. Meanwhile, the proteins with downregulated expression were 14-3-3 gamma, BUB3, microtubule-associated protein RP/EB family member 1, thioredoxin-like protein, chloride intracellular channel protein 1, ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 5, xaa-Pro dipeptidase, 83 enoyl-CoA delta isomerase 1, protein-disulfide isomerase-related chaperone Erp29, hnRNP 2H9B, peroxiredoxin 1, WD-40 repeat protein, and serine/threonine kinase receptor-associated protein. CONCLUSION: The water extract of C. cicadae reduced the growth of human hepatocellular carcinoma MHCC97H cells via G2/M cell cycle arrest. Кордицепс cicadae индуцирует G2/M клеточного цикла в MHCC97H человеческих клеток гепатоцеллюлярной карциномы: протеомные исследования. Кордицепс cicadae-лекарственный гриб, который часто используется для лечения рака. Однако механизмы противоопухолевой C. cicadae в значительной степени неизвестны. Цель данной статьиисследовать механизмы противоопухолевой C. cicadae против клеток гепатоцеллюлярной карциномы in vitro с использованием протеомных подход. Методы: гепатоцеллюлярной карциномы человека MHCC97H клетки были обработаны водный экстракт C. cicadae (0, 100, 250, 500, и 1000 мкг/мл) в течение 48 ч и заготавливали на жизнеспособность клеток анализов. Существенные различия в экспрессии белков между контролем и C. cicadae обработанные клетки были проанализированы двумерный гель на основе протеомики в сочетании с матрицей при содействии лазерной десорбции / ионизации время полета массспектрометрии. Проточная цитометрия анализ был использован для расследования клеточного цикла и гибели клеток. Противоопухолевый молекулярный механизм был проанализирован весь proteome сопоставления. Результаты: водный экстракт C. cicadae (0, 100, 250, 500, и 1000 мкг/мл), подавляет рост MHCC97H клеток является дозозависимым через фазе G2/M клеточного цикла без признаков апоптоза. Среди выявленных белков с upregulated выражения были динактина субъединицы 2, N-myc вниз по течению, регулируемых генов 1, белок теплового шока бета-1, Альфа-енолазы изоформы 1, фи передачи белка, и WD повторяю, содержащие белок 1. Между тем, белки с указанных выражения были 14-3-3 гамма, BUB3, системы микротрубочек, связанные белка RP/EB 1 члена семьи, thioredoxinкак белка, хлорид внутриклеточный белок канала 1, ectonucleoside трифосфата diphosphohydrolase 5, хаа-Pro dipeptidase, enoyl-КоА-Дельта-продуцентов ксилозоизомеразы 1, белка-дисульфида продуцентов ксилозоизомеразы, связанных с шаперона Erp29, hnRNP 2H9B, peroxiredoxin 1, WD-40 повторить белка, и серин/треонин-киназы рецепторов, связанных белка. Вывод: вода, экстракт C. cicadae уменьшается рост человека гепатоцеллюлярной карциномы MHCC97H клетки через G2/M клеточного цикла. Int J Oncol. 2014 Jul;45(1):373-82. doi: 10.3892/ijo.2014.2414. Epub 2014 May 5. The effect of Cordyceps extract and a mixture of Ganoderma lucidum/Agaricus Blazi Murill extract on human endometrial cancer cell lines in vitro. Hahne JC, Meyer SR, Dietl J, Honig A. Department of Gynecology, Medical University of Würzburg, D-97080 Würzburg, Germany. Endometrial carcinoma is the most common gynaecological malignancy. Nevertheless there is a lack of curative therapies, especially for patients diagnosed with late stage, recurrent or aggressive disease, who have a poor prognosis. Cordyceps Sinensis, Ganoderma lucidum and Agaricus Blazi Murill are three fungi widely used in traditional Chinese medicine, and effects as adjuvants in tumour therapy have been demonstrated. However, the function and effects of these fungi in regard to endometrial cancer are not known. Three endometrial cancer cell lines, Ishikawa, Hec-1A and AN3-CA (derived from endometrial cancers grade I, II and III, respectively), were used to determine the effect of the fungi extracts on endometrial cancer cell function and to analyze the molecular mechanism. All fungi extracts had an inhibitory effect on cell viability and proliferation most probably exerted through induction of autophagy. Our data suggest that these fungi extracts may be used as adjuvants in endometrial tumour therapy. Эффект Кордицепса, экстракт смеси и Ganoderma lucidum/Agaricus Blazi Murill выписка по правам рака эндометрия клеточных линий in vitro. Карцинома эндометрия наиболее распространенных гинекологических злокачественных новообразований. Тем не менее, отсутствие лечебной терапии, особенно для пациентов, диагностированных с поздней стадии, рецидивирующий или агрессивным, которые имеют плохой 84 прогноз. Кордицепс Sinensis, Ganoderma lucidum и Agaricus Blazi Murill три грибы широко используется в традиционной китайской медицине, и последствия, в качестве адьювантов в терапии опухолей были продемонстрированы. Однако, функции и эффекты этих грибов в отношении рака эндометрия не известны. Три клеточных линий рака эндометрия, Исикава, Hec-1A и AN3-CA (производный от рака эндометрия класса I, II и III соответственно), были использованы для того, чтобы определить влияние грибов экстракты на функции клеток рака эндометрия и анализа молекулярного механизма. Все грибы экстракты было тормозящее влияние на жизнеспособность клеток и распространения наиболее вероятно, оказываемое посредством индукции аутофагии. Наши данные позволяют предположить, что эти грибы выписки могут быть использованы в качестве адьювантов в терапии опухолей эндометрия. Evid Based Complement Alternat Med. 2014;2014:979613. doi: 10.1155/2014/979613. Epub 2014 Apr 1. Improving Training Condition Assessment in Endurance Cyclists: Effects of Ganoderma lucidum and Ophiocordyceps sinensis Dietary Supplementation. Rossi P1, Buonocore D1, Altobelli E2, Brandalise F1, Cesaroni V1, Iozzi D1, Savino E2, Marzatico F1. 2Department of Earth and Environmental Science, Pavia University, Pavia, Italy. The main reasons for taking daily dietary supplements are to maintain good health, to improve homeostasis, and to create conditions for reducing the risk of disease. Due to growing market demand, the search for effective, nontoxic, natural compounds with antioxidant and ergogenic properties has increasingly become a matter of interest. This paper describes how a specific combination of fungal supplements can help improve the performance of endurance athletes. We report the effects of a brief 3-month trial of two fungal supplements, Ganoderma lucidum and Cordyceps sinensis (3 capsules of O. sinensis and 2 capsules of G. lucidum per day), in 7 healthy male volunteers, aged between 30 and 40 years, who are all amateur cyclists that participate in "Gran Fondo" cycling races. This trial investigated the effects of fungal supplements on the level of physical fitness of the athletes by monitoring and comparing the following biomarkers just before and after physical exertion: the testosterone/cortisol ratio in the saliva and oxidative stress (DPPH free radical scavenging activity). A decrease of more than 30% in the testosterone/cortisol ratio after race compared to before race was considered as a risk factor for nonfunctional overreaching (NFO) or the overtraining syndrome (OTS). The results show that, after 3 months of supplementation, the testosterone/cortisol ratio changed in a statistically significant manner, thereby protecting the athletes from NFO and OTS. Antioxidant activity was measured by quantifying the scavenging ability of the human serum on the synthetic free radical DPPH. After 3 months of fungal supplementation, the data demonstrate an increased scavenger capacity of free radicals in the athletes' serum after the race, thereby protecting the athletes from oxidative stress. Совершенствование подготовки оценки состояния в выносливости велосипедистов: эффекты Ganoderma lucidum и Ophiocordyceps sinensis диетических добавок. Основные причины ежедневно принимают пищевые добавки, чтобы сохранить хорошее здоровье, улучшить гомеостаза, и создание условий для снижения риска заболеваний. Из-за растущего спроса на рынке, поиск эффективных, нетоксичен, природных соединений, обладающих антиоксидантной и эргогеническим свойства становятся все более интересно. Этот документ описывает, как конкретные комбинации грибные добавки могут помочь повысить производительность выносливость спортсменов. Мы отчета последствия краткое 3-месячный испытательный срок на два грибные добавки, Ganoderma lucidum и Кордицепс sinensis (3 капсулы О. sinensis и 2 капсулы G. lucidum в день), в 7 здоровых добровольцев мужского пола, в возрасте между 30 и 40 лет, кто-любителей всех велосипедистов, которые участвуют в "Gran Fondo" велосипедных гонок. Это испытание было изучено влияние грибные добавки на уровень физической подготовленности спортсменов мониторинга и сравнивая следующие биомаркеров просто до и после физических нагрузок: тестостерон/кортизол отношение в слюне и окислительного стресса (dpph-антирадикальное действие). Снижение более чем на 30% в тестостерон/кортизол отношение после гонки по сравнению перед гонкой было рассматривать как фактор риска для атрофированы, вытягивание (NFO) или синдром перетренированности (OTS). Результаты показывают, что после 3 месяцев лечения, тестостерон/кортизол соотношение изменилось в статистически значимым образом, тем самым 85 защищая спортсменов из NFO и OTS. Антиоксидантная активность была измерена путем количественной оценки очистки способность сыворотки крови человека на синтетических свободных радикалов ДФПГ. После 3 месяцев грибковых добавок, данные свидетельствуют о повышенном старьевщик потенциала свободных радикалов в олимпийской сыворотке после гонки, тем самым, защитить спортсменов от окислительного стресса. 1. Introduction Fatigue and underperformance are common in athletes and can affect more than 65% at the peak of their career. The European College of Sport Science has defined these symptoms as nonfunctional overreaching (NFO) and the overtraining syndrome (OTS) [1–3]. Athletes increase their training load in order to improve their performance. However, a maladapted response to excessive exercise, without adequate rest, can lead to nonfunctional performance, such as a discrepancy between the stress incurred during training or competing and the athlete's ability to recover after exercise. The most commonly encountered effects are underperformance, reduced tolerance to training load, decreased coordination, and increased heart rate. NFO is a performance decrement that requires 72 hours of recovery, while OTS is a performance decrement that requires days or weeks of recovery after maximal physical exercise [1–3]. It is clinically difficult to differentiate between NFO and OTS as the difference is based on the time it takes for athletes to recover and not necessarily on the degree or type of symptoms. Thus, a period of complete rest is often required before it is possible to diagnose one syndrome or the other. Many authors consider overreaching and overtraining as a continuum, while others suggest that NFO precedes OTS [3]. It would be very useful to understand the mechanisms underlying underperformance in order to assess, manage, and educate the athlete. The overtraining syndrome (OTS) disturbs many body systems (neurologic, endocrinologic, and immunologic systems). Many hypotheses have been presented to explain the pathogenesis of the OTS [2]. The hypothalamic hypothesis suggests that deregulation of the hypothalamus and hormonal axes activates the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in endurance athletes, but data in the literature are contradictory. Furthermore, this hypothesis suggests that endurance athletes may experience changes in levels of cortisol, adrenocorticotropic hormone, testosterone, and other hormones. Unfortunately, literature data prove contradictory in terms of the pattern of hormonal changes involved [4– 7]. One of the indices that is used to evaluate the stress induced by physical exercise is the ratio between the levels of testosterone and cortisol (T/C), both in basal conditions and after exercise. The T/C ratio is used to define the general metabolic trend in an organism: a decrease indicates a catabolic tendency, while an increase indicates an anabolic trend. In particular, data from the scientific literature show that a decrease of less than 30% in the T/C ratio indicates an effective workout, while a decrease of more than 30% from baseline in the T/C ratio is a risk factor for overtraining [7]. The oxidative stress hypothesis suggests that excessive oxidative stress causes muscle damage and fatigue. A small amount of data indicates that markers of oxidative stress are higher at rest in overtrained athletes and increase with exercise. Many fungal species have recently been reported to display antioxidant and ergogenic properties, demonstrating what has already been claimed by Traditional Chinese Medicine (TCM) [8, 9]. One of the most popular fungi in this group is Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst., better known in western countries by the Japanese term “Reishi”; it is defined in Traditional Chinese Medicine (TCM) as the “mushroom of immortality.” Ganoderma lucidum preferentially grows on broadleaved trees, such as oak or chestnut, mainly as a saprotroph and only rarely as a parasite. This species has been reported to have multiple beneficial values because it contains a vast number of bioactive compounds, the most pharmacologically active of which being triterpenes and polysaccharides [10–14]. Another two of these bioactive compounds are adenosine monophosphate, thought to help lower blood pressure and remove blood vessel blockage, and superoxide dismutase, an antiaging substance. The main medicinal properties of this fungus are immune response modulating, anticancer, antihypertensive, antioxidant, antiaging, anti-inflammatory, antiviral, and cardio- and nephroprotection [15, 16]. Another important medicinal fungal species is Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G. H. Sung, J. M. Sung, Hywel-Jones & Spatafora, more commonly known as Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc. According to the last taxonomic revision, it is an ascomycete, endemic to the Tibetan Plateau and surrounding Himalayas. The fungus is parasitic and colonizes the larvae of a moth, Hepialus armoricanus, forming a complex that includes the remains of the parasitic larva and the stroma of the fungus (sclerotia). In its growth phase, the 86 fungus gradually turns into a fruiting body. Ophiocordyceps sinensis is used in Traditional Chinese Medicine (TCM) to promote health, longevity, and athletic power because of its tonic effect, reducing fatigue. Recent studies have demonstrated that the chemical constituents extracted from this species have various protective effects on the nervous system, cardiovascular diseases, proliferation of tumor masses, lipid metabolism, and infection [17]; moreover, it has antiaging properties [18]. One of the constituents isolated from O. sinensis, cordycepin (3′-deoxyadenosine), is a derivative of the nucleoside adenosine, differing only in the absence of an oxygen molecule in the 3′ position of the ribose. Athletes who perform endurance training undergo oxidative stress and potentially suffer from the overtraining syndrome. The aim of the present study was to evaluate the effects of two fungal supplements, used in TCM, on the athletic performance of road cyclists. Considering the different properties of the two fungal species mentioned above, we suggested that the athletes in our study group take this specific combination of dietary supplements. 1. Введение Усталость и отставания являются общими спортсмены и может повлиять на более чем 65% на пике своей карьеры. Европейского колледжа спортивных наук определила эти симптомы нефункциональным, вытягивание (NFO) и синдром перетренированности (OTS) [1-3]. Спортсмены повысить их учебную нагрузку в целях повышения их производительности. Однако, maladapted ответ на чрезмерные физические нагрузки, без достаточного отдыха, может привести к нефункциональным производительности, таких как расхождение между стрессом, понесенные во время тренировки или соревнования и способность спортсмена для восстановления после тренировки. Наиболее часто встречающиеся эффекты отставания, снижение толерантности к учебной нагрузке, снижение координации и учащение пульса. NFO-это снижению работоспособности, что требует 72 часов на восстановление, в то время как OTSэто снижению работоспособности, что требует нескольких дней или недель на восстановление, после предельных физических упражнений [1-3]. Клинически трудно провести различие между NFO и OTS как разница базируется на времени, необходимом для спортсменов, чтобы восстановить и не обязательно на степень или типа симптомов. Таким образом, период полного покоя-это часто необходимо, чтобы ее можно диагностировать один синдром или другие. Многие авторы считают, растрачивая и перетренированности как континуум, в то время как другие считают, что NFO предшествует ОТС " [3]. Было бы очень полезно, чтобы понять механизмы, лежащие в основе отставания в целях оценки, управления и воспитать спортсмена. Этот синдром перетренированности (OTS) нарушает многие системы организма (неврологические, эндокринологические, и иммунологических систем). Много гипотез были представлены объяснить патогенезе ОТС " [2]. Гипоталамо гипотеза предполагает, что дерегулирование гипоталамуса и гормональные осей активирует гипоталамо-гипофизарнонадпочечниковой системы в выносливости спортсменов, но данные в литературе, являются противоречивыми. Кроме того, эта гипотеза предполагает, что на выносливость могут возникнуть изменения уровня кортизола, АКТГ, тестостерона и других гормонов. К сожалению, в литературе данные свидетельствуют противоречивые точки зрения шаблон гормональных изменений, происходящих [4-7]. Одним из показателей, который используется для оценки уровня стресса, индуцированного физические упражнения-это отношение между уровнем тестостерона и кортизола (T/C), как в базальных условиях и после тренировки. T/C коэффициент используется для определения общей метаболической тенденция в организме: снижение указывает на то, катаболический тенденцию, в то время как рост указывает анаболический тенденция. В частности, данные научной литературы показывает, что уменьшение менее чем на 30% В Т/ц отношение указывает на эффективную тренировку, в то время как спад-более чем на 30% от исходного уровня в т/ц отношение является фактором риска перетренированности [7]. Окислительного стресса гипотеза предполагает, что чрезмерное окислительный стресс вызывает повреждение мышц и усталость. Небольшой объем данных указывает на то, что маркеров оксидативного стресса выше на отдых в уставшими от тренировок спортсменов и увеличение физических упражнений. Многие виды грибов недавно сообщалось дисплей антиоксидант и эргогеническим свойства, продемонстрировав, что уже были заявлены в традиционной китайской медицине (ткм) [8, 9]. Один 87 из самых популярных грибов в этой группе Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst., более известный на Западе-японский термин “Рейши”; оно определено в традиционной китайской медицине (ткм), как “гриб бессмертия”. Ganoderma lucidum растет преимущественно на лиственных деревьев, таких как дуб или каштановые, в основном, в качестве saprotroph и лишь изредка, как паразит. Этот вид был, по сообщениям, несколько выгодных значения, поскольку он содержит огромное количество биологически активных соединений, наиболее фармакологически активным из которых является тритерпены и полисахаридов [10-14]. Еще два из этих биологически активных соединений, аденозинмонофосфат, думал помочь снизить кровяное давление и удаления засорения кровеносных сосудов, и супероксиддисмутазы, antiaging вещества. Основные лечебные свойства этого гриба иммуномодулирующим, противоопухолевым, антигипертензивное, антиоксидант, antiaging, противовоспалительное, противовирусное, и кардио - и nephroprotection 6]. Еще одним важным лекарственных видов грибковых Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G. H. сена, J. M. сена, Хайвел-Jones & Spatafora, более известный как Кордицепс sinensis (Berk.) Sacc. Согласно последним таксономических ревизий, это ascomycete, эндемичных для тибетского нагорья и прилегающих Гималаев. Гриб является паразитическим и заселяет личинки моли, Hepialus armoricanus, образуя комплекс, который включает в себя остатки паразитические личинки и стромы гриба (склероции). В фазе роста, гриб постепенно превращается в плодовое тело. Ophiocordyceps sinensis используется в традиционной китайской медицине (ткм) укрепления здоровья, долголетия, и атлетической силы в связи с его тонизирующее действие, уменьшая усталость. Недавние исследования показали, что химические компоненты, извлеченные из этой породы имеют различные защитное действие на нервную систему, сердечно-сосудистых заболеваний, распространение опухолевых масс, метаболизм липидов и инфекции [17]; кроме того, он имеет antiaging свойства [18]. Одной из составляющих изолирован от O. sinensis, кордицепина (3'-deoxyadenosine), - это производные нуклеозидов аденозин, отличаясь лишь в отсутствие кислорода в молекуле 3 " должность рибозы. Спортсмены, которые выполняют тренировка на выносливость подвергаются окислительному стрессу и потенциально страдают от синдрома перетренированности. Целью настоящего исследования было оценить влияние двух грибные добавки, используемые в традиционной китайской медицине, на спортивные показатели автомобильного велосипедистов. Учитывая различные свойства двух видов грибковых упоминалось выше, мы предположили, что спортсмены нашей исследовательской группы принять это уникальное сочетание биологически активных добавок. Discussion This paper investigates the problem of underperformance in athletes by referring to two different hypotheses in the pathogenesis of nonfunctional overreaching and overtraining: the hypothalamic hypothesis and the oxidative stress hypothesis. We tested the effect of the dietary fungal supplements Ophiocordyceps sinensis and Ganoderma lucidum both on the levels of testosterone and cortisol in the saliva of road cyclists and on the scavenger ability of free radicals in their serum. The link between hormonal status and oxidative stress has not been considered in previous publications. Excessive oxidative stress is an important mediator of a decline in steroid hormone production mediated by activated p38 mitogen-activator protein kinase (p38MAPK) [25]. The “stress response” paradigm is comparable to adrenal hyperfunction, according to which psychophysical stress and sensible activation of the hypothalamic-hypophyseal-adrenal axis cause oxidative damage. In animal models of restraint stress, adrenal hyperfunction leads to a decrease in antioxidant enzymes (SOD, Cat, GSH transferase, and reductase) and a reduction of GSH and urate in serum. In the same animal model, lipid peroxidation and carbonyl contents significantly increase in the brain, liver, and heart suggesting a causal role of stress hormones in oxidative processes induced during the adaptive response [26, 27]. Oxidative stress and inflammation are associated with fatigue and bad recovery and are risk factors for overreaching in intense exercise. Antioxidant treatment may have a positive effect on markers of oxidative stress, inflammation, and cortisol response [28]. Furthermore, there is a correlation between sex hormones and plasmatic total antioxidant capacity (TAC), and TAC significantly correlated with total testosterone [29]. The generation of reactive oxygen and nitrogen species (RONS) in response to intense exercise can occur via several pathways, including mitochondrial respiration (electron leakage from electron transport chain 88 and subsequent production of the superoxide radical), which is the main metabolic mechanism involved in the performance of cyclists. An alteration in the redox state in favor of the generation of RONS is necessary in order to initiate signaling pathways; however, when acute or chronic free radicals are produced, the antioxidant defense system can be overwhelmed, thereby disrupting normal redox-sensitive signaling and causing a permanent shift in “redox homeostasis” [30, 31]. The development of procedures to ameliorate the production of undesirable RONS may become one of the core research areas in this field. It is common practice for athletes to use antioxidant dietary supplements as they are known to prevent the adverse effects of exercise-induced oxidative stress, hasten the recovery of muscle function, and improve performance [32, 33]. The most commonly used supplements include vitamin E, vitamin C, βcarotene, coenzyme Q10, lipoic acid, N-acetylcysteine, allopurinol, quercetin, resveratrol, and several other polyphenolic compounds or a combination of the above. However, free radicals not only cause damage but they also have a role in cell signaling. RONS produced during exercise act as signals that regulate molecular events that are important in muscle cell adaptations to exercise [34]. The practical consequence is that antioxidant administration prevents such adaptations. Antioxidants, especially in high doses, have recently been shown to increase markers of exercise-induced oxidative stress or to inhibit the beneficial physiological or muscle adaptations induced by ROS [34, 35]. The practical implication is that by decreasing the effects of RONS using antioxidants, beneficial cell adaptations may be hindered during exercise. Our data suggest that athletes may have a viable alternative to taking antioxidant dietary supplements, namely, micotherapy supplements containing nutriceuticals that do not greatly interfere with antioxidant exercise-induced adaptations, thereby improving systemic redox. The fungal species Ophiocordyceps sinensis is mainly used in TCM as a tonic. It has been suggested that its antioxidant effects improve performance. The molecular mechanism responsible for the effects this fungus has on physical fitness has not yet been clarified. A pilot study [36] carried out using a fermented product of standardized O. sinensis on 20 healthy elderly subjects describes a 10% increase of the metabolic threshold (from 0.84 to 0.93 L/min) and of the ventilatory threshold (8.5%). In rats, oral administration of O. sinensis causes a statistically significant increase in the period of endurance (from 1.79 to 2.9 times) compared to the control group [36]. In the gastrocnemius muscle of the rat, higher levels of some molecules were measured, with metabolic functions at muscular level [37]. Ophiocordyceps sinensis is a powerful hydrogen donor, and the protection effect of oxidative damage is due to its free radical scavenger ability. The protective effects of O. sinensis against oxidative damage to lipids, proteins, and low-density lipoproteins (LDL) are not due to the presence of cordycepin and adenosine but due to the presence of polyphenols and flavonoids [38]. Antioxidant properties have also been reported in assays for lipid oxidation of the polysaccharide fraction from the mycelium of O. sinensis [39]. Sporophore water and ethanol extracts of Ophiocordyceps sinensis possess potent antioxidant properties [40]. The other fungal species in this study, Ganoderma lucidum, contains many bioactive compounds amongst which triterpenes have displayed antioxidant effects and exert a scavenging action on free radicals (superoxide, peroxyl, DPPH) in vitro [41, 42]. It is noteworthy that some differences between European or Chinese strains and sporophores have been registered [43, 44]. The administration of extracts of triterpenes for 1 month has been shown to enhance the activity of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione peroxidase, GPX in mice, in vivo [41, 42]. Even at low concentrations, triterpenes have been found to be effective in preventing DNA damage and in reducing apoptosis. They also reduce the formation of reactive oxygen species (ROS) and increase the activity of endogenous antioxidant enzymes in splenic lymphocytes subjected to irradiation. This suggests that triterpenes isolated from G. lucidum are able to protect cells from radiationinduced damage, indicating possible applications in the field of therapy [38, 39]. Furthermore, crude ethanol and water extracts from Ganoderma are a rich source of antioxidant compoundssuch as phenols, ascorbic acid, β-carotene, and lycopene and display antioxidant properties in some different assays, namely, the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and the metal chelating activity against ferrous ions. We divided the athletes who participated in this study into two groups, according to their testosterone/cortisol ratio before and after race: well-trained athletes (2 subjects) and athletes at risk of overtraining (5 subjects). 89 There was no difference between the before and after race testosterone levels in the two well-trained athletes during the placebo phase, whereas there was a 2-fold increase in the before race basal testosterone level after fungal supplementation compared to the placebo condition and a 4-fold increase in the after race level. Cortisol levels did not change in a statistically significant manner before and after fungal supplementation or before and after race. The T/C ratio and scavenger activity of free radicals improved in both athletes. After 3 months of fungal supplementation, the T/C ratio and the scavenger activity of free radicals increased in a statistically significant way in the other 5 athletes, who were potentially at risk of OTS during the placebo phase (as a result of incorrect or insufficient training), thus protecting them from overreaching and/or overtraining. In the placebo condition, after race levels of testosterone decreased compared to before race, while after race levels of cortisol increased compared to before race. After fungal supplementation, before race basal testosterone levels increased compared to before race levels in the placebo condition, and before race levels increased even more compared to the placebo condition, reaching a 3-fold increase. Before race basal cortisol levels did not change after fungal supplementation, but after race levels increased after fungal supplementation compared to levels in the placebo condition, demonstrating that the fungal supplements protected the athletes at risk of overtraining. The statistically significant increase in FRSA after race after fungal supplementation and the statistically significant difference in after race values after fungal supplementation compared to the placebo condition suggest that the 7 athletes are protected from an increase in free radical production during physical exercise. We cannot distinguish between the two states of underperformance, because the difference is based on time before recovery and not on the degree or type of symptoms [2]. We can therefore conclude that a 3-month period of O. sinensis and G. lucidum dietary supplementation may protect endurance athletes from nonfunctional overreaching/overtraining. An interesting future development of this research would be to analyze inflammatory parameters in order to understand the role fungal supplementation plays on the immune system. The study should continue to select standardized fungal dietary supplements, but it should be expanded to include a larger number of endurance athletes, due to the variability in their athletic condition [45]. Обсуждение В работе исследуется проблема отставания спортсменов в виду два разных гипотез в патогенезе атрофированы, вытягивание и перетренированности: гипоталамо-гипо-и окислительного стресса гипотеза. Мы протестировали влияние диетических грибные добавки Ophiocordyceps sinensis и Ganoderma lucidum как на уровни тестостерона и кортизола в слюне дороги для велосипедистов и на старьевщик способность свободных радикалов в их сыворотке крови. Связь между гормонального статуса и окислительный стресс не были рассмотрены в предыдущих публикациях. Чрезмерное окислительный стресс является важным посредником снижение продукции стероидных гормонов при посредничестве активированный p38 митоген-активатор протеинкиназы (p38MAPK) [25]. “Стресс-реакции” парадигма сопоставима гиперфункция надпочечников, согласно которому психофизические нагрузки и разумный активации гипоталамо-гипофизарной-надпочечниковой системы вызывать окислительное повреждение. На животных моделях пресечения стресс, гиперфункция надпочечников приводит к снижению антиоксидантных ферментов (СОД, кошка, ГШтрансферазы, и редуктазы) и снижение ГШ и уратов в сыворотке крови. В то же модели животных, перекисного окисления липидов и содержание карбонильных значительно увеличится в мозг, печень и сердце предлагаю, причинную роль гормонов стресса в окислительных процессов, индуцированных в процессе адаптивного ответа [26, 27]. Окислительный стресс и воспаление, связанные с усталостью и плохим восстановления и являются факторами риска, вытягивание в интенсивных тренировок. Антиоксидант лечение может оказать положительное влияние на показатели окислительного стресса, воспаление, и кортизола ответ [28]. Кроме того, существует корреляция между половых гормонов и плазматических общая антиоксидантная активность (TAC), TAC и существенно коррелирует с общего тестостерона [29]. К генерации активных форм кислорода и азота видов (нейронов) в ответ на интенсивные физические упражнения могут возникнуть через несколько путей, в том числе митохондриального 90 дыхания (electron от утечки электрон-транспортной цепи и последующее производство супероксидного радикала), который является основным метаболический механизм, участвующих в исполнении велосипедистов. Изменение окислительно-восстановительного состояния в пользу поколения нейронов необходимо для того, чтобы инициировать сигнальных путей; однако, при острой или хронической свободные радикалы вырабатываются, системы антиоксидантной защиты могут быть перегружены, тем самым нарушает нормальную редокс-чувствительных сигнализации и вызывая необратимые изменения в “окислительно-восстановительные гомеостаза” [30, 31]. Разработка процедур, чтобы улучшить производство нежелательных нейронов может стать одним из основных направлений исследований в этой области. Это обычная практика для спортсменов антиоксидантные пищевые добавки, поскольку они, как известно, предотвратить отрицательные последствия упражнение-индуцированного окислительного стресса, ускорить восстановление функции мышц и повышения производительности [32, 33]. Наиболее часто используемые добавки включают витамин Е, витамин С, бета-каротин, коэнзим Q10, липоевая кислота, N-ацетилцистеин, аллопуринол, кверцетин, ресвератрол, и несколько других полифенольных соединений или их комбинации. Тем не менее, свободные радикалы не только нанести ущерб, но они также играют определенную роль в клеточной сигнализации. Нейронов, производимых во время упражнения действуют в качестве сигналов, которые регулируют молекулярных событий, которые играют важную роль в адаптации к мышечной клетке упражнений [34]. На практике это приводит к тому, что антиоксидант администрации предотвращает такие приспособления. Антиоксиданты, особенно в высоких дозах, недавно было показано, что увеличение маркеры упражнение-индуцированного окислительного стресса или препятствовать положительный физиологический или мышечной адаптации, вызванных АФК [34, 35]. Практическим следствием является снижение воздействия электронов с помощью антиоксиданты, благотворно адаптации клеток могут быть нарушены во время тренировки. Наши данные показывают, что спортсмены могут иметь жизнеспособную альтернативу принимать антиоксидантные пищевые добавки, а именно, micotherapy добавок, содержащих nutriceuticals, что не сильно конфликтовать с антиоксидантными упражнения вызванного адаптации, тем самым улучшая системных редокс. Грибковые видов Ophiocordyceps sinensis, в основном, используется в традиционной китайской медицине как тонизирующее средство. Было высказано предположение, что его антиоксидантные свойства повышения производительности. Молекулярный механизм, ответственный за последствия этого гриба " о физической культуре пока не уточняется. Пилотное исследование [36] осуществляется с помощью кисломолочных продуктов стандартизированных O. sinensis на 20 здоровых пожилых лиц описывает 10% повышение обменных порог (от 0,84 до 0,93 л/мин) и вентиляторной порог (8.5%). В крысы, перорально О. sinensis вызывает статистически значимое увеличение срока выносливость (от 1,79 до 2,9 раза) по сравнению с контрольной группой [36]. В икроножных мышцах крысы, более высокие уровни некоторых молекул были измерены с метаболических функций на уровне мышечной [37]. Ophiocordyceps sinensis находится мощный донор водорода, и защитного эффекта окислительного повреждения из-за его свободных радикалов способности. Защитные эффекты О. sinensis от окислительного повреждения липидов, протеинов, липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) не из-за присутствия кордицепина и аденозина, но из-за присутствия полифенолы и флавоноиды [38]. Антиоксидантными свойствами обладают также сообщалось в анализах для окисления липидов полисахарида фракции из мицелия O. sinensis [39]. Sporophore водные и спиртовые экстракты из Ophiocordyceps sinensis обладают мощными антиоксидантными свойствами [40]. Другие виды грибов в этом исследовании, Ganoderma lucidum, содержит много биологически активных соединений, среди которых тритерпены демонстрировали антиоксидантный эффект и оказывают очистки действий на свободных радикалов (супероксид пероксил, ДФПГ) in vitro [41, 42]. Примечательно, что некоторые различия между европейской или китайской штаммов и спороношений были зарегистрированы. Администрация извлекает из тритерпены в течение 1 месяца, как было показано, для повышения активности антиоксидантных ферментов, таких как супероксиддисмутаза (СОД), каталазы (кат)и глутатион-пероксидазы, GPX мышей in vivo [41, 42]. Даже при низких концентрациях, тритерпены 91 были признаны эффективными в предотвращении повреждения ДНК и в снижении апоптоза. Они также уменьшают образование активных форм кислорода (АФК) и повышают активность эндогенных антиоксидантных ферментов лимфоцитов селезенки, подвергшихся облучению. Это говорит о том, что тритерпены изолированы от G. lucidum способны защищать клетки организма от радиационноиндуцированного повреждения, указывающие на возможные приложения в области терапии [38, 39]. Кроме того, сырой этанола и водных экстрактов из Ganoderma являются богатым источником антиоксидантов compoundssuch как фенолы, аскорбиновая кислота, бета-каротин и ликопин и отображения антиоксидантными свойствами, в несколько разных анализах, а именно, 2,2-дифенил-1picrylhydrazyl (ДФПГ) антирадикальное деятельности и металла хелатирующие деятельности против ионы двухвалентного. Мы разделили спортсмены, принявшие участие в данном исследовании на две группы, согласно их тестостерон/кортизол отношение до и после гонки: хорошо подготовленных спортсменов (2 предмета) и спортсменов на риск перетренированности (5 предметов). Нет никакой разницы между " до " и " после гонки уровни тестостерона в два хорошо подготовленных спортсменов в ходе плацебо фазы, в то время как там было в 2 раза увеличить перед гонкой базальный уровень тестостерона после грибные добавки по сравнению с плацебо состояние и 4-кратный рост после гонки уровне. Уровень кортизола не изменить в статистически значимым образом до и после грибковых добавок и до и после гонки. T/C отношение и старьевщик активность свободных радикалов улучшение в обоих спортсменов. После 3 месяцев грибные добавки, т/ц отношение и старьевщик активность свободных радикалов увеличилось статистически значимые пути и в других 5 спортсменов, которые были подвержены риску ОТС " в ходе плацебо фазы (в результате неправильного или недостаточного обучения), тем самым защищая их от претензии и/или перетренированности. В плацебо состоянии, после гонки уровень тестостерона снизился по сравнению с до гонки, а после гонки уровень кортизола увеличилась по сравнению перед гонкой. После грибные добавки, перед гонкой базального уровня тестостерона увеличилась по сравнению перед гонкой уровнях в плацебо состоянии, и перед гонкой уровень вырос даже больше, по сравнению с плацебо состояние, достигнув 3-кратное увеличение. Перед гонкой базального кортизола не изменилась и после того грибные добавки, но после гонки уровень вырос после грибные добавки по сравнению с уровнем в плацебо состояние, демонстрируя, что грибные добавки охраняемых спортсменов на риск перетренированности. Статистически значимый рост FRSA после гонки после грибные добавки и статистически существенное различие в после гонки значения после грибные добавки по сравнению с плацебо состоянии предположить, что 7 спортсменов защищены от увеличения выработки свободных радикалов во время физических упражнений. Мы не можем провести различие между двумя государствами неудовлетворительной, потому что разница, основанные на времени, прежде чем выполнять восстановление, а не на степень или типа симптомов [2]. Таким образом, мы можем заключить, что в 3-месячный период. sinensis и G. lucidum пищевых добавок может защитить спортсменов от атрофированы, вытягивание/перетренированности. Интересное будущее развитие данного исследования было проанализировать воспалительных параметров, чтобы понять, какую роль грибные добавки играет на иммунную систему. Исследование должно продолжать выберите стандартизированных грибковых биологически активных добавок, но он должен быть расширен, чтобы включить большее число спортсменов, из-за изменчивости в свои спортивные условие [45]. Int J Oncol. 2014 Jul;45(1):209-18. doi: 10.3892/ijo.2014.2397. Epub 2014 Apr 24. Extract of Cordyceps militaris inhibits angiogenesis and suppresses tumor growth of human malignant melanoma cells. Ruma IM1, Putranto EW1, Kondo E2, Watanabe R2, Saito K2, Inoue Y3, Yamamoto K1, Nakata S2, Kaihata M4, Murata H1, Sakaguchi M1. 1Department of Cell Biology, Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, Okayama University, Okayama 700-8558, Japan. Angiogenesis is essential for tumor development and metastasis. Among several angiogenic factors, 92 vascular endothelial growth factor receptor (VEGF) is important for tumor-derived angiogenesis and commonly overexpressed in solid tumors. Thus, many antitumor strategies targeting VEGF have been developed to inhibit cancer angiogenesis, offering insights into the successful treatment of solid cancers. However, there are a number of issues such as harmful effects on normal vascularity in clinical trials. Taking this into consideration, we employed Cordyceps militaris as an antitumor approach due to its biological safety in vivo. The herbal medicinal mushroom Cordyceps militaris has been reported to show potential anticancer properties including anti-angiogenic capacity; however, its concrete properties have yet to be fully demonstrated. In this study, we aimed to elucidate the biological role of Cordyceps militaris extract in tumor cells, especially in regulating angiogenesis and tumor growth of a human malignant melanoma cell line. We demonstrated that Cordyceps militaris extract remarkably suppressed tumor growth via induction of apoptotic cell death in culture that links to the abrogation of VEGF production in melanoma cells. This was followed by mitigation of Akt1 and GSK-3β activation, while p38α phosphorylation levels were increased. Extract treatment in mouse model xenografted with human melanoma cells resulted in a dramatic antitumor effect with down-regulation of VEGF expression. The results suggest that suppression of tumor growth by Cordyceps militaris extract is, at least, mediated by its anti-angiogenicity and apoptosis induction capacities. Cordyceps militaris extract may be a potent antitumor herbal drug for solid tumors. Экстракт Кордицепса militaris подавляет ангиогенез и подавляет рост опухоли человеческих клеток злокачественной меланомы. Ангиогенеза является существенным для развития опухоли и метастазов. Среди нескольких ангиогенных факторов, рецептора фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF) имеет важное значение для полученные из опухоли ангиогенеза и часто overexpressed в солидных опухолях. Таким образом, многие противоопухолевые стратегии, нацеленные на VEGF были разработаны, чтобы подавлять рак ангиогенеза, предложив успешного лечения солидных раков. Однако, существует ряд проблем, таких как вредного воздействия на нормальную усилению кровотока в клинических испытаниях. Учитывая это, мы использовали Кордицепс militaris в качестве противоопухолевого подход, благодаря своей биологической безопасности в условиях in vivo. Растительный лекарственный гриб Кордицепс militaris сообщалось показать потенциальным противораковыми свойствами, в том числе антиангиогенный потенциала; однако, его свойства бетона, который еще не полностью доказана. В этом исследовании мы стремились выяснить биологическая роль Кордицепс militaris экстракт в опухолевых клетках, особенно в области регулирования ангиогенеза опухоли и рост злокачественной меланомы человека линии клеток. Мы показали, что Кордицепс militaris экстракт удивительно подавление роста опухоли с помощью индукции апоптотической гибели клеток в культуре, которая содержит ссылки на упразднение продукции VEGF в клетках меланомы. За этим последовали смягчение Akt1 и GSK-3β активации, а p38α фосфорилирования уровнях были увеличены. Экстракт лечение в мышиной модели xenografted с клетках меланомы человека привели к резкому противоопухолевое действие с синдромом регуляции экспрессии VEGF. Результаты показали, что подавление роста опухоли Кордицепс militaris экстракт, по крайней мере, при посредничестве своей анти-angiogenicity и индукции апоптоза мощностей. Кордицепс militaris экстракт может быть мощным противоопухолевого лекарственного растительного сырья для солидных опухолей. Food Chem Toxicol. 2014 Apr 19;69C:281-288. doi: 10.1016/j.fct.2014.04.009. [Epub ahead of print] Polysaccharide extract of Cordyceps sobolifera attenuates renal injury in endotoxemic rats. Chiu CH1, Chyau CC1, Chen CC2, Lin CH1, Cheng CH3, Mong MC4. Extracts derived from Cordyceps have been demonstrated to possess various pharmacological effects, including immunomodulatory, antitumor, hypoglycemic, and antioxidant activities. This study was aimed to clarify the role of CS-P, a polysaccharide fraction isolated from Cordyceps sobolifera, in modulating nephrofunctional damage in a rat model of endotoxemia. CS-P (500mg/kg body weight) was orally administered to rats for 4weeks before the peritoneal injection of lipopolysaccharide (LPS, 10mg/kg body weight). Pre-treatment with CS-P significantly attenuated the deleterious renal functions caused by LPS, i.e., elevated blood urea nitrogen and creatinine as well as urine protein. Histopathological examination of kidney tissues also demonstrated that CS-P improved LPS-induced pathological abnormalities. The induction of inducible nitric oxide synthase and the overproduction of nitric acid by LPS were also significantly reduced 93 by CS-P via inhibiting nuclear factor-κB activation. In addition, CS-P pre-treatment suppressed the plasma levels of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6. Concurrently, CS-P supplementation potently suppressed the LPS-induced rise of lipid peroxidation and markedly enhanced the antioxidant defense system by restoring the levels of superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and catalase in kidney. The present results suggested that CS-P pre-treatment could protect against LPS-triggered inflammatory responses and renal injury in rats. Полисахарид экстракт Кордицепса sobolifera ослабление почек травмы в endotoxemic крыс. Экстракты, полученные из Кордицепса были продемонстрированы имеют различные Фармакологические эффекты, в том числе иммуномодулирующей, противоопухолевой, гипогликемических, и антиоксиданта. Эта работа была призвана прояснить роль CS-P, полисахарид, фракция изолированы от Кордицепс sobolifera, в модуляции nephrofunctional ущерб в крысиной модели эндотоксемии. CS-P (500 мг/кг массы тела) принимал перорально, крысы за 4 недели до брюшины инъекций липополисахарида (ЛПС, 10мг/кг массы тела). Предварительная обработка с CS-P значительно ослабило вредных функций почек, вызванные LPS, т.е., повышенное содержание в крови азота мочевины и креатинина, а также белка в моче. Гистопатологические обследование тканей почки показало также, что CS-P улучшило ЛПС-индуцированного патологических отклонений. Индукция индуцибельной синтазы оксида азота и перепроизводство азотной кислоты LPS были также значительно сокращены на CS-P посредством ингибирования ядерный фактор-κB активации. Кроме того, ПК-P предварительной обработки подавил плазменные уровни фактора некроза опухоли-альфа и интерлейкина-6. Одновременно, CS-P добавок мощно подавил ЛПС-индуцированного повышение перекисного окисления липидов и заметно усиливается системы антиоксидантной защиты, восстановив уровень супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы и каталазы в почках. В настоящее время результаты позволяют предположить, что CS-P предварительной обработки смог бы защитить от LPS-срабатывает воспалительной реакции и почечной травмы у крыс. Nutr Res Pract. 2014 Apr;8(2):172-6. doi: 10.4162/nrp.2014.8.2.172. Epub 2014 Mar 28. Cordyceps militaris alleviates non-alcoholic fatty liver disease in ob/ob mice. Choi HN1, Jang YH1, Kim MJ2, Seo MJ3, Kang BW4, Jeong YK3, Kim JI1. 1Department of Smart Food and Drugs, School of Food and Life Science, Inje University, 197 Inje-ro, Gimhae, Gyeongnam 621-749, Korea. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is becoming an important public health problem as metabolic syndrome and type 2 diabetes have become epidemic. In this study we investigated the protective effect of Cordyceps militaris (C. militaris) against NAFLD in an obese mouse model. MATERIALS/METHODS: Four-week-old male ob/ob mice were fed an AIN-93G diet or a diet containing 1% C. militaris water extract for 10 weeks after 1 week of adaptation. Serum glucose, insulin, free fatty acid (FFA), alanine transaminase (ALT), and proinflammatory cytokines were measured. Hepatic levels of lipids, glutathione (GSH), and lipid peroxide were determined. RESULTS: Consumption of C. militaris significantly decreased serum glucose, as well as homeostasis model assessment for insulin resistance (HOMA-IR), in ob/ob mice. In addition to lowering serum FFA levels, C. militaris also significantly decreased hepatic total lipids and triglyceride contents. Serum ALT activities and tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) levels were reduced by C. militaris. Consumption of C. militaris increased hepatic GSH and reduced lipid peroxide levels. CONCLUSIONS: These results indicate that C. militaris can exert protective effects against development of NAFLD, partly by reducing inflammatory cytokines and improving hepatic antioxidant status in ob/ob mice. Кордицепс militaris снимает неалкогольная жировая болезнь печени в ob/ob мышей. Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) становится важной проблемой общественного здравоохранения в качестве метаболического синдрома и сахарного диабета 2 типа должны стать эпидемией. В данной работе мы исследовали защитный эффект Кордицепса militaris (C. militaris) против НАЖБП ожирением в мышиной модели. Материалы/методы: четыре недели-летний мужчина ob/ob мышей кормили в Айн-93G диеты или диеты, содержащей 1% C. militaris водной вытяжки в течение 10 недель после 1 недели адаптации. Уровень глюкозы, инсулина, свободных жирных кислот (СЖК), аланин-трансаминазы (АЛТ), и 94 провоспалительных цитокинов были измерены. Печеночная уровней липидов, аминокислот, глутатиона (GSH)и перекиси липидов были определены. Результаты: потребление C. militaris значительно снизилась глюкозы в сыворотке крови, а также гомеостаза модель для оценки резистентности к инсулину (HOMA-IR), в ob/ob мышей. В дополнение к снижению в сыворотке ФФА уровнях, C. militaris также значительно снизилось, печеночной общих липидов и содержание триглицеридов. АЛТ в сыворотке крови деятельности и фактора некроза опухоли-Альфа (ФНО-A) и интерлейкина-6 (ил-6) снизится уровень C. militaris. Потребление C. militaris печеночных ГШ и снижение перекиси липидов уровнях. Выводы: полученные результаты свидетельствуют о C. militaris может оказывать защитное действие в отношении развития НАЖБП, частично за счет снижения воспалительных цитокинов и повышение печеночных антиоксидантного статуса в ob/ob мышей. INTRODUCTION Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) refers to a spectrum of liver diseases, which include hepatic steatosis (fatty liver), non-alcoholic steatohepatitis (NASH), and advanced fibrosis and cirrhosis in the absence of chronic alcohol use [1]. NAFLD is the most common cause of liver disease [2]. Although relatively benign, steatosis can progress to NASH, an extreme form of NAFLD, and NASH can eventually develop into liver cirrhosis [3]. NAFLD has also been suggested to potentiate liver damage induced by other factors, including alcohol, toxins, and viruses [4]. NAFLD prevalence is estimated at 15-40% in Western countries and 9-40% in Asia [5]. Although the underlying mechanism of NAFLD is not clear, the '2-hit hypothesis' was proposed to explain the pathogenesis [3,6]. The 'first hit' is accumulation of triglycerides in the liver (steatosis), which is strongly associated with insulin resistance. The fatty liver is susceptible to injury mediated by the 'second hit', which includes inflammatory adipokines/cytokines, oxidative stress, and mitochondrial dysfunction, leading to steatohepatitis and fibrosis. Insulin resistance is a major pathology underlying the development and progression of NASH [7]. Proinflammatory cytokines such as tumor necrosis factor-α (TNF-a) and interleukin6 (IL-6) have been suggested to play a crucial role in the development of insulin resistance [8]. Because metabolic syndrome and type 2 diabetes are important risk factors for NAFLD [9], NAFLD is becoming an important public health problem as these have become epidemic [10]. Although numerous therapeutic agents have been postulated to treat NAFLD [11], no pharmacological treatment is to date known [12]. The Cordyceps species are entomopathogenic fungi that are used as medicinal mushrooms in eastern Asia [13]. Among them, Cordyceps sinensis (C. sinensis) is the most valued mushroom, which has pharmacological effects that are used in traditional Chinese medicine. However, natural C. sinensis is scarce and highly expensive. Therefore, Cordyceps militaris (C. militaris) is a prominent substitute for C. sinensis due to its similar composition and pharmacological effects to C. sinensis and reasonable price [14]. C. militaris has shown antioxidant activity in vitro [15,16]. C. militaris extract has free radical scavenging activity and has been reported to have hepatoprotective activity in vitro [17]. C. militaris extract has alleviated oxidative injury in HepG2 cells induced by tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) by reducing reactive oxygen species (ROS) generation and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) formation. In addition, C. militaris has demonstrated anti-inflammatory activity in vitro [18]. A hot water extract of C. militaris reduced production of nitric oxide (NO) and secretion of TNF-α and IL-6 induced by lipopolysaccharide (LPS) in macrophages. These findings suggest that C. militaris could play a beneficial role in alleviation of NAFLD by improving oxidative stress and reducing inflammation. However, the beneficial effects of C. militaris on NAFLD have not been fully investigated. Therefore, in this study, the protective effect of C. militaris against NAFLD was investigated in leptin-deficient ob/ob mice, which show obesity, insulin resistance, and hyperglycemia and are used as an animal model of NAFLD [19,20,21,22]. Введение Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) относится к спектру заболеваний : печени, которые включают в себя стеатоз печени (жировая дистрофия печени), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), и выраженный фиброз и цирроз печени в отсутствие хронического алкоголизма [1]. НАЖБП является наиболее распространенной причиной заболевания печени [2]. Хотя относительно мягким, стеатоз может прогрессировать до Нэша, крайняя форма НАЖБП, и Нэш в конечном итоге может 95 развиться цирроз печени [3]. НАЖБП также было предложено, чтобы усилить печени повреждений, вызванных другими факторами, в том числе алкоголя, токсинов и вирусов [4]. НАЖБП распространенности оцениваются в 15-40% в западных странах и 9-40% в Азии [5]. Хотя основной механизм НАЖБП не ясно, " 2-хит гипотеза", было предложено объяснить, патогенезе [3,6]. "Первый удар " - это накопление триглицеридов в печени (жировой гепатоз), который прочно ассоциируется с устойчивостью к инсулину. Ожирение печени подвержен травмам при посредничестве " второй удар", который включает в себя воспалительных адипокинов/цитокины, окислительный стресс, и митохондриальной дисфункции, ведущих к стеатогепатит и фиброз. Инсулинорезистентность является серьезной патологии, лежащих в основе развития и прогрессирования NASH [7]. Провоспалительных цитокинов, таких, как фактор некроза опухоли-Альфа (ФНО-a) и интерлейкина-6 (ил-6), было предложено сыграть решающую роль в развитии инсулинорезистентности [8]. Потому что метаболического синдрома и сахарного диабета 2 типа являются важными факторами риска для НАЖБП [9], НАЖБП становится важной проблемой общественного здравоохранения, поскольку это было стать эпидемией [10]. Хотя многочисленные терапевтические агенты были постулируется для лечения НАЖБП [11], ни фармакологического лечения на сегодняшний день известно [12]. Кордицепс видов энтомопатогенных грибов, которые используются в качестве лекарственных грибов в Восточной Азии [13]. Среди них, Кордицепс sinensis (C. sinensis) - это самый ценный гриб, который имеет Фармакологические эффекты, которые используются в традиционной китайской медицине. Однако, природные C. sinensis-это дефицитный и дорогостоящий. Поэтому, Кордицепс militaris (C. militaris) - выдающийся заменить C. sinensis из-за аналогичных состава и фармакологических эффектов C. sinensis и умеренная цена [14]. C. militaris показал антиоксидантной активностью in vitro [15,16]. C. militaris экстракт бесплатно антирадикальное деятельности и, как сообщается, обладающих гепатопротекторной активностью in vitro [17]. C. militaris экстракт смягчить окислительного повреждения в HepG2 индуцированных клеток метил-трет-бутилового гидропероксид (t-BHP), путем снижения активных форм кислорода (АФК) поколения и thiobarbituric кислоты реактивной веществ (продуктов) образование. Кроме того, C. militaris продемонстрировал противовоспалительной активностью in vitro [18]. Горячая вода, экстракт C. militaris уменьшается выработка оксида азота (NO) и секреции ФНО-A и ил-6, индуцированных липополисахарида (ЛПС) в макрофагах. Эти результаты показывают, что C. militaris может сыграть полезную роль в облегчении НАЖБП путем улучшения окислительного стресса и уменьшение воспаления. Тем не менее, положительные эффекты C. militaris на НАЖБП не были полностью исследованы. Поэтому в настоящем исследовании, защитный эффект C. militaris против НАЖБП была изучена в лептин-дефицитных ob/ob мышей, которые показывают, ожирение, инсулинорезистентность, и гипергликемии и используются в качестве модели животного НАЖБП [19,20,21,22]. DISCUSSION We determined the effect of C. militaris supplementation on development of fatty liver, oxidative stress, and inflammatory cytokine levels to evaluate its benefit for NAFLD in ob/ob mice. These mice have a mutation in the ob gene, which encodes leptin, resulting in hyperphagia and obesity [31]. The hepatocytes of these insulin-resistant mice spontaneously become steatotic, making them a valuable tool for studying NAFLD [32]. Supplementation with 1% C. militaris reduced serum glucose and the HOMA-IR, a surrogate parameter of insulin resistance [33] in the ob/ob mice. This finding is in agreement with previous reports. C. militaris extract offered at 1% of the diet improved insulin resistance and hyperglycemia without influencing insulin secretion capacity in 90% pancreatectomized rats [34] and in db/db mice [24]. C. militaris extract reduced serum FFA levels in this study. In addition, it decreased hepatic total lipids and triglyceride contents and serum ALT, suggesting alleviation of fatty liver and improvement of liver function. Insulin resistance increases secretion of FFAs from peripheral adipose tissue due to enhanced lipolysis [35], resulting in elevated FFA uptake by the liver, which in turn is converted into triglycerides [36]. Reportedly, FFAs in the blood are elevated in animal models of NAFLD [37] and in NAFLD patients [36]. 96 The improvement in insulin resistance by C. militaris may be partially related to its effect on proinflammatory cytokines. C. militaris decreased serum TNF-α and IL-6 levels. C. militaris also showed a tendency to decrease serum MCP-1, although the difference was not statistically significant. These findings are in agreement with a previous report that C. militaris reduced TNF-α and IL-6 secretion by LPS-treated murine macrophages [18]. TNF-α mediates insulin resistance by impairing insulin signal transduction [38]. IL6 affects insulin signaling, leading to development of insulin resistance [39]. MCP-1 contributes to development of the insulin resistance and hepatic steatosis associated with obesity [40]. Thus, the reduction in TNF-α and IL-6 levels induced by C. militaris could contribute to improvement of insulin sensitivity and attenuation of hepatic steatosis. ob/ob mice with fatty liver have been reported to show increased production of ROS, suggesting increased oxidative stress [41]. Steatotic liver is vulnerable to the 'second hit' mediated by oxidative stress, which leads to inflammation [3,6]. In this study, C. militaris reduced hepatic TBARS, suggesting alleviation of the oxidative stress in ob/ob mice. C. militaris extract was reported to exert a potent antioxidant activity by directly scavenging free radicals [15,16]. In addition, we demonstrated that C. militaris elevated hepatic GSH levels in ob/ob mice. C. militaris extract has been shown to increase GSH levels in t-BHP-treated HepG2 cells [17]. Ramesh et al. reported that cordycepin (3'-deoxyadenosin), one of the major bioactive components of C. militaris, elevated hepatic GSH and reduced TBARS in aged rats, suggesting that cordycepin could be the active component in terms of antioxidant activities [42]. Since nuclear erythroid-related factor 2 (Nrf2) plays a key role in synthesis of GSH [43], further study to investigate the effect of C. militaris and cordycepin on Nrf2-signaling pathway could be needed to elucidate the mechanism underlying the antioxidant activity. GSH is an antioxidant involved in scavenging ROS and removing lipid peroxides [44]. Thus, C. militaris could contribute to amelioration of the progression of NAFLD by decreasing oxidative stress. In conclusion, C. militaris effectively reduced serum glucose and FFA levels and improved insulin sensitivity in ob/ob mice. C. militaris also reduced hepatic triglyceride accumulation and serum ALT. In addition, C. militaris ameliorated hepatic oxidative stress and reduced serum proinflammatory cytokine levels. Therefore, C. militaris may be beneficial in preventing NAFLD. Обсуждение Мы, определено влияние C. militaris добавок на развитие жировой инфильтрации печени, окислительный стресс, и воспалительных цитокинов уровнях, чтобы оценить ее пользу для НАЖБП в ob/ob мышей. Эти мутации у мышей в оф Гена, который кодирует лептина, в результате чего неутолимый голод и ожирение [31]. Гепатоциты эти инсулин резистентных мышей спонтанно становятся steatotic, что делает их ценным инструментом для изучения НАЖБП [32]. Добавок 1% C. militaris снижение глюкозы в сыворотке крови и HOMA-IR, суррогатной параметр инсулинорезистентности [33] в ob/ob мышей. Этот вывод находится в согласии с предыдущими отчетами. C. militaris экстракт, предлагаемых на 1% рациона улучшенное сопротивление инсулина и гипергликемию без влияния на секрецию инсулина мощностью в 90% pancreatectomized крыс [34] и в db/db мышей [24]. C. militaris экстракт снижение в сыворотке ФФА уровнях в данном исследовании. Кроме того, она снизилась печеночной общих липидов и содержание триглицеридов и АЛТ в сыворотке крови, предполагая, нищетой жировой дистрофии печени и улучшение функции печени. Сопротивление инсулина, усиливает секрецию FFAs из периферической жировой ткани за счет усиления липолиза [35], что приводит к повышенным ФФА поглощение печени, который в свою очередь превращается в триглицериды [36]. Как сообщается, FFAs в крови повышен на животных моделях НАЖБП [37], и в пациентов с НАЖБП [36]. Повышение резистентности к инсулину C. militaris может быть частично связано с его влияние на провоспалительных цитокинов. C. militaris снизилась сыворотке крови ФНО-A и ил-6 уровней. C. militaris также показал тенденцию к снижению в сыворотке MCP-1, хотя разница не была статистически значимой. Эти выводы согласуются с предыдущим отчет, что C. militaris снижение ФНОA и ил-6 секреции LPS-лечение мышиных макрофагов [18]. TNF-a является посредником инсулинорезистентность путем нанесения ущерба инсулина передачи сигнала [38]. IL-6 инсулин влияет на сигнализацию, ведущих к развитию резистентности к инсулину [39]. MCP-1 способствует развитию резистентности к инсулину и стеатоз печени, связанных с ожирением [40]. Таким образом, сокращение ФНО-A и ил-6 уровней, индуцированных C. militaris могли бы внести свой вклад в 97 улучшение чувствительности к инсулину и затухания стеатоз печени. ob/ob мыши с жирной печени, как сообщается, показывают рост производства рос, предполагающий ужесточение окислительного стресса [41]. Steatotic печени является уязвимым для " второй хит " при посредничестве окислительного стресса, который приводит к воспалению [3,6]. В этом исследовании C. militaris снижение печеночной продуктов, предлагая смягчению последствий окислительного стресса в ob/ob мышей. C. militaris экстракт сообщили оказывают мощное антиоксидантное действие, непосредственно очистки свободных радикалов [15,16]. Кроме того, мы продемонстрировали, что C. militaris повышенными печеночной ГШ уровнях в ob/ob мышей. C. militaris экстракт было показано, что увеличение ГШ уровнях в t-BHP обработанных клеток HepG2 [17]. Ramesh et al. сообщается, что кордицепина (3'-deoxyadenosin), один из основных биологически активных компонентов C. militaris, повышенные печеночной ГШ и снижение продуктов в возрасте от крыс, предполагая, что кордицепина может быть активной составляющей деятельности антиоксидант [42]. Поскольку ядерная эритроидных, связанных с фактором 2 (регулируемый белком nrf2) играет ключевую роль в синтезе ГШ [43], дальнейшего изучения, чтобы исследовать эффект C. militaris и кордицепина на регулируемый белком nrf2-сигнальный путь может быть необходимой для выяснения механизмов, лежащих в основе антиоксидантной активностью. ГШ-это антиоксидант, участвует в очистки рос и удаление перекисей липидов [44]. Таким образом, C. militaris могли бы способствовать улучшению прогрессирование НАЖБП на окислительный стресс. В заключение, C. militaris эффективно снизить уровень глюкозы и FFA уровнях и повышение чувствительности к инсулину в ob/ob мышей. C. militaris также снижение триглицеридов в печени накопления и АЛТ в сыворотке крови. Кроме того, C. militaris мелиорированных печеночной окислительного стресса и снижение сыворотке крови провоспалительных цитокинов уровнях. Поэтому, C. militaris может быть полезно в предотвращении НАЖБП. Biomed Res Int. 2014;2014:160980. doi: 10.1155/2014/160980. Epub 2014 Mar 11. Studies on the Antidiabetic Activities of Cordyceps militaris Extract in Diet-Streptozotocin-Induced Diabetic Sprague-Dawley Rats. Dong Y1, Jing T1, Meng Q1, Liu C1, Hu S1, Ma Y2, Liu Y1, Lu J1, Cheng Y1, Wang D1, Teng L3. Due to substantial morbidity and high complications, diabetes mellitus is considered as the third "killer" in the world. A search for alternative antidiabetic drugs from herbs or fungi is highly demanded. Our present study aims to investigate the antidiabetic activities of Cordyceps militaris on diet-streptozotocin-induced type 2 diabetes mellitus in rats. Diabetic rats were orally administered with water extract or alcohol extract at 0.05 g/kg and 2 g/kg for 3 weeks, and then, the factors levels related to blood glucose, lipid, free radicals, and even nephropathy were determined. Pathological alterations on liver and kidney were examined. Data showed that, similar to metformin, Cordyceps militaris extracts displayed a significant reduction in blood glucose levels by promoting glucose metabolism and strongly suppressed total cholesterol and triglycerides concentration in serum. Cordyceps militaris extracts exhibit antioxidative effects indicated by normalized superoxide dismutase and glutathione peroxidase levels. The inhibitory effects on blood urea nitrogen, creatinine, uric acid, and protein revealed the protection of Cordyceps militaris extracts against diabetic nephropathy, which was confirmed by pathological morphology reversion. Collectively, Cordyceps militaris extract, a safe pharmaceutical agent, presents excellent antidiabetic and antinephropathic activities and thus has great potential as a new source for diabetes treatment. Исследования по Противодиабетических деятельности Кордицепс militaris экстракт в диетеStreptozotocin-Индуцированной диабетической Sprague-Dawley крыс. Из-за существенных высокой заболеваемости и осложнений сахарного диабета считается третьим "убийца" в мире. Поиск альтернативных антидиабетические препараты из травы или грибов очень нужна. Наше настоящее исследование направлено для расследования противодиабетических деятельности Кордицепс militaris на диете-streptozotocin-индуцированной сахарный диабет 2 типа у крыс. Диабетических крыс были перорально с водой или экстракт спиртовой экстракт в дозе 0,05 г/кг и 2 г/кг в течение 3 недель, а затем, факторов, уровни, относящиеся к крови глюкозы, липидов, свободные радикалы, и даже нефропатии были определены. Патологические изменения в печени и почках были рассмотрены. Данные показали, что, как метформин, Кордицепс militaris экстракты 98 показала значительное снижение уровня глюкозы в крови путем стимулирования обмена глюкозы и сильно подавлен общей концентрации холестерина и триглицеридов в сыворотке крови. Кордицепс militaris экстракты проявляют антиоксидантный эффекты указал на нормализованную супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы уровнях. Тормозящее действие на азот мочевины крови, креатинин, мочевая кислота и белок выявлено защиты Кордицепс militaris экстракты против диабетической нефропатии, что было подтверждено патологической морфологии реверсии. В совокупности, Кордицепс militaris вытяжка, сейф фармацевтическое средство, представляет превосходный антидиабетические и antinephropathic деятельности и таким образом обладает большим потенциалом как новый источник для лечения сахарного диабета. 1. Introduction Diabetes mellitus (DM) is characterized by chronic hyperglycaemia which is resulted by the defects of insulin secretion or action. Diabetes patients suffer with a series of metabolic disorders in carbohydrate, fat, and proteins [1]. Noninsulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM), caused by insulin resistance, is known as the most common form of diabetes (type 2 diabetes) [2]. According to statistics, till 2025, 8 billion people in the whole world will suffer with type 2 diabetes. Additionally, various complications including cardiovascular disease, nephropathy, neuropathy, retinopathy, and hyperlipemia are observed in most diabetes patients [3]. As a cosmopolitism tough problem, no satisfactory therapeutic regimen can cure diabetes although most of them normalize blood glucose and fat levels, possess hypotensive activity, and improve microcirculation [4]. Traditional therapy only focuses on pancreatic islet function recovery and blood glucose regulation, which fails to control the diabetic complications [5]. As reported previously, insulin injection and some oral antihyperglycemic agents, such as metformin and pioglitazone, display undesirable adverse effects [6]. Pioglitazone induces hepatocellular-cholestatic liver injury and metformin causes diarrhea and nausea or vomiting [7]. Additionally, weight gain, hypoglycemia, edema, gastrointestinal disturbances, and insulin resistance are observed in diabetes patients who receive long-term insulin treatment [8]. Meanwhile, diabetes mellitus requires lifelong medication, and the economic burden of patients should receive attention [9]. Due to the limitation of existing antidiabetic agents, a search for alternative treatment is highly demanded. Herbal medicine turns out to be a valuable reservoir for novel drugs due to its few side effects [10]. Amount of research demonstrated that natural products possess antidiabetic activity with less adverse effects and show great auxiliary therapeutic effect on complications [11, 12]. Cordyceps militaris, an anamorph of Cordyceps sinensis, is advertised as a Chinese herb with antioxidant [13], immunomodulatory [14], anticancer, and anti-inflammatory pharmacological [15] effects. Cordyceps polysaccharides, the richest and most important activity component, display a hypoglycemic activity [16]. Additionally, several studies have shown that water extracts of Cordyceps militaris possess notable activity via increment of insulin secretion and cholinergic activation in normal Wistar rats [17, 18]. Excitingly, separated research finds that Cordyceps militaris can be used for kidney protection [19]. However, the regulatory effects of polysaccharide-enriched fraction of Cordyceps militaris on Sprague-Dawley rats with diabetes have not been reported yet. We therefore hypothesized that Cordyceps militaris extracts may show antidiabetic, hypolipidemic, and even antinephritic effects. To test this hypothesis, the present study aims to investigate the related biological activities of Cordyceps militaris extracts via in vivo experiments. After treatment with polysaccharideenriched fractions of Cordyceps militaris, the changes of serum fasting glucose levels, pyruvate kinase activity, triglyceride (TG), and total cholesterol in experimental diabetic Sprague-Dawley rats were detected. Several indexes associated with oxidation resistance and hypolipidemic activity were also determined. Furthermore, the therapeutic effects of Cordyceps militaris extracts on diabetic nephropathy were detected through histopathologic morphology observation and four indexes analysis including blood urea nitrogen (BUN), uric acid (UA), creatinine, and urine protein. 1. Введение Сахарный диабет (СД) характеризуется хронической гипергликемии, которую приводит дефектов секрецию инсулина или действий. Больных диабетом страдают ряд метаболических нарушений в обмене углеводов, жиров и белков [1]. Noninsulin-зависимый сахарный диабет (ИНСД), вызванные инсулинорезистентность, известен как наиболее распространенной формой диабета (диабета типа 2) [2]. По данным статистики, на период до 2025 года, 8 миллиарда человек во всем мире страдают СД 2 99 типа. Кроме того, различные осложнения, в том числе сердечно-сосудистых заболеваний, нефропатия, нейропатия, ретинопатия и hyperlipemia наблюдаются в большинстве больных сахарным диабетом [3]. Как космополитизм сложная проблема, нет удовлетворительного терапевтического режима может вылечить диабет хотя большинство из них нормализации уровня глюкозы в крови и уровень жиров, обладает гипотензивной активности и улучшения микроциркуляции [4]. Традиционная терапия фокусируется только на островка поджелудочной функция восстановления и регулирования уровня глюкозы в крови, который не в состоянии контролировать диабетических осложнений [5]. Как сообщалось ранее, укол инсулина и некоторых пероральных antihyperglycemic агентов, таких как метформин и пиоглитазон, отображения нежелательных побочных эффектов [6]. Пиоглитазон индуцирует гепатоцеллюлярной-повреждение печени, холестатический и метформин вызывает понос и тошнота или рвота [7]. Кроме того, увеличение веса, гипогликемия, отек, желудочно-кишечные расстройства, и сопротивление инсулина наблюдается у больных сахарным диабетом, которые получают инсулин длительного лечения [8]. Между тем, сахарный диабет требует непрерывного лекарства и экономическое бремя пациенты должны получать внимания [9]. В связи с ограничениями существующих антидиабетические средства, поиск альтернативных методов лечения пользуется большим спросом. Фитотерапия, оказывается, ценный источник для новых препаратов, из-за его мало побочных эффектов [10]. Количество исследований показали, что натуральные продукты обладают антидиабетическими деятельности меньше побочных эффектов и покажут великие вспомогательного терапевтического эффекта на осложнений [11, 12]. Кордицепс militaris, анаморфа Кордицепс sinensis, рекламируется в качестве китайского растения с высоким содержанием антиоксидантов, [13], иммуномодулирующее [14], противоопухолевые и противовоспалительные фармакологических [15] эффектов. Полисахариды Кордицепса, самых богатых и самых важных компонент деятельности, отображения гипогликемической активностью [16]. Кроме того, несколько исследований показали, что водный экстракт Кордицепса militaris обладают заметная активность через приращение секрецию инсулина и холинергические активации в нормальных крыс линии Вистар [17, 18]. Возбуждающе, разделенных исследования показывают, что Кордицепс militaris могут быть использованы для защиты почек [19]. Однако регуляторные эффекты полисахарид-обогащенного доля Кордицепс militaris на Sprague-Dawley крыс с диабетом не были зарегистрированы еще. Поэтому мы предположили, что Кордицепс militaris выписки могут показать, антидиабетические, гиполипидемическое, и даже antinephritic эффекты. Чтобы проверить эту гипотезу, настоящее исследование направлено для расследования, связанные с биологической активности Кордицепс militaris экстракты через экспериментов in vivo. После лечения с полисахарид-обогащенного фракций Кордицепс militaris, изменения в сыворотке крови уровень глюкозы натощак, пируваткиназы деятельности, триглицеридов (тг)и общего холестерина в экспериментальных диабетической SpragueDawley крыс обнаружено не было. Несколько индексы, связанные со стойкостью к окислению и гиполипидемическая активность также были определены. Кроме того, терапевтический эффект Кордицепса militaris экстракты диабетическая нефропатия были обнаружены через гистопатологические морфологии наблюдения и четырех индексов анализа, в том числе азота мочевины крови (BUN), мочевой кислоты (UA), креатинина, и белка в моче. Discussion Diabetes has become the third “killer” in the world following cancer, cardiovascular and cerebrovascular diseases. Due to various pathologic changes, amount of diabetic complications occur in blood vessels, cranial and peripheral nerves, and skin [31]. Retinopathy and nephropathy are also considered as high frequency complications caused by the abnormal thickening of the basement membrane in capillaries [32]. The antihyperglycemic and antidyslipidemic effects of Cordyceps militaris water extracts have already been studied in db/db mice [33]. As reported previously, the polished rice cultivated with Cordyceps militaris reduces blood glucose levels and shows antioxidant effects in STZ-induced diabetic rats [27]. In our present study, the hypoglycemic effects related to fasting blood glucose levels of Cordyceps militaris extracts were confirmed. Furthermore, the hypolipidemic, antioxidative, and antidiabetic nephropathic effects of Cordyceps militaris extracts were observed in diet-STZ-induced diabetic rats. Through histopathological analysis in liver tissue, Cordyceps militaris was confirmed as a pharmacological safe agent. 100 In our present study, the results showed that both WE and AE possess hypoglycemic effect similar to that of DH, and this effect may be partially related to the increment of glucose absorption indicated by the enhancement of PK activity [34]. PK is the rate-limiting enzyme of glycolytic pathway which can promote the metabolism of sugar [35]. Due to the disorder of lipid metabolism [36], serum concentrations of total cholesterol and TG were enhanced significantly in DM rats; in contrast, both WE and AE normalized plasma lipid and lipoprotein profile. Cordyceps militaris extracts may prevent the accumulation of fatty acid in liver [37]. Since Cordyceps militaris extracts displayed no stimulating effect on insulin (data not shown), their antidiabetic effect may not be related to insulin secretion. Previous study reports that Cordyceps militaris water extract decreases fasting serum glucose levels by increasing glucose disposal rates and fraction velocity of glycogen synthase in 90% pancreatectomized rats [38]. Further study will be performed to confirm this result. Increased glucose levels result in glucose autooxidation and autooxidative glycosylation of proteins [27]. Due to the unbalanced producing and scavenging, free radicals were accumulated in diabetic patients, which played a role in the pathogenesis of the long-term complications of human diabetes [39]. A deficiency of the antioxidant activity of SOD and GSH-Px in diabetes mellitus is related to higher concentration of peroxide [40]. Our data demonstrated that both AE and WE normalized SOD activity and enhanced GSH-Px levels compared with DM group. Our finding is consistent with other researches reporting that Cordyceps militaris extracts reduce reactive oxygen species (ROS) and nitrogen species (RNS) generation caused by high glucose [41]. Furthermore, diabetic nephropathy is reported as a serious microvascular complication of diabetes [42]. BUN, UA, urine protein, and creatinine are traditional indexes for kidney damage [43]. Cordyceps militaris extracts displayed a strong inhibitory effect on BUN, UA, creatinine, and urine protein levels compared with DM rats. Interestingly, mesangial expansion, mesangial hypercellularity, and a thickened glomerular basement membrane, known as the morphological indicators of nephropathy [44], were not obvious in model group. However, a large amount of inflammatory cell infiltration in renal interstitium and the atrophy of renal tubule cells was noted in DM rats, which were strongly reversed after DH, AE, and WE treatment. The pathological lesions of renal tubule may also be related to STZ which is responsible for renal injury [45], oxidative stress inflammation, and endothelial dysfunction [46]. Considering the model was only established for nearly two months, diabetic nephropathy related pathological symptoms might be in early phase. Although the protection of AE and WE against diabetic nephropathy has been well confirmed, the potential mechanism needs to be further investigated. Additionally, most researches are related to the activities of Cordyceps militaris water extracts which promote glucose metabolism by increasing the activities of hepatic glucokinase, hexokinase, and glucose-6phosphate dehydrogenase [47]. Being consistent with previous findings [48], AE shows poorer hypoglycemic activity compared with WE. It may be due to the better solubility and absorption of WE; however, more experiments need to be performed to investigate the difference between them. In our separated experiment, WE was purified and characterized. One main fraction entitled CMN1 with a 37842 Da molecular weight was obtained. The backbone of CMN1 is composed of (1→2)-linkages and (1→3)-linkages with a branched (1→6)-linkage and (1→4)-linkage, and its monosaccharide composition was Rha, Ara, Man, and Gal. CMN1 shows similar molecular weight and monosaccharide composition with CSP-1 isolated by Li's group [49]. Another point we would like to emphasize here is the diabetic rat model established in the experiment. As reported previously, HFHSD raising was used to develop insulin resistance model [50, 51]; meanwhile, STZ enters the pancreatic β cell via a glucose transporter GLUT2 and induces a mild impairment of insulin secretion which is similar to the feature of the later stage of type 2 diabetes [23]. The model is considered as a stable animal model of type 2 diabetes and usually used for pharmaceutical screening [52]. However, our results demonstrated that this diet-STZ-induced model fails to simulate all the symptoms in type 2 diabetes. Only several related complications such as nephritis were reflected in it. Furthermore, no insulin increment was observed in DM group (data not shown). Although the increment of TG level is considered as a result of insulin resistance, it may also be related to blood glucose enhancement and fatty acid metabolism [37]. More experiments will be performed to study the unexpected data obtained in diet-STZ-induced diabetic rat model. Altogether, by using diet-STZ-induced diabetic rats, the antidiabetic activity of Cordyceps militaris extracts 101 has been confirmed in our present study. Cordyceps militaris extracts also show antinephropathic and antioxidative properties indicating the therapeutic effects on diabetic complications. Cordyceps militaris extract, a safe pharmaceutical agent, has great potential as a new source for diabetes treatment. Обсуждение Диабет стал третьим “убийца” в мире в результате рака, сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний. Из-за различных патологических изменений, объем диабетические осложнения возникают в кровеносных сосудов, черепных и периферических нервов, кожи и [31]. Ретинопатия и нефропатия также рассматривается как высокая частота осложнений, вызванных ненормальным утолщение базальной мембраны в капилляров [32]. В antihyperglycemic и antidyslipidemic эффект Кордицепса militaris водных экстрактах уже учился в дБ/дБ мышей [33]. Как сообщалось ранее, полированного риса с Кордицепсом militaris снижает уровень глюкозы в крови и показывает антиоксидантное действие в STZ-индуцированной диабетических крыс [27]. В настоящей работе, гипогликемическое действие, связанное с уровень глюкозы крови натощак Кордицепса militaris экстракты были подтверждены. Кроме того, гиполипидемическое, антиоксидантное, и сахароснижающих nephropathic эффект Кордицепса militaris экстракты наблюдались в диете-STZиндуцированной диабетических крыс. Через гистопатологические анализа в ткани печени, Кордицепс militaris был подтвержден в качестве фармакологического безопасное средство. В настоящее исследование, результаты которого показали, что и мы, и AE обладают гипогликемический эффект, аналогичный DH, и этот эффект может быть частично связано с приращением всасывание глюкозы обозначено повышение PK активности [34]. PK является лимитирующей ферментов гликолитического путь, который может повысить метаболизм сахара [35]. Из-за нарушения липидного обмена [36], концентрации в сыворотке крови общего холестерина и тг были значительно укреплена в ДМ крыс; напротив, как мы и AE нормированная плазменных липидов и липопротеидов в профиль. Кордицепс militaris выписки могут предотвратить накопление жирных кислот в печени [37]. С Кордицепс militaris выдержки отображаются не стимулирующий эффект на инсулин (данные не показаны), их эффект противодиабетических не может быть связано с секрецию инсулина. Предыдущее исследование сообщает, что Кордицепс militaris водный экстракт уменьшает уровни глюкозы в сыворотке крови натощак за счет увеличения утилизации глюкозы цены и фракции скорость синтеза гликогена в 90% pancreatectomized крыс [38]. Дальнейшее исследование будет выполнена, чтобы подтвердить этот результат. Увеличение уровня глюкозы в результате глюкозы автоокисления и autooxidative гликозилирования белков [27]. Из-за несбалансированности производства и очистки, свободные радикалы были накоплены в диабетических пациентов, которые сыграли роль в патогенезе хронических осложнений человека диабета [39]. Недостаточности антиоксидантной активности СОД и GSH-Px в сахарный диабет относится к более высокой концентрации перекиси [40]. Наши данные показали, что оба AE и мы нормированная активность СОД и усиленной GSH-Px уровнях по сравнению с DM группы. Наш вывод согласуется с другими исследованиями отчетности, что Кордицепс militaris экстракты уменьшают активных форм кислорода (АФК) и азота видов (RNS) поколения, вызванные высокой гликемии [41]. Кроме того, диабетической нефропатии, рассматривается в качестве серьезной микрососудистых осложнений диабета [42]. Бун, UA, моче белка и креатинина традиционных индексов для почек [43]. Кордицепс militaris выдержки отображаются сильное тормозящее влияние на БУЛКЕ, UA, креатинина, и белка в моче уровнях по сравнению с DM крыс. Интересно, мезангиальной расширения, мезангиальной hypercellularity, и утолщенной клубочковой базальной мембраны, известной как морфологических показателей нефропатии [44], не были очевидны в модели группы. Однако, большое количество воспалительных клеточной инфильтрации почечной в интерстиций и атрофия почечном канальце клеток было отмечено в ДМ крыс, которые были сильно меняться после DH, AE, и мы лечении. Патологические поражения почечном канальце также может быть связано с СТЗ, которая отвечает за травмы почек [45], окислительный стресс воспаление и дисфункция эндотелия [46]. Рассматривая модель была создана только в течение почти двух месяцев, диабетическая нефропатия связанные с патологическими симптомами, может быть, в ранней стадии. Хотя защита AE и мы против диабетической нефропатии был также подтвердил, потенциальный механизм должен быть расследован. 102 Кроме того, большинство исследований, связанных с деятельностью Кордицепс militaris водные экстракты, которые способствуют метаболизм глюкозы путем увеличения деятельность печени гексокиназа, гексокиназы, и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы [47]. В соответствии с предыдущие выводы [48], АЭ показывает беднее гипогликемической активностью по сравнению с нами. Это может быть из-за лучшую растворимость и усвоение мы, однако, больше экспериментов должны быть выполнены, чтобы исследовать разницу между ними. В наши отделившиеся эксперимент, мы очищали и характеризуется. Одна основная фракция вправе CMN1 с 37842 да молекулярный вес был получен. Костяк CMN1 состоит из (1перед 2)взаимосвязь и (1перед 3)взаимосвязь с разветвленной (1перед 6)-качалок (1перед 4)-связь, и его моносахарид композиция была Rha, Ара, человек, и Гал. CMN1 показывает такой же молекулярной массой и моносахарид состав с CSP-1 изолированные Li группы. Еще один момент мы хотели бы подчеркнуть, диабетических крыс модель, созданная в эксперименте. Как сообщалось ранее, HFHSD средств было использовано на развитие инсулинорезистентности модели [50, 51]; между тем, СТЗ, входит в поджелудочной β ячейки с помощью транспортера глюкозы GLUT2 и индуцирует умеренными нарушениями секреции инсулина, что подобное есть в поздней стадии диабета 2 типа [23]. Модель считается стабильным животной модели диабета типа 2 и обычно используется для фармацевтических исследований [52]. Тем не менее, наши результаты показали, что диеты-STZ-индуцированной модель не имитировать все симптомы сахарного диабета 2 типа. Только несколько связанных с ним осложнений, таких как нефрит были отражены в нем. Кроме того, инсулин-прирост наблюдался в ДМ группы (данные не показаны). Хотя прирост TG уровне рассматривается как результат резистентности к инсулину, это также может быть связано повышение уровня глюкозы в крови и метаболизма жирных кислот [37]. Более эксперименты будут проведены исследования неожиданные данные, полученные в диете-STZиндуцированной диабетической крысиной модели. В целом, с помощью диеты-STZ-индуцированной диабетических крыс, противодиабетических деятельности Кордицепс militaris экстракты был подтвержден в настоящей работе. Кордицепс militaris экстракты также посмотреть antinephropathic и антиокислительные свойства указанием лечебного воздействия на диабетических осложнений. Кордицепс militaris вытяжка, сейф фармацевтическое средство, обладает большим потенциалом как новый источник для лечения сахарного диабета. Biochem Biophys Res Commun. 2014 May 2;447(2):341-5. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.03.150. Epub 2014 Apr 12. Anti-HCV activity of the Chinese medicinal fungus Cordyceps militaris. Ueda Y1, Mori K1, Satoh S1, Dansako H1, Ikeda M1, Kato N2. 1Department of Tumor Virology, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry, and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Okayama 700-8558, Japan. 2Department of Tumor Virology, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry, and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Okayama 700-8558, Japan. Electronic address: nkato@md.okayama-u.ac.jp. Persistent hepatitis C virus (HCV) infection causes chronic liver diseases and is a global health problem. Although the sustained virologic response rate in the treatment of genotype 1 using new triple therapy (pegylated-interferon, ribavirin, and telaprevir/boceprevir) has been improved by more than 70%, several severe side effects such as skin rash/ageusia and advanced anemia have become a problem. Under these circumstances, a new type of anti-HCV oral drug with few side effects is needed. Our recently developed HCV drug assay systems, including the HuH-7 cell line-derived OR6 and AH1R, and the Li23 cell line-derived ORL8 and ORL11, allow genome-length HCV RNAs (several strains of genotype 1b) encoding renilla luciferase to replicate efficiently. Using these systems as anti-HCV candidates, we have identified numerous existing medicines that can be used against HCV with few side effects, such as statins and teprenon. To obtain additional anti-HCV candidates, we evaluated a number of oral health supplements, and found that the 103 capsule but not the liquid form of Cordyceps militaris (CM) (Ascomycotinanorth, North Chinese caterpillar fungus), which is used as a Chinese herbal medicine, exhibited moderate anti-HCV activity. In combination with interferon-α or ribavirin, CM exhibited an additive inhibitory effect. Among the main components of CM, cordycepin, but not ergosterol, contributed to the anti-HCV activity of CM. In consideration of all these results, we suggest that CM would be useful as an oral anti-HCV agent in combination with interferon-α and/or ribavirin. Анти-HCV деятельности китайского лечебного гриба Кордицепс militaris. Постоянные вируса гепатита С (HCV) инфекция вызывает хронические заболевания печени и является глобальной проблемой здравоохранения. Хотя устойчивый вирусологический ответ курс лечения генотипа 1, используя новый тройной терапии (пегилированный интерферон, рибавирин, и телапревир/телапревира с усиленными ингибиторами) улучшены более чем на 70%, несколько серьезных побочных эффектов, таких как сыпь/ageusia и передовых анемии становятся проблемой. В этих условиях нового типа анти-HCV пероральном применении препарата с несколько побочных воздействий. Недавно разработанные HCV наркотиков анализа систем, включая ха-7 клеточной линии-производные OR6 и AH1R, и Li23 клеточной линии-производные ORL8 и ORL11, позволяют генома-длина РНК HCV (несколько штаммов Генотип 1b) кодирования renilla люциферазы для реплицироваться. С помощью этих систем в качестве анти-HCV кандидатов, мы определили множество существующих лекарственных средств, которые могут быть использованы против вируса гепатита С несколько побочные эффекты, такие как статины и teprenon. Чтобы получить дополнительные анти-HCV кандидатов, Мы проверили ряд здоровья полости рта дополнения, и обнаружили, что капсула но не Кордицепс в жидкой форме militaris (см) (Ascomycotinanorth, Северокитайской caterpillar гриб), который используется в качестве китайской травяной медицины, характеризовался умеренными анти-HCV деятельности. В комбинации с интерфероном-A или рибавирина, см выставлены добавка ингибирующее действие. Среди основных компонентов см, кордицепина, но не эргостерина, способствовали анти-HCV деятельности см. При рассмотрении всех этих результатов, мы рекомендуем см, что будет полезным как в устной форме, анти-HCV агента в комбинации с интерфероном-альфа и/или рибавирина. Carbohydr Polym. 2014 Jun 15;106:270-5. doi: 10.1016/j.ca2014.02.040. Epub 2014 Feb 20. Structure and properties of a (1→3)-β-D-glucan from ultrasound-degraded exopolysaccharides of a medicinal fungus. Chen X1, Siu KC1, Cheung YC1, Wu JY2. 1Department of Applied Biology & Chemical Technology, State Key Laboratory of Chinese Medicine and Molecular Pharmacology in Shenzhen, The Hong Kong Polytechnic University, Hung Hom, Kowloon, Hong Kong. 2Department of Applied Biology & Chemical Technology, State Key Laboratory of Chinese Medicine and Molecular Pharmacology in Shenzhen, The Hong Kong Polytechnic University, Hung Hom, Kowloon, Hong Kong. Electronic address: jian-yong.wu@polyu.edu.hk. A high molecular weight (MW) exopolysaccaride (EPS) fraction EPS1 was isolated from the fermentation broth of a medicinal fungus Cordyceps sinensis Cs-HK1 and partially degraded by high-intensity ultrasound (US) into a lower MW fraction EPS1U. EPS1U exhibited a single, symmetric peak on size exclusion chromatography with an average MW of 730kDa by light scattering analysis. It had a much lower intrinsic viscosity (1.7 versus 15.6dL/g) but a much higher solubility in water (77.5 versus 5.1g/L) than EPS1. Based on methylation analysis and NMR spectrometry, the structure of EPS1U was deduced as a (1→3)-β-d-glucan with glucose side chains attached to O-6 position at the branching points. EPS1U showed a high moisture absorption capability comparable to chitosan and urea, suggesting its potential as a moisturizing agent for food and cosmeceutical application. This is the first report on a high MW (1→3)-β-d-glucan isolated from EPS produced by Cordyceps sinensis. Структура и свойства (1перед 3)-бета-D-глюкана от УЗИ-деградированные экзополисахариды лекарственного гриба. Высокой молекулярной массы (МВт) exopolysaccaride (EPS) доля EPS1 был изолирован от брожения 104 отвар из лекарственного гриба Кордицепс sinensis Cs-HK1 и частично деградировавших в результате ультразвука высокой интенсивности (США) в нижней МВт фракции EPS1U. EPS1U выставлены единым, симметричный пик на размер хроматографии со средней МВт 730kDa на анализ рассеяния света. Он был значительно ниже внутренней вязкости (против 1.7 15.6dL/g), но гораздо более высокую растворимость в воде (77.5 против 5.1g/л), чем EPS1. Основываясь на метилирование анализа и ЯМРспектрометрии, структура EPS1U была выведена как (1перед 3)-бета-d-глюкана с глюкозой боковой цепи, прикрепленной к о-6 позиции в точках ветвления. EPS1U показал высокой влагопоглощающей способностью, сопоставимой с хитозаном и мочевины, предлагая свой потенциал в качестве увлажняющего агента для пищевых и косметических приложений. Это первый доклад на высоком МВт (1перед 3)-бета-d-глюкана изолированы от EPS, производимых Кордицепс sinensis. Chem Biol Interact. 2014 Jun 5;216:17-25. doi: 10.1016/j.cbi.2014.03.010. Epub 2014 Apr 2. Cordycepin induces apoptosis of C6 glioma cells through the adenosine 2A receptor-p53-caspase-7PARP pathway. Chen Y1, Yang SH2, Hueng DY3, Syu JP4, Liao CC4, Wu YC5. 1Department of Biology and Anatomy, National Defense Medical Center, Taipei, Taiwan. Electronic address: ychen0523@ndmctsgh.edu.tw. Cordycepin, 3'-deoxyadenosine from Cordyceps sinensis, has been shown to exert anti-tumor effects in several cancer cell lines. This study investigated the effect of cordycepin on a rat glioma cell line. Cordycepin caused apoptosis in C6 glioma cells in a time- and concentration-dependent manner, but did not affect the survival of primary cultured rat astrocytes. Cordycepin increased the total protein levels of p53 and phosphorylated p53 in the C6 cells. Levels of cleaved caspase-7 and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP), but not cleaved caspase-3, were also increased after cordycepin treatment. Specific inhibitors for p53 and caspases abrogated cordycepin-induced caspase-7 and PARP cleavage, and prevented cordycepin-induced apoptosis. Moreover, siRNA knockdown of p53 blocked cordycepin-induced cleavage of caspase-7 and PARP. Both adenosine 2A receptor (A2AR) antagonist and small interference RNA (siRNA) knockdown of A2AR blocked cordycepin-induced apoptosis, p53 activation, and caspase-7 and PARP cleavage. These may provide a new strategy of cordycepin for glioma therapy in the future. Кордицепина индуцирует апоптоз клеток глиомы С6 через аденозиновых рецепторов 2а-p53каспазы-7-PARP пути. Кордицепина, 3'-deoxyadenosine от Кордицепс sinensis, как было показано, оказывают противоопухолевое воздействие на ряд клеточных линий рака. В этом исследовании изучали влияние кордицепина крысы линии клеток глиомы. Кордицепина вызвало апоптоз клеток глиомы С6 во времени и концентрации-зависимым способом, но не влияют на выживание первичной культивированный крыса астроциты. Кордицепина увеличение общего белка р53 и фосфорилированных р53 в С6. Уровни скола каспазы-7 и поли (АДФ-рибоза) - полимеразы (PARP), но не расщепляется каспазы-3, также выросли после кордицепина лечения. Специфические ингибиторы для р53 и каспаз отменен кордицепина-индуцированной каспазы-7 и ПАРП декольте, и предотвратить кордицепина-индуцированного апоптоза. Кроме того, siRNA нокдаун р53 заблокирован кордицепинаиндуцированной расщепление каспазы-7 и ПАРП. Как аденозиновых рецепторов 2а (A2AR) антагонист и малых интерференции РНК (siRNA) сногсшибательность A2AR заблокирован кордицепинаиндуцированного апоптоза, p53 при активации каспазы-7 и ПАРП декольте. Это может предоставить новые стратегии кордицепина возникновения глиомы терапии в будущем. Acta Pharmacol Sin. 2014 May;35(5):697-706. doi: 10.1038/aps.2013.186. Epub 2014 Mar 17. Cordyceps sinensis protects against liver and heart injuries in a rat model of chronic kidney disease: a metabolomic analysis. Liu X1, Zhong F2, Tang XL1, Lian FL1, Zhou Q2, Guo SM2, Liu JF3, Sun P1, Hao X2, Lu Y2, Wang WM2, Chen N2, Zhang NX1. 1Department of Analytical Chemistry, Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of 105 Sciences, Shanghai 201203, China. 3Blood Research Institute, Blood Center of Wisconsin, Milwaukee, WI 53226, USA. Aim:To test the hypothesis that the traditional Chinese medicine Cordyceps sinensis could improve the metabolic function of extrarenal organs to achieve its anti-chronic kidney disease (CKD) effects.Methods:Male SD rats were divided into CKD rats (with 5/6-nephrectomy), CKD rats treated with Cordyceps sinensis (4 mg•kg-1•d-1, po), and sham-operated rats. After an 8-week treatment, metabolites were extracted from the hearts and livers of the rats, and then subjected to (1)H-NMR-based metabolomic analysis.Results:Oxidative stress, energy metabolism, amino acid and protein metabolism and choline metabolism were considered as links between CKD and extrarenal organ dysfunction. Within the experimental period of 8 weeks, the metabolic disorders in the liver were more pronounced than in the heart, suggesting that CKD-related extrarenal organ dysfunctions occurred sequentially rather than simultaneously. Oral administration of Cordyceps sinensis exerted statistically significant rescue effects on the liver and heart by reversely regulating levels of those metabolites that are typically perturbed in CKD.Conclusion:Oral administration of Cordyceps sinensis significantly attenuates the liver and heart injuries in CKD rats. The (1)H NMR-based metabolomic approach has provided a systematic view for understanding of CKD and the drug treatment, which can also be used to elucidate the mechanisms of action of other traditional Chinese medicines. Кордицепс sinensis защищает печень и сердце травм в крысиной модели хронической болезни почек: metabolomic анализа. Цель:проверить гипотезу о том, что традиционная китайская медицина Кордицепс sinensis могли бы улучшить метаболические функции extrarenal органов, для достижения своей борьбе с хронической болезнью почек (ХБП) effects.Methods:мужчина SD крысы были разделены на ЦП крыс (с 5/6-нефрэктомия), CKD крыс, получавших Кордицепс sinensis (4 мг•кг-1•d-1, po), и обман, оперированных крыс. После 8-недельного лечения, метаболитов были извлечены из сердца и печени крыс, а затем подвергают H (1)-на основе ЯМР metabolomic analysis.Results:Окислительный стресс, энергетическом обмене веществ, аминокислот и белков и холина считались связей между ЦП и extrarenal полиорганной недостаточности. В течение экспериментального периода продолжительностью 8 недель, метаболических нарушений в печени были более выражены, чем в центре, предполагая, что ХБП, связанных с extrarenal органной дисфункции происходили последовательно, а не одновременно. Пероральное введение Кордицепс sinensis оказывали статистически значимого спасательных воздействие на печень и сердце, наоборот, регулирующие уровни этих метаболитов, которые, как правило, возмущенных в CKD.Conclusion:пероральное введение Кордицепс sinensis значительно ослабляет печень и сердце травм в ХБП крыс. (1)H на основе ЯМР metabolomic подход позволил систематический обзор для понимания ХБП и лечения наркомании, который также может быть использован для выяснения механизмов действия других традиционных китайских лекарств. Mol Biol Rep. 2014 Mar;41(3):1815-27. doi: 10.1007/s11033-014-3031-y. Epub 2014 Jan 19. Cultured mycelium Cordyceps sinensis protects liver sinusoidal endothelial cells in acute liver injured mice. Peng Y1, Chen Q, Yang T, Tao Y, Lu X, Liu C. 1Institute of Liver Diseases, Shuguang Hospital Affiliated to Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, 528 Zhangheng Road, Pudong New Area, Shanghai, 201203, China. Cultured mycelium Cordyceps sinensis (CMCS) was widely used for a variety of diseases including liver injury, the current study aims to investigate the protective effects of CMCS on liver sinusoidal endothelial cells (LSECs) in acute injury liver and related action mechanisms. The mice were injected intraperitoneally with lipopolysaccharide (LPS) and D-galactosamine (D-GalN). 39 male BABL/c mice were randomly divided into four groups: normal control, model control, CMCS treatment and 1,10-phenanthroline treatment groups. The Serum liver function parameters including alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) levels were assayed with the commercial kit. The inflammation and scaffold structure in liver were stained with hematoxylin and eosin and silver staining respectively. The LSECs and sub-endothelial basement membrane were observed with the scanning and transmission electronic 106 microscope. The protein expressions of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) in liver were analyzed with Western blotting. Expression of von Willebrand factor (vWF) was investigated with immunofluorescence staining. The lipid peroxidation indicators including antisuperoxideanion (ASAFR), hydroxyl free radical (·OH), superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde and glutathione S-transferase (GST) were determined with kits, and matrix metalloproteinase-2 and 9 (MMP-2/9) activities in liver were analyzed with gelatin zymography and in situ fluorescent zymography respectively. The model mice had much higher serum levels of ALT and AST than the normal mice. Compared to that in the normal control, more severe liver inflammation and hepatocyte apoptosis, worse hepatic lipid peroxidation demonstrated by the increased ASAFR, ·OH and MDA, but decreased SOD and GST, increased MMP-2/9 activities and VCAM-1, ICAM-1 and vWF expressions, which revealed obvious LSEC injury and scaffold structure broken, were shown in the model control. Compared with the model group, CMCS and 1,10-phenanthroline significantly improved serum ALT/AST, attenuated hepatic inflammation and improved peroxidative injury in liver, decreased MMP-2/9 activities in liver tissue, improved integration of scaffold structure, and decreased protein expression of VCAM-1 and ICAM-1. CMCS could protect LSECs from injury and maintain the microvasculature integration in acute injured liver of mice induced by LPS/D-GalN. Its action mechanism was associated with the down-regulation of MMP-2/9 activities and inhibition of peroxidation in injured liver. Культивированный мицелия Кордицепса защищает печень синусоидальных эндотелиальных клеток при остром травму печени мышей. Культивированный мицелия Кордицепса (ОМЦ), широко используется для различных заболеваний, включая повреждение печени, текущее исследование направлено для расследования защитные эффекты смс по печени синусоидальных эндотелиальных клеток (LSECs) в острой травмы печени и связанные с ними действия механизмов. Мышам внутрибрюшинно липополисахарида (ЛПС) и Dgalactosamine (D-GalN). 39 мужчин BABL/c мышей были случайным образом разделены на четыре группы: нормальный контроль, модель управления ОМЦ лечения и 1,10-фенантролина группам лечения. Сыворотка показателей функции печени, в том числе аланин-аминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) уровни были проанализированы коммерческого набора. Воспаление и скелетные структуры в печени окрашивали гематоксилином и эозином и серебра окрашивание соответственно. В LSECs и суб-эндотелиальной базальной мембраны наблюдались с сканирующей и просвечивающей электронной микроскопии. Белка выражения молекулы межклеточной адгезии-1 (ICAM-1) и сосудистых cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) в печени были проанализированы с помощью вестерн-блоттинга. Выражение фактор фон Виллебранда (vWF) была изучена с иммунофлюоресцентного окрашивания. Показатели перекисного окисления липидов, в том числе antisuperoxideanion (ASAFR), свободный радикал гидроксила (·ой), супероксиддисмутаза (СОД), малонового диальдегида и глутатион-S-трансферазы (GST) были определены наборы, и матриксных металлопротеиназ-2 и 9 (ММП-2/9) деятельности в печени были проанализированы с желатином zymography и флуоресцентной in situ zymography соответственно. Модели мышей был намного выше, сывороточные уровни АЛТ и АСТ, чем у обычных мышей. По сравнению с нормальным контролем, более тяжелое воспаление печени и апоптоза гепатоцитов, хуже перекисного окисления липидов в печени свидетельствует увеличение ASAFR, ·ох, и MDA, но снизился на дерново и ГСТ, возросло ММП2/9 деятельности и VCAM-1, ICAM-1 и vWF выражения, которые выявил явное ЛИЭС травмы и эшафот структура нарушается, было показано в модели управления. По сравнению с моделью группа, смс и 1,10-фенантролина значительно улучшилось сывороточной АЛТ/АСТ, ослабленный воспаления печени и улучшение peroxidative травмы в печени, снижение ММП-2/9 деятельности в ткани печени, улучшение интеграции эшафот структуры и снижение экспрессии белка VCAM-1 и ICAM-1. ОМЦ могут защитить LSECs от травм и сохранить микроциркуляторном русле интеграции в острой травмы печени мышей, индуцированных LPS/D-GalN. Его действие механизм, связанный с регулированием ММП-2/9 деятельности и ингибирования окисления липидов в ранения печени. J Clin Pharm Ther. 2014 Feb;39(1):84-90. doi: 10.1111/jcpt.12115. Epub 2013 Dec 9. An improved dosage regimen of sertraline hydrochloride in the treatment for premature ejaculation: an 8-week, single-blind, randomized controlled study followed by a 4-week, open-label extension study. 107 Xu G1, Jiang HW, Fang J, Wen H, Gu B, Liu J, Zhang LM, Ding Q, Zhang YF. 1Department of Urologic Surgery, Huashan Hospital Affiliated to Fudan University, Shanghai, China. This study aimed at evaluating the safety and efficacy of an improved dosage regimen of sertraline in patients with premature ejaculation (PE) and to examine whether the premature ejaculation diagnostic tool (PEDT) can be used as a measure of treatment response in these patients. METHODS: A total of 218 PE patients were randomized into control (n = 61) and treatment (n = 157) groups to receive mycelium of cordyceps sinensis C4 and sertraline 50 mg daily for 8 weeks, respectively. Following this blinded stage, sixty-three patients chose to take sertraline 100 mg daily for an additional 4week period, and 80 other patients continued treatment with sertraline 50 mg. Main outcome measures include intravaginal ejaculatory latency time (IELT), PEDT score and Clinical Global Impression of Change (CGIC) score. RESULTS: At weeks 4 and 8, mean IELT of patients who subsequently chose to take 100 mg of sertraline was significantly lower than that of patients who continued taking 50 mg of sertraline, although the IELT value was comparable between the two groups of patients at baseline. However, with an additional 4-week treatment, the mean IELT increased significantly more in the 100-mg group than in the 50-mg continuation group. Similar results were also obtained in the analyses of the PEDT and CGIC scores. Both regimens were well tolerated, and relapse rate did not differ significantly between the two groups. WHAT IS NEW AND CONCLUSION: These findings suggest that PE patients not responding to an 8-week treatment with sertraline 50 mg can benefit from an additional 4-week treatment with sertraline 100 mg and that the PEDT may be a valid measure of treatment response in PE patients. Усовершенствованный режим дозирования сертралина гидрохлорид в лечении преждевременной эякуляции: 8-недельное, простое слепое рандомизированное контролируемое исследование с последующим 4-недельного открытого дополнительного исследования. Это исследование, направленное на оценку эффективности и безопасности усовершенствованная схема применения сертралина у больных с преждевременной эякуляцией (PE) и проверить, могут ли преждевременное семяизвержение diagnostic tool (PEDT) может быть использован в качестве меры ответа на лечение таких пациентов. Методы: в общей сложности 218 PE пациенты были рандомизированы на контроль (n = 61) и лечения (n = 157) группы для получения мицелия кордицепса C4 и сертралин 50 мг ежедневно в течение 8 недель, соответственно. Следующие это ослепило этапе, шестидесяти трех пациентов предпочли занять сертралин 100 мг ежедневно в течение еще 4-недельного периода, а в 80 другие пациенты продолжали лечение с 50 мг сертралина. Основные критерии оценки включают интравагинального латентное время эякуляции (IELT), PEDT и оценка (Clinical Global Impression of Change (CGIC), оценка. Результаты: на 4 и 8 недель, значит, IELT пациентов, которые впоследствии решили взять 100 мг сертралина был значительно ниже, чем у пациентов, которые продолжали принимать 50 мг сертралина, хотя IELT значения были сопоставимы в обеих группах пациентов на базовом уровне. Однако, с дополнительным 4-недельный курс лечения, значит, IELT значительно увеличился более 100 мг в группе, чем в 50-мг продолжение группы. Аналогичные результаты были получены также в анализе PEDT и CGIC баллов. Обе схемы были хорошо переносится, и рецидивов не отличались между двумя группами. Что нового и вывод: эти результаты показывают, что PE больных, не реагирующих на 8-недельного лечения сертралином 50 мг могут получить выгоду от дополнительных 4 недель лечения при 100 мг сертралина и что PEDT может быть правильным мерилом ответа на лечение у пациентов с тэла. J Cell Mol Med. 2014 Feb;18(2):293-304. doi: 10.1111/jcmm.12187. Epub 2013 Nov 28. Cordycepin activates AMP-activated protein kinase (AMPK) via interaction with the γ1 subunit. Wu C1, Guo Y, Su Y, Zhang X, Luan H, Zhang X, Zhu H, He H, Wang X, Sun G, 1Pharmacology and Toxicology Research Center, Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Beijing, China. Cordycepin is a bioactive component of the fungus Cordyceps militaris. Previously, we showed that cordycepin can alleviate hyperlipidemia through enhancing the phosphorylation of AMP-activated protein 108 kinase (AMPK), but the mechanism of this stimulation is unknown. Here, we investigated the potential mechanisms of cordycepin-induced AMPK activation in HepG2 cells. Treatment with cordycepin largely reduced oleic acid (OA)-elicited intracellular lipid accumulation and increased AMPK activity in a dosedependent manner. Cordycepin-induced AMPK activation was not accompanied by changes in either the intracellular levels of AMP or the AMP/ATP ratio, nor was it influenced by calmodulin-dependent protein kinase kinase (CaMKK) inhibition; however, this activation was significantly suppressed by liver kinase B1 (LKB1) knockdown. Molecular docking, fluorescent and circular dichroism measurements showed that cordycepin interacted with the γ1 subunit of AMPK. Knockdown of AMPKγ1 by siRNA substantially abolished the effects of cordycepin on AMPK activation and lipid regulation. The modulating effects of cordycepin on the mRNA levels of key lipid regulatory genes were also largely reversed when AMPKγ1 expression was inhibited. Together, these data suggest that cordycepin may inhibit intracellular lipid accumulation through activation of AMPK via interaction with the γ1 subunit. Кордицепина активизирует AMP activated protein kinase) через взаимодействие с 1-субъединицы. Кордицепина-это биологически активных компонента гриба Кордицепс militaris. Ранее мы показали, что кордицепина может облегчить гиперлипидемия путем повышения фосфорилирования AMP activated protein kinase), но механизм этого стимуляции неизвестно. Здесь мы провели расследование потенциальных механизмов кордицепина-индуцированной AMPK активации клеток HepG2. Лечение с кордицепина в значительной степени уменьшается олеиновой кислоты (ОА)-вызвал внутриклеточных липидов накопление и увеличение AMPK деятельности является дозозависимым. Кордицепина-индуцированной AMPK активации не сопровождалось каким-либо изменения в внутриклеточном уровнях усилитель или усилитель/ATP отношение, как и не было под влиянием кальмодулин-зависимые протеинкиназы (CaMKK) торможения; однако, эта активация был заметно подавлен печени, угнетающих B1 (LKB1) нокдаун. Молекулярный докинг, люминесцентные и круговой дихроизм измерения показали, что кордицепина взаимодействовали с 1-субъединицы AMPK. Сногсшибательность AMPKγ1 по siRNA существенно отменили эффекты кордицепина на AMPK активации и регуляции липидного. Модулирующие эффекты кордицепина на мРНК ключевых уровней липидов регуляторных генов были также во многом меняется, когда AMPKγ1 выражение было законсервировано. Вместе, эти данные свидетельствуют, что кордицепина могут препятствовать внутриклеточного накопления липидов путем активации AMPK через взаимодействие с 1субъединицы. Phytomedicine. 2014 Feb 15;21(3):372-8. doi: 10.1016/j.phymed.2013.08.022. Epub 2013 Oct 3. Ergosterol peroxide from Cordyceps cicadae ameliorates TGF-β1-induced activation of kidney fibroblasts. Zhu R1, Zheng R1, Deng Y2, Chen Y1, Zhang S3. 1Department of Nephrology, Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200032, China. Chronic kidney disease is a growing public health problem with an urgent need for new pharmacological agents. Ergosterol peroxide (EP) is the major sterol produced by Cordyceps cicadae Shing (C. cicadae), a widely used traditional Chinese medicine. C. cicadae has been used to treat many kinds of diseases and has a potential benefit on renoprotection. This study aimed to investigate the anti-fibrotic effects of EP as well as the underlying mechanisms. A normal rat kidney fibroblast cell line (NRK-49F) was stimulated to undergo fibroblast activation by transforming growth factor-β1 (TGF-β1) and EP treatment was applied to explore its potential anti-fibrotic effects. Cell proliferation was investigated using MTT analysis. Fibrosis-associated protein expression was analyzed using immunohistochemistry and/or Western blotting. EP treatment attenuated TGF-β1-induced renal fibroblast proliferation, expression of cytoskeleton protein and CTGF, as well as ECM production. Additionally, EP blocked TGF-β1-stimulated phosphorylation of ERK1/2, p38 and JNK pathway. Moreover, the TGF-β1-induced expression of fibronectin was attenuated by either inhibition of MAPKs or by EP treatment. In conclusion, our findings demonstrate that EP is able to suppress TGF-β1induced fibroblasts activation in NRK-49F. This new information provides a line of theoretical evidence supporting the use of C. cicadae in the intervention of kidney disease and suggests that EP has the potential to be developed as a therapeutic agent to prevent renal fibrosis. 109 Эргостерина перекись из Кордицепса cicadae улучшает TGF-β1-индуцированной активации функции почек, фибробласты. Хроническая болезнь почек является растущей проблемой общественного здравоохранения с настоятельная необходимость в новых фармакологических средств. Эргостерина пероксид (ЭП) является основным стерина, производимых Кордицепс cicadae Шинг (C. cicadae), широко используемых в традиционной китайской медицине. C. cicadae был использован для лечения многих видов заболеваний и имеет потенциальные выгоды на renoprotection. Это исследование с целью изучить фиброзный эффекты КМГ, а также лежащих в их основе механизмов. Обычная крыса почек клеточной линии фибробластов (NRK-49F) стимулировали пройти активации фибробластов трансформирующий фактор роста-β1 (TGF-β1) и EP лечения была применена к изучению возможного фиброзный эффекты. Пролиферация клеток исследовали с помощью МТТ анализа. Фиброз-связанные экспрессии белков, были проанализированы с помощью иммуногистохимических и/или вестернблоттинга. EP лечения ослабленных TGF-β1-индуцированной почечной пролиферации фибробластов, экспрессия белков цитоскелета и CTGF, а также ECM производства. Кроме того, КМГ заблокирован TGF-β1-стимулированной фосфорилирования ERK1/2, и p38 JNK пути. Кроме того, TGF-β1индуцированной экспрессии фибронектин был ослабляется, либо путем ингибирования MAPKs или EP лечения. В заключение, наши результаты показывают, что ЭП в состоянии подавить TGF-β1индуцированной активации фибробластов в NRK-49F. Эта новая информация обеспечивает линию теоретические доказательства, подтверждающие использование C. cicadae в интервенции почечной недостаточности и свидетельствует о том, что КМГ имеет потенциал, чтобы быть разработаны в качестве терапевтического агента для предотвращения фиброз почек. Агарик Исследования февраль 2014 г. – сентябрь 2014 г. Полярный высокий молекулярный вес фракции Agaricus blazei Murill, экстракт AndoSan™, снижает активность опухоль-ассоциированные Протеазы, Legumain, в RAW 264.7 клеток. Аннотация AndoSan™ является экстракт Agaricus blazei Murill (AbM; 82.4%), Hericium erinaceum (14,7%), Grifola frondosa (2.9%). Основным ингредиентом AndoSan, про, богата на различные формы βглюканов. Поскольку эти экспонат мощной противоопухолевой активностью и иммуномодулирующим действием, стимулирующий эффект AndoSan на производство различных цитокинов, хемокинов и лейкоцитарные факторы роста преимущественно были приписаны к βглюканов. AndoSan утверждал на 90% состоят из углеводов, из которых 2,8% β-глюканов, но в данном исследовании мы показываем, что содержание углеводов составляет только 2% сухого веса, соответствующие 0.09% β-глюкана на мл AndoSan. Фракционирование AndoSan, с последующим углеводным анализа и ВЭЖХ анализ показал, что большинство из глюкозы была сосредоточена в полярных высокомолекулярных фракций AndoSan (этаноле, нерастворимых в водной вытяжке [EIWE] -) и что этот экстракт был в состоянии существенно ингибировать активность опухольассоциированные протеазы, legumain, в RAW 264.7 клеток. Legumain синтезируется в виде zymogen и подвергается рН-зависимым аутоактивацией proform достичь ферментативно активной форме. В данном исследовании мы показываем, что оба полярных и неполярных AndoSan фракций способны угнетать аутоактивацией prolegumain, и что полярных фракций AndoSan-один из самых мощных ингибиторов активной формы фермента. J Med Food. 2014 Aug 19. [Epub ahead of print] The Polar High Molecular Weight Fraction of the Agaricus blazei Murill Extract, AndoSan™, Reduces the Activity of the Tumor-Associated Protease, Legumain, in RAW 264.7 Cells. Berven L1, Karppinen P, Hetland G, Samuelsen AB. 11 Department of Pharmaceutical Chemistry, School of Pharmacy, University of Oslo , Oslo, Norway . 110 AndoSan™ is an extract of Agaricus blazei Murill (AbM; 82.4%), Hericium erinaceum (14.7%), and Grifola frondosa (2.9%). The main ingredient of AndoSan, AbM, is rich in different forms of β-glucans. Since these exhibit potent antitumor activity and have immunomodulatory effects, the stimulatory effect of AndoSan on the production of different cytokines, chemokines, and leukocyte growth factors has predominantly been attributed to β-glucans. AndoSan has been claimed to consist of 90% carbohydrate, of which 2.8% is βglucans, but in this study, we show that the carbohydrate content is only 2% of the dry weight, corresponding to 0.09% β-glucan per mL of AndoSan. Fractionation of AndoSan, followed by carbohydrate analysis and HPLC analysis revealed that most of the glucose was concentrated in the polar high molecular weight fraction of AndoSan (ethanol insoluble water extract [EIWE]-A) and that this extract was able to significantly inhibit the activity of the tumor-associated protease, legumain, in RAW 264.7 cells. Legumain is synthesized as a zymogen and undergoes pH-dependent autoactivation of the proform to reach an enzymatically active form. In this study, we demonstrate that both the polar and nonpolar AndoSan fractions are able to inhibit the autoactivation of prolegumain, and that the polar fractions of AndoSan are the most potent inhibitors of the active form of the enzyme. Защитный эффект Agaricus blazei Murrill, глубинного культивирования с использованием оптимизированного состава среды, на алкоголь-индуцированного поражения печени. Agaricus blazei Murrill (ABM), съедобный гриб родом из Бразилии, широко используется для nonprescript и лечебных целях. Алкогольной болезни печени (АБП) рассматривается как ведущая причина для повреждения печени в современные пищевые жизни, которая может быть развита при длительном или большая доза алкоголя. В этом исследовании средний состав ABM был оптимизирован с помощью методологии поверхности отклика для максимальной мицелиальной биомассы и внеклеточного полисахарида (EPS) производства. Модель предсказывает, чтобы получить максимальную мицелиальной биомассы и внеклеточного полисахарида на 1.047 г/100 мл, и 0.367 г/100 мл, соответственно, когда картофель 29.88 г/100 мл, глюкоза 1,01 г/100 мл, и отруби 1,02 г/100 мл. Проверенные эксперименты показали, что модель была значительно согласуются с моделью прогнозирования и, что тенденции мицелиальной биомассы и внеклеточного полисахарида были предсказаны с помощью искусственной нейронной сети. После этого, оптимизированной среде был использован для глубинного культивирования по про. Затем, алкоголь-индуцированного поражения печени у мышей модель была использована для изучения защитного эффекта про культивируемых с использованием оптимизированной среде по печени. И печеночной гистопатологические наблюдения показали, что про было достаточно важную роль в модели мышей, которые имели алкогольные повреждения печени. Biomed Res Int. 2014;2014:573978. doi: 10.1155/2014/573978. Epub 2014 Jul 10. The protective effect of Agaricus blazei Murrill, submerged culture using the optimized medium composition, on alcohol-induced liver injury. Wang H1, Li G2, Zhang W1, Han C1, Xu X3, Li YP3. Author information 1School of Pharmacy, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China. Agaricus blazei Murrill (ABM), an edible mushroom native to Brazil, is widely used for nonprescript and medicinal purposes. Alcohol liver disease (ALD) is considered as a leading cause for a liver injury in modern dietary life, which can be developed by a prolonged or large intake of alcohol. In this study, the medium composition of ABM was optimized using response surface methodology for maximum mycelial biomass and extracellular polysaccharide (EPS) production. The model predicts to gain a maximal mycelial biomass and extracellular polysaccharide at 1.047 g/100 mL, and 0.367 g/100 mL, respectively, when the potato is 29.88 g/100 mL, the glucose is 1.01 g/100 mL, and the bran is 1.02 g/100 mL. The verified experiments showed that the model was significantly consistent with the model prediction and that the trends of mycelial biomass and extracellular polysaccharide were predicted by artificial neural network. After that, the optimized medium was used for the submerged culture of ABM. Then, alcohol-induced liver injury in mice model was used to examine the protective effect of ABM cultured using the optimized medium on the liver. And the hepatic histopathological observations showed that ABM had a relatively significant role in mice model, which had alcoholic liver damage. 111 Oxid Med Cell Longev. 2014;2014:563179. doi: 10.1155/2014/563179. Epub 2014 Apr 28. Effects of Treating Old Rats with an Aqueous Agaricus blazei Extract on Oxidative and Functional Parameters of the Brain Tissue and Brain Mitochondria. de Sá-Nakanishi AB, Soares AA, de Oliveira AL, Fernando Comar J, Peralta RM, Bracht A. Department of Biochemistry, University of Maringá, Avenida Colombo 5790, 87020900 Maringá, PR, Brazil. Dysfunction of the mitochondrial respiratory chain and increased oxidative stress is a striking phenomenon in the brain of aged individuals. For this reason there has been a constant search for drugs and natural products able to prevent or at least to mitigate these problems. In the present study the effects of an aqueous extract of Agaricus blazei, a medicinal mushroom, on the oxidative state and on the functionality of mitochondria from the brain of old rats (21 months) were conducted. The extract was administered intragastrically during 21 days at doses of 200 mg/kg. The administration of the A. blazei extract was protective to the brain of old rats against oxidative stress by decreasing the lipid peroxidation levels and the reactive oxygen species content and by increasing the nonenzymic and enzymic antioxidant capacities. Administration of the A. blazei extract also increased the activity of several mitochondrial respiratory enzymes and, depending on the substrate, the mitochondrial coupled respiration. Результаты лечения старых крыс с водной Agaricus blazei выписка по окислительного и функциональных параметров мозговой ткани и Митохондриях мозга. Дисфункция дыхательной цепи митохондрий и увеличение окислительный стресс является ярким явлением в мозг в возрасте от физических лиц. По этой причине наблюдается постоянный поиск препаратов и натуральных продуктов, способных предотвратить или по крайней мере смягчить эти проблемы. В настоящее время изучают влияние водного экстракта Agaricus blazei, лекарственных грибов, окислительных государства и функции митохондрий из мозга старых крыс (21 месяц), были проведены. Экстракт вводили внутрижелудочно в течение 21 дней в дозах 200 мг/кг. Администрация A. blazei экстракт защитные мозг старых крыс от окислительного стресса путем снижения уровня перекисного окисления липидов и кислорода Контента, так и за счет увеличения nonenzymic и ферментативной антиоксидантной способности. Администрация A. blazei экстракт также повышением активности несколько дыхательных ферментов митохондрий и, в зависимости от основы, митохондриального дыхания в сочетании. World J Microbiol Biotechnol. 2014 Apr 27. [Epub ahead of print] Mycelial antineoplastic activity of Agaricus blazei. Bertéli MB1, Umeo SH, Bertéli A, do Valle JS, Linde GA, Colauto NB. 1Molecular Biology Laboratory, Paranaense University, Praça Mascarenhas de Moraes, Umuarama, PR, 4282, Brazil. Basidiocarp of Agaricus blazei (=Agaricus brasiliensis; =Agaricus subrufescens) is used as teas or capsules due to its antineoplastic effect but there are few reports of using mycelium for this purpose. The objective of this study was to evaluate the antineoplastic activity on sarcoma 180 cells implanted in mice of two forms of preparation of the mycelium from two A. blazei strains grown in culture medium with different concentrations of isolated soy protein. Mycelia were grown in Pontecorvo medium with different concentrations of isolated soybean protein (ISP). Mycelial hot water extract, moistened mycelial powder, hot water extract of green tea, Ifosfamida® (ifosfamide drug), and saline solution were administered daily by gavage in mice with sarcoma 180 cells to evaluate antineoplastic activity. It was concluded that antineoplastic activity was the same for both strains, except when used as moistened mycelial powder, which rules out the use of mycelial powder in capsules. Mycelial hot water extract had high antineoplastic activity with lower metabolic demand on the spleen and maintenance of normal blood parameters. Mycelial growth in different ISP concentrations had the same antineoplastic activity. Also the vegetative mycelium was as effective as the basidiocarp for sarcoma 180 tumor inhibition. Green tea was as effective as mycelial hot water extract. Мицелиальных противоопухолевую активность Agaricus blazei. 112 Basidiocarp из Agaricus blazei (=Agaricus brasiliensis; =Agaricus subrufescens) используется как чай или капсулы из-за его противоопухолевого эффекта, но есть несколько отчетов, используя мицелий для этой цели. Целью настоящего исследования была оценка противоопухолевой активности на саркома 180 клеток мышей с вживленными в двух формах подготовки мицелия от двух A. blazei штаммы, выращенные в питательной среде с различной концентрацией изолированный соевый белок. Грибница, были выращены в Понтекорво средних с разными концентрациями изолированный соевый белок (ISP). Мицелиальных горячая вода, экстракт смоченной мицелиальных порошок, горячая вода, экстракт зеленого чая, Ифосфамида эрекцию (ифосфамид наркотиков), и физиологический раствор вводили ежедневно в калийную мышей с саркомой 180 клетки для оценки противоопухолевой активностью. Был сделан вывод, что противоопухолевую активность была одинаковой для обоих штаммов, за исключением случаев, когда используется в качестве смоченной мицелиальных порошок, который исключает применение мицелиальных порошка в капсулах. Мицелиальных горячая вода, экстракт имели высокую противоопухолевую активность с метаболическая спрос на селезенки и поддержания нормальных показателей крови. Мицелиальных роста в различных ISP концентрации были одинаковые противоопухолевую активность. Также вегетативного мицелия был столь же эффективны, как basidiocarp для саркома 180 опухоли торможения. Зеленый чай является столь же эффективным, как и мицелиальных горячая вода, экстракт. Molecules. 2014 Apr 3;19(4):4189-99. doi: 10.3390/molecules19044189. Agaricus blazei hot water extract shows anti quorum sensing activity in the nosocomial human pathogen Pseudomonas aeruginosa. Soković M1, Ćirić A1, Glamočlija J1, Nikolić M1, van Griensven LJ2. 1Department of Plant Physiology, Institute for Biological Research "Siniša Stanković", University of Belgrade, Bulevar Despota Stefana 142, Belgrade 11000, Serbia. 2Plant Research International, Wageningen University and Research Centre, Droevendaalsesteeg 1, Wageningen 6700 AA, The Netherlands. leo.vangriensven@wur.nl. The edible mushroom Agaricus blazei Murill is known to induce protective immunomodulatory action against a variety of infectious diseases. In the present study we report potential anti-quorum sensing properties of A. blazei hot water extract. Quorum sensing (QS) plays an important role in virulence, biofilm formation and survival of many pathogenic bacteria, including the Gram negative Pseudomonas aeruginosa, and is considered as a novel and promising target for anti-infectious agents. In this study, the effect of the sub-MICs of Agaricus blazei water extract on QS regulated virulence factors and biofilm formation was evaluated against P. aeruginosa PAO1. Sub-MIC concentrations of the extract which did not kill P. aeruginosa nor inhibited its growth, demonstrated a statistically significant reduction of virulence factors of P. aeruginosa, such as pyocyanin production, twitching and swimming motility. The biofilm forming capability of P. aeruginosa was also reduced in a concentration-dependent manner at sub-MIC values. Water extract of A. blazei is a promising source of antiquorum sensing and antibacterial compounds. Agaricus blazei горячая вода, экстракт показывает анти quorum sensing деятельности в внутрибольничных патоген человека, Pseudomonas aeruginosa. В съедобный гриб Agaricus blazei Murill, как известно, вызывают защитные иммуномодулирующего действия против ряда инфекционных заболеваний. В настоящем исследовании мы отчета потенциальные анти-quorum sensing свойства A. blazei горячая вода, экстракт. Quorum sensing (СМК) играет важную роль в вирулентности, формирование биопленок и выживания многих патогенных бактерий, в том числе грамотрицательных бактерий Pseudomonas aeruginosa, и считается, как роман, так и перспективные цели для борьбы с инфекционными агентами. В этом исследовании, эффект субмикрофоны Agaricus blazei водного экстракта на QS регулируемых факторов вирулентности и формирование биопленок была оценена в отношении P. aeruginosa PAO1. Суб-MIC концентрации экстракта, который не убивал P. aeruginosa, ни подавлял ее роста, показали статистически значимое снижение факторов вирулентности P. aeruginosa, таких как pyocyanin производства, дергаясь и плавательный моторики. В биопленки демпфирующей способностью P. aeruginosa также была снижена в концентрационном-зависимым способом на суб-MIC значения. Водный экстракт A. blazei перспективным источником antiquorum зондирования и антибактериальных препаратов. 113 J Med Food. 2014 Mar;17(3):295-301. doi: 10.1089/jmf.2013.2934. Epub 2014 Jan 16. Agaricus brasiliensis KA21 improves circulatory functions in spontaneously hypertensive rats. Tsubone H1, Makimura Y, Hanafusa M, Yamamoto Y, Tsuru Y, Motoi M, Amano S. 11 Research Center for Food Safety, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo , Bunkyo-ku, Tokyo, Japan . The present study aimed to clarify the effects of Agaricus brasiliensis KA21 (i.e., Agaricus blazei) mushroom on circulatory function. Spontaneously hypertensive rats (SHRs) were fed 10% A. blazeicontaining pellets (agaricus group) or normal pellets (control group) for 5 weeks from 6 to 11 weeks of age. For Experiment 1, tail blood pressure and heart rate were measured in the conscious SHRs. For Experiment 2, echocardiographic and blood biochemical measurements were performed in the anesthetized SHRs. In Experiment 1, blood pressure and heart rate were significantly lower in the agaricus group compared with the control group throughout the observation period. In Experiment 2, the agaricus group also showed a significant decrease in cardiac output accompanied by a decrease in heart rate and an increase in early and late ventricular filling velocity (E/A ratio). Moreover, levels of escape enzymes such as creatine kinase (CK), CK-BB, CK-MB, asparate aminotransferase, lactate dehydrogenase, and aldolase were significantly lower than in the control group. We concluded that the ingestion of feed containing A. brasiliensis KA21 can improve hypertensive cardiovascular hemodynamics by decreasing the working load of the heart, presumably by lowering the sympathetic nervous tone in SHRs. Agaricus brasiliensis KA21 улучшает функции кровообращения в спонтанно гипертензивных крыс. Настоящее исследование с целью выяснения влияния Agaricus brasiliensis KA21 (т.е., Agaricus blazei) гриб на сердечно-сосудистые функции. Спонтанно гипертензивных крыс (SHRs) кормили 10% A. blazei, содержащих гранулы (agaricus группы) или обычных окатышей (контрольная группа) в течение 5 недель от 6 до 11-недельного возраста. Эксперимент 1, хвост артериальное давление и частоту сердечных сокращений измеряется в сознательном SHRs. Для эксперимента 2, эхокардиографические и биохимический анализ крови измерения проводились в наркоз SHRs. В эксперименте 1, кровяное давление и пульс были значительно ниже в agaricus группе по сравнению с контрольной группой на протяжении периода наблюдения. В эксперименте 2, agaricus группы также показали значительное снижение сердечного выброса сопровождается снижением сердечного ритма и повышение в начале и конце наполнения желудочков скорости (E/соотношении). Кроме того, уровни защитить себя от таких ферментов, как креатиновая киназа (CK), CK-BB, CK-MB, asparate аминотрансферазы, лактатдегидрогеназа, и aldolase были значительно ниже, чем в контрольной группе. Мы пришли к выводу, что при приеме внутрь кормов, содержащих A. brasiliensis KA21 может улучшить гипертонической гемодинамики сердечно-сосудистой путем снижения рабочей нагрузки на сердце, вероятно, снижение тонуса симпатической нервной в SHRs. J Physiol Biochem. 2014 Mar;70(1):215-24. doi: 10.1007/s13105-013-0295-y. Epub 2013 Nov 8. Hypolipidemic effect of the edible mushroom Agaricus blazei in rats subjected to a hypercholesterolemic diet. de Miranda AM1, Ribeiro GM, Cunha AC, Silva LS, dos Santos RC, Pedrosa ML, Silva ME. 1Research in Biological Sciences/NUPEB, Ouro Preto University, Ouro Preto, Minas Gerais, Brazil, mayrinkaline@yahoo.com.br. The effects of Agaricus blazei intake on the lipid profile of animals fed a hypercholesterolemic diet were evaluated. Thirty-two female Fisher rats were divided into four groups and given the standard AIN-93 M diet (C), this diet + 1 % A. blazei (CAb), a hypercholesterolemic diet with 25 % soybean oil and 1 % cholesterol (H) or this diet + 1 % A. blazei (HAb) for 6 weeks. Food intake, weight gain, liver and serum lipid profiles, activity of aminotransferases [alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST)], and creatinine and urea levels as well as abdominal fat weight were measured. Histological analysis of kidney and liver tissue was also performed. The HAb group had a higher food intake, but a lower weight gain as compared to group H. This resulted in a significant decrease in abdominal fat weight, to values close to those of groups C and CAb. Supplementing the hypercholesterolemic diet with A. blazei promoted a significant reduction in 114 total and non-HDL cholesterol, as well as in the atherogenic index, as compared to group H, and this effect was more pronounced in the serum. There was no hepatotoxic effect caused by the supplementation of the diets with the mushroom. We conclude that in our experimental model and in the concentration used, A. blazei was effective in improving the lipid profile of the animals. Гиполипидемическое действие съедобный гриб Agaricus blazei у крыс, перенесших повышенным уровнем холестерина в рационе. Последствия Agaricus blazei потребление на липидный профиль животных, питавшихся повышенным уровнем холестерина в рационе были оценены. Тридцать два женских Фишер крысы были разделены на четыре группы и с учетом стандартных Айн-93 м диеты (C), эта диета + 1%. а. blazei (CAb), диета с повышенным уровнем холестерина, 25 % соевого масла и 1 % холестерина (H) или эта диета + 1%. а. blazei (HAb) в течение 6 недель. Потребление пищи, увеличение веса, печени и липидов сыворотки профили, активность аминотрансфераз [аланин-аминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ)], и креатинина и мочевины уровней, а также жира в брюшной полости, вес измерялись. Гистологический анализ почечной и печеночной ткани также была проведена. HAb группе были выше, прием пищи, однако снижение веса по сравнению с группой H. это привело к значительному снижению жира в брюшной полости, вес, до значений, близких к тем группам C и CAb. Дополняя рацион с повышенным уровнем холестерина, а blazei способствовало значительному снижению общей и номера-HDL холестерина, а также индекса атерогенности, поскольку, чем в группе H, и этот эффект был более выражен в сыворотке крови. Нет гепатотоксического эффекта, вызванного дополнение диеты с грибами. Мы заключаем, что в нашей экспериментальной моделью и в используемых концентрациях, а blazei эффективное улучшение липидного профиля животных. 115